ES2245893B1

ES2245893B1 - Mejoras en el objeto de la patente de invencion n.p200301747 que se refiere a "3-nitro-pirazolo(1,5-a)pirimidinas 7-sustituidas y composiciones y metodos relacionados".

Info

Publication number: ES2245893B1
Application number: ES200401696A
Authority: ES
Inventors: Luis Anglada Burniol; Albert Palomer Benet; Marta Princep Mota; Antonio Guglietta
Original assignee: Ferrer Internacional SA
Current assignee: Ferrer Internacional SA
Priority date: 2003-07-24
Filing date: 2004-07-12
Publication date: 2006-12-01
Anticipated expiration: 2024-07-12
Also published as: PA8607401A1; ES2222814A1; EA200600318A1; MA27945A1; AR045088A1; IL173347A0; ZA200600471B; ES2245893A1; CL2004001813A1; ES2222814B1; PE20050722A1; CN1829720A; TNSN05324A1

Abstract

Consiste en nuevas 3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidinas 7- sustituidas, así como su preparación. Sus usos para tratar o prevenir las enfermedades relacionadas con la modulación del receptor GABA-A y sus composiciones.

Description

Mejoras en el objeto de la Patente de Invención nº P200301747 que se refiere a: "3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidinas 7-sustituidas y composiciones y métodos relacionados".

Sector técnico

Esta invención se encuadra en el sector técnico de agentes con afinidad sobre el receptor GABA-A, más concretamente en el relativo a las pirazolo[1,5-a]pirimidinas.

Divulgación de la invención

En nuestra Patente de Invención Nº P200301747 se reivindican las 3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidinas 7-sustituidas de fórmula general (I):

1

donde

R_{1} se selecciona entre fenil, piridil, pirimidinil, triazinil, N-óxido-piridil, tienil, furanil, tiazolil y oxazolil, estando cada R_{1} opcionalmente sustituido con un grupo R_{2};

R_{2} se selecciona entre alquil (C_{1}-C_{6}), cicloalquil(C_{3}-C_{6}), alquenil (C_{2}-C_{6}), alquinil (C_{2}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), CF_{3}, CN, SO_{2}-R_{3}, NO_{2}, NH-R_{3}, NR_{3}R_{4}, COR_{5}, CO-NHR_{5}, COOR_{5},

2

R_{3} y R_{4} se seleccionan independientemente entre alquil (C_{1}-C_{6}), cicloalquil(C_{3}-C_{6}), aril y heteroaril;

R_{5} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), alquenil(C_{2}-C_{6}), alquinil(C_{2}-C_{6}) y cicloalquil(C_{3}-C_{6});

R_{6} se selecciona entre alquil(C_{1}-C_{6}), cicloalquil (C_{3}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), NH-alquil(C_{1}-C_{6}), N(dialquil (C_{1}-C_{6})), alquil(C_{1}-C_{6})-O-alquil(C_{1}-C_{6}), alquil(C_{1}-C_{6})-NH-alquil(C_{1}-C_{6}), alquil(C_{1}-C_{6})-N(dialquil(C_{1}-C_{6})), fenil, fenil monosustituido, furanil, tienil, tiazolil y piridil;

R_{7} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), cicloalquil(C_{3}-C_{6}), aril y heteroaril sustituido o no;

R_{8} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), CF_{3}, CN, CO-R_{9} y SO_{2}-R_{9};

R_{9} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), fenil, fenil sustituido y heteroaril sustituido o no;

X es O, S o NR_{8}; y

n es un entero de 0 a 3 inclusive;

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

La presente invención se refiere a las nuevas pirazolo[1,5-a]pirimidinas de fórmula (I) donde R_{1} es fenil 3-sustituido por un grupo R_{2} elegido entre (a) y (b):

3

donde R_{5}, R_{6}, R_{7}, y n tienen los significados antedichos.

Preferentemente, en (a) R_{5} se selecciona entre metil, etil, n-propil, n-butil y 2-propinil, R_{6} se selecciona entre metil, etil e i-propil; y en (b) R_{7} es hidrógeno y n es 1.

El término sales farmacéuticamente aceptables, según se utiliza aquí, incluye cualquier sal tanto con ácidos inorgánicos como orgánicos, tales como el bromhídrico, el clorhídrico, el fosfórico, el nítrico, el sulfúrico, el acético, el adípico, el aspártico, el bencenosulfónico, el benzoico, el cítrico, el etansulfónico, el fórmico, el fumárico, el glutámico, el láctico, el maleico, el málico, el malónico, el mandélico, el metansulfónico, el 1,5-naftalendisulfónico, el oxálico, el piválico, el propiónico, el p-toluensulfónico, el succínico, el tartárico y similares.

Específicamente, la presente invención se refiere a los compuestos siguientes:

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(prop-2-inil)-metansulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-etansulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-etil)-etansulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-prop-2-inil)-propan-2-sulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-etansulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-etansulfonamida;

7-(3-(2-isotiazolidinil-1,1-dioxido)-fenil)-3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidina;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-propan-2-sulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-etil-propan-2-sulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-propan-2-sulfonamida; y

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-propan-2-sulfonamida.

De la misma manera que los compuestos de la patente principal, los compuestos de la presente invención también son activos frente al receptor GABA-A y en concreto frente a las subunidades \alpha1 y \alpha2 de dicho receptor. Como consecuencia, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento y la prevención de todas aquellas enfermedades mediadas por las subunidades \alpha1 y \alpha2 del receptor GABA-A. Son ejemplos no limitativos de dichas enfermedades, las alteraciones del sueño, preferentemente el insomnio, la ansiedad y la epilepsia. Son ejemplos no limitativos de las indicaciones propias de los compuestos de la presente invención todas aquellas enfermedades o situaciones en que se necesite una inducción del sueño, tales como el insomnio o la anestesia, de la sedación o de la relajación muscular.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también es proporcionar un procedimiento para la obtención de los compuestos de fórmula (I) y de sus sales farmacéuticamente aceptables.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para tratar o prevenir las enfermedades relacionadas con la modulación del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para tratar o prevenir las enfermedades relacionadas con la modulación de la subunidad \alpha1 del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para tratar o prevenir las enfermedades relacionadas con la modulación de la subunidad \alpha2 del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para el tratamiento o la prevención de la ansiedad en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para el tratamiento o la prevención de la epilepsia en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para el tratamiento o la prevención de las alteraciones del sueño en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para el tratamiento o la prevención del insomnio en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para la inducción de sedación-hipnosis en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para la inducción de anestesia en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para modular el tiempo necesario para inducir el sueño y su duración en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables para la inducción de relajación muscular en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

De la misma manera que en la patente principal, otro aspecto de la presente invención también es proporcionar una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) o de sus sales farmacéuticamente aceptables en asociación con excipientes terapéuticamente inertes.

De la misma manera que en la patente principal, los compuestos de la presente invención también pueden prepararse según la reacción del Esquema 1

Esquema 1

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donde R_{1} tiene los valores indicados anteriormente y Q es un grupo saliente adecuado como dimetilamino, metiltio o metoxi. La reacción entre la 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina (III) y la 1-(aril) o (heteroaril)-2-propen-1-ona (II) adecuadamente sustituida se lleva a cabo en un disolvente prótico o aprótico polar inerte tal como ácido acético glacial, etanol, metanol, dimetilformamida o dimetilsulfóxido a temperaturas comprendidas entre 50º y 130ºC. El tiempo de reacción es de varias horas, transcurridas las cuales se elimina el disolvente y se reparte el residuo obtenido entre una disolución acuosa de bicarbonato sódico y diclorometano. El crudo resultante de evaporar a sequedad la fase orgánica puede purificarse por uno de los siguientes métodos: a) Cromatografía sobre silica gel utilizando acetato de etilo o diclorometano/metanol como eluyente; b) Cristalización en un disolvente adecuado (por ejemplo, acetato de etilo, etanol, metanol, etc).

El intermedio de fórmula (II) cuando Q es dimetilamino puede obtenerse por reacción entre la correspondiente acetofenona y el dimetil acetal de la N,N-dimetilformamida o el reactivo de Bredereck (tert-butoxibis(dimetilamino) metano) según describen J. M. Domagala et al (J. Heterocyclic Chem., 26(4), 1147-58, 1989); y K. Sawada et al (Chem. Pharm. Bull., 49(7), 799-813, 2001). La secuencia de reacciones para obtener el intermedio de fórmula (II) se muestra en el Esquema 2, teniendo R_{5}, R_{6}, R_{7} y n los significados indicados anteriormente.

Esquema 2

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El intermedio 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina (III) se obtiene según describen M. E. C. Biffin et al. (J. Chem. Soc (C) 2159-2162, 1968); M. E. C. Biffin et al. (Aust. J. Chem. 26, 1041-1047, 1967); y M. E. C. Biffin et al. (Tetrahedron Lett., 21, 2029-2031, 1967), siguiendo la secuencia de reacciones del Esquema 3.

Esquema 3

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A partir de los compuestos de fórmula general (I) es posible la obtención de sus sales farmacéuticamente aceptables por tratamiento con los ácidos correspondientes.

Los solicitantes han descubierto que los compuestos de la presente invención también presentan, al igual que los compuestos de la patente principal, una relevante afinidad por las subunidades \alpha1 y \alpha2 del receptor GABA-A, según se demuestra en las Tablas 1 y 2. Estos resultados in vitro se han corroborado en las pruebas de sedación-hipnosis in vivo, cuyos resultados se recogen en la Tabla 3.

De acuerdo con los resultados obtenidos, ciertos compuestos de la presente invención manifiestan sorprendentemente unas actividades farmacológicas tanto in vitro como in vivo análogas o superiores a los compuestos del estado de la técnica y de la patente principal. Todos estos resultados apoyan su uso en todas aquellas enfermedades o situaciones moduladas por las subunidades \alpha1 y \alpha2 del receptor GABA-A en las que se necesite una inducción del sueño, tales como el insomnio o la anestesia, una inducción de la sedación o una inducción de la relajación muscular.

Las actividades farmacológicas de los compuestos de la presente invención se han determinado siguiendo la metodología descrita en la patente principal, según se detalla en los epígrafes a) y b).

(a) Ensayos de unión a ligando. Determinación de la afinidad de las compuestos por las subunidades \alpha1 y \alpha2 del receptor GABA-A

Se utilizaron ratas macho Sprague-Dawley de peso comprendido entre 200-250 g en el momento del experimento. Tras decapitación del animal, el cerebelo (tejido que contiene mayoritariamente la subunidad \alpha1 del receptor del GABA-A) y la médula espinal (tejido que contiene mayoritariamente la subunidad \alpha2 del receptor del GABA-A) fueron extraídos. La preparación de las membranas se realizó según el método descrito por J. Lameh et al. (Prog. Neuro-Psychopharmacol. Biol. Psychiatry, 24, 979-991, 2000). Los tejidos, una vez pesados, se suspendieron en tampón tris\cdotHCl 50 mM pH 7.7 en una relación 1:40 (P/V) y fueron homogeneizados. A continuación, se centrifugaron a 20000 g durante 10 min a 7ºC. El pellet obtenido se resuspendió en las mismas condiciones, centrifugándose otra vez. El pellet final obtenido se resuspendió en el mínimo volumen y se guardó durante la noche congelado a -80ºC. Al día siguiente, se repitió el proceso hasta resuspenderse el pellet final en una relación 1:10 (P/V).

Para estudiar la afinidad de los compuestos se realizaron ensayos de competición utilizando como ligando marcado flumazenilo. Los ensayos se realizaron según los métodos descritos por S. Arbilla et al. (Eur. J. Pharmacol., 130, 257-263, 1986); e Y. Wu et al. (Eur. J. Pharmacol., 278, 125-132, 1995). Se incubaron las membranas que contienen los receptores objetos de estudio, el flumazenilo marcado radiactivamente a una concentración final de 1 nM, y concentraciones crecientes de la entidad química a estudiar, en un volumen total de 500 \mul en tampón de ensayo Tris\cdotHCl 50 mM pH 7.4. En paralelo, se incubaron las membranas únicamente con el flumazenilo marcado (totales, 100% unión) y en presencia de una concentración elevada de flumazenilo sin marcar (inespecífico, estimación del % de unión inespecífica del ligando marcado). Las reacciones se iniciaron al añadir el ligando marcado y se incubaron durante 60 minutos a una temperatura de 0ºC. Al finalizar el periodo de incubación, los tubos se filtraron utilizando un "harvester" Brandel modelo M-48R, y se lavaron tres veces con tampón de ensayo frío. El "harvester" contiene un filtro GF/B en el cual quedan retenidas las membranas con los receptores y el ligando marcado que se ha unido a éstos. Los filtros son retirados y se dejan secar. Una vez secos, se cortan, se introducen en viales y se les añade líquido de centelleo dejándose durante toda la noche en agitación hasta el día siguiente que se procede a su contaje. Para el contaje se utilizó una contador de centelleo Packard modelo Tricarb.

Para el análisis de los resultados se calculó el % de unión específica para cada concentración del compuesto a estudiar según:

% unión específica = (X-I/T-I) * 100

donde,

X: cantidad de ligando unido para cada concentración del compuesto.

T: totales, cantidad máxima unida del ligando marcado.

I: inespecífico, cantidad de ligando marcado unido de forma inespecífica, independiente del receptor de estudio.

Cada concentración de compuesto se ensayó por duplicado y con el valor medio se obtuvieron los valores experimentales de % de unión específica representándose frente a la concentración de compuesto. Los valores así obtenidos se ajustaron a una ecuación para ensayos de competición (SigmaPlot, SPSS Inc.) calculándose el valor de la CI_{50} (concentración del compuesto que inhibe el 50% de la unión específica). A partir de los valores de CI_{50} se calcularon las K_{i} (constantes de inhibición) según la fórmula de Cheng-Prusoff (Y. Cheng y W. H. Prusoff, Biochem. Pharmacol., 22(23), 3099-3108, 1973). En la presente solicitud de patente de adición, los datos de afinidad para la subunidad \alpha2 se expresan como % de inhibición a las concentraciones de 10^{-5} M y 10^{-7} M. Los resultados de estas pruebas se detallan en las Tablas 1 y 2.

TABLA 1 Afinidad por la subunidad \alpha1 del receptor GABA-A

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TABLA 2 Afinidad por la subunidad \alpha2 del receptor GABA-A

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(b) Determinación de la actividad predictiva de sedación-hipnosis in vivo

Los efectos in vivo de estos compuestos fueron evaluados mediante una prueba predictiva de sedación-hipnosis en ratón (D. J. Sanger et al., Eur. J. Pharmacol., 313, 35-42, 1996; y G. Griebel et al., Psychopharmacology, 146, 205-213, 1999).

Se utilizaron grupos de 5 a 8 ratones macho CD1 de 22 a 26 g de peso en el momento de la prueba. Los compuestos se administraron, en suspensión en agar al 0.25% con una gota de Tween 80, por vía intraperitoneal en dosis únicas equimoleculares y a un volumen de administración de 10 ml/Kg. Los animales control recibieron sólo vehículo. Se cuantificó, mediante un Actisystem DAS16 (Panlab SL), el desplazamiento (número de contajes) realizado por los animales durante 30 min, en intervalos de 5 min, tras la administración de los compuestos. Se calculó el porcentaje de inhibición del desplazamiento de los animales tratados respecto a los animales control despreciando los primeros 5 min. Los resultados de esta prueba se detallan en la Tabla 3.

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TABLA 3 Determinación de la sedación-hipnosis en ratón

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Ejemplo 1 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(prop-2-inil)-metansulfonamida

0.042 g (0.33 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.1 g (0.33 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-prop-2-inil)-metansulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 62 mg (R=51%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(prop-2-inil)-metansulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 2.55 (1H, t, J= 2.4 Hz), 3.11 (3H, s), 4.54 (2H, s), 7.31 (1H, d, J= 4.8 Hz), 7.67 (1H, t, J= 8 Hz), 7.89-7.92 (1H, m), 7.99-8.02 (1H, m), 8.26-8.28 (1H, m), 8.83 (1H, s), 9 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 372 (MH+)

HPLC = 88.5%.

Ejemplo 2 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-etansulfonamida

0.028 g (0.26 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.07 g (0.26 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-propil)-etansulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 24 mg (R=29%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-etansulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 0.94 (3H, t, J= 7.6 Hz), 1.42 (3H, T, J= 7.6 Hz), 1.54-1.60 (2h, m), 3.06-3.12 (2H, q, J= 7.6 Hz), 3.74 (2H, T, J= 7.6 Hz), 7.31 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.61-7.67 (2H, m), 7.95-7.98 (1H, m), 8.06-8.07 (1H, m), 8.83 ( 1H, s), 8.98-8.99 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 390 (MH+)

HPLC = 96.1%.

Ejemplo 3 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-etil)-etansulfonamida

0.029 g (0.23 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.07 g (0.23 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-etil)-etansulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 21 mg (R=25%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-etil)-etansulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 1.22 (3H, t, J= 7.2 Hz), 1.4 (6H, d, J= 7.2 Hz), 3.28 (1H, m), 3.86 (2H, t, J= 6.8 Hz), 7.31 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.63-7.65 (2H, m), 7.94-7.97 (1H, m), 8.06-8.08 (1H, m), 8.82 (1H, s), 8.98-8.99 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 376 (MH+)

HPLC = 96.4%.

Ejemplo 4 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-prop-2-inil)-propan-2-sulfonamida

0.048 g (0.37 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.125 g (0.37 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-prop-2-inil)-propan-2-sulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 37 mg (R=25%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-prop-2-inil)-propan-2-sulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 1.43 (6H, d, J= 6.4 Hz), 2.43 (1H, s), 3.44-3.5 (1H, m), 4.55 (2H, s), 7.31 (1H, d, J= 4.8 Hz), 7.65 (1H, t, J= 7.6 Hz), 7.80-7.82 (1H, m), 7.99 (1H, d, J= 7.6 Hz), 8.21 (1H, s),8.83(1H, s), 8.99 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 400 (MH+)

HPLC = 100%.

Ejemplo 5 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-etansulfonamida

0.043 g (0.34 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.1 g (0.34 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-metil-etansulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 38 mg (R=31%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-etansulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 1.41 (3H, t, J= 7.2 Hz), 3.11 (2H, q, J= 7.6 Hz), 3.44 (3H, s), 7.3 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.59-7.67 (2H, m), 7.88-7.92 (1H, m), 8.08-8.09 (1H, m), 8.83 (1H, s), 8.99 (1H, d, J= 4.8 Hz).

MS (ES) m/z = 362 (MH+)

HPLC = 96.1%.

Ejemplo 6 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-etansulfonamida

0.026 g (0.21 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.07 g (0.21 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-butil)-etansulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 34 mg (R=41%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-etansulfonamida.

\global\parskip0.990000\baselineskip

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 0.91 (3H, t, J= 7.2 Hz), 1.34-1.43 (5H, m), 1.49-1.52 (2H, m), 3.09 (2H, q, J= 7.2 Hz), 3.78 (2H, t, J= 7.2 Hz), 7.31 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.61-7.67 (2H, m), 7.95-7.98 (1H, m), 8.06 (1H, s),8.23 (1H, s), 8.99 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 404 (MH+)

HPLC = 99.1%.

Ejemplo 7 7-(3-(2-isotiazolidinil-1,1-dioxido)-fenil)-3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidina

0.043 g (0.34 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.1 g (0.34 mmoles) de 3-Dimetilamino-1-[3-(1,1-dioxo-isotiazolidin-2-il)-fenil]-propenona disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 64 mg (R=52%) correspondiente a la 7-(3-(2-isotiazolidinil-1,1-dioxido)-fenil)-3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidina.

^{1}H NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta 2.47-2.51 (2H, m), 3.61 (2H, t, J= 7.2 Hz), 3.86 (2H, t, J= 6.4 Hz), 7.55 (1H, d, J= 7.6 Hz), 7.67 (1H, t, J= 8 Hz), 7.7 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.78-7.81 (2H, m), 9.1 (1H, d, J= 4 Hz), 9.14 (1H, s).

MS (ES) m/z = 360 (MH+)

HPLC = 86.9%.

Ejemplo 8 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-propan-2-sulfonamida

0.062 g (0.48 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.15 g (0.48 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-metil-propan-2-sulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 122 mg (R=67%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-propan-2-sulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 1.39 (6H, d, J= 7.2 Hz), 3.36-3.341 (1H, m), 3.46 (3H, s), 7.3 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.59-7.67 (2H, m), 7.85-7.88 (1H, m), 8.10-8.12 (1H, m), 8.82 (1H, s), 8.97-8.99 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 376 (MH+)

HPLC = 91.6%.

Ejemplo 9 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-etil-propan-2-sulfonamida

0.067 g (0.52 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.17 g (0.52 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-etil-propan-2-sulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 97 mg (R=47%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-etil-propan-2-sulfonamida.

MS (ES) m/z = 390 (MH+)

HPLC = 93.9%.

Ejemplo 10 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-propan-2-sulfonamida

0.032 g (0.26 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.09 g (0.26 mmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-butil)-propan-2-sulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 49 mg (R=46%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-butil)-propan-2-sulfonamida.

^{1}H NMR(400 MHz, CDCl_{3}): \delta 0.89(3H, t, J= 7.6 Hz), 1.36 (2H, m), 1.40 (2H, d, J= 6.8 Hz), 1.51 (2H, m), 3.27 (1H, m), 3.80 (2H, t, J= 7.6 Hz), 7.31 (1H, d, J= 4.4 Hz), 7.63-7.65 (2H, m), 7.94-7.96 (1H, m), 8.09(1H, m), 8.82 (1H, s), 8.89 (1H, d, J= 4.4 Hz).

MS (ES) m/z = 418 (MH+)

HPLC = 100%.

Ejemplo 11 N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-propan-2-sulfonamida

0.064 g (0.50 mmoles) de 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina y 0.17 g (0.50 inmoles) de N-[3-[3-(dimetilamino)-1-oxo-2-propenil]fenil]-N-(n-propil)-propan-2-sulfonamida disueltos en 5 ml de ácido acético glacial se mantienen a reflujo durante 8 horas. Transcurrido este tiempo, el disolvente se elimina por destilación a presión reducida y sobre el residuo resultante se añaden 4 ml de diclorometano y 5 ml de disolución saturada de bicarbonato sódico. Separadas las dos fases, se lava la fase acuosa con 5 ml de diclorometano. Las fases orgánicas reunidas se lavan con 5 ml de agua y se secan en presencia de sulfato de magnesio. La fase de diclorometano evaporada a sequedad conduce a un aceite que en presencia de acetato de etilo da un sólido de coloración amarillenta que pesa 116 mg (R=57%) correspondiente a la N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-propil)-propan-2-sulfonamida.

^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 0.93 (3H, t, J= 7.6 Hz), 1.4 (6H, d, J= 7.2 Hz), 1.53-1.58 (2H, m), 3.26-3.29 (1H, m), 3.76 (2H, t, J= 7.6 Hz), 7.31 (1H, d, J= 4.8 Hz), 7.63-7.65 (2H, m), 7.94-7.96 (1H, m), 8.08-8.09 (1H, m), 8.82 (1H, s).

MS (ES) m/z = 404 (MH+)

HPLC = 94.5%.

Ejemplo 12 Comprimidos de 2.5 mg

10

Ejemplo 13 Cápsulas de 5 mg

12

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 14 Gotas orales

13

Claims

1. Mejoras en el objeto de la Patente de Invención Nº P200301747 que se refiere a "3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidinas 7-sustituidas y composiciones y métodos relacionados", que comprende los compuestos de fórmula general (I):

14

donde R_{1} es fenil 3-sustituido por un grupo R_{2} elegido entre (a) y (b):

15

donde

R_{5} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), alquenil (C_{2}-C_{6}), alquinil(C_{2}-C_{6}) y cicloalquil(C_{3}-C_{6});

R_{6} se selecciona entre alquil(C_{1}-C_{6}), cicloalquil(C_{3}-C_{6}), alcoxi(C_{1}-C_{6}), NH-alquil(C_{1}-C_{6}), N(dialquil(C_{1}-C_{6})), alquil(C_{1}-C_{6})-O-alquil(C_{1}-C_{6}), alquil(C_{1}-C_{6})-NH-alquil(C_{1}-C_{6}), alquil(C_{1}-C_{6})-N(dialquil(C_{1}-C_{6})), fenil, fenil monosustituido, furanil, tienil, tiazolil y piridil;

R_{7} se selecciona entre hidrógeno, alquil(C_{1}-C_{6}), cicloalquil(C_{3}-C_{6}), aril y heteroaril sustituido o no; y n es un entero de 0 a 3 inclusive;

y sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 donde donde R_{1} es:

16

y donde R_{5} y R_{6} tienen los significados definidos en la fórmula (I).

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 donde R_{5} se selecciona entre metil, etil, n-propil, n-butil y 2-propinil; y R_{6} se selecciona entre metil, etil e i-propil.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 donde R_{1} es:

17

y donde n y R_{7} tienen los significados definidos en la fórmula (I).

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 4 donde n es 1 y R_{7} es hidrógeno.

6. Un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 2 y 3, donde dicho compuesto se selecciona entre el grupo consistente en:

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-(n-etil)-etansulfonamida;

N-[3-(3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-fenil]-N-metil-etansulfonamida;

7. Un compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 4 y 5, donde dicho compuesto es 7-(3-(2-isotiazolidinil-1,1-dioxido)-fenil)-3-nitro-pirazolo[1,5-a]pirimidina.

8. Un procedimiento para la obtención del compuesto de fórmula (I) y de sus sales farmacéuticamente aceptables según la reivindicación 1, caracterizado por la reacción del intermedio (II):

\vskip1.000000\baselineskip

18

donde R_{1} tiene igual significado que en (I) y Q es un grupo saliente adecuado seleccionado entre N(dialquil(C_{1}-C_{6})), alquiltio(C_{1}-C_{6}) y alcoxi(C_{1}-C_{6}), con 4-nitro-2H-pirazol-3-ilamina (III):

\vskip1.000000\baselineskip

19

y opcionalmente, tratamiento de los compuestos de la reivindicación 1 en forma de base libre con un ácido para formar la sal correspondiente.

9. Un procedimiento tal como el que se reivindica en la reivindicación 8 caracterizado porque se utiliza el intermedio de fórmula (II) donde Q se selecciona entre dimetilamino, metiltio y metoxi.

10. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de las enfermedades relacionadas con la modulación del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

11. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de las enfermedades relacionadas con la modulación de la subunidad \alpha1 del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

12. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de las enfermedades relacionadas con la modulación de la subunidad \alpha2 del receptor GABA-A en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

13. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de la ansiedad en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

14. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de la epilepsia en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

15. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de las alteraciones del sueño en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

16. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención del insomnio en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

17. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para la inducción de sedación-hipnosis en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

18. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para la inducción de anestesia en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

19. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para modular el tiempo necesario para inducir el sueño y su duración en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

20. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 para la fabricación de un medicamento para la inducción de relajación muscular en un mamífero que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad eficaz de dicho compuesto.

21. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 en asociación con excipientes terapéuticamente inertes.