ES2241057T3 - Inhibicion de proteasomas 26s y 20s por medio de indanonas. - Google Patents

Inhibicion de proteasomas 26s y 20s por medio de indanonas.

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ES2241057T3
ES2241057T3 ES97943499T ES97943499T ES2241057T3 ES 2241057 T3 ES2241057 T3 ES 2241057T3 ES 97943499 T ES97943499 T ES 97943499T ES 97943499 T ES97943499 T ES 97943499T ES 2241057 T3 ES2241057 T3 ES 2241057T3
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Abstract

ESTA INVENCION SE REFIERE A UN PROCEDIMIENTO PARA LA INHIBICION DE LA PROLIFERACION CELULAR MEDIANTE INDANONAS.

Description

Inhibición de proteasomas 26S y 20S por medio de indanonas.
Antecedentes de la invención 1. Campo de la invención
La presente invención se refiere a una clase de compuestos de indanona nunca antes considerados para la inhibición de la proliferación celular. Como inhibidores de proliferación celular, los compuestos son útiles para el tratamiento del cáncer, enfermedad cardiovascular, p. ej., restenosis, rechazo del trasplante en el anfitrión, gota y otros trastornos proliferantes además de ser terapéuticos potenciales para las enfermedades autoinmunitarias, tales como la artritis reumatoide, lupus, diabetes de tipo I, esclerosis múltiple y trastornos y enfermedades similares.
2. Descripción de la técnica
La proteinasa multicatalítica o proteasoma es una estructura celular muy conservada que es responsable de la proteolisis dependiente del ATP de la mayoría de las proteínas celulares. El proteasoma 20S (700 kDa) contiene por lo menos cinco actividades proteolíticas distintas que presentan un nuevo tipo de mecanismo que implica un resto de treonina en el punto activo (Coux, O., Tanaka, K. y Goldberg, A. 1996 Ann. Rev. Biochem. 65:801-47).
El proteosoma 20S ha sido cristalizada a partir de la arquebacteria Thermoplasma acidophilum (Lowe, J., Stock, D., Jap, B., Zwickl, P., Baumeister, W., y Huber, R. 1995 Science 268:533-539). El proteasoma 20S arquebacteriano contiene catorce copias de dos tipos distintos de subunidades, \alpha y \beta, que forman una estructura cilíndrica constituida por cuatro anillos agrupados. Los anillos de la parte superior y de la parte inferior contienen siete subunidades \alpha cada uno mientras que los anillos internos contienen siete subunidades \beta. Un poro se extiende a través de la estructura que contiene los puntos proteolíticos activos y las proteínas se destinan al paso de la degradación a través de este canal. El proteosoma 20S eucariótico es más complejo que el de la arquebacteria porque numerosas subunidades distintas han aumentado durante la evolución, sin embargo, las subunidades se pueden clasificar todavía según la nomenclatura \alpha y \beta de la arquebacteria de acuerdo con su homología. Por tanto, la estructura cuaternaria del complejo eucariótico es similar a la de la arquebacteria que comprende dos anillos \alpha y dos \beta. Sin embargo, independientemente del proteosoma arquebacteriano que presenta principalmente actividad proteolítica similar a la quimiotripsina (Dahlmann, B., Kopp, F., Kuehn, L., Niedel, B., Pfeifer, G., Hejerl, R. y Baumeister, W., 1989 FEBS Lett. 251:125-131, Seemuller, E., Lupas, A., Zuhl, F., Zwickl, P. and Baumeister, W. 1995 FEBBS Lett. 359-173-178; y Lowe, J., Stock, D., Jap, B., Zwickl, P., Baumeister, W. y Huber, R. 1995 Science 268:533-539). El proteosoma eucariótico contiene por lo menos cinco actividades de proteasa identificables. Existen péptidos denominados de tipo quimiotripsina, de tipo tripsina y de peptidilglutamina hidrolizables. Se han descrito además otras dos actividades, una que presenta una preferencia para le escisión de los enlaces péptido en la parte del carboxilo de los aminoácidos de cadena ramificada y la otra hacia los enlaces entre pequeños aminoácidos neutros. (Orlowski, M. 1990 Biochemistry 29: 10289-10297).
Aunque el proteasoma 20S contiene el núcleo proteolítico, no puede degradar las proteínas in vivo a menos que esté acomplejado con un casquete de 19S en ambos extremos de su estructura, que contienen múltiples actividades de ATPasa. Esta estructura mayor es conocida como proteasoma 26S y degrada rápidamente las proteínas que han sido dirigidas para su degradación mediante la adición de múltiples moléculas del polipéptido, ubiquitina, de 8,5 kDa.
La primera etapa para la ubiquitinación de una proteína procede por activación de una molécula de ubiquitina en su terminal carboxilo del resto de glicina mediante la adición de ATP que crea un producto intermedio tioéster de alta energía. Esta etapa está catalizada por la enzima activadora de ubiquitina, E1. La ubiquitina se transfiere a continuación a un resto activo de cisteína de una enzima conjugadora de ubiquitina, E2. Las enzimas E2 atacan la ubiquitina en los grupos \varepsilon-amino de los restos de lisina en la proteína sustrato que está destinada a ser degradada. Este proceso, en algunos casos requiere también una ubiquitina ligasa, E3. La conjugación repetida de ubiquitina con restos de lisina de los grupos de ubiquitina unidos anteriormente conduce a la formación de cadenas de multi-ubiquitina y crea un soporte de ubiquitina alrededor de la proteína sustrato. Las proteínas sustrato multi-ubiquitinadas son reconocidas por el proteasoma 26S y son degradadas y las cadenas de multi-ubiquitina se liberan del complejo y se recicla la ubiquitina.
Está todavía bajo investigación qué es lo que origina que una proteína se llegue a ubiquitinar y, por lo tanto, a degradar. Obviamente esto debe ser una serie muy regulada de sucesos ya que la duración crítica de la degradación específica de la proteína es crucial para muchas funciones del ciclo celular. Se han propuesto varias señales que se centran mayormente en las secuencias de la estructura interna dentro del propio sustrato. Una de dichas propuestas es la "regla del N final" en la que el resto del terminal amino de una proteína determina su vida media. Otras proteínas tales como las ciclinas contienen una secuencia corta de aminoácidos muy conservados denominada la "caja de destrucción" que son aparentemente necesarios para la degradación. Además las secuencias "PEST", que están constituidas por regiones ricas en prolina, aspartato, glutamato, serina y treonina también parece que actúan como señales de degradación. Se cree que dichas secuencias internas actúan como elementos de reconocimiento entre el sustrato de proteína y su sistema de ubiquitinación específico.
Se han descrito dos tipos de inhibidores que inhiben la actividad proteolítica del proteasoma. Se ha publicado que determinados aldehídos de péptidos inhiben la actividad de tipo quimiotripsina relacionada con el proteasoma (Vinitsky, A., Michaud, C., Powers, J. y Orlowski, M. 1992 Biochemistry 31:9421-9428; Tsubuki, S., Kawasaki, H., Saito, Y., Miyashita, N., Inomata, M. y Kawashima, S., 1993 Biochem. Biophys. Res. Commun. 196:1195-1201; Rock, K.L., Gramm, C., Rothstein, L., Clark, K., Stein, R., Dick, L., Hwang, D. y Goldberg, A.L. 1994 Cell 78:761-771). Éstos son N-acetil-L-leucinil-L-leucinal-L-norleucinal (ALLN) y un compuesto estrechamente relacionado, N-acetil-L-leucinil-L-leucinil-metional (LLM) con unas K_{i} de 0,14 \muM. El inhibidor más potente de este tipo es un compuesto estructuralmente relacionado, N-carbobenzoxil-L-leucinil-L-leucinil-L-norvalinal (MG 115) que inhibe una K_{i} de 0,021 \muM. Aunque estos aldehídos de péptido son más eficaces contra la actividad proteolítica de tipo quimiotripsina de los proteasomas, estudios meticulosos han demostrado que son inhibidores de proteasa no específicos. Informes más recientes han descrito series de potentes inhibidores de dipéptido que tienen valores de IC_{50} en el intervalo entre 10 y 100 nM in vitro (Iqbal, M., Chatterjee, S., Kauer, J.C., Das, M., Messina, P. A., Freed, B., Biazzo, W. y Siman, R. 1995 J. Med. Chem. 38:2276-2277) y una serie de inhibidores igualmente potentes in vitro de dipéptidos derivados de \alpha-cetocarbonilo y del éster bórico (Iqbal, M., Chatterjee, S., Kauer, J.C., Mallamo, J.P., Messina, P.A., Reiboldt, A. y Siman, R. 1996 Bioorg. Med. Chem. Lett. 6:287-290).
Otro informe describe una clase de compuestos que presentan especificidad en la inhibición de la actividad del proteasoma (Fenteany, G., Standaert, R.F., Lane, W.S., Choi, S., Corey, E.J. y Schreiber, S.L. 1995 Science 268:726-731). La lactacistina es un metabolito de Streptomyces que inhibe específicamente la actividad proteolítica del complejo de proteasoma. Esta molécula se descubrió al principio por su capacidad para producir excrecencia de la neurita en una línea de células de neuroblastoma (Omura et al., 1991 J. Antibiot. 44:113) después se demostró que inhibe la proliferación de varios tipos de células (Fenteany et al., 1994 Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:3358). Utilizando lactacistina radiomarcada, los estudios de enlace (Fenteany et al., 1995 Science 268:726-731) han identificado el punto de unión y el mecanismo de acción. Estos estudios han demostrado que la lactacistina se une de forma irreversible a un resto de treonina situado en el terminal amino de la subunidad \beta de los proteasomas. Una serie de análogos basados en la estructura de la lactacistina se han investigado también (Fenteany et al., 1995 Science 268:726-731). Estos estudios indicaron que la estructura de la \beta-lactona era esencial para su actividad inhibidora.
Ahora está muy demostrado que el proteasoma es el principal sistema proteolítico extralisosómico que está implicado en las trayectorias degradadoras que producen numerosas y diversas funciones celulares tales como la división celular, el tratamiento del antígeno y la degradación de proteínas reguladoras de vida corta tales como los factores de transcripción, los productos del oncogén y las ciclinas (estudiados en Ciechanover, A. 1994 Cell 79:13-21). La función principal del proteasoma consiste en catalizar la proteolisis de proteínas en pequeños péptidos. Sin embargo se ha demostrado también que la trayectoria ubiquitina-proteasoma puede catalizar el tratamiento proteolítico regulado de un gran precursor inactivo en una proteína activa. El caso mejor documentado de esto implica la activación del factor de transcripción NF-\kappaB (Palombella, V.J., Rando, O.J., Goldberg, A.L. y Maniatis, T. 1994 Cell 78:773-785). La forma activa de NF-\kappaB es un heterodímero constituido por una subunidad p65 y una p50. Esta última está presente en el citosol de la célula en forma de precursor inactivo, a saber p105, precursor de p50 polipéptido de 105 kDa. El tratamiento proteolítico de p105 para generar p50 tiene lugar mediante la trayectoria ubiquitina-proteasoma. Además, el p50 y el p65 procesados se mantienen en el citosol como un complejo inactivo con la proteína inhibidora I\kappaB. Las señales inflamatorias activan NF-\kappaB iniciando el curso de la señalización para la degradación completa de I\kappaB, y también estimulan el tratamiento de p105 en p50. De este modo dos sucesos proteolíticos, ambos gobernados por la trayectoria ubiquitina-proteasoma se necesitan para la activación inducida de la señal de NF-\kappaB. No se conoce qué origina la terminación de la proteolisis de p105 tras la generación de p50 pero se ha propuesto que la conformación de p50 puede hacerlo resistente a un tratamiento posterior y dar lugar a que se disocie en el complejo 26S.
El hecho de que el proteasoma desempeña un suceso crítico en la activación del NF-\kappaB podría explotarse clínicamente mediante la utilización de inhibidores dirigidos hacia la proteolisis del proteasoma. En determinadas enfermedades la función normal del NF-\kappaB activo puede ser perjudicial para la salud humana como se observa en las respuestas inflamatorias tras la infección bacteriana, micótica o vírica. Por lo tanto los inhibidores de la activación de NF-\kappaB, debido a su capacidad para impedir la secreción de citocinas, pueden tener utilidad potencial en el tratamiento del ARDS (síndrome disneico agudo) y del SIDA. Como la activación del NF-\kappaB es también esencial para la angiogénesis, los inhibidores de proteasoma pueden tener utilidad en el tratamiento de aquellas enfermedades relacionadas con la neovascularización anómala.
Al principio p53 se describió como una oncoproteína pero desde entonces se ha demostrado que está implicado en muchos procesos celulares (estudiados por Ko, L.J. y Prives, C. 1996 Genes Dev. 10, 1054-1072). Se ha demostrado que p53 produce apoptosis en varias líneas celulares hematopoyéticas (Oren, M., 1994 Semin. Cancer Biol. 5, 221-227) mediante la acción de muchos estímulos diferentes que incluyen la alteración del ADN, la infección viral y la eliminación de los factores de crecimiento. Sin embargo, es importante observar que la apoptosis puede producirse de manera independiente de p53, por ejemplo, mediante la acción de glucocorticoides. La producción de p53 conduce a la interrupción del crecimiento celular en la fase G1 del ciclo celular así como a la muerte celular por apoptosis. Ambas funciones permiten a p53 controlar la alteración del ADN reduciendo de este modo la propagación de las mutaciones del ADN cuando se dividen las células. p53 detiene las células en G1 produciendo el inhibidor de cinasa dependiente de ciclina, p21, que a su vez produce una acumulación de la forma hipofosforilada del producto del gen el retinoblastoma. Se cree que p53 actúa como un punto de comprobación en la célula tras la alteración del ADN, ello da lugar en primer lugar a una interrupción de la división celular y a la apoptosis. Es conocido que la degradación de p53 procede a través de la trayectoria ubiquitina-proteosoma y la destrucción de la degradación de p53 es un modo posible de producir apoptosis. Otra utilidad potencial de los inhibidores de proteasoma puede consistir en el tratamiento de enfermedades que proceden de la proliferación celular anómala.
Está muy documentado que el curso ubiquitina-proteasoma es crítico para la destrucción regulada de las ciclinas que regulan la salida de la mitosis y permiten a las células evolucionar a la fase siguiente del ciclo celular. Por lo tanto la inhibición de la degradación de las ciclinas utilizando inhibidores de proteasoma produce la interrupción del crecimiento. Por consiguiente otra utilidad potencial de los inhibidores de proteasoma consiste en su utilización en el tratamiento de enfermedades que proceden de una división celular acelerada. Éstas incluyen el cáncer, las enfermedades cardiovasculares tales como miocarditis, restenosis tras la angioplasia, nefropatías tales como lupus, poliquistosis renal, infecciones micóticas, enfermedades dermatológicas tales como psoriasis, cicatrización anormal de las heridas, queloides, enfermedades inmunológicas tales como la autoinmunidad, asma y alergia, hipersensibilidad aguda y retardada, enfermedad injerto frente a huésped, rechazo del trasplante y enfermedades neuroinmunológicas tales como la esclerosis múltiple y la encefalomielitis aguda diseminada.
Sumario de la invención
Un objetivo de la presente invención consiste en proporcionar compuestos útiles para la inhibición de la proliferación celular en mamíferos.
Un objetivo de la presente invención consiste en proporcionar compuestos útiles para el tratamiento eficaz de las enfermedades que proceden de la división celular acelerada.
Otro objetivo de la presente invención consiste en proporcionar compuestos útiles para el tratamiento de enfermedades proliferantes inhibiendo la degradación de los inhibidores del proteasoma.
Otro objetivo de la presente invención consiste en utilizar una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos para inhibir los trastornos proliferantes de las células en el hombre.
En una forma de realización, la presente invención proporciona compuestos que son útiles para la inhibición de la proliferación celular en mamíferos y que tienen la fórmula general:
1
en la que R_{1}, R_{2}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8} y R_{9} cada uno es hidrógeno y R_{3} es -OCH_{3}; y X es
2
en la que D_{1} y D_{2} son cada uno restos de aminoácidos; y E se selecciona de entre el grupo constituido por un resto de aminoácido y -NRR', en el que R y R' se seleccionan indistintamente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C_{1-10}, alquilo C_{1-10} sustituido, arilo y arilo sustituido.
Los compuestos son útiles, cuando se administran en cantidades terapéuticas, para el tratamiento de mamíferos, y preferentemente para el tratamiento de seres humanos que padecen trastornos proliferantes de las células, enfermedades infecciosas y enfermedades inmunológicas.
Descripción de las figuras
En las Figuras, la Figura 1 es un análisis de inmunorreactividad por transferencia Western que utiliza un anticuerpo anti-I\kappaB\alpha de un extracto de células RAW que ha sido tratado con los compuestos 173 y 187 que se describen en la Tabla 1;
la Figura 2 es un análisis de inmunorreactividad por transferencia Western para un anticuerpo anti-P50 de extractos de células RAW que han sido tratadas con el compuesto 187 que se describe en la Tabla 1 antes de la exposición a su LPS; y
la Figura 3 es un análisis de desplazamiento por movilidad del gel utilizando un extracto nuclear preparado a partir de células RAW que habían sido pretratadas con el compuesto 187 que se describe en la Tabla 1 antes de la exposición a LPS.
Descripción de la forma de realización actual
La presente invención proporciona compuestos que son útiles para la inhibición de trastornos de proliferación celular, enfermedades infecciosas y enfermedades inmunológicas en mamíferos y especialmente en el hombre que tienen la fórmula general:
3
en la que R_{1}, R_{2}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8} y R_{9} cada uno es hidrógeno y R_{3} es -OCH_{3}; y X es
4
en la que D_{1} y D_{2} son cada uno restos de aminoácidos; y E se selecciona de entre el grupo constituido por un resto de aminoácido y -NRR', en el que R y R' se seleccionan indistintamente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C_{1-10}, alquilo C_{1-10} sustituido, arilo y arilo sustituido.
Los términos siguientes se utilizan para describir varios constituyentes de los compuestos de la presente invención. Los términos se definen de la forma siguiente:
El término "halógeno" se refiere a los átomos de flúor, bromo, cloro y yodo.
El término "hidroxilo" se refiere al grupo -OH.
El término "oxo" se refiere al grupo =O.
El término "tiol" o "mercapto" se refiere al grupo -SH y -S(O)_{0-2}.
La expresión "alquilo inferior" se refiere a un grupo alquilo cíclico, con cadena lineal o ramificada de uno a diez átomos de carbono. Esta expresión está ejemplificada además por grupos tales como metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, t-butilo, i-butilo (ó 2-metilpropilo), ciclopropilmetilo, i-amilo, n-amilo, hexilo y similares.
La expresión "alquilo inferior sustituido" se refiere al alquilo inferior recién descrito incluyendo uno o más grupos tales como hidroxilo, tiol, alquiltiol, halógeno, alcoxi, amino, amido, carboxilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterociclo, cicloheteroalquilo, cicloheteroalquilo sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, ariloxi, hetarilo, hetarilo sustituido, aralquilo, heteroaralquilo, alquil alquenilo, alquil alquinilo, alquil cicloalquilo, alquil cicloheteroalquilo y ciano. Estos grupos pueden estar unidos a cualquier átomo de carbono del grupo alquilo inferior.
El término "alquenilo" se refiere a un grupo -CR'=CR''R''', en el que R', R'', R''' se selecciona cada uno de entre hidrógeno, halógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido o similares tal como se definió.
El término "alquinilo" se refiere a un grupo -C\equivCR'; en el que R' se selecciona de entre hidrógeno, halógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido o similares tal como se definió.
El término "alquil alquenilo" se refiere a un grupo -R-CR'=CR'''R'''', en el que R es alquilo inferior o alquilo inferior sustituido, R', R''', R'''' se selecciona cada uno independientemente de entre hidrógeno, halógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, hetarilo o hetarilo sustituido tal como se definió
anteriormente.
El término "alquil alquinilo" se refiere a un grupo -RC\equivCR' en el que R es alquilo inferior o alquilo inferior sustituido, R' es hidrógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, hetarilo o hetarilo sustituido tal como se definió anteriormente.
El término "alcoxi" significa el grupo -OR, en el que R es alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, acilo, arilo, arilo sustituido, aralquilo, aralquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, cicloheteroalquilo o cicloheteroalquilo sustituido tal como se definió anteriormente.
El término "alquiltio" significa el grupo -SR, -S(O)_{n=1-2}-R, en el que R es alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, arilo, arilo sustituido, aralquilo o aralquilo sustituido tal como se definió anteriormente.
El término "acilo" significa grupos -C(O)R, en el que R es hidrógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, arilo, arilo sustituido y similares tal como se definió anteriormente.
El término "ariloxi" significa grupos -OAr, en el que Ar es un grupo arilo, arilo sustituido, heteroarilo o heteroarilo sustituido tal como se definió anteriormente.
El término "amino" significa el grupo NRR', en el que R y R' pueden ser independientemente hidrógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, arilo, arilo sustituido, hetarilo, cicloalquilo o hetarilo sustituido tal como se definió anteriormente o acilo.
El término "amido" significa el grupo -C(O)NRR', en el que R y R' pueden ser independientemente hidrógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, arilo, arilo sustituido, hetarilo, o hetarilo sustituido tal como se definió anteriormente.
El término "carboxilo" significa el grupo -C(O)OR, en el que R puede ser independientemente hidrógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, arilo, arilo sustituido, hetarilo y hetarilo y similares tal como se definió.
Los términos "arilo" o "Ar" se refieren a un grupo carbocíclico aromático que tiene por lo menos un anillo aromático (p. ej., fenilo o bifenilo) o múltiples anillos condensados y que por lo menos un anillo es aromático (p. ej., 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, naftilo, antrilo o fenantrilo).
El término "arilo sustituido" se refiere a un arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos funcionales, p. ej., halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío inferior, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "heterociclo" se refiere a un grupo carbocíclico saturado, insaturado o aromático con un solo anillo (p. ej., morfolino, piridilo o furilo) o múltiples anillos condensados (p. ej., naftpiridilo, quinoxalilo, quinolinilo, indolizinilo o benzo[b]tienilo) y que tiene por lo menos un heteroátomo, tal como N, O o S, en el anillo, que puede estar opcionalmente insustituido con p. ej., halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío inferior, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
Los términos "heteroarilo" o "hetarilo" se refiere a un heterociclo en el que por lo menos un anillo heterocíclico es aromático.
El término "heteroarilo sustituido" se refiere a un heterociclo opcionalmente mono o polisustituido con uno o más grupos funcionales, p. ej., halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "aralquilo" se refiere al grupo -R-Ar, en el que Ar es un grupo arilo y R es un grupo alquilo inferior o alquilo inferior sustituido. Los grupos arilo pueden estar opcionalmente insustituidos o sustituidos con, p. ej., halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "heteroalquilo" se refiere al grupo -R-Het, en el que Het es un grupo heterociclo y R es un grupo alquilo inferior. Los grupos heteroalquilo pueden estar opcionalmente insustituidos o sustituidos, p. ej., con halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "heteroarilalquilo" se refiere al grupo -R-HetAr en el que HetAr es un grupo heteroarilo y R es alquilo inferior o alquilo inferior sustituido. Los grupos heteroarilalquilo pueden estar opcionalmente insustituidos o sustituidos, p. ej., con halógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, alcoxi, alquiltío, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "cicloalquilo" se refiere a un grupo alquilo cíclico o policíclico divalente que contiene 3 a 15 átomos de carbono. Para los grupos policíclicos, éstos pueden ser anillos múltiples condensados en los que uno de los anillos distales puede ser aromático (p. ej., indanilo, tetrahidronaftaleno, etc.).
El término "cicloalquilo sustituido" se refiere a un grupo cicloalquilo que comprende uno o más sustituyentes, p. ej., halógeno, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, alcoxi, alquiltío, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "cicloheteroalquilo" se refiere a un grupo cicloalquilo, en el que uno o más de los átomos de carbono del anillo está sustituido con un heteroátomo (p. ej., N, O, S o P).
El término "cicloheteroalquilo sustituido" se refiere a un grupo cicloheteroalquilo tal como el definido en la presente memoria que contiene uno o más sustituyentes, tales como halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío inferior, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "alquil cicloalquilo" se refiere al grupo -R-cicloalquilo, en el que cicloalquilo es un grupo cicloalquilo y R es alquilo inferior o alquilo inferior sustituido. Los grupos cicloalquilo puede estar opcionalmente insustituidos o sustituidos, p. ej., con halógeno, alquilo inferior, alcoxi inferior, alquiltío, trifluormetilo, amino, amido, carboxilo, hidroxilo, arilo, ariloxi, heterociclo, hetarilo, hetarilo sustituido, nitro, ciano, alquiltío, tiol, sulfamido y similares.
El término "aminoácido" se refiere al isómero D- o L- de alfa aminoácidos naturales y sintéticos, preferentemente los aminoácidos naturales son alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina o valina.
Normalmente, E puede ser un aminoácido. Con frecuencia se prefieren aminoácidos lipófilos. En general, las abreviaturas de los aminoácidos siguen la Comisión Conjunta de la IUPAC-IUB sobre nomenclatura bioquímica tal como se describe en Eur. J. Biochem., 158, 9 (1984).
Se prefiere que -D_{1} sea leucina y -D_{2} sea leucina y E sea NR'R''. Es más preferible que -D_{1} sea l-leucina y -D_{2} sea d-leucina y que E se seleccione de entre el grupo de compuestos constituidos por bencilamina, l-indanilamina, N,N'-dibencilamina, 2,6-difluorobencilamina, 4-metoxibencilamina, piperonilamina, NH_{2} y glucinamida.
En una forma de realización preferida, D_{1} es leucina, D_{2} es leucina y E es bencilamina. En otra forma de realización preferida, D_{1} es leucina, D_{2} es leucina y E es 1-indanilamina. En otra forma de realización preferida todavía, D_{1} es leucina, D_{2} es leucina y E es N,N-dibencilamina. En otra forma de realización preferida, D_{1} es leucina, D_{2} es leucina y E es 2,6-difluorbencilamina.
En estas formas de realización preferidas, se prefiere más que D_{1} sea L-leucina y D_{2} sea D-leucina.
Está dentro del conocimiento de un experto en la materia que los estereoisómeros de los compuestos descritos en la presente memoria así como los isómeros y estereoisómeros de los componentes que comprenden los compuestos identificados en la presente memoria están todos comprendidos dentro del alcance de los compuestos de la presente invención.
Si los compuestos de la presente invención contienen un grupo básico, se pueden preparar sales de adición de ácido. Las sales de adición de ácido de los compuestos se preparan de la manera habitual en un disolvente adecuado a partir del compuesto precursor y un exceso de ácido, tal como, pero sin limitarse a, clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, maleico, succínico o metansulfónico. Si el compuesto final contiene un grupo ácido, se pueden preparar sales catiónicas. Normalmente el compuesto precursor se trata con un exceso de un reactivo alcalino, tal como hidróxido, carbonato o alcóxido, que contiene el catión apropiado. Cationes tales como, Na^{+}, K^{+}, Ca^{2+} y NH_{4}^{+} son ejemplos de cationes presentes en las sales farmacéuticamente aceptables. Determinados compuestos forman sales internas o iones bipolares que pueden ser también aceptables.
Los compuestos descritos anteriormente son útiles para el tratamiento de los trastornos de proliferación celular, enfermedades infecciosas y enfermedades inmunológicas en mamíferos, y particularmente, en pacientes humanos que necesitan dicho tratamiento. Los trastornos proliferantes de las células que se pueden tratar utilizando los compuestos descritos anteriormente incluyen el cáncer, la enfermedad cardiovascular tales como la miocarditis y la restenosis tras la angioplasia, enfermedades renales tales como lupus y poliquistosis renal, rechazo del trasplante en el anfitrión, gota y otros trastornos proliferantes. Las enfermedades autoinmunitarias que se pueden tratar con los compuestos descritos anteriormente incluyen la artritis reumatoide, lupus, diabetes de tipo I, esclerosis múltiple y trastornos y enfermedades similares. Las enfermedades infecciosas que se pueden tratar utilizando los compuestos descritos anteriormente incluyen IBD, enfermedad de Crohn, SIDA, ARDS y trastornos similares. Los compuestos dados a conocer anteriormente se pueden utilizar para tratar infecciones micóticas, enfermedades dermatológicas tales como psoriasis, cicatrización anormal de las heridas, queloides, enfermedades inmunológicas tales como la autoinmunidad, asma, alergia, hipersensibilidad aguda y retardada, enfermedad injerto contra huésped, rechazo del trasplante y enfermedad neuroinmunológica tales como la esclerosis múltiple y la encefalomielitis aguda diseminada.
El compuesto seleccionado o las combinaciones del mismo se pueden administrar por vía parenteral u oral en una cantidad eficaz, preferentemente dispersado en un portador farmacéutico. Las unidades de dosificación del ingrediente activo se seleccionan generalmente de entre el intervalo de 0,01 a 100 mg/kg, pero serán determinadas fácilmente por un experto en la materia dependiendo de la vía de administración, de la edad y de la enfermedad del paciente. Las unidades de dosificación se pueden administrar desde una a diez veces al día o más para la enfermedad aguda o crónica. No se esperan efectos toxicológicos inaceptables cuando los compuestos de la invención se administran según la presente invención.
Las composiciones farmacéuticas de los compuestos de la presente invención o de los derivados de los mismos, se pueden formular como soluciones o polvos liofilizados para administración parenteral. Los polvos se pueden redisolver mediante la adición de un diluyente adecuado o de otro portador farmacéuticamente aceptable antes de su utilización. La formulación líquida generalmente es una solución acuosa, tamponada e isotónica. Ejemplos de diluyentes adecuados son la solución salina isotónica normal, dextrosa 5% estándar en agua o solución tamponada de acetato de sodio o de amonio. Dicha formulación es especialmente adecuada para administración parenteral, pero se pueden también utilizar para administración oral. Puede ser deseable añadir excipientes tales como polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxicelulosa, acacia, polietilenglicol, manitol, cloruro de sodio o citrato de sodio. Como alternativa, estos compuestos pueden estar encapsulados, en comprimidos o preparados en una emulsión o jarabe para administración oral. Se pueden añadir portadores sólidos o líquidos farmacéuticamente aceptables para potenciar o estabilizar la composición o para facilitar la preparación de la composición. Los portadores líquidos incluyen jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, glicerina, solución salina, alcoholes y agua. Los portadores sólidos incluyen, pero no se limitan a, almidón, lactosa, sulfato de calcio, dihidrato, terra alba, estearato de magnesio o ácido esteárico, talco, pectina, acacia, agar-agar o gelatina. El portador puede incluir además un material de liberación lenta tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o con una cera. La cantidad de portador sólido varía pero, preferentemente, estará comprendido aproximadamente entre 20 mg y aproximadamente 1 g por unidad de dosificación. Las preparaciones farmacéuticas se preparan siguiendo técnicas convencionales de farmacia que implican molienda, mezclado, granulación y compresión, cuando sea necesario, para las formas en comprimido; o molienda, mezclado y rellenado para las formas en cápsulas de gelatina dura. Cuando se utiliza un portador líquido, la preparación estará en forma de jarabe, elixir, emulsión o de una suspensión acuosa o no acuosa. Dicha formulación líquida se puede administrar directamente por vía oral (p.o) o rellenar en una cápsula de gelatina blanda.
Ejemplo 1
Los compuestos de la presente invención se preparan por procedimientos convencionales de química orgánica. Los reactivos de acoplamiento son bien conocidos en la técnica, tales como DCC y otras carbodiimidas, EDC, BOP y PPA, y se pueden utilizar opcionalmente con otros reactivos, tales como HOBT, NMM y DMAP, que pueden facilitar la reacción. La preparación de los compuestos de fórmula (1) en los que E es un aminoácido es bien conocida en la técnica utilizando técnicas en fase de solución o fase sólida convencional tal como las descritas en Bodanszky, "The Practice of Peptide Synthesis", Springer-Verlag, primera edición, 1984. Los grupos protectores adecuados para el grupo amino son los dados a conocer por Greene et al., "Protective Groups in Organic Synthesis", segunda edición, John Wiley and Sons, Nueva York, 1991. Los grupos benciloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo y fluorenilmetoxicarbonilo son grupos protectores amino particularmente útiles.
La síntesis de péptidos en fase sólida se llevó a cabo de la forma siguiente. Se coloca resina de amida de Rink en un filtro fritado adaptado con jeringuilla. La resina se desprotege utilizando piperidina al 20% en DMF. Después de 20 minutos, se lavó la resina cinco veces con DMF, cinco veces con metanol, a continuación cinco veces con DMF. Se extrajo en la jeringuilla una solución de aminoácidos (E), carbodiimida y HOBT en DMF y la mezcla de reacción se dejó mezclar durante 4 a 20 horas. Se tiró la solución de reacción y se lavó la mezcla cinco veces con DMF, cinco veces con metanol, a continuación cinco veces con DMF. Se repitió este ciclo hasta que se acopló la secuencia deseada. El acoplamiento final utilizó ácido 5-metoxi-1-indanona-3-acético, carbodiimida y HOBT. Tras los lavados finales de la resina, se escindió el fragmento de péptido de la resina utilizando 95% de TFA/5% de agua. La concentración de la mezcla de escisión dio un sólido blanco.
Ejemplo 2
Los compuestos de la presente invención preparados según el procedimiento del Ejemplo 1 se probaron de la forma siguiente. La subunidad catalítica 20S del proteasoma (conocida también como complejo multicatalítico de proteinasa) se purificó hasta homogeneidad en el cerebro bovino según los procedimientos publicados (Wilk S. y Orlowski, M., J. Neurochem 40:842-849). Se mide la actividad quimiotríptica del complejo aumentando la fluorescencia seguido de la escisión del péptido substrato succinil-leucina-leucina-valina-tirosina-7-amino-4-metilcumarina. El ensayo normal in vitro está constituido por 2 \mug de proteasoma 20S, 0,1 a 100 \mug/ml de inhibidor de proteasoma en 200 \mul de HEPES 50 mM, que contiene dodecilsulfato de sodio al 0,1%, pH 7,5. La reacción proteolítica se inicia mediante la adición de sustrato de péptido fluorógeno 50 \muM y permitió evolucionar durante 15 minutos a 37ºC. La reacción se termina mediante la adición de 100 \mul de tampón de acetato 100 mM, pH 4,0. La velocidad de la proteolisis es directamente proporcional a la cantidad de aminometilcumarina liberada que se mide por espectroscopía fluorescente (EX 370 nm, EM 430 nm). Las estructuras de los compuestos ensayados así como los resultados de la prueba se describen en la Tabla 1, a continuación. Los compuestos, que no están comprendidos por las reivindicaciones de la presente invención, se exponen únicamente a título comparativo.
TABLA 1
5
6
7
8
9
10
Ejemplo 3
Los compuestos preparados según el procedimiento del Ejemplo 1 se analizaron frente a varias líneas celulares diferentes. Se cultivaron monocapas de células en presencia del compuesto de ensayo durante 18 horas para evaluar su capacidad para inhibir la proliferación celular. Se determinó la proliferación celular por colorimetría utilizando el análisis de proliferación celular no radioactivo acuoso Celltiter 96 (Promega) en el que la proliferación celular es directamente proporcional a la absorbancia a 490 nm. Los resultados se expresan como IC_{50} en \mug/ml para la inhibición de la proliferación celular en varios tipos de células.
11 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 4
Se determinó la inhibición de LPS producida por la síntesis de TNF en los compuestos preparados según el procedimiento del Ejemplo 1. Se pretrataron células RAW con diferentes concentraciones del compuesto de ensayo durante 1 hora antes de la administración de lipopolisacárido (100 ng/ml). Se recogieron los sobrenadantes del cultivo celular tras 1 hora y se analizó la concentración de TNF por ELISA (Biosource).
\newpage
Compuesto IC_{50} (\mug/ml)
173 5
187 5
194 3
196 3
197 3
Ejemplo 5
Este Ejemplo examina la capacidad del compuesto 173 y particularmente del compuesto 187 descrito anteriormente en la Tabla 1 para inhibir la actividad del proteasoma como se indica, en parte, por la presencia de I\kappaB y/o de p105 en las células inhibidas. Con el fin de trasladar NF-\kappaB al núcleo en respuesta de un estímulo tal como el lipopolisacárido (LPS) y activar la transcripción se necesita que ocurran dos sucesos proteolíticos, a saber la degradación de la proteína I\kappaB inhibidora y la transformación de p105 a p50. Estos sucesos proteolíticos sirven para desenmascarar la señal de localización nuclear de NF-\kappaB.
Inhibición de la degradación de I\kappaB producida por LPS
Se pretrataron células RAW con diferentes concentraciones del compuesto de la prueba durante 1 hora antes de la administración de lipopolisacárido (100 ng/ml). Se recogieron todos los lisados celulares tras 1 hora, se separó 10 \mug de proteína por SDS-PAGE, se transfirió a nitrocelulosa y se analizó la inmunorreactividad con anticuerpo anti-I\kappaBa. Se observaron las transferencias Western (véase la Figura 1) utilizando el kit de detección quimioluminiscente de Boehringer Mannheim. La transferencia demuestra que I\kappaB está presente en las células tratadas con una cantidad tan pequeña como 5 \mug/ml de los compuestos 173 y 187.
Inhibición de la transformación de p150 a p50 producida por LPS
Se utilizó el compuesto 187 como se describe en la Tabla 1 para pretratar las células RAW tal como se describió anteriormente y se analizó la inmunorreactividad para con un anticuerpo anti-p50 de todos los lisados celulares preparados como se describió anteriormente. Estos resultados, indicados en la Figura 2 indican que p50 y p150 están presentes en las células tratadas con una cantidad tan pequeña como 5 \mug/ml de compuesto 187, mientras que en las células sin tratar, la mayoría de p105 se ha transformado en p50.
Inhibición de la transposición producida por LPS de NF-\kappaB en la fracción nuclear de la célula
Se trataron células RAW durante 1 hora con el compuesto 187 (20 \mug/ml) y a continuación se incubaron con lipopolisacárido (100 ng/ml) durante una hora más. Se prepararon fracciones nucleares según los procedimientos normalizados. Las reacciones de unión para los ensayos de desplazamiento por movilidad en el gel contenían 5 \mug de proteína de extracto nuclear, 50.000 cpm de oligonucleótido que se une por consenso a NF-\kappaB marcado con ^{32}P en presencia y ausencia de un exceso de cincuenta veces de oligonucleótido sin marcar. El ensayo de desplazamiento por movilidad del gel, indicado en la Figura 3 demuestra que el compuesto 187 es eficaz en la inhibición de la acumulación de NF-\kappaB en el núcleo de las células.

Claims (22)

1. Compuesto de fórmula:
12
en la que R_{1}, R_{2}, R_{4}, R_{5}, R_{6}, R_{7}, R_{8} y R_{9} cada uno es hidrógeno y R_{3} es -OCH_{3}; y X es
13
en la que D_{1} y D_{2} son cada uno restos de aminoácidos; y E se selecciona de entre el grupo constituido por un resto de aminoácido y -NRR', en el que R y R' se seleccionan indistintamente de entre el grupo constituido por hidrógeno, alquilo C_{1-10}, alquilo C_{1-10} sustituido, arilo y arilo sustituido.
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que el alquilo C_{1-10} sustituido es alquilo C_{1-10} sustituido con arilo o arilo sustituido.
3. Compuesto según la reivindicación 1 ó 2, en el que D_{1} y D_{2} se seleccionan cada uno de entre el grupo constituido por -leucina y D-leucina.
4. Compuesto según la reivindicación 3, en el que D_{1} es L-leucina y D_{2} es D-leucina.
5. Compuesto según la reivindicación 4, en el que E se selecciona de entre el grupo constituido por gly-NH_{2}, bencilamina, dibencilamina y 2,6-fluorbencilamina.
6. Compuesto de fórmula:
14
en la que R_{1} es H y R_{2} se selecciona de entre el grupo constituido por bencilo, hidroxietilo, adamantilo, fenilo, fenetilo y ciclohexilmetilo o R_{1} es bencilo y R_{2} metilo o bencilo.
7. Compuesto según la reivindicación 6, en el que R_{1} es hidrógeno y R_{2} es bencilo.
8. Compuesto de fórmula:
15
en la que R se selecciona de entre el grupo constituido por 1-indanilo, piperonilo, 2,6-difluorbencilo, bencilo, 4-metoxibencilo y 4-nitrobencilo.
9. Compuesto según la reivindicación 8, en el que R es 2,6-difluorbencilo.
10. Utilización de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para la preparación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento de una enfermedad seleccionada de entre el grupo constituido por trastornos de proliferación celular, trastornos del sistema inmunitario y enfermedades infecciosas en un mamífero.
11. Utilización según la reivindicación 10, en la que el mamífero es un ser humano.
12. Utilización según la reivindicación 10 u 11, en la que la cantidad terapéuticamente eficaz oscila entre 0,001 y 100 mg/kg del peso del mamífero.
13. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, en la que el trastorno de proliferación celular se selecciona de entre el grupo constituido por artritis reumatoide, lupus, diabetes de tipo I, esclerosis múltiple, cáncer, restenosis, enfermedad injerto contra huésped y gota.
14. Utilización según la reivindicación 13, en la que el trastorno de proliferación celular es la restenosis.
15. Utilización según la reivindicación 13, en la que el trastorno de proliferación celular es el cáncer.
16. Utilización según la reivindicación 13, en la que la composición farmacéutica produce apoptosis.
17. Utilización según la reivindicación 13, en la que el trastorno de proliferación celular es la poliquistosis renal.
18. Utilización según las reivindicaciones 10 a 12, en la que la enfermedad es una enfermedad infecciosa.
19. Utilización según la reivindicación 18, en la que la enfermedad infecciosa se selecciona de entre el grupo constituido por IBD, enfermedad de Crohn, SIDA, ARDS y enfermedades micóticas.
20. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, en la que el trastorno del sistema inmunitario se selecciona de entre el grupo constituido por artritis reumatoide, enfermedades autoinmunitarias, rechazo del trasplante y psoriasis.
21. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 20, en la que la composición farmacéutica está en forma de solución.
22. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 20, en la que la composición farmacéutica está en forma de comprimido.
ES97943499T 1996-09-24 1997-09-23 Inhibicion de proteasomas 26s y 20s por medio de indanonas. Expired - Lifetime ES2241057T3 (es)

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Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2219867A1 (en) * 1997-10-31 1999-04-30 Jiangping Wu The use of proteasome inhibitors for treating cancer, inflammation, autoimmune disease, graft rejection and septic shock
US6075150A (en) * 1998-01-26 2000-06-13 Cv Therapeutics, Inc. α-ketoamide inhibitors of 20S proteasome
FR2779653B1 (fr) * 1998-06-11 2002-12-20 Inst Nat Sante Rech Med Utilisation de composes modulateurs du proteasome en therapie
US6902721B1 (en) * 1998-07-10 2005-06-07 Osteoscreen, Inc. Inhibitors of proteasomal activity for stimulating bone growth
CN1339970A (zh) * 1999-02-10 2002-03-13 鹤尾隆 抗癌药物增强剂
EP1053750A1 (en) * 1999-04-22 2000-11-22 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Use of proteasome-inhibitor for the induction of programmed cell death (apoptosis)
US20040116329A1 (en) * 2002-01-29 2004-06-17 Epstein Stephen E. Inhibition of proteasomes to prevent restenosis
AU2003206945A1 (en) * 2002-02-22 2003-09-09 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Use of proteinase inhibitors in the treatment of autoimmune diseases
US7223745B2 (en) * 2003-08-14 2007-05-29 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7576206B2 (en) * 2003-08-14 2009-08-18 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
SI2030981T1 (sl) * 2004-05-10 2014-11-28 Onyx Therapeutics, Inc. Spojine za inhibiranje proteasomskega encima
EP1637529A1 (en) * 2004-09-20 2006-03-22 4Sc Ag Novel piperidin-4-yl-thiazole-carboxamide analogues as inhibitors of T-cell proliferation and uses thereof
US7468383B2 (en) * 2005-02-11 2008-12-23 Cephalon, Inc. Proteasome inhibitors and methods of using the same
US7414142B2 (en) 2005-09-19 2008-08-19 Wyeth 5-aryl-indan-1-one oximes and analogs useful as progesterone receptor modulators
US7319152B2 (en) 2005-09-19 2008-01-15 Wyeth 5-Aryl-indan-1-one and analogs useful as progesterone receptor modulators
US7442830B1 (en) 2007-08-06 2008-10-28 Millenium Pharmaceuticals, Inc. Proteasome inhibitors
PT2318419E (pt) 2008-06-17 2015-08-25 Millennium Pharm Inc Compostos de ésteres de boronato e suas composições farmacêuticas
CN102725300B (zh) 2009-12-22 2015-03-11 赛福伦公司 蛋白酶体抑制剂及其制备、纯化、和应用的方法
CN109180780B (zh) * 2012-07-26 2022-03-18 圣特莱国际公司 多肽环氧酮化合物
TWI746422B (zh) 2014-05-20 2021-11-21 美商千禧製藥公司 用於癌症治療的方法
CN104370795B (zh) * 2014-10-15 2016-09-28 复旦大学 一种双靶向卵巢癌细胞微管蛋白及其周围血管的茚酮化合物及其制备方法与应用
CN104557559B (zh) * 2015-01-14 2016-08-17 成都中医药大学 茚满二酮手性环己烷螺环化合物及其制备方法与用途
CN108976145B (zh) * 2017-05-31 2020-12-01 首都医科大学 氨基正己酰氨基甲环酰氨基正己酰极性氨基酸，其合成，活性和应用
CN111467331B (zh) * 2020-05-19 2021-01-26 北京大学 1-茚酮在制备治疗或预防常染色体显性遗传多囊肾病药物的应用
US11452708B2 (en) * 2021-02-08 2022-09-27 King Abdulaziz University Discovery of potent [alpha]-glucosidase inhibitors from Heterophragma adenophyllum

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5021413B1 (en) * 1988-08-24 1994-12-13 Sankyo Co Analgesic thiomorpholins, their preparation, and pharmaceutical compositions containing them
ATE154598T1 (de) * 1990-07-12 1997-07-15 Pfizer Carbamate des indan-pyrrolidins
JPH07119184B2 (ja) * 1991-05-29 1995-12-20 ファイザー・インコーポレーテッド ジヒドロキシインダノン化合物
TW306910B (es) * 1992-09-11 1997-06-01 Hoechst Ag
US5409944A (en) * 1993-03-12 1995-04-25 Merck Frosst Canada, Inc. Alkanesulfonamido-1-indanone derivatives as inhibitors of cyclooxygenase
US5693617A (en) * 1994-03-15 1997-12-02 Proscript, Inc. Inhibitors of the 26s proteolytic complex and the 20s proteasome contained therein
IL112969A (en) * 1994-03-17 2001-05-20 Baxter Int Pharmaceutical compositions for the treatment of cancer comprising allogenic lymphocytes or their combination with a t-cell activator
US6660268B1 (en) * 1994-03-18 2003-12-09 The President And Fellows Of Harvard College Proteasome regulation of NF-KB activity

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Publication number Publication date
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