ES2237756T3

ES2237756T3 - Utilizacion de fosfatidilserinas para la preparacion de un medicamento destinado a mejorar la actividad cerebral.

Info

Publication number: ES2237756T3
Application number: ES95402484T
Authority: ES
Inventors: Masahi c/o K.K. Yakult Honsha Sakai; Hidejuki c/o K.K. Yakult Honsha Yamatoya; Naomi c/o K.K. Yakult Honsha Mizusawa; Satoshi C/O K.K. Yakult Honsha Kudo
Original assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Current assignee: Yakult Honsha Co Ltd
Priority date: 1994-11-08
Filing date: 1995-11-07
Publication date: 2005-08-01
Anticipated expiration: 2015-11-07
Also published as: JPH08133984A; DE69534002T2; US5900409A; CA2162232A1; EP0711559A2; JP3053537B2; EP0711559B1; CA2162232C; US6117853A; DE69534002D1; EP0711559A3; KR960016889A

Abstract

UN MEJORADOR DE CEREBRACION QUE TIENE UNA ACCION PROMINENTE PARA INCREMENTAR EL NIVEL DE GLUCOSA CEREBRAL QUE POSEE UN EFECTO DE MEJORA DE LA CEREBRACION DE UN SUJETO AL QUE SE LE ADMINISTRA EL MEJORADOR. EL MEJORADOR DE CEREBRACION CONTIENE COMO INGREDIENTE EFICAZ FOSFATIDIL-L-SERINA O LISOFASFATIDIL-L-SERINA PRODUCIDA MEDIANTE LA ELIMINACION DE LA CADENA DE ACIDO GRASO EN LA POSICION ALFA O BETA DE FOSFATIDIL-L-SERINA O DE SALES DE LA MISMA. EL FOSFATIDIL-L-SERINA POSEE UNA CADENA DE ACIDO GRASO ESTRUCTURAL DERIVADA DE AL MENOS UNA LECITINA DE MATERIAL CRUDO SELECCIONADO DEL GRUPO QUE CONSTA DE LECITINA DE LA VAINA DE SOJA, LECITINA DE COLZA O LECITINA DE YEMA DE HUEVO, UTILIZANDO LA LECITINA DE MATERIAL CRUDO COMO EL SUSTRATO, SE PUEDE PRODUCIR FOSFATIDIL-L-SERINA UTILIZANDO LA TRANSFOSFATIDILACION.

Description

Utilización de fosfatidilserinas para la preparación de un medicamento destinado a mejorar la actividad cerebral.

Sumario de la invención

Constituye un objetivo de la presente invención proporcionar la utilización de fosfatidil-L-serina, o una sal de la misma, obtenida al someter por lo menos un material en bruto de lecitina seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, a un procedimiento de fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar sus impurezas, como ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en el que:

(i): los ácidos grasos en dicha fosfatidil-L-serina del material en bruto de lecitina de soja están compuestos principalmente por ácido palmítico y ácido linoleico, y

(ii): los ácidos grasos en dicha fosfatidil-L-serina del material en bruto de lecitina de yema de huevo están compuestos principalmente por ácido palmítico y ácido oleico, sin que se presente ningún problema respecto al costo y suministro.

Según los trabajos de investigación de estos inventores, se confirma que la fosfatidilserina producida utilizando una transfosfatidilación enzimática de por lo menos un material en bruto de lecitina, seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, así como la lisofosfatidil-L-serina, producida por la transfosfatidilación del material en bruto producto hidrogenado de lecitina con fosfolipasa A_{2} en presencia de L-serina, tiene efectos marcados de aumento del nivel de glucosa cerebral y de mejora del deterioro de la memoria.

La utilización de fosfatidil-L-serina o de una sal de la misma, en una forma de realización de la presente invención, se obtiene sometiendo por lo menos un material en bruto de lecitina, seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo a un procedimiento de fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces, en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar impurezas, como ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en la que:

(ii): los ácidos grasos en dicha fosfatidil-L-serina del material en bruto de lecitina de yema de huevo están compuestos principalmente por ácido palmítico y ácido oleico;

y en la que la cadena de ácidos grasos es una cadena hidrogenada de ácidos grasos saturados.

La utilización de la lisofosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, en otra forma de realización de la presente invención, se produce sometiendo la fosfatidil-L-serina a un procedimiento de fosfatidilación con la fosfolipasa A_{2}, como un ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en el que: dicha lisofosfatidil-L-serina está compuesta de fosfatidil-L-serina, estando eliminada en posición \alpha o \beta su cadena de ácidos grasos;

dicha fosfatidil-L-serina se obtiene sometiendo por lo menos un material en bruto de lecitina seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, a un procedimiento para la fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces, en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar las impurezas;

La utilización de la lisofosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, en todavía otra forma de realización de la presente invención, se produce sometiendo la fosfatidil-L-serina a un procedimiento de fosfatidilación con la fosfolipasa A_{2}, como un ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en el que:

dicha lisofosfatidil-L-serina está compuesta de fosfatidil-L-serina, eliminándose su cadena de ácidos grasos en posición \alpha ó \beta;

La utilización de la fosfatidil-L-serina, o la utilización de la lisofosfatidil-L-serina de todavía otra forma de realización de la presente invención, caracterizada porque dicha fosfatidil-L-serina o sal de la misma, se obtiene sometiendo dicho material en bruto de lecitina a dicho procedimiento de fosfatidilación con dicha fosfolipasa D en presencia de L-serina y un disolvente orgánico.

Según la presente invención, la utilización de fosfatidil-L-serina o la utilización de lisofosfatidil-L-serina que contienen, como ingredientes efectivos, fosfatidil-L-serina que posee una cadena estructural de ácidos grasos derivada de la lecitina de soja o de la lecitina de la yema de huevo de lisofosfatidil-L-serina compuesta de fosfatidil-L-serina, estando eliminada su cadena de ácidos grasos en posición \alpha o \beta, posee una notable acción para aumentar el nivel de glucosa cerebral, por lo que posee un efecto de mejora de la actividad mental de un individuo al que se le administra un agente que se añade para obtener una mejora.

Utilización de fosfatidil-L-serina o utilización de lisofosfatidil-L-serina según la presente invención, puede contener como ingrediente efectivo la sal de la fosfatidil-L-serina o de la lisofosfatidil-L-serina compuesta por la fosfatidil-L-serina reajustada con su cadena de ácidos grasos eliminada en posición \alpha o \beta, pudiéndose utilizar satisfactoriamente dicha sal si ésta se encuentra en una forma farmacéuticamente aceptable. Dichas sales específicas incluyen sales de sodio, sales de potasio, sales de magnesio, sales de amonio, sales de clorhidrato, sales de sulfato y similares, y, entre ellas, se da preferencia a sales sódicas y sales potásicas.

La utilización de fosfatidil-L-serina o la utilización de lisofosfatidil-L-serina de la presente invención puede administrarse efectivamente vía intravenosa y oral. El agente que se añade para obtener una mejora, puede mezclarse con otros excipientes tales como otros fosfolípidos, azúcar y proteínas para preparar cápsulas y gránulos de manejo y período de caducidad mejorados. A causa de que no existe ningún problema de seguridad, el agente que se añade para obtener una mejora, puede mezclarse en los alimentos y en la bebida diarios, para utilizarlo en el mejoramiento y prevención de los trastornos en la actividad mental.

La fosfatidil-L-serina y la lisofosfatidil-L-serina anteriormente mencionados como ingredientes efectivos según la presente invención son ambos producidos mediante la transfosfatidilación con fosfolipasa D utilizando como substrato lecitina de soja o lecitina de yema de huevo.

A continuación se ilustrará el procedimiento. Un material en bruto de lecitina (principalmente, fosfatidilcolina) seleccionado a partir de lecitina de soja y lecitina de yema de huevo se somete a un procedimiento de transfosfatidilación con fosfolipasa D en presencia de L-serina, sustituyendo por tanto el grupo colina con el grupo serina, para producir la fosfatidil-L-serina reajustada.

Si la cadena estructural de ácidos grasos del material en bruto de lecitina seleccionada a partir de la lecitina de la soja y de la yema de huevo es un ácido graso insaturado, éste es convertido preferentemente a un ácido graso saturado mediante el procedimiento de hidrogenación. Éste puede aplicarse sobre el material en bruto de lecitina antes de la transfosfatidilación; de lo contrario, el procedimiento de hidrogenación puede aplicarse a la fosfatidil-L-serina producida por la transfosfatidilación.

La lisofosfatidil-L-serina puede producirse por eliminación de la cadena de ácidos grasos en cualquier posición \alpha o \beta de la fosfatidil-L-serina así producida, o de la fosfatidil-L-serina hidrogenada. Utilizando un material en bruto de lisolecitina producido por eliminación de la molécula de ácidos grasos unida a la posición \alpha o \beta del glicerol del material en bruto de la lecitina, seleccionado a partir de la lecitina de soja, de la lecitina de la semilla de colza y de la lecitina de la yema de huevo, el procedimiento de transfosfatidilación que se describe anteriormente es promovido para producir lisofosfatidil-L-serina. Entonces, el coste para dicha eliminación es bajo sin que se produzca ningún problema respecto a la producción en masa.

Como material en bruto, puede utilizarse cualquier lecitina de soja o lecitina de yema de huevo disponible comercialmente, sin limitación. Como fosfolipasa D para utilización en el procedimiento de transfosfatidilación, pueden emplearse, por ejemplo, aquéllos actinomices (del género Actinomyces) si poseen una actividad sobre la lecitina o la lecitina hidrogenada o la lisolecitina en presencia de la L-serina, para producir fosfatidil-L-serina.

El procedimiento específico de transfosfatidilación es conocido y está descrito en, por ejemplo, en la patente japonesa abierta a inspección pública nº 63-245685 por lo que en la presente memoria no se describe una explicación detallada. La transfosfatidilación en presencia de un disolvente orgánico tal como el acetato de etilo, se recomienda como el procedimiento para producir el agente de la presente invención que se añade para mejorar la actividad mental, debido al sencillo post-tratamiento y el rendimiento de conversión más elevado.

Preferentemente, la fosfatidil-L-serina producida mediante el procedimiento de transfosfatidilación estará sometida a un procedimiento apropiado de purificación para eliminar impurezas. Mientras que no se presenten desventajas, tales como efectos adversos a partir de la administración y la inhibición de la acción de mejora de la actividad mental, la presencia de impurezas derivada del material en bruto o las impurezas procedentes de contaminación durante el procedimiento, pueden no se, en absoluto, problemáticas, si el contenido de dichas impurezas está dentro del intervalo aceptable.

Descripción de las formas de realización preferidas Ejemplo 1-1

Utilizando la lecitina de soja como material en bruto, se obtuvo la fosfatidil-L-serina mediante el siguiente procedimiento:

La lecitina de soja (50 g; PC 80, BOLEC como nombre del producto; Croklaan B.V., Holanda) y el aceite de soja (10 g) se situaron en un vial de 300 ml, añadiéndose después acetato de etilo (50 ml) para solubilizarlos. Añadiendo una solución (20 ml) de 0,30 g/ml de L-serina disuelta en 0,1 M de tampón fosfato sódico, pH 7,0, a la solución resultante para obtener una mezcla completa, se añadió otra solución de 500 U/ml de fosfolipasa D de Actinomyces (15 ml/fabricada por Yakult Honsha, Co., Ltd) a la solución de la mezcla, para que se llevase a cabo la reacción a 50ºC agitando durante 5 horas.

Para inactivar la enzima en la solución reactiva, el vial que contenía ésta se sumergió en agua caliente. A continuación, la solución reactiva se enfrió en hielo, para separar la solución en dos capas, que se dejaron reposar durante 30 minutos. A continuación, la capa superior se desechó. La capa inferior que quedaba se extrajo en cloroformo, que se secó entonces bajo presión reducida. Se añadió cloroformo (15 ml) al producto resultante (5 g) para disolución. La solución resultante se aplicó entonces a una columna (de un diámetro de 32 mm x 300 mm de longitud) empaquetada con gel de sílice (Silica Gel 60 como nombre del producto; fabricado por Merck Japan Ltd.) para separar una fracción que contenía fosfatidil-L-serina utilizando cloroformo-metanol (4:1) con una velocidad de flujo de 100 ml/h a temperatura ambiente.

Ejemplo 1-2

Utilizando lecitina de yema de huevo (PL-100LE) como nombre del producto; fabricado por Q.P. Corp. Japón) como substrato, se produjo la fosfatidil-L-serina adaptada mediante idéntico procedimiento que en el Ejemplo 1-1.

Ejemplo 1-3

Utilizando lecitina de semilla de colza como material en bruto, la fosfatidil-L-serina se produjo mediante el procedimiento siguiente:

Etanol al 85% (4,8 kg) se añadió a lecitina de semilla de colza (1,2 kg; fabricado por Rinoru Oil Mills Co., Ltd. Japón) y se homogeneizó de forma suficiente con un homogeneizador. A continuación, el homogeneizado resultante se dejó permanecer en reposo a temperatura ambiente durante 2 horas para separar el sobrenadante, que se secó bajo presión reducida para recuperar una fracción soluble en etanol (alrededor de 300 g). A una parte (120 g) de la fracción se añadió acetato de etilo ( 600 g) para agitar y mezclar, que se dejó entonces permanecer en reposo por la noche a 5ºC. La fracción insoluble en acetato de etilo precipitó a través del procedimiento, secándose entonces bajo presión reducida, para recuperar la lecitina de semilla de colza con un contenido más alto de fosfatidilcolina (fracción de lecitina de semilla de colza de alrededor de 70 g).

Utilizando la fracción de lecitina de semilla de colza como substrato, mediante idéntico procedimiento que en el Ejemplo 1-1, se produjo la fosfatidil-L-serina adaptada.

Ejemplo 2-1

La lecitina de soja (LECINOL S-10EX como nombre de producto, Nikko Chemicals Co., Ltd) se procesó para hidrogenación. Utilizando la lecitina de soja hidrogenada como substrato, se produjo la fosfatidil-L-serina mediante idéntico procedimiento que en el Ejemplo 1-1.

Ejemplo 2-2

La fosfatidil-L-serina derivada de la lecitina de soja (1 g) producida en el Ejemplo 1-1, se solubilizó en una solución de mezcla de n-hexano (15 g) y etanol (3 g). Añadiendo carbono paladio al 10% (0,15 g) a la solución, la solución resultante se procesó para hidrogenación durante alrededor de 5 horas bajo agitación, con las condiciones de temperatura y presión ambiental.

Ejemplo 3-1

A partir de los tipos individuales fosfatidil-L-serina producidos en los Ejemplos 1-1 a 2-2, se produjo la lisofosfatidil-L-serina tal como se describe a continuación.

Más específicamente, cada tipo de fosfatidil-L-serina (300 mg) se cargó en un vial de 6 ml, seguido por la adición de acetato de etilo (1,2 ml), 0,25 M tampón fosfato sódico, pH 7,4 (0,20 ml), agua destilada (1,2 ml) y 11.200 U/ml de fosfolipasa A_{2} del páncreas porcino (0,02 ml; "LECITASE 10L" como nombre del producto, fabricado por Novo-Nordex Co., Ltd.) para una mezcla suficiente, antes de la reacción a 50ºC durante 16 horas. El vial que contiene la solución reactiva se sumergió entonces en agua caliente durante 20 minutos para inactivar la enzima en la solución reactiva. A continuación, la solución se lavó en acetona (3,0 ml x 3). Entonces, el precipitado se recuperó y se secó al aire para dar lugar a fosfatidil-L-serina.

Ejemplo 4

Se analizaron las composiciones de las cadenas de ácidos grasos de los tipos individuales de fosfatidil-L-serina y lisofosfatidil-L-serina obtenidas en el Ejemplo 1-1 a 3-1. Según el procedimiento rutinario, el análisis de una muestra metil esterificada se llevó a cabo mediante cromatografía líquido-gas (GLC) con una columna capilar. Los resultados se muestran en la Tabla 1 a continuación. Aquí en la tabla 1, "PS" significa fosfatidil-L-serina: "LPS", lisofosfatidil-L-serina; "16,0" ácido palmítico; "18,0" significa ácido esteárico; "18:1", ácido oleico;"18:2" ácido linoleico y "18:3" ácido linolénico.

TABLA 1

1

Tal como se aprecia en la Tabla 1, los ácidos grasos en la fosfatidil-L-serina extraída del cerebro bovino estaban compuestos principalmente de ácido esteárico y ácido oleico. Al contrario, los ácidos grasos en la fosfatidil-L-serina readaptada del material en bruto de la lecitina de la yema de huevo estaban compuestos en su mayor parte por ácido palmítico y ácido oleico, mientras que los ácidos grasos en la fosfatidil-L-serina procedente del material en bruto de la lecitina de soja estaban compuestos principalmente por ácido palmítico y ácido linolénico. De este modo, es indicado que estos tipos de fosfatidil-L-serina readaptada tengan composiciones de ácidos grasos marcadamente diferentes de las de fosfatidil-L-serina procedentes del cerebro bovino.

Ejemplo 5

Tal como se describirá a continuación, el efecto del aumento del nivel de la glucosa cerebral mediante la administración oral, se confirmó en un ensayo.

1. Preparación de una muestra para administración

A la fosfatidil-L-serina (20 mg) producida mediante el procedimiento de transfosfatidilación a partir de un substrato de lecitina de soja, se añadieron 250 mM de tampón fosfato, pH 7,9 (1 ml), que se emulsificó entonces con un homogeneizador de tipo Potter, seguido por la aplicación de ultrasonidos (a 0ºC durante 8 minutos), para preparar una muestra de ensayo. Se obtuvo una muestra de control añadiendo 250 mM de tampón fosfato, pH 7,9 (1 ml) a lecitina de soja (20 mg), seguido por el procedimiento de emulsificación y de aplicación de ultrasonidos.

2. Administración de una muestra

En las 2 horas después de la preparación, las muestras en emulsión se administraron oralmente a grupos plurales de ratones machos ICR (con un peso corporal de alrededor de 35 g) a 1,0 ml/40 g (PS: 500 mg/kg) por ratón, utilizando una sonda estomacal.

3. Congelación rápida del cerebro

Cuando transcurrió un período de tiempo dado (entre 30 minutos y 4 horas) después de la administración, cada grupo de ratones se decapitó, sacrificándolo hasta la muerte. Sus cabezas se sometieron a nitrógeno líquido para una rápida congelación.

4. Recogida del cerebro congelado

Las cabezas congeladas de los ratones se partieron por la mitad en la línea media con un cortafrío de autopsia. Entonces, con éste, se eliminaron los tejidos, excluyendo las partes anterior, posterior, superior e inferior del cerebro, extirpando de este modo este órgano.

5. Extracción del cerebro congelado

Se obtuvo el peso total del cerebro congelado de cada ratón (de 300 a 400 mg), pulverizándose este órgano en un mortero relleno con nitrógeno líquido. Al polvo (100 mg) en el mortero se le añadieron 0,3 N de ácido perclórico (0,5 ml), para majarlo. El residuo se centrifugó y se desechó para recuperar el sobrenadante. Éste se neutralizó con 1 N de hidróxido potásico, y el precipitado resultante de perclorato potásico se centrifugó y desechó para recuperar el sobrenadante de la solución extraída, almacenándolo después de congelarlo.

6. Ensayo de la glucosa cerebral

Utilizando un equipo de ensayo mediante el procedimiento de la hexoquinasa, se determinó el nivel de glucosa en la solución extraída y almacenada bajo congelación. Los resultados se muestran en la Tabla 2 a continuación. En la Tabla 2, en la presente memoria, "PS" significa fosfatidil-L-serina.

TABLA 2

2

Tal como se muestra en la tabla 2, la fosfatidil-L-serina readaptada derivada de la soja, administrada oralmente, aumentó el nivel de glucosa cerebral alrededor de 4 veces, 30 minutos después de la administración, respecto al nivel de glucosa cuando no se administró (P<0,05 (Comparación múltiple de Tschuky). A continuación, el nivel de glucosa disminuyó conforme el tiempo iba pasando. Cuatro horas después de la administración, el nivel alcanzado era inferior al obtenido en el caso de no administración.

Ejemplo 6

Tal como se describirá a continuación, el efecto del aumento del nivel de glucosa cerebral después de la inyección por la vena caudal, se confirmó en un ensayo.

1. Preparación de varios tipos de lisofosfatidil-L-serina

A partir de los tipos de fosfatidil-L-serina producidos en los Ejemplos 1-1 a 2-2, se produjeron varios tipos de lisofosfatidil-L-serina de la manera siguiente:

Más específicamente, cada uno de los tipos de fosfatidil-L-serina (300 mg) se emplazó en un vial de 6 ml, seguido por la adición de acetato de etilo (1,20 ml), tampón 0,1 M Tris-HCl, pH 7,4 (1,20 ml) y 11.200 U/ml de fosfolipasa A_{2} (0,02 ml; "LECITASE 10L" como nombre de producto; fabricado por Novo-Nordex Co. Ltd) para una mezcla suficiente, antes de la reacción a 50ºC durante 14 horas. A continuación, los ácidos grasos liberados se lavaron en acetona, para recuperar la lisofosfatidil-L-serina.

2. Preparación de una muestra para administración

A los diversos tipos de lisofosfatidil-L-serina (2,0 mg o 6,0 mg) se añadieron 250 mM de tampón fosfato, pH 7,9 (1 ml), seguido por emulsificación con un homogeneizador del tipo Potter y subsiguiente trato con ultrasonidos (a 0ºC durante 8 minutos); para preparar muestras.

3. Administración de la muestra

En las 2 horas después de la preparación, las muestras individuales en emulsión se administraron a través de la vena caudal a grupos plurales de ratones machos ICR (con un peso corporal de alrededor de 35 g) a 1,0 ml/40 g (PS: 30 mg/kg) por ratón.

4. Congelación rápida del cerebro

Cuando transcurrió un período de tiempo dado (30 minutos) después de la administración, cada grupo de ratones se decapitó, sacrificándolo hasta la muerte. Sus cabezas se sometieron a nitrógeno líquido para una rápida congelación.

5. Recogida del cerebro congelado

Para la extracción a partir de las cabezas congeladas y el ensayo de la glucosa cerebral, se llevaron a cabo los mismos procedimientos que en el Ejemplo 5. Los resultados se muestran en la Tabla 3 a continuación. En la Tabla 3, en la presente memoria, "LPS" significa lisofosfatidil-L-serina.

TABLA 3

3

Tal como se muestra en la tabla 3, la lisofosfatidil-L-serina de los tipos de soja y de yema de huevo aumentó significativamente la glucosa cerebral murina, como en el caso de la lisofosfatidil-L-serina del cerebro bovino.

Ejemplo 7

El efecto de mejora del deterioro de la memoria, mejora inducida por la escopolamina (SC) se confirmó de la siguiente forma:

A cada grupo de 10 ratas SD macho con un peso de alrededor de 300 g, se administró intraperitonealmente una solución de escopolamina (3,0 mg/ml de tampón) o una solución de cada uno de los diversos tipos de fosfatidil-L-serina (60 mg/ml de tampón), cada uno a una dosis de 1,0 ml/kg. Veinte minutos después de la administración, las ratas se dispusieron en el recinto luminoso de una jaula dividida (fabricada por Muromachi Machinery Co., Ltd). Alrededor de 10 segundos más tarde, se abrió la puerta que separaba la zona luminosa de la oscura, e inmediatamente después las ratas pasaban a la zona oscura, siéndoles suministrados choques eléctricos de 2 segundos (4 mA, 100 V, CC). Entonces, 24 horas después de la administración, las ratas se situaron otra vez en la zona luminosa, para evaluar el tiempo latente de reacción hasta un máximo de 5 minutos, hasta que las cuatro extremidades se situaron todas en la zona oscura. Se determinó que un tiempo latente más largo de reacción indica un m recuerdo mejor de la experiencia del choque eléctrico. Los resultados se muestran en la Tabla 4. En la Tabla 4, en la presente memoria, "PS" significa fosfatidil-L-serina, "LPS", lisofosfatidil-L-serina; y "SC" escopolamina.

TABLA 4

4

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 *1:  \begin{minipage}[t]{100mm} proporción de avance: una
relación de las ratas que penetran en la zona oscura en 5 minutos
respecto al número total de animales.\end{minipage} \cr  *2:
Tiempo latente de reacción en la zona oscura (media)\cr  *3:
administrado con solución tampón\cr   \hskip0,5cm 
RR  -  PS: PS de semilla de colza
readaptado\cr}

Tal como se muestra en la tabla 4, la fosfatidil-L-serina de los tipos derivados de la soja, de la semilla de colza y de la yema de huevo, tiene el efecto de mejorar el deterioro de la memoria inducido por la escopolamina en el mismo grado aproximadamente que en el caso de la fosfatidil-L-serina del cerebro bovino.

Tal como se ha descrito anteriormente, el agente que se añade para mejorar el estado mental que contiene fosfatidil-L-serina procedente de la soja, de la semilla de colza o de la yema del huevo como ingrediente efectivo según la presente invención, puede administrarse fácil y continuadamente sin dolor, porque la fosfatidil-L-serina que es efectiva para mejorar el estado mental, puede ser ingerida oralmente de entre el agente que se añade para mejorar el estado mental. Además, la fosfatidil-L-serina efectiva para mejorar el estado mental, puede producirse con menos coste y adicionalmente, a gran escala, utilizando la transfosfatidilación mediante una enzima de degradación de fosfolípidos (fosfolipasa D).

Claims

1. Utilización de fosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, obtenida sometiendo por lo menos un material de lecitina en bruto, seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, a un procedimiento de fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces, en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar sus impurezas, como ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en la que:

(ii): los ácidos grasos en dicha fosfatidil-L-serina del material en bruto de lecitina de yema de huevo están compuestos principalmente por ácido palmítico y ácido oleico.

2. Utilización de fosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, obtenida sometiendo por lo menos un material en bruto de lecitina, seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, a un procedimiento de fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces, en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar impurezas, como ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en el que:

y en la que la cadena de ácidos grasos es una cadena de ácidos grasos saturada hidrogenada.

3. Utilización de la lisofosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, producida sometiendo la fosfatidil-L-serina a un procedimiento de fosfatidilación con la fosfolipasa A_{2}, como un ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en la que:

dicha fosfatidil-L-serina se obtiene sometiendo por lo menos un material en bruto de lecitina seleccionado de entre el grupo formado por lecitina de soja y lecitina de yema de huevo, a un procedimiento de fosfatidilación con fosfolipasa D derivada de Actinomyces, en presencia de L-serina, seguido de un procedimiento de purificación para eliminar las impurezas;

4. Utilización de la lisofosfatidil-L-serina, o de una sal de la misma, producida sometiendo la fosfatidil-L-serina a un procedimiento de fosfatidilación con la fosfolipasa A_{2}, como un ingrediente efectivo para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento del deterioro de la memoria, en la que:

y en la que la cadena de ácidos grasos es una cadena de ácidos grasos saturados hidrogenada.

5. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizada porque dicha fosfatidil-L-serina, o una sal de la misma, se obtiene sometiendo dicho material en bruto de lecitina a dicho procedimiento de fosfatidilación con dicha fosfolipasa D en presencia de L-serina y un disolvente orgánico.

6. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 3 y 4, caracterizada porque dicha fosfatidil-L-serina, o una sal de la misma, se obtiene sometiendo dicho material en bruto de lecitina a dicho procedimiento de fosfatidilación con dicha fosfolipasa D en presencia de L-serina y un disolvente orgánico.

7. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, y 5, caracterizada porque dicha fosfatidil-L-serina, o una sal de la misma, comprende además un excipiente farmacéutico.

8. Utilización según cualquiera de las reivindicaciones 3, 4, y 6, caracterizada porque la lisofosfatidil-L-serina, o una sal de la misma, comprende además un excipiente farmacéutico.