ES2231292T3 - Acidos ox(adi)azolil-hidroxamicos utiles como inhibidores de la procolageno c-proteinasa. - Google Patents

Acidos ox(adi)azolil-hidroxamicos utiles como inhibidores de la procolageno c-proteinasa.

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ES2231292T3 ES00981523T ES00981523T ES2231292T3 ES 2231292 T3 ES2231292 T3 ES 2231292T3 ES 00981523 T ES00981523 T ES 00981523T ES 00981523 T ES00981523 T ES 00981523T ES 2231292 T3 ES2231292 T3 ES 2231292T3
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Paul Vincent Fish
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Abstract

Un compuesto de fórmula (I): **(Fórmula)** en la cual: X es C1-6-alquileno o C2-6-alquenileno, cada uno de los cuales esta sustituido opcionalmente con uno o mas átomos de flúor; R es arilo o C3-8-cicloalquilo sustituido opcionalmente con uno o mas átomos de flúor; W es N o CZ; Y y Z son cada uno independientemente H, C1-4-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o mas sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, S(O)pR6, OR5, CONR1R2, CO2R7 y arilo), C1-4-alcanoilo sustituido opcionalmente con uno o mas halógenos, C1-4-alcoxicarbonilo sustituido opcionalmente con uno o mas halógenos, o CONR1R2; R1 y R2 se seleccionan cada uno independientemente de H, C3-8-cicloalquilo, C1-4-alquilo (sustituido opcionalmente con C3-8-cicloalquilo, arilo, CO2H, CO2R5 y/o NR3R4), o R1 y R2 pueden considerarse junto con el nitrógeno al cual estan unidos para representar un anillo heterociclico de 4 a 6 miembros que contiene opcionalmente uno o dos heteroatomos adicionales en el anillo seleccionados independientemente de N, O y S, estando dicho anillo heterociclico opcionalmente benzo- o pirido-condensado, y estando dicho anillo heterociclico sustituido opcionalmente con C1-4-alquilo, CO2H, CO2R5, arilo y/o NR3R4; o R3 y R4 pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al cual estan unidos para representar un resto morfolina, piperidina, azetidina o piperazina (sustituido opcionalmente en N con C1-4-alquilo); R5 es C1-4-alquilo sustituido opcionalmente con CO2R7 o CONR3R4, o R5 es arilo; R6 es C1-4-alquilo sustituido opcionalmente con uno o mas halógenos, o arilo; R7 es H o R6; p es 0, 1 ó 2.

Description

Ácidos ox(adi)azolil-hidroxámicos útiles como inhibidores de la Procolágeno C-proteinasa.
Esta invención se refiere a cierta clase de compuestos, y las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, que inhiben la Procolágeno C-proteinasa ("PCP"). Aquéllos son útiles por consiguiente en el tratamiento de mamíferos que padecen afecciones que pueden ser aliviadas por la inhibición de la PCP. Presenta especial interés un tratamiento anti-cicatrices para las heridas.
Los tejidos fibróticos, con inclusión de las cicatrices dérmicas, se caracterizan por una acumulación excesiva de matriz extracelular, principalmente colágeno tipo I. Se cree que la inhibición de la deposición de colágeno reducirá la formación de tejido de cicatriz. El colágeno es secretado como el precursor, procolágeno, que se transforma en el colágeno insoluble por escisión del propéptido C-terminal por la PCP. La PCP es una metaloproteasa dependiente de cinc que es secretada por fibroblastos activados por TGF-\beta pertenecientes a la subfamilia de las proteasas semejantes a la astacina y capaces de escindir el péptido C-terminal de los procolágenos de tipos I, II y III. Adicionalmente, datos conocidos sugieren que PCP activa la lisil-oxidasa, una enzima esencial para la formación de reticulaciones covalentes que estabilizan la forma fibrosa del colágeno. Por consiguiente, la inhibición de PCP puede no sólo reducir la deposición de colágeno, sino que puede hacer también más accesible el colágeno para la degrada-
ción.
El colágeno es integral para, entre otras cosas, la formación apropiada de tejido conectivo. Así, la super- o infra-producción de colágeno o la producción de colágeno anormal (con inclusión de colágeno procesado incorrectamente) se ha asociado con numerosas enfermedades y trastornos del tejido conectivo. Pruebas cada vez más concluyentes sugieren que PCP es una enzima clave esencial para la maduración apropiada del colágeno (véase por ejemplo la publicación de Solicitud de Patente Internacional número WO 97/05865).
La presente invención se refiere a sustancias capaces de inhibir la actividad de PCP para regular, modular y/o reducir la formación y deposición de colágeno. De modo más específico, la invención se refiere al uso de compuestos y composiciones farmacéuticas de los mismos para el tratamiento de diversas afecciones relacionadas con la producción de colágeno.
En el momento actual, se han identificado más de diecinueve tipos de colágenos. Estos colágenos, con inclusión de los colágenos fibrilares tipos I, II y III, se sintetizan como moléculas precursoras de procolágeno que contienen extensiones peptídicas amino- y carboxi-terminales. Estas extensiones peptídicas, a las que se hace referencia como "pro-regiones", se designan como propéptidos N y C, respectivamente. Las pro-regiones se escinden típicamente tras la secreción de la molécula precursora de triple hélice procolágeno de la célula para producir una molécula de colágeno de triple hélice madura. Tras la escisión, la molécula de colágeno "madura" es susceptible de asociación, por ejemplo, en fibras de colágeno muy estructuradas. Véase, v.g., Fessler y Fessler, 1978, Annu. Rev. Biochem. 47:129-162; Bornstein y Traub, 1979, en: The Proteins (compiladores Neurath, H. y Hill, R.H.), Academic Press, Nueva York, pp. 412-632; Kivirikko et al., 1984, en ``Extracellur Matrix Biochemistry (compiladores Piez, K.A. y Reddi, A.H.), Elsevier Science Publishing Co., Inc., Nueva York, pp. 83-118; Prockop y Kivirikko, 1984, N. Engl, J. Med. 311: 376-383; Kuhn, 1987, en: Structure and Function of Collagen Types (compiladores Mayne, R. y Burgeson, R.E.), Academic Press, Inc., Orlando, Florida, pp. 1-42.
Una serie de afecciones ha sido asociada con la producción inadecuada o descontrolada de colágeno, con inclusión de fibrosis o cicatrización patológica, con inclusión de esclerosis endocárdica, fibrosis idiopática intersticial, fibrosis intersticial pulmonar, fibrosis perimuscular, fibrosis de Symmers, fibrosis pericentral, hepatitis, dermatofibroma, cirrosis tal como cirrosis biliar y cirrosis alcohólica, cirrosis pulmonar aguda, fibrosis pulmonar idiopática, síndrome de dificultad respiratoria aguda, fibrosis renal/glomerulonefritis, fibrosis renal/nefropatía diabética, escleroderma/sistémico, escleroderma/local, queloides, cicatrices hipertróficas, adhesiones graves de las articulaciones/artritis, mielofibrosis, cicatrices de la córnea, fibrosis quística, distrofia muscular (de Duchenne), fibrosis cardiaca, fibrosis muscular/separación retinal, estrechez esofágica y enfermedad de Pyronie. Otros trastornos fibróticos pueden ser inducidos o iniciados por cirugía, con inclusión de revisión de cicatrices/cirugías plásticas, glaucoma, fibrosis por cataratas, cicatrices de la córnea, adhesiones en las articulaciones, enfermedad de rechazo inverso, cirugía tendinosa, pinzamiento de nervios, contractura de Dupuytren, adhesiones/fibrosis OB/GYN, adhesiones pélvicas, fibrosis peridural, restenosis. Otras afecciones en las que el colágeno juega un papel determinado incluyen las quemaduras. La fibrosis del tejido pulmonar se observa también en pacientes que sufren enfermedad obstructiva crónica de las vías aéreas (COAD) y asma. Una estrategia para el tratamiento de estas enfermedades y afecciones consiste en inhibir la producción y/o deposición excesiva y/o el descontrol del colágeno. Así pues, la identificación y el aislamiento de moléculas que controlen, inhiban y/o modulen la producción y deposición de colágeno presentan un interés médico fundamental.
Pruebas recientes sugieren que PCP es la enzima clave esencial que cataliza la escisión del propéptido Procolágeno C. Esto ha sido demostrado en colágenos fibrilares, que incluyen colágeno tipo I, tipo II y tipo III.
La PCP fue observada por vez primera en los medios de cultivo de fibroblastos humanos y de ratón (Goldberg et al., 1975, Cell 4: 45-50; Kessler y Goldberg, 1978, Anal. Biochem. 86: 463-469), y fibroblastos de tendón de pollo (Duskin et al., 1978, Arch. Biochem. Biophys. 185: 326-332; Leung et al., 1979, J. Biol. Chem. 254: 224-232). Una proteinasa ácida que elimina los propéptidos C-terminales del procolágeno tipo I ha sido identificada también (Davidson et al., 1979, Eur. J. Biochem. 100: 551).
Una proteína parcialmente purificada que tiene actividad de PCP se obtuvo de cráneos de pollo en 1982. Njieha et al., 1982, Biochemistry 23: 757-764. En 1985, se aisló, purificó y caracterizó PCP de pollo a partir de medios acondicionados de tendones de embrión de pollo. Hojima et al., 1985, J. Biol. Chem. 260: 15996-16003. Subsiguientemente, se ha purificado la PCP murina a partir de medios de fibroblastos de ratón cultivados. Kessler et al., 1986, Collagen Relat. Res. 6: 249-266; Kessler y Adar, 1989, Eur. J. Biochem. 186: 115-121. Finalmente, el cDNA que codifica PCP humana ha sido identificado, como se expone en los artículos y referencias citados anteriormente, y las referencias indicadas en ellos.
Experimentos realizados con estas formas purificadas de PCP de pollo y ratón han indicado que la enzima contribuye decisivamente en la formación de fibras de colágeno funcionales. Fertala et al., 1994, J. Biol. Chem. 269: 11584.
Como consecuencia de la patente importancia de la enzima para la producción de colágeno, los científicos han identificado varios inhibidores de PCP. Véase, v.g., Hojima et al., supra. Por ejemplo, varios formadores de quelatos metálicos han demostrado actividad como inhibidores de PCP. Análogamente, se ha encontrado que quimostatina y pepstatina A son inhibidores relativamente potentes de PCP. Adicionalmente, \alpha_{2}-macroglobulina, ovostatina, y suero de bovino fetal parecen inhibir al menos parcialmente la actividad de PCP.
Análogamente, se ha comunicado que ditiotreitol, SDS, concanavalina A, Zn^{2+}, Cu^{2+} y Cd^{2+} que son inhibidores a concentraciones bajas. Del mismo modo, algunos agentes reductores, varios aminoácidos, fosfato, y sulfato de amonio eran inhibidores a concentraciones de 1-10 mM. Además, se demostró que la enzima es inhibida por los aminoácidos básicos lisina y arginina (Leung et al., supra; Ryhänen et al., 1982, Arch. Biochem. Biophys. 215: 230-235). Finalmente, se ha encontrado que concentraciones altas de NaCl o tampón Tris-HCl inhiben la actividad de PCP. Por ejemplo, se ha comunicado que con NaCl 0,2, 0,3, y 0,5 M, la actividad de PCP se reducía 66, 38, y 25%, respectivamente, de la observada con la concentración estándar de ensayo de 0,15 M. El tampón Tris-HCl en una concentración de 0,2-0,5 M inhibía acusadamente la actividad (Hojima et al., supra). La actividad de PCP y su inhibición se han determinado utilizando una amplia serie de ensayos. Véase, v.g., Kessler y Goldberg, 1978, Anal. Biochem. 86: 463; Njieha et al., 1982, Biochemistry 21: 757-764. Como se ha expuesto en numerosas publicaciones, la enzima es difícil de aislar por medios bioquímicos convencionales, y la identidad de la secuencia de cDNA que codifica dicha enzima no se conocía hasta que se publicó en las solicitudes de patente referenciadas anteriormente y solicitudes afines.
Teniendo en cuenta su papel esencial en la formación y maduración del colágeno, PCP parece ser una diana ideal para el tratamiento de trastornos asociados con la producción y maduración inadecuada o descontrolada del colágeno. Sin embargo, ninguno de los inhibidores descritos hasta ahora ha demostrado ser un agente terapéutico eficaz para el tratamiento de enfermedades y afecciones relacionadas con el colágeno.
La identificación de compuestos eficaces que inhiben específicamente la actividad de PCP para regular y modular la producción anormal o inadecuada de colágeno es por consiguiente deseable y constituye el objeto de esta invención.
Las metaloproteasas de la matriz (MMPs) constituyen una familia de metaloproteasas que contienen cinc estructuralmente similares, que están involucradas en la remodelación, reparación y degradación de las proteínas de la matriz extracelular, tanto como parte de procesos fisiológicos normales como en condiciones patológicas.
Otra función importante de ciertas MMPs es activar otras enzimas, con inclusión de otras MMPs, por escisión del pro-dominio de su dominio de proteasa. Así, ciertas MMPs actúan para regular las actividades de otras MMPs, con lo que la super-producción de una MMP puede conducir a proteólisis excesiva de la matriz extracelular por otra; v.g., MMP-14 activa la pro-MMP-2.
Durante la curación de las heridas normales y crónicas, es expresada MMP-1 por queratinocitos migrantes en los bordes de la herida (U.K. Saarialho-Kere, S.O. Kovacs, A.P. Pentland, J. Clin. Invest. 1993, 92, 2858-66). Existen evidencias que sugieren que se requiere MMP-1 para la migración de los queratinocitos en una matriz de colágeno tipo I in vitro, y es inhibida completamente por la presencia del inhibidor de MMP no selectivo SC44463 ((N4-hidroxi)-N1-[(1S)-2-(4-metoxifenil)metil-1-((1R)-metilamino)carbonil)]-(2R)-2-(2-metilpropil)butanodiamida) (B.K. Pilcher, J.A. Dumin, B.D. Sudbeck, S.M. Krane, H.G. Welgus, W.C. Parks, J. Cell. Biol., 1997, 137, 1-13). La migración de los queratinocitos in vivo es esencial para que se produzca la curación eficaz de las heridas.
MMP-2 y MMP-9 parecen jugar papeles importantes en la curación de las heridas durante la fase de remodelación extendida y el comienzo de la re-epitelialización, respectivamente (M.S. Agren, Brit. J. Dermatology, 1994, 131, 634-40; T. Salo, M. Mäkänen, M. Kylmäniemi, Lab. Invest., 1994, 70, 176-82). El potente y no selectivo inhibidor de MMP BB94 (ácido (2S,3R)-5-metil-3-{[(1S)-1-(metilcarbamoil)-2-feniletil]carbamoil}-2-[(2-tieniltio)-metil]hexanohidroxámico, batimastat), inhibe la invasión de células endoteliales de la membrana basal, inhibiendo con ello la angiogénesis (G. Tarboletti, A. Garofalo, D. Belotti, T. Drudis, P. Borsotti, E. Scanziani, P.D. Brown, R. Giavazzi, J. Natl. Cancer Inst., 1995, 87, 293-8). Existen pruebas de que este proceso requiere MMP-2 y/o 9 activa.
La técnica anterior adicional en este campo incluye:
Yamamoto M et al., J. Med. Chem., 41(8), 9 de abril de 1998, 1209: "Inhibition of membrane-type 1 matrix meta-lloproteinase by hydroxamate inhibitors: and examination of the subsite pocket".
Así pues, sería de esperar que los inhibidores de PCP que inhiben significativamente las MMPs 1 y/o 2 y/o 9 deterioren la curación de las heridas. MMP-14 es responsable de la activación de MMP-2, y por tanto la inhibición de MMP-14 podría dar también como resultado una curación deteriorada de las heridas.
Para revisiones recientes de MMPs, véase Zask et al., Current Pharmaceutical Design, 1996, 2, 624-661; Beckett, Exp. Opin. Ther. Patents, 1996, 6, 1305-1315; y Beckett et al., Drug Discovery Today, vol 1 (No. 1), 1996, 16-26.
Nombres alternativos para diversas MMPs y sustratos sobre las que actúan éstas se muestran en la tabla siguiente (Zask et al., supra).
1
De acuerdo con un aspecto de la presente invención, se proporcionan compuestos de fórmula (I):
3
en la cual:
X es C_{1-6}-alquileno o C_{2-6}-alquenileno, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor;
R es arilo o C_{3-8}-cicloalquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor;
W es N o CZ;
Y y Z son cada uno independientemente H,
C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, S(O)_{p}R^{6}, OR^{5}, CONR^{1}R^{2}, CO_{2}R^{7} y arilo),
C_{1-4}-alcanoílo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos,
C_{1-4}-alcoxicarbonilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos,
o CONR^{1}R^{2};
R^{1} y R^{2} se seleccionan cada uno independientemente de H, C_{3-8}-cicloalquilo, C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5} y/o NR^{3}R^{4}),
o R^{1} y R^{2} pueden considerarse junto con el nitrógeno al cual están unidos para representar un anillo heterocíclico de 4 a 6 miembros que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos adicionales en el anillo seleccionados independientemente de N, O y S,
estando dicho anillo heterocíclico opcionalmente benzo- o pirido-condensado,
y estando dicho anillo heterocíclico sustituido opcionalmente con C_{1-4}-alquilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5}, arilo y/o NR^{3}R^{4};
R^{3} y R^{4} se seleccionan cada uno independientemente de H, C_{1-4}-alquilo o C_{1-4}-alcoxicarbonilo sustituidos opcionalmente con uno o más halógenos,
o R^{3} y R^{4} pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos para representar un resto morfolina, piperidina, azetidina o piperazina (sustituido opcionalmente en N con C_{1-4}-alquilo);
R^{5} es C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con CO_{2}R^{7} o CONR^{3}R^{4}, o R^{5} es arilo;
R^{6} es C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, o arilo;
R^{7} es H o R^{6};
p es 0, 1 ó 2;
"arilo" es un sistema aromático carbocíclico o heterocíclico, mono- o bicíclico, que comprende desde 5 a 10 átomos de anillo, incluyendo hasta 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S,
donde, si existe un átomo N en el anillo, el mismo puede estar presente como el N-óxido,
estando dicho sistema de anillo(s) sustituido opcionalmente con hasta 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, C_{1-4}-alcoxi sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, fenilo, piridilo, CO_{2}H, CONR^{3}R^{4}, CO_{2}(C_{1-4}-alquilo), NR^{3}R^{4}, OH y OC(O)(C_{1-4}-alquilo);
y las sales y solvatos (con inclusión de hidratos) farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Los grupos "alquilo", "alquileno", "alcoxi", "alcanoílo", y "alquenileno", incluidos en los grupos que incorporan dichos restos, pueden ser de cadena lineal o ramificados donde el número de átomos de carbono lo permite.
Debe entenderse que halógeno significa flúor, cloro, bromo o yodo.
Las sales farmacéuticamente aceptables son bien conocidas por los expertos en la técnica, e incluyen por ejemplo las mencionadas en la técnica citada anteriormente, y por Berge et al, en J. Pharm. Sci., 66, 1-19 (1977). Sales de adición de ácido adecuadas se forman a partir de ácidos que forman sales no tóxicas e incluyen las sales hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, hidrogenofosfato, acetato, trifluoroacetato, gluconato, lactato, salicilato, citrato, tartrato, ascorbato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, formiato, benzoato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, pamoato, camsilato, y p-toluenosulfonato.
Sales de adición de base farmacéuticamente aceptables son bien conocidas por los expertos en la técnica, e incluyen, por ejemplo, las mencionadas en la técnica citada anteriormente, y pueden formarse a partir de bases que forman sales no tóxicas e incluyen las sales de aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y cinc, y sales de aminas no tóxicas tales como dietanolamina.
Algunos de los compuestos de fórmula (I) pueden existir en una o más formas de ion dipolar. Debe entenderse que las sales farmacéuticamente aceptables incluyen la totalidad de dichos iones dipolares.
Algunos de los compuestos de fórmula (I), sus sales y solvatos, pueden existir en una o más formas polimórficas. Debe entenderse que la invención incluye la totalidad de dichos polimorfos.
Los compuestos de fórmula (I), sus sales e hidratos pueden exhibir variación isotópica, v.g., se pueden preparar formas enriquecidas en ^{2}H, ^{3}H, ^{13}C, ^{14}C, ^{15}N, ^{18}O, etc., por ejemplo por variación adecuada de los métodos de síntesis descritos en esta memoria utilizando métodos y reactivos conocidos en la técnica o modificaciones rutinarias de los mismos. La totalidad de dichas variantes isotópicas están incluidas en el alcance de la invención.
Algunos de los compuestos de la fórmula (I) pueden existir como isómeros geométricos. Los compuestos de la fórmula (I) pueden poseer uno o más centros de asimetría, aparte de los centros especificados en la fórmula (I), y existir por tanto en dos o más formas estereoisómeras. La presente invención incluye la totalidad de los estereo-isómeros e isómeros geométricos individuales de los compuestos de fórmula (I) y mezclas de los mismos.
Preferiblemente, los compuestos de fórmula (I) tienen la estereoquímica (IA) siguiente:
4
Preferiblemente, para los compuestos de fórmula (I) en la cual W es CZ, al menos uno de Y y Z es H o C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más halógenos).
Preferiblemente, X es un resto C_{2-4}-alquileno lineal, sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor. Muy preferiblemente X es propileno.
Preferiblemente, R es C_{3-8}cicloalquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
Más preferiblemente, R es ciclobutilo o ciclohexilo, sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
Todavía más preferiblemente, R es ciclobutilo o ciclohexilo.
Muy preferiblemente, R es ciclohexilo.
Preferiblemente, W es N, CH o CCH_{3}.
Muy preferiblemente, W es N.
Preferiblemente, Z es H o C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de halógeno.
Más preferiblemente, Z es H o metilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
Muy preferiblemente, Z es H o metilo.
Preferiblemente, Y es C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, S(O)_{p}R^{6}, OR^{5}, CONR^{1}R^{2}, CO_{2}R^{7} y arilo), C_{1-4}-alcoxicarbonilo, o CONR^{1}R^{2}.
Más preferiblemente, Y es metilo, isopropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, (pirrolidino)COCH_{2}, fenilsulfonilmetilo, 4-clorofenoximetilo, (piridin-2-il)metilo, (piridin-3-il)metilo, (piridin-4-il)metilo, (imidazol-2-il)metilo, CO_{2}(C_{1-2}-alquilo), CONH_{2}, CONH(C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H o CO_{2}R^{5})), CON(C_{1-4}-alquil)(C_{1-4}-alquil(sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H o CO_{2}R^{5})), o CONR^{1}R^{2} donde R^{1} y R^{2} se consideran junto con el nitrógeno al cual están unidos para representar un anillo heterocíclico de 4 a 6 miembros que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos adicionales en el anillo seleccionados independientemente de N, O y S,
y estando dicho anillo heterocíclico opcionalmente benzo- o pirido-condensado,
y estando dicho anillo heterocíclico sustituido opcionalmente con C_{1-4}-alquilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5}, arilo o NR^{3}R^{4}.
Todavía más preferiblemente, Y es CO_{2}C_{2}H_{5}, CONH_{2}, CONHCH_{3}, CONH(n-C_{3}H_{7}), CONH(i-C_{3}H_{7}), (ciclopropil)CH_{2}NHCO, (ciclobutil)CH_{2}NHCO, (2-metoxifenil)CH_{2}NHCO, (4-metoxi-fenil)CH_{2}NHCO, (piridin-2-il)CH_{2}NHCO, CONHCH_{2}CO_{2}H, CON-(CH_{3})CH_{2}CO_{2}CH_{3}, CON(CH_{3})_{2}, (4-dimetilaminopiperidinil)CO, (3-morfolinoazetidinil)CO, (4-(piridin-4-il)piperidino)-CO, (piridin-2-il)CH_{2}N(CH_{3})CO, CON(CH_{3})CH_{2}CO_{2}H, (3-metoxicarbonilazetidinil)CO, (3-carboxiazetidinil)CO, metilo, isopropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, (pirrolidino)COCH_{2}, fenilsulfonilmetilo, 4-clorofenoximetilo, (piridin-2-il)metilo, (piridin-3-il)metilo, (piridin-4-il)metilo, (imidazol-2-il)metilo, bencilaminocarbonilo, piperidinocarbonilo, (2,3-dihidroisoindol-2-il)CO, (1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-2-il)CO, morfolinocarbonilo, 4-metilpiperazinocarbonilo, (5-aza-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2-il)CO o N-metilbencilaminocarbonilo.
Muy preferiblemente, Y es CONH_{2}, CONHCH_{3} o CON(CH_{3})_{2}.
Un grupo preferido de compuestos es aquél en el cual cada sustituyente es como se especifica en los ejemplos que se dan más adelante.
Otro grupo preferido de compuestos son los de los ejemplos que se dan más adelante (especialmente los Ejemplos 2, 3 y 12) y las sales y solvatos de los mismos.
Otro aspecto de la invención es el uso de las sustancias de fórmula (I) descritas en esta memoria, con inclusión de las sales y solvatos de las mismas, en medicina.
Otro aspecto de la invención es el uso de las sustancias de fórmula (I) descritas en esta memoria, que incluyen las sales y solvatos de las mismas, en la fabricación de un medicamento anti-cicatrices.
Otro aspecto de la invención es una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I), sales del mismo o solvatos del mismo, y un diluyente, vehículo o adyuvante farmacéuticamente aceptable.
Otro aspecto de la invención es la combinación de un inhibidor de PCP, que es un compuesto de fórmula (I), o una sal o solvato, con otro material útil en el tratamiento de las heridas, tal como:
(i) un factor de crecimiento tal como TGF-\beta-3 (Renovo), IGF-1 (Genentech), complejo de IGF-1 (Celtrix), KGF-2 o FGF-10 (Sumitomo), DWP-401/EGF (Daewoong) o SNK-863 (Sanwa Kagaku Kenkyusho);
(ii) un agonista de factores de crecimiento tal como Noggin (Regeneron);
(iii) un anticuerpo de factor de crecimiento/material antisentido, tal como los correspondientes a: TGF-\beta-1 ó 2 (Renovo, CaT), PDGF (II Yang) o CTGF (Fibrogen);
(iv) una hormona tal como DHEAS (Pharmadigm), ConXn/Relaxin (Connetics);
(v) un anticuerpo para compuestos de adhesión tal como ICAM-1 (Boehringer);
(vi) una MMP tal como Collagenase ABC (BioSpecifics);
(vii) una barrera tal como ADCON (Gliatech);
(viii) productos de piel tales como sistemas de piel artificial tales como los basados en DermaGraft (Advanced Tissue Sciences Inc.), Piel Artificial INTEGRA (Integra Life Sciences Holding Corp.), cultivos de células tales como Apligraf/Graftskin (Novartis), los desarrollados por Cell Genesys Inc., AlloDerm (LifeCell) o productos de formulación de matriz tales como el gel Argidene (Telios Pharmaceuticals Inc.);
(ix) un inhibidor de uPA tal como los descritos en el documento WO 99/01451;
(x) un inhibidor de MMP-3 tal como los descritos en los documentos WO 99/35124 y WO 99/29667.
Un aspecto adicional de la invención es el uso de una sustancia de acuerdo con las definiciones anteriores para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección mediada por PCP.
Otro aspecto adicional de la invención es un método de tratamiento de una afección mediada por PCP que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de una sustancia de acuerdo con las definiciones anteriores.
Debe apreciarse que la referencia a tratamiento incluye tanto la profilaxis como el alivio de síntomas establecidos de afecciones y enfermedades mediadas por PCP.
La invención proporciona adicionalmente métodos para la producción de compuestos de la invención, que se describen más adelante y en los Ejemplos y Preparaciones. Los expertos apreciarán los compuestos de la invención podrían producirse por métodos distintos de los descritos específicamente en esta memoria, por adaptación de los métodos descritos en esta memoria en las secciones siguientes y/o adaptación de los mismos, por ejemplo por métodos conocidos en la técnica. Guías adecuadas para síntesis, transformaciones de grupos funcionales, uso de grupos protectores, etc. son, por ejemplo, "Comprehensive Organic Transformations" por RC Larock, VCH Publishers Inc. (1989), "Advanced Organic Chemistry" por J. March, Wiley Interscience (1985), "Designing Organic Synthesis" por S Warren, Wiley Interscience (1978), "Organic Synthesis - The Disconnection Approach" por S Warren, Wiley Interscience (1982), "Guidebook to Organic Synthesis" por RK Mackie y DM Smith, Longman (1982), "Protective Groups in Organic Synthesis" por TW Greene y PGM Wuts, John Wiley and Sons Inc. (1999), y PJ Kocienski, en "Protecting Groups", Georg Thieme Verlag (1994) y cualesquiera versiones actualizadas de dichos textos estándar.
En los Métodos que siguen, a no ser que se especifique otra cosa, los sustituyentes son como se define arriba con referencia a los compuestos de la fórmula (I) anterior.
Los compuestos de fórmula (I), en la cual W es N, se pueden preparar de acuerdo con la química reseñada en el esquema siguiente:
5
Los compuestos de ácido hidroxámico de fórmula (I) en la cual W es N se pueden producir por reacción del derivado de ácido activado correspondiente de fórmula (II), en la cual L^{-} es un grupo lábil adecuado, con hidroxilamina.
Grupos lábiles adecuados son generalmente aquéllos que se separarían de una manera más eficiente que el hidróxido del ácido originario (IV), en una reacción de sustitución nucleófila, tal como un haluro, C_{1-4}alcóxido sustituido opcionalmente con halógeno, un alquilsulfonato tal como metilsulfonato o mesilsulfonato, y un arilsulfonato tal como p-tosilsulfonato. Otros grupos lábiles adecuados son familiares para aquéllos que trabajan en el campo del acoplamiento de aminoácidos.
Tales compuestos de fórmula (II) se pueden producir por química estándar a partir del ácido (IV) correspondiente. Los compuestos de fórmula (II) en la cual L es un grupo lábil tal como Cl, Br, I, OCO(C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos), mesilato, tosilato, y análogos, se pueden producir a partir del compuesto correspondiente de fórmula (II) en la cual L es OH por métodos convencionales, con inclusión de los métodos representados p.ej. en los Ejemplos 2, etc.
La hidroxilamina utilizada en esta reacción se genera convenientemente in situ por tratamiento de una sal de hidroxilamina tal como la sal hidrocloruro con una base adecuada tal como trietilamina. Convenientemente, la reacción se lleva a cabo en un disolvente polar tal como DMF.
Esta reacción, los grupos lábiles, disolventes, reactivos, etc. se ilustran más adelante en los Ejemplos 1-4, 12-16, 18, 20-28, 30, 33-40 y 41.
Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden producir a partir de un compuesto protegido en NHO de fórmula (III), donde P es un grupo protector de O adecuado, por desprotección adecuada. Grupos protectores de O adecuados pueden encontrarse en el texto de Greene y Wuts, supra, e incluyen trialquilsililo (tal como trimetilsililo), bencilo, etc.
Los compuestos de fórmula (III) se pueden producir de manera análoga a los compuestos de fórmula (I) a partir de los compuestos de fórmula (II), utilizando una hidroxilamina protegida PONH_{2} o una sal adecuada de la misma en lugar de la hidroxilamina propiamente dicha o la sal de hidroxilamina.
El método de desprotección está determinado por el grupo protector utilizado, como es bien conocido en la técnica. V.g., los grupos bencilo pueden hidrogenarse utilizando convenientemente un método de hidrogenación catalítica por transferencia. Los reactivos y condiciones para la reacción (III)\rightarrow(I) se representan más adelante en los Ejemplos 29, 31, y 32, así como en los otros ejemplos en los cuales se utilizó un reactivo de hidroxilamina protegida (v.g. O-trimetilsililhidroxilamina) (v.g. los Ejemplos 2, etc.), en los cuales la desprotección se lleva a cabo convenientemente en el mismo recipiente que el paso previo.
Otros métodos de producción de los ácidos hidroxámicos (I) son conocidos y pueden utilizarse, v.g. los mencionados en el texto de J. March, supra, capítulos 0-54, 0-57 y 6-4, y las referencias pertinentes citadas en ellos.
Los ácidos de fórmula (IV) se pueden producir por desprotección de las especies químicas protegidas en O de fórmula (V). Grupos protectores en O adecuados pueden encontrarse en el capítulo sobre protección en O en el libro de Greene y Wuts, supra, e incluyen C_{1-4}-alcoxi tal como t-butoxi (como se representa en la Preparación 4), benciloxi, trialquilsililoxi tal como trimetilsililoxi, etc.
El método de desprotección está determinado por el grupo protector utilizado, como es bien conocido en la técnica (véase Greene y Wuts, supra). V.g., los grupos bencilo pueden eliminarse por hidrogenación, utilizando convenientemente un método de hidrogenación catalítica por transferencia; los grupos t-butilo pueden eliminarse por tratamiento con un ácido tal como ácido trifluoroacético, etc.
Los compuestos de fórmula (V), v.g., en donde P es un grupo t-butoxi, se pueden producir por ejemplo por reacción de condensación de un compuesto correspondiente de fórmula (VI), por ejemplo por calentamiento a temperatura elevada en un disolvente inerte tal como en xileno a aproximadamente 130ºC, representándose esta reacción por la Preparación 3 expuesta más adelante.
Los compuestos de fórmula (VI) se pueden producir por ejemplo por acoplamiento de un ácido de fórmula (VII) con un reactivo de fórmula C(NH_{2})(Y) = NOH, que está disponible por métodos de la bibliografía o adaptación de los mismos de manera convencional, tal como se representa en los métodos descritos en esta memoria (v.g., véase la Preparación 2, etc.). Típicamente, la condensación se lleva a cabo por adición de una solución del ácido (VII) en un disolvente inerte adecuado tal como 1,4-dioxano a un reactivo adecuado tal como hidrato de 1-hidroxibenzo-triazol, seguido por adición de un agente de acoplamiento adecuado tal como un agente de acoplamiento de carbodiimida, v.g. N,N'-diciclohexilcarbodiimida, seguido por tratamiento con el reactivo C(NH_{2})(Y) = NOH. Convenientemente, el acoplamiento se lleva a cabo a la temperatura ambiente.
Los compuestos de fórmula (VII) se pueden producir por hidrogenación del derivado de itaconato correspondiente, el cual se puede producir a su vez por métodos convencionales tales como la condensación de Stobbe. Ciertos aspectos de estas preparaciones relacionados con la Preparación estereoselectiva de algunos compuestos intermedios tales como los descritos en la Preparación 1 - Ruta C, son nuevos e inventivos y constituyen un aspecto adicional de esta invención.
Los compuestos de fórmula (I), en la cual W es CZ, se pueden preparar de acuerdo con la química reseñada en el esquema siguiente:
6
Los compuestos de ácido hidroxámico de fórmula (I) en la cual W es CZ se pueden producir por reacción del derivado de ácido activado correspondiente de fórmula (IX), en la cual L^{-} es un grupo lábil adecuado, con hidroxil-amina. Los grupos lábiles, reactivos, etc. son los mismos que se han mencionado anteriormente en relación con los compuestos correspondientes de fórmula (I) en la que W es N.
Tales compuestos de fórmula (IX) se pueden producir por química estándar a partir del ácido (X) correspondiente utilizando la misma química, o similar, a la reseñada anteriormente en relación con los compuestos correspondientes de fórmula (II) en la que W es N (supra).
Alternativamente, los compuestos de fórmula (I) se pueden producir a partir de un compuesto protegido en NHO de fórmula (VIII), donde P es un grupo protector de O adecuado, por desprotección adecuada. Grupos protectores de O adecuados pueden encontrarse en el texto de Greene y Wuts, supra, e incluyen dialquilsililo (tal como trimetilsililo), bencilo, etc.
Los compuestos de fórmula (VIII) se pueden producir de manera análoga a los compuestos de fórmula (II) a partir de los compuestos de fórmula (II), utilizando una hidroxilamina protegida PONH_{2} o una sal adecuada de la misma en lugar de la hidroxilamina propiamente dicha o la sal de hidroxilamina.
El método de desprotección está determinado por el grupo protector utilizado, como es bien conocido en la técnica. V.g., los grupos bencilo pueden hidrogenarse, utilizando convenientemente un método de hidrogenación catalítica por transferencia. Los reactivos y condiciones para la reacción (VIII)\rightarrow(I) se representan más adelante en los Ejemplos 29, 31, y 32, así como en los otros ejemplos en los que se utilizó un reactivo de hidroxilamina protegido (v.g. O-trimetilsililhidroxilamina) (v.g. Ejemplos 2, etc.), en los cuales la desprotección se lleva a cabo convenientemente en el mismo recipiente que el paso previo.
Otros métodos de producción de los ácidos hidroxámicos (I) son conocidos y pueden utilizarse, v.g. los mencionados en el texto de J. March, supra, capítulos 0-54, 0-57 y 6-4, y las referencias pertinentes citadas en ellos.
Los ácidos de fórmula (X) se pueden producir por desprotección de las especies químicas protegidas en O de fórmula (XI). Grupos protectores en O adecuados pueden encontrarse en el capítulo sobre protección de O en el libre de Greene y Wuts, supra, e incluyen C_{1-4}-alcoxi tal como t-butoxi (como se representa en la Preparación 4), benciloxi, trialquilsililoxi tal como trimetilsililoxi, etc.
El método de desprotección está determinado por el grupo protector utilizado, como es bien conocido en la técnica (véase Greene y Wuts, supra). V.g., los grupos bencilo pueden eliminarse por hidrogenación, utilizando convenientemente un método de hidrogenación catalítica por transferencia, los grupos t-butilo pueden eliminarse por tratamiento con un ácido tal como ácido trifluoroacético, etc.
Los compuestos de fórmula (XI), v.g. donde P es un grupo t-butoxi, se pueden producir por ejemplo por oxidación de un compuesto de fórmula (XII). Convenientemente, la oxidación se lleva a cabo utilizando bromuro de cobre (II) con hexametilenotetramina y una base tal como DBU. Los reactivos, condiciones, etc. se representan en la Preparación 62 más adelante.
Los compuestos de fórmula (XII) se pueden producir por condensación de compuestos de fórmula (XIII), por ejemplo por tratamiento del compuesto de fórmula (XIII) con un agente adecuado tal como Reactivo de Burgess, en un disolvente anhidro tal como THF. Esta reacción se representa en la Preparación 61 más adelante.
Los compuestos de fórmula (XIII) se pueden producir por condensación del ácido de fórmula (II) anterior con un agente de fórmula NH_{2}CH(Y)CH(Z)OH, como se representa en la Preparación 60 más adelante. Los compuestos de fórmula NH_{2}CH(Y)CH(Z)OH están disponibles comercialmente, por la bibliografía o por modificación rutinaria de la misma.
Algunos compuestos de fórmula (I) pueden interconvertirse en otros compuestos de fórmula (I) - por ejemplo, cuando Y es un ácido, éste puede convertirse en un éster y viceversa - representados en los Ejemplos 17 y 19 más adelante.
Será evidente para los expertos en la técnica que otros regímenes de protección y desprotección subsiguiente durante la síntesis de un compuesto de la invención pueden obtenerse por técnicas convencionales, por ejemplo como se describe en los volúmenes de Greene y Wuts, y Kocienski, supra.
En caso deseado o necesario, el compuesto de fórmula (I) se convierte en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de fórmula (I) se puede preparar mezclando soluciones de un compuesto de fórmula (I) y el ácido o base deseado, según sea apropiado. La sal puede precipitarse de la solución y recogerse por filtración, o puede recogerse por otros medios tales como evaporación del disolvente.
Algunos compuestos de la invención pueden interconvertirse en otros compuestos de la invención por métodos mencionados en los Ejemplos y Preparaciones, y métodos de la bibliografía bien conocidos.
Los compuestos de la invención están disponibles, sea por los métodos descritos en esta memoria en los Métodos, Ejemplos y Preparaciones, o por adaptación adecuada de los mismos utilizando métodos conocidos en la técnica. Debe entenderse que los métodos de transformación por síntesis mencionados en esta memoria pueden llevarse a cabo en diversas secuencias diferentes a fin de que los compuestos deseados puedan ensamblarse eficientemente. El químico experto ejercerá su criterio y experiencia en cuanto a la secuencia más eficaz de reacciones para la síntesis de un compuesto diana dado.
Los compuestos, sales o solvatos de la invención se pueden separar y purificar por métodos convencionales.
La separación de diastereoisómeros puede realizarse por técnicas convencionales, v.g. por cristalización fraccionada, cromatografía o H.P.L.C. de una mezcla estereoisómera de un compuesto de fórmula (I) o una sal adecuada o derivado de la misma. Un enantiómero individual de un compuesto de fórmula (I) se puede preparar también a partir de un compuesto intermedio ópticamente puro correspondiente o por resolución, tal como por H.P.L.C. del racemato correspondiente utilizando un soporte quiral adecuado o por cristalización fraccionada de las sales diastereoisómeras formadas por reacción del racemato correspondiente con un ácido o base ópticamente activo(a) adecuado(a). En ciertos casos se puede producir la cristalización preferencial de uno de los enantiómeros a partir de una solución de una mezcla de enantiómeros, enriqueciéndose así la solución restante en el otro enantiómero.
Para uso humano, los compuestos de fórmula (I) o sus sales se pueden administrar solos, pero generalmente se administrarán en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable seleccionado con relación a la ruta de administración propuesta y la práctica farmacéutica estándar. Por ejemplo, aquéllos se pueden administrar por vía oral, con inclusión de la vía sublingual, en la forma de tabletas que contienen excipientes tales como almidón o lactosa, o en cápsulas u óvulos, sea solos o en mezcla con excipientes, o en la forma de elixires, soluciones o suspensiones que contienen agentes saborizantes o colorantes. El compuesto o sal podría incorporarse en cápsulas o tabletas para direccionamiento al colon o duodeno por disolución retardada de dichas cápsulas o tabletas durante un tiempo particular después de la administración oral. La disolución podría controlarse por la susceptibilidad de la formulación a las bacterias encontradas en el duodeno o el colon, de tal modo que no tenga lugar disolución sustancial alguna antes de alcanzar el área diana del tracto gastrointestinal. Los compuestos o sales pueden inyectarse por vía parenteral, por ejemplo, por vías intravenosa, intramuscular o subcutánea. Para administración parenteral, aquéllos se utilizan óptimamente en la forma de una solución o suspensión acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo, suficiente sal o glucosa para hacer la solución isotónica con la sangre. Aquéllos pueden administrarse por vía tópica, o transdérmica, en la forma de cremas, geles, suspensiones, lociones, ungüentos, polvos para espolvoreo, pulverizaciones, espumas, mousses, vendajes con fármaco incorporado, parches en la piel, ungüentos tales como petrolatum o ungüentos basados en parafina blanca blanda, o por la vía de un parche en la piel u otro dispositivo, todos ellos estériles. Aquéllos podrían administrarse directamente sobre una herida. Los mismos podrían incorporarse en una sutura recubierta. Por ejemplo, los compuestos pueden incorporarse en una loción o crema constituida por una emulsión acuosa o aceitosa de aceites minerales; monoestearato de sorbitán; Polisorbato 60; cera de ésteres cetílicos; alcohol cetearílico; 2-octildodecanol; alcohol bencílico; agua; polietilenglicoles y/o aceite de parafina, o se pueden incorporar en un ungüento adecuado constituido por uno o más de los siguientes - aceite mineral; petrolatum líquido; petrolatum blanco; propilenglicol; composición polioxietileno-polioxipropileno; cera emulsionante y agua, o como hidrogel con derivados de celulosa o poliacrilato u otros modificadores de la viscosidad, o como polvo seco o pulverización líquida o aerosol con butano/propano, HFA, CFC, CO_{2} u otro propelente adecuado, incluyendo también opcionalmente un lubricante tal como trioleato de sorbitán, o como un vendaje con fármaco incorporado, sea como un vendaje de tul, con parafina blanca blanda o con vendajes de gasa impregnados en polietilenglicoles o con hidrogel, hidrocoloide, alginato o vendajes de película. El compuesto o sal podría administrarse también intraocularmente para uso oftálmico, v.g. en un implante de cristalino o como una gota oftálmica con tampones apropiados, modificadores de la viscosidad (v.g. derivados de celulosa o poliacrilato), conservantes (v.g. cloruro de benzalconio (BZK)) y agentes para ajustar la tonicidad (v.g. cloruro de sodio). Tales métodos de formulación son bien conocidos en la técnica.
Para ciertos usos, sería adecuada la administración vaginal, rectal y nasal (v.g. por inhalación de un polvo seco o aerosol).
Todas las formulaciones citadas pueden contener también estabilizadores y conservantes apropiados.
Para administración oral y parenteral a pacientes humanos, el nivel de dosificación diario de los compuestos de fórmula (I) o sus sales será de 0,001 a 20, preferiblemente de 0,01 a 20, más preferiblemente de 0,1 a 10, y muy preferiblemente de 0,5 a 5 mg/kg (en dosis simples o divididas). Así, las tabletas o cápsulas de la invención contendrán desde 0,1 a 500, preferiblemente desde 50 a 200, mg de compuesto activo para administración simple o de dos o más a la vez en caso apropiado.
Para administración tópica a pacientes humanos con heridas o cicatrices agudas/quirúrgicas, el nivel de dosificación diario de los compuestos, en suspensión u otra formulación, podría ser desde 0,01 a 50 mg/ml, preferiblemente desde 0,3 a 30 mg/ml.
La dosificación variará con el tamaño de la herida, tanto si la herida está abierta o cerrada como si está parcialmente cerrada, y tanto si la piel está intacta o no.
El médico determinará en cualquier caso la dosificación real que será la más adecuada para un paciente individual, y la misma variará con la edad, el peso y la respuesta del paciente particular. Las dosificaciones anteriores son ilustrativas del caso medio; por supuesto, pueden existir casos individuales en los cuales deben considerarse intervalos de dosificación mayores o menores, y dichos intervalos están dentro del alcance de esta invención.
Métodos de ensayo biológicos Inhibición de PCP
A fin de determinar la potencia de los inhibidores de PCP, se utilizó un ensayo de escisión de PCP fluorógeno. Este ensayo está basado en el modelo de Beekman et al. (FEBS Letters (1996), 390: 221-225) utilizando un sustrato fluorógeno. El sustrato (Dabcyl-Arg-Tyr-Tyr-Arg-Ala-Asp-Asp-Ala-Asn-Val-Glu(EDANS)-NH_{2}) contiene el sitio de escisión de la PCP humana (Hojima et al., J Biol Chem (1985), 260: 15996-16003). La PCP humana se ha purificado a partir de sobrenadante de células CHO estables transfectadas utilizando una columna de interacción hidrófoba seguido por filtración con gel Superdex 200. Se incubaron 4 \mug de proteína total de esta Preparación de enzima con diversas concentraciones de la sustancia a ensayar y sustrato 3 x 10^{-6} M en tampón de ensayo (Tris-Base 50 mM, pH 7,6 que contiene NaCl 150 mM, CaCl_{2} 5 mM, ZnCl_{2} 1 \muM, y 0,01% de Brij 35). El ensayo se realizó en placas negras de fluorímetro de 96 pocillos y la fluorescencia se leyó continuamente en un fluorímetro durante 2,5 horas (\lambda_{ex}= 340 nm, \lambda_{em}= 485 nm) a una temperatura constante de 37ºC con agitación mediante sacudidas. La salida de la señal fluorógena estaba en correlación lineal con la actividad de PCP. La lectura de la velocidad media desde los 30 min después del comienzo del experimento hasta las 2,5 horas se calculó por medio del soporte lógico Biolise. Se calcularon los valores CI_{50} por representación gráfica de los valores de % de inhibición contra la concentración de compuesto utilizando la incorporación del soporte lógico Tessela para la hoja de cálculo Excel.
Inhibición de MMP
La capacidad de los compuestos para inhibir la escisión de péptidos fluorógenos por las MMPs 1, 2, 9, y 14 se describe más adelante.
Los ensayos para las MMPs 2, 9 y 14 están basados en el protocolo original descrito por Knight et al. (Fed. Euro. Biochem. Soc., 296(3), 263-266; 1992) con las ligeras modificaciones indicadas más adelante.
Inhibición de MMP-1 (i) Preparación de la enzima
Se preparó el dominio catalítico MMP-1 en Pfizer Central Research. Una solución stock de MMP-1 (1 \muM) se activó por la adición de acetato aminofenilmercúrico (APMA), a una concentración final de 1 mM, durante 20 minutos a 37ºC. Se diluyó luego MMP-1 en tampón de ensayo Tris-HCl (Tris 50 mM, NaCl 200 mM, CaCl_{2} 5 mM, ZnSO_{4} 20 \muM, 0,05% de Brij 35), pH 7,5, hasta una concentración de 10 nM. La concentración final de enzima utilizada en el ensayo era 1 nM.
(ii) Sustrato
El sustrato fluorógeno utilizado en este ensayo era Dnp-Pro-ciclohexil-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(N-Me-Ala)-NH_{2} como ha sido descrito originalmente por Bickett et al (Anal. Biochem. 212, 58-64, 1993). La concentración de sustrato final utilizada en el ensayo fue 10 \muM.
(iii) Determinación de la inhibición de la enzima
Los compuestos de ensayo se disolvieron en dimetil-sulfóxido y se diluyeron con tampón de ensayo de tal modo que no estuviera presente más de 1% de dimetil-sulfóxido. El compuesto de ensayo y la enzima se añadieron a cada pocillo de una placa de 96 pocillos y se dejó que alcanzaran el equilibrio durante 15 minutos a 37ºC en un agitador de sacudidas orbital antes de la adición del sustrato. Se incubaron luego las placas durante 1 hora a 37ºC antes de la determinación de la fluorescencia (escisión del sustrato) utilizando un fluorímetro (Fluostar; BMG LabTechnologies, Aylesbury, Reino Unido) para una longitud de onda de excitación de 355 nm y longitud de onda de emisión de 440 nm. La potencia de los inhibidores se midió a partir de la magnitud de escisión del sustrato obtenida utilizando un intervalo de concentraciones del compuesto de ensayo, y, a partir de la curva dosis-respuesta resultante, se calculó un valor CI_{50} (la concentración de inhibidor requerida para inhibir el 50% de la actividad de la enzima).
Inhibición de MMP-2 y MMP-9 (i) Preparación de la enzima
Los dominios catalíticos MMP-2 y MMP-9 se prepararon en Pfizer Central Research. Una solución stock de MMP-2/MMP-9 (1 M) se activó por la adición de acetato aminofenilmercúrico (APMA). Para MMP-2 y MMP-9, se añadió una concentración final de APMA 1 mM, seguido por incubación durante 1 hora a 37ºC. Las enzimas se diluyeron luego en tampón de ensayo Tris-HCl (Tris 100 mM, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 10 mM y 0,16% de Brij 35, pH 7,5), hasta una concentración de 10 nM. La concentración final de enzima utilizada en los ensayos fue 1 nM.
(ii) Sustrato
El sustrato fluorógeno utilizado en esta selección fue Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Tyr-Ala-Nva-Trp-Met-Lys(Dnp)-NH_{2} (Bachem Ltd, Essex, Reino Unido) como ha sido descrito originalmente por Nagase et al (J. Biol. Chem., 269(33), 20952-20957, 1994). Este sustrato se seleccionó debido a que tiene una tasa de hidrólisis equilibrada contra las MMPs 2 y 9 (k_{cat}/k_{m} de 54.000, 59.400 y 55.300 s^{-1} M^{-1} respectivamente). La concentración final del sustrato utilizada en el ensayo fue 5 \muM.
(iii) Determinación de la inhibición de la enzima
Los compuestos de ensayo se disolvieron en dimetil-sulfóxido y se diluyeron con solución tampón de ensayo (como anteriormente) de tal modo que no estuviera presente más de 1% de dimetil-sulfóxido. El compuesto de ensayo y la enzima se añadieron a cada pocillo de una placa de 96 pocillos y se dejó que alcanzaran el equilibrio durante 15 minutos a 37ºC en un agitador de sacudidas orbital antes de la adición de sustrato. Las placas se incubaron luego durante 1 hora a 37ºC antes de la determinación de la fluorescencia utilizando un fluorímetro (Fluostar; BMG LabTechnologies, Aylesbury, Reino Unido) para una longitud de onda de excitación de 328 nm y longitud de onda de emisión de 393 nm. La potencia de los inhibidores se midió a partir de la magnitud de escisión del sustrato obtenida utilizando un intervalo de concentraciones del compuesto de ensayo, y, a partir de la curva dosis-respuesta resultante, se calculó un valor CI_{50} (la concentración de inhibidor requerida para inhibir el 50% de la actividad de la enzima).
Inhibición de MMP-14 (i) Preparación de la enzima
El dominio catalítico MMP-14 se adquirió del Prof. Tschesche, Departamento de Bioquímica, Facultad de Química, Universidad de Bielefeld, Alemania. Una solución stock de enzima 10 M se activó durante 20 minutos a 25ºC más adelante de la adición de 5 g/ml de tripsina (Sigma, Dorset, Reino Unido). La actividad de tripsina se neutralizó luego por la adición de 50 g/ml de inhibidor de tripsina de soja (Sigma, Dorset, Reino Unido), antes de la dilución de esta solución stock de enzima en tampón de ensayo Tris-HCl (Tris 100 mM, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 10 mM y 0,16% de Brij 35, pH 7,5) hasta una concentración de 10 nM. La concentración final de enzima utilizada en el ensayo fue 1 nM.
(ii) Sustrato
El sustrato fluorógeno utilizado en este escrutinio fue Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH_{2} (Bachem Ltd, Essex, Reino Unido) como ha sido descrito por Will et al (J. Biol. Chem., 271(29), 17119-17123, 1996). La concentración final de sustrato utilizado en el ensayo fue 10 \muM.
La determinación de la inhibición de la enzima por los compuestos de ensayo se realizó de la misma manera que se ha descrito anteriormente para las MMPs 2 y 9.
Los compuestos de los Ejemplos 1-40 y 42-58 tenían valores CI_{50} de PCP de 0,5 \muM e inferiores, y los compuestos de los Ejemplos 1-40, 43, 44 y 46 tenían selectividades frente a MMP-2 mayores que 100 veces.
Ejemplos y preparaciones
Los puntos de fusión se determinaron utilizando tubos capilares de vidrio abiertos y un aparato de punto de fusión Gallenkamp, y están sin corregir. Los datos de Resonancia Magnética Nuclear (NMR) se obtuvieron utilizando espectrómetros Varian Unity Inova-400, Varian Unity Ino-va-300 o Bruker AC300, y se indican en partes por millón con respecto a tetrametilsilano. Los datos espectrales de masas (MS) se obtuvieron en un equipo Finnigan Mat. TSQ 7000 o un equipo Fisons Instruments Trio 1000. Los iones calculados y observados que se indican se refieren a la composición de isótopos de masa mínima. Los espectros infrarrojos (IR) se midieron utilizando un espectrómetro infrarrojo de transformadas de Fourier Nicolet Magna 550. La cromatografía súbita hace referencia a cromatografía en columna sobre gel de sílice (Kieselgel 60, mallas 230-400, de E. Merck, Darmstadt. Se utilizaron placas F_{254} de Kieselgel 60 de E. Merck para TLC, y los compuestos se visualizaron utilizando luz UV, permanganato de potasio acuoso al 5% o reactivo de Dragendorff (pulverización en superficie con nitrito de sodio acuoso). Los análisis térmicos por Calorimetría de Barrido Diferencial (DSC) y Análisis TermoGravimétrico (TGA) se obtuvieron utilizando equipos Perkin Elmer DSC7 y TGA7. Las características de sorción de humedad se registraron utilizando un Analizador Automático de Sorción de Agua DVS1 de Surface Measurement Systems Ltd. El contenido de agua se determinó en un equipo Mitsubishi CA100 (Valorador Culombimétrico Karl Fischer). El patrón de difracción en polvo de rayos X (PXRD) se determinó utilizando un difractómetro en polvo de rayos X Siemens D5000 provisto de un cambiador de muestras automático, un goniómetro theta-theta, rendijas de divergencia de haz automáticas, un monocromador secundario y un contador de centelleo. Otras medidas se realizaron utilizando equipo estándar. Hexano hace referencia a una mezcla de hexanos (calidad hplc), p.e. 65-70ºC. Éter hace referencia a dietil-éter. Ácido acético hace referencia a ácido acético glacial. 1-Hidroxi-7-aza-1H-1,2,3-benzotriazol (HOAt), N-óxido de hexafluorofosfato de N-[(dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo-[4,5-b]piridin-1-ilmetileno]-N-metilmetaniminio (HATU) y hexafluorofosfato de 7-azabenzotriazol-1-iloxitris-(pirrolidino)fosfonio (PyAOP) se adquirieron de Per-Septive Biosystems U.K. Ltd. "DIPE" hace referencia a diisopropiléter. El gel de sílice de fase inversa para la cromatografía súbita se obtuvo de Fluka (Fluka 100, C_{18}, 40-63 \mu). Pentano hace referencia a n-pentano de calidad para Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC) (p.e. 35-37ºC). La nomenclatura se ha asignado utilizando un programa disponible de IUPAC. Se utilizan abreviaturas estándar en todos los casos, v.g. "Me" es metilo, "Et" es etilo, "Pr" es propilo, "Ph" es fenilo, etc. Se reconoció que durante ciertas repeticiones de los métodos expuestos en los Ejemplos y Preparaciones, parecía haber tenido lugar cierta racemización. En algunos casos se encontró que los enantiómeros específicos deseados se pueden separar a partir de mezclas de los mismos por métodos rutinarios tales como cristalización diferencial.
^{a}La autopurificación por HPLC se realizó utilizando 2 columnas - Phenomonex LUNA C8 de 150 x 21,2 mm, 10 \mum y Phenomonex MAGELLEN C18 de 150 x 21,2 mm, 5 \mum, eluyendo con un sistema en gradiente de disolvente orgánico [acetato de amonio (aq) 100 mM: acetonitrilo (1:9)]: disolvente acuoso [acetato de amonio (aq) 100 mM: acetonitrilo (9:1)]
^{b}La autopurificación por HPLC se realizó utilizando 2 columnas - Phenomonex LUNA C8 de 150 x 21,2 mm, 10 \mum y Phenomonex MAGELLEN C18 de 150 x 21,2 mm, 5 \mum, eluyendo con un sistema en gradiente de disolvente orgánico (acetonitrilo): disolvente acuoso (ácido trifluoroacético acuoso al 0,1%).
Ejemplo 1 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo
7
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (140 mg, 0,41 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (320 \mul, 2,07 mmol) en N,N-dimetilformamida (5 ml) se trató con hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (235 mg, 0,61 mmol) y la solución resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (113 mg, 0,61 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 20 horas. La mezcla se vertió en ácido clorhídrico (1 M, 20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99,5:0,5) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (97:3) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (62 mg).
MS: 354 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,52 (2H, m), 3,70 (1H, br m), 2,94-2,52 (2H, br m), 1,96-1,00 (18H, m), 0,85 (2H, m).
Ejemplo 2(a)
5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida 
\vskip1.000000\baselineskip
8 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de ácido (3R)-3-[3-(aminocarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoico (Preparación 6)
(6,00 g, 19,42 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (200 ml) se enfrió a 0ºC, se trató luego con N-metilmorfolina (2,40 ml, 22,0 mmol) y cloroformiato de isobutilo (2,8 ml, 22,0 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (7,0 ml, 60,0 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara hasta la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol (50 ml) y se agitó durante 30 minutos más. Esta mezcla se repartió entre acetato de etilo y agua. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se recristalizó en acetato de isopropilo (500 ml) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (4,46 g). El análisis por HPLC quiral indicó que este material tenía un exceso enantiomérico (ee) de 87,6%. Una muestra de este material (2,9 g) se disolvió en acetato de etilo (450 ml) a reflujo y se dejó enfriar luego. El precipitado se separó por filtración y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida para proporcionar un sólido blanco, que se recristalizó luego en acetato de isopropilo (120 ml) para proporcionar el compuesto del título (1,42 g). El análisis por HPLC quiral demostró que este material tenía un exceso enantiomérico de 98,3%.
MS: 323 (MH^{-})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,50 (1H, br s), 8,81 (1H, br s), 8,26 (1H, br s), 8,05 (1H, br s), 3,47 (1H, m), 2,56-2,39 (2H, m), 1,73-1,46 (7H, m), 1,27-0,99 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Análisis: Encontrado, C, 52,76; H, 7,64; N, 16,34%; C_{15}H_{24}N_{4}O_{4}.H_{2}O requiere C, 52,62; H, 7,65; N, 16,36%.
PF: 136-138ºC
\newpage
Ejemplo 2(b)
5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida monohidratada
9
Una solución de 5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxi-amino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida (1,58 kg, 4,86 mol) en tetrahidrofurano (15 litros) se calentó a 40ºC y se añadió agua desmineralizada (26 litros) para dar una solución turbia. La mezcla se dejó enfriar a la temperatura ambiente, agitando durante 24 horas. La mezcla se enfrió a 5ºC y se agitó durante 1 hora. El precipitado se recogió por filtración y se secó a vacío (38ºC, 100 mbar) para proporcionar el compuesto del título como un sólido incoloro (1,37 kg).
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,50 (1H, br s), 8,81 (1H, br s), 8,26 (1H, br s), 3,47 (1H, m), 2,56-2,39 (2H, m), 1,73-1,46 (7H, m), 1,27-0,99 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Contenido de agua (Karl Fischer culombimétrico): 5,0%
Sorción de Vapor Dinámica: 5,17% p/p @ 20% RH (30ºC), 4,84% p/p @ 2% RH (30ºC), deshidratación significativa por debajo de 1% RH (30ºC).
TGA (pérdida de peso): 24ºC-117ºC = 4,93%
117ºC-160ºC = 0,26%
Ejemplo 2(c)
5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida (anhidra)
10
Se disolvió 5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida (3,20 g,
9,86 mmol) en acetato de etilo (80 ml) a reflujo. La mezcla se dejó enfriar a la temperatura ambiente, y se agitó durante 3 horas. El precipitado se recogió por filtración y se secó a vacío (40-45ºC, 48 horas) para proporcionar el compuesto del título como un sólido incoloro (2,40 g).
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,50 (1H, br s), 8,81 (1H, br s), 8,26 (1H, br s), 3,47 (1H, m), 2,56-2,39 (2H, m), 1,73-1,46 (7H, m), 1,27-0,99 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Sorción de vapor Dinámica: 0,18% p/p @ 15% RH (30ºC), 0,23% p/p @ 30% RH (30ºC), 0,34% p/p @ 45% RH (30ºC). El compuesto del título se hidrata lentamente a 60% RH (30ºC) convirtiéndose en el monohidrato (se utilizó XRD para confirmación), y finalmente se equilibra a 5,3% p/p para 90% RH (30ºC).
\newpage
TGA (pérdida de peso): 25ºC-91ºC = 0,22%
91ºC-138ºC = 0,33%
Ejemplo 3 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-metil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
11
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(metil-amino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 8) (285 mg, 0,88 mmol) y N-metilmorfolina (110 \mul, 1,00 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (130 \mul, 1,0 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (130 \mul, 1,06 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara hasta la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v, 10 ml) y se agitó durante 2 horas. Esta mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se recristalizó luego en hexano:acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (130 mg).
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,48 (1H, br s), 8,87 (1H, m), 8,77 (1H, br s), 3,48 (1H, m), 3,19 (2H, m), 2,16 (1H, m), 1,87 (1H, m), 1,57 (9H, m), 1,14 (8H, m), 0,80 (5H, m).
Ejemplo 4
5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-propil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
12
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(propilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 9) (66 mg, 0,18 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (31 \mul, 0,18 mmol) en N-metil-2-pirrolidinona (3 ml) se trató con hexafluorofosfato de O-(7-azabenzo-triazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (102 mg, 0,27 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió luego N,N-diisopropiletilamina (93 \mul, 0,54 mmol) seguido por hidrocloruro de hidroxilamina (37,5 mg, 0,54 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se repartió entre acetato de etilo y tampón acuoso de pH 7. Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con solución acuosa de ácido cítrico (5% p/v) y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (90:10), que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (0:100) y luego a diclorometano:metanol (95:5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (31 mg).
MS: 367 (MH^{+})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,48 (1H, br s), 8,87 (1H, br t), 8,76 (1H, br s), 3,47 (1H, m), 3,19 (2H, m), 2,16 (1H, m), 1,88 (1H, m), 1,76-1,43 (9H, m), 1,30-1,00 (8H, m), 0,90-70 (5H, m).
\newpage
Ejemplo 5
5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-isopropil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
13
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de isopropilamina (434 mg, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (531 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (180 \mul, 1,63 mmol) y cloroformiato de isobutilo (210 \mul, 1,62 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (220 \mul, 1,80 mmol) y se continuó la agitación durante 10 minutos a 0ºC y luego durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató luego con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{a} en fase inversa para proporcionar el compuesto del título como una espuma (43 mg).
MS: 367 (MH^{+}), 389 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 9,06 (1H, br s), 7,63 (1H, br s), 6,74 (1H, br d), 4,37 (1H, m), 3,70 (1H, m), 2,83-2,60 (2H, m), 1,78-1,52 (7H, m), 1,35-1,07 (14H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 6 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-(ciclopropilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
14
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de ciclopropilmetilamina (522 mg, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (349 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (120 \mul, 1,09 mmol) y cloroformiato de isobutilo (140 \mul, 1,09 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (140 \mul, 1,15 mmol) y se continuó la agitación durante 10 minutos a 0ºC y después durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató luego con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como una espuma (88 mg).
MS: 379 (MH^{+}), 401 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 9,20 (1H, br s), 7,05 (1H, br s), 3,72 (1H, m), 3,33 (2H, m), 2,87-2,60 (2H, m), 1,88-1,52 (7H, m), 1,40-1,00 (8H, m), 0,83 (3H, m), 0,59 (2H, m), 0,30 (2H, m).
Ejemplo 7 N-Ciclobutil-5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
15
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de ciclobutilamina (522 mg, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas se reunieron, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (462 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (150 \mul, 1,36 mmol) y cloroformiato de isobutilo (180 \mul, 1,39 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (190 \mul, 1,55 mmol) y se continuó la agitación durante 10 minutos a 0ºC y luego durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató luego con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar un residuo (63 mg) que se disolvió en diclorometano (3 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (20 \mul, 0,18 mmol) y cloroformiato de isobutilo (23 \mul, 0,18 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (24 \mul, 0,20 mmol) y se continuó la agitación durante 3 horas. Se añadió más O-(trimetil-silil)hidroxilamina (30 \mul, 0,25 mmol) y se continuó agitando durante 17 horas. La reacción se inhibió con metanol y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió luego en metanol (5 ml), se trató con carbonato de potasio (110 mg) y se agitó a la temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla se trató con unas cuantas gotas de ácido acético y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como una espuma (24 mg).
MS: 379 (MH^{+}), 401 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,80 (1H, br s), 7,06 (1H, br d), 4,57 (1H, m), 3,70 (1H, m), 2,85-2,54 (2H, m), 2,43 (1H, m), 2,05 (1H, m), 1,87-1,41 (11H, m), 1,38-0,98 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Ejemplo 8 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-(2-metoxibencil)-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
16
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de 2-metoxibencilamina (1,00 g, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (672 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (180 \mul, 1,64 mmol) y cloroformiato de isobutilo (210 \mul, 1,63 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (220 \mul, 1,80 mmol) y se continuó agitando durante 10 minutos a 0ºC y luego durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató luego con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como una espuma (140 mg).
MS: 445 (MH^{+}), 462 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,44 (1H, br s), 7,29 (2H, m), 6,91 (2H, m), 4,63 (2H, d, J=5 Hz), 3,89 (3H, s), 3,71 (1H, m), 2,86-2,54 (2H, m), 1,90-1,48 (7H, m), 1,39-1,00 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 9 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-(4-metoxibencil)-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
17
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de 4-metoxibencilamina (1,00 g, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (578 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (160 \mul, 1,45 mmol) y cloroformiato de isobutilo (190 \mul, 1,47 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (195 \mul, 1,60 mmol) y se continuó agitando durante 10 minutos a 0ºC y luego durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató después con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como una espuma (74 mg).
MS: 445 (MH^{+}), 462 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 7,37 (2H, d, J = 8 Hz), 6,89 (2H, d, J = 8 Hz), 4,50 (2H, s), 3,76 (3H, s), 3,60 (1H, m), 2,73-2,50 (2H, m), 1,86-1,66 (7H, m), 1,40-1,09 (8H, m), 0,85 (2H, m).
Ejemplo 10 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-(2-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
18
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (500 mg, 1,47 mmol) en etanol (13 ml) se trató con una solución de 2-aminometilpiridina (794 mg, 7,35 mmol) en etanol (2 ml) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 10 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 10 ml), se neutralizó a pH 4 con una solución acuosa saturada de hidróxido de amonio y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. Este residuo (467 mg) se disolvió luego en diclorometano (15 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (140 \mul, 1,27 mmol) y cloroformiato de isobutilo (165 \mul, 1,28 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)hidroxilamina (170 \mul, 1,39 mmol) y se continuó agitando durante 10 minutos a 0ºC y luego durante 17 horas a la temperatura ambiente. La mezcla se trató después con ácido trifluoroacético:agua (5 ml, 9:1) y la solución se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente en tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{b} en fase inversa para proporcionar un sólido (130 mg) que se disolvió en diclorometano (5 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (33 \mul, 0,30 mmol) y cloroformiato de isobutilo (38 \mul, 0,30 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, se trató luego con O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (40 \mul, 0,32 mmol) y se continuó agitando durante 3 horas. La reacción se inhibió con metanol y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en metanol (5 ml), se trató con carbonato de potasio (110 mg, 0,80 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla se trató con unas cuantas gotas de ácido acético y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separó la fase orgánica, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como un sólido (34 mg).
PF: 128-130ºC
MS: 416 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,50 (2H, m), 7,72 (1H, dd, J = 7, 7 Hz), 7,40-7,18 (2H, m), 4,74 (2H, d, J = 5 Hz, 3,67 (1H, m), 2,83-2,50 (2H, m), 1,86-1,42 (7H, m), 1,40-0,97 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Ejemplo 11 Ácido 2-{[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]amino}-acético
19
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (527 mg, 1,56 mmol) en etanol (20 ml) se trató con trietilamina (508 mg, 5,02 mmol) e hidroxicloruro del éster t-butílico de glicina (743 mg, 4,43 mmol) y la solución resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 30 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en ácido clorhídrico (1M, 20 ml) y se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (1:1) y luego dicloro-metano:metanol (19:1). Este residuo (430 mg, 1,02 mmol) se disolvió en diclorometano (10 ml), se enfrió a 0ºC y se trató secuencialmente con N-metilmorfolina (130 \mul, 1,20 mmol) y cloroformiato de isobutilo (150 \mul, 1,20 mmol). Esta mezcla se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora y se trató luego con O-(trimetil-silil)hidroxilamina (160 \mul, 1,30 mmol). La mezcla se agitó durante 17 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se diluyó con diclorometano, se lavó con solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en diclorometano (10 ml), se trató con ácido trifluoroacético (10 ml) y la solución se agitó durante 2,5 horas a la temperatura ambiente. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se purificó por HPLC^{b} para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (350 mg).
PF: 141-142ºC
MS: 383 (MH^{+}), 405 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 50,80; H, 7,00; N, 13,90%; C_{17}H_{26}N_{4}O_{6}.H_{2}O requiere C, 50,99; H, 7,05; N, 13,99%.
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,10 (2H, s), 3,63 (1H, m), 2,72-2,51 (2H, m), 1,85-1,60 (7H, m), 1,38-1,10 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Ejemplo 12 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N,N-dimetil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
20
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(dimetilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 11) (60 mg, 0,18 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (30 \mul, 0,18 mmol) en N,N-dimetil-formamida (3 ml) se trató con hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (100 mg, 0,27 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió luego más N,N-diisopropiletilamina (90 \mul, 0,52 mmol), seguido por hidrocloruro de hidroxilamina (35 mg, 0,52 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se repartió la mezcla entre acetato de etilo y tampón acuoso de pH 7. Se separaron las capas y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con solución acuosa de ácido cítrico (5% p/v) y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron, y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (50:50) y luego a diclorometano:metanol (95:5). El residuo se purificó ulteriormente por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de dicloro-metano:metanol (99:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (95:5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite que cristalizó al dejarlo en reposo (35 mg).
MS: 353 (MH^{+})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 10,50 (1H, br s), 8,81 (1H, br s), 3,48 (1H, m), 3,03 (3H, s), 2,93 (3H, s), 2,50 (2H, m), 1,76-1,52 (7H, m), 1,32-1,03 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Ejemplo 13 (3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[4-(dimetilamino)-1-piperidinil]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-N-hidroxihexanamida
21
Una solución de trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(dimetilamino)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,
4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 26) (702 mg, 1,31 mmol) y N-metilmorfolina (159 \mul, 1,45 mmol) en N,N-dimetilformamida (15 ml) se enfrió a 0ºC y se trató luego gota a gota con cloroformiato de isobutilo (188 \mul, 1,45 mmol). La solución resultante se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (274 mg, 3,94 mmol) seguido por más N-metilmorfolina (433 \mul, 3,94 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en una solución acuosa saturada de carbonato de sodio. Se ajustó el pH de la solución a 9 por adición gota a gota de ácido acético y el producto se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (90:10:1) y luego diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (80:20:2) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (23 mg).
MS: 436 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,68 (1H, m), 3,95 (1H, m), 3,48 (1H, m), 3,18 (1H, m), 2,91 (1H, m), 2,72-2,54 (3H, m), 2,36 (6H, s), 2,04 (1H, m), 1,96 (1H, m), 1,84-1,60 (7H, m), 1,50 (2H, m), 1,35-1,10 (8H, m), 0,88 (2H, m).
Ejemplo 14 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-(3-{[3-(4-morfolinil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanamida
22
Una solución de trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(4-morfolinil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 28) (1173 mg, 2,70 mmol) y N-metilmorfolina (327 \mul, 2,97 mmol) en N,N-dimetilformamida (25 ml) se enfrió a 0ºC, se trató gota a gota con cloroformiato de isobutilo (386 \mul, 2,97 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno a 0ºC durante 45 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (564 mg, 8,11 mmol) seguido por más N-metilmorfolina (891 \mul, 8,11 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en una solución acuosa saturada de carbonato de sodio. El pH de la solución se ajustó a 9 por adición gota a gota de ácido acético. Se añadió agua (75 ml) y el producto se extrajo luego con acetato de etilo (x2). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (90:10:1) y luego con diclorometano:metanol:amoníaco densidad 0,88 (80:20:2). El producto se purificó ulteriormente por HPLC para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (151 mg).
MS: 450 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 56,19; H, 7,61; N, 14,81%; C_{22}H_{35}N_{5}O_{5}.H_{2}O requiere C, 56,51; H, 7,96; N, 14,98%.
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,63 (1H, m), 4,42 (1H, m), 4,44 (1H, m), 4,03 (1H, m), 3,75 (4H, m), 3,41 (1H, m), 3,30 (1H, m), 2,72-2,53 (2H, m), 2,45 (4H, m), 1,83-1,56 (7H, m), 1,36-1,07 (8H, m), 0,87 (2H, m).
PF: 52-63ºC
Ejemplo 15 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-(3-{[4-(4-piridinil)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanamida
23
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(4-piridinil)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoico (Preparación 32) (311 mg, 0,68 mmol) y N-metilmorfolina (83 \mul, 0,75 mmol) en N,N-dimetilformamida (15 ml) se enfrió a 0ºC, se trató gota a gota con cloroformiato de isobutilo (98 \mul, 0,75 mmol) y la solución resultante se agitó a 0ºC durante 45 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (142 mg, 2,05 mmol) seguido por más N-metilmorfolina (226 \mul, 2,05 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo (50 ml) y agua (50 ml). Se separaron las capas y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC para proporcionar un residuo que se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separó la fase orgánica, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se trituró con dietil-éter para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (94 mg).
MS: 470 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 8,45 (2H, d, J = 4 Hz), 7,37 (2H, d, J = 4 Hz), 4,79 (1H, m), 4,00 (1H, m), 3,60 (1H, m), 3,32 (1H, m), 3,00 (2H, m), 2,70-2,52 (2H, m), 2,06-1,85 (2H, m), 1,83-1,60 (9H, m), 1,39-1,12 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Ejemplo 16 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-metil-N-(2-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
24
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[metil-(2-piridinilmetil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoico (Preparación 36) (453 mg, 1,09 mmol) y N-metilmorfolina (132 \mul, 1,20 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (155 \mul, 1,20 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió O-(tri-metilsilil)hidroxilamina (160 \mul, 1,31 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con solución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 ml) y se agitó durante 1 hora. Esta mezcla se diluyó luego con agua y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo:isopropanol (95:5) y luego con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (90:10) hasta dicloro-metano:metanol (80:20) para proporcionar un residuo (260 mg, 0,31 mmol) que se disolvió en metanol (5 ml) y se trató con carbonato de potasio (138 mg, 1,00 mmol), y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (x4). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (84 mg).
MS: 430 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) (mezcla de rotámeros) \delta: 8,55 (1H, m), 7,72 (1H, m), 7,42-7,20 (2H, m), 4,84 (2H, m), 3,64 (1H, m), 3,24 (1,2H, s), 3,18 (1,8H, s), 2,84-2,53 (2H, m), 1,86-1,45 (7H, m), 1,39-0,88 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Ejemplo 17 Ácido 2-[[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil](metil)-amino]acético
25
Una solución de 2-[[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]
(metil)amino]acetato de metilo (Preparación 40) (180 mg, 0,44 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con hidróxido de litio monohidratado (42 mg, 1 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se trató luego la mezcla con ácido clorhídrico (2M), se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{b} para proporcionar el compuesto del título como una espuma blanca (95 mg).
MS: 397 (MH^{+}), 419 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) (mezcla de rotámeros) \delta: 4,39 (1H, s), 4,27 (1H, s), 3,60 (1H, m), 3,23 (1,5H, s), 3,16 (1,5H, s), 2,73-2,50 (2H, m), 1,86-1,58 (7H, m), 1,39-1,08 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Ejemplo 18 1-[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidinacarboxilato de metilo
26
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(metoxicarbonil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 43) (200 mg, 0,49 mmol) y N-metilmorfolina (59 \mul, 0,54 mmol) en diclorometano anhidro (7 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (70 \mul, 0,54 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (175 \mul, 1,47 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v, 10 ml) y se agitó durante 2 horas. Esta mezcla se diluyó luego con agua y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC para proporcionar el compuesto del título como una espuma (150 mg).
MS: 423 (MH^{+}), 440 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,80-4,62 (2H, m), 4,46-4,25 (2H, m), 3,77 (3H, s), 3,63 (2H, m), 2,75-2,50 (2H, m), 1,83-1,57 (7H, m), 1,39-1,08 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Ejemplo 19 Ácido 1-[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidina-car-boxílico
27
Una solución de 1-[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidinacarboxilato de metilo (Ejemplo 18) (130 mg, 0,31 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con hidróxido de litio monohidratado (25 mg, 0,60 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se añadió más hidróxido de litio monohidratado (25 mg, 0,60 mmol) y se agitó la mezcla durante 3 horas. Se trató luego la mezcla con ácido clorhídrico (2M), se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{b} para proporcionar el compuesto del título como una espuma (110 mg).
MS: 409 (MH^{+}), 431 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCL_{3}) \delta: La NMR precisa rehacerse, 4,71 (2H, m), 4,35 (2H, m), 3,69-3,43 (2H, m), 2,86-2,56 (2H, m), 1,90-1,52 (7H, m), 1,40-0,99 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 20 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanamida
28
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 45) (170 mg, 0,61 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (2 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (98 mg, 0,61 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 20 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (42 mg, 0,61 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre ácido clorhídrico (0,5M) y acetato de etilo. Se separaron las capas y la fase orgánica se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (98:2) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (82 mg).
MS: 296 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,56 (1H, m), 2,70 (1H, m), 2,58 (1H, m), 2,38 (3H, s), 1,88-1,42 (7H, m), 1,39-1,03 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 21 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanamida
29
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 47) (175 mg, 0,57 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (93 mg, 0,57 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (40 mg, 0,57 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se filtró la mezcla y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (44 mg).
MS: 324 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,54 (1H, m), 3,06 (1H, m), 2,75-2,48 (2H, m), 1,88-1,58 (7H, m), 1,39-1,05 (14H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 22 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
30
Una solución de ácido (3R)-6-cicloehexil3-[3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 49) (250 mg, 0,81 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (130 mg, 0,81 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (56 mg, 0,81 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (75 mg).
MS: 326 (MH^{+}), 348 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,57 (2H, s), 3,62 (1H, m), 3,46 (3H, s), 2,80-2,52 (2H, m), 1,88-1,42 (7H, m), 1,39-1,03 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 23 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(2-metoxietil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
31
Una solución de ácido ((3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-metoxietil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 51) (245 mg, 0,76 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (123 mg, 0,76 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (53 mg, 0,76 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5). El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico (1M), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite (100 mg).
MS: 340 (MH^{+}), 362 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,77 (2H, m), 3,55 (1H, m), 3,36 (3H, s), 3,00 (2H, t, J = 6 Hz), 2,80-2,52 (2H, m), 1,88-1,52 (7H, m), 1,39-1,05 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 24 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-{3-[2-oxo-2-(1-pirrolidinil)etil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanamida
32
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[2-oxo-2-(1-pirrolidinil)etil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 53) (200 mg, 0,53 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (86 mg, 0,53 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (37 mg, 0,53 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (90:10:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (50 mg).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,80 (2H, m), 3,67-3,40 (5H, m), 2,80-2,52 (2H, m), 2,13-0,98 (19H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 25 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-{3-[(fenilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanamida
33
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(fenilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 55) (60 mg, 0,14 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (4 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (25 mg, 0,15 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 hora. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (10 mg, 0,14 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (15 mg).
MS: 436 (MH^{+}), 453 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,93 (1H, br s), 8,01-7,40 (5H, m), 4,53 (2H, s), 3,60 (1H, m), 2,85-2,52 (2H, m), 1,84-1,43 (7H, m), 1,39-1,00 (8H, m), 0,85 (2H, m).
Ejemplo 26 (3R)-3-{3-[(4-Clorofenoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexil-N-hidroxihexanamida
34
Una solución de ácido (3R)-3-{3-[(4-clorofenoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexil-hexanoico (Preparación 57) (180 mg, 0,44 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (71 mg, 0,44 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (30 mg, 0,44 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un vidrio (53 mg).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,24 (2H, m), 6,94 (2H, d J = 8 Hz), 5,13 (2H, s), 3,70-3,44 (1H, m), 3,00-2,50 (2H, m), 1,85-1,53 (7H, m), 1,37-1,02 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 27 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(2-piridinilmetil-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
35
Una solución de trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-piridinilmetil-1,2,4-oxadiazol-5-il]-hexanoico (Preparación 59) (214 mg, 0,45 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (5 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (194 mg, 1,20 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió luego hidrocloruro de hidroxilamina (83 mg, 1,20 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la fase orgánica se lavó con agua y luego con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (120 mg).
MS: 373 (MH^{+}), 395 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 8,79 (1H, br s), 8,45 (1H, d J = 5 Hz), 7,74 (1H, t, J = 5 Hz), 7,38-7,20 (2H, m), 4,20 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,48-2,31 (2H, m), 1,89-1,43 (7H, m), 1,29-0,95 (8H, m), 0,76 (2H, m).
Ejemplo 28 2-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
36
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[4-(etoxicarbonil)1,3-oxazol-2-il]hexanoico (Preparación 63) (130 mg, 0,39 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (67 \mul, 0,39 mmol) en N,N-dimetilformamida (6 ml) se trató con hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (220 mg, 0,58 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se añadió luego más N,N-diisopropiletilamina (270 \mul, 1,54 mmol) seguido por hidrocloruro de hidroxilamina (80 mg, 1,16 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y tampón acuoso de pH 7. Se separó la capa orgánica, se lavó secuencialmente con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se liberó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (98:2) para proporcionar el compuesto del título (20 mg).
MS: 353 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,14 (1H, s), 4,37 (2H, q, J = 7 Hz), 3,50 (1H, m), 2,76 (1H, m), 2,57 (1H, m), 1,88-1,52 (7H, m), 1,37 (3H, t, J = 7 Hz), 1,32-1,02 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 29 2-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N,N-dimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida
37
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N,N-dimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida (Preparación 66) (100 mg, 0,23 mmol) en etanol (5 ml) se trató con paladio al 5% sobre sulfato de bario (50 mg), se presurizó a 1 atm con hidrógeno en un recipiente herméticamente cerrado y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se vertió la solución a través de Arbocel® y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x3) y luego diclorometano:éter (1 ml:4 ml) para proporcionar el compuesto del título como una espuma (75 mg).
MS: 351 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,94 (1H, s), 3,52 (1H, m), 3,38-2,94 (6H, br d), 2,73-2,45 (2H, m), 1,85-1,47 (7H, m), 1,41-0,98 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 30 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(1-pirrolidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
38
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1-pirrolidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 13) (288 mg, 0,79 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (138 \mul, 0,79 mmol) en N,N-dimetilformamida (6 ml) se trató con hexafluorofosfato de O-(7-azabenzo-triazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (452 mg, 1,19 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió luego más N,N-diisopropiletilamina (552 \mul, 3,16 mmol) seguido por el hidrocloruro de hidroxilamina (165 mg, 2,38 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y tampón acuoso de pH 7. Se separó la capa orgánica, se lavó secuencialmente con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (98:2) para proporcionar el compuesto del título como una espuma (126 mg).
MS: 379 (MH^{+}), 396 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,75 (2H, m), 3,60 (3H, m), 2,66 (1H, dd, J = 13, 8 Hz), 2,57 (1H, dd, J = 13, 3 Hz), 1,98 (4H, m), 1,86-1,58 (7H, m), 1,40-1,07 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Ejemplo 31 2-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N,N,5-trimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida
39
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N,N,5-trimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida (Preparación 73) (105 mg, 0,23 mmol) en etanol (5 ml) se trató con paladio al 5% sobre sulfato de bario (45 mg) y formiato de amonio (73 mg, 1,15 mmol) y la mezcla se calentó a 45ºC durante 17 horas. Se añadieron cantidades adicionales de paladio sobre sulfato de bario (30 mg) y formiato de amonio (60 mg, mmol) y se continuó el calentamiento durante 2 horas. La solución se filtró a través de Arbocel® y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x3) y se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (98:2:0,2 a 90:10:1) para proporcionar el compuesto del título como una espuma (25 mg).
MS: 366 (MH^{+}), 388 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 61,77; H, 8,62; N, 11,22%; C_{19}H_{31}N_{3}O_{4}.0,1 H_{2}O requiere C, 62,14; H, 8,56; N, 11,44%
^{1}H-NMR (CD_{3}) \delta: 10,37 (1H, br s), 8,66 (1H, br s), 3,25 (1H, m), 3,14 (3H, br s), 2,91 (3H, br s), 2,43-2,21 (5H, m), 1,66-1,50 (7H, m), 1,24-1,00 (8H, m), 0,79 (2H, m).
Ejemplo 32 2-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxamida
40
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxamida (Preparación 74) (133 mg, 0,31 mmol) en etanol (6 ml) se trató con paladio al 5% sobre sulfato de bario (80 mg) y formiato de amonio (196 mg, 3,10 mmol) y la mezcla se calentó a 45ºC durante 2,5 horas. La solución se filtró a través de Arbocel® y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x3) y se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (98:2:0,2 a 90:10:1) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (56 mg).
MS: 338 (MH^{+}), 360 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 61,77; H, 8,62; N, 11,22%; C_{19}H_{31}N_{3}O_{4}.0,1 H_{2}O requiere C, 62,14; H, 8,56; N, 11,44%
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 7,12 (2H, br s), 3,52 (1H, m), 2,56-2,21 (2H, m), 1,67-1,49 (7H, m), 1,23-1,00 (8H, m), 0,79 (2H, m).
Otros compuestos preparados por el mismo método general, utilizando materiales de partida apropiados (véase la sección de Preparaciones más adelante), se enumeran a continuación en la Tabla 1.
TABLA 1
41
42
43
Ejemplo 41/Preparación 40
2-[[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil](metil)amino]acetato de metilo
44
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 39) (273 mg, 0,70 mmol) y N-metilmorfolina (85 \mul, 0,77 mmol) en diclorometano anhidro (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (100 \mul, 0,77 mmol) y la mezcla resultante se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió luego O-(trimetilsilil)hidroxilamina (250 \mul, 2,10 mmol) y se agitó la mezcla en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se inhibió luego con metanol (10 ml) y se agitó durante 10 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la capa orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (187 mg).
MS: 411 (MH^{+}), 433 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 4,50-4,21 (2H, m), 3,84-3,60 (4H, m), 3,32 (1,8H, s), 3,21 (1,2H, s), 2,81-2,56 (2H, m), 1,90-1,50 (7H, m), 1,40-1,03 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 42 (3R)-6-Ciclohexil-3-(3{[3-(dimetilamino)-1-azetidinil]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-N-hidroxihexanamida
45
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3{[3-(dimetilamino)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 76) (200 mg, 0,51 mmol) y N-metilmorfolina (112 \mul, 1,00 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (15 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (79 \mul, 0,69 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (85 \mul, 0,61 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como una espuma (180 mg).
MS: 408 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,60 (1H, m), 4,38 (1H, m), 4,22 (1H, m), 3,99 (1H, m), 3,60 (1H, m), 3,24 (1H, m), 2,64 (1H, dd), 2,57 (1H, dd), 2,20 (6H, s), 1,58-1,80 (6H, m), 1,08-1,36 (7H, m), 0,85 (2H, m).
Ejemplo 43 3-{[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]amino}-1-azetidina-carboxilato de terc-butilo
46
Una solución de ácido (3R)-3-[3-({[1-(terc-butoxi-carbonil)-3-azetidinil]amino}carbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoico (Preparación 79) (350 mg, 0,75 mmol) y N-metilmorfolina (163 \mul, 1,48 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (15 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (116 \mul, 0,89 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (272 \mul, 2,22 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 98,75:1,25:0,13 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como un vidrio.
MS: 497 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,23 (2H, t), 3,98 (2H, t), 3,59 (1H, m), 2,64 (1H, dd), 2,57 (1H, dd), 1,58-1,83 (7H, m), 1,41 (9H, s), 1,08-1,37 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Ejemplo 44 N-(3-Azetidinil)-5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
47
Una solución de 3-{[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]
amino}-1-azetidinacarboxilato de terc-butilo (Ejemplo 43) (160 mg, 0,33 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (7 ml) y la mezcla resultante se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x2). El residuo se trituró con dietil-éter, se filtró y se secó para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (123 mg).
MS: 380 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,83 (1H, m), 4,30 (4H, d), 3,58 (1H, m), 2,50-2,70 (2H, m), 1,77 (2H, m), 1,62 (5H, m), 1,08-1,39 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 45 1-[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidinilimidodicarbonato de di(terc-butilo)
48
Una solución de ácido (3R)-3-[3-({3-[bis(terc-butoxicarbonil)amino]-1-azetidinil}carbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoico (Preparación 80) (430 mg, 0,76 mmol) y N-metilmorfolina (167 \mul, 1,52 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (20 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (120 \mul, 0,93 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (280 \mul, 2,29 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se calentó luego con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (2 x 25 ml) y salmuera (25 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 98,75:1,25:0,13 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como una espuma pegajosa.
MS: 578 (M-H^{-})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,88 (1H, m), 4,62 (1H, m), 4,40 (1H, t), 4,24 (1H, m), 3,60 (1H, m), 2,65 (1H, dd), 2,56 (1H, dd), 1,58-1,80 (6H, m), 1,50 (18H, s), 1,08-1,35 (9H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 46 (3R)-3-{3-[(3-Amino-1-azetidinil)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexil-N-hidroxihexanamida
49
Una solución de 1-[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidinilimidodicarbonato de di(terc-butilo) (Ejemplo 45) (250 mg, 0,43 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (7 ml), y la mezcla resultante se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x2). El residuo se trituró con dietil-éter, se filtró y se secó para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco.
MS: 380 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,90 (1H, m), 4,53 (2H, m), 4,19 (2H, m), 3,58 (1H, m), 2,58-2,65 (2H, m), 1,76 (2H, m), 1,66 (5H, m), 1,06-1,38 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Ejemplo 47 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-[2-(dimetilamino)etil]-N-metil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
50
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[2-(dimetilamino)etil](metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 82) (450 mg, 0,72 mmol) y N-metilmorfolina (284 \mul, 2,53 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (112 \mul, 0,87 mmol) y se agitó en atmósfera de argón durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (355 \mul, 2,90 mmol) y se agitó la mezcla durante 3,5 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol (2,5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 20 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (20 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 97:3:0,3 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiada gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como una goma (123 mg).
MS: 410 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 57,02; H, 8,50; N, 16,43%; C_{20}H_{35}N_{5}O_{4}.0,25 H_{2}O.0,1 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 58,35; H, 8,72; N, 16,14%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,36-3,76 (3H, br d), 3,11 (3H, s), 2,45-2,74 (3H, m), 2,30 (1H, s), 2,25-2,35 (7H, m), 1,60-1,85 (7H, m), 1,05-1,40 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 48 5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-[3-(dimetilamino)propil]-N-metil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida
51
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[3-(dimetilamino(propil](metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 84) (566 mg, 0,88 mmol) y N-metilmorfolina (390 \mul, 3,52 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (340 \mul, 2,64 mmol) y se agitó en atmósfera de argón durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (540 \mul, 4,40 mmol) y se agitó la mezcla durante 4,5 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol (2,5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 20 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (20 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 97:3:0,3 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiada gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título (150 mg).
MS: 424 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 58,30; H, 8,64; N, 15,33%; C_{21}H_{37}N_{5}O_{4}.0,2 H_{2}O.0,08 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 57,14; H, 8,50; N, 16,57%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,68 (2H, m), 3,30 (2H, m), 3,18 (3H, s), 2,28-2,40 (3H, m), 2,23 (6H, s), 1,58-1,88 (9H, m), 1,08-1,40 (8H, m), 0,88 (2H, m).
Ejemplo 49 [(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)metoxi]acetato de etilo
52
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 87) (330 mg, 0,86 mmol) y N-metilmorfolina (160 \mul, 1,46 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (14 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (120 \mul, 0,93 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2,5 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (350 \mul, 2,86 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se trató luego la mezcla con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 98:2 (diclorometano:metanol) que cambiada gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (272 mg).
MS: 420 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,70 (2H, s), 4,20 (4H, m), 3,54 (1H, m), 2,61 (1H, dd), 2,50 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,30 (11H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 50 Ácido [(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)metoxi]acético
53
Una solución de [(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxi-amino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-metoxi]-acetato de etilo (Ejemplo 49) (158 mg, 0,40 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (2 ml) se trató con hidróxido de litio monohidratado (2 mg, 0,48 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se lavó con dietil-éter (x2). La capa acuosa se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico (2M) y se lavó con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (141 mg).
MS: 370 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,70 (2H, s), 4,20 (2H, s), 3,55 (1H, m), 2,60 (1H, dd), 2,50 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,30 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Ejemplo 51 2-[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)metoxi]propanoato de etilo
54
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-1-metil-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-hexanoico (Preparación 89) (370 mg, 0,93 mmol) y N-metilmorfolina (170 \mul, 1,54 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (15 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (130 \mul, 1,00 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2,5 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (380 \mul, 3,10 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se trató luego la mezcla con metanol (4 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiada gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (330 mg).
MS: 434 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 57,55; H, 8,14; N, 9,81%; C_{20}H_{33}N_{3}O_{6}.0,1 H_{2}0.0,05 DCM requiere C, 57,68; H, 8,04; N, 10,6%
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,75 (1H, d), 4,59 (1H, d), 4,20 (3H, m), 3,55 (1H, m), 6,61 (1H, dd), 2,50 (1H, dd), 1,69-1,80 (7H, m), 1,38 (3H, d), 1,10-1,30 (11H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 52 Ácido 2-[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)metoxi]propanoico
55
Una solución de 2-[(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)metoxi]propanoato de etilo (Ejemplo 51) (184 mg, 0,45 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (2 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con hidróxido de litio monohidratado (2 mg, 0,48 mmol) y se agitó a 0ºC durante 2 horas. Se eliminó parcialmente el disolvente a presión reducida y se diluyó con agua, después de lo cual se lavó con dietil-éter (x2). La capa acuosa se acidificó a pH 1 con ácido clorhídrico (2M) y se lavó con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (160 mg).
MS: 384 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,77 (1H, d), 4,59 (1H, d), 4,17 (3H, q), 3,45 (1H, m), 2,61 (1H, dd), 2,50 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,39 (3H, d), 1,07-1,30 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Ejemplo 53 (3R)-3-{3-[(2-Amino-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexil-N-hidroxihexanamida
56
Una solución de ácido (3R)-3-{3-[(2-amino-2-oxo-etoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoico (Preparación 91) (178 mg, 0,50 mmol) y N-metilmorfolina (100 \mul, 0,91 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (8 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (70 \mul, 0,54 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2,5 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)-hidroxil-amina (200 \mul, 1,63 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 98:2 (diclorometano:metanol) que cambiada gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol) y a continuación metanol puro para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (60 mg).
MS: 391 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 53,67; H, 7,55; N, 14,19%; C_{17}H_{28}N_{4}O_{5}.0,2 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 53,60; H, 7,43; N, 14,54%
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,70 (2H, s), 4,08 (2H, s), 3,55 (1H, m), 2,45-2,70 (2H, m), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,30 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 54 3-(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)propanoato de etilo
57
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(3-etoxi-3-oxopropil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 94) (110 mg, 0,30 mmol) y N-metilmorfolina (60 \mul, 0,54 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (6 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (42 \mul, 0,32 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2,5 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (120 \mul, 1,00 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol y se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (94 mg).
MS: 404 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,15 (2H, q), 3,52 (1H, m), 3,03 (2H, t), 2,78 (4H, m), 2,58 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,35 (11H, m), 0,82 (2H, m).
Ejemplo 55 Ácido 3-(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)propanoico
58
Una solución de 3-(5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)propanoato de etilo (Ejemplo 54) (58 mg, 0,15 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) y agua (1 ml) se trató con hidróxido de litio monohidratado (13 mg, 0,31 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se lavó con dietil-éter (x2). La capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico (2M) (2 ml) y se lavó con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0:0 (diclorometano:metanol:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como una goma anaranjada (36 mg).
MS: 376 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 55,98; H, 7,61; N, 11,12%; C_{17}H_{27}N_{3}O_{5}.0,2 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 55,77; H, 7,46; N, 11,34%
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,50 (1H, m), 2,98 (2H, t), 2,76 (2H, t), 2,59 (1H, dd), 2,48 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,07-1,35 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Ejemplo 56 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-{3-[(propilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
59
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(propilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico (Preparación 97) (298 mg, 0,77 mmol) y 2,6-lutidina (135 \mul, 1,16 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (100 \mul, 0,77 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (310 \mul, 2,31 mmol) y se agitó la mezcla durante 4 horas, después de lo cual se dejó calentar a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con ácido clorhídrico (1M) y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 95:5 (dicloro-metano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (140 mg).
MS: 424 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 53,65; H, 7,80; N, 10,26%; C_{18}H_{31}N_{3}O_{5}S requiere C, 53,84; H, 7,78; N, 10,47%
^{1}H-NMR (DMSO) \delta: 10,39 (1H, br s), 8,65 (1H, br s), 4,70 (2H, s), 3,45 (1H, m), 3,20 (2H, obs), 2,50 (2H, obs), 1,76 (1H, m), 1,50-1,70 (7H, m), 1,08-1,25 (8H, m), 0,98 (3H, t), 0,80 (2H, m).
Ejemplo 57 2-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-[2-(dimetilamino)etil]-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxami-da
60
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N-[2-(dimetilamino)etil]-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxamida (Preparación 98) (193 mg, 0,39 mmol) en etanol (10 ml) se trató con formiato de amonio (244 mg, 3,90 mmol) y paladio al 5% sobre sulfato de bario (100 mg) y se calentó a 43ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 98:2:0,2 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (80 mg).
MS: 409 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 60,93; H, 9,06; N, 13,54%; C_{21}H_{36}N_{4}O_{4}.0,2 H_{2}O requiere C, 61,20; H, 8,90; N, 13,59%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 8,61 (1H, br s), 7,59 (1H, br s), 3,28 (2H, q), 3,18 (1H, obs), 2,45 (2H, obs), 2,35 (2H, t), 2,17 (6H, s), 1,50-1,65 (7H, m), 1,10-1,20 (7H, m), 0,80 (2H, m).
Ejemplo 58 Ácido {[(2-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-5-metil-1,3-oxazol-4-il)carbonil]amino}acético
61
Una solución de ácido ({[2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)-amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-il]carbonil}amino)acético (Preparación 100) (60 mg, 0,12 mmol) en etanol (3 ml) se trató con formiato de amonio (78 mg, 1,23 mmol) e hidróxido de paladio (20 mg) y se calentó a 43ºC, en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. La mezcla de reacción se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 99:1:0,1 (dicloro-metano:metanol:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (17 mg).
MS: 394 (M-H)^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,68 (1H, br s), 4,95-4,10 (2H, m), 3,34 (1H, m), 2,40-2,60 (5H, m), 1,50-1,80 (7H, m), 1,05-1,35 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Ejemplo 59 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(1H)-imidazol-2-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
62
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1H)-imidazol-2-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 103) (200 mg, 0,43 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (5 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (77 mg, 0,48 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió O-(trimetilsilil)-hidroxilamina (160 \mul, 1,30 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas. La mezcla se trató luego con metanol (4 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con 90:10:1 (dicloro-metano:metanol:amoniaco) para proporcionar un aceite incoloro que comenzó a cristalizar una vez que se añadieron una pequeña cantidad de metanol y diclorometano. El sólido se trituró con diclorometano y se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido (49 mg).
MS: 362 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 59,24; H, 7,42; N, 19,13%; C_{18}H_{27}N_{5}O_{3}.0,2H_{2}O requiere C, 59,22; H, 7,57; N, 19,18%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 10,38 (1H, s), 8,65 (1H, s), 7,70 (1H, s), 7,17 (1H, s), 6,88 (1H, s), 5,39 (2H, s), 3,42 (1H, m), 2,45 (2H, m), 1,5-1,70 (7H, m), 1,00-1,15 (8H, m), 0,78 (2H, m).
Ejemplo 60 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(4-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
63
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(4-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 106) (380 mg, 0,96 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (156 ml, 0,96 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (388 \mul, 2,89 mmol) y se agitó la mezcla durante 3,5 horas. La mezcla se trató luego con metanol (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con 95:5 (diclorometano:metanol) para proporcionar un sólido blanco. El análisis sugería que quedaba 10% de imidazol. El sólido se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (128 mg).
MS 373 (MH^{+}).
Análisis: Encontrado, C, 64,13; H, 7,59; N, 14,86%; C_{20}H_{28}N_{4}O_{3} requiere C, 64,49; H, 7,58; N, 15,04%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 10,38 (1H, s), 8,65 (1H, s), 8,49 (2H, d), 7,25 (2H, d), 4,10 (2H, s), 3,39 (1H, m), 2,20 (2H, m), 1,50-1,65 (7H, m), 1,00-1,20 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Ejemplo 61 (3R)-6-Ciclohexil-N-hidroxi-3-[3-(3-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanamida
64
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(3-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 109) (410 mg, 1,04 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (169 mg, 1,04 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (418 \mul, 3,12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se trató luego con metanol (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua (3 x 30 ml) y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de disolvente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 95:5 (diclorometano:metanol) para proporcionar un sólido blanco céreo. El sólido se recristalizó en acetato de etilo para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (128 mg).
MS: 373 (MH^{+})
Análisis: Encontrado: C, 64,53; H, 7,63; N, 14,53%; C_{20}H_{28}N_{4}O_{3}.0,15 EtOAc requiere C, 64,15; H, 7,63; N, 14,53%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 10,36 (1, s), 8,62 (1H, s), 8,54 (1H, s), 8,43 (1H, d), 7,65 (1H, d), 7,30 (1H, m), 4,10 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,70 (1H, m), 2,40 (1H, m), 1,50-1,70 (7H, m), 1,00-1,20 (8H, m), 0,76 (2H, m).
Ejemplo 62 2-{(1R)-4-Ciclobutil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N,N-dimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida
65
Una solución de ácido (3R)-6-ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}hexanoico (Preparación 121) (155 mg, 0,50 mmol) y N-metilmorfolina (90 \mul, 0,82 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (8 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (90 \mul, 0,70 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se añadió O-(trimetilsilil)hidroxilamina (200 \mul, 1,63 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se trató luego con metanol (2 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 10 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 98:2 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol). El sólido se trituró con dietil-éter, se filtró y se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (64 mg).
MS: 346 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 59,03; H, 7,81; N, 12,92%; C_{16}H_{25}N_{3}O_{4}.0,1 H_{2}O requiere C, 59,10; H, 7,81; N, 12,92%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 10,45 (1H, s), 8,78 (1H, s), 8,38 (1H, s), 3,25 (1H, t), 3,28 (3H, s), 2,90 (3H, s), 2,40 (1H, dd), 2,28 (1H, dd), 2,12 (1H, m), 1,91 (2H, m), 1,70 (2H, m), 1,57 (2H, m), 1,45 (2H, m), 1,27 (2H, m), 1,02 (2H, m).
Preparación 1
Ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico
Ruta A
Ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico
66
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenilpentanoico (Syn. Lett.; 1998; 637-639) (10,00 g, 34,2 mmol) en ácido acético (120 ml) se trató con catalizador de rodio al 5% sobre alúmina, se presurizó a 60 psi (4,22 kg/cm^{2}) con hidrógeno en un recipiente herméticamente cerrado y se agitó a la temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla se filtró a través de un pequeño bloque de Arbocel® y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (7,53 g).
MS: 299 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,80 (1H, m), 2,61 (1H, m), 2,38 (1H, m), 1,75-1,56 (7H, m), 1,55-1,04 (17H, m), 0,84 (2H, m).
Ruta B
(4S)-4-Bencil-3-(5-ciclohexilpentanoil)-1,3-oxazolidin-2-ona
67
Una solución de ácido 5-ciclohexilpentanoico (63,50 g, 345 mmol) en N,N-dimetilformamida (0,5 ml) y diclorometano (350 ml) se enfrió a 5ºC y se trató gota a gota con cloruro de oxalilo (31,6 ml, 362 mmol) durante 30 minutos. La mezcla se agitó a 0ºC durante 3 horas y después de ello se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar cloruro de 5-ciclohexilpentanoílo como un sólido amarillo pálido (70,0 g).
Una solución de n-butil-litio (100 ml, 250 mmol, 2,5M en hexanos) se añadió por medio de una cánula a una solución de (4S)-4-bencil-1,3-oxazolidin-2-ona (44,30 g, 250 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (400 ml) a -78ºC. La solución amarilla se agitó luego durante 45 minutos. Se añadió después una solución de cloruro de 5-ciclohexil-pentanoílo (55,5 g, 275 mmol) en tetrahidrofurano (100 ml) durante 1 hora. La mezcla se agitó a -78ºC durante 30 minutos, y se calentó luego a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se inhibió con una solución acuosa de cloruro de amonio (20% p/v, 400 ml) y se extrajo con acetato de etilo. Se separaron las capas y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se recristalizó en hexano (500 ml) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (81,0 g).
MS: 344 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,41-7,13 (5H, m), 4,68 (1H, m), 4,27-4,02 (2H, m), 3,31 (1H, dd, J = 16, 4 Hz), 3,06-2,70 (3H, m), 1,81-1,53 (7H, m), 1,49-1,04 (8H, m), 0,88 (2H, m)
3-{[(4S)-4-Bencil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]carbonil}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
68
Una solución de (4S)-4-bencil-3-(5-ciclohexil-pentanoil)-1,3-oxazolidin-2-ona (70,0 g, 204 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (650 ml) se enfrió a -70ºC y se trató gota a gota con hexametildisilazida de sodio (1M en tetrahidrofurano, 224 ml, 224 mmol) durante 45 minutos. La mezcla se agitó durante 45 minutos más antes de ser tratada con bromoacetato de t-butilo (31,6 ml, 214 mmol). Esta mezcla se agitó a -70ºC durante 30 minutos, se calentó luego a -30ºC y se inhibió con una solución acuosa de cloruro de amonio (20% p/v, 400 ml) y se calentó a la temperatura ambiente. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se recristalizó en hexano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (71,4 g).
MS: 458 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,41-7,13 (5H, m), 4,66 (1H, m), 4,23-4,03 (3H, m), 3,35 (1H, dd, J = 16, 4 Hz), 2,95-2,68 (3H, m), 2,47 (1H, m), 1,80-1,07 (24H, m), 0,85 (2H, m)
Ácido 2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico
69
Una solución de 3-{[(4S)-4-bencil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]carbonil}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (64,0 g, 139,9 mmol) en tetrahidrofurano:agua (3:1, 800 ml) se enfrió a -5ºC y se trató luego sucesivamente con peróxido de hidrógeno (30% p/v agua, 87 ml, 769 mmol) y luego con hidróxido de litio hidratado (10,0 g, 238 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora, y se inhibió luego por adición gota a gota de una solución acuosa de tiosulfato de sodio (500 ml), manteniendo la temperatura por debajo de 20ºC. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (desechado) y la fase acuosa se acidificó a pH 2 con ácido cítrico sólido y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de hexano:acetato de etilo (2:1) que cambiaba gradualmente hasta hexano:acetato de etilo (1:1) para proporcionar el compuesto del título (40,7 g).
Ruta C
Éster 1-terc-butílico del ácido 3-(dietoxifosforil)-succínico
70
Se añadió gota a gota fosfonoacetato de trietilo (102 g, 0,45 mol) durante 11 min a una solución agitada de terc-butóxido de potasio (60 g, 0,54 mol) en THF (500 ml), a 0ºC, bajo nitrógeno. La mezcla se agitó durante 1 hora a 0ºC, se añadió luego diclorometano (300 ml) y la mezcla de reacción se calentó a 25-30ºC. La mezcla se agitó a 25-30ºC durante 1 hora y se añadió luego gota a gota durante 33 minutos a una solución de bromoacetato de terc-butilo (96 g, 0,49 mol) en THF (50 ml), a 0ºC, bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a 0-5ºC durante 2 horas y se añadió luego una solución de ácido cítrico (174 g, 0,91 mol) en agua desmineralizada (250 ml). La mezcla se concentró a vacío para eliminar la mayor parte del THF y se añadió luego tolueno (750 ml). Se separó la fase orgánica, se lavó con salmuera (2 x 150 ml) y se concentró a vacío para dejar un aceite incoloro. El aceite se recogió en etanol y se añadió gota a gota una solución de hidróxido de potasio (36 g, 0,64 mol) en agua desmineralizada (150 ml) durante 15 min. La mezcla se agitó a 0ºC durante 4 horas y se añadieron luego una solución de ácido cítrico (158 g, 0,82 mol) en agua desmineralizada (600 ml), y tolueno (600 ml). Se separó la fase orgánica y la fase acuosa se re-extrajo con tolueno (600 ml). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con agua desmineralizada (2 x 150 ml) y se concentraron a vacío para dejar un sólido blanco. Se añadió tolueno (150 ml) y la suspensión espesa se concentró de nuevo a vacío para dejar un sólido blanco. El producto se purificó por cristalización en éter terc-butilmetílico (300 ml) y ciclohexano (600 ml) para dar el compuesto de título como un sólido (79 g).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,20-4,10 (4H, m), 3,49-3,36 (1H, m), 3,00-2,85 (1H, m), 2,72-2,60 (1H, m), 1,20 (9H, s), 1,37-1,27 (6H, m)
Preparación alternativa
Se añadió fosfonoacetato de trietilo (12,0 kg, 53,5 mol) durante 30 minutos a una solución agitada de terc-butóxido de potasio (7,20 kg, 64,2 mol) en THF (118 litros) entre 0 y 5ºC, bajo nitrógeno. La mezcla se calentó a 25-30ºC, mientras se agitaba durante 1 hora y se añadió luego durante 45 minutos a una solución de bromoacetato de terc-butilo (11,5 kg, 59,0 mol) en THF (28 litros), entre 0 y 5ºC, bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a 0-5ºC durante 1 hora y se añadieron luego agua desmineralizada (6,1 litros) y etanol (30 litros). Se añadió después una solución de hidróxido de potasio (4,2 kg, 75,0 mol) en agua desmineralizada (84 litros) durante 2 horas, entre -5 y 0ºC. La mezcla se agitó a -10ºC durante 16 horas y se añadió luego una solución de ácido cítrico (16,5 kg, 85,8 mol) en agua desmineralizada (32 litros). La mezcla se concentró a vacío hasta un volumen de 180 litros y se añadió luego acetato de etilo (90 litros). Se separó la fase orgánica y la fase acuosa se re-extrajo con acetato de etilo (30 litros). Las fases orgánicas reunidas se lavaron con agua (30 litros), se liberaron luego de materias volátiles y se reemplazaron con ciclohexano por destilación a presión atmosférica, a un volumen constante de 72 litros. Se añadió éter terc-butilmetílico (18 litros) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 12 horas, y se filtró luego. El residuo se lavó con una mezcla de ciclohexano (16 litros) y éter terc-butilmetílico (3,6 litros), y se secó luego a vacío durante 16 horas para dar el compuesto del título como un sólido incoloro (10,0 kg, 60%).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,20-4,10 (4H, m), 3,49-3,36 (1H, m), 3,00-2,85 (1H, m), 2,72-2,60 (1H, m), 1,20 (9H, s), 1,37-1,27 (6H, m)
Ácido (E)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenil-2-pentenoico
71
Una solución de éster 1-terc-butílico del ácido 3-(dietoxifosforil)succínico (100 g, 0,32 mol) en THF (300 ml) se añadió gota a gota durante 15 min a una solución agitada de terc-butóxido de potasio (110 g, 0,98 mol) en THF (300 ml), entre -10 y -5ºC, bajo nitrógeno. La mezcla se agitó a -10ºC durante 15 min y se añadió luego una solución de aldehído hidrocinámico (46,8 g, 0,35 mmol) en THF (100 ml) gota a gota durante 15 min, entre -13 y -8ºC. La mezcla se agitó a -10ºC durante 30 min y se añadieron luego una solución de ácido cítrico (111 g, 0,58 mol) en agua desmineralizada (500 ml), y acetato de etilo (500 ml). Se ajustó el pH a pH 4 con solución acuosa de hidróxido de sodio (50%) y se separaron las fases. La fracción acuosa se lavó con acetato de etilo (500 ml) y las fracciones orgánicas reunidas se lavaron con solución saturada de bicarbonato de sodio (500 ml), solución de ácido cítrico (10%, 500 ml) y agua desmineralizada (500 ml), y se concentraron luego a vacío. El sólido resultante se suspendió en ciclohexano (470 ml) durante 1 hora y la mezcla se filtró luego. El residuo se lavó con ciclohexano (2 x 50 ml) y se secó a vacío para dejar el compuesto del título como un sólido incoloro (76 g, 81%).
MS: 289 [(M-H)]^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,33-7,16 (5H, m), 7,05 (1H, br t), 3,20 (2H, s), 2,89 (2H, br t), 2,50 (2H, br dd), 1,41 (9H, s)
Ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenilpentanoico
72
Una solución agitada de ácido (E)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenil-2-pentenoico (100 g, 0,34 mol), ciclohexilamina (39 ml, 0,34 mol) y cloruro de [(S)-2,2'-bis(difenilfosfino-1,1'-binaftil]-cloro(p-cimeno)rutenio (0,64 g, 0,69 mmol) en metanol (1000 ml) se calentó a 60ºC, bajo hidrógeno (60 psi (4,22 kg/cm^{2})), durante 42 horas y se dejó luego enfriar a la temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celita y se concentró luego a vacío para dar un sólido amarillo que se purificó por recristalización en acetona (850 ml). El sólido resultante se repartió entre acetato de etilo (1200 ml) y solución de ácido cítrico (10%, 1200 ml) y la fase orgánica se separó, se lavó con agua desmineralizada (1200 ml) y se concentró a vacío para dejar el compuesto del título como un aceite (80 g).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7-30-7,17 (5H, m), 2,85-2,78 (1H, m), 2,66-2,58 (3H, m), 2,37 (1H, br dd), 1,75-1,51 (4H, m), 1,40 (9H, s)
Preparación de la sal de ciclohexilamina
73
Una solución agitada de ciclohexilamina (266 ml, 2,32 mol), ácido (E)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenil-2-pentenoico (688 g, 2,37 mol) y cloruro de [(S)-2,2'-bis(difenilfosfino-1,1'-binaftil]cloro(p-cimeno)rutenio (4,4 g, 4,7 mmol) en metanol (6,9 litros) se calentó a 60ºC, bajo hidrógeno (60 psi (4,22 kg/cm^{2})), durante 47 horas y se dejó enfriar luego a la temperatura ambiente (exceso enantiomérico: 88%). La mezcla se filtró a través de Celita, se eliminó luego el disolvente de materias volátiles por destilación y se reemplazó con acetona por destilación a la presión atmosférica, hasta un volumen constante de 4,2 litros. La suspensión resultante se enfrió a la temperatura ambiente mientras se agitaba durante 4 horas, y se filtró luego. El residuo se lavó con acetona (2 x 1 litro) y se secó luego a vacío a 45ºC durante 16 horas para dejar el compuesto del título como un sólido incoloro (590 g, 64%, exceso enantiomérico: 98,9%).
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 7,23-7,09 (5H, m), 3,05-2,98 (1H, m), 2,64-2,56 (3H, m), 2,53 (1H, dd, J = 15,2, 7, 2 Hz), 2,23 (1H, dd, J = 15,2, 7, 2 Hz), 2,00-1,97 (2H, m), 1,85-1,81 (2H, m), 1,72-1,20 (10H, m), 1,40 (9H, s)
Sal de ciclohexilamina del ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico
74
Se añadieron sal de ciclohexilamina del ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-pentanoico (691 g, 1,77 mol) y acetato de etilo (7,0 litros) a una solución acuosa de ácido cítrico (10%, 6,3 litros) y la fase orgánica se separó, se lavó con agua (7,0 litros) y se concentró a vacío para dar un aceite amarillo. Se agitó una solución del aceite y rodio al 5% sobre carbono (51,6 g) en metanol (7,0 litros) a la temperatura ambiente, bajo nitrógeno (150 psi (10,55 kg/cm^{2})) durante 48 horas y se filtró luego a través de Celita. Se añadió al filtrado ciclohexilamina (202 ml, 1,77 mol) y la solución metanólica se liberó de materias volátiles por destilación y se reemplazó con metiletil-cetona por destilación a la presión atmosférica, hasta un volumen de 5,5 litros. La mezcla se dejó enfriar a la temperatura ambiente mientras se agitaba durante 48 horas, y se filtró luego. El residuo se lavó con metiletil-cetona (2 x 500 ml) y se secó luego a vacío a 45ºC durante 4 horas para dejar el compuesto del título como un sólido incoloro (495 g, 71%).
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,06-2,99 (1H, m), 2,63-2,56 (1H, m), 2,53 (1H, dd, J = 15,2, 7, 2 Hz), 2,23 (1H, dd, J = 15,2, 7, 2 Hz), 2,02-1,97 (2H, m), 1,77-1,15 (21H, m), 1,43 (9H, s), 0,93-0,82 (2H, m).
Ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico
75
Una solución de ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-fenilpentanoico (2,2 g, 7,5 mmol) y Rh al 5%/C (0,22 g) en metanol (220 ml) se agitó a la temperatura ambiente, bajo hidrógeno (150 psi (10,55 kg/cm^{2})) durante 24 horas, y se filtró luego a través de Celita. El filtrado se concentró a vacío para dejar el compuesto del título como un aceite (2,0 g).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 2,82-2,76 (1H, m), 2,60 (1H, br dd), 2,37 (1H, br dd), 1,70-1,60 (6H, m), 1,51-1,30 (3H, m), 1,42 (9H, s), 1,23-1,11 (6H, m), 0,96-0,80 (2H, m).
Preparación 2
(3R)-3-[({[(Z)-1-Amino-2-etoxi-2-oxoetilideno]amino}oxi)-carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
76
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (7,53 g, 25,2 mmol) en 1,4-dioxano (175 ml) se trató con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (3,75 g, 27,8 mmol) y la mezcla se enfrió a 0ºC. Se añadió luego N,N'-diciclo-hexilcarbodiimida (5,47 g, 26,5 mmol) y se agitó la mezcla durante 3 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se filtró luego y se lavó con 1,4-dioxano (2 x 50 ml). El filtrado se trató luego con carbonato de sodio (4,01 g, 37,8 mmol) y 2-amino-2-(hidroxiimino)acetato de etilo (J. Org. Chem. 23; 1958; 1794) (3,33 g, 25,2 mmol). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de acetato de etilo:pentano (30:70) que cambiaba gradualmente hasta acetato de etilo:pentano (50:50) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (6,50 g).
MS: 413 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,71 (2H, br s), 4,39 (2H, q), 2,92 (1H, m), 2,67 (1H, dd), 2,44 (1H, dd), 1,75-1,32 (22H, m), 1,26-1,04 (5H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 3
5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo
77
Una solución de (3R)-3-[({[(Z)-1-amino-2-etoxi-2-oxoetilideno]amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de
terc-butilo (Preparación 2) (21,0 g, 50,82 mmol) en xileno (400 ml) se calentó a 130ºC durante 17 horas, y se dejó enfriar luego a la temperatura ambiente. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de acetato de etilo:pentano (5:95) que cambiaba gradualmente hasta acetato de etilo:pentano (20:80) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (20,0 g).
MS: 395 (MH^{+}), 412 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,51 (2H, m), 3,54 (1H, m), 2,86 (1H, dd), 2,65 (1H, dd), 1,86-1,57 (7H, m), 1,50-1,33 (12H, m), 1,30-1,03 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 4
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
78
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (820 mg, 2,08 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (5 ml). La mezcla se agitó durante 2,5 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se disolvió luego en acetato de etilo, se lavó secuencialmente con una solución acuosa de dihidrogeno-citrato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite (740 mg).
MS: 339 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,49 (2H, q, J = 7 Hz), 3,57 (1H, m), 3,05 (1H, dd, J = 17, 8 Hz), 2,81 (1H, dd, J = 17, 4 Hz), 1,92-1,55 (7H, m), 1,45 (3H, t, J = 7 Hz), 1,35-1,02 (8H, m), 0,84 (2H, m)
Preparación 5
(3R)-3-[3-(Aminocarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-fenilhexanoato de terc-butilo
79
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (400 mg, 1,01 mmol) en etanol saturado con amoniaco gaseoso (20 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de hexano: acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta hexano:acetato de etilo (60:40) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (260 mg).
PF: 77-79ºC
MS: 366 (MH^{+}), 383 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 62,42; H, 8,59; N, 11,48%; C_{19}H_{31}N_{3}O_{4} requiere C, 62,44; H, 8,55; N, 11,50%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,80 (1H, br s), 5,90 (1H, br s), 3,53 (1H, m), 2,87 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,66 (1H, dd, J = 17, 5 Hz), 1,90-1,50 (7H, m), 1,46-1,02 (17H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación alternativa de (3R)-3-[3-(aminocarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
80
Se calentó (3R)-3-[({[(Z)-1,2-diamino-2-oxoetiliden]-amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (Preparación 101) (4,10 g, 10,7 mmol) en xilenos mixtos (25 ml) a reflujo durante 48 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema isocrático de n-hexano:acetato de etilo (75:25) para proporcionar un aceite amarillo. El aceite se cristalizó en ciclohexano para proporcionar el compuesto del título como un sólido incoloro (0,60 g).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,80 (1H, br s), 5,90 (1H, br s), 3,53 (1H, m), 2,87 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,66 (1H, dd, J = 17, 5 Hz), 1,90-1,50 (7H, m), 1,46-1,02 (17H, m), 0,93-0,82 (2H, m).
Preparación 6
Ácido (3R)-3-[2-(aminocarbonil)-1,2,4-oxoadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoico
81
Una solución de (3R)-3-[3-(aminocarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-fenilhexanoato de terc-butilo (Preparación 5) (250 mg, 0,68 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (5 ml). La mezcla se agitó durante 2 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2) y luego con hexano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (204 mg).
PF: 172-174ºC
Análisis: Encontrado, C, 58,03; H, 7,48; N, 13,38%; C_{15}H_{23}N_{3}O_{4} requiere C, 58,24; H, 7,49; N, 13,19%
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,55 (1H, m), 2,93 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,80 (1H, dd, J = 17, 4 Hz), 1,84-1,59 (7H, m), 1,40-1,08 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Preparación 7
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(metilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
82
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (4,70 g, 11,9 mmol) en etanol (80 ml) se trató con metilamina (38% p/v en etanol (12,0 ml, 96,0 mml)) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (9:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (8:2) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido que cristalizó al dejarlo en reposo (4,23 g).
MS: 380 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,97 (1H, br m), 3,48 (1H, m), 3,04 (3H, d), 2,84 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,66 (1H, dd, J = 17, 4 Hz), 1,84-1,55 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,33-1,02 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 8
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(metilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
83
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(metilamino)-carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
(Preparación 7, 380 mg, 1,00 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 3,5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de citrato de sodio y luego con salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se cristalizó en hexano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (310 mg).
PF: 83-86ºC
MS: 341 (MNH_{4}^{+})
Análisis: Encontrado, C, 59,24; H, 7,75; N, 12,77%; C_{16}H_{25}N_{3}O_{4} requiere C, 59,43; H, 7,79; N, 12,79%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,94 (1H, br m), 3,55 (1H, m), 3,01 (4H, m), 2,79 (1H, dd, J = 14,3), 1,86-1,53 (7H, m), 1,35-1,06 (8H, m), 0,83 (2H, m).
\newpage
Preparación 9
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(propilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
84
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (107 mg, 0,31 mmol) en tolueno (2 ml) se trató con n-propilamina (250 \mul, 3,10 mmol) y la mezcla se calentó a 125ºC en un recipiente herméticamente cerrado durante 2 horas. La mezcla se enfrió a la temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se lavó secuencialmente con solución acuosa de ácido cítrico (5% p/v), agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (80:20) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (60:40) y luego hasta diclorometano:metanol (90:10) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (76 mg).
MS: 352 (MH^{+})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 8,90 (1H, m), 3,64-3,00 (3H, m), 2,80 (2H, m), 1,81-1,43 (9H, m), 1,39-1,00 (8H, m), 0,83 (5H, m).
Preparación 10
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(dimetilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
85
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (1,00 g, 2,53 mmol) en etanol (8 ml) se enfrió a 0ºC y se trató gota a gota con dimetilamina (5,6 M en etanol, 4,50 ml, 25,3 mmol). La solución se agitó durante 17 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (4:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (0,93 g).
MS: 394 (MH^{+}), 411 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,50 (1H, m), 3,12 (6H, d), 2,85 (1H, dd, J = 16, 7 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,84-1,57 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,34-1,05 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 11
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(dimetilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
86
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(dimetilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 10) (2,35 g, 5,97 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (2 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (98:2) para proporcionar el compuesto del título (1,27 g).
MS: 360 (MNa^{+}), 355 (MNH_{4}^{+})
Análisis: Encontrado, C, 60,63; H, 8,16; N, 12,30%; C_{17}H_{27}N_{3}O_{4} requiere C, 60,51; H, 8,07; N, 12,45%
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 3,45 (1H, m), 2,99 (3H, s), 3,91 (3H, s), 2,76 (2H, m), 1,73-1,52 (7H, m), 1,30-1,02 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Preparación 12
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(1-pirrolidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
87
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató gota a gota con pirrolidina (0,63 ml, 7,60 mmol) y la solución resultante se calentó a 60ºC durante 9 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (4:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (360 mg).
MS: 420 (MH^{+}), 437 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,71 (4H, m), 3,50 (1H, m), 2,86 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,64 (1H, dd, J = 16, 3 Hz), 1,96 (4H, m), 1,74-1,55 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,33-1,04 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 13
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1-pirrolidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
88
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1-pirrol-idinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 12) (356 mg, 0,85 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (288 mg).
MS: 364 (MH^{+}), 381 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,83-3,45 (5H, m), 2,94 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,81 (1H, dd, J = 16, 4 Hz), 1,98 (4H, m), 1,87-1,54 (7H, m), 1,44-1,06 (8H, m), 0,88 (2H, m).
\newpage
Preparación 14
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(1-piperidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
89
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató gota a gota con piperidina (0,75 ml, 7,60 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 9 horas. Se enfrió la mezcla y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (80:20) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (334 mg).
MS: 434 (MH^{+}), 451 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,72 (2H, m), 3,48 (3H, m), 2,84 (1H, dd, J = 14, 8 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 14, 4 Hz), 1,86-1,53 (13H, m), 1,39 (9H, s), 1,33-1,05 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 15
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1-piperidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
90
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1-piperidinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 14) (334 mg, 0,77 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título como un sólido beige (266 mg).
MS: 378 (MH^{+}), 395 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 3,73 (2H, m), 3,55 (1H, m), 3,43 (2H, m), 2,97-2,75 (2H, m), 1,86-1,57 (13H, m), 1,40-1,07 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Preparación 16a
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
Preparación 16b
(3R)-3-{3-[(Bencilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
91
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató con hidrocloruro de isoindolina (0,59 g, 3,80 mmol) (que contenía también bencilamina) y trietilamina (0,74 ml, 5,32 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (90:10). El residuo se purificó ulteriormente por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (99:1) para proporcionar el compuesto del título 16a (91 mg).
MS: 468 (MH^{+}), 485 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,33 (4H, m), 5,19 (2H, s), 5,04 (2H, s), 3,56 (1H, m), 2,92 (1H, dd, J = 15, 7 Hz), 2,71 (1H, dd, J = 15, 3 Hz), 1,90-1,58 (7H, m), 1,41 (9H, s), 1,38-1,05 (8H, m), 0,83 (2H, m).
La elución ulterior con diclorometano:acetato de etilo (95:5), dio luego el compuesto 16b (173 mg).
MS: 473 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,41-7,17 (5H, m), 4,66 (2H, d, J = 5 Hz), 3,50 (1H, m), 2,84 (1H, dd, J = 15, 8 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 15, 3 Hz), 1,83-1,57 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,34-1,04 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 17
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
92
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1,3-dihidro-2H-isoindol-2-ilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 16a) (91 mg, 0,19 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título como un sólido beige (82 mg).
MS: 412 (MH^{+}), 429 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 7,46-7,25 (4H, m), 5,19 (2H, s), 4,99 (2H, s), 3,62 (1H, m), 2,98 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,84 (1H, dd, J = 17, 5 Hz), 2,94-2,77 (7H, m), 1,47-1,06 (8H, m), 0,90 (2H, m).
Preparación 18
Ácido (3R)-3-{3-[(bencilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoico
93
Una solución de (3R)-3-{3-[(bencilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
(Preparación 16b) (173 mg, 0,38 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título como un sólido beige (155 mg).
MS: 400 (MH^{+}), 417 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 7,40-7,20 (5H, m), 4,56 (2H, s), 3,54 (1H, m), 2,93 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,80 (1H, dd, J = 16, 3 Hz), 1,83-1,67 (7H, m), 1,40-1,06 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Preparación 19
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[3,4-dihidro-2(1H)-isoquinolinil-carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
94
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató con 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (0,95 ml, 7,60 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 9 horas. Se enfrió la mezcla y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (80:20). El residuo se purificó ulteriormente por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta pentano:acetato de etilo (70:30) para proporcionar el compuesto del título (343 mg).
MS: 482 (MH^{+}), 499 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 7,26-6,97 (4H, m), 4,92 (1,2H, s), 4,80 (0,8H, s), 4,00 (0,8H, m), 3,82 (1,2H, m), 3,53 (1H, m), 3,01-2,83 (3H, m), 2,67 (1H, dd, J = 15, 3 Hz), 1,87-1,58 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,36-1,08 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 20
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[3,4-dihidro-2(1H)-isoquinolinilcarbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
95
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[3,4-dihidro-2(1H)-isoquinolinilcarbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 19) (343 mg, 0,71 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (281 mg).
MS: 426 (MH^{+}), 443 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: (mezcla de rotámeros) 7,28-7,00 (4H, m), 4,87 (1,2H, s), 4,74 (0,8H, s), 3,99 (0,8H, m), 3,78 (1,2H, m), 3,57 (1H, m), 3,05-2,78 (4H, m), 1,86-1,57 (7H, m), 1,45-1,08 (8H, m), 0,87 (2H, m).
\newpage
Preparación 21
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(4-morfolinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
96
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se enfrió a 0ºC y se trató luego con morfolina (0,066 ml, 7,60 mmol). La mezcla resultante se calentó a la temperatura ambiente y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se añadió más morfolina (0,53 ml, 6,08 mmol) y la mezcla se calentó a 60ºC durante 8 horas. Se enfrió la mezcla y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:acetato de etilo (80:20) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (269 mg).
MS: 436 (MH^{+}), 453 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,80 (4H, m), 3,67 (4H, m), 3,49 (1H, m), 2,84 (2H, dd, J = 14, 8 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 14, 3 Hz), 1,84-1,57 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,33-1,06 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 22
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(4-morfolinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
97
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(4-morfolinilcarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 21) (269 mg, 0,62 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título 
\hbox{(219 mg).}
MS: 380 (MH^{+}), 397 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,80 (4H, m), 3,68 (4H, m), 3,54 (1H, m), 3,00 (1H, dd, J = 14, 8 Hz), 2,78 (1H, dd, J = 14, 3 Hz), 1,88-1,57 (7H, m), 1,40-1,04 (8H, m), 0,85 (2H, m).
Preparación 23
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(4-metil-1-piperazinil)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
98
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató con 1-metilpiperazina (0,84 ml, 7,60 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. Se enfrió la mezcla y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (98:2), que cambiaba gradualmente hasta dicloroetano:metanol (95:5) para proporcionar el compuesto del título (312 mg).
MS: 449 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,80 (2H, m), 3,59 (2H, m), 3,47 (1H, m), 2,85 (1H, m), 2,65 (1H, m), 2,54-2,36 (4H, m), 2,30 (3H, s), 1,85-1,54 (7H, m), 1,37 (9H, s), 1,33-1,04 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 24
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(4-metil-1-piperazinil)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
99
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(4-metil-1-piperazinil)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 23) (312 mg, 0,70 mmoles) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título como una espuma blanca (320 mg).
MS: 393 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,03 (4H, br m), 3,56 (1H, m), 3,41 (4H, m), 2,98-2,78 (5H, m), 1,83 (7H, m), 1,40-1,12 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Preparación 25
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[4-(dimetilamino-1-piperidinil]-carbonil})-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
100
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (800 mg, 2,03 mmol) en etanol (10 ml) se trató con N,N-dimetil-N-(4-piperidinil)amina (1,23 g, 9,61 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclometano:metanol (90:10) para dar un residuo que se purificó ulteriormente por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoniaco de densidad 0,88 (90:10:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (653 mg).
MS: 477 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,77 (1H, m), 4,05 (1H, m), 3,50 (1H, m), 3,13 (1H, m), 2,92-2,60 (4H, m), 2,40 (6H, s), 2,04-1,50 (9H, m), 1,40 (9H, s), 1,36-1,07 (10H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 26
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(dimetilamino)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
101
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(dimetilamino)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexa-
noato de terc-butilo (Preparación 25) (652 mg, 1,37 mmol) en diclorometano (15 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (5 ml). La mezcla resultante se agitó durante 2 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol:amoniaco de densiad 0,88 (90:10:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol:amoniaco de densidad 0,88 (70:30:2) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (702 mg).
MS: 421 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,80 (1H, m), 4,09 (1H, m), 3,55 (1H, m), 3,22 (2H, m), 2,93 (1H, m), 2,83-2,60 (8H, m), 2,20-2,00 (2H, m), 1,82-1,54 (9H, m), 1,41-1,07 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Preparación 27
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[3-(4-morfolinil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
102
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (1,00 g, 2,54 mmol) en etanol (10 ml) se trató con dihidrocloruro de 4-(3-azetidinil)-morfolina (2,72 g, 12,6 mmol) y trietilamina (2,56 g, 25 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 24 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (97:3) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (95:5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (1,32 g).
MS: 491 (MH^{+}), 508 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,64 (1H, m), 4,43 (1H, m), 4,25 (1H, m), 4,05 (1H, m), 3,73 (4H, m), 3,52 (1H, m), 3,31 (1H, m), 2,84-2,66 (2H, m), 2,45 (4H, m), 1,85-1,55 (7H, m), 1,46-1,05 (17H, m), 0,86 (2H, m).
\newpage
Preparación 28
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(4-morfolinil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
103
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(4-morfolinil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoato de terc-butilo (Preparación 27) (1,32 g, 2,70 mmol) en diclorometano (15 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (5 ml). La mezcla resultante se agitó durante 3 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x3) y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como una espuma blanca (1,31 g).
MS: 435 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,86 (1H, m), 4,50 (1H, m), 4,39 (1H, m), 4,14 (1H, m), 3,92 (4H, m), 3,56 (1H, m), 3,37-3,17 (5H, m), 2,93 (1H, dd, J = 13, 8 Hz), 2,82 (1H, dd, J = 13, 3 Hz), 1,83-1,59 (7H, m), 1,39-1,09 (8H, m), 0,86 (2H, m).
Preparación 29
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[7,8-dihidro[1,6]naftiridin-6(5H)-ilcarbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
104
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató con dihidrocloruro de 5,6,7,8-tetrahidro-[1,6]naftiridina (Chem. Pharm. Bull.; 32; 7; 1984; 2522-2529) (0,79 g, 3,80 mmol) y trietilamina (1,27 ml, 9,13 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. Se enfrió la mezcla y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (50:50) para proporcionar el compuesto del título (281 mg).
MS: 483 (MH^{+}), 505 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 8,44 (1H, d, J = 3 Hz), 7,48 (0,67H, d, J = 6 Hz), 7,33 (0,33H, d, J = 6 Hz), 7,20-7,10 (1H, m,) 4,92, (1,34H, s), 4,83 (0,66H, s), 4,13 (0,66H, t, J = 5 Hz), 3,94 (1,34H, t, J = 5 Hz), 3,52 (1H, m), 3,13 (2H, m), 2,87 (1H, dd, J = 14, 7 Hz), 2,67 (1H, dd, J = 14, 3 Hz), 1,85-1,56 (7H, m), 1,39 (9H, d), 1,35-1,04 (8H, m), 0,83 (2H, m).
\newpage
Preparación 30
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[7,8-dihidro[1,6]naftiridin-6(5H)-ilcarbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
105
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[7,8-dihidro[1,6]naftiridin-6(5H)-ilcarbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexa-
noato de terc-butilo (Preparación 29) (281 mg, 0,58 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (245 mg).
MS: 427 (MH^{+})
1H-NMR (CD_{3}OD) \delta: (mezcla de rotámeros) 8,56 (1H, d, 5 Hz), 8,17 (0,67H, d, J = 8 Hz), 8,01 (0,33H, d, J = 8 Hz), 7,73-7,56 (1H, m), 5,05 (1,34H, s), 5,00 (0,66H, s), 4,16 (0,66H, m), 4,01 (1,34H, m), 3,59 (1H, m), 3,24 (2H, m), 3,04-2,76 (2H, m), 1,92-1,55 (7H, m), 1,46-1,06 (8H, m), 0,87 (2H, m).
Preparación 31
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[4-(4-piridinil)-1-piperidinil]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
106
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (0,50 g, 1,27 mmol) en etanol (10 ml) se trató con 4-(4-piridinil)piperidina (Monatsh. Chem.; 3; 1882; 867) (0,41 g, 2,54 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 72 horas. Se añadió más 4-(4-piridinil)piperidina (0,21 g, 1,27 mmol) y la mezcla se calentó a reflujo durante 24 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (95:5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (0,39 g).
MS: 511 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 8,44 (2H, d, J = 4 Hz), 7,35 (2H, d, J = 4 Hz), 4,79 (1H, m), 4,00 (1H, m), 3,53 (1H, m), 3,34 (1H, m), 3,00 (2H, m), 2,84 (1H, dd, J = 14, 8 Hz), 2,75 (1H, dd, J= 14, 5 Hz), 2,02 (1H, m), 1,92 (1H, m), 1,83-1,58 (9H, m), 1,44-1,09 (17H, m), 0,86 (2H, m).
\newpage
Preparación 32
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(4-piridinil)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
107
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[4-(4-piridinil)-1-piperidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoato de terc-butilo (Preparación 31) (376 mg, 0,74 mmol) en diclorometano (15 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con ácido trifluoroacético (5 ml). La mezcla resultante se agitó durante 3 horas dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x3) y luego con diclorometano. Se añadió una solución saturada de carbonato de sodio al residuo hasta que se alcanzó un pH de 12 seguido por adición gota a gota de una solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v) hasta que el pH alcanzó 3,5. La solución se diluyó luego con agua y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (310 mg).
MS: 455 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 8,44 (2H, d, J = 4 Hz), 7,36 (2H, d, J = 4 Hz), 4,78 (1H, m), 3,97 (1H, m), 3,56 (1H, m), 3,34 (1H, m), 3,06-2,75 (4H, m), 2,01 (1H, m), 1,92 (1H, m), 1,83-1,56 (9H, m), 1,40-1,04 (8H, m) 0,85 (2H, m).
Preparación 33
(3R)-3-(3-{[Bencil(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
108
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (300 mg, 0,76 mmol) en etanol (4 ml) se trató con N-bencil-N-metilamina (0,98 ml, 7,60 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 60ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La mezcla se enfrió y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (100:0) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (95:5) para proporcionar el compuesto del título (296 mg).
MS: 470 (MH^{+}), 487 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: (mezcla de rotámeros) 7,42-7,21 (5H, m), 4,79 (1H, d, J = 15 Hz), 4,63 (1H, d, J = 15 Hz), 3,52 (1H, m), 3,00 (3H, m), 2,90-2,67 (2H, m), 1,85-1,57 (7H, m), 1,41-1,04 (17H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 34
Ácido (3R)-3-(3-{[bencil(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-6-ciclohexilhexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
109
Una solución de (3R)-3-(3-{[bencil(metil)amino]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (Preparación 33) (296 mg, 0,63 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (226 mg).
MS: 414 (MH^{+}), 431 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: (mezcla de rotámeros) 7,42-7,22 (5H, m), 4,79 (1H, d, J = 15 Hz), 4,58 (1H, d, 15 Hz), 3,56 (1H, m), 3,00 (3H, d), 2,97-2,73 (2H, m), 1,84-1,55 (7H, m), 1,41-1,03 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 35
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[metil(2-piridinilmetil)amino]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
110
Se añadió 1,1'-azobis(N,N-dimetilformamida) (645 mg, 3,75 mmol) a una solución enfriada de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(metilamino)carbonil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 7) (1,42 g, 3,75 mmol), tributilfosfina (930 \mul, 3,75 mmol) y 2-hidroximetil-piridina (240 \mul, 2,50 mmol) en tolueno (10 ml) y la mezcla resultante se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 15 minutos, y luego a la temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla se filtró y se eliminó el disolvente del filtrado a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de hexano:acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta hexano:acetato de etilo (50:50) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (530 mg).
MS: 472 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 8,54 (1H, m), 7,68 (1H, m), 7,44-7,15 (2H, m), 4,86 (1H, s), 4,79 (1H, s), 3,51 (1H, m), 3,16 (1,5H, s), 3,10 (1,5H, s), 2,84 (1H, m), 2,63 (1H, m), 1,89-1,52 (7H, m), 1,36 (9H, d), 1,31-1,00 (8H, m), 0,81 (2H, m).
\newpage
Preparación 36
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[metil(2-piridinilmetil)-amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
111
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[metil(2-piridinilmetil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 35) (527 mg, 1,12 mmol) en diclorometano (20 ml) se trató con ácido trifluoroacético (10 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. El residuo se disolvió en una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (3 ml) y el pH se ajustó a pH 4 con solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v). La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2) y las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (456 mg).
MS: 414 (M^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 8,51 (1H, m), 7,75 (1H, m), 7,47 (0,5H, d, J = 6 Hz), 7,40 (0,5H, d, J = 6 Hz), 7,23 (1H, m), 4,96-4,66 (2H, m), 3,51 (1H, m), 3,10 (3H, d), 3,05-2,66 (2H, m), 1,89-1,52 (7H, m), 1,40-1,01 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 37
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
112
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (1,18 g, 3,00 mmol) y trietilamina (1,51 g, 15,00 mmol) en etanol (30 ml) se trató con hidrocloruro del éster metílico de glicina (1,88 g, 15,00 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La mezcla se enfrió y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se repartió entre agua y acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de hexano:acetato de etilo (90:10) que cambiaba gradualmente hasta hexano:acetato de etilo (50:50) para proporcionar el compuesto del título (456 mg).
MS: 455 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,42 (1H, br t), 4,25 (2H, d, J = 4 Hz), 3,80 (3H, s), 3,51 (1H, m), 2,84 (1H, dd, J = 14, 9 Hz), 2,66 (1H, dd, J = 14, 3 Hz), 1,83-1,55 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,34-1,07 (8H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 38
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)(metil)amino]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
113
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 37) (440 mg, 1,00 mmol) en dimetilsulfóxido anhidro (10 ml) se trató con yodometano (310 \mul, 5,00 mmol) y carbonato de cesio (975 mg, 3,00 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 40º en atmósfera de nitrógeno durante 3 horas, y se agitó luego a la temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con dietil-éter (x3). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con hexano:acetato de etilo (2:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (315 mg).
MS: 452 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 4,36 (1H, s), 4,30 (1H, s), 3,76 (3H, d), 3,51 (1H, m), 3,25 (1,5H, s), 3,20 (1,5H, s), 2,86 (1H, m), 2,66 (1H, m), 1,85-1,57 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,34-1,04 (8H, m), 0,84 (2H, m),
Preparación 39
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
114
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoato de terc-butilo (Preparación 38) (315 mg, 0,70 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con una solución acuosa saturada de citrato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite (273 mg).
MS: 396 (MH^{+}), 418 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 4,26 (1,6H, m), 4,11 (0,4H, m), 3,75 (3H, d), 3,52 (1H, m), 3,21 (3H, d), 3,00 (1H, m), 2,78 (1H, m), 1,89-1,41 (7H, m), 1,38-0,95 (8H, m), 0,80 (2H, m).
\newpage
Preparación 40/Ejemplo 41
2-[[(5-{(1R)-4-Ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]-butil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil](metil)amino]acetato de metilo
115
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[(2-metoxi-2-oxoetil)(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico (Preparación 39) (273 mg, 0,70 mmol) y N-metilmorfolina (85 \mul, 0,77 mmol) en diclorometano anhidro (10 ml) se enfrió a 0ºC, se trató con cloroformiato de isobutilo (100 \mul, 0,77 mmol) y la mezcla resultante se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió luego O-(trimetilsilil)hidroxilamina (250 \mul, 2,10 mmol) y se agitó la mezcla en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla se inhibió luego con metanol (10 ml) y se agitó durante 10 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y agua. Se separaron las capas y la capa orgánica se lavó secuencialmente con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC^{a} para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (187 mg).
MS: 411 (MH^{+}), 433 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: (mezcla de rotámeros) 4,50-4,21 (2H, m), 3,84-3,60 (4H, m), 3,32 (1,8H, s), 3,21 (1,2H, s), 2,81-2,56 (2H, m), 1,90-1,50 (7H, m), 1,40-1,03 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 41
Ácido 1-[(5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidina-carboxílico
116
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (790 mg, 2,00 mmol) en dimetilsulfóxido (25 ml) se trató con ácido 3-azetidina-carboxílico (505 mg, 5,00 mmol) y carbonato de potasio (690 mg, 5,00 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 95ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. La mezcla se enfrió y se trató luego con ácido clorhídrico (1M, 25 ml) se diluyó después con agua (25 ml) y se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (90:10) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (490 mg).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,76 (2H, m), 4,45 (2H, m), 3,64-3,43 (2H, m), 2,89 (1H, dd, J = 15, 8 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 15, 4 Hz), 1,84-1,56 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,34-1,03 (8H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 42
1-[(5-{(1R)-1-[2-(terc-Butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbonil]-3-azetidinacarboxilato de metilo
117
Una solución de ácido 1-[(5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-carbonil]-3-azetidinacarboxílico (Preparación 41) (480 mg, 1,07 mmol) y N-metilmorfolina (130 \mul, 1,17 mmol) en diclorometano (10 ml) se enfrió a 0ºC y se trató luego con cloroformiato de isobutilo (150 \mul, 1,17 mmol). La mezcla se agitó a 0ºC durante 30 minutos y se dejó calentar luego a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se inhibió con metanol (5 ml) y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y ácido clorhídrico (1M). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:acetato de etilo (95:5) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:acetato de etilo (90:10) para proporcionar el compuesto del título (230 mg).
MS: 464 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,73 (2H, m), 4,40 (2H, m), 3,78 (3H, s), 3,52 (2H, m), 2,86 (1H, dd, J = 15, 8 Hz), 2,64 (1H, dd, J = 15, 3 Hz), 1,83-1,58 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,33-1,06 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 43
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(metoxicarbonil)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
208
Una solución de 1-[(5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)carbon-il]-3-azetidinacarboxilato de metilo (Preparación 42) (225 mg, 0,48 mmol) en diclorometano (8 ml) se trató con ácido trifluoroacético (4 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (x2). El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con una solución acuosa saturada de citrato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite (200 mg).
MS: 408 (MH^{+}), 430 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,73 (2H, m), 4,40 (2H, m), 3,78 (3H, s), 3,53 (2H, m), 3,04 (1H, m), 2,80 (1H, m), 1,87-1,41 (7H, m), 1,36-1,00 (8H, m), 0,83 (2H, m).
\newpage
Preparación 44
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
118
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (596 mg, 2,00 mmol) en diclorometano (8 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (364 mg, 2,25 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió luego N-hidroxi-acetamidina (Chem. Ber.; 17; 1884; 2746) (148 mg, 2,00 mmol) y se agitó la mezcla durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo en atmósfera de nitrógeno durante 90 minutos. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano para proporcionar el compuesto del título (385 mg).
MS: 337 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,41 (1H, m), 2,76 (1H, dd, J = 14, 8 Hz), 2,60 (1H, dd, J = 14, 5 Hz), 2,36 (3H, s), 1,76-1,56 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,32-1,04 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 45
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoico
119
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 44) (350 mg, 1,04 mmol) con ácido trifluoroacético (3 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título (185 mg).
MS: 298 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,41 (1H, m), 2,96 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,75 (1H, dd, J = 16, 6 Hz), 2,36 (3H, s), 1,80-1,40 (7H, m), 1,35-0,93 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 46
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-hexanoato de terc-butilo
120
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,70 mmol) en diclorometano (30 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (272 mg, 1,70 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió luego N'-hidroxi-2-metilpropanimidamida (Monatsh. Chem.; 113; 1982; 781-792) (174 mg, 1,70 mmol) y se agitó la mezcla durante 30 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 120ºC en atmósfera de nitrógeno durante 18 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (250 mg).
MS: 365 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,42 (1H, m), 3,05 (1H, m), 2,78 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,60 (1H, dd, J = 16, 4 Hz), 1,70-1,57 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,34-1,06 (14H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 47
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
121
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-(3-isopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 46) (250 mg, 0,69 mmol) con ácido trifluoroacético (5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (220 mg).
MS: 309 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,50 (1H, m), 3,09 (1H, m), 2,95 (2H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,76 (1H, dd, J = 16, 4 Hz), 1,84-1,56 (7H, m), 1,40-1,05 (14H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 48
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
122
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,70 mmol) en diclorometano (30 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (272 mg, 1,70 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió luego N'-hidroxi-2-metoxietanimidamida (J. Med. Chem.; 40; 8; 1997; 1230-1246) (177 mg, 1,70 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 120ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (99:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite (350 mg).
MS: 367 (MH^{+}), 389 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,56 (2H, s), 3,49 (4H, m), 2,84 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,65 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,85-1,52 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,36-1,05 (8H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 49
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
123
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 48) (350 mg, 0,96 mmol) con ácido trifluoroacético (3 ml) y la mezcla resultante se destiló a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (250 mg).
MS: 311 (MH^{+}), 333 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,57 (2H, s), 3,50 (4H, m), 3,00 (1H, m), 2,89 (1H, m), 1,90-1,51 (7H, m), 1,40-1,01 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 50
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(2-metoxietil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
124
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,70 mmol) en diclorometano (30 ml) se trató con 1,1-carbonildiimidazol (272 mg, 1,70 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió luego N'-hidroxi-3-metoxipropanimidamida (J. Amer. Chem. Soc.; 80; 1958; 3769-3771) (201 mg, 1,70 mmol) y se agitó la mezcla durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 120ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (99:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (410 mg).
MS: 381 (MH^{+}), 403 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,73 (2H, t, J = 6 Hz), 3,42 (1H, m), 3,34 (3H, s), 2,98 (2H, t, J = 6 Hz), 2,77 (1H, dd, J = 16, 9 Hz), 2,61 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,79-1,54 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,32-1,03 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 51
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-metoxietil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
125
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-metoxietil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 50) (410 mg, 1,08 mmol) con ácido trifluoroacético (3 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título (250 mg).
MS: 325 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,46 (1H, br s), 2,77 (2H, t, J = 6 Hz), 3,48 (1H, m), 3,36 (3H, s), 3,07-2,87 (3H, m), 2,75 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,86-1,53 (7H, m), 1,38-1,02 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 52
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[2-oxo-2-(1-pirrolidinil)etil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
126
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,70 mmol) en diclorometano (30 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (272 mg, 1,70 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió luego N'-hidroxi-3-oxo-3-(1-pirrolidinil)propanimidamida (Patente FR 73/36858 731016) (291 mg, 1,70 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 110ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (99:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (309 mg).
MS: 434 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,76 (2H, s), 3,56-3,39 (5H, m), 2,80 (1H, dd, J = 15, 8 Hz), 2,61 (1H, dd, J = 15, 4 Hz), 1,97 (2H, m), 1,86 (2H, m), 1,81-1,58 (7H, m), 1,41-1,05 (17H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 53
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[2-oxo-2-(1-pirrolidinil)-etil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
127
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[2-oxo-2-(1-pirrolidinil)etil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 52) (309 mg, 0,71 mmol) con ácido trifluoroacético (2 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título como un ácido amarillo pálido (200 mg).
MS: 378 (MH^{+}), 400 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,83 (2H, s), 3,64-3,40 (5H, m), 2,93 (1H, dd, J = 17, 8 Hz), 2,76 (1H, dd, J = 17, 5 Hz), 2,11-1,50 (11H, m), 1,43-1,02 (8H, m), 0,84 (2H, m)
\newpage
Preparación 54
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(fenilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
128 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (300 mg, 1,00 mmol) en diclorometano (15 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (162 mg, 1,00 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió luego N'-hidroxi-2-(fenilsulfonil)etanimidamida (J. Heterocycl. Chem.; 16; 1979; 1197-1200) (214 mg, 1,00 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 130ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (99:1) para proporcionar el compuesto del título (78 mg).
MS: 499 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,83 (2H, d, J = 7 Hz), 7,69 (1H, dd, J = 7, 7 Hz), 7,54 (2H, dd, J = 7, 7 Hz), 4,52 (2H, s), 3,43 (1H, m), 2,78 (1H, dd, J = 16, 9 Hz), 2,60 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,78-1,58 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,30-1,06 (8H, m), 0,85 (2H, m).
Preparación 55
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(fenilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
129 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(fenilsulfonil)-metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 54) (78 mg, 0,16 mmol) con ácido trifluoro-acético (2 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como un ácido que cristalizó al dejarlo en reposo (60 mg).
MS: 421 (MH^{+}), 438 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,80 (2H, d, J = 7 Hz), 7,66 (1H, dd, J = 7, 7 Hz), 7,53 (2H, dd, J = 7, 7 Hz), 4,53 (2H, s), 3,45 (1H, m), 2,91 (1H, dd, J = 16, 9 Hz), 2,73 (1H, dd, J = 5 Hz), 1,80-1,52 (7H, m), 1,39-1,01 (8H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 56
(3R)-3-{3-[(4-clorofenoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
130
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (300 mg, 1,00 mmol) en diclorometano (15 ml) se trató con 1,1'-carbonildiimidazol (162 mg, 1,00 mmol) y la solución se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió luego 2-(4-clorofenoxi)-N'-hidroxietanimidamida (Patente US 97/815671 970313) (197 mg, 0,98 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 120ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:metanol (99:1) para proporcionar el compuesto del título como un ácido incoloro (220 mg).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,25 (2H, d, J = 8 Hz), 6,93 (2H, d, J = 8 Hz), 5,13 (2H, s), 3,48 (1H, m), 2,82 (1H, dd, J = 17, 9 Hz), 2,64 (1H, dd, J = 17, 4 Hz), 1,81-1,57 (7H, m), 1,36 (9H, s), 1,33-1,03 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 57
Ácido (3R)-3-{3-[(4-clorofenoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoico
131
Se trató (3R)-3-{3-[(4-clorofenoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (Preparación 56) (215 mg, 0,46 mmol) con ácido trifluoroacético (5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida, y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno para proporcionar el compuesto del título (189 mg).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,25 (2H, d, J = 9 Hz), 6,94 (2H, d, J = 9 Hz), 5,14 (2H, s), 3,53 (1H, m), 2,99 (1H, dd, J = 15, 9 Hz), 2,78 (1H, dd, J = 15, 4 Hz), 1,85-1,56 (7H, m), 1,35-1,04 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 58
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(2-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
132
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (300 mg, 1,00 mmol) en diclorometano (15 ml) se trató secuencialmente con hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (192 mg, 1,00 mmol), 4-(dimetilamino)-piridina (125 mg, 1,02 mmol) y N-hidroxi-2-(2-piridinil)-etanimidamida (Chem. Pharm. Bull.; 21; 10; 1973; 2146-2160) (152 mg, 1,00 mmol). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se calentó solo a 120ºC en atmósfera de nitrógeno durante 2 horas. El producto bruto se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol (99:1). El residuo se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo:pentano (30:70) para proporcionar el compuesto del título como un ácido (107 mg).
MS: 414 (MNa^{+}), 436 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,55 (1H, d, J = 5 Hz), 7,62 (1H, dd, J = 7, 7 Hz), 7,32-7,10 (2H, m), 4,27 (2H, s), 3,45 (1H, m), 2,79 (1H, dd, J = 16, 8 Hz), 2,60 (1H, dd, J = 16, 5 Hz), 1,83-1,51 (7H, m), 1,41-1,00 (17H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 59
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
133
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(2-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 58) (247 mg, 0,60 mmol) con ácido trifluoroacético (7 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y luego con diclorometano para proporcionar el compuesto del título como un ácido (262 mg).
MS: 358 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,75 (1H, d, J = 5 Hz), 8,04 (1H, dd, J = 7, 7 Hz), 7,55 (2H, m), 4,48 (2H, s), 3,49 (1H, m), 2,99-2,61 (2H, m), 1,84-1,44 (7H, m), 1,42-1,00 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 60
(3R)-6-ciclohexil-3-({[(1S)-2-etoxi-1-(hidroximetil)-2-oxoetil]amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo
134
Una solución de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (5,00 g, 16,76 mmol) en diclorometano (75 ml) se trató secuencialmente con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (2,49 g, 18,43 mmol), hidrocloruro del éster etílico de serina (3,13 g, 18,43 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (6,13 ml, 35,19 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 0ºC en atmósfera de nitrógeno durante 15 minutos. Se añadió luego hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (3,53 g, 18,43 mmol) y se agitó la mezcla durante 48 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante ácido tiempo. La mezcla se diluyó con diclorometano (200 ml), se lavó secuencialmente con agua, solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v), una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de acetato de etilo:pentano (10:90) hasta (50:50) para proporcionar el compuesto del título como un ácido incoloro (5,41 g).
MS: 413 (M^{+})
Análisis: Encontrado, C, 63,20; H, 9,52; N, 3,27%; C_{22}H_{39}NO_{6}.0,33 EtOAc requiere C, 63,28; H, 9,48; N, 3,16%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,50 (1H, br d, J = 6 Hz), 4,60 (1H, m), 4,26 (2H, q, J = 8 Hz), 4,09 (1H, m), 3,85 (1H, m), 3,18 (1H, m), 2,70 (1H, dd, J = 18, 9 Hz), 2,51 (1H, m), 2,37 (1H, dd, J = 18, 3 Hz), 1,78-1,52 (7H, m), 1,50-1,02 (20H, m), 0,85 (2H, m).
Preparación 61
(4S)-2-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-4,5-dihidro-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
135
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-({[(1S)-2-etoxi-1-(hidroximetil)-2-oxoetil]amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo (Preparación 60) (4,14 g, 10 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) se trató con hidróxido de (metoxicarbonilsulfamoil)trietilamonio, sal interna [Reactivo de Burgess] (2,62 g, 11 mmol) y la mezcla resultante se calentó a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (80:20) hasta (50:50) para proporcionar el compuesto del título como un ácido incoloro (3,10 g).
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,69 (1H, m), 4,52-4,33 (2H, m), 4,22 (2H, m), 2,87 (1H, m), 2,63 (1H, dd, J = 16, 7 Hz), 2,40 (1H, dd, J = 16, 6 Hz), 1,76-1,03 (27H, m), 0,85 (2H, m).
Preparación 62
2-{(1R)-1-[2-(terc-Butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
136
Una suspensión de bromuro de cobre(II) (2,08 g, 9,31 mmol) y hexametilenotetramina (1,30 g, 9,31 mmol) en diclorometano desgasificado (25 ml) se trató con 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (1,39 ml, 9,31 mmol), se enfrió luego en un baño de agua fría y se agitó durante 5 minutos. Ácido suspensión se trató luego gota a gota con una solución de (4S)-2-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-4,5-dihidro-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo (Preparación 61) (0,92 g, 2,33 mmol) en diclorometano (5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo y una solución de amoniaco de densidad 0,88:solución acuosa saturada de cloruro de amonio (1:1, 100 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2). Se reunieron las capas orgánicas, se lavaron secuencialmente con ácido clorhídrico (2M), solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo:pentano (10:90) para proporcionar el compuesto del título como un ácido amarillo pálido (0,59 g).
MS: 394 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,13 (1H, s), 4,39 (2H, q, J = 7 Hz), 3,39 (1H, m), 2,80 (1H, dd, J = 17, 8 Hz), 2,58 (1H, dd, J = 17, 6 Hz), 1,84-1,53 (7H, m), 1,49-1,02 (20H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 63
Trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[4-(etoxicarbonil)-1,3-oxazol-2-il]hexanoico
137
Una solución de 2-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo (Preparación 62) (1,58 g, 4,01 mmol) en diclorometano anhidro (25 ml) se trató con ácido trifluoroacético (7 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano para proporcionar el compuesto del título (1,66 g).
MS: 338 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 9,62 (1H, br s), 8,12 (1H, s), 4,34 (2H, q, J = 7 Hz), 3,39 (1H, m), 2,93 (1H, dd, J = 17, 8 Hz), 2,67 (1H, dd, J = 17, 5 Hz), 1,84-1,47 (7H, m), 1,34 (3H, t, J = 7 Hz), 1,29-0,98 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Preparación 64
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
138
Una mezcla de trifluoroacetato del ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[4-(etoxicarbonil)-1,3-oxazol-2-il]hexanoico (Preparación 63) (1,66 g, 3,68 mmol), 1,1'-carbonil-diimidazol (0,80 g, 4,93 mmol), hidrocloruro de O-bencil-hidroxilamina (1,57 g, 9,84 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (1,71 ml, 9,82 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (10 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (50 ml) y se lavó secuencialmente con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v) y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano:metanol (98:2) y se purificó luego ulteriormente por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo:pentano (50:50) para proporcionar el compuesto del título como un ácido anaranjado (1,41 g)
MS: 443 (MH^{+}), 465 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,07 (1H, s), 7,40-7,22 (5H, m), 4,85 (2H, s), 4,36 (2H, q, J = 7 Hz), 3,45 (1H, m), 2,89-2,40 (2H, m), 1,82-1,56 (7H, m), 1,36 (3H, t, J = 7 Hz), 1,32-1,05 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 65
Ácido 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-1,3-oxazol-4-carboxílico
139
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo (Preparación 64) (1,31 g, 2,96 mmol) en 1,4-dioxano:agua (10 ml:5 ml) se trató con hidróxido de litio monohidratado (0,19 g, 4,44 mmol) y se agitó en un baño de agua fría durante 3,5 horas. La mezcla se diluyó con agua (100 ml) y se lavó con acetato de etilo. Se separaron las capas y la capa acuosa se acidificó con ácido cítrico sólido y se extrajo luego con acetato de etilo. Se separaron las capas y la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (0,75 g).
MS: 415 (MH^{+}), 437 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (DMSO-d_{6}) \delta: 12,87 (1H, br s), 11,03 (1H, br s), 8,58 (1H, s), 7,41-7,20 (5H, m), 4,70 (2H, s), 3,26 (1H, m), 2,50-2,26 (2H, m), 1,67-1,45 (7H, m), 1,22-0,99 (8H, m), 0,79 (2H, m).
Preparación 66
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N,N-dimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida
140
Una solución de ácido 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)-amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-1,3-oxazol-4-carboxílico
(Preparación 65) (200 mg, 0,48 mmol) en diclorometano (6 ml) se trató secuencialmente con 1-hidroxi-benzotriazol hidratado (72 mg, 0,53 mmol), hidrocloruro de dimetilamina (79 mg, 0,96 mmol), N-metilmorfolina (160 \mul, 1,45 mmol) e hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)-propil]-3-etilcarbodiimida (111 mg, 0,58 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v), una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoniaco de densidad 0,88 (95:5:0,5) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (200 mg).
MS: 442 (MH^{+}), 464 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,99 (1H, s), 7,43-7,20 (5H, m), 4,85 (2H, s) 3,44 (1H, m), 3,39-2,91 (6H, br m), 2,80-2,32 (2H, m), 1,80-1,51 (7H, m), 1,37-1,04 (8H, m), 0,84 (2H, m)
Preparación 67
(3R)-6-Ciclohexil-3-({[2-hidroxi-1-(metoxicarbonil)propil]amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo
141
Una solución enfriada en hielo de ácido (2R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (6,40 g, 21,45 mmol) en diclorometano (75 ml) se trató secuencialmente con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (3,19 g, 23,60 mmol), hidrocloruro del éster metílico de treonina (4,00 g, 23,60 mmol), N,N-diisopropiletilamina (7,85 ml, 45,10 mmol) e hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (4,52 g, 23,58 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó luego secuencialmente con agua, solución acuosa de ácido cítrico (10% p/v), una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en dietil-éter (100 ml) y se trató con pentano (150 ml) para producir un precipitado blanco. Se separó este por filtración y se lavó con pentano para proporcionar el compuesto del título como un polvo blanco (6,48 g).
MS: 436 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,35 (1H, br d), 4,63 (1H, m), 4,26 (1H, m), 3,76 (3H, s), 2,73-2,53 (2H, m), 2,34 (1H, m), 1,73-1,56 (7H, m), 1,45-1,09 (20H, m), 0,84 (2H, m)
Preparación 68
(3R)-6-Ciclohexil-3-({[1-(metoxicarbonil)-2-oxopropil]-amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo
142
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-({[2-hidroxi-1-(metoxicarbonil)propil]amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo (Preparación 67) (6,48 g, 15,69 mmol) en diclorometano (60 ml) se trató con peryodinano de Dess-Martin [1,1,1-triacetoxi-1,1-dihidro-1,2-benzoyodoxol-3(1H)-ona] (7,32 g, 17,26 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadieron luego una solución de tiosulfato de sodio (6 g en 50 ml de agua) y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (50 ml) a la mezcla, la cual se agitó durante 10 minutos más. Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas reunidas se lavaron secuencialmente con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (100:0 hasta 90:10) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (4,86 g).
MS: 412 (MH^{+}), 434 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,82 (1H, br d), 5,21 (1H, m), 3,78 (3H, s), 2,72-2,52 (2H, m), 2,40-2,25 (4H, m), 1,72-1,53 (7H, m), 1,45-1,04 (17H, m), 0,83 (2H, m)
Preparación 69
2-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
143
Una suspensión de trifenilfosfina (9,49 g, 36,18 mmol), yodo (7,98 g, 31,44 mmol) y trietilamina (8,49 ml, 60,75 mmol) en tetrahidrofurano se enfrió a -78ºC y se trató luego con (3R)-6-ciclohexil-3-({[1-(metoxicarbonil)-2-oxopropil]amino}carbonil)hexanoato de terc-butilo (Preparación 68) (4,86 g, 11,80 mmol) durante 15 minutos. La mezcla se agitó a -78ºC durante 30 minutos, y luego a 0-5ºC durante 2 horas. Se diluyó la mezcla con agua y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de acetato de etilo:pentano (0:100 hasta 10:90) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (2,92 g).
MS: 394 (MH^{+}), 416 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,89 (3H, s), 3,29 (1H, m), 2,74 (1H, dd, J=14, 6Hz), 2,60-2,49 (4H, m), 1,79-1,54 (7H, m), 1,38 (9H, s), 1,31-1,05 (8H, m), 0,82 (2H, m)
Preparación 70
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[4-(metoxicarbonil)-5-metil-1,3-oxazol-2-il]hexanoico
144
Una solución de 2-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo (Preparación 69) (2,92 g, 7,43 mmol) en diclorometano anhidro (15 ml) se trató con ácido trifluoroacético (7,5 ml) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 24 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano (x3). El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de acetato de etilo:pentano (0:100 hasta 40:60) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (2,50 g).
MS: 338 (MH^{+}), 360 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 62,90; H, 8,18; N, 3,93%; C_{18}H_{27}NO_{5}.0,3 EtOAc requiere C, 63,38;H, 8,14; N, 3,85%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,86 (3H, s), 3,33 (1H, m), 2,92 (1H, dd, J=17, 8Hz), 2,67 (1H, dd, J=17, 5Hz), 2,58 (3H, s), 1,81-1,56 (7H, m), 1,34-1,03 (8H, m), 0,81 (2H, m).
Preparación 71
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo
145
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[4-(metoxicarbonil)-5-metil-1,3-oxazol-1-il]hexanoico (Preparación 70) (2,48 g, 7,36 mmol) se enfrió a 0ºC y se trató con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (994 mg, 7,36 mmol), hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (2,12 g, 11,06 mmol) y N-metilmorfolina (1,21 ml, 11,04 mmol). La mezcla se agitó durante 15 minutos y se trató luego con O-bencilhidroxilamina (1,17 g, 7,36 mmol) y más N-metilmorfolina (0,81 ml, 7,36 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó secuencialmente con agua, una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (3,22 g).
MS: 443 (MH^{+}), 465 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado C, 66,78; H, 7,77; N, 6,19%; C_{25}H_{34}N_{2}O_{5}.0,3 EtOAc requiere C, 67,10;H, 7,82; N, 5,97%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,62 (1H, br s), 7,33 (5H, m), 4,84 (2H, s), 3,84 (3H, s), 3,36 (1H, m), 2,70-2,33 (5H, m), 1,78-1,54 (7H, m), 1,30-1,03 (8H, m), 0,82 (2H, m)
\newpage
Preparación 72
Ácido 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxílico
146
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo (Preparación 71) (1,00 g, 2,26 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se trató con una solución acuosa de hidróxido de sodio (1N, 1,5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se añadió más hidróxido de sodio acuoso (1N, 3,0 ml) y se agitó la mezcla durante 20 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en agua y se lavó con acetato de etilo. Se separaron las capas y la capa acuosa se acidificó con ácido cítrico sólido y se extrajo luego con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como una espuma blanca (0,83 g).
MS: 427 (MH^{-})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,34 (5H, m), 4,85 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,71-2,33 (5H, m), 1,76-1,51 (7H, m), 1,32-1,03 (8H, m), 0,83 (2H, m)
Preparación 73
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N,N,5-trimetil-1,3-oxazol-4-carboxamida
147
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo (Preparación 72) (152 mg, 0,36 mmol) en diclorometano (5 ml) se trató secuencialmente con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (48 mg, 0,36 mmol), N-metilmorfolina (82 \mul, 0,75 mmol), hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (75 mg, 0,39 mmol) e hidrocloruro de dimetilamina (29 mg, 0,36 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 17 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó secuencialmente con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoniaco de densidad 0,88 (95:5:05) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro que cristalizó al dejarlo en reposo (109 mg).
MS:456 (MH^{+}), 478 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,53 (1H, br s), 7,34 (5H, m), 4,84 (2H, s), 3,36 (1H, m), 3,27-2,86 (6H, br m), 2,64-2,31 (5H, m), 1,74-1,50 (7H, m), 1,31-1,03 (8H, m), 0,82 (2H, m)
\newpage
Preparación 74
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxamida
148
Una solución de 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxilato de metilo (Preparación 72) (200 mg, 0,47 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató secuencialmente con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (63 mg, 0,47 mmol), N-metilmorfolina (77 \mul, 0,70 mmol) e hidrocloruro de 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilcarbodiimida (134 mg, 0,70 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió luego solución concentrada de amoníaco (0,88, 50 \mul, 1,00 mmol) y se agitó la mezcla durante 17 horas. Se diluyó la mezcla con diclorometano y se lavó secuencialmente con agua, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó luego por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con diclorometano:metanol:amoníaco de densidad 0,88 (97:3:0,3) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (140 mg).
MS: 426 (MH^{-})
Análisis: Encontrado C, 67,45; H, 7,85; N, 9,64%; C_{24}H_{33}N_{3}O_{4} requiere C, 67,42;H, 7,78; N, 9,83%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,36 (5H, m), 4,86 (2H, s), 3,36 (1H, m), 2,72-2,37 (5H, m), 1,75-1,53 (7H, m), 1,42-1,05 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 75
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[3-(dimetilamino)-1-azetidinil]-carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
149
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (360 mg, 0,91 mmol) y trietilamina (370 mg, 3,65 mmol) en etanol (5 ml) se trató con N,N-dimetil-3-azetidinamina (J. Med. Chem.; 36; 801; 1993) (300 mg, 0,91 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. Se repartió la mezcla entre acetato de etilo (150 ml) y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (150 ml). La capa orgánica se lavó con solución saturada de cloruro de amonio (150 ml), agua (150 ml) y salmuera (150 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo:dietilamina (87,5:12,5:0,25) que cambiaba gradualmente hasta pentano:acetato de etilo:dietilamina (50:50:1) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (355 mg).
MS: 449(MH^{+}), 471(MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,56 (1H, dd), 4,38 (1H, dd), 4,21 (1H, dd), 4,05 (1H,dd), 3,50 (1H, m), 3,17 (1H, m), 2,86 (1H, dd), 2,63 (1H, dd), 2,19 (6H, s), 1,78 (1H, m), 1,65 (6H, br t), 1,39 (9H, s), 1,08-1,28 (8H, m), 0,82 (2H, m).
\newpage
Preparación 76
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(dimetilamino)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
150
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[3-(dimetilamino)-1-azetidinil]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 75) (340 mg, 0,76 mmol) en ácido trifluoroacético (10 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano. El residuo se disolvió en acetato de etilo (50 ml) y se lavó con solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (30 mg). Los lavados acuosos reunidos se extrajeron con diclorometano, que contenía menos de 10% de metanol (3 x 150 ml). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (180 mg); masa total combinada 210 mg.
MS: 393 (MH^{+}), 415 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CD_{3}OD) \delta: 4,88 (1H, m), 4,70 (1H, m), 4,49 (1H, dd), 4,31 (1H, dd), 4,13 (1H, m), 3,05 (1H, m), 2,91 (1H, dd), 2,35 (6H, s), 2,79 (1H, dd), 1,78 (2H, q), 1,58-1,73 (5H, m), 1,09-1,3,5 (8H, m), 0,70-0,93 (2H, br q).
Preparación 77
3-(1,3-Dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)-1-azetidinacarboxilato de terc-butilo
151
Una solución de 3-yodociclobutanocarboxilato de terc-butilo (documento EP 992493) (5,0 g, 17,7 mmol) en dimetilformamida se trató con ftalimida de potasio (5,0 g, 27,0 mmol) y se calentó a 100ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró para eliminar el exceso de ftalimida de potasio, que se lavó con dimetilformamida (10 ml). El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con xileno (2 x 30 ml). El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 95:5 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 55:45 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (3,78 g).
MS:325 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,84 (2H, m), 7,72 (2H, m), 5,01 (1H, m), 4,50 (2H, m), 4,20 (2H, m), 1,40 (9H, s).
Preparación 78
3-Amino-1-azetidinacarboxilato de terc-butilo
152
Una solución de 3-(1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-isoindol-2-il)-1-azetidinacarboxilato de terc-butilo (Preparación 77) en metilamina en metanol (2M) (10 ml) se agitó en un tubo herméticamente cerrado a 55ºC durante 3 horas. Al enfriar, se formó un precipitado y la mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (100 ml, que contenía ácido clorhídrico (2M) (3 ml)) y agua (50 ml, que contenía ácido clorhídrico (2M) (2 ml)). La fase acuosa reunida se basificó con solución de hidróxido de sodio (2M) (20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 75 ml). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 97,5:2,5:0,25 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título (935 mg) con una pureza de 90% aproximadamente, que se utilizó en la preparación sin purificación ulterior.
MS: 173 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,11 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,57 (2H, m), 1,41 (9H, s).
Preparación 79
Ácido (3R)-3-[3-({[1-(terc-butoxicarbonil)-3-azetidinil]-amino}carbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexanoico
153
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (480 mg, 1,42 mmol) y trietilamina (1 ml, 7,18 mmol) en etanol (8 ml) se trató con 3-amino-1-azetidinacarboxilato de terc-butilo (Preparación 78) (300 mg, 1,74 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 18 horas. El disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99.1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (90:10) para proporcionar el compuesto del título contaminado con la amina de partida. Se disolvió el sólido en acetato de etilo y se lavó con ácido clorhídrico (0,5M) (2 x), agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como una espuma pegajosa.
MS: 463 (M-H)^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,64 (1H, d), 4,80 (1H, m), 4,25 (2H, t), 3,88 (2H, dd), 3,97 (1H, dd), 2,79 (1H, dd), 1,57-1,80 (8H, m), 1,38 (9H, s), 1,03-1,20 (8H, m), 0,80 (2H, m).
Preparación 80
Ácido (3R)-3-[3-({3-[bis(terc-butoxicarbonil)amino]-1-azetidinil}carbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-6-ciclohexilhexa-noico
154
Una solución de ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(etoxicarbonil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico (Preparación 4) (480 mg, 1,26 mmol) y trietilamina (350 \mul, 2,50 mmol) en etanol (8 ml) se trató con 3-azetidinilimidodicarbonato de di(terc-butilo) (documentos EP 153163 y EP 106489) (1,00 g, 4,56 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC en atmósfera de nitrógeno durante 18 horas. El disolvente se eliminó a presión reducida. El sólido se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, a la cual se añadió la cantidad mínima de ácido clorhídrico (2M) para alcanzar pH 2, ácido clorhídrico (0,5 M) (2 x), agua y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de diclorometano:metanol (99:1) que cambiaba gradualmente hasta diclorometano:metanol (90:10) para proporcionar el compuesto del título (440 mg).
MS:563 (M-H)^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,78 (2H, m), 4,60 (1H, m), 4,45 (1H, t), 4,26 (1H, dd), 2,98 (1H, dd), 2,78 (1H, dd), 1,60-2,0 (7H, m), 1,49 (9H, s), 1,08-1,35 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 81
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[[2-(dimetilamino)etil](metil)-amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo
155
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (560 mg, 1,42 mmol) en etanol (2 ml) se trató con N,N,N'-trimetiletilenodiamina (900 \mul, 0,91 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 85ºC en un tubo herméticamente cerrado durante 4,5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice, eluyendo con un sistema de 95:5:0,5 (diclorometano:metanol:amo-níaco) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (632 mg).
MS:451 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,64 (1H, br s), 3,51 (2H, m), 3,14 (3H, s), 2,83 (1H, dd), 2,65 (1H, dd), 2,43-2,60 (2H br d), 2,28 (3H, br s), 2,19 (3H, br s), 1,58-1,85 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,07-1,36 (8H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 82
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[2-(dimetilamino)etil]-(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
156
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[2-(dimetilamino)etil](metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il]-hexanoato de terc-butilo (Preparación 81) (630 mg, 1,40 mmol) en diclorometano (5 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 90:10 (diclorometano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como una goma incolora (453 mg).
MS: 395 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 46,50; H, 6,00; N, 9,13%; C_{20}H_{34}N_{4}O_{4}, 2 CF_{3}CO_{2}H requiere C, 46,30; H, 5,83; N, 9,00%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,88 (1H, m), 3,76 (1H, m), 3,52 (1H, m), 3,05-3,40 (5H, m), 2,70-3,00 (7H, m), 1,57-1,90 (6H, m), 1,08-1,40 (7H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 83
(3R)-6-Ciclohexil-3-(3-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)-amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
157
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo (Preparación 3) (550 mg, 1,40 mmol) en etanol (2 ml) se trató con N,N,N'-trimetil-1,3-propanodiamina (1,02 ml, 7,00 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 85ºC en un tubo herméticamente cerrado durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 97:3:0,3 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (512 mg).
MS: 465 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 64,44; H, 9,72; N, 12,07%; C_{25}H_{44}N_{4}O_{4} requiere C, 64,62; H, 9,54; N, 12,06%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,58 (1H, t), 3,50 (1H, t), 3,44 (1H, t), 3,09 (3H, d), 2,83 (1H, m), 2,64 (1H, dd), 2,35 (1H, t), 2,23 (3H, s), 2,20 (1H, m), 2,15 (3H, s), 1,58-1,88 (8H, m), 1,40 (9H, s), 1,06-1,37 (7H, m), 0,84 (2H, m).
Preparación 84
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[3-(dimetilamino)propil]-(metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoico
158
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-(3-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino]carbonil}-1,2,4-oxadiazol-5-il)hexanoato de terc-butilo (Preparación 83) (500 mg, 1,08 mmol) en diclorometano (5 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4,5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con diclorometano. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (diclorometano:metanol) que cambiaba gradualmente hasta 80:20 (diclorometano:metanol) para proporcionar el compuesto del título como un vidrio incoloro (595 mg).
MS: 409 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 45,48; H, 5,84; N, 8,50%; C_{21}H_{36}N_{4}O_{4}, 2 CF_{3}CO_{2}H, 2H_{2}O requiere C, 45,87; H, 6,16; N, 8,56%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 3,52 (2H, m), 3,37 (1H, m), 3,09 (3H, m), 2,99 (2H, t), 2,81 (6H, s), 1,98 (2H, m), 1,58-1,90 (7H, m), 1,05-1,44 (8H, m), 0,88 (2H, m).
\newpage
Preparación 85
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(hidroximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
159
Una solución de 5-{(1R)-1-[2-terc-butoxi)-2-oxoetil]-4-ciclohexilbutil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxilato de etilo
(Preparación 3) (15,2 g, 38,50 mmol) en etanol (120 ml) se trató con porciones de borohidruro de sodio (1,46 g, 38,50 mmol) y la mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno durante 5 horas. Se añadió lentamente ácido cítrico acuoso (solución al 5% p/v) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 30 minutos más. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida. La capa acosa se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo dando una emulsión. Se añadió cloruro de sodio anhidro para romper la emulsión. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (13,4 g).
MS: 375 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,77 (2H, s), 3,46 (1H, m), 2,80 (1H, dd), 2,62 (1H, dd), 1,58-1,80 (7H, m), 1,39 (9H, s), 1,07-1,33 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 86
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
160
Una suspensión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (13 mg, 0,33 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (1 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(hidroximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-hexanoato de terc-butilo (Preparación 85) (105 mg, 0,30 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (1 ml) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió bromoacetato de etilo (37 \mul, 0,33 mmol) y se agitó la mezcla durante 18 horas, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (99:1) hasta pentano:acetato de etilo (80:20) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (84 mg).
MS: 461 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 62,87; H, 8,77; N, 6,39%; C_{23}H_{38}N_{2}O_{6} requiere C, 62,99; H, 8,73; N, 6,39%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,75 (2H, s), 4,20 (4H, m), 3,45 (1H, m), 2,80 (1H, dd), 2,60 (1H, dd), 1,6-1,8 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,10-1,30 (11H, m), 0,94 (2H, m).
\newpage
Preparación 87
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
161
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 86) (500 mg, 1,08 mmol) en diclorometano (7 ml) se trató con ácido trifluoroacético (3 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y diclorometano. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0:0 (diclorometano:metanol:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (374 mg).
MS: 383 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 59,67; H, 7,91; N, 7,32%; C_{19}H_{30}N_{2}O_{6}, 0,05 H_{2}O. 0,05 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 59,62; H, 7,90; N, 7,22%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,75 (2H, s), 4,20 (4H, m), 3,51 (1H, m), 2,98 (1H, dd), 2,75 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,30 (11H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 88
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-1-metil-2-oxoetoxi)-metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo
162
Una suspensión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (18 mg, 0,45 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (1 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-(hidroximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 85) (142 mg, 0,40 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (1 ml) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 0,5 horas. Se añadió 2-bromopropionato de etilo (37 \mul, 0,33 mmol) y se agitó la mezcla durante 2 días, dejando que se calentara a la temperatura ambiente durante este tiempo. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (99:1) hasta pentano:acetato de etilo (0:100) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (90 mg).
MS: 475 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 63,57; H, 8,93; N, 6,19%; C_{24}H_{40}N_{2}O_{6} requiere C, 63,69; H, 8,91; N, 6,19%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,79 (1H, d), 4,58 (1H, d), 4,20 (3H, m), 3,45 (1H, m), 2,78 (1H, dd), 2,60 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,42 (3H, d), 1,35 (9H, s), 1,10-1,30 (11H, m), 0,83 (2H, m).
\newpage
Preparación 89
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-1-metil-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
163
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(2-etoxi-1-metil-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de
terc-butilo (Preparación 88) (480 mg, 1,06 mmol) en diclorometano (8 ml) se trató con ácido trifluoroacético (3,5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y diclorometano. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0:0 (diclorometano:metanol:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 95:5:0,5 (diclorometano:metanol:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (395 mg).
MS: 419 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 60,03; H, 8,21; N, 6,97%; C_{20}H_{32}N_{2}O_{6}, 0,2 CH_{2}Cl_{2} requiere C, 60,04; H, 8,16; N, 7,00%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,80 (1H, d), 4,58 (1H, d), 4,10-4,30 (3H, m), 3,50 (1H, m), 2,98 (1H, dd), 2,75 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,45 (3H, d), 1,10-1,30 (11H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 90
(3R)-3-{3-[(2-Amino-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
164
Una suspensión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (51 mg, 1,28 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-(hidroximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-hexanoato de terc-butilo (Preparación 85) (105 mg, 0,30 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 ml) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió 2-bromoacetamida (235 mg, 1,70 mmol) y la mezcla se dejó calentar a la temperatura ambiente y se calentó luego a 40ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un sistema en gradiente de pentano:acetato de etilo (99:1) hasta pentano:acetato de etilo (0:100) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (330 mg).
MS: 432 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,68 (2H, s), 4,10 (2H, s), 3,46 (1H, m), 2,79 (1H, dd), 2,62 (1H, dd), 1,6-1,8 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,10-1,30 (8H, m), 0,84 (2H, m).
\newpage
Preparación 91
Ácido (3R)-3-{3-[(2-amino-2-oxoetoxi)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoico
165
Una solución de (3R)-3-{3-[(2-amino-2-oxoetoxi)-metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (Preparación 90) (280 mg, 0,86 mmol) en diclorometano (7 ml) se trató con ácido trifluoroacético (3 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y diclorometano. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0:0 (diclorometano:metanol:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:metanol:ácido acético) para proporcionar un aceite incoloro que se trituró con dietiléter y se filtró para proporcionar el compuesto del título (155 mg).
MS: 376 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,60-6,80 (2H, br d) 4,70 (2H, s), 4,08 (2H, dd), 3,48 (1H, m), 2,85 (1H, dd), 2,73 (1H, dd), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,40 (8H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 92
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}-metil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
166
Una suspensión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (1,52 g, 38,00 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(hidroximetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 85) (13,40 g, 38,00 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (120 ml) se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. Se añadió poco a poco cloruro de p-tolueno-sulfonilo (7,25 g, 38,00 mmol) y la mezcla se dejó calentar a la temperatura ambiente 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con diclorometano para proporcionar el compuesto del título (10,75 g).
MS: 529 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,80 (2H, d), 7,33 (2H, d), 5,12 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,72 (1H, dd), 2,58 (1H, dd), 2,43 (3H, s), 1,56-1,78 (7H, m), 1,35 (9H, s), 1,05-1,30 (8H, m), 0,82 (2H, m).
\newpage
Preparación 93
2-({5-[(1R)-1-(2-terc-butoxi-2-oxoetoxi)-4-ciclohexilbutil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}metil)malonato de 1-terc-butilo y 3-etilo
167
Una suspensión de hidruro de sodio al 60% en aceite mineral (35 mg, 38,00 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con malonato de terc-butiletilo (13,40 g, 38,00 mmol), se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 5 minutos y se dejó calentar luego a la temperatura ambiente. Se añadió una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 92) (400 mg, 0,78 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (3 ml) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (518 mg) con una pureza de aproximadamente 70%, que se utilizó sin purificación ulterior.
MS: 546 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,20 (2H, m), 3,80 (1H, t), 3,40 (1H, m), 3,25 (2H, d), 2,75 (1H, dd), 2,59 (1H, dd), 1,60-1,75 (7H, m), 1,43 (9H, s), 1,39 (9H, s), 1,10-1,30 (11H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 94
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(3-etoxi-3-oxopropil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
168
Una solución de 2-({5-[(1R)-1-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-4-ciclohexilbutil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}metil)malonato de 1-terc-butilo y 3-metilo (Preparación 93) (510 mg, 0,79 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con ácido trifluoroacético (5 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno. El sólido se disolvió en xileno (10 ml) y se calentó a 140ºC durante 7 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 95:5:0 (diclorometano:alcohol isopropílico:ácido acético) que cambiaba gradualmente hasta 90:10:1 (diclorometano:alcohol isopropílico:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (117 mg).
MS: 389 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,12 (2H, q), 3,48 (1H, m), 3,03 (2H, t), 2,92 (1H, dd), 2,75 (3H, m), 1,60-1,80 (7H, m), 1,10-1,35 (11H, m), 0,82 (2H, m).
\newpage
Preparación 95
(3R)-3-[({[(Z)-1-Amino-2-(propilsulfonil)etilideno]-amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
169
Una solución de ácido (2R)-2-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,67 mmol), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (354 mg, 1,85 mmol), N-metilmorfolina (203 \mul, 1,85 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol hidratado (227 mg, 1,67 mmol) en diclorometano (20 ml) se trató con (1Z)-N'-hidroxi-2-(propilsulfonil)etanimidamida (300 mg, 1,67 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se agitó durante 20 minutos. Se separaron las capas por medio de un cartucho de filtración de 5 micrómetros. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (760 mg).
MS: 483 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,62 (2H, br s), 3,82 (2H, d), 3,15 (2H, m), 2,83 (1H, m), 2,65 (1H, dd), 2,42 (1H, dd), 1,90 (2H, m), 1,57-1,80 (8H, m), 1,45 (9H, s), 1,10-1,30 (7H, m), 1,08 (3H, t), 0,83 (2H, m).
Preparación 96
(3R)-6-Ciclohexil-3-{3-[(propilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
170
Una solución de (3R)-3-[({[(Z)-1-amino-2-(propilsulfonil)etilideno]amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo (Preparación 95) (760 mg, 1,60 mmol) en xileno (15 ml) se calentó a 130ºC durante 28 horas. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 70:30 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (400 mg).
MS: 441 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 4,32 (2H, s), 3,48 (1H, m), 3,13 (2H, dd), 2,80 (1H, dd), 2,65 (1H, dd), 1,92 (2H, m), 1,60-1,80 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,10-1,35 (11H, m), 0,82 (2H, m).
\newpage
Preparación 97
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(propilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoico
171
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-{3-[(propilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol-5-il}hexanoato de terc-butilo (Preparación 96) (371 mg, 0,84 mmol) en cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4M) (4 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 24 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se disolvió en cloruro de hidrógeno reciente en 1,4-dioxano (4M) y se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (313 mg).
MS: 385 (M-H)^{-}
^{1}H-NMR (DMSO) \delta: 4,70 (2H, s), 3,43 (1H, m), 2,75 (2H, t), 2,52 (2H, obs), 1,75 (2H, m), 1,50-1,70 (7H, m), 1,05-1,30 (9H, m), 0,97 (3H, t), 0,80 (2H, m).
Preparación 98
2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-N-[2-(dimetilamino)etil]-5-metil-1,3-oxazol-4-carbo-xamida
172
Una solución de ácido 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)-amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxílico (Preparación 72) (200 mg, 0,47 mmol), N-metilmorfolina (77 \mul, 0,70 mmol), 1-hidroxibenzotriazol hidratado (63 mg, 0,47 mmol) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (134 mg, 0,70 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con N,N-dimetiletilenodiamina (56 \mul, 0,51 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema de 94:4:0,4 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (216 mg).
MS: 499 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 67,24; H, 8,60; N, 11,25%; C_{28}H_{42}N_{4}O_{4} requiere C, 67,44; H, 8,49; N, 11,24%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,35 (5H, br s), 7,10 (1H, br s), 4,85 (2H, s), 3,45 (2H, q), 3,35 (1H, m), 2,59 (3H, s), 2,46 (2H, t), 2,24 (6H, s), 1,60-1,75 (7H, m), 1,10-1,30 (7H, m), 0,85 (2H, m).
\newpage
Preparación 99
({[2-((1R)-1-{2-[(Benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-il]carbonil}amino)-acetato de metilo
173
Una solución de ácido 2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)-amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-carboxílico (Preparación 72) (230 mg, 0,53 mmol), N-metilmorfolina (61 \mul, 0,56 mmol), 1-hidroxibenzotriazol hidratado (68 mg, 0,53 mmol) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (107 mg, 0,56 mmol) en diclorometano (10 ml) se trató con una solución de hidrocloruro del éster metílico de glicina (70 mg, 0,56 mmol) y N-metilmorfolina (61 \mul, 0,56 mmol) en diclorometano (2 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con agua, solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 100:0:0 (diclorometano:metanol:amoníaco) que cambiaba gradualmente hasta 98:2:0,2 (diclorometano:metanol:amoníaco) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (160 mg).
MS: 522 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,44 (1H, br s), 7,35 (5H, s), 5,11 (1H, s), 4,87 (2H, s), 4,12 (2H, d), 3,77 (3H, s), 3,37 (1H, m), 2,70 (1H, m), 2,56 (3H, s), 2,45 (1H, m), 1,55-1,1,80 (7H, m), 1,05-1,40 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 100
Ácido ({[2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-il]carbonil}amino)-acético
174
Una solución de ({[2-((1R)-1-{2-[(benciloxi)amino]-2-oxoetil}-4-ciclohexilbutil)-5-metil-1,3-oxazol-4-il]carbonil}amino)acetato de metilo (Preparación 99) (158 mg, 0,32 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se trató con solución de hidróxido de sodio (1M) (470 \mul, 0,47 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó en agua y se lavó con acetato de etilo. La capa acuosa se acidificó con ácido cítrico sólido y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título (61 mg).
MS: 484 (M-H)^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,35 (5H, br s), 4,85 (2H, s), 4,17 (2H, d), 3,39 (1H, m), 2,60 (3H, s), 2,43 (1H, m), 1,55-1,75 (7H, m), 1,10-1,35 (9H, m), 0,85 (2H, m).
Masa Exacta: 486,26 (MH^{+})
\newpage
Preparación 101
(3R)-3-[({[(Z)-1,2-diamino-2-oxoetilideno]amino}oxi)-carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
175
Se trató ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (3,47 g, 11,6 mmol) en dimetilformamida (21 ml) con 1,1'-carbonildiimidazol (1,97 g, 12,2 mmol) y se agitó la mezcla a la temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió luego N-dimetilaminopiridina (1,43 g, 11,7 mmol) en una sola porción, seguido por la adición de 2-amino-2-(hidroxiimino)-acetamida (1,25 g, 12,1 mmol, Helv. Chim. Acta; 47; 1964; 33-46). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 24 horas. Se repartió la mezcla entre acetato de etilo y una solución al 10% de ácido cítrico en agua desmineralizada. Se separaron las capas y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas reunidas se lavaron con agua desmineralizada (x4) y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El residuo se cristalizó en n-hexano, se recogió el precipitado por filtración y se secó a vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido incoloro (3,30 g, rendimiento 74%).
MS: 382 [(M-H)]^{-}
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,04 (1H, br s), 5,73 (2H, br s), 5,46 (1H, br s), 2,90 (1H, m), 2,68 (1H, dd, J= 15, 12 Hz), 2,45 (1H, dd, J= 18, 6 Hz), 1,63-1,74 (9H, m), 1,55-1,50 (1H, m), 1,43 (9H, s), 1,37-1,10 (5H, m), 0,93-0,82 (2H, m).
Preparación 102
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(1H-imidazol-2-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
176
Una solución de 1H-imidazol-1-carboxilato de terc-butilo (133 mg, 0,79 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (2 ml), enfriada a -78ºC, se trató con n-butil-litio, 2,5M en hexanos (320 \mul, 0,79 mmol) y se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Se añadió lentamente una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 92) (400 mg, 0,79 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (2 ml) y la mezcla se dejó calentar a la temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura durante 18 horas. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo (30 ml) y agua (30 ml). La capa orgánica se lavó una vez más con agua (20 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo pálido (307 mg).
MS: 403 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 65,61; H, 8,91; N, 11,78%; C_{22}H_{34}N_{4}O_{3} requiere C, 65,64; H, 8,51; N, 13,92%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 7,59 (1H, s), 7,07 (1H, s), 7,01 (1H, s), 5,28 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,76 (1H, dd), 2,60 (1H, dd), 1,40-1,80 (10H, m), 1,10-1,40 (12H, m), 0,88 (4H, m).
\newpage
Preparación 103
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1H-imidazol-2-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
177
Se trató (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(1H-imidazol-2-ilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 102) (530 mg, 1,32 mmol) con ácido trifluoroacético (10 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 1,5 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno (3 x 30 ml) y diclorometano (2 x 30 ml) para proporcionar el compuesto del título (609 mg).
MS: 347 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 48,81; H, 5,61; N, 10,40%; C_{18}H_{26}N_{4}O_{3}, 1,5CF_{3}CO_{2}H, 0,13H_{2}O requiere C, 48,52; H, 5,38; N, 10,78%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,80 (1H, s), 7,38 (1H, s), 7,28 (1H, s), 5,41 (2H, s), 3,48 (1H, m), 2,70-2,95 (2H, m), 1,50-1,80 (7H, m), 1,10-1,40 (8H, m), 0,85 (2H, m).
Preparación 104
(3R)-3-[({[(Z)-1-Amino-2-(4-piridinil)etilideno]amino}-oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
178
Una solución de ácido (2R)-2-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,67 mmol) en diclorometano (20 ml) se trató con hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (354 mg, 1,85 mmol), N-metilmorfolina (203 \mul, 1,85 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol hidratado (227 mg, 1,67 mmol). Se añadió (1Z)-N'-hidroxi-2-(4-piridinil)etanimidamida (documento WO 9600720) (374 mg, 1,67 mmol) seguida por N-metilmorfolina (369 \mul, 3,34 mmol) a la mezcla de reacción, que se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se agitó durante 20 minutos. Se separaron las capas por medio de un cartucho de filtración de 5 micrómetros. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (840 mg). Éste se utilizó sin purificación ulterior en el paso siguiente.
MS: 454 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,58 (2H, d), 7,28 (2H, d), 4,90 (1H, br s), 3,57 (2H, s), 2,85 (1H, m), 2,40 (2H, m), 1,60-1,80 (6H, m), 1,30-1,60 (12H, m), 1,10-1,30 (6H, m), 0,87 (2H, m).
\newpage
Preparación 105
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(4-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
179
Una solución de (3R)-3-[({[(Z)-1-amino-2-(4-piridinil)etilideno]amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de
terc-butilo (Preparación 104) (840 mg, 1,60 mmol) en xileno (15 ml) se calentó a 130ºC durante 4,5 horas. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 90:10 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 50:50 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (420 mg).
MS: 436 (MNa^{+})
Análisis: Encontrado, C, 69,38; H, 8,69; N, 9,72%; C_{24}H_{35}N_{3}O_{3}.0,1 EtOAc requiere C, 69,39; H, 8,45; N, 9,72%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,54 (2H, d), 7,21 (2H, d), 4,03 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,77 (1H, dd), 2,60 (1H, m), 1,60-1,80 (8H, m), 1,35 (9H, s), 1,10-1,30 (7H, m), 0,82 (2H, m).
Preparación 106
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(4-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
180
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(4-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 105) (400 mg, 0,97 mmol) en cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4M) (5 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 24 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida. El sólido se disolvió en cloruro de hidrógeno reciente en 1,4-dioxano (4M) y se agitó a la temperatura ambiente durante 3 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (390 mg).
MS: 356 (M-H)^{-}
Análisis: Encontrado, C, 59,65; H, 7,34; N, 9,62%; C_{20}H_{27}N_{3}O_{3}. HCl. 0,35H_{2}O. 0,25 Dioxano requiere C, 59,74; H, 7,33; N, 9,95%
^{1}H-NMR (DMSO) \delta: 8,75 (2H, d), 7,78 (2H, d), 4,40 (2H, s), 3,40 (1H, m), 2,75 (2H, m), 1,50-1,70 (7H, m), 1,00-1,25 (8H, m), 0,89 (2H, m).
\newpage
Preparación 107
(3R)-3-[({[(Z)-1-Amino-2-(3-piridinil)etilideno]amino}-oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo
181
Una solución de ácido (2R)-2-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-5-ciclohexilpentanoico (Preparación 1) (500 mg, 1,67 mmol) en diclorometano (20 ml) se trató con hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (354 mg, 1,85 mmol), N-metilmorfolina (203 \mul, 1,85 mmol) y 1-hidroxibenzotriazol hidratado (227 mg, 1,67 mmol). Se añadió (1Z)-N'-hidroxi-2-(3-piridinil)etanimidamida (documento WO 9600720) (374 mg, 1,67 mmol) seguida por N-metilmorfolina (369 \mul, 3,34 mmol) a la mezcla de reacción, que se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 ml) y se agitó durante 20 minutos. Se separaron las capas por medio de un cartucho de filtración de 5 micrómetros. Se eliminó el disolvente orgánico a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (835 mg). Éste se utilizó sin purificación ulterior en el paso siguiente.
MS: 432 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,55 (2H, d), 7,70 (1H, d), 7,28 (1H, d), 4,90 (2H, br s), 3,70 (2H, m), 2,85 (1H, m), 2,40 (2H, m), 1,60-1,80 (7H, m), 1,40 (9H, s), 1,10-1,30 (8H, m), 0,83 (2H, m).
Preparación 108
(3R)-6-Ciclohexil-3-[3-(3-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo
182
Una solución de (3R)-3-[({[(Z)-1-amino-2-(3-piridinil)etilideno]amino}oxi)carbonil]-6-ciclohexilhexanoato de
terc-butilo (Preparación 107) (835 mg, 1,60 mmol) en xileno (15 ml) se calentó a 130ºC durante 4,5 horas. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un sistema en gradiente de 90:10 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 50:50 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (443 mg).
MS: 436 (MNa^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,60 (1H, s), 8,50 (1H, d), 7,62 (1H, d), 7,21 (1H, m), 4,05 (2H, s), 3,41 (1H, m), 2,77 (1H, dd), 2,58 (1H, m), 1,60-1,75 (8H, m), 1,35 (9H, s), 1,10-1,25 (7H, m), 0,82 (2H, m).
\newpage
Preparación 109
Ácido (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(3-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoico
183
Una solución de (3R)-6-ciclohexil-3-[3-(3-piridinilmetil)-1,2,4-oxadiazol-5-il]hexanoato de terc-butilo (Preparación 108) (408 mg, 0,99 mmol) en cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4M) (5 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. El análisis por cromatografía en capa delgada (t.l.c.) indicó que la reacción había progresado hasta más de 90%. Se añadieron un par de gotas de ácido clorhídrico concentrado y la mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 24 horas más. Se eliminó el disolvente a presión reducida. Se añadió una porción reciente de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4M) (4 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y se destiló azeotrópicamente con acetato de etilo y dietiléter. El aceite se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (418 mg).
MS: 356 (M-H)^{-}
Análisis: Encontrado, C, 59,07; H, 7,43; N, 8,71%; C_{20}H_{27}N_{3}O_{3}. HCl. 0,4H_{2}O. 0,7 Dioxano requiere C, 59,17; H, 7,49; N, 9,08%
^{1}H-NMR (DMSO) \delta: 8,72 (1H, s), 8,63 (1H, d) 8,10 (1H, d), 7,69 (1H, t), 4,25 (2H, s), 3,38 (1H, m), 2,67 (2H, t), 1,50-1,70 (7H, m), 1,00-1,25 (8H, m), 0,79 (2H, m).
Preparación 110
(4S)-4-Isopropil-3-(4-pentenoil)-1,3-oxazolidin-2-ona
184
Una solución de (4S)-4-isopropil-1,3-oxazolidin-2-ona (26 g, 0,2 mol) en tetrahidrofurano anhidro (600 ml) se enfrió a -78ºC en atmósfera de nitrógeno y se trató con n-butil-litio, 2,5M en hexanos (80 ml, 0,2 mol) manteniendo la temperatura por debajo de -65ºC. Una vez completada la adición, se dejó calentar la mezcla de reacción a -55ºC y se agitó a esta temperatura durante 30 minutos. La mezcla se enfrió de nuevo a -78ºC y se trató gota a gota con una solución de cloruro de 4-pentenoílo (23,7 g, 0,2 mol) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml). Después de agitar a -78ºC durante 30 minutos, la mezcla de reacción se dejó calentar a la temperatura ambiente. Se añadió solución acuosa saturada de cloruro de amonio (1 l) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (2 x). Los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de disolvente de 100:0 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 70:30 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo (36,3 g).
MS: 229 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,85 (1H, m), 5,10 (1H, d), 5,02 (1H, d), 4,41 (1H, m), 4,22 (2H, m), 3,11 (1H, m), 2,98 (1H, m), 2,30-2,45 (3H, m), 0,92 (3H, d), 0,85 (3H, d).
\newpage
Preparación 111
(3R)-3-{[(4S)-4-Isopropil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]carbonil]-5-hexenoato de terc-butilo
185
Una solución de (4S)-4-isopropil-3-(4-pentenoil)-1,3-oxazolidin-2-ona (Preparación 110) (36 g, 0,17 mol) en tetrahidrofurano anhidro (650 ml) en atmósfera de nitrógeno, a -78ºC, se trató gota a gota con bis(trimetil-silil)amiduro de sodio, 1 M en tetrahidrofurano (188 ml, 0,19 mol) durante 1,5 horas, manteniendo la temperatura por debajo de -65ºC. La mezcla se agitó a -78ºC durante 30 minutos y se dejó calentar luego a la temperatura ambiente. Se vertió la mezcla en solución acuosa saturada de cloruro de amonio (500 ml) y se extrajo con dietiléter. El extracto orgánico se lavó con salmuera y agua, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. La suspensión espesa de color pardo se trituró con hexano, se filtró y se lavó con hexano frío. El sólido blanco se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título (35,8 g).
MS: 343 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,78 (1H, m), 5,08 (1H, d), 5,02 (1H, s), 4,40 (1H, m), 4,18-4,30 (3H, m), 2,77 (1H, dd), 2,30-2,45 (3H, m), 2,18 (1H, m), 1,41 (9H, s), 0,91 (6H, t).
Preparación 112
Ácido (2R)-2-(4,4-dimetil-2-oxopentil-4-pentenoico
186
Una solución de (3R)-3-{[(4S)-4-isopropil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]carbonil}-5-hexenoato de terc-butilo (Preparación 111) (37,5 g, 0,11 mol) en 1,4-dioxano (190 ml), en atmósfera de nitrógeno, se trató con una solución de hidróxido de litio monohidratado (7,3 g, 0,17 mol) en agua (75 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió más hidróxido de litio monohidratado (2,42 g, 0,06 mol) y la mezcla se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico (2 M) (250 ml) y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con 50:50 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (14,2 g).
MS: 232 (MNH_{4}^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,77 (1H, m), 5,12 (1H, d), 5,08 (1H, s), 2,90 (1H, m), 2,60 (1H, dd), 2,25-2,55 (3H, m), 1,43 (9H, s).
Preparación 113
(2S)-2-{[(2R)-2-(4,4-Dimetil-2-oxopentil)-4-pentenoil]-amino}-3-hidroxipropanoato de etilo
187
Una solución de ácido (2R)-2-(4,4-dimetil-2-oxopentil-4-pentenoico (Preparación 112) (15,91 g, 74,3 mmol), 1-hidroxibenzotriazol hidratado (11,00 g, 81,4 mmol), hidrocloruro del éster etílico de L-serina (13,84 g, 81,6 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (27 ml, 156,0 mmol) en diclorometano (280 ml) se trató con hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (15,67 g, 81,7 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con agua, ácido cítrico acuoso (2 M), solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. Se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo 
\hbox{(23,8 g).}
MS: 330 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 6,50 (1H, br d), 5,77 (1H, m), 5,10 (2H, s + d), 4,59 (1H, m), 4,22 (2H, q), 4,02 (1H, br d), 3,84 (1H, br d), 2,85 (1H, br s), 2,55-2,70 (2H, m), 2,40 (2H, m), 2,18 (1H, m), 1,40 (9H, s), 1,30 (3H, t).
Preparación 114
(4S)-2-[(1R)-1-(4,4-dimetil-2-oxopentil)-3-butenil]-4,5-dihidro-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
188
Una solución de (2S)-2-{[(2R)-2-(4,4-dimetil-2-oxopentil)-4-pentenoil]amino}-3-hidroxipropanoato de etilo (Preparación 113) (23,8 g, 72,3 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (300 ml), en atmósfera de nitrógeno, se trató con sal hidrocloruro de trietilamina del hidróxido de (metoxicarbonilsulfamoil)trietilamonio (43,5 g, 79,4 mmol) y se agitó a reflujo durante 1,5 horas. Después de dejar enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla se filtró, se lavó con acetato de etilo y el filtrado se concentró a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de disolvente 80:20 (hexano:dietiléter) que cambiaba gradualmente hasta 50:50 (hexano:dietiléter) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (11,0 g).
MS: 312 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 5,73 (1H, m), 5,05 (2H, s + d), 4,66 (1H, m), 4,42 (1H, t), 4,38 (1H, t), 4,20 (2H, m), 3,95 (1H, m), 2,60 (1H, dd), 2,30-2,50 (3H, m), 1,41 (9H, s), 1,28 (3H, t).
Preparación 115
2-[(1R)-1-(4,4-Dimetil-2-oxopentil)-3-butenil]-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo
189
Una suspensión de bromuro de cobre(II) (50,6 g, 226,6 mmol) y hexametilenotetramina (31,6 g, 225,5 mmol) en diclorometano (250 ml), en atmósfera de nitrógeno, se trató con 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (33 ml, 220,7 mmol). La mezcla se enfrió a 0ºC y se trató con una solución de (4S)-2-[(1R)-1-(4,4-dimetil-2-oxopentil)-3-butenil]-4,5-dihidro-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo (Preparación 114) (17,6 g, 56,4 mmol) en diclorometano (250 ml) por medio de una cánula. La mezcla de reacción se dejó calentar a la temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. Se midió el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con acetato de etilo. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con una mezcla 1:1 de solución de amoníaco de densidad 0,880:solución acuosa saturada de cloruro de amonio (x2), agua, ácido clorhídrico (2M) (x3), solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y salmuera. El disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un disolvente en gradiente de 95:5 (hexano:dietiléter) que cambiaba gradualmente hasta 50:50 (hexano:dietiléter) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (11,5 g).
MS: 310 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,10 (1H, s), 5,70 (1H, m), 5,01 (2H, s + d), 4,37 (2H, q), 3,45 (1H, m), 2,79 (1H, dd), 2,50-2,65 (2H, m), 2,45 (1H, m), 1,30-1,45 (12H, s + t).
Preparación 116
Ácido 2-[(1R)-1-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-3-butenil]-1,3-oxazol-4-carboxílico
190
Se iniciaron dos reacciones idénticas, cada una de las cuales contenía lo siguiente:
Una solución de 2-[(1R)-1-(4,4-dimetil-2-oxopentil)-3-butenil]-1,3-oxazol-4-carboxilato de etilo (Preparación 115) (4,0 g, 12,9 mmol) en 1,4-dioxano (40 ml) y agua (20 ml) se enfrió a 0ºC y se trató con hidróxido de litio monohidratado (0,8 g, 19,0 mmol). La mezcla se agitó a 0ºC durante 4 horas. Se añadió más hidróxido de litio monohidratado (0,8 g, 19,0 mmol) y se agitó a 0ºC durante 10 minutos. Las dos reacciones se reunieron y se repartieron entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se neutralizó con ácido cítrico (16,3 g, 38,0 mmol) y se extrajo con acetato de etilo (x3). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se eliminó el disolvente a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (8,3 g).
MS: 282 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,10 (1H, s), 5,70 (1H, m), 5,01 (2H, s + d), 3,47 (1H, m), 2,80 (1H, dd), 2,62 (1H, dd), 2,57 (1H, m), 2,45 (1H, m), 1,38 (9H, s).
Preparación 117
(3R)-3-{4-[(Dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-5-hexenoato de terc-butilo
191
Una solución de ácido 2-[(1R)-1-(2-terc-butoxi-2-oxoetil)-3-butenil]-1,3-oxazol-4-carboxílico (Preparación 116) (10,77 g, 38,3 mmol) en diclorometano (250 ml), a 0ºC, se trató con 1-hidroxibenzotriazol hidratado (5,75 g, 42,6 mmol), hidrocloruro de dimetilamina (3,45 g, 42,3 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (13 ml, 75,13 mmol) y por último hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (8,10 g, 42,3 mmol), se dejó calentar a la temperatura ambiente y se agitó durante 20 horas en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio, ácido cítrico acuoso (10%), agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El disolvente se eliminó a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de disolvente de 7:3 (pentano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 1:1 (pentano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (9,9 g).
MS: 309 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 61,31; H, 7,89; N, 8,92%; C_{16}H_{24}N_{2}O_{4}, 0,2H_{2}O requiere C, 61,60; H, 7,88; N, 8,98%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,00 (1H, s), 5,70 (1H, m), 5,02 (2H, s + d), 3,40 (1H, m), 3,30 (3H, br s), 3,03 (3H, br s), 2,75 (1H, m), 2,38 (1H, dd), 2,50 (1H, t), 2,43 (1H, m), 1,39 (9H, s).
Preparación 118
(3R)-3-{4-[(Dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-5-oxopentanoato de terc-butilo
192
Una solución de (3R)-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-5-hexenoato de terc-butilo (Preparación 117) (1,0 g, 3,24 mmol) en acetona (20 ml) y agua (20 ml) se trató con tetróxido de osmio, al 2,5% en peso en terc-butanol (500 \mul, 0,04 mmol) y se agitó a la temperatura ambiente durante 5 minutos. Se añadió peryodato de sodio (2,13 g, 10,00 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. Se repartió la mezcla de reacción entre acetato de etilo y solución acuosa de tiosulfato de sodio (20% p). La capa orgánica se lavó con agua (x2) y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El disolvente se eliminó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (866 mg).
MS: 311 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 56,13; H, 7,13; N, 8,66%; C_{15}H_{22}N_{2}O_{5}, 0,6H_{2}O requiere C, 56,10; H, 7,28; N, 8,72%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 9,78 (1H, s), 8,01 (1H, s), 3,87 (1H, m), 3,29 (3H, br s), 3,03 (4H, br s), 2,70-2,90 (2H, m), 2,64 (1H, dd), 1,39 (9H, s).
Preparación 119
(3R,5Z)-6-Ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-5-hexenoato de terc-butilo
193
Una suspensión de bromuro de (ciclobutilmetil)-(trifenil)fosfonio (Preparación 122) (680 mg, 1,65 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (13 ml), en atmósfera de nitrógeno, a 0ºC, se trató con bis(trimetilsilil)-amiduro de sodio 1 M en tetrahidrofurano (1,65 ml, 1,65 mmol) durante un periodo de 5 minutos. La mezcla de color anaranjado brillante se agitó a 0ºC durante 1 hora. Se añadió a la mezcla una solución de (3R)-3-{4-[(dimetilamino)-carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-5-oxopentanoato de terc-butilo (Preparación 118) (428 mg, 1,38 mmol) en tolueno (4 ml) y se agitó a 0ºC durante 30 minutos, después de lo cual se dejó calentar a la temperatura ambiente durante 30 minutos más. Se añadió agua (2 ml) y se eliminaron los disolventes a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con solución acuosa diluida de tartrato sódico-potásico y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se eliminó el disolvente a presión reducida. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de disolvente de 9:1 (hexano:acetato de etilo) que cambiaba gradualmente hasta 1:1 (hexano:acetato de etilo) para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (282 mg).
MS: 363 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 65,95; H, 8,35; N, 7,72%; C_{20}H_{30}N_{2}O_{4}, 0,1H_{2}O requiere C, 65,95; H, 8,36; N, 7,69%
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,00 (1H, s), 5,55 (1H, t), 5,11 (1H, q), 3,00-3,40 (8H, m), 2,73 (1H, dd), 2,56 (1H, dd), 2,30-2,50 (2H, m), 2,08 (2H, m), 1,70-1,90 (4H, m), 1,38 (9H, s).
Preparación 120
(3R)-6-Ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-hexanoato de terc-butilo 
\vskip1.000000\baselineskip
194
Una solución de (3R,5Z)-6-ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-hexenoato de terc-butilo
(Preparación 119) (260 mg, 0,72 mmol) en etanol (15 ml) se trató con hidróxido de paladio (250 mg) seguido por formiato de amonio (500 mg) y se agitó la mezcla a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a la temperatura ambiente y se filtró a través de Arbacel. El disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El disolvente se eliminó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un aceite incoloro (246 mg).
MS: 366 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,17 (1H, s), 3,31 (4H, m), 3,05 (3H, m), 2,70 (1H, dd), 2,59 (1H, dd), 2,22 (1H, m), 2,00 (2H, m), 1,60-1,90 (4H, m), 1,55 (2H, m), 1,30-1,40 (11H, m) 1,07 (2H, m).
Preparación 121
Ácido (3R)-6-ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-hexanoico
195
Una solución de (3R)-6-ciclobutil-3-{4-[(dimetilamino)carbonil]-1,3-oxazol-2-il}-hexanoato de terc-butilo (Preparación 120) (240 mg, 0,66 mmol) en diclorometano (4 ml) se trató con ácido trifluoroacético (1,2 ml) y se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas. Se eliminó el disolvente a presión reducida y el residuo se destiló azeotrópicamente con tolueno y diclorometano. El aceite se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con 97:3:0,3 (diclorometano:meta-nol:ácido acético) para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (161 mg).
MS: 309 (MH^{+})
^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta: 8,05 (1H, s), 3,33 (4H, m), 3,05 (3H, m), 2,87 (1H, dd), 2,67 (1H, dd), 2,20 (1H, m), 1,99 (2H, m), 1,60-1,90 (4H, m), 1,52 (2H, m), 1,36 (2H, m) 1,07 (2H, m).
Preparación 122
Bromuro de (ciclobutilmetil)(trifenil)fosfonio
196
Una solución de (bromometil)ciclobutano (4,5 ml, 0,04 mol) en tolueno (50 ml) se trató con trifenilfosfina (10,56 g, 0,04 mol) y se agitó la mezcla a reflujo, en atmósfera de nitrógeno, durante 2 días. Se dejó enfriar la mezcla a la temperatura ambiente y se trató con hexano (50 ml). El disolvente se separó por decantación y se añadió más hexano. El disolvente se separó nuevamente por decantación. El sólido se lavó con dietil-éter (x2) y se secó a presión reducida para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (6,34 g).
MS: 332 (MH^{+})
Análisis: Encontrado, C, 67,13; H, 5,88; N, 0,00%; C_{23}H_{24}PBr requiere C, 67,16; H, 5,88; N, 0,00%
^{1}H-NMR (d_{6}-DMSO) \delta: 7,65-7,90 (15H, m), 3,74 (2H, m), 2,62 (1H, br m), 1,60-1,80 (6H, m).

Claims (39)

1. Un compuesto de fórmula (I):
\vskip1.000000\baselineskip
197
en la cual:
X es C_{1-6}-alquileno o C_{2-6}-alquenileno, cada uno de los cuales está sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor;
R es arilo o C_{3-8}-cicloalquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor;
W es N o CZ;
Y y Z son cada uno independientemente H,
C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, S(O)_{p}R^{6}, OR^{5}, CONR^{1}R^{2}, CO_{2}R^{7} y arilo),
C_{1-4}-alcanoílo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos,
C_{1-4}-alcoxicarbonilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos,
o CONR^{1}R^{2};
R^{1} y R^{2} se seleccionan cada uno independientemente de H, C_{3-8}-cicloalquilo, C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5} y/o NR^{3}R^{4}),
o R^{1} y R^{2} pueden considerarse junto con el nitrógeno al cual están unidos para representar un anillo heterocíclico de 4 a 6 miembros que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos adicionales en el anillo seleccionados independientemente de N, O y S,
estando dicho anillo heterocíclico opcionalmente benzo- o pirido-condensado,
y estando dicho anillo heterocíclico sustituido opcionalmente con C_{1-4}-alquilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5}, arilo y/o NR^{3}R^{4};
o R^{3} y R^{4} pueden considerarse junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos para representar un resto morfolina, piperidina, azetidina o piperazina (sustituido opcionalmente en N con C_{1-4}-alquilo);
R^{5} es C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con CO_{2}R^{7} o CONR^{3}R^{4}, o R^{5} es arilo;
R^{6} es C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, o arilo;
R^{7} es H o R^{6};
p es 0, 1 ó 2;
"arilo" es un sistema aromático carbocíclico o heterocíclico, mono- o bicíclico, que comprende desde 5 a 10 átomos de anillo, incluyendo hasta 3 heteroátomos seleccionados de N, O y S,
donde, si existe un átomo N en el anillo, el mismo puede estar presente como el N-óxido,
estando dicho sistema de anillo(s) sustituido opcionalmente con hasta 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno, C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, C_{1-4}-alcoxi sustituido opcionalmente con uno o más halógenos, fenilo, piridilo, CO_{2}H, CONR^{3}R^{4}, CO_{2}(C_{1-4}-alquilo), NR^{3}R^{4}, OH y OC(O)(C_{1-4}-alquilo);
y las sales y solvatos (con inclusión de hidratos) farmacéuticamente aceptables del mismo.
2. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 1, en el cual el compuesto de fórmula (I) tiene la estereoquímica de la fórmula (IA):
198
3. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual W es N.
4. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el cual W es CZ, y al menos uno de Y y Z es H o C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más halógenos).
5. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 4, en el cual W es CZ y Z es H o C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de halógeno.
6. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 5, en el cual Z es H o metilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
7. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con la reivindicación 6, en el cual Z es H o metilo.
8. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual X es un resto C_{2-4}-alquileno lineal sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
9. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual R es C_{3-8}-cicloalquilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
10. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual Y es C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente de halógeno,
S(O)_{p}R^{6}, OR^{5}, CONR^{1}R^{2}, CO_{2}R^{7} y arilo), C_{1-4}-alcoxicarbonilo, o CONR^{1}R^{2}.
11. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual X es propileno.
12. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual R es ciclobutilo o ciclohexilo sustituido opcionalmente con uno o más átomos de flúor.
13. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual Y es metilo, isopropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, (pirrolidino)COCH_{2}, fenilsulfonilmetilo, 4-clorofenoximetilo, (piridin-2-il)metilo, (piridin-3-il)metilo, (piridin-4-il)metilo, (imidazol-2-il)metilo, CO_{2}(C_{1-2}-alquilo), CONH_{2}, CONH(C_{1-4}-alquilo (sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H o CO_{2}R^{5})), CON(C_{1-4}-alquil)(C_{1-4}-alquil(sustituido opcionalmente con C_{3-8}-cicloalquilo, arilo, CO_{2}H o CO_{2}R^{5})), o CONR^{1}R^{2} donde R^{1} y R^{2} se consideran junto con el nitrógeno al cual están unidos para representar un anillo heterocíclico de 4 a 6 miembros que contiene opcionalmente uno o dos heteroátomos adicionales en el anillo seleccionados independientemente de N, O y S,
y estando dicho anillo heterocíclico opcionalmente benzo- o pirido-condensado,
y estando dicho anillo heterocíclico sustituido opcionalmente con C_{1-4}-alquilo, CO_{2}H, CO_{2}R^{5}, arilo o NR^{3}R^{4}.
14. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual R es ciclobutilo o ciclohexilo.
15. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual Y es CO_{2}C_{2}H_{5}, CONH_{2}, CONHCH_{3}, CONH(n-C_{3}H_{7}), CONH(i-C_{3}H_{7}), (ciclopropil)CH_{2}NHCO, (ciclobutil)CH_{2}NHCO, (2-metoxifenil)-CH_{2}NHCO, (4-metoxifenil)CH_{2}NHCO, (piridin-2-il)CH_{2}NHCO, CONHCH_{2}CO_{2}H, CON(CH_{3})CH_{2}
CO_{2}CH_{3}, CON(CH_{3})_{2}, (4-dimetilamino-piperidinil)CO, (3-morfolinoazetidinil)CO, (4-(piridin-4-il)piperidino)CO,
(piridin-2-il)CH_{2}N(CH_{3})CO, CON(CH_{3})-CH_{2}CO_{2}H, (3-metoxicarbonilazetidinil)CO, (3-carboxi-azetidinil)CO, metilo, isopropilo, metoximetilo, 2-metoxietilo, (pirrolidino)COCH_{2}, fenilsulfonilmetilo, 4-clorofenoximetilo, (piridin-2-il)metilo, (piridin-3-il)-metilo, (piridin-4-il)metilo, (imidazol-2-il)metilo, bencilaminocarbonilo, piperidinocarbonilo, (2,3-dihidro-isoindol-2-il)CO, (1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-2-il)CO, morfolinocarbonilo, 4-metilpiperazinocarbonilo, (5-aza-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-2-il)CO o N-metilbencil-aminocarbonilo.
16. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual R es ciclohexilo.
17. Un compuesto, sal o solvato de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el cual Y es CONH_{2}, CONHCH_{3} o CON(CH_{3})_{2}.
18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que se selecciona de:
5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida;
5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N-metil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida; y
5-{(1R)-4-ciclohexil-1-[2-(hidroxiamino)-2-oxoetil]butil}-N,N-dimetil-1,2,4-oxadiazol-3-carboxamida,
y las sales y solvatos de los mismos.
19. Una sustancia de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores para uso en medicina.
20. El uso de una sustancia de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 ó 18, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección mediada por PCP.
21. Una composición farmacéutica que comprende una sustancia de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 ó 18, y un diluyente, vehículo o adyuvante farmacéuticamente aceptable.
22. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación (I), que comprende desprotección de un compuesto de fórmula (III) o (VIII),
199
según sea apropiado, donde P es un grupo protector de O y los otros sustituyentes son como se define en la reivindicación 1.
23. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (I) como se define en la reivindicación (1) que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (II) o (IX)
200
según sea apropiado, en donde L es un grupo lábil adecuado y los otros sustituyentes son como se define en la reivindicación 1, con hidroxilamina o una sal de la misma, en caso necesario con una base.
24. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (II) o (IX) como se define en la reivindicación 23, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (IV) o (X) según sea apropiado
\vskip1.000000\baselineskip
201 
\vskip1.000000\baselineskip
con un reactivo de activación adecuado para introducir el resto "L".
25. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (V)
\vskip1.000000\baselineskip
202 
\vskip1.000000\baselineskip
que comprende la condensación interna de un compuesto de fórmula (VI)
203 
\vskip1.000000\baselineskip
en la cual P es un grupo protector de O.
26. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (XI)
\vskip1.000000\baselineskip
204 
\newpage
que comprende deshidrogenar un compuesto de fórmula (XII)
205
en la cual P es un grupo protector de O.
27. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (VI) como se define en la reivindicación 25, que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (VII)
206
con un compuesto de fórmula YC(=NOH)NH_{2}.
28. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (XII) como se define en la reivindicación 26, que comprende la condensación interna de un compuesto de fórmula (XIII):
207
29. Un proceso para producir un compuesto de fórmula (XIII) como se define en la reivindicación 28, que comprende
la condensación de un compuesto de fórmula (VII) como se define en la reivindicación 27 con un compuesto de fórmula NH_{2}CH(Y)CH(Z)OH.
30. Un compuesto de fórmula (II) como se define en la reivindicación 23, en la cual L es Cl, Br, I, OCO(C_{1-4}-alquilo sustituido opcionalmente con uno o más halógenos), mesilato o tosilato.
31. Un compuesto de fórmula (III) como se define en la reivindicación 22, en la cual P es trialquilsililo o bencilo.
32. Un compuesto de fórmula (IV) como se define en la reivindicación 24.
33. Un compuesto de fórmula (V) como se define en la reivindicación 25, en la cual P es C_{1-4}-alquilo, bencilo o trialquilsililo.
34. Un compuesto de fórmula (VI) como se define en la reivindicación 25, en la cual P es como se define en la reivindicación 33.
35. Un compuesto de fórmula (VIII) como se define en la reivindicación 22, en la cual P es como se define en la reivindicación 31.
36. Un compuesto de fórmula (IX) como se define en la reivindicación 23, en la cual L es como se define en la reivindicación 30.
37. Un compuesto de fórmula (XII) como se define en la reivindicación 26, en la cual P es como se define en la reivindicación 33.
38. 3-{[(4S)-4-Bencil-2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il]carbonil}-6-ciclohexilhexanoato de terc-butilo.
39. Sal de ciclohexilamina del ácido (R)-2-[2-(terc-butoxi)-2-oxoetil]-5-ciclohexilpentanoico.
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