ES2230270T3 - Metodo para la extraccion de proteinas de una celula sencilla. - Google Patents
Metodo para la extraccion de proteinas de una celula sencilla.Info
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Abstract
Un proceso para homogeneizar un material de proteína de célula sencilla, comprendiendo dicho proceso la etapa de homogeneizar una mezcla acuosa de la proteína de célula sencilla sometiéndola a una caída de presión total en el intervalo que va de 40 MPa a 120 MPa (de 400 a 1200 bares), en el que dicho material de proteína de célula sencilla es un cultivo microbiano que comprende bacterias metanotróficas opcionalmente en combinación con una o más especies de bacterias heterotróficas.
Description
Método para la extracción de proteínas de una
célula sencilla.
La presente invención se refiere a un método para
tratar un material de célula sencilla para producir un producto que
presenta propiedades funcionales mejoradas. En particular, la
invención se refiere a un método para homogeneizar un material de
célula sencilla, por ejemplo un fango bacteriano acuoso, en el que
el material es sometido a una caída de presión bajo condiciones de
temperatura controlada.
Recientemente se ha dirigido mucha atención hacia
el desarrollo de nuevas fuentes de proteínas que pueden ser
incorporadas en alimentos para el consumo humano y/o animal. Se ha
propuesto una serie de diferentes materiales que contienen
proteínas como sustitutos de las fuentes de proteínas más
tradicionales, tales como el pescado, los productos de soja y el
plasma sanguíneo, en alimentos humanos y como piensos para
animales. Estos materiales incluyen microorganismos de célula
sencilla tales como los hongos, las levaduras y las bacterias que
contienen elevadas proporciones de proteínas. Éstos pueden ser
cultivados mediante reproducción de célula sencilla y se han
desarrollado diversos procesos sintéticos de producción de
proteínas mediante el crecimiento de microorganismos de célula
sencilla sobre hidrocarburos o sobre otros sustratos.
Hoy día, los microorganismos que contienen
proteínas (también denominados aquí "proteínas de célula
sencilla") más comúnmente usados son los derivados de hongos o
de levaduras.
Los materiales de proteína de célula sencilla
pueden ser utilizados directamente en alimentos, por ejemplo en la
forma de producto secado por pulverización. Sin embargo, su uso
extendido tanto en productos alimenticios para humanos como para
animales está limitado por sus propiedades funcionales. Por ejemplo,
presentan pobres propiedades de gelificación y emulsión, así como
una capacidad de unión a aceite limitada.
Se han propuesto diversos métodos para mejorar
las propiedades de materiales de proteína de célula sencilla,
particularmente para el uso en productos alimenticios para humanos.
Por ejemplo, el documento
US-A-3843807 (Standard Oil Company)
describe un método para texturizar microorganismos de célula
sencilla que contienen proteínas, en el que se extruye una pasta
acuosa de levadura que contiene una mezcla de células tanto rotas
como completas. Las etapas posteriores de calefacción y de secado
dan como resultado un producto que presenta las propiedades
deseadas tales como la masticabilidad, la crujibilidad y la
resistencia a la dispersión en agua, haciéndolo particularmente
adecuado para el uso como aditivo en alimentos para humanos, por
ejemplo en mezclas de salchicha y
hamburguesa.
hamburguesa.
Las proteínas de célula sencilla que presentan
propiedades funcionales mejoradas también han sido obtenidas por
tratamiento térmico de una mezcla de levadura acuosa (véase el
documento US-A-4192897 a nombre de
Standard Oil Company). El producto tratado térmicamente potencia el
sabor y aumenta la textura suave en la boca en alimentos para
humanos tales como aliños para ensalada, mezclas de salsa para
tacos, salsa stroganoff y salsa para
pizza.
pizza.
Con el uso creciente de microorganismos que
contienen proteínas como sustituto para la fuente de proteínas
tradicionales, existe una necesidad continua de métodos
alternativos para mejorar o para variar las propiedades funcionales
de dichos materiales para hacerlos más aceptables en diversas
aplicaciones para alimentos.
Se ha descubierto ahora que las propiedades
funcionales de proteínas de célula sencilla pueden ser variadas y/o
mejoradas sometiendo a dichas materias a un proceso de
homogeneización, en particular a un proceso mecánico capaz de
provocar la rotura o la desintegración celular, por ejemplo un
proceso de homogeneización a elevada presión en el que la materia
que contiene proteína de célula sencilla es sometida a una caída de
presión. El producto homogeneizado resultante presenta propiedades
funcionales mejoradas, tales como la formación de gel, la unión a
agua, la unión a aceite y las propiedades de emulsión, cuando es
usado como una proteína nutricional tanto en alimentos para humanos
como en alimentos para animales.
Por tanto, de acuerdo con un aspecto, la presente
invención proporciona un proceso para conferir propiedades
funcionales mejoradas a una materia de proteína de célula sencilla,
comprendiendo dicho proceso la etapa de homogeneizar una mezcla
acuosa de la proteína de célula sencilla. El material de proteína
homogeneizado producido mediante dicho método constituye un aspecto
adicional de la invención.
La homogeneización se puede llevar a cabo
mediante cualquier medio convencional. Preferiblemente, la
homogeneización es llevada a cabo usando un homogeneizador de alta
presión, por ejemplo sometiendo al material de célula sencilla a un
cambio de presión, preferiblemente una caída de presión, capaz de
provocar la desintegración celular. Típicamente, el material puede
ser sometido a una caída de presión en el intervalo de entre 40 MPa
y 120 MPa (de 400 a 1200 bares), más preferiblemente de entre 50
MPa y 110 MPa (de 500 a 1100 bares), por ejemplo de entre 60 MPa y
100 MPa (de 600 a 1000 bares). Generalmente, la caída de presión
será instantánea.
Más específicamente, la invención proporciona un
proceso para conferir propiedades funcionales mejoradas a un
material de proteína de célula sencilla, comprendiendo dicho proceso
las siguientes etapas:
- (a)
- preparar una mezcla acuosa de un material de célula sencilla;
- (b)
- someter la mezcla a una caída de presión capaz de provocar la desintegración celular, por ejemplo una caída de presión en el intervalo de entre 40 MPa y 120 MPa, preferiblemente de entre 50 MPa y 110 MPa, por ejemplo de entre 60 MPa y 100 MPa, mediante la cual se produce un producto homogeneizado; y
- (c)
- opcionalmente secar el producto homogeneizado.
En otro aspecto adicional, la invención
proporciona un material de proteína de célula sencilla o un
homogenato que contiene proteína derivado de un material de célula
sencilla, preferiblemente una biomasa bacteriana homogénea.
Tal como se usa aquí, los términos
"homogeneizado" u "homogenato", etc., pretenden referirse
a cualquier producto que ha sido fabricado o se ha vuelto homogéneo,
preferiblemente un producto que ha sido sometido a un proceso de
homogeneización. El término "homogéneo" pretende abarcar
cualquier dispersión, suspensión o emulsión sustancialmente uniforme
de componentes celulares. En términos generales, cualquier producto
que presente un grado de homogeneidad de al menos el 60% o, más
preferiblemente, de al menos el 70 ó el 80%, puede ser considerada
sustancialmente homogénea. Una dispersión, suspensión o emulsión
sustancialmente homogénea puede presentar, por ejemplo, un grado de
homogeneidad por encima del 90%, preferiblemente por encima del
95%.
Típicamente, el proceso de homogeneización de
acuerdo con la invención incluirá el tratamiento del material de
microbiano de célula sencilla en la forma de una pasta o mezcla
acuosa fluida. Generalmente consistirá esencialmente en material
celular entero, aunque también puede haber presente una proporción
de material celular roto.
Los organismos unicelulares tales como las
bacterias consisten en un elevado número de células extremadamente
pequeñas que contienen cada una proteína encapsulada dentro de la
estructura de la pared celular. Las paredes celulares son
relativamente rígidas y sirven para proporcionar soporte mecánico.
Durante el proceso de homogeneización de la invención, las paredes
de las células microbianas son rotas por lo que se libera una
porción de proteína procedente del interior de la estructura
celular. Esto se puede lograr, por ejemplo, mediante una secuencia
de presurización y despresurización del material de célula
sencilla. La homogeneización puede ser llevada a cabo mediante la
presurización del material hasta una presión de 150 MPa (1500
bares), preferiblemente hasta 140 MPa (1400 bares), por ejemplo
hasta 120 MPa (1200 bares). Sin embargo, se cree que es realmente
la caída de presión la que determina la eficacia del proceso, y las
caídas presión típicas caen dentro del intervalo de 40 MPa a 120
MPa, más preferiblemente de 50 MPa a 110 MPa, por ejemplo de 60 MPa
a 100 MPa.
Típicamente el proceso será llevado a cabo en un
homogeneizador industrial, disponible por ejemplo en APV Rannie,
Dinamarca, en condiciones de temperatura controlada, preferiblemente
a una temperatura de menos de 50ºC, particularmente de forma
preferible entre 25 y 50ºC, por ejemplo entre 25 y 35ºC.
Otros métodos usados en la técnica pueden ser
usados para llevar a cabo la homogeneización de acuerdo con la
invención. Por ejemplo, la homogeneización puede ser llevada a cabo
sometiendo al material de célula sencilla a fuerzas de cizalla
capaces de romper las paredes celulares. Esto se puede lograr usando
un mezclador en el que se hace pasar el material a través de una
zona en la que se ejercen fuerzas de cizalla sobre él mediante el
uso de superficies que se mueven unas respecto a otras.
Generalmente, se crearán fuerzas de cizalla entre una superficie en
movimiento, por ejemplo una superficie rotatoria, y una superficie
estática, es decir, como en un rotor-estátor tal
como el descrito en el documente WO99/08782.
Se pueden usar otras técnicas conocidas para el
uso en métodos de desintegración celular mecánica, por ejemplo el
molino de bolas a alta velocidad, para llevar a cabo la
homogeneización. También se pueden usar métodos de
ultrasonidos.
Cualquier material de proteína de célula sencilla
puede ser tratado de acuerdo con el proceso de la invención. Sin
embargo, los microorganismos preferidos incluyen bacterias y
levaduras. Se puede usar cualquier bacteria o levadura aprobada
para su uso en productos alimenticios, y las especies adecuadas
pueden ser seleccionadas fácilmente por aquellos con conocimientos
en la técnica. Particularmente de forma preferible, el material de
proteína de célula sencilla para su uso en la invención será un
cultivo microbiano que consiste en bacterias metanotróficas
opcionalmente en combinación con una o más especies de bacterias
heterotróficas, especialmente de forma de preferible una combinación
de bacterias metanotróficas y heterotróficas. Tal como se usa aquí,
el término "metanotrófica" abarca cualquier bacteria que
utiliza metano o metanol para su crecimiento. El término
"heterotrófica" se usa para bacterias que utilizan para su
crecimiento sustratos orgánicos distintos del metano o del
metanol.
metanol.
De forma conveniente, el material de célula
sencilla puede ser producido mediante un proceso de fermentación en
el que se alimenta oxígeno y un sustrato adecuado tal como un
hidrocarburo, un alcohol o carbohidrato líquido o gaseoso, por
ejemplo metano, metanol o gas natural, junto con una disolución
mineral nutriente, a un reactor tubular que contiene
microorganismos. En la técnica se conocen bien y se han descrito
una serie de procesos como
éste.
éste.
Para su uso en la invención son particularmente
preferidos los materiales de célula sencilla derivados de la
fermentación de fracciones de hidrocarburos o de gas natural. Son
especialmente preferidas las proteínas de célula sencilla derivadas
de la fermentación de gas natural. Según aumenta la concentración de
microorganismos dentro del fermentados, una porción del contenido o
del caldo del reactor es retirada y los microorganismos pueden ser
separados mediante técnicas bien conocidas en la técnica, por
ejemplo mediante centrifugación y/o ultrafiltración. De forma
conveniente, en dicho proceso de fermentación, el caldo será
retirado de forma continua del fermentador y tendrá una
concentración de células de entre el 1 y el 5% en peso, por ejemplo
de aproximadamente el 3% en
peso.
peso.
Los materiales de célula sencilla producidos a
partir de dos o más microorganismos pueden ser tratados de acuerdo
con la invención. Aunque estos pueden ser producidos en el mismo o
en distintos fermentadores, generalmente serán producidos en el
mismo fermentador bajo condiciones de fermentación idénticas. Los
materiales producidos a partir de procesos de fermentación
separados pueden ser mezclados antes de la homogeneización de
acuerdo con el proceso de la invención.
Las bacterias preferidas para su uso en la
invención incluyen la Methylococcus capsulatus (Bath), una
bacteria termófila originalmente aislada de manantiales de agua
caliente en Bath, Inglaterra, y depositada como NCIMB 11132 en The
National Collections of Industrial and Marine Bacteria, Aberdeen,
Escocia. La M. capsulatus (Bath) presenta un crecimiento
óptimo a aproximadamente 45ºC, aunque el crecimiento se puede
producir entre 37 y 52ºC. Es una célula
gram-negativa esférica, que se presenta normalmente
por pares. Las membranas intracelulares están dispuestas como
agrupaciones de discos vesiculares características de metanotrofos
de Tipo I. La M. capsulatus (Bath) es genéticamente un
organismo muy estable sin plásmidos conocidos. Puede utilizar
metano o metanol para el crecimiento, y amoníaco, nitrato o
nitrógeno molecular como fuente de nitrógeno para la síntesis de
proteínas.
Otras bacterias adecuadas para el uso en la
invención incluyen las bacterias heterotróficas Alcaligenes
acidovorans DB3 (cepa NCIMB 12387), Bacillus firmus DB5
(cepa NCIMB 13280) y Bacillus brevis DB4 (cepa NCIMB 13288)
que tiene cada una un crecimiento óptimo a la temperatura
aproximada de 45ºC.
La A. acidovorans DB3 es una bacteria gram
negativa, aeróbica, de vara, que pertenece a la familia
Pseudomonadaceae que puede usar etanol, acetato, propionato
y butirato para el crecimiento. La B. brevis DB4 es una
bacteria gram negativa, formadora de endosporas, aeróbica, de vara,
que pertenece al género Bacillus que puede utilizar acetato,
D-fructosa, D-manosa, ribosa y
D-tagatosa. La B. firmus DB5 es una bacteria
gram negativa, formadora de endosporas, aeróbica, de vara, del
género Bacillus que puede utilizar acetato,
N-acetil-glucosamina, citrato,
gluconato, D-glucosa, glicerol y manitol.
Las levaduras adecuadas para el uso en el proceso
de la invención pueden ser seleccionadas del grupo que consiste en
Saccharomyces y Candida.
Un ejemplo de un proceso de fermentación que usa
gas natural como única fuente de carbono y de energía es el descrito
en el documento EP-A-306466 (Dansk
Bioprotein). Este proceso se basa en la fermentación continua de la
bacteria metanotrófica M. capsulatus cultivada en metano. Se
usa aire puro u oxígeno para la oxigenación, y se usa amoníaco como
fuente de nitrógeno. Además de estos sustratos, el cultivo
bacteriano normalmente requerirá agua, fosfato (por ejemplo, en
forma de ácido fosfórico) y diversos minerales que pueden incluir
magnesio, calcio, potasio, hierro, cobre, cinc, manganeso, níquel,
cobalto y molibdeno, usados típicamente en la forma de sulfatos,
cloruros o nitratos. Todos los minerales usados en la producción
del material de célula sencilla deberían presentar calidades de
grado alimenticio.
El gas natural consiste principalmente en metano,
aunque su composición variará entre diferentes campos gasísticos.
Típicamente, se puede esperar que el gas natural contenga
aproximadamente un 90% en metano, aproximadamente un 5% de etano,
aproximadamente un 2% de propano y algunos hidrocarburos superiores.
Durante la fermentación del gas natural, el metano es oxidado
mediante bacterias metanotróficas para dar lugar a biomasa y a
dióxido de carbono. El metanol, el formaldehído y el ácido fórmico
son intermedios metabólicos. El formaldehído y en determinado grado
el dióxido de carbono son asimilados por la biomasa. Sin embargo,
las bacterias metanotróficas son incapaces de usar sustratos que
comprendan enlaces carbono-carbono para el
crecimiento, y los demás componentes del gas natural, esto es, el
etano, el propano y las pequeñas cantidades de hidrocarburos
superiores, son oxidados por las bacterias metanotróficas para
producir los correspondientes ácidos carboxílicos (por ejemplo, el
etano es oxidado a ácido acético). Dichos productos pueden ser
inhibidores de las bacterias metanotróficas y, por lo tanto, es
importante que sus concentraciones permanezcan bajas,
preferiblemente por debajo de 50 mg/l, durante la producción de la
biomasa. Una solución para este problema es el uso combinado de una
o más bacterias heterotróficas que sean capaces de utilizar los
metabolitos producidos por las bacterias metanotróficas. Dichas
bacterias también son capaces de utilizar materia orgánica liberada
al caldo de fermentación durante la lisis celular. Esto es
importante con el fin de evitar la formación de espuma, y también
sirve para minimizar el riesgo de que el cultivo sea contaminado
con bacterias no deseadas. Una combinación de bacterias
metanotróficas y heterotróficas da como resultado un cultivo
estable y de alto
rendimiento.
rendimiento.
Durante la producción del material de célula
sencilla, el pH de la mezcla de fermentación estará regulado
generalmente entre aproximadamente 6 y 7, por ejemplo en 6,5 \pm
0,3. Los ácidos/bases adecuados para la regulación del pH pueden
ser seleccionados fácilmente por aquellos con conocimientos en la
técnica. Particularmente adecuado para el uso a este respecto son el
hidróxido sódico y el ácido sulfúrico. Durante la fermentación,
preferiblemente la temperatura dentro del fermentador debería ser
mantenida en el intervalo entre 40ºC y 50ºC, más preferiblemente en
45ºC \pm 2ºC.
Especialmente preferido para el uso en la
invención es un cultivo microbiano que comprende una combinación de
la bacteria metanotrófica Methylococus capsulatus (Bath)
(cepa NCIMB 11132), y la bacteria heterotrófica Alcaligenes
acidovorans DB3 (cepa NCIMB 12387) y la Bacillus firmus
DB 5 (cepa NCIMB 13280), opcionalmente en combinación con
Bacillus brevis DB4 (cepa NCIMB 13288). El papel de la A.
acidovorans DB3 es utilizar el acetato y el propionato
producidos por la M. capsulatus (Bath) a partir del etano y
del propano del gas natural. La A. acidovorans DB3 puede
constituir hasta el 10%, por ejemplo aproximadamente del 6 al 8%, de
la cantidad total de células de la biomasa resultante. El papel del
B. brevis DB4 y del B. firmus DB5 es el de utilizar
los productos de lisis y los metabolitos del medio. Típicamente, el
B. brevis DB4 y el B. firmus DB5 constituirán cada uno
menos del 1% del total de células durante la fermentación
continua.
Los fermentadores adecuados para su uso en la
preparación del material de célula sencilla son los de tipo lazo,
tales como los descritos en los documentos DK 1404/92,
EP-A-418187 y
EP-A-306466 de Dansk Bioprotein, o
los reactores neumáticos. Un fermentador de tipo lazo que presenta
mezcladores estáticos da como resultado una elevada utilización de
los gases (por ejemplo, de hasta el 95%) debido a las
características de flujo pistón del fermentador. Los gases son
introducidos en diferentes posiciones a lo largo del lazo y
permanecen en contacto con el líquido hasta que son separados en la
zona de cabeza al final del lazo. La fermentación continua puede
ser alcanzada usando un 2-3% de biomasa (en base a
peso seco) y una velocidad de dilución de 0,02 a 0,50 h^{-1}, por
ejemplo de 0,05-
0,25 h^{-1}.
0,25 h^{-1}.
Se pueden usar otros fermentadores para preparar
el material de célula sencilla, que incluyen los fermentadores
tubulares y los de tanque agitado.
Idealmente, la biomasa producida a partir de la
fermentación de gas natural comprenderá entre un 60 y un 80% en peso
de proteína cruda; entre un 5 y un 20% en peso de grasa cruda;
entre un 3 y un 10% en peso de ceniza; entre un 3 y un 15% en peso
de ácidos nucleicos (ARN y ADN); entre 10 y 30 g/kg de fósforo;
hasta 350 mg/kg de hierro; y hasta 120 mg/kg de cobre. De forma
particularmente preferible, la biomasa comprenderá entre 68 y 73%,
por ejemplo aproximadamente 70% en peso, de proteína cruda; entre 9
y 11%, por ejemplo aproximadamente 10% en peso, de grasa cruda;
entre 5 y 10%, por ejemplo 7% en peso, de ceniza; entre 8 y 12%,
por ejemplo aproximadamente 10% en peso, de ácidos nucleicos (ARN y
ADN); entre 10 y 25 g/kg de fósforo; hasta 310 mg/kg de hierro; y
hasta 110 mg/kg de cobre. El perfil de aminoácidos del contenido de
proteína debería ser nutricionalmente favorable, con una elevada
proporción de los aminoácidos más importantes, cisteína, metionina,
treonina, lisina, triptófano y arginina. Normalmente éstos pueden
estar presentes en cantidades de aproximadamente 0,7%, 3,1%, 5,2%,
7,2%, 2,5% y 6,9%, respectivamente (expresado como tanto por ciento
de la cantidad total de aminoácidos). Generalmente, los ácidos
grasos comprenderán principalmente el ácido palmítico saturado
(aproximadamente 50%) y el ácido palmitoleico monoinsaturado
(aproximadamente 36%). El contenido mineral del producto
comprenderá típicamente grandes cantidades de fósforo
(aproximadamente 1,5% en peso), potasio (aproximadamente 0,8% en
peso) y magnesio (aproximadamente 0,2% en peso).
Generalmente, los materiales de proteína de
célula sencilla obtenidos a partir de un proceso de fermentación
continua serán sometidos a centrifugación y a filtración, por
ejemplo a ultrafiltración, procesos destinados a eliminar la mayor
parte del agua presente y a formar una pasta o mezcla acuosa antes
de la homogeneización. Durante la centrifugación el contenido en
materia seca de la biomasa normalmente aumenta desde
aproximadamente el 2 hasta aproximadamente el 15% en peso, por
ejemplo hasta aproximadamente el 12% en peso.
La ultrafiltración, que puede ser llevada a cabo
a una temperatura de entre 40 y 50ºC, por ejemplo entre 42 y 46ºC,
concentra aún más la biomasa para formar un producto que contiene
entre el 10 y el 30%, preferiblemente entre el 15 y el 25%, por
ejemplo entre el 15 y el 22% en peso de material de célula sencilla.
La exclusión por tamaños usada durante la ultrafiltración
generalmente será en el intervalo de aproximadamente 100.000
Daltons.
Después de la ultrafiltración, la biomasa puede
ser enfriada, preferiblemente hasta una temperatura de entre 10 y
30ºC, por ejemplo a aproximadamente 15ºC, por ejemplo haciendo
pasar la mezcla de proteína concentrada procedente de la unidad de
ultrafiltración a través de un cambiador de calor que puede estar
colocado en un tanque a temperatura constante, por ejemplo durante
un periodo de entre 1 y 24 horas, preferiblemente entre 5 y 15
horas, por ejemplo de 5 a 12 horas, a una temperatura de entre 10 y
20ºC, más preferiblemente entre 5 y 15ºC, a un pH en el intervalo
de entre 5,5 y 6,5.
La homogeneización puede ser llevada a cabo en un
homogeneizador convencional de alta presión en el que las células
pueden ser desintegradas en primer lugar presurizando, por ejemplo
hasta una presión de 150 MPa (1500 bares), y a continuación
despresurizando el interior del homogeneizador. Preferiblemente, la
caída de presión total aplicada a la biomasa estará en el intervalo
de 40 MPa a 120 MPa (de 400 a 1200 bares), por ejemplo
aproximadamente 80 MPa (800 bares). La caída de presión puede
realizarse de forma escalonada, es decir puede comprender una o más
etapas, aunque generalmente comprenderá una o dos etapas,
preferiblemente una única etapa. En los casos en los que la
homogeneización se lleva a cabo como un proceso de dos etapas es
preferible que la caída de presión de la segunda etapa represente
menos de 1/5, preferiblemente menos de 1/10, por ejemplo
aproximadamente 1/20 de la caída total de presión en el
homogeneizador. La temperatura del material durante la
homogeneización preferiblemente no debería exceder los 50ºC.
El proceso de homogeneización descrito aquí da
como resultado la producción de un producto que comprende,
preferiblemente que consiste esencialmente en, material celular
desintegrado. Por ejemplo, el material celular desintegrado estará
presente en una cantidad de al menos el 80%, preferiblemente de al
menos el 90% en peso. Normalmente, el producto será una mezcla de
proteínas relativamente viscosa que contiene componentes celulares
particulados y solubles. Aunque puede ser usada directamente como
aditivo en productos alimenticios, normalmente será procesada aún
más para eliminar el exceso de agua del agua. La elección de
cualquier etapa o etapas de secado adicionales dependerá del
contenido de agua del producto después de la homogeneización y del
contenido de humedad deseado en el producto final.
Normalmente, el producto será procesado aún más
de acuerdo con técnicas de secado por pulverización bien conocidas
en la técnica. Se puede usar cualquier secador por pulverización
con o sin unidades de lecho fluido, por ejemplo el secador por
pulverización Tipo 3-SPD disponible en APV Anhydro,
Dinamarca. Preferiblemente, la temperatura de entrada del aire al
secador por pulverización puede ser de aproximadamente 300ºC y la
temperatura de salida puede ser de aproximadamente 90ºC.
Preferiblemente, el producto resultante tendrá un contenido en agua
de entre aproximadamente el 2 y el 10% en peso, por ejemplo entre
el 6 y el 8% en peso. El producto resultante normalmente tendrá un
tamaño de partícula de entre 0,1 y 0,5 mm.
De forma particularmente preferible, la etapa de
homogeneización vendrá seguida inmediatamente de un secado por
pulverización. De forma alternativa, puede ser necesario, o incluso
deseable, almacenar o mantener el producto homogeneizado, por
ejemplo en un tanque de almacenamiento, antes de continuar con el
procesado. En ese caso, se ha descubierto que las condiciones bajo
las cuales el producto es almacenado pueden reducir las propiedades
de gelificación del producto final después del secado por
pulverización. Las propiedades de gelificación del material
homogeneizado pueden mantenerse almacenándolo a una temperatura
inferior a los 20ºC y a un pH < 7, preferiblemente < 6,5, de
forma particularmente preferible a un pH en el intervalo entre 5,5
y 6,5, por ejemplo entre 5,8 y 6,5. En estas condiciones, el
producto puede ser almacenado por hasta 24 horas sin ninguna pérdida
sustancial de las propiedades de gelificación.
En otro aspecto adicional, la invención
proporciona por tanto un método para mantener las propiedades
funcionales de un material de proteína de célula sencilla
homogeneizado, comprendiendo dicho método la etapa de almacenar
dicho material a una temperatura inferior a los 20ºC y a un pH
inferior a aproximadamente 6,5.
Los productos producidos mediante el proceso de
la invención presentan propiedades altamente deseables, que los
hacen particularmente adecuados para el uso en productos
alimenticios tanto para humanos como para animales, tanto por sí
solos como combinados con otras fuentes de proteínas. En particular,
al contrario que el material de proteína de célula sencilla
original, el producto homogeneizado presenta propiedades
funcionales mejoradas tales como la formación de gel, la unión a
agua, la unión a aceite y las propiedades de emulsión. Por ejemplo,
el producto de la invención presenta una formación de gel mejorada
cuando se mezcla con productos de calidad alimenticia
convencionales, en particular con polisacáridos tales como
alginatos y/o carragenatos. Además, se observa una capacidad de
unión a aceite mejorada al mezclar el producto con aceites tales
como el aceite de soja o el aceite de pescado. Típicamente, una
disolución al 15% (p/p) de un producto homogeneizado producido de
acuerdo con la invención puede presentar una fuerza de gel (módulo
elástico) en el intervalo de entre 1000 y 2000 Pa, por ejemplo de
aproximadamente 1500 Pa.
En otro aspecto más, la invención proporciona el
uso de un material de proteína de célula sencilla homogeneizado como
el descrito aquí como agente de gelificación, como emulgente o como
ligante de aceite o de agua en la preparación de un producto
alimenticio para humanos o para animales.
El producto de la invención es especialmente útil
como proteína funcional en productos alimenticios, particularmente
cuando es usado como sustituto del plasma natural en piensos para
animales y en comida para mascotas. Cuando se usa en comida para
mascotas, se pueden añadir ingredientes adicionales al producto
tales como grasas, azúcares, sales, aromatizantes, minerales, etc.
El producto puede ser conformado a continuación en trozos que
simulen la apariencia y la textura de los trozos de carne natural.
El producto de la invención además presenta las ventajas de que es
fácilmente formulado para que contenga los nutrientes necesarios,
es fácilmente digerible por animales y es sabroso para los
animales.
El producto de la invención puede encontrar un
uso adicional como texturizante de productos cárnicos (por ejemplo,
en bolas de carne), como sustituto de proteínas de plasma usadas
convencionalmente como extensores en la carne fresca para aumentar
el peso y el volumen, como emulgente (por ejemplo, en aliños,
etc.), y en productos de bollería para potenciar las propiedades de
la masa.
Cuando se usa en productos alimenticios, el
material homogeneizado será usado típicamente en una cantidad de
entre 1 y 10% en peso, preferiblemente hasta 5% en peso. La
proporción exacta dependerá de la función deseada del material y
puede ser determinada fácilmente por aquellos con conocimientos en
la técnica. Típicamente, cuando se usa como agente de gelificación
puede estar presente en una cantidad de hasta el 20% en peso, por
ejemplo del 5 al 10% en peso (en base al contenido de materia seca
del producto).
En un aspecto adicional, la invención proporciona
un producto o aditivo de grado alimenticio, por ejemplo un pienso
para animales o para mascotas, que comprende un material de célula
sencilla homogeneizado como el descrito aquí.
En otro aspecto adicional, la invención
proporciona un alimento para mascotas que comprende trozos de un
material de célula sencilla homogeneizado como el descrito
aquí.
Ahora se describirá una realización preferida de
la invención en referencia a la Figura 1 adjunta que ilustra de
forma esquemática un aparato para su uso en la preparación de un
material de célula sencilla homogeneizado de acuerdo con la
invención.
En referencia a la Figura 1, la Methylococcus
capsulatus (Bath) NCIMB 11132 es producida en el fermentador 1
mediante una fermentación continua de gas natural en un medio de
sales minerales y de amonio (AMS) a 45ºC, pH 6,5, y a una velocidad
de dilución de 0,15 h^{-1}. El medio AMS contiene las siguientes
cantidades por litro: 10 mg de NH_{3}, 75 mg de
H_{3}PO_{4}\cdot2H_{2}O, 380 mg de
MgSO_{4}\cdot7H_{2}O, 100 mg de CaCl_{2}\cdot2H_{2}O,
200 mg de K_{2}SO_{4}, 75 mg de FeSO_{4}\cdot7H_{2}O, 1,0
mg de CuSO_{4}\cdot5H_{2}O, 0,96 mg de
ZnSO_{4}\cdot7H_{2}O, 120 \mug de
CoCl_{2}\cdot6H_{2}O, 48 \mug de
MnCl_{2}\cdot4H_{2}O, 36 \mug de H_{3}BO_{3}, 24 \mug
de NiCl_{2}\cdot6H_{2}O y 1,20 \mug de
NaMoO_{4}\cdot2H_{2}O. El factor limitante es el oxígeno.
El fermentador se rellena con agua que ha sido
esterilizada térmicamente a 125ºC durante 10 segundos. La adición de
los distintos componentes es regulada de acuerdo a su consumo. La
fermentación continua se lleva a cabo con un 2-3% de
biomasa (en una base de peso seco).
El material de célula sencilla resultante es
extraído continuamente. A continuación es sometido a centrifugación
en una centrífuga 2 en la que el contenido en materia seca aumenta
desde aproximadamente 2 hasta 15% en peso. La biomasa acuosa
resultante es transferida a un tanque de almacenamiento (no
mostrado) donde es mantenida, por ejemplo, a una temperatura de
entre 5 y 15ºC.
La biomasa bacteriana es concentrada aún más
hasta un producto que contiene entre 15 y 22% en peso de biomasa,
usando una unidad de ultrafiltración 3 que tiene un tamaño de
exclusión de 100.000 Daltons. La temperatura durante la
ultrafiltración normalmente es mantenida entre 40 y 50ºC. Después de
la ultrafiltración la biomasa es enfriada, por ejemplo, hasta una
temperatura de entre 10 y 30ºC, haciendo pasar la mezcla de
proteína concentrada procedente de la unidad de ultrafiltración a
través de un cambiador de calor (no mostrado). Después de eso, la
mezcla de proteínas puede ser mantenida en un tanque de
almacenamiento (no mostrado) a una temperatura constante. El
producto resultante es un cultivo estable libre de contaminación
por bacterias no deseadas.
Con el fin de minimizar el uso de agua y de
minimizar la cantidad de agua residual, el agua procedente de la
centrífuga 2 y/o de la unidad de ultrafiltración 3 es recirculada
al fermentador después de un pequeño tratamiento térmico.
La homogeneización de la biomasa bacteriana es
llevada a cabo en un homogeneizador industrial de alta presión 4. La
mezcla de proteínas procedente del tanque de almacenamiento es
bombeada continuamente a través del homogeneizador en el que las
células son desintegradas mediante la presurización y el inmediato
descenso de la presión dentro del homogeneizador. La caída de
presión total dentro del homogeneizador variará típicamente entre 60
MPa y 100 MPa (de 600 a 1000 bares). Durante la homogeneización se
mantiene la temperatura preferiblemente por debajo de 50ºC.
Después de la homogeneización, la mezcla de
proteínas relativamente viscosa que contiene los componentes
celulares particulados y solubles es secada por pulverización en el
secador por pulverización 5. El secado por pulverización con una
temperatura de entrada del aire de aproximadamente 300ºC y con una
temperatura de salida de aproximadamente 90ºC da como resultado un
producto final que presenta un contenido en agua de entre 6 y 8% en
peso.
La proteína homogeneizada resultante forma
distintos geles después de ser calentada hasta temperaturas por
encima de 60ºC y se ser enfriada a continuación hasta temperatura
ambiente con concentraciones de proteínas que oscilan entre 7,5 y
15% en peso. Las condiciones adecuadas para la formación de gel
incluyen un intervalo de pH entre 5,7 y 7,0 en el que el pH es
controlado usando una disolución tampón tal como un tampón de
fosfato o de citrato en concentraciones que oscilan entre 50 y 200
mmol.
La formación mejorada de gel se observa cuando el
producto homogeneizado es mezclado con polisacáridos tales como el
almidón, el alginato y el carrageno iota y kappa. La adición de
entre un 0,5 y un 1,0% en peso de carragenano al producto (de 7,5 a
15%) en una disolución acuosa de cloruro potásico a entre el 0,1 y
el 2,0%, a un pH que oscila entre 5 y 7,5, potencia enormemente la
resistencia del gel, lo que indica una interacción sinérgica entre
el producto y los polisacáridos. También se han observados efectos
sinérgicos similares en la reología y en la formación del gen
cuando se mezcla el producto con diversas fuentes de almidón (en
cantidades de entre 3 y 10% de concentración final de almidón)
tales como almidón purificado y almidón modificado químicamente que
contienen diversas cantidades de amilosa y de amilopectina.
Las propiedades de emulsión del producto
homogeneizado se demuestran mezclando la proteína (entre el 2 y el
4%) en una disolución de cloruro sódico a un pH de entre 5 y 7 con
aceite de soja (concentración final del 20 al 40%). Esta disolución
es mezclada en mezclador thurrax durante 20 segundos antes de la
preparación de la emulsión en un microfluidizador a una presión de
70 MPa (700 bares) siendo recirculada la emulsión a través del
microfluidizador cuatro veces. Las emulsiones producidas a partir
del producto homogeneizado pueden ser estabilizadas aún más
mediante la adición de xantano (por ejemplo, en una cantidad de
entre 0,1 y 0,5% en peso) antes de mezclar las materias de
partida.
La capacidad de unirse a aceite del material
homogeneizado se demuestra mezclando el producto con aceites tales
como el aceite de soja o el aceite de pescado en una mezcla, por
ejemplo mezclando 0,5 g del producto homogeneizado en 3 ml de
aceite de soja seguido de la incubación durante 30 minutos a
temperatura ambiente. Debido a la adsorción de aceite, se puede
esperar que el peso del producto aumente entre un 50 y un 80%.
Los siguientes ejemplos, no limitantes, sirven
para ilustrar en mayor profundidad la invención.
Se produce un cultivo microbiano que comprende
Methylococcus capsulatus (Bath) (cepa NCIMB 11132),
Alcaligenes acidovorans DB3 (cepa NCIMB 12387) y Bacillus
firmus DB 5 (cepa NCIMB 13280), en un fermentador de tipo lazo
mediante la fermentación aeróbica continua de gas natural en un
medio de sales de amonio y minerales (AMS) a 45ºC, pH 6,5, y con
una velocidad de dilución de 0,15 h^{-1}. El medio AMS contiene
las siguientes cantidades por litro: 10 mg de NH_{3}, 75 mg de
H_{3}PO_{4}\cdot2H_{2}O, 380 mg de
MgSO_{4}\cdot7H_{2}O, 100 mg de CaCl_{2}\cdot2H_{2}O,
200 mg de K_{2}SO_{4}, 75 mg de FeSO_{4}\cdot7H_{2}O, 1,0
mg de CuSO_{4}\cdot5H_{2}O, 0,96 mg de
ZnSO_{4}\cdot7H_{2}O, 120 \mug de
CoCl_{2}\cdot6H_{2}O, 48 \mug de MnCl_{2}\cdot4H_{2}O,
36 \mug de H_{3}BO_{3}, 24 \mug de
NiCl_{2}\cdot6H_{2}O y 1,20 \mug de
NaMoO_{4}\cdot2H_{2}O.
El fermentador se llena con agua que ha sido
esterilizada térmicamente a 125ºC durante 10 segundos. La adición de
los distintos nutrientes es regulada de acuerdo a su consumo. La
fermentación continua se lleva a cabo con un 2-3% de
biomasa (en base al peso seco).
Se recoge de forma continua un material de célula
sencilla que presenta las siguientes características:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
La biomasa es sometida a centrifugación en una
centrífuga industrial continua a 3.000 rpm, seguido de
ultrafiltración usando membranas que tienen un tamaño de exclusión
de 100.000 Daltons. El producto resultante es sometido a
continuación a homogeneización en un homogeneizador industrial
(caída de presión: 1000 bares (100 MPa); temperatura de entrada:
15ºC) para producir una biomasa homogeneizada de acuerdo con la
invención.
La coagulación puede medirse como un incremento
en el módulo elástico (G') ya que la proteína se desnaturaliza por
acción del calor. Esto puede ser llevado a cabo en un reómetro Paar
Physica UDS200 usando un disolución al 15% (p/p) de la biomasa
homogeneizada en Na-fosfato 0,2 M, pH 7,2. El
instrumento mide G' a una tensión constante (1 x 10^{-3} Pa) y a
una frecuencia constante (1 Hz) mientras que la temperatura es
variada como se indica a continuación:
| De 20 a 90ºC | 10 minutos |
| 90ºC | 5 minutos |
| de 90 a 20ºC | 5 minutos |
| 20ºC | 2 minutos |
Los resultados correspondientes al producto
producido en el Ejemplo 1 se muestran en la Figura adjunta número 2.
La coagulación de la biomasa homogeneizada comienza a una
temperatura entre 60 y 70ºC. Se observa un incremento en el módulo
elástico de entre 10 y 20 veces su valor al aumentar la temperatura
hasta 90ºC. Cuando la temperatura se mantiene a 90ºC sólo se observa
un pequeño incremento en el módulo elástico. El enfriamiento hasta
20ºC da como resultado un nuevo incremento del módulo elástico en
otras 10 veces su valor.
La biomasa homogeneizada preparada en el Ejemplo
1 fue suspendida en NaCl al 1,5% y fue mezclada vigorosamente para
romper las partículas. El pH fue ajustado a voluntad (por ejemplo a
6,5) y la disolución fue agitada durante 1 hora. La disolución fue
combinada con aceite de soja y se fabricó una emulsión usando un
mezclador Ytron-MS tipo MSU.G.C.AA a máxima
velocidad durante 3 minutos. La emulsión fue transferida a un tubo
de ensayo y se registró la separación de aceite o de agua. Para las
emulsiones que fueron calentadas, los tubos de ensayo fueron
sumergidos en un baño de agua hirviendo durante 30 minutos.
La biomasa homogeneizada del Ejemplo 1 da como
resultado emulsiones estables que no producen la separación de una
fase de aceite. Sin embargo, se puede formar nata en algunos
sistemas de baja viscosidad.
Se usó xantano como agente estabilizador. El
xantano fue disuelto en NaCl al 1,5% mediante agitación a
temperatura ambiente a lo largo de la noche. A continuación, las
emulsiones de biomasa homogeneizada fueron preparadas con xantano
tanto al 0,5% como al 0,25% como se ha descrito en el punto
2.2.1.
El aumento de la viscosidad usando goma de
xantano da como resultado emulsiones sin nata y que pueden
permanecer estables durante varias semanas. El aumento de
temperatura no provoca la ruptura de la emulsión. Sin embargo, se
produce la coagulación de la biomasa homogeneizada y se puede
observar la separación de agua entre las partículas coaguladas. La
estructura de coagulación puede ser desintegrada en la mayoría de
las emulsiones mediante una agitación moderada, manteniendo con
ello una emulsión estable.
Las emulsiones de biomasa homogeneizada estables
pueden ser producidas a diferentes pHs. Un pH ácido combinado con
calor da lugar a la formación de nata, debido probablemente a la
hidrólisis del xantano, y por tanto, a una viscosidad
disminuida.
La biomasa homogeneizada de acuerdo con la
invención puede producir emulsiones
aceite-en-agua que contienen hasta
un 80% de aceite. El aumento de la concentración de aceite hasta el
85% invierte la emulsión dando lugar a emulsiones de
agua-en-aceite.
La absorción de grasa fue medida suspendiendo 0,5
g de la biomasa homogeneizada del Ejemplo 1 en 3 ml de aceite de
soja seguido de la incubación durante > 30 minutos a temperatura
ambiente. Las suspensiones fueron filtradas con un filtro de <
10 \mum y se midió la cantidad de aceite absorbida (en gramos) por
el material insoluble en aceite.
La absorción de Grasa/Aceite medida para la
biomasa homogeneizada del Ejemplo 1 y para diversas proteínas
disponibles comercialmente* se muestra en la Figura adjunta número
3. Como puede observarse, el producto de acuerdo con la invención
se une a grasa de forma más eficiente que las demás proteínas
comerciales ensayadas.
(* "Plasma" = plasma animal secado por
pulverización AP 820 de APC Europe;
{}\hskip0.5cm
"Fish Meal" = Comida de pescado LT 3012 de Nordsildmel A/S;
y
{}\hskip0.5cm "Soya Kons Danpro A" y "Soya Kons
Danpro A-02" = concentrados de soja de Central
Soya Aarhus A/S).
Se fabricó una suspensión al 2,5% del producto
homogeneizado del Ejemplo 1 y fue mezclada vigorosamente para
desintegrar las partículas. Se ajustó el pH a 4, 6 y 8 usando NaOH
1M ó HCl 1M y la suspensión fue agitada durante otros 60 minutos a
temperatura ambiente. Las suspensiones resultantes fueron
centrifugadas a continuación en un rotor SS-34 a
10.000 x g durante 30 minutos.
El sobrenadante fue vertido y el exceso de agua
fue eliminado dándole la vuelta al tubo durante 10 minutos. Se midió
el peso de la partícula húmeda y a continuación fue secada a lo
largo de la noche a 105ºC. A continuación se midió el peso de la
partícula seca.
Se midió la absorción de agua tanto como la
cantidad de agua (en gramos) absorbida por la partícula insoluble en
agua (unión de agua) o como el agua absorbida (en gramos) a la
proteína total (embebimiento de agua). Los resultados se muestran
en la Tabla 1 mostrada a continuación:
En la Tabla 1 se puede observar que la parte
insoluble de la biomasa homogeneizada de acuerdo con la invención
absorbe aproximadamente de 4 a 6 veces su peso en agua y la parte de
proteína aproximadamente de 2 a 2,5 veces su peso en agua.
La solubilidad de la proteína puede ser
determinada con experimentos similares a los de la absorción de
agua, pero midiendo la proteína soluble en el sobrenadante. Los
resultados para la biomasa homogeneizada del Ejemplo 1 así como los
de varias proteínas disponibles comercialmente* se muestran en la
Figura adjunta número 4.
(* "Plasma" = plasma animal secado por
pulverización AP 820 de APC Europe;
{}\hskip0.5cm
"Fish Meal" = Comida de pescado LT 3012 de Nordsildmel
A/S).
Los resultados muestran que la solubilidad del
producto de acuerdo con la invención depende del pH: un pH ácido da
como resultado una baja solubilidad; y un pH alcalino da como
resultado una elevada solubilidad. En disoluciones débilmente
ácidas, el producto de la invención se comporta como una partícula
coloidal y son estas propiedades coloidales las que predominan.
Claims (17)
1. Un proceso para homogeneizar un material de
proteína de célula sencilla, comprendiendo dicho proceso la etapa de
homogeneizar una mezcla acuosa de la proteína de célula sencilla
sometiéndola a una caída de presión total en el intervalo que va de
40 MPa a 120 MPa (de 400 a 1200 bares), en el que dicho material de
proteína de célula sencilla es un cultivo microbiano que comprende
bacterias metanotróficas opcionalmente en combinación con una o más
especies de bacterias heterotróficas.
2. Un proceso como el reivindicado en la
reivindicación 1, que además comprende la etapa de secar el
producto homogeneizado resultante.
3. Un proceso como el reivindicado en la
reivindicación 1 para conferir propiedades funcionales mejoradas a
un material de proteína de célula sencilla, comprendiendo dicho
proceso las siguientes etapas:
- a)
- preparar una mezcla acuosa de un material de célula sencilla que es un cultivo microbiano que comprende bacterias metanotróficas opcionalmente en combinación con una o más especies de bacterias heterotróficas;
- b)
- someter la mezcla a una caída de presión total de entre 40 MPa y 120 MPa (de 400 a 1200 bares), mediante la cual se obtiene un producto homogeneizado; y
- c)
- opcionalmente, secar el producto homogeneizado.
4. Un proceso como el reivindicado en cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la homogeneización se
lleva a cabo a una temperatura inferior a 50ºC, preferiblemente
entre 25 y 50ºC, por ejemplo de 25 a 35ºC.
5. Un proceso como el reivindicado en cualquiera
de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicha caída de presión es
escalonada.
6. Un proceso como el reivindicado en la
reivindicación 5, en el que dicha caída de presión se lleva a cabo
como un proceso de dos etapas que comprende una primera y una
segunda etapa en las que la caída de presión en la segunda etapa
representa menos de un quinto del total de la caída de presión.
7. Un proceso como el reivindicado en cualquier
reivindicación precedente, en el que el producto homogeneizado
resultante es secado mediante un secador por pulverización.
8. Un proceso como el reivindicado en cualquier
reivindicación precedente, en el que antes del secado por
pulverización el producto homogeneizado es mantenido en un tanque
de almacenamiento a una temperatura inferior a 20ºC y a un pH
inferior a aproximadamente 6,5.
9. Un proceso como el reivindicado en cualquier
reivindicación precedente, en el que dicho cultivo microbiano
comprende bacterias metanotróficas y heterotróficas.
10. Un proceso como el reivindicado en la
reivindicación 9, en el que dicho cultivo microbiano comprende una
combinación de la bacteria metanotrófica Methylococcus
capsulatus (Bath) (cepa NCIMB 11132), y de las bacterias
heterotróficas Alcaligenes acidovorans DB3 (cepa NCIMB 13287)
y Bacillus firmus DB 5 (cepa NCIMB 13289), opcionalmente en
combinación con Bacillus brevis DB4 (cepa NCIMB 13288).
11. Un proceso como el reivindicado en cualquier
reivindicación precedente, en el que dicho material de célula
sencilla deriva de la fermentación de fracciones de hidrocarburos o
de gas natural.
12. Un material de proteína de célula sencilla
homogeneizado que puede ser obtenido mediante un proceso como el
reivindicado en la reivindicación 9 ó en la reivindicación 10.
13. Un material de proteína de célula sencilla
homogeneizado que comprende una combinación de la bacteria
metanotrófica Methylococcus capsulatus (Bath) (cepa NCIMB
11132), y de las bacterias heterotróficas Alcaligenes
acidovorans DB3 (cepa NCIMB 13287) y Bacillus firmus DB 5
(cepa NCIMB 13289), opcionalmente en combinación con Bacillus
brevis DB4 (cepa NCIMB 13288).
14. Un producto o aditivo de grado alimenticio,
por ejemplo un pienso para animales o un alimento para mascotas,
que comprende un material de célula sencilla como el reivindicado
en la reivindicación 12 ó en la reivindicación 13.
15. Un alimento para mascotas que comprende
pedazos de un material de célula sencilla como el reivindicado en la
reivindicación 12 ó en la reivindicación 13.
16. Un producto o un aditivo de buena calidad,
por ejemplo un pienso para animales o un alimento para mascotas,
que comprende un material de proteína de célula sencilla
homogeneizado que puede obtenerse mediante un proceso como el
reivindicado en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, junto con
un producto de grado alimenticio.
17. El uso de un material de proteína de célula
sencilla homogeneizado, que se obtiene mediante un proceso como el
reivindicado en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, como
agente gelificante, como emulgente o como ligante de un aceite o de
agua, en la preparación de un producto alimenticio o de un
pienso.
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