ES2229486T5 - Formulaciones nutricionales que contienen lacto-n-neotetraosa. - Google Patents

Formulaciones nutricionales que contienen lacto-n-neotetraosa. Download PDF

Info

Publication number
ES2229486T5
ES2229486T5 ES98913279T ES98913279T ES2229486T5 ES 2229486 T5 ES2229486 T5 ES 2229486T5 ES 98913279 T ES98913279 T ES 98913279T ES 98913279 T ES98913279 T ES 98913279T ES 2229486 T5 ES2229486 T5 ES 2229486T5
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
composition
neotetraose
lacto
electrodialized
mcg
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES98913279T
Other languages
English (en)
Other versions
ES2229486T3 (es
Inventor
Pedro A. Prieto
Terry A. Kroening
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Abbott Laboratories
Original Assignee
Abbott Laboratories
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=25253891&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2229486(T5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abbott Laboratories filed Critical Abbott Laboratories
Publication of ES2229486T3 publication Critical patent/ES2229486T3/es
Application granted granted Critical
Publication of ES2229486T5 publication Critical patent/ES2229486T5/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/20—Dietetic milk products not covered by groups A23C9/12 - A23C9/18
    • A23C9/203—Dietetic milk products not covered by groups A23C9/12 - A23C9/18 containing bifidus-active substances, e.g. lactulose; containing oligosaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
    • A23L29/30—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols, e.g. xylitol; containing starch hydrolysates, e.g. dextrin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/15—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/16—Inorganic salts, minerals or trace elements
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S426/00—Food or edible material: processes, compositions, and products
    • Y10S426/801—Pediatric

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pediatric Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Dairy Products (AREA)

Abstract

La invención se refiere a una formulación nutricional que contienen una cantidad eficaz de lacto-N-neotetraosa para estimular el crecimiento y/o la actividad metabólica del Bifidobacterium. La invención se refiere también a un procedimiento para inhibir infecciones bacterianas que incluye una etapa de administración de dicha composición nutricional a un individuo.

Description

Campo Técnico de la Invención
La presente invención se refiere, en general, a la composición de productos nutricionales conteniendo lacto-Nneotetraosa para estimular el crecimiento y/o actividad metabólica de bacterias del género Bifidobacterium.
Antecedentes de la Invención
Antes del nacimiento, el feto existe en un estado prácticamente libre de gérmenes, ya que el feto está protegido por los mecanismos de defensa de su madre. Durante el parto, el neonato se expone a una abundancia de bacterias de la flora vaginal y de la piel de la madre, así como del entorno circundante. Varias semanas después de su nacimiento, se constituye la microflora intestinal del neonato. La composición de esta microflora es relativamente simple y se cree que esta influenciada por la diversidad de bacterias con las que el bebé entra en contacto, así como por la dieta del bebé.
En los primeros meses de vida, la dieta del niño consta, principalmente, de leche de pecho humana y/o fórmula. La leche de pecho humana es conocida por contener más de 100 oligosacáridos diferentes, algunos de los cuales están determinados genéticamente. Desafortunadamente, las similitudes estructurales de muchos de los carbohidratos hacen difícil el aislar, identificar y cuantificar estos oligosacáridos.
Muchas funciones beneficiosas han sido atribuidas a la leche humana y sus oligosacáridos. De hecho, varios estudios han descubierto que la cámara de los niños criados a pecho difiere de la los niños alimentados con fórmula. Más específicamente, estudios han demostrado que la cámara de los niños criados a pecho tiene un pH inferior, una proporción superior de bacterias del género Bifidobacterium, y una proporción inferior de bacterias de tipo putrefactivo menos conveniente que las cámaras de niños alimentados con fórmula. Estudios han demostrado que el inferior pH de la leche de pecho humana (5’0) inhibe el crecimiento de Bacteroides spp., Clostridium spp. y Escherichia coli (E. coli) [Beerens, H., y col., Amer. J. Clin. Nut. 33: 2.434-2.439 (noviembre de 1980)].
Por lo tanto, el niño criado a pecho posee una defensa natural contra Bacteroides, Clostridium, y E. coli, que da alniño resistencia contra la gastroenteritis. Ídem además, la introducción de leche de vaca o fórmula dentro de la dieta de un niño criado exclusivamente a pecho produce, generalmente, un aumento sustancial del número de estas bacterias [Petschow, B. W., y col., J. Clin. Microbio., 28: 287-292 (1990)].
En EP 313 533 y BE 518 408 se revelan formulaciones infantiles.
Se cree que la leche de pecho humana contiene algunos factores que favorecen el desarrollo de una flora bacteriana intestinal favorable, específicamente Bifidobacterium, que se opone a la proliferación de microbios patógenos. Se cree que el crecimiento de Bifidobacterium en el intestino de un bebé está favorecido por las propiedades fisicoquímicas de la leche humana, particularmente su alto contenido en lactosa, el cual es un sustrato para el Bifidobacterium, su bajo contenido en proteína, y su baja capacidad tamponadora. Desafortunadamente, se cree que la fórmula infantil tiene una alta capacidad tamponadora que no es favorable para el crecimiento del Bifidobacterium. Por lo tanto, existe la necesidad de un producto nutricional, para su uso en niños, que favorezca el crecimiento y proliferación de microflora intestinal favorable tal como, por ejemplo, Bifidobacterium, inhibiendo mientras el crecimiento de, por ejemplo, Bacteroides, Clostridium, y E. coli.
Breve Resumen de la Invención
La presente invención proporciona una formulación nutricional sintética para su uso en la estimulación del Bifidobacterium infantis según la reivindicación 1 que contiene Lacto-N-neoTetraosa y macronutrientes comestibles. La formulación nutricional contiene una cantidad de Lacto-N-neoTetraosa que es eficaz para estimular el crecimiento y/o actividad metabólica de bacterias de la cepa Bifidobacterium infantis. Los macronutrientes comestibles son formulados, preferentemente, para alimentar a un niño. En tal caso, los macronutrientes constan de uno o más de aceite de coco, aceite de soja, mono y diglicéridos, glucosa, lactosa comestible, suero electrodializado y leche desnatada electrodializada, suero de leche, proteína de soja y otros hidrolizados de proteína.
La formulación nutricional de la invención puede estar en forma líquida o sólida. La formulación puede contener de una o más de las vitaminas A, C, D, E y complejo B. La formulación puede contener uno o más de los minerales de calcio, magnesio, manganeso, sodio, potasio, fósforo, cobre, zinc, cloruro, yodo, selenio y hierro.
Adicionalmente, la presente invención proporciona una composición nutricional sintética que contiene una cantidad de Lacto-N-neoTetraosa, estimuladora de Bifidobacterium para niños, así como macronutrientes comestibles formulados para alimentar a un niño tales como uno o más de aceite de coco, aceite de soja, mono y diglicéridos, glucosa, lactosa comestible, suero electrodializado, leche desnatada electrodializada, y suero de leche; una o más de las vitaminas A, C, D, E y complejo B; y uno o más de los minerales de calcio, magnesio, manganeso, sodio, potasio, fósforo, cobre, zinc, cloruro, yodo, selenio y hierro.
Como se utiliza aquí, el término “antibacteriano” se refiere a una sustancia que mate bacterias o inhiba su crecimiento o replicación.
Descripción Detallada de la Invención
I. Formulación Nutricional
La presente invención proporciona una formulación nutricional sintética que contiene una cantidad del oligosacárido Lacto-N-neoTetraosa (LNnT, Gal 1-4GlcNAc 1-3Gal 1-4Glc) que es eficaz para estimular el crecimiento y/o actividad metabólica de bacterias de la cepa Bifidobacterium infantis, y además contiene macronutrientes comestibles.
Como se conoce en la técnica, Gal designa galactosa, GlcNAc designa N-acetil-glucosamina, y Glc designa glucosa. La Lacto-N-neoTetraosa es un tetrasacárido de existencia natural, encontrado en la leche de pecho humana.
Una formulación nutricional de la presente invención contiene macronutrientes comestibles, vitaminas y minerales, en cantidades deseadas para un uso concreto. Las cantidades de tales ingredientes variarán dependiendo de si la formulación es pretendida para su uso con niños, chicos o adultos normales sanos, o sujetos que tengan necesidades especializadas tales como acompañar ciertos estados patológicos (por ejemplo, trastornos metabólicos). Se comprenderá por personas especializadas en la técnica que los componentes utilizados en una formulación nutricional de la presente invención son de origen semipurificado o purificado. Mediante semipurificado o purificado se quiere decir una materia que ha sido preparada mediante purificación de una materia natural, o por síntesis. Estas técnicas son conocidas en la técnica (ver, por ejemplo, Code of Federal Regulations for Food Ingredients and Food Processing; Recommended Dietary Allowances; 10th ed., National Academy Press, Washington D.C., 1989).
En una forma de realización preferida, una formulación nutricional de la presente invención es un producto nutricional entérico infantil. Por consiguiente, en un aspecto adicional de la invención, se proporciona una formulación nutricional que sea apropiada para alimentar niños. La fórmula consta, además de LNnT, de vitaminas y minerales en cantidades diseñadas para proporcionar las necesidades nutricionales diarias de niños. Es importante observar que los factores antimicrobianos en la leche humana, o en fórmulas infantiles, pueden alcanzar directamente el tracto respiratorio del niño como resultado de regurgitación e inhalación de estos factores durante y después de la alimentación. La mucosa del tracto respiratorio puede, por lo tanto, ganar protección directa de esta manera.
Los componentes macronutricionales incluyen, por ejemplo, grasas comestibles, carbohidratos y proteínas. Grasas comestibles ejemplares son, por ejemplo, aceite de coco, aceite de soja, y mono y diglicéridos. Carbohidratos ejemplares son, por ejemplo, glucosa, lactosa comestible, y almidón de maíz hidrolizado. Una fuente típica de proteína sería, por ejemplo, proteína de soja, suero electrodializado o leche desnatada electrodializada o suero de leche, o los hidrolizados de estas proteínas, aunque también están disponibles, y se pueden utilizar, otras fuentes de proteínas. Estos macronutrientes serían añadidos en forma de compuestos nutricionales comúnmente aceptados, en cantidades equivalentes a las presentes en la leche humana o según base energética, esto es, en una base por calorías.
La fórmula infantil incluiría, preferentemente, las vitaminas y minerales siguientes: calcio, fósforo, potasio, sodio, cloruro, magnesio, manganeso, hierro, cobre, zinc, selenio y yodo, y vitaminas A, E, D, C y complejo B,
La fórmula infantil se puede esterilizar y utilizar posteriormente según la base lista para alimentar (LPA), o almacenada en polvo o líquido concentrado. El polvo se puede preparar secando por pulverización la fórmula infantil preparada como se indicó arriba, y la fórmula se puede reconstituir rehidratando el concentrado. Las fórmulas nutricionales infantiles son conocidas en la técnica, y disponibles comercialmente (por ejemplo, Similac y Alimentum de Ross Products Division, Abbott Laboratories).
Las formulaciones de la presente invención contienen una cantidad de LNnT eficaz para estimular el crecimiento y/o actividad metabólica de bacterias de la cepa Bifidobacterium infantis.
Se puede aislar LNnT de muchas maneras conocidas per se, a partir de leche humana combinada, o producido mediante síntesis química. Por ejemplo, se puede sintetizar LNnT químicamente mediante transferencia enzimática de unidades de sacárido, desde porciones donantes a porciones aceptoras, utilizando glicosiltransferasas como se describió en la Patente U.S. 5.288.637 y WO96/10086.
El método preferido para sintetizar LNnT implica la transferencia enzimática de unidades de sacárido desde nucleótidos-sacárido a aceptores de sacáridos, utilizando glicosiltransferasas, donde los nucleótidos-sacárido y las glicosiltransferasas utilizadas están en forma impurificada. Este método preferido está descrito en “A Process for
5 Synthesizing Oligosaccharides”, presentado al mismo tiempo con esta solicitud. Adicionalmente, el LNnT utilizado en la formulación nutricional de la presente invención debería estar en forma purificada o parcialmente purificada, y libre de toxinas bacterianas, virus y otros contaminantes perjudiciales.
Los niveles reales de dosificación de LNnT en las formulaciones de la presente invención se pueden cambiar con tal
10 de obtener una cantidad de principio activo que sea eficaz para obtener una respuesta deseada para una composición y método de administración concretos. El nivel de dosificación seleccionado depende, por lo tanto, del efecto terapéutico o nutricional deseado, de la ruta de administración, y de la duración deseada de administración y otros factores.
15 La cantidad eficaz de LNnT para estimular el crecimiento y/o metabolismo de Bifidobacteria infantis es desde unos 0’075 hasta aproximadamente 2’0 mg/ml y, preferentemente, desde aproximadamente 0’1 hasta aproximadamente 0’5 mg/ml. La estimulación del crecimiento del Bifidobacterium se determina tanto como un incremento en la biomasa de las bacterias como se determina como incrementos en las mediciones de densidad óptica (D.O.) y/o aumento en el número de bacterias. Se considera que el metabolismo del Bifidobacterium se estimula cuando
20 aumenta la actividad enzimática por célula bacteriana. Preferentemente, esta estimulación metabólica se mide utilizando enzimas de las bacterias que sean constituyentemente activas o sean inducidas para ser activas antes de cualquier medición de la estimulación metabólica [Sambrook, J., y col., Molecular Cloning A Laboratory Manual, 2d Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989)].
25 Los ejemplos siguientes ilustran formas de realización preferidas de la presente invención.
Ejemplo 1: Efecto de los Oligosacáridos en Bifidobacterium infantis
Cepas bacterianas y condiciones de crecimiento
30 Se ensayaron varias preparaciones de carbohidratos por sus capacidades para favorecer el crecimiento y la actividad metabólica en Bifidobacterium infantis. Las cepas bacterianas fueron adquiridas, en forma liofilizada, de la American Type Culture Collection (Rockville, MD). La cepa utilizada fue Bifidobacterium infantis ATCC 15697. Para ensayos de crecimiento y actividad metabólica, se cultivaron B. infantis durante 24 horas en medio líquido
35 complejo (Medio Clostridial Reforzado, Difco) como fuente de inóculo. El medio mínimo base utilizado para los ensayos está descrito abajo en la Tabla 1. Por cada litro de medio de crecimiento se añadieron asépticamente, antes de la inoculación, 2 ml de solución estéril de vitaminas (Tabla 2) y 10 ml de una solución de ácido ascórbico al 5% (p/v) (pH 6’5).
40 Tabla 1
Formulación de Medio Mínimo Se ajustó el pH a 6’8, y se esterilizó la formulación en autoclave. Antes de la inoculación se añadieron, asépticamente, una solución de vitaminas y ácido ascórbico.
Acetato sódico (anhidro)
1’64 g/l
Cloruro amónico
1’06 g/l
Fosfato potásico (dibásico)
2’50 g/l
Cl2Zn
80 mg/l
Cl3Fe
400 mg/l
SO4Cu
40 mg/l
Cl2Mn
40 mg/l
B4O7Na2
40 mg/l
Mo7O24(NH4)6
40 mg/l
Tween 80
0’50 ml/l
Lactosa
2’00 g/l
Proteosa Peptona (Difco)
1’00 g/l
Tabla 2
Solución de Vitaminas
Riboflavina p-Aminobenzoato Piridoxina Ácido nicotínico Tiamina Biotina Pantotato cálcico Ácido fólico
500 mg/l 50 mg/l 250 mg/l 500 mg/l 250 mg/l 100 mg/l 500 mg/l 100 mg/l
Ensayos de estimulación de la actividad metabólica bacteriana
10 Los ensayos para medir la estimulación de la actividad metabólica de las bacterias están basados en la determinación de la actividad enzimática por célula bacteriana. Se midieron las actividades de la -galactosidasa y la esterasa del Bifidobacterium infantis. Cada muestra (1’5 ml de volumen total) fue inoculada con aproximadamente 105 células bacterianas. Se cultivó Bifidobacterium infantis durante 24 horas en un medio de crecimiento. Después de lavar las células, el cultivo celular fue centrifugado (en la cámara anaeróbica) durante 5 minutos a 2.000 x g, para
15 obtener un gránulo de células. Se descartó el sobrenadante, el gránulo fue resuspendido suavemente en 1’5 ml de salino tamponado con fosfato (PBS; pH 7’2), y se mezcló la suspensión con uno de los siguientes compuestos de ensayo (previamente disueltos en un tampón), a una concentración de 0’1 y/o 1’0 mg/ml:
Leche de pecho humana al 2%
(2% LP)
Lacto-N-neoTetraosa
(LNnT)
Fructooligosacáridos
(FOS)
Galactooligosacáridos
(GOS)
Sacarosa
N-acetilglucosamina y sacarosa
(GlcNAc:sacarosa)
Glucosamina y sacarosa
(GlcNH3:sacarosa)
20 Esta mezcla fue incubada, bajo condiciones anaeróbicas, a 37ºC durante una hora. Se hicieron diluciones en serie de la mezcla, y se plaquearon en placas de medio de crecimiento complejo, las cuales fueron incubadas 48 horas a 37ºC, anaeróbicamente, y luego contadas. El resto de la suspensión celular (1’0 ml) fue utilizado para ensayos enzimáticos celulares totales.
25 Se utilizaron los sustratos 5-bromo-4-cloro-3-indolil-d-galactopiranósido (X-Gal) y 5-bromo-4-cloro-3-indolil acetato (X-Act) para medir, respectivamente, las actividades de la -galactosidasa y la esterasa. Ambos sustratos fueron adquiridos de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO). Cada sustrato fue añadido a la suspensión celular hasta una concentración final de 20M. Se supervisó la velocidad de hidrólisis en un espectrofotómetro DU 7400 (Beckman Instruments, Inc., Palo Alto, CA) a 600 nm, utilizando el sustrato en PBS como blanco. Las lecturas fueron tomadas
30 a 0, 15, y 30 minutos, y se calculó el cambio en la absorbancia por minuto (dA/min). Abajo, en la Tabla 3, se muestran los resultados.
Se calculó un índice de utilización (IU) para el sustrato, utilizando la velocidad de hidrólisis del sustrato y los valores de ufc/ml obtenidos de las determinaciones de conteo de las placas. La ecuación utilizada para este cálculo es como sigue: IU = (Velocidad de utilización del sustrato x (ufc/ml)-1 x (volumen del ensayo)-1 x 1010. Abajo, en la Tabla 3, se muestran los resultados.
Tabla 3
Estimulación Metabólica de B. infantis
Muestra
Concentración (mg/ml) IUBG1 IUA2
LP al 2%
0’1 64’7 87’3
LNnT
1 11’2 3’2
LNnT
0’1 83’9 11’2
FOS
1 15’1 3
FOS
0’1 23’7 3’9
GOS
1 14’7 2
GOS
0’1 17’3 2’3
Sacarosa
1 8’8 1
Sacarosa
0’1 9’4 0’9
GlcNAc:sacarosa3 15:55
1 12’8 2’3
GlcNAc:sacarosa3
0’1 10’8 1’9
GlcNH3:sacarosa4 18:44
1 16’9 1
GlcNH3:sacarosa4
0’1 11’6 1’4
1IUBG = índice de utilización de la -galactosidasa (actividad de la -galactosidasa/célula) 2IUA = índice de utilización del acetato (actividad de la esterasa/célula)
10 3Se mezcló GlcNAc (N-acetilglucosamina) con sacarosa en la proporción dada antes de muestrear. 4Se mezcló GlcNH3 (glucosamina) con sacarosa en la proporción dada antes de muestrear.
Los resultados en la Tabla 3 demuestran que el LNnT es un excelente estimulante metabólico del B. infantis. En el IUBG, la actividad del LNnT está secundada por la de una solución de leche de pecho humana al 2%, la cual es
15 conocida por contener LNnT. En el IUA, otra cosa que leche de pecho, ninguno de los otros compuestos ensayados exhibió actividad próxima a la del LNnT.
Ensayos de crecimiento bacteriano
20 Los ensayos para medir el crecimiento de las bacterias están basados en el ácido láctico producido por célula bacteriana. Las bacterias fueron cultivadas en el medio no conteniendo cualquiera de carbohidrato, LNnT, Fructooligosacáridos (FOS), Galactooligosacáridos (GOS), Sacarosa, N-acetilglucosamina, y sacarosa (GlcNAc:sacarosa), y glucosamina y sacarosa (GlcNH3:sacarosa). Después de aproximadamente 24-48 horas, se midió la fermentación de carbohidrato mediante densidad óptica, pH y producción de ácido láctico. El E. coli (ATCC
25 25922) no produce ácido láctico bajo estas condiciones, y sirve como control negativo para el punto final del ácido láctico. La densidad óptica sirve como punto final cualitativo.
Tabla 4
Concentración de Ácido Láctico
Concentración calculada de ácido láctico
Concentración de ácido láctico menos el fondo
Sin carbohidrato
0’598 0’010
Muestra A – 1 mg/ml de LNnT
0’630 0’070
Muestra B – 1 mg/ml de FOS
0’581 0’000
Muestra C – 1 mg/ml de GOS
0’628 0’010
Muestra D – 1 mg/ml de sacarosa
0’576 0’00
Muestra E – 1 mg/ml de GlcNAc:sacarosa
0’577 0’000
Muestra F – 1 mg/ml de GlcNH3:sacarosa
0’584 0’010
Muestra G – 0’1 mg/ml de LNnT
0’578 0’020
Muestra H – 0’1 mg/ml de FOS
0’603 0’050
Muestra I – 0’1 mg/ml de de GOS
0’583 0’030
Muestra J – 0’1 mg/ml de sacarosa
0’570 0’000
Muestra K – 0’1 mg/ml de GlcNAc:sacarosa
0’578 0’000
Muestra L – 0’1 mg/ml de GlcNH3:sacarosa
0’594 0’010
5
Ejemplo 2: Formulación Infantil, lista para alimentar, conteniendo LNnT
10
Una formulación infantil lista para alimentar, conteniendo el oligosacárido LNnT, tiene la siguiente composición [148 ml = 4’19 julios (5 onzas líquidas = 100 cal.)]:
Nutrientes:
por 4’19 julios (100 cal.);
Proteína
2’14 g
Grasa
5’40 g
Carbohidratos
10’7 g
Lacto-N-neoTetraosa
71’0 mg
Agua
133 g
Ácido linoleico
1.300 mg
Vitaminas:
por 4’19 julios (100 cal.);
Vitamina A
300 UI
Vitamina D
60 UI
Vitamina E
3’0 UI
Vitamina K Tiamina (Vit. B1) Riboflavina (Vit. B2) Vitamina B6 Vitamina B12 Niacina Ácido fólico (Folacín) Ácido Pantoténico Biotina Vitamina C (ácido ascórbico) Colina Inositol Minerales: Calcio Fósforo Magnesio Hierro Zinc Manganeso Cobre Yodo Sodio Potasio Cloruro
8 mcg 100 mcg 150 mcg 60 mcg 0’25 mcg 1.050 mcg 15 mcg 450 mcg 4’4 mcg 9 mg 16 mg 4’7 mg por 4’19 julios (100 cal.); 73 mg 56 mg 7’5 mg 1’8 mg 0’75 mg 30 mcg 75 mcg 15 mcg 44 mg 108 mg 62 mg
La formulación infantil descrita arriba se puede utilizar cuando se necesite una fórmula infantil tanto como si la decisión se toma para discontinuar el amamantamiento antes de 1 año de edad, si se necesita un complemento al 5 amamantamiento, o como alimentación rutinaria si no se adopta el amamantamiento.
Ejemplo 3: Formulación Infantil con soja, lista para alimentar, conteniendo LNnT
Una formulación infantil con soja, lista para alimentar, conteniendo el oligosacárido LNnT, tiene la siguiente 10 composición [148 ml = 4’19 julios (5 onzas líquidas = 100 cal.)]:
Nutrientes: Proteína Grasa Carbohidratos Lacto-N-neoTetraosa Agua Ácido linoleico Vitaminas: Vitamina A Vitamina D Vitamina E Vitamina K Tiamina (Vit. B1) Riboflavina (Vit. B2) Vitamina B6 Vitamina B12 Niacina Ácido fólico (Folacín) Ácido Pantoténico Biotina Vitamina C (ácido ascórbico) Colina Inositol Minerales: Calcio Fósforo Magnesio Hierro Zinc Manganeso Cobre Yodo Sodio Potasio Cloruro
por 4’19 julios (100 cal.); 2’45 g 5’46 g 0’3 g 14’2 mg 133 g 1.300 mg por 4’19 julios (100 cal.); 300 UI 60 UI 3’0 UI 15 mcg 60 mcg 90 mcg 60 mcg 0’45 mcg 1.350 mcg 15 mcg 750 mcg 4’5 mcg 9 mg 8 mg 5 mg por 4’19 julios (100 cal.); 105 mg 75 mg 6 mg 0’22 mg 0’75 mg 5 mcg 90 mcg 9 mcg 27 mg 105 mg 64 mg
La formulación infantil descrita arriba se puede utilizar cuando se desee alimentación con soja y se necesite una fórmula infantil, tanto como si la decisión se toma para discontinuar el amamantamiento antes de 1 año de edad, si se necesita un complemento al amamantamiento, o como alimentación rutinaria si no se adopta el amamantamiento.

Claims (9)

  1. REIVINDICACIONES
    1.Una composición nutricional sintética para su uso en la estimulación del Bifidobacterium infantis que comprende una cantidad de Lacto-N-neoTetraosa, estimuladora del Bifidobacterium infantis, desde unos 0,075 hasta aproximadamente 2,0 mg/ml y comprendiendo además macronutrientes comestibles.
  2. 2.La composición de la Reivindicación 1 en donde los macronutrientes comestibles están formulados para alimentar a un niño.
  3. 3.La composición de la Reivindicación 2 en donde los macronutrientes constan de uno o más de aceite de coco, aceite de soja, mono y diglicéridos, glucosa, lactosa comestible, suero electrodializado y leche desnatada electrodializada, suero de leche, proteína de soja y otros hidrolizados de proteína.
  4. 4.La composición de la Reivindicación 1 que está en forma líquida.
  5. 5.La composición de la Reivindicación 1 que está en forma sólida.
  6. 6.La composición de la Reivindicación 1 constando además de una o más de las vitaminas A, C, D, E y complejo B.
  7. 7.La composición de la Reivindicación 1 constando además de uno o más de los minerales de calcio, magnesio, manganeso, sodio, potasio, fósforo, cobre, zinc, cloruro, yodo, selenio y hierro.
  8. 8.La composición de la Reivindicación 2 comprendiendo uno o más de aceite de coco, aceite de soja, mono y diglicéridos, glucosa, lactosa comestible, suero electrodializado, leche desnatada electrodializada; una o más de las vitaminas A, C, D, E y complejo B; y uno o más de los minerales de calcio, magnesio, manganeso, sodio, potasio, fósforo, cobre, zinc, cloruro, yodo, selenio y hierro.
  9. 9.La composición de la Reivindicación 1 conteniendo desde aproximadamente 0’075 hasta aproximadamente 1’0 mg/ml de Lacto-N-neoTetraosa.
    10 La composición de la Reivindicación 9 conteniendo desde aproximadamente 0’1 hasta aproximadamente 0’5 mg/ml de Lacto-N-neoTetraosa.
ES98913279T 1997-03-31 1998-03-30 Formulaciones nutricionales que contienen lacto-n-neotetraosa. Expired - Lifetime ES2229486T5 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US829220 1992-02-03
US08/829,220 US5906982A (en) 1997-03-31 1997-03-31 Nutritional formulations containing Lacto-N-neoTetraose

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2229486T3 ES2229486T3 (es) 2005-04-16
ES2229486T5 true ES2229486T5 (es) 2012-01-10

Family

ID=25253891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES98913279T Expired - Lifetime ES2229486T5 (es) 1997-03-31 1998-03-30 Formulaciones nutricionales que contienen lacto-n-neotetraosa.

Country Status (11)

Country Link
US (2) US5906982A (es)
EP (1) EP0973413B2 (es)
JP (1) JP4148535B2 (es)
AT (1) ATE271788T1 (es)
CA (1) CA2285066C (es)
DE (1) DE69825260T3 (es)
DK (1) DK0973413T4 (es)
ES (1) ES2229486T5 (es)
NO (1) NO315254B1 (es)
PT (1) PT973413E (es)
WO (1) WO1998043495A1 (es)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5906982A (en) * 1997-03-31 1999-05-25 Abbott Laboratories Nutritional formulations containing Lacto-N-neoTetraose
US6375994B1 (en) * 1999-08-20 2002-04-23 Sun Ten Laboratories, Inc. Preparation of fiber, L-glutamine and a soy derivative for the purpose of enhancement of isoflavone bioavailability
EP1062873A1 (en) * 1999-12-13 2000-12-27 N.V. Nutricia Improved infant formula, protein hydrolysate for use in such an infant formula, and method for producing such a hydrolysate
EP1332759B1 (en) * 2002-02-04 2005-09-28 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Pharmaceutical and nutritional compositions containing a di- or oligosaccharide as insulin secretion promoter
US20040047866A1 (en) * 2002-09-09 2004-03-11 President And Fellows Of Harvard College Immunomodulatory methods using carbohydrate antigens
GB0321996D0 (en) * 2003-09-19 2003-10-22 Novartis Nutrition Ag Organic compounds
WO2006012536A2 (en) 2004-07-22 2006-02-02 Ritter Andrew J Methods and compositions for treating lactose intolerance
DE102004040452A1 (de) * 2004-08-20 2006-02-23 N.V. Nutricia Peptidgemisch
ATE361101T1 (de) 2004-08-24 2007-05-15 Nutricia Nv Nahrungszusammensetzung die unverdauliche oligosaccharide enthält
KR101199751B1 (ko) * 2005-04-08 2012-11-08 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤 유단백질을 함유하는 철 조성물
US8197872B2 (en) * 2007-05-17 2012-06-12 The Regents Of The University Of California Human milk oligosaccharides to promote growth of beneficial gut bacteria
CA2705014A1 (en) * 2007-11-08 2009-05-14 Nestec S.A. Use of oligosaccharides containing n-acetyllactosamine for maturation of immune responses in neonates
US20110223248A1 (en) * 2007-12-12 2011-09-15 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating lactose intolerance
WO2010098822A1 (en) 2009-02-24 2010-09-02 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Prebiotic formulations and methods of use
WO2011137249A1 (en) 2010-04-28 2011-11-03 Ritter Pharmaceuticals, Inc. Prebiotic formulations and methods of use
EP2465508A1 (en) * 2010-11-23 2012-06-20 Nestec S.A. Composition comprising hydrolysed proteins and oligosaccharides for treating skin diseases
WO2012092082A1 (en) * 2010-12-30 2012-07-05 Abbott Laboratories Reduced buffering capacity of a low calorie infant formula
NZ612386A (en) * 2010-12-31 2015-02-27 Abbott Lab Synbiotic combination of probiotic and human milk oligosaccharides to promote growth of beneficial microbiota
NZ612472A (en) 2010-12-31 2015-02-27 Abbott Lab Nutritional compositions comprising human milk oligosaccharides and nucleotides and uses thereof for treating and/or preventing enteric viral infection
MX338174B (es) 2010-12-31 2016-04-06 Abbott Lab Metodos para reducir la incidencia de la tension oxidativa al usar los oligosacaridos de leche humana, la vitamina c y los agentes antiinflamatorios.
NZ612455A (en) 2010-12-31 2015-02-27 Abbott Lab Human milk oligosaccharides to promote growth of beneficial bacteria
MY166945A (en) 2010-12-31 2018-07-25 Abbott Lab Nutritional formulations including human milk oligosaccharides and long chain polyunsaturated polyunsaturated fatty acids and uses thereof
US9539269B2 (en) 2010-12-31 2017-01-10 Abbott Laboratories Methods for decreasing the incidence of necrotizing enterocolitis in infants, toddlers, or children using human milk oligosaccharides
EP3338784B1 (en) 2010-12-31 2020-07-22 Abbott Laboratories Human milk oligosaccharides for modulating inflammation
CN103391783A (zh) 2010-12-31 2013-11-13 雅培制药有限公司 使用人乳寡糖改善呼吸道健康的方法
CA2842672A1 (en) 2011-07-22 2013-01-31 Abbott Laboratories Galactooligosaccharides for preventing injury and/or promoting healing of the gastrointestinal tract
SG2014013478A (en) 2011-08-29 2014-05-29 Abbott Lab Human milk oligosaccharides for preventing injury and/or promoting healing of the gastrointestinal tract
ES2546262T5 (es) * 2011-10-18 2019-04-12 Nestec Sa Composición para emplear en la promoción de la absorción del magnesio y/o la retención del magnesio
EP2842560A4 (en) * 2012-04-23 2015-12-02 Univ Kyoto COMPOSITION FOR PROMOTING BIFIDOBACTERIUM GROWTH
CA2894897C (en) * 2012-12-20 2018-09-18 Abbott Laboratories Nutritional formulations using human milk oligosaccharides for modulating inflammation
US10881674B2 (en) 2014-12-08 2021-01-05 Glycom A/S Synthetic composition for treating metabolic disorders
US10835544B2 (en) 2014-12-08 2020-11-17 Glycom A/S Synthetic composition for regulating satiety
US10987368B2 (en) * 2014-12-08 2021-04-27 Glycom A/S Synthetic composition for preventing or treating CVD
CN115350200A (zh) 2014-12-08 2022-11-18 格礼卡姆股份公司 用于治疗代谢障碍的合成组合物
AU2016227600B2 (en) 2015-03-05 2020-05-21 Société des Produits Nestlé S.A. Compositions for use in the prevention or treatment of gastrointestinal infections/inflammations in infants or young children
WO2017021476A1 (en) 2015-08-04 2017-02-09 Nestec S.A. Nutritional compositions with 2fl and lnnt for use in inducing a gut microbiota close to the one of breast fed infants
EP3471562A4 (en) * 2016-06-15 2020-07-29 Glycom A/S SYNTHETIC COMPOSITIONS WITH MOTHER MILK OLIGOSACCHARIDES FOR THE PREVENTION AND TREATMENT OF DISEASES
AU2017307455B2 (en) 2016-08-04 2023-07-06 Société des Produits Nestlé S.A. Nutritional compositions with 2FL and LNnT for use in preventing and/or treating non-rotavirus diarrhea by acting on the gut microbiota dysbiosis
WO2024024906A1 (ja) * 2022-07-29 2024-02-01 森永乳業株式会社 ビフィドバクテリウム・ブレーベのオリゴ糖資化促進用組成物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE518409A (es) *
AU561067B2 (en) * 1982-03-22 1987-04-30 Biocarb Ab Anti-bacterial composition containing an oligosaccharide
SE462134B (sv) * 1987-10-22 1990-05-14 Biocarb Ab Livsmedel innehaallande lacto-n-tetraos och foerfarande foer dess framstaellning
US4895838A (en) * 1988-03-09 1990-01-23 Trustees Of Boston University Method for provoking angiogenesis by administration of angiogenically active oligosaccharides
WO1991016449A1 (en) * 1990-04-16 1991-10-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Saccharide compositions, methods and apparatus for their synthesis
US5750176A (en) * 1994-03-09 1998-05-12 Abbott Laboratories Transgenic non-human mammal milk comprising 2'-fucosyl-lactose
WO1995024488A1 (en) * 1994-03-09 1995-09-14 Abbott Laboratories Transgenic animals producing oligosaccharides and glycoconjugates
US5545553A (en) * 1994-09-26 1996-08-13 The Rockefeller University Glycosyltransferases for biosynthesis of oligosaccharides, and genes encoding them
US5906982A (en) * 1997-03-31 1999-05-25 Abbott Laboratories Nutritional formulations containing Lacto-N-neoTetraose

Also Published As

Publication number Publication date
ES2229486T3 (es) 2005-04-16
CA2285066A1 (en) 1998-10-08
CA2285066C (en) 2010-06-08
NO315254B1 (no) 2003-08-11
NO994722D0 (no) 1999-09-28
EP0973413B2 (en) 2011-11-09
NO994722L (no) 1999-09-28
DK0973413T3 (da) 2004-11-29
DE69825260T2 (de) 2005-08-04
JP2001517950A (ja) 2001-10-09
US5906982A (en) 1999-05-25
EP0973413A1 (en) 2000-01-26
WO1998043495A1 (en) 1998-10-08
EP0973413B1 (en) 2004-07-28
DE69825260D1 (de) 2004-09-02
PT973413E (pt) 2004-11-30
US6083934A (en) 2000-07-04
DK0973413T4 (da) 2012-02-27
DE69825260T3 (de) 2012-04-26
ATE271788T1 (de) 2004-08-15
JP4148535B2 (ja) 2008-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2229486T5 (es) Formulaciones nutricionales que contienen lacto-n-neotetraosa.
ES2725464T3 (es) Sistema de fórmula infantil con niveles adaptativos de oligosacáridos de leche humana (OLH)
US9089157B2 (en) Adherence inhibition of pathogens by prebiotic oligosaccharides
ES2278021T5 (es) Empleo de una composición que comprende un prebiótico para disminuir el proceso inflamatorio y activación anormal de parámetros inmunológicos no específicos
US6451584B2 (en) Lactobacillus bifidus growth promoting composition and use thereof
RU2586928C2 (ru) Модуляция роста бифидобактерий в сочетании с олигосахаридами, находящимися в материнском молоке
CN105722515A (zh) 用于预防或治疗有风险婴儿或幼儿的urt感染的组合物
PT1255449E (pt) Formulação nutricional contendo substâncias pré-bióticas
CN108777998B (zh) 一种调节人体肠道功能的复合益生元及其应用
SG183849A1 (en) Nutritional compositions
CN111067104A (zh) 一种复合益生菌婴幼儿配方奶粉及其制备方法
Hinds et al. Effect of infant formula on Streptococcus mutans biofilm formation
CN108669563A (zh) 一种组合物、其应用和增强免疫力、改善过敏的产品
CN105053251A (zh) 一种增强免疫力和保护视力的婴幼儿奶粉及其制备方法
US9826766B2 (en) Use of polysaccharides for the intestinal well-being of nursing infants and/or infants
TW201431502A (zh) 用於促進飽足的營養組成物
CN104797260A (zh) 变态反应改善剂
Hendrickse et al. The calorie intake and weight gain of low birth weight infants fed on fresh breast milk or a special formula milk
US20220400729A1 (en) Synergistic combination of butyric-acid-producing prebiotics and probiotics
US20160353774A1 (en) Nutritional compositions comprising spore-forming probiotics
WO2016018533A1 (en) Hydrolyzed lactose-containing nutritional compositions and uses thereof
Lugonja et al. A comparative investigation of an in vitro and clinical test of the bifidogenic effect of an infant formula
US20230013403A1 (en) Compositions comprising human milk oligosaccharides for use in a subject to support language development
MXPA99008954A (es) Formulaciones alimenticias que contienen lacto-n-neotetraosa