ES2224294T3 - Vacunacion in ovo contra la enfermedad de newcastle. - Google Patents
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Abstract
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UNA VACUNA DESTINADA A LA VACUNACION IN OVO DE LAS AVES DE CORRAL CONTRA LA NUEMOENCEFALITIS AVIAR (ENFERMEDAD DE NEWCASTLE). ESTA VACUNA CONTIENE CEPAS DE LOS VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE CON LA INDICACION INTERNA NDW Y ESTA DEPOSITADA EN EL CNCM (INSTITUTO PASTEUR) BAJO EL NUMERO I-781.
Description
Vacunación in ovo contra la enfermedad de
Newcastle.
La presente invención se refiere a la utilización
de una cepa del virus de la enfermedad de Newcastle en la
preparación de una vacuna para la vacunación in ovo de aves
de corral contra la infección de la enfermedad de Newcastle.
La vacunación in ovo con vacunas que
contienen virus fue descrita extensamente por Sharma et al.
(patente US nº 4.458.630). En particular, dicha patente describe que
se puede inyectar el virus vivo de la enfermedad de Marek en el
líquido amniótico del huevo, con lo cual el embrión se infecta y el
virus de la vacuna se replica hasta alcanzar un título elevado, lo
cual induce la formación de anticuerpos protectores en el embrión
tratado (Sharma; Avian Diseases 29, 1155
1167-68 (1985)).
En la patente US nº 5.427.791, Ahmad et
al. describen la vacunación embrionaria contra la enfermedad de
Newcastle. En dicha patente, los virus se modificaron mediante la
utilización de etil metano sulfonato (EMS) con el propósito de
proporcionar una atenuación apatogénica del virus vivo de la
enfermedad de Newcastle (cepa NDV-B1).
Una desventaja de este tipo de modificación es el
hecho de que el EMS es un mutágeno y la vacuna también es
susceptible de actuar como mutágeno, lo cual resulta indeseable para
la administración regular de la vacuna. Por otra parte, el
NDV-B1 sin tratar no puede ser aplicado para la
vacunación in ovo ya que la inyección de este virus sin
modificar en los huevos causaría la muerte de casi todos los
embriones.
Además, se ha observado que el margen entre la
dosis eficaz mínima y la dosis máxima segura para estos virus
modificados es inferior a 10 (por lo tanto inferior a log1). En la
práctica, y en vista de los errores resultantes de la producción y
debido a las pérdidas durante el almacenaje, este margen resulta
demasiado pequeño.
Sorprendentemente, se ha observado que las
vacunas que contienen virus de la enfermedad de Newcastle de la cepa
NDW, resultan particularmente apropiados para la aplicación in
ovo. Por lo tanto, la presente invención se refiere a la
utilización de la cepa NDW del virus de la enfermedad de Newcastle
en la preparación de una vacuna apropiada para la administración
in ovo a aves de corral.
Se depositaron muestras del virus de la
enfermedad de Newcastle de la cepa NDW en el CNCM del Institut
Pasteur bajo el nº 781. Ver el documento EP 351 908.
Ventajosamente, la cepa NDW se administra en una
cantidad comprendida entre 10^{-1} y 10^{3} y más
particularmente en una cantidad comprendida entre 10^{-0,7} y
10^{2,2} por huevo.
Para obtener los mejores resultados en la
inmunización se observó que la vacuna que contiene NDW se puede
administrar in ovo al cabo de entre 17 y 19 días de
incubación, preferentemente al cabo de 18 días de incubación.
Se preparó un stock de virus semilla de trabajo a
partir de un virus semilla original (depositado en el CNCM, Institut
Pasteur bajo el nº I-781) mediante la inoculación en
la cavidad alantoidea de huevos embrionados de pollos SPF.
Del mismo modo, la vacuna se prepara mediante la
inoculación del virus semilla de trabajo en la cavidad alantoidea de
huevos SPF embrionados. Al finalizar la incubación, se recoge el
fluido alantoideo que contiene el virus de la vacuna. El fluido
alantoideo se diluye, se congela y se guarda a -50ºC.
Antes de cargar, el fluido alantoideo se
descongela, se diluye adicionalmente hasta la concentración
requerida del virus de la vacuna, se mezcla con un estabilizante, se
introduce en viales y se liofiliza.
Se vacunaron huevos SPF en el amnion a los 18
días de incubación mediante el procedimiento descrito por Sharma y
Burmester (Avian Diseases 26 (1), 134-149)
con la vacuna descrita en el Ejemplo 1.
Se vacunaron seis grupos de huevos de acuerdo con
el esquema expuesto en la tabla siguiente.
Conclusión: La vacunación in ovo de
huevos SPF a los 18 días de desarrollo embrionario con la vacuna NDV
resulta segura con una dosis máxima comprendida entre 10^{1,2} y
10^{2,2} EID_{50} por huevo.
Se vacunaron huevos comerciales de pollos de
engorde en el amnion a los 18 días de incubación mediante el
procedimiento descrito por Sharma y Burmester (Avian Diseases
26(1), 134-149) con la vacuna descrita en el
Ejemplo 1.
Se vacunaron ocho grupos de huevos de acuerdo con
el esquema expuesto en la tabla siguiente.
Conclusión: La vacunación in ovo de
huevos de pollos de engorde con anticuerpos maternos resulta segura
(sin efecto en la eclosión de los huevos) hasta una dosis de por lo
menos 10^{2} EID_{50} por huevo.
La eficacia de la vacuna NDV preparada de acuerdo
con en Ejemplo 1 se examinó en huevos SPF.
Los parámetros para la protección fueron la
respuesta de anticuerpos después de la vacunación (prueba de la
inhibición de la hemoaglutinación = prueba HI) y el porcentaje de
mortalidad después del desafío. El virus de desafío era la cepa
Hertz 33/56 del virus de la enfermedad de Newcastle, el cual se
administró a cada uno de los pollos en una cantidad de 10^{5,0}
EID_{50}.
Se vacunaron cinco grupos de huevos de acuerdo
con el esquema expuesto en la tabla siguiente.
Conclusión: La vacunación in ovo de
huevos SPF a los 18 días de desarrollo embrionario con la vacuna NDV
resulta eficaz. Una dosis de vacuna de aproximadamente 10^{-0,7}
por huevo es la dosis eficaz mínima para la vacunación NDV in
ovo.
La eficacia de la vacuna NDV preparada de acuerdo
con en Ejemplo 1 se examinó en huevos comerciales de pollos de
engorde con anticuerpos maternos (título HI de 5,1 a la edad de un
día).
Los parámetros para la protección fueron la
respuesta de anticuerpos después de la vacunación (prueba HI) y el
porcentaje de mortalidad después del desafío. El virus de desafío
era la cepa Hertz 33/56 del virus de la enfermedad de Newcastle, el
cual se administró a cada uno de los pollos en una cantidad de
10^{5,0} EID_{50}.
Se vacunaron tres grupos de huevos de acuerdo con
el esquema expuesto en la tabla siguiente:
Conclusión: La vacunación in ovo de
huevos comerciales de pollos de engorde a los 18 días de desarrollo
embrionario con la vacuna NDV resulta eficaz. Lo anterior no resulta
influenciado por la presencia de anticuerpos maternos.
Claims (6)
1. Utilización de la cepa NDW del virus de la
enfermedad de Newcastle, depositada en el CNCM (Institut Pasteur)
bajo el número I-781, para la preparación de una
vacuna para la vacunación in ovo.
2. Utilización según la reivindicación 1,
caracterizada porque los virus de la cepa NDW se encuentran
presentes en una cantidad comprendida entre 10^{-1} y 10^{3} por
huevo.
3. Utilización según la reivindicación 1,
caracterizada porque los virus de la cepa NDW se encuentran
presentes en una cantidad comprendida entre 10^{-0,7} y 10^{2,2}
por huevo.
4. Utilización según cualquiera de la
reivindicaciones 1 a 3, caracterizada porque los virus de la
cepa NDW se administran en fluido alantoideo.
5. Utilización según cualquiera de la
reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque los virus de la
cepa NDW se administran in ovo al cabo de entre 17 y 19 días
de incubación.
6. Utilización según la reivindicación 5,
caracterizada porque los virus de la cepa NDW se administran
in ovo al cabo de 18 días de incubación.
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