ES2215420T3

ES2215420T3 - Inhibidores de la prenil-transferasa.

Info

Publication number: ES2215420T3
Application number: ES99968984T
Authority: ES
Inventors: Thomas D. Gordon; Barry A. Morgan
Original assignee: Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 1998-12-31
Filing date: 1999-12-30
Publication date: 2004-10-01
Anticipated expiration: 2019-12-30
Also published as: RU2241712C2; EP1140942A2; RU2241712C9; US20080176835A1; HUP0104708A3; US7691859B2; EP1140942B1; DE69941307D1; PT1140942E; EP1382607A3; HUP0104708A2; WO2000039130A3; DE69915514T2; NO20013281D0; NO321057B1; ATE261447T1; US20060142275A1; ATE440100T1; EP1382607A2; DE69915514D1

Abstract

Un compuesto de **fórmula** en la que n1 es 0 ó 1; X es, independientemente para cada caso, (CHR11)n3(CH2)n4Z(CH2)n5; Z es O, N(R12), S, o un enlace; n3 es, independientemente para cada caso, 0 ó 1; n4 y n5 son, independientemente para cada caso, 0, 1, 2 ó 3; Y es, independientemente para cada caso, CO, CH2, CS o un enlace; o N(R24R25); R2, R11 y R12 es cada uno, independientemente para cada caso, H o un resto seleccionado del grupo consistente en alquilo(C1-6) y arilo, en el que dicho resto está opcionalmente sustituido con uno o más R8 o R30; R3 es, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C1-6), alquenilo(C2-6), alquinilo(C2-6), cicloalquilo(C3-6), alquil(C1- 6)cicloalquilo(C3-6), cicloalquenilo(C5-7), cicloalquenil(C5-7)alquilo(C1-6), arilo, aril-alquilo(C1- 6), heterociclilo, y heterociclil-alquilo(C1-6), en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más R30; o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Description

Inhibidores de la prenil-transferasa.

Antecedentes de la invención

La familia de proteínas Ras es importante en la vía de la transducción de señales que modulan el crecimiento celular. La proteína se produce en el ribosoma, se descarga al citosol, y se modifica postranslacionalmente. El primer Paso en la serie de modificaciones postranslacionales es la alquilación de la Cys^{168} con pirofosfato de farnesilo o geranilgeranilo en la reacción catalizada por enzimas de prenil-transferasa tal como la farnesil-transferasa y geranilgeranil-transferasa (Hancock, JF. y colaboradores, Cell 57:1167-1177 (1989)). A continuación, los tres ácidos C-terminales se escinden (Gutiérrez, L. y colaboradores, EMBO J. 8:1093-1098 (1989)), y el Cys terminal se convierte en un éster metílico (Clark, S., y colaboradores, Proc. Nat'l Acad. Sci. (USA) 85:4643-4647 (1988)). Algunas formas de Ras se palmitoílan también reversiblemente sobre residuos de cisteína inmediatamente N-terminales a Cys^{168} (Buss, JE, y colaboradores, Mol. Cell. Biol. 6:116-122(1986)). Se cree que estas modificaciones aumentan el carácter hidrófobo de la región C-terminal de las Ras, haciendo que se localice en la superficie de la membrana celular. La localización de las Ras en la membrana celular es necesaria para la transducción de señales (Willumsen, BM, y colaboradores, Science 310:583-586 (1984)).

Se observaron formas oncogénicas de las Ras en un número relativamente grande de cánceres que incluyen por encima del 50 por ciento de los cánceres de colon y por encima del 90 por ciento de los cánceres de páncreas (Bos, JL. Cancer Research 49:4682-4689 (1989)). Estas observaciones sugieren que intervención en la función de la transducción de señales mediatizadas por las Ras puede ser útil en el tratamiento del cáncer.

Anteriormente, se ha demostrado que el tetrapéptido C-terminal de las Ras tiene el motivo "CAAX" (en el que C es cisteína, A es un aminoácido alifático y X es cualquier aminoácido). Se ha demostrado que los tetrapéptidos que tienen esta estructura van a ser inhibidores de las prenil-transferasas (Reiss, y colaboradores, Cell 62:81-88 (1990)). La pobre potencia de estos primeros inhibidores de la farnesil-transferasa ha incitado a la búsqueda de nuevos inhibidores con un comportamiento farmacocinético más favorable (James, GL y colaboradores, Science 260:1937-1942 (1993)); Kohl, NE y colaboradores Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 91:9141-9145 (1994); deSolms, SJ, y colaboradores, J. Med. Chem. 38:3967-3971 (1995); Nagasu, T. y colaboradores, Cancer Research 55:5310-5314 (1995); Lemer, EC, y colaboradores, J. Biol. Fchen. 270:26802-26806 (1995); Lemer, EC y colaboradores, J. Biol. Chem. 270:26770 (1995); y James y colaboradores, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:4454 (1996)).

Recientemente, se ha demostrado que un inhibidor de la prenil-transferasa puede bloquear el crecimiento de tumores dependientes de las Ras en ratones desnudos (Kohl, NE. y colaboradores, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:9141-9145 (1994). Además, se ha demostrado que por encima del 70 por ciento de un gran muestreo de líneas de células tumorales están inhibidas por los inhibidores de la prenil-transferasa con células epiteliales selectivamente no transformadas (Sepp-Lorenzino, I. y colaboradores, Cancer Research, 55:5302-5309 (1995)). Se ha descrito la farnesilación inhibidora como un procedimiento para tratar infecciones por virus delta de la hepatitis, (Casey, P. y colaboradores, WO 97/31641).

Resumen de la invención

En un aspecto, la invención caracteriza un compuesto de fórmula (I):

1

en la que

n1 es 0 ó 1;

X es, independientemente para cada caso, (CHR^{11})_{n3}(CH_{2})_{n4}Z(CH_{2})_{n5};

Z es O, N(R^{12}), S, o un enlace;

n3 es, independientemente para cada caso, 0 ó 1;

n4 y n5 son, independientemente para cada caso, 0, 1, 2 ó 3;

Y es, independientemente para cada caso, CO, CH_{2}, CS o un enlace;

2

o N(R^{24}R^{25});

R^{2}, R^{11} y R^{12} es cada uno, independientemente para cada caso, H o un resto seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}) y arilo, en el que dicho resto está opcionalmente sustituido con uno o más R^{8} o R_{30};

R^{3} es, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}), alquenilo(C_{2-6}), alquinilo(C_{2-6}), cicloalquilo(C_{3-6}), alquil(C_{1-6})cicloalquilo(C_{3-6}), cicloalquenilo(C_{5-7}), cicloalquenil(C_{5-7})alquilo(C_{1-6}), arilo, aril-alquilo(C_{1-6}), heterociclilo, y heterociclil-alquilo(C_{1-6}), en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituid con uno o más R^{30};

R^{4} y R^{5} son cada uno, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}), cicloalquilo(C_{3-6}), arilo, y heterociclilo, en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más R^{30}, en el que cada sustituyente se selecciona independientemente, o R^{4} y R^{5} se pueden considerar junto a los carbonos a los que están unidos para formar un arilo;

R^{6} es, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}), alquenilo(C_{2-6}), cicloalquilo(C_{3-6}), alquil(C_{1-6})cicloalquilo(C_{3-6}), cicloalquenilo(C_{5-7}), cicloalquenil(C_{5-7})alquilo(C_{1-6}), arilo, aril-alquilo(C_{1-6}), heterociclilo, y heterociclil-alquilo(C_{1-6}), en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente cada uno del grupo consistente en OH, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), -N(R^{8}R^{9}), -COOH, -CON(R^{8}R^{9}), y halo,

donde R^{8} y R^{9} son cada uno, independientemente para cada caso, H, alquilo(C_{1-6}), alquenilo(C_{2-6}), alquinilo(C_{2-6}), arilo o aril-alquilo(C_{1-6});

R^{7} es, independientemente para cada caso, H, =O, =S, o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}), alquenilo(C_{2-6}), cicloalquilo(C_{3-6}), cicloalquil(C_{3-6})alquilo(C_{1-6}), cicloalquenilo(C_{5-7}), cicloalquenil(C_{5-7})alquilo(C_{1-6}), arilo, aril-alquilo(C_{1-6}), heterociclilo, y heterociclil-alquilo(C_{1-6}), en los que dicho resto sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionado cada uno, independientemente, del grupo consistente en OH, alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), -N(R^{8}R^{9}), -COOH, -CON(R^{8}R^{9}), y halo;

R^{10} es C;

O cuando n1 = 0, R^{6} y R^{7} se pueden considerar junto con los átomos de carbono a los que están unidos, para formar arilo o ciclohexilo;

R^{21} es, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido, seleccionado del grupo consistente en alquilo (C_{1-6}) y aril-alquilo(C_{1-6}), en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, seleccionados independientemente cada uno del grupo consistente en R^{8} y R^{30};

R^{22} es H, alquiltio(C_{1-6}), cicloalquiltio(C_{3-6}), R^{8}-CO-, o un sustituyente según la fórmula

3

R^{24} y R^{25} cada uno es, independientemente para cada caso, H, alquilo(C_{1-6}), o aril-alquilo(C_{1-6});

R^{30} es, independientemente para cada caso, alquilo(C_{1-6}), -O-R^{8}, S(O)_{n6}R^{8}, -S(O)_{n7}N(R^{8}R^{9}), N(R^{8}R^{9}), -CN, -NO_{2}, -CO_{2}R^{8}, -CON(R^{8}R^{9}), -NCO-R^{8}, o halógeno;

N6 y n7 es cada uno, independientemente para cada caso, 0, 1 ó 2;

en la que dicho heterociclilo es azepinilo, bencimidazol, bencisoxazolilo, benzofurazanilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, cromanilo, cinnolinilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotio-piranil-sulfona, furilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, indolinilo, indolilo, isocromanilo, isoindolinilo, isoquinolinilo, isotiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, morfolinilo, naftiridinilo, oxazodiazolilo, 2-oxoazepinilo, 2-oxopiperacinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, piperidilo, piperacinilo, piridilo, piridil-N-óxido, quinoxalinil, tetrahidrofuril, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiamofolinilo, tiamofolinil-sulfóxido, tiazolilo, tiazolinilo, tienofurilo, tienotienilo, o tienilo; y

en la que dicho arilo es fenilo o naftilo;

con tal que:

cuando n1 = 1, R^{10} es C y R^{6} es H, entonces R^{10} y R^{7} se pueden considerar juntos para formar

4

o cuando n1 = 1, R^{10} es C, y R^{7} es =O, -H, o =S, entonces R^{10} y R^{6} se pueden considerar juntos para formar

5

en la que X^{1}, X^{2}, y X^{3} es cada uno, independientemente, H, halógeno, -NO_{2}, -NCO-R^{8}, -CO_{2}R^{8}, -CN, o -CON(R^{8}R^{9}); y con tal que la estructura R^{1}-X-Y no contenga un resto (2-amino-3-tiopropilo) o un resto (2-amino-1-oxo-3-tiopropilo);

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Un grupo preferido de compuestos de fórmula (I), designado grupo A, es donde R^{1} es

6

o N(R^{24}R^{25}); y

X es CH(R^{11})_{n3}(CH_{2})_{n4}, en la que Z es O, S o N(R^{12});

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Otro grupo preferido de compuestos de fórmula (I), designado como grupo B, es donde R^{1} es

7

X es CH(R^{11})_{n3}(CH_{2})_{n4}; y

n1 es 0;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Otro grupo preferido de compuestos de fórmula (I), designado como grupo C, es donde R^{1} es

8

n3, n4 y n5 es cada uno 0;

Z es un enlace

Y es, independientemente para cada caso, CO o CS; y

n1 es 0;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Otro grupo preferido de compuestos de fórmula (I), designado como grupo D, es donde R^{1} es

9

R^{6} es H;

n1 es 1;

R^{7} y R^{10} se consideran juntos para formar

10

n3 es 1 y R^{11} es H;

Z es O o un enlace;

n5 es 0; y

Y es CO, CH_{2} o un enlace;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

Otro grupo preferido de compuestos de fórmula (I), designado como grupo E, es donde R^{1} es

11

R^{7} es H o =O;

n1 es 1;

R^{6} y R^{10} se consideran juntos para formar

12

n3 es 1 y R^{11} es H;

n5 es 0;

Y es CO o CH_{2}; y

Z es O o un enlace;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, la presente invención está dirigida a una composición farmacéutica que comprende uno o más de un compuesto (I), como se definió aquí anteriormente, o una sal suya farmacéuticamente aceptable, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En todavía otro aspecto, la presente invención está dirigida a un procedimiento para inhibir las prenil-transferasas (por ejemplo, farnesil-transferasa o geranilgeranil-transferasa) en un sujeto, por ejemplo un mamífero tal como un ser humano, administrando al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I, como se definió aquí anteriormente, o una sal suya farmacéuticamente aceptable. En un aspecto más, la presente invención está dirigida a un procedimiento para tratar la restenosis o enfermedades proliferativas de los tejidos (por ejemplo, un tumor) en un sujeto, administrando al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal suya farmacéuticamente aceptable. Ejemplos de una enfermedad proliferativa de los tejidos incluyen tanto las asociadas con la proliferación celular benigna (por ejemplo no malignas) tal como la fibrosis, hiperplasia prostática benigna, aterosclerosis, y restenosis, como las asociadas con la proliferación celular maligna, tal como el cáncer (por ejemplo, tumores ras-mutantes). Ejemplos de tumores tratable incluyen, pero no se limitan a, cánceres de mama, colon, páncreas, próstata, pulmón, ovarios, epidérmicos y hematopoyéticos (Sepp-Lorenzino, I. y colaboradores, Cancer Research 55:5302 (1995)).

En todavía otro aspecto más, la presente invención está dirigida al uso de uno o más compuestos de fórmula (I), como se definió aquí anteriormente, o una sal suya farmacéuticamente aceptable, para unirse a una prenil-transferasa, como cuando se lleva a cabo un ensayo in vitro o in vivo.

Descripción detallada de la invención

En general, los compuestos de fórmula (I) se pueden hacer mediante procedimientos que incluyen los conocidos en las técnicas químicas para la producción de compuestos. Ciertos procedimientos para la elaboración de compuestos de fórmula (I) se proporcionan como aspectos más de la invención y se ilustran mediante los esquemas de reacción y ejemplos incluidos en la presente memoria descriptiva.

En las anteriores fórmulas estructurales y a lo largo de toda la presente solicitud, los siguientes términos tienen los significados indicados a menos que se establezca expresamente otra cosa:

El término alquilo pretende incluir aquellos grupos alquilo que tienen el número designado de átomos de carbono tanto en una configuración de cadena lineal como ramificada. Ejemplos de estos grupos alquilo son metilo, etoilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, butilo terciario, pentilo, isopentilo, hexilo, isohexilo, y similares. Cuando se incluye el término C_{0}-alquilo en una definición, se pretende indicar un enlace covalente sencillo.

El término cicloalquilo pretende incluir un grupo monocicloalquilo o un grupo bicicloalquilo que tiene el número designado de átomos de carbono. Ejemplos de estos grupos cicloalquilo son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclohexilo y similares.

El término alquenilo pretende incluir grupos hidrocarbonados que tienen uno o más dobles enlaces y el número designado de átomos de carbono tanto en configuración de cadena lineal como ramificada. Ejemplos de estos grupos alquenilo son etenilo, propenilo, isopropenilo, butenilo, sec-butenilo, butenilo terciario, pentenilo, isopentenilo, hexenilo, isohexenilo y similares.

El término cicloalquenilo pretende incluir un grupo monocicloalquenilo o un grupo bicicloalquenilo del número indicado de carbonos que tienen uno o más dobles enlaces, peor no suficientes dobles enlaces como para hacer el grupo aromático. Ejemplos de estos grupos cicloalquenilo son ciclopentenilo, ciclohexenilo, cicloheptenilo y similares.

El término alquinilo pretende incluir los grupos alquinilo, es decir grupos hidrocarbonados que tienen uno o más triples enlaces, que tienen el número de átomos de carbono designado tanto en una configuración de cadena lineal como ramificada. Ejemplos de estos grupos alquinilo son etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, isopentinilo, hexinilo, isohexinilo y similares.

El término alquiltio pretende incluir aquellos grupos alquiltio, es decir grupos hidrocarbonados que están unidos a la molécula a través de un átomo de azufre, que tiene el número designado de átomos de carbono tanto en configuración lineal como ramificada. Ejemplos de estos grupos alquilo son el metilito, etiltio, propiltio, isopropiltio, butiltio, sec-butiltio, butiltio terciario, pentiltio, isopentiltio, hexiltio, y similares.

El término cicloalquiltio pretende incluir un grupo monoalquiltio o un grupo bicicloalquiltio del número indicado de átomos de carbono. Ejemplos de estos grupos cicloalquiltio son el ciclopentitio, ciclohexiltio, y similares.

El término alcoxi pretende incluir aquellos grupos alcoxi que tienen el número designado de átomos de carbono tanto en una configuración de cadena lineal como ramificada. Ejemplos de estos grupos alcoxi son metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, butoxi terciario, pentoxi, isopentoxi, hexoxi, isohexoxi y similares.

El término arilo pretende incluir anillos aromáticos conocidos en la técnica, que pueden ser monocíclicos o bicíclicos tales como fenilo y naftilo.

El término heterociclilo, según se utiliza en la presente memoria descriptiva, representa un anillo heterocíclico monocíclico de 5 a 7 miembros, o bicíclico de 8 a 11 miembros, o tricíclico de 11-15 miembros que está o bien saturado o insaturado , y que constan de átomos de carbono y de uno a cuatro heteroátomos, seleccionados del grupo consistente en átomo de carbono y de uno a cuatro heteroátomos, seleccionados independientemente del grupo consistente en N, O, y S. También está incluido cualquier grupo bicíclico en el que algunos de los anillos heterocíclicos anteriormente definidos se fusiona a un anillo bencénico, en el que el anillo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono. Ejemplos de estos resto heterocíclicos incluyen, pero no se limitan a, azepinilo, bencimidazolilo, bencisoxazolilo, benzofuracinilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, cromanilo, cinnolinilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotio-piranil-sulfona, furilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, indolinilo, indolilo, isocromanilo, isoindolinilo, isoquinolinilo, isotiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, morfolinilo, naftiridinilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, 2-oxopiperazinilo, 2-oxopiperadinilo, 2-oxopirrolidinilo, piperidilo, piperacinilo, piridilo, piridil-N-óxido, quinoxalinilo, tetrahidrofurilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiamorfolinilo, tiamorfolinil-sulfóxido, tiazolilo, tiazolinilo, tienofurilo, tienotienilo, tienilo, y similares.

El químico de experiencia normal reconocerá que ciertas combinaciones de sustituyentes que contienen heteroátomos listados en esta invención definen compuestos que serán menos estables bajo condiciones fisiológicas. Por consiguiente, estos compuestos son menos preferidos.

El término halógeno o halo pretende incluir los átomos de halógeno flúor, cloro, bromo y yodo.

Cuando una estructura química, como la usada en la presente memoria descriptiva tiene una flecha que sale de ella, la flecha indica el punto de unión. Por ejemplo, la estructura

13

es un grupo pentilo. Cuando aparece un valor entre paréntesis cerca de la flecha, el valor indica dónde se puede encontrar el punto de unión. Por ejemplo, en la fórmula general (I):

14

como se definió anteriormente en la presente memoria descriptiva, donde R^{10} y R^{7} se consideran juntos para formar

15

da como resultado la siguiente estructura:

16

Cuando se traza una línea a través de un resto cíclico, la línea indica que el sustituyente se puede unir al resto cíclico en cualquiera de los puntos de unión disponibles. Por ejemplo,

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significa que el sustituyente "X" puede estar unido en posición orto, meta o, para al punto de unión. Además, cuando se traza una línea a través de un resto bicíclico o tricíclico, la línea indica que el sustituyente se puede unir al resto bicíclico o tricíclico en cualquiera de los puntos de unión disponibles en cualquiera de los anillos. De forma similar, cuando se traza una flecha a través de un resto cíclico, la flecha indica que el punto de unión del resto cíclico al compuesto puede tener lugar en cualquiera de los puntos de unión disponibles sobre el resto cíclico. Además, cuando se traza una flecha a través de un resto bicíclico o tricíclico, la flecha indica que el punto de unión del resto bicíclico o tricíclico al compuesto puede tener lugar en cualquiera de los puntos de unión disponibles en cualquiera de los anillos del resto bicíclico o tricíclico.

Alguno de los compuestos de la presente invención pueden tener al menos un centro asimétrico. En la molécula puede haber presente centros asimétricos adicionales dependiendo de la naturaleza de los diversos sustituyentes en la molécula. Cada uno de estos centros asimétricos producirá dos isómeros ópticos y se pretende que todos estos isómeros ópticos, como isómeros ópticos separados, puros o parcialmente purificados, mezclas racémicas o mezclas diastoméricas suyas, están incluidas dentro del alcance de la presente invención.

Los compuestos de la presente invención generalmente se pueden aislar en forma de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables, tales como las sales derivadas de utilizar ácidos orgánicos e inorgánicos. Ejemplos de estos ácidos son el clorhídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, fórmico, acético, trifluoroacético, propiónico, maleico, succínico, D-tartárico, L-tartárico, malónico, metanosulfónico y similares. Además, ciertos compuestos que contienen una función ácida, como un carboxi, se pueden aislar en forma de su sal inorgánica en la que el contraión se puede seleccionar de sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, y similares, así como de bases orgánicas.

Las sales farmacéuticamente aceptables se pueden formar tomando aproximadamente 1 equivalente de un compuesto de fórmula (I) y poniéndolo en contacto con aproximadamente 1 equivalente o más del correspondiente ácido apropiado de la sal que se desea. El desarrollo y el aislamiento de la sal resultante es bien conocido por los expertos normales en la técnica.

Los compuestos de esta invención se pueden administrar por vía de administración oral, parenteral (por ejemplo, por inyección intramuscular, intraperitoneal, intravenosa o subcutánea, o implante), nasal, vaginal, rectal, sublingual o tópica y se pueden formular con vehículos farmacéuticamente aceptable para proporcionar formas de dosificación apropiadas para cada vía de administración. Por consiguiente, la presente invención incluye dentro de su alcance composiciones farmacéuticas que comprenden, como ingrediente activo, al menos uno de los compuestos de fórmula (I) en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las formas sólidas de dosificación para la administración oral incluyen cápsulas, pastillas, píldoras, polvos y gránulos. En estas formas sólidas de administración, el compuesto activo se mezcla con al menos un vehículo inerte farmacéuticamente aceptable al como sacarosa, lactosa, o almidón. Estas formas de dosificación también pueden contener, como es práctica normal, sustancias adicionales distintas a estos diluyentes inertes, por ejemplo agentes lubricantes tales como estearato de magnesio. En el caso de cápsulas, pastillas y píldoras, las formas de dosificación pueden comprender también antes tamponantes. Las pastillas y píldoras se pueden preparar además con revestimientos entéricos.

Las formas líquidas de dosificación para la administración oral, incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables, que contienen diluyentes inertes usados comúnmente en la técnica, tal como el agua. Al lado de estos diluyentes inertes, las composiciones pueden incluir también adyuvantes, tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y formadores de suspensiones, y agentes edulcorante, perfumantes y que dan sabor.

Las composiciones según esta invención para administración parenteral incluyen soluciones, suspensiones o emulsiones acuosas, o no acuosas, estériles. Ejemplos de disolventes o vehículos no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales tales como aceite de oliva y aceite de maíz, gelatina, y ésteres orgánicos inyectables tales como oleato de etilo. Estas formas de dosificación pueden contener también adyuvantes tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionente, y dispersante. Se pueden esterilizar, por ejemplo mediante filtración a través de un filtro que retenga bacterias, incorporando a la composición agentes esterilizantes, irradiando las composiciones, o calentando las composiciones. También se pueden elaborar en forma de composiciones sólidas estériles que se pueden disolver en agua esterilizada, o algún otro medio inyectable estéril, inmediatamente antes de su uso.

Las composiciones para administración rectal o vaginal son, preferiblemente, supositorios que pueden contener, además de la sustancia activa, excipientes tales como mantequilla de coca o una cera para supositorios.

Las composiciones para administración nasal o sublingual se preparan también con excipientes bien conocidos en la técnica.

En general, una dosificación eficaz de ingrediente activo en las composiciones de esta invención se puede variar; sin embargo, es necesario que la cantidad del ingrediente activo sea tal que se obtenga una forma de dosificación adecuada. La dosificación seleccionada depende del efecto terapéutico deseado, de la vía de administración, y de la duración del tratamiento, la totalidad de los cuales está dentro del conocimiento de un experto normal en la técnica. Generalmente, se administran diariamente a los seres humanos y otros animales, por ejemplo mamíferos, niveles de dosificación entre 0,0001 a 100 mg/kg de peso corporal.

Un intervalo de dosificación preferido es, diariamente, 0,01 a 10,0 mg/kg de peso corporal, que se puede administrar como una dosis única o dividida en múltiples dosis.

Los compuestos de la presente invención pueden ser, y fueron, evaluados por su actividad sobre el crecimiento dependiente del anclaje de las líneas de células tumorales humanas, según el siguiente ensayo.

Se sembraron células en una placa de 96 pocillos en el día 0, y tratadas a partir del día 1 durante 96 horas con las siguientes concentraciones de un compuesto de la presente invención: 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,39 y 0,00 \muM. Al final de este periodo, se evaluó la cuantificación de la proliferación celular mediante un ensayo colorimétrico basado en la escisión de la sal de tetrazolio WST1 mediante deshidrogenasas mitocondriales en las células viables que llevan a la formación de formazan. Estos experimentos se repitieron dos veces en octuplicados, permitiendo así la determinación de una zona de observación de concentración del compuesto que incluye el valor de
CI_{50}.

El protocolo descrito inmediatamente antes se llevó a cabo usando las siguientes líneas de células tumorales humanas: Próstata: adenocarcionoma DU145, con ras WT, resistentes al L744-832; Colon: HT29, adenocarcinoma con ras Tipo salvaje (WT), sensible a L744-832; Páncreas: MIA PaCa-2, carcinoma con mutación de Ki-ras.

Se entenderá que mientras se ha descrito la invención junto con su descripción detallada, que la descripción anteriormente mencionada pretende ilustrar y no limitar el alcance de la invención, que se define mediante el alcance de las reivindicaciones ajuntas.

Ejemplos

Compuesto 1

8-butil-7-(3-(imidazol-5-il)-1-oxopropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

18

Compuesto 2

8-butil-2-(2-hidroxifenil)-7-(imidazol-4-il-propil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

19

\newpage

Compuesto 3

8-butil-7-(4-imidazolilpropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo-[1,2a]-pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

20

Compuesto 4

7-(2-(imidazol-4-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

21

Compuesto 5

2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-7-(1-oxo-2-(1-(fenilmetil)-imidazol-5-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

22

Compuesto 6

2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-7-(2-(1-fenilmetil)-imidazol-5-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

23

\newpage

Compuesto 7

7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

24

Compuesto 8

7-((1H-imidazol-4-il)metil-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

25

Compuesto 9

7-((4-imidazolil)carbonil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

26

Compuesto 10

7-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)metil-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

27

\newpage

Compuesto 11

5-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-5,6-dihidro-2-fenil-1H-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

28

Compuesto 12

7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

29

Compuesto 13

5-butil-7-(2-(4-cianofenilmetilimidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-fenil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

30

Compuesto 14

6-butil-7-(2-(4-cianofenilmetilimidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

31

Compuesto 15

6-butil-7-(2-(4-cianofenilmetilimidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-fenil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

32

\newpage

Compuesto 16

5-butil-7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

33

Compuesto 17

7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-8-(ciclohexilmetil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

34

Compuesto 18

5-butil-7-(2-(1H-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

35

Compuesto 19

7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-fenilmetoxi)-fenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

36

\newpage

Compuesto 20

2-(2-butoxifenil)-7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-1-oxo-etil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

\vskip1.000000\baselineskip

37

Compuesto 21

1,2-dihidro-1-((1H-imidazol-4-il)metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

38

Compuesto 22

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

39

Compuesto 23

9-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

40

\newpage

Compuesto 24

9-cloro-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

41

Compuesto 25

10-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

42

Compuesto 26

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

43

Compuesto 27

1,2-dihidro-1-(2-(imidazol-1-il)-1-oxoetil)-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

44

\newpage

Compuesto 28

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-(piridin-3-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

45

Compuesto 29

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-(piridin-4-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

46

Compuesto 30

1-(2-(1-bencilimidazol-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

47

Compuesto 31

1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-5-il)-1-oxoetil-9,10-difluoro-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

48

\newpage

Compuesto 32

4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-[(4-ciano)fenilmetil]imidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

49

Compuesto 33

1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-10-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

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50

Compuesto 34

1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

51

Compuesto 35

10-bromo-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

\vskip1.000000\baselineskip

52

Compuesto 36

1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi))fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-8-fluoro-4-fenilimidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

53

Compuesto 37

4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi))fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-8-fluoroimidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

54

Compuesto 38

1-(2-(1-((3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenilimidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepina

55

Compuesto 39

1-(2-(5-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-1-il)-1-oxoetil-2,5-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]-benzodiazepina

56

Parte experimental

En los siguientes ejemplos y esquemas las variables sustituyentes son como se definen en la presente memoria descriptiva. Las variables sustituyentes de los esquemas y ejemplos no necesariamente coinciden con las definidas en las reivindicaciones.

Ejemplo 1 8-butil-7-(3-(imidazol-5-il)-1-oxopropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El ejemplo 1 se sintetizó según el esquema 1 como se establece a continuación.

Esquema 1

57

\vskip1.000000\baselineskip

1.a. H_{2}/Pd sobre carbono/HOAC

1.b. (BOC)_{2}O/K_{2}CO_{3}/5% HCl ac./MeOH

1.c. Cs_{2}CO_{3}, Br-CHR^{5}COR^{4}, luego NH_{4}OAc/xilenos

1.d. Br-CHR^{6}CO_{2}Et/K_{2}CO_{3}/DMF

1.e. H_{2}/Pd sobre carbono/HOAc

1.f. BH_{3}/THF

1.g. Compuesto II/DCC/HOAt/DMF

1.h. Tfa/Ipr_{3}SiH

Paso 1.a

Ácido 3-(1H-imidazol-5-il)-propiónico

Se disolvió ácido urocánico (compuesto i, donde R^{2} es H) (1,38 g, 10,0 mmoles) en HCl acuoso al 5% (20 ml) más MeOH (15 ml) que contenía 10% de Pd sobre carbono (100 mg) y la mezcla se agitó mediante sacudidas durante una noche a aproximadamente 206,8 kPa (30 psi) de H_{2}. Se separó el catalizador por filtración a través de una almohadilla de tierra de diatomeas de 3 cm y el filtrado se concentró hasta un sólido y se secó durante una noche a vacío. El material crudo se usó sin más purificación. Espectro de masas 141,4 MH^{+}.

Paso 1.b

Ácido 3-(1-((1,1-dimetiletoxi)carbonil)-imidazol-5-il)-propiónico

El producto crudo procedente del Paso 1.a. (10,0 mmoles) se disolvió en H_{2}O (10 ml) que contenía K_{2}CO_{3} (2,76 g, 20 mmoles) y a eso se le añadió dicarbonato de di-terc-butilo (2,18 g, 10,0 mmoles) en acetonitrilo (20 ml). Se agitó vigorosamente la reacción durante 3 horas, luego se añadió H_{2}O (10 ml) y la mezcla se concentró hasta aproximadamente ½ del volumen. La mezcla se acidificó con ácido cítrico y se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Los extractos acuosos se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron y se concentraron hasta formar sólidos que se secaron a presión reducida para dar 1,89 g (79%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 12,0-12,2(1H, s), 8,0-8,2(1H, s), 7,2-7,3(1H, s), 2,65-2,8(2H, t), 2,45-2,65(2H, t), 1,5-1,7(9H, s).

Paso 1.c

2-(1-(S)-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-pentil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol

Se combinaron Cbz-(L)-Norleucina (compuesto iii, donde R^{3} es n-butilo) (10,6 g, 40,0 mmoles) y Cs_{2}CO_{3} (6,52 g, 20,0 mmoles) en DMF:H_{2}O 2:1 (65 ml) y la mezcla se removió dando vueltas hasta que se hizo homogénea. Los disolventes se separaron a presión reducida, el residuo se disolvió en DMF (75 ml) y se añadió 2-bromo-2'-metoxiacetofenona (9,16 g, 40,0 mmoles) en DMF (50 ml). La mezcla se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente y luego se concentró a presión reducida. El ceto-éster resultante se disolvió en xilenos (250 ml), se filtró, se añadió NH_{4}OAc (50,0 g, 0,36 moles), y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 3 horas con separación de del exceso de NH_{4}OAc y se liberó H_{2}O usando una trampa Dean-Stark. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. Se añadió solución saturada de NaHCO_{3} (100 ml) y el producto se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 50 ml). Las capas de CH_{2}Cl_{2} combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a vacío para dar una primera cosecha de 6,23 g (m.r. = 118-121ºC) del compuesto del título. Las aguas madres se purificaron mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando EtOAc:hexanos 2:3, como eluyente. Las fracciones de producto puro se combinaron y se concentraron para producir una segunda cosecha de 3,26 g (i.f. = 119-122ºC) para una producción combinada de 9,49 g (60%) del compuesto del título. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 11,7-11,9(1H, s), 8,0-8,15(1H, d), 7,5-7,7(1H, m), 7,4-7,5(1H, s), 7,1-7,4(6H, m), 6,9-7,12H, m), 4,95(-5,2(2H, q), 4,6-4,8(1H, q), 3,8-4,0(3H, s), 1,6-2,0(2H, m), 1,1-1,4(4H, m), 0,8-1,0(3H, t).

Paso 1.d

1-(2-etoxi-2-oxoetil)-2-(1-(S)-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-fenil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol

El producto del Paso 1.c. (compuesto iv, donde R^{3} es n-butilo, R^{4} es 2-metoxifenil, y R^{5} es H) (9,40 , 23,9 mmoles) se disolvió en DMF (50 ml) y se trató con K_{2}CO_{3} (6,90 g, 50,0 mmoles) y bromoacetato de etilo (4,17 ml, 75,0 mmoles), y la mezcla se calentó a aproximadamente 55ºC durante aproximadamente 2 horas. La mezcla se concentró, luego se disolvió en éter (100 ml) y se lavó una vez con solución saturada de NaHCO_{3} (50 ml) y una vez con solución saturada de NaCl (50 ml). La capa de éter se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró hasta dar un aceite (11,5 g, 100%) que se usó sin más purificación. Espectro de masas 480,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,04-8,12(1H, d,d), 7,65-7,85(1H, t ancha), 7,5-7,6(1H, s), 7,25-7,4(5H, m), 7,1-7,25(1H, m), 7,0-7,1(1H, d), 6,9-7,05(1H, t), 4,9-5,15(2H, q), 5,0-5,2(2H, s), 4,5-4,7(1H, q), 4,05-4,2(2H, q), 3,8-4,0(3H, s), 1,8-2,0(2H, m), 1,2-1,4(4H, m), 1,15-1,25(3H, t), 0,75-0,95(3H, t).

Paso 1.e

8-butil-6-oxo-2-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-a]piperazina

El producto del Paso 1.d. (compuesto v, donde R^{3} es n-butilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, y R^{5} y R^{6} son H) (11,5 g, 23,9 mmoles) se disolvió en HOAC (100 ml) que contenía un catalizador de 10% de Pd sobre carbono (500 mg) y se hidrogenó a 345 kPa (50 psi) de H_{2} durante aproximadamente 3 horas a temperatura ambiente. El catalizador se separó por filtración a través de una almohadilla de tierra de diatomeas de 3 cm, y el filtrado se calentó a aproximadamente 70ºC durante aproximadamente 2 horas. La mezcla se concentró hasta dar un sólido a presión reducida, se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (100 ml) y se lavó con solución saturada de NaHCO_{3} (125 ml). La capa de CH_{2}Cl_{2} se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se añadieron 275 ml de hexanos. El producto se separó por filtración y se secó hasta peso constante para dar 6,21 g (87%) de producto, i.f. = 200-202ºC, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,5-8,6(1H, s), 8,0-8,1(1H, d), 7,4-7,6(1H, s), 7,1-7,3(1H, t), 7,0-7,1(1H, d), 6,9-7,1(1H, t), 4,55-4,8(2H, q), 4,55-4,7(1H, t), 3,8-4,0(3H, s), 1,75-1,95(2H, m), 1,1-1,5(4H, m), 0,8-0,9(3H, t).

Paso 1.f

8-butil-2-(2-metoxifenil)-5,6-7,8-tetrahidro-imidazo[1,2-a]piperazina

El producto del Paso 1.e. (6,13 g, 20,5 mmoles) (compuesto vi, donde R^{3} es n-butilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, y R^{5} y R^{6} son H) se disolvió en THF (100 ml) y se trató con BH_{3}/THF 1M (82,0 ml, 82,0 mmoles) a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas y luego se puso a reflujo durante aproximadamente 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se añadió, gota a gota, HCl 4N (50 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas, luego se basificó mediante la adición cuidadosa de porciones de K_{2}CO_{3} sólido. El producto se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas de EtOAc se combinaron, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (aproximadamente 50 ml), se añadió HCl concentrado (1,75 ml) y la solución se concentró de nuevo a presión reducida. El producto se cristalizó en MeOH/Et_{2}O para dar 6,76 g (92%) del producto deseado. Espectro de masas 286,2 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 10,0-11,5(2H, s ancha), 8,05-8,15(1H, d,d), 8,0-8,1(1H, s), 7,35-7,5(1H, t), 7,15-7,3(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 4,8-4,95(1H, m), 4,4-4,65(2H, m), 3,9-4,0(3H, s9, 3,65-3,8(1H, m), 3,5-3,65(1H, m), 2,45-2,65(1H, m), 2,1-2,35(1H, m), 1,5-1,7(2H, m), 1,25-1,5(2H, m), 0,85-1,0(3H, t).

Paso 1.g

8-butil-7-(3-(((1,1-dimetiletoxi)carbonil)-imidazol-5-il)-1-oxopropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo[1,2-a]pirazina

Se disolvió DCC (309 mg, 1,50 mmoles) y el producto del Paso 1.b. (compuesto ii, donde R^{2} es H) (720 mg, 3,00 mmoles) en THF (10 ml) y se agitó durante aproximadamente 30 minutos a temperatura ambiente. Los sólidos se separaron por filtración, se añadió el producto del Paso 1.f (compuesto vii, donde R^{3} es n-butilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, y R^{5}, R^{6} y R^{7} son H) (358 mg, 1,0 mmoles), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentró hasta formar una goma y se purificó mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando EtOAc como eluyente. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron hasta formar un vidrio, y se secó hasta peso constante. Producción 500 mg (995). Espectro de masas 508,2 (MH^{+}).

Paso 1.h

8-butil-7-(3-(imidazol-5-il)-1-oxopropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

El producto del Paso 1.g (450 mg, 0,89 mmoles) se disolvió en MeOH (5 ml) y se añadió HCl 4N, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente ½ hora. Los disolventes se separaron a presión reducida para dar 420 mg de producto crudo. Parte del crudo (100 mg) se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} (Varian Analytical, Walnut Creek, CA) usando un gradiente de 10-30% de CH_{3}CN/HCl ac. (pH = 2,0) durante 45 minutos con detección UV a 245 nm. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizó para dar un producto puro (47 mg, 47%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 508,2 MH^{+}.

Ejemplo 2 8-butil-2-(2-hidroxifenil)-7-(imidazol-4-il-propil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El producto del Paso 1.h. (compuesto viii, donde R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H, R^{3} es n-butilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, X es -CH_{2}- e Y es -CO-) (320 mg, 0,667 mmoles), se disolvió en un mínimo de THF y se añadió, gota a gota, con agitación, una solución 1M de BH_{3} en THF (10,0 ml, 10,0 mmoles). La mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 horas, luego se enfrió. Se añadió, gota a gota, una solución de HCl 4N, y la mezcla se calentó brevemente a reflujo y luego se basificó mediante la adición cuidadosa de porciones de K_{2}CO_{3} sólido. El producto se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml) y luego se extrajo de nuevo con Tfa acuosa al 0,5% (4 x 10 ml). El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 0-25% CH_{3}CN/0,1% Tfa acuosa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizó luego, y luego se liofilizó dos veces desde HCl diluido para dar el producto puro (41 mg, 13%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 380,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,0-9,1(1H, s), 7,9-8,05(2H, m), 7,45-7,55(1H, s), 7,2-7,3(1H, t), 7,05-7,15(1H, d), 6,9-7,0(1H, t), 4,5-6,0(3-4H, s ancha), 4,0-4,4(), 1,5-1,7(2H, m), 1,25-1,5(2H, m), 0,8-1,0(3H, t).

Ejemplo 3 8-butil-7-(4-imidazolilpropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El producto del Paso 1.h. (475 mg, 0,937 mmoles), se disolvió en MeOH (10 ml) y se añadió una solución de NaOH (80 mg, 2,moles) en H_{2}O (1 ml) a temperatura ambiente, y la mezcla se agitó durante aproximadamente ½ hora, y luego se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en THF (10 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida hasta aproximadamente 2 ml y se añadió BH_{3}/THF 1M (8,0 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 3 horas y se calmó mediante la adición de HCl acuoso al 5% con breve calentamiento a reflujo. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se basificó mediante la adición cuidadosa de NaHCO_{3} sólido, y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 10 ml). Las capas de CH_{2}Cl_{2} se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 0-25% CH_{3}CN/HCl ac. (pH = 2,0) durante 45 minutos con detección de UV a 270 nm. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizó luego para dar el producto puro (64 mg, 15%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 394,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,0-9,1(1H, s), 8,0-8,2(2H, d), 7,9-8,1(1H, s), 7,4-7,5(1H, s), 7,35-7,5(1H, t), 7,1-7,3(1H, d), 7,0-7,2(1H, t), 5,0-7,0(3H, s ancha), 4,1-4,5(3H, m), 3,9-4,0(3H, s), 3,2-3,7(2H, d, ancha), 2,7-3,0(2H, s, ancha), 2,6-2,9(2H, t), 1,9-2,2(4H, m), 1,0-1,7(4H, m), 0,8-1,0(3H, t).

Ejemplo 4 7-(2-(imidazol-4-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El ejemplo 4 se sintetizó según los Esquemas 1 y 4, reemplazándose los Pasos 1.a. y 1.b. por los Pasos 4.a. hasta 4.c.

Esquema 4

58

4.a. HCl/MeOH;

4.b. Clorotrifenilmetano/Et_{3}N/DMF;

4.c. NaOH 2,5N/MeOH

Paso 4.a

4-imidazolacetato de metilo

Una solución de sal sódica de ácido 4-imidazolacético, hidratado (compuesto ix, donde R^{2} es H) (3,0 g, 18,1 mmoles) en MeOH (50 ml) se enfrió a aproximadamente 0ºC y se hizo burbujear HCl gas anhidro en una mezcla durante aproximadamente 15 minutos, mientras que se mantenía la temperatura de reacción por debajo de aproximadamente 5ºC. La reacción se agitó durante aproximadamente ½ hora a temperatura ambiente y luego se separaron los disolventes a presión reducida para dar un aceite que solidifica al dejarlo reposar. Espectro de masas 141,0 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,0-9,2(1H, s), 7,4-7,6(1H, s), 3,85-3,95(2H, 3), 3,6-3,7(3H, s).

Paso 4.b

1-trifenilmetil-4-imidazolacetato de metilo

Una solución del producto del Paso 4.a. (3,2 g, 17,5 mmoles) en DMF (50 ml) se trató con clorotrifenilmetano (4,88 g, 17,5 mmoles)y Et_{3}N (5,4 ml, 38,5 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 horas. La DMF se evaporó a presión reducida y el residuo se distribuyó entre EtOAc y solución saturada de NaCl. La capa de EtOAc se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un producto como un aceite viscoso (6,96 g, 104%) que cristalizó al permanecer en reposo. Espectro de masas 383,3 MH^{+}.

Paso 4.c

Sal sódica del ácido 1-trifenilmetil-4-imidazolacético

Se disolvió el producto del Paso 4.b. (2,0 g, 5,24 mmoles) en MeOH (20 ml) y se añadió NaOH 1,5N (2,1 ml) a temperatura ambiente, y la mezcla se agitó durante una noche. Los disolventes se separaron a presión reducida para dar un producto crudo (2,08 g, 102%) que se usó en los siguientes pasos sin más purificación.

Los Pasos 4.d. a 4.i, se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 1.c. a 1.h. del ejemplo 1, partiendo de Cbz-(L)-Ile-OH en lugar de Cbz-(L)-Nle-OH, y dando 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidro-(7-(2-(1-trimetilfenil-imidazol-4-il)-1-oxo-etil)-imidazol[1,2a]pirazina) (compuesto viii, donde R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H, R^{3} es isobutilo, y R^{4} es 2-metoxifenilo).

Paso 4.j

7-(2-(1H-imidazol-4-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

Se trató el producto del Paso 4.i. (150 mg, 0,24 mmoles) con Tfa (1,0 ml) que contenía iPr_{3}SiH (51 \mul, 0,25 mmoles) a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas. Se añadió éter (10 ml) y el producto se extrajo con 3 x 10 ml de solución acuosa de Tfa al 0,1%. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20% a 70% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se reliofilizaron desde HCl diluido para dar el producto (53 mg, 57%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 394,3 MH^{+}.

Ejemplo 5 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-7-(1-oxo-2-(1-(fenilmetil)-imidazol,-5-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

El ejemplo 5 se sintetizó según los esquemas 1 y 5, reemplazándose los Pasos 1.a y 1.b por los Pasos 5.a. a 5.c.

Esquema 5

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59

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5.a. R^{1}-Br/CH_{3}CN

5.b. MeOH, reflujo;

5.c. HCl ac. Al 5%, reflujo

Paso 5.a

1-fenilmetil-3-trifenilmetil-5-imidazolacetato de metilo

Se disolvió 1-trifenilmetil-4-imidazolacetato de metilo del Paso 4.b. (1,12 g, 2,93 mmoles) en CH_{3}CN (15 ml) y se añadió bromuro de bencilo (349 \mul, 2,93 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se puso a reflujo durante aproximadamente 3 horas y se dejó reposar a temperatura ambiente durante una noche. Los disolventes se separaron a presión reducida y el residuo se usó sin más purificación en el Paso 5.b.

Paso 5.b

1-fenilmetil-5-imidazolacetato de metilo

Se disolvió 1 producto del Paso 5.a. en MeOH (20 ml), y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 1 hora. Los disolventes se separaron a presión reducida. El residuo se trituró con hexanos (2 x 20 ml) y con EtOAc (2 x 20 ml). El residuo se usó sin más purificación en el Paso 5.c.

Paso 5.c

Ácido 1-fenilmetil-5-imidazolacético

El producto del Paso 5.b. se disolvió en HCl acuosos al 5% y se calentó a reflujo durante aproximadamente 3 horas y luego se concentró a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 5% a 35% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se reliofilizaron desde HCl diluido para dar el producto (360 mg, 49%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 217,1 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,4-8,6(1H, s), 7,3-7,5(3H, m), 7,1-7,3(3H, m), 5,2-5,4(2H, s), 3,5-3,7(2H, s).

Los Pasos 5.d. a 5.g. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 1.c. a 1.f. del ejemplo 1, partiendo de Cbz-(L)-Ile-OH en lugar de Cbz-(L)-Nle-OH, y produciendo 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metiletil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo[1,2-a]pirazina (compuesto Vii, donde R^{3} es isobutilo, R^{4} es 2-metoxifenilo y R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H).

\newpage

Paso 5.h

Se disolvieron en DMF (10 ml), DCC (206 mg, 1,00 mmoles), HOSu (115 mg, 1,00 mmoles), NMM (220 \mul, 2,0 mmoles), el producto del Paso 5.g. (179 mg, 0,50 mmoles) y el producto del Paso 5.c. (330 mg, 1,00 mmoles), y se agitó a temperatura ambiente durante una noche y luego se calentó a aproximadamente 50ºC, durante aproximadamente 8 horas. La mezcla se concentró hasta dar una goma y se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 25% a 40% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 30 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se reliofilizaron desde HCl diluido para dar el producto (96 mg, 40%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 484,3 MH^{+}.

Ejemplo 6 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-7-(2-(1-fenilmetil)-imidazol-5-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El ejemplo 6 se preparó a partir del producto del Paso 5.h. de forma análoga al Ejemplo 3. Espectro de masas 470,4 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,15-9,4(1H, s), 8,05-8,2(1H, ,d), 7,9-8,1(1H, d), 7,5-7,6(1H, s), 7,25-7,5(6H, m), 7,15-7,25(1H, d,d), 7,05-7,15(1H, m), 4,6-5,4(3H, s, ancha), 4,0-4,3(2H, m), 3,8-4,0(4H, m), 3,1-3,5(2H, m), 2,6-9,95(4H, m), 1,95-2,15(1H, m), 1,3-1,5(1H, m), 1,1-1,3(1H, m), 0,85-1,0(3H, d), 0,7-0,85(3H, t).

Ejemplo 7 7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

Se disolvió en CH_{3}CN (3,0 ml), 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidro-7-(2-(1-trifenilmetilimidazol-4-il)-1-oxo-etil)-imidazo[1,2a]pirazina) (compuesto viii, donde R^{1}, R^{2}, R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H, R^{3} es isobutilo, y R^{4} es 2-metoxifenilo) del Ejemplo 4, Paso 4.i. (135 mg, 0,21 mmoles) y se añadió \alpha-bromo-p-tolunitrilo (42 mg, 0,21 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 3 horas. Los disolventes se separaron a presión reducida y se añadió MeOH (3,0 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 1 hora y los disolventes se separaron a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 5% a 35% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se reliofilizaron desde HCl diluido para dar el producto (9,8 mg, 8%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 509,3 MH^{+}.

Ejemplo 8 7-((1H-imidazol-4-il)metil-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El ejemplo 8 se sintetizó según los Esquemas 1 y 8, estando los Pasos 1.a. y 1.b. reemplazados por los Pasos 8.a a 8.b y estando el Paso 1.g. y el 1.h. reemplazados por los Pasos 8.c. y 8.d.

Esquema 8

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60

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8.a. (C_{6}H_{5})_{3}CCl/Et_{3}N/DMF

8.b. Complejo SO_{3}-piridina/Et_{3}N/DMSO

8.c. Compuesto vii/NaBH(OAc)_{3}/CH_{2}Cl_{2}

8.d. Tfa/iPr_{3}SiH

Paso 8.a

4-hidroximetil-1-trifenilmetil-imidazol

Se combinaron 4-hidroximetilimidazol (compuesto xii, donde R^{2} es H) (2,50 g, 18,6 mmoles) y Et_{3}N (2,59 ml, 18,6 mmoles) en DMF (30 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se añadió, gota a gota, una solución de clorotrifenilmetano (5,19 g, 18, moles) en DMF (25 ml, a temperatura ambiente, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 23 horas y luego se vertió en agua helada (300 ml). El producto se separó por filtración, se lavó con agua fría (75 ml) y se trituró con p-dioxano (30 ml). El producto se separó por filtración y se secó a presión reducida para dar un producto (4,96 g, 78%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,3-7,5(9H, m), 7,25-7,35(1H, d), 7,0-7,2(6H, m), 6,7-6,75(1H, s), 4,15-4,2(2H, m).

Paso 8.b

1-trifenilmetil-imidazol-4-carboxaldehído

El producto del Paso 8.a. (2,04 g, 6,00 mmoles) se puso en suspensión en DMSO (10,0 ml) y se añadieron Et_{3}N (3,34 ml, 24,0 mmoles) y complejo de SO_{3}-piridina (2,39 g, 15,0 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó aproximadamente a 110ºC durante aproximadamente 1 hora y luego se dejó enfriar. La mezcla se vertió en 150 ml de H_{2}O y el producto se separó por filtración. El residuo se trató con solución saturada de NaHCO_{3} (50 ml) y se extrajo con 2 x 100 ml de CH_{2}Cl_{2}. Las capas de CH_{2}Cl_{2} combinadas se lavaron con solución de ácido cítrico al 5% (100 ML), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se cristalizó en MeOH y H_{2}O. Producción = 1,08 g (53%).

Paso 8.c

7-((1-trifenilmetil-imidazol-4-il)metil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2-a]pirazina

Dihidrocloruro de 8-(1-metilpropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazol[1,2-a]pirazina (compuesto vii, donde R3 es 1-metilpropilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, y R^{5}-R^{7} son H) (procedente del paso 4.g.) (179 mg, 0,50 mmoles) y el producto del Paso 8.b. (compuesto xiv, donde R^{2} es H) (338 mg, 1,00 mmoles) se combinaron en 1,2-dicloroetano (2,0 ml). Se añadió NaBH(OAc)_{3} (212 mg, 1,00 mmoles) y se dejó agitando la reacción a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. La mezcla de reacción se vertió sobre una columna de gel de sílice y el producto se eluyó usando EtOAc como eluyente. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron para dar el producto como una espuma blanca (150 mg, 49%). Espectro de masas 608,2 MH^{+}.

Paso 8.d

7-((1H-imidazol-4-il)metil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

El producto del Paso 8.c. (compuesto viii, donde R^{1} es trifenilmetilo, R^{3} es isobutilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, y R^{2}, R^{5}-R^{7} son H, y X e Y constituyen un enlace) (160 mg, 0,26 mmoles) se trató con Tfa (10 ml) que contenía iPr_{3}SiH (0,20 ml, 1,0 mmoles) durante aproximadamente 45 minutos a temperatura ambiente bajo N_{2}. Los disolventes se separaron a presión reducida y el producto se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20% a 40% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizaron. El producto se reliofilizó dos veces desde HCl diluido para dar el producto (77 mg, 66%). Espectro de masas 366,2 MH^{+}.

Ejemplo 9 7-((4-imidazolil)carbonil)-2(metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

El Ejemplo 9 se preparó según los Esquemas 1 y 4 de una forma análoga al ejemplo, partiendo de ácido imidazo-4-carboxílico en lugar del ácido imidazol-4-acético en el Paso 4.a. Espectro de masas 380,3 MH^{+}.

Ejemplo 10 7-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)metil-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina

El producto del Paso 8.c. (compuesto Vii, donde R^{1} es isobutilo, R^{4} es 2-metoxifenilo, R^{2}, R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H, y X e Y constituyen un enlace) (150 mg, 0,25 mmoles) se disolvió en CH_{3}CN (2,0 ml), se añadió \alpha-bromo-p-tolunitrilo (49 mg, 0,25 mmoles) y la mezcla se puso a reflujo durante aproximadamente 1 hora. Se añadió MeOH (3,0 ml)y la mezcla se puso de nuevo a reflujo durante aproximadamente 1 hora. Los disolventes se separaron a presión reducida, se añadió Et_{2}O (10 ml) y el producto se extrajo con Tfa al 1,0% (2 x 15 ml). El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20% a 50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 40 minutos. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizaron. El producto se reliofilizó dos veces desde HCl diluido para dar el producto (52 mg, 35%). Espectro de masas 481,4 MH^{+}.

Ejemplo 11 5-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-5,6-dihidro-2-fenil-1H-imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepina

El Ejemplo 11 se sintetizó según los esquemas 5 y 11.

Esquema 11

61

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11.a. Cbz-Osu/K_{2}CO_{3}/CH_{3}CN/H_{2}O,

11.b. Cs_{2}CO_{3}/R^{4}COCHBrR^{5} luego NH_{4}OAc/xilenos,

11.c. HBr/HOAC,

11.d. cloruro de 2-fluorobenzoilo/Et_{3}N/CH_{2}Cl_{2}, luego a reflujo en DMF,

11.e BH_{3}/THF,

11.f. cloroformiato de 1-cloroetilo/CH_{2}Cl_{2}

62

11.g. MeOH/(HCl,

11.h. Trt-Cl/Et_{3}N/DMF

11.i. R^{1}-Br/EtOAc luego MeOH

11.j. MeOH/H_{2}O/NaOH

11.k DCC/HOAt/DMF/compuesto xix/Et_{3}N

Paso 11.a

(N-(fenilmetoxi)carbonil)-N-(fenilmetil)-glicina

Se añadió una solución de Cbz-Osu (6,18 g, 24,8 mmoles) en CH_{3}CN (55 ml) a una solución de hidrocloruro de N-bencilglicina (compuesto xv, donde R^{3} es H), (5,00 g, 24,8 mmoles) y K_{2}CO_{3} (8,84 g, 49,6 mmoles) en H_{2}O (35 ml) y la mezcla se agitó vigorosamente durante aproximadamente 2 horas. La mezcla se concentró a aproximadamente 35 ml y se lavó con Et_{2}O (2 x 25 ml). La capa acuosa se acidificó a aproximadamente pH = 1 mediante la adición cuidadosa de HCl concentrado y el producto se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las capas de EtOAc se combinaron y se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida hasta un aceite claro, incoloro (7,40 g, 99,7%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 12,5-12,8(1H, s, ancha), 7,1-7,5(10H, m), 5,0-5,2(2H, s), 4,4-4,6(2H, d), 3,8-4,0(2H, s).

Paso 11.b

2-((N-(fenilmetoxi)carbonil)-N-(fenilmetil)amino)-metil)-4-fenilimidazol

El producto del Paso 11.a. (7,18 g, 24, 0 mmoles) se disolvió de DMF (50 ml) y se añadió Cs_{2}CO_{3} (3,91 g, 112,0 mmoles) en H_{2}O (20 ml), y la mezcla se agitó removiendo hasta homogeneizar. El disolvente se separó a presión reducida, el residuo se disolvió en DMF (25 ml) y se añadió 2-bromo-2'-metoxi-acetofenona (4,78 g, 24,0 mmoles) en DMF (25 ml). La mezcla se agitó durante aproximadamente 30 minutos a temperatura ambiente y luego se concentró a presión reducida. El ceto-éster resultante se disolvió en xilenos (125 ml) y se filtró. Se añadió NH_{4}OAc (280 g, 0,36 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 horas con separación del exceso de NH_{4}OAc y se liberó H_{2}O usando una trampa Dean-Stark. La mezcla de reacción se enfrió y se lavó con solución saturada de NaHCO_{3} (100 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a vacío hasta 9,70 g 1(102%), que se usó sin más purificación. Espectro de masas 398,2 MH^{+}.

Paso 11.c

2-(N-fenilmetil)amino)-metil)-4-fenil-imidazol

El producto del Paso 11.b. (compuesto xvi, donde R^{3} y R^{5} son H, y R^{4} es 2-metoxifenil, (9,7 g, 24,0 mmoles) se trató con 30% HBr/HOAc (85 ml) a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas. Se añadió Et_{2}O (100 ml) a la suspensión resultante y el producto se separó por filtración, se lavó con Et_{2}O y se secó a presión reducida para dar un producto (7,70 g, 75%) como un sólido blancuzco. Espectro de masas 264,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,5-11,0(3H, s ancha), 8,1-8,2(1H, s), 7,8-7,9(2H, m), 7,55-7,65(2H, m), 7,45-7,55(2H, m), 7,35-7,5(4H, m), 4,5-4,7(2H, s), 4,3-4,5(2H, s).

Paso 11.d

6-oxo-2-fenil-5-(fenilmetil)-1H-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 11.c. (4,25 g, 10,0 mmoles) se puso en suspensión en THF y se añadió Et_{3}N (4,9 ml, 35,0 mmoles) a temperatura ambiente. Se añadió cloruro de 2-fluorobenzoilo (1,19 ml, 10,0 mmoles) y la mezcla se agitó aproximadamente 1 hora a temperatura ambiente. Los disolventes se separaron a presión reducida y el residuo se extrajo en CH_{2}Cl_{2} (50 ml) y se lavó con solución saturada de NaCl (2 x 25 ml). La capa de CH_{2}Cl_{2} se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en DMF (35 ml), se añadió K_{2}CO_{3} (1,38 g, 10,0 mmoles) y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 1 hora. Los disolventes se separaron a presión reducida, el producto intermedio se disolvió en EtOAc (50 ml) y se lavó dos veces con NaHCO_{3} saturado y una vez con solución saturada de NaCl. La capa de EtOAc se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a aproximadamente 25 ml. Se añadió Et_{2}O (aproximadamente 25 ml) y el producto se separó por filtración (1,46 g). Las aguas madres se purificaron mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando hexanos/EtOAc 1:1 como eluyente para proporcionar una segunda cosecha de una espuma de color anaranjado pálido (0,63 g) que se usa en las siguientes reacciones. Rendimiento total = 57%. Espectro de masas 366,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,25-8,35(1H, s), 7,95-8,05(1H, d,d), 7,6-7,9(4H, m), 5,7-7,7(1H, t), 7,3-7,5(2H, t), 7,2-7,4(6H, m), 4,6-5,0(2H, s ancha), 4,4-4,6
(2H, s).

\newpage

Paso 11.e

2-fenil-5-(fenilmetil)-1H-imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 11.d. (compuesto xvii, donde R^{3} y R^{5} son H, y R^{4} es 2-metoxifenil) (0,63 g, 1,73 mmoles) se disolvió en THF y se añadió complejo borano 1M/THF (16,0 ml, 16,0 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente ½ horas y luego se enfrió. Se añadió HCl 4N HCl (12 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente ½ hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se concentró hasta aproximadamente 12 ml a presión reducida, y luego se neutralizó con adición cuidadosa de NaHCO_{3} sólido. El producto se extrajo dos veces con EtOAc, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, luego se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en metanol (10 ml) y se trató con HCl concentrado (0,5 ml) para convertir el producto en la sal de hidrocloruro. La solución se concentró y el producto se obtuvo por cristalización en MeOH/Et_{2}O. Producción = 444 mg (60%). Espectro de masas 352,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,5-8,6(1H, s), 7,9-8,0(2H, d), 7,65-7,9(5H, m), 7,4-7,6(6H, m), 7,3-7,4(1H, t), 4,5-6,5 (H_{2}O), 4,4-4,6 (2H,s), 4,2-4,3 (2H,s), 4,1-4,25 (2H,s).

Paso 11.f

2-fenil-1H-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepeina

El producto del Paso 11.e. (compuesto xvii, donde R^{3}, R^{5}, R^{6}, y R^{7} son H, y R^{4} es 2-metoxifenilo) (382 mg, 0,90 mmoles) se distribuyó entre una solución saturada de NaHCO_{3} y CH_{2}Cl_{2}. La capa de CH_{2}Cl_{2} se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se añadió cloroformiato de 1-cloroetilo (108 \mul, 10,0 mmoles) a 6temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La capa de CH_{2}Cl_{2} se lavó con solución saturada de NaHCO_{3}, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (5,0 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. La solución metanólica se trató con HCl concentrado (0,5 ml) para convertir el producto en la sal de hidrocloruro. La solución se concentró y el producto se obtuvo por cristalización en MeOH/Et_{2}O. Producción 186 mg (62%). Espectro de masas 262,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 10,7-11,1(1-2H, s ancha), 8,5-8,6(1H, s), 8,1-8,6(1-2H, s ancha), 7,9-8,05(2H, d,d), 7,7-7,85(3H, m), 7,55-7,65(1H, m), 7,45-7,55(2H, t), 7,3-7,45(1H, m), 4,2-4,4(2H, s), 4,1-4,3(2H, s).

Paso 11.g

4-imidazolacetato de metilo

Se puso en suspensión en tolueno (100 ml) la sal sódica dihidratada del ácido 4-imdazolacético (15,3 g, 83,1 mmoles) y se concentró para separar el agua de hidratación. El residuo se disolvió en MeOH (235 ml) y la solución se enfrió en un baño de hielo/agua bajo N_{2}. Se añadió HCl gaseoso concentrado y la solución resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se concentró a sequedad. El residuo se redisolvió en MeOH (235 ml), se filtró y la solución se enfrió en un baño de hielo/agua bajo N_{2}. Se añadió HCl gaseoso durante 20 minutos y la solución resultante se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. Se añadió tolueno (150 ml) y la mezcla se concentró a sequedad para dar el producto (16,6 g, 113%) que se usó en el siguiente Paso sin más purificación. Espectro de masas 141,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,8-8,9(1H, s), 7,5-7,7(1H, s), 3,7-3,9(2H, s), 3,6-3,7(3H, s).

Paso 11.h

1-trifenilmetil-4-imidazolacetato de metilo

El producto del Paso 11.g. (crudo, 83,1 mmoles) se disolvió en DMF (70 ml) bajo N_{2} y se añadió Et_{3}N (35,6 ml, 241 mmoles) en una reacción exotérmica. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadió clorotrifenilmetano (23,2 g, 83,1 mmoles) y la mezcla se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en H_{2}O (300 ml) y se extrajo una vez con 300 ml de EtOAc y una vez con 150 ml de EtOAc. Las capas combinadas de EtOAc se lavaron con solución saturada de NaHCO_{3} (300 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a un aceite que cristaliza para dar un sólido de color castaño (30,9 g, 97%). Espectro de masas 382,9 MH^{+}.

Paso 11.i

1-(cianofenilmetil)-5-imidazolacetato de metilo

El producto del Paso 11.h. (15,0 g, 39,2 mmoles) se disolvió en EtOAc (80 ml) con calentamiento. Se añadió \alpha-bromo-p-toluonitrilo (7,69 g, 39,2 mmoles) y la mezcla se calentó a 65-70ºC durante 2,5 horas. Se separó por filtración una primera cosecha, se lavó con EtOAc, y se secó hasta dar 9,27 g. El filtrado se concentró hasta aproximadamente 80 ml y se calentó a 65-70ºC durante 1 horas adicionales. Se separó por filtración una segunda cosecha, se lavó con EtOAc, y se secó hasta 9,4 g. El filtrado se concentró hasta aproximadamente 0 ml y se calentó a 65-70ºC durante 48 horas adicionales. Se separó por filtración una tercera cosecha, se lavó con EtOAc, y se secó hasta 0,87 g. Los productos intermedios combinados se pusieron en suspensión en MeOH (350 ml) y se calentó a reflujo durante ½ hora. El disolvente se destiló a presión reducida y el sólido resultante se trituró con EtOAc (250 ml). El sólido resultante se puso en suspensión en CH_{2}Cl_{2} (500 ml), se añadió NaHCO_{3} saturado (500 ml) y la mezcla se agitó durante 3 horas. Se separó la capa acuosa y la capa de CH_{2}Cl_{2} se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un aceite que cristaliza al estar en reposo (8,08 g, 81%). Espectro de masas 256,2 MH^{+}.

Paso 11.j

Hidrocloruro ácido del 1-(cianofenilmetil)-5-imidazol

El producto del Paso 11.i. (8,0 g, 31,2 mmoles) se disolvió en THF (200 ml) y se añadió NaOH 2N (16,7 ml, 33,4 mmoles). La mezcla se agitó durante 48 horas a temperatura ambiente. La solución se neutralizó a pH = 2,0 mediante la adición de HCl 2N y la solución se concentró a presión reducida un sólido color castaño. El residuo se agitó con MeOH (200 ml), se separaron los sólidos por filtración y el filtrado se concentró a presión reducida y se secó para dar un producto (5,85 g, 67%). Espectro de masas 242,1 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,3-9,4(1H, s), 7,8-7,95(2H, d), 7,55-7,7(1H, s), 7,4-7,6(2H, d), 5,5-5,7(2H, s), 3,8-4,0(2H, s).

Paso 11.k

5-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-fenil-1H-imidazo[1,2-a][1,4]

El producto del Paso 11.j. (77 mg, 0,24 mmoles) se combinó con DCC (49 mg, 0,24 mmoles), HOAt (33 mg, 0,24 mmoles), NMM (110 \mul, 1,0 mmol) y el producto del Paso 11.f. (75,0 mg, 0,225 mmoles) en DMF (3, 0 ml) y se dejó agitando la reacción aproximadamente 3 días a temperatura ambiente. Los disolventes se separaron a presión reducida y el producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 15% a 40% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizaron. El producto se reliofilizó dos veces desde HCl diluido para dar el producto puro (71 mg, 61%). Espectro de masas 485,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,3-9,4(1H, d), 8,6-8,8(1H, d), 8,0-8,15(2H, d), 7,3-8,0(12H, m), 5,5-5,7(2H, s), 4,9-5,1(1H, s), 4,75-4,9(1H, s), 4,65-4,8(1H, s), 4,45-4,6(1H, s), 4,25-4,4(1H, s), 4,15-4,3(1H, s).

Ejemplo 12 7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

Los Pasos 12.a. hasta 12.d. se llevaron a cabo de forma análoga al Esquema 1, pasos 1.c. a 1.f., partiendo de Cbz-Gly-OH en lugar de Cbz-(L)-Ile-OH en el Paso 12.a, el Paso 12.f. se llevó a cabo de forma análoga al Esquema 1, Paso 1.g., sustituyendo el producto del Paso 1.b. por el producto del Paso 11.j. Espectro de masa 453,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO, 90ºC) 9,1-9,2(1H, d), 7,95-8,05(1H, d,d), 7,9-8,0(1H, s), 7,8-7,9(2H, d), 7,55-7,6(1H, s), 7,5-7,6(2H, d), 7,35-7,5(1H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 5,4-5,7(2H, s), 4,9-5,1(2H, s ancha), 4,15-4,4(2H, s ancha), 4,05-4,2(2H, s), 3,9-4,1(2H, s ancha), 3,9-4,0(3H, s).

Ejemplo 13 5-butil-7-(2-(4-cianofenilmetilimidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

Los Pasos 13.a. a 13.d. se llevaron a cabo de forma análoga al Esquema 1, Pasos 1.c. a 1.f. El Cbz-(Gly)-OH se sustituyó en lugar de Cbz-(L)-Nle-OH en el Paso 14.a. y el bromoacetato de etilo se sustituyó por 2-bromohexanoato de etilo en el Paso 13.b., el Paso 13.e. se llevó a cabo de forma análoga al Esquema 1, Paso 1.g., sustituyendo el producto del Paso 1.b. por el producto del Paso 11.j. Espectro de masas 479 MH^{+}.

Ejemplo 14 6.butil-(7-(2-(4-cianofenilmetilimidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

El Ejemplo 14 se preparó de forma análoga al Ejemplo 13, excepto que los Pasos 1,d., 1.e. y 1.f. fueron sustituidos con los Pasos 14.a y 14.b.

Esquema 14

63

14.a. R^{7}COCHBrR^{6}/K^{2}CO^{3}/DMF

14.b. H_{2}/Pd sobre carbono/HOAc

Paso 14.a

1-(2-oxo-hexil)-2-(1-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol

Se combinaron 1-H-(1-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-metil-4-(2-metoxifenil)-imidazol (compuesto iV, donde R^{3} y R^{5} son H, y R^{4} es 2-metoxifenilo) (790 mg, 2,34 mmoles), 1-cloro-2-hexanona (473 mg, 3,51 mmoles) y K_{2}CO_{3} (469 mg, 4,68 mmoles) en DMF (4 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 42 horas. La reacción se diluyó con NaHCO_{3} saturado (25 ml) y se extrajo con Et_{2}O (2 x 50 ml). Los extractos de Et_{2}O combinados se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando 3% MeOH/CH_{2}Cl_{2} como eluyente. Se combinaron las fracciones de producto crudo y se concentraron a presión reducida para dar un aceite amarillo pálido (650 mg) que solidifica en reposo. Espectro de masas 436,3 MH^{+}.

Paso 14.b

6-butil-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo[1,2-a]pirazina

El producto del Paso 14.a. (compuesto xxiv, donde R^{3}, R^{5} y R^{6} son H, R^{5} es 2-metoxifenilo, y R^{7} es n-butilo) (650 mg, 1,49 mmoles) se disolvió en HOAC (25 ml) que contenía 10% de Pd sobre carbono (65 mg) y la mezcla se hidrógeno a 206,8 kPa (30 psi) de H_{2}, durante aproximadamente 6 horas. El catalizador se separó por filtración a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentró a presión reducida para dar un aceite amarillo pálido que cristaliza en reposo (430 mg, 101%).

Paso 14.c

6-butil-7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-fenil-5,6,7,8-tetrahidromimidazo[1,2-a]pirazina

El Ejemplo 14 se obtuvo en el Paso 14.c. de forma análoga al Paso 1.g., sustituyendo el producto del Paso 1.f. por el producto del Paso 14.b. Espectro de masas 509,3 MH^{+}.

Ejemplo 15 6-butil-7-(2-(4-cianofenilmetilimidazo-5-il)-1-oxo-etil)2-fenil-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

El Ejemplo 15 se preparó de forma análoga al Ejemplo 14, partiendo con 2-bromoacetofenona en lugar de 2-bromo-2'-metoxiacetofenona en el Paso 1.c. Espectro de masas 509,4 MH^{+}.

Ejemplo 16 5-butil-7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazo.-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El Ejemplo 16 se preparó de forma análoga al Ejemplo 13, partiendo con 2-bromoacetofenomna en lugar de 2-bromo-2'-metoxiacetofenona en el Paso 1.c. Espectro de masas 509,3 MH^{+}.

Ejemplo 17 7-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-8-ciclohexilmetil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

Pasos 17.a a 17.d. se llevaron a cabo de forma análoga al Esquema 1, Pasos 1.c. a 1.f. La Cbz-(L)-ciclohexilalanina se sustituyó en lugar de la Cbz-(L)-Nle-OH en el Paso 17.a. El Paso 17.e. se llevó a cabo de forma análoga al Esquema 1, Paso 1.g. sustituyendo el producto del Paso 1.b. por el producto del Paso 11.j. Espectro de masas 549,4 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,15-9,25(1H, s), 8,05-8,15(1H, d), 8,0-8,1(1H, s), 7,8-7,9(2H, d), 7,6-7,7(1H, s), 7,5-7,6(2H, d), 7,4-7,5(1H, t), 7,15-7,3(1H, d), 7,05-7,15(1H, t), 5,85-6,05(1H, d,d), 5,5,-5,6(2H, s), 4,1-4,5(5H, m), 3,0-4,1(3H, s), 3,75-3,9(1H, m), 1,85-2,1(3H, m), 1,4-1,8(4H, m), 0,8-1,4(7H, m).

Ejemplo 18 5-butil-7-(2-(1H-imidazol-5-il)-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El Ejemplo 18 se preparó de forma análoga al ejemplo 4 usando 5-butil-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina (compuesto vii, donde R^{3}, R^{5} y R^{7} son H, R^{4} es 2-metoxifenilo y R^{6} es n-butilo), como se describe para el ejemplo 14, en lugar de 2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina en el Paso 19.e. Espectro de masas 394,3 MH^{+}.

Ejemplo 19 7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-(fenilmetoxi)-fenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

El material de partida para el Paso 19.a. se preparó de forma análoga al Esquema 1, Pasos 1.c. a 1.f., sustituyendo Cbz-(Gly)-OH en lugar de Cbz-(L)-Nle-OH. El paso 19.d. se llevó a cabo forma similar al Esquema 1, Paso 1.g., sustituyendo el producto del Paso 1.b. por el producto del Paso 11.j.

Esquema 19

64

19.a. BBr_{3}/CH_{2}Cl_{2}/hexanos, luego (Boc)_{2}O/NaOH/THF/H_{2}O

19.b. NaH/R^{8}-Br/DMF

19.c. Tfa/iPr_{3}SiH

Paso 19.a

7-((1,1-dimetiletoxi)carbonil)-2-(2-hidroxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

Se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (100 ml), 2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina (compuesto vii, donde R^{3}, R^{5} y R^{7} son H, R^{4} es 2-metoxifenilo (5,30 g, 23,1 mmoles) y se añadió gota a gota durante aproximadamente 15 minutos a una mezcla de BBr_{3} 1M/hexanos (80,3 ml, 80,3 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (500 ml) a aproximadamente 0ºC, La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. El producto intermedio desmetilado se extrajo con H_{2}O (3 x 240 ml) y las capas acuosas combinadas se lavaron con Et_{2}O (100 ml). La solución se ajustó a un pH de aproximadamente 8 mediante la adición de NaOH 2,5N, y se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (5,5 g, 25,4 mmoles) en THF (200 ml). La solución se agitó vigorosamente durante aproximadamente 2 horas mientras que se mantenía la solución a pH = 8,0-8,5. La mezcla se concentró hasta aproximadamente 700 ml y se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 100 ml). Las capas de CH_{2}Cl_{2} combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un producto (7,10 g, 97%) como un sólido color castaño. Espectro de masas 316,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,65-7,7(1H, s), 7,6-7,7(1H, d,d), 7,0-7,15(1H, m), 6,75-6,9(2H, m), 4,6-4,7(2H, s), 4,0-4,2(2H, t), 3,75-3,9(2H, t), 3,3-3,4(H_{2}O), 1,4-1,55(9H, s).

Paso 19.b

7-((1,1-dimetiletoxi)carbonil)-2-(fenilmetoxi)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo[1,2a]pirazina

Una dispersión al 60% de NaH en aceite mineral (76 mg, 1,9 mmoles) se lavó con hexanos (2 x 5,0 ml) y se añadió a temperatura ambiente una solución de 2-(2-hidroxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo[1,2a]pirazina del Paso 9.a. (500 mg, 1,58 mmoles) en DMF (10 ml). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 10 minutos y luego se añadió bromuro de bencilo (188 \mul, 1,58 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas. La mezcla se vertió en una solución saturada de NaCl (40 ml) y se extrajo con Et_{2}O (2 x 50 ml). Las capas de Et_{2}O se combinaron, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida para dar un producto (430 mg, 67%) como un aceite amarillo viscoso que cristalizó en reposo. Espectro de masas 406,3
MH^{+}.

Paso 19.c

2-(2-(fenilmetoxi)fenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina

El producto del Paso 19.b. (250 mg, 0,62 mmoles) se trató con Tfa (15,0 ml) que contenía iPr_{3}SiH (505 \mul, 2,47 mmoles) a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora bajo N_{2}. Los disolventes se separaron a presión reducida y el residuo se trituró con Et_{2}O (2 x 20 ml), se filtró y se secó. El residuo se usó en el siguiente Paso sin más purificación.

Paso 19.d

7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-2-(2-(fenilmetoxi)-fenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2-a]pirazina

El Ejemplo 19 se preparó a partir del producto del Paso 10.d. y el producto del Paso 11.j., de forma análoga al Paso 1.g. Espectro de masas 529,3 MH^{+}.

Ejemplo 20 2-(2-butoxifenil)-7-(2-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2-a]pirazina

El Ejemplo 20 se preparó de forma análoga al ejemplo 19, usando yoduro de n-butilo en lugar de bromuro de bencilo en el Paso 20.b. Espectro de masas 495,4 MH^{+}.

Ejemplo 21 1,2-dihidro-1-((1H-imidazol-4-il)metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Se preparó el material de partida para el Paso 21.a. de forma análoga al esquema 1, Pasos 1.c., sustituyendo Cbz-(Gly)-OH en lugar de Cbz-(L)-Nle-OH. Los pasos 21.d. y 21.e se realizaron de forma análoga al Paso 8.c. y 8.d.

Esquema 21

65

21.a. Bromuro de 2-fluorobencilo/K_{2}CO_{3}/DMF

21.b. HBr/HOAC

21.c. NMP (reflujo)

Paso 21.a

1-((2-fluorofenil)-metil)-2-(1-(S)-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol

Se disolvió en DMF (20 ml), 1H-2-(1-(S)-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol (1,69 g, 5,00 mmoles), y se trató con K_{2}CO_{3} (1,38 g, 10,0 mmoles) y bromuro de 2-fluorobencilo (1,21 ml, 10,0 mmoles), y la mezcla se calentó a aproximadamente 50ºC durante aproximadamente 2 horas. La mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se recogió en EtOAc (50 ml), se lavó una vez con solución saturada de NaHCO_{3} (25 ml) y una vez con solución saturada de NaCl (25 ml). La capa de EtOAc se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró hasta dar un aceite (2,22 g, 99,6%) que cristaliza en reposo. Espectro de masas 446,2 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,05-8,15(1H, d), 8,75-8,9(1H, t), 7,5-7,6(1H, s), 7,1-7,5(9H, m), 6,0-7,1(3H, m), 5,3-5,45(2H, s), 4,9-5,1(2H, s), 4,3.4,45(2H, s), 3,8-3,9(3H, s).

Paso 21.b

2-(aminometil)-1-((2-fluorofenil)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol

Se disolvió en 30% HBr/HOAC (25 ml), 1-((-fluorofenil)-metil)-2-(1-(S)-(((fenilmetoxi)carbonil)-amino)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol (compuesto xxvi, donde R^{2}, R^{3}, R^{5} y R^{6} son H, R^{4} es 2-metoxifenilo (2,22 g, 4,99 mmoles), y la reacción se agitó durante aproximadamente 1 hora a temperatura ambiente. Se añadió Et_{2}O (100 ml) y la suspensión resultante se agitó aproximadamente durante 15 minutos adicionales y el producto se separó por filtración y se lavó con Et_{2}O (100 ml). El producto se neutralizó mediante la adición de solución saturada de NaHCO_{3} (50 ml) y el producto se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 25 ml). Las capas combinadas de CH_{2}Cl_{2} se combinaron, se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida hasta dar un aceite viscoso (1,26 g, 81%) que solidifica en reposo. Espectro de masas 312,2 MH^{+}.

Paso 21.c

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazol[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Se añadió 2-8aminometil)-1-((2-fluorofenil)-metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazol procedente del paso 22.b. (1,26 g, 4,05 mmoles) a NMP (20 ml) que contenía K_{2}CO_{3} (1,12 g, 8,10 mmoles) y la reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 11 horas. Los disolventes se separaron por destilación a presión reducida y se añadió H_{2}O (50 ml). El producto crudo se separó por filtración y se purificó más mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando CH_{2}Cl_{2} y luego MeOH:CH_{2}Cl_{2} 19:1 como eluyentes. Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron a presión reducida, y luego se trituró con EtOAc para dar un producto como un sólido color castaño (329 mg, 28%). Espectro de masas 292,3 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,95-8,1(1H, d,d), 7,6-7,65(1H, s), 7,1-7,2(1H, m), 6,9-7,1(4H, m), 6,5-6,65(2H, m), 5,2-,4(2H, s), 4,4-4,5(2H, s), 3,8-4,0(3H, s).

Paso 21.d

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-((1-trifenilmetil)-imidazol-4-il)metil)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

De forma similar al Paso 8.c., se trató una mezcla del producto del Paso 21.c. (compuesto xxvii, donde R^{2}, R^{3}, R^{5}, y R^{6} son H, y R^{4} es 2-metoxifenilo) (146 mg, 0,50 mmoles) y 1-trifenilmetil-imidazol-4-carboxaldehído (del Paso 8.b.) (338 mg, 1,00 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (5,0 ml) con ácido acético (1,0 ml) y NaBH(OAc)_{3} (212 mg, 1,00 mmoles) durante aproximadamente 1 hora. Se añadió 1-trifenilmetil-imidazol-4-carboxaldehído adicional (338 mg, 1,00 mmoles), ácido acético (1,0 ml) y NaBH(OAc)_{3} (212 mg, 1,00 mmoles) y la mezcla se agitó durante aproximadamente 1 hora. Se añadió EtOAc (25 ml) y NH_{4}OAc concentrado (3,0 ml) y la mezcla se agitó aproximadamente 1,5 horas. Se añadió una solución saturada de NaHCO_{3} y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las capas de EtOAc combinadas se secaron, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía súbita sobre gel de sílice usando CH_{2}Cl_{2}:EtOAc:hexanos 1:1:1 y luego EtOAc como eluyente. Las fracciones del producto combinadas se concentraron y se secaron hasta 210 mg (68%) a presión reducida. Espectro de masas 614,3 MH^{+}.

Paso 21.e

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-((1-(trifenilmetil)-imidazol-4-il)metil)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 21.d. se desprotegió de forma análoga al Paso 1.h. para dar 10 mg (70%) del producto. Espectro de masas 372,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,0-9,2(1H, s), 8,05-8,15(1H, s), 7,9-8,0(1H, d), 7,7-7,8(1H, s), 7,3-7,55(4H, m), 7,1-7,3(2H, m), 7,0-7,1(1H, t), 5,6-5,8(2H, s), 4,55-4,75(1H, s), 3,9-4,1(3H, s), 2,7-4,0(H_{2}O, ancha).

Ejemplo 22 1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El Ejemplo 22 se preparó según el Esquema 21 y el Esquema 11.

Paso 22.a

1-(2-((4-cianofenilmetil)-imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Se combinó 1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina (compuesto xxvii, donde R^{2}, R^{3}, R^{5}, y R^{6} son H, y R^{4} es 2-metoxifenilo) (procedente del Paso 21.c.) con DCC 8103 mg, 0,50 mmoles), HOAt (68 mg, 0,50 mmoles), NMM (55 \mul, 0,50 mmoles) y ácido 1-(4-cianofenilmetil)-5-imidazolacético (el producto del Paso 11.j) (160 mg, 0,50 mmoles) en DMF (3,0 ml) y se dejó agitar la reacción durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se calentó a aproximadamente 70ºC durante aproximadamente 12 horas y luego se concentró a presión reducida. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} haciendo un primer paso usando un gradiente de 10%-40% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos, seguido de un segundo paso usando un gradiente de 20%-35% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron y se concentró a sequedad. El producto se convirtió en una sal de hidrocloruro pasando una solución H_{2}O/MeOH 9:1 a través de una columna de cambio iónico (AG X2, malla 200-400, 100 ml lecho, 0,6 meq/ml, forma de cloruro, BioRad, Inc., Hercules, CA). Las fracciones del producto se concentraron de nuevo a presión reducida y se liofilizó desde H_{2}O (10 ml) para dar 21 mg (10%) del producto deseado. Espectro de masas 515,3 MH^{+}.

Ejemplo 23 9-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Se preparó el Ejemplo 23 según el Esquema 21, el Esquema 23 y el Esquema 1, Paso 1.g.

Esquema 23

66

Paso 23.a

9-bromo-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1H-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 21.c. (2091 mg, 1,00 mmoles) se disolvió en ácido acético (10 ml) y se añadió, gota a gota, con agitación, Br_{2} (52 \mul). Se añadió metanol (10 ml) para mantener homogénea la solución. Cuando se hubo completado la adicción, los disolventes se evaporaron a presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20-50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones del producto se concentraron hasta aproximadamente ½ del volumen y se liofilizó. El producto liofilizado se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica al 20% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma de cloruro). Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron y se liofilizaron desde H_{2}O para dar el producto (110 mg, 24%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 370,0-371,9 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,05-8,15(1H, s), 7,9-8,0(1H, d), 7,4-7,5(1H, t), 7,3-7,4(1H, s), 7,2-7,3(1H, d,d), 7,15-7,25(1H, d), 7,05-7,15(1H, t), 6,65-6,75(1H, d), 5,55-5,7(2H, s), 4,8-4,95(2H, s), 3,9-4,0(3H, s).

Paso 23.b

9-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 23.a. (72 mg, 0,177 mmoles) se disolvió en DMF ( 3 ml). A esta solución se le añadió NMM (98 \mul, 0,89 mmoles), ácido 1-(4-cianofenilmetil)-5-imidazolacético (el producto del Paso 11.j.) (128 mg, 0,26 mmoles), HOAt (49 mg, 0,35 mmoles) y DCC (74 mg, 0,36 mmoles). La reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente y luego se calentó a 70ºC durante una hora. La solución se enfrió, se añadió DCC (74 mg, 0,36 mmoles) y la solución se agitó de nuevo durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se calentó a 70ºC durante una hora y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 25-60% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Se requirió una segunda purificación usando un gradiente de 44-80% de CH_{3}CN/0,2% CH_{2}CN/0,2% de NH_{4}OAc durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones del producto se concentraron y se liofilizaron para dar el producto puro (11 mg, 9%), como una sal de acetato. Espectro de masas 593,2-595,3 MH^{+}.

Ejemplo 24 9-cloro-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c]benzodiazepina

El Ejemplo 24 se preparó según el Esquema 21, el Esquema 23 y el Esquema 1, Paso 1.g.

Paso 24.a

9-cloro-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1H-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 21.c. (291 mg, 1,00 mmoles) se convirtió en la sal de hidrocloruro disolviendo en metanol (10 ml), añadiendo HCl acuoso al 5% (3,0 ml) y concentrando hasta dar sólidos. El residuo se disolvió en metanol (5 ml) y se añadió HOAC (1,0 ml) y N-clorosuccinimida (133 mg, 1,0 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche y luego se concentró a presión reducida. El residuo se distribuyó entre NaHCO_{3} y CHCl_{3} y la capa CHCl_{3} se aplicó a una columna de gel de sílice. La columna se eluyó primero con CHCl_{3}:EtOAc 3:1 y luego con CHCl_{3}:EtOAc 1:1 para obtener el producto crudo. Este material crudo se purificó más mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 25-60% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones de producto limpio se combinaron y se liofilizaron para dar 94 mg (17%) de producto como la sal di-Tfa. Espectro de masas 326,2 MH^{+}. 8,0-8,1)(1H, s), 7,7-7,8(1H, d,d), 7,4-7,5(1H, t), 7,2-7,3(1H, s), 7,15-7,3(1H, d), 7,1-7,2(1H, d,d), 7,05-7,15(1H, t), 6,7-6,8(1H, d), 5,55-5,65(2H, s), 4,7-4,8(2H, s), 3,9-4,0(3H, s).

Paso 24.b

9-cloro-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 24.a (72 mg, 0,13 mmoles) se disolvió en DMF (1,5 ml). A esta solución se le añadió NMM (114 \mul, 1,04 mmoles), ácido 1-(4-cianofenilmetil)-5-imidazolacético (compuesto xii, donde R^{1} es (4-cianofenilmetilo) y R^{2} es H) (92 mg, 0,26 mmoles), y TFFH (69 mm, 0,26 mmoles). La reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente y luego se calentó a 70ºC durante una hora. Se volvió a enfriar la solución a temperatura ambiente y se añadió ácido 1-(4-cianofenilmetil)-5-imidazolacético (el producto del Paso 11.j) (92 mg, 0,26 mmoles), y TFFH (69 mg, 0,26 mmoles). La reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente y luego se concentró a presión reducida. El residuo se purificó más mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 25-60% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones de producto se concentraron y se liofilizaron,. El producto liofilizado se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma cloruro). Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se liofilizó desde H_{2}O para dar el producto crudo (59 mg, 73%), como el dihidrocloruro. Espectro de masas 549,3 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,2-9,3(1H, s), 8,0-8,1(1H, s), 7,9-8,1(1H, d), 7,8-7,9(2H, d), 7,7-7,85(2Hm), 7,6-7,75(1H, d,d), 7,5-7,7(1H, s), 7,4-7,55(2H, d), 7,35-7,5(1H, t), 7,15-7,3(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 4,5-6,3(2H, d,d), 5,4-5,8(4H, m), 3,9-4,05(3H, s), 3,5-3,9
(2H, d,d).

Ejemplo 25 10-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 25.a. hasta 25.c. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. hasta 21.c. sustituyendo bromuro de 4-bromo-2-fluorobencilo n lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 25.a. El producto del Paso 25.c. se aisló como la sal de dihidrocloruro agitando una suspensión metanólica con un exceso del 20% de ácido clorhídrico concentrado y separando por filtración el sólido resultante. Espectro de masas 370,1, 372,1 MH^{+}.

Paso 25.d

10-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazo-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 25.c. (100 mg, 0,23 mmoles) se puso en suspensión en DMF (1,5 ml) y se añadió el producto del Paso 11.j. (125 mg, 45 mmoles), TFFH (119 mg, 0,45 mmoles), y NMM (110 \mul, 1,0 mmoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 45 minutos y se dejó reposar a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla cruda se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20-50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Se realizó una segunda purificación usando un sistema isocrático que contiene 44% CH_{3}CH/NH_{4}OAc acuoso al 0,2%, luego se convirtió en la sal de Tfa por liofilización a partir de 20% CH_{3}CN/1% Tfa, y luego se convirtió en la sal de hidrocloruro pasando una solución metanólica al 30% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma cloruro). Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se liofilizó desde 20% CH_{3}CN/H_{2}O para dar el producto crudo (45 mg, 30%), como el dihidrocloruro. Espectro de masas 593,2, 595,3 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,1-9,3(1H, s), 7,9-8,1(3H, m), 7,8-7,9(2H, d), 7,7,-7,8(1H, d,d), 7,6-7,7(1H, d), 7,5-7,6(1H, s), 7,4-7,5(2H, d), 7,3-7,45(1H, t), 7,1-7,25(1H, s), 7,0-7,1(1H, t), 4,4-6,2(2H, d,d), 5,4-5,7(4H, m), 3,9-4,0(3H, s), 3,5-3,9(2H, d,d).

Ejemplo 26 1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 26.a hasta 26.c. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. hasta 21.c., sustituyendo bromuro de 2,6-difluorobencilo en lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el paso 26.a.

Paso 26.d

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 26.c. (124 mg, moles) se puso en suspensión en DMF (2 ml) y se añadió el producto del Paso 11.j. (111 mg, 0,40 mmoles), TFFH (106 mg, 0,40 mmoles), y NMM (88 \mul, 0,8 mmoles). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. Se añadió una segunda porción del producto del Paso 11.j. (111 mg, 0,40 mmoles), TFF (106 mg, 0,40 mmoles), y NMM (88 \mul, 0,8 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas adicionales. Se añadió una tercera porción del producto del Paso 11.j. (111 mg, 0,40 mmoles), TFF (106 mg, 0,40 mmoles), y NMM (88 \mul, 0,8 mmoles) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla cruda se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 20-50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones de producto se concentraron y se liofilizaron. El producto liofilizado se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica al 40% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma cloruro). Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron y se liofilizó desde H_{2}O para dar el producto puro (126 mg, 59%), como el dihidrocloruro. Espectro de masas 533,3 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,2-9,3(1H, s), 8,2-8,4(1H, s), 7,9-8,1(1H, d), 7,8-7,9(2H, d), 7,55-7,7(3H, m), 7,35-7,55(4H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 4,5-6,3(2H, d,d), 5,4-5,9(2H, d,d), 5,5-5,7(2H, d,d), 3,9-4,1(3H, s), 3,6-4,0(2H, d,d).

Ejemplo 27 1,2-dihidro-(1-(2-(imidazol-1-il)-1-oxoetil)-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Se trató una solución del producto del Paso 21.c. (146 mg, 0,50 mmoles) en DMF (2 ml) con cloruro de cloroacetilo (44 \mul, 0,55 mmoles) en DMF (0,5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante ½ hora. Se añadió imidazol (204 mg, 3,00 mmoles) y la mezcla se calentó a 50ºC durante 3 horas y luego se dejó reposar a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla cruda se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 10-50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron a presión reducida. La sal de Tfa se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica al 30% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma cloruro). Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron a un volumen de aproximadamente 10 ml y se liofilizó desde H_{2}O para dar el producto puro (127 mg, 54%), como el dihidrocloruro. Espectro de masas 400,2 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,1-9,2(1H,s), 8,1-8,2(1H, s), 7,9-8,05(1H, d), 7,8-7,9(1H, d), 7,5-7,8(5H, m), 7,35-7,5(1H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 6,2-6,35(1H, d), 6,0-6,15(1H, d), 5,5-5,7(1H, d), 5,35-5,5(1H, d), 4,95-5,15(1H, d), 4,6-4,8(1H, d), 3,9-4,0(3H, s).

Ejemplo 28 1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-piridin-3-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Se trató una solución del producto del Paso 21.c. (102 mg, 0,35 mmoles) en DMF (1,5 ml) con hidrocloruro del ácido 3-piridinacético (69,4 mg, 0,40 mmoles), NMM (110 \mul, 1,00 mmoles) y TFFH (106 mg, 040 mmoles) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante ½ hora. Se añadió a la reacción una cantidad adicional de hidrocloruro del ácido 3-piridinacético (26,0 mg, 0,15 mmoles), NMM (33 \mul, 0,30 mmoles) y TFFH (40 mg, 0,15 mmoles) y se continuó agitando a temperatura ambiente durante ½ hora. La mezcla cruda se concentró a presión reducida. Se añadió una solución saturada de NaHCO_{3} (5 ml) y el producto se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 5 ml). El CH_{2}Cl_{2} se separó por destilación a presión reducida y el residuo se disolvió en CH_{3}CN acuoso al 10%, se ajustó a pH = 2 con Tfa. El producto crudo se purificó mediante HPLC preparativa sobre una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 10-50% de CH_{3}CN/0,1% Tfa durante 45 minutos con detección de UV a 254 nm. Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron a presión reducida. La sal de Tfa se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica al 30% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma cloruro). Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron a un volumen de aproximadamente 10 ml y se liofilizó desde H_{2}O para dar el producto puro (123 mg, 73%), como el dihidrocloruro. Espectro de masas 411,1 MH^{+}.

Ejemplo 29 1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-piridin-4-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El Ejemplo 29 se preparó de forma análoga al Ejemplo 28 excepto que se usó hidrocloruro del ácido 4-piridinacético en lugar del hidrocloruro del ácido 3-piridinacético en el Paso 29.a. Espectro de masas 411,1 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 8,8-8,9(2H, d), 8,1-8,2(1H, s), 7,9-8,0(3H, m), 7,75-7,9(1H, d), 7,65-7,75(1H, d), 7,6-7,7(1H, t), 7,5-7,65(1H, t), 7,35-7,5(1H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 6,2-6,4(1H, d), 5,7-5,85(1H, d), 5,5-5,65(1H, d), 4,5-4,7(1H, d)3,7-4,2(2H, m), 3,9-4,05(3H, s).

Ejemplo 30 1-(2-(1-bencilimidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 30.a hasta 30.c se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. hasta 21.c., sustituyendo bromuro de 2,6-difluorobencilo en lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 30.a.

Paso 30.d

1-(2-(1-bencilimidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 30.c. se acopló al producto del Paso 5.c. (ácido 1-fenilmetil-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 508,5 MH^{+}, RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,1-9,3(1H, s), 8,2-8,3(1H, s), 7,9-8,0(1H, d,d), 7,2-7,7(10H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t), 6,1-6,3(1H, d), 5,65-5,8(1H, d), 5,3-5,6(3H, m), 4,45-4,6(1H, d), 3,9-4,0(3H, s), 3,6-3,9(2H, q).

Ejemplo 31 1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-5-il)-1-oxoetil-9,10-difluoro-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 31.a hasta 31.c se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. a 21.c., sustituyendo bromuro de 1,4,5-trifluorobencilo en lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 31.a.

Paso 31.d

1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-5-il)-1-oxoetil-9,10-difluoro-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 31.c. se acopló al producto del Paso 11.j. (hidrocloruro del ácido 1-(cianofenilmetil-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 551,4 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,1-9,3(1H, s), 7,9-8,1(3H, m), 7,75-7,9(3H, m), 7,55-7,65(1H, s), 7,45-7,55(2H, d), 7,35-7,45(1H, m), 7,15-7,25(1H, d), 7,0-7,15(1H, t).

Ejemplo 32 4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-[((4-ciano)fenilmetilimidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Paso 32.a

2,2'-dibromoacetofenona

Se añadió bromo (40,3 g, 0,25 mmoles), gota agota, a una solución de 2'-bromoacetofenona (50,0 g, 0,25 moles) en ácido acético (500 ml) durante 1,5 horas a 14-20ºC. Se dejó que la solución se calentase a temperatura ambiente y se concentró a presión reducida para dar un producto crudo que se uso sin purificación adicional.

El Paso 32.b. se llevó a cabo de forma análoga al Paso 1.c., sustituyendo el producto del Paso 32.a. en lugar de la 2-bromo-2'-metoxiacetofenona y Cbz-glicina en lugar de Cbz-(L)-norleucina.

Los Pasos 32.c. a 32.e. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a a 21.c., sustituyendo bromuro de 2,6-difluorobencilo en lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 32.c., y sustituyendo l 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno en lugar de K_{2}CO_{3} en el Paso 32.e.

Paso 32.f

4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-[(4-ciano)fenilmetil]imidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 32.e. se acopló al producto del Paso 11.j. (hidrocloruro del ácido 1-(cianofenilmetil-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 581,1. 583,1 MH^{+}.

Ejemplo 33 1-(2-(1-[(4-ciano)fenilmetil]imidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-10-fluoro-4-(metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Los pasos 33.a. a 33.c. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. a 21.c., sustituyendo bromuro de 2,4-difluorobencilo en lugar de bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 30.a.

Paso 33.d

1-(2-(1-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-10-fluoro-4-(metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 33.c. se acopló al producto del Paso 11.j. (hidrocloruro del ácido 1-(cianofenilmetil-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 533,2 MH^{+}.

Ejemplo 34 1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazol-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 34.a. a 34.f. se llevaron a cabo según el esquema 34.

Esquema 34

67

a. MeOH/HCl

b. NaNO_{2}/HCl acuoso/KI

c. Zn(CN)_{2}/(Ph_{3}P)_{4}Pd/DMF

d. MeI/NaH/DMF

e. LiBH_{4}/THF

f. SOBr_{2}/CH_{2}Cl_{2}

Paso 34.a

4-amino-3-hidroxibenzoato de metilo

Se enfrió una solución de ácido 4-amino-3-hidroxibenzoico (24,5 g, 159 mmoles) en metanol (650 ml) en un baño de hielo y se trató con HCl gaseoso durante aproximadamente 20 minutos (aproximadamente 60 g). Se continuó agitando durante una noche y luego la solución se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con EtOAc (200 ml) y se secó hasta dar un sólido de color marrón (24,5 g, 92%) que se usó sin purificación adicional. Espectro de masas 168,2. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 9,3-9,4(1H, s), 7,2-7,3(2H, m), 6,55-6,65(1H, d), 5,3-5,4(2H, s (ancha)), 3,6-3,8(3H, s).

Paso 34.b

3-hidroxi-4-yodobenzoato de metilo

Se diluyó una solución del producto del Paso 34.a. (24,5 g, 146 mmoles) en THF (77 ml) con HCl 3N (232 ml) y se enfrió en un baño de hielo a 8ºC donde se formó un precipitado. Se añadió NaNO_{2} (11,1 g, 161 mmoles) en H_{2}O (75 ml) durante 6 minutos a la temperatura del baño de hielo. Se continuó agitando 25 minutos y luego se añadió una solución de KI (97,1 g, 585 mmoles) en H_{2}O (75 ml) en una poción, y se agitó durante 15 minutos. Se añadió EtOAc (550 ml) y se separaron las capas. Se lavó la capa de EtOAc H_{2}O (500 ml) y salmuera (400 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró hasta dar un sólido negro. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando CH_{2}Cl_{2} como eluyente para dar 19,7 g (48%) de un sólido blancuzco. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 10,5-10,8(1H, s), 7,8-7,9(1H, d), 7,4-7,5(1H, m), 7,1-7,2(1H, m), 3,75-3,85(3H, s).

Paso 34.c

4-ciano-3-hidroxibenzoato de metilo

Se trató una solución del producto del Paso 34.b. (25,3 g, 91,1 mmoles) y ZnCN_{2} (7,48 g, 63,7 mmoles) en DMF (100 ml), bajo N_{2}, con (Ph_{3}P)_{4}Pd (2,0 g, 1,82 mmoles) y se calentó a aproximadamente 80ºC durante 4 horas. Luego se enfrió la solución a temperatura ambiente y se distribuyó entre EtOAc (400 ml) y H_{2}O (400 ml). La capa de EtOAc se lavó con salmuera (4 x 200 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró y se filtró a presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice usando CH_{2}Cl_{2}, y luego 2,5% de MeOH/CH_{2}Cl_{2} como eluyentes. Las fracciones se concentraron hasta dar un sólido naranja y se secó hasta peso constante a vacío para dar el producto (13,4 g, 83%) que se usó en el Paso 34.d. sin más purificación. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,7-7,8(1H, m), 7,5-7,6(1H, d), 7,4-7,5(1H, m), 3,8-3,9(3H, s).

Paso 34.d

4.ciano-3-metoxi-benzoato de metilo

Se lavó NaH al 60% en aceite mineral (6,02 g, 151 mmoles) con 3 porciones de hexanos (20 ml) y se puso en suspensión en DMF (100 ml) a temperatura ambiente. El producto del Paso 34.c. (13,3 g, 75,3 mmoles) se lavó en DMF (100 ml) y la mezcla resultante se trató con yodometano (9,38 ml, 151 mmoles). Se dejó agitando la reacción durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (400 ml) y se lavó con ácido cítrico al 5% (2 x 150 ml) y salmuera (150 ml). La capa de EtOAc se secó luego sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró para dar un producto sólido (13,4 g, 93%), que se usó en el Paso 34.e. sin purificación adicional. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,62-7,72(3H, m), 4,0-4,1(3H, s), 3,9-4,0(3H, s).

Paso 34.e

4-hidroximetil-3-metoxi-benzonitrilo

El producto del Paso 34.d. (13,3 g, 70,0 mmoles) en THF (200 ml) se trató con LiBH_{4} 2M (75 ml, 150 mmoles) bajo N_{2} y la solución resultante se calentó a reflujo durante 3 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se trató cuidadosamente con HCl 4N en exceso para sofocar el reactivo en exceso. Se añadió H_{2}O (50 ml) y EtOAc (100 ml) y se separaron las capas. Las capas acuosas se volvieron a extraer con EtOAc (2 x 50 ml) y las capas de EtOAc se combinaron y se lavaron con salmuera (3 x 100 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a presión reducida para dar un sólido blanco (10,7 g, 94%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,5-7,8(1H, d), 7,0-7,1(1H, s), 6,94-7,0(1H, m), 4,75-4,8(2H, s), 3,9-4,9(3H, s), 1,9-2,1(1H, s (ancha)).

Paso 34.f

4-hidroximetil-3-metoxi-benzonitrilo

El producto del Paso 34.e. (1,0 g, 6,13 mmoles) se puso en suspensión en CH_{2}Cl_{2} (3,0 ml), se trató con SOBr_{2} (480 \mul, 6,13 mmoles), se agitó durante aproximadamente ½ hora y luego se concentró. El residuo se volvió a disolver en CH_{2}Cl_{2} (100 ml), se lavó con solución saturada de NaHCO_{3} (50 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró hasta dar un sólido amarillo claro (1,22 g, 88%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,5-7,6(1H, d (J = 8 Hz)), 7,02-7,08(1H, d,d (J = 8 Hz, J = 1Hz)), 7,0-7,02(1H, d (J = 1 Hz)), 4,45-4,5(2H, s), 3,95-4,0(3H, s).

Los Pasos 34.g. a 34.i. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 5.a a 5.c., sustituyendo el producto del Paso 34.f. por bromuro de bencilo en el Paso 5.a.

Paso 34.j

1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto de Paso 30.c. se acopló con el producto del Paso 34.i. (hidrocloruro del ácido 1-((4-ciano-metoxi-fenil)metil)-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masa 563,2 MH^{+}.

Ejemplo 35 10-bromo-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 35.a. a 35.c. se llevaron a cabo de forma análoga a los Pasos 21.a. a 21.c., sustituyendo bromuro de 2,4-dibromobencilo en lugar bromuro de 2-fluorobencilo en el Paso 35.a.

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Paso 35.d

10-bromo-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 35.c. (10-bromo-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina) se acopló con el producto del Paso 34.i. (hidrocloruro del ácido 1-((4-ciano-metoxi-fenil)metil)-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 623,1, 625,1 MH^{+}.

Ejemplo 36 1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-fenilimidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto de Paso 30.c. (1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepina) se acopló con el producto del Paso 34.i. (hidrocloruro del ácido 1-((4-ciano-metoxi-fenil)metil)-5-imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 2.b. Espectro de masas 533,3 MH^{+}.

Ejemplo 37 4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 32.e. (4-(2-bromofenil)-1-(2-(1-((4-ciano-3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 611,1, 613,1 MH^{+}.

Ejemplo 38 1-(2-(1-((3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 38.a a 38.c. se llevó a cabo de forma análoga a los Pasos 5.a. a 5.c., sustituyendo el bromuro de 3-metoxi-bencilo en lugar de del bromuro de bencilo en el Paso 5.a.

Paso 38.d

1-(2-(1-((3-metoxi)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 30.c. (1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepina) se acopló con el producto del Paso 38.c. (hidrocloruro del ácido 1-((3-metoxi)fenilmetil)imidazolacético) y se purificó de forma análoga al Paso 24.b. Espectro de masas 538,4 MH^{+}.

Ejemplo 39 1-(2-(5-((4-ciano)fenilmetil)imidazo-5-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepina

Los Pasos 39.a a 39.d. se llevaron a cabo según el Esquema 39, como sigue:

\newpage

Esquema 39

68

a. EtMgBr/4-ciano-benzaldehído/Et_{2}O/CH_{2}Cl_{2}

b. Tfa/Et_{3}SiH/(reflujo)

c. Trt-Cl/Et_{3}N/THF

d. BrCH_{2}COBr/DMF

e. Producto intermedio xxxvi, luego MeOH.

Paso 39.a

(R,S)-4-(hidroxi-(1-tritil-1H-imidazol-4-il)-metil)-benzonitrilo

Se enfrió una solución de 1-tritil-4-yodoimidazol (3,53 g, 8,10 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (35 ml) a aproximadamente -3ºC bajo N_{2} y se añadió, gota a gota, EtMgBr 3M en Et_{2}O, mientras que se mantenía la temperatura de reacción por debajo de aproximadamente 0ºC. La solución se agitó durante aproximadamente una hora a aproximadamente 0ºC y luego se añadió 4-cianobenzaldehído (1,18 g, 9,00 mmoles) en una porción y se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió luego, de nuevo, a aproximadamente 0ºC y se añadió HCl al 5% (30 ml). La mezcla de reacción se agitó aproximadamente 15 minutos, y luego se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 25 ml). Las capas de CH_{2}Cl_{2} combinadas se lavaron con NaHCO_{3} saturado, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y luego se concentró a presión reducida. El residuo se trituró con EtOAc (25 ml) y el producto se separó por filtración (2,92 g, 82%). Espectro de masas 442,3 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,7-7,8(2H, d), 7,5-7,6(2H, d), 7,3-7,5(9H, m), 7,25-7,3(1H, s), 7,0-7,15(6H, m), 6,75-6,8(1H, s), 5,9-6,90(1H, m), 5,6-5,7(1H, m).

Paso 39.b

4-((1H-imidazol-4-il)-metil)-benzonitrilo

Se trató una solución del producto del Paso 39.a. (1,10 g, 2,49 mmoles) con Tfa (15 ml) y Et_{3}SiH (3,0 ml, 18,8 mmoles). La mezcla se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 horas. La mezcla de reacción se concentró luego para separar los subproductos. Se añadió Tfa (15 ml) y Et_{3}SiH (3,0 ml, 18,8 mmoles) y luego la mezcla se puso a reflujo durante un periodo adicional de aproximadamente 2 horas y luego se concentró. Se añadieron reactivos nuevos y se separaron los subproductos por evaporación a presión reducida, según se requiera, hasta el material de partida se hubo consumido. El consumo del material de partida se controló mediante análisis de HPLC analítico usando una columna VYDAC C_{18} (The Nest Group, Southborough, MA) y un gradiente de 0% a 70% de CH_{3}CN/0,1% de Tfa durante 25 minutos. El producto crudo se purificó mediante una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 0% a 25% CH_{3}CN/0,1% Tfa acuosa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron hasta ½ del volumen y se liofilizaron para dar el producto crudo. La sal producto se basificó con solución saturada de NaHCO_{3}, se extrajo en CH_{2}Cl_{2} (3 x 25 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. Espectro de masas 183,9 MH^{+}. RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,55-7,6(2H, d(J = 8 Hz)), 7,55-7,58(1H, d(J = 1 Hz)), 7,3-7,4(2H, d(J = 8 Hz)), 6,75-6,8(1H, d(J = 1Hz)), 3,9-4,1(2H, s).

Paso 39.c

4-((1-tritil-1H-imidazol-4-il)-metil)-benzonitrilo

El producto del Paso 39.b. (152 mg, 0,83 mmoles), clorotrifenilmetano (231 mg, 0,83 mmoles) y Et_{3}N (139 \mul, 1,0 mmoles) se disolvieron en THF (4 ml) y se agitó bajo N_{2} a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 horas. Se añadió una solución saturada de NaHCO_{3} (5 ml) y el producto se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto crudo se purificó por cristalización en EtOAc y hexanos para dar el producto puro (285 mg, 81%). Espectro de masas 426,4 MH^{+} (línea menor), RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}, 30ºC) 7,5-7,6(2H, d(J = 8Hz)), 7,4-7,45(1H, d(J = 1Hz)), 7,3-7,4(11H, m), 7,1-7,2(6H, m), 6,58-6,62(1H, d(J = 1Hz)), 3,9-4,0(2H, a).

Paso 39.d

1-bromoacetil-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 39.c. (108 mg, 0,35 mmoles) se disolvió en DMF (1,5 ml) y se añadió bromuro bromoacetilo (65 \mul, 0,75 mmoles) a temperatura ambiente con agitación. Se dejó reposar la mezcla durante una noche y luego se concentró a presión reducida para dar el producto crudo que se usó en el Paso 39.e. sin más purificación. Espectro de masas 430,2, 432,2 MH^{+}).

Paso 39.e

(2-(5-((4-ciano)fenilmetil)imidazol-1-il)-1-oxoetil-2,5-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepina

El producto del Paso 39.d. (0,32 mmoles) se distribuyó entre NaHCO_{3} (2 ml) y EtOAc (5 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc )(5 ml) y las capas de EtOAc se combinaron, se secaron (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a aproximadamente 2 ml. El producto del Paso 39.c. (134 mg, 0,32 mmoles) se añadió y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 días y luego se concentró a presión reducida. El residuo se extrajo en metanol (4 ml) y se calentó a reflujo durante aproximadamente 1 hora. La reacción se enfrió y se concentró a presión reducida y el producto crudo se purificó mediante una columna RAININ™ C_{18} usando un gradiente de 0% a 50% CH_{3}CN/0,1% Tfa acuosa durante 45 minutos. Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron a presión reducida. La sal de Tfa se convirtió en la sal de hidrocloruro haciendo pasar una solución metanólica al 30% a través de una columna de cambio iónico (BioRad AG 1-X2, malla 200-400, 0,6 meq/ml, 100 ml, forma de cloruro). Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron a un volumen de aproximadamente 10 ml y se liofilizaron desde H_{2}O para dar el producto puro (35 mg, 18%) como el dihidrocloruro. Espectro de masas 533,2 MH^{+}.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I

69

en la que

n1 es 0 ó 1;

Z es O, N(R^{12}), S, o un enlace;

n3 es, independientemente para cada caso, 0 ó 1;

n4 y n5 son, independientemente para cada caso, 0, 1, 2 ó 3;

Y es, independientemente para cada caso, CO, CH_{2}, CS o un enlace;

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o N(R^{24}R^{25});

R^{3} es, independientemente para cada caso, H o un resto opcionalmente sustituido seleccionado del grupo consistente en alquilo(C_{1-6}), alquenilo(C_{2-6}), alquinilo(C_{2-6}), cicloalquilo(C_{3-6}), alquil(C_{1-6})cicloalquilo(C_{3-6}), cicloalquenilo(C_{5-7}), cicloalquenil(C_{5-7})alquilo(C_{1-6}), arilo, aril-alquilo(C_{1-6}), heterociclilo, y heterociclil-alquilo(C_{1-6}), en los que dicho resto opcionalmente sustituido está opcionalmente sustituido con uno o más R^{30};

R^{10} es C;

71

N6 y n7 es cada uno, independientemente para cada caso, 0, 1 ó 2;

en la que dicho heterociclilo es azepinilo, bencimidazolilo, bencisoxazolilo, benzofurazanilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, cromanilo, cinnolinilo, dihidrobenzofurilo, dihidrobenzotienilo, dihidrobenzotiopiranilo, dihidrobenzotio-piranil-sulfona, furilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, indolinilo, indolilo, isocromanilo, isoindolinilo, isoquinolinilo, isotiazolidinilo, isotiazolilo, isotiazolidinilo, morfolinilo, naftiridinilo, oxazodiazolilo, 2-oxoazepinilo, 2-oxopiperacinilo, 2-oxopiperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, piperidilo, piperacinilo, piridilo, piridil-N-óxido, quinoxalinil, tetrahidrofuril, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiamofolinilo, tiamofolinil-sulfóxido, tiazolilo, tiazolinilo, tienofurilo, tienotienilo, o tienilo; y

en la que dicho arilo es fenilo o naftilo;

con tal que:

72

73

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que:

R^{1} es

74

o N(R^{24}R^{25}); y

X es CH(R^{11})_{n3}(CH_{2})_{n4} o Z, en la que Z es O, S o N(R^{12});

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

3. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que

R^{1} es

7

X es CH(R^{11})_{n3}(CH_{2})_{n4}; y

n1 es 0;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

4. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que:

R^{1} es

76

n3, n4 y n5 es cada uno 0;

Z es un enlace

Y es, independientemente para cada caso, CO o CS; y

n1 es 0;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

5. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que

R^{1} es

77

R^{6} es H;

n1 es 1;

R^{7} y R^{10}se consideran juntos para formar

78

n3 es 1 y R^{11} es H;

Z es O o un enlace;

n5 es 0; y

Y es CO, CH_{2} o un enlace;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

6. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que:

R^{1} es

79

R^{7} es H o =O;

n1 es 1;

R^{6} y R^{10} se consideran juntos para formar

80

n3 es 1 y R^{11} es H;

n5 es 0;

Y es FCO o CH_{2}; y

Z es CO o un enlace;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

7. Un compuesto según la reivindicación 3, en el que dicho compuesto es

8-butil-7-(3-(imidazol-5-il)-1-oxopropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina;

8-butil-2-(2-hidroxifenil)-7-(imidazol-4-il-propil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazol[1,2a]pirazina;

8-butil-7-(4-imidazolilpropil)-2-(2-metoxifenil)-5,6,7,8-tetrahidro-imidazo-[1,2a]-pirazina;

7-(2-(imidazol-4-il)-1-oxo-etil)-2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina;

2-(2-metoxifenil)-8-(1-metilpropil)-7-(1-oxo-2-(1-(fenilmetil)-imidazol-5-il)etil)-5,6,7,8-tetrahidroimidazo[1,2a]pirazina;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

8. Un compuesto según la reivindicación 5, en el que dicho compuesto es

1,2-dihidro-1-((1H-imidazol-4-il)metil)-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

9-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

9-cloro-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

10-bromo-1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

9. Un compuesto según la reivindicación 8, en el que dicho compuesto es

1-(2-(1-(4-cianofenilmetil)imidazol-4-il)-1-oxoetil)-1,2-dihidro-8-fluoro-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepina.

10. Un compuesto según la reivindicación 6, en el que dicho compuesto es

5-(2-(1-(4-cianofenilmetil)-imidazol-5-il)-1-oxo-etil)-5,6-dihidro-2-fenil-1H-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepina;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

11. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que dicho compuesto es

1,2-dihidro-1-(2-(imidazol-1-il)-1-oxoetil)-4-(2-metoxifenil)-imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina;

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-(piridin-3-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina;

1,2-dihidro-4-(2-metoxifenil)-1-(2-(piridin-4-il)-1-oxoetil)imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepina;

o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

12. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que dicho compuesto es

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o una sal suya farmacéuticamente aceptable.

13. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto según la reivindicación 1, o una sal suya farmacéuticamente aceptable, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

14. El uso de un compuesto según la reivindicación 1, o una sal suya farmacéuticamente aceptable, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad seleccionada del grupo consistente en fibrosis, hiperplasia prostática benigna, aterosclerosis, restenosis, cáncer de mama, cáncer de colon, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer de ovarios, cáncer de la epidermis, cáncer hematopoyético, e infección por el virus delta de la hepatitis.

15. El uso de un compuesto según la reivindicación 1, o una sal suya farmacéuticamente aceptable, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un tumor dependiente de las Ras en un sujeto que lo necesite.

16. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 o una sal suya farmacéuticamente aceptable, para la elaboración de un medicamento para la inhibición de la prenil-transferasa en un sujeto que lo necesite.

17. Un compuesto según la reivindicación 2, en el que dicho compuesto es

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o una sal suya farmacéuticamente aceptable.