NO321057B1

NO321057B1 - Prenyl-transferase-inhibitorer, preparater av disse samt anvendelse av disse til frmstilling av terapeutiske preparater for behandling av sykdom.

Info

Publication number: NO321057B1
Application number: NO20013281A
Authority: NO
Inventors: Barry A Morgan; Thomas D Gordon
Original assignee: Sod Conseils Rech Applic
Priority date: 1998-12-31
Filing date: 2001-06-29
Publication date: 2006-03-06
Also published as: RU2241712C2; EP1140942A2; RU2241712C9; US20080176835A1; HUP0104708A3; US7691859B2; EP1140942B1; DE69941307D1; PT1140942E; EP1382607A3; HUP0104708A2; WO2000039130A3; DE69915514T2; NO20013281D0; ATE261447T1; US20060142275A1; ES2215420T3; ATE440100T1; EP1382607A2; DE69915514D1

Abstract

En familie av imidazol-forbindelser som er nyttige for inhibering av aktiviteten til prenyl-transferaser. Forbindelsene dekkes av formel (1): hvor X er (CHR)(CH)Z(CH), hvor Z er. O, N(R), S eller en binding, Y er CO, CH, CS eller en binding, Rer A, B, C, D, E, F, G, H, I, J. ellerR)og de øvrige substituenter er som definert i beskrivelsen.

Description

Bakgrunn for oppfinnelsen.

Ras-familien av proteiner er viktige i signal-transduksjonsveien som modu-lerer cellevekst. Proteinet produseres i ribosomet, frigjøres til cytosolen og modifi-seres post-translasjonelt. Det første trinnet i serien av post-translasjons-modifikasjoner er alkyleringen av Cys168 med farnesyl eller geranylgeranyl-pyrofosfat i en reaksjon katalysert av prenyl-transferase-enzymer så som famesyl-transferase og geranylgeranyl-transferase (Hancock, JF, et al., Cell 57:1167-1177 (1989)). Føl-gelig blir de tre C-terminale aminosyrer spaltet (Gutierrez, L., et al., EMBO J. 8:1093-1098 (1989)), og den terminale Cys omdannes til en metylester (Clark, S.

et al. Proe. Nafl Acad. Sei. (USA) 85:4643-4647 (1988)). Noen former av Ras blir også reversibelt palmitoylert på cystein-rester umiddelbart N-terminalt til Cys<168 >(Buss, JE, et al., Mol. Cell. Biol. 6:116-122 (1986)). Det antas at disse modifikasjoner øker hydrofobisiteten til C-terminalregionen på Ras, og forårsaker at den lokaliserer seg på overflaten av cellemembranen. Lokalisering av Ras til cellemembranen er nødvendig for signaltransduksjon (Willumsen, BM, et al., Science 310:583-586(1984))..

Onkogene former av Ras er observert ved et relativt stort antall cancerfor-mer, innbefattende over 50% av colon-cancer og over 90% av pancrease-cancer (Bos, JL, Cancer Research 49:4682-4689 (1989)). Disse observasjoner antyder at intervensjon i funksjonen av Ras-mediert signaltransduksjon kan være nyttig i behandlingen av cancer.

Tidligere er det blitt vist at det C-terminale tetrapeptid på Ras har "CAAX"-motiv (når C er cystein, er A en alifatisk aminosyre og X er en hvilken som helst aminosyre). Tetrapeptider som har denne struktur er vist å være inhibitorer av prenyl-transferaser (Reiss, et al., Cell 62.81 -88 (1990)). Liten effekt ("poor poten-cy") hos disse tidlige famesyl-transferase-inhibitorer har påskyndet letingen etter nye inhibitorer med mer fordelaktige farmakokinetisk oppførsel (James, GL, et al., Science 260:1937-1942 (1993); Kohl, NE, et al., Proe. Nati Acad. Sei. USA 91:9141-9145 (1994); deSolms, SJ, et al., J. Med. Chem. 38:3967-3971 (1995); Nagasu, T. et al., Cancer Research 55:5310-5314 (1995); Lemer, EC, et ai., J.

Biol. Chem. 270:26802-26806 (1995); Lemer, EC, et al., J. Biol. Chem. 270:26770

(1995); og James, et al., Proe. Nati. Acad. Sei. USA 93:4454 (1996)).

Det er nylig blitt vist at en prenyl-transferase-inhibitor kan blokkere veksten av Ras-avhengige tumorer hos naken-mus (Kohl, NE, et al., Proe. Nafl Acad. Sei. USA 91:9141 -9145 (1994)). I tillegg er det blitt vist at over 70% av en stor prøve av tumor-cellelinjer blir inhibert med prenyl-transferase-inhibitorer med selektivitet overfor ikke-transformerte epitelial-celler (Sepp-Lorenzino, I, et al., Cancer Research, 55:5302-5309 (1995)). Inhiberende famesylering er blitt beskrevet som en metode for behandling av hepatitt-deltavinjsinfeksjon (Casey, P, et al., WO 97/31641).

Oppsummering av oppfinnelsen.

I ett aspekt av fremviser oppfinnelsen en forbindelse med formel (I):

hvor:

n1 er 0 eller 1; X, uavhengig ved hver forekomst, er (CH2)n42(CH2)n5, Z er O eller en binding; n4 og n5, uavhengig ved hver forekomst, er 0,1,2 eller 3; Y, uavhengig ved hver forekomst, er CO, CH2 eller en binding, R<1> er

eller N(R24R<25>);

R<3>, uavhengig ved hver forekomst er H, (Ci.6)alkyl, (C3^)cykloalkyl(Ci^)alkyl eller fenyl eventuelt substituert med halogen;

R<4> er fenyl eventuelt substituert med OH, halogen, (Ci^)alkoksy eller fenyl(Ci-6)alkoksy;

R5 er H;

R<6>erHeller(Ci.6)alkyl;

R<7>erHeller(Ci^)alkyl;

R<10>erC;

R<21> er H eller fenyl(Ci-6)alkyl eventuelt substituert med CN og/eller {Cv e)alkoksy;

R24 og R25 er H;

forutsatt at:

når n1 = 1, R<10> er C og R<6> er H, så kan R10 og R<7> sammen danne eller, når n1 = 1, R10 er C og R<7> er H, så kan R10 og R<6> sammen danne hvor X<1>, X<2> og X<3> hver, uavhengig, er H eller halogen, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav. En foretrukket gruppe av forbindelser med formel (I), betegnet gruppe A, er hvor R<1> er

eller N(R24R25), og

X er (CH2)n4 eller Z, hvor Z er O,

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

En annen foretrukket gruppe av forbindelser med formel (I), betegnet gruppe B, er hvor

R1 er

X er (CHaU og

n1 er 6,

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

En annen foretrukket gruppe av forbindelser med formel (I), betegnet gruppe D, er hvor:

R<1> er R<6>erH, n1 er 1, R7 og R<10> sammen danner

n4 er 1,2 eller 3,

Z er O eller en binding,

n5 er 0, og

Y er CO, CH2 eller en binding,

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

En annen foretrukket gruppe av forbindelser med formel (I), betegnet gruppe F, er hvor:

R<7>erH, n1 er 1, R<6> og R<10> sammen danner

n4 er 1,2 eller 3,

n5er0,

Y er CO eller CH2, og

Z er O eller en binding,

eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

I et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot et farmasøytisk preparat som omfatter én eller flere av en forbindelse med formel (I), som definert ovenfor, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og en farmasøytisk akseptabel bærer.

I enda et annet aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for inhibering av prenyl-transferaser (for eksempel famesyl-transferase eller geranylgeranyl-transferase) i et individ, for eksempel et pattedyr så som et meneske. I et ytterligere aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot anvendelse av en forbindelse med formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av restenose eller vevsproliferative sykdommer (for eksempel tumor) i et individ. Eksempler på vevsproliferative sykdommer innbefatter både dem som assosieres med godartet (for eksempel ikke-målign) celleproliferasjon så som fibrose, godartet prostatahyperplasi, aterosklerose og restenose, og dem assosiert med malign celleproliferasjon, så som cancer (for eksempel ras-mutant-tumorer). Eksempler på tumorer som kan behandles innbefatter bryst-, colon-, pancreas-, prostata-, lunge-, ovarie-, epidermal- og hematopoietisk cancer (Sepp-Lorenzino, I, et al., Cancer Research 55:5302 (1995)).

I enda et ytterligere aspekt er foreliggende oppfinnelse rettet mot anvendel-sen av én eller flere forbindelser med formel (I), som definert ovenfor, eller et far-masøytisk akseptabelt salt derav til fremstilling av et terapeutisk preparat for bin- . ding til en prenyl-transferase, som ved utførelse av en in vitro- eller in vivo-måling.

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen.

Generelt kan forbindelsene med formel (I) fremstilles ved fremgangsmåter som innbefatter dem som er kjent på det kjemiske fagområde for fremstilling av forbindelser. Visse fremgangsmåter for fremstilling av forbindelser med formel (I) tilveiebringes som ytterligere trekk ved oppfinnelsen, og er illustrert i reaksjons-skjemaene og eksempler innbefattet deri.

I de strukturelle formler ovenfor og gjennom foreliggende søknad, har de følgende betegnelser de antydede betydninger, med mindre annet uttrykkelig er angitt: Betegnelsen alkyl er ment å innbefatte slike alkylgrupper som har det angitte antall karbonatomer i enten en rettkjedet eller forgrenet konfigurasjon. Eksempler på slike alkylgrupper er metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, sek.butyl, tertiært butyl, pentyl, isopentyl, heksyl, isoheksyl og lignende. Når betegnelsen C0-alkyl er innbefattet i en definisjon, er det ment å betegne en enkelt, kovalent binding.

Betegnelsen cykloalkyl er ment å innbefatte en mono-cykloalkylgruppe eller en bicykloalkylgruppe med det angitte antall karbonatomer. Eksempler på slike cykloalkylgrupper er cyklopropyl, cyklobutyl, cykloheksyl og lignende.

Betegnelsen alkenyl er ment å innbefatte, hydrokarbongrupper med én eller flere dobbeltbindinger og det angitte antall karbonatomer i enten en rettkjedet eller forgrenet konfigurasjon. Eksempler på slike alkenylgrupper er etenyl, propenyl, isopropenyl, butenyl, sek.butenyl, tertiært butenyl, pentenyl, isopentenyl, heksenyl, isoheksenyl og lignende.

Betegnelsen cykloalkenyl er ment å innbefatte en mono-cykloalkenyl-gruppe eller en bicylkoalkenyl-gruppe med det antydede karbontall som har én eller flere dobbeltbindinger, men ikke nok dobbeltbindinger til å gjøre gruppen aromatisk. Eksempler på slike cykloalkenylgrupper er cyklopentenyl, cyklohekse-nyl, cykloheptenyl og lignende.

Betegnelsen alkynyl er ment å innbefatte slike alkynylgrupper, dvs. hydrokarbongrupper som har én eller flere trippelbindinger, som har det angitte antall karbonatomer i enten rettkjedet eller forgrenet konfigurasjon. Eksempler på slike alkynylgrupper er etynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, isopentynyl, heksynyl, iso-heksynyl og lignende.

Betegnelsen alkoksy er ment å innbefatte slike alkoksygrupper som har det angitte antall karbonatomer i enten en rettkjedet eller forgrenet konfigurasjon. Eksempler på slike alkoksygrupper er metoksy, etoksy, propoksy, isopropoksy, butoksy, isobutoksy, tertiær butoksy, pentoksy, isopentoksy, heksoksy, isoheksoksy og lignende.

Betegnelsen aryl er ment å innbefatte aromatiske ringer kjent på fagområdet, som kan være mono-cykliske eller bicykliske, så som fenyl og naftyl.

Betegnelsen heterocyklyl, som anvendt her, representerer en 5- til 7-leddet moncyklisk eller 8- til 11 -leddet bicyklisk eller 11 -15-leddet tricyklisk, heterocyklisk ring som enten er mettet eller umettet, og som består av karbonatomer og fra ett til fire heteroatomer uavhengig valgt fra gruppen som består av N og O. Også innbefattet er enhver bicyklisk gruppe hvor en hvilken som helst av de ovenfor defi-nerte heterocykliske ringer er kondensert til en benzenring, hvor den heterocykliske ring kan være bundet til ethvert heteroatom eller karbonatom. Eksempler på slike heterocykliske grupper innbefatter, azepinyl, benzimidazolyl, benzisoksa-zolyl, benzofurazanyl, benzopyranyl, benzofuryl, benzoksazolyl, kromanyl, cinnoli-nyl, dihydrobenzofuryl, furyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, indolinyl, indo-lyl, isokromanyl, isoindolinyl, isokinolinyl, morfolinyl, naftyridinyl, 2-oksoazepinyl, 2-oksopiperazinyl, 2-oksopiperidinyl, 2-oksopyrrolidinyl, piperidyl, piperazinyl, pyridyl, pyridyl-N-oksid, kinoksalinyl, tetrahydrofuryl, tetrahydroisokinolinyl, tetrahydrokino-linyl og lignende.

En kjemiker med vanlig kunnskap på området vil erkjenne at visse kombi-nasjoner av heferoatomholdige substituenter opplistet i denne oppfinnelse define-rer forbindelser som vil være mindre stabile under fysiologiske betingelser. Følge-lig er slike forbindelser mindre foretrukket.

Betegnelsen halogen eller halo er ment å innbefatte halogenatomene fluor, klor, brom og jod.

Når en kjemisk struktur, som benyttet her, har en pil som utgår fra den, antyder pilen punktet for tilknytning. For eksempel er strukturen

en pentylgruppe. Når en verdi i parentes er synlig nær pilen, antyder verdien hvor i forbindelsen tilknytningspunktet kan finnes. For eksempel i den generelle formel (I): som definert ovenfor, når R<10> og R<7> sammen danner resulterer det i den følgende struktur:

Når en linje dras gjennom en cyklisk gruppe, antyder linjen at substituenten kan knyttes til den cykliske gruppe ved et hvilket som helst av de tilgjengelige bindingspunkter.

for eksempel betyr

at substituenten "X" kan være bundet orto, meta

eller para til tilknytningspunktet. Videre, når en linje er dratt gjennom en bicyklisk eller tricyklisk gruppe, antyder linjen at substituenten kan være bundet til den bicykliske eller monocykliske gruppe ved et hvilket som helst av de tilgjengelige bindingspunkter i en hvilken som heist av ringene. Likeledes, når en pil er dratt gjennom en cyklisk gruppe, antyder pilen at tilknytningspunktet på den cykliske gruppe

til forbindelsen kan være på et hvilket som helst av de tilgjengelige bindingspunkter på den cykliske gruppe. Videre, når en pil er trukket gjennom en bicyklisk eller en tricyklisk gruppe, antyder pilen at tilknytningspunktet på den bicykliske eller en tricylisk gruppe til forbindelsen kan være på et hvilket som helst av de tilgjengelige bindingspunkter i en hvilken som helst av ringene på de bicykliske eller en tricyklisk gruppe(ne),

Noen av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse kan ha minst ett asymmetrisk senter. Ytterligere asymmetriske sentre kan være til stede på molekylet, avhengig av naturen til de forskjellige substituentene på molekylet. Hvert slikt asymmetrisk senter vil gi to optiske isomerer og det er ment at alle slike optiske isomerer, som adskilte, rene eller delvis rensede, optiske isomerer, racemiske blandinger eller diastereomere blandinger derav, er innbefatten innen rammen av denne oppfinnelsen.

Forbindelsene i denne oppfinnelsen kan generelt bli isolert i form av sine farmasøytiske akseptable syreaddisjonssalter så som saltene som er utledet fra anvendelse av uorganiske og organiske syrer. Eksempler på slike syrer er salt-, salpeter-, svovel-, fosfor-, maur-, eddik-, trifluoreddik-, propion-, malein-, rav-, D-vin-, L-vin-, malon-, metansulfonsyre og lignende. I tillegg kan visse forbindelser inneholdende en syrefunksjon, så som et karboksy, bli isolert i form av sine uorganiske salter, hvor mot-ionet kan velges fra natrium, kalium, litium, kalsium, magnesium og lignende, så vel som fra organiske baser.

De farmasøytisk akseptable salter kan dannes ved å ta ca. 1 ekvivalent av en forbindelse med formel (I) og bringe den i kontakt med ca. 1 ekvivalent eller mer av den passende, tilsvarende syre av saltet som ønskes. Opparbeiding og isolasjon av det resulterende salt er velkjent for vanlige fagfolk på området.

Forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen kan administreres ved oral, parenteral (foreksempel intramuskulær, intraperitoneal, intravenøs eller subkutan injek-sjon, eller implantasjon), nasal, vaginal, rektal, sublingual eller topiske måter for administrering og kan formuleres med farmasøytisk akseptable bærere for å til-veiebringe doseringsformer som er passende for hver administreringsmåte. Føl-gelig innbefatter foreliggende oppfinnelse innen sin ramme farmasøytiske preparater som omfatter, som en aktiv ingrediens, minst én av forbindelsene med formel (I), sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer.

Doseringsformer i fast form for oral administrering innbefatter kapsler, tabletter, piller, pulvere og granuler. I slike doseringsformer i fast form er den aktive forbindelse i blanding med minst én inert, farmasøytisk akseptabel bærer så som sukrose, laktose eller stivelse. Slike doseringsformer kan også omfatte, som nor-mal praksis er, ytterligere substanser som ikke er slike inerte fortynningsmidler, for eksempel smøremidler så som magnesiumstearat. I tilfelle av kapsler, tabletter og piller, kan doseringsformene også omfatte bufringsmidler. Tabletter og piller kan i tillegg bli fremstilt med enteriske belegg.

Flytende doseringsformer for oral administrering innbefatter farmasøytisk akseptable emulsjoner, løsninger, suspensjoner, siruper, eliksirene inneholdende inerte fortynningsmidler vanlig brukt på fagområdet, så som vann. Ved siden av slike inerte fortynningsmidler, kan preparater også innbefatte hjelpestoffer, så som fuktemidler, emulgeringsmidler og suspenderingsmidler, og setnings-, smaksset-tings-og parfymeringsmidler.

Fremstillinger ifølge denne oppfinnelsen for parenteral administrering innbefatter sterile, vandige eller ikke-vandige løsninger, suspensjoner eller emulsjoner. Eksempler på ikke-vandige løsningsmidler eller vehikler er propylenglykol, polyetylenglykol, vegetabilske oljer, så som olivenolje og maisolje, gelatin, og inji-serbare organiske estere så som etyloleat. Slike doseringsformer kan også inneholde hjelpestoffer så som konserverings-, fukte-, emulgerings- og dispergerings-midler. De kan være sterilisert ved for eksempel filtrering gjennom et bakterie-tilbakeholdende filter, ved innlemmelse av steriliserende midler i preparatene, ved stråling av preparatene, eller ved oppvarming av preparatene. De kan også fremstilles i form av sterile preparater i fast form som kan oppløses i sterilt vann, eller annet sterilt, injiserbart medium straks før bruk.

Preparater for rektal eller vaginal administrering er fortrinnsvis stikkpiller som kan inneholde, i tillegg til den aktive substans, eksipienter så som kakaosmør eller en suppositorie-voks.

Preparater for nasal eller sublingual administrering fremstilles også med standard eksipienter som er velkjente innen fagområdet.

Generelt kan en effektiv dosering av aktiv ingrediens i preparatene i henhold til denne oppfinnelse varieres; det er imidlertid nødvendig at mengden av den aktive ingrediens er slik at en egnet doseringsform er oppnådd. Den valgte dosering avhenger av den ønskede terapeutiske effekt, på administreringsmåten og på varigheten av behandlingen, som alle ligger innenfor kunnskapsområdet til en vanlig fagmann på området. Generelt administreres doseringsnivåer på mellom 0,0001 til 100 mg/kg kroppsvekt daglig til mennesker og andre dyr, for eksempel pattedyr.

Et foretrukket doseområde er 0,01 til 10,0 mg/kg kroppsvekt daglig, som kan administreres i en enkeltdose eller oppdelt i flere doser.

Forbindelser ifølge denne oppfinnelse kan og ble vurdert med hensyn til aktivitet på ankrings-avhengig ("anchorage-dependent") vekst av humane tumor-cellelinjer ifølge følgende måling.

Cellene ble sådd på en 96-brønners plate på dag 0 og behandlet på dag 1 i 96 timer med de følgende konsentrasjoner av en forbindelse ifølge foreliggende oppfinnelse: 50,25,12,5,6,25,3,12,1,56,0,78, 0,39 og 0,00 um. På slutten av denne perioden blir kvantifiseringen av celleproliferasjon vurdert ved kolorimetrisk måling basert på spaltningen av tetrazoliumsaltet WST1 ved mitokondriske de-hydrogenaser i levedyktige celler, som fører til formazan-dannelse. Disse forsøk ble gjentatt to ganger i oktuplikater, og tillater således bestemmelse av et vindu av forbindelseskonsentrasjon, innbefattende ICso-verdien.

Protokollen beskrevet rett ovenfor ble utført ved anvendelse av de følgende humane tumorcellelinjer: Prostata: DU 145 adeocarcinom, med WT ras, resistent overfor L744-832; Colon: HT29, adenocarcinom med Wild Type ras (WT), følsom overfor L744-832; Pancreas: MIA PaCa-2, carcinom med Ki-ras-mutasjon; Lunge: A427, carcinom med Ki-ras-mutasjon.

Det skal forstås at foregående beskrivelse ment å illlustrere oppfinnelsen som er definert ved rammen for de medfølgende krav.

EKSEMPLER

Forbindelse 1:8-butyl-7-(3-(imidazol-5-yl)-1-oksopropyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 2:8-butyl-2-(2-hydroksytenyl)-7-(imidazol-4-ylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin Forbindelse 3:8-butyl-7-(4-imidazolylpropyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydro-imidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 4:7-(2-(imidazol-4-yl)-1-oksoetyl)-2-(2-metoksyfenyl)-8-(1-metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 5:2-(2-metoksyfenyl)-8-{1 -metylpropyl)-7-(1 -okso-2-(1 - (fenylmetyl)-imida2ol-5-yl)etyl-5,6t7,8-tetrahydroimida^o[1.2a]pyrazin Forbindelse 6:2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-7-(2-(1 -fenylmetyl)-imidazol-5-yl)etyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin Forbindelse 7:7-(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl}-imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin Forbindelse 8:7-({1 H-imidazol-1 -yl)metyl)-2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-5t6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 9:7-((4-imidazolyl)karb6nyl)-2-(2-metoksyfenyl)-8-(1-rnetylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 10: 7-(1-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)metyl-2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin Forbindelse 11: 5-(2-(1 -(4-cyanofenyjmetyl)imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-5,6-dihydro-2-fenyl-1 H-imidazo[1.2-a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 12: 7-(2-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin

Forbindelse 14: 5-butyl-7-(2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-2-fenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin

Forbindelse 15:6-butyl-7-{2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin Forbindelse 16:6-butyl-7-(2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-fenyl-5,6,7,8-tetrahydroimida2o[1.2-a]pyrazin Forbindelse 17:5-butyl-7-(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1 -okso-etyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin Forbindelse 18:7-(2-{1 •(4-cyanofenylmetyl)imidazo!-5-yl)-1 -oksoetyl)-8-(cykloheksylmetyl)-2-{2-metoksyfenyl)-5,67t84etrahydroimida^o[1.2a]pyrazin

Forbindelse <1>9:5-but<y>l-7-(2-(1 H-i<m>idazol-5-yl)-1-oksoet<y>l)-2-(2-metoks<y->fenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin

Forbindelse 20:7-(2-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-(2-(fenylmetoksy)fenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin Forbindelse 21:2-(2-butoksyfenyl)-7-(2-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin Forbindelse 22:1,2-dihydro-1-({1 H-imidazol-4-yl)metyl)-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 23:1 -(2-(1 -{4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 24:9-brom-1-{2-(1-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1-okso-etyl)-1,2-dihydro-4-(-2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin Forbindelse 25: 9-klor-1-(2-(1-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1-oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazp[1.2-c][1.4]benzodiazepin Forbindelse 26:10-brom-1 -{2-(1-(4-cyanofenyImetyl)imidazol-4-yl)-1-okso-etyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 27:1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro<->8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-cJ[1 4]benzodiazepin

Forbindelse 28:1,2-dihydro-l -2-imidazol-1 -yl)-1 -oksoetyl)-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 29:112-dihydro-4-(2-metoksyfenyt)-1-{2-(pyridin-3-yl)-1-okso-etyl)imidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 30:1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-1-(2-(pyridin-4-yl)-1-okso-etyl)imidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 31:1 -(2-(1 -benzylimidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 32:1 -(2-(1 -({4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl-9,10-difluor-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenylimidazo[1.2c][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 33:4-(2-bromfenyl)-1 -(2-(1 -[(4-cyano)fenylfenyl]imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 34:1 -(2-(1 -((4-cyano)fenylmetyl)imidazo-5-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-10-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazol[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 35:1 -(2-(1 -((4-cyano-3-metoksy)fenylmetyl)imidazo-5-yl)-1 - oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazol[1.2a][1.4]behzodiazepin

Forbindelse 36:10-brom-1 -(2-(1 -((4-cyano-3-metoksy)fenylmetyl)imidazo-5-yl)-1-oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2a][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 37:1 -(2-(1 -((4-cyano-3-metoksy)fenylmetyl)imidazo-5-yl)-1 - oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-fenylimidazol[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 38:4-(2-bromfenyl)-1 -(2-(1 -((4-cyano-3-metoksy)fenylmetyl)-imidazo-5-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-8-f luorimidazol[1.2a][1.4]benzodiazepin Forbindelse 39:1 -(2-(1 -((3-metoksy)fenylmetyl)imidazo-5-yl)-1 oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazol[1.2a][1.4]benzodiazepin

Forbindelse 40:1-(2-(5-((4-cyano)fenylmetyl)imidazol-1-yl)-1-oksoetyl-2,5-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2c][1,4]benzodiazepin

EKSPERIMENTELT

I de følgende eksempler og skjemaer anvendes substituent-variablene som definert deri. Substituent-variablene i skjemaene og eksemplene stemmer ikke nødvendigvis overens med dem definert i kravene.

Eksempel 1: 8- butvl- 7- f3- fimidazoj- 5- vn- 1- oksopropvn- 2- f2- metoksvfenvlV 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2alpvrazin.

Eksempel 1 ble syntetisert i henhold til skjema 1 som vist nedenfor.

Trinn 1 . a. 3-( 1 H- imidazol- 5- vhpropionsvre.

Urokansyre (urocanic syre) (forbindelse i, hvor R2 er H) (1,38 g, 10,0 mmol) ble oppløst i 5% vandig HCI (20 ml) pluss MeOH (15 ml) inneholdende 10% Pd på karbon (100 mg) og blandingen ble rystet over natten i ca. 30 psi H2. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom et 3 cm sjikt av diatoméjord og filtratet ble inndampet til et faststoff og tørket over natten under vakuum. Råmaterialet ble benyttet uten ytterligere rensing. Massespektrometri: 141,4 MH<+>.

Trinn 1 . b. 3- f 1 - f( 1. 1 - dimeWletoksv) kaiftonvnimidazol- 5- vflpropionsvre.

Råproduktet fra trinn 1 .a. (10,0 mmol) ble oppløst i H20 (10 ml) inneholdende K2C03 (2,76 g, 20 mmol) og til dette ble det tilsatt di-tert.butyl-dikarbonat (2,18 g, 10,0 mmol) i acetonitril (20 ml). Reaksjonen ble omrørt kraftig i ca. 3 timer, deretter ble H20 (10 ml) tilsatt og blandingen ble inndampet til ca. Vfe volum. Blandingen ble surgjort med sitronsyre og ekstrahert med EtOAc (2 x 25 ml). De vandige ekstrakter ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet til faststoffer som ble tørket under redusert trykk, hvilket ga 1,89 g (79%).

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 12,0-12,2 (1H, s), 8,0-8,2 (1H, s), 7,2-7,3 (1H, s), 2,65-2,8 (2H, t), 2,45-2,65 (2H, t), 1,5-1,7 (9H, s).

Trinn 1 . c. 2-( 1 - fSV( fffenvlmetoksv) karoonvhamino) pentvn- 4- f2- metoksv-fenvhimidazol.

Cbz-(L)-norleukin (forbindelse iii, hvor R<3> er n-butyl) (10,6 g, 40,0 mmol) og Cs2C03 (6,52 g, 20,0 mmol) ble slått sammen i 2:1/DMF:H20 (65 ml) og blandingen ble virvelrørt inntil homogen. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk, resten ble oppløst i DMF (75 ml) og 2-brom-2'-metoksyacetofenon (9,16 g, 40,0 mmol) i DMF (50 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ca. 15 min. ved romtemperatur, deretter inndampet under redusert trykk. Den resulterende keto-ester ble oppløst i xylener (250 ml), filtrert, NH4OAc (50,0 g, 0,36 mmol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 3 timer med fjerning av overskudd av NH4OAc og frigjorde H20 ved anvendelse av en Dean-Stark-felle. Reaksjonsblandingen ble inndampet under redusert trykk. Mettet NaHCOrløsning (100 ml) ble tilsatt og produktet ble ekstrahert med CH2CI2 (3 x 50 ml). De sammenslåtte CH2CI2-lag ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under vakuum, hvilket ga en første avling på 6,23 g (m.r. = 118-121 °C) av tittelforbindelsen. Moderiøsning-ene ble renset ved flash-kromatografi på kiselgel ved anvendelse av 2:3 / EtOAc:heksaner som elueringsmiddel. Rene produktfraksoner ble slått sammen og inndampet, hvilket ga en andre avling på 3,26 g (m.r. = 119-122°C) for et kombi-nert utbytte på 9,49 g (60%) av tittelforbindelsen. NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 11,7-11,9 (1H, s), 8,0-8,15 (1H, d), 7,5-7,7 (1H, m), 7,4-7,5 (1H, s), 7,1-7,4 (6H, m), 6,9-7,1 (2H, m), 4,95-5,2 (2H, q), 4,6-4,8 (1H, q), 3,8-4,0 (3H, s), 1,6-2,0 (2H, m), 1,1 -1,4 (4H, m), 0,8-1,0 (3H, t).

Trinn 1 . d. 1 -( 2- etoksv- 2- oksoetvl)- 2^ 1 -( SH( Yfenvlmetoksv) karbonvh-aminotoentvl- 4-( 2- metoksvfenvlVimidazol.

Produktet fra trinn 1 .c. (forbindelse iv, hvor R<3> er n-butyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<5> er H) (9,40 g, 23,9 mmol) ble oppløst i DMF (50 ml) og behandlet med K2CO3 (6,90 g, 50,0 mmol) og etylbromacetat (4,17 ml, 75,0 mmol) og blandingen ble oppvarmet ved ca. 55°C i ca. 2 timer. Blandingen ble inndampet, deretter oppløst i eter (100 ml) og vasket én gang med mettet NaHC03-løsning (50 ml) og én gang med mettet NaCI-løsning (50 ml). Eterlaget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet til en olje (11,5 g, 100%) som ble benyttet uten ytterligere rensing.

Massespektrometri: 480,3 MH+, NMR (300 MHz, DMSO-d«, 30°C) 8,04-8,12 (1H, d,d), 7,65-7,85 (1H, t bred), 7,5-7,6 (1H, s), 7,25-7,4 (5H, m), 7,1-7,25 (1H, m), 7.0- 7,1 (1H, d), 6,9-7,05 (1H, t), 4,9-5,15 (2H, q), 5,0-5,2 (2H, s), 4,5-4,7 (1H, q), 4,05-4,2 (2H, q), 3,8-4,0 (3H, s), 1,8-2,0 (2H, m), 1,2-1,4 (4H, m), 1,45-1,25 (3H, t), 0,75-0,95 (3H, t).

Trinn 1 . e. 8- butvl- 6- okso- 2- ra- metoksvfenvnimidazoH . 2- alovrazin.

Produktet fra trinn 1 .d. (forbindelse v, hvor R<3> er n-butyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<3> og R6 er H) (11,5 g, 23,9 mmol) ble oppløst i HOAc (100 ml) inneholdende 10% Pd på karbon-katalysator (500 mg) og hydrogenen under 50 psi H2 i ca. 3 timer ved romtemperatur. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom et 3 cm sjikt av diatoméjord og filtratet ble oppvarmet ved ca. 70°C i ca. 2 timer. Blandingen ble inndampet til et faststoff under redusert trykk, oppløst i CH2CI2 (100 ml) og vasket med mettet NaHCQrløsning (125 ml). CH2CI2-sjiktet ble tørket over Na2S04, filtrert og 275 ml heksaner ble tilsatt. Produktet ble filtrert fra og tørket til konstant vekt, hvilket ga 6,21 g (87%) produkt, m.r. = 200-202°C.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,5-8,6 (1H, s), 8,0-8,1 (1H, d), 7,4-7,6 (1H, s), 7.1- 7,3 (1H, t), 7,0-7,1 (1H, d), 6,9-7,1 (1H, t), 4,55-4,8 (2H, q), 4,55-4,7 (1H, t), 3,8-4,0 (3H, s), 1,75-1,95 (2H, m), 1,1-1,5 (4H, m), 0,8-0,9 (3H, t).

Trinn 1 . f. 8- butvl- 2- f2- metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1.2-alpvrazin.

Produktet fra trinn 1 .e. (6,13 g, 20,5 mmol) (forbindelse vi, hvor R<3> er n-butyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<5>bg R6 er H) ble oppløst i THF (100 ml) og behandlet med 1M BH3/THF (82,0 ml, 82,0 mmol) ved romtemperatur i ca. 2 timer og deretter tilbakeløpt i ca. 3 timer. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur og 4N HCI (50 ml) ble dråpevis tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 2 timer, deretter gjort basisk ved forsiktig, porsjonsvis tilsetning av fast K2C03. Produktet ble ekstrahert med EtOAc (3 x 50 ml). EtOAc-lagene ble slått sammen, tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk. Resten ble oppløst i MeOH (ca. 50 ml), konsentrert HCI (1,75 ml) ble tilsatt og løsningen ble igjen inndampet under redusert trykk. Produktet ble krystallisert fra MeOH / Et20, hvilket ga 6,76 g (92%) av det ønskede produkt. Massespektrometri: 286,3MH<+.>

NMR (300 MHz, DMSO-d6,30°C) 10,0-11,5 (2H, s bred), 8,05-8,15(1 H.d.d), 8,0-8,1 (1H, s), 7,35-7,5 (1H, t), 7,15-7,3 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 4,8-4,95 (1H, m), 4,4-4,65 (2H, m), 3,9-4,0 (3H, s), 3,65-3,8 (1H, m), 3,5-3,65 (1H, m), 2,45-2,65 (1H, m), 2,1-2,35 <1H, m), 1,5-1,7 (2H, m), 1,25-1,5 (2H, m), 0,85-1,0 (3H, t).

Trinn 1 . q. 8- butvl- 7-( 3- M1. 1 - dimetvletoksv^ karbonvhimidazot- 5- vh- 1 - oksooropvft- 2- f2- metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2- alPvrazin.

DCC (309 mg, 1,50 mmol) og produktet fra trinn 1 .b. (forbindelse ii, hvor R<2 >er H) (720 mg, 3,00 mmol) ble oppløst i THF (10 ml) og omrørt ca. 30 min. ved romtemperatur. Faststoffene ble filtrert fra, produktet f ra trinn 1.f. (forbindelse vii, hvor R3 ér n-butyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<5>, R6 og R<7> er H) (358 mg, 1,0 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten. Blandingen ble inndampet til en gummi og renset ved flash-kromatpgrafi på kiselgel ved anvendelse av EtOAc som elueringsmiddei. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet til et glass og tørket til en konstant vekt. Utbytte = 500 mg (99%). Massespektrometri: 508,2 (MH<+>).

Trinn 1 , h. 8- butvl- 7- f3- flmidazol- 5- vft- 1 - oksopropvh- 2- f2- metoksvfenvh-5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazoH. 2- a1pyrazin.

Produktet fra trinn 1.g. (450 mg, 0,89 mmol) ble oppløst i MeOH (5 ml) og 4N HCI ble tilsatt og reaksjonen bie omrørt ved romtemperatur i ca. Vå time. Løs-ningsmidler ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga 420 mg råprodukt. En del av råproduktet (100 mg) ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne (Varian Analytical, Walnut Creek, CA) ved anvendelse av en gradient på 10-30% CH3CN /aq. HCI (pH= 2,0) i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. % volum og lyofilisert, hvilket ga rent produkt (47 mg, 47%) som di-hydrokloridet. Massespektrometri: 508,2 MH+.

Eksempel 2:8- butvl- 2- f2- hvdroksvfenvn- 7- nmidazol- 4- vlproDvh- 5. 6. 7. 8-tetrahvdroimidazoH , 2- alpvrazin.

Produktet fra trinn 1 .h. (forbindelse viii, hvor R<1>, R<2>, R5, R6 og R<7> er H, R<3> er n-butyl, R<4> er 2-metoksyfenyl, X er -CH2- og Y er -CO-) (320 mg, 0,677 mmol) ble oppløst i et minimum av THF og en 1M løsning av BH3 i THF (10,0 ml, 10,0 mmol) ble dråpevis tilsatt under omrøring. Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca.

2 timer, deretter avkjølt. En 4N HCMøsning ble dråpevis tilsatt og blandingen ble raskt oppvarmet til tilbakeløp og deretter gjort basisk ved forsiktig, porsjonsvis tilsetning av fast K2C03. Produkt ble ekstrahert med EtOAc (3x10 ml) og deretter ekstrahert igjen med 0,5% vandig Tfa (4x10 ml). Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ de-kolonne ved anvendelse av en gradient på 0-25% CH3CN / 0,1% vandig Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. Vi volum og lyofilisert og deretter gjen-lyofilisert to ganger fra fortynnet HCL, hvilket ga rent produkt (41 mg, 13%) som di-hydrokloridet. Massespektrometri: 380,3 MH\

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,0-9,1 (1H, s), 7,9-8,05 (2H, m), 7,45-7,55 (1H, s), 7,2-7,3 (1H, t), 7,05-7,15 (1H, d), 6,9-7,0 (1H, t), 4,5-6,0 (3-4H, s bred), 4,0-4,4 (), 1,5-1,7 (2H, m), 1,25-1,5 (2H, m), 0,8-1,0 (3H, t).

Eksempel 3: 8- butvl- 7- f4- imidazolvloroovn- 2- f2- metoksvfenvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazoH . 2- atovrazin.

Produktet fra trinn 1 .h. (475 mg, 0,937 mmol) ble oppløst i MeOH (10 ml) og en løsning av NaOH (80 mg, 2,0 mmol) i H20 (1 ml) ble tilsatt ved romtemperatur og blandingen ble omrørt i ca. Vi time og deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble oppløst i THF {10 ml), tørket over Na2S04l filtrert og inndampet under redusert trykk til ca; 2 ml og 1M BH3 / THF (8,0 ml) ble tilsatt. Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 3 timer og deretter bråakjølt ved tilsetning av 5% vandig HCI med kort oppvarming ved tilbakeløp. Reaksjonen ble avkjølt til romtemperatur, gjort basisk ved forsiktig tilsetning av fast NaHC03 og ekstrahert med CH2CI2 (2x10 ml). CH2CI2-lagene ble tørket over Na2S04l filtrert og inndampet under redusert trykk. Resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cie-kolonne ved anvendelse av en gradient på 0-25% CH3CN / aq. HCI (pH = 2,0) i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 270 nm. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. Vz volum og lyofilisert, hvilket gir rent produkt (64 mg, 15%) som di-hydrokloridet. Massespektrometri: 394,3 MH<+.>

NMR (300 MHz, DMSO-d6,30°C) 9,0-9,1 (1H, s), 8,0-8,2 (2H, d), 7,9-8,1 (1H, s), 7,4-7,5 (1H, s), 7,35-7,5 (1H, t), 7,1-7,3 (1H, d), 7,0-7,2 (1H, t), 5,0-7,0 (3H, s bred), 4,1-4,5 (3H, m), 3,9-4,0 (3H, s), 3,2-3,7 (2H, d bred), 2,7-3,0 (2H, s bred), 2,6-2,9 (2H, t), 1,9-2,2 (4H, m), 1,0-1,7 (4H, m), 0,8-1,0 <3H, t).

Eksempel 4: 7- f2- fimidazol- 4- vh- 1 - oksoetvn- 2- f2- metoksvfenvn- 8- f 1 - metvl-propvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2atovrazin.

Eksempel 4 ble syntetisert i henhold til skjemaer 1 og 4, idet trinn 1 .a. og 1 .b. er erstattet med trinn 4.a. til 4.c.

Trinn 4. a. Metvl- 4- imidazolacetat.

En løsning av 4-imidazoleddiksyre-natriumsalthydrat (forbindelse ix, hvor R<2 >er H) (3,0 g, 18,1 mmol) i MeOH (50 ml) ble avkjølt til ca. 0°C og vannfri HCI-gass ble boblet inn i blandingen i ca. 15 min. mens reaksjonstemperaturen ble opprett-holdt under ca. 5°C. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ca. 14 time ved romtemperatur og deretter ble løsningsmidler fjernet under redusert trykk, hvilket ga en olje som størkner ved henstand. Massespektrometri: 141,0 MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,0-9,2 (1H, s), 7,4-7,6 (1H, s), 3,85-3,95 (2H, 3), 3,6-3,7 (3H, s)).

Trinn 4. b. Metvl- 1 - trifenvlmetvl- 4- imidazolacetat.

En løsning av produktet fra trinn 4.a. (3,2 g, 17,5 mmol) i DMF (50 ml) ble behandlet med klortrifenylmetan (4,88 g, 17,5 mmol) og EfeN (5,4 ml, 38,5 mmol) og reaksjonen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 6 timer. DMF ble avdampet under redusert trykk og resten ble fordelt mellom EtOAc og mettet NaCI-løsning. EtOAc-laget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk, hvilket ga produktet som en viskøs olje (6,96 g, 104%) som krystalliserte seg ved henstand. Massespektrometri: 383,3 MH<+>.

Trinn 4. c. 1- trifenvlmetvM- imidazoleddiksvre. natriumsalt.

Produktet fra trinn 4.b. (2,0 g, 5,24 mmol) ble oppløst i MeOH (20 ml) og 2,5N NaOH (2,1 ml) ble tilsatt ved romtemperatur og blandingen ble omrørt over natten. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk, hvilket ga råprodukt (2,08 g, 102%) som ble benyttet i påfølgende trinn uten ytterligere rensing.

Trinn 4. d. til 4. i. ble utført på et måte analog med den i trinn 1 .c. til 1..h. i eksempel 1, idet det ble startet med Cbz-(L)-He-OH i stedet for Cbz-(L)-Nle-OH, som ga (2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydro-(7-(2-(1-trifenylmetyl-imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)imidazo[1.2a]pyrazine) (forbindelse viii, hvor R<1>, R<2>, R5, R6 og R<7> er H, R<3> er isobutyl og R<4> er 2-metoksyfenyl).

Trinn 4. i. 7-( 2-( 1 H- imidazol- 4- vn- 1 - oksoetvn- 2-( 2- metoksvfenvn- 8- M - metvlpropvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazbn. 2alovrazin.

Produktet fra trinn 4.i. (150 mg, 0,24 mmol) ble behandlet med Tfa (1,0 ml) inneholdende iPr3SiH (51 ul, 0,25 mmol) ved romtemperatur i ca. 2 timer. Eter (10 ml) ble tilsatt og produktet ble ekstrahert med 3 x 10 ml av 0,1% vandig Tfa-løsning. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne under anvendelse av en gradient fra 20% til 70% CH3CN / 0,1 % Tfa i lø-pet av 45 min. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet og re-lyofilisert fra fortynnet HCI, hvilket ga produkt (53 mg, 57%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 394,3 MH<+>.

Eksempel 5: 2-( 2- Metoksvfenvn- 8-(' 1 - metvtoropvh- 7-( 1 -okso-2-( 1 -

ffenvlmetvhimidazol- 5- vhetvl. 5. 6. 7. 8 tetrahvdroimidazoH . 2alpvrazin.

Eksempel 5 ble syntetisert i henhold til skjemaene 1 og 5, idet trinnene 1.a. og 1.b. ble erstattet med trinnene 5.a. til 5.c.

Trinn 5. a. Metvl- 1- fenvlmetvl- 3- trifenvlmetvl- 5- imidazolacetat.

Metyl-1-tirfenylmetyl-4-imidazolacetat fra trinn 4.b. (1,12 g, 2,93 mmol) ble oppløst i CH3CN (15 ml) og benzylbromid (349 ul, 2,93 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur. Blandingen ble tilbakeløpt i ca. 3 timer og fikk stå ved romtemperatur over natten. Løsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk og resten ble benyttet uten ytterligere rensing i trinn 5.b.

Trinn 5. b. Metvl- 1- fenvlmetvl- 5- imidazolacetat.

Produktet fra trinn 5.a. ble oppløst i MeOH (20 ml) og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 1 time. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk. Resten ble gnidd med heksaner (2 x 20 ml) og med EtOAc (2 x 20 ml). Resten ble benyttet uten ytterligere rensing i trinn 5.c.

Trinn 5. c. 1- fenvlmetvl- 5- imidazol- eddiksvre.

Produktet fra trinn 5.b. ble oppløst i 5% vandig HCI og oppvarmet ved tilba-keløp i ca. 3 timer og deretter inndampet under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cie-kolonne ved anvendelse av en gradient fra 5% til 35% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet og re-lyofilisert fra fortynnet HCI, hvilket ga produktet (360 mg, 49%) som hydrokloridet. Massespektrometri: 217,1 MH\

NMR (300 MHz, DMSO-d6,30°C) 8,4-8,6 (1H, s), 7,3-7,5 (3H, m), 7,1-7,3 (3H, m), 5,2-5,4 (2H, s), 3,5-3,7 (2H, s).

Trinn 5. d. til 5. a. ble utført på en måte analog med trinnene 1.c. til 1 .f. i eksempel 1, idet det ble startet med Cbz-(L)-lle-OH i stedet for Cbz-(L)-Nle-OH, hvilket ga 2-(2-metoksyfenyl)-8-(1-metyletyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin (forbindelse vii, hvor R<3> er isobutyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<5>, R6 og R<7> er H).

Trinn 5. h. 2-( 2- metoksvfenvn- 8-( 1 - metvlpropvn- 7-( 1 - okso- 2- f 1 - ffenvl-metvhimidazol- 5- vhetvl^ 5. 67. 846trahvdroimida^ ori. 2alpvra2in.

DCC (206 mg, 1,00 mmol), HOSu (115 mg, 1,00 mmol), NMM (220 uJ, 2,0 mmol) produktet fra trinn 5.g. (179 mg, 0,50 mmol) og produktet fra trinn 5.c. (330 mg, 1,00 mmol) ble oppløst i DMF (10 ml) og omrørt ved romtemperatur over natten og deretter oppvarmet ved ca. 50°C i ca. 8 timer. Blandingen ble inndampet til en gummi og renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne ved anvendelse av en gradient fra 25% til 40% CH3CN / 0,1 % vandig Tfa i løpet av 30 min. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet og re-lyofilisert fra fortynnet HCI, hvilket ga produkt (96 mg, 40%) som hydrokloridet. Massespektrometri: 484,3 MHV

Eksempel 6: 2- f2- metoksvfenvft- 8- f1 - metvlpropvft- 7- f2- f 1 - fenvlmetvh-imidazol- 5- vhetvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2alPvrazin.

Eksempel 6 ble fremstilt fra produktet i trinn 5.h. på en måte analog med eksempel 3. Massespektrometri: 470,4 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,15-9,4 (1H, s), 8,05-8,2 (1H, d,d), 7,9-8,1 (1H, d), 7,5-7,6 (1H, s), 7,25-7,5 (6H, m), 7,15-7,25 (1H, d,d), 7,05-7,15 (1H, m), 5,5-5,6 (2H, s), 4,6-5,4 (3H, s bred), 4,0-4,3 (2H, m), 3,8-4,0 (4H, m), 3,1-3,5 (2H, m),

2,6-9,95 (4H, m), 1,95-2,15 (1H, m), 1,3-1,5 (1H, m), 1,1 -1,3 (1H, m), 0,85-1,0 (3H,d), 0,7-0,85 (3H,t).

Eksempel 7: 7- tø- M -( 4- cvanofenvlmetvhimidazol- 5- vh- 1 - oksoetvlV2-( 2-metoksvfenvn- 8-( 1 - metvlpropvft- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof 1. 2a1ovrazin.

(2-(2-metoksyfenyl)-8-(1-metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydro-(7-(2-(1-trifenylmetyl-imidazol-4-yl)-1-oksoetyl)imidazo[1.2a]pyrazin) (forbindelse viii, hvor R<1>, R<2>, R<5>, R<6> og R<7> er H, R<3> er isobutyl og R4 er 2-metoksyfenyl) fra eksempel 4, trinn 4.i.

(135 mg, 0,21 mmol) ble oppløst i CH3CN (3,0 ml) og et a-brom-p-tolunitril (42 mg, 0,21 mmol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 3 timer. Løsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk og MeOH (3,0 ml) ble tilsatt. Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 1 time og løsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient 5% til 35% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet og re-

lyofilisert fra fortynnet HCI, hvilket ga produkt (9,8 mg, 8%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 509,3 Mh<T.>

Eksempel 8: 7-( Y1 H- imidazol- 4- vnmetvn- 2-( 2- metoksvfenvl)- 8-( 1- metvlpropvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2alpyrazin.

Eksempel 8 ble syntetisert i henhold til skjemaer 1 og 8, idet trinnene 1 .a. og 1.b. ble erstattet med trinnene 8.a. til 8.b. og trinnene 1.g. og 1.h. bie erstattet med trinnene 8.c. og 8.d.

Trinn 8. a. 4- hvdroksvmetvl- 1- trifenvlmetvl- imidazol.

4-hydroksymetylimidazol-hydroklorid (forbindelse xiii, hvor R2 er H) (2,50 g, 18,6 mmol) og EfeN (2,59 ml, 18,6 mmol) ble slått sammen i DMF (30ml) og om-rørt ved romtemperatur. En løsning av klortrifenylmetan (5,19 g, 18,6 mmol) i DMF (25 ml) ble dråpevis tilsatt ved romtemperatur og resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i ca. 23 timer og deretter hellet i isvann (300 ml). Produktet ble filtrert fra, vasket med kaldt vann (75 ml) og gnidd med p-dioksan (30 ml). Produktet ble filtrert fra og tørket under redusert trykk, hvilket ga produkt (4,96 g, 78%).

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 7,3-7,5 (9H, m), 7,25-7,35 (1H, d), 7,0-7,2 (6H, m), 6,7-6,75 (1H, s), 4,15-4,2 (2H, m).

Trinn 8. b. 14rilenvlmetvl- imidazol- 4- karboksaldehvd.

Produktet fra trinn 8.a. (2,04 g, 6,00 mmol) ble oppslemmet i DMSO (10,0 ml) og EfeN (3,34 ml, 24,0 mmol) og S03-pyridinkompleks (2,39 g, 15,0 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur. Blandingen ble oppvarmet ved ca. 110°C i ca. 1 time og fikk deretter avkjøles. Blandingen ble hellet i 150 ml H20 og produktet ble filtrert fra. Resten ble behandlet med mettet NaHCOs-løsning (50 ml) og ekstrahert 2 x 100 ml CH2CI2. De sammenslåtte Cf-feCIrlag ble vasket med 5% sitronsyre-løsning (100 ml), tørket over Na2S04l filtrert og inndampet under redusert trykk. Resten ble krystallisert fra MeOH og H20. Utbytte = 1,08 g (53%).

Trinn B. c. 7 -( f 1 - trifenvlmetvl- imidazol- 4- vtfmetvh- 2- f2- metoksvfenvh- 8-

( 1 - metvtDropvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof 1. 2alpvrazin.

8-(1-metylpropyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]-pyrazin-dihydroklorid (forbindelse vii, hvor R<3> er 1 -metylpropyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og Rs<->R<7> er H) (fra trinn 4.g.) (179 mg, 0,50 mmol) og produktet fra trinn 8.b.

(forbindelse xiv, hvor R2 er H) (338 mg, 1,00 mmol) ble slått sammen i 1,2-diklor-etan (2,0 ml). NaBH(OAc)a (212 mg, 1,00 mmol) ble tilsatt og reaksjonen fikk om-røres ved romtemperatur i ca. 1 time. Reaksjonsblandingen ble hellet på en kisel-gelkolonne og produktet ble eluert ved anvendelse av EtOAc som elueringsmiddel. Produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet, hvilket ga rent produkt som et hvitt skum (150 mg, 49%). Massespektrometri: 608,2, MH<+>.

Trinn 8. d. 7-( i 1 H- imidazol- 4- vhmetvh- 2- f2- metoksvfenvtf- 8- f 1 - metvl-propvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazon . 2a1pvrazin.

Produktet fra trinn 8.c. (forbindelse viii, hvor R<1> er trifenylmetyl, R<3> er isobutyl, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<2>, R<5->R<7> er H, og X og Y utgjør en binding) (160 mg, 0,26 mmol) ble behandlet med Tfa (10 ml) inneholdende iPr3SiH (0,20 ml, 1,0 mmol) i ca. 45 min. ved romtemperatur under N2. Løsningsmidlene ble fjernet under redusert trykk og produktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 20-40% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. tø volum og lyofilisert. Produktet ble re-lyofilisert to ganger fra fortynnet HCI, hvilket ga rent produkt (77 mg, 66%). Massespektrometri: 366,2 MH\

Eksempel 9: 7- f( 4- imidazolvhkarbonvh- 2-( 2- metoksvfenvh- 8- f 1 -metvl-pfOPvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2aTpvrazin.

Eksempel 9 ble fremstilt i henhold til skjemaene 1 og 4 på en måte analog med eksempel 4, idet det ble startet med imidazol-4-karboksylsyre i stedet for imidazol-4-eddiksyre i trinn 4.a. Massespektrometri: 380,3 MH<+>.

Eksempel 10: 7- n- f4- cvanofenvlmetvlMmidazol- 5- vftmetvl- 2- f2- metoksvfenvh- 8- f 1 - metvlpropvlV5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazoM , 2a1pvrazin.

Produktet fra trinn 8.c. (forbindelse viii, hvor R<1> ertrifenylmetyl, R<3> er isobutyl, R4 er 2-metoksyfenyl, R<2>, R5, R6 og R<7> er H, og X og Y utgjør en binding) (150 mg, 0,25 mmol) ble oppløst i CH3CN (2,0 ml), a-brom-p-tolunitril (49 mg, 0,25 mmol) ble tilsatt og blandingen ble tilbakeløpt i ca. 1 time. MeOH (3,0 ml) ble tilsatt og blandingen ble tilbakeløpt igjen i ca. 1 time. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk, Et20 (10 ml) ble tilsatt og produktet ble ekstrahert med 1,0% Tfa (2x15 ml). Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ C«-kolonne, ved anvendelse av en gradien på 20-50% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 40 min. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. tø volum og lyofilisert. Produktet ble re-lyofilisert to ganger fra fortynnet HCI, hvilket ga rent produkt (52 mg, 35%). Massespektrometri: 481,4 MH<+>.

Eksempel 11: 5- f2-( 1 • f4- cvanofenvlmetvhimidazol- 5- vn- 1 - oksoetvfl-5. 6- dihvdro- 2- fenvl- 1 H- imidazoH . 2- alf 1. 41benzodiazepin.

Eksempel 11 ble syntetisert i henhold til skjemaene 5 og 11.

Trinn 11 . a. fN- ffenvlmeotksv^ karoonvlVN- ffenvlrnetvharvcin.

En løsning av Cbz-OSu (6,18 g, 24,8 mmol) i CH3CN (55 ml) ble tilsatt til en løsning av N-benzylglycin-hydroklorid (forbindelse xv, hvor R3 er H), (5,00 g, 24,8 mmol) og K2C03 (6,84 g, 49,6 mmol) i H20 (35 ml) og blandingen ble kraftig om-rørt i ca. 2 timer. Blandingen ble inndampet til ca. 35 ml og vasket med Et20 (2 x 25 ml). Det vandige laget ble surgjort til ca. pH = 1 ved forsiktig tilsetning av konsentrert HCI og produktet ble ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml). EtOAc-lagene ble slått sammen og tørket over Na2S04p filtrert og inndampet under redusert trykk, til en klar, farveløs olje (7,40 g, 99,7%).

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 12,5-12,8 (1H, s bred), 7,1-7,5 (10H, m), 5,0-5,2

<2H, s), 4,4-4,6 (2H, d), 3,8-4,0 (2H, s).

Trinn 11 , b. 2- ffN- ffenvlmetoksv) karbonvh- N- ffenvlmetvhamino^ metvh- 4-fenvlimidazol.

Produktet fra trinn 11 .a. (7,18 g, 24,0 mmol) ble oppløst i DMF (50 ml) og Cs2C03 (3,91 g, 12,0 mmol) i H20 (20 ml) bie tilsatt og blandingen ble virvelrøtt inntil homogen. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk, resten ble oppløst i DMF (25 ml) og 2-brom-2'-metoksy-acetofenon (4,78 g, 24,0 mmol) i DMF (25 ml) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ca. 30 min. ved romtemperatur, deretter inndampet under redusert trykk. Den resulterende keto-ester ble oppløst i xylener (125 ml) og filtrert. NH4OAc (28,0 g, 0,36 mol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 2 timer med fjerning av overskudd av NH4OAc og friga H20 ved anvendelse av en Dean-Stårk-felle. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og vasket med mettet NaHCOs-løsning (100 ml), tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under vakuum til 9,70 g (102%), som ble benyttet uten ytterligere rensing. Massespektrometri: 398,2 MH<+>.

Trinn 11 . c. 2-( N- n<envlmetvftamino} metvlM- fenvlimidazol.

Produktet fra trinn 11 .b. (forbindelse xvi, hvor R<3> og Rs er H og R<4> er 2-metoksyfenyl), (9,7 g, 24,0 mmol) ble behandlet med 30% HBr/HOAc (85 ml) ved romtemperatur i ca. 2 timer. Et20 (100 ml) ble tilsatt til den resulterende oppslemming og produktet ble filtrert fra, vasket med Et20 og tørket under redusert trykk, hvilket ga produkt (7,70 g, 75%) som et elfenbenshvitt faststoff. Massespektrometri: 264,3 MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30?C) 8,5-11,0 (3H, s bred), 8,1-8,2 (1H, s), 7,8-7,9 (2H, m), 7,55-7,65 (2H, m), 7,45-7,55 (2H, m), 7,35-7,5 (4H, m), 4,5-4,7 (2H, s), 4,3-4,5 (2H,s).

Trinn 11 . d. 6- okso- 2- fenvl- 5- ffenvlmetvh- 1 H- imidazon . 2a1H . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 11 .c. (4,25 g, 10,0 mmol) ble oppslemmet i THF (35 ml) og EfeN (4,9 ml, 35,0 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur. 2-fluorbeirzoylklorid (1,19 ml, 10,0 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt ca. 1 time ved romtemperatur. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk og resten ble tatt opp i CH2CI2 (50 mi) og vaskt med mettet NaCI-løsning (2 x 25 ml). CH2CI2-laget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert tykk. Resten ble oppløst i DMF (35 ml), K2CO3 (1,38 g, 10,0 mmol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i cå. 1 time. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk, mel-lomproduktet ble oppløst i EtOAc (50 ml) og vasket 2x med mettet NaHC03 og 1x med mettet NaCI-løsning. EtOAc-laget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet til ca. 25 ml. Et20 (ca. 25 ml) ble tilsatt og produktet ble filtrert fra (1,46 g). Moderiøsningene ble renset ved flash-kromatografi på kiselgel ved anvendelse av 1:1/ heksaner:EtOAc som elueringsrhiddel, hvilket ga en andre avling av blek-oransje skum (0,63 g) som ble benyttet i påfølgende reaksjoner. Totalt utbytte = 57%, Massespektrometri: 366,2 MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6,30°C) 8,25-8,35 (1H, s), 7,95-8,05 (1H, d,d), 7,6-7,9 (4H, m), 7,5-7,7 (1H, t), 7,3-7,5 (2H, t), 7,2-7,4 (6H, m), 4,6-5,0 (2H, s bred), 4,4-4,6 (2H, s).

Trinn 11 . e. 2- fenvl- 5- ffenvlmetvn- 1 H- imidazoH . 2a1f1. 4Tbenzodiazepin. Produktet fra trinn 11 .d. (forbindelse xvii, hvor R3 og R<5> er H og R<4> er 2-metoksyfenyl) (0,63 g, 1,73 mmol) ble oppløst i THF og 1M boran/THF-kompleks (16,0 ml, 16,0 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur. Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 1 time og deretter avkjølt. 4N HCI (12 ml) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. tø time. Blandingen ble avkjølt til romtemperatur, inndampet til ca. 12 ml under redusert trykk, og deretter nøytralisert ved forsiktig tilseting av NaHC03 i fast form. Produktet ble ekstrahert 2x med EtOAc, tørket over Na2S04, filtrert, deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble oppløst

i metanol (10 ml) og behandlet med konsentrert HCI (0,5 ml) for å omdanne produkt til hydrokloridsaltet. Løsningen ble inndampet og produktet ble oppnådd ved krystallisering fra MeOH/Et20. Ubytte = 444 mg (60%). Massespektrometri: 352,2

MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,5-8,6 (1H, s), 7,9-8,0 (2H, d), 7,65-7,9 (5H,

m), 7,4-7,6 (6H, m), 7,3-7,4 (1H, t), 4,5-6,5 (H20) 4,4-4,6 (2H,s) 4,2-4,3 (2H, s), 4,1-4,25 (2H,s).

Trinn 11 . f. 2- fenvl- 1 H- imidazol f 1, 2a1f41. 41 benzodiazeoin.

Produktet fra trinn 11e (forbindelse xviii, hvor R<3>, R5, R6 og R<7> er H og R4 er 2-metoksyfenyl) (382 mg, 0,90 mmol) ble fordelt mellom mettet NaHCOs-løsning og CH2CI2. CH2Cl2-laget ble tørket over Na2S04, filtrert og 1-kloretylklorformat

(108 ul, 1,00 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur. Blandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur. CH2CI2-|aget ble vasket med mettet NaHC03-løsntng, tørket over Na2S04l filtrert og inndampet under redusert trykk. Resten ble oppløst i MeOH (5,0 ml) og omrørt ved romtemperatur i ca. 1 time. Den metanolholdige løsning ble behandlet med konsentrert HCI (0,5 ml) for å omdanne produkt til hydrokloridsaltet. Løsningen ble inndampet og produktet oppnådd ved krystallise-

ring fra MeOH/Et20. Utbytte = 186 mg (62%), Massespektrometri: 262,2 MH<*. >NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 10,7-11,1 (1-2H, s bred), 8,5-8,6 (1H, s), 8,1-8,6 (1-2H, s bred), 7,9-8,05 (2H, d,d), 7,7-7,85 (3H, m), 7,55-7,65 (1H, m), 7,45-7,55 (2H, t), 7,3-7,45 (1H, m), 4,2-4,4 (2H, s), 4,1-4,3 (2H, s).

Trinn 11 . a. Metvl- 4- imidazolacetat.

4-imidazoleddiksyre-natriumsaltdihydrat (15,3 g, 83,1 mmol) ble oppslemmet i toluen (100 ml) og inndampet for å fjerne vann etter hydrering. Resten ble oppløst i MeOH (235 ml) og løsningen ble avkjølt i et is/vannbad under N2. Qass-formig HCI ble tilsatt i 20 min. og den resulterende løsning ble omrørt i 2 timer ved romtemperatur. Blandingen ble inndampet til tørrhet. Resten ble gjen-oppløst i MeOH (235 ml), filtrert, og løsningen ble avkjølt i et isvannbad under N2. Gassformig HCI ble tilsatt i 20 min., og den resulterende løsning ble omrørt i 2 timer

ved romtemperatur. Toluen (150 ml) ble tilsatt og blandingen ble inndampet til tørrhet og tørket, hvilket ga produkt (16,6 g, 113%) som ble benyttet i neste trinn uten ytterligere rensing. Massespektrometri: 141,2 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,8-8,9 (1H, s), 7,5-7,7 (1 H,s)3,7-3,9 (2H, s), 3,6-3,7 (3H, s).

Trinn 11 . h. Metvl. 1 - tirfenvlmetvl- 4- imidazolacetat.

Produktet fra trinn 11g (83,1 mmol) ble oppløst i DMF (70 ml) under N2 og EfeN (35,6 ml, 241 mmol) ble tilsatt i en eksoterm reaksjon. Etter avkjøling til romtemperatur ble klortrifenylmetan (23,2 g, 83,1 mmol) tilsatt og blandingen ble om-

rørt over natten ved romtemperatur. Blandingen ble hellet i H20 (300 ml) og ekstrahert én gang med 300 ml EtOAc og én gang med 150 ml EtOAc. De sammenslåtte EtOAc-lag ble vasket med mettet NaHC03-løsning (300 ml), tørket over Na2S04, filtrert og inndampet til en olje som krystalliserte seg, hvilket gå et brunfarvet faststoff (30,9 g, 97%). Massespektrometri: 382,9 MH<*>.

Trinn 11 . i. Metvl- 1 - fcvanofenvlmetvft- 5- imidazolacetat.

Produktet fra trinn 11 .h. (15,0 g, 39,2 mmol) ble oppløst i EtOAc (80 ml)

med oppvarming, ot-brom-p-toluonitril (7,69 g, 39,2 mmol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved 65-70°C i 2,5 time. En første avling ble filtrert fra, vasket med EtOAc og tørket til 9,27 g. Filtratet ble inndampet til ca. 80 ml og oppvarmet ved 65-70°C i ytterligere 14 timer. En andre avling ble filtrert fra, vasket med EtOAc og tørket til 9,40 g. Filtratet ble inndampet til ca. 30 ml og oppvarmet ved 65-70°C

i ytterligere 48 timer. En tredje avling ble filtrert fra, vasket med EtOAc og tørket til 0,87 g. De sammenslåtte mellomprodukter ble oppslemmet i MeOH (350 ml) og oppvarmet ved tilbakeløp i tø time. Løsningsmidlet ble destillert under redusert trykk og det resulterende faststoff ble gnidd med EtOAc (250 ml). Det resulteren-

de faststoff ble oppslemmet i CH2CI2 (500 ml), mettet NaHC03 (500 ml) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i 3 timer. Det vandige laget ble fjernet og CH2CI2-laget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk, hvilket ga en olje som krystalliserte seg ved henstand (8,08 g, 81%). Massespektrometri: 256,2

MH<*>.

Trinn 11 . i. 1 - fcvanofenvlmetvl)- 5- imiclazolsvre- hvdroklorid.

Produktet fra trinn 11 .i. (8,0 g, 31,3 mmol) ble oppløst i THF (200 ml) og 2N NaOH (16,7 ml, 33,4 mmol) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt 48 timer ved romtemperatur. Løsningen ble nøytralisert til pH = 2,0 ved tilsetning av 2N HCI og løsningen ble inndampet under redusert trykk til et brunfarvet faststoff. Resten ble omrørt med MeOH (200 ml), faststoffer ble fjernet ved filtrering og filtratet ble inndampet under redusert trykk og tørket, hvilket ga produkt (5,85 g, 67%): Massespektrometri: 242,1 MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,3-9,4 (1H, s), 7,8-7,95 (2H, d), 7,55-7,7 (1H, s), 7,4-7,6 (2H, d), 5,5-5,7 (2H, s), 3,8-4,0 (2H, s).

Trinn 11 . k. 5-( 2-( 1 -( 4- cvanofenvlmetvhimidazol- 5- vD- 1 - oksoetvlf- 2- fenvl-

1 H- imidazoM . 2- alM . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 11 .j. (77 mg, 0,24 mmol) ble slått sammen med DCC (49 mg, 0,24 mmol), HOAt (33 mg, 0,24 mmol), NMM (110 ul), 1,0 mmol) og produktet fra trinn 11 .f. (75,0 mg, 0,225 mmol) i DMF (3,0 ml) og reaksjonsblandingen fikk omrøres ca. 3 dager ved romtemperatur. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk og råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne ved anvendelse av en gradient på 15-40% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble inndampet til ca. % volum og lyofilisert. Produktet ble re-lyofilisert to ganger fra fortynnet HCI, hvilket ga rent produkt (71 mg, 61%). Massespektrometri: 485,3 MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,3-9,4 (1H, d), 8,6-8,8 (1H, d), 8,0-8,15 (2H, d), 7,3-8,0 (12H, m), 5,5-5,7 (2H, s), 4,9-5,1 (1H, s), 4,75-4,9 (1H, s), 4,65-4,8 (1H, s), 4,45-4,6 (1H, s), 4,25-4,4 (1H, s), 4,15-4,3 (1H, s).

Eksempel 12: 7-( 2-( 4- cvanofenvlmeWnimidazol- 5- vn- 1 - oksoetvl)- 2- f2-metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2- alpvrazin.

Trinnene 12.a. til 12.d. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinnene 1.c. til 1 .f., idet det ble startet med Cbz-Gly-OH i stedet for Cbz-(L)-lle-OH i trinn

12.a. Trinn 12.f. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinn 1 .g., idet produktet fra trinn 11 .j. erstatter produktet fra trinn 1 .b. Massespektrometri: 453,3

MH<+>.

NMR (300 MHz, DMSO, 90°C) 9,1-9,2 (1H, d), 7,95-8,05 (1H, d,d), 7,9-8,0 (1H, s), 7,8-7,9 (2H, d), 7,55-7,6 (1H, s), 7,5-7,6 (2H, d), 7,35-7,5 (1H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 5,4-5,7 (2H, s), 4,9-5,1 (2H, s bred), 4,15-4,4 (2H, s bred), 4,05-4,2 (2H, s), 3,9-4,1 (2H, s bred), 3,9-4,0 (3H, s).

Eksempel 14: 5- butvl- 7- f2- r:4- cvanofenvlmetvl- irriidazol- 5- vh- 1 • oksoetvh- 2- fenvi- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2- alPvrazin.

Trinnene 14.a. til 14.d. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinnene 1 -c. til 1.f. Cbz-(Gly)-OH erstattet Cbz-(L)-Nle-OH i trinn 14.a. og etyl-2-brom-heksanoat erstattet etylbromacetat i trinn 14.b. Trinn 14.e. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinn 1 .g. idet produktet fra trinn 1erstattet produktet fra trinn T.b. Massespektrometri: 479,3 MH<*>.

Eksempel 15: 6- butvl- 7- f2- f4- cvanofenvlmetvlimidazol- 5- vlV1 - okso-etvlV2- f2- metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazon . 2- alPvrazin.

Eksempel 15 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 14, med unn-tak av at trinnene 1 .d., 1 .e. og 1,f. ble erstattet med trinnene 15.a. og 15.b.

Trinn 15. a. 1 -( 2- oksoheksvh- 2-( 1 -(( ffenvlmetoksvlkarijonvlteminolmetvh-4-( 2- metoksvfenv»imidazol.

1-H-2-(1-(((fenylmetoksy)kaifconyl)amino)metyl)^

(forbindelse iv, hvor R<3> og Rs er H og R<4> er 2-metoksyfenyl) (790 mg, 2,34 mmol), 1-klor-2-heksanon (473 mg, 3,51 mmol) og K2C03 (469 mg, 4,68 mmol) ble slått sammen i DMF (4 ml) og omrørt ved romtemperatur i ca. 42 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med mettet NaHCCb (25 ml) og ekstrahert med Et20 (2 x 50 ml). De sammenslåtte Et20-ekstraktene ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved flash-kromatografi på kiselgel ved anvendelse av 3% MeOH / CH2CI2 som elueringsmiddel. Rene produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet under redusert trykk, hvilket ga en blekgul olje (650 mg, 64%) som størknet ved henstand. Massespektrometri: 436,3 MH<+>.

Trinn 15. b. 6- butvl- 2- f2- metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazon . 2- alpvrazin.

Produktet fra trinn 15.a. (forbindelse xxiv, hvor R<3>, R<5> og R<6> er H, R<5> er 2-metoksyfenyl og R<7> er n-butyl) (650 mg, 1,49 mmol) ble oppløst i HOAc (25 ml) inneholdende 10% Pd på karbon (65 mg) og blandingen ble hydrogenert ved 30

psi H2 i ca. 6 timer. Katalysatoren ble fjernet ved filtrering gjennom diatoméjord

og filtratet ble inndampet under redusert trykk, hvilket ga en blekgrul olje som krystalliserte seg ved henstand (430 mg, 101 %).

Trinn 15. c. 6- butvl- 7- f2- f4- cvanofenvlmetvltimidazol- 5- vh- 1 - oksoetvh- 2-fenvl- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2- alpyrazin.

Eksempel 15 ble oppnådd i trinn 15.c. på en måte analog med trinn 1 .g.,

idet produktet fra trinn 15.b. erstatter produktet fra trinn 1 .f. Massespektrometri: 509,3 MH<*>.

Eksempel 16: 6- butvl- 7-( 2-( 4- cvanofenvlmetvl- imidazol- 5- vn- 1 - okso-etvl>- 2- fenvl- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2alpyrazin.

Eksempel 16 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 15, idet det startes med 2-bromacetofenon istedenfor 2-brom-2'-metoksyacetofenon i trinn 1.c. Massespektrometri: 509,4 MH<*>.

Eksempel 17: 5- butvl- 7- f2- f 1 - f4- cvanofenvlmetvnimidazol- 5- vlV1 - oksoetvn- 2- f2- metoksvfenvh- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2alPvrazin.

Eksempel 17 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 14, idet det startes med 2-bromacetofenon istedenfor 2-brom-2'-metoksyacetofenon i trinn 1.c. Massespektrometri: 509,3 MH<*>.

Eksempel 18: 7- f2- f 1 -( 4- cvanofenvlmetvnimidazol- 5- vn- 1 - oksoetvn- 8-cvkloheksvlmetvh- 2- f2- metoksvfenvl^ 5. 6. 7. 8- t6trahvdroimidazori. 2alpvrazin.

Trinnene 18.a. til 18.d. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinnene 1.c. til 1.f. Cbz-(L)-cykloheksylalanin erstattet Cbz-(L)-Nle-OH i trinn 18.a. Trinn 18.e. ble utført på en måte analog med skjema 1, trinn 1.g. idet produktet fra trinn

11 .j. erstatter produktet fra trinn 1 .b. Massespektrometri: 549,4 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-de, 30°C) 9,15-9,25 (1H, s), 8,05-8,15 (1H, d), 8,0-8,1 (1H, s), 7,8-7,9 (2H, d), 7,6-7,7 (1H, s), 7,5-7,6 (2H, d), 7,4-7,5 (1H, t), 7,15-7,3 (1H, d), 7,05-7,15 (1H, t), 5,85-6,05 (1H, d,d), 5,5-5,6 (2H, s), 4,1-4,5 <5H, m), 3,9-4,1 (3H, s), 3,75-3,9 (1H, m), 1,85-2,1 (3H, m), 1,4-1,8 (4H, m), 0,8-1,4 (7H, m).

Eksempel 19: H- imidazol- 5- vh- 1 -oksoetvlV2-(2-metoksvfenvft- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazon. 2a1Pvrazin.

Eksempel 19 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 4, ved anvendelse av 5-butyl-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin (forbindelse vii, hvor R<3>, R5 og R<7> er H, R<4> er 2-metoksyfenyl og R<6> er n-butyl), som beskrevet for eksempel 14, istedenfor 2-(2-metoksyfenyl)-8-(1-metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin i trinn 19.e. Massespektrometri: 394,3

MH<*>.

Eksempel 20. 7-( 2-( 4- cvanofenvlmetvnimidazol- 5- vn- 1 - oksoetvh- 2- f2-ffenvlmetoksv) fenvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1. 2- alpvrazin.

Utgangsmaterialet for trinn 20.a. ble fremstilt på en måte analog med skjema 1, trinnene 1.c. til 1f, idet Cbz-(Gly)-OH erstatter Cbz-(L)-Nle-OH. Trinn 20.d. ble utført på en måte som ligner skjema 1, trinn 1 .g., idet produktet fra trinn 11 j erstatter produktet fra trinn 1 .b.

Trinn 20. a. 7- f( 1. 1 - dimetvletoksv) karbonvn- 2-( 2- hvdroksvfénvn- 5. 6. 7. 8-tetrahvdroimidazoH . 2alpvrazin.

2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin (forbindelse vii, hvor R<3>, R5, R6 og R<7> er H og R4 er 2-metoksyfenyl) (5,30 g, 23,1 mmol) ble opp-løst i CH2CI2 (100 ml) og tilstt dråpevis i løpet av ca. 15 min. til en blanding av 1M BBr3 / heksaner (80,3 ml, 80,3 mmol) i CH2CI2 (500 ml) ved ca. 0°c. Blandingen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble omrørt over natten. Det de-metylerte

mellomprodukt ble ekstrahert med H20 (3 x 240 ml) og de sammenslåtte vandige lag ble vasket med Et20 (100 ml). Løsningen ble justert til en pH på ca. 8 ved tilsetning av 2,5N NaOH, og di-tert.butyldikarbonat (5,55 g, 25,4 mmol) ble tilsatt i THF (200 ml). Løsningen ble kraftig omrørt i ca. 2 timer, idet løsningen ble holdt på pH = 8,0-8,5. Blandingen ble inndampet til ca. 700 ml og ekstrahert med CH2CI2 (2 x 100 ml). De sammenslåtte CH2CI2-lag ble tørket over Na2S04, filtrert

og inndampet under redusert trykk, hvilket ga produkt (7,10 g, 97%) som et brun-farget faststoff. Massespektrometri: 316,2 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 7,65-7,7 (1H, s), 7,6-7,7 (1H, d,d), 7,0-7,15 (1H, m), 6,75-6,9 (2H, m), 4,6-4,7 (2H, s), 4,0-4,2 <2H, t), 3,75-3,9 (2H, t), 3,3-3,4 H20, 1,4-1,55 (9H,s).

Trinn 20. b. 7-( 71. 1 - dimetvletoksv^ karbonvl)- 2- fenvlmetoksvV5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazoH . 2alovrazin.

En 60% dispersjon av NaH i mineralolje (76 mg, 1,9 mmol) ble vasket med heksaner (2 x 5,0 ml) og en løsning av 2-(2-hydroksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydro-imidazo[1.2a]pyrazin fra trinn 9.a. (500 mg, 1,58 mmol) i DMF (10 mi) ble tilsatt ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble omrørt i ca. 10 min. og deretter ble benzylbromid (188 ul, 1,58 mmol) tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 2 timer. Blandingen ble hellet i mettet NaCI-løsning (40 ml) og ekstrahert med Et20 (2 x 50 ml). Et20-Iagene ble slått sammen, tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk, hvilket ga produktet (430 mg, 67%) som en viskøs, gul olje som krystalliserte seg ved henstand. Massespektrometri: 406,3 MH<*>.

Trinn 20. c. 2- f2- ffenvlmetoksvWenvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazof1, 2a1-pvrazin.

Produktet fra trinn 20.b. (250 mg, 0,62 mmol) ble behandlet med Tfa (15,0 ml) inneholdend iPr3SiH (505 ul, 2,47 mmol) ved romtemperatur i ca. 1 time under N2. Løsningsmidler ble fjernet under redusert trykk og resten ble gnidd med Et20 (2 x 20 ml), filtrert og tørket. Resten ble benyttet i neste trinn uten ytterligere rensing.

Trinn 20. d. 7-( 2-( 4- cvanofenvlmetvMmidazol- 5- v»- 1 - oksoetvtf- 2-( 2- ffenvlmetoksv) fenvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazon . 2- alpvrazin.

Eksempel 20 ble fremstilt fra produktet fra trinn 20.d. og produktet fra trinn 11 .j. på en måte analog med trinn 1 .g. Massespektrometri: 529,3 MH<*>.

Eksempel 21: 2- f2- butoks\ frenvlV7- f2- M- cvanQfenvlmetvhimidazol- 5-vh- 1 - oksoetvn- 5. 6. 7. 8- tetrahvdroimidazoH . 2- alPvrazin.

Eksempel 21 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 20 ved anven-deise av n-butyljodi istedenfor benzylbromid i trinn 20.b. Massespektrometri: 495,4 MH<+>.

Eksempel 22: 1. 2- dihvdro- 1 - ff 1 H- imidazol- 4- vnmetvfl- 4- f2- metoksv-fenvllimidazoH . 2- clf 1. 41benzodiazepin.

Utgangsmaterialet for trinn 22.a. ble fremstilt på en måte analog med skjema 1, trinnene 1 .a, idet Cbz-{Gly)-OH erstattet Cbz-(L)-Nle-OH. Trinnene 22.d. og 22.e. ble utført på en måte analog med trinnene 8.c. og 8.d.

Trinn 22. a. 1 - f f2- f luorfenvhmetvft- 2- f 1 - f SWf ff envlmetoksv^ karbonvh-amino^ metvlM- f2- metoksvfenvhimidazol.

1H-2-(1-(S)-(((fenylmetoksy)karoonyl)amino)metyl)-4-(2-metoksyfenyl)-imidazol (1,69 g, 5,00 mmol) ble oppløst i DMF (20 ml) og behandlet med K2C03 (1,38 g, 10,0 mmol) bg 2-fluorbenzylbromid (1,21 ml, 10,0 mmol) og blandingen ble oppvarmet ved ca. 50°C i ca. 2 timer. Blandingen ble inndampet under redusert trykk. Resten ble tatt i EtOAc (50 ml), vasket én gang med mettet NaHC03-løsning (25 ml) og én gang med mettet NaCI-løsning (25 ml). EtOAc-laget ble tør-

ket over Na2S04, filtrert og inndampet til en olje (2,22 g, 99,6%) som krystalliserte . seg ved henstand. Massespektrometri: 446,2, MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,05-8,15 (1H, d), 8,75-8,9 (1H, t), 7,5-7,6 (1H, S), 7,1-7,5 (9H, m), 6,9-7,1 (3H, m), 5,3-5,45 (2H, s), 4,9-5,1 (2H, s), 4,3-4,45 (2H, s), 3,8-3,9 (3H, s).

Trinn 22. b. 2 -( aminometvh- 1 -( 72- fluorfenvhmetvlM- f2- metoksvfenv0-imidazol.

1- ((2-fluorfenyl)metyl)-2-(1-(S)-(((fenylmetoksy)karbonyl)amino)metyl)-4-(2-metoksyfenyl)imidazol (forbindelse xxvi; hvor R<2>, R<3>, R5 og R<6> er H og R<4> er 2-metoksyfenyl) (2,22 g, 4,99 mmol) ble oppløst i 30% HBr/ HOAc (25 ml) og reaksjonsblandingen ble omrørt i oa. 1 time ved romtemperatur. Et20 (100 ml) ble tilsatt og den resulterende oppslemming ble omrørt ca. ytterligere 15 min. og produktet ble filtrert fra og vasket med Et20 (100 ml). Produktet ble nøytralisert ved tilsetning av mettet NaHC03-løsning (50 ml) og produktet ble ekstrahert med CH2CI2 (2 x 25 ml). De sammenslåtte CH2CI2-lag ble slått sammen, tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk til en viskøs olje (1,26 g, 81%), som størknet ved henstand. Massespektrometri: 312,2 MH<*.>

Trinn 22. c. 1. 2- dihvdro- 4- te- metoksvf envftimidazoH . 2- cU 1. 41benzodiazepin.

2- {aminometyl)-1 -((2-fluorfenyl)metyl)-4-(2-metoksyfenyl)imidazol fra trinn 22.b. (1,26 g, 4,05 mmol) ble tilsatt til NMP (20 ml) inneholdende K2C03 (1,12 g, 8,10 mmol) og reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 11 timer. Løsningsmidlene ble destillert av under redusert trykk og H20 (50 ml) ble tilsatt. Råprodukt ble filtrert fra og renset ytterligere ved flash-kromatografi på kiselgel ved anvendelse av CH2CI2 og deretter 19:1 / MeOH:CH2CI2 som elueringsmidler. Produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet under redusert trykk, og deretter gnidd med EtOAc, hvilket ga produkt som et brunfarvet faststoff (329 mg, 28%). Massespektrometri: 292,3 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 7,95-8,1 (1H, d,d), 7,6-7,65 (1H, s), 7,1-7,2 (1H, m), 6,9-7,1 (4H, m), 6,5-6,65 (2H, m), 5,2-5,4 (2H, s), 4,4-4,5 (2H, s), 3,8-4,0 (3H, s).

Trinn 22. d. 1. 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvh- 1 - f M - ftrif envlmetvhimidazol- 4-vhmetvltimidazof 1. 2- cin . 41benzodiazepin.

På en måte lik den i trinn 8.c, ble en blanding av produktet fra trinn 22.c.

(forbindelse xxvii, hvor R<2>, R<3>, R<5> og R<6> er H og R4 er 2-metoksyfenyl) (146 mg, 0,50 mmol) og 1 -trifenylmetyl-imidazol-4-karboksaldehyd (fra trinn 8.b.) (338 mg, 1,00 mmol) i CH2CI2 (5,0 ml) behandlet med eddiksyre (1,0 ml) og NaBH(OAc)3 (212 mg, 1,00 mmol) i ca. 1 time. Ytterligere 1-trifenylmetyl-imidazol-4-karboks-aldehyd (338 mg, 1,00 mmol), eddiksyre (1,0 ml) og NaBH(OAc)3 (212 mg, 1,00 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i ca. 1 time. EtOAc (25 ml) og konsentrert NH4OAc (3,0 ml) ble tilsatt og blandingen ble omrørt i ca. 1,5 time. Mettet NaHC03-løsning ble tilsatt og blandingen ekstrahert med EtOAc (3 x 25 ml). De sammenslåtte EtOAc-lagene ble tørket, filtrert og inndampet under redusert trykk. Produkt ble renset ved flash-kromatografi på kiselgel ved anvendelse av 1.1:1 / CH2CI2:EtOAc:heksaner og deretter EtOAc som elueringsmiddel. De sammenslåtte produktfraksjoner ble inndampet og tørket til 210 mg (68%) under redusert trykk. Massespektrometri: 614,3 MH<*>.

Trinn 22. e. 1. 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvn- 1 -ff 1 - ftrifenvlmetvhimidazol- 4-vhmetvnimidazori , 2- c1f1, 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 22.d. ble avbeskyttet på en måte analog med trinn 1.h., hvilket ga 104 mg (70%) av produktet. Massespektrometri: 372,3, MH*.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,0-9,2 (1H, s), 8,05-8,15 (1H, s), 7,9-8,0 (1H, d), 7,7-7,8 (1H, s), 7,3-7,55 (4H, m), 7,1-7,3 <2H, m), 7,0-7,1 (1H, t), 5,6-5,8 (2H, s), 4,55-4,75 (4H, s), 3,9-4,1 (3H, s), 2,7-4,0 (H20, bred).

Eksempel 23: 1 - f 2- f 1 -( 4- cvanofenvlmetvtfimidazol- 4- vh- 1 - oksoetvft-1. 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvnimidazori , 2- clf 1. 41benzodiazepin.

Eksempel 23 ble fremstilt i henhold til skjema 22 og skjema 11.

Trinn 23. a. 1 - f2- f f4- cvanofenvlmetvhimidazol- 4- vfl- 1 - oksoetvh- 1, 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvhimidazof1. 2- cin . 41benzodiazepin.

1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin (forbindelse xxvii, hvor R<2>, R<3>, R<5> og R<6> er H og R<4> er 2-metoksyfenyl) (fra trinn 22.c.) ble slått sammen med DCC (103 mg, 0,50 mmol), HOAt (68 mg, 0,50 mmol), NMM

(55 pJ, 0,50 mmol) og 1-(4-cyanofenylmetyl)-5-imidazol-eddiksyre (produktet f ra trinn 11 .j.) (160 mg, 0,50 mmol) i DMF (3,0 ml) og reaksjonsblandingen fikk omrø-res over natten ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet til ca. 70°C i ca. 12 timer og deretter inndampet under redusert trykk. Råmaterialet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ C18-kolonne ved å foreta en første passering ved anvendelse av en gradient på 10-40% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min., fulgt av en andre passering ved anvendelse av en gradient på 20-35% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjonene ble slått sammen og inndampet til tørrhet. Produktet ble omdannet til et dihydroktoridsalt ved å bringe en 9:1 / H20:MeOH-løsning gjennom en ionebytte-kolonne (AG 1 X2,200-400 mesh, 100 ml sjikt, 0,6 meq/mi, kloridform, Biorad, Inc., Hercules, CA). Produktfraksjoner ble igjen inndampet under redusert trykk og lyofilisert fra H20 (10 ml), hvilket ga 21 mg (10%) av det ønskede produkt. Massespektrometri: 515,3 MH<+.>

Eksempel 24: 9- brom- 1 -( 2-( 1 - f4- cvanofenvlmetvhimidazol- 4- vh- 1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvnimidazori . 2- clH. 41benzodiazepin.

Eksempel 24 ble fremstilt i henhold til skjema 22, skjema 24 og skjema 1, trinn 1 .g.

Trinn 24. a. 9- brom- 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvh- 1 H- imidazon , 2- cin . 41-benzodiazeoin.

Produktet fra trinn 22.c. (291 mg, 1,00 mmol) ble oppløst i eddiksyre (10 ml) og Br2 (52 pl) ble tilsatt dråpevis under omrøring. Metanol (10 ml) ble tilsatt for å opprettholde homogen løsning. Da tilsetningen var fullført ble løsnings-midlene avdampet under redusert trykk og resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 20-50% CH3CN / . 0,1% Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble inndampet til tø volum og lyofilisert. Det iyofiliserte produkt ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 20% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen og inndampet og lyofilisert fra H20, hvilket ga rent produkt (110 mg, 24%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 370,0, 371,9 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,05-8,15 (1H, s), 7,9-8,0 (1H, d) 7,4-7,5 (1H, t), 7,3-7,4 (1H, s), 7,2-7,3 (1H, d,d), 7,15-7,25 (1H, d), 7,05-7,15 (1H, t), 6,65-6,75 (1H, d), 5,55-5,7 (2H, s), 4,8-4,95 (2H, s), 3,9-4,0 (3H, s).

Trinn 24. b. 9- brom- 1 -( 2-( 1 -( 4- cvanofenvlmetvltimidazol- 4- vh- 1 - oksoetvh-1. 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvhimidazof1. 2- clH . 41benzodiazeoin.

Produktet fra trinn 24.a. (72 mg, 0,177 mmol) ble oppløst i DMF (3 ml). Til denne løsning ble det tilsatt NMM (98 pl, 0,89 mmol), 1-(4-cyanofenylmetyl)-5-imidazol-eddiksyre (produktet f ra trinn 11.j.) (128 mg, 0,36 mmol), HOAt (49 mg, 0,36 mmol) og DCC (74 mg, 0,36 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur og deretter oppvarmet tul 70C i én time. Løsningen ble avkjølt og DCC (74 mg, 0,36 mmol) ble tilsatt og løsningen ble omrørt ved romtemperatur over natten igjen. Reaksjonsblandingen ble oppvarmet ved 70°C i én time og inndampet under redusert trykk. Resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 25-60% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. En andre rensing var nødvendig, med anvendelse av en gradient på 44-80% CH3CN / 0,2% NH4OAc i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble inndampet og lyofilisert, hvilket ga rent produkt (11 mg, 9%) som et acetatsalt Massespektrometri: 593,2,595,3 MH<*>.

Eksempel 25: 9- klor- 1 -( 2- 1 1 - f4- cvanofenvlmetvftimidazol- 4- vft- 1 - oksoetvh- 1 ^- dihvdro^- te- metoksvfenvhimidazoM , 2- cin . 41benzodiazepin.

Eksempel 25 ble fremstilt i henhold til skjema 22, skjema 24 og skjema 1, trinn 1 .g.

Trinn 25. a. 9- klor- 1 ^- dihvdro^- te- metoksvfenvft- l H- imidazon . 2- clM . 41-benzodiazepin.

Produktet fra trinn 22.c. (291 mg, 1,00 mmol) ble omdannet til dihydroklo-ridsattet ved oppløsning i metanol (10 ml), tilsetning av 5% vandig HCI (3,0 ml) og inndamping til faststoffer. Resten ble oppløst i metanol (5 ml) og HOAc (1,0 ml) og N-klorsuksinimid (133 mg, 1,0 mm) ble tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten, deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble fordelt mellom mettet NaHC03 og CHCb og CHCI3-laget ble tilført en kiselgelkolon-ne. Kolonnen ble eluert først med 3:1 / CHCI3:EtOAc og deretter med 1:1 / CHCI3:EtOAc, hvilket ga råprodukt. Dette råmaterialet ble videre renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ C18-kolonne ved anvendelse av en gradient på 25-60% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. De re-ne produktfraksjoner ble slått sammen og lyofilisert, hvilket ga 94 mg (17%) av produkt som di-Tfa-sattet. Massespektrometri: 326,2 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,0-8,1 (1H, s), 7,7-7,8 (1H, d,d), 7,4-7,5 (1H, t), 7,2-7,3 (1H, s), 7,15-7,3 (1H, d), 7,1-7,2 (1H, d,d), 7,05-7,15 (1H, t), 6,7-6,8 (1H, d), 5,55-5,65 (2H, s), 4,7-4,8 (2H, s), 3,9-4,0 (3H, s).

Trinn 25. b. 9- klor- 1 -(2-H - M- cvanofenvlmetvhimidazol- 4- vh- 1 - oksoetvn-1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvnimidazoM . 2- cin . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 25.a. (72 mg, 0,3 mmol) ble oppløst i DMF (1,5 ml). Til denne løsning ble det tilsatt NMM (114 pl, 1,04 mmol), 1-(4-cyanofenylmetyl)-5-imidazol-eddiksyre (forbindelse xii, hvor R<1> er (4-cyanofenylmetyl) og R<2> er H) (92 mg, 0,26 mmol) og TFFH (69 mg, 0,26 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur og deretter oppvarmet til 70°C i én time. Løsning-en ble avkjølt tilbake til romtemperatur og 1-(4-cyånofenylmetyl)-5-imidazoleddiksyre (produktet fra trinn 11 .j.) (92 mg, 0,26 mmol) og TFFH (69 mg, 0,26 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt over natten ved romtemperatur, deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne ved anvendelse av en gradient på 25-60% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble inndampet og lyofilisert. Det lyofiliserte produkt ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 30% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet og lyofilisert fra H2O, hvilket ga rent produkt (59 mg, 73%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 549,3 MH<*.>

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,2-9,3 (1H, s), 8,0-8,1 (1H, s), 7,9-8,1 (1H, d), 7,8-7,9 (2H, d), 7,7-7,85 (2H, m), 7,6-7,75 (1H, d,d), 7,5-7,7 (1H, s), 7,4-7,55 (2H, d), 7,35-7,5 (1H, t), 7,15-7,3 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 4,5-6,3 (2H, d,d), 5,4-5,8 (4H, m), 3,9-4,05, (3H, s), 3,5-3,9 (2H, d,d).

Eksempel 26: 10- brom- 1 - l2-( 1 - f4- cvanofenvlmetvhimidazol- 4- vft- 1 - oksoetvn- 1 ^- dihvdro^- rø- metoksvfenvnimidazoTI . 2- dM . 41benzodiazepin.

Trinnene 26.a. til 26.C. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.C, idet 4-brom-2-fluorbenzylbromid erstatter 2-fluorbenzylbromid i trinn 26.a. Produktet fra trinn 26.c ble isolert som dihydrokloridsaftet ved omrøring av en metanolisk suspensjon med et 20% overskudd av konsentrert saltsyre og avfiltrering av det resulterende faststoff. Massespektrometri: 370,1,372,1 MH<*>.

Trinn 26. d. 10- brom- 1 ~( 2-( 1 - f4- cvanof envlmetvl) imidazol- 4- vh- 1 - oksoetvn-1. 2- dihvdro- 4- f2- metoksvfenvhimidazof 1. 2- 0^ 1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 26.c. (100 mg, 0,23 mmol) ble oppslemmet i DMF (1,5 ml) og produktet fra trinn 11 .j. (125 mg, 0,45 mmol), TFFH (119 mg, 0,45 mmol) og NMM (110 pil, 1,0 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 45 min. og fikk stå ved romtemperatur over natten. Den rå blandingen ble inndampet under redusert trykk og resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cie-kolonne ved anvendelse av en gradient på 20-50% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. En andre rensing ble utført ved anvendelse av et isokratisk system inneholdende 44% CH3CN / 0,2% vandig NH4OAc. Produktfraksjoner ble inndampet og lyofilisert. Det lyofiliserte produkt ble re-lypfilisert fra 20% CH3CN / H20, deretter omdannet til Tfa-sattet ved lyofilisering fra 20% CH3CN /1% Tfa, og deretter omdannet til hydrokloirdsaltet ved å føre en 30% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet og lyofilisert fra 20% CH3CN / H20, hvilket ga rent produkt (45 mg, 30%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 593,2, 595,2 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,1-9,3 (1H, s), 7,9-8,1 (3H, m), 7,8-7,9 (2H, d), 7.7- 7,8 (1H, d,d), 7,6-7,7 {1H, d), 7,5-7,6 (1H, s), 7,4-7,5 (2H, d), 7,3-7,45 (1H, t), 7,1 -7,25 (1H, s), 7,0-7,1 (1H, t), 4,4-6,2 (2H, d,d), 5,4-5,7 (4H, m), 3,9-4,0 (3H, s), 3,5-3,9 (2H, d,d).

Eksempel 27: 1 ~( 2-( 1 - f4- cvanofenvlmetvhimidazol- 4- vtf- 1 - oksoetvn-1. 2- dihvdro- 8- fluor- 4- f2- metoksvfenvhimidazof 1. 2- clH . 41benzodiazeoin.

Trinnene 27.a. til 27.c. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til

22.C, idet 2,6-difluorbenzylbromid erstatter 2-fluorbenzylbromid i trinn 27.a.

Trinn 27. d. 1 -( 2- M -( 4- cvanofenvlmetvftimidazol- 4- vl}- 1 - oksoetvu- l. 2- dihvdro- 8- fluor- 4- f2- metoksvfenvhimidazori . 2- cin . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 27.c. (124 mg, 0,40 mmol) ble oppslemmet i DMF (2 ml)

og produktet fra trinn 11 .j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0,40 mmol) og NMM (88 pl, 0,8 mmol) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 1,5 time. En andre porsjon av produktet fra trinn 11 .j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0,40 mmol) og NMM (88 uJ. 0,8 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i ytterligere 1,5 time. En tredje porsjon av produktet fra trinn 11 .j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0,40

mmol) og NMM (88 ul, 0,8 mmol) ble tilsatt og reaksjonsblandingen omrørt ved romtemperatur over natten. Den rå blandingen bie inndampet under redusert

trykk og resten ble renset ved preparativ PLC på en RAININ™Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 20-50% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble slått sammen og lyofilisert. Tfa-saltet ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 40% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 mi, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet og lyofilisert fra H20, hvilket ga rent produkt (126 mg, 59%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 533,3 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,2-9,3 (1H, s), 8,2-8,4 (1H, s), 7,9-8,1 (1H, d), 7.8-7,9 (2H, d), 7,55-7,7 (3H, m), 7,35-7,55 (4H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15

(1H, t), 4,5-6,3 (2H, d,d), 5,4-5,9 (2H, d,d), 5,5-5,7 (2H, d,d), 3,9-4,1 (3H, s), 3,6-4,0(2H,d,d).

Eksempel 28: 1. 2- dihvdro- l - tø- fimidazol- l -vlV1 - oksoetvlM- te- met-oksvfenvtømidazoli . 2111. 41benzodiazepin.

En løsning av produktet fra trinn 22.c. (146 mg, 0,50 mmol) i DMF (2 ml) ble behandlet med kloracetylklorid (44 pl, 0,55 mmol) i DMF (0,5 ml) og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i tø time. Imidazol (204 mg, 3,00 mmol) ble tilsatt og blandingen ble oppvarmet ved 50°C i 3 timer og fikk deretter stå ved romtemperatur over natten. Den rå blandingen ble inndampet under redusert trykk og resten ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Ci8-kolonne ved anvendelse av en gradient på 10-50% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 25 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet under redusert trykk. Tfa-saitet ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 30% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/kml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet til et volum på ca. 10 ml og lyofilisert fra H2O, hvilket ga rent produkt (127 mg, 54%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 400,2 MH<*>. NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,1-9,2 (1H, s), 8,1-8,2 (TH, s), 7,9-8,05 (1H, d), 7,8-7,9 (1H, d), 7,5-7,8 (5H, m), 7,35-7,5 (1H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 6,2-6,35 (1H, d)), 6,0-6,15 (1H, d), 5,5-5,7 (1H, d), 5,35-5,5 (1H, d), 4,95-5,15 (1H, d), 4,6-4,8 (1H,d) 3,9-4,0 (3H, s).

Eksempel 29: 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvft- 1 -{ 2-( Pvridin- 3- vn- 1 - oksoetvhimidazoM . 2alM . 41benzodiazepin.

En løsning av produktet fra trinn 22.c. (102 mg, 0,35 mmol) i DMF (1,5 ml) ble behandlet med 3-pyridineddiksyre-hydroktorid (69,4 mg, 0,40 mmol), NMM (110 pl, 1,00 mmol) og TFFH (106 mg, 0,40 mmol) og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 tø time. En ytterligere mengde av 3-pyridineddiksyre-hydroklorid (26,0 mg, 0,15 mmol), NMM (33 ul, 0,30 mmol) og TFFH (40 mg, 0,15 mmol) ble tilsatt til reaksjonsblandingen og omrøring ble fortsatt ved romtemperatur i 1 1/2 time. Den rå blandingen ble inndampet under redusert trykk. Mettet NaHC03-løsning (5 ml) ble tilsatt og produktet ble ekstrahert med CH2CI2 (2 x 5 ml). CH2O2 ble destillert av under redusert trykk og resten ble oppløst i 10% vandig CH3CN justert til pH = 2 med Tfa. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 10-50% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 25 min. med UV-deteksjon ved 254 nm. Produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet under redusert trykk. Tf a-saltet ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 30% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2,200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet til et volum på ca. 10 ml og lyofilisert fra H20, hvilket ga rent produkt (123 mg, 73%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 411,1 MH<*>.

Eksempel 30: 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvn- 1 -( 2- fovridin- 4- vh- 1 - oksoetvhimidazon . 2a1M . 41benzodiazepin.

Eksempel 30 ble fremstilt på en måte analog med eksempel 29, med unn-tak av at 4-pyridiri-eddiksyre-hydroklorid ble benyttet i stedet for 3-pyridin-eddiksyre-hydroklorid i trinn 30.a. Massespektrometri: 411,1 MH<*>. NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 8,8-8,9 (2H, d), 8,1-8,2 (1H, s), 7,9-8,0 (3H, m), 7,75-7,9 (1H, d), 7,65-7,75 (1H, d), 7,6-7,7 (1H, t), 7,5-7,65 (1H, t), 7,35-7,5 (1H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 6,2-6,4 (1H, d), 5,7-5,85 (1H, d), 5,5-5,65 (1H, d), 4,5-4,7 (1H, d), 3,7-4,2 (2H, m), 3,9-4,05 (3H, s).

Eksempel 31: 1 -f2-f 1 - benzvlimidazol- 5- vn- l - oksoetvft- 1 . 2- dihvdro- 8-fluor- 4- f2- metoksvfenvl^ imidazori . 2a1H. 41benzodiazepin.

Trinnene 31 . a. til 31 . c. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.c, idet 2,6-difluorbenzylbromid erstatter 2-fluorbenzylbromid i trinn 31 .a.

Trinn 31 . d. 1 -( 2-( 1 - benzvlimidazol- 5- vlV1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 8- fluor- 4-( 2- metoksvfenvhimidazoM. 2aU1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 31 .c. ble bundet til produktet fra trinn 5.c. (1-fenylmetyi-5-imidazol-eddiksyre) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 508,5 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,1-9,3 (1H, s), 8,2-8,3 (1H, s), 7,9-8,0 (1H,

d,d), 7,2-7,7 (10H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15 (1H, t), 6,1-6,3 (1H, d), 5,65-5,8 (1H, d), 5,3-5,6 (3H, m), 4,45-4,6 (1H, d), 3,9-4,0 (3H, s), 3,6-3,9 (2H, q).

Eksempel 32: 1- f2- f1- ff4- cvano) fenvlmetvhimida2ol- 5- vn- 1- oksoetvl: 9. 10- difluor- 1 . 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvhimidazori . 2c)( 1. 41benzodiazepin.

Trinnene 32. a. til 32. c. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.C, idet 2,4,5-trifluorbenzylbromid erstatter 2-fluorbenzylbromid i trinn 32.a.

Trinn 32. d. 1 -( 2- M -(( 4- cvano) fenvlmetvl) imidazol- 5- vlM- oksoetvl- 9. 10-difluor- 1 ^- dihvdro^-^- metoksvfenvnimidazon . 2clf 1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 32.c. ble bundet til produktet fra trinn 11 .j. (1 -(cyanofenylmetyl-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 551,4 MH<*>.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 9,1-9,3 (1H, s), 7,9-8,1 (3H, m), 7,75-7,9 (3H, m), 7,55-7,65 (1H, s), 7,45-7,55 (2H, d), 7,35-7,45 (1H, m), 7,15-7,25 (1H, d), 7,0-7,15 (1H,t).

Eksempel 33: 4-( 2- bromfenvh- 1 -( 2-( 1 - K4- cvano) fenvlmetvl1imidazol- 5-vD- 1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 8- fluorimidazori , 2ain . 41benzodiazepin.

Trinn 33. a. 2. 2'- dibromacetofenon.

Brom (40,3 g, 0,25 mol) ble dråpevis tilsatt til en løsning av 2'-bromacetofenon (50,0 g, 0,25 mol) i eddiksyre (500 ml) i løpet av 1,5 time ved 15-20°C. Løsningen fikk deretter oppvarmes til romtemperatur og ble inndampet under redusert trykk, hvilket ga et råprodukt som ble benyttet uten ytterligere rensing.

Trinn 33. b. ble utført på en måte analog med trinn 1.c, idet produktet fra trinn 33.a. erstattet 2-brom-2'-metoksyacetofenon og Cbz-glycin erstattet Cbz-(L)-norleukin.

Trinnene 33. c. til 33. e. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.c, idet 2,6-difluorbenzylbromid erstattet 2-fluorbenzylbromid i trinn 33.c, og idet 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en erstattet K2CO3 i trinn 33.e.

Trinn 33:f. 4-( 2- bromf envIM - l2-( 1 - rf4- cvano) fenvlrnetvf1imidazol- 5- vh- 1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 8- fluorimidazori . 2a1f1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 33.e. ble bundet til produktet fra trinn 11 j. (1-(cyanofenylmetyl-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 581,1,583,1 MH<+>.

Eksempel 34: 1 - f2-( 1 - f( 4- cvanoKenvlmetvnimidazo- 5- vft- 1 - oksoetvIV 1. 2- dihvdro- 10- fluor- 4-( 2- metoksvfenvhimidazolH . 2a1f1. 41benzodiazepin.

Trinnene 34. a. til 34. c. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.c, idet 2,4-dif luorbenzylbromid erstattet 2-fluorbenzylbromid i trinn 31 .a.

Trinn 34. d. 1 -( 2-{ 1 -(( 4- cvanoYfenvlmetvlMmidazo- 5- vn- 1 - oksoetvn- 1 . 2-dihvdro- 10- fluor- 4- f2- metoksvfenvhimidazolf 1. 2a1f 1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 34.c. ble bundet til produktet fra trinn 11 .j. (1 -(cyanofenylmetyl-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 533,2 MH<+>.

Eksempel 35: 1- f2- M- ff4- cvano- 3- metoksvlfenvlmetvhimidazo- 5- vn- 1-oksoetvn- 1. 2- dihvdro- 8- f luor- 4- f2- metoksvfenvhimidazoin . 2a1f 1. 41benzodiazepin.

Trinnene 35. a. til 35. f. ble utført i henhold til skiema 35.

Trinn 35. a. Metv1- 4- amino- 3- hvdroksvbenzoat.

En løsning av 4-amino-3-hydroksybenzosyre (24,5 g, 159 mmol) i metanol (650 ml) ble avkjølt i et bisbad og behandlet med gassformig HCI i ca. 20 min. (ca. 60 g). Omrøring ble fortsatt over natten og deretter ble løsningen inndampet under redusert trykk. Resten ble gnidd med EtOAc (200 ml) og tørket til et brunt faststoff (24,5 g, 92%), som ble benyttet uten ytterligere rensing. Massespektrometri: 168,2.

NMR (300 MHz, DMSO-de, 30°C) 9,3-9,4 (1H, s), 7,2-7,3 (2H, m), 6,55-6,65 (1H, d), 5,3-5,4 (2H, s (bred)), 3,6-3,8 (3H, s).

Trinn 35. b. Metvl- 3- hvdroksv- 4- iodbenzoat.

En løsning av produktet fra trinn 35.a. (24,5 g, 146 mmol) i THF (77 ml) ble fortynnet med 3N HCI (232 ml) og avkjølt i et isbad til 8°C, da et utfellingsprodukt dannet seg. NaN02 (11,1 g, 161 mmol) i H20 (75 ml) ble tilsatt i løpet av 6 min. ved isbadtemperatur. Fortsett omrøring i 25 min. og tilsett deretter en løsning av Kl (97,1 g, 585 mmol) i H20 (75 ml) i én porsjon og omrør i 15 min. Tilsett EtOAc

(550 ml) og adskill lagene. Vask EtOAc-laget med H20 (500 ml) og sartoppløs-ning (400 ml), tørk over Na2S04, filtrer og inndamp til et sort faststoff. Råproduktet ble renset ved kiselgel-kromatografi ved anvendelse av CH2CI2 som elueringsmiddel, hvilket ga 19,7 g (48%) av et elfenbenshvitt faststoff.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 10,6-10,8 (1H, s), 7,8-7,9 (1H, d), 7,4-7,5 (1H, m), 7,1-7,2 (1H, m), 3,75-3,85 (3H, s).

Trinn 35. c. Metvl- 4- cvano- 3- hvdroksvbenzoat.

En løsning av produktet fra trinn 35.b. (25,3 g, 91,1 mmol) og ZnCN2 (7,48

g, 63,7 mmol) i DMF (100 ml) ble behandlet, under N2, med (Ph3P)4Pd (2,0 g, 1,82 mmol) og oppvarmet ved ca. 80°C i 4 timer. Løsningen ble deretter avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom EtOAc (400 ml) og H20 (400 ml). EtOAc-laget ble vasket med saltoppløsning (4 x 200 ml), tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved kiselgel-kromatografi ved anvendelse av CH2CI2, og deretter 2,5% MeOH / CH2CI2 som elueringsmidler. Frak-

sjoner ble inndampet til et lyst oransje faststoff og tørket til konstant vekt under vakuum, hvilket ga produktet (13,4 g, 83%) som ble benyttet i trinn 35.d. uten ytterligere rensing.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 7,7-7,8 (1H, m), 7,5-7,6 (1H, d), 7,4-7,5 (1H, m), 3,8-3,9 (3H, s).

Trinn 35. d. Metvl- 4- cvano- 3- metoksvbenzoat.

60% NaH i mineralolje (6,02 g, 151 mmol) ble vasket med 3 porsjoner av heksaner (20 ml) og oppslemmet i DMF (100 ml) ved romtemperatur. Produktet fra trinn 35.c. (13,3 g, 75,3 mmol) i DMF (100 ml) ble tilsatt og den resulterende blanding ble behandlet med jodmetan (9,38 ml, 151 mmol), Reaksjonsblandingen fikk omrøres over natten ved romtemperatur. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med EtOAc (400 ml) og vasket med 5% sitronsyre (2 x 150 ml) og saltoppløsning

(150 ml). EtOAc-laget ble deretter tørket over Na2S04, filtrert og inndampet, hvilket ga et faststoff-produkt (13,4 g, 93%) som ble benyttet i trinn 35.e. uten ytterligere rensing.

NMR (300 MHz, CDCI3,30°C) 7,62-7,72 (3H, m), 4,0-4,1 (3H, s), 3,9-4,0 (3H, s).

Trinn 3S. e. 4- hvdroksvmetvl- 2- metoksvbenzonftril.

Produktet fra trinn 35.d. (13,3 g, 70,0 mmol) i THF (200 ml) ble behandlet med 2M LiBR* (75 ml, 150 mmol) under N2 og den resulterende løsning ble oppvarmet ved tilbakeløp i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble avkjølt til romtemperatur og behandlet forsiktig med overskudd av 4N HCI for å bråavkjøle overskudds-reagens. H20 (50 ml) og EtOAc (100 ml) ble tilsatt og lagene ble adskilt. De vandige lagene ble gjen-ekstrahert med EtOAc (2 x 50 ml) og EtOAc-lagene ble slått sammen og vasket med saltoppløsning (3 x 100 ml), tørket (Na2S04), filtrert og inndampet under redusert trykk, hvilket ga et hvitt faststoff (10,7 g, 94%).

NMR (300 MHz, CDCb, 30°C) 7,5-7,8 (1H, d), 7,0-7,1 (1H, s), 6,94-7,0 (1H, m), 4,75-4,8 (2H, s), 3,9-4,0 (3H, s), 1,9-2,1 (1H, s (bred)).

Trinn 35. f. 4- brommetvl- 2- metoksvbenzonitril.

Produktet fra trinn 35.e. (1,0 g, 6,13 mmol) ble oppslemmet i CH2CI2 (3,0 ml), behandlet med SOBr2 (480 pl, 6,13 mmol), omrørt i ca. tø time og deretter inndampet. Resten ble gjenoppløst i CH2CI2 (100 ml), vasket med mettet NaH-COa-løsning (50 ml), tørket (Na2S04), filtrert og inndampet til et lysegult faststoff (1,22g,88%).

NMR (300 MHz, CDCI3, 30°C) 7,5-7,6 (1H, d (j = 8 Hz)), 7,02-7,08 ((1H, d,d 0 = 8 Hz, j = 1 Hz), 7,0-7,02 (1H, d = 1 Hz), 4,45-4,5 (2H, s), 3,95-4,0 (3H, s).

Trinnene 35. a. til 35. i. ble utført på en måte analog med trinnene 5.a til 5.c, idet produktet fra trinn 35.f. erstattet benzylbromid i trinn 5.a.

Trinn 35. i. 1 - 12 - 1 1 - f( 4- cvano- 3- metoksv) fenvlmetvhimidazo- 5- vl)- 1 - okso-etvO- 1 ■ 2- dihvdro- 8- fluor- 4- f2- metoksvfenvnimidazoin . 2a1f1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 31 .c. ble bundet til produktet fra trinn 35.i. (1 -((4-cyano-3-metoksyfenyl)metyl)-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 563,2 MH<*.>

Eksempel 36: 10- brom- 1 -( 2- M -(( 4- cvano- 3- metoksv) fenvlmetvD-imidazo- 5- vl)- 1 - oksoetvl)- 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvDimidazoiri , 2a1f 1. 41benzodiazepin.

Trinnene 36. a. til 36. c. ble utført på en måte analog med trinnene 22.a. til 22.c, idet 2,4-dibrombenzylbromid erstattet 2-fluorbenzylbromid i trinn 36.a.

Trinn 36. d. 10- brom- 1- f2- n- ff4- cvano- 3- metoksv) fenvlmetvl) imidazo- 5-vn- 1- oksoetvl)- 1. 2- dihvdro- 4-( 2- metoksvfenvnimidazolM . 2a1f1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 36.c. (10-brom-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo-[1.2-c][1.4]benzodiazepin) ble bundet til produktet fra trinn 35.i. (1-((4-cyano-3-metoksyfenyl)metyl)-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 623,1, 625,1 MH<+.>

Eksempel 37: 1 -( 2-( 1 -(( 4- cvano- 3- metoksv) fenvlmetvflimidazo- 5- vfl- 1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 8- fluor- 4- fenvlimidazoin . 2ain . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 31 .c. (1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin) ble bundet til produktet fra trinn 35.i. (1-((4-cyano-3-metoksyfenyl)metyl)-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 533,3 MH<*>.

Eksempel 38: 4- f2- bromfenvh- 1 -( 2 - Ci -(( 4- cvano- 3- metoksvWenvl-metvh- imidazo- 5- vh- 1 - oksoetvh- 1. 2- dihvdro- 8- f luorimidazoM . 2ain . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 33.e. (4-{-2-bromfenyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin) ble bundet til produktet fra trinn 351 (1 -{{4-cyano-3-metoksyfenyl)metyi)-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og rénset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 611,1,613,1 MH<*>.

Eksempel 39: 1 -( 2-( 1 - f ( 3- metoksvWenvlmetvnimidazo- 5- vn- 1 -oksoetvh-1 . 2- dihvdro- 8- fluor- 4- f2- metoksvfenvlYimidazolf1. 2a1f1. 41benzodiazepin.

Trinnene 39. a. til 39. c. ble utført på en måte analog med trinnene 5.a. til 5.c, idet 3-metoksybenzyl-bromid erstattet benzylbromid i trinn 5.a.

Trinn 39. d. 1 -( 2-( 1 -(( 3- metoksvlf envlmetvlYimidazo- 5- vn- 1 - oksoetvh- l . 2-dihvdro- 8- fluor- 4-( 2- metoksvfenvhimidazolf1. 2a1f 1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 31 .c. (1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin) ble bundet til produktet fra trinn 39.c. (1-{(3-metoksyfenyl)-metyl)-5-imidazol-eddiksyre-hydroklorid) og renset på en måte analog med trinn 25.b. Massespektrometri: 538,4 MH<*>.

Eksempel 40: 1 -( 2-( 5-( M- cvanotfenvlmetvhimidazol- 1 - vh- 1 - oksoetvl-2. 5- dihvdro- 8- fluor- 4- f2- metoksvfenvh- imidazof1. 2cin . 41benzodiazepinV Trinnene 40. a. til 40. d. ble utført i henhold til skjema 40, som følger:

Trinn 40. a. ( R. Sl- 4- mvdroksv- 1- tritv1- 1 H- irriidazol- 4- vumetv»benzonitril.

En løsning av 1-trityl-4-jodimidazol (3,53 g, 8,10 mmol) i CH2CI2 (35 ml) ble avkjølt til ca. -3°C under N2 og 3M EtMgBr i Et20 ble dråpevis tilsatt mens reaksjonstemperaturen ble holdt under 0°C. Løsningen ble omrørt i ca. én time ved ca. 0°C og deretter ble 4-cyanobenzaldehyd (1,18 g, 9,00 mmol) tilsatt i én porsjon og reaksjonsblandingen fikk oppvarmes til romtemperatur i ca. 1 time. Reaksjonsblandingen ble deretter igjen avkjølt til ca. 0°C og 5% HCI (30 ml) ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt ca. 15 min. og deretter ekstrahert med CH2CI2 (2 x 25 ml). Oe sammenslåtte CH2Cl2-lagene ble vasket med mettet NaHC03, tørket over Na2S04, filtrert og deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble gnidd med EtOAc (25 ml) og produktet filtrert fra (2,92 g, 82%). Massespektrometri: 442,3 MH+.

NMR (300 MHz, DMSO-d6, 30°C) 7,7-7,8 (2H, d), 7,5-7,6 (2H, d), 7,3-7,5 (9H, m),. 7,25-7,3 (1H, s), 7,0-7,15 (6H, m), 6,75-6,8 (1H, s), 5,9-6,90 (1H, m), 5,6-5,7 (1H, m).

Trinn 40. b. 4-( MH- imidazol- 4- vhmetvhbenzonitril.

En løsning av produktet fra trinn 40.a. (1,10 g, 2,49 mmol) ble behandlet med Tfa (15 ml) og Et3SiH (3,0 ml, 18,8 mmol). Blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 2 timer. Reaksjonsblandingen ble deretter inndampet for å fjerne biprodukter. Tfa (15 ml) og EtsSiH (3,0 ml, 18,8 mmol) ble tilsatt og blandingen tilbakeløpt I ytterligere ca. 2 timer og deretter inndampet. Friske reagenser ble tilsatt og biprodukter ble fjernet ved inndampning under redusert trykk som nød-vendig, inntil utgangsmaterialet var oppbrukt. Konsumpsjon av utgangsmateriale ble overvåket ved analytisk HPLC-analyse ved anvendelse av en VYDAC Cis-kolonne (The Nest Group, Southborough, MA) og en gradient på 0% til 70% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 25 min. Råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 0% til 50% CH3CN / 0,1% Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble slått sammen, inndampet til tø volum og lyofilisert, hvilket ga rent produkt. Produktsaltet ble gjort basisk med mettet NaHC03-løsning, ekstrahert over i CH2Ct2 (3 x 25 ml), tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk. Massespektrometri: 183,9 MH<4>.

NMR (300 MHz, CDCI3, 30°C) 7,55-7,6 (2H, d (j 8 Hz), 7,55-7,58 (1H, d (j = 1 Hz)), 7,3-7,4 (2H, d (j * 8 Hz)), 6,75-6,8 (1H, d 0 = 1 Hz)), 3,9-4,1 (2H, s).

Trinn 40. c. 4 - 11 1 - tritvl- 1 H- imidazol- 4- vhmétvhbenzonitril.

Produktet fra trinn 40.b. (152 mg, 0,83 mmol), klortrifenylmetan (231 mg, 0,83 mmol) og EfeN (139 pl, 1,0 mmol) ble oppløst i THF (4 ml) og omrørt under N2 ved romtemperatur i ca. 2 timer. En mettet løsning av NaHC03 (5 ml) ble tilsatt og produktet ble ekstrahert med EtOAc (2 x 20 ml). Det organiske laget ble tørket over Na2S04, filtrert og inndampet under redusert trykk. Råproduktet ble renset ved krystallisering fra EtOAc og heksaner, hvilket ga rent produkt (285 mg, 81%). Massespektrometri: 426,4 MH<+> (minste linje).

NMR (300 MHz, CDCI3, 30°C) 7,5-7,6 (2H, d (j = 8 Hz)), 7,4-7,45 (1H, d = 1

Hz)), 7,3-7,4 (11H, m), 7,1-7,2 (6H, m), 6,58-6,62 (1H, d (j = 1 Hz)), 3,9-4,0 (2H, s).

Trinn 40. d. 1 - bromacetvl- 1. 2- dihvdro- 8- f luor- 4-( 2- metoksvfenvnimidazo-n - 2ain . 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 40.c. (108 mg, 0,35 mmol) ble oppløst i DMF (1,5 ml) og bromacetylbromid (65 pl, 0,75 mmol) ble tilsatt ved romtemperatur under omrø-ring. Blandingen fikk stå over natten og ble deretter inndampet under redusert trykk, hvilket ga råproduktet, som ble benyttet i trinn 40.e. uten ytterligere rensing. Massespektrometri: 430,2, 432,2 MH<+>.

Trinn 40. e. ( 2-( 5-(( 4- cvanoMenvlmetvlYimidazol- 1 - vn- 1 - oksoetvl- 2. 5- dihydro- 8- fluor- 4-( 2- metoksvfenvl) imidazon . 2c] f 1. 41benzodiazepin.

Produktet fra trinn 40.d. (0,32 mmol) ble fordelt mellom mettet NaHC03 (2 ml) og EtOAc (5 ml). Det vandige laget ble ekstrahert igjen med EtOAc (5 ml) og EtOAc-lagene ble slått sammen, tørket (Na2S04), filtrert og inndampet til ca. 2 ml. Produktet fra trinn 40.c. (134 mg, 0,32 mmol) ble tilsatt og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i ca. 2 dager og deretter inndampet under redusert trykk. Resten ble tatt opp i metanol (4 ml) og oppvarmet ved tilbakeløp i ca. 1 time. Reaksjonsblandingen ble avkjølt og inndampet under redusert trykk og råproduktet ble renset ved preparativ HPLC på en RAININ™ Cis-kolonne ved anvendelse av en gradient på 0% til 50% CH3CN / 0,1 % Tfa i løpet av 45 min. Produktfraksjoner ble slått sammen og inndampet under redusert trykk. Tfa-saltet ble omdannet til hydrokloridsaltet ved å føre en 30% metanolisk løsning gjennom en ionebytte-kolonne (BioRad AG 1-X2, 200-400 mesh, 0,6 meq/ml, 100 ml, kloridform). Produktfraksjonene ble slått sammen, inndampet til et volum på ca. 10 ml og lyofilisert fra H20, hvilket ga rent produkt (35 mg, 18%) som dihydrokloridet. Massespektrometri: 533,2 MH<+.>

Det skal forstås at mens oppfinnelsen er blitt beskrevet i sammenheng med den detaljerte beskrivelse derav, så er foregående beskrivelse ment å illustrere og ikke begrense omfanget av oppfinnelsen, definert ved de medfølgende krav. Andre aspekter, fordeler og modifikasjoner ligger innenfor kravenes ramme.

Claims

1. Forbindelse med formel I, hvor: n1 er 0 eller 1, X, uavhengig ved hver forekomst, er (CH2)ivtZ(CH2)n5. Z er O eller en binding, n4 og n5 hver, uavhengig ved hver forekomst, er 0,1,2 eller 3, Y, uavhengig ved hver forekomst, er CO, CH2 eller en binding, R<1> er eller N(R<24>R<25>), R<3>, uavhengig ved hver forekomst, er H, (Ci-e)alkyl, (C3*)cykloalkyl(Ci.6)alkyl eller fenyl eventuelt substituert med halogen R<4> er fenyl eventuelt substituert med OH, halogen, (Ci^alkoksy eller fenyl(Ci-6)alkoksy, R<5>erH, R<6>erHeller(Ci.6)alkyl, R7erHeller(Ci^)alkyl, R<10>erC, R2<1> er H eller fenyl(Ci<)alkyl eventuelt substituert med CN og/eller (Ci^)alkoksy, R24 og R25 er H, forutsatt at: når n1 = 1, R10 er C og R<6> er H, så kan R<10> og R<7> sammen danne eller, når n1 ■ 1, R10 er C, og R<7> er H, så kan R<10> og R<6> sammen danne hvor X , X og X hver, uavhengig, er H eller halogen, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

2. Forbindelse ifølge krav 1, hvor: R<1> er eller NfR^R25), og X er (CH2)n4 eller Z, hvor Z er O, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

3. Forbindelse ifølge krav 2, hvor: R1 er X er (CH2)n4, og ni erO, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

4. Forbindelse ifølge krav 2, hvor: R<1> er R<6> er H, n1 er 1, R<7> og R<10> sammen danner n4 er 1, 2 eller 3, Z er O eller en binding, r>5 er 0, og Y er CO, CH2 eller en binding, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

5. Forbindelse ifølge krav 2, hvor R<1> er R<7>erH, n1 er 1, R6 og R<10> sammen danner n4 er 1,2 eller 3, n5er0, YerCOellerCH2og Z er O eller en binding, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

6. Forbindelse ifølge krav 3, hvor den nevnte forbindelse er 8-butyl-7-(3-(imida2ol-5-yl)-1-oksopropyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetra-hydroimidazo[1.2a]pyrazin, 8-butyl-2-(2-hydroksyfenyl)-7-(imidazol-4-ylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydro-imidazo[1.2a]pyrazin, 8-butyl-7-(4-imidazolylpropyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1.2a]pyrazin, 7-{2-(imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-2-{2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 2-(2-metoksyfenyl)-8-(1 -metylpropyl)-7-(1 -okso-2-(1 -(fenylmetyl)imidazol-5-yl)etyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin, 2-(2-metoksyfenyl)-8-{1 -metylpropyl)-7-(2-(1 -fenylmetyl)imidazol-5-yl)etyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 7-(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-(2-métoksyfenyl)-8-(1-metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 7-((1 H-imida2oM-yl)metyl)-2-(2-metoksyfenyO-8-(1 -metylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 7-((4-imidazolyl)karbonyl)-2-(2-metoksyte^ tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 7-(1 -{4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)metyl-2-(2-metoksyfen -metylpropyl)-5,6,7,84etrahydroimidazo[1.2a]pyrazin> 7-(2-{4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 5- butyl-7-(2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yO^ tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 6- butyl-7-(2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-2-^ fenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 6- butyl-7-(2-(4-cyanofenylmetyl-imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-2-fenyl)-^ tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, 5-butyl-7-(2-(1-(4-cyanofenylmetyl)im^ fenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazoM.2a]pyrazin, 7- (2-{1-{4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-8-(cykloheksyl^ 2-(2-metoksyfenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyraziri, 5-butyl-7-{2-(1H-imidazol-5-yl)-lH3ksoetyl)-2-{2-metoksyfenyl)-5p6,7l8-tetra-hydroimidazo[1.2a]pyrazin, 7-{2-{4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1 -oksoetyl)-2-(2-(fenylmetoksy)-fenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2-a]pyrazin, eller 2-(2-butoksyfenyl)-7-(2-(4-cyanofeny1metyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1.2a]pyrazin, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.;

7. Forbindelse ifølge krav 4, hvor den nevnte forbindelse er 1,2-dihydro-1 -((1 H-imidazol-4-yl)metyl)-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c]-[1.4]benzodiazepin, 1 -(2-{1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 9-brom-1 -{2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 9- klor-1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)irnida2ol-4-yl)*1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 10- brom-1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 1 -(2-{1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl-1,2-dihydro-8-f luor-4-{2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

8. Forbindelse ifølge krav 7, hvor den nevnte forbindelse er 1 -(2-(1 -{4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin)( 9-brom-1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 9- klor-1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 10- brom-1-(2-(1-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1-oksoetyl)-1,2-dihydro-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin), 1 -(2-(1 -(4-cyanofenylmetyl)imidazol-4-yl)-1 -oksoetyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-metoksyfenyl)-imidazo[1.2-c][1.4]benzodiazepin).

9. Forbindelse ifølge krav 5, hvor den nevnte forbindelse er 5-(2-{1-(4-cyanofenylmetyl)imidazol-5-yl)-1-oksoetyl)-5,6-dihydro-2-fenyl-1 H-imidazo[1.2-a][1.4]benzodiazepin), eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

10. Forbindelse ifølge krav 2, hvor den nevnte forbindelse er 1,2-dihydro-1 -(2-(imidazol-1 -yl)-1 -oksoetyl)-4-(2-metoksyfenyl)imidazo[1.2-a][1.4]benzodiazepin, 1,2-dihydro-(4-(2-metoksyfenyl)-1 -(2-{pyridin-3-yl)-1 -oksoetyl)imidazo[1.2-a][1.4]benzodiazepin), eller 1,2-dihydro-4-{2-metoksyfenyl)-1 -(2-(pyridin-4-yl)-1 -oksoetyl)imidazoI1.2a]-[1.4]benzodiazepin, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

11. Forbindelse ifølge krav 2, hvor den nevnte forbindelse er eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.

12. Farmasøytisk preparat som omfatter en effektiv mengde av en forbindelse ifølge krav 1, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav og en farmasøytisk akseptabel bærer.

13. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av en sykdom, hvor den nevnte sykdom er fra gruppen som består av fibrose, godartet prostatahyperplasi, aterosklerose, restenose, bryst-kreft, tykktarm-kreft, pancreas-kreft, prostata-kreft, lunge-kreft, ovarie-kreft, epidermal kreft, hematopoietisk kreft, og hepatitt-deltavirus-infeksjon.

14. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, til fremstilling av et terapeutisk preparat for behandling av en sykdom, hvor den nevnte sykdom er en Ras-avhengig tumor.

15. Anvendelse av en forbindelse Helge krav 1, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, til fremstilling av et terapeutisk preparat for å inhibere prenyl-transferase.

16. Forbindelse ifølge krav 2, hvor den nevnte forbindelse er eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.