DE69915514T2

DE69915514T2 - Prenyltransferase-inhibitoren

Info

Publication number: DE69915514T2
Application number: DE69915514T
Authority: DE
Inventors: D. Thomas GORDON; A. Barry MORGAN
Original assignee: Societe de Conseils de Recherches et dApplications Scientifiques SCRAS SAS
Current assignee: Ipsen Pharma SAS
Priority date: 1998-12-31
Filing date: 1999-12-30
Publication date: 2005-01-05
Anticipated expiration: 2019-12-31
Also published as: EP1382607B1; EP1140942B1; ATE261447T1; US20080176835A1; EP1382607A3; DE69915514D1; EP1382607A2; NO321057B1; CZ20012358A3; EP1140942A2; US20060142275A1; DK1140942T3; HUP0104708A2; ES2215420T3; DE69941307D1; RU2241712C9; NO20013281L; AU2717100A; US7361656B2; WO2000039130A3

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Die Familie der Ras-Proteine ist wichtig im Signalübertragungsweg, der das Zellwachstum moduliert. Das Protein wird in dem Ribosom produziert, in das Cytosol abgegeben und nach der Translation modifiziert. Die erste Stufe in der Reihe der nach der Translation erfolgenden Modifikationen ist die Alkylierung von Cys¹⁶⁸ mit Farnesyl- oder Geranylgeranylpyrophosphat in einer Reaktion, die durch Prenyltransferaseenzyme wie Farnesyltransferase und Geranylgeranyltransferase katalysiert wird (JF Hancock et al., Cell 57: 1167–1177 (1989)). Anschließend werden die drei C-terminalen Aminosäuren abgespalten (L. Gutierrez et al., EMBO J. 8: 1093–1098 (1989)), und das terminale Cys wird in einen Methylester umgewandelt (S. Clark et al., Proc. Natl Acad. Sci. (USA) 85: 4643–4647 (1988)). Einige Formen von Ras werden auch an Cysteinresten, die unmittelbar N-terminal zu Cys¹⁶⁸ sind, reversibel palmitoyliert (JE Buss et al., Mol. Cell. Biol. 6: 116–122 (1986)). Es wird angenommen, dass diese Modifikationen die Hydrophobizität des C-terminalen Bereiches von Ras erhöhen, wodurch herbeigeführt wird, dass er sich an der Oberfläche der Zellmembran anordnet. Die Anordnung von Ras an der Zellmembran ist für die Signalübertragung notwendig (BM Willumsen et al., Science 310: 583–586 (1984)).
Onkogene Formen von Ras werden in einer relativ großen Anzahl von Krebsen beobachtet, die über 50% der Colonkrebse und über 90% der Pankreaskrebse einschließen (JL Bos, Cancer Research 49: 4682–4689 (1989)). Diese Beobachtungen legen nahe, dass die Intervention der Funktion der Ras-vermittelten Signalübertragung bei der Behandlung von Krebs brauchbar sein kann.
Es ist zuvor gezeigt worden, dass das C-terminate Tetrapeptid von Ras das "CAAX"-Motiv aufweist (wobei C Cystein ist, A eine aliphatische Aminosäure ist und X irgendeine Aminosäure ist). Tetrapeptide mit dieser Struktur sind, wie gezeigt wurde, Inhibitoren von Prenyltransferasen (Reiss et al., Cell 62: 81–88 (1990)). Die schwache Potenz dieser frühen Farnesyltransferaseinhibitoren hat die Suche nach neuen Inhibitoren mit günstigerem pharmakokinetischem Verhalten erforderlich gemacht (GL James et al., Science 260: 1937–1942 (1993); NE Kohl et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 91: 9141–9145 (1994); SJ de-Solms et al., J. Med. Chem. 38: 3967–3971 (1995); T. Nagasu et al., Cancer Research 55: 5310–5314 (1995); EC Lerner et al., J. Biol. Chem. 270: 26802–26806 (1995); EC Lerner et al., J. Biol. Chem. 270: 26770 (1995) und James et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4454 (1996)).
Es ist in letzter Zeit gezeigt worden, dass ein Prenyltransferaseinhibitor das Wachstum Ras-abhängiger Tumoren in Nacktmäusen blockieren kann (NE Kohl et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 91: 9141–9145 (1994)). Es ist außerdem gezeigt worden, dass über 70% einer großen Probennahme von Tumorzelllinien durch Prenyltransferaseinhibitoren mit Selektivität gegenüber nicht-transformierten Epithelialzellen inhibiert werden (I. Sepp-Lorenzino et al., Cancer Research, 55: 5302–5309 (1995)). Das Inhibieren von Farnesylierung ist als Verfahren zur Behandlung der Hepatitis delta Virusinfektion offenbart worden (P. Casey et al., WO 97/31641).
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Gemäß einem Aspekt umfasst die Erfindung eine Verbindung der Formel (I):
in der n1 0 oder 1 ist,
X jeweils unabhängig für jedes Auftreten (CHR¹¹)_n3(CH₂)_n4Z(CH₂)_n5 ist,
Z O, N(R¹²), S oder eine Bindung ist,
n3 jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0 oder 1 ist,
n4 und n5 jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0, 1, 2 oder 3 sind,
Y jeweils unabhängig für jedes Auftreten CO, CH₂, CS oder eine Bindung ist,
R¹
oder N(R²⁴R²⁵) ist,
R², R¹¹ und R¹² jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl und Aryl sind, wobei der Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R⁸ oder R³⁰ substituiert ist,
R³ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C_1-6)-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R³⁰ substituiert ist,
R⁴ und R⁵ jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, Aryl und heterocyclischer Rest ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R³⁰ substituiert ist, wobei jeder der Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt ist, oder R⁴ und R⁵ zusammengenommen mit den Kohlenstoffen, an die sie gebunden sind, Aryl bilden,
R⁶ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C_1-6)-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus OH, (C_1-6)-Alkyl, (C_1-6)-Alkoxy, -N(R⁸R⁹), -COOH, -CON(R⁸R⁹) und Halogen substituiert ist, wobei R⁸ und R⁹ jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H, (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_2-6)-Alkinyl, Aryl oder Aryl-(C_1-6)-alkyl ist,
R⁷ unabhängig für jedes Auftreten H, =O, =S oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C_1-6)-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus OH, (C_1-6)-Alkyl, (C_1-6)-Alkoxy, -N(R⁸R⁹), -COOH, -CON(R⁸R⁹) und Halogen substituiert ist,
R¹⁰ C ist,
oder wenn n1 = 0 ist, R⁶ und R⁷ mit den Kohlenstoffatomen, an die sie gebunden sind, zusammengenommen werden können, um Aryl oder Cyclohexyl zu bilden,
R²¹ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl oder Aryl-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, von denen jeder unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus R⁸ und R³⁰,
R²² H, (C_1-6)-Alkylthio, (C_3-6)-Cycloalkylthio, R⁸-CO- oder ein Substituent mit der Formel
ist,
X²⁴ und X²⁵ jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H, (C_1-6)-Alkyl oder Aryl-(C_1-6)-alkyl ist,
R³⁰ jeweils unabhängig für jedes Auftreten (C_1-6)-Alkyl, -O-R⁸, -S(O)_n6R⁸, -S(O)_n7-N(R⁸R⁹), -N(R⁸R⁹), -CN, -NO₂, -CO₂R⁸, -CON(R⁸R⁹), -NCO-R⁸ oder Halogen ist,
n6 und n7 jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0, 1 oder 2 ist,
wobei der heterocyclische Rest Azepinyl, Benzimidazolyl, Benzisoxazolyl, Benzofurazanyl, Benzopyranyl, Benzothiopyranyl, Benzofuryl, Benzothiazolyl, Benzothienyl, Benzoxazolyl, Chromanyl, Cinnolinyl, Dihydrobenzofuryl, Dihydrobenzothienyl, Dihydrobenzothiopyranyl, Dihydrobenzothiopyranylsulfon, Furyl, Imidazolidinyl, Imidazolinyl, Imidazolyl, Indolinyl, Indolyl, Isochromanyl, Isoindolinyl, Isochinolinyl, Isothiazolidinyl, Isothiazolyl, Isothiazolidinyl, Morpholinyl, Naphthyridinyl, Oxadiazolyl, 2-Oxoazepinyl, 2-Oxopiperazinyl, 2-Oxopiperidinyl, 2-Oxopyrrolidinyl, Piperidyl, Piperazinyl, Pyridyl, Pyridyl-N-oxid, Chinoxalinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydroisochinolinyl, Tetrahydrochinolinyl, Thiamorpholinyl, Thiamorpholinylsulfoxid, Thiazolyl, Thiazolinyl, Thienofuryl, Thienothienyl oder Thienyl ist, und
wobei das Aryl Phenyl oder Naphthyl ist,
mit der Maßgabe, dass
wenn n1 = 1 ist, R¹⁰ C ist und R⁶ H ist, dann R¹⁰ und R⁷ zusammen genommen werden können, um
zu bilden, oder
wenn n1 = 1 ist, R¹⁰ C ist und R⁷ =O, -H oder =S ist, dann R¹⁰ und R⁶ zusammengenommen werden können, um
zu bilden,
worin X¹, X² und X³ jedes jeweils unabhängig H, Halogen, -NO₂, -NCO-R⁸, -CO₂R⁸, -CN oder -CON(R⁸R⁹) ist, und
mit der Maßgabe, dass die Struktur R¹-X-Y keinen (2-Amino-3-thiopropyl)-Anteil oder keinen (2-Amino-1-oxo-3-thiopropyl)-Anteil enthält,
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Eine bevorzugte Gruppe von Verbindungen der Formel (I) mit der Bezeichnung Gruppe A ist eine, bei der
R¹
oder N(R²⁴R²⁵) ist, und
X CH(R¹¹)_n3(CH₂)_n4 oder Z ist, wobei Z O, S oder N(R¹²) ist,
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Eine andere bevorzugte Gruppe von Verbindungen der Formel (I), die als Gruppe B bezeichnet werden, ist eine, bei der
R¹
ist,
X CH(R¹¹)_n3(CH₂)_n4 ist und
n1 0 ist,
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Eine andere bevorzugte Gruppe von Verbindungen der Formel (I), die als Gruppe C bezeichnet werden, ist eine, bei der
R¹
ist,
n3, n4 und n5 jeweils 0 ist,
Z eine Bindung ist,
Y unabhängig für jedes Auftreten CO oder CS ist, und
n1 0 ist,
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Eine andere bevorzugte Gruppe von Verbindungen der Formel (I), die als Gruppe D bezeichnet werden, ist eine, bei der
R¹
ist,
R⁶ H ist,
R⁷ und R¹⁰ zusammengenommen
bilden
n3 1 ist und R¹¹ H ist,
Z = O oder eine Bindung ist,
n5 0 ist und
Y CO, CH₂ oder eine Bindung ist;
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Eine andere bevorzugte Gruppe von Verbindungen der Formel (I), die als Gruppe E bezeichnet werden, ist eine, bei der
R¹
ist,
R⁷ H oder =O ist,
n1 1 ist,
R⁶ und R¹⁰ zusammengenommen
bilden,
n3 1 ist und R¹¹ H ist,
n5 0 ist,
Y CO oder CH₂ ist und
Z O oder eine Bindung ist,
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Gemäß einem anderen Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine oder meh rere einer Verbindung der Formel (I) wie oben definiert, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben, und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger umfasst.
Gemäß einem noch anderen Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zum Inhibieren von Prenyltransferasen (z. B. Farnesyltransferase oder Geranylgeranyltransferase) bei einem Individuum, z. B. einem Säugetier wie einem Menschen, indem dem Individuum eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel I wie hier zuvor definiert oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben verabreicht wird. Gemäß einem weiteren Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Behandlung von Restenose oder proliferierenden Gewebeerkrankungen (z. B. Tumor) bei einem Individuum, indem dem Individuum eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes derselben verabreicht wird. Beispiele für proliferierende Gewebeerkrankungen schließen sowohl jene ein, die mit der Proliferation gutartiger (benigner) (z. B. nicht-bösartiger) Zellen verbunden sind, wie Fibrose, benigne Prostatahyperplasie, Atherosklerose und Restenose, und jene, die mit der Proliferation bösartiger (maligner) Zellen verbunden sind, wie Krebs (z. B. ras-mutante Tumoren). Beispiele für behandelbare Tumoren schließen Brust-, Colon-, Pankreas-, Prostata-, Lungen-, Ovar-, Epidermal- und hämatopoietische Krebse ein (I. Sepp-Lorenzino et al., Cancer Research 55: 5302 (1995)).
Gemäß einem noch weiteren Aspekt betrifft die vorliegende Erfindung die Verwendung von einer oder mehreren Verbindungen der Formel (I) wie zuvor definiert oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes derselben, zur Bindung an eine Prenyltransferase, wie bei der Durchführung eines in vitro- oder in vivo-Assays.
AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Im Allgemeinen können die Verbindungen der Formel (I) nach Verfahren hergestellt werden, die jene einschließen, die in der Chemie zur Herstellung von Verbindungen bekannt sind. Es werden bestimmte Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) als weitere Merkmale der Erfindung zur Verfügung gestellt, und sie werden durch die hier eingeschlossenen Reaktionsschemata und Beispiele veranschaulicht.
In den obigen Strukturformeln und in der vorliegenden Anmeldung haben die folgenden Begriffe die angegebenen Bedeutungen, wenn nicht anders angegeben:
Der Begriff Alkyl soll jene Alkylgruppen mit der angegebenen Anzahl der Kohlenstoffatome in geradkettiger oder verzweigter Konfiguration einschließen. Beispielhaft für diese Alkylgruppen sind Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, sek.-Butyl, tert.-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Hexyl, Isohexyl und dergleichen. Wenn der Begriff C₀-Alkyl in eine Definition eingeschlossen ist, soll dies eine einzelne kovalente Bindung bedeuten.
Der Begriff Cycloalkyl soll eine Monocycloalkylgruppe oder eine Bicycloalkylgruppe mit der angegebenen Anzahl von Kohlenstoffatomen einschließen. Beispielhaft für solche Cycloalkylgruppen sind Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclohexyl und dergleichen.
Der Begriff Alkenyl soll Kohlenwasserstoffgruppen mit einer oder mehreren Doppelbindungen und der angegebenen Anzahl von Kohlenstoffatomen in geradkettiger oder verzweigter Konfiguration einschließen. Beispielhaft für solche Alkenylgruppen sind Ethenyl, Propenyl, Isopropenyl, Butenyl, sek.-Butenyl, tert.-Butenyl, Pentenyl, Isopentenyl, Hexenyl, Isohexenyl und dergleichen.
Der Begriff Cycloalkenyl soll eine Monocycloalkenylgruppe oder eine Bicycloalkenylgruppe der angegebenen Kohlenstoffzahl mit einer oder mehreren Doppelbindungen einschließen, die aber nicht genügend Doppelbindungen aufweist, um die Gruppe aromatisch zu machen. Beispielhaft für diese Cycloalkenylgruppen sind Cyclopentenyl, Cyclohexenyl, Cycloheptenyl und dergleichen.
Der Begriff Alkinyl soll jene Alkinylgruppen, d. h. Kohlenwasserstoffgruppen mit einer oder mehreren Dreifachbindungen und der angegebenen Zahl der Kohlenstoffatome in geradkettiger oder verzweigter Konfiguration einschließen. Beispielhaft für solche Alkinylgruppen sind Ethinyl, Propinyl, Butinyl, Pentinyl, Isopentinyl, Hexinyl, Isohexinyl und dergleichen.
Der Begriff Alkylthio soll jene Alkylthiogruppen, d. h. Kohlenwasserstoffgruppen einschließen, die über ein Schwefelatom an das Molekül gebunden sind und die angegebene Anzahl der Kohlenstoffatome in einer geradkettigen oder verzweigten Konfiguration haben. Beispielhaft für diese Alkylgruppen sind Methylthio, Ethylthio, Propylthio, Isopropylthio, Butylthio, sek.-Butylthio, tert.-Butylthio, Pentylthio, Isopentylthio, Hexylthio, Isohexylthio und dergleichen.
Der Begriff Cycloalkylthio soll eine Monocycloalkylthiogruppe oder eine Bicycloalkylthiogruppe der angegebenen Kohlenstoffzahl einschließen. Beispielhaft für diese Cycloalkylthiogruppen sind Cyclopentylthio, Cyclohexylthio und dergleichen.
Der Begriff Alkoxy soll jene Alkoxygruppen mit der angegebenen Zahl von Kohlenstoffatomen in geradkettiger oder ver zweigter Konfiguration einschließen. Beispielhaft für diese Alkoxygruppen sind Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Isopropoxy, Butoxy, Isobutoxy, tert.-Butoxy, Pentoxy, Isopentoxy, Hexoxy, Isohexoxy und dergleichen.
Der Begriff Aryl soll im Stand der Technik bekannte aromatische Ringe einschließen, die monocyclisch oder bicyclisch sein können, wie Phenyl und Naphthyl.
Der Begriff heterocyclischer Rest steht hier für einen 5- bis 7-gliedrigen monocyclischen oder 8- bis 11-gliedrigen bicyclischen oder 11- bis 15-gliedrigen tricyclischen heterocyclischen Ring, der gesättigt oder ungesättigt ist und aus Kohlenstoffatomen und einem bis vier Heteroatomen besteht, die unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus N, O und S. Ebenfalls eingeschlossen sind irgendwelche bicyclische Gruppen, bei denen jeder der oben definierten heterocyclischen Ringe an einen Benzolring kondensiert ist, wobei der heterocyclische Ring an irgendein Heteroatom oder Kohlenstoffatom gebunden sein kann. Beispiele für diese heterocyclischen Anteile schließen Azepinyl, Benzimidazolyl, Benzisoxazolyl, Benzofurazanyl, Benzopyranyl, Benzothiopyranyl, Benzofuryl, Benzothiazolyl, Benzothienyl, Benzoxazolyl, Chromanyl, Cinnolinyl, Dihydrobenzofuryl, Dihydrobenzothienyl, Dihydrobenzothiopyranyl, Dihydrobenzothiopyranylsulfon, Furyl, Imidazolidinyl, Imidazolinyl, Imidazolyl, Indolinyl, Indolyl, Isochromanyl, Isoindolinyl, Isochinolinyl, Isothiazolidinyl, Isothiazolyl, Isothiazolidinyl, Morpholinyl, Naphthyridinyl, Oxadiazolyl, 2-Oxoazepinyl, 2-Oxopiperazinyl, 2-Oxopiperidinyl, 2-Oxopyrrolidinyl, Piperidyl, Piperazinyl, Pyridyl, Pyridyl-N-oxid, Chinoxalinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydroisochinolinyl, Tetrahydrochinolinyl, Thiamorpholinyl, Thiamorpholinylsulfoxid, Thiazolyl, Thiazolinyl, Thienofuryl, Thienothienyl oder Thienyl und dergleichen, sind jedoch nicht auf diese begrenzt.
Der Durchschnittschemiker wird erkennen, dass bestimmte Kombinationen heteroatomhaltiger Substituenten, die in dieser Erfindung aufgeführt sind, Verbindungen definieren, die unter physiologischen Bedingungen weniger stabil sind. Demzufolge sind diese Verbindungen weniger bevorzugt.
Der Begriff Halogen oder Halo soll die Halogenatome Fluor, Chlor, Brom und Iod einschließen.
Wenn eine chemische Struktur hier einen von ihr ausgehenden Pfeil aufweist, zeigt der Pfeil die Bindungsstelle. Die Struktur
ist beispielsweise eine Pentylgruppe. Wenn nahe dem Pfeil ein Wert in Klammern steht, gibt der Wert an, wo in der Verbindung sich die Bindungsstelle befindet. Bei der allgemeinen Formel (I) wie hier definiert
Ergibt sich, wenn R¹⁰ und R⁷ zusammengenommen
bilden, die folgende Struktur:
Wenn eine Linie durch einen cyclischen Anteil gezogen wird, zeigt die Linie, dass der Substituent an irgendeinen der verfügbaren Bindungspunkte an den cyclischen Anteil gebunden sein kann. Beispielsweise bedeutet
dass der Substituent "X" ortho, meta oder para zu dem Bindungspunkt gebunden sein kann. Wenn zudem eine Linie durch einen bicyclischen oder tricyclischen Anteil gezogen wird, zeigt die Linie, dass der Substituent an irgendeinem der verfügbaren Bindungspunkte in irgendeinem der Ringe an den bicyclischen oder tricyclischen Anteil gebunden sein kann. Wenn in ähnlicher Weise ein Pfeil durch einen cyclischen Anteil gezogen wird, zeigt der Pfeil, dass der Bindungspunkt des cyclischen Anteils an die Verbindung an irgendeinem der verfügbaren Bindungspunkte an dem cyclischen Anteil liegen kann.
Wenn zudem ein Pfeil durch einen bicyclischen oder tricyclischen Anteil gezogen ist, zeigt der Pfeil, dass der Bindungspunkt des bicyclischen oder tricyclischen Anteils an der Verbindung an irgendeinem der verfügbaren Bindungspunkte in irgendeinem beliebigen der Ringe des bicyclischen oder tricyclischen Anteils liegen kann.
Einige der Verbindungen der vorliegenden Erfindung können mindestens ein asymmetrisches Zentrum aufweisen. Zusätzliche asymmetrische Zentren können in Abhängigkeit von der Beschaffenheit der verschiedenen Substituenten in dem Molekül in dem Molekül vorhanden sein. Jedes derartige asymmetrische Zentrum produziert zwei optische Isomere, und es ist vorgesehen, dass alle derartigen optischen Isomere, ob getrennte, reine oder teilgereinigte optische Isomere, racemische Mischungen oder diastereomere Mischungen davon vom Umfang der vorliegenden Erfindung eingeschlossen sind.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können im Allgemeinen in Form ihrer pharmazeutisch akzeptablen Säureadditionssalze isoliert werden, wie Salze, die von anorganischen und organischen Säuren abgeleitet sind. Beispiele für solche Säuren sind Salz-, Salpeter-, Schwefel-, Phosphor-, Ameisen-, Essig-, Trifluoressig-, Propion-, Malein-, Bernstein-, D-Wein-, L-Wein-, Malon-, Methansulfonsäure und dergleichen sein. Zudem können bestimmte Verbindungen, die eine saure Funktion wie Carboxy enthalten, in Form ihres anorganischen Salzes isoliert werden, bei dem das Gegenion ausgewählt sein kann aus Natrium, Kalium, Lithium, Calcium, Magnesium und dergleichen, sowie aus organischen Basen.
Die pharmazeutisch akzeptablen Salze können gebildet werden, indem etwa 1 Äquivalent einer Verbindung der Formel (I) genommen und mit etwa 1 Äquivalent oder mehr der geeigneten entsprechenden Säure des gewünschten Salzes kontaktiert wird. Aufarbeitung und Isolierung des resultierenden Salzes ist Durchschnittsfachleuten wohl bekannt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können durch orale, parenterale (z. B. intramuskuläre, intraperitoneale, intravenöse oder subkutane Injektion oder Implantat), nasale, vaginale, rektale, sublinguale oder topische Verabreichungswege verabreicht werden, und kann mit pharmazeutisch akzeptablen Trägern formuliert werden, um Dosierformen zu liefern, die für jeden Verabreichungsweg geeignet sind. Demnach schließt die vorliegende Erfindung in ihren Umfang pharmazeutische Zusammensetzungen ein, die als aktiven Bestandteil mindestens eine der Verbindungen der Formel (I) in Assoziation mit einem pharmazeutisch akzeptablen Träger umfasst.
Feste Dosierformen für orale Verabreichung schließen Kapseln, Tabletten, Pillen, Pulver und Körnchen ein. In diesen festen Dosierformen wird die aktive Verbindung mit mindestens einem inerten pharmazeutisch akzeptablen Träger gemischt, wie Sucrose, Lactose oder Stärke. Solche Dosierformen können auch, wie es üblich ist, zusätzliche Substanzen umfassen, die von inerten Verdünnungsmitteln verschieden sind, z. B. Schmiermittel wie Magnesiumstearat. Im Fall von Kapseln, Tabletten und Pillen können die Dosierformen auch Puffermittel umfassen. Tabletten und Pillen können zusätzlich mit magensaftfesten Beschichtungen hergestellt werden.
Flüssige Dosierformen für die orale Verabreichung schließen pharmazeutisch akzeptable Emulsionen, Lösungen, Sirupe, diejenigen Elixiere ein, die inerte Verdünnungsmittel enthalten, die üblicherweise in der Technik verwendet werden, wie Wasser. Neben solchen inerten Verdünnungsmittel können Zusammensetzungen auch Hilfsstoffe wie Benetzungsmittel, Emulgier- und Suspendiermittel, und Süßungs-, Aromatisierungs- und Parfümiermittel einschließen.
Erfindungsgemäße Zubereitungen für die parenterale Verabreichung schließen sterile wässrige oder nicht-wässrige Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen ein. Beispiele für nicht-wässrige Lösungsmittel oder Vehikel sind Propylenglykol, Polyethylenglykol, pflanzliche Öle, wie Olivenöl und Maisöl, Gelatine und injizierbare organische Ester, wie Ethyloleat. Solche Dosierformen können auch Hilfsstoffe enthalten, wie Konservierungs-, Benetzungs-, Emulgier- und Dispergiermittel. Sie können beispielsweise durch Filtration durch einen Bakterien zurückhaltenden Filter, durch Einbringung sterilisierender Mittel in die Zusammensetzungen, durch Bestrahlen der Zusammensetzungen oder durch Erhitzen der Zusammensetzungen sterilisiert werden. Sie können auch in Form steriler fester Zusammensetzungen hergestellt werden, die in sterilem Wasser oder irgendwelchem anderen sterilen injizierbaren Medium unmittelbar vor Gebrauch gelöst werden können.
Zusammensetzungen für die rektale oder vaginale Verabreichung sind vorzugsweise Zäpfchen, die zusätzlich zu der aktiven Substanz Hilfsmittel wie Kakaobutter oder Zäpfchenwachs enthalten.
Zusammensetzungen für die nasale und sublinguale Verabreichung werden auch mit Standardhilfsmitteln hergestellt, die in der Technik wohl bekannt sind.
Im Allgemeinen kann eine effektive Dosierung des aktiven Bestandteils in den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen variiert werden; es ist jedoch nötig, dass die Menge des aktiven Bestandteils so ist, dass eine geeignete Dosierform erhalten wird. Die gewählte Dosis hängt von der gewünschten therapeutischen Wirkung, dem Verabreichungsweg und der Behandlungsdauer ab, die alle zu dem Wissen von Durchschnittsfachleuten gehören. Menschen und anderen Tieren, z. B. Säugetieren, werden im Allgemeinen Dosierniveaus zwischen 0,0001 bis 100 mg/kg Körpergewicht täglich verabreicht.
Ein bevorzugter Dosierbereich ist 0,01 bis 10,0 mg/kg Körpergewicht täglich, das als Einzeldosis oder in mehrere Dosen unterteilt verabreicht werden kann.
Erfindungsgemäße Verbindungen können auf Aktivität bei verankerungsabhängigem Wachstum von Humantumorzelllinien gemäß dem folgenden Assay bewertet werden, und dies wurde durchgeführt.
Eine 96-Mulden-Platte wurde am Tag 0 mit Zellen beimpft und am Tag 1 96 Stunden lang mit den folgenden Konzentration einer erfindungsgemäßen Verbindung behandelt: 50, 25, 12,5, 6,25, 3,12, 1,56, 0,78, 0,39 und 0,00 μM. Am Ende dieses Zeitraums wurde die Quantifizierung der Zellproliferation durch einen kolorimetrischen Assay bewertet, der auf der Spaltung des Tetrazoliumsalzes WST1 durch mitochondriale Dehydrogenasen in lebensfähigen Zellen basiert, die zur Formazanbildung führt. Diese Experimente wurden zwei Mal in Achterreihen wiederholt, was eine Bestimmung eines Fensters der Verbindungskonzentration einschließlich des IC₅₀-Werts ermöglicht.
Das gerade eben beschriebene Protokoll wurde unter Verwendung der folgenden Humantumorzelllinien durchgeführt: Prostata: DU145 Adenocarcinom mit WT-Ras, beständig gegen L744-832; Colon: HT29 Adenocarcinom mit Ras vom Wild-Typ (WT), empfindlich gegenüber L744-832; Pankreas: MIA PaCa-2, Carcinom mit Ki-ras-Mutation; Lunge: A427, Carcinom mit Ki-ras-Mutation.
Es sei darauf hingewiesen, dass die vorhergehende Beschreibung, obwohl die Erfindung im Zusammenhang mit ihrer ausführlichen Beschreibung dargestellt worden ist, veranschaulichend sein soll und den Umfang der Erfindung nicht ein schränken soll, der durch den Umfang der angefügten Ansprüche definiert ist.
BEISPIELE Verbindung 1: 8-Butyl-7-(3-imidazol-5-yl)-1-oxopropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 2: 8-Butyl-2-(2-hydroxyphenyl)-7-(imidazol-4-ylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 3: 8-Butyl-7-(4-imidazolylpropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 4: 7-(2-Imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 5: 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(1-oxo-2-(1-(phenylmethyl)imidazol-5-yl)ethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimid-azo[1,2a]pyrazin
Verbindung 6: 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(2-(1-phenylmethyl)-imidazol-5-yl)ethyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 7: 7-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxo-ethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methoxypropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 8: 7-((1H-Imidazol-4-yl)methyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 9: 7-((4-Imidazolyl)carbonyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 10: 7-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)methyl-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 11: 5-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-5,6-dihydro-2-phenyl-1H-imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 12: 7-(2-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Verbindung 13: 5-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 14: 6-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 15: 6-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 16: 5-Butyl-7-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 17: 7-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-8-(cyclohexylmethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 18: 5-Butyl-7-(2-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 19: 7-(2-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-(phenylmethoxy)phenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1,2a]pyrazin
Verbindung 20: 2-(2-Butoxyphenyl)-7-(2-(4-cyanophenylmethyl)-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Verbindung 21: 1,2-Dihydro-1-((1H-imidazol-4-yl)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Verbindung 22: 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 23: 9-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Verbindung 24: 9-Chlor-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Verbindung 25: 10-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Verbindung 26: 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Verbindung 27: 1,2-Dihydro-1-(2-(imidazol-1-yl)-1-oxoethyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 28: 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-(pyridin-3-yl)-1-oxoethyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 29: 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-(pyridin-4-yl)-1-oxoethyl)imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 30: 1-(2-(1-Benzylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 31: 1-(2-(1-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl-9,10-difluoro-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 32: 4-(2-Bromphenyl)-1-(2-(1-[(4-cyano)phenylmethyl]imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoroimidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 33: 1-(2-(1-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-10-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Verbindung 34: 1-(2-(1-((4-Cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2-a][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 35: 10-Brom-1-(2-(1-((4-cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 36: 1-(2-(1-((4-Cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-phenylimidazol-[1,2a][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 37: 4-(2-Bromphenyl)-1-(2-(1-((4-cyano-3-methoxy)-phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazol[1,2a][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 38: 1-(2-(1-((3-Methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2a][1,4]-benzodiazepin
Verbindung 39: 1-(2-(5-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazol-1-yl)-1-oxoethyl-2,5-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo-[1,2c][1,4]-benzodiazepin
EXPERIMENTELLER TEIL
In den folgenden Beispielen und Schemata werden die Substituentvariablen wie hier definiert verwendet. Die Substituentvariablen der Schemata und Beispiele stimmen nicht notwen digerweise mit jenen überein, die in den Ansprüchen definiert sind.
Beispiel 1: 8-Butyl-7-(3-(imidazol-5-yl)-1-oxopropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 1 wurde gemäß dem nachfolgend dargestellten Schema 1 synthetisiert. Schema 1

1.a. H₂/Pd auf Kohle/HOAc
1.b. (BOC)₂O/K₂CO₃/5% wässr. HCl/MeOH
1.c. Cs₂CO₃, Br-CHR⁵COR⁴, dann NH₄OH/Xylole
1.d. Br-CHR⁶CO₂Et/K₂CO₃/DMF
1.e. H₂/Pd auf Kohle/HOAc
1.f. BH₃/THF
1.g. Verbindung ii/DCC/HOAc/DMF
1.h. Tfa/iPr₃SiH

Stufe 1.a. 3-(1H-Imidazol-5-yl)-propionsäure
Urocansäure (Verbindung i, wobei R² H ist) (1,38 g, 10,0 mmol) wurde in 5% wässriger HCl (20 ml) plus MeOH (15 ml) gelöst, die 10% Pd auf Kohle (100 mg) enthielt, und die Mischung wurde über Nacht unter etwa 30 psi H₂ geschüttelt. Der Katalysator wurde durch Filtration durch ein 3 cm Kissen aus Kieselerde entfernt, und das Filtrat wurde zu einem Feststoff konzentriert und über Nacht unter Vakuum getrocknet. Das Rohmaterial wurde ohne weitere Reinigung verwendet. Massenspektrum 141,4 MH⁺.
Stufe 1.b. 3-(1-((1,1-Dimethylethoxy)carbonyl)-imidazol-5-yl)-propionsäure
Das Rohprodukt aus Stufe 1.a. (10,0 mmol) wurde in H₂O (10 ml) gelöst, das K₂CO₃ (2,76 g, 20 mmol) enthielt, und dazu wurde Di-tert.-butyldicarbonat (2,18 g, 10,0 mmol) in Acetonitril (20 ml) gegeben. Die Reaktion wurde etwa 3 Stunden lang kräftig gerührt, dann wurde H₂O (10 ml) zugegeben und die Mischung auf etwa das halbe Volumen konzentriert. Die Mischung wurde mit Zitronensäure angesäuert und mit EtOAc (2 × 25 ml) extrahiert. Die wässrigen Extrakte wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und zu Feststoffen konzentriert, die unter reduziertem Druck getrocknet wurden, um 1,89 g (79%) zu ergeben. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 12,0 bis 12,2 (1H, s), 8,0 bis 8,2 (1H, s), 7,2 bis 7,3 (1H, s), 2,65 bis 2,8 (2H, t), 2,45 bis 2,65 (2H, t), 1,5 bis 1,7 (9H, s).
Stufe 1.c. 2(1-(S)-(((Phenylmethoxy)carbonyl)amino)pentyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol
Cbz-(L)-Norleucin (Verbindung iii, bei der R³ n-Butyl ist) (10,6 g, 40,0 mmol) und Cs₂CO₃ (6,52 g, 20,0 mmol) wurden in 2 : 1 DMF : H₂O (65 ml) kombiniert und die Mischung wurde gequirlt, bis sie homogen war. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand wurde in DMF (75 ml) gelöst, und 2-Brom-2'-methoxyacetophenon (9,16 g, 40,0 mmol) in DMF (50 ml) wurden zugefügt. Die Mischung wurde etwa 15 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt, dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der resultierende Ketoester wurde in Xylolen (250 ml) gelöst, filtriert, NH₄OAc (50,0 g, 0,36 Mol) zugesetzt und die Mischung etwa 3 Stunden lang unter Entfernung von überschüssigem NH₄OAc und freigesetztem Wasser mittels einer Dean-Stark-Falle auf Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde unter vermindertem Druck konzentriert. Es wurde gesättigte NaHCO₃-Lösung (100 ml) zugegeben und das Produkt mit CH2Cl₂ (3 × 50 ml) extrahiert. Die kombinierten CH₂Cl₂-Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, um eine erste Charge aus 6,23 g (Schmelzbereich 118 bis 121°C) der Titelverbindung zu ergeben. Die Mutterlaugen wurden durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von 2 : 3 EtOAc : Hexanen als Eluierungsmittel gereinigt. Reine Produktfraktionen wurden kombiniert und konzentriert, um eine zweite Charge aus 3,26 g (Schmelzbereich 119 bis 122°C) zu ergeben, was eine kombinierte Ausbeute von 9,49 g (60%) der Titelverbindung ergab. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 11,7 bis 11,9 (1H, s), 8,0 bis 8,15 (1H, d), 7,5 bis 7,7 (1H, m), 7,4 bis 7,5 (1H, s), 7,1 bis 7,4 (6H, m), 6,9 bis 7,1 (2H, m), 4,95 bis 5,2 (2H, q), 4,6 bis 4,8 (1H, q), 3,8 bis 4,0 (3H, s), 1,6 bis 2,0 (2H, m), 1,1 bis 1,4 (4H, m), 0,8 bis 1,0 (3H, t).
Stufe 1.d. 1-(2-Ethoxy-2-oxoethyl)-2-(1-(S)-(((phenylmethoxy)-carbonyl)amino)pentyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol
Das Produkt aus Stufe 1.c. (Verbindung iv, wobei R³ n-Butyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵ H ist) (9,40 g, 23,9 mmol) wurde in DMF (50 ml) gelöst und mit K₂CO₃ (6,90 g, 50,0 mmol) und Ethylbromacetat (4,17 ml, 75,0 mmol) behandelt, und die Mischung wurde etwa 2 Stunden lang auf 55°C erhitzt. Die Mischung wurde konzentriert, dann in Ether (100 ml) gelöst und einmal mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (50 ml) und einmal mit gesättigter NaCl-Lösung (50 ml) gewaschen. Die Etherphase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und zu einem Öl konzentriert (11,5 g, 100%), das ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Massenspektrum 480,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,04 bis 8,12 (1H, dd), 7,65 bis 7,85 (1H, t breit), 7,5 bis 7,6 (1H, s), 7,25 bis 7,4 (5H, m), 7,1 bis 7,25 (1H, m), 7,0 bis 7,1 (1H, d), 6,9 bis 7,05 (1H, t), 4,9 bis 5,15 (2H, q), 5,0 bis 5,2 (2H, s), 4,5 bis 4,7 (1H, q), 4,05 bis 4,2 (2H, q), 3,8 bis 4,0 (3H, s), 1,8 bis 2,0 (2H, m), 1,2 bis 1,4 (4H, m), 1,15 bis 1,25 (3H, t), 0,75 bis 0,95 (3H, t).
Stufe 1.e. 8-Butyl-6-oxo-2-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt von Stufe 1.d. (Verbindung v, wobei R³ n-Butyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵ und R⁶ H sind) (11,5 g, 23,9 mmol) wurde in HOAc (100 ml) gelöst, die 10% Pd auf Kohle-Katalysator (500 mg) enthielt, und wurde etwa 3 Stunden lang unter 50 psi H₂ bei Raumtemperatur hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration durch ein 3 cm Kissen aus Kieselerde entfernt, und das Filtrat wurde etwa 2 Stunden lang auf etwa 70°C erwärmt. Die Mischung wurde unter vermindertem Druck zu einem Feststoff konzentriert, in CH₂Cl₂ (100 ml) gelöst und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (125 ml) gewaschen. Die CH₂Cl₂-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und 275 ml Hexane zuge fügt. Produkt wurde abfiltriert und zu konstantem Gewicht getrocknet, um 6,21 g (87%) Produkt zu ergeben, Schmelzbereich 200 bis 202°C, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,5 bis 8,6 (1H, s), 8,0 bis 8,1 (1H, d), 7,4 bis 7,6 (1H, s), 7,1 bis 7,3 (1H, t), 7,0 bis 7,1 (1H, d), 6,9 bis 7,1 (1H, t), 4,55 bis 4,8 (2H, q), 4,55 bis 4,7 (1H, t), 3,8 bis 4,0 (3H, s), 1,75 bis 1,95 (2H, m), 1,1 bis 1,5 (4H, m), 0,8 bis 0,9 (3H, t).
Stufe 1.f. 8-Butyl-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt aus Stufe 1.e. (6,13 g, 20,5 mmol) (Verbindung vi, wobei R³ b-Butyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵ und R⁶ H sind) wurde in THF (100 ml) gelöst und mit 1 M BH₃/THF (82,0 ml, 82,0 mmol) bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang behandelt und dann etwa 3 Stunden lang unter Rückfluss gehalten. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und 4 N HCl (50 ml) tropfenweise zugegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang gerührt, dann durch vorsichtige portionsweise Zugabe von festem K₂CO₃ basisch gemacht. Produkt wurde mit EtOAc (3 × 50 ml) extrahiert. Die EtOAc-Phasen wurden kombiniert, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in MeOH (etwa 50 ml) gelöst, konzentrierte HCl (1,75 ml) zugesetzt und die Lösung wieder unter vermindertem Druck konzentriert. Das Produkt wurde aus MeOH/Et₂O kristallisiert, um 6,76 g (92%) des gewünschten Produkts zu ergeben. Massenspektrum 286,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 10,0 bis 11,5 (2H, s breit), 8,05 bis 8,15 (1H, dd), 8,0 bis 8,1 (1H, s), 7,35 bis 7,5 (1H, t), 7,15 bis 7,3 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 4,8 bis 4,95 (1H, m), 4,4 bis 4,65 (2H, m), 3,9 bis 4,0 (3H, s), 3,65 bis 3,8 (1H, m), 3,5 bis 3,65 (1H, m), 2,45 bis 2,65 (1H, m), 2,1 bis 2,35 (1H, m), 1,5 bis 1,7 (2H, m), 1,25 bis 1,5 (2H, m), 0,85 bis 1,0 (3H, t).
Stufe 1.g. 8-Butyl-7-(3-(((1,1-dimethylethoxy)carbonyl)imidazol-5-yl)-1-oxopropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
DCC (309 mg, 1,50 mmol) und das Produkt aus Stufe 1.b. (Verbindung ii, wobei R² H ist) (720 mg, 3,00 mmol) wurden in THF (10 ml) gelöst und etwa 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Feststoffe wurden abfiltriert, das Produkt aus Stufe 1.f. (Verbindung vii, wobei R³ n-Butyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵, R⁶ und R⁷ H sind) (358 mg, 1,0 mmol) wurde zugesetzt und die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die Mischung wurde zu einem Gummi konzentriert und durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von EtOAc als Eluierungsmittel gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, zu einem Glas konzentriert und zu einem konstanten Gewicht getrocknet. Ausbeute = 500 mg (99%), Massenspektrum 508,2 (MH⁺).
Stufe 1.h. 8-Butyl-7-(3-(imidazol-5-yl)-1-oxopropyl)-2-)(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt von Stufe 1.g. (450 mg, 0,89 mmol) wurde in MeOH (5 ml) gelöst und 4 N HCl zugegeben, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur etwa eine halbe Stunde lang gerührt. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, um 420 mg Rohprodukt zu ergeben. Ein Teil des Rohprodukts (100 mg) wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule (Varian Analytical, Walnut Creek, CA, USA) unter Verwendung eines Gradienten von 10 bis 30% CH₃CN/wässr. HCl (pH 2,0) über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden auf das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert, um reines Produkt (47 mg, 47%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 508,2 MH⁺.
Beispiel 2: 8-Butyl-2-(2-hydroxyphenyl)-7-(imidazol-4-ylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt von Stufe 1.h. (Verbindung viii, wobei R¹, R², R⁵, R⁶ und R⁷ H sind, R³ n-Butyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist, x -CH₂- ist und Y -CO- ist) (320 mg, 0,667 mmol) wurde in einer Mindestmenge THF gelöst, und 1 M Lösung von BH₃ in THF (10,0 ml, 10,0 mmol) wurde tropfenweise unter Rühren zugegeben. Die Mischung wurde etwa 2 Stunden lang unter Rückfluss erhitzt, dann abgekühlt. Eine 4 N HCl-Lösung wurde tropfenweise zugegeben, und die Mischung wurde kurz auf Rückfluss erhitzt und dann durch vorsichtige portionsweise Zugabe von festem K₂CO₃ basisch gemacht. Produkt wurde mit EtOAc (3 × 10 ml) extrahiert und dann wieder mit 0,5% wässriger Tfa (4 × 10 ml) extrahiert. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 0 bis 25% CH₃CN/0,1% wässr. Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden auf das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert und dann zwei Mal erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um reines Produkt (41 mg, 13%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 380,3 MH⁺. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,0 bis 91,1 (1H, s), 7,9 bis 8,05 (2H, m), 7,45 bis 7,55 (1H, s), 7,2 bis 7,3 (1H, t), 7,05 bis 7,15 (1H, d), 6,9 bis 7,0 (1H, t), 4,5 bis 6,0 (3–4H, s breit), 4,0 bis 4,4 (), 1,5 bis 1,7 (2H, m), 1,25 bis 1,5 (2H, m), 0,8 bis 1,0 (3H, t).
Beispiel 3: 8-Butyl-7-(4-imidazolylpropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt von Stufe 1.h. (475 mg, 0, 937 mmol) wurde in MeOH (10 ml) gelöst, und eine Lösung von NaOH (80 mg, 2,0 mmol) in H₂O (1 ml) wurde bei Raumtemperatur zugegeben und die Mischung etwa eine halbe Stunde lang gerührt und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in THF (10 ml) gelöst, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck auf etwa 2 ml konzentriert, und 1 M BH₃/THF (8,0 ml) wurden zugegeben. Die Mischung wurde etwa 3 Stunden lang auf Rückfluss erwärmt und dann durch Zugabe von 5% wässriger HCl mit kurzem Erwärmen auf Rückfluss gequencht. Die Reaktion wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, durch vorsichtige Zugabe von festem NaHCO₃ basisch gemacht und mit CH₂Cl₂ (2 × 10 ml) extrahiert. Die CH₂Cl₂-Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 0 bis 25% CH3CN/wäss. HCl (pH 2,0) über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 270 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden auf etwa das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert, um reines Produkt (64 mg, 15%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrometrie 394,3. MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,0 bis 9,1 (1H, s), 8,0 bis 8,2 (2H, d), 7,9 bis 8,1 (1H, s), 7,4 bis 7,5 (1H, s), 7,35 bis 7,5 (1H, t), 7,1 bis 7,3 (1H, d), 7,0 bis 7,2 (1H, t), 5,0 bis 7,0 (3H, s breit), 4,1 bis 4,5 (3H, m), 3,9 bis 4,0 (3H, s), 3,2 bis 3,7 (2H, d breit), 2,7 bis 3,0 (2H, s breit), 2,6 bis 2,9 (2H, t), 1,9 bis 2,2 (4H, m), 1,0 bis 1,7 (4H, m), 0,8 bis 1,0 (3H, t).
Beispiel 4: 7-(2-Imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroinidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 4 wurde gemäß den Schemata 1 und 4 synthetisiert, wobei die Stufen 1.a. und 1.b. durch die Stufen 4.a. bis 4.c. ersetzt wurden. Schema 4

4.a. HCl/MeOH
4.b. Chlortriphenylmethan/Et₃N/DMF
4.c. 2,5 N NaOH/MeOH

Stufe 4.a. Methyl-4-imidazolacetat
Eine Lösung von 4-Imidazolessigsäure-Natriumsalzhydrat (Verbindung ix, wobei R² H ist) (3,0 g, 18,1 mmol) in MeOH (50 ml) wurde auf 0°C abgekühlt, und wasserfreies HCl-Gas wurde etwa 15 Minuten lang in die Mischung perlen gelassen, während die Reaktionstemperatur unter etwa 5°C gehalten wurde. Die Reaktion wurde etwa eine halbe Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt, und dann wurden die Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt, um ein Öl zu ergeben, das beim Stehen lassen erstarrte. Massenspektroskopie 141,0 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,0 bis 9,2 (1H, s), 7,4 bis 7,6 (1H, s), 3,85 bis 3,95 (2H, 3), 3,6 bis 3,7 (3H, s).
Stufe 4.b. Methyl-1-triphenyl-4-imidazolacetat
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 4.a. (3,2 g, 17,5 mmol) in DMF (50 ml) wurde mit Chlortriphenylmethan (4,88 g, 17,5 mmol) behandelt, und die Reaktion wurde etwa 6 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Das DMF wurde unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand zwischen EtOAc und gesättigter NaCl-Lösung verteilt. Die EtOAc-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert, um Produkt als viskoses Öl zu ergeben (6,96 g, 104%), das beim Stehen lassen kristallisierte. Massenspektrum 383,3 MH⁺.
Stufe 4.c. 1-Triphenylmethyl-4-imidazolessigsäure-Natriumsalz
Das Produkt aus Stufe 4.b. (2,0 g, 2,54 mmol) wurde in MeOH (20 ml) gelöst, und 2,5 N NaOH (2,1 ml) wurde bei Raumtemperatur zugegeben und die Mischung über Nacht gerührt. Lö sungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, um Rohprodukt (2,08 g, 102%) zu ergeben, das in den nachfolgenden Stufen ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Stufen 4.d. bis 4.i. wurden in analoger Weise zu den Stufen 1.c. bis 1.h. von Beispiel 1 ausgehend von Cbz-(L)-Ile-OH anstelle von Cbz-(L)-Nle-OH durchgeführt und ergaben (2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydro-(7-(2-(1-triphenylmethylimidazol-4-yl)-1-oxoethyl)imidazol[1,2a]pyrazin) (Verbindung viii, wobei R¹, R², R⁵, R⁶ und R⁷ H sind, R³ Isobutyl ist und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist).
Stufe 4.j. 7-(2-(1H-Imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Das Produkt von Stufe 4.i. (150 mg, 0,24 mmol) wurde mit Tfa (1,0 ml), die iPr₃SiH (51 μL, 0,25 mmol) enthielt, bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang behandelt. Ether (10 ml) wurde zugegeben, und das Produkt wurde mit 3 × 10 ml 0,1 wässriger Tfa-Lösung extrahiert. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 20 bis 70% CH₃CN/0,1% wässr. Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um reines Produkt (53 mg, 57%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 394,3 MH⁺.
Beispiel 5: 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(1-oxo-2-(1-(phenylmethyl)imidazol-5-yl)ethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 5 wurde gemäß den Schemata 1 und 5 synthetisiert, wobei die Stufen 1.a. und 1.b. durch die Stufen 5.a. bis 5.c. ersetzt wurden. Schema 5

5.a. R¹-Br/CH₃CN
5.b. MeOH/Rückfluss
5.c. 5% wässr. HCl, Rückfluss

Stufe 5.a. Methyl-1-phenylmethyl-3-triphenylmethyl-5-imidazolacetat
Methyl-1-triphenylmethyl-4-imidazolacetat aus Stufe 4.b. (1,12 g, 2,93 mmol) wurde in CH₃CN (15 ml) gelöst und Benzylbromid (349 μl, 2,93 mmol) wurde bei Raumtemperatur zugegeben. Die Mischung wurde etwa 3 Stunden lang unter Rückfluss gehalten und bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und der Rückstand wurde ohne weitere Reinigung in Stufe 5.b. verwendet.
Stufe 5.b. Methyl-1-phenylmethyl-5-imidazolacetat
Das Produkt aus Stufe 5.a. wurde in MeOH (20 ml) gelöst, und die Mischung wurde etwa 1 Stunde lang auf Rückfluss erwärmt. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wurde mit Hexanen (2 × 20 ml) und mit EtOAc (2 × 20 ml) trituriert. Der Rückstand wurde ohne weitere Reinigung in Stufe 5.c. verwendet.
Stufe 5.c. 1-Phenylmethyl-5-imidazolessigsäure
Das Produkt von Stufe 5.b. wurde in 5% wässriger HCl gelöst und etwa 3 Stunden lang auf Rückfluss erwärmt und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 5% bis 35% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um Produkt (360 mg, 49%) als Hydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 217,1 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C), 8,4 bis 8,6 (1H, s), 7,3 bis 7,5 (3H, m), 5,2 bis 5,4 (2H, s), 3,5 bis 3,7 (2H, s).
Die Stufen 5.d. bis 5.g. wurden in einer analogen Weise zu den Stufen 1.c. bis 1.f, von Beispiel 1 ausgehend von Cbz-(L)-Ile-OH anstelle von Cbz-(L)-Nle-OH durchgeführt und ergaben 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1,2a]pyrazin (Verbindung vii, wobei R³ Isobutyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵, R⁶ und R⁷ H sind).
Stufe 5.h. (2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(1-oxo-2-(1-(phenylmethyl)imidazol-5-yl)ethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
DCC (206 mg, 1,00 mmol), HOSu (115 mg, 1,00 mmol), NMM (220 μL, 2,0 mmol), das Produkt aus Stufe 5.g. (179 mg, 0,50 mmol) und das Produkt aus Stufe 5.c. (330 mg, 1,00 mmol) wurden in DMF (10 ml) gelöst und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann etwa 8 Stunden lang auf etwa 50°C erwärmt. Die Mischung wurde zu einem Gummi konzentriert und durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 25% bis 40% CH₃CN/0,1% Tfa über 30 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um Produkt (96 mg, 40%) als Hydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 484,3 MH⁺.
Beispiel 6: 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(2-(1-phenylmethyl)imidazol-5-yl)ethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 6 wurde aus dem Produkt von Stufe 5.h, in analoger Weise zu Beispiel 3 hergestellt. Massenspektrum 470,4 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,15 bis 9,4 (1H, s), 8,05 bis 8,2 (1H, dd), 7,9 bis 8,1 (1H, d), 7,5 bis 7,6 (1H, s), 7,25 bis 7,5 (6H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, dd), 7,05 bis 7,15 (1H, m), 5,5 bis 5,6 (2H, s), 4,6 bis 5,4 (3H, s breit), 4,0 bis 4,3 (2H, m), 3,8 bis 4,0 (4H, m), 3,1 bis 3,5 (2H, m), 2,6 bis 9,95 (4H, m), 1,95 bis 2,15 (1H, m), 1,3 bis 1,5 (1H, m), 1,1 bis 1,3 (1H, m), 0,85 bis 1,0 (3H, d), 0,7 bis 0,85 (3H, t).
Beispiel 7: 7-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
(2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydro-7-(2-(1-triphenylmethylimidazol-4-yl)-1-oxoethyl)imidazol-[1,2a]pyrazin) (Verbindung viii, wobei R¹, R², R⁵, R⁶ und R⁷ H sind, R³ Isobutyl ist und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) aus Beispiel 4, Stufe 4.i. (135 mg, 0,21 mmol) wurde in CH₃CN (3,0 ml) gelöst, und α-Brom-p-tolunitril (42 mg, 0,21 mmol) wurde zugegeben und die Mischung wurde etwa 3 Stunden lang auf Rückfluss erwärmt. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und MeOH (3,0 ml) wurde zugefügt. Die Mischung wurde etwa 1 Stunden lang auf Rückfluss erhitzt, und Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 5% bis 35% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um Produkt (9,8 mg, 8%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 509,3 MH⁺.
Beispiel 8: 7-((1H-Imidazol-4-yl)methyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 8 wurde gemäß den Schemata 1 und 8 synthetisiert, wobei die Stufen 1.a. und 1.b. durch die Stufen 8.a. bis 8.b. ersetzt wurden und Stufe 1.g und 1.h. durch Stufe 8.c und 8.d ersetzt wurde. Schema 8

8.a. (C₆H₅)₃CCl/Et₃N/DMF
8.b. SO₃-Pyridin-Komplex/Et₃N/DMSO
8.c. Verbindung vii/NaBH(OAc)₃/CH₂Cl₂
8.d. Tfa/iPr₃SiH

Stufe 8.a. 4-Hydroxymethyl-1-triphenylmethylimidazol
4-Hydroxymethylimidazolhydrochlorid (Verbindung xiii, wobei R² H ist) (2,50 g, 18,6 mmol) und Et₃N (2,59 ml, 18,6 mmol) wurden in DMF (30 ml) kombiniert und bei Raumtemperatur gerührt. Eine Lösung von Chlortriphenylmethan (5,19 g, 18,6 mmol) in DMF (25 ml) wurde tropfenweise bei Raumtemperatur zugegeben, und die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur etwa 23 Stunden lang gerührt und dann in Eiswasser (300 ml) gegossen. Das Produkt wurde abfiltriert, mit kaltem Wasser (75 ml) gewaschen und mit p-Dioxan (30 ml) trituriert. Das Produkt wurde abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet, um Produkt (4,96 g, 78%) zu ergeben. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 7,3 bis 7,5 (9H, m), 7,25 bis 7,35 (1H, d), 7,0 bis 7,2 (6H, m), 6,7 bis 6,75 (1H, s), 4,15 bis 4,2 (2H, m).
Stufe 8.b. 1-Triphenylmethylimidazol-4-carboxyldehyd
Das Produkt von Stufe 8.a. (2,04 g, 6,00 mmol) wurde in DMSO (10,0 ml) suspendiert, und Et₃N (3,34 ml, 24,0 mmol) und SO₃-Pyridin-Komplex (2,39 g, 15,0 mmol) wurde bei Raumtemperatur zugegeben. Die Mischung wurde etwa 1 Stunde lang auf etwa 110°C erwärmt und dann abkühlen gelassen. Die Mischung wurde in 150 ml H₂O gegossen, und das Produkt wurde abfiltriert. Der Rückstand wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (50 ml) behandelt und 2 Mal mit 100 ml CH₂Cl₂ extrahiert. Die kombinierten CH₂Cl₂-Phasen wurden mit 5% Zitronensäurelösung (100 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde aus MeOH und H₂O kristallisiert. Ausbeute = 1,08 g (53%).
Stufe 8.c. 7-((1-Triphenylmethylimidazol-4-yl)methyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1,2-a]pyrazin
8-(1-Methylpropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazindihydrochlorid (Verbindung vii, wobei R³ 1-Methylpropyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁵ bis R⁷ H sind) (aus Stufe 4.g.) (179 mg, 0,50 mmol) und das Produkt aus Stufe 8.b. (Verbindung xiv, wobei R² H ist) (338 mg, 1,00 mmol) wurden in 1,2-Dichlorethan (2,0 ml) kombiniert. NaBH(OAc)₃ (212 mg, 1,00 mmol) wurde zugegeben, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur etwa 1 Stunde lang rühren gelassen. Die Reaktionsmischung wurde auf eine Silikagelsäule gegossen, und das Produkt wurde unter Verwendung von EtOAc als Eluierungsmittel eluiert. Produktfraktionen wurden kombiniert und konzentriert, um reines Produkt als weißen Schaum (150 mg, 49%) zu ergeben. Massenspektrum 608,2, MH⁺.
Stufe 8.d. 7-((1H-Imidazol-4-yl)methyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Das Produkt aus Stufe 8.c. (Verbindung viii, wobei R¹ Triphenylmethyl ist, R³ Isobutyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R², R⁵ bis R⁷ H sind und X und Y eine Bindung bilden) (160 mg, 0,26 mmol) wurde mit Tfa (10 ml), das iPr₃SiH (0,20 ml, 1,0 mmol) enthielt, etwa 45 Minuten lang bei Raumtemperatur unter N₂ behandelt. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und das Produkt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 20 bis 40% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden auf etwa das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert. Das Produkt wurde zwei Mal erneut als verdünnter HCl lyophilisiert, um reines Produkt (77 mg, 66%) zu ergeben. Massenspektrum 366,2 MH⁺.
Beispiel 9: 7-((4-Imidazolyl)carbonyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 9 wurde gemäß den Schemata 1 und 4 in analoger Weise zu Beispiel 4 ausgehend von Imidazol-4-carbonsäure anstelle von Imidazol-4-essigsäure in Stufe 4.a. durchgeführt. Massenspektrum 380,3 MH⁺.
Beispiel 10: 7-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)methyl-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Das Produkt aus Stufe 8.c. (Verbindung viii, wobei R¹ Triphenylmethyl ist, R³ Isobutyl ist, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist, R², R⁵, R⁶ und R⁷ H sind und X und Y eine Bindung bilden) (150 mg, 0,25 mmol) wurden in CH₃CN (2,0 ml) gelöst. α-Brom-p-tolunitril (49 mg, 0,25 mmol) wurden zugegeben, und die Mischung wurde etwa 1 Stunde lang unter Rückfluss gehalten. Es wurde MeOH (3,0 ml) zugegeben, und die Mischung wurde wieder etwa 1 Stunde lang unter Rückfluss gehalten. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, Et₂O (10 ml) wurde zugegeben, und das Produkt wurde mit 1,0% Tfa (2 × 15 ml) extrahiert. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 20 bis 50 CH₃CN/0,1% Tfa über 40 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden auf etwa das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert. Das Produkt wurde zwei Mal erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um reines Produkt (52 mg, 35%) zu ergeben. Massenspektrum 481,4 MH⁺.
Beispiel 11: 5-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-5,6-dihydro-2-phenyl-1H-imidazol[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Beispiel 11 wurde gemäß den Schemata 5 und 11 synthetisiert. Schema 11

11.a. Cbz-OSu/K₂CO₃/CH₃CN/H₂O
11.b. Cs₂CO3/R⁴COCHBrR⁵ dann NH₄OAc/Xylole
11.c. HBr/HOAc
11.d. 2-Fluorbenzoylchlorid/Et₃N/CH₂Cl₂, dann DMF unter Rückfluss
11.e. BH₃/THF
11.f. 1-Chlorethylchlorformiat/CH₂Cl₂
11.g. MeOH/HCl
11.h. Trt-Cl/Et₃N/DMF
11.i. R¹-Br/EtOAc dann MeOH
11.j. MeOH/H₂O/NaOH
11.k. DCC/HOAt/DMF/Verbindung xix/Et₃N

Stufe 11.a. (N-(Phenylmethoxy)carbonyl)-N-(phenylmethyl)glycin
Eine Lösung von Cbz-OSu (6,18 g, 24,8 mmol) in CH₃CN (55 ml) wurde zu einer Lösung von N-Benzylglycinhydrochlorid (Verbindung xv, wobei R³ H ist) (5,00 g, 24,8 mmol) und K₂CO₃ (6,84 g, 49,6 mmol) in H₂O (35 ml) gegeben, und die Mischung wurde etwa 2 Stunden lang kräftig gerührt. Die Mischung wurde auf etwa 35 ml konzentriert und mit Et₂O (2 × 25 ml) gewaschen. Die wässrige Phase wurde durch vorsichtige Zugabe von konzentrierter HCl auf etwa pH 1 angesäuert, und das Produkt wurde mit EtOAc (2 × 50 ml) extrahiert. Die EtOAc-Phasen wurden kombiniert und über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck zu einem klaren farblosen Öl (7,40 g, 99,7%) konzentriert. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 12,5 bis 12,8 (1H, s breit), 7,1 bis 7,5 (10H, m), 5,0 bis 5,2 (2H, s), 4,4 bis 4,6 (2H, d), 3,8 bis 4,0 (2H, s).
Stufe 11.b. 2-((N-Phenylmethoxy)carbonyl)-N-(phenylmethyl)amino)-methyl)-4-phenylimidazol
Das Produkt aus Stufe 11.a. (7,18 g, 24,0 mmol) wurde in DMF (50 ml) gelöst, und Cs₃CO₃ (3,91 g, 12,0 mmol) in H₂O (20 ml) wurde zugefügt und die Mischung gequirlt, bis sie homogen war. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand wurde in DMF (25 ml) gelöst und 2-Brom-2'-methoxyacetophenon (4,78 g, 24,0 mmol) in DMF (25 ml) zugefügt. Die Mischung wurde etwa 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt, dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der resultierende Ketoester wurde in Xylolen (125 ml) gelöst und filtriert. NH₄OAc (28,0 g, 0,36 Mol) wurde zugegeben und die Mischung etwa 2 Stunden lang unter Entfernung von überschüssigem NH₄OAc und freigesetztem H₂O mittels einer Dean-Stark-Falle auf Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (100 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter Vakuum auf 9,70 g (102%) konzentriert, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Massenspektrum 398,2 MH⁺.
Stufe 11.c. 2-(N-(Phenylmethyl)amino)-methyl)-4-phenylimidazol
Das Produkt aus Stufe 11.b. (Verbindung xvi, bei der R³ und R⁵ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (9,7 g, 24,0 mmol) wurde mit 30% HBr/HOAc (85 ml) bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang behandelt. Zu der resultierenden Aufschlämmung wurde Et₂O (100 ml) gegeben, und das Produkt wurde abfiltriert, mit Et₂O gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet, um Produkt (7,70 g, 75%) als schmutzigweißen Feststoff zu ergeben. Massenspektrum: 264,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,5 bis 11,0 (3H, s breit), 8,1 bis 8,2 (1H, s), 7,8 bis 7,9 (2H, m), 7,55 bis 7,65 (2H, m), 7,45 bis 7,55 (2H, m), 7,35 bis 7,5 (4H, m), 4,5 bis 4,7 (2H, s), 4,3 bis 4,5 (2H, s).
Stufe 11.d. 6-Oxo-2-phenyl-5-(phenylmethyl)-1H-imidazo[1,2a]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 11.c. (4,25 g, 10,0 mmol) wurde in THF (35 ml) suspendiert, und Et₃N (4,9 ml, 35,0 mmol) wurde zugefügt. 2-Fluorbenzoylchlorid (1,19 ml, 10,0 mmol) wurde zugefügt und die Mischung etwa eine Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ (50 ml) aufgenommen und mit gesättigter NaCl-Lösung (2 × 25 ml) gewaschen. Der Rückstand wurde in DMF (35 ml) gelöst, K₂CO₃ (1,38 g, 10,0 mmol) wurde zugegeben und die Mischung etwa eine Stunde lang auf Rückfluss erhitzt. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, die Zwischenstufe wurde in EtOAc (50 ml) gelöst und 2 Mal mit gesättigter NaHCO₃ und 1 Mal mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Die EtOAc-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und auf etwa 25 ml konzentriert. Et₂O (etwa 25 ml) wurde zugegeben, und das Produkt wurde abfiltriert (1,46 g). Mutterlaugen wurden durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von 1 : 1 Hexanen : EtOAc als Eluierungsmittel gereinigt, um eine zweite Charge eines blassorangen Schaums (0,63 g) zu liefern, der in nachfolgenden Reaktionen verwendet wurde. Gesamtausbeute = 57%, Massenspektrum 366,2 MH⁺. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,25 bis 8,35 (1H, s), 7,95 bis 8,05 (1H, dd), 7,6 bis 7,9 (4H, m), 7,5 bis 7,7 (1H, t), 7,3 bis 7,5 (2H, t), 4,6 bis 5,0 (2H, s breit), 4,4 bis 4,6 (2H, s).
Stufe 11.e. 2-Phenyl-5-(phenylmethyl)-1H-imidazo[1,2a][1,4]-benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 11.d. (Verbindung xvii, wobei R³ und R⁵ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (0,63 g, 1,73 mmol) wurde in THF gelöst, und 1 M Boran/THF-Komplex (16,0 ml, 16,0 mmol) wurde bei Raumtemperatur zugegeben. Die Mischung wurde etwa 1 Stunde lang auf Rückfluss erhitzt und dann abgekühlt. 4 N HCl (12 ml) wurde zugefügt, und die Mischung wurde etwa eine halbe Stunde lang auf Rückfluss erhitzt. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, unter vermindertem Druck auf etwa 12 ml konzentriert und dann durch vorsichtige Zugabe von festem NaHCO₃ neutralisiert. Das Produkt wurde 2 × mit EtOAc extrahiert, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert, dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in Methanol (10 ml) gelöst und mit konzentrierter HCl (0,5 ml) behandelt, um Produkt in das Hydrochloridsalz zu überführen. Die Lösung wurde konzentriert, und das Produkt wurde durch Kristallisation aus MeOH/Et₂O erhalten. Ausbeute 444 mg (60%), Massenspektrum 352,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,5 bis 8,6 (1H, s), 7,9 bis 8,0 (2H, d), 7,65 bis 7,9 (5H, m), 7,4 bis 7,6 (6H, m), 7,3 bis 7,4 (1H, t), 4,5 bis 6,5 (H₂O), 4,4 bis 4,6 (2H, s), 4,2 bis 4,3 (2H, s), 4,1 bis 4,25 (2H, s).
Stufe 11.f. 2-Phenyl-1H-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 11.e. (Verbindung xviii, wobei R³, R⁵, R⁶ und R⁷ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (382 mg, 0,90 mmol) wurde zwischen gesättigter NaHCO₃-Lösung und CH₂Cl₂ verteilt. Die CH₂Cl₂-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert, und 1-Chlorethylchlorformiat (108 μl, 1,00 mmol) wurde bei Raumtemperatur zugegeben. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die CH₂Cl₂-Phase wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in MeOH (5,0 ml) gelöst und bei Raumtemperatur etwa 1 Stunde lang gerührt. Die methanolische Lösung wurde mit konzentrierter HCl (0,5 ml) behandelt, um Produkt in das Hydrochloridsalz zu überführen. Die Lösung wurde konzentriert, und das Produkt wurde durch Kristallisation aus MeOH/Et₂O erhalten. Ausbeute 186 mg (62%), Massenspektrum 262,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 10,7 bis 11,1 (1-2H, s breit), 8,5 bis 8,6 (1H, s), 8,1 bis 8,6 (1-2H, s breit), 7,9 bis 8,05 (2H, dd), 7,7 bis 7,85 (3H, m), 7,55 bis 7,65 (1H, m), 7,45 bis 7,55 (2H, t), 7,3 bis 7,45 (1H, m), 4,2 bis 4,4 (2H, s), 4,1 bis 4,3 (2H, s).
Stufe 11.g. Methyl-4-imidazolacetat
4-Imidazolessigsäure-Natriumsalzdihydrat (15,3 g, 83,1 mmol) wurde in Toluol (100 ml) suspendiert und konzentriert, um Hydratisierungswasser zu entfernen. Der Rückstand wurde in MeOH (235 ml) gelöst, und die Lösung wurde in einem Eis/Wasser-Bad unter N₂ gekühlt. Gasförmiges HCl wurde für 20 Minuten zugegeben, und die resultierende Lösung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde zur Trockne konzentriert. Der Rückstand wurde erneut in MeOH (235 ml) gelöst, filtriert, und die Lösung wurde in einem Eis/Wasser-Bad unter N₂ gekühlt. Gasförmiges HCl wurde für 20 Minuten zugegeben, und die resultierende Lösung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Toluol (150 ml) wurde zugesetzt, und die Mischung wurde zur Trockne konzentriert und getrocknet, um Produkt (16,6 g, 113%) zu ergeben, das in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Massenspektrum 141,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,8 bis 8,9 (1H, s), 7,5 bis 7,7 (1H, s), 3,7 bis 3,9 (2H, s), 3,6 bis 3,7 (3H, s).
Stufe 11.h. Methyl-1-triphenylmethyl-4-imidazolacetat
Das Produkt aus Stufe 11.g. (roh, 83,1 mmol) wurde in DMF (70 ml) unter N₂ gelöst, und Et₃N (35,6 ml, 241 mmol) wurde in einer exothermen Reaktion zugegeben. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde Chlortriphenylmethan (23,2 g, 83,1 mmol) zugegeben, und die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde in H₂O (300 ml) gegossen und einmal mit 300 ml EtOAc und einmal mit 150 ml EtOAc extrahiert. Die kombinierten EtOAc-Phasen wurden mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (300 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und zu einem Öl konzentriert, das unter Bildung eines bräunlichen Feststoffs (30,9 g, 97%) kristallisierte. Massenspektrum 382,9 MH⁺.
Stufe 11.i. Methyl-1-(cyanophenylmethyl)-5-imidazolacetat
Das Produkt aus Stufe 11.h. (15,0 g, 39,2 mmol) wurde in EtOAc (80 ml) unter Erwärmen gelöst. α-Brom-p-toluonitril (7,69 g, 39,2 mmol) wurde zugefügt, und die Mischung wurde 2,5 Stunden lang auf 65 bis 70°C erwärmt. Eine erste Charge wurde abfiltriert, mit EtOAc gewaschen und auf 9,72 g getrocknet. Das Filtrat wurde auf etwa 80 ml konzentriert und weitere 14 Stunden lang auf 65 bis 70°C erhitzt. Eine zweite Charge wurde abfiltriert, mit EtOAc gewaschen und auf 9,40 g getrocknet. Das Filtrat wurde auf etwa 30 ml konzentriert und weitere 48 Stunden lang auf 65 bis 70°C erhitzt. Eine dritte Charge wurde abfiltriert, mit EtOAc gewaschen und auf 0,87 g getrocknet. Die kombinierten Zwischenprodukte wurden in MeOH (350 ml) suspendiert und eine halbe Stunde lang auf Rückfluss erhitzt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck destilliert, und der resultierende Feststoff wurde mit EtOAc (250 ml) trituriert. Der resultierende Feststoff wurde in CH₂Cl₂ (500 ml) suspendiert, gesättigtes NaHCO₃ (500 ml) zugefügt und die Mischung 3 Stunden lang gerührt. Die wässrige Phase wurde ent fernt, und die CH₂Cl₂-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert, um ein Öl zu ergeben, das beim Stehen lassen kristallisierte (8,08 g, 81%). Massenspektrum 256,2 MH⁺.
Stufe 11.j. 1-(Cyanophenylmethyl)-5-imidazolsäurehydrochlorid
Das Produkt aus Stufe 11.i. (8,0 g, 31,3 mmol) wurde in THF (200 ml) gelöst, und 2 N NaOH (16,7 ml, 33,4 mmol) wurde zugegeben. Die Mischung wurde 48 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde durch Zugabe von 2 N HCl auf pH 2,0 neutralisiert, und die Lösung wurde unter vermindertem Druck zu einem bräunlichen Feststoff konzentriert. Der Rückstand wurde mit MeOH (200 ml) gerührt, Feststoffe wurden durch Filtration entfernt, und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck konzentriert und getrocknet, um Produkt (5,85 g, 67%) zu ergeben. Massenspektrum 242,1 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,3 bis 9,4 (1H, s), 7,8 bis 7,95 (2H, d), 7,55 bis 7,7 (1H, s), 7,4 bis 7,6 (2H, d), 5,5 bis 5,7 (2H, s), 3,8 bis 4,0 (2H, s).
Stufe 11.k. 5-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-1H-imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 11.j (77 mg, 0,24 mmol) wurde mit DCC (49 mg, 0, 24 mmol), HOAt (33 mg, 0,24 mmol), NMM (110 μL, 1,0 mmol) und dem Produkt aus Stufe 11.f. (75,0 mg, 0,225 mmol) in DMF (3,0 ml) kombiniert, und die Reaktion wurde etwa 3 Tage lang bei Raumtemperatur rühren gelassen. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 15 bis 40% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden auf etwa das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert. Das Produkt wurde zwei Mal erneut aus verdünnter HCl lyophilisiert, um reines Produkt (71 mg, 61%) zu ergeben. Massenspektrum 485,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,3 bis 9,4 (1H, d), 8,6 bis 8,8 (1H, d), 8,0 bis 8,15 (2H, d), 7,3 bis 8,0 (12H, m), 5,5 bis 5,7 (2H, s), 4,9 bis 5,1 (1H, s), 4,75 bis 4,9 (1H, s), 4,65 bis 4,8 (1H, s), 4,45 bis 4,6 (1H, s), 4,25 bis 4,4 (1H, s), 4,15 bis 4,3 (1H, s).
Beispiel 12: 7-(2-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Stufen 12.a. bis 12.d. wurden in analoger Weise zu Schema 1, Stufen 1.c. bis 1.f. ausgehend von Cbz-Gly-OH anstelle von Cbz-(L)-Ile-OH in Stufe 12.a. durchgeführt. Stufe 12.f. wurde in analoger Weise zu Schema 1, Stufe 1.g. durchgeführt, wobei das Produkt aus Stufe 1.b. durch das Produkt aus Stufe 11.j. ersetzt wurde. Massenspektrum 453,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO, 90°C) 9,1 bis 9,2 (1H, d), 7,95 bis 8,05 (1H, dd, 7,9 bis 8,0 (1H, s), 7,8 bis 7,9 (2H, d), 7,55 bis 7,6 (1H, s), 7,5 bis 7,6 (2H, d), 7,35 bis 7,5 (1H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 5,4 bis 5,7 (2H, s), 4,9 bis 5,1 (2H, s breit), 4,15 bis 4,4 (2H, s breit), 4,05 bis 4,2 (2H, s), 3,9 bis 4,1 (2H, s breit), 3,9 bis 4,0 (3H, s).
Beispiel 13: 5-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Stufen 13.a. bis 13.d. wurden in analoger Weise zu Schema 1, Stufen 1.c. bis 1.f. durchgeführt, wobei in Stufe 14.a. Cbz-(Gly)-OH anstelle von Cbz-(L)-Nle-OH verwendet wurde und in Stufe 13.b. Ethyl-2-bromhexanoat anstelle von Ethylbromacetat verwendet wurde. Stufe 13.e. wurde in analoger Weise zu Schema 1, Stufe 1.g, durchgeführt, wobei das Produkt aus Stufe 1.b. durch das Produkt aus Stufe 11.j. ersetzt wurde. Massenspektrum 479,3 MH⁺.
Beispiel 14: 6-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Beispiel 14 wurde in einer analogen Weise zu Beispiel 13 hergestellt, außer dass Stufen 1.d., 1.e. und 1.f. durch Stufen 14.a. und 14.b. ersetzt wurden. Schema 14

14.a. R⁷COCHBrR⁶/K₂CO₃/DMF
14.b. H₂/Pd auf Kohle/HOAc

Stufe 14.a. 1-(2-Oxohexyl)-2-(1-(((phenylmethoxy)carbonyl)amino)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol
1-H-2-(1-(((Phenylmethoxy)carbonyl)amino)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol (Verbindung iv, wobei R³ und R⁵ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (790 mg, 2,34 mmol), 1-Chlor-2-hexanon (473 mg, 3,51 mmol) und K₂CO₃ (469 mg, 4,68 mmol) wurden in DMF (4 ml) kombiniert und bei Raumtemperatur etwa 42 Stunden lang gerührt. Die Reaktion wurde mit gesättigter NaHCO₃ (25 ml) verdünnt und mit Et₂O (2 × 50 ml) extrahiert. Die kombinierten Et₂O-Extrakte wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von 3% MeOH/CH₂Cl₂ als Eluierungsmittel gereinigt. Reine Produktfraktionen wurden kombiniert und unter vermindertem Druck konzentriert, um ein blassgelbes Öl (650 mg, 64%) zu ergeben, das beim Stehen lassen erstarrte. Massenspektrum 436,3 MH⁺.
Stufe 14.b. 6-Butyl-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Das Produkt aus Stufe 14.a. (Verbindung xxiv, wobei. R³, R⁵ und R⁶ H sind, R⁵ 2-Methoxyphenyl ist und R⁷ n-Butyl ist) (650 mg, 1,49 mmol) wurde in HOAc (25 ml) gelöst, die 10% Pd auf Kohle (65 mg) enthielt, und die Mischung wurde unter 30 psi H₂ etwa 6 Stunden lang hydriert. Der Katalysator wurde durch Filtration durch Kieselerde entfernt, und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck konzentriert, um ein blassgelbes Öl zu ergeben, das beim Stehen lassen kristallisierte (430 mg, 101%).
Stufe 14.c. 6-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Beispiel 14 wurde in Stufe 14.c. in analoger Weise zu Stufe 1.g. erhalten, wobei das Produkt aus Stufe 1.f. durch das Produkt aus Stufe 14.b. ersetzt wurde. Massenspektrum 509.3 MH⁺.
Beispiel 15: 6-Butyl-7-(2-(4-cyanophenylmethylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-phenyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Beispiel 15 wurde in analoger Weise zu Beispiel 14 ausgehend von 2-Bromacetophenon anstelle von 2-Brom-2'-methoxyacetophenon in Stufe 1.c. hergestellt. Massenspektrum 509,4 MH⁺.
Beispiel 16: 5-Butyl-7-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 16 wurde in analoger Weise zu Beispiel 13 ausgehend von 2-Bromacetophenon anstelle von 2-Brom-2'-methoxyacetophenon in Stufe 1.c. hergestellt. Massenspektrum 509,3 MH⁺.
Beispiel 17: 7-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-8-cyclohexylmethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Stufen 17.a. bis 17.d. wurden in analoger Weise zu Schema 1, Stufen 1.c. bis 1.f. durchgeführt. In Stufe 17.a. wurde Cbz-(L)-Cyclohexylalanin anstelle von Cbz-(N)-Nle-OH verwendet. Stufe 17.e. wurde in analoger Weise zu Schema 1, Stufe 1.g. durchgeführt, wobei das Produkt der Stufe 1.b. durch das Produkt aus Stufe 11.j. ersetzt wurde. Massenspektrum 549,4 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,15 bis 9,25 (1H, s), 8,05 bis 8,15 (1H, d), 8,0 bis 8,1 (1H, s), 7,8 bis 7,9 (2H, d), 7,6 bis 7,7 (1H, s), 7,5 bis 7,6 (2H, d), 7,4 bis 7,5 (1H, t), 7,15 bis 7,3 (1H, d), 7,05 bis 7,15 (1H, t), 5,85 bis 6,05 (1H, dd), 5,5 bis 5,6 (2H, s), 4,1 bis 4,5 (5H, m), 3,9 bis 4,1 (3H, s), 3,75 bis 3,9 (1H, m), 1,85 bis 2,1 (3H, m), 1,4 bis 1,8 (4H, m), 0,8 bis 1,4 (7H, m).
Beispiel 18: 5-Butyl-7-(2-(1H-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Beispiel 18 wurde in analoger Weise zu Beispiel 4 unter Verwendung von 5-Butyl-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin (Verbindung vii, wobei R³, R⁵ und R⁷ H sind, R⁴ 2-Methoxyphenyl ist und R⁶ n-Butyl ist) wie in Beispiel 14 beschrieben anstelle von 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin in Stufe 19.e. hergestellt. Massenspektrum 394,3 MH⁺.
Beispiel 19: 7-(2-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-(phenylmethoxy)phenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1,2-a]pyrazin
Das Ausgangsmaterial für Stufe 19.a. wurde in analoger Weise zu Schema 1, Stufen 1.c. bis 1.f., hergestellt, wobei Cbz-(L)-Nle-OH durch Cbz-(Gly)-OH ersetzt wurde. Stufe 19.d. wurde in ähnlicher Weise wie Schema 1, Stufe 1.g., durchgeführt, wobei das Produkt aus Stufe 1.b. durch das Produkt aus Stufe 11.j. ersetzt wurde. Schema 19

19.a. BBr₃/CH₂Cl₂/Hexane, dann (Boc)₂O, NaOH, THF/H₂O
19.b. NaH/R⁸-Br/DMF
19.c. Tfa/iPr₃SiH

Stufe 19.a. 7-((1,1-Dimethylethoxy)carbonyl)-2-(2-hydroxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
2-(2-Methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin (Verbindung vii, wobei R³, R⁵, R⁶ und R⁷ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (5,30 g, 23,1 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (100 ml) gelöst und tropfenweise im Verlauf von etwa 15 Minuten zu einer Mischung aus 1 M BBr₃/Hexanen (80,3 ml, 80,3 mmol) in CH₂Cl₂ (500 ml) bei etwa 0°C gegeben. Die Mischung wurde auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und über Nacht gerührt. Das entmethylierte Zwischenprodukt wurde mit H₂O (3 × 240 ml) extrahiert, und die kombinierten wässrigen Phasen wurden mit Et₂O (100 ml) gewaschen. Die Lösung wurde durch Zugabe von 2,5 N NaOH auf einen pH-Wert von etwa 8 eingestellt, und Di-tert.-butyldicarbonat (5,55 g, 25,4 mmol) wurde in THF (200 ml) zugegeben. Die Lösung wurde etwa 2 Stunden lang kräftig gerührt, während die Lösung auf pH 8,0 bis 8,5 gehalten wurde. Die Mi schung wurde auf etwa 700 ml konzentriert und mit CH₂Cl₂ (2 × 100 ml) extrahiert. Die kombinierten CH₂Cl₂-Phasen wurden über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert, um Produkt (7,10 g, 97%) als bräunlichen Feststoff zu ergeben. Massenspektrum 316,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 7,65 bis 7,7 (1H, s), 7,6 bis 7,7 (1H, dd), 7,0 bis 7,15 (1H, m), 6,75 bis 6,9 (2H, m), 4,6 bis 4,7 (2H, s), 4,0 bis 4,2 (2H, t), 3,75 bis 3,9 (2H, t), 3,3 bis 3,4 (H₂O), 1,4 bis 1,55 (9H, s).
Stufe 19.b. 7-((1,1-Dimethylethoxy)carbonyl)-2-(phenylmethoxy)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Eine 60% Dispersion von NaH in Mineralöl (76 mg, 1,9 mmol) wurde mit Hexanen (2 × 5,0 ml) gewaschen, und eine Lösung von 2-(2-Hydroxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]-pyrazin aus Stufe 9.a. (500 mg, 1,58 mmol) in DMF (10 ml) wurde bei Raumtemperatur zugegeben. Die Reaktion wurde etwa 10 Minuten lang gerührt, und dann wurde Benzylbromid (188 μL, 1,58 mmol) zugefügt und die Reaktion bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde in gesättigte NaCl-Lösung (40 ml) gegossen und mit Et₂O (2 × 50 ml) extrahiert. Die Et₂O-Phasen wurden kombiniert, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert, um Produkt (430 mg, 67%) als viskoses gelbes Öl zu ergeben, das beim Stehen lassen kristallisierte. Massenspektrum 406,3 MH⁺.
Stufe 19.c. 2-(2-(Phenylmethoxy)phenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin
Das Produkt aus Stufe 19.b. (250 mg, 0,62 mmol) wurde mit Tfa (15,0 ml), die iPr₃SiH enthielt (505 μL, 2,47 mmol), bei Raumtemperatur etwa eine Stunde lang unter N₂ behandelt. Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck entfernt, und der Rückstand wurde mit Et₂O (2 × 20 ml) trituriert, filtriert und getrocknet. Der Rückstand wurde in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung verwendet.
Stufe 19.d. 7-(2-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-2-(2-(phenylmethoxy)-phenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo-[1,2-a]pyrazin
Beispiel 19 wurde aus dem Produkt aus Stufe 19.d. und dem Produkt aus Stufe 11.j. in analoger Weise wie Stufe 1.g. hergestellt. Massenspektrum 529,3 MH⁺.
Beispiel 20: 2-(2-Butoxyphenyl)-7-(2-(4-cyanophenylmethyl)-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2-a]pyrazin
Beispiel 20 wurde in analoger Weise wie Beispiel 19 unter Verwendung von n-Butyliodid anstelle von Benzylbromid in Stufe 20.b. hergestellt. Massenspektrum 495,4 MH⁺.
Beispiel 21: 1,2-Dihydro-1-((1H-imidazol-4-yl)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Das Ausgangsmaterial für Stufe 21.a. wurde in analoger Weise zu Schema 1, Stufen 1.c. hergestellt, wobei Cbz-(Gly)-OH anstelle von Cbz-(L)-Nle-OH verwendet wurde. Stufen 21.d. und 21.e. wurden in analoger Weise zu Stufe 8.c. und 8.d. durchgeführt. Schema 21:

21.a. 2-Fluorbenzylbromid/K₂CO₃/DMF
21.b. HBr/HOAc
21.c. NMP (Rückfluss)

Stufe 21.a. 1-((2-Fluorophenyl)-methyl)-2-(1-(S)-(((phenylmethoxy)carbonyl)amino)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol
1H-2-(1-(S)-(((Phenylmethoxy)carbonyl)amino)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol (1,69 g, 5,00 mmol) wurde in DMF (20 ml) gelöst und mit K₂CO₃ (1,38 g, 10,0 mmol) und 2-Fluorbenzylbromid (1,21 ml, 10,0 mmol) behandelt, und die Mischung wurde etwa 2 Stunden lang auf etwa 50°C erhitzt. Die Mischung wurde unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in EtOAc (50 ml) aufgenommen, einmal mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (25 ml) gewaschen und einmal mit gesättigter NaCl-Lösung (25 ml) gewaschen. Die EtOAc-Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und zu einem Öl (2,22 g, 99,6%) konzentriert, das beim Stehen lassen kristallisierte. Massenspektrum 446,2, MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,05 bis 8,15 (1H, d), 8,75 bis 8,9 (1H, t), 7,5 bis 7,6 (1H, s), 7,1 bis 7,5 (9H, m), 6,9 bis 7,1 (3H, m), 5,3 bis 5,45 (2H, s), 4,9 bis 5,1 (2H, s), 4,3 bis 4,45 (2H, s), 3,8 bis 3,9 (3H, s).
Stufe 21.b. 2-(Aminomethyl)-1-((2-fluorphenyl)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol
1-((2-Fluorphenyl)methyl)-2-(1-(S)-(((phenylmethoxy)carbonyl)amino)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol (Verbindung xxvi, wobei R², R³, R⁵ und R⁶ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (2,22 g, 4,99 mmol) wurde in 30% HBr/HOAc (25 ml) gelöst und die Reaktion etwa 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Et₂O (100 ml) wurde zugegeben und die resultierende Aufschlämmung etwa weitere 15 Minuten lang gerührt und das Produkt abfiltriert und mit Et₂O (100 ml) gewaschen. Das Produkt wurde durch Zugabe von gesättigter NaHCO₃-Lösung (50 ml) neutrali siert, und das Produkt wurde mit CH₂Cl₂ (2 × 25 ml) extrahiert. Die kombinierten CH₂Cl₂-Phasen wurden kombiniert, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck zu einem viskosen Öl (1,26 g, 81%) konzentriert, das beim Stehen lassen erstarrte. Massenspektrum 312,2 MH⁺.
Stufe 21.c. 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
(2-Aminomethyl)-1-((2-fluorphenyl)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazol aus Stufe 22.b. (1,26 g, 4,05 mol) wurde zu NMP (20 ml) gegeben, das K₂CO₃ (1,12 g, 8,10 mmol) enthielt, und die Reaktion wurde etwa 11 Stunden lang auf Rückfluss erhitzt. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck abdestilliert, und H₂O (50 ml) wurde zugegeben. Rohprodukt wurde abfiltriert und weiter durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von CH₂Cl₂ und dann 19 : 1 MeOH : CH₂Cl₂ als Eluierungsmittel gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert und unter vermindertem Druck konzentriert und dann mit EtOAc trituriert, um Produkt als bräunlichen Feststoff (329 mg, 28%) zu ergeben. Massenspektrum 292,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 7,95 bis 8,1 (1H, dd), 7,6 bis 7,65 (1H, s), 7,1 bis 7,2 (1H, m), 6,9 bis 7,1 (4H, m), 6,5 bis 6,65 (2J, m), 5,2 bis 5,4 (2H, s), 4,4 bis 4,5 (2H, s), 3,8 bis 4,0 (3H, s).
Stufe 21.d. 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-((1-triphenylmethyl)imidazol-4-yl)methyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
In ähnlicher Weise wie Stufe 8.c. wurde eine Mischung des Produkts aus Stufe 21.c. (Verbindung xxvii, wobei R², R³, R⁵ und R⁶ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (146 mg, 0,050 mmol) und 1-Triphenylmethylimidazol-4-carboxaldehyd (aus Stufe 8.b.) (338 mg, 1,00 mmol) in CH₂Cl₂ (5,0 ml) mit Essigsäure (1,0 ml) und NaBH(OAc)₃ (212 mg, 1,00 mmol) etwa eine Stunde lang behandelt. Weiteres 1-Triphenylmethylimidazol-4-carboxaldehyd (338 mg, 1,00 mmol), Essigsäure (1,0 ml) und NaBH(OAc)₃ (212 mg, 1,00 mmol) wurde zugegeben und die Mischung etwa eine Stunde lang gerührt. EtOAc (25 ml) und konzentriertes NH₄OAc (3, 0 ml) wurde zugegeben und die Mischung etwa 1,5 Stunden lang gerührt. Gesättigte NaHCO₃-Lösung wurde zugegeben und die Mischung mit EtOAc (3 × 25 ml) extrahiert. Die kombinierten EtOAc-Phasen wurden getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Produkt wurde durch Flash-Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von 1 : 1 : 1 CH₂Cl₂ : EtOAc : Hexanen und dann EtOAc als Eluierungsmittel gereinigt. Die kombinierten Produktfraktionen wurden konzentriert und unter vermindertem Druck auf 210 mg (68%) getrocknet. Massenspektrum 614,3 MH⁺.
Stufe 21.e. 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-((1-(triphenylmethyl)imidazol-4-yl)methyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 21.d. wurde in analoger Weise zu Stufe 1.h. entschützt, um 104 mg (70%) des Produkts zu ergeben. Massenspektrum 372,3, MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,0 bis 9,2 (1H, s), 8,05 bis 8,15 (1H, s), 7,9 bis 8,0 (1H, d), 7,7 bis 7,8 (1H, s), 7,3 bis 7,55 (4H, m), 7,1 bis 7,3 (2H, m), 7,0 bis 7,1 (1H, t), 5,6 bis 5,8 (2H, s), 4,55 bis 4,75 (4H, s), 3,9 bis 4,1 (3H, s), 2,7 bis 4,0 (H₂O, breit).
Beispiel 22: 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin
Beispiel 22 wurde gemäß Schema 21 und Schema 11 herge- stellt.
Stufe 22.a. (1-(2-((4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2-c][1,4]benzodiazepin (Verbindung xxvii, wobei R², R³, R⁵ und R⁶ H sind und R⁴ 2-Methoxyphenyl ist) (aus Stufe 21.c.) wurde mit DCC (103 mg, 0,50 mmol), HOAt (68 mg, 0,50 mmol), NMM (55 μL, 0,50 mmol) und 1-(4-Cyanophenylmethyl)-5-imidazolessigsäure (dem Produkt aus Stufe 11.j.) (160 mg, 0,50 mmol) in DMF (3,0 ml) kombiniert, und die Reaktion wurde über Nacht bei Raumtemperatur rühren gelassen. Die Reaktion wurde etwa 12 Stunden lang auf etwa 70°C erwärmt und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Das Rohmaterial wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule gereinigt, indem ein erster Durchgang unter Verwendung eines Gradienten von 10 bis 40% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten durchgeführt wurde, gefolgt von einem zweiten Durchgang unter Verwendung eines Gradienten von 20 bis 35 CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten. Die Produktfraktionen wurden kombiniert und zur Trockne konzentriert. Das Produkt wurde in ein Dihydrochloridsalz überführt, indem eine 9 : 1 H₂O : MeOH-Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (AG 1 X2, 200 bis 400 mesh, 100 ml Bett, 0,6 mÄq/ml, Chloridform, Biorad, Inc., Hercules, CA, USA) laufen gelassen wurde. Produktfraktionen wurden wieder unter vermindertem Druck konzentriert und aus H₂O (10 ml) lyophilisiert, um 21 mg (10%) des gewünschten Produkts zu ergeben. Massenspektrum 515,3 MH⁺.
Beispiel 23: 9-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Beispiel 23 wurde gemäß Schema 21, Schema 23 und Schema 1, Stufe 1.g. hergestellt.
Schema 23
Stufe 23.a. 9-Brom-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1H-imidazo-[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 21.c. (291 mg, 1,00 mmol) wurde in Essigsäure (10 ml) gelöst, und Br₂ (52 μl) wurde tropfenweise unter Rühren zugegeben. Methanol (10 ml) wurde zugegeben, um eine homogene Lösung aufrechtzuerhalten. Als die Zugabe vollständig war, wurden die Lösungsmittel unter vermindertem Druck verdampft, und der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 20 bis 50% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden auf das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert. Das lyophilisierte Produkt wurde in das Hydrochloridsalz überführt, indem 20 methanolische Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) geleitet wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert und konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (110 mg, 24%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 370,0, 371,9 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,05 bis 8,15 (1H, s), 7,9 bis 8,0 (1H, d), 7,4 bis 7,5 (1H, t), 7,3 bis 7,4 (1H, s), 7,2 bis 7,3 (1H, dd), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,05 bis 7,15 (1H, t), 6,65 bis 6,75 (1H, d), 5,55 bis 5,7 (2H, s), 4,8 bis 4,95 (2H, s), 3,9 bis 4,0 (3H, s).
Stufe 23.b. 9-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 23.a. (72 mg, 0,177 mmol) wurde in DMF (3 ml) gelöst. Zu dieser Lösung wurde NMM (98 μl, 0,89 mmol), 1-(4-Cyanophenylmethyl)-5-imidazolessigsäure (das Produkt aus Stufe 11.j.) (128 mg, 0,36 mmol), HOAt (49 mg, 0,36 mmol) und DCC (74 mg, 0,36 mmol) gegeben. Die Reaktion wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann eine Stunde lang auf 70°C erwärmt. Die Lösung wurde gekühlt und DCC (74 mg, 0,36 mmol) zugegeben und die Lösung bei Raumtemperatur wieder über Nacht geführt. Die Reaktion wurde eine Stunde lang auf 70°C erhitzt und unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 25 bis 60 CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Eine zweite Reinigung unter Verwendung eines Gradienten aus 44 bis 80% CH₃CN/0,2% NH₄OAc über 45 Minuten war erforderlich. Produktfraktionen wurden konzentriert und lyophilisiert, um reines Produkt (11 mg, 9%) als Acetatsalz zu ergeben. Massenspektrum 593,2, 593,3 MH⁺.
Beispiel 24: 9-Chlor-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Beispiel 24 wurde gemäß Schema 1, Schema 23 und Schema 1, Stufe 1.g. hergestellt.
Stufe 24.a. 9-Chlor-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1H-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 21.c. (291 mg, 1,00 mmol) wurde durch Auflösen in Methanol (10 ml), Zugabe von 5% wässriger HCl (3,0 ml) und Konzentrieren zu Feststoffen in das Dihydrochloridsalz überführt. Der Rückstand wurde in Methanol (5 ml) und HOAc (1,0 ml) gelöst, und N-Chlorsuccinimid (133 mg, 1,0 mmol) wurde zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen gesättigter NaHCO₃ und CHCl₃ verteilt, und die CHCl₃-Phase wurde auf eine Silikagelsäule gegeben. Die Säule wurde zuerst mit 3 : 1 CHCl₃ : EtOAc und dann mit 1 : 1 CHCl₃ : EtOAc eluiert, um Rohprodukt zu erhalten. Dieses Rohmaterial wurde weiter durch präparative HPLC an ei ner RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 25 bis 60% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Die sauberen Produktfraktionen wurden kombiniert und lyophilisiert, um 94 mg (17%) Produkt als Di-Tfa-Salz zu ergeben. Massenspektrum 326,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,0 bis 8,1 (1H, s), 7,7 bis 7,8 (1H, dd), 7,4 bis 7,5 (1H, t), 7,2 bis 7,3 (1H, s), 7,15 bis 7,3 (1H, d), 7,1 bis 7,2 (1H, dd), 7,05 bis 7,15 (1H, t), 6,7 bis 6,8 (1H, d), 5,55 bis 5,65 (2H, s), 4,7 bis 4,8 (2H, s), 3,9 bis 4,0 (3H, s).
Stufe 24.b. 9-Chlor-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 24.a. (72 mg, 0,13 mmol) wurde in DMF (1,5 ml) gelöst. Zu dieser Lösung wurden NMM (114 μl, 1,04 mmol), 1-(4-Cyanophenylmethyl)-5-imidazolessigsäure (Verbindung xii, bei der R³ (4-Cyanophenylmethyl) ist und R² H ist) (92 mg, 0,26 mmol) und TFFH (69 mg, 0,26 mmol) gegeben. Die Reaktion wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann eine Stunde lang auf 70°C erwärmt. Die Lösung wurde zurück auf Raumtemperatur abgekühlt, und 1-(4-Cyanophenylmethyl)-5-imidazolessigsäure (das Produkt aus Stufe 11.j.) (92 mg, 0,26 mmol) und TFFH (69 mg, 0,26 mmol) wurden zugegeben. Die Reaktion wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 25 bis 60% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden konzentriert und lyophilisiert. Das lyophilisierte Produkt wurde in das Hydrochloridsalz umgewandelt, indem eine 30 methanolische Lösung durch eine Ionenaustauscherlösung (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) geleitet wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (59 mg, 73%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 549,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C), 9,2 bis 9,3 (1H, s), 8,0 bis 8,1 (1H, s), 7,9 bis 8,1 (1H, d), 7,8 bis 7,9 (2H, d), 7,7 bis 7,85 (2H, m), 7,6 bis 7,75 (1H, dd), 7,5 bis 7,7 (1H, s), 7,4 bis 7,55 (2H, d), 7,35 bis 7,5 (1H, t), 7,15 bis 7,3 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 4,5 bis 6,3 (2H, dd), 5,4 bis 5,8 (4H, m), 3,9 bis 4,05 (3H, s), 3,5 bis 3,9 (2H, dd).
Beispiel 25: 10-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Die Stufen 25.a. bis 25.c. wurden in analoger Weise zu den Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei 4-Brom-2-fluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid in Stufe 25.a. verwendet wurde. Das Produkt aus Stufe 25.c. wurde als Dihydrochloridsalz durch Rühren einer methanolischen Suspension mit 20% Überschuss an konzentrierter Salzsäure und Abfiltrieren des resultierenden Feststoffs hergestellt. Massenspektrum 370,1, 372,1 MH⁺.
Stufe 25.d. 10-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 25.c. (100 mg, 0,23 mmol) wurde in DMF (1,5 ml) suspendiert, und das Produkt aus Stufe 11.j. (125 mg, 0,45 mmol), TFFH (119 mg, 0,45 mmol) und NMM (110 μl, 1,0 mmol) wurden zugefügt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur etwa 45 Minuten lang gerührt und bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Die rohe Mischung wurde unter vermindertem Druck konzentriert, und der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradien ten aus 20 bis 50% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Eine zweite Reinigung wurde unter Verwendung eines isokroten Systems durchgeführt, das 44 CH₃CN/0,2% wässrige NH₄OAc enthielt. Produktfraktionen wurden konzentriert und lyophilisiert. Das lyophilisierte Produkt wurde aus 20% CH₃CN/H₂O erneut lyophilisiert, dann durch Lyophilisierung aus 20% CH₃CN/1% Tfa in das Tfa-Salz überführt und dann durch Leiten einer 30% methanolischen Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) in das Hydrochloridsalz überführt. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und aus 20% CH₃CN/H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (45 mg, 30%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 593,2, 595,2 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,1 bis 9,3 (1H, s), 7,9 bis 8,1 (3H, m), 7,8 bis 7,9 (2H, d), 7,7 bis 7,8 (1H, dd), 7,6 bis 7,7 (1H, d), 7,5 bis 7,6 (1H, s), 7,4 bis 7,5 (2H, d), 7,3 bis 7,45 (1H, t), 7,1 bis 7,25 (1H, s), 7,0 bis 7,1 (1H, t), 4,4 bis 6,2 (2H, dd), 5,4 bis 5,7 (4H, m), 3,9 bis 4,0 (3H, s), 3,5 bis 3,9 (2H, dd).
Beispiel 26: 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin
Die Stufen 26.a. bis 26.c. wurden in analoger Weise zu den Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei 2,6-Difluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid in Stufe 26.a. verwendet wurde.
Stufe 26.d. 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2-c]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 26.c. (124 mg, 0,40 mmol) wurde in DMF (2 ml) suspendiert, und das Produkt aus Stufe 11.j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0,40 mmol) und NMM (88 μl, 0,8 mmol) wurden zugegeben. Die Reaktion wurde etwa 1,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Eine zweite Portion des Produkts aus Stufe 11.j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0, 40 mmol) und NMM (88 μl, 0,8 mmol) wurden zugegeben, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur weitere 1,5 Stunden lang gerührt. Eine dritte Portion des Produkts aus Stufe 11.j. (111 mg, 0,40 mmol), TFFH (106 mg, 0,40 mmol) und NMM (88 μl, 0,8 mmol) wurden zugesetzt, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Die rohe Mischung wurde unter vermindertem Druck konzentriert, und der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 20 bis 50% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert und lyophilisiert. Das Tfa-Salz wurde in das Hydrochloridsalz überführt, indem eine 40% methanolische Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (BioRad AG-1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) geleitet wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (126 mg, 59%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 533,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,2 bis 9,3 (1H, s), 8,2 bis 8,4 (1H, s), 7,9 bis 8,1 (1H, s), 7,8 bis 7,9 (2H, d), 7,55 bis 7,7 (3H, m), 7,35 bis 7,55 (4H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 4,5 bis 6,3 (2H, dd), 5,4 bis 5,9 (2H, dd), 5,5 bis 5,7 (2H, dd), 3,9 bis 4,1 (3H, s), 3,6 bis 4,0 (2H, dd).
Beispiel 27: 1,2-Dihydro-1-(2-imidazol-1-yl)-1-oxoethyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]henzodiazepin
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 21.c. (146 mg, 0,50 mmol) in DMF (2 ml) wurde mit Chloracetylchlorid (44 μl, 0, 55 mmol) in DMF (0,5 ml) behandelt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur eine halbe Stunde lang gerührt. Imidazol (204 mg, 3,00 mmol) wurde zugefügt, und die Mischung wurde 3 Stunden lang auf 50°C erwärmt und dann bei Raumtemperatur über Nacht stehen gelassen. Die rohe Mischung wurde unter vermindertem Druck konzentriert, und der Rückstand wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten aus 10 bis 50% CH₃CN/0,1 F Tfa über 25 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Tfa-Salz wurde in das Hydrochloridsalz überführt, indem eine 30 methanolische Lösung durch eine Ionenaustauscherlösung (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) geleitet wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, auf ein Volumen von etwa 10 ml konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (127 mg, 54%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 400,2 NH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,1 bis 9,2 (1H, s), 8,1 bis 8,2 (1H, s), 7,9 bis 8,05 (1H, d), 7,8 bis 7,9 (1H, d), 7,5 bis 7,8 (5H, m), 7,35 bis 7,5 (1H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 6,2 bis 6,35 (1H, d), 6,0 bis 6,15 (1H, d), 5,5 bis 5,7 (1H, d), 5,35 bis 5,5 1H, d), 4,95 bis 5,15 (1H, d), 4,6 bis 4,8 (1H, d), 3,9 bis 4,0 (3H, s).
Beispiel 28: 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-(pyridin-3-yl)-1-oxoethyl)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 21.c. (102 mg, 0,35 mmol) in DMF (1,5 ml) wurde mit 3-Pyridinessigsäurehydrochlorid (69,4 mg, 0,40 mmol), NMM (110 μl, 1,00 mmol) und TFFH (106 mg, 0,40 mmol) behandelt, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur 1 ½ Stunden lang gerührt. Eine weitere Menge 3-Pyridinessigsäurehydrochlorid (26,0 mg, 0,15 mmol), NMM (33 μl, 0,30 mmol) und TFFH (40 mg, 0,15 mmol) wurde zu der Reaktion gegeben, und es wurde bei Raumtemperatur weitere 1½ Stunden lang gerührt. Die rohe Mischung wurde unter verminder tem Druck konzentriert. Gesättigte NaHCO₃-Lösung (5 ml) wurde zugegeben, und das Produkt wurde mit CH₂Cl₂ (2 × 5 ml) extrahiert. Das CH₂Cl₂ wurde unter vermindertem Druck abdestilliert, und der Rückstand wurde in 10% wässrigem CH₃CN gelöst, das mit Tfa auf pH 2 eingestellt worden war. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 10 bis 50% CH₃CN/0,1% Tfa über 25 Minuten mit UV-Detektion bei 254 nm gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Tfa-Salz wurde in das Hydrochloridsalz umgewandelt, indem eine 30% methanolische Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) geleitet wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, auf ein Volumen von etwa 10 ml konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (123 mg, 73%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 411,1 MH⁺.
Beispiel 29: 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-(pyridin-4-yl)-1-oxoethyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Beispiel 29 wurde in einer zu Beispiel 28 analogen Weise hergestellt, außer dass 4-Pyridinessigsäurehydrochlorid anstelle von 3-Pyridinessigsäurehydrochlorid in Stufe 29.a. verwendet wurde. Massenspektrum 411,1 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 8,8 bis 8,9 (2H, d), 8,1 bis 8,2 (1H, s), 7,9 bis 8,0 (3H, m), 7,75 bis 7,9 (1H, d), 7,65 bis 7,75 (1H, d), 7, 6 bis 7,7 (1H, t), 7,5 bis 7,65 (1H, t), 7,35 bis 7,5 (1H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 6,2 bis 6,4 (1H, d), 5,7 bis 5,85 (1H, d), 5,5 bis 5,65 (1H, d), 4,5 bis 4,7 (1H, d), 3,7 bis 4,2 (2H, m), 3,9 bis 4,05 (3H, s).
Beispiel 30: 1-(2-(1-Benzylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Stufen 30.a. bis 30.c. wurden in analoger Weise zu Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei in Stufe 30.a. 2,6-Difluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid verwendet wurde.
Stufe 30.d. 1-(2-(1-Benzylimidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt von Stufe 30.c. wurde mit dem Produkt aus Stufe 5.c. (1-Phenylmethyl-5-imidazolessigsäure) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 508.5 MH⁺, NMR (30 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,1 bis 9,3 (1H, s), 8,2 bis 8,3 (1H, s), 7,9 bis 8,0 (1H, dd), 7,2 bis 7,7 (10H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t), 6,1 bis 6,3 (1H, d), 5,65 bis 5,8 (1H, d), 5,3 bis 5,6 (3H, m), 4,45 bis 4,6 (1H, d), 3,9 bis 4,0 (3H, s), 3,6 bis 3,9 (2H, q).
Beispiel 31: 1-(2-(1-((Cyano)phenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl-9,10-difluor-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo-[1,2c][1,4]-benzodiazepin
Stufen 31.a. bis 31.c. wurden in analoger Weise zu Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei in Stufe 31.a. 2,4,5-Trifluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid verwendet wurde.
Stufe 32.d. 1-(2-(1-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl-9,10-difluor-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo-[1,2c][1,4]-benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 31.c. wurde mit dem Produkt aus Stufe 11.j. (1-(Cyanophenylmethyl-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 551,4 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,1 bis 9,3 (1H, s), 7,9 bis 8,1 (3H, m), 7,75 bis 7,9 (3H, m), 7,55 bis 7,65 (1H, s), 7,45 bis 7,55 (2H, d), 7,35 bis 7,45 (1H, m), 7,15 bis 7,25 (1H, d), 7,0 bis 7,15 (1H, t).
Beispiel 32: 4-(2-Bromphenyl)-1-(2-(1-((4-cyano)phenylmethyl]-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazo[1,2a]-[1,4]benzodiazepin
Stufe 32.a. 2,2'-Dibromacetophenon
Brom (40,3 g, 0,25 Mol) wurde tropfenweise zu einer Lösung von 2'-Bromacetophenon (50,0 g, 0,25 Mol) in Essigsäure (500 ml) über 1,5 Stunden bei 15 bis 20°C gegeben. Die Lösung wurde dann auf Raumtemperatur erwärmen gelassen und unter vermindertem Druck konzentriert, um ein Rohprodukt zu ergeben, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Stufe 32.b. wurde in einer analogen Weise zu Stufe 1.c. durchgeführt, wobei das Produkt aus Stufe 32.a. anstelle von 2-Brom-2'-methoxyacetophenon und Cbz-Glycin anstelle von Cbz-(L)-Norleucin verwendet wurde.
Stufen 32.c. bis 32.e. wurden in einer analogen Weise zu Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei in Stufe 32.c. 2,6-Difluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid verwendet wurde und in Stufe 32.e. 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en anstelle von K₂CO₃ verwendet wurde.
Stufe 32.f. 4-(2-Bromphenyl)-1-(2-(1-[(4-cyano)phenylmethyl]-imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazo[1,2a]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 32.e. wurde mit dem Produkt aus Stufe 11.j. (1-(Cyanophenylmethyl-1-imidazolessigsäurechlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 581,1, 583,1 MH⁺.
Beispiel 33: 1-(2-(1-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-10-fluor-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2a][1,4]benzodiazepin
Stufen 33.a. bis 33.c. wurden in analoger Weise zu Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei 2,4-Difluorbenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid in Stufe 30.a. verwendet wurde.
Stufe 33.d. 1-(2-(1-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-10-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 33.c. wurde mit dem Produkt aus Stufe 11.j. (1-(Cyanophenylmethyl-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 533,2 MH⁺
Beispiel 34: 1-(2-(1-((4-Cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Stufen 34.a bis 34.f. wurden gemäß Schema 34 durchgeführt. Schema 34

a. MeOH/HCl
b. NaNO₂/wässr. HCl/KI
c. Zn(CN)₂/(Ph₃P)₄Pd/DMF
d. MeI/NaH/DMF
e. LiBH₄/THF
f. SOBr₂/CH₂Cl₂

Stufe 34.a. Methyl-4-amino-3-hydroxybenzoat
Eine Lösung von 4-Amino-3-hydroxybenzoesäure (24,5 g, 159 mmol) in Methanol (650 ml) wurde in einem Eisbad gekühlt und mit gasförmiger HCl etwa 20 Minuten lang behandelt (etwa 60 g). Es wurde über Nacht weiter gerührt, und dann wurde die Lösung unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde mit EtOAc (200 ml) trituriert und zu einem braunen Feststoff (24,5 g, 92%) getrocknet, der ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Massenspektrum 168,2, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 9,3 bis 9,4 (1H, s), 7,2 bis 7,3 (2H, m), 6,55 bis 6,65 (1H, d), 5,3 bis 5,4 (2H, s (breit)), 3,6 bis 3,8 (3H, s).
Stufe 34.b. Methyl-3-hydroxy-4-iodbenzoat
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 34.a. (24,5 g, 146 mmol) in THF (77 ml) wurde mit 3 N HCl (232 ml) verdünnt und in einem Eisbad auf 8°C verdünnt, wenn sich ein Niederschlag bildete. NaNO₂ (11,1 g, 161, mmol) in H₂O (75 ml) wurde im Verlauf von 6 Minuten bei Eisbadtemperatur zugegeben. Es wurde weitere 25 Minuten lang gerührt und dann eine Lösung aus KI (97,1 g, 585 mmol) in H₂O (75 ml) in einer Portion zugegeben und 15 Minuten lang gerührt. Es wurde EtOAc (550 ml) zugegeben und die Phasen getrennt. Die EtOAc-Phase wurde mit H₂O (500 ml) und Salzlösung (400 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und zu schwarzem Feststoff konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von CH₂Cl₂ als Eluierungsmittel gereinigt, um 19,7 g (48%) eines schmutzigweißen Feststoffs zu ergeben. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 10,6 bis 10,8 (1H, s), 7,8 bis 7,9 (1H, d), 7,4 bis 7,5 (1H, m), 7,1 bis 7,2 (1H, m), 3,75 bis 3,85 (3H, s).
Stufe 34.c. Methyl-4-cyano-3-hydroxybenzoat
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 34.b. (25,3 g, 91,1 mmol) und Zn(CN)₂ (7,48 g, 63,7 mmol) in DMF (100 ml) wurde unter N₂ mit (Ph₃P)₄Pd (2,0 g, 1,82 mmol) behandelt und etwa 4 Stunden lang auf etwa 80°C erwärmt. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und zwischen EtOAc (400 ml) und H₂O (400 ml) verteilt. Die EtOAc-Phase wurde mit Salzlösung (4 × 200 ml) gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Chromatographie an Silikagel unter Verwendung von CH₂Cl₂ und dann 2,5% MeOH/CH₂CH₂ als Eluierungsmittel gereinigt. Fraktionen wurden zu einem hellorangenen Feststoff konzentriert und unter Vakuum zu konstantem Gewicht getrocknet, um Produkt (13,4 g, 83%) zu ergeben, das in Stufe 34.d. ohne weitere Reinigung verwendet wurde. NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 7,7 bis 7,8 (1H, m), 7,5 bis 7,6 (1H, d), 7,4 bis 7,5 (1H, m), 3,8 bis 3,9 (3H, s).
Stufe 34.d. Methyl-4-cyano-methoxybenzoat
60% NaH in Mineralöl (6,02 g, 151 mmol) wurde mit 3 Portionen Hexanen (20 ml) gewaschen und in DMF (100 ml) bei Raumtemperatur suspendiert. Das Produkt aus Stufe 34.c. (13,3 g, 75,3 mmol) in DMF (100 ml) wurde zugegeben, und die resultierende Mischung wurde mit Iodmethan (9,38 ml, 151 mmol) behandelt. Die Reaktion wurde bei Raumtemperatur über Nacht rühren gelassen. Die Reaktionsmischung wurde mit EtOAc (400 ml) verdünnt und mit 5% Zitronensäure (2 × 150 ml) und Salzlösung (150 ml) gewaschen. Die EtOAc-Phase wurde dann über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und konzentriert, um festes Produkt (13,4 g, 93%) zu ergeben, die in Stufe 34.e. ohne weitere Reinigung verwendet wird. NMR (300 MHz, CDCl₃, 30°C) 7,62 bis 7,72 (3H, m), 4,0 bis 4,1 (3H, s), 3,9 bis 4,0 (3H, s).
Stufe 34.e. 4-Hydroxymethyl-2-methoxybenzonitril
Das Produkt von Stufe 34.d. (13,3 g, 70,0 mmol) in THF (200 ml) wurde mit 2 M LiBH₄ (75 ml, 1500 mmol) unter N₂ behandelt, und die resultierende Lösung wurde 3 Stunden lang auf Rückfluss erhitzt. Die Reaktion wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und vorsichtig mit 4 N HCl im Überschuss behandelt, um überschüssiges Reagenz zu quenchen. H₂O (50 ml) und EtOAc (100 ml) wurden zugefügt, und die Phasen wurden getrennt. Die wässrigen Phasen wurden mit EtOAc (2 × 50 ml) erneut extrahiert, und die EtOAc-Phasen wurden kombiniert und mit Salzlösung (3 × 100 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert, um einen weißen Feststoff (10,7 g, 94%) zu ergeben. NMR (300 MHz, CDCl₃, 30°C) 7,5 bis 7,8 (1H, d), 7,0 bis 7,1 (1H, s), 6,94 bis 7,0 (1H, m), 4,75 bis 4,8 (2H, s), 3,9 bis 4,0 (3H, s), 1,9 bis 2,1 (1H, s (breit)).
Stufe 34.f. 4-Brommethyl-2-methoxybenzonitril
Das Produkt aus Stufe 34.e. (1,0 g, 6,13 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (3, 0 ml) suspendiert, mit SOBr₂ (480 μl, 6,13 mmol) behandelt, etwa eine halbe Stunde lang gerührt und dann konzentriert. Der Rückstand wurde erneut in CH₂Cl₂ (100 ml) gelöst, mit gesättigter NaHCO₃-Lösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und zu einem hellgelben Feststoff (1,22 g, 88%) konzentriert. NMR (300 MHz, CDCl₃, 30°C) 7,5 bis 7,6 (1H, d (j = 8 Hz)), 7,02 bis 7,08 (1H, dd (j = 8 Hz, j = 1 Hz), 7,0 bis 7,02 (1H, d (J = 1 Hz), 4,45 bis 4,5 (2H, s), 3,95 bis 4,0 (3H, s).
Stufen 34.g bis 34.i. wurden in analoger Weise zu Stufen 5.a. bis 5.c. durchgeführt, wobei das Produkt aus Stufe 34.f. das Benzylbromid in Stufe 5.a. ersetzte.
Stufe 34.j. 1-(2-(1-((4-Cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)-imid-azol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 30.c. wurde mit dem Produkt von Stufe 34.i. (1-((4-Cyano-3-methoxyphenyl)methyl)-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 563,2 MH⁺.
Beispiel 35: 10-Brom-1-(2-(1-((4-cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Stufen 35.a. bis 35.c. wurden in analoger Weise zu Stufen 21.a. bis 21.c. durchgeführt, wobei in Stufe 35.a. 2,4-Dibrombenzylbromid anstelle von 2-Fluorbenzylbromid verwendet wurden.
Stufe 35.d. 10-Brom-1-(2-(1-((4-cyano-3-methoxy)phenylmethyl)-imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 35.c. (10-Brom-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin) wurde mit dem Produkt von Stufe 34.i. (1-((4-Cyano-3-methoxyphenyl)methyl)-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 623,1, 625,1 MH⁺.
Beispiel 36: 1-(2-(1-((4-Cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-phenylimidazol[1,2a]-[1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 30.c. (1,2-Dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin) wurde mit dem Produkt aus Stufe 34.i. (1-((4-Cyano-3-methoxyphenyl)-methyl)- 5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gereinigt. Massenspektrum 533,3 MH⁺.
Beispiel 37: 4-(2-Bromphenyl)-1-(2-(1-((4-cyano-3-methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluorimidazol[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 32.e. (4-(2-Bromphenyl)-1,2-dihydro-8-fluoroimidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin) wurde mit dem Produkt aus Stufe 34.i. (1-((4-Cyano-3-methoxyphenyl)methyl)-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise zu Stufe 24.b. gekoppelt. Massenspektrum 611,1, 613,1 MH⁺.
Beispiel 38: 1-(2-(1-((3-Methoxy)phenylmethyl)imidazo-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2a][1,4]benzodiazepin
Stufen 38.a. bis 38.c. wurden in analoger Weise zu Stufen 5.a. bis 5.c. durchgeführt, wobei 3-Methoxybenzylbromid anstelle von Benzylbromid in Stufe 5.a. verwendet wurde.
Stufe 38.d. (1-(2-(1-((3-Methoxy)phenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 30.c. (1,2-Dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin) wurde an das Produkt aus Stufe 38.c. (1-((3-Methoxyphenyl)methyl)-5-imidazolessigsäurehydrochlorid) gekoppelt und in analoger Weise wie Stufe 24.b. gekoppelt. Massenspektrum 538,4 MH⁺.
Beispiel 39: 1-(2-(5-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazol-1-yl)-1-oxoethyl-2,5-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazol-[1,2c][1,4]benzodiazepin
Stufen 39.a. bis 39.d. wurden gemäß dem folgenden Schema 39 durchgeführt.

a. EtMgBr/4-Cyanobenzaldehyd/Et₂O/CH₂Cl₂
b. Tfa/Et₃SiH/(Rückfluss)
c. Trt-Cl/Et₃N/THF
d. BrCH₂COBr/DMF
e. Intermediat xxxvi, dann MeOH

Stufe 39.a. (R,S)-4-(Hydroxy-(1-trityl-1H-imidazol-4-yl)methyl)benzonitril
Eine Lösung von 1-Trityl-4-iodimidazol (3,53 g, 8,10 mmol) in CH₂Cl₂ (35 ml) wurde unter N₂ auf etwa –3°C abgekühlt, und 3 M EtMgBr in Et₂O wurde tropfenweise zugegeben, während die Reaktionstemperatur unter etwa 0°C gehalten wurde. Die Lösung wurde etwa eine Stunde lang bei etwa 0°C gerührt, und dann wurde 4-Cyanobenzaldehyd (1,18 g, 9,00 mmol) in einer Portion zugegeben, und die Reaktion wurde etwa 1 Stunde lang auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die Reaktionsmischung wurde dann wieder auf etwa 0°C abgekühlt, und 5% HCl (30 ml) wurden zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde etwa 15 Minuten lang gerührt und dann mit CH₂Cl₂ (2 × 25 ml) extrahiert. Die kombinierten CH₂Cl₂-Phasen wurden mit gesättigtem NaHCO₃ gewaschen, über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde mit EtOAc (25 ml) trituriert und das Produkt abfiltriert (2,92 g, 82%). Massenspektrum 442,3 MH⁺, NMR (300 MHz, DMSO-d₆, 30°C) 7,7 bis 7,8 (2H, d), 7,5 bis 7,6 (2H, d), 7,3 bis 7,5 (9H, m), 7,25 bis 7,3 (1H, s), 7,0 bis 7,15 (6H, m), 6,75 bis 6,8 (1H, s), 5,9 bis 6,90 (1H, m), 5,6 bis 5,7 (1H, m).
Stufe 39.b. 4-((1H-Imidazol-4-yl)methyl)benzonitril
Eine Lösung des Produkts aus Stufe 39.a. (1,10 g, 2,49 mmol) wurde mit Tfa (15 ml) und Et₃SiH behandelt. Die Mischung wurde etwa 2 Stunden lang auf Rückfluss erhitzt. Die Reaktionsmischung wurde dann konzentriert, um Nebenprodukte zu entfernen. Tfa (15 ml) und Et₃SiH (3,0 ml, 18,8 mmol) wurden zugegeben, und die Mischung wurde weitere etwa 2 Stunden lang unter Rückfluss gehalten und dann konzentriert. Es wurden frische Reagenzien zugegeben, und Nebenprodukte wurden durch Verdampfen unter vermindertem Druck nach Bedarf entfernt, bis die Ausgangsmaterialien verbraucht waren. Der Verbrauch des Ausgangsmaterials wurde durch analytische HPLC-Analyse unter Verwendung einer VYDAC C₁₈-Säule (The Nest Group, Southburough, MA, USA) und eines Gradienten von 0 bis 70% CH₃CN/0,1% Tfa über 25 Minuten überwacht. Das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 0% bis 50 CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert, auf das halbe Volumen konzentriert und lyophilisiert, um reines Produkt zu ergeben. Das Produktsalz wurde mit gesättigter NaHCO₃-Lösung alkalisch gemacht, in CH₂Cl₂ (3 × 25 ml) extrahiert, über Na₂SO₄ getrocknet, fil triert und unter vermindertem Druck konzentriert. Massenspektrum 183,9 MH⁺, NMR (300 MHz, CDCl₃, 30°C) 7,55 bis 7,6 (2H, d (J = 8 Hz), 7,55 bis 7,58 (1H, d (J = 1 Hz)), 7,3 bis 7,4 (2H, d (J = 8 Hz)), 6,75 bis 6,8 (1H, d (J = 1 Hz)), 3,9 bis 4,1 (2H, s).
Stufe 39.c. 4-((1-Trityl-1H-imidazol-4-yl)methyl)benzonitril
Das Produkt aus Stufe 39.b. (152 mg, 0,83 mmol), Chlortriphenylmethan (231 mg, 0,83 mmol) und Et₃N (139 μl, 1,0 mmol) wurden in THF (4 ml) gelöst und unter N₂ bei Raumtemperatur etwa 2 Stunden lang gerührt. Eine gesättigte Lösung von NaHCO₃ (5 ml) wurde zugegeben, und das Produkt wurde mit EtOAc (2 × 20 ml) extrahiert. Die organische Phase wurde über Na₂SO₄ getrocknet, filtriert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Rohprodukt wurde durch Kristallisation aus EtOAc und Hexanen gereinigt, um reines Produkt (285 mg, 81%) zu ergeben. Massenspektrum 426,4 MH⁺ (Nebenlinie), NMR (300 MHz, CDCl₃, 30°C) 7,5 bis 7,6 (2H, d (J = 8 Hz), 7,4 bis 7,45 (1H, d (J = 1 Hz)), 7,3 bis 7,4 (11H, m), 7,1 bis 7,2 (6H, m), 6,58 bis 6,62 (1H, d (J = 1 Hz)), 3,9 bis 4,0 (2H, s).
Stufe 39.d. 1-Bromacetyl-1,2-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 39.c. (108 mg, 0,35 mmol) wurde in DMF (1,5 ml) gelöst, und Bromacetylbromid (65 μl, 0,75 mmol) wurde unter Rühren bei Raumtemperatur zugegeben. Die Mischung wurde über Nacht stehen gelassen und wurde dann unter vermindertem Druck konzentriert, um Rohprodukt zu ergeben, das in Stufe 39.c. ohne weitere Reinigung verwendet wurde. Massenspektrum 430,2, 432,2 MH⁺.
Stufe 39.e. (2-(5-((4-Cyano)phenylmethyl)imidazol-1-yl)-1-oxoethyl-2,5-dihydro-8-fluoro-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin
Das Produkt aus Stufe 39.d. (0,32 mmol) wurde zwischen gesättigter NaHCO₃ (2 ml) und EtOAc (5 ml) verteilt. Die wässrige Phase wurde wieder mit EtOAc (5 ml) extrahiert, und die EtOAc-Phasen wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und auf etwa 2 ml konzentriert. Das Produkt aus Stufe 39.c. (134 mg, 0,32 mmol) wurde zugegeben, und die Mischung wurde bei Raumtemperatur etwa 2 Tage lang gerührt und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde in Methanol (4 ml) aufgenommen und etwa 1 Stunde lang auf Rückfluss erwärmt. Die Reaktion wurde gekühlt und unter vermindertem Druck konzentriert, und das Rohprodukt wurde durch präparative HPLC an einer RAININ^TM C₁₈-Säule unter Verwendung eines Gradienten von 0% bis 50% CH₃CN/0,1% Tfa über 45 Minuten gereinigt. Produktfraktionen wurden kombiniert und unter vermindertem Druck konzentriert. Das Tfa-Salz wurde in das Hydrochloridsalz überführt, indem eine 30% methanolische Lösung durch eine Ionenaustauschersäule (BioRad AG 1-X2, 200 bis 400 mesh, 0,6 mÄq/ml, 100 ml, Chloridform) gegeben wurde. Die Produktfraktionen wurden kombiniert, auf ein Volumen von etwa 10 ml konzentriert und aus H₂O lyophilisiert, um reines Produkt (35 mg, 18%) als Dihydrochlorid zu ergeben. Massenspektrum 533,2 MH⁺.

Claims

Verbindung der Formel I,
in der n1 0 oder 1 ist, X jeweils unabhängig für jedes Auftreten (CHR¹¹)_n3(CH₂)_n4Z(CH₂)_n5 ist Z O, N(R¹²), S oder eine Bindung ist, n3 jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0 oder 1 ist, n4 und n5 jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0, 1, 2 oder 3 sind, Y jeweils unabhängig für jedes Auftreten CO, CH₂, CS oder eine Bindung ist, R¹
, oder N(R²⁴R²⁵) ist, R², R¹¹ und R¹² jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-16)-Alkyl und Aryl sind, wobei der Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R⁸ oder R³⁰ substituiert ist, R³ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_2-6)-Alkinyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C_1-6)-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R³⁰ substituiert ist, R⁴ und R⁵ jedes jeweils unabhängig für jedes Auf treten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, Aryl und heterocyclischer Rest ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einer oder mehreren Gruppen R³⁰ substituiert ist, wobei jeder der Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt ist, oder R⁴ und R⁵ zusammenge nommen mit den Kohlenstoffen, an die sie gebunden sind, Aryl bilden, R⁵ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C_1-6)-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten jeweils unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus OH, (C_1-6)-Alkyl, (C_1-6)-Alkoxy, -N(R⁸R⁹), -COOH, -CON(R⁸R⁹) und Halogen substituiert ist, wobei R⁸ oder R⁹ jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H, (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_2-6)-Alkinyl, Aryl oder Aryl-(C_1-6)-alkyl ist, R⁷ unabhängig für jedes Auftreten H, =O, =S oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus (C_1-6)-Alkyl, (C_2-6)-Alkenyl, (C_3-6)-Cycloalkyl, (C_3-6)-Cycloalkyl-(C_1-6)-alkyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl, (C_5-7)-Cycloalkenyl-(C )-alkyl, Aryl, Aryl-(C_1-6)-alkyl, heterocyclischer Rest und heterocyclischer Rest-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten, die jeweils unabhängig ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus OH, (C_1-6)-Alkyl, (C_1-6)-Alkoxy, -N(R⁸R⁹), -COOH, -CON(R⁸R⁹) und Halogen substituiert ist, R¹⁰ C ist, oder wenn n1 = 0 ist, R⁶ und R⁷ mit den Kohlenstoffatomen, an die sie gebunden sind, zusammengenommen werden können, um Aryl oder Cyclahexyl zu bilden, R¹¹ jeweils unabhängig für jedes Auftreten H oder ein gegebenenfalls substituierter Anteil ausgewählt aus der Gruppe be stehend aus (C_1-6)-Alkyl und Aryl-(C_1-6)-alkyl ist, wobei der gegebenenfalls substituierte Anteil gegebenenfalls mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, von denen jeder unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus R₈ und R³⁰, R²² H, (C_1-6)-Alkylthio, (C_3-6)-Cycloalkylthio, R⁸-CO- oder ein Substituent mit der Formel
ist, R²⁴ und R²⁵ jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten H, (C_1-6)-Alkyl oder Aryl-(C_1-6)-alkyl ist, R³⁰ jeweils unabhängig für jedes Auftreten (C_1-6)-Alkyl, -O-R⁸, -S(O)_n6R⁸, -S(O)_n7-N(R⁸R⁹), -N(R⁸R⁹), -CN, -NO₂, -CO₂R⁸, -CON(R⁸R⁹), -NCO-R⁸ oder Halogen ist, n6 und n7 jedes jeweils unabhängig für jedes Auftreten 0, 1 oder 2 ist, wobei der heterocyclischer Rest Azepinyl, Benzimidazolyl, Benzisoxazolyl, Benzofurazanyl, Benzopyranyl, Benzothiopyranyl, Benzofuryl, Benzothiazolyl, Benzothienyl, Benzoxazolyl, Chromanyl, Cinnolinyl, Dihydrobenzofuryl, Dihydrobenzothienyl, Dihydrobenzothiopyranyl, Dihydrobenzothiopyranylsulfon, Furyl, Imidazolidinyl, Imidazolinyl, Imidazolyl, Indolinyl, Indolyl, Isechromanyl, Isoindolinyl, Isochinolinyl, Isothia zolidinyl, Isothiazolyl, Isothiazolidinyl, Morpholinyl, Naphthyridinyl, Oxadiazolyl, 2-Oxazepinyl, 2-Oxopiperazinyl, 2-Oxopiperidinyl, 2-Oxopyrrolidinyl, Piperidyl, Piperazinyl, Pyridyl, Pyridyl-N-oxid, Chinoxalinyl, Tetrahydrofuryl, Tetrahydroisochinolinyl, Tetrahydrochinolinyl, Thiamorpholinyl, Thiamorpholinylsulfoxid, Thiazolyl, Thiazolinyl, Thienofuryl, Thienothienyl oder Thienyl ist, und wobei das Aryl Phenyl oder Naphthyl ist, mit der Maßgabe, dass: wenn n1 = 1 ist, R¹⁰ C ist und R⁶ H ist, dann R¹⁰ und R⁷ zusammengenommen genommen werden können, um
zu bilden, oder wenn n1 = 1 ist, R¹⁰ C ist und R⁷ =O, -H, oder =S ist, dann R¹⁰ und R⁶ zusammengenommen werden können, um
zu bilden, worin X¹, X² und X³ jedes jeweils unabhängig H, Halogen, -NO₂, -NCO-R⁸, -CO₂R⁸, -CN oder -CON(R⁸R⁹) ist, und mit der Maßgabe, dass die Struktur R¹-X-Y keinen (2-Amino-3-thiopropyl)-Anteil oder keinen (2-Amino-1-oxo-3-thiopropyl)-Anteil enthält, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 1, bei der: R¹
oder N(R²⁴R²⁵) ist, und X CH(R¹¹)_n3(CH₂)_n4 oder Z, wobei Z O, S oder N(R¹²) ist, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der R¹
ist, X CH(R¹¹)_n3(CH₂)_n4 ist und n1 0 ist, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der R¹
ist, n3, n4 und n5 jeweils 0 sind, Z eine Bindung ist, Y jeweils unabhängig für jedes Auftreten CO oder CS ist und n1 0 ist, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der R¹
ist, R⁶ H ist, n1 1 ist, R⁷ und R¹⁰ zusammengenommen werden, um
zu bilden, n3 1 ist und R¹¹ H ist, Z O oder eine Bindung ist, n5 0 ist und Y CO, CH₂ oder eine Bindung ist, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der R¹
ist R⁷ H oder =O ist, n1 1 ist, R⁶ und R¹⁰ zusammengenommen werden, um
zu bilden, n3 1 ist und R¹¹ H ist, n5 0 ist, Y CO oder CH₂ ist, Z O oder eine Bindung ist, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben.
Verbindung nach Anspruch 3, bei der die Verbindung 8-Butyl-7-(3-imidazol-5-yl)-1-oxopropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin, 8-Butyl-2(2-hydroxyphenyl)-7-(imidazol-4-yl-propyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin, 8-Butyl-7-(4-imidazolylpropyl)-2-(2-methoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,2a]pyrazin, 7-(2-Imidazol-4-yl)-1-oxo-ethyl)-2-(2-methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-5,6,7,8-tetrahydroimidazol[1,2a]pyrazin, 2-(2-Methoxyphenyl)-8-(1-methylpropyl)-7-(1-oxo-2-(1-phenylmethyl)imidazol-5-yl)ethyl-5,6,7,8-tetrahydroimidazol-[1,2a]pyrazin, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.
Verbindung nach Anspruch 5, bei der die Verbindung 1,2-Dihydro-1-((1H-imidazol-n-yl)methyl)-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2c][1,4]benzodiazepin, 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin, 9-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 9-Chlor-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 10-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.
Verbindung nach Anspruch 8, bei der die Verbindung 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]benzodiazepin, 9-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 9-Chlor-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 10-Brom-1-(2-(1-(4-cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxo-ethyl)-1,2-dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin, 1-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-4-yl)-1-oxoethyl)-1,2-dihydro-8-fluor-4-(2-methoxyphenyl)-imidazo[1,2-c][1,4]-benzodiazepin ist.
Verbindung nach Anspruch 6, bei der die Verbindung 5-(2-(1-(4-Cyanophenylmethyl)imidazol-5-yl)-1-oxoethyl)-5,6-dihydro-2-phenyl-1H-imidazo[1,2-a][1,4]-benzodiazepin oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der die Verbindung 1,2-Dihydro-1-(2-imidazol-1-yl)-1-oxyethyl)-4-(2-methoxyphenyl)imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin, 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-pyridin-3-yl)-1-oxyethyl)-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin, oder 1,2-Dihydro-4-(2-methoxyphenyl)-1-(2-pyridin-4-yl)-1-oxyethyl)-imidazo[1,2a][1,4]benzodiazepin, oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der die Verbindung

oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wirksame Menge einer Verbindung gemäß Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salz derselben und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger umfasst.
Verwendung einer Verbindung gemäß Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes derselben zur Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Erkrankung ausgewählt aus de Gruppe bestehend aus Fibrose, benigne prostatische Hyperplasie, Atherosklerose, Restenose, Brustkrebs, Kolonkrebs, Pankreaskrebs, Prostatakrebs, Lungenkrebs, Ovarkrebs, epidermalem Krebs, hämatopoetischen Krebs und Hepatitis delta Virus-Infektion.
Verwendung einer Verbindung gemäß Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes derselben zur Herstellung eines Medikaments für die Behandlung eines Ras-abhängigen Tumors in einer Person mit Bedarf daran.
Verwendung einer Verbindung gemäß Anspruch 1 oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes derselben zur Herstellung eines Medikaments für die Inhibierung von Prenyltransferase in einer Person mit Bedarf daran.
Verbindung nach Anspruch 2, bei der die Verbindung

oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben ist.