ES2350282T3

ES2350282T3 - Tiazol pirazolopirimidinas como antagonistas del receptor de crf1.

Info

Publication number: ES2350282T3
Application number: ES07842582T
Authority: ES
Inventors: Jason Kenneth Myers; Philip Arthur Hipskind; Takako Takakuwa; Erik James Hembre; Chafiq Hamdouchi Hamdouchi; James Lee Toth; Zhaogen Chen
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2006-09-20
Filing date: 2007-09-17
Publication date: 2011-01-20
Anticipated expiration: 2027-09-17
Also published as: DK2094709T3; MY146388A; TWI402269B; IL197614A; JP5161226B2; UA96458C2; AU2007297421A1; PE20081377A1; IL197614A0; PL2094709T3; HK1132505A1; EP2094709A1; KR20090052366A; CN101516887B; EA015179B1; DE602007009305D1; ATE481405T1; AU2007297421B2; NZ575572A; CY1110854T1

Abstract

Un compuesto de Fórmula I **Fórmula** en la que: R1 y R2 son, independientemente, etilo o n-propilo; R3 es hidrógeno, CI, Br, metilo, trifluorometilo o metoxi; R4 es hidrógeno, Br, RaRbN-, metoximetilo, n-butilo, acetamido, piridin-4-ilo, morfolin-4-ilo, **Fórmula** R - H2NCH2CH2-, (CH3)3COC(O)NHCH2CH2-, o CH3CH2CH2NHCH2CH2-; o una sal farmacéuticamente aceptable de20 l mismo.

Description

CAMPO DE LA INVENCIÓN

Esta invención se refiere a nuevos compuestos de tiazol pirazolopirimidina, a composiciones farmacéuticas de los mismos, y al uso de los mismos como antagonistas del receptor de CRF1 en el tratamiento de trastornos psiquiátricos y neuroendocrinos, enfermedades neurológicas, y síndrome metabólico. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El factor de liberación de corticotropina (CRF) es un péptido de 41 aminoácidos que es el regulador fisiológico principal de la secreción del péptido derivado de proopiomelanocortina (POMC) desde la glándula pituitaria anterior. Además de su papel endocrino en la glándula pituitaria, la localización inmunohistoquímica de CRF ha demostrado que la hormona tiene una amplia distribución extrahipotalámica en el sistema nervioso central y produce un amplio espectro de efectos autónomos, electrofisiológicos y conductuales, coherentes con un papel neurotransmisor o neuromodulador en el cerebro. Existe también evidencia de que el CRF desempeña un papel significativo en la integración de la respuesta en el sistema inmune a agentes creadores de estrés fisiológicos, psicológicos e inmunológicos.

El CRF se ha visto implicado en trastornos psiquiátricos y enfermedades neurológicas, incluyendo depresión y ansiedad, así como las siguientes: enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, parálisis supranuclear progresiva, esclerosis lateral amiotrófica, enfermedad de Parkinson, epilepsia, migrañas, alcoholismo y toxicomanía y síntomas de abstinencia asociados, obesidad, síndrome metabólico, hiperplasia suprarrenal congénita, enfermedad de Cushing, hipertensión, apoplejía, síndrome del intestino irritable, úlcera gástrica inducida por estrés, síndrome premenstrual, disfunción sexual, parto prematuro, trastornos inflamatorios, alergias, esclerosis múltiple, dolor visceral, trastornos del sueño, tumores de la pituitaria o tumores ectópicos derivados de pituitaria, síndrome de fatiga crónica y fibromialgia.

Los subtipos del receptor de CRF, CRF1 y CRF2, se han identificado y se distribuyen heterogéneamente dentro del cerebro, sugiriendo así una diversidad funcional potencial. Por ejemplo, los receptores de CRF1, ampliamente distribuidos en el cerebro, están fuertemente implicados en la emocionalidad que acompaña a la exposición a agentes creadores de estrés medioambientales. Significativamente, los receptores de CRF1, no de CRF2, parecen mediar comportamientos de tipo ansiogénico seleccionado. Una distribución septal/hipotalámica más discreta y la disponibilidad de ligandos endógenos alternativos sugieren un papel funcional diferente para el receptor de CRF2. Por ejemplo, se informa de un nuevo neuropéptido de la familia CRF con afinidad preferente por los receptores CRF2 respecto a CRF1, que suprime el apetito sin producir el perfil de activación conductual observado con el agonismo selectivo de CRF1. En otros casos, el agonismo de CRF2 produce efectos similares a aquellos presentados para los antagonistas de CRF1 o deleción del gen CRF1. Por ejemplo, aunque los agonistas de CRF2 se han propuesto como agentes antiobesidad, los antagonistas de CRF1 pueden ser también un tratamiento importante para la obesidad.

Ciertas pirrolo[2,3-d]pirimidinas, pirrolo[3,2-d]pirimidinas, pirazolo[1,5-a]pirimidinas, 1,2,3triazolo[4,5-b]piridinas, y pirazolo[1,5-a]-1,3,5-triazinas, útiles como antagonistas de CRF, se describen en los documentos WO 94/13676, WO 97/29109, WO 98/08847, y WO 98/03510. El documento WO 00/59908 describe ciertas pirazolo[1,5-a]pirimidinas que se describen como antagonistas de CRF. El documento WO 2005/063755 describe un género de compuestos que abarcan pirazolo[1,5-a]pirimidinas y pirazolo[1,5-a]pirimidin-2-onas, describiéndose los compuestos de este género también como antagonistas de CRF. Los antagonistas de CRF 3-(4-cloro-2morfolin-4-il-tiazol-5-il)-8-(1-etilpropil)-2,6-dimetil-imidazo[1,2-b]piridazina y 4-(2-butilamino)-2,7dimetil-8-(2-metil-6-metoxipirid-3-il)pirazolo[1,5-a]-1,3,5-triazina se describen en J. Neuroscience, Vol. 27, Nº 10, 2718-2726 (2007) y en el documento WO 02/072202, respectivamente. He et al. describen en J. Med. Chem., Vol. 43, 449-456 (2000) SAR estudios en la serie de la pirazolo[1,5a]-1,3,5-triazina que conduce al descubrimiento del antagonista de CRF 4-(1,3-dimetoxiprop-2ilamino)-2,7-dimetil-8-(2,4-diclorofenil)-pirazolo[1,5-a]-1,3,5-triazina. Chen et al. en J. Med. Chem., Vol. 47, 4787-4798 (2004) describe una serie de 3-piridilpirazolo[1,5-a]pirimidinas, que se describen como antagonistas de CRF.

El documento WO 01/23388 describe ciertas pirazolo[1,5-a]pirimidinas y pirazolo[1,5-a]1,3,5-triazinas sustituidas con amino que se describen como moduladores selectivos del receptor del neuropéptido de mamífero Y1 (NPYI).

La presente invención proporciona nuevas tiazol pirazolopirimidinas útiles como antagonistas del receptor de CRF1. En vista de lo anterior, es deseable descubrir nuevos antagonistas de CRF1 eficaces y selectivos como agentes terapéuticos potencialmente valiosos para el tratamiento de trastornos psiquiátricos y neuroendocrinos, enfermedades neurológicas, y síndrome metabólico. Además, puesto que una mayoría de fármacos comerciales para el SNC y cardiovasculares presentan perfiles de biodisponibilidad y farmacocinéticos desfavorables, también es deseable descubrir nuevos compuestos con perfiles de biodisponibilidad y farmacocinéticos favorables respecto a antagonistas de CRF conocidos, tales como CP154526 y NBI30775. SUMARIO DE LA INVENCIÓN

En una realización, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I en la que:

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R1 y R2 son, independientemente, etilo o n-propilo;

R3 es hidrógeno, CI, Br, metilo, trifluorometilo o metoxi;

R4 es hidrógeno, Br, RaRbN-, metoximetilo, n-butilo, acetamido, piridin-4-ilo, morfolin-4-ilo,

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Ra Rb

y son, independientemente, hidrógeno, alquilo C1-C3, H2NCH2CH2-, (CH3)3COC(O)NHCH2CH2-, o CH3CH2CH2NHCH2CH2-; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende: un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En otra realización, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de depresión, ansiedad, alcoholismo o toxicomanía, obesidad, hipertensión, síndrome metabólico, síndrome del intestino irritable, epilepsia, apoplejía, trastornos del sueño, alergia, migrañas, síndrome premenstrual, infertilidad, disfunción sexual, hiperplasia suprarrenal congénita, enfermedad de Cushing, parto prematuro, úlcera gástrica inducida por estrés, trastornos inflamatorios, tumores de pituitaria o ectópicos derivados de pituitaria, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, dolor visceral o esclerosis múltiple.

En otra realización, la presente invención se refiere a un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de depresión, ansiedad, alcoholismo o toxicomanía, obesidad, hipertensión, síndrome metabólico, síndrome del intestino irritable, epilepsia, apoplejía, trastornos del sueño, alergia, migrañas, síndrome premenstrual, infertilidad, disfunción sexual, hiperplasia suprarrenal congénita, enfermedad de Cushing, parto prematuro, úlcera gástrica inducida por estrés, trastornos inflamatorios, tumores de pituitaria o ectópicos derivados de pituitaria, síndrome de fatiga crónica, fibromialgia, dolor visceral o esclerosis múltiple.

En otra realización, la presente invención se refiere a un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Como se han usado anteriormente, y a lo largo de la descripción de la invención, los siguientes términos, a menos que se indique otra cosa, se entenderá que tienen los siguientes significados:

"Alquilo" significa un grupo hidrocarburo alifático saturado, que puede ser lineal o ramificado, que tiene de 1 a 5 átomos de carbono en la cadena.

"Excipiente farmacéuticamente aceptable" se refiere a una formulación de vehículo, solución, o aditivo farmacéuticamente aceptable, para potenciar las características de formulación. Dichos excipientes deben ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el destinatario de la misma y los conoce bien el experto (véase, por ejemplo, Remingtons Pharmaceutical Sciences, 19ª Edición, Mack Publishing Company, 1995).

"Sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a las sales de adición de ácidos, y sales de adición de bases, orgánicas e inorgánicas, relativamente no tóxicas, de los compuestos de la presente invención. Estas sales pueden prepararse in situ durante el aislamiento y purificación finales de los compuestos. En particular, las sales de adición de ácidos pueden prepararse por separado, haciendo reaccionar el compuesto purificado en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado y aislando la sal formada de esta manera (véase, por ejemplo, Remingtons Pharmaceutical Sciences, 19ª Edición, Mack Publishing Company, 1995).

"Cantidad terapéuticamente eficaz" o "cantidad eficaz" significa la cantidad del compuesto de fórmula I de la presente invención, o composición farmacéutica que contiene un compuesto de fórmula I de la presente invención, que provocará la respuesta biológica o médica de, o el efecto terapéutico deseado, en un tejido, sistema, animal o ser humano que está siendo buscado por el investigador, veterinario, médico o internista.

Las expresiones "tratamiento", "tratar", "tratando" y similares, pretenden incluir tanto ralentizar como invertir el progreso de un trastorno. Estas expresiones también incluyen aliviar, mejorar, atenuar, eliminar o reducir uno o más síntomas de un trastorno o afección, incluso aunque el trastorno o afección no se haya eliminado realmente e incluso aunque el progreso del trastorno o afección no se haya ralentizado o invertido por sí mismo. El término "tratamiento" y términos similares también incluyen tratamiento preventivo (por ejemplo, profiláctico) y tratamiento paliativo.

La prevención de la enfermedad se manifiesta por una prolongación o retraso del comienzo de los síntomas de la enfermedad.

El símbolo "-" en una estructura molecular indica la posición de la unión para un sustituyente particular.

Cuando cualquier variable aparece más de una vez en cualquier constituyente o en la fórmula I, su definición en cada aparición es independiente de su definición en cualquier otra aparición. También, se permiten las combinaciones de sustituyentes y/o variables, sólo si dichas combinaciones dan como resultado compuestos estables. Al elegir los compuestos de la presente invención, un especialista habitual en la técnica reconocerá que los diversos sustituyentes, es decir, R1, R2, etc., deben elegirse de conformidad con principios bien conocidos de la conectividad de la estructura química.

Según la nomenclatura convencional usada a lo largo de esta divulgación, la parte terminal de la cadena lateral designada se describe en primer lugar, seguida de la funcionalidad adyacente hacia el punto de unión. Por ejemplo, un sustituyente arilcarbonilaminoalquilo es equivalente a arilC(O)-NH-alquil-.

La presente invención contempla las siguientes realizaciones que, como alternativa, pueden combinarse adicionalmente:

(a): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son etilo;

(b): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son n-propilo;

(c): Un compuesto de Fórmula I en la que R3 es CI, Br, metilo o trifluorometilo;

(d): Un compuesto de Fórmula I en la que R3 es CI;

(e): Un compuesto de Fórmula I en la que R3 es Br;

(f): Un compuesto de Fórmula I en la que R4 es RaRbN-, piridin-4-ilo, morfolin-4-ilo, o

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(g): Un compuesto de Fórmula I en la que R4 es morfolin-4-ilo;

(h): Un compuesto de Fórmula I en la que R4 es

(i): Un compuesto de Fórmula I e pendientemente, alquilo C1-C3;

(j): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son etilo, R3 es CI, y R4 es morfolin-4-ilo;

(k): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son n-propilo, R3 es CI, y R4 es morfolin-4-ilo;

(o) Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son n-propilo, R3 es CI, y R4 es

(p): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son etilo, R3 es Br, y R4 es

(q): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son n-propilo, R3 es Br, y R4 es

(r): Uso de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar depresión o ansiedad;

(s): Uso de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar el alcoholismo o toxicomanía;

(t): Uso de un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para tratar el alcoholismo o toxicomanía y los síntomas de abstinencia asociados;

(u): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para la unión a CRF1 de ≤ 500 nM;

(v): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para la unión a CRF1 de ≤ 50 nM;

(w): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para la unión a CRF1 de ≤ 5 nM;

(x): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para la unión a CRF1 de ≤ 500 nM y que se une selectivamente a CRF1 (es decir, menor Ki) respecto a CRF2;

(y): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para la unión a CRF1 de ≤ 50 nM y que se une selectivamente a CRF1 (es decir, menor Ki) respecto a CRF2;

(z): Un compuesto de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que presenta un valor de Ki para unión a CRF1 de ≤ 5 nM y que se une selectivamente a CRF1 (es decir, menor Ki) respecto a CRF2; y/o (aa) Compuestos particulares ejemplificados con biodisponibilidad y perfiles farmacocinéticos superiores respecto a algunos antagonistas de CRF conocidos (por ejemplo, CP154526 y NBI30775), tales como el Ejemplo 15.

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(I): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son etilo, R3 es Br, y R4 es morfolin-4-ilo;

(m): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son n-propilo, R3 es Br, y R4 es morfolin-4-ilo;

(n): Un compuesto de Fórmula I en la que R1 y R2 son etilo, R3 es CI, y R4 es

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Los compuestos de la presente invención se formulan, preferiblemente, en forma de composiciones farmacéuticas administradas por diversas vías. Preferiblemente, dichas composiciones son para administración oral. Dichas composiciones farmacéuticas y procedimientos para preparar las mismas se conocen bien en la técnica (véase, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, A. Gennaro, et al., eds., 19ª ed., Mack Publishing Co., 1995).

Los compuestos de Fórmula I, generalmente, son eficaces en un amplio intervalo de dosificación. Por ejemplo, las dosificaciones por día, normalmente, están dentro del intervalo de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal. En algunos casos, los niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente pueden ser más que adecuados, mientras que en otros casos pueden emplearse dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario perjudicial y, por lo tanto, el intervalo de dosificación anterior no pretende limitar el alcance de la invención de ninguna manera. Se entenderá que la cantidad del compuesto realmente administrada estará determinada por un médico, a la luz de las circunstancias pertinentes, incluyendo la afección a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto o compuestos administrados realmente, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, y la gravedad de los síntomas del paciente.

Los compuestos de Fórmula I son antagonistas de CRF-1 y, como tales, son útiles para tratar una afección que puede tratarse reduciendo el tono o la estimulación del receptor de CRF1. El factor de liberación de corticotropina (CRF), un péptido de 41 aminoácidos que es el regulador fisiológico principal de la secreción del péptido derivado de proopiomelanocortina (POMC) desde la glándula pituitaria anterior [J. Rivier et al., Proc. Natl. Acad. Sci (EE.UU.) 80:4851 (1983); W. Vale et al., Science 213:1394 (1981)], se ha relacionado con numerosas afecciones médicas. Por ejemplo, además de su papel endocrino en la glándula pituitaria, la localización inmunohistoquímica de CRF ha demostrado que la hormona tiene una distribución extrahipotalámica amplia en el sistema nervioso central y produce un amplio espectro de efectos autónomos, electrofisiológicos y conductuales, coherente con un papel neurotransmisor o neuromodulador en el cerebro [W. Vale et al., Rec. Prog. Horm. Res. 39:245 (1983); G. F. Koob, Persp. Behav. Med. 2:39 (1985); E. B. De Souza et al., J. Neurosci. 5:3189 (1985)]. Existe evidencia también de que CRF desempeña un papel significativo en la integración de la respuesta en el sistema inmune a los creadores de estrés fisiológicos, psicológicos, e inmunológicos [véase, por ejemplo, J. E. Blalock, Physiological Reviews 69:1 (1989); J. E. Morley, Life Sci. 41:527(1987)].

El CRF está implicado en trastornos psiquiátricos y enfermedades neurológicas incluyendo depresión y ansiedad [D. M. Nielsen, Life Sci. 78:909-919; H. E. Kunzel et al., J. Psychiatr. Res. 37:525-533; D. R. Gehlert et al., Eur. J. Pharmacol. 509:145-153]. Un papel para CRF se ha postulado también en la etiología y patofisiología de la enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, parálisis supranuclear progresiva y esclerosis lateral amiotrófica, puesto que están relacionadas con la disfunción de las neuronas CRF en el sistema nervioso central [para una recapitulación, véase: E. B. De Souze, Hosp. Practice 23:59 (1988)]. Chronic administration in CRF has been shown to produce impairment of the dopamine system suggesting a role in Parkinson’s disease [E. Izzo et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 81:701 -708 (2005)]. Otros trastornos neurológicos, en los que el CRF está implicado incluyen epilepsia [T. Z. Baram et al., Brain Res. 770:89-95 (1997)] y migrañas [T. C. Theoharides et al., Endocrinology 136:5745-5750 (1995)]. El CRF se ha visto implicado en el alcoholismo y toxicomanía y síntomas de abstinencia asociados [D.

H. Overstreet et al., Pharmacol. Biochem. Behav. 77:405-413; Y. Shaham et al., Psychopharmacology (Berl) 137:184-190]. Además, hay evidencia de que el CRF tiene un papel en diversos trastornos endocrinos y enfermedades cardiovasculares tales como obesidad [E. Timofeeva y D. Richard, Neuroendocrinology 66:327-340 (1997)], síndrome metabólico [A. M. Ward et al., Metabolism 53:720-726(2004)], hiperplasia suprarrenal congénita [D. P. Merke y G. B. Cutler Jr., Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 30:121 -135 (2001)], enfermedad de Cushing [M. Labeuretal., Curr. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. 4:335-342 (2004)], hipertensión

[R. J. Briscoe, et al., Brain Res. 881:204-207 (2000)], y apoplejía [S. L. Stevens et al., J. Cereb. Blood Flow Metab. 23:1151 -1159 (2003)]. Se ha demostrado que las molestias gástricas, tales como síndrome del intestino irritable [Y. Tache et al., Eur J. Surg. Sups1:16-22 (2002)] y úlcera gástrica inducida por estrés [K. E. Gabry et al., Mol. Psychiatry 7:474-483, 433 (2002)] están relacionadas con el CRF. Además, hay una indicación de que el CRF tiene un papel en diversas áreas de la salud femenina humana, por ejemplo, síndrome premenstrual [F. Facchinetti et al., Psychosom. Med. 56:418-422 (1994)], infertilidad [L. Ghizzoni et al., Endocrinology 138:4806-4811 (1997)], disfunción sexual [J. E. Jones et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 283:R591-597 (2002)], y parto prematuro [P. D. Wadhwa et al., Am. J. Obstet. Gynecol. 191:10631069 (2004)]. Existe evidencia también de que el CRF tiene un papel significativo en el sistema inmune, indicando un potencial terapéutico para tratar trastornos inflamatorios [A. Gravanis y A. N. Margioris, Curr. Med. Chem. 12:1503-1512 (2005)], alergias [L. K. Singh et. al., Brain Behav. Immun. 13:225-239 (1999)], esclerosis múltiple y otros trastornos autoinmunes [C. Benou et al., J. Immunol. 174:5407-5413 (2005)]. Además de lo anterior, el CRF se ha visto implicado en el dolor visceral [M. Nijsen et al., Neurogastroenterol. Motil. 17: 423-432 (2005)], trastornos del sueño [T. M. Buckley y A. F. Schatzberg, J. Clin. Endocrinol. Metab. 90:3106-3114(2005)], tumores de la pituitaria o tumores ectópicos derivados de pituitaria [K. D. Dieterich et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 83:3327-3331 (1998)], síndrome de fatiga crónica y fibromialgia [G. Neeck y L. J. Crofford, Rheum. Dis. Clin. North Am. 26: 989-1002 (2000)].

Los subtipos del receptor de CRF, CRF1 y CRF2, se han identificado y se distribuyen heterogéneamente dentro del cerebro [D. T. Chalmers et al., TIPS 17:166-72 (1996)] sugiriendo, de esta manera, una diversidad funcional potencial [S. C. Heinrichset al., Regul. Peptides 71:15 (1997)]. Por ejemplo, el receptor de CRF1 ampliamente distribuido en el cerebro está fuertemente implicado en la emocionalidad que acompaña a la exposición a creadores de estrés medioambientales [G. Liebsch et al., Regul. Peptides 59: 229-39 (1995); D. W. Schulz, PNAS 93: 10477-82 (1996)]. Significativamente, los receptores de CRF1, no CRF2, parecen mediar comportamientos de tipo ansiogénico seleccionados [Heinrichs et al., 1997]. Una distribución septal/hipotalámica más discreta [D. T. Chalmers et al., J. Neurosci. 15(10): 6340-50 (1995)] y la disponibilidad de ligandos endógenos alternativos [J. Vaughan et al., Nature 378: 287-92 (1995)] sugiere un papel funcional diferente para el receptor de CRF2 [Heinrichs et al., 1997]. Por ejemplo, se informa de que un nuevo neuropéptido de la familia CRF con afinidad preferente por CRF2 respecto a los receptores de CRF1, suprime el apetito sin producir el perfil de activación conductual observado con el agonismo selectivo de CRF1 (H. Tezval et al., PNAS 101(25): 9468-9473 (2004)]. En algunos casos, el agonismo de CRF2 produce efectos similares a aquellos presentados para los antagonistas de CRF1 o la deleción del gen de CRF1 [S. C. Heinrichs, Trends in Pharmacological Sciences 20(8):311-5 (1999)]. Por ejemplo, aunque los agonistas de CRF2 se han propuesto como agentes antiobesidad, los antagonistas de CRF1 también pueden ser un tratamiento importante para la obesidad [C. Contoreggi et al., Neuroendocrinology 80(2):111-23 (2004)]. PREPARACIÓN DE LOS COMPUESTOS DE LA INVENCIÓN

Todos los compuestos de la presente invención pueden prepararse químicamente, por ejemplo, siguiendo las rutas sintéticas expuestas más adelante. Sin embargo, el siguiente análisis no pretende limitar el alcance de la presente invención de ninguna manera. Por ejemplo, las etapas sintéticas específicas para cada una de las rutas descritas pueden combinarse de diferentes maneras, o junto con etapas de diferentes esquemas, para preparar compuestos de Fórmula I adicionales. Los productos de cada etapa pueden recuperarse por procedimientos convencionales,

5 incluyendo extracción, evaporación, precipitación, cromatografía, filtración, trituración, cristalización, y similares. En los Esquemas a continuación, todos los sustituyentes, a menos que se indique otra cosa, son como se han definido anteriormente y los reactivos adecuados se conocen y aprecian bien en la técnica.

10 Esquema 1

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La formación de un compuesto de fórmula (6a,b), (7), u 8(a-c) puede realizarse de acuerdo con reacciones como las representadas en el Esquema 1. Un compuesto apropiado de fórmula (6a,b), (7), u (8a-c) es uno en el que R1 y R2 son como se ha definido para la fórmula I y R3a = H o CH3, R3b = Br o CH3 yR3c = o H, CH3 o Br.

En el Esquema 1, Etapa 1, la pirazolo[1,5-a]pirimidina-7-ona de fórmula (1) se convierte en 7-cloro-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina usando oxicloruro de fósforo y dimetilanilina en un disolvente inerte, tal como tolueno, a la temperatura de reflujo del disolvente.

En la Etapa 2, un reactivo de Grignard de fórmula (3) (X = CI o Br) se hace reaccionar con el cloruro de fórmula (2), en un disolvente inerte tal como tolueno, a la temperatura de reflujo proporcionando la 7-alquil pirazolopirimidina de fórmula (4).

Como alternativa, puede obtenerse una 7-alquil pirazolopirimidina de fórmula (4) como se muestra en las Etapas 3, 4, y 5. En la Etapa 3 el acetoacetato de etilo se acila con un haluro de ácido de fórmula (4a) en presencia de cloruro de magnesio proporcionando un diceto-éster de fórmula (4b). El diceto-éster de fórmula (4b) se descarboxila en condiciones de Krapcho proporcionando la dicetona de fórmula (4c). Por ejemplo, (4b) se calienta en dimetilsulfóxido a una temperatura de aproximadamente 130 a 170 ºC para realizar la descarboxilación. En la Etapa 5, la dicetona de fórmula (4c) se cicla con 3-amino-5-metilpirazol dando la 7-alquil pirazolopirimidina de fórmula (4) en un disolvente prótico tal como metanol, etanol, o ácido acético. Las condiciones preferidas son el uso de ácido acético a una temperatura de aproximadamente 0 a 60 ºC.

La pirazolopirimidina de fórmula (4) se funcionaliza a una yodo pirazolopirimidina de fórmula

(5) en la Etapa 6 usando un exceso de N-yodosuccinimida en acetonitrilo.

En el Esquema 1, Etapa 7 u 8, la yodo pirazolopirimidina de fórmula (5) se hace reaccionar con un haluro de tiazol cinc en una reacción de acoplamiento cruzado de Negishi proporcionando una tiazolil pirazolopirimidina de fórmula (6a) o (6b) (Jensen, J.; Skjaerbaek, N.; Vedso, P. Synthesis 2001, 128). El haluro de tiazol cinc se genera usando procedimientos bien conocidos por los especialistas en la técnica. Por ejemplo, en la Etapa 7, se trata 2-trimetilsilaniltiazol con n-, sec-,

o terc-butillitio, seguido de intercambio litio-cinc con ZnCI2. El reactivo de organocinc se acopla con la yodo pirazolopirimidina de fórmula (5) en presencia de un catalizador de paladio, por ejemplo, diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenil-fosfino)ferroceno]paladio (II), en un disolvente inerte, tal como THF, a la temperatura de reflujo durante aproximadamente 12 a 36 horas, proporcionando una tiazol pirazolopirimidina de fórmula (6a).

Como alternativa, en la Etapa 8, se genera un bromuro de tiazol cinc usando 5-bromo-4metiltiazol y cinc metálico, y se usa en el acoplamiento cruzado de Negishi, básicamente como se describe para la Etapa 7, proporcionando una tiazol pirazolopirimidina de fórmula (6b).

En el Esquema 1, Etapa 9, un tiazol de fórmula (6a,b) se broma dando un bromo o dibromo

tiazol de fórmula (7), en la que R3b = Br o CH3. El tiazol se broma con 1 ó 2 equiv. de Nbromosuccinimida, dependiendo de si R3a es CH3 o H, respectivamente. Se obtiene un alquil tiazol de fórmula (8a-c) a partir de un tiazol de fórmula (6a,b) en la Etapa 11, o de un bromotiazol de fórmula (7) en la Etapa 10. En la Etapa 10, el intercambio

5 halógeno-litio con n-, sec-,ot-butillitio proporciona un reactivo de tiazol litio, que posteriormente se hace reaccionar con electrófilos, tales como haluros de alquilo, tales como yodometil metiléter o yodobutano. En la Etapa 11, el reactivo de tiazol litio se forma por desprotonación usando n-, sec-,

o terc-butillitio y, posteriormente, se hace reaccionar después con un electrófilo, tal como yodometil metiléter o yodobutano.

10 Un especialista en la técnica apreciará que el sistema de anillo de tiazol se funcionaliza fácilmente y que los intermedios de tiazol tales como 2-trimetilsilanil-tiazol (Dondoni, A.; et. al. J. Org. Chem. 1988, 53, 1748) pueden prepararse fácilmente. El 5-bromo-4-metiltiazol se obtiene por bromación de 4-metiltiazol con bromo en ácido acético (Collins, I. J., et. al. documento WO 2003093252, 13 Nov 2003). La 2,5-dimetil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidina-7-ona (1) se prepara

15 fácilmente por condensación de acetoacetato de etilo y 5-metil-2H-pirazol-3-ilamina en ácido acético a reflujo.

Esquema 2

imagen3

La formación de un compuesto de fórmula (9), (10), o (11) puede realizarse de acuerdo con reacciones como las representadas en el Esquema 2. Un compuesto apropiado de fórmula (9), (10), o (11) es uno en el que R1, R2, Ra, y Rb son como se han definido para la fórmula I y R3b = Br

o CH3, y R4a = -NRaRb o -N-morfolinilo y "het" se define como se representa.

5 En la Etapa 1, un bromotiazol de fórmula (7) se acopla con un reactivo de cinc heterocíclico en una reacción de acoplamiento cruzado de Negishi proporcionando un tiazol heterocíclico de fórmula (9). Por ejemplo, 1-metil-1,2,4-triazol se trata con n-, sec-, o terc-butillitio, seguido de cloruro de cinc, a aproximadamente -80 a -65 ºC, y se hace reaccionar in situ con un bromotiazol de fórmula (7). La reacción se realiza preferentemente en un disolvente inerte, tal como THF, en

10 presencia de un catalizador de paladio, tal como diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) o tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0). La reacción se calienta a temperatura de reflujo. Como alternativa, el reactivo de cinc heterocíclico se forma a partir de un haloheterociclo, tal como 4-yodopiridina y cinc metálico. En el Esquema 2, Etapa 2, se forma un intermedio de 2-formil tiazol mediante intercambio

15 halógeno-litio usando n-, sec-,ot-butillitio seguido de reacción con N-formil morfolina. El formil tiazol se somete a una aminación reductora en presencia de una amina orgánica, tal como morfolina, proporcionando un morfolinil metil tiazol de fórmula (10). Las aminaciones reductoras se conocen bien en la técnica, típicamente usando un borohidruro inorgánico reactivo, tal como borohidruro sódico o cianoborohidruro sódico. Las condiciones preferidas implican el uso de

20 triacetoxiborohidruro sódico en un disolvente inerte, tal como diclorometano o THF.

En la Etapa 3, un bromotiazol de fórmula (7) experimenta una reacción de desplazamiento con una amina de fórmula -NR3Rb o con morfolina, proporcionando un aminotiazol de fórmula (11). La reacción se realiza en un disolvente inerte, tal como THF o dioxano, usando una base inorgánica, tal como carbonato de cesio a 70 a 110 ºC.

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Esquema 3

imagen1

La formación de un compuesto de fórmula (13), (14), o (15) puede realizarse de acuerdo con reacciones como las representadas en el Esquema 3. Un compuesto apropiado de fórmula (13), (14), o (15) es uno en el que R1, R2, y R4 son como se han definido para la fórmula I.

Un especialista en la técnica reconocerá que un 4-bromotiazol, tal como el de fórmula (12) puede manipularse fácilmente a otra funcionalidad. Por ejemplo, en la Etapa 1, el bromuro puede deshalogenarse con cloruro cuproso para dar un tiazol de fórmula (13) que posteriormente se clora con N-clorosuccinimida proporcionando un 4-clorotiazol de fórmula (14).

En el Esquema 3, Etapa 3, un 4-bromotiazol de fórmula (12) se desplaza con metóxido sódico en presencia de yoduro de cobre (I) en metanol a aproximadamente 100 a 120 ºC en un disolvente inerte tal como dimetilformamida, proporcionando un 4-metoxi tiazol de fórmula (15).

Esquema 4

imagen1

La formación de un compuesto de fórmula (17), (18), (19), (20), (20a), o (21) puede realizarse de acuerdo con reacciones como las representadas en el Esquema 4. Un compuesto apropiado de fórmula (17), (18), (19), (20), (20a), o (21) es uno en el que R1, R2, Ra, y Rb son como se han definido para la fórmula I y R4a es -NRaRb o-N-morfolinilo y "het" se define como se representa.

En el Esquema 4, Etapa 1, una yodopirazolopirimidina de fórmula (5) y un 5-bromotiazol de fórmula (16) experimentan un acoplamiento cruzado de Negishi para formar un dimetilpirroliltiazol de fórmula (17). Por ejemplo, el 5-bromotiazol de fórmula (16) se trata con n-, sec-, o terc-butillitio y después con cloruro de cinc a aproximadamente -80 a -65 ºC. El reactivo de organocinc se hace reaccionar in situ con una yodopirazolopirimidina de fórmula (5). La reacción de acoplamiento se

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realiza preferentemente en un disolvente inerte, tal como THF, a temperatura de reflujo, en presencia de un catalizador de paladio, tal como bis(tri-t-butilfosfina) paladio (0).

En la Etapa 2, un dimetilpirroliltiazol de fórmula (17) se desprotege proporcionando un aminotiazol de fórmula (19). El dimetilpirrol se trata con hidroxilamina en ácido acético a una temperatura de aproximadamente 60 a 100 ºC, durante aproximadamente 4 a 8 h, preferiblemente durante aproximadamente 6 h. En la Etapa 3, para formar la tiazol acetamida de fórmula (18), se usan las mismas condiciones que en la Etapa 2, con la excepción de que la reacción continúa durante aproximadamente 72 h.

En el Esquema 4, Etapa 4, un 2-aminotiazol de fórmula (19) se convierte en un 2bromotiazol de fórmula (20) usando una reacción de Sandmeyer modificada. Las condiciones preferidas son el uso de un alquilnitrito, tal como t-butilnitrito, y bromuro de cobre (II), en acetonitrilo a una temperatura de aproximadamente 60 a 80 ºC.

En la Etapa 5, un 2-bromotiazol de fórmula (20) experimenta una reacción de desplazamiento con una amina de fórmula -NRaRb o con morfolina proporcionando un aminotiazol de fórmula (21). La reacción se realiza en un disolvente inerte, tal como metanol, THF, o dioxano, o se trata puro, con un exceso de la amina, a una temperatura de aproximadamente 70 a 110 ºC. Como alternativa, la reacción se realiza con la amina reaccionante y un exceso de trietilamina, o una base inorgánica, tal como carbonato de cesio. Se contempla también en la síntesis de aminotiazoles de fórmula (21) diversas etapas de desprotección, tales como retirada del terc-butil éster de ácido carbámico (BOC), según se requiera o sea beneficioso para realizar las reacciones anteriores, en el que -NRaRb lleva una funcionalidad amina adicional, como se define para la fórmula I. La selección y uso de grupos protectores adecuados se conoce y aprecia bien en la técnica (véase, por ejemplo, Protecting Groups in Organic Synthesis, Theodora Greene (Wileylnterscience)).

En el Esquema 4, Etapa 6, un 2-bromotiazol de fórmula (20) se acopla con un reactivo de cinc heterocíclico en una reacción de acoplamiento cruzado de Negishi proporcionando un tiazol heterocíclico de fórmula (20a) de una manera similar a la descrita para el Esquema 2, Etapa 1.

El especialista apreciará que un tiazol funcionalizado de fórmula (16) puede prepararse por medios conocidos en la técnica. Por ejemplo, la ciclación de tiourea con una bromocetona, tal como 3-bromo-1,1,1-trifluoropropan-2-ona, proporciona 4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina. La posterior bromación y protección de la amina usando hexano-2,5-diona proporciona (16).

Esquema 5

imagen4

La formación de un compuesto de fórmula (23) puede realizarse de acuerdo con reacciones

como las representadas en el Esquema 5. Un compuesto apropiado de fórmula (23) es uno en el

que R1 y R2 son como se han definido para la fórmula I y R4b se define como se representa.

15 Una yodopirazolopirimidina de fórmula (5) y un 4-cloro-2-morfolino-tiazol, por ejemplo, de fórmula (22) experimentan acoplamiento cruzado para formar un pirazolopirimidin tiazol de fórmula (23). Por ejemplo, los reactantes se acoplan en presencia de yoduro de cobre, acetato de paladio, y trifenilfosfina, con una base tal como carbonato de cesio. La reacción de acoplamiento se realiza preferentemente en un disolvente inerte, tal como DMF, a aproximadamente 100-150 ºC durante 4

20 -24 h. El especialista apreciará que puede prepararse un tiazol funcionalizado de fórmula (22) por medios conocidos en la técnica. Por ejemplo, puede hacerse reaccionar 2,4-diclorotiazol con morfolina dando el 2-morfolino-tiazol de fórmula (22). El 2,4-diclorotiazol también puede bromarse exhaustivamente proporcionando 2,5-dibromo-4-clorotiazol. El intercambio bromo-litio posterior con

25 n-butillitio en THF a -90 ºC e inactivación con agua proporciona 2-bromo-4-clorotiazol [J. Chem. Soc. Perkin Trans 1: Org Bioorg. Chem. (1972-1999), (2):215-219 (1992)]. El 2-bromo-4-clorotiazol puede someterse a una reacción de acoplamiento cruzado de Negishi con un reactivo de cinc heterocíclico para obtener la tiazol-2-il triazolo piridina.

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Esquema 6

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La formación de un compuesto de fórmula (27) puede realizarse de acuerdo con reacciones como las representadas en el Esquema 6. Un compuesto apropiado de fórmula (27) es uno en el que R1 y R2 son como se han definido para la fórmula I y "het" se define como se representa para la Etapa 1 o Etapa 3, respectivamente.

En el Esquema 6, Etapa 1, un tiazol heterocíclico, por ejemplo, de fórmula (25) se obtiene por reacción de una yodopirazolopirimidina de fórmula (5) con un bromotiazol de fórmula (24). La reacción se realiza en presencia de bromuro de N-butilamonio y una base, tal como acetato potásico con un catalizador de paladio tal como acetato de paladio con tris(2,4-di-terc-butil-fenil)fosfano, en un disolvente inerte tal como N-metilpirrolidinona, a una temperatura de aproximadamente 100-150ºC.

Como alternativa, en la Etapa 2, una tiazolil pirazolopirimidina de fórmula (6a) se yoda proporcionando un 2-yodotiazol de fórmula (26). El tiazol se trata con diisopropilamiduro de litio a una temperatura de -70 a -80 ºC durante aproximadamente una hora y después se trata con Nyodosuccinimida a aproximadamente la misma temperatura en un disolvente inerte, tal como THF. Esto va seguido de la Etapa 3, en la que se forma un triazolil o 4-piridil tiazol de fórmula (25) usando condiciones de acoplamiento cruzado de Negishi similares a las descritas para el Esquema 2, Etapa 1.

En el Esquema 6, Etapa 4, una tiazolil pirazolopirimidina de fórmula (25) se broma dando un bromotiazol de fórmula (27). La bromación se efectúa usando N-bromosuccinimida en presencia de una pequeña cantidad de ácido acético en un disolvente inerte, tal como acetonitrilo.

Un compuesto de fórmula (27), en la que het = 2,5-dimetil-pirrol-1-ilo, puede elaborarse adicionalmente para obtener compuestos de la invención como se describe en el Esquema 4, Etapas 2, 3, 4, y 5.

El especialista apreciará que los tiazoles heterocíclicos de fórmula (24) pueden prepararse fácilmente por medios conocidos en la técnica. Por ejemplo, la amida del ácido tiazol-2-carboxílico puede ciclarse al triazol con 1,1-dimetoxi-N,N-dimetil-metanamina, seguido de N-metil-hidrazina para obtener el triazolil tiazol, que posteriormente puede bromarse con N-bromosuccinimida. Los procedimientos bibliográficos dan 4-tiazol-2-il-piridina, que puede bromarse proporcionando 4-(5bromo-tiazol-2-il)-piridina. El 5-bromo-2-(2,5-dimetil-pirrol-1-il)-tiazol puede obtenerse fácilmente por reacción de 2-amino-5-bromotiazol con hexano-2,5-diona.

Como se usa en este documento, "CCF" se refiere a cromatografía en capa fina; "HPLC" se refiere a cromatografía líquida de alto rendimiento; "CL/EM" se refiere a cromatografía líquida/espectrometría de masas; "CG/EM" se refiere a cromatografía de gases/espectrometría de masas"; "TdV-AR” se refiere a tiempo de vuelo de alta resolución; "APCI" se refiere a ionización química a presión atmosférica; "δ" se refiere a partes por millón campo abajo de tetrametilsilano; "THF" se refiere a tetrahidrofurano; "EtOAc" se refiere a acetato de etilo; "MeOH" se refiere a metanol; "EtOH" se refiere a etanol; "DMF" se refiere a dimetilformamida. EJEMPLOS

Sin elaboración adicional, se cree que un especialista en la técnica, usando la descripción anterior, puede realizar de forma práctica la presente invención en toda su extensión. Las siguientes preparaciones y ejemplos se proporcionan para describir la invención con más detalle. Los reactivos y materiales de partida están fácilmente disponibles para, o puede sintetizarlos fácilmente, un especialista habitual en la técnica. Los Ejemplos 1 -35 proporcionan compuestos representativos e ilustran la preparación de los mismos. Los Ejemplos A-D ilustran diversos ensayos biológicos que pueden usarse para determinar las propiedades biológicas de los compuestos de las invenciones. Aquellos especialistas en la técnica reconocerán rápidamente las variaciones apropiadas de los procedimientos descritos en los ejemplos. Los nombres de los compuestos de la presente invención se proporcionan mediante ChemDraw Ultra®, versión 7.0.1. Las sales se nombran como la base libre más el ácido conjugado.

Preparación 1

2,5-Dimetil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ona

Se añade acetoacetato de etilo (128 g, 0,98 mol), gota a gota, a una solución en ácido acético (500 ml) de 5-metil-2H-pirazol-3-ilamina (100 g, 0,95 mol), manteniendo la temperatura a 25-28 ºC. La mezcla se calienta a reflujo durante 10 h y después se enfría a temperatura ambiente.

La reacción se añade a terc-butil metil éter (5 l) enfriado a 5 ºC, manteniendo la temperatura por debajo de 10 ºC. Se agita durante 1 h a 5 ºC, y se filtra. El material resultante se seca al vacío durante una noche proporcionando un sólido blanco (158 g, 96%).

Preparación 2

7-Cloro-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

A una suspensión de 2,5-dimetil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ona (10,0 g, 61,3 mmol) en tolueno (150 ml) se le añade N,N-dimetilanilina (9,7 ml, 76,7 mmol). Se añade oxicloruro de fósforo (11,2 ml, 122,6 mmol), gota a gota, a esta suspensión blanca. Se calienta a reflujo durante 3 h en una atmósfera inerte, se enfría a temperatura ambiente, y se concentra la reacción hasta un aceite pardo usando presión reducida. El aceite se disuelve en acetato de etilo (250 ml) y se basifica con NaOH 1,0 N. La fase orgánica se separa y la fase acuosa básica se extrae con acetato de etilo (2 x 100 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtran y se concentran a presión reducida para producir un sólido pardo. El material se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 80% hexano/20% (THF al 30%/hexano) a 0% hexano/100% (THF al 30%/hexano) en un gradiente por etapas con incrementos del 20% proporcionando un sólido de color verde claro (6,65 g, 59%). EM/EN m/z (35CI) 182,3 (M+1)+. Procedimiento Alternativo:

Se añade 2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ona (20 g, 122 mmol) a 1,4-dioxano (60 ml). La mezcla se agita a 22 ºC durante 10 min y después se añade N,N-dietilanilina (20,8 ml, 128 mmol). Se agita durante 5 min más y después se añade oxicloruro de fósforo (11,7 ml, 126 mmol) durante 15 min. La mezcla se agita a 22 ºC durante 15 min, después se calienta a 80-85 ºC durante 35 min y la reacción se mantiene a esta temperatura durante 1,5 h. La mezcla de reacción enfriada se añade lentamente a una solución de fosfato potásico dibásico (106,7 g, 612,82 mmol) en agua (325 ml) enfriada a 0-5 ºC, manteniendo la temperatura por debajo de 5 ºC durante la adición. La mezcla se agita a 22 ºC y después se añade metil-t-butil éter (150 ml). La fase orgánica se separa y la fase acuosa se extrae con metil-t-butil éter (2 x 100 ml). Las porciones orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato sódico, se filtran y el disolvente se evapora. Se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (2/1) proporcionando el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (20,7 g, 88%). EM/EN m/z (35CI) 182 (M+1)+.

Preparación 3

7-(1-Propil-butil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

imagen1

Se carga un matraz secado en estufa equipado con un condensador de reflujo, con THF anhidro (40 ml), yodo (cantidad catalítica), virutas de magnesio (1,92 g, 78,9 mmol) y 4bromoheptano (9,4 ml, 52 mmol). La reacción se calienta a reflujo en un baño de aceite. La temperatura de la reacción forma un pico cuando se inicia la reacción de Grignard. La reacción se agita 4 h más a 90 ºC y se enfría a temperatura ambiente. Se deja que el magnesio metálico sedimente (también puede centrifugarse) y el reactivo de Grignard se retira mediante una cánula a una presión positiva de argón en un matraz cargado con 7-cloro-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (4,80 g, 26,3 mmol) en tolueno anhidro (20 ml). La reacción se calienta a reflujo en una atmósfera inerte durante una noche. La reacción se enfría a temperatura ambiente y se interrumpe con agua. Se diluye con acetato de etilo (150 ml), después se añade agua (100 ml) y cloruro de amonio saturado (50 ml). La fase acuosa se separa y se extrae con diclorometano (75 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtran y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 80% hexano/20% (acetato de etilo al 20%/hexano) a 0% hexano/100% (acetato de etilo al 20%/hexano) en un gradiente por etapas con incrementos del 20% dando cristales amarillos (3,08 g, 48%). EM/EN m/z 246,3 (M+1)+. Procedimiento Alternativo:

Se calienta una mezcla de virutas de magnesio (3,5 g, 144 mmol) y una cantidad catalítica de yodo (100 mg) en THF (100 ml) a 65 ºC en una atmósfera de nitrógeno. Se añaden unas pocas gotas de 4-bromoheptano puro y la mezcla se calienta hasta que empieza la reacción. Después se añade una solución de 4-bromoheptano (17,6 ml, 94,9 mmol) en THF (42 ml) manteniendo la temperatura a 65-70 ºC durante 2 h. La mezcla se calienta a reflujo durante una hora más y después la reacción se enfría a 22 ºC. El reactivo de Grignard preparado se añade a una solución de 7-cloro-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (10,2 g; 53,3 mmol) en THF (60 ml) enfriado a 0 ºC en una atmósfera de nitrógeno. La solución reactiva de magnesio se añade mediante una cánula durante 45 min mientras se mantiene la temperatura por debajo de 10 ºC. Después, la mezcla se agita durante 30 min más a 5 ºC. A esta mezcla se le añade una solución acuosa de cloruro de amonio al 10% (p/p) (125 ml) y se agita a 22 ºC durante 30 min. La fase orgánica se separa y la fase acuosa se extrae con acetato de etilo (2 x 25 ml). Las fases orgánicas se combinan y se secan sobre sulfato sódico. La mezcla se filtra y el disolvente se evapora. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida en gel de sílice usando un eluyente de hexanos/acetato de etilo (5/1) proporcionando el compuesto del título (8 g, 62%). EM/EN m/z 246 (M+1)+.

Preparación 3a

7-(1-Propil-butil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Ruta Alternativa Etapa 1: éster etílico del ácido 3-acetil-3-oxo-4-propil-heptanoico

Se añade cloruro de magnesio (14,63 g, 153,70 mmol) a diclorometano (500 ml) seguido de la adición de acetoacetato de etilo (19,55 ml, 20,00 g, 153,79 mmol) todo de una vez y se agita a temperatura ambiente durante una hora. La mezcla se enfría en un baño de agua enfriada con hielo y se le añade piridina (24,86 ml, 24,32 g, 307,39 mmol) gota a gota. Se añade cloruro de di-npropilacetilo (25,00 g, 153,70 mmoles) gota a gota a 0 ºC en atmósfera de nitrógeno a la suspensión blanca. Una vez completada la adición el baño de refrigeración se retira, se calienta a temperatura ambiente, y se agita durante 16 h. La reacción se interrumpe con HCl 1 N (400 ml) y la fase inferior se separa. La porción orgánica se seca sobre sulfato de magnesio, se filtra, y se concentra al vacío dando un aceite amarillo (34 g, 86%). El material se usa directamente en la siguiente etapa sin purificación adicional. Etapa 2: 5-Propil-octano-2,4-diona

Se disuelve éster etílico del ácido 3-acetil-3-oxo-4-propil-heptanoico (32,4 g, 126,39 mmoles) en dimetilsulfóxido (100 ml) y agua (5 ml). La solución se calienta a 150 ºC durante de 6 a 8 h o la reacción se sigue por CG/EM. La reacción se enfría y se extrae con heptano (3 x 100 ml). Las porciones orgánicas combinadas se lavan con agua (100 ml) y salmuera (100 ml). Se concentra al vacío a 50 ºC para retirar la mayor parte del heptano. Se obtienen 23,29 g de un aceite y se usa directamente en la siguiente etapa. Etapa 3: 7-(1-Propil-butil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se mezcla 5-propil-octano-2,4-diona (15 g, 81,40 mmoles) en ácido acético (15 ml) y se enfría en un baño de hielo. Se añade 5-amino-3-metilpirazol (7,91 g, 81,40 mmol) en porciones y se agita a temperatura ambiente. Se comprueba si la reacción se ha completado por CG/EM después de 3 h. CG indica un isómero en la región correcta, en comparación con una muestra auténtica. El exceso de ácido acético se retira por destilación. Se añade agua (50 ml) y se extrae con heptano (50 ml). El heptano se lava con salmuera (50 ml). La fase orgánica se seca sobre MgSO4, se filtra, y se concentra al vacío dando un aceite bruto (15,8 g, 79%). RMN de 1H (CDCl3): 6,39 (s, 1 H); 6,31 (s, 1 H); 3,75 (m, 1 H); 2,55 (s, 3 H); 2,45 (s, 3 H); 1,71 (c, 4 H); 1,23 (m, 4 H); 0,85 (t, 6 H).

El siguiente compuesto se prepara básicamente como se describe en la Preparación 3, usando cualquier procedimiento. Se usa 3-bromopentano para preparar el reactivo de Grignard.

Prep. Nº: Nombre químico Datos físicos

4: 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM/EN m/z 218,1 (M+1)+

5 Preparación 5

7-(1-Propil-butil)-3-yodo-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se disuelve 7-(1-propil-butil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (3,08 g, 12,5 mmol) en acetonitrilo anhidro (25 ml) y se añaden 6 porciones (0,70 g cada una) de N-yodosuccinimida (4,2 g, 18,7 mmol) a intervalos de 10 minutos. Se agita durante el fin de semana a temperatura

10 ambiente. El acetonitrilo se separa y el aceite se diluye con diclorometano (100 ml). Se lava con solución saturada de cloruro de amonio (2 x 50 ml). La fase orgánica se recoge, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra, y se concentra a presión reducida para producir un aceite de color rojo oscuro. El aceite se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (acetato de etilo al 20%/hexano) a 0% hexano/100% (acetato de etilo al 20%/hexano)

15 en un gradiente por etapas con incrementos del 50% dando un aceite naranja (10,97 g, 87%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 6,42 (s, 1 H), 3,74-3,70 (m, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,46 (s, 3 H), 1,741,68 (m, 4 H), 1,28-1,14 (m, 4 H), 0,84 (t, J = 7,0 Hz, 6 H). El siguiente compuesto se prepara básicamente como se describe en la Preparación 5.

Prep. Nº: Nombre químico Datos físicos

6: 7-(1-Etil-propil)-3-yodo-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 6,44 (s, 1 H), 3,59 (m, 1 H), 2,61 (s, 3 H), 2,49 (s, 3 H), 1,86-1,76 (m, 4 H), 0,85 (t, J = 7,5 Hz, 6 H).

20

Procedimiento alternativo para la Preparación 6:

Se añade ácido acético (1 ml) y N-yodosuccinimida ( 6,7 g, 29,9 mmol) en una porción a

una solución de 7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (6 g, 27,5 mmol) en acetonitrilo

(60 ml). La mezcla se agita a 22 ºC durante 2 h. El disolvente se evapora y el residuo se recoge en

25 agua (50 ml) y metil-t-butil éter (100 ml). Las porciones orgánicas se separan, se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y el disolvente se evapora dando el compuesto del título (9,2 g, 96%). EM/EN m/z 344 (M+1)+.

Preparación 7

2-Trimetilsilanil-tiazol

Se mezcla n-butillitio (20,4 ml, 51,0 mmol, 2,5 M en hexano) con éter dietílico (50 ml) en un matraz de tres bocas, equipado con un embudo de goteo y un termómetro. Se enfría a -78 ºC y se le añade gota a gota una solución de tiazol (4,25 g, 50,0 mmol) en éter dietílico (50 ml). Una vez completada la adición, la mezcla de reacción se agita a -78 ºC durante 30 min, seguido de la adición de clorotrimetilsilano (5,4 g, 50,0 mmol). Se agita a -78 ºC durante una hora y después se calienta a temperatura ambiente. La reacción se interrumpe añadiendo bicarbonato sódico saturado. La fase acuosa se extrae con éter dietílico. Las porciones orgánicas combinadas se lavan con salmuera y se secan sobre sulfato sódico. Se filtra y se concentra a presión reducida dando un residuo. Se purifica por destilación dando 8,33 g (52-56 ºC/15 mm de Hg) del compuesto del título. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) 8,13 (d, 1 H, J = 2,6 Hz), 7,54 (d, 1 H, J =2,6 Hz), 0,43 (s, 9 H).

Preparación 8

5-Bromo-4-metiltiazol

Se añade bromo (9,27 ml, 182 mmol) a una solución de 4-metiltiazol (15,0 g, 152 mmol) en ácido acético (30 ml) a 0 ºC. La mezcla de reacción se calienta lentamente a temperatura ambiente y se agita durante una noche. Se diluye con diclorometano y se lava con NaOH 1 N y salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra al vacío. El producto bruto se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (5/1) obteniéndose el compuesto del título (9,94 g, 37%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,69 (s, 1 H), 2,43 (s, 3 H).

Preparación 9

Éster etílico del ácido tiazol-2-carboxílico

A una mezcla de 2-trimetilsililtiazol (135 g, 858,1 mmol) en tolueno (1350 ml) se le añade una solución de cloroformiato de etilo (98,4 ml, 1,03 mol) en tolueno (1350 ml) durante 15 min. La reacción se agita a 22 ºC durante 2 h. La solución se añade sobre carbonato sódico acuoso al 25% (p/p) (5 l) y se agita durante 30 min. La fase orgánica se separa y la fase acuosa se vuelve a extraer con cloruro de metileno (2 x 1 l). Las fases orgánicas se combinan y el disolvente se evapora proporcionando el compuesto del título (134 g, 99%). EM/EN m/z 158 (M+1)+.

Preparación 10

Amida del ácido tiazol-2-carboxílico

Se añade éster etílico del ácido tiazol-2-carboxílico (150 g, 0,9 mol) a una mezcla de metanol (75 ml) e hidróxido de amonio acuoso al 30% (750 ml) y la mezcla se calienta a reflujo durante 1 h. Después se enfría a 22 ºC y el metanol se evapora al vacío. La mezcla se agita durante 30 min a temperatura ambiente y el sólido se filtra. El sólido aislado se seca al vacío dando el compuesto del título (98 g, 85%). EM/EN m/z 129 (M+1)+.

Preparación 11

1-Metil-5-tiazol-2-il-1H-[1,2,4]triazol

Se enfría 1,1-dimetoxi-N,N-dimetil-metanamina (240 ml) a 10 ºC y se le añade amida del ácido tiazol-2-carboxílico (60 g, 421 mmol) en tres porciones. La mezcla se agita a 10 ºC durante 30 min. Después, la mezcla se calienta gradualmente a reflujo en 45 min. El metanol formado se retira por destilación y después la reacción se calienta a 100 ºC durante 1,5 h. La mezcla se enfría a 60 ºC y el exceso de 1,1-dimetoxi-N,N-dimetil-metanamina se retira por destilación al vacío. El residuo se enfría a 22 ºC y se le añaden hexanos (200 ml). La mezcla se tritura durante 15 min, se filtra, y el sólido se seca hasta peso constante antes de usarlo en la siguiente etapa.

El sólido aislado anterior se añade (68 g) a ácido acético (680 ml) y la mezcla se enfría a 10 ºC. Se añade N-metil-hidrazina (27 ml, 509 mmol) a una velocidad tal que la temperatura se mantiene por debajo de 15ºC. La mezcla se calienta a 20 ºC en 30 min y después se calienta gradualmente a 90 ºC. Se agita a 90 ºC durante 30 min y después se enfría a 22 ºC. El ácido acético se retira por destilación al vacío. El residuo se añade sobre agua y se ajusta a un pH = 8 añadiendo solución acuoso de hidróxido sódico al 25%. La fase acuosa se extrae con metil-t-butil éter (3 x 600 ml). Las fases orgánicas se combinan y el disolvente se evapora. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice usando un eluyente de hexanos/isopropanol (9/1) proporcionando el compuesto del título (49 g, 70%). EM/EN m/z 167 (M+1)+.

Preparación 12

5-(5-Bromo-tiazol-2-il)-1-metil-1H-[1,2,4]tiazol

A una mezcla de metil-5-tiazol-2-il-1H-[1,2,4]triazol (6,55 g; 39,4 mmol) y dimetilformamida (32 ml), se le añade N-bromosuccinimida (14 g, 78,8 mmol) en tres porciones durante 1 h. La mezcla se agita a 22 ºC durante 18 h y después se añade a agua (300 ml) enfriada a 0-5 ºC. La fase acuosa se separa y se extrae con metil-t-butil éter (2 x 200 ml). Las fases orgánicas se combinan y se lavan con hidrogenocarbonato sódico acuoso al 7% (100 ml) y después se secan sobre sulfato sódico. El disolvente se filtra y se evapora dando el compuesto del título (9,5 g, 93%). EM/EN m/z 79Br/81Br) 245/247 (M+1)+.

Preparación 13

2,5-Dimetil-3-[2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se combina 5-(5-bromo-tiazol-2-il)-1-metil-1H-[1,2,4]triazol (6,5 g, 23,8 mmol) y 2,5-dimetil7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina (6 g, 24,5 mmol) en N-metilpirrolidinona (58 ml) y se agita para completar la solución en atmósfera de nitrógeno. Después se añade bromuro de tetra-Nbutilamonio (5,47 g, 16,7 mmol) y acetato potásico (11,8 g, 119 mmol) y la mezcla se calienta a 100 ºC en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla caliente se desgasifica mediante tres ciclos de vacío/purga con nitrógeno. Después se añade acetato de paladio (216 mg, 0,94 mmol) y tris(2,4-diterc-butil-fenil)-fosfano (787 mg, 1,2 mmol). La mezcla se calienta 4 h a 125 ºC en atmósfera de nitrógeno. La mezcla se enfría a 22 ºC y se añade a agua (750 ml). La fase acuosa se extrae con metil-t-butil éter (3 x 200 ml), las porciones orgánicas se combinan, y se evaporan. El residuo se purifica por filtración a través de lecho corto de un gel de sílice eluyendo con hexanos/acetato de etilo (4/1). Se combina el producto que contiene las fracciones y el disolvente se evapora dando el compuesto del título (7 g, 72%). EM/EN m/z 410 (M+1)+.

Preparación 14

2,5-Dimetil-7-(1-propil-butil)-3-tiazol-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se carga un matraz secado en estufa con 2-trimetilsilaniltiazol (1,765 g, 11,24 mmol) disuelto en THF anhidro (30 ml) y se enfría en una atmósfera inerte a -78 ºC. Se añade lentamente n-butillitio (solución 2,5 M de hexano, 4,5 ml, 11,24 mmol) y se agita 30 min a -78 ºC. Se añade cloruro de cinc anhidro (2,26 g, 16,58 mmol) en una alícuota y se agita 30 min a -78 ºC. Se permite que la reacción suba a temperatura ambiente, se agita 30 min, y se le añade 7-(1-propil-butil)-3yodo-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (1,624 g, 5,18 mmol) y diclorometano de dicloro[1,1'bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (0,423 g, 0,518 mmol). Se calienta a reflujo durante una noche en un baño de aceite (90 ºC) en una atmósfera inerte. La reacción se enfría a temperatura ambiente, se interrumpe con bicarbonato sódico saturado, y se diluye con acetato de etilo (150 ml). La fase acuosa se separa y se extrae con acetato de etilo (75 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtran, y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (THF al 30%/hexano) a 0% hexano/100% (THF al 30%/hexano) en un gradiente por etapas con incrementos del 10% dando un sólido blanco (0,720 g, 42%). EM/EN m/z 329,0 (M+1)+.

El siguiente compuesto se prepara básicamente como se describe en la Preparación 14.

Prep. Nº: Nombre químico Datos físicos

15: 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-tiazol-5-ilpirazolo[1,5-a]pirimidina RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,75 (s, 1 H), 8,75 (s, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 6,47 (s, 1 H), 3,62-3,55 (m, 1 H), 2,65 (s, 3 H), 2,61 (s, 3 H), 1,89-1,75 (m, 4 H), 0,85 (t, 6 H, J = 7,5 Hz), 0,85 (t, 6 H, J = 7,5 Hz).

Procedimiento alternativo para la Preparación 15:

Se añade n-butillitio (76,5 ml, 191 mmol, 2,5 M en hexanos) a una solución de 2trimetilsililtiazol (30 g, 191 mmol) en THF (450 ml) a -78 ºC en atmósfera de nitrógeno, 5 manteniendo la temperatura por debajo de -74 ºC durante la adición. La mezcla se agita a -78 ºC durante 30 min y después se añade cloruro de cinc, en forma de polvo seco, (39,9 g, 286 mmol) en una porción y la mezcla se calienta a 22 ºC durante una hora. Se añade 7-(1-etil-propil)-3-yodo-2,5dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina, (30 g, 87 mmol) y cloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno paladio (ll) (6,5 g, 8 mmol) y la mezcla se calienta a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 8 h.

10 La mezcla se enfría a 22 ºC y se le añade cloruro de amonio acuoso al 10% (450 ml). La fase orgánica se separa y la fase acuosa se lava con metil-t-butiléter (2 x 100 ml). Las porciones orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y el disolvente se evapora dando el compuesto del título (20,4 g, 78%). EM/EN m/z 301 (M+1)+.

15 Preparación 16

7-(1-Etil-propil)-3-(2-yodo-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se añade una solución recién preparada de di-i-propilamiduro de litio (150 ml; 62,4 mmol, 0,6 M en THF) a una mezcla de 7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-3-tiazol-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidina, (17,8 g, 62,4 mmol) en THF (100 ml) a -78 ºC en una atmósfera de nitrógeno, manteniendo la

20 temperatura por debajo de -74 ºC durante la adición. La mezcla se agita a -78 ºC durante una hora y después se le añade una solución de N-yodosuccinimida (15 g, 63 mmol) en THF (100 ml) manteniendo la temperatura por debajo de -74 ºC. La reacción se calienta gradualmente a 22 ºC y después se le añade una solución acuosa al 10% de cloruro de amonio (300 ml). La fase orgánica se separa y la fase acuosa se lava con metil-t-butil éter (2 x 200 ml). Las fases orgánicas se

25 combinan, se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y el disolvente se evapora. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con hexanos/acetona (5/1) dando el compuesto del título (15 g, 60%). EM/EN m/z 427 (M+1)+.

Ejemplo 1

7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-(4-metil-tiazol-5-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidina Se añade cinc Rieke® (10 g en 100 ml de THF, 13,2 ml, 18,48 mmol) a 5-bromo-4metiltiazol (2,13 g, 18,48 mmol) y se calienta a reflujo durante 2 h. La mezcla se enfría a

5 temperatura ambiente y se hace sedimentar el cinc mediante una centrífuga. Se burbujea gas nitrógeno a través de la 7-(1-etil-propil)-3-yodo-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (900 mg, 2,62 mmol) en tetrahidrofurano seco (10 ml) y se añade la solución de bromuro de organocinc seguido de la adición de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloropaladio (ll) (106 mg, 0,13 mmol). La mezcla de reacción se agita a reflujo durante una noche y se enfría a temperatura ambiente. Se añade

10 solución de cloruro de amonio a la mezcla de reacción y se extrae con diclorometano. La porción orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y el disolvente se retira al vacío. El producto bruto se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice, eluyendo con hexano/acetato de etilo (3/1) obteniéndose el compuesto del título (652 mg, 79%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,80 (s, 1 H), 6,48 (s, 1 H), 3,63 (m, 1 H), 2,57 (s, 3 H), 2,43 (s, 3 H), 2,40 (s, 3 H), 1,85 (m, 4 H), 0,90 (t, 6

15 H, J = 7,3 Hz). EM/EN m/z 315 (M+1)+.

Preparación 17

3-(2,4-dibromo-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina Se disuelve 2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)-3-tiazol-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidina (3,15 g, 9,59 mmol) en acetonitrilo (100 ml) y se le añade N-bromosuccinimida (4,27 g, 24,0 mmol) en una

20 alícuota. Se agita durante una noche en una atmósfera inerte y se confirma que la reacción se ha completado usando CCF. Se concentra a presión reducida, el aceite se diluye con diclorometano (150 ml), y se lava con agua (75 ml). La fase orgánica se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra, y se concentra a presión reducida. El aceite resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (THF al 30%/ hexano) a 0% hexano/100% (THF al

25 30%/hexano) en un gradiente en una etapa (0-10-15-20-25-30-35-40-45-50-100% de THF al 30%/hexano) dando cristales amarillos (3,70 g, 79%). EM/EN m/z (79Br81Br) 486,7 (M+1)+. Los siguientes compuestos se preparan básicamente como se describe en la Preparación 17, con la excepción de que se usa diclorometano como disolvente.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

2: 3-(2,4-Dibromo-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM (IQPA) m/z (79Br81Br) 459,1 (M+1)+

3*: 3-(2-Bromo-4-metil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM/EN m/z (79Br) 393 (M+1)+

*Se usan 1,1 eq. de NBS y se agita durante 3 días.

Ejemplo 4

3-(4-Bromo-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina

imagen1

10 Se carga un matraz secado en estufa con 3-(2,4-dibromotiazol-5-il)-2,5-dimetil-7-(1-propilbutil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina (0,973 g, 2,00 mmol), dioxano anhidro (20 ml), morfolina (0,872 g, 10,0 mmol), y carbonato de cesio (1,95 g, 6,00 mmol). Se calienta a reflujo en un baño de aceite (105 ºC) en una atmósfera inerte durante una noche. Se confirma que la reacción se ha completado usando CL/EM. Se diluye con acetato de etilo (100 ml), se lava con agua (50 ml), y la

15 fase acuosa se vuelve a extraer con acetato de etilo (50 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio, se filtran, y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (diclorometano al 40%/ acetato de etilo al 20%/amoniaco 7 N al 2% en metanol/hexano al 38%) a 0% hexano/100% (diclorometano al 40%/acetato de etilo al 20%/amoniaco 7 N al 2% en

20 metanol/hexano al 38%) en un gradiente por etapas con incrementos del 10% dando un sólido blanquecino (0,878 g, 89%). EM/EN m/z (79Br) 491,7 (M+1)+. Los siguientes ejemplos se preparan básicamente como se describe en el Ejemplo 4, usando como la amina cualquiera de 2,0 dimetilamina/THF o morfolina, y usando THF o dioxano como disolvente. Las reacciones se ejecutan en un recipiente sellado o en un tubo Schlenk.

25

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

5*: {4-Bromo-5-[2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-il}-dimetilamina EM/EN (79Br) 449,8 (M+1)+ .

6: 3-(4-Bromo-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM (IQPA) m/z (81Br) 466,5 (M+1)+

7: {4-Bromo-S-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-il}-dimetilamina EM (IQPA) m/z (81Br) 424,4 (M+1)+

8: {5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-4-metil-tiazol-2-il}-dimetil-amina EM/EN m/z 358 (M+1)+

9: 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-(4-metil-2-morfolin-4il-tiazol-5-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM/EN m/z 400 (M+1)+

*Se usan 6 equiv. de carbonato de cesio.

Ejemplo 10

3-[4-Bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-2,5-dimetil-7-(1-propilbutil)-pirazolo[1,5a]pirimidina

5

10

imagen1

Se carga un matraz secado en estufa con 1-metil-1,2,4-triazol (0,498, 6,00 mmol) y THF

anhidro (20 ml) y se enfría en una atmósfera inerte a -78 ºC. Se añade lentamente n-butillitio

(solución 2,5 M de hexano, 2,4 ml, 6,0 mmol) y se agita 30 min. Se añade cloruro de cinc anhidro

15 (1,36 g, 10,0 mmol) en una alícuota y se agita 30 min a -78 ºC. Se permite que la reacción se caliente a temperatura ambiente, se agita 30 min, y se le añade 3-(2,4-dibromotiazol-5-il)-2,5dimetil-7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina (0,973 g, 2,00 mmol) y diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) (0,163 g, 0,200 mmol). La reacción se calienta a reflujo durante una noche en un baño de aceite (90 ºC) en una atmósfera inerte. La reacción se

20 enfría a temperatura ambiente, se inactiva con agua, y se diluye con acetato de etilo (100 ml). La porción acuosa se separa y se extrae con diclorometano (50 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtran, y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (acetonitrilo al 10%/THF al 40%/hexano al 50%) a 0% hexano/100% (acetonitrilo al 10%/THF al

25 40%/hexano al 50%) en un gradiente por etapas con incrementos del 10% dando un sólido blanco (0,090 g, 9%). EM/EN m/z (79Br) 487,7 (M+1)+. Preparación alternativa:

A una solución de 2,5-dimetil-3-[2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-7-(1-propil-butil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (6 g, 14,65 mmol) en acetonitrilo (60 ml) se le añade N-bromosuccinimida 30 (2,74 g, 15,4 mmol) en una porción y se agita a 22 ºC durante 10 h. El disolvente se evapora y el residuo se disuelve en una mezcla de agua (50 ml) y metil-t-butil éter (100 ml). La fase orgánica se separa y la fase acuosa se extrae con metil-t-butil éter adicional (2 x 50 ml). Las porciones

orgánicas se combinan y el disolvente se evapora. El material resultante se purifica por filtración a través de un lecho corto de gel de sílice, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (3/1). Se combinan las fracciones que contienen el producto y el disolvente se evapora. Se añaden heptanos (25 ml) y el sólido se tritura. El sólido se filtra y se seca al vacío dando el compuesto del título (5,5 g, 77%).

5 EM/EN m/z (79Br/81Br) 488/490 (M+1)+.

Ejemplo 10a

3-[4-Bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-2,5-dimetil-7-(1-propilbutil)-pirazolo[1,5a]pirimidina, clorhidrato

10

15 Se disuelve 3-[4-bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-2,5-dimetil-7-(1-propilbutil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina (750 mg, 1,54 mmol) en acetona (5 ml) y se añade HCl 1 M en éter dietílico (1,84 ml, 1,84 mmol). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 3 h y se concentra al vacío. El residuo se disuelve en éter dietílico/hexano = 1/1 (5 ml) y se cristaliza la sal

imagen1

20 HCl deseada (526 mg, 65%). EM/EN m/z (81Br) 490 (M+1)+; RMN de 1H (CDCl3): 8,20 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 4,21 (s, 3 H), 3,64 (m, 1 H), 2,49 (m, 3 H), 2,44 (s, 3 H), 1,75 (m, 4 H), 1,96 (m, 4 H), 0,81 (m, 6 H). El siguiente compuesto se prepara básicamente como se describe en el Ejemplo 10.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

11*: 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-[4-metil-2-(2-metil-2H[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM/EN m/z 396 (M+1)+

* Se usa cloruro de cinc 0,5 M en THF en lugar de cloruro de cinc anhidro. Se calienta a 80 ºC durante 3 días.

Ejemplo 12

3-(4-Bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina

imagen1

En atmósfera de nitrógeno, se añade n-butillitio (2,5 M en hexano, 0,6 ml, 1,5 mmol) a una solución de 1-metil-1,2,4-triazol (124,5 mg, 1,5 mmol) en THF (3 ml) a -78 ºC y se agita durante 30 min. Se añade cloruro de cinc anhidro (409 mg, 3,0 mmol), se continúa agitando durante 30 min, se calienta a temperatura ambiente y se agita durante 2 h. Se añade 3-(2,4-dibromotiazol-5-il)-7-(1etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (229 mg, 0,5 mmol), seguido de tetraquis(trifenilfosfina)paladio (58 mg, 0,05 mmol) y se calienta a reflujo durante una noche. Se enfría a temperatura ambiente, se diluye con acetato de etilo, y se lava con cloruro de amonio saturado. La porción orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos:acetato de etilo (10:2,5) dando el compuesto del título en forma de una espuma amarilla (77 mg). EM (IQPA) m/z (79Br) 460,4 (M+1)+.

Preparación alternativa del Ejemplo 21:

Se añade ácido acético (1 ml) y N-bromosuccinimida (4,1 g, 22 mmol) a una solución de 7(1-etil-propil)-2,5-dimetil-3-[2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-pirazolo[1,5-a]pirimidina (8 g, 21 mmol) en acetonitrilo (80 ml). La mezcla se agita 2 h a 22 ºC. Después el disolvente se evapora y se añade agua (50 ml) y metil-t-butil éter (100 ml) al residuo resultante. La porción orgánica se separa, se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y el disolvente se evapora. El residuo resultante se recristaliza en alcohol isopropílico dando el compuesto del título (8,7 g, 90%). EM/EN (m/z): (79Br/81Br) 460/462 (M+1)+. Ejemplo 12a 3-(4-Bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina, ácido p-tolueno sulfónico

Se disuelve 3-(4-bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 0,109 mmol) en acetona (3 ml). Se añade una solución acuosa 0,25 M de ácido p-tolueno sulfónico (434,4 µl, 0,109 mmol) y la mezcla resultante se evapora a sequedad. Se añade acetato de etilo (12 ml) para conseguir la disolución parcial de los sólidos. Se añade metanol (1 ml) para conseguir una solución transparente. La solución se concentra por evaporación lenta hasta que se observan cristales. Los cristales se aíslan por filtración y se secan al vacío a 25 ºC para obtener aproximadamente 50 mg del compuesto del título.

La estequiometría de la sal se determina por cromatografía iónica usando las siguientes condiciones de HPLC: columna: Phenomenex Phenosphere SAX, 4,6 x 150 mm a 30 ºC; fase móvil: acetonitrilo al 50%/tampón fosfato sódico 0,025 M al 50% a pH = 4,5; caudal = 1,5 ml/min;

5 detección: UV a 205 nm; volumen de inyección = 5 µl; tiempo de ejecución = 3 min. Cantidad teórica calc: 27,2% tosilato; encontrado: 28,4% tosilato (media de tres ensayos HPLC).

Ejemplo 13

{4-Cloro-5-[2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-il}-dimetilamina Se carga un matraz secado en estufa con {4-bromo-5-[2,5-dimetil-7-(1-propil-butil)

10 pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-il-dimetilamina (0,20, 0,44 mmol) y THF anhidro (3,0 ml) y se enfría en una atmósfera inerte a -78ºC. Se añade lentamente n-butillitio (solución de hexano 1,6 M, 0,42 ml, 0,67 mmol) y se agita 30 min. Se añade N-clorosuccinimida (0,120 g, 0,889 mmol) en una alícuota y se agita 30 min a -78 ºC. Se permite que la reacción se caliente a temperatura ambiente, y se agita durante 5 h, comprobando el progreso usando CL/EM. Se diluye con acetato de etilo

15 (100 ml), se lava con cloruro de amonio saturado (50 ml), y la fase acuosa se vuelve a extraer con diclorometano (50 ml). Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtran, y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con 100% hexano/0% (THF al 25%/hexano) a 0% hexano/100% (THF al 25%/hexano) en un gradiente por etapas con incrementos del 10% dando un

20 sólido blanco (0,087 g, 48%). EM/EN m/z (35CI) 406,0 (M+1)+. Los siguientes ejemplos se preparan básicamente como se describe en el Ejemplo 13 usando el bromotiazol apropiado preparado anteriormente.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

14: 3-(4-Cloro-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-7-(1propil-butil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM/EN m/z (35CI) 448,0 (M+1)+

15: {4-Cloro-5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-il}-dimetil-amina EM (IQPA) m/z (35CI) 378,0 (M+1)+

25 Preparación 18

2,4-diclorotiazol

Se enfría a 5 ºC una mezcla de tiazolidin-2,4-diona (50 g, 0,43 mol) en oxicloruro de fósforo

(240 ml) y se le añade piridina (34 ml, 0,43 mol) durante 15 min. La mezcla se calienta a 125 ºC

durante 4 h y después se enfría a 22 ºC. El exceso de oxicloruro de fósforo se retira por destilación

30 al vacío y se añade el residuo a agua (1 l) enfriada a una temperatura de 5 ºC. La mezcla se extrae

con cloruro de metileno (3 x 400 ml). Las porciones orgánicas se combinan y el disolvente se evapora dando el compuesto del título (50 g, 76%). EM/IE m/z : (35CI35CI/35CI37CI37CI37CI) 153/155/157 (M+1)+.

Preparación 19

4-cloro-2-morfolino-tiazol

A una mezcla de 2,4-diclorotiazol (34 g, 0,22 mol) en acetonitrilo (425 ml) se le añade carbonato potásico (60,9 g, 0,44 mol) y después morfolina (21,2 ml, 0,225 mol) gota a gota durante 30 min. La mezcla se calienta a reflujo a 40 ºC y después se enfría a 22 ºC. La mezcla se filtra y el filtrado se evapora. El residuo se tritura con alcohol i-propílico (60 ml) a 22 ºC durante una hora. Los sólido se filtran y se secan al vacío hasta un peso constante dando el compuesto del título (34,5 g, 76%). EM/EN m/z (35CI) 205 (M+1)+. Ejemplo 16 3-(4-Cloro-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

imagen1

En una atmósfera de nitrógeno se disuelve 3-(4-bromo-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (116 mg, 0,25 mmol) en THF (1,5 ml) y se enfría a -78 ºC. Se añade n-butillitio (0,1 ml, 2,5 M en hexano, 0,25 mmol) y se agita a -78 ºC durante 30 min. Se añade N-clorosuccinimida (33,4 mg, 0,25 mmol) y se agita durante 30 min más, calentando lentamente a temperatura ambiente. Después de agitar durante una noche, la reacción se interrumpe añadiendo una solución de cloruro de amonio saturado y se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se lava con salmuera, se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos:diclorometano:acetato de etilo (5:5:2) proporcionando el compuesto del título (54 mg). EM (IQPA) m/z (35CI) 420,6 (M+1)+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 6,44 (s, 1 H), 3,79 (t, 4 H, J = 4,8 Hz), 3,63-3,56 (m, 1 H), 3,47 (t, 4 H, J = 4,8 Hz), 2,55 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H), 1,88-1,75 (m, 4 H), 0,87 (t, 6 H, J = 7,5 Hz).

Preparación Alternativa de la Preparación 6:

Se combina 7-(1-etil-propil)-3-yodo-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina, (9 g, 26,2 mmol) y 4-cloro-2-morfolino-tiazol (7,5 g, 36,7 mmol) en dimetilformamida (90 ml) desgasificada previamente con nitrógeno. Se añade carbonato de cesio (17,8 g, 55 mmol), yoduro de cobre (250 mg, 1,31 mmol), trifenilfosfina (550 mg, 2,09 mmol) y acetato de paladio (117 mg, 0,52 mmol). La mezcla se calienta a 125 ºC durante 16 h y después se enfría a 22 ºC. Se añade agua (900 ml) y se extrae con metil-t-butil éter (3 x 200 ml). Las porciones orgánicas se combinan y el disolvente se evapora. Se purifica por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con hexanos/acetato de etilo (4/1) dando el compuesto del título (6,4 g, 62%). EM/EN m/z (35CI) 420 (M+1)+. Ejemplo 16a 3-(4-Cloro-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina, clorhidrato

Se disuelve 3-(4-cloro-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina (1,40 g, 3,33 mmol) en acetona (10 ml) a 50 ºC y se enfría a temperatura ambiente. Se añade cloruro de hidrógeno (2 M en éter dietílico, 2,0 ml, 4,0 mmol) y se agita bien en un sonicador. La solución se concentra un poco y se añade una cantidad mínima de éter dietílico para cristalizar la sal HCl. La mezcla se enfría en un frigorífico durante una noche. Se añade cloruro de hidrógeno adicional (2 M en éter dietílico, 2,0 ml, 4,0 mmol) y se enfría en un frigorífico. El material cristalino se filtra y se seca obteniéndose el compuesto del título (1,15 g, 75%). EM/EN m/z (35CI) 420 (M+1)+; RMN de 1H (CDCl3): 9,18 (a, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 3,72 (m, 4 H), 3,49 (m, 1 H), 3,39 (m, 4 H), 2,48 (s, 3 H), 2,38(s, 3 H), 1,79 (m, 4 H), 0,79 (m, 6 H). Ejemplo 17 3-(4-Bromo-2-butil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

En una atmósfera de nitrógeno, se añade n-butillitio (2,5 M en hexano, 0,2 ml, 0,5 mmol) a una solución de 3-(2,4-dibromo-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (230 mg, 0,5 mmol) en THF (3 ml) a -78 ºC. Después de 30 min, se añade 1-yodobutano (138 mg, 0,75 mmol) y se continúa agitando durante 1 hora. Se calienta a temperatura ambiente y se agita durante una hora. La reacción se interrumpe añadiendo solución saturada de cloruro de amonio y se extrae con acetato de etilo. La porción orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (10/1,5) dando el compuesto del título en forma de una espuma naranja (78 mg). EM/EN m/z (81 Br) 437,4 (M+1)+.

5

10

15

20

25

30

36 El siguiente ejemplo se prepara básicamente como se describe en el Ejemplo 17.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

18: 3-(4-Bromo-2-metoximetil-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina EM (IQPA) m/z (81Br) 424,6 (M+1)+

Ejemplo 19

7-(1-Etil-propil)-3-(2-metoximetil-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

En una atmósfera de nitrógeno, se añade n-butillitio (2,5 M en hexano, 0,4 ml, 1,0 mmol) a una solución de 7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-3-tiazol-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidina (300 mg, 1,0 mmol) en THF (3 ml) a -78 ºC. Se agita 30 min y se añade 1-yodometil metil éter (205 mg, 1,2 mmol). Se continúa agitando durante una hora y después se calienta lentamente a temperatura ambiente y se agita durante una noche. La reacción se interrumpe añadiendo solución saturada de cloruro de amonio y se extrae con acetato de etilo. La fase orgánica se lava con salmuera, se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra al vacío hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (10/2) dando el compuesto del título en forma de una espuma amarilla (184 mg). EM (IQPA) m/z 345,3 (M+1)+. Ejemplo 20 3-(4-Cloro-2-metoximetil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se añade n-butillitio (2,5 M en hexanos, 174 ml, 0,43 mmol) a una solución agitada de 7-(1etil-propil)-3-(2-metoximetil-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (150 mg, 0,43 mmol) en THF (3 ml) a -78 ºC. Se agita durante 30 min y se añade N-clorosuccinimida (87 mg, 0,653 mmol). Se agita 30 min y después la reacción se calienta lentamente a temperatura ambiente permitiendo que la reacción continúe durante una noche. La reacción se interrumpe añadiendo solución saturada de cloruro de amonio, se extrae con acetato de etilo, se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra hasta obtener un residuo. Se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos/acetato de etilo (10/2) dando el compuesto del título (7 mg). EM (IQPA) m/z (35CI) 379,3 (M+1)+. Ejemplo 21 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-[2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se mezcla 3-(4-bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (175 mg, 0,38 mmol) y cloruro de cobre (l) (132 mg, 1,33 mmol) en DMF (5 ml) y se calienta a 120 ºC durante 24 h. Se enfría a temperatura ambiente, se diluye con acetato de etilo, y se lava con salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra al vacío hasta obtener un residuo. Se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos y después hexanos/EtOAc (10/1,8) dando un sólido de color amarillo-naranja (45 mg). EM/EN m/z 382,0 (M+1)+.

Preparación Alternativa:

Se añade n-butillitio (2,5 M en hexanos, 57,6 ml, 144 mmol) a una solución de N-metiltriazol (11,95 g, 144 mmol) en THF (600 ml) a -78 ºC en una atmósfera de nitrógeno, manteniendo la temperatura por debajo de -74 ºC durante la adición. Después se añade cloruro de cinc, en polvo seco, (26 g, 192 mmol) en una porción y la mezcla se calienta a 22 ºC en una hora. Se añade 7-(1etil-propil)-3-(2-yodo-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (12,5 g, 29 mmol) y catalizador de tetraquis(trifenil) fosfina paladio (1,15 g, 0,01 mol) en una porción y la mezcla se calienta a reflujo en atmósfera de nitrógeno durante 8 h. La mezcla se enfría a 22 ºC y se añade agua (300 ml). La fase orgánica se separa y la fase acuosa se extrae con metil-t-butil éter (2 X 200 ml). Las porciones orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y el disolvente se evapora. Se purifica haciéndolo pasar sobre un lecho corto de gel de sílice eluyendo con hexanos/acetato de etilo (4/1) dando el compuesto del título (8 g, 72%). EM/EN m/z 382 (M+1)+. Ejemplo 22 3-(4-Cloro-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina

Se agita una mezcla de 7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-3-[2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol5-il)-pirazolo[1,5-a]pirimidina (20 mg, 0,052 mmol) y N-clorosuccinimida (7,6 mg, 0,0569 mmol) en diclorometano (0,5 ml) y acetonitrilo (0,5 ml) a temperatura ambiente durante una noche en un vial. Se concentra hasta obtener un residuo. Se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos y después con hexanos/acetato de etilo (10/1,5) dando el compuesto del título (16 mg). EM/EN m/z (35CI) 416,0 (M+1)+. Ejemplo 23 7-(1-Etil-propil)-3-(4-metoxi-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se agita una mezcla de 3-(4-bromo-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (162 mg, 0,35 mmol), metóxido sódico (57 mg, 1,05 mmol) y yoduro de cobre (l) (67 mg, 0,35 mmol) en metanol (3 ml) en un vial de 4 ml sellado durante 15 h a 120 ºC. Se enfría a temperatura ambiente, el sólido se retira por filtración, y el filtrado se concentra al vacío. El residuo se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos/THF (10/2). El material se recristaliza en metanol dando el compuesto del título (20 mg). EM/EN m/z 416,0 (M+1)+. Preparación 20 4-Bromo-5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2-carbaldehído

En una atmósfera de nitrógeno, se añade n-butillitio (1,6 M en hexanos, 0,312 ml, 0,50 mmol) a una solución en THF (2,5 ml) de 3-(2,4-dibromo-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (230 mg, 0,50 mmol) a -78 ºC y se agita durante 30 min. Se añade una solución en THF (0,5 ml) de N-formil morfolina (58 mg, 0,50 mmol). Se agita durante una hora, después la reacción se almacena a -20 ºC durante una noche. La reacción se calienta a temperatura ambiente, se diluye con éter, y se inactiva añadiendo HCl 4 N (4 ml). La fase orgánica se separa y se extrae con HCl 4 N (2 x 4 ml). Las porciones acuosas se combinan, se tratan con bicarbonato sódico sólido a pH = 8 a 9 y después se extraen con éter dietílico. Todas las fases orgánicas se combinan, se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y se concentran hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con hexanos/diclorometano/acetato de etilo (5/5/1) dando el compuesto del título (154 mg). EM (IQPA) m/z (81 Br) 409,0 (M+1)+.

Ejemplo 24

3-(4-Bromo-2-morfolin-4-il-metil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se combinan 4-bromo-5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-tiazol-2carbaldehído (150 mg, 0,368 mmol), morfolina (35 mg, 0,405 mmol) y triacetoxiborohidruro sódico (97 mg, 0,46 mmol), en diclorometano (3 ml) y metanol (0,5 ml). Se agita durante una noche, se añade morfolina adicional (35 mg, 0,405 mmol), y triacetoxiborohidruro sódico (97 mg, 0,46 mmol), y se agita 4 h más. El disolvente se retira al vacío, se diluye con diclorometano, y se lava con salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra al vacío. El material resultante se purifica usando cromatografía ultrarrápida, eluyendo con diclorometano:amoniaco 2 M en metanol (10: 1) dando una mezcla. La mezcla se purifica usando una columna de fase inversa, eluyendo con agua/acetonitrilo (80/20) a agua/acetonitrilo (10/90) dando el compuesto del título (20 mg). EM/EN m/z (81Br) 480,0 (M+1)+. Ejemplo 25 3-(4-Bromo-2-piridin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

En una atmósfera de nitrógeno, se añade n-butillitio (1,6 M en hexano, 0,312 ml, 0,5 mmol) a una solución de 3-(2,4-dibromo-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (229 mg, 0,5 mmol) en THF (4 ml) a -78 ºC. Después de agitar durante 30 min, se añade cloruro de cinc anhidro (264 mg, 1,5 mmol) y se continúa agitando durante 30 min. La reacción se calienta a temperatura ambiente y se agita durante una hora. Se añade 4-yodopiridina (103 mg, 0,5 mmol), seguido de cloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno paladio (II) (aducto de diclorometano) (0,40,8 mg, 0,05 mmol). La reacción se calienta a reflujo durante una noche. Se enfría a temperatura ambiente, se diluye con acetato de etilo, y se lava con agua y salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra hasta obtener un residuo. El material bruto se purifica por cromatografía ultrarrápida, eluyendo con diclorometano:amoniaco 2 N en metanol (10:0,75) dando una mezcla. La mezcla se purifica usando una columna en fase inversa, eluyendo con agua:acetonitrilo = 80:20 a agua:acetonitrilo = 10:90, dando el compuesto del título (19 mg). EM/EN m/z (79Br) 456,0 (M+1)+.

Preparación 21

4-Trifluorometil-tiazol-2-ilamina

5 Se añade tiourea (4,0 g, 52,3 mmol) y 3-bromo-1,1,1-trifluoropropan-2-ona (5,5 ml, 10 g, 52,3 mmol) a etanol (100 ml) y se calienta a 50 ºC durante 2 h. Se enfría a temperatura ambiente y se concentra a sequedad. El residuo se disuelve en agua y el pH se ajusta a >12 con NaOH 2 M. Se extrae con éter dietílico (4 x). Los extractos orgánicos combinados se secan con sulfato sódico, se filtran, y se concentran al vacío. El material resultante se purifica por cromatografía sobre gel de

10 sílice (CH2CI2) obteniéndose el compuesto del título (6,9 g, 79%). EM/EN m/z 169 (M+1)+.

Preparación 22

5-Bromo-4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina, bromhidrato Se añade bromo (2,0 ml, 6,28 g, 39,3 mmol) gota a gota a una solución enfriada con un

baño de hielo de 4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina (6,0 g, 35,7 mmol) en éter dietílico (60 ml). Se agita

15 durante una hora una vez completada la adición y después se calienta a temperatura ambiente. Los sólidos se recogen por filtración y se lavan con éter dietílico obteniéndose el compuesto del título (10,5 g, 90%). EM/EN m/z (79Br/81Br) 247/249 (M+1)+. Preparación 23 5-Bromo-2-(2,5-dimetil-pirrol-1-il)-4-trifluorometil-tiazol

20 Se añade hexano-2,5-diona (3,5 ml, 3,4 g, 30,2 mmol) a una solución de bromhidrato de 5bromo-4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina (9,0 g, 27,4 mmol) en metanol (60 ml). Se agita a temperatura ambiente durante una noche. Se añade tampón fosfato (50 ml, pH = 7). El precipitado resultante se recoge por filtración, lavando con agua. La torta de filtrado se disuelve en CH2CI2 y se seca sobre sulfato sódico. Se filtra y se concentra al vacío obteniéndose el compuesto del título

25 (8,2 g, 92%). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 5,91 (s, 2 H), 2,27 (s, 6 H).

Ejemplo 26

3-[2-(2,5-Dimetil-pirrol-1-il)-4-trifluorometil-tiazol-5-il]-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5

]pirimidina

30

35

imagen1

Se enfría una solución de 5-bromo-2-(2,5-dimetil-pirrol-1-il)-4-trifluorometil-tiazol (2,2 g, 6,6 mmol) en THF (25 ml) en un baño de hielo seco. Se añade t-butillitio (1,7 M en pentano, 8,5 ml, 14,5 mmol) gota a gota. Se agita durante 45 min y después se añade cloruro de cinc (0,5 M en THF, 14,6 ml, 7,3 mmol) gota a gota. Se agita 5 min y el baño de refrigeración se retira. Se agita 30 min y después se le añade 7-(1-etil-propil)-3-yodo-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (1,5 g, 4,4 mmol) y bis(tri-t-butilfosfina)paladio (0) (450 mg, 0,9 mmol). Se calienta a reflujo durante 24 h. La reacción se enfría, la mezcla se vierte en éter dietílico, y se lava con agua (2 x). Las fases acuosas combinadas se extraen con éter dietílico. Las porciones orgánicas combinadas se secan sobre sulfato sódico, se filtran, y se concentran a sequedad al vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (CH2CI2 al 75-100% en hexanos) dando el compuesto del título (1,47 g, 72%). EM-TdV-AR m/z calc. para C23H26F3N5S+H+: 462,1939, encontrado: 462,1915. Ejemplo 27 5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina

Se añade hidroxilamina (2 ml, 50% en agua) a una solución de 3-[2-(2,5-dimetil-pirrol-1-il)4-trifluorometil-tiazol-5-il]-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (1,1 g, 2,3 mmol) en ácido acético (10 ml). La reacción se calienta a 80 ºC durante 6 h. Se enfría a temperatura ambiente. Se vierte en éter dietílico y se lava con NaOH 2 M (2 x) y después una vez con agua. La porción orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra a sequedad al vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo al 40% en hexanos) dando el compuesto del título (0,76 g, 87%). EM/EN m/z 384 (M+1)+. Preparación 24 3-(2-Bromo-4-trifluorometil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

Se calienta una mezcla de bromuro de cobre (ll) (540 mg, 2,4 mmol) y t-butilnitrito (0,36 ml, 310 mg, 3,0 mmol) en acetonitrilo (20 ml) a 60 ºC. Se añade 5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-ilamina (755 mg, 2,0 mmol) en forma de un sólido. La reacción se calienta a 80 ºC durante 2 h. La reacción se enfría, se vierte en éter dietílico y se extrae con agua (3 x). La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra a sequedad al vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice en CH2CI2 dando el compuesto del título (0,77 g, 87%). EM/EN m/z (79Br/81Br) 447, 449 (M+1)+. Ejemplo 28 {5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-dimetil-amina

Se calienta un tubo cerrado herméticamente que contiene 3-(2-bromo-4-trifluorometil-tiazol5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (313 mg, 0,7 mmol), y dimetil amina (2 M en THF, 4 ml, 8 mmol) en metanol (4 ml) a 80 ºC durante 2 h. La reacción se enfría y se concentra al vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con

acetato de etilo al 0-30% en CH2CI2, dando el compuesto del título (0,28 g, 97%). EM-TdV-AR m/z

calc. para C19H24F3N5S+H+ 412,1770, encontrado: 412,1783.

El siguiente ejemplo se prepara básicamente como se describe para el Ejemplo 28 con la

excepción de que la reacción se calienta a reflujo durante 8 h.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

29: 7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-3-(2morfolin-4-il-4-trifluorometil-tiazol-5-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina EM-TdV-AR m/z calc. para C21H26F3N5OS+H+: 454,1873, encontrado: 454,1873, encontrado: 454,1888

Ejemplo 30

N-{5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-acetamida Se añade hidroxilamina (50% en agua, 5 ml) a una solución de 3-[2-(2,5-dimetil-pirrol-1-il)

10 4-trifluorometil-tiazol-5-il]-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (2,4 g, 5,2 mmol) en ácido acético (25 ml). La reacción se calienta a 80 ºC durante 72 h. La reacción se enfría a temperatura ambiente, se vierte en éter dietílico y se lava con NaOH 2 M (2 x) y después una vez con agua. La porción orgánica se seca sobre sulfato sódico, se filtra, y se concentra a sequedad. El residuo resultante se purifica por cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo al

15 40% en hexanos dando el compuesto del título (0,28 g, 13%). EM-TdV-AR m/z calc. para C19H22F3N5OS+H+ 426,1575, encontrado: 426,1565.

Ejemplo 31

Éster terc-butílico del ácido (2-{5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4trifluorometil-tiazol-2-ilamino}-etil)-carbámico

20

imagen1

Se añade éster terc-butílico del ácido (2-amino-etil)-carbámico (0,5 ml, 506 mg, 3,2 mmol) a una 30 solución de 3-(2-bromo-4-trifluorometil-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina (100 mg, 0,22 mmol) y trietil-amina (0,3 ml, 222 mg, 2,2 mmol) en metanol (1 ml). El metanol se retira por evaporación y se calienta a 80 ºC durante una noche. La reacción se enfría a temperatura ambiente y se concentra al vacío. El residuo resultante se purifica por cromatografía en columna, eluyendo con acetato de etilo al 10-50% en CH2CI2, dando el compuesto del título (0,11 g, 97%). EM/EN m/z 527,2 (M+1)+.

Los compuestos de a continuación se preparan básicamente como describe en el Ejemplo 31 usando la amina apropiada.

Prep. o Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

Prep. 25*: éster terc-butílico del ácido [2-({5-[7-(1-etil-propil)2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4trifluorometil-tiazol-2-il}-propil-amino)-etil]carbámico EM/EN m/z 569,3 (M+1)+

Continuación

Prep. o Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

Prep. 26**: éster terc-butílico del ácido (S)-(1-{5-[7-(1-etilpropil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4trifluorometil-tiazol-2-il}-pirrolidin-3-il)-carbámico EM/EN m/z 553,3 (M+1)+

Ej. 32***: N-{5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-N,Ndipropil-etano-1,2-diamina, clorhidrato EM/EN m/z 511,2 (M+1)+

* Se calienta a reflujo en EtOH durante una noche. El EtOH se evapora y se calienta a 110 ºC durante 24 h. ** Se calienta a 80 ºC en EtOH durante una noche. *** Se prepara la sal HCl y se recristaliza en EtOAc/hexanos.

Ejemplo 33

N1-{5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-etano-1,2-diamina, clorhidrato

15 Se añade éster terc-butílico del ácido (2-{5-[7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-ilamino}-etil)-carbámico (101 mg, 0,192 mmol) a HCl 1 M en metanol (1 ml). La reacción se calienta a 70 ºC durante una noche. La reacción se enfría y se concentra al vacío en metanol/acetato de etilo. El residuo resultante se tritura con acetato de etilo obteniéndose el compuesto del título (64 mg, 78%). EM/EN m/z 427,0 (M+1)+.

Ej. Nº: Nombre químico Datos físicos

34: N1-{5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-N1-propil-etano-1,2-diamina, clorhidrato EM/EN m/z 469,2 (M+1 )+

35: (S)-1-{5-[7-(1-Etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-4-trifluorometil-tiazol-2-il}-pirrolidin-3ilamina, clorhidrato EM/EN m/z 453,0 (M+1)+

Ejemplo A

5 Evaluación de la Potencia In Vivo Usando la Unión Ex Vivo

Para evaluar la potencia in vivo, se evalúa un compuesto de la presente invención usando unión ex vivo. Usando procedimientos como los proporcionados en D. R. Gehlert et al., EJP 509: 145-153 (2005), un compuesto se administra a una rata por vía oral. La unión de 125I-sauvagina al cerebelo se evalúa después ex vivo como se describe en Gehlert et al. Por ejemplo, el Ejemplo 15

10 proporciona una inhibición del 65% a 10 mg/kg.

Ejemplo B

Ensayo de Unión de CRF1 al Filtro Las limitaciones de la expresión de CRF1 humano basado en plásmido, en términos de generación de una línea celular recombinante con suficiente densidad del receptor para desarrollar

15 un ensayo de unión, se superan usando un sistema de expresión retroviral Phoenix autorizado de Stanford. La línea celular HEK-hCRF1 estable se usa para preparar membranas y las reacciones de unión (200 µl) se establecen de la siguiente manera: 50 µl de 125I-sauvagina (0,2 nM final), 50 µl de compuesto y 100 µl de membrana de CRF1 (25 µg/reacción). Las reacciones se incuban a temperatura ambiente durante 2 h y después se terminan por filtración a través de placas de filtro

20 de fibra de vidrio FB Millipore pre-tratradas (96 pocillos). Las placas se lavan dos veces con tampón de ensayo enfriado con hielo (tris 50 mM, NaCl 12,5 mM, EDTA 1 mM, MgCI2 10 mM, BSA al 0,05%, pH 7,2), se secan al aire durante una noche y se cuentan con 100 µl de Microscint 40 en un contador MicroBeta. La unión no específica (UNE) se determina en presencia de sauvagina 0,5 µM no marcada. Típicamente se realizan determinaciones por triplicado y la mediana de los puntos

25 de datos se representa mediante Graph Pad Prism. Usando este ensayo, los compuestos ejemplificados de la presente invención inhiben la unión de 125I-Sauvagina (4 nM) en células rodantes/adherentes con una Ki (constante de inhibición) por debajo de 1 µM. Por ejemplo, el Ejemplo 15 muestra una Ki de 6,2 nM.

Ejemplo C

Ensayo de Unión de CRF2 al Filtro

Las limitaciones de la expresión de CRF2 humano basado en plásmido, en términos de generación de una línea celular recombinante con suficiente densidad del receptor para desarrollar un ensayo de unión, se superan usando un sistema de expresión retroviral Phoenix autorizado de Stanford. La línea celular HEK-hCRF2 estable se usa para preparar membranas y las reacciones de unión (200 µl) se establecen de la siguiente manera: 50 µl de 125I-sauvagina (0,2 nM final), 50 µl de compuesto y 100 µl de membrana de CRF2 (25 µg/reacción). Las reacciones se incuban a temperatura ambiente durante 2 h y después se terminan por filtración a través de placas de filtro de fibra de vidrio FB Millipore pre-tratradas (96 pocillos). Las placas se lavan dos veces con tampón de ensayo enfriado con hielo (tris 50 mM, NaCl 12,5 mM, EDTA 1 mM, MgCI2 10 mM, BSA al 0,05%, pH 7,2), se secan al aire durante una noche y se cuentan con 100 µl de Microscint 40 en un contador MicroBeta. La unión no específica (UNE) se determina en presencia de sauvagina 0,5 µM no marcada. Como alternativa, los compuestos se evalúan usando un ensayo de centelleo por proximidad. Este ensayo se establece de la siguiente manera: 50 µl de 125I-Sauvagina (concentración final 0,2 nM), 50 µl de compuesto o sauvagina no marcada (UNE) y 100 µl que contienen 250 µg de perlas SPA de aglutinina de germen de trigo (AGT) y membrana de CRF2 (1,5 µg/reacción). Las placas se incuban durante 4-5 h a temperatura ambiente y después se centrifugan a 200 X g durante 10 min. La radioactividad unida se evalúa usando un contador de centelleo Wallac Trilux. La unión se evalúa típicamente usando determinaciones por triplicado y la mediana de los puntos se datos se representa mediante Graph Pad Prism. Los compuestos se exploran inicialmente a una concentración fija y, si se observa suficiente actividad, se generan posteriormente curvas concentración-respuesta.

Los compuestos de la presente invención ejemplificados particularmente se ensayan en el ensayo de unión a CRF2 y muestran una afinidad débil por el receptor de CRF2. Por ejemplo, el Ejemplo 15 muestra una inhibición del 11% a una concentración de 50 µM. Este resultado sugiere que los compuestos de la presente invención son selectivos para el receptor de CRF1, (respecto a CRF2). Ejemplo D Biodisponibilidad y Propiedades Farmacocinéticas

El volumen de distribución (Vdist) se refiere a la cantidad del fármaco en el cuerpo respecto a la concentración del fármaco en la sangre o el plasma. El volumen de distribución se refiere al volumen de fluido que se requeriría para contener la cantidad total del fármaco en el cuerpo a la misma concentración que en la sangre o el plasma: Vdist = cantidad de fármaco en el cuerpo / concentración de fármaco en la sangre o el plasma (Goodman y Gillman's). Para una dosis de 10 mg y una concentración en plasma de 10 mg/l, el volumen de distribución sería de 1 litro. El volumen de distribución refleja la extensión a la que el fármaco está presente en el tejido extravascular. Un gran volumen de distribución refleja la tendencia de un compuesto a unirse a los componentes del tejido en comparación con la unión a proteína del plasma. En un marco clínico, Vdist puede usarse para determinar una dosis de carga para conseguir una concentración en estado estacionario.

Para ensayar el volumen de distribución, a ratas Sprague Dawley macho (N = 3) se les administra una sola dosis intravenosa de 1 mg/kg del compuesto. Se recogen múltiples muestras de plasma en puntos temporales de 0,08 a 24 horas después de la dosis. Las muestras de plasma se analizan por CL/EM/EM para determinar las concentraciones en plasma. Se realizan cálculos de farmacocinética del plasma para determinar los parámetros farmacocinéticas, incluyendo Vdist y aclaramiento del plasma (Clp).

Los compuestos de la presente invención tienen, preferiblemente, perfiles de biodisponibilidad favorables. Por ejemplo, una mayoría de fármacos comerciales para el SNC y cardiovasculares presentan un Vdist human de <10 l/kg. En comparación con los antagonistas de CRF, CP154526 (Schulz et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (EE.UU.), 93:10477 (1996)) y NBI30775 (Chen et al., Drug Development Research, 65:216 (2005)), que presentan un Vdist en rata de 114 l/kg y 76 l/kg, respectivamente, cuando se analizan por separado. El Ejemplo 15 de la presente invención, cuando se analiza por separado, presenta un Vdist en rata de sólo 7,2 l/kg después de una sola dosis intravenosa de 1 mg/kg.

Además, el aclaramiento del plasma (CLp) es una medida de la velocidad de retirada del fármaco del cuerpo. Después de una dosis intravenosa y una cinética de primer orden, el aclaramiento del plasma puede determinarse usando la siguiente ecuación: CLp = Dosis / AUC, donde AUC es el área total bajo la curva que describe la concentración del fármaco en el plasma como una función del tiempo, de cero a infinito. Los antagonistas de CRF de referencia, CP154526 y NBI37582, presentan un aclaramiento en rata (CLp) de 83 y 306 ml/min/kg, respectivamente, cuando se analizan por separado, después de una sola dosis intravenosa, mientras que el Ejemplo 15 de la presente invención, cuando se analiza por separado, presenta un CLp de rata de sólo 23,6 ml/min/kg.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmula I

5

10

en la que: R1 y R2 son, independientemente, etilo o n-propilo; R3 es hidrógeno, CI, Br, metilo, trifluorometilo o metoxi; R4 es hidrógeno, Br, RaRbN-, metoximetilo, n-butilo, acetamido, piridin-4-ilo, morfolin-4-ilo,

imagen1

imagen2

mismo.
2.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R3 es CI, Br, metilo o trifluorometilo.
3.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R3 es CI o Br.

25
4. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, o una sal 30 farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R4 es RaRbN-, piridin-4-ilo, morfolin-4-ilo, o

imagen3
5.

El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R4 es morfolin-4-ilo o
6.

El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R4 es RaRb-y Ra y Rb son, independientemente, alquilo C1-C3.
7.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que es 3-[4-bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il]-2,5-dimetil-7-(1-propilbutil)-pirazolo[1,5-a]pirimidina.
8.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que es 3-(4-bromo-2-(2-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-tiazol-5-il)-7-(1-etilpropil)-2,5-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina.
9.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que es 3-(4-cloro-2-morfolin-4-il-tiazol-5-il)-7-(1-etil-propil)-2,5-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina.
10.

Una composición farmacéutica que comprende: un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
11.

Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.
12.

Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de ansiedad o depresión.
13.

Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento del alcoholismo o toxicomanía.