ES2203685T3 - Peptidos y agentes curativos para enfermedades autoinmunitarias que los comprenden. - Google Patents
Peptidos y agentes curativos para enfermedades autoinmunitarias que los comprenden.Info
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Abstract
LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A UN PEPTIDO QUE TIENE LA SIGUIENTE SECUENCIA AMINOACIDICA; ALA HE INDEPENDIENTEMENTE REPRESENTAN UN RESIDUO AMINOACIDICO QUE PUEDE TENER UNA CADENA LATERAL DE ALQUILO O HETEROALQUILO QUE PUEDE ESTAR SUSTITUIDA CON UN GRUPO HIDROXI, AMINO O GUANIDILO; XAA2 Y XAA6 CADA UNO INDEPENDIENTEMENTE REPRESENTAN UN RESIDUO AMINOACIDICO QUE PUEDE POSEER UNA CADENA LATERAL ALQUILO O HETEROALQUILO QUE PUEDE ESTAR SUSTITUIDA CON UN GRUPO HIDROXILO; XAA3 Y XAA5 CADA UNO INDEPENDIENTEMENTE REPRESENTAN UN RESIDUO AMINOACIDICO QUE PUEDE POSEER UNA CADENA LATERAL HIDROFOBA; Y N SIGNIFICA 1 O 0), O DERIVADOS DEL MISMO, O MODIFICACIONES DEL MISMO. EL PEPTIDO O DERIVADOS DEL MISMO DE CONFORMIDAD CON LA PRESENTE INVENCION ES UTIL COMO COMPOSICION FARMACEUTICA PARA LA PREVENCION Y TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES AUTOINMUNES, REACCION DE RECHAZO CONCURRENTE AL TRANSPLANTE DE ORGANOS, INFLAMACION O SIMILARES.
Description
Péptidos y agentes curativos para enfermedades
autoinmunitarias que los comprenden.
La presente invención se refiere a péptidos o a
sus derivados. Los péptidos o sus derivados según la presente
invención son útiles para el tratamiento supresor no específico del
antígeno de la inmunorreacción anormalmente aumentada en
enfermedades autoinmunitarias. Al tener también un efecto
autoinmunitario, es también útil para el tratamiento de la
inflamación.
Por consiguiente, la presente invención se
refiere a los campos que conciernen a péptidos o sus derivados o
también a los productos farmacéuticos que contienen los mismos.
Las enfermedades autoinmunitarias están
ocasionadas por la producción continua de un anticuerpo o linfocito
que reacciona con un componente del propio tejido. En las
enfermedades autoinmunitarias, descritas específicamente, la
interrupción de la tolerancia inmunológica intensifica la respuesta
inmunitaria en los propios componentes orgánicos, lo que origina la
reacción entre un anticuerpo o un linfocito T autorreactivo
producido de este modo y un autoantígeno o célula correspondiente al
mismo, originando de este modo la disfunción celular o
alteracioness del tejido. Actualmente, se conocen 50 o más tipos de
enfermedades autoinmunitarias y según el grado de propagación de
una lesión en los órganos, se pueden clasificar en enfermedades
autoinmunitarias específicas de órganos y enfermedades
autoinmunitarias no específicas de órganos.
Ejemplos de las enfermedades anteriores incluyen
la diabetes mellitus dependiente de insulina en la que la lesión se
produce por la destrucción selectiva de los linfocitos B en los
islotes pancreáticos de Langerhans, la enfermedad de Basedow y la
enfermedad de Hashimoto en la que la disfunción del tiroides es
producida por el anticuerpo frente a un receptor de la hormona
estimulante del tiroides, la miastenia grave, que presenta
contración muscular disminuida por un anticuerpo frente a un
receptor de acetilcolina del músculo estriado y la anemia
hemolítica autoinmunitaria en la que la hemolisis se produce por el
anticuerpo frente al eritrocito.
Ejemplo de estas últimas enfermedades incluyen la
artritis reumatoidea crónica en la que se considera que tienen
lugar trastornos generalizados en los tejidos óseo o cartilaginoso,
desencadenados por la agragación de IgG y anticuerpos
anti-IgG (factores reumatoides), lupus eritematoso
generalizado en el que la reacción perturbadora se produce por la
deposición de anticuerpos frente al ADN o por componentes nucleares
en el riñón, articulaciones o piel, síndrome de SjÜgren en el que la
disfunción tiene lugar debido a la infiltración linfocítica dentro
de la glándula salival o la glándula lacrimal y la lesión orgánica
generalizada, tal como tiene lugar actualmente la nefritis
intersticial con cierta frecuencia y la esclerosis múltiple en la
que la desmielinación diseminada nidi y gliosis aparece en la
sustancia alba del sistema nervioso central y producen parálisis
motriz generalizada, oftalmopatía, parestesia o similares.
Para el tratamiento de enfermedades
autoinmunitarias, es práctica corriente administrar un
inmunosupresor tipificado por una preparación glucoesteroide,
ciclosporina A o FK 506. El tratamiento que utiliza dicha
preparación está acompañado, sin embargo, por inconvenientes tales
como graves efectos secundarios, por ejemplo, enfermedades
infecciosas, nefrotoxicidad del propio fármaco o carcinogénesis, que
procede de un amplio espectro de inmunosupresión [Sadao
Kashiwazaki, Sogo Rinsho, 43 (9), 1725-1729 (1994).
El documento WO 93/00365 expone epítopos del VCH útiles como
reactivos inmunogénicos y los correspondientes anticuerpos. Sauma S.
et al. da a conocer análogos de péptido de 58 a 66 péptidos,
procedentes de la proteína de la matriz del virus de la gripe
(Hum. Immunol., 1993, vol. 37, nº 4, págs.
252-258).
En los últimos años, se han intentado tratar las
enfermedades inmunitarias sin utilizar dicho inmunosupresor de
amplio espectro.
En la reacción con un antígeno, los linfocitos B
reconocen el propio antígeno, mientras que los linfocitos T
reconocen el complejo de una molécula de MHC en la superficie del
antígeno que presenta el linfocito y un péptido del antígeno fijado
en la estría de la molécula de MHC. La molécula de MHC que se
diferencia en los linfocitos T individuales y humanos que poseen
MHC congénita en un antígeno determinado presenta buena respuesta a
este antígeno. Esta es alguna de las razones por las que algunos
seres humanos son probablemente reactivos a un determinado antígeno.
Por otra parte, los receptores del antígeno del linfocito T
(receptores del linfocito T: TcR) se pueden clasificar en varias
familias. Existe una sustancia que activa los linfocitos T, que se
une a una o algunas de las familias de TcR y la sustancia se
denomina superantígeno. El superantígeno activa un gran número de
linfocitos T, comparados con los del caso de inmunorreacción
ordinaria de modo que sucede para producir una reacción prolongada,
que conduce a una enfermedad. Para la activación de los linfocitos
T, es necesaria la unión de una molécula asociada (ligando) a la
molécula de adhesión en la superficie, además del reconocimiento
del antígeno. La reacción de las células puede, por consiguiente,
ser inhibida bloqueando la molécula de adhesión o se puede
amplificar la reacción aumentando la expresión del ligando de la
célula asociada.
Se ha publicado que entre los grupos de
linfocitos T, existen linfocitos T que suprimen la inmunorreacción
que son los denominados linfocitos T supresores [Tada y Takemori,
J. Exp. Med., 140, 239 (1974)]. Se ha descubierto que estos
linfocitos T producen factores inmunosupresores solubles para
suprimir la producción de anticuerpo específico del antígeno [Tada,
et al., J. Immunol., 111, 952 (1973))]. Está descrita la
relación entre los factores inmunosupresores solubles y la cadena
alfa de TcR [Dorf, et al., J. Immunol., 145,
2809-2819 (1990)]. La encefalomielitis alérgica
experimental (EAE) que es un modelo de esclerosis múltiple se
produce por administración de la proteína básica mielina. En la
EAE, se conoce la presencia de un receptor del antígeno del
linfocito T (TcR específico de la enfermedad) que se expresa
específicamente sobre el linfocito patógeno. Se ha desarrollado,
por consiguiente, el método de tratamiento que utiliza un
anticuerpo contra un TcR específico de la enfermedad o vacuna del
péptido TcR [Howell, et al., Science, 251,
430-432 (1991); Vandervrk, et al., Nature,
341, 541-544 (1989)]. Dicho método de tratamiento
de enfermedades autoinmunitarias se considera que está asociado a
efectos secundarios menos graves comparado con el método que emplea
un inmunosupresor tal como la preparación de glucoesteroide o
ciclosporina A. El método anterior se puede aplicar únicamente en
el caso en que el linfocito T o el antígeno que ha producido una
enfermedad esté circunscrito en un intervalo marcadamente estrecho.
Se considera que el método anterior es dificil de aplicar a
enfermedades autoinmunitarias, tal como la artritis reumatoidea
crónica, de la que no se ha determinado todavía el antígeno y en la
que existe un número diverso de linfocitos patógenos. Este
procedimiento requiere el establecimiento de linfocitos T supresores
individuales específicos para cada antígeno y el análisis de su
TcR. En el estado presente en el que los linfocitos T supresores
que proceden del ser humano no se pueden establecer fácilmente, es
sumamente difícil desarrollar el TcR anterior como agente
inmunosupresor.
Por otra parte, se describe un caso en el que se
produce tolerancia inmunológica utilizando un péptido que tiene una
secuencia de aminoácidos procedente del antígeno [Greenstein, et
al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 9, 7608-7612
(1993)]. Como método para utilizar un inmunosupresor compuesto por
un fragmento de péptido TcR, se expone un método en el que se
utiliza el polipéptido procedente de la cadena beta de TcR
(compuesto por 13 restos de aminoácidos como mínimo) para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias, particularmente,
artritis reumatoidea crónica (Publicación en lengua japonesa
expuesta al público nº HEI 6-511241); y un método en
el que se administra un fragmento de péptido de TcR o linfocitos T
patógenos que producen esclerosis múltiple para suprimir el comienzo
de EAE (documento WO 90/11294). Mohapatra et al., han
demostrado que un péptido sintético compuesto de 15 restos de
aminoácido que contiene CDR3 (zona que determina la
complementariedad), que es una zona determinante del antígeno
específico de Tcr procedente de los linfocitos T supresores,
presenta un efecto inmunosupresor [J. Immunol., 151,
688-698 (1993)].
Los fragmentos del péptido descritos
anteriormente no son mejores que un agente inmunosupresor
caracterizado por tener especificidad para el antígeno, de modo que
ha quedado sin resolver el problema de que no se pueden utilizar
para el tratamiento de todas las enfermedades autoinmunitarias.
Un objetivo de la presente invención es superar
los inconvenientes o defectos de los métodos convencionales
descritos anteriormente, proporcionando de este modo un agente
terapéutico para las enfermedades autoinmunitarias, que presenta
efectos inmunosupresores no específicos en el antígeno y puede
utilizarse por lo tanto para el tratamiento de enfermedades
autoinmunitarias de las que no se han determinado todavía los
antígenos.
Otro objetivo de la presente invención es
proporcionar un agente terapéutico para las enfermedades
autoinmunitarias, que se puede utilizar para el tratamiento de
enfermedades autoinmunitarias acompañadas de inflamación.
Un objetivo adicional de la presente invención es
proporcionar un péptido que se caracteriza por tener un peso
molecular bajo comparado con el empleado en el método convencional,
de forma que se puede preparar a bajo coste y presenta efectos
secundarios marcadamente reducidos tales como la aparición de
antigenicidad debida a la administración frecuente.
Como resultado de una investigación extensa de la
relación mutua entre la secuencia de aminoácidos de un fragmento de
proteína o péptido originado a partir de una proteína tal como CDR3
de TcR procedente de los linfocitos T supresores y un agente
terapéutico para enfermedades autoinmunitarias, los presentes
inventores han hallado que existen algunos péptidos que tienen
actividad supresora frente a la producción de antígeno IgG no
específico. Al descubrir que un péptido compuesto de 9 restos de
aminoácido, que se conoce como Secuencia ID nº 1 en el listado de
secuencias, suprime no solamente la producción del anticuerpo
anti-ovoalbúmina (OVA) sino también la producción
del anticuerpo anti-hemocianina de la lapa de ojo de
cerradura (KLH) en cada experimento in vivo, los presentes
inventores han concluido la presente invención. De forma
imprevista, OVA y KLH son antígenos típicos utilizados como
inmunógenos (Immunology Dictionary, 1993, Tokio Kagaku
Dojin, págs. 101 y 130). En general, TcR procedente de los
linfocitos T supresores corresponde uno a uno específicamente a
varios antígenos. El péptido de la presente invención, por otra
parte, suprime la producción de anticuerpo frente a diferentes
antígenos tales como OVA y KLH y, por consiguiente, presenta
actividad inmunosupresora no específica en el antígeno.
Los presentes inventores han descubierto además
que el péptido compuesto de 9 restos de aminoácidos, que se presenta
como Secuencia ID nº 1 en el listado de secuencias, suprime el
inicio de la encefalomielitis alérgica experimental (EAE), modelo
de esclerosis múltiple, que es una de las enfermedades
autoinmunitarias de la que son responsables los linfocitos T.
Además, es sorprendente que hayan descubierto que el péptido
compuesto por 9 restos de aminoácidos que se indica en la Secuencia
ID nº 1 en el listado de secuencias, suprime el edema en un modelo
de edema de pata provocado por la carragenina y, por consiguiente,
presenta un efecto antiinflamatorio. El péptido de la presente
invención presenta una propiedad de inmunosupresión suprimiendo las
actividades del linfocito T además de la antiinflamación.
Como resultado de los extensos esfuerzos a
realizar, los presentes inventores han descubierto un péptido de
bajo peso molecular compuesto de 8 restos de aminoácido, que
presenta menos antigenicidad y se puede sintetizar fácilmente, que
se presenta como Secuencia ID nº 2 en el listado de secuencias,
suprime no sólo la producción de anticuerpo anti-OVA
sino también la producción de anti-KLH, en cada
experimento in vivo. Los presentes inventores han
descubierto también el método de sustitución de la alanina (Geysen
H.M., et al., J. Immunol. Methods, 102,
259-274 (1987)] que existe, en algunos péptidos con
una determinada secuencia de aminoácidos por consenso, péptidos que
tienen una actividad supresora de la producción de IgG no específica
del antígeno. Al descubrir que dichos péptidos que tienen una
secuencia general de aminoácidos suprimen no solamente la producción
del anticuerpo anti-ovoalbúmina (OVA) sino también
la producción del anticuerpo anti-hemocianina de la
lapa de ojo de cerradura (KLH) en cada experimento in vivo,
los presentes inventores han concluido la presente invención.
Por consiguiente, la presente invención se
refiere a un péptido con una secuencia de aminoácidos representada
por la fórmula siguiente:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxi, amino o
guanidilo;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxilo;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba; y
n representa 1 ó 0), con la condición de que el
caso en que Xaa2 representa Gly esté excluída una composición
farmacéutica que contiene el mismo; y un método para el tratamiento
de enfermedades que de este modo lo utilizan.
La Fig. 1 es un gráfico del cromatograma del
péptido (I). El péptido (I) obtenido según la presente invención
presentó una pureza del 100%.
La Fig. 2 es un gráfico del cromatograma del
péptido (II). El péptido (II) obtenido según la presente invención
presentó una pureza del 99,6%.
La Fig. 3 es un gráfico del cromatograma del
péptido (III). El péptido (III) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,8%.
La Fig. 4 es un gráfico del cromatograma del
péptido (IV). El péptido (IV) obtenido según la presente invención
presentó una pureza del 97,2%.
La Fig. 5 es un gráfico del cromatograma del
péptido (V).
El péptido (V) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,5%.
La Fig. 6 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VI).
El péptido (VI) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,4%.
La Fig. 7 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VII).
El péptido (VII) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 97,9%.
La Fig. 8 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VIII). El péptido (VIII) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,1%.
La Fig. 9 es un gráfico del cromatograma del
péptido (IX).
El péptido (IX) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 97,5%.
La Fig. 10 es un gráfico del cromatograma del
péptido (X).
El péptido (X) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,2%.
La Fig. 11 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XI).
El péptido (XI) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 97,6%.
La Fig. 12 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XII). El péptido (XII) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 97,5%.
La Fig. 13 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XIII). El péptido (XIII) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,2%.
La Fig. 14 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XIV). El péptido (XIV) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 98,6%.
La Fig. 15 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XV).
El péptido (XV) obtenido según la presente
invención presentó una pureza del 100%.
La presente invención se refiere a un péptido con
una secuencia de aminoácidos representada por la fórmula
siguiente:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que es un grupo alquilo
C_{1}-C_{15}, que puede ser lineal o ramificado
o por lo menos en los átomos de carbono ha sido reemplazado con un
átomo de azufre o de oxígeno y puede ser reemplazado con un grupo
hidroxi, amino o
guanidilo;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxilo;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba; y
n representa 1 ó 0, con la condición de que el
caso en que Xaa2 representa glicina se
excluya).
Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo, tal como se definió
anteriormente, que puede estar sustituida con un grupo hidroxi,
amino o guanidilo. Ejemplos pueden incluir Lys, Arg, His y Ala.
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo, tal como se definió
anteriormente, que puede estar sustituida con un grupo hidroxilo.
Ejemplos pueden incluir Thr y Ala.
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba. Ejemplos pueden incluir Gly y Ala.
El término "alquilo", tal como se utiliza en
la presente memoria, significa un grupo que abarca grupos alquilo
C_{1}-C_{15}, preferentemente
C_{1}-C_{10}, primarios, secundarios y
terciarios que pueden ser lineales o ramificados. El término
"heteroalquilo", tal como se utiliza en la presente memoria,
significa un grupo en el que por lo menos uno de los átomos de
carbono de los C_{1}-C_{15} descritos
anteriormente, preferentemente el grupo alquilo
C_{1}-C_{10} se ha reemplazado con un número
similar de heteroátomos tales como azufre (S) u oxígeno (O)
[ordinariamente, en forma de (tio)éster o (tio)éter], n representa 1
ó 0.
En el derivado del péptido de la presente
invención, todos o parte de los aminoácidos pueden estar en forma
D, un grupo funcional con un hidrógeno activo puede ser reemplazado
con un grupo protector adecuado o el grupo carboxilo en el C
terminal puede estar en forma de un carboxi-derivado
tal como amida o éster. No se impone ninguna limitación particular
sobre el grupo protector adecuado para la sustitución con el grupo
amino o carboxilo en el péptido, sin embargo, se prefiere un grupo
acetilo (Ac) o un grupo t-butoxicarbonilo (tBoc).
Como carboxi-derivado en el C terminal, se prefiere
una amida.
La transformación en un derivado del péptido
puede producir una mejora en la estabilidad.
\newpage
Específicamente descrita, la presente invención
está relacionada con un péptido con la siguiente secuencia de
aminoácidos:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente cualquiera entre Lys, Art, His y
Ala;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente Thr o Ala;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente Gly o Ala; y n representa 1 ó 0).
Más específicamente, la presente invención se
refiere a un péptido con una secuencia de aminoácidos seleccionada
del grupo constituido por las siguientes secuencias de
aminoácidos:
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly,
y
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala.
Todavía de forma más específica, la presente
invención se refiere a un péptido o uno de sus derivados
seleccionados del grupo constituido por los péptidos y sus
derivados representados por las siguientes fórmulas (I) a (XII):
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (I) |
| DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr | (II) |
| Ac-Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (III) |
| tBoc-Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (IV) |
| Ac-DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr | (V) |
| Ac-DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr-NH_{2} | (VI) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VII) |
| Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VIII) |
| Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly | (IX) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly | (X) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly | (XI) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala | (XII) |
(en las que D representa una forma D, Ac
representa un grupo acetilo y tBoc representa un grupo
t-butoxi-carbonilo),
o uno de sus
derivados.
No se impone ninguna limitación particular en el
procedimiento de preparación del péptido con una secuencia de
aminoácidos representa por la fórmula siguiente:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxi, amino o
guanidilo;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxilo;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba; y
n representa 1 ó 0),
o uno de sus derivados. Por ejemplo, es posible
sintetizar un péptido utilizando un sintetizador de péptidos según
la síntesis de péptidos en fase sólida (Fmoc) según una forma
ordinaria seguida de purificación mediante una columna HPLC en fase
inversa. Los péptidos (II) a (XII) se pueden también sintetizar
mediante el péptido sintetizador y pueden transformarse
químicamente según se
necesite.
Se prefiere que el péptido de la presente
invención tenga propiedades fisicoquímicas solubles. Debido a que
el péptido de la presente invención tiene un peso molecular bajo,
los efectos secundarios tales como la aparición de antigenicidad se
pueden reducir significativamente aún después de la administración
frecuente y además, su toxicidad es muy baja. La presente invención
también está relacionada con una composición farmacéutica que
contiene un péptido con una secuencia de aminoácidos representada
por la fórmula siguiente:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxi, amino o
guanidilo;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que puede estar sustituida con
un grupo hidroxilo;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba; y
n representa 1 ó
0),
o uno de sus derivados; o una composición
farmacéutica que contiene dicho péptido o uno de sus derivados y un
excipiente farmacéuticamente
aceptable.
Descrita específicamente la presente invención
está relacionada con un péptido que tiene una secuencia de
aminoácidos representada por la fórmula siguiente:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente uno de Lys, Arg, His y
Ala;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente Thr o Ala;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente Gly o Ala; y
n representa 1 ó
0),
o uno de sus
derivados.
Más específicamente, la presente invención está
relacionada con un péptido con una secuencia de aminoácidos
seleccionada del grupo constituido por las siguientes secuencias de
aminoácidos:
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly,
y
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala,
o sus derivados; o una composición farmacéutica
que contiene dicho péptido o sus derivados y un excipiente
farmacéuticamente
aceptable.
Todavía más específicamente, la presente
invención también está relacionada con un péptido o uno de sus
derivados seleccionados del grupo constituido por los péptidos y
sus derivados representado por las siguientes fórmulas (I) a
(XII):
\newpage
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (I) |
| DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr | (II) |
| Ac-Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (III) |
| tBoc-Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr | (IV) |
| Ac-DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr | (V) |
| Ac-DAla-DLys-DLeu-DThr-DPhe-Gly-DLys-Gly-DThr-NH_{2} | (VI) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VII) |
| Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VIII) |
| Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly | (IX) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly | (X) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly | (XI) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala | (XII) |
(en las que D representa una forma D, Ac
representa un grupo acetilo y tBoc representa un grupo
t-butoxicarbonilo);
o una composición farmacéutica que contiene dicho
péptido o sus derivados y un excipiente farmacéuticamente
aceptable.
En los derivados de péptido utilizados para la
composición farmacéutica de la presente invención, todos o parte de
los aminoácidos pueden estar en forma D, un grupo funcional con un
hidrógeno activo se puede sustituir con un grupo protector
apropiado o el grupo carboxilo en el extremo
C-terminal puede estar en forma de
carboxi-derivado, tal como amida o éster. No se
impone ninguna limitación particular sobre el grupo protector
adecuado para la sustitución con el grupo amino o carboxilo en el
péptido, sin embargo, se prefiere un grupo acetilo (Ac) o un grupo
t-butoxicarbonilo (tBoc). Como derivado carboxi en
el C terminal, se prefiere una amida. La transformación en un
derivado de péptido puede producir una mejora de la estabilidad.
La composición farmacéutica de la presente
invención descrita anteriormente es útil particularmente para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias. Por consiguiente, la
presente invención proporciona una composición farmacéutica para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias.
La composición farmacéutica de la presente
invención para el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias se
caracteriza falta de especificidad del antígeno. El péptido o sus
derivados según la presente invención suprime la actividad de los
linfocitos T, de modo que la presente invención también se refiere a
una composición farmacéutica para el tratamiento de una o más de
una enfermedad seleccionada del grupo constituido por esclerosis
múltiple, artritis reumatoidea crónica, lupus eritematoso
generalizado, síndrome de SjÜgren, enfermedad de Basedow, enfermedad
de Hashimoto y anemia hemolítica autoinmunitaria.
La composición farmacéutica de la presente
invención descrita anteriormente es también útil para la prevención
y el tratamiento del episodio de rechazo que acompaña al trasplante
de órganos. Por consiguiente, la presente invención proporciona una
composición farmacéutica para la prevención y el tratamiento del
episodio de rechazo que acompaña al trasplante de órganos.
Además, la composición farmacéutica de la
presente invención descrita anteriormente presenta un efecto
antiinflamatorio y es útil como agente antiinflamatorio.
Por consiguiente, la presente invención
proporciona una composición farmacéutica para el tratamiento de la
inflamación.
La presente invención se refiere asimismo a un
método de tratamiento para enfermedades autoinmunitarias que
comprende administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz del
péptido descrito anteriormente o de sus derivados. La presente
invención también se refiere a un método de tratamiento para una o
más de una enfermedad seleccionada del grupo constituido por
esclerosis múltiple, artritis reumatoidea crónica, lupus eritematoso
generalizado, síndrome de SjÜgren, enfermedad de Basedow,
enfermedad de Hashimoto y anemia hemolítica autoinmunitaria, que
comprende administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz del
péptido descrito anteriormente o de sus derivados.
La presente invención también está relacionada
con un método preventivo y curativo del episodio de rechazo que
acompaña al trasplante de órganos, que comprende administrar una
cantidad farmacéuticamente eficaz del péptido descrito
anteriormente o de sus derivados.
La presente invención también está relacionada
con un método de tratamiento de la inflamación, que comprende
administrar una cantidad farmacéuticamente eficaz del péptido
descrito anteriormente o de sus derivados.
La presente invención también se refiere a la
utilización del péptido descrito anteriormente o de sus derivados
para la preparación de una composición farmacéutica para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias. La presente invención
también se refiere a la utilización del péptido descrito
anteriormente o de sus derivados para la preparación de una
composición farmacéutica para el tratamiento de una o más de una
enfermedad seleccionada del grupo constituido por esclerosis
múltiple, artritis reumatoidea crónica, lupus eritematoso
generalizado, síndrome de SjÜgren, enfermedad de Basedow,
enfermedad de Hashimoto y anemia hemolítica autoinmunitaria.
La presente invención también se refiere a la
utilización del péptido descrito anteriormente o de sus derivados
para la preparación de una composición farmacéutica para la
prevención y tratamiento del episodio de rechazo que acompaña al
trasplante de órgano.
La presente invención también se refiere a la
utilización del péptido descrito anteriormente o de sus derivados
para la preparación de una composición farmacéutica para el
tratamiento de la inflamación.
Aunque la dosificación clínica del péptido de la
presente invención varía dependiendo del método de administración,
edad, peso y condiciones de cada paciente, o similares, está
comprendida típicamente en el intervalo de 0,005 a 500 mg,
preferentemente de 0,1 a 100 mg al día y por adulto.
Como método de administración se puede emplear la
administración intravenosa. Además de la inyección intravenosa
ordinaria, también es posible la transfusión.
Se puede formular el péptido de la presente
invención o sus derivados, como preparación en inyección, por
ejemplo, en una preparación en polvo para inyecciones. En este
caso, la preparación para inyección se puede obtener añadiendo uno o
más excipientes adecuados solubles en agua seleccionados entre
manitol, sacarosa, lactosa, maltosa, glucosa, fructosa o similares,
añadidos a la preparación en polvo, disolviendo la mezcla
resultante en agua, vertiendo las porciones de la mezcla resultante
en viales o ampollas, liofilizando y a continuación sellándolos
herméticamente. Es también posible administrar la preparación en
polvo en el organismo a través de la nariz o los pulmones como una
preparación de aerosol en partículas finas. Además, la preparación
en polvo se puede administrar por vía oral después de añadirla con
un excipiente adecuado o similares.
En la presente invención, se estudiaron por el
método ELISA los efectos supresores de la producción de anticuerpos
anti-OVA y de la producción de anticuerpos
anti-KLH en ratones. En comparación con el grupo al
que no se administró, el péptido de la presente invención presentó
de forma significativa gran actividad supresora contra la
producción de anticuerpos anti-OVA. Incluso en
comparación con un fragmento de péptido compuesto por 15 restos de
aminoácidos procedentes de CDR3, el péptido de la presente
invención presentó una actividad supresora de la producción de
anticuerpos marcadamente elevada. Comparado con el grupo al que no
se administró, el péptido de la presente invención presentó una
actividad supresora marcadamente elevada contra la producción de
anticuerpos anti-KLH.
Además, se examinaron los efectos supresores
contra el comienzo de la encefalomielitis alérgica experimental
(EAE) en ratones. Comparado con el grupo al que no se administró,
el péptido de la presente invención presentó un efecto supresor
significativo contra el inicio de EAE. Además, se examinó el efecto
supresor del péptido de la presente invención en el modelo de edema
en la pata provocado por la carragenina, comparado con el grupo al
que no se administró.
No hace mucho se ha publicado que un péptido de
bajo peso molecular que procede de una zona J de la cadena alfa de
TcR y que se puede sintetizar artificialmente presenta un efecto
inmunosupresor no específico en el antígeno. El péptido o sus
derivados de la presente invención son útiles como agente
terapéutico de enfermedades autoinmunitarias, particularmente, una
composición farmacéutica para el tratamiento de una o más de una
enfermedad seleccionado del grupo constituido por esclerosis
múltiple, artritis reumatoidea crónica, lupus eritematoso
generalizado, síndrome de SjÜgren, enfermedad de Basedow,
enfermedad de Hashimoto y anemia hemolítica autoinmunitaria.
Presenta asimismo un efecto antiinflamatorio, de modo que es útil
como agente terapéutico para, entre aquellas enfermedades
autoinmunitarias, acompañadas de inflamación, tal como la artritis
reumatoidea crónica. Además, el péptido de la presente invención
presenta efectos supresores de la producción de anticuerpos, de
manera que es útil como agente preventivo o terapéutico para la
alergia de tipo inmediato en la que está interesada IgE, tal como
polinosis, dermatitis atópica, asma, choque anafiláctico o fiebre
del heno, o alergia al fármaco.
La presente invención se describirá en lo
sucesivo con detalle mediante ejemplos, pero no obstante estar
limitada en espíritu, la presente invención no está limitada a o
por los siguientes ejemplos.
El péptido (I) se sintetizó por el método (Fmoc)
en fase sólida utilizando un sintetizador de péptidos ("modelo
430A", Applied Biosystems Inc.).
\newpage
Un aminoácido que tiene un
N-terminal protegido con un grupo
9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc) se acopló a una
resina de p-hidroximetilfenoximetilpoliestireno
(HMP) por el método que se describe a continuación.
En primer lugar, se desprotegió el aminoácido en
la resina a temperatura ambiente durante 30 minutos utilizando
piperidina al 20%/N-metilpirrolidona (NMP), seguido
de lavado dos veces con NMP y a continuación con diclorometano (DCM)
al 50%/metanol. Después del lavado, se añadió un péptido diluido
con fosfato de
o-benzotriazol-1-il-N,N,N,N-tetrametiluranio-hexafluoro
(HBTU)/DCM y se realizó la reacción de acoplamiento a temperatura
ambiente durante alrededor de 60 a 120 minutos. Se repitieron las
etapas descritas anteriormente para el acoplamiemto de todos los
aminoácidos. Después de la ejecución de la reacción, se eliminó el
grupo Fmoc N-terminal utilizando HBTU al 50%/DCM,
seguido de la recuperación del péptido libre procedente de la
resina utilizando ácido trifluoroacético (TFA). El péptido
recuperado de este modo se diluyó con solución de ácido acético al
5%, seguido de purificación por HPLC en fase inversa.
Los péptidos (II), (III), (IV) y (V) se
sintetizaron por el método (tBoc) en fase sólida utilizando un
sintetizador de péptidos ("Beckman 990c").
Un aminoácido que tiene un
N-terminal protegido con un grupo
t-butiloxicarbonilo (tBoc) se acopló a una resina
por el método que se describe a continuación. De forma imprevista,
se utilizó una resina de fenilacetamido metilo (Pam) para la
síntesis de un péptido que tiene un grupo carbonilo
C-terminal y una resina de
4-metilbencidrilamina (MBHA) para la síntesis de un
péptido con un grupo amida C-terminal.
En primer lugar, se desprotegió el aminoácido en
la resina a temperatura ambiente durante 25 minutos utilizando TFA
al 50%/DCM, respectivamente. A continuación, se añadió un péptido
diluido con DMF al 50%/DCM y se realizó la reacción de acoplamiento
a temperatura ambiente durante alrededor de 60 a 120 minutos. Se
repitieron las etapas descritas anteriormente y se terminaron las
reacciones de acoplamiemto de todos los aminoácidos. Se obtuvo el
péptido (IV) recuperando el péptido libre a partir de la resina por
el método HF (J.M. Stewart et al., Pierce Chemical Co.,
Rockford, Illinois, 1984), diluyendo el péptido libre resultante
con una solución de ácido acético al 5% y a continuación
purificándolo por el método HPLC en fase inversa. Se obtuvo el
péptido (II) eliminando el grupo tBoc en el extremo
N-terminal utilizando TFA al 50%/DCM, recuperando el
péptido libre de la resina por el método HF, diluyendo con solución
de ácido acético al 5% y a continuación purificando por el
procedimiento HPLC en fase inversa.
Cada uno de los péptidos (III), (IV) y (V) se
obtuvieron añadiendo un grupo acetilo (Ac) al
N-terminal utilizando un anhídrido acético al 20%,
recuperando el péptido libre por el método HF, diluyendo con una
solución de ácido acético al 5% y a continuación purificándolo por
el método HPLC en fase inversa.
Se determinó la pureza del péptido sintetizado de
este modo utilizando una columna C-18 (Vydac Corp.)
por el método HPLC en fase inversa. Se detectó el pico de elución
con un gradiente lineal de 5% a 25% de acetonitrilo/agua purificada
como fase móvil, midiendo la absorbancia a 215 nm.
La Fig. 1 es un gráfico del cromatograma del
péptido (I). El péptido (I) sintetizado anteriormente presentó una
pureza del 100%.
La Fig. 2 es un gráfico del cromatograma del
péptido (II). El péptido (II) sintetizado anteriormente presentó
una pureza del 99,6%.
La Fig. 3 es un gráfico del cromatograma del
péptido (III). El péptido (III) sintetizado anteriormente presentó
una pureza del 98,8%.
La Fig. 4 es un gráfico del cromatograma del
péptido (IV). El péptido (IV) sintetizado anteriormente presentó
una pureza del 97,2%.
La Fig. 5 es un gráfico del cromatograma del
péptido (V).
El péptido (V) sintetizado anteriormente presentó
una pureza del 98,5%.
La Fig. 6 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VI).
El péptido (VI) sintetizado anteriormente
presentó una pureza del 98,4%.
\newpage
El día 5 y el día 3 antes de la administración
del antígeno, el péptido (I) compuesto por 9 restos de aminoácidos
indicados por la Secuencia ID nº 1 en el listado de secuencias de la
presente invención y un péptido sintético 15 compuesto por 15
restos de aminoácidos procedentes del clon 17.2 TcR, cuyo péptido ha
sido descrito por Mohopatra et al. como se describió
anteriormente, se disolvieron 100 g de cada uno, en 200 ml de
solución salina fisiológica y se administró por vía subcutánea cada
solución obtenida de este modo a ratones Balb/c de 9 semanas. Como
referencia, se empleó un grupo sin administrar, al que se administó
la misma cantidad de solución salina fisiológica. Se disolvieron 100
g de OVA (Sigma Chemical Co.) en 200 l de solución salina
fisiológica, seguido de administración por vía subcutánea. Se
extrajo sangre el día 21 después de la administración del antígeno
y se valoró el anticuerpo por el método descrito a
continuación.
Se diluyó el OVA a 10 g/ml con solución salina
tamponada con fosfato (PBS) y se vertieron porciones de 50 l de la
solución en una microplaca de 96 pocillos. La operación de
recubrimiento se realizó a 40ºC toda la noche. Se lavó a
continuación la microplaca tres veces con Tween-20
al 0,05% conteniendo PBS (T-PBS). Se vertieron en
cada pocillo porciones de 200 l de caseína al 0,5% solución salina
fisiológica tamponada con tris (caseína TBS)y se dejó
reposar la microplaca a temperatura ambiente durante una hora. Se
lavó a continuación la microplaca tres veces con
T-PBS. Después se diluyó el suero de la sangre
extraido de los ratones a 1/200 con caseína TBS al 0,5%, se
vertieron en cada pocillo porciones de 50 l del suero diluido y se
dejó reposar la placa durante una hora (reacción primaria).
Después de la ejecución de la reacción primaria,
se lavó la microplaca tres veces con T-PBS. Se
vertieron en cada pocillo porciones de cincuenta l de anticuerpo
marcado con peroxidasa IgG anti-ratón (TAGO Co.)
diluidos a 1/4000 con caseína TBS al 0,5%, seguido de reacción a
temperatura ambiente durante una hora (reacción secundaria).
Después de la ejecución de la reacción secundaria, se lavó otra vez
la microplaca tres veces. Se vertieron en cada pocillo porciones de
cincuenta l de líquido de sustrato/cromógeno (sustrato de cromógeno:
Behringwerke AG), seguido de reacción a temperatura ambiente
durante 30 minutos. Después de la ejecución de la reacción, se
añadió ácido sulfúrico diluido 0,5 N para terminar la reacción y se
midió la absorbancia a 450 nm mediante un colorímetro
("BEP-II", producto de Behringwerke
AG/Alemania) con una absorbancia de 650 nm como referencia. Los
resultados se muestran en la Tabla 1.
| Tratado con | Valor del anticuerpo anti-OVA Ig-G (unidad) |
| Grupo sin administrar | 59 \pm 40,0 |
| Péptido 15 procedente del clon 17.2 | 13,5 \pm 12,0 |
| Péptido (I) | 8,8 \pm 10,8 |
De los resultados anteriores, se ha observado que
comparados con el grupo sin administrar, se suprimió la producción
de anticuerpo de forma significativa en ratones a los que se
administró el péptido sintético 15 procedente del clon 17.2 y el
péptido (I) de esta invención respectivamente. De forma imprevista,
cada grupo constaba de 8 ratones.
El día 5 y el día 3 antes de la administración
del antígeno, cada uno de los péptidos (I) a (VI) de la presente
invención compuestos por 9 restos de aminoácidos indicados por la
Secuencia ID nº 1 en el listado de secuencias, se disolvieron en 200
\mul de solución salina fisiológica. La solución salina
resultante se administró por vía subcutánea a ratones Balb/c de 9
semanas. Como referencia, se empleó un grupo sin administrar, al que
se administó la misma cantidad de solución salina fisiológica. Se
disolvieron 25 \mug de KLH como antígeno y la solución resultante
se administró por vía subcutánea. Se extrajo sangre el día 21
después de la administración del antígeno y se valoró el anticuerpo
por el método descrito a continuación.
Se diluyó KLH a 10 g/ml con solución salina
tamponada con fosfato (PBS). Se vertieron porciones de 50 \mul de
la solución resultante en una microplaca de 96 pocillos y se dejó
reposar la placa a 40ºC toda la noche. Se lavó después la
microplaca tres veces con PBS conteniendo Tween-20
al 0,05% (T-PBS), se vertieron en los pocillos
porciones de 200 \mul de solución salina fisiológica tamponada con
tris con caseína al 0,5% (caseína TBS) respectivamente. Se dejó
reposar la microplaca a temperatura ambiente durante una hora. Se
lavó a continuación la microplaca tres veces con
T-PBS y se vertieron en cada pocillo porciones de 50
\mul de suero de ratón diluidas a 1/200 con caseína TBS, seguido
de reacción durante una hora (reacción primaria).
Se lavó la microplaca resultante tres veces con
T-PBS, en la que se vertieron en cada pocillo
porciones de 50 \mul de anticuerpo marcado con peroxidasa IgG
anti-ratón (TAGO Co.) diluidas a 1/4000 con caseína
TBS. La reacción se efectuó a temperatura ambiente durante una hora
(reacción secundaria). Después de la ejecución de la reacción
secundaria, se lavó otra vez la microplaca tres veces. Se vertieron
en los pocillos porciones de cincuenta \mul de líquido de
sustrato/cromógeno (sustrato de cromógeno: Behringwerke AG),
respectivamente, seguido de reacción a temperatura ambiente durante
30 minutos. Después de la ejecución de la reacción, se añadió ácido
sulfúrico diluido 0,5 N para terminar la reacción y se midió la
absorbancia a 450 nm mediante un colorímetro
("BEP-II", producto de Behringwerke
AG/Alemania) con una absorbancia de 650 nm como referencia. Los
resultados se muestran en la Tabla 2.
| Tratado con | Valor del anticuerpo anti-KLH Ig-G (unidad \pm SD) |
| Péptido (I) | 78,7 \pm 28,3 |
| Péptido (II) | 48,4 \pm 13,1 |
| Péptido (III) | 50,1 \pm 25,8 |
| Péptido (IV) | 48,5 \pm 24,9 |
| Péptido (V) | 37,7 \pm 17,7 |
| Péptido (V) | 29,5 \pm 19,5 |
| Solución salina fisiológica | 133,8 \pm 48,2 |
A partir de los resultados anteriores, se ha
observado que comparados con el grupo sin administrar, al que se
había administrado solución salina fisiológica, la producción de
anticuerpo fue suprimida de forma significativa en los grupos de
ratones a los que se había administrado los péptidos (I) a (VI),
respectivamente. De forma imprevista, cada grupo de ratones
constaba de 8 ratones.
Se ha entendido a partir de los resultados de los
Ejemplos 2 y 3, que los péptidos de la presente invención
presentaban acción inmunosupresora no específica del antígeno.
Como antígeno, se empleó homogeneizado de la
médula espinal de cerdo de Guinea. Se diluyó este homogeneizado de
la médula espinal de cerdo de Guinea con PBS hasta ser 6,6 mg/ml,
seguido de adición de la cantidad equivalente de adyuvante completo
de Freund. Se formó la mezcla resultante en una emulsión con un
aparato ultrasónico. La mezcla resultante se administró a dos áreas
bajo la piel lateral en una cantidad de 300 \mul. El día 5 y el
día 3 antes de la administración del antígeno y 5 días a la semana
durante 4 semanas después de la administración del antígeno, se
disolvió la solución del péptido (I) en 100 \mul de solución
salina fisiológica administrada por vía subcutánea a ratones SJL de
14 semanas. De forma imprevista, para aumentar la relación inicial,
se administró por vía intravenosa 400 \mug/100\mul de toxina de
tos ferina (PTX) como refuerzo el día de la administración del
antígeno y dos días después de la administración del antígeno. Se
realizó la observación al principio a partir del día 14 hasta el día
28 después de la administración primaria del antígeno. El comienzo
se puntuó basándose en los siguientes criterios estándar
[Pettinelli, C.B., Fritz D.E. y MacFarlin, D.E. J. Immunol., 129,
nº 3, 1024-1028 (1982)]. En la Tabla 3 se muestran
los valores de la puntación media + desviación estándar (SD) en cada
grupo de administración el día 22, el día 25 y el día 28 después de
la administración primaria del antígeno.
De forma imprevista, cada grupo constaba de 8
ratones y se utilizó el método de dos colas de Steel para el
análisis estadístico.
Puntuación 0: Ninguna anormalidad
Puntuación 1: Ligera parálisis de la pata trasera
con debilidad de la cola
Puntuación 2: Parálisis moderada de la pata
trasera con debilidad de la cola
Puntuación 3: Parálisis total de la pata
trasera
Puntuación 4: Ligera parálisis de la pata
delantera con parálisis total de la pata trasera
Puntuación 5: Parálisis total de todas las
patas
Puntuación 6: Muerte por parálisis
Los resultados se muestran en la Tabla 3.
| Día 22 | Día 25 | Día 28 | |
| 25 \mug/organismo | 0,3 \pm 0,4 | 0,1 \pm 0,3 | 0,0 \pm 0,0 |
| 5 \mug/organismo | 0,4 \pm 0,7 | 1,0 \pm 1,1 | 0,7 \pm 0,8 |
| 1 \mug/organismo | 1,6 \pm 1,8 | 0,9 \pm 1,1 | 1,8 \pm 1,9 |
| Solución salina fisiológica | 3,6 \pm 2,5 | 4, \pm 2,6 | 4,2 \pm 2,6 |
Se ha reconocido que se suprimió el inicio de EAE
por administración del péptido (I) sintético de la presente
invención. Particularmente, en el grupo administrado con 5
\mug/organismo, se suprimió el inicio el día 25 y el día 28 con
una diferencia significativa del 5% comparada con el grupo
administrado con solución salina fisiológica. En el grupo
administrado con 25 \mug/organismo, se suprimió el inicio el día
22 con una diferencia significativa del 5% comparada con el grupo
administrado con solución salina fisiológica. Además, a partir del
día 25, se suprimió el inicio con una diferencia significativa del
1%.
En el Ejemplo 4 se ha observado que el péptido de
la presente invención es eficaz para el tratamiento de la
esclerosis múltiple.
Se añadio \lambda-carragenina
("PICNIN-A", Zushi Chemical Co.) a una solución
salina fisiológica a la concentración final de 1% p/v y se calentó
en un baño de agua hirviendo hasta disolver completamente la
\lambda-carragenina. La solución resultante se
dejó reposar a continuación a temperatura ambiente. Antes del
experimento, se disolvió la solución completamente mediante
calentamiento en un baño de agua y se dejó reposar en un baño de
agua a aproximadamente 60ºC hasta la administración. Inmediatamente
después se administraron 50 \mul del péptido (I) de la presente
invención o solución salina fisiológica (grupo sin administrar) por
vía subcutánea a la pata izquierda de las ratas
Sprague-Dawley (machos, de 6 semanas), se
administraron 50 \mul de solución de carragenina al 1% en la
misma zona. Se midió el volumen de la pata utilizando un
pletismómetro (producto de BM Instrument Co.) cada hora durante 5
horas después de la administración de carregenina. De forma
imprevista, cada grupo constaba de 10 ratas y se utilizó el método
de dos colas de Dunnet para análisis estadístico. Los resultados se
presentan en la Tabla 4.
| 1 hora | 2 horas | 5 horas | |
| 0,2 \mug/zona | 2,3 | 3,9 | 4,8 |
| 10 \mug/zona | 30,2 | 37,3 | 27,5 |
Se ha reconocido que el comienzo del edema una
hora después de la administración de carragenina tendía a suprimirse
por la administración del péptido (I) de la presente invención. En
el grupo administrado con 10 \mug/zona, el comienzo del edema se
suprimió en dos horas y después de la administración de carragenina
con una diferencia significativa del 5% y se observó una tendencia
a suprimir el comienzo del edema cinco horas después de la
administración de carragenina. A partir de lo anterior, se ha
observado que el péptido de la presente invención presenta acción
antiinflamatoria. Además, los presentes inventores realizaron el
experimento siguiente para descubrir péptidos eficaces de bajo peso
molecular.
Los péptidos (VII), (VIII), (IX), (X), (XI),
(XII), (XIII), (XIV) y (XV) se sintetizaron y purificaron de manera
similar a la del Ejemplo 1 utilizando un sintetizador de péptidos
("modelo 430A", ABI Co.).
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VII) |
| Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (VIII) |
| Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly | (IX) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly | (X) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly | (XI) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala | (XII) |
| Ala-Lys-Ala-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (XIII) |
| Ala-Lys-Leu-Thr-Ala-Gly-Lys-Gly | (XIV) |
| Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly | (XV) |
Se llevó a cabo la detección de la pureza de los
péptidos sintetizados de este modo.
Se detectó la pureza de cada péptido sintetizado
de este modo de forma similar a la del Ejemplo 1.
La Fig. 7 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VII).
El péptido (VII) sintetizado de este modo
presentó una pureza del 97,9%.
La Fig. 8 es un gráfico del cromatograma del
péptido (VIII). El péptido (VIII) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 98,1%.
La Fig. 9 es un gráfico del cromatograma del
péptido (IX).
El péptido (IX) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 97,5%.
La Fig. 10 es un gráfico del cromatograma del
péptido (X).
El péptido (X) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 98,2%.
La Fig. 11 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XI).
El péptido (XI) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 97,6%.
La Fig. 12 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XII). El péptido (XII) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 97,5%.
La Fig. 13 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XIII). El péptido (XIII) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 98,2%.
La Fig. 14 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XIV). El péptido (XIV) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 98,6%.
La Fig. 15 es un gráfico del cromatograma del
péptido (XV).
El péptido (XV) sintetizado de este modo presentó
una pureza del 100%.
De manera similar a la del Ejemplo 3, se
estudiaron los efectos supresores de los péptidos (I), (VII) a (XV)
sobre la producción de anticuerpos anti-KLH en
ratones. Los resultados se presentan en la Tabla 5.
| Tratado con | Valor del anticuerpo anti-KLH (unidad \pm SD) |
| Péptido (I) | 39,5 \pm 16,1 |
| Péptido (VII) | 25,9 \pm 15,4 |
| Péptido (VIII) | 44,9 \pm 18,1 |
| Péptido (IX) | 33,9 \pm 13,7 |
| Péptido (X) | 26,5 \pm 22,0 |
| Péptido (XI) | 19,9 \pm 15,9 |
| Péptido (XII) | 49,5 \pm 40,1 |
| Péptido (XIII) | 68,9 \pm 25,1 |
| Péptido (XIV) | 59,9 \pm 32,8 |
| Péptido (XV) | 86,4 \pm 27,8 |
| Solución salina fisiológica (grupo sin administrar) | 115,7 \pm 61,3 |
Comparado con el grupo sin administrar y el grupo
administrado con péptido (I), la producción de anticuerpo se
suprimió significativamente en los ratones a los que se administró
el péptido (VII), (IX), (X) o (XI). La producción de anticuerpo no
se suprimió, por otra parte, en los ratones a los que se administró
péptido (VIII), (XII), (XIII), (XIV) o (XV), comparado con el grupo
administrado con el péptido (I). De forma imprevista, cada grupo
constó de 8 ratones.
A partir de los resultados anteriores se ha
observado que el péptido mínimo que permite la supresión de la
producción del anticuerpo está compuesto por 8 restos de
aminoácidos tal como se indica mediante la Secuencia ID nº 2 del
listado de secuencias.
De forma similar a la del Ejemplo 2, se midieron
los efectos supresores de los péptidos (I), (VII) a (XIV) sobre la
producción de anticuerpos anti-OVA en ratones. Los
resultados se presentan en la Tabla 6.
| Tratado con | Valor del anticuerpo anti-OVA |
| Péptido (I) | 23,8 \pm 12,4 |
| Péptido (VII) | 20,9 \pm 21,4 |
| Péptido (VIII) | 65,3 \pm 34,7 |
| Péptido (IX) | 10,4 \pm 6,3 |
| Péptido (X) | 49,8 \pm 28,4 |
| Péptido (XI) | 15,3 \pm 14,3 |
| Péptido (XII) | 50,9 \pm 26,7 |
| Tratado con | Valor del anticuerpo anti-OVA |
| Péptido (XIII) | 193,5 \pm 155,9 |
| Péptido (XIV) | 90,9 \pm 89,5 |
| Solución salina fisiológica (grupo sin administrar) | 151,0 \pm 25,3 |
Se suprimió significativamente la producción de
anticuerpos de los ratones a los que se había suministrado el
péptido (VII), (IX) o (XI) comparada con el grupo sin administrar y
con el grupo al que se había administrado el péptido (I). La
producción de anticuerpos de los ratones a los que se había
administrado el péptido (XIII) o (XIV), no se suprimió, por otra
parte, comparada con el grupo al que se había administrado el
péptido (I). De forma imprevista, cada grupo constó de 8
ratones.
A partir de los Ejemplos 7 y 8, se ha descubierto
que un péptido que presenta efectos supresores sobre la producción
de anticuerpos no específicos del antígeno se necesita que tenga
Ala, Leu y Phe en la primera, tercera y quinta posiciones de su
secuencia de aminoácidos, respectivamente, para la supresión de la
producción de anticuerpos.
Claims (14)
1. Un péptido que presenta la siguiente secuencia
de aminoácidos:
Ala-Xaa1-Leu-Xaa2-Phe-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa6)_{n}
(en la que Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo que es un grupo alquilo
C_{1}-C_{15} primario, secundario y terciario
saturado, que puede ser lineal o ramificada o por lo menos uno de
los átomos de carbono ha sido reemplazado con un átomo de azufre o
de oxígeno y que puede estar sustituido con un grupo hidroxi, amino
o
guanidilo;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral de alquilo o heteroalquilo, tal como se definió
anteriormente que puede estar sustituida con un grupo hidroxilo;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente un resto de aminoácido que puede tener una cadena
lateral hidrófoba;
y
n representa 1 ó 0, con la condición de que el
caso en que Xaa2 represente Gly está
excluído).
2. Un péptido o sus derivados según la
reivindicación 1, en el que representa 1 ó 0;
Xaa1 y Xaa4 representan cada uno
independientemente uno cualquiera entre Lys, Arg, His y Ala;
Xaa2 y Xaa6 representan cada uno
independientemente Thr o Ala;
Xaa3 y Xaa5 representan cada uno
independientemente Gly o Ala.
3. Un péptido o sus derivados según la
reivindicación 1 ó 2, que tiene una secuencia de aminoácidos
seleccionada del grupo constituido por las siguientes secuencias de
aminoácidos:
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly-Thr,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Ala-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Ala-Phe-Gly-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Ala-Lys-Gly,
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Ala-Gly,
y
Ala-Lys-Leu-Thr-Phe-Gly-Lys-Ala.
4. Un péptido o sus derivados según cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 3, en el que la secuencia de aminoácidos
está parcial o totalmente en forma D.
5. Un péptido o sus derivados según cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 4, en el que el grupo amino en el extremo
N-terminal se ha reemplazado con un grupo
protector.
6. Un péptido o sus derivados según la
reivindicación 5, en el que el grupo protector del grupo amino en el
extremo N-terminal es un grupo acetilo o
t-butoxicarbonilo.
7. Un péptido o sus derivados según cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 6, en el que el grupo carboxilo en el
extremo C-terminal es un
carboxi-derivado.
8. Un péptido o sus derivados según la
reivindicación 7, en el que el carboxi-derivado en
el extremo C-terminal es un grupo amida.
9. Un péptido o sus derivados según cualquiera de
las reivindicaciones 1 a 8, que es un péptido seleccionado del
grupo constituido por los péptidos representados por las fórmulas
(I) a (XII) siguientes:
\newpage
(en las que D representa una forma D, Ac
representa un grupo acetilo y tBoc representa un grupo
t-butoxicarbonilo) o uno de sus
derivados.
10. Una composición farmacéutica que comprende
uno o más de un péptido o sus derivados, tal como se reivindica en
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.
11. Una composición farmacéutica para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias, que comprende uno o
más de un péptido o sus derivados, tal como se reivindica en
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10.
12. Una composición farmacéutica para el
tratamiento de enfermedades autoinmunitarias según la reivindicación
11, que se utiliza para el tratamiento de una o más de una
enfermedad autoinmunitaria seleccionada del grupo constituido por
esclerosis múltiple, artritis reumatoidea crónica, lupus eritematoso
generalizado, síndrome de SjÜgren, enfermedad de Basedow,
enfermedad de Hashimoto y anemia hemolítica autoinmunitaria.
13. Una composición farmacéutica según la
reivindicación 10 u 11, que sirve para la prevención y el
tratamiento del episodio de rechazo que acompaña al trasplante de
órganos.
14. Una composición farmacéutica según la
reivindicación 10, que sirve para el tratamiento de la
inflamación.
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Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| US6935730B2 (en) | 2000-04-03 | 2005-08-30 | Unicorn Image Products Co. Ltd. Of Zhuhai | One-way valve, valve unit assembly, and ink cartridge using the same |
| US7232898B2 (en) | 2002-05-21 | 2007-06-19 | Resistentia Pharmaceuticals Ab | Chimeric IgE polypeptides and host cells |
| CN1169829C (zh) * | 2002-06-27 | 2004-10-06 | 北京大学人民医院 | 非t细胞结合肽及其用途 |
| CA2571710A1 (en) | 2004-06-24 | 2006-11-02 | Nicholas Valiante | Small molecule immunopotentiators and assays for their detection |
| JP7000161B2 (ja) | 2015-05-26 | 2022-01-19 | ジェムバックス アンド カエル カンパニー，リミティド | 新規ペプチド及びこれを含む組成物 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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