EP1311273A2 - Association d'une purine et d'un ains pour le traitement des dysfonctions sexuelles - Google Patents

Association d'une purine et d'un ains pour le traitement des dysfonctions sexuelles

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EP1311273A2
EP1311273A2 EP01963080A EP01963080A EP1311273A2 EP 1311273 A2 EP1311273 A2 EP 1311273A2 EP 01963080 A EP01963080 A EP 01963080A EP 01963080 A EP01963080 A EP 01963080A EP 1311273 A2 EP1311273 A2 EP 1311273A2
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EP
European Patent Office
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purine
nsaid
product
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activity
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Withdrawn
Application number
EP01963080A
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German (de)
English (en)
Inventor
Philippe Gorny
Bertrand Mailliard
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Adenomed BV
Original Assignee
Adenomed BV
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Publication date
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Withdrawn legal-status Critical Current

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    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications

Definitions

  • the subject of the invention is the use, in combination, of a purine activity and of a non-steroidal anti-inflammatory agent (NSAID) activity in the preparation of a medicament intended to be used as an antithrombotic agent and / or anti-inflammatory.
  • NSAID non-steroidal anti-inflammatory agent
  • a clot (or thrombus) forms unnecessarily in a blood vessel.
  • a clot made up of platelet aggregates which are often deposited at the level of arterial atherosclerotic plaques, can then cause a cardiac, cerebral, or other infarction, or even acute ischemia of an artery in the arm or leg.
  • Low blood flow increases the risk of developing a thrombus, especially in the venous network of the lower limbs, and a clot detached from this thrombus can be drawn to a pulmonary artery that it obstructs, thus causing pulmonary embolism .
  • anticoagulants can be used, but also inhibitors of platelet aggregation.
  • Cyclooxygenase inhibitors can notably inhibit the synthesis of thromboxane A 2 , which has both aggregating and vasoconstrictive properties. Cyclooxygenase inhibitors are therefore likely to constitute useful antithrombotic drugs. Low dose aspirin is currently used in this indication.
  • nucleotides are involved in many physiological processes, including vascular tone, heart contractions and platelet aggregation.
  • ADP plays a key role in the induction of platelet aggregation via certain platelet P2 receptors, in particular in particular the P2X1, P2Y1 and P2T receptors.
  • AMP acts in particular through PI receptors (in particular PlA2a receptors).
  • NSAID non-steroidal anti-inflammatory activity
  • purine activity it is possible to mention here, either an agonist activity on the receptors involved in the inhibition of platelet aggregation and having AMP and / or adenosine as natural ligands (for example receptors of the PI type), or an antagonist activity on the receptors involved in platelet aggregation (pro-aggregating receptors) and having the natural ADP ligand (for example the P2 receptors).
  • an agonist activity on the receptors involved in the inhibition of platelet aggregation and having AMP and / or adenosine as natural ligands for example receptors of the PI type
  • an antagonist activity on the receptors involved in platelet aggregation pro-aggregating receptors
  • having the natural ADP ligand for example the P2 receptors
  • AMP used alone, has anti-aggregating activity, and AMP can also be used as an active ingredient in the preparation of an anti-aggregating drug.
  • inflammation is the response of a vascularized living tissue to a local lesion (trauma, infection, irritation by chemicals, etc.). Inflammation of the tissues is manifested in particular by symptoms such as redness, swelling, pain. The lesion initially generates vasodilation accompanied by an increase in vascular permeability, promoting the migration of leukocytes to the injured site.
  • Various chemical mediators participate in the inflammatory reaction, among which there may be mentioned in particular the metabolites of arachidonic acid (AA).
  • AA cyclooxygenases
  • lipooxygenases or Lipox
  • the cyclooxygenase pathway leads to the production of prostaglandins and thromboxanes, which have many biological activities, which may depend on the cells that produce them. Among these biological activities, one can cite vasodilation, increase in vascular permeability, increase in painful sensations, induction of fever, etc.
  • the lipooxygenase pathway leads to leukotrienes, which contribute to inflammation in various pathologies such as: rheumatoid arthritis, asthma, psoriasis, gout, etc.
  • steroidal anti-inflammatory drugs inhibit phospholipase
  • non-steroidal anti-inflammatory drugs NSAIDs
  • cyclooxygenase cyclooxygenase
  • Cox-1 which is expressed permanently, especially in the stomach
  • Cox-2 an inducible form which is only expressed during inflammatory reactions.
  • Cox-1 produces prostaglandins in the stomach which have the function of protecting the gastric mucosa against ambient acidity.
  • Most NSAIDs inhibit both Cox-1 and Cox-2, resulting in unwanted side effects such as damage to the gastric lining, with the risk of bleeding or ulcer formation.
  • NSAIDs are now known (for example rofecoxib and celecoxib) which do not have this drawback, since they are specific inhibitors of Cox-2.
  • adenosine and AMP are anti-inflammatory agents.
  • adenosine endogenous or exogenous protects cells against certain oxidizing free radicals, and inhibits neutrophilic leukocytes.
  • AMP inhibits the migration of leukocytes during inflammation.
  • adenosine is involved in the mechanism of action of methotrexate and sulfasalazine, used in the treatment of rheumatoid arthritis.
  • Adenosine also inhibits, in humans, the release of various pro-inflammatory cytokines such as IL-6, IL-8, IL-12, TNF.
  • a subject of the invention is therefore the use, in combination, of a purine activity and an NSAID activity, as active ingredients in the preparation of a medicament intended to combat thromboses and / or inflammation. .
  • purine in particular means purine-based nucleosides and nucleotides and in particular adenosine as well as the corresponding phosphates, in particular AMP, ADP and ATP, guanosine, GMP, GDP, GTP, inosine as well as its mono-, di- and triphosphates, and their derivatives or analogs, in particular their pharmaceutically acceptable salts (for example hydrochlorides of nucleosides or nucleotides with amino function, or alkaline salts of nucleotides ).
  • purine is also understood to mean any substance capable of acting on purine receptors, also called purinergic receptors (in particular PI receptors sensitive to AMP and adenosine, and P2 receptors, sensitive to ADP and ATP). Such substances are known or can be sought according to known methods.
  • a purine activity is an activity obtained by the presence of a purine as it has just been defined.
  • purine analogues mention may be made in particular, in particular in the case of the preparation of an anti-aggregating medicament, agonists of the PI type receptors and antagonists of the P2 type receptors. Such agonist or antagonist products are known; see for example the site www.sigma-aldrich.com, section RBI.
  • agonists or antagonists can be carried out according to known methods by simple routine experiments.
  • 1ADP or its agonists
  • derivatives are any products which are obtained by the modification of a chemical function or of an atom or group of atoms of an active product, and which have a physiological activity of same type than the active product.
  • the derivatives of active products having acid functions can be in particular the salts (for example sodium salts or salts of other alkali metals, or alternatively salts formed with amines, for example piperazine salts or salts of lysine), or the esters formed by said acids with alcohols, or the amides formed by these acids with amines;
  • the derivatives of active products having amino functions are in particular the amides and the addition salts formed by these amines with acids;
  • the derivatives of active products having alcohol functions are in particular the esters formed by said alcohols with acids.
  • Nonsteroidal anti-inflammatory drugs constitute a known class of anti-inflammatory drugs, which have several properties in common, and in the first place an activity of inhibition of cyclooxygenase which gives them the capacity to inhibit the synthesis of prostaglandins.
  • NSAIDs have other properties in common, in particular the decoupling of oxidative phosphorylation, changes in the intracellular movements of calcium ions, activation of the synthesis of inducible NO synthase, action on nuclear factors kappa, etc. . It is possible that one or more of these properties is responsible for the potentiating effect of NSAIDs on purines, but it is also possible that other properties, known or unknown, are involved.
  • non-steroidal anti-inflammatory drugs there may be mentioned for example (see in particular THE MERCK INDEX, 12 th edition, Therapeutic Category and Biological Activity Index):
  • aminoarylcarboxylic acids such as: enfenamic acid, etofenamic acid, flufenamic acid, isonixin, meclofenamic acid, mefenamic acid, niflumic acid, talniflumate, terofenamate, tolfenamic acid; - derivatives of arylacetic acids such as: aceclofenac, acemetacin, alclofenac, amfenac, amtolmetine guacile, bromfenac, bufexamac, cinmetacin, clopirac, diclofenac, etodolac, felbinac, fenclozic acid, fentiazac, glucamacin, glucamacin lonazolac, metiazinic acid, mofezolac, oxametacin, pirazolac, proglumetacin, sulindac, tiaramide, to
  • arylbutyric acids such as: bumadizon, butibufen, fenbufen, xenbucin; - derivatives of arylcarboxylic acids such as: clidanac, ketorolac, tinodirine;
  • arylpropionic acid derivatives such as: alminoprofen, benoxaprofen, bermoprofen, bucloxic acid, carprofen, fenoprofen, flunoxaprofen, flurbiprofen, ibuproxen, indoprofen, ketoprofen, loxoprofen, naproxen methiazinic acid, suprofen, tiaprofenic acid, ximoprofen, zaltoprofen, maproxen; salicylic acid derivatives such as: acetaminosalol, aspirin, benorylate, bromosaligenin, calcium acetylsalicylate, diflunisal, etersalate, fendosal, gentisic acid, glycol salicylate, imidazole salicylate, lysine salicylate acetate, salicylic acid salicylate, mesylate salicylate, mesalicylate
  • the international nonproprietary name designates both the basic active ingredients and their immediate derivatives which can be used in pharmacy (for example acids, and also their salts).
  • NSAIDs including NSAIDs with a carboxylic group
  • NSAIDs with a carboxylic group are known products, described in particular in THE MERCK INDEX 12 th edition, the content of which (including data and references relating to NSAIDs) is incorporated into the present description by reference.
  • a product which selectively or preferentially inhibits Cox-2 for example rofecoxib, celecoxib, nabumetone.
  • active ingredients of a medicament obtained in accordance with the invention may be presented separately, each in an appropriate pharmaceutical form, and combined in the same package.
  • the medicament in a single pharmaceutical form containing the two active ingredients, as well as optionally an appropriate pharmaceutical excipient.
  • a product having both a purine activity and an NSAID activity must be considered as constituting by itself a combination having the two types of activities, and can therefore be used in accordance with the invention as active ingredient unique.
  • a purine and an NSAID can be combined by establishing a chemical bond between the two molecules.
  • the medicament obtained in accordance with the invention can be administered by the oral, sublingual, nasal, pulmonary, rectal or parenteral route (for example intravascular, intramuscular, transcutaneous, intra-articular).
  • a carboxylic function such as for example acetylsalicylic acid, mefenamic acid, diclofenac, naproxen, ibuprofen, sulindac, etc.
  • An amidification product is thus obtained which has both purine activity and NSAID activity. Examples of such products are the products of formula I which will be described below.
  • the medicament obtained in accordance with the invention can be administered by the oral, sublingual, nasal, pulmonary, rectal or parenteral route (for example intravascular, intramuscular, transcutaneous, intra-articular).
  • oral administration in particular in the form of capsules, oral solutions or emulsions, powders, gels, granules, tablets or tablets
  • nasal route for example solutions to be administered in the form of drops or sprays
  • pulmonary route solutions in pressurized bottle for aerosols
  • rectal route suppositories
  • cutaneous route for example creams, ointments or transdermal devices, also called patches or patches
  • injection injectable solutions, lyophilized powders making it possible to reconstitute injectable solutions
  • transmucosal route as for example by sublingual route (solutions in pressurized bottle, or tablets with disintegration of the mouth).
  • the medicament of the invention can be prepared for example in a pharmaceutical form allowing the administration, to a subject in need of such a medicament, for example a human subject, of 10 to 1000 mg of purine, per day, and allowing in addition the administration of a sufficient dose of NSAIDs, for example a dose of 10 to 3000 mg of NSAIDs per day.
  • a dose of 50 to 500 mg of AMP and 10 to 1000 mg per day of aspirin can be administered to adult humans.
  • AMP can be replaced in particular by equivalent amounts of adenosine.
  • one wishes to substitute another purine for AMP and / or another NSAID for aspirin one can easily adapt the ranges of doses mentioned above by replacing a given dose of AMP by an equivalent dose of another purine and / or by replacing a given dose of aspirin with an equivalent dose of another NSAID.
  • Such an equivalent dose can be determined for example using any conventional anti-inflammatory test.
  • a dose of purine equivalent to a given dose of AMP is for example a dose capable of having a comparable anti-aggregating effect in the tests described in the experimental part below.
  • the dosage can be adapted depending in particular on the body weight of the subject treated.
  • the medicament obtained according to the invention can be administered as an antithrombotic and anti-aggregating agent in particular in the treatment of angina pectoris, circulatory insufficiencies of the lower limbs, with the aim of preventing infarctions in patients suffering from atherosclerosis. , and also in order to avoid the recurrence of infarctions, in particular cardiac or cerebral.
  • the medicament obtained according to the invention can also be administered as an anti-inflammatory agent in all pathologies where it is necessary to inhibit or limit the inflammatory reaction, in particular in the treatment of osteoarthritis, rheumatoid arthritis , tendonitis, gout attacks, inflammatory bowel disease, dysmenorrhea, post-traumatic edema, ankylosing spondylitis, and in all cases where you want to fight pain and fever.
  • the combination of a purine and an NSAID (for example the association aspirin-adenosine or sulindac-adenosine), administered immediately after an angioplasty, can inhibit or reduce restenosis.
  • an NSAID for example the association aspirin-adenosine or sulindac-adenosine
  • NSAIDs by a single product in which a purine, or a purine analog, is covalently linked to an NSAID, for example a product of formula I as described below.
  • the invention also relates to new products comprising an NSAID and a purine, covalently linked to said NSAID, optionally by means of at least one spacer arm.
  • the products of formula I can be used in the form of salts, in particular in the form of alkali metal salts such as sodium or potassium salts; these salts are for example those of phosphate groups, if they are present, phenolic groups (case of salicylic acid), etc.
  • the products of formula I can also be used, where appropriate, in the form of addition salts (for example in the form of the hydrochloride) when these products contain an amino group.
  • the bonds between the spacer arm and the remains A and B are covalent bonds.
  • A can represent in particular the acyl residue of an NSAID having a carboxylic group (the NSAID therefore has the formula A-OH) and B can represent the residue of a purine-based nucleoside or nucleotide linked to X , or connected to A (in the absence of a spacer arm), via the nitrogen of a primary amine of the purine base and / or via the oxygen of a hydroxyl group of said purine-based nucleoside or nucleotide; for example one or more groups A or AX- can be linked to B via the oxygen of the primary alcohol of said nucleoside and / or via the oxygen of at least one secondary alcohol of said nucleotide .
  • the purine from which B derives obviously has the formula BH.
  • said nucleoside or nucleotide is in particular a ribonucleoside or ribonucleotide.
  • the purine can be chosen from adenosine, guanosine and inosine, as well as the corresponding 5 '-monophosphates, -diphosphates and -triphosphates.
  • the spacer arms may in particular be bivalent residues of bi-functional aliphatic compounds (that is to say compounds having reactive functional groups at each of their ends, each making it possible to form covalent bonds with A and with B).
  • These compounds may for example be compounds which have both an amino group and a carboxylic (or thiocarboxylic) group, or alternatively compounds which have both an amino group and a hydroxyl group.
  • group X (disregarding its end functional groups) represents in particular a divalent aliphatic group possibly interrupted by one or more heteroatoms - O - or - S - or by one or more heteroatomic groups - NH - or - CO - NH -.
  • the spacing agents that is to say the compounds capable of giving, after reaction with purine and the NSAID, products of formula I in which A and B are linked by spacer arms, are for example alpha acids -, beta- or gamma-amino alkanecarboxylic acids, in particular natural alpha-amino acids such as glycine, alanine, valine or leucine, or even peptides, in particular dipeptides or tripeptides.
  • the spacing agents can also be hydroxycarboxylic acids such as lactic, glycolic acids, aldonic acids (gluconic, mannonic, galactonic, ribonic, arabinonic, xylonic and erythronic) and the corresponding lactones or dilactones (for example lactide, glycolide, delta-glucolonactone, delta-valeronactone), or aldaric acids.
  • the functional groups optionally present on the spacer arm and not involved in the binding with an element A or B can be used to graft other residues A and / or B so as to obtain compounds of formula I for which m and / or n are greater than 1.
  • a carboxylic compound (NSAID or spacer agent) can be reacted in the form of a carboxylic acid (or thiocarboxylic) halide, or in the form of a mixed anhydride, or in the form of an activated ester, for example a p-nitrophenyl ester.
  • the acid can also be activated using a coupling agent such as dicy clohexylcarbodiimide.
  • the compounds of formula I comprise residues of nucleosides or nucleotides, they can be prepared using in particular the methods known in the chemistry of nucleic acids, described for example in the work by Kochetkoc and Budovskii, Organic Chemistry of Nucleic Acids, Plénum Press, 1971 (2 volumes), the content of which is incorporated into the present description by reference.
  • the -NH groups can be protected by carbobenzoxy, phthaloyl, t-butoxycarbonyl, trifluoroacetyl, toluenesulfonyl groups;
  • the carboxylic groups can be protected in the form of benzyl esters, tetrahydropyranyl esters or t-butyl esters;
  • the alcohols can be protected in the form of esters (for example acetates), in the form of tetrahydropyranyl ethers, of benzyl ethers or of trityl ethers, or also in the form of acetals (including in the form of form of acetonides in the case of vicinal glycols).
  • the protection and possible deprotection reactions of various chemical groups are known and described, for example, in the book Advances in Organic Chemistry, Methods and Results, Vol. 3, Interscience Publishers (1963), pages 159 et seq. And pages 191 et seq., As well as in TW Green, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience Publication (1991). The content of these works is incorporated into this description by reference.
  • the phosphating or dephosphating reactions of the primary alcohol of the nucleotides or nucleosides can be carried out using natural enzymes (for example phosphatases, phosphokinases).
  • A- B (la) in which A and B are defined as above.
  • A represents in particular the acyl residue of an NSAID having a carboxylic group, the bond with B taking place for example by the formation of an amide or of an ester with an amino or alcohol function, respectively, of the purine of which the formula is BH.
  • the products of formula I or la there may be mentioned in particular the amides and esters formed with the acyl residues A of salicylic acid, acetylsalicylic acid, diclofenac, ibuprofen, naproxen or sulindac, and with the B residues derived from. adenosine or AMP.
  • the products of formula I or la generally have an improved gastric tolerance, compared to the NSAID from which they are derived.
  • the products of formula I or la are administered in the same pharmaceutical forms as those described above, and in equivalent doses, taking into account the respective proportions of the molecules derived from purine and NSAIDs in the product of formula I or considered .
  • the doses administered can be determined by routine experiments, using known tests for anti-inflammatory activity or anti-aggregating activity.
  • Example 1 Preparation of the product of formula A - NH - Y, in which A is the acyl residue of acetylsalicylic acid and Y is the remainder of the AMP amputated from its primary amine, the NH group of the formula representing the remainder of said primary amine of AMP. It is therefore a product of amidation of AMP by acetylsalicylic acid.
  • the starting materials are acetylsalicylic acid (origin: SIGMA) and AMP (or (5'-O-phosphate) adenosine), sodium salt (origin: SIGMA).
  • AMP 0.5 g of AMP is dissolved in 14 ml of water at room temperature. 0.17 g of potassium carbonate (K 2 CO 3 ) is added, and 0.25 g of 2-acetyl benzoyl chloride and then 3 ml of dioxane are added in order to dissolve the latter. The mixture is stirred for 12 hours at room temperature, then the solvents are evaporated.
  • K 2 CO 3 potassium carbonate
  • the chlorides are removed by dialysis, or the product obtained is purified by chromatography on silica gel, eluting with an ethyl acetate / water / isopropanol mixture 1: 1: 1.
  • the phosphate group is salified with sodium and potassium ions.
  • the proton and phosphorus 31 P NMR spectra are in agreement with the structure indicated.
  • Example 2 Preparation of the product of formula A - NH - Y, in which A is a salicylyl residue, Y represents the remainder of the AMP (amputated from its primary amine), and the NH group of the formula is the remainder of said primary amine of AMP. It is therefore the amidation product of AMP with salicylic acid.
  • the starting product is the product of Example 1, which is subjected to deacetylation in basic medium. We dissolve this product in water and add 3 equivalents potassium carbonate K 2 CO 3 at room temperature. After a reaction time of 12 hours at room temperature, the product indicated in the title of this example is obtained.
  • the deacetylated product is purified by chromatography on silica gel, as in Example 1.
  • the phosphate and phenate functions of this product are salified by sodium and potassium ions.
  • Example 3 Preparation of a product of formula A - NH - Y, in which A represents a salicylyl group, Y represents a residue of adenosine amputated from its primary amine, and the NH group of the formula represents the remainder of said amine adenosine primary.
  • adenosine and AMP can inhibit and reverse ADP-induced platelet aggregation.
  • NSAIDs alone and associated with AMP Effects of NSAIDs alone and associated with AMP on the aggregation of rat platelets If sodium salicylate (7.5 mM) is added to the plasma, then ADP (20 ⁇ M) is added, 'observed no significant inhibition of platelet aggregation.
  • the platelets are prepared from blood taken from rats treated 1 hour previously by an intravenous injection of aspirin (2 mg / kg) and of AMP (1 mg / kg). Platelets are stimulated by ADP (10 and 20 ⁇ M).
  • the platelets are stimulated by ADP (20 ⁇ M), either in the presence of the product of Example 1 (0.3 mM), or in the presence of aspirin (20 mM) + AMP (0.25 mM).
  • stimulation by ADP induces platelet aggregation at 50%.
  • the maximum aggregation reaches 30% and then reverses.
  • the aggregation reaches 40% and then reverses.
  • ADP The response of human platelets stimulated by ADP (20 ⁇ M) is studied in the presence of the product of Example 1 (0.5 mM). In controls, ADP causes maximum platelet aggregation of up to 80%. In the case of the addition of ADP in the presence of the product of Example 1, the maximum aggregation does not exceed 35% and begins to reverse after 3 to 4 minutes.
  • the response of human platelets stimulated with collagen (0.19 mg / ml, Biodata) is studied. Two parameters are taken into account: the latency time (time between bringing the platelets into contact with the collagen and the start of aggregation) and the maximum amplitude of aggregation.
  • the response to collagen in terms of maximum response, is neither modified by aspirin (0.6 mM), nor by sodium salicylate (2 mM), nor by AMP (0.6 mM), neither by the product of Example 1 (0.5 mM), nor by the combination of sodium salicylate (2 mM) and AMP (0.6 mM).
  • the product of Example 1 doubles the latency time which follows the contacting of the platelets with the collagen.
  • the combination AMP (0.6 mM) + sodium salicylate (2 mM) is of comparable efficiency to that of the product of Example 1 (0.5 mM).
  • Sodium salicylate (2 mM) has no effect on the latency time.
  • the latency is multiplied by approximately 1.5; Study of the anti-inflammatory effect
  • This test is carried out on Sprague Dawley rats (IFFA CREDO, l'Arbresle, France).
  • the rats are put on an empty stomach (but have drinking water available ad libitum) the day before the experiment.
  • the rats are treated subcutaneously with indomethacin (20 mg / kg) or by gavage with 100 mg / kg of aspirin, or of the product compound of example 1, or of the product of example 3
  • the rats are sacrificed with a lethal dose of pentobarbital.
  • the stomach is removed, opened along the large curvature and rinsed with water.
  • the gastric mucosa is photographed and digitized using a Macintosh G3 microcomputer equipped with software (NIH, USA) and a video card (Scion, USA).
  • the stomach is attached to buffered formalin to be treated by standard histological techniques for paraffin inclusion.
  • the sections (5 ⁇ m) are then stained with hematoxylin-eosin-saffron. Two observations can be made: macroscopic (after sampling, under a microscope) and histological.
  • stomachs of rats treated with indomethacin show significant gross ulcerations confirmed by the histological study.
  • the stomachs of rats treated with aspirin at this dose have lesions in the form of petechiae or micro-ulcerations. This study shows that, compared to aspirin and indomethacin, the products of Examples 1 and 3 do not induce, in this in vivo model in rats, alteration of the gastric wall.

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Abstract

L'utilisation en association, d'un AINS et d'une purine, soit en mélange, soit lies par covalence, permet d'obtenir des effets pharmacologiques intéressants, en particulier des effets antithrombotiques et anti-inflammatories, y compris l'inhibition de la resténose.

Description

Utilisation, en association, d'une activité de purine et d'une activité d'AINS dans la préparation d'un médicament antithrombotique et/ou anti-inflammatoire
L'invention a pour objet l'utilisation, en association, d'une activité de purine et d'une activité d'agent anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS) dans la préparation d'un médicament destiné à être utilisé comme agent antithrombotique et/ou antiinflammatoire.
On sait que la lésion d'un vaisseau sanguin conduit à l'activation du système de coagulation et à l'agrégation des plaquettes sanguines (ou thrombocytes). Il en résulte la formation d'un caillot constitué de filaments de fibrine dans lesquels sont emprisonnées des plaquettes. Ce caillot obture la plaie, ce qui permet l'arrêt de l'hémorragie et à terme le retour à une circulation normale du sang.
Il arrive aussi qu'un caillot (ou thrombus) se forme sans nécessité dans un vaisseau sanguin. Un tel caillot, constitué d'agrégats plaquettaires qui se déposent souvent au niveau des plaques d'athérosclérose artérielles, peut alors provoquer un infarctus cardiaque, cérébral, ou autre, ou encore l'ischémie aiguë d'une artère du bras ou de la jambe. Un faible débit du flux sanguin augmente le risque d'apparition d'un thrombus, notamment dans le réseau veineux des membres inférieurs, et un caillot détaché de ce thrombus peut être entraîné vers une artère pulmonaire qu'il obstrue, provoquant ainsi une embolie pulmonaire.
Dans la prophylaxie des thromboses, on peut utiliser des anticoagulants, mais aussi des inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire. Les inhibiteurs de la cyclooxygénase peuvent inhiber notamment la synthèse du thromboxane A2, lequel possède à la fois des propriétés agrégantes et vasoconstrictrices. Les inhibiteurs de la cyclooxygénase sont donc susceptibles de constituer des médicaments antithrombotiques intéressants. On utilise actuellement l'aspirine à faible dose dans cette indication.
On sait aussi que les nucléotides sont impliqués dans de nombreux processus physiologiques, y compris le tonus vasculaire, les contractions cardiaques et l'agrégation plaquettaire.
En particulier, il est connu que l'ADP joue un rôle-clé dans l'induction de l'agrégation des plaquettes par l'intermédiaire de certains récepteurs P2 plaquettaires, en particulier les récepteurs P2X1, P2Y1 et P2T. L'AMP agit notamment par l'intermédiaire de récepteurs PI (en particulier les récepteurs PlA2a).
On a maintenant découvert que l'association d'une activité de purine et d'une activité d'anti-inflammatoire non stéroïdien (AINS), permet d'obtenir un effet de synergie potentialisatrice dans l'inhibition de l'agrégation plaquettaire. Cette association peut être réalisée soit par administration d'un produit agissant sur les récepteurs purinergiques et d'un AINS, soit par administration d'un produit dans lequel une ou plusieurs molécules de purine sont liées par covalence à une ou plusieurs molécules d'AINS, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur. De tels produits sont notamment des produits de formule I qui seront décrits ci-après.
On peut mentionner ici, comme exemple d'activité de purine, soit une activité d'agoniste sur les récepteurs impliqués dans l'inhibition de l'agrégation plaquettaire et ayant pour ligands naturels l'AMP et/ou l'adénosine (par exemple les récepteurs de type PI), soit une activité d'antagoniste sur les récepteurs impliqués dans l'agrégation plaquettaire (récepteurs pro-agrégants) et ayant pour ligand naturel l'ADP (par exemple les récepteurs de type P2).
On a en outre découvert que l'AMP, utilisé seul, possède une activité anti- agrégante, et l'AMP peut aussi être utilisé comme ingrédient actif dans la préparation d'un médicament anti-agrégant. On sait par ailleurs que l'inflammation est la réponse d'un tissu vivant vascularisé à une lésion locale (traumatisme, infection, irritation par des produits chimiques, etc). L'inflammation des tissus se traduit notamment par des symptômes tels que rougeur, gonflement, douleur. La lésion engendre initialement une vasodilatation accompagnée d'une augmentation de la perméabilité vasculaire, favorisant la migration de leucocytes vers le site lésé. Divers médiateurs chimiques participent à la réaction inflammatoire, parmi lesquels on peut citer en particulier les métabolites de l'acide arachidonique (AA). Ces métabolites agissent localement sur les vaisseaux sanguins et sur le site lésé, puis ils sont rapidement détruits. L'acide arachidonique est un constituant des phospholipides de la membrane des cellules. Sous l'action de divers stimuli, les phospholipases membranaires libèrent l'AA qui est alors l'objet de transformations métaboliques dont les deux plus importantes sont liées à son utilisation comme substrat pour les cyclooxygénases (ou Cox) et les lipooxygénases (ou Lipox). Les cellules produisant l'AA pendant la réponse inflammatoire sont principalement les leucocytes et les plaquettes.
La voie de la cyclooxygénase conduit à la production de prostaglandines et de thromboxanes, qui ont de nombreuses activités biologiques, pouvant dépendre des cellules qui les produisent. Parmi ces activités biologiques, on peut citer la vasodilatation, l'augmentation de la perméabilité vasculaire, l'augmentation des sensations douloureuses, l'induction de la fièvre, etc.
La voie lipooxygénase conduit aux leucotriènes, qui contribuent à l'inflammation dans diverses pathologies telles que : arthrite rhumatoïde, asthme, psoriasis, goutte, etc.
Les substances anti-inflammatoires les plus efficaces actuellement connues agissent sur le métabolisme de l'acide arachidonique : les anti-inflammatoires stéroïdiens inhibent la phospholipase, tandis que les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) inhibent la cyclooxygénase, et inhibent donc la formation des prostaglandines et des thromboxanes.
On sait qu'il existe deux isoenzymes de la cyclooxygénase, à savoir la Cox-1, qui est exprimée de façon permanente, notamment dans l'estomac, et la Cox-2, forme inductible qui n'est exprimée qu'au cours des réactions inflammatoires. La Cox-1 produit dans l'estomac des prostaglandines qui ont pour fonction de protéger la muqueuse gastrique contre l'acidité ambiante. La plupart des AINS inhibent à la fois la Cox-1 et la Cox-2, et il en résulte des effets secondaires fâcheux comme l'altération de la muqueuse gastrique, avec risques d'hémorragies ou de formation d'un ulcère. On connaît maintenant des AINS (par exemple le rofecoxib et le celecoxib) qui ne présentent pas cet inconvénient, car ce sont des inhibiteurs spécifiques de la Cox-2. On sait également que certaines purines, par exemple l'adénosine et l'AMP, sont des agents anti-inflammatoires. Par exemple, l'adénosine (endogène ou exogène) protège les cellules contre certains radicaux libres oxydants, et inhibe les leucocytes neutrophiles. L'AMP inhibe la migration de leucocytes lors de l'inflammation. En outre, l'adénosine intervient dans le mécanisme d'action du méthotrexate et de la sulfasalazine, utilisés dans le traitement de l'arthrite rhumatoïde. L'adénosine inhibe aussi, chez les humains, la libération de diverses cytokines pro-inflammatoires telles que IL-6, IL-8, IL-12, TNF. On a maintenant découvert que l'association d'une activité de purine et d'une activité d'AINS permet d'obtenir un effet de synergie potentialisatrice dans l'inhibition de la réaction inflammatoire. Cette association peut être réalisée soit par administration d'une purine et d'un AINS, soit par administration d'un produit dans lequel une ou plusieurs molécules de purine sont liées par covalence à une ou plusieurs molécules d'AINS, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur. De tels produits sont notamment des produits de formule I qui seront décrits ci-après.
L'invention a donc pour objet l'utilisation, en association, d'une activité de purine et d'une activité d'AINS, comme ingrédients actifs dans la préparation d'un médicament destiné à combattre les thromboses et/ou l'inflammation.
Dans la présente demande, on entend par "purine" notamment les nucléosides et nucléotides à base purique et en particulier l'adénosine ainsi que les phosphates correspondants, notamment l'AMP, l'ADP et l'ATP, la guanosine, le GMP, le GDP, le GTP, l'inosine ainsi que ses mono-, di- et triphosphates, et leurs dérivés ou analogues, notamment leurs sels acceptables en pharmacie (par exemple chlorhydrates de nucléosides ou de nucléotides à fonction aminé, ou sels alcalins des nucléotides). Plus généralement, on entend également par "purine" toute substance capable d'agir sur les récepteurs puriniques, également appelés récepteurs purinergiques (notamment récepteurs PI sensibles à l'AMP et à l'adénosine, et récepteurs P2, sensibles à l'ADP et à l'ATP). De telles substances sont connues ou peuvent être recherchées selon des méthodes connues. Une activité de purine est une activité obtenue par la présence d'une purine telle qu'elle vient d'être définie. Parmi les analogues de purines, on peut citer en particulier, notamment dans le cas de la préparation d'un médicament anti-agrégant, les agonistes des récepteurs de type PI et les antagonistes des récepteurs de type P2. De tels produits agonistes ou antagonistes sont connus ; voir par exemple le site www.sigma-aldrich.com, rubrique RBI. En outre, la recherche de tels agonistes ou antagonistes peut être effectuée selon les méthodes connues par de simples expériences de routine. Bien entendu, dans la préparation d'un médicament anti-agrégant par association d'une purine et d'un AINS, on n'utilise pas 1ADP (ni ses agonistes) comme ingrédients actifs. Dans la présente demande, de façon générale, on appelle "dérivés" tous produits qui sont obtenus par la modification d'une fonction chimique ou d'un atome ou groupe d'atomes d'un produit actif, et qui ont une activité physiologique de même type que le produit actif. A titre d'exemples, les dérivés de produits actifs ayant des fonctions acides peuvent être notamment les sels (par exemple sels de sodium ou sels d'autres métaux alcalins, ou encore sels formés avec des aminés, par exemple sels de pipérazine ou sels de lysine), ou les esters formés par lesdits acides avec des alcools, ou les amides formés par ces acides avec des aminés ; les dérivés de produits actifs ayant des fonctions aminés sont notamment les amides et les sels d'addition formés par ces aminés avec des acides ; les dérivés de produits actifs ayant des fonctions alcools sont notamment les esters formés par lesdits alcools avec des acides.
Les anti-inflammatoires non stéroïdiens, ou AINS, constituent une classe connue d 'anti-inflammatoires, qui ont plusieurs propriétés en commun, et en premier lieu une activité d'inhibition de la cyclooxygénase qui leur donne la capacité d'inhiber la synthèse des prostaglandines. Les AINS ont d'autres propriétés en commun, et notamment le découplage de la phosphorylation oxydative, des modifications des mouvements intracellulaires des ions calcium, l'activation de la synthèse de la NO synthase inductible, l'action sur les facteurs nucléaires kappa, etc. Il est possible que l'une ou plusieurs de ces propriétés soit à l'origine de l'effet potentialisateur des AINS sur les purines, mais il est également possible que d'autres propriétés, connues ou inconnues, soient impliquées.
Parmi les anti-inflammatoires non stéroïdiens, on peut citer par exemple (voir notamment THE MERCK INDEX, 12e édition, Therapeutic Category and Biological Activity Index) :
- les dérivés d'acides aminoarylcarboxyliques tels que : acide enfénamique, acide étofénamique, acide flufénamique, isonixine, acide méclofénamique, acide méfénamique, acide niflumique, talniflumate, térofénamate, acide tolfénamique ; - les dérivés d'acides arylacétiques tels que : aceclofenac, acemétacine, alclofenac, amfenac, amtolmetine guacile, bromfenac, bufexamac, cinmétacine, clopirac, diclofénac, etodolac, felbinac, acide fenclozique, fentiazac, glucamétacine, ibufenac, indométacine, isofezolac, isoxepac, lonazolac, acide metiazinique, mofezolac, oxamétacine, pirazolac, proglumétacine, sulindac, tiaramide, tolmétine, tropésine, zomepirac ;
- les dérivés d'acides arylbutyriques tels que : bumadizon, butibufène, fenbufène, xenbucine ; - les dérivés d'acides arylcarboxyliques tels que : clidanac, ketorolac, tinodirine ;
- les dérivés d'acides arylpropioniques tels que : alminoprofène, benoxaprofène, bermoprofène, acide bucloxique, carprofène, fénoprofène, flunoxaprofène, flurbiprofène, ibuprofène, ibuproxam, indoprofène, kétoprofène, loxoprofène, naproxène, oxaprozine, piketoprofène, pirprofène, pranoprofène, acide protizinique, acide méthiazinique, suprofène, acide tiaprofénique, ximoprofène, zaltoprofène, maproxen ; les dérivés d'acide salicylique tels que : acétaminosalol, aspirine, benorylate, bromosaligénine, acétylsalicylate de calcium, diflunisal, etersalate, fendosal, acide gentisique, salicylate de glycol, salicylate d'imidazole, acétylsalicylate de lysine, mésalamine, salicylate de morpholine, salicylate de 1-naphtyle, olsalazine, parsalmide, acétylsalicylate de phényle, salicylate de méthyle, salicylate de phényle, salacétamide, acide [2-(aminocarbonyl) phénoxy] acétique, acide salicylsulfurique, salsalate, sulfasalazine, aspalatone ; ainsi que les esters nitriques des salicylates ou de l'aspirine tels que le 2-acétoxybenzoate de 2-(2-nitroxy) -butyle et le 2-acétoxybenzoate de 2(2-nitroxyméthyl) phényle ; d'autres dérivés d'acides carboxyliques tels que : acide ε-acétamidocaproïque, acide 3-amino-4-hydroxybutyrique ; - des dérivés de pyrazole ou de pyrazolone tels que : difénamizole, épirizole, apazone, benzpiperylon, feprazone, suxibuzone, bumadizone, clofézone, kébuzone, mofébutazone, proxifézone, morazone, oxyphenbutazone, phénylbutazone, pipébuzone, propyphénazone, pyrazinophénazone, ramifenazone, thiazolinobutazone, tolmétine, antipyrine, noramidopyrine, dipyrone, azapropazone, celecoxib ; - les dérivés de thiazinecarboxamides tels que : ampiroxicam, droxicam, isoxicam, lornoxicam, piroxicam, tenoxicam ; d'autres anti-inflammatoires tels que : S-adénosylméthionine, amixétrine, bendazac, benzydamine, -bisabolol, bucolome, difenpiramide, ditazol, emorfazone, fepradinol, guaiazulène, nabumetone, nimesulide, oxaceprol, paranyline, perisoxal, proquazone, tenidap, zileuton, rofecoxib ; ainsi que les donneurs de monoxyde d'azote dérivés d'AINS tels que les esters nitriques et les dérivés nitro ou nitroso qui sont décrits dans les brevets et demandes de brevet EP 0 670 825, US 5 700 947, WO 95/30641, US 5 703 073, US 6 043 232 et US 6 043 233, dont le contenu est incorporé dans la présente description par référence.
Dans la liste d'AINS qui précède, la dénomination commune internationale désigne aussi bien les ingrédients actifs de base que leurs dérivés immédiats utilisables en pharmacie (par exemple les acides, et aussi leurs sels).
Les AINS, y compris les AINS à groupe carboxylique, sont des produits connus, décrits notamment dans THE MERCK INDEX 12e édition, dont le contenu (y compris les données et les références concernant les AINS) est incorporé dans la présente description par référence. Parmi les anti-inflammatoires utilisables, il peut être intéressant de choisir un produit qui inhibe sélectivement ou préférentiellement la Cox-2 (par exemple rofecoxib, celecoxib, nabumetone).
Les ingrédients actifs d'un médicament obtenu conformément à l'invention peuvent être présentés de façon séparée, chacun sous une forme pharmaceutique appropriée, et réunis dans un même emballage.
Mais pour faciliter l'administration simultanée des ingrédients actifs, on préfère généralement préparer le médicament sous une seule forme pharmaceutique contenant les deux ingrédients actifs, ainsi éventuellement qu'un excipient pharmaceutique approprié. Bien entendu, un produit ayant à la fois une activité de purine et une activité d'AINS doit être considéré comme constituant à lui seul une combinaison ayant les deux types d'activités, et peut donc être utilisé conformément à l'invention comme ingrédient actif unique. Par exemple, une purine et un AINS peuvent être combinés en établissant une liaison chimique entre les deux molécules. On peut notamment amidifier une fonction aminé de la purine, ou esterifier une ou plusieurs fonctions alcool du produit à activité de purine, avec un groupement acide présent dans un AINS à fonction carboxylique tel que par exemple l'acide acétylsalicylique, l'acide méfénamique, le diclofénac, le naproxène, l'ibuprofène, le sulindac, etc. On peut amidifier notamment une fonction aminé de la base purique de la purine, ou esterifier une ou plusieurs fonctions alcool de l'ose de la purine (nucléoside ou nucléotide). On obtient ainsi un produit d'amidification qui possède à la fois une activité de purine et une activité d'AINS. Des exemples de tels produits sont les produits de formule I qui seront décrits ci-après. Le médicament obtenu conformément à l'invention peut être administré par voie orale, sublinguale, nasale, pulmonaire, rectale ou parentérale (par exemple intravasculaire, intramusculaire, transcutanée, intra-articulaire).
A cet effet, il peut être présenté sous toute forme permettant l'administration par voie orale (en particulier sous la forme de gélules, de solutions ou émulsions buvables, de poudres, de gels, de granulés, de tablettes ou de comprimés), par voie nasale (par exemple des solutions à administrer sous forme de gouttes ou de pulvérisations), par voie pulmonaire (solutions en flacon pressurisé pour aérosols), par voie rectale (suppositoires), par voie cutanée (par exemple crèmes, onguents ou dispositifs transdermiques, encore appelés timbres ou patches), par injection (solutions injectables, poudres lyophilisées permettant de reconstituer des solutions injectables) ou par voie transmuqueuse comme par exemple par voie sublinguale (solutions en flacon pressurisé, ou comprimés à délitement buccal).
Ces formes pharmaceutiques sont préparées de façon usuelle et peuvent contenir des excipients et véhicules classiques appropriés.
Le médicament de l'invention peut être préparé par exemple sous une forme pharmaceutique permettant l'administration, à un sujet ayant besoin d'un tel médicament, par exemple un sujet humain, de 10 à 1000 mg de purine, par jour, et permettant en outre l'administration d'une dose suffisante d'AINS, par exemple une dose de 10 à 3000 mg d'AINS par jour.
A titre d'exemple, on peut administrer une dose de 50 à 500 mg d'AMP et de 10 à 1000 mg par jour d'aspirine, chez l'humain adulte. On peut remplacer l'AMP notamment par des quantités équivalentes d'adénosine. Si on souhaite substituer une autre purine à l'AMP et/ou un autre AINS à l'aspirine, on peut facilement adapter les gammes de doses mentionnées ci-dessus en remplaçant une dose donnée d'AMP par une dose équivalente d'une autre purine et/ou en remplaçant une dose donnée d'aspirine par une dose équivalente d'un autre AINS. Une telle dose équivalente peut être déterminée par exemple à l'aide de tout test classique anti-inflammatoire. Une dose de purine équivalente à une dose d'AMP donnée est par exemple une dose capable d'avoir un effet anti-agrégant comparable dans les tests décrits dans la partie expérimentale ci-après.
Bien entendu, on peut adapter la posologie en fonction notamment du poids corporel du sujet traité. Le médicament obtenu selon l'invention peut être administré en tant qu'agent antithrombotique et anti-agrégant notamment dans le traitement des angines de poitrine, des insuffisances circulatoires des membres inférieurs, dans le but de prévenir les infarctus chez les patients souffrant d'athérosclérose, et aussi dans le but d'éviter la récidive des infarctus, notamment cardiaques ou cérébraux.
Le médicament obtenu selon l'invention peut également être administré en tant qu'agent anti-inflammatoire dans toutes les pathologies où il convient d'inhiber ou de limiter la réaction inflammatoire, notamment dans le traitement de l'arthrose, de l'arthrite rhumatoïde, des tendinites, des crises de goutte, des maladies inflammatoires de l'intestin, des dysménorrhées, des œdèmes post-traumatiques, de la spondylarthrite ankylosante, et dans tous les cas où l'on souhaite lutter contre la douleur et contre la fièvre.
Par ailleurs, on sait qu'après une angioplastie, la dilatation forcée d'une artère par un ballonnet équivaut à un traumatisme pariétal et endothélial (l'endothélium étant le revêtement interne de l'artère), lequel déclenche un mécanisme automatique de réparation cellulaire. Les cellules musculaires lisses, sous-jacentes à l'endothélium, sécrètent divers facteurs de croissance qui ont à ce titre un rôle promoteur essentiel. Le danger vient de l'excès de réaction pariétale dû à une réaction de type inflammatoire, en regard d'une zone elle-même anormale, avec épaississement de la paroi vasculaire, provoquant la reconstitution d'une nouvelle sténose (ou resténose), dû à un excès de cicatrisation. Il en résulte qu'environ 30 % des angioplasties sont resténosées au bout de 6 mois. On doit alors redilater ou recourir à la chirurgie. Différentes méthodes semblent pouvoir réduire l'incidence des resténoses : l'usage des stents métalliques (ressorts qui maintiennent le vaisseau ouvert et que l'on place après dilatation), la radiothérapie in situ, la libération ou l'apport sur le site de substances anti-inflammatoires inhibitrices de la resténose. Cette dernière méthode est justifiée par le fait que le déclenchement de la réaction pariétale est un phénomène qui fait suite sans délai au traumatisme de la dilatation.
L'association d'une purine et d'un AINS (par exemple l'association aspirine- adénosine ou sulindac-adénosine), administrée immédiatement après une angioplastie, peut inhiber ou réduire la resténose. Comme indiqué ci-dessus, on peut remplacer l'association d'une purine et d'un
AINS par un produit unique dans lequel une purine, ou un analogue de purine, est lié par covalence à un AINS, par exemple un produit de formule I tel que décrit ci-après. L'invention a également pour objet de nouveaux produits comprenant un AINS et une purine, liée par covalence audit AINS, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur.
Ces produits sont notamment ceux qui répondent à la formule I (A-)m (X)p (-B)n (I) dans laquelle A est le reste de la molécule d'un AINS, B est le reste d'une purine et X représente soit une liaison covalente entre A et B, soit un bras espaceur reliant au moins un reste A à au moins un reste B, m est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, n est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, et p représente zéro ou un nombre entier au plus égal au plus grand des nombres m et n. On peut en effet, selon les cas, soit greffer un ou plusieurs restes A et/ou B sur un seul bras espaceur, soit greffer un ou plusieurs groupes A-X- sur un reste B (et alors m = p et n = 1), soit greffer un ou plusieurs groupes -X-B sur un reste A (et alors n = p et m = 1). Lorsque p = zéro, soit un ou plusieurs restes A sont liés à un reste B (et n = 1), soit un ou plusieurs restes B sont liés à un reste A (et m = 1).
Les produits de formule I peuvent être utilisés sous forme de sels, en particulier sous forme de sels de métaux alcalins tels que des sels de sodium ou de potassium ; ces sels sont par exemple ceux des groupements phosphates, s'ils sont présents, des groupements phénoliques (cas de l'acide salicylique), etc. On peut également utiliser les produits de formule I, le cas échéant, sous forme de sels d'addition (par exemple sous forme de chlorhydrate) lorsque ces produits contiennent un groupement aminé.
Les liaisons entre le bras espaceur et les restes A et B sont des liaisons covalentes. Les groupes chimiques faisant la liaison entre A et B (lorsque p = zéro), ou entre A et X ou entre X et B (lorsque p est différent de zéro), sont par exemple des groupes ester carboxylique, amide carboxylique, ester thiocarboxylique ou amide thiocarboxylique.
Dans la formule I, A peut représenter notamment le reste acyle d'un AINS possédant un groupe carboxylique (l'AINS a donc pour formule A-OH) et B peut représenter le reste d'un nucléoside ou nucléotide à base purique relié à X, ou relié à A (en cas d'absence de bras espaceur), par l'intermédiaire de l'azote d'une aminé primaire de la base purique et/ou par l'intermédiaire de l'oxygène d'un groupe hydroxyle dudit nucléoside ou nucléotide à base purique ; par exemple un ou plusieurs groupes A ou A-X- peuvent être reliés à B par l'intermédiaire de l'oxygène de l'alcool primaire dudit nucléoside et/ou par l'intermédiaire de l'oxygène d'au moins un alcool secondaire dudit nucléotide. Dans ces cas, la purine dont dérive B a évidemment pour formule BH. Dans la formule I, ledit nucléoside ou nucléotide est notamment un ribonucléoside ou ribonucléotide. La purine peut être choisie parmi l'adénosine, la guanosine et l'inosine, ainsi que les 5 '-monophosphates, -diphosphates et -triphosphates correspondants.
Les bras espaceurs peuvent être notamment des restes bivalents de composés aliphatiques bi-fonctionnels, (c'est-à-dire des composés ayant à chacune de leurs extrémités des groupes fonctionnels réactifs permettant chacun de former des liaisons covalentes avec A et avec B). Ces composés peuvent être par exemple des composés qui possèdent à la fois un groupe amino et un groupe carboxylique (ou thiocarboxylique), ou encore des composés qui possèdent à la fois un groupe amino et un groupe hydroxyle. Dans la formule I, le groupe X (en faisant abstraction de ses groupes fonctionnels d'extrémité) représente notamment un groupe aliphatique divalent éventuellement interrompu par un ou plusieurs hétéroatomes - O - ou - S - ou par un ou plusieurs groupements hétéroatomiques - NH - ou - CO - NH -.
Les agents espaceurs, c'est-à-dire les composés capables de donner, après réaction avec la purine et l'AINS, des produits de formule I dans lesquels A et B sont reliés par des bras espaceurs, sont par exemple des acides alpha-, bêta- ou gamma-amino alcanecarboxyliques, en particulier des acides alpha - aminés naturels tels que la glycine, l'alanine, la valine ou la leucine, ou encore des peptides, notamment des dipeptides ou des tripeptides. Les agents espaceurs peuvent également être des acides hydroxy- carboxyliques tels que les acides lactique, glycolique, les acides aldoniques (gluconique, mannonique, galactonique, ribonique, arabinonique, xylonique et érythronique) et les lactones ou dilactones correspondantes (par exemple lactide, glycolide, delta- glucolonactone, delta-valéronactone), ou encore les acides aldariques. Les groupes fonctionnels éventuellement présents sur le bras espaceur et non impliqués dans la liaison avec un élément A ou B peuvent être utilisés pour greffer d'autres restes A et/ou B de façon à obtenir des composés de formule I pour lesquels m et/ou n sont supérieurs à 1. C'est le cas par exemple des groupes hydroxyles des hydroxyacides, du second groupe carboxylique des acides aminés diacides carboxyliques, du second groupe amino des aminoacides diaminés, du groupe hydroxyle des acides aminés hydroxyles, etc. Pour préparer les composés de formule I, on utilise les méthodes classiques de la synthèse organique. Par exemple, pour préparer des amides ou des esters, on peut faire réagir un composé carboxylique (AINS ou agent espaceur) sous la forme d'un halogénure d'acide carboxylique (ou thiocarboxylique), ou sous la forme d'un anhydride mixte, ou sous la forme d'un ester activé, par exemple un ester de p-nitrophényle. On peut également activer l'acide à l'aide d'un agent de couplage tel que le dicy clohexylcarbodiimide .
Comme les composés de formule I comprennent des restes de nucléosides ou nucléotides, on peut les préparer en utilisant en particulier les méthodes connues dans la chimie des acides nucléiques, décrites par exemple dans l'ouvrage de Kochetkoc et Budovskii, Organic Chemistry of Nucleic Acids, Plénum Press, 1971 (2 volumes), dont le contenu est incorporé dans la présente description par référence.
Bien entendu, lorsque les composés dont dérivent A, B ou X de la formule I, comprennent plusieurs fonctions susceptibles de réagir, il convient d'opérer soit en utilisant les réactifs en proportions stoechiométriques (selon le nombre de produits précurseurs de A et/ou de B que l'on veut faire réagir), soit en protégeant temporairement les fonctions réactives dont on ne souhaite pas qu'elles réagissent. On utilise pour cela les méthodes de protection temporaire desdites fonctions réactives. Ces méthodes de protection temporaire sont bien connues, notamment celles qui ont été développées lors des recherches concernant la synthèse des peptides. Par exemple, les groupements -NH peuvent être protégés par des groupements carbobenzoxy, phtaloyle, t-butoxycarbonyle, trifluoroacétyle, toluènesulfonyle ; les groupements carboxyliques peuvent être protégés sous la forme d'esters benzyliques, d'esters de tétrahydropyranyle ou d'esters de t-butyle ; les alcools peuvent être protégés sous la forme d'esters (par exemple acétates), sous la forme d'éthers de tétrahydropyranyle, d'éthers benzyliques ou d'éthers de trityle, ou encore sous la forme d'acétals (y compris sous la forme d'acétonides dans le cas des glycols vicinaux). Les réactions de protection et de déprotection éventuelle de divers groupes chimiques sont connues et décrites par exemple dans l'ouvrage Advances in Organic Chemistry, Methods and Results , Vol. 3, Interscience Publishers (1963), pages 159 et suivantes et pages 191 et suivantes, ainsi que dans l'ouvrage de T.W. Green, Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley-Interscience Publication (1991). Le contenu de ces ouvrages est incorporé à la présente description par référence. Les réactions de phosphatation ou de déphosphatation de l'alcool primaire des nucléotides ou nucléosides peuvent être mises en œuvre en utilisant les enzymes naturelles (par exemple phosphatases, phosphokinases).
Parmi les produits de formule I, on citera en particulier ceux qui répondent à la formule la : A- B (la), dans laquelle A et B sont définis comme précédemment. A représente notamment le reste acyle d'un AINS possédant un groupe carboxylique, la liaison avec B se faisant par exemple par formation d'un amide ou d'un ester avec une fonction aminé ou alcool, respectivement, de la purine dont la formule est BH. Parmi les produits de formule I ou la, on citera notamment les amides et esters formés avec les restes acyle A de l'acide salicylique, de l'acide acétylsalicylique, du diclofénac, de l'ibuprofène, du naproxène ou du sulindac, et avec les restes B dérivés de . l'adénosine ou de l'AMP.
Bien entendu, il est particulièrement intéressant de choisir, parmi les produits de formule I, ceux qui présentent un effet de synergie potentialisatrice par rapport à leurs constituants purine et AINS. De tels produits peuvent être sélectionnés par de simples expériences de routine.
On a remarqué en outre que les produits de formule I ou la ont généralement une tolérance gastrique améliorée, par rapport à l'AINS dont ils dérivent. Les produits de formule I ou la sont administrés sous les mêmes formes pharmaceutiques que celles décrites ci-dessus, et à des doses équivalentes, compte tenu des proportions respectives des molécules dérivées de purine et d'AINS dans le produit de formule I ou la considéré. Les doses administrées peuvent être déterminées par des expériences de routine, en utilisant les tests connus de recherche d'une activité anti- inflammatoire ou d'une activité anti-agrégante.
Les indications qui précèdent, données pour les produits de formule I ou la, s'appliquent également, de façon générale, à tout produit comprenant un AINS et une purine, liés par covalence, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur.
L'invention faisant l'objet de la présente demande est également définie par les revendications annexées à la présente description. Les exemples suivants illustrent l'invention.
Exemple 1 : Préparation du produit de formule A - NH - Y, dans laquelle A est le reste acyle de l'acide acétylsalicylique et Y est le reste de l'AMP amputé de son aminé primaire, le groupement NH de la formule représentant le reste de ladite aminé primaire de l'AMP. II s'agit donc du produit d'amidification de l'AMP par l'acide acétylsalicylique.
Les produits de départ sont l'acide acétylsalicylique (origine : SIGMA) et l'AMP (ou (5'-O-phosphate) adénosine), sel de sodium (origine : SIGMA).
On dissout 0,5 g d'AMP dans 14 ml d'eau à température ambiante. On ajoute 0,17 g de carbonate de potassium (K2CO3), et on ajoute 0,25 g de chlorure de 2-acétyl benzoyle, puis 3 ml de dioxane afin de solubiliser ce dernier. On agite le mélange pendant 12 heures à température ambiante, puis on évapore les solvants.
On élimine les chlorures par dialyse, ou on purifie le produit obtenu par chromatographie sur gel de silice, en éluant avec un mélange acétate d'éthyle/eau/isopropanol 1:1:1.
Le groupement phosphate est salifié par des ions sodium et potassium. Les spectres RMN du proton et du phosphore 31P sont en accord avec la structure indiquée.
En opérant de façon analogue, mais en remplaçant le carbonate de potassium par du carbonate de sodium, on obtient l 'amide correspondant dont les groupements phosphates sont salifiés par des ions sodium.
Exemple 2 : Préparation du produit de formule A - NH - Y, dans laquelle A est un reste salicylyle, Y représente le reste de l'AMP (amputé de son aminé primaire), et le groupement NH de la formule est le reste de ladite aminé primaire de l'AMP. II s'agit donc du produit d'amidification de l'AMP par l'acide salicylique.
Le produit de départ est le produit de l'exemple 1, que l'on soumet à une désacétylation en milieu basique. On dissout ce produit dans l'eau et ajoute 3 équivalents de carbonate de potassium K2CO3 à température ambiante. Au bout d'un temps réactionnel de 12 heures à température ambiante, on obtient le produit indiqué dans le titre de cet exemple.
On purifie le produit désacétylé par chromatographie sur gel de silice, comme à l'exemple 1.
Les fonctions phosphate et phénate de ce produit sont salifiées par des ions sodium et potassium.
En remplaçant le carbonate de potassium par le sodium, on obtient le produit indiqué dans lequel les fonctions phosphate et phénate sont salifiées par des ions sodium. Exemple 3 : Préparation d'un produit de formule A - NH - Y, dans lequel A représente un groupement salicylyle, Y représente un reste d 'adénosine amputé de son aminé primaire, et le groupement NH de la formule représente le reste de ladite aminé primaire de l'adénosine.
Il s'agit donc du produit d'amidification de l'adénosine par l'acide salicylique. a) 2', 3' 5', O-triacétate d'adénosine :
On mélange 5,34 g d'adénosine et 11,4 ml d'anhydride acétique dissous dans 25 ml de pyridine anhydre. On agite pendant 12 heures à température ambiante, puis on évapore les solvants. Le résidu est ensuite repris plusieurs fois à l'éthanol. On obtient 6,97 g de cristaux blancs. b) N-(2-acétylsalicylyl) 2', 3', 5', 0-triacétate d'adénosine :
On dissout 2,457 g du produit obtenu en a) dans 26 ml de dichlorométhane et 0,95 ml de triéthylamine, puis on ajoute 0,402 g de chlorure d'acide acétylsalicylique, à une température de 0°C. On laisse le mélange réactionnel se réchauffer jusqu'à température ambiante puis on agite pendant 12 heures. Le mélange est alors extrait par une solution aqueuse saturée en NaCl, puis la phase organique ainsi traitée est séchée sur MgSO . Le solvant est évaporé, et le résidu est chromatographie sur gel de silice en éluant avec un mélange CH2Cl2/MeOH 98:2. On obtient le composé annoncé (1,41 g) sous la forme d'un solide blanc. c) N-salicylyl adénosine : On dissout à température ambiante 0,230 g du composé obtenu en b) dans
10 ml d'un mélange méthanol/eau 7:3, puis on ajoute 0,232 g de K2CO3. Au bout d'une heure, le mélange est lavé plusieurs fois au dichlorométhane et la phase aqueuse est concentrée. On obtient 0,156 g d'un solide jaune.
Le spectre RMN est en accord avec la structure indiquée. Etude des effets des AINS seuls et associés à l'adénosine ou l'AMP sur l'agrégation plaquettaire On prélève du sang recueilli sur tampon citrate, chez des rats n'ayant reçu aucun traitement ou chez des humains n'ayant reçu aucun traitement dans les quinze jours précédant le prélèvement. On prépare par centrifugation selon les méthodes connues un plasma riche en plaquettes.
Les mesures sont réalisées grâce à un agrégomètre commercialisé sous la dénomination "Chrono-log" et elles sont traitées et numérisées par un système d'acquisition "MP30 Biopac". a) Effets de l'AMP et de l'adénosine sur l'agrégation des plaquettes de rat
Avec les plaquettes de rat stimulées par l'ADP (20 μM), on observe une agrégation rapide et importante (80 ). Lorsque l'ADP est ajoutée à la même concentration en présence d'AMP
2,5 mM ou 5,0 mM, on n'observe qu'une agrégation partielle (40 % et 20 %, respectivement), suivie d'une désagrégation spontanée. Ainsi, l'action de l'AMP dépend de la dose.
Lorsqu'on remplace l'AMP (5 mM) par l'adénosine (4 mM), on obtient des résultats comparables.
Lorsqu'on stimule les plaquettes de rat par l'ADP (20 μM), puis ajoute 30 secondes plus tard l'AMP (10 mM), on observe une désagrégation immédiate.
En conclusion, l'adénosine et l'AMP peuvent inhiber et inverser l'agrégation des plaquettes induite par l'ADP. b) Effets des AINS seuls et associés à l'AMP sur l'agrégation des plaquettes de rat Si l'on ajoute au plasma du salicylate de sodium (7,5 mM), puis ajoute l'ADP (20 μM), on n'observe pas d'inhibition significative de l'agrégation plaquettaire.
Lorsqu'on ajoute l'ADP (20 μM) en présence de salicylate de sodium (7,5 mM) et d'AMP (2,5 mM), on n'observe pratiquement plus aucune agrégation plaquettaire.
Ainsi, l'association de l'AMP et du salicylate de sodium présente un effet de synergie potentialisatrice. Des résultats similaires ont été obtenus en remplaçant le salicylate de sodium par l'aspirine (7,5 mM) ou l'indométacine (0,05 mM). c) Effets de l'association aspirine + AMP sur l'agrégation des plaquettes de rat
Les plaquettes sont préparées à partir de sang prélevé chez des rats traités 1 heure auparavant par une injection intraveineuse d'aspirine (2mg/kg) et d'AMP (1 mg/kg). On stimule les plaquettes par l'ADP (10 et 20 μM).
Avec des doses de 10 et 20 μM d'ADP, chez les animaux témoins (n'ayant reçu aucun traitement préalable), on observe une agrégation plaquettaire supérieure à 50 %, 3 minutes après l'addition d'ADP. Chez les animaux traités préalablement par l'aspirine et l'AMP, on observe une faible agrégation (20 % environ) qui s'inverse au bout de 3 minutes environ. d) Effets du produit de l'exemple 1 sur l'agrégation des plaquettes de rats
On stimule par l'ADP (20 μM) en présence du produit de l'exemple 1 (0,3 mM). Avec le plasma non traité préalablement, l'agrégation maximale atteint 55 % avec une pente initiale de la courbe de 0,99. En présence du produit de l'exemple 1 (ajouté immédiatement avant l'addition d'ADP), l'agrégation maximale est de 39 %, avec une pente initiale de 0,84. Il résulte des essais effectués que dans ces conditions expérimentales la réduction de l'agrégation est de 30 à 50 %. Lorsque le produit de l'exemple 1 est ajouté au plasma 25 minutes avant la stimulation par l'ADP, l'agrégation maximale est inférieure à 30 %. e) Effet du produit de l'exemple 1 sur l'agrégation des plaquettes de rats ; comparaison avec l'association AMP + aspirine
Les plaquettes sont stimulées par l'ADP (20 μM), soit en présence du produit de l'exemple 1 (0,3 mM), soit en présence d'aspirine (20 mM) + AMP (0,25 mM).
Chez les animaux témoins, la stimulation par l'ADP induit une agrégation plaquettaire à 50 %.
Dans le cas du plasma traité par le produit de l'exemple 1, l'agrégation maximale atteint 30 % puis s'inverse. Dans le cas du plasma ayant reçu de l'aspirine et de l'AMP, l'agrégation atteint 40 % puis s'inverse.
Ces résultats montrent que le produit de l'exemple 1 est plus actif que la simple association de l'aspirine et de l'AMP. f) Effets du produit de l'exemple 1 sur les plaquettes humaines
On étudie la réponse des plaquettes humaines stimulées par l'ADP (20 μM) en présence du produit de l'exemple 1 (0,5 mM). Chez les témoins, l'ADP provoque une agrégation plaquettaire maximale atteignant 80 %. Dans le cas de l'addition d'ADP en présence du produit de l'exemple 1, l'agrégation maximale ne dépasse pas 35 % et commence à s'inverser au bout de 3 à 4 minutes.
Dans le cas où les plaquettes sont stimulées par l'acide arachidonique (20 μM), on observe une agrégation de 70 %. Lorsque l'acide arachidonique est ajouté en présence du produit de l'exemple 1 (0,005 mM), l'agrégation des plaquettes est totalement inhibée. g) Réponse des plaquettes humaines stimulées par le collagene
On étudie la réponse de plaquettes humaines stimulées par du collagene (0,19 mg/ml, Biodata). Deux paramètres sont pris en compte : le temps de latence (délai entre la mise en contact des plaquettes avec le collagene et le début de l'agrégation) et l'amplitude maximum d'agrégation.
La réponse au collagene, en terme de réponse maximum, n'est modifiée ni par l'aspirine (0,6 mM), ni par le salicylate de sodium (2 mM), ni par l'AMP (0,6 mM), ni par le produit de l'exemple 1 (0,5 mM), ni par l'association de salicylate de sodium (2 mM) et d'AMP (0,6 mM).
En revanche, à la dose indiquée, le produit de l'exemple 1 double le temps de latence qui suit la mise en contact des plaquettes avec le collagene. L'association AMP (0,6 mM) + salicylate de sodium (2 mM) est d'efficacité comparable à celle du produit de l'exemple 1 (0,5 mM). Le salicylate de sodium (2 mM) est sans effet sur le temps de latence. Dans le cas de l'AMP (0,6 mM), le temps de latence est multiplié par 1,5 environ; Etude de l'effet anti-inflammatoire
Le test est effectué sur des souris mâles pesant 20 g. Ce protocole dure 5 jours. Au jour Jl, on injecte par voie sous-cutanée dans la partie dorsale 3 cm3 d'air. Les poches d'air obtenues sont regonflées à J2, J3 et J4 avec 1 cm3 d'air. On administre à J3, J4 et à J5, 1 heure avant l'induction de l'inflammation, par gavage gastrique, soit 0,1 ml d'eau (témoins, n = 14), soit de l'aspirine (100 mg/kg, n = 5), soit le produit de l'exemple 1 (100 mg kg, n = 4), soit le produit de l'exemple 3 (100 mg/kg, n = 5). On induit l'inflammation par injection de 1 ml d'une suspension à 2 % (poids/volume) de carraghénane en tampon PBS dans la poche d'air. Après 4 heures, les poches sont lavées avec 2 ml de PBS et les exsudats sont recueillis. Des parties aliquotes sont diluées jusqu'à 1:1 avec une solution à 0,01 % de bleu de méthylène dans un tampon PBS. On effectue alors un comptage des cellules (principalement des neutrophiles) dont l'accumulation est provoquée par l'inflammation.
Les résultats sont résumés dans le Tableau 1. Ils montrent que les produits des exemples 1 et 3 diminuent significativement le nombre de leucocytes accumulés dans l'exsudat inflammatoire, par rapport aux témoins et par rapport à l'aspirine seule.
TABLEAU 1
Etude de la toxicité gastrique
Ce test est effectué sur des rats Sprague Dawley (IFFA CREDO, l'Arbresle, France). Les rats sont mis à jeun (mais ont à leur disposition de l'eau de boisson ad libitum) la veille de l'expérimentation. Les rats sont traités par voie sous-cutanée avec de l'indométacine (20 mg/kg) ou par gavage avec 100 mg/kg d'aspirine, ou du produit composé de l'exemple 1, ou du produit de l'exemple 3. Trois heures plus tard, les rats sont sacrifiés par une dose létale de pentobarbital. L'estomac est prélevé, ouvert le long de la grande courbure et rincé à l'eau. La muqueuse gastrique est photographiée et numérisée à l'aide d'un microordinateur Macintosh G3 équipé d'un logiciel (NIH, USA) et d'une carte vidéo (Scion, USA). L'estomac est fixé au formol tamponné afin d'être traité par les techniques histologiques classiques pour l'inclusion en paraffine. Les coupes (5μm) sont ensuite colorées à l'hématoxyline-éosine-safran. Deux observations peuvent être effectuées : macroscopique (après le prélèvement, sous microscope) et histologique.
Les estomacs des rats traités par l'indométacine présentent des ulcérations macroscopiques importantes confirmées par l'étude histologique. Les estomacs des rats traités par l'aspirine à cette dose, présentent des lésions sous forme de pétéchies ou des micro-ulcérations. Cette étude montre que, comparés à l'aspirine et à l'indométacine, les produits des exemples 1 et 3 n'induisent pas, dans ce modèle in vivo chez le rat, d'altération de la paroi gastrique.

Claims

REVENDICATIONS
1. Utilisation, en association, d'une activité de purine et d'une activité d'AINS, comme ingrédients actifs dans la préparation d'un médicament destiné à combattre l'inflammation et/ou les thromboses.
2. Utilisation selon la revendication 1 dans laquelle ledit médicament est destiné à combattre la resténose induite après angioplastie.
3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ladite activité de purine est apportée par l'adénosine, la guanosine, l'inosine ou un nucléotide correspondant.
4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite activité de purine est apportée par l'adénosine ou l'AMP.
5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite activité d'AINS est apportée par un produit anti-inflammatoire choisi parmi les dérivés d'acides aminoarylcarboxyliques, d'acides arylacétiques, d'acides arylbutyriques, d'acides arylcarboxyhques, d'acides arylpropioniques, d'acide salicylique, les dérivés de pyrazole ou de pyrazolone et les dérivés de thiazinecarboxamides, ainsi que les esters nitriques et les dérivés nitro et nitroso d'AINS.
6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite activité est apportée par l'acide acétylsalicylique, l'acide salicylique, l'ibuprofène, le naproxène, le diclofénac, le sulindac, le celecoxib, le rofecoxib, la nabumetone, ou leurs sels.
7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit médicament est présenté sous une forme pharmaceutique permettant l'administration, par jour, de 10 à 1000 mg de purine et de 10 à 3000 mg d'AINS.
8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit médicament présente l'une au moins des caractéristiques suivantes :
- ledit médicament contient lesdits ingrédients actifs, de façon séparée, dans un même emballage, - ledit médicament se présente sous une forme pharmaceutique unique contenant les deux ingrédients actifs,
- ledit médicament se présente sous la forme de gélules, de solutions ou émulsions buvables, de granulés, de gels, de crèmes, de poudres, de tablettes, de comprimés, d'onguents, de solutions ou suspensions injectables, de poudres lyophilisées, de dispositifs transdermiques, de suppositoires, ou de solutions, éventuellement en flacons pressurisés, pour administration par voie nasale ou pulmonaire.
9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit médicament est un produit dans lequel une ou plusieurs molécules de purine ou d'un analogue de purine sont liées par covalence à une ou plusieurs molécules d'AINS, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur.
10. Utilisation selon la revendication 9, présentant l'une au moins des caractéristiques suivantes :
- ledit médicament résulte de l'amidification d'une fonction aminé de la purine, ou de l'estérification d'une ou plusieurs fonctions alcool de la purine, par un AINS à groupe carboxylique ;
- ledit médicament résulte de l'amidification de l'adénosine ou de l'AMP par un AINS à groupe carboxylique ;
- ledit AINS est choisi parmi l'acide acétylsalicylique, l'acide salicylique, le diclofénac, le naproxène, l'ibuprofène, le sulindac et l'acide méfénamique.
11. Utilisation selon la revendication 9 ou 10, dans laquelle ledit produit répond à la formule I : (A-)m (X)p (-B)n (I) dans laquelle A est le reste de la molécule d'un AINS, B est le reste d'une purine et X représente soit une liaison covalente entre A et B, soit un bras espaceur reliant au moins un reste A à au moins un reste B, les liaisons entre ledit bras espaceur et lesdits restes A et B étant des liaisons covalentes, m est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, n est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, et p représente zéro ou un nombre entier au plus égal au plus grand des nombres m et n, ou ledit produit est un sel d'un produit répondant à la formule I.
12. Utilisation selon la revendication 11, dans laquelle les groupes chimiques faisant la liaison entre A et B, ou entre A et X ou entre X et B sont des groupes ester carboxylique, amide carboxylique, ester thiocarboxylique ou amide thiocarboxylique.
13. Utilisation selon la revendication 11 ou 12, dans laquelle l'AINS est choisi parmi l'aspirine, l'acide salicylique, l'ibuprofène, le naproxène, le diclofénac et le sulindac.
14. Produit dans lequel une ou plusieurs molécules de purine sont liées par une liaison chimique, en particulier par covalence, à une ou plusieurs molécules d'AINS, éventuellement par l'intermédiaire d'au moins un bras espaceur.
15. Produit selon la revendication 14, dans lequel ledit AINS est un AINS à groupe carboxylique.
16. Produit selon la revendication 14 ou 15, présentant l'une au moins des caractéristiques suivantes :
- la molécule d'AINS est un ester nitrique ou un dérivé nitro ou nitroso d'un AINS ; ladite purine est choisie parmi l'adénosine et l'AMP.
17. Produit selon l'une quelconque des revendication 14 à 15, dans lequel la liaison covalente est assurée par un groupe ester carboxylique, amide carboxylique, ester thiocarboxylique ou amide thiocarboxylique.
18. Produits selon l'une quelconque des revendications 14 à 17, de formule générale I :
(A-)m (X)p (-B)n (I) dans laquelle A est le reste de la molécule d'un AINS, B est le reste d'une purine et X représente soit une liaison covalente entre A et B, soit un bras espaceur reliant au moins un reste A à au moins un reste B les liaisons entre ledit bras espaceur et lesdits restes A et B étant des liaisons covalentes, m est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, n est un nombre entier pouvant aller de 1 à 3, et p représente zéro ou un nombre entier au plus égal au plus grand des nombres m et n, ou leurs sels.
19. Produit selon la revendication 18, dans lequel la liaison entre A et B, ou entre A et X ou entre X et B, est assurée par un groupe ester carboxylique, amide carboxylique, ester thiocarboxylique ou amide thiocarboxylique.
20. Produit selon l'une quelconque des revendications 18 et 19, choisi parmi les produits d'amidification ou d'estérification de l'adénosine ou de l'AMP par l'acide salicylique, l'acide acétylsalicylique, l'acide méfénamique, le diclofénac, le naproxène, l'ibuprofène ou le sulindac, ou les esters nitriques, les dérivés nitro ou nitroso de ces produits.
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