EP1049810A2 - HEMMUNG DER DURCH MUTIERTES p53 VERURSACHTEN MODULATION VON DNA - Google Patents

HEMMUNG DER DURCH MUTIERTES p53 VERURSACHTEN MODULATION VON DNA

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EP1049810A2
EP1049810A2 EP99910089A EP99910089A EP1049810A2 EP 1049810 A2 EP1049810 A2 EP 1049810A2 EP 99910089 A EP99910089 A EP 99910089A EP 99910089 A EP99910089 A EP 99910089A EP 1049810 A2 EP1049810 A2 EP 1049810A2
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EP
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dna
mut
strand separation
mutated
inhibition
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EP99910089A
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Wolfgang Willi Deppert
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    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
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    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4746—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used p53
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention relates to a method for inhibiting the modulation of DNA caused by mutant p53.
  • the invention further relates to a system for identifying substances which are suitable for such an inhibition.
  • a protein called p53 is present in cells. This is a tumor suppressor that is activated when DNA is damaged. It then binds to promoters of target genes and activates their transcription. As a result, the cells stop growing with subsequent repair of the DNA damage or the death of the cells.
  • p53 is mutated in many tumors. In this form, it often has no tumor suppressor activity. Rather, it even presents itself as a protein that has oncogenic properties.
  • Various attempts have been made to inhibit mutant p53 (hereinafter referred to as mut p53) in its oncogenic properties. However, these attempts did not lead to satisfactory results.
  • the object of the present invention is therefore to provide an agent with which mut p53 is examined and, if appropriate, in its oncogenic agents
  • the present invention thus relates to a method for inhibiting the modulation of DNA caused by mut p53, comprising the inhibition of the binding of mut p53 to DNA with strand separation potential.
  • the present invention is based on the knowledge of the applicant that mut p53, but not wild-type p53, can cause a modulation of a DNA that has a strand separation potential. He found that such DNA is common and is often found in MAR DNA.
  • MAR Microx Attachment Region
  • DNA refers to regulatory elements of higher order of chromatin, by which chromatin is divided into topologically independent "loops", which enables independent spatial and temporal regulation of gene expression and DNA replication.
  • DNA with strand separation potential often comprises the sequence AATATATTT or a variation thereof. In addition to the sequence mentioned, the DNA often also has other AT-rich regions.
  • the modulation of the DNA can be different, for example a solid complex of mut p53 and the DNA or a strand separation of these. He found that the modulation is often a strand separation if the specified sequence and possibly the adjacent sequences have an overall AT character. On the other hand, the modulation often shows up as a solid complex when the
  • these findings are used for a method for inhibiting modulation of DNA caused by mut p53.
  • One such method involves inhibiting mut p53 binding to DNA with strand separation potential.
  • mut p53 encompasses any or part of p53 that can bind to DNA with strand separation potential.
  • p53 can be one which has a mutated core domain and / or a mutated C terminus. Examples of such p53 mutants are Pro273 p53 and MethA p53. Mut p53 can also be one that works together with another
  • DNA with strand separation potential encompasses any DNA which can be modulated by mut p53.
  • the modulation can be different, for example a solid complex of mut p53 and a DNA with strand separation potential or a strand separation thereof.
  • the DNA with strand separation potential can be one which contains one or more copies of the
  • the DNA can also comprise further AT-rich regions.
  • a DNA with strand separation potential is preferably found in MAR-DNA.
  • binding encompasses any manner in which mut p53
  • the binding can be one in which mut p53 binds directly to the DNA.
  • the bond can also be one in which mut p53 is indirect, i.e. about other factors, such as proteins, binds to DNA.
  • inhibitor encompasses any manner in which the binding of mut p53 to DNA with strand separation potential can be inhibited.
  • the type of inhibition will depend on whether the binding of mut p53 to the DNA is direct or indirect. With indirect binding, i.e. Other factors, such as proteins, can be used for inhibition by substances which inhibit the other factors. Substances that inhibit mut p53 can also be added. If mut p53 is bound directly to the DNA, it makes sense to use substances that inhibit mut p53. Such substances can e.g. be those that inhibit a mutated core domain of p53 and / or a mutated C-terminus of p53. Examples of such
  • Substances are the antibodies PAb 240 and PAb 421.
  • a system for identifying substances which are suitable for inhibiting modulation of DNA caused by mut p53.
  • Such a system includes mut p53 and a DNA
  • the above statements apply accordingly to individual components of the system.
  • a modulation of DNA or its inhibition can be determined by conventional methods. For example, DNA strand separation or complex formation and their inhibition by an EMSA
  • Electrophoretic Mobility Shift Assay (“Electrophoretic Mobility Shift Assay”) test can be determined. For this purpose, it makes sense to incubate mut p53 with labeled, double-stranded DNA, which has a strand separation potential, and to separate the mixture electrophoretically, as a result of which the formation of single-stranded DNA or a complex and their inhibitions become visible.
  • Such a modulation can be a solid complex of mut p53 and a DNA with strand separation potential or a DNA strand separation thereof.
  • the modulation of DNA plays a major role in many processes in the cell. For example, DNA strand separation is an essential step in the expression of genes and the replication of DNA. DNA strand separation is subject to strong control. This control is overridden by mut p53. This clears the way for the cell to degenerate, i.e. can lead to tumor formation.
  • the present invention it is possible to intervene therapeutically in diseases in which mut p53 causes a modulation of DNA.
  • diseases are especially tumor diseases.
  • the present invention is characterized in that it creates the possibility of identifying substances which are suitable for the inhibition of modulation of DNA caused by mut p53, in particular in tumors. Such substances are also an object of the present invention.
  • Fig. 2 shows the DNA strand separation caused by mut p53
  • FIG. 3 shows the complex formation caused by mut p53 in MAR5 DNA
  • FIG. 4 shows the complex formation caused by mut p53 in MAR7 and MAR8 DNA
  • Fig. 5 shows the inhibition of DNA strand separation caused by mut p53 in MARI-DNA.
  • the modulation of DNA is shown in the form of a DNA strand separation or complex formation.
  • Enhancer region of the gene for the heavy immunoglobulin chain lies two MAR regions were designed in the form of oligonucleotides. It was MARI, i.e. 3 'flanking region of the enhancer, and MARII, i.e. 5 'flanking region of the enhancer.
  • the oligonucleotides had the following sequences:
  • MARI has the sequence AATATATTT given above. MARII shows a variation of this sequence, whereby the overall AT character is not changed.
  • oligonucleotides were designed which have variations of MARI in such a way that the overall AT character is weakened. These oligonucleotides had the following sequences: MAR6: ACTATGCTT MAR7: GCTCTCTTT
  • oligonucleotides were designed which have the sequence of MARI together with adjacent "GC clamps".
  • the overall AT character was weakened by the "GC clamps”.
  • the oligonucleotides were synthesized, 32p-end labeled, and annealed to give them double-stranded. These were incubated with wild type p53 or mut p53, eg MethA p53 or Pro 273 p53, and subjected to an EMSA test. The procedure was as follows:
  • mut p53 e.g. MethA p53 or Pro 273 p53
  • a modulation of DNA e.g. Strand separation or complex formation in DNA with strand separation potential.
  • an agent which inhibits the binding of mut p53 to a DNA with strand separation potential such as the antibodies PAb 421 and PAb 240, can be inhibited by DNA strand separation induced by mut p53.

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA, umfassend die Inhibierung der Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential. Ferner betrifft die Erfindung ein System zur Identifizierung von Substanzen, die sich zu einer solchen Hemmung eignen.

Description

Hemmung der durch mutiertes p53 verursachten Modulation von DNA
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Hemmung der durch mutiertes p53 verursachten Modulation von DNA. Ferner betrifft die Erfindung ein System zur Identifizierung von Substanzen, die sich zu einer solchen Hemmung eignen.
In Zellen liegt ein mit p53 bezeichnetes Protein vor. Dieses ist ein Tumor- suppressor, der bei DNA-Schäden aktiviert wird. Er bindet dann an Promotoren von Zielgenen und aktiviert deren Transkription. Dadurch wird ein Wachstumsstillstand der Zellen mit anschließender Reparatur der DNA-Schäden bzw. der Tod der Zellen erreicht.
Es hat sich gezeigt, daß p53 in vielen Tumoren mutiert ist. In dieser Form weist es oft keine Tumorsuppressor-Aktivität auf. Vielmehr stellt es sich sogar als Protein dar, das onkogene Eigenschaften aufweist. Verschiedene Versuche wur- den unternommen, mutiertes p53 (nachstehend mit mut p53 bezeichnet) in seinen onkogenen Eigenschaften zu inhibieren. Diese Versuche führten allerdings nicht zu befriedigenden Ergebnissen.
Der vorliegenden Erfindung liegt somit die Aufgabe zugrunde, ein Mittel bereitzu- stellen, mit dem mut p53 untersucht und gegebenenfalls in seinen onkogenen
Eigenschaften inhibiert werden kann.
Erfindungsgemäß wird dies durch die Gegenstände in den Patentansprüchen erreicht.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit ein Verfahren zur Hemmung der durch mut p53 verursachten Modulation von DNA, umfassend die Inhibierung der Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential.
Die vorliegende Erfindung beruht auf der Erkenntnis des Anmelders, daß mut p53, nicht aber Wildtyp-p53 eine Modulation einer DNA verursachen kann, die ein Strangtrennungspotential aufweist. Er hat gefunden, daß solche DNA verbreitet ist und häufig in MAR-DNA vorliegt. Mit MAR ("Matrix Attachment Region")-DNA werden regulatorische Elemente höherer Ordnung von Chromatin bezeichnet, durch die Chromatin in topologisch unabhängige "Loops" eingeteilt wird, was eine unabhängige räumliche und zeitliche Regulation der Genexpression und der DNA-Replikation ermöglicht. Ferner hat der Anmelder gefunden, daß DNA mit Strangtrennungspotential häufig die Sequenz AATATATTT oder eine Variation davon umfaßt. Vielfach weist die DNA neben der genannten Sequenz auch weitere AT-reiche Bereiche auf. Des weiteren hat er erkannt, daß die Modulation der DNA unterschiedlich, z.B. ein fester Komplex aus mut p53 und der DNA oder eine Strangtrennung dieser, sein kann. Er hat gefunden, daß die Modulation häufig eine Strangtrennung ist, wenn die angegebene Sequenz und ggfs. die angrenzenden Sequenzen einen AT-Gesamtcharakter aufweisen. Andererseits zeigt sich die Modulation oft als fester Komplex, wenn bei den
Sequenzen kein oder nur ein schwacher AT-Gesamtcharakter vorliegt. Darüber hinaus hat der Anmelder gefunden, daß die durch mut p53 verursachte Modulation von DNA gehemmt werden kann, wenn die Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential inhibiert wird.
Erfindungsgemäß werden diese Erkenntnisse für ein Verfahren zur Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA genutzt. Ein solches Verfahren umfaßt die Inhibierung der Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential.
Der Ausdruck "mut p53" umfaßt jegliches p53 oder einen Teil davon, das bzw. der an DNA mit Strangtrennungspotential binden kann. Insbesondere kann p53 ein solches sein, das eine mutierte Core-Domäne und/oder einen mutierten C- Terminus aufweist. Beispiele solcher p53 Mutanten sind Pro273 p53 und MethA p53. Auch kann mut p53 ein solches sein, das zusammen mit einem anderen
Protein in einem Fusionsprotein vorliegt. Der Ausdruck "DNA mit Strangtrennungspotential" umfaßt jegliche DNA, die durch mut p53 eine Modulation erfahren kann. Die Modulation kann unterschiedlich, z.B. ein fester Komplex aus mut p53 und einer DNA mit Strangtrennungspotential oder eine Strangtrennung dieser sein. Insbesondere kann die DNA mit Strangtrennungspotential eine solche sein, die ein oder mehrere Kopien der
Sequenz AATATATTT oder einer Variation davon umfaßt. Ferner kann die DNA auch weitere AT-reiche Bereiche umfassen. Eine DNA mit Strangtrennungspotential findet sich vorzugweise in MAR-DNA.
Der Ausdruck "Bindung" umfaßt jegliche Art und Weise, mit der mut p53 an
DNA mit Strangtrennungspotential binden kann. Insbesondere kann die Bindung eine solche sein, bei der mut p53 direkt an die DNA bindet. Auch kann die Bindung eine solche sein, bei der mut p53 indirekt, d.h. über andere Faktoren, wie Proteine, an die DNA bindet.
Der Ausdruck "Inhibierung" umfaßt jegliche Art und Weise, mit der die Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential inhibiert werden kann. Die Art der Inhibierung wird davon abhängen, ob die Bindung von mut p53 an die DNA direkt oder indirekt ist. Bei indirekter Bindung, d.h. über weitere Faktoren, wie Proteine, kann die Inhibierung durch Substanzen erfolgen, welche die weiteren Faktoren inhibieren. Auch können Substanzen hinzugegeben werden, welche mut p53 inhibieren. Bei direkter Bindung von mut p53 an die DNA erscheint es sinnvoll, Substanzen zu verwenden, die mut p53 inhibieren. Solche Substanzen können z.B. jene sein, die eine mutierte Core-Domäne von p53 und/oder einen mutierten C-Terminus von p53 inhibieren. Beispiele solcher
Substanzen sind die Antikörper PAb 240 und PAb 421 .
Erfindungsgemäß wird auch ein System zur Identifizierung von Substanzen bereitgestellt, die sich zur Hemmung von durch mut p53 verursachten Modula- tion von DNA eignen. Ein solches System umfaßt mut p53 und eine DNA mit
Strangtrennungspotential sowie gegebenenfalls eine Substanz, deren Hemmwirkung auf die Bindung von mut p53 an eine DNA mit Strangtrennungspotential getestet wird. Hinsichtlich einzelner Komponenten des Systems gelten die vorstehenden Ausführungen entsprechend. Des weiteren wird darauf hingewiesen, daß eine Modulation von DNA bzw. deren Hemmung durch übliche Verfahren bestimmt werden kann. Beispielsweise kann eine DNA-Strangtrennung bzw. eine Komplexbildung und deren Hemmungen durch einen EMSA
("Electrophoretic Mobility Shift Assay")-Test bestimmt werden. Hierzu bietet es sich an, mut p53 mit markierter, doppelsträngiger DNA zu inkubieren, die ein Strangtrennungspotential aufweist, und das Gemisch elektrophoretisch aufzutrennen, wodurch die Bildung von einzelsträngiger DNA bzw. eines Komplexes und deren Hemmungen sichtbar werden.
Mit der vorliegenden Erfindung ist es möglich, die durch mut p53 verursachte Modulation von DNA zu hemmen. Eine solche Modulation kann ein fester Komplex aus mut p53 und einer DNA mit Strangtrennungspotential oder eine DNA- Strangtrennung dieser sein. Die Modulation von DNA spielt eine große Rolle bei vielen Prozessen in der Zelle. Beispielsweise ist die DNA-Strangtrennung ein wesentlicher Schritt bei der Expression von Genen und der Replikation von DNA. Die DNA-Strangtrennung unterliegt einer starken Kontrolle. Durch mut p53 wird diese Kontrolle außer Kraft gesetzt. Damit ist ein Weg frei, der zur Entartung der Zelle, d.h. zur Tumorbildung, führen kann.
Mit der vorliegenden Erfindung ist es möglich bei Erkrankungen, bei denen mut p53 eine Modulation von DNA verursacht, therapeutisch einzugreifen. Solche Erkrankungen sind insbesondere Tumorerkrankungen. Des weiteren zeichnet sich die vorliegende Erfindung dadurch aus, daß sie die Möglichkeit schafft, Substanzen zu identifizieren, die sich für die Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA, insbesondere bei Tumoren, eignen. Solche Substanzen sind ebenfalls ein Gegenstand der vorliegenden Erfindung.
Kurze Beschreibung der Zeichnungen:
Fig. 1 zeigt die durch mut p53 verursachte DNA-Strangtrennung bei MARI-DNA,
Fig. 2 zeigt die durch mut p53 verursachte DNA-Strangtrennung bei
MARII-DNA, Fig. 3 zeigt die durch mut p53 verursachte Komplexbildung bei MAR5-DNA, Fig. 4 zeigt die durch mut p53 verursachte Komplexbildung bei MAR7- und MAR8-DNA, und
Fig. 5 zeigt die Hemmung der durch mut p53 verursachten DNA-Strangtrennung bei MARI-DNA.
Die Erfindung wird durch das nachstehende Beispiel erläutert.
Beispiel: Modulation von DNA durch mut p53 und deren Hemmung
Die Modulation von DNA wird in Form einer DNA-Strangtrennung bzw. einer Komplexbildung gezeigt.
(a) Induktion von DNA-Strangtrennung bzw. einer Komplexbildung durch mut p53
Aus dem 997 bp Xbal-lgE MAR-Fragment, das in der
Enhancer-Region des Gens für die schwere Immunglobulin- Kette liegt, wurden zwei MAR-Regionen in Form von Oligo- nukleotiden konzipiert. Es handelte sich um MARI, d.h. 3'- flankierende Region des Enhancer, und MARII, d.h. 5'- flankierende Region des Enhancer. Die Oligonukleotide hatten folgende Sequenzen:
MARI IgH Enhancer 5'-
3'-flankierende Region AGTGTCTTTAATTTCTAA^ TATATTTAGAAAACTGC
G-3' MARII IgH Enhancer 5'- 5'-flankierende Region TTTTAACAATAATAAAT-
TAAGTTTAAAATATTT-
GCG -3'
MARI weist die vorstehend angegebene Sequenz AATATATTT auf. MARII weist eine Variation dieser Sequenz auf, wobei der AT-Gesamtcharakter nicht verändert ist.
Ferner wurden Oligonukleotide konzipiert, die Variationen von MARI aufweisen derart, daß der AT-Gesamtcharakter abgeschwächt ist. Diese Oligonukleotide hatten folgende Sequenzen: MAR6: ACTATGCTT MAR7: GCTCTCTTT
Des weiteren wurden Oligonukleotide konzipiert, welche die Sequenz von MARI zusammen mit angrenzenden "GC- clamps" aufweisen. Durch die "GC-clamps" wurde der AT- Gesamtcharakter abgeschwächt.
Die Oligonukleotide wurden synthetisiert, 32p-endmarkiert und einer Annealing-Reaktion unterzogen, wodurch sie doppelsträngig erhalten wurden. Diese wurden mit Wildtyp p53 bzw. mut p53, z.B. MethA p53 bzw. Pro 273 p53, inkubiert und einem EMSA-Test unterzogen. Hierzu wurde wie folgt vorgegangen:
Gemische, die Wildtyp p53, MethA p53 bzw. Pro 273 p53 enthielten, wurden 20 min mit 2 μg Poly dl:dC (nichtspezifischer Kompetitor) in 10 mM Hepes pH 7,8; 50 mM KCI; 1 mM EDTA; 5mM MgCI2; 10 % Glycerin vorinkubiert. Nach der Vorinkubation wurden die markierten Oligonukleotide hinzugegeben und die Gemische 30 min bei Raumtemperatur inkubiert. Danach wurden die Gemische einer dreistündigen 4 % nativen Polyacrylamid-Gelelektrophorese unterzogen , bevo r d ie Gele getroc knet u nd a uto- radiographiert wurden (vgl. Fig. 1 - 4) .
Es zeigt sich, daß mut p53, z.B. MethA p53 bzw. Pro 273 p53, eine Modulation von DNA, z.B. Strangtrennung bzw. Komplexbildung bei DNA mit Strangtrennungspotential, verursachen kann.
(b) Hemmung durch mut p53 verursachte DNA-Strangtrennung
Es wurde, wie unter (a) beschrieben, vorgegangen, mit Ausnahme, daß Gemische von MethA p53 auch die Antikörper PAb 421 bzw. PAb 240 enthielten. Als Oligonukleotide wurden jene verwendet, die MARI-DNA enthielten (vgl. Fig. 5).
Es zeigt sich, daß durch ein die Bindung von mut p53 an eine DNA mit Strangtrennungspotential inhibierendes Mittel, wie die Antikörper PAb 421 bzw. PAb 240, die durch mut p53 induzierte DNA-Strangtrennung gehemmt werden kann.

Claims

Patentansprüche
1 . Verfahren zur Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA, umfassend die Inhibierung der Bindung von mut p53 an DNA mit Strangtrennungspotential.
2. Verfahren nach Anspruch 1 , wobei die Modulation ein fester Komplex aus mut p53 und der DNA mit Strangtrennungspotential ist.
3. Verfahren nach Anspruch 1 , wobei die Modulation eine Strangtrennung der DNA mit Strangtrennungspotential ist.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -3, wobei mut p53 eine mutierte Core-Domäne aufweist.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -3, wobei mut p53 einen mutierten C-Terminus aufweist.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -5, wobei die DNA mit Strangtrennungspotential die Sequenz AATATATTT oder eine Variation davon umfaßt.
7. Verfahren nach Anspruch 6, wobei die Variation die Sequenz AAAA- TATTT umfaßt.
8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -7, wobei die DNA mit Strang- trennungspotential in MAR-DNA vorliegt.
9. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -4 und 6-8, wobei die Inhibierung durch eine Substanz erfolgt, die eine mutierte Core-Domäne von p53 inhibiert.
0. Verfahren nach Anspruch 9, wobei die Substanz der Antikörper PAb240 ist.
1 1 . Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -3 und 5-8 , wobei die Inhibierung durch eine Substanz erfolgt, die einen mutierten C-Terminus von p53 inhibiert.
1 2. Verfahren nach Anspruch 1 1 , wobei die Substanz der Antikörper Pab421 ist.
1 3. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -8, wobei die Inhibierung durch Substanzen erfolgt, die eine mutierte Core-Domäne und einen mutierten C-Terminus von p53 inhibieren.
14. Verfahren nach Anspruch 1 3, wobei die Substanzen die Antikörper
PAb240 und PAb421 sind.
1 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 -14, wobei die Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA in der Therapie von Erkrankungen erfolgt.
1 6. Verfahren nach Anspruch 1 5, wobei die Erkrankung eine Tumorerkrankung ist.
1 7. System zur Identifizierung von Substanzen, die sich zur Hemmung von durch mut p53 verursachten Modulation von DNA eignen, umfassend mut p53 und eine DNA mit Strangtrennungspotential.
1 8. System nach Anspruch 1 7, wobei das System ferner eine Substanz umfaßt, deren Hemmwirkung auf die Bindung von mut p53 an eine DNA mit Strangtrennungspotential getestet wird.
1 9. System nach Anspruch 1 7 oder 1 8, wobei mut p53 eine mutierte Core- Domäne aufweist.
20. System nach Anspruch 1 7 oder 1 8, wobei mut p53 einen mutierten C- Terminus aufweist.
21 . System nach einem der Ansprüche 1 7-20, wobei die DNA mit Strangtrennungspotential in MAR-DNA vorliegt.
22. System nach einem der Ansprüche 1 7-21 , wobei die DNA mit Strangtrennungspotential die Sequenz AATATATTT oder eine Variation davon umfaßt.
23. System nach Anspruch 22, wobei die Variation die Sequenz AAAATATTT umfaßt.
EP99910089A 1998-01-26 1999-01-22 HEMMUNG DER DURCH MUTIERTES p53 VERURSACHTEN MODULATION VON DNA Withdrawn EP1049810A2 (de)

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