EA033647B1 - Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение - Google Patents

Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение Download PDF

Info

Publication number
EA033647B1
EA033647B1 EA201790119A EA201790119A EA033647B1 EA 033647 B1 EA033647 B1 EA 033647B1 EA 201790119 A EA201790119 A EA 201790119A EA 201790119 A EA201790119 A EA 201790119A EA 033647 B1 EA033647 B1 EA 033647B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
oil
coix seed
injection
olein
seed oil
Prior art date
Application number
EA201790119A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201790119A1 (ru
Inventor
Dapeng Li
Original Assignee
Zhejiang Kanglaite Group Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang Kanglaite Group Co Ltd filed Critical Zhejiang Kanglaite Group Co Ltd
Publication of EA201790119A1 publication Critical patent/EA201790119A1/ru
Publication of EA033647B1 publication Critical patent/EA033647B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A61K31/231—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms having one or two double bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/899—Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
    • A61K36/8994—Coix (Job's tears)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/24—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing atoms other than carbon, hydrogen, oxygen, halogen, nitrogen or sulfur, e.g. cyclomethicone or phospholipids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4816—Wall or shell material
    • A61K9/4825—Proteins, e.g. gelatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4833—Encapsulating processes; Filling of capsules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/4858—Organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/02—Esters of acyclic saturated monocarboxylic acids having the carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or to hydrogen
    • C07C69/22—Esters of acyclic saturated monocarboxylic acids having the carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or to hydrogen having three or more carbon atoms in the acid moiety
    • C07C69/30—Esters of acyclic saturated monocarboxylic acids having the carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or to hydrogen having three or more carbon atoms in the acid moiety esterified with trihydroxylic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/52—Esters of acyclic unsaturated carboxylic acids having the esterified carboxyl group bound to an acyclic carbon atom
    • C07C69/533—Monocarboxylic acid esters having only one carbon-to-carbon double bond
    • C07C69/58—Esters of straight chain acids with eighteen carbon atoms in the acid moiety
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/52—Esters of acyclic unsaturated carboxylic acids having the esterified carboxyl group bound to an acyclic carbon atom
    • C07C69/587—Monocarboxylic acid esters having at least two carbon-to-carbon double bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
    • C11B1/10—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting
    • C11B1/104—Production of fats or fatty oils from raw materials by extracting using super critical gases or vapours
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/001—Refining fats or fatty oils by a combination of two or more of the means hereafter
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/006—Refining fats or fatty oils by extraction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B3/00—Refining fats or fatty oils
    • C11B3/008—Refining fats or fatty oils by filtration, e.g. including ultra filtration, dialysis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/37—Extraction at elevated pressure or temperature, e.g. pressurized solvent extraction [PSE], supercritical carbon dioxide extraction or subcritical water extraction
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/54—Improvements relating to the production of bulk chemicals using solvents, e.g. supercritical solvents or ionic liquids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к маслу семян коикса, экстрагированному из Semen Coicis, его фармацевтическим препаратам и его применению для лечения опухолей. B частности, масло семян коикса содержит 11 триглицеридных ингредиентов в следующих мас.%: 4,87-6,99 трилинолеина, 13,00-18,69 1-олеин-2,3-дилинолеина, 5,25-7,54 1-пальмитин-2,3-дилилолеина, 13,23-19,02 1,3-диолеин-2-линолеина, 10,26-14,75 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина, 2,28-3,28 1,3-дипальмитин-2-линолеина, 14,44-20,76 триолеина, 8,06-11,58 1-пальмитин-2,3-диолеина, 1,37-1,97 1-олеин-2-линолеин-3-стеарина, 1,52-2,19 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,29-1,86 1,2-диолеин-3-стеарина.

Description

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к области фармацевтики, в частности настоящее изобретение относится к маслу семян коикса, его фармацевтическим препаратам, способу их получения и их применению для получения противоопухолевых лекарственных средств.
Область техники
Семена коикса представляют собой высушенные спелые семена Coix lacryma-jobi L. var ma-yuen (Roman.), Stapf, рода растений семейства злаковых. Это мочегонное лекарственное средство, которое использовалось в качестве лекарства и в качестве съедобного растения на протяжении долгого времени. Современные исследования показали, что для семян коикса характерно множество фармакологических эффектов, таких как анальгетический противовоспалительный, иммуномодулирующий, противоязвенный, гиполипидемический эффект и эффект против ожирения. В последние несколько лет исследователи во всем мире изучали химический состав семян коикса с использованием ТСХ, ВЭЖХ-МС, ГХ и т.д. и обнаружили в нем множество активных ингредиентов, включая коиксенолид, триглицериды, жирные кислоты, лактамы, коикс лактоны, сахариды, стеролы и тритерпеноиды. Среди них первыми обнаруженными компонентами, обладающими противоопухолевыми активностями и наиболее изученным химическим составом, привлекающими больше всего внимания, являются сложные эфиры. Инъекция Канглайта, в которой активный ингредиент представляет собой масло семян коикса, широко используется в клинических применениях в настоящее время в Китае, однако масло семян коикса, используемое в инъекции Канглайта, содержит сложные компоненты. В дополнение к триглицеридам она также содержит моноглицериды, диглицериды и эфиры жирных кислот и т.д. Это неизбежно будет являться серьезной проблемой с точки зрения контроля качества в практическом производственном процессе и безопасности в клинических применениях.
В настоящем изобретении сырьевой материал порошка семян коикса обрабатывали посредством сверхкритической экстракции диоксидом углерода, базификации, очистке нейтральным оксидом алюминия и очистке каолином и т.д. для получения эффективной части - масла семян коикса. После выделения и идентификации активных ингредиентов было установлено, что масло семян коикса содержит главным образом 11 триглицеридных компонентов. Дальнейшее определение его физико-химических констант позволило установить оптимальное кислотное число, йодное число, число омыления, показатель преломления, удельный вес и т.д. Использование масла семян коикса согласно изобретению в лекарственных средствах имеет такие преимущества, как подтвержденный состав ингредиентов, обеспечивающий стабильность качества каждой партии в условиях промышленного производства, и отсутствие токсических и побочных эффектов, обусловленных комплексом ингредиентов при прямом приеме масла семян коикса.
Краткое описание изобретения
Первый аспект изобретения заключается в обеспечении масла семян коикса, экстрагированного из Semen Coicis. Масло семян коикса содержит 11 триглицеридных ингредиентов в следующих мас.%: 4,876,99 трилинолеина, 13,00-18,69 1-олеин-2,3-дилинолеина, 5,25-7,54 1-пальмитин-2,3-дилилолеин, 13,2319,02 1,3-диолеин-2-линолеина, 10,26-14,75 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина, 2,28-3,28 1,3дипальмитин-2-линолеина, 14,44-20,76 триолеина, 8,06-11,58 1-пальмитин-2,3-диолеина, 1,37-1,97 1олеин-2-линолеин-3-стеарина, 1,52-2,19 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,29-1,86 1,2-диолеин-3-стеарина.
Предпочтительно массовое процентное содержание вышеуказанных 11 триглицеридных ингредиентов составляет: 5,47-6,69 трилинолеина, 14,63-17,88 1-олеин-2,3-дилилолеина, 5,90-7,21 1-пальмитин-
2,3-дилинолеина, 14,88-18,19 1,3-диолеин-2-линолеина, 11,55-14,11 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина, 2,57-3,14 1,3-дипальмитин-2-линолеина, 16,25-19,86 триолеина, 9,07-11,08 1-пальмитин-2,3-диолеина, 1,54-1,88 1-олеин-2-линеолеин-3-стеарина, 1,71-2,09 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,45-1,78 1,2-диолеин3-стеарина.
Более предпочтительно массовое процентное содержание вышеуказанных 11 триглицеридных ингредиентов составляет: 5,96-6,20 трилинолеина, 15,93-16,58 1-олеин-2,3-дилилолеина, 6,43-6,69 1пальмитин-2,3-дилинолеина, 16,20-16,87 1,3-диолеин-2-линолеина, 12,57-13,09 1-пальмитин-2-линолеин3-олеина, 2,79-2,91 1,3-дипальмитин-2-линолеина, 17,69-18,42 триолеина, 9,87-10,27 1-пальмитин-2,3диолеина, 1,68-1,74 1-олеин-2-линеолеин-3-стеарина, 1,86-1,94 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,58-1,65 1,2диолеин-3-стеарина.
Вышеуказанные содержания относится к массовому процентному содержанию триглицеридных соединений в масле семян коикса. 11 триглицеридных мономерных соединений с помощью препаративной хроматографии могут быть выделены из масла семян коикса, полученного с помощью следующих стадий, и их содержание может быть измерено путем взвешивания и расчета продуктов. Они также могут быть получены в соответствии с общепринятыми аналитическими методами, известными в области техники.
Масло семян коикса имеет следующие физико-химические константы, основанные на обнаружении жирного масла: удельный вес при 20°C составляет 0,917-0,920, показатель преломления при 20°C составляет 1,471-1,474, кислотное число составляет менее 0,2, йодное число составляет 100-106, число омыления составляет 188-195.
Масло семян коикса по изобретению может быть получено способом, включающим следующие стадии:
- 1 033647 (1) сверхкритическая экстракция диоксидом углерода:
измельчение семян коикса в порошок с размером частиц 20-60 меш и экстракция порошка с использованием сверхкритической системы экстракции CO2, в которой порошок семян коикса помещают в экстрактор; подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревают горячей водой, циркулирующей в рубашке, для достижения температуры экстракции и температуры разделения 33-45 и 30-45°C соответственно; температуру на выходе сепаратора I и сепаратора II поддерживают на уровне 20-50 и 1535°C соответственно; жидкий CO2 подают под давлением при расходе от 2,5 до приблизительно 7,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса) в подогреватель CO2 через насос высокого давления, превращая его в флюид в сверхкритическом состоянии; в экстракторе масло экстрагируют флюидом CO2 под давлением 19-23 МПа; затем флюид CO2 с этим маслом поступает в разделительную колонку, в которой давление контролируют на уровне 7-10 МПа для отделения этого масла; газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступает в сепаратор I и сепаратор II, в которых давление поддерживают на уровне 5-7 и 4-6 МПа соответственно; примеси, такие как вода, отделяют и удаляют; посредством конденсатора газообразный CO2 превращают в жидкий CO2 для повторного использования; непрерывная экстракция в течение 2-3 ч приводит к получению неочищенного масла коикса;
(2) процесс очистки:
добавление 55% петролейного эфира (температура кипения 60-90°C) относительно массы масла в неочищенное масло семян коикса, полученное сверхкритической экстракцией CO2; добавление 2% водного раствора NaOH в количестве от 36 до 56% относительно массы масла в соответствии с кислотным числом; после перемешивания смеси в течение 10 мин и выдерживания в течение 18-24 ч - удаление нижнего грязного слоя; промывание верхнего слоя очищенной водой и выдерживание в течение 18-24 ч; после удаления нижнего слоя отработанной воды повторное промывание верхнего слоя; после выдерживания в течение еще 40-50 ч удаление нижнего слоя отработанной воды; деэмульгирование верхнего слоя ацетоном в количестве 70-90% относительно массы масла; после выдерживания в течение 2-4 ч - удаление нижнего слоя отработанного ацетона и добавление от 3 до 8% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла в верхний масляный слой; перемешивание смеси в течение 30 мин, затем фильтрование осадка; нагревание фильтрата и добавление от 2 до 6% активированного каолина относительно массы неочищенного масла; перемешивание смеси в течение 30 мин при 40-50°C и последующее фильтрование осадка; концентрирование фильтрата при пониженном давлении для удаления растворителя, затем повторное промывание очищенной водой; после выдерживания в течение 1-2 ч -удаление нижнего слоя отработанной воды, нагревание верхнего масляного слоя и его вакуумная сушка в атмосфере азота; затем добавление 8-12% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивание смеси и выдерживание в холодном месте; после фильтрования стерилизация отфильтрованного масла путем сухого нагревания в вакууме при 160170°C в течение 1-2 ч; после охлаждения фильтрование масла через 0,2 мкм микропористую мембрану; затем раздельная загрузка полученного масла семян коикса в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и герметизация колб.
Предпочтительно процесс очистки включает следующие стадии: добавление 55% петролейного эфира (температура кипения 60-90°C) относительно массы масла в неочищенное масло семян коикса, полученное сверхкритической экстракцией CO2; добавление 2% водного раствора NaOH в количестве от 36 до 56% относительно массы масла в соответствии с кислотным числом; после перемешивания смеси в течение 10 мин и выдерживания в течение 20 ч - удаление нижнего грязного слоя; промывание верхнего слоя очищенной водой и выдерживание в течение 22 ч; после удаления нижнего слоя отработанной воды повторное промывание верхнего слоя; после выдерживания в течение еще 46 ч - удаление нижнего слоя отработанной воды; деэмульгирование верхнего слоя ацетоном в количестве 70-90% относительно массы неочищенного масла и выдерживание в течение 3 ч; удаление нижнего слоя отработанного ацетона и добавление 5% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла в верхний масляный слой; перемешивание смеси в течение 30 мин, затем фильтрование осадка; нагревание фильтрата и добавление от 4% активированного каолина относительно массы неочищенного масла; перемешивание смеси в течение 30 мин при 40-50°C и последующее фильтрование осадка; концентрирование фильтрата при пониженном давлении для удаления растворителя, затем повторное промывание очищенной водой; после выдерживания в течение 1 ч - удаление нижнего слоя отработанной воды; нагревание верхнего масляного слоя и его вакуумная сушка в атмосфере азота; затем добавление 10% активированного нейтрального оксида алюминия, перемешивание смеси и выдерживание в холодном месте; после фильтрования стерилизация фильтрованного масла путем сухого нагревания в вакууме при 160-170°C в течение 2 ч; после охлаждения фильтрование масла через 0,2 мкм микропористую мембрану; затем раздельная загрузка полученного масла семян коикса в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и герметизация колб.
Масло семян коикса согласно изобретению представляет собой желтоватую прозрачную жидкость с легким запахом и легким вкусом. Оно хорошо растворимо в петролейном эфире или хлороформе, легко растворимо в ацетоне, слаборастворимо в этаноле, но нерастворимо в воде.
Масло семян коикса, полученное на основе вышеуказанных способов, было обнаружено согласно
- 2 033647 способу, приведенному в приложении к Фармакопее Китайской Народной Республики (издание 2010 г.), том I. Его физико-химические константы таковы: удельный вес при 20°C составляет 0,917-0,920, показатель преломления при 20°C составляет 1,471-1,474, кислотное число составляет менее 0,2, йодное число составляет 100-106, число омыления составляет 188-195. Кислотное число согласно Фармакопее относится к массе гидроксида калия (в миллиграммах), необходимой для нейтрализации свободных жирных кислот, содержащихся в 1 г жиров, жирных масел или других подобных веществ. В качественном исследовании маслопродуктов кислотное число играет важную роль. Что касается масла семян коикса согласно изобретению, кислотное число составляет менее 0,2. Путем оптимизации способа получения, таким как оптимизация параметров сверхкритической экстракции, и способа очистки, такого как подщелачивание, было получено масло семян коикса, обладающее следующими преимуществами: с одной стороны, оно имеет очень низкое содержание примесей свободных жирных кислот, что означает высокое качество продукта; с другой стороны, в нем содержится большое количество активных ингредиентов триглицеридов высокой степени чистоты, и типы триглицеридных ингредиентов в них являются определимыми и их содержание является стабильным. Кроме того, другие физико-химические константы, такие как число омыления, йодное число и т.д., измеренные для разных партий образцов, различались в небольшом диапазоне. Это дополнительно подтверждает, что для масла семян коикса согласно изобретению характерно стабильное качеством и более безопасное клиническое применение. Способ получения по настоящему изобретению приводит к получению стабильного продукта с высоким выходом и низкой стоимостью. Он подходит для промышленного производства с точки зрения безопасности и контроля.
Второй аспект изобретения заключается в обеспечении фармацевтического препарата, содержащего масло семян коикса, в частности он содержит терапевтически эффективное количество масла семян коикса согласно изобретению и одного или более фармацевтически приемлемых носителей.
Фармацевтически приемлемые носители могут быть выбраны из фармацевтических общеизвестных разбавителей, эксципиентов, наполнителей, эмульгаторов, связующих веществ, смазывающих веществ, ускорителей абсорбции, поверхностно-активных веществ, разрыхлителей, смазывающих веществ и антиоксидантов, если необходимо, ароматизаторов, подсластителей, консервантов и/или красителей.
Фармацевтически приемлемые носители могут быть выбраны из одного или более из группы, состоящей из маннита, сорбита, метабисульфита натрия, бисульфита натрия, тиосульфата натрия, цистеина гидрохлорида, тиогликолевой кислоты, метионина, соевого лецитина, витамина C, витамина E, динатриевой ЭДТА, кальций натриевой ЭДТА, карбоната одновалентного щелочного металла, ацетата, фосфата или его водного раствора, соляной кислоты, уксусной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, аминокислоты, хлорида натрия, хлорида калия, лактата натрия, раствора этилпарабена, бензойной кислоты, сорбата калия, хлоргексидин ацетата, ксилита, мальтозы, глюкозы, фруктозы, декстрана, глицина, крахмала, сахарозы, лактозы, маннита, кремневых производных, целлюлозы и ее производных, альгинатов, желатина, поливинилпирролидона, глицерина, Твин 80, агар-агара, карбоната кальция, бикарбоната кальция, поверхностно-активных веществ, полиэтиленгликоля, циклодекстрина, β-циклодекстрина, фосфолипидного материала, каолина, талька и стеарата кальция или стеарата магния.
Фармацевтический препарат согласно изобретению может представлять собой пероральные твердые препараты, пероральные жидкие препараты или инъекции.
Предпочтительно пероральный твердый препарат выбирают из любого из капсул, таблеток, микропиллюль, гранул и концентрированных пилюль; пероральный жидкий препарат выбирают из любого из водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров и сухого продукта, который может быть восстановлен водой или другим(и) подходящим(и) носителем(ми) перед применением; и инъекцию выбирают из любой из наносуспензий, липосом, эмульсий, лиофилизированного порошка для инъекции и водной инъекции.
Более предпочтительно инъекция содержит следующие компоненты: 50-350 г масла семян коикса согласно изобретению, 10-40 г соевого лецитина для инъекции или соевого лецитина, пригодного для инъекции, 15-50 г глицерина для инъекции или глицерина, пригодного для инъекции, и воду для инъекций, добавляемую до 1000 мл.
Инъекция согласно изобретению может быть получена способом, включающим следующие стадии: добавление соответствующего количества воды для инъекции к рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции или соевого лецитина, пригодного для инъекции; диспергирование смеси диспергирующим эмульгатором с высоким усилием сдвига с получением дисперсии без крупных фрагментов или гранул; добавление рецептурного количества глицерина для инъекции или глицерина, пригодного для инъекции; затем добавление воды для инъекции до указанного количества и перемешивание смеси до получения водной фазы;
взвешивание рецептурного количества масла семян коикса; раздельное нагревание навески масла и водной фазы до 60-70°C, затем их смешивание и эмульгирование смеси в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляет 5-12 МПа и высокое давление составляет 25-50 МПа; повторение цикла гомогенизации 3-6 раз до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм будет составлять не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не будут обнаруживаться; при необходимости использование NaOH или HCl для доведения pH до 4,8-8,5, предпочтительно 6,8-7,0, наиболее
- 3 033647 предпочтительно 6,8;
фильтрование полученной гомогенной эмульсии под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр 3 мкм или менее; наполнение эмульсией, азотирование, стерилизация и охлаждение для получения инъекции.
Капсула согласно изобретению содержит следующие компоненты: 200-800 г масла семян коикса, 0,20-0,60 г антиоксиданта(ов) и/или эмульгатора(ов) на 1000 капсул.
Капсула согласно изобретению может быть получена способом, включающим следующие стадии: получение раствора клея: взвешивание желатина, очищенной воды, глицерина и консерванта в массовом соотношении 1:0,6-1,2:0,3-0,8:0,0001-0,01; последовательное добавление глицерина, очищенной воды и консерванта (выбранного из любого из 10% раствора этилпарабена, бензойной кислоты, сорбата калия и хлоргексидин ацетата) в резервуар для плавления клея; нагревание до 70-90°C; затем добавление желатина и постоянное перемешивание смеси в вакууме до полного растворения желатина; фильтрация раствора клея и хранение отфильтрованного раствора клея при 56-62°C перед использованием;
приготовление лекарственной жидкости: добавление рецептурного количества масла семян коикса, антиоксиданта (витамина E) и/или эмульгатора (Твин 80) в дозатор и постоянное перемешивание смеси до достижения гомогенности; и прессование капсул: выбор подходящих пресс-форм в зависимости от размера капсулы; прессование капсул при температуре 15-30°C и относительной влажности менее 35%; сушка прессованных и формованных капсул; после удаления капсул ненормального размера промывание капсул нормального размера 95% медицинским этанолом и продолжительная сушка до достижения содержания влаги менее 12%; визуальный контроль и удаление негодных капсул; наконец нанесение печати и упаковка с получением капсул.
В фармакодинамических экспериментах показано, что масло семян коикса согласно изобретению и его фармацевтический препарат проявляют различные степени ингибирования в отношении различных линий опухолевых клеток человека. Они могут быть использованы в качестве противоопухолевых лекарственных средств.
Таким образом, другой аспект изобретения заключается в обеспечении применения масла семян коикса согласно изобретению для получения противоопухолевых лекарственных средств.
Опухоли относится к раку легкого, раку печени, раку поджелудочной железы, раку предстательной железы, раку яичника и раку молочной железы на ранней, средней или поздней стадии.
Следующие экспериментальные данные приведены для иллюстрации противоопухолевых эффектов масла семян коикса согласно изобретению и его фармацевтических препаратов.
1. Ингибирование маслом семян коикса и его препаратами 8 линий опухолевых клеток человека в МТТ методе in vitro
А. Материалы эксперимента и их подготовка:
(1) линии клеток PANC-1 (панкреатические раковые клетки человека), SKOV3 (раковые клетки яичника человека), MCF-7 (раковые клетки молочной железы человека), Bcap-37 (раковые клетки молочной железы человека), SMMC-7721 (раковые клетки печени человека), HepG-2 (раковые клетки печени человека), А549 (раковые клетки легкого человека) и Н460 (раковые клетки легкого человека), хранящиеся и пассированные в научно-исследовательском фармакологическом центре Шанхайского института фармацевтической промышленности;
(2) полная DMEM среда (среда Игла в модификации Дульбекко), поставляемая с 10% сывороткой новорожденного теленка (GIBCO BRL), 1% пенициллина (100 ед/мл) плюс стрептомицина (100 мкг/мл);
(3) 0,25% раствор трипсина, приобретенный у Invitrogen Corp. и хранящийся при -20°C;
(4) фосфатный буфер (PBS): 8 г NaCl, 0,2 г KCl, 1,15 г Na2HPO4 и 0,2 г KH2pO4, растворенные в 1 л дважды дистиллированной воды и стерилизованные в автоклаве при 121°C в течение 20 мин и затем хранящиеся при 4°C;
(5) раствор МТТ (3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолий бромид) (AMRESCO): 5 мг/мл в PBS;
(6) раствор для растворения кристаллов формазана: 10 г SDS (додецилсульфат натрия), 5 мл изобутанола и 0,1 мл концентрированной соляной кислоты, растворенные в 100 мл деионизированной дважды дистиллированной воды.
Б. Экспериментальный метод
Эффекты ингибирования образцов в отношении вышеуказанных линий клеток определяли с помощью метода МТТ. Конкретные процедуры были следующими.
1) Культура клеток.(а) Хранящиеся клетки вынимали из жидкого азота, быстро размораживали на водяной бане при 37°C и в стерильных условиях переносили в 6 мл клеточной среды в 10 мл центрифужную пробирку, которую центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 мин. Супернатант удаляли, затем осажденные клетки ресуспендировали в 5-6 мл клеточных сред путем пипетирования и переносили в колбу в инкубаторе при 37°C для клеточной культуры. (б) На следующие сутки колбу вынимали из инкубатора и отработанную среду удаляли, затем клетки инкубировали в 5-6 мл свежей среды в инкубаторе при 37°C. (в) На третьи сутки колбу вынимали из инкубатора и отработанную среду удаляли, затем в
- 4 033647 колбу добавляли 2-3 мл PBS (pH 7,4) при взбалтывании для очистки, и отработанный PBS удаляли. Такую стадию клеточной очистки повторяли еще раз. В колбу добавляли 3-5 капель 0,25% раствора трипсина при взбалтывании, тем самым хорошо их распределяя. Колбу закрывали и помещали в инкубатор при 37°C на приблизительно 3 мин и под микроскопом наблюдали отделение клеток от стенок колбы. Добавляли 2 мл клеточной среды и клетки полностью отделяли от стенок колбы пипетированием, затем клеточную суспензию переносили в 2 отдельные чистые колбы, каждая из которых содержала 5-6 мл среды. Клеточную суспензию распределяли с помощью пипетирования, затем колбу помещали в инкубатор при 37°C. (г) Стадию (в) повторяли каждый следующий день. В ходе всего процесса культивирования прилипающим клеткам не позволяли расти слишком густо и суспензионные клетки всегда поддерживали в логарифмической стадии роста.
(2) Приготовление образца и контроля: надлежащее количество образца масла семян коикса (масло семян слез Иова) растворяли в ДМСО с получением раствора концентрации 10 мг/мл. Этот раствор разбавляли в градиентном разбавлении PBS для получения набора растворов образцов в концентрациях 10 мг/мл, 5000 мкг/мл, 2500 мкг/мл, 1250 мкг/мл, 625 мкг/мл и 312,5 мкг/мл соответственно.
(3) Каждый разбавленный раствор образца добавляли в дублированные лунки 96-луночного плоскодонного микропланшета (10 мкл/лунка). Соответствующим образом разбавленные растворы ДМСО в качестве контролей добавляли в лунки микропланшета.
(4) Клетки в логарифмической стадии роста трипсинизировали и промывали, затем ресуспендировали в среде, содержащей 10% телячью сыворотку. Количество живых клеток подсчитывали методом исключения красителя трипанового синего и суспензии клеток доводили до плотности 2х105 клеток/мл.
(5) Клеточный 96-луночный плоскодонный микропланшет помещали в инкубатор при 37°C и клетки инкубировали в условиях 5% CO2 в течение 48 ч.
(6) 20 мкл 5 мг/мл раствора МТТ добавляли в каждую лунку и клетки непрерывно инкубировали в инкубаторе в течение 3-4 ч.
(7) В каждую лунку добавляли 100 мкл раствора для растворения кристаллов и клетки непрерывно инкубировали в инкубаторе в течение ночи для растворения образующихся кристаллов формазана в достаточной степени. Затем значение оптической плотности измеряли при 570 нм для каждой лунки.
(8) На основании значений оптической плотности были рассчитаны степени ингибирования роста клеток для групп образцов различных концентраций. Формула расчета была следующей:
(1 - средняя оптическая плотность экспериментальных лунок/средняя оптическая плотность контрольных лунок)х100%
В. Результаты экспериментов
Таблица 1. Степени ингибирования образцов различных концентраций
- 5 033647
Таблица 2. Значения IC50 образцов для 8 линий клеток in vitro (мкг/мл)
Образец Масло семян Положительный
Линия κηστδΐΧ'-''-^^^ коикса контроль (таксол)
PANC-1 513,6 0,44
SKOV3 244,4 0,22
MCF-7 257,1 0,18
Всар-37 247,0 0,28
SMMC-7721 206,7 0,41
HepG-2 223,7 0,45
А549 168,1 0,46
Н460 181,6 0,49
Г. Заключение
Масло семян коикса согласно изобретению в различных концентрациях обладает ингибирующим эффектом различной степени в отношении 8 линий опухолевых клеток человека.
Дальнейшие эксперименты подтвердили, что масло семян коикса согласно изобретению и его препараты также могут достигать желаемых эффектов, описанных выше в экспериментальных примерах.
Следующие примеры дополнительно иллюстрируют изобретение, но не являются ограничением изобретения.
Подробное описание предпочтительных воплощений
Пример 1. Получение масла семян коикса.
Сверхкритическая экстракция диоксидом углерода
Семена коикса измельчали в порошок с размером частиц 20 меш и экстрагировали с использованием для сверхкритической экстракции CO2. Порошок семян коикса помещали в экстрактор. Подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревали с помощью горячей воды, циркулирующей в рубашке так, чтобы температура экстракции и температура разделения составляли 40 и 45°C соответственно и температуры на выходе из сепаратора I и сепаратора II поддерживались на отметке 50 и 35°C соответственно. Жидкий CO2 подавали под давлением с расходом 2,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса) в подогреватель CO2 с помощью насоса высокого давления, превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии. В экстракторе масло экстрагировали флюидом CO2 под давлением 20 МПа. Затем флюид CO2 с этим маслом подавали на разделительную колонку и давление разделительной колонки поддерживали на уровне 7 МПа для отделения масла. Газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступал в сепаратор I и сепаратор II, давление в которых поддерживалось на уровне 7 и 6 МПа соответственно. Отделенные примеси, такие как вода, удаляли. Посредством конденсатора газообразный CO2 переводили в жидкое состояние для повторного использования. Непрерывная экстракция в течение 2,5 ч приводила к образованию неочищенного масла семян коикса.
Очистка
К неочищенному маслу семян коикса, полученному сверхкритической экстракцией CO2, добавляли 55% петролейного эфира (60°C) относительно массы масла. 45% водного раствора NaOH (2%) относительно массы масла добавляли в соответствии с кислотным числом. После перемешивания в течение 10 мин и выдерживания в течение 20 ч, нижний грязный слой удаляли. Верхний слой промывали очищенной водой и выдерживали 22 ч. После удаления нижнего слоя отработанной воды верхний слой повторно промывали. После выдерживания в течение еще 46 ч нижний слой отработанной воды удаляли и верхний слой деэмульгировали путем добавления 80% ацетона относительно массы масла. После выдерживания в течение 3 ч нижний слой отработанного ацетона удаляли. К верхнему масляному слою добавляли 5% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин и фильтровали. Фильтрат нагревали, добавляли 4% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин при 45°C и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и повторно промывали очищенной водой. После выдерживания в течение 1 ч нижний слой отработанной воды удаляли. Верхний масляный слой нагревали и сушили в вакууме в атмосфере азота. Затем добавляли 10% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы масла. Смесь перемешивали и выдерживали в холодном месте. После фильтрации отфильтрованное масло стерилизовали путем сухого нагревания в вакууме при 165°C в течение 2 ч.
После охлаждения масло фильтровали через 0,2 мкм микропористую мембрану и раздельно загружали в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и затем колбы герметизировали. Таким образом получали масло семян коикса с выходом 4,5%. Были определены следующие физико-химический константы: удельный вес при 20°C - 0,917; показатель преломления при 20°C - 1,471; кислотное число - 0,18; йодное число - 102; число омыления - 190.
- 6 033647
Пример 2. Получение масла семян коикса.
Сверхкритическая экстракция диоксидом углерода: семена коикса измельчали в порошок с размером частиц 30 меш и экстрагировали с использованием для сверхкритической экстракции CO2. Порошок семян коикса помещали в экстрактор. Подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревали с помощью горячей воды, циркулирующей в рубашке, так, чтобы температура экстракции и температура разделения составляли 35 и 40°C соответственно, и температуры на выходе из сепаратора I и сепаратора II поддерживались на уровне 20 и 15°C соответственно. Жидкий CO2 подавали под давлением в подогреватель CO2 с помощью насоса высокого давления с расходом 7,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса), превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии. В экстракторе масло экстрагировали флюидом CO2 под давлением 22 МПа. Затем флюид CO2 с этим маслом подавали на разделительную колонку и давление разделительной колонки поддерживали на уровне 8 МПа для отделения масла. Газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступал в сепаратор I и сепаратор II, давление в которых поддерживалось на уровне 6 и 5 МПа соответственно. Отделенные примеси, такие как вода, удаляли. Посредством конденсатора газообразный CO2 переводили в жидкое состояние для повторного использования. Непрерывная экстракция в течение 2 ч приводила к образованию неочищенного масла семян коикса.
Очистка
К неочищенному маслу семян коикса, полученному сверхкритической экстракцией CO2, добавляли 55% петролейного эфира (90°C) относительно массы масла и 56% водного раствора NaOH (2%) относительно массы масла добавляли в соответствии с кислотным числом. После перемешивания в течение 10 мин и выдерживания в течение 22 ч нижний грязный слой удаляли. Верхний слой промывали очищенной водой и выдерживали 20 ч. После удаления нижнего слоя отработанной воды верхний слой подвергали повторному промыванию. После выдерживания в течение еще 48 ч нижний слой отработанной воды удаляли и верхний слой деэмульгировали путем добавления 90% ацетона относительно массы масла. После выдерживания в течение 2 ч нижний слой отработанного ацетона удаляли. К верхнему масляному слою добавляли 8% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин и фильтровали. Фильтрат нагревали, добавляли 6% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин при 42°C и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и повторно промывали очищенной водой. После выдерживания в течение 2 ч нижний слой отработанной воды удаляли. Верхний масляный слой нагревали и сушили в вакууме в атмосфере азота. Затем добавляли 9% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы масла. Смесь перемешивали и выдерживали в холодном месте. После фильтрации отфильтрованное масло стерилизовали путем сухого нагревания в вакууме при 170°C в течение 1,5 ч. После охлаждения масло фильтровали через 0,2 мкм микропористую мембрану, раздельно загружали в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и затем колбы герметизировали. Таким образом получали масло семян коикса с выходом 4,9%. Были определены следующие физико-химический константы: удельный вес при 20°C - 0,920; показатель преломления при 20°C - 1,473; кислотное число - 0,19; йодное число - 104; число омыления - 188.
Пример 3. Получение масла семян коикса.
Сверхкритическая экстракция диоксидом углерода
Семена коикса измельчали в порошок с размером частиц 40 меш и экстрагировали с использованием для сверхкритической экстракции CO2. Порошок семян коикса помещали в экстрактор. Подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревали с помощью горячей воды, циркулирующей в рубашке, так, чтобы температура экстракции и температура разделения составляли 33 и 39°C соответственно и температуры на выходе из сепаратора I и сепаратора II поддерживались на уровне 30 и 20°C соответственно. Жидкий CO2 подавали под давлением в подогреватель CO2 с помощью насоса высокого давления с расходом 5,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса), превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии. В экстракторе масло экстрагировали флюидом CO2 под давлением 19 МПа. Затем флюид CO2 с этим маслом подавали на разделительную колонку и давление разделительной колонки поддерживали на уровне 9 МПа для отделения масла. Газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступал в сепаратор I и сепаратор II, давление в которых поддерживалось на уровне 5 и 4 МПа соответственно. Отделенные примеси, такие как вода, удаляли. Посредством конденсатора газообразный CO2 переводили в жидкое состояние для повторного использования. Непрерывная экстракция в течение 3 ч приводила к образованию неочищенного масла семян коикса.
Очистка
К неочищенному маслу семян коикса, полученному сверхкритической экстракцией CO2, добавляли 55% петролейного эфира (80°C) относительно массы масла и 36% водного раствора NaOH (2%) относительно массы масла добавляли в соответствии с кислотным числом. После перемешивания в течение 10 мин и выдерживания в течение 18 ч нижний грязный слой удаляли. Верхний слой промывали очищенной водой и выдерживали 18 ч. После удаления нижнего слоя отработанной воды верхний слой подвергали повторному промыванию. После выдерживания в течение еще 42 ч нижний слой отработан
- 7 033647 ной воды удаляли и верхний слой деэмульгировали путем добавления 75% ацетона относительно массы масла. После выдерживания в течение 2 ч нижний слой отработанного ацетона удаляли. К верхнему масляному слою добавляли 3% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин и фильтровали. Фильтрат нагревали, добавляли 2% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин при 47°C и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и повторно промывали очищенной водой. После выдерживания в течение 1 ч нижний слой отработанной воды удаляли. Верхний масляный слой нагревали и сушили в вакууме в атмосфере азота. Затем добавляли 11% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы масла. Смесь перемешивали и выдерживали в холодном месте. После фильтрации отфильтрованное масло стерилизовали путем сухого нагревания в вакууме при 160°C в течение 2 ч. После охлаждения масло фильтровали через 0,2 мкм микропористую мембрану и раздельно загружали в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и затем колбы герметизировали. Таким образом получали масло семян коикса с выходом 4,7%. Были определены следующие физико-химический константы: удельный вес при 20°C - 0,918; показатель преломления при 20°C - 1,474; кислотное число - 0,15; йодное число - 102; число омыления - 194.
Пример 4. Получение масла семян коикса.
Сверхкритическая экстракция диоксидом углерода
Семена коикса измельчали в порошок с размером частиц 50 меш и экстрагировали с использованием для сверхкритической экстракции CO2. Порошок семян коикса помещали в экстрактор. Подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревали с помощью горячей воды, циркулирующей в рубашке, так, чтобы температура экстракции и температура разделения составляли 35 и 42°C соответственно, и температуры на выходе из сепаратора I и сепаратора II поддерживались на уровне 40 и 30°C соответственно. Жидкий CO2 подавали под давлением в подогреватель CO2 с помощью насоса высокого давления с расходом 4,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса), превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии. В экстракторе масло экстрагировали флюидом CO2 под давлением 21 МПа. Затем флюид CO2 с этим маслом подавали на разделительную колонку и давление разделительной колонки поддерживали на уровне 10 МПа для отделения масла. Газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступал в сепаратор I и сепаратор II, давление в которых поддерживалось на уровне 7 и 5 МПа соответственно. Отделенные примеси, такие как вода, удаляли. Посредством конденсатора газообразный CO2 переводили в жидкое состояние для повторного использования. Непрерывная экстракция в течение 2 ч приводила к образованию неочищенного масла семян коикса.
Очистка
К неочищенному маслу семян коикса, полученному сверхкритической экстракцией CO2, добавляли 55% петролейного эфира (70°C) относительно массы масла и 50% водного раствора NaOH (2%) относительно массы масла добавляли в соответствии с кислотным числом. После перемешивания в течение 10 мин и выдерживания в течение 19 ч, нижний грязный слой удаляли. Верхний слой промывали очищенной водой и выдерживали 21 ч. После удаления нижнего слоя отработанной воды верхний слой подвергали повторному промыванию. После выдерживания в течение еще 50 ч нижний слой отработанной воды удаляли и верхний слой деэмульгировали путем добавления 85% ацетона относительно массы масла. После выдерживания в течение 4 ч нижний слой отработанного ацетона удаляли. К верхнему масляному слою добавляли 6% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин и фильтровали. Фильтрат нагревали, добавляли 5% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин при 50°C и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и повторно промывали очищенной водой. После выдерживания в течение 1,5 ч нижний слой отработанной воды удаляли. Верхний масляный слой нагревали и сушили в вакууме в атмосфере азота. Затем добавляли 12% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы масла. Смесь перемешивали и выдерживали в холодном месте. После фильтрации отфильтрованное масло стерилизовали путем сухого нагревания в вакууме при 162°C в течение 1 ч. После охлаждения масло фильтровали через 0,2 мкм микропористую мембрану, раздельно загружали в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и колбы герметизировали. Таким образом получали масло семян коикса с выходом 4,0%. Были определены следующие физико-химический константы: удельный вес при 20°C - 0,920; показатель преломления при 20°C - 1,471; кислотное число - 0,16; йодное число - 105; число омыления - 192.
Пример 5. Получение масла семян коикса.
Сверхкритическая экстракция диоксидом углерода
Семена коикса измельчали в порошок с размером частиц 60 меш и экстрагировали с использованием для сверхкритической экстракции CO2. Порошок семян коикса помещали в экстрактор. Подогреватель CO2, экстрактор и разделительную колонку нагревали с помощью горячей воды, циркулирующей в рубашке, так, чтобы температура экстракции и температура разделения составляли 42 и 45°C соответственно и температуры на выходе из сепаратора I и сепаратора II поддерживались на уровне 35 и 25°C соответственно. Жидкий CO2 подавали под давлением в подогреватель CO2 с помощью насоса высокого дав
- 8 033647 ления с расходом 6,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса), превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии. В экстракторе масло экстрагировали флюидом CO2 под давлением 23 МПа. Затем флюид CO2 с этим маслом подавали на разделительную колонку и давление разделительной колонки поддерживали на уровне 8 МПа для отделения масла. Газообразный CO2 из разделительной колонки последовательно поступал в сепаратор I и сепаратор II, давление в которых поддерживалось на уровне 6 и 4 МПа соответственно. Отделенные примеси, такие как вода, удаляли. Посредством конденсатора газообразный CO2 переводили в жидкое состояние для повторного использования. Непрерывная экстракция в течение 2,5 ч приводила к образованию неочищенного масла семян коикса.
Очистка
К неочищенному маслу семян коикса, полученному сверхкритической экстракцией CO2, добавляли 55% петролейного эфира (80°C) относительно массы масла и 40% водного раствора NaOH (2%) относительно массы масла добавляли в соответствии с кислотным числом. После перемешивания в течение 10 мин и выдерживания в течение 24 ч нижний грязный слой удаляли. Верхний слой промывали очищенной водой и выдерживали 24 ч. После удаления нижнего слоя отработанной воды верхний слой подвергали повторному промыванию. После выдерживания в течение еще 44 ч нижний слой отработанной воды удаляли и верхний слой деэмульгировали путем добавления 70% ацетона относительно массы масла. После выдерживания в течение 3 ч нижний слой отработанного ацетона удаляли. К верхнему масляному слою добавляли 4% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин и фильтровали. Фильтрат нагревали, добавляли 3% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивали 30 мин при 40°C и затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении для удаления растворителя и повторно промывали очищенной водой. После выдерживания в течение 2 ч нижний слой отработанной воды удаляли. Верхний масляный слой нагревали и сушили в вакууме в атмосфере азота. Затем добавляли 8% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы масла. Смесь перемешивали и выдерживали в холодном месте. После фильтрации отфильтрованное масло стерилизовали путем сухого нагревания в вакууме при 165°C в течение 2 ч. После охлаждения масло фильтровали через 0,2 мкм микропористую мембрану и раздельно загружали в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и затем колбы герметизировали. Таким образом получали масло семян коикса с выходом 4,3%. Были определены следующие физико-химический константы: удельный вес при 20°C - 0,917; показатель преломления при 20°C - 1,473; кислотное число - 0,14; йодное число - 103; число омыления - 192.
Пример 6. Выделение и определение триолеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ C18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой В, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 12,6-14,2 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением триолеина.
HR-EI-MS (масс-спектрометрия высокого разрешения с ионизацией электронным ударом): m/z составляло 878,7344 (рассчитано 878,7363, C57H98O6), степень ненасыщенности составляла 9.
ИК (пленка KBr): 1746, 1170, 1098; 2928, 2856, 724; 3008, 1655 см-1 (слабое).
Данные 1Н-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
- 9 033647
Таблица 3. Спектральные данные 1Н-ЯМР (CDCl3) соединений примеров 6-13
A: трилинолеин, B: 1-олеин-2,3-дилинолеин, C: 1-пальмитин-2,3-дилинолеин, D: 1,3-диолеин-2линолеин, E: 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеин, F: 1,3-дипальмитин-2-линолеин, G: триолеин, H: 1 пальмитин-2,3-диолеин.
- 10 033647
Таблица 4. Спектральные данные 13С-ЯМР (CDCl3) соединений примеров 6-13
A: трилинолеин, B: 1-олеин-2,3-дилинолеин, C: 1-пальмитин-2,3-дилинолеин, D: 1,3-диолеин-2линолеин, E: 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеин, F: 1,3-дипальмитин-2-линолеин, G: триолеин, H: 1пальмитин-2,3-диолеин.
Пример 7. Выделение и определение 1-олеин-2,3-дилинолеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ C18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 15,4-17,3 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в
- 11 033647 атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при
35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1-олеин-2,3-дилинолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 880,7518 (рассчитано 854,7363, C55H98O6), степень ненасыщенности составляла 7.
ИК (пленка KBr): 1747, 1164, 1098; 2925, 2854, 723; 3008, 1655 см-1 (слабое).
Данные 'H-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 8. Выделение и определение 1-пальмитин-2,3-дилинолеина.
Предварительное выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ С18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 2735 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 17,4-18,1 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота с получением неочищенного продукта.
Вторичную очистку осуществляли на колонке Superstar Benetnach™ С18 (10 ммх250 мм, 5 мкм) с подвижной фазой A: ацетонитрил и подвижной фазой B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1). Раствор полученного ранее неочищенного продукта (20 мг/мл) получали с подвижной фазой B, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-23 мин: 50-60%, 32-43 мин: 60-90%, 43-60 мин: 100%; и расход 3 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 31,2-34,7 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1-пальмитин-2,3-дилинолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 854,7370 (рассчитано 854,7363, C55H98O6), степень ненасыщенности составляла 7.
ИК (пленка KBr): 1746, 1165, 1095; 2926, 2854, 722; 3009, 1648 см-1 (слабое).
Данные Щ-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 9. Выделение и определение 1,3-диолеин-2-линолеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ С18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 18,4-20,2 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°С в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1,3-диолеин-2-линолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 882,7678 (рассчитано 882,7672, С57Н102О6), степень ненасыщенности составляла 7.
ИК (пленка KBr): 1747, 1163, 1097; 2925, 2855, 723; 3007, 1655 см-1 (слабое).
Данные Ή-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 10. Выделение и определение 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ С18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 20,3-21,4 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°С в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 856,7519 (рассчитано 856,7513, СееЩдоОб), степень ненасыщенности составляла 6.
ИК (пленка KBr): 1747, 1164, 1098; 2925, 2854, 723; 3008, 1655 см-1 (слабое).
- 12 033647
Данные 'H-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 11. Выделение и определение 1,3-дипальмитин-2-линолеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ C18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 25,7-26,2 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1,3-дипальмитин-2-линолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 830,7371 (рассчитано 830,7363, C53H98G6), степень ненасыщенности составляла 5.
ИК (пленка KBr): 1747, 1164, 1098; 2925, 2854, 723; 3008, 1655 см-1 (слабое).
Данные 1Н-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 12. Выделение и определение триолеина.
Выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ С18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 26,6-27,7 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением триолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 884,7851 (рассчитано 884,7833, С57Н104О6), степень ненасыщенности составляла 6.
ИК (пленка KBr): 1749, 1165, 1095; 2925, 2854, 723; 3004, 1654 см-1 (слабое).
Данные 1Н-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 13. Выделение и определение 1-пальмитин-2,3-диолеина.
Предварительное выделение проводили на устройстве для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии Р3000А (колонка: Superstar Benetnach™ С18, 20 ммх150 мм, 5 мкм; подвижная фаза A: ацетонитрил; подвижная фаза B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1)). Раствор масла семян коикса (50 мг/мл) был получен с подвижной фазой B, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-27 мин: 50-60%, 27-35 мин: 90%, 35-45 мин: 100%; и расход 18 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 28,2-29,3 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота с получением неочищенного продукта.
Вторичную очистку осуществляли на колонке Superstar Benetnach™ С18 (10 ммх250 мм, 5 мкм) с подвижной фазой A: ацетонитрил и подвижной фазой B: ацетонитрил/тетрагидрофуран (1:1). Раствор полученного выше неочищенного продукта (20 мг/мл) получали с подвижной фазой B, и объем вводимой пробы для каждого отделения составлял 1,5 мл. Условия градиента были следующими: подвижная фаза B: 0-23 мин: 50-60%, 32-43 мин: 60-90%, 43-60 мин: 100%; и расход: 3 мл/мин. УФ-детектирование проводили при 208 нм. Пиковые фракции при времени выхода пика 32,9-35,1 мин собирали и концентрировали с помощью роторного испарителя в вакууме в атмосфере азота. Остатки переносили хлороформом в 10 мл флакон и сушили в вакуумной печи при 35°С в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенные образцы замораживали в холодильнике с получением 1-пальмитин-2,3-диолеина.
HR-EI-MS: m/z составляло 858,7672 (рассчитано 858,7676, С55Н102О6), степень ненасыщенности составляла 5.
ИК (пленка KBr): 1747, 1166, 1095; 2926, 2854, 722; 3003, 1654 см-1 (слабое).
Данные Щ-ЯМР показаны в табл. 3.
Данные 13С-ЯМР показаны в табл. 4.
Пример 14. Получение 1,3-дипальмитина-2-олеина.
Раствор масла семян коикса, полученный в тетрагидрофуране (750 мг/мл), предварительно разделяли на устройстве для препаративной ВЭЖХ СНЕЕТАН-НР100 (колонка: Venusil XBP С18 (2), 50x250 мм, 5 мкм, 100 А; подвижная фаза: ацетонитрил/тетрагидрофуран - 78:22 (об./об.); объем вводимой пробы
- 13 033647 составлял 2 мл; расход - 80 мл/мин; УФ-детекция длины волны - 205 нм/280 нм). Пиковые фракции при времени выхода пика 29-38 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе с получением неочищенного продукта.
Вторичную очистку проводили на колонке Venusil XBP C18(L) (30x150 мм, 5 мкм, 150 А) с ацетонитрилом:дихлорметаном (65/35) в качестве подвижной фазы при расходе 32 мл/мин. Раствор полученного ранее неочищенного продукта (10 мг/мл) получали в дихлорметане, и объем вводимой пробы для каждого разделения составлял 2 мл. УФ-детектирование проводили при 205 нм/280 нм. Пиковую фракцию при времени выхода пика 15 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе. Остатки переносили хлороформом в 10 мл пробирку и высушивали в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенный образец 1,3-дипальмитина-2-олеина замораживали в холодильнике.
HR-EI-MS: m/z составляло 832,7542 (рассчитано 832,7566, C53H100O6), степень ненасыщенности составляла 4.
IR (пленка KBr): 1747, 1166, 1095; 2925, 2854, 722; 3003, 1654 см-1(слабое).
Данные 1Н-ЯМР (CDCl3) показаны в табл. 5.
Таблица 5. Спектральные данные 1Н-ЯМР соединения примера 14
Положение Химический сдвиг Количество Н, пик и константа взаимодействия
Н-С=С 5,34 2Н, m
СН-ОСО 5,26 1Н, m
-СН2-ОСО 4,29 2Н, dd,12,0,4,4
-СНг-ОСО 4,14 2Н, d, 12,0,6,0
-СН2СОО 2,31 2Н, t,7,6
-СН2СОО 2,31 4Н, t, 7,6
-СН2-СН= 2,00 4Н, m
-СН2СН2СОО 1,60 6Н, m
-СН2 1,27 68Н, m
-СНз 0,87 9Н, t, 6,8
Данные 1Х-ЯМР (CDCl3) показаны в табл. 6.
Таблица 6. Спектральные данные 'У-ЯМР соединения примера 14
Положение Химический сдвиг Положение Химический сдвиг
С1 1 173,282 СЮ 1 29,750-29,040
2 172,839 2 129,999
3 173,282 3 29,750-29,040
С2 1 34,026 С11 1 29,750-29,040
2 34,179 2 27,205
3 34,026 3 29,750-29,040
СЗ 1 24,848 С12 1 29,750-29,040
2 24,848 2 29,750-29,040
3 24,848 3 29,750-29,040
С4 1 29,750-29,040 С13 1 29,750-29,040
2 29,750-29,040 2 29,750-29,040
- 14 033647
3 29,750-29,040 3 29,750-29,040
С5 1 29,750-29,040 С14 1 31,895
2 29,750-29,040 2 29,750-29,040
3 29,750-29,040 3 31,895
С6 1 29,750-29,040 С15 1 22,672
2 29,750-29,040 2 29,750-29,040
3 29,750-29,040 3 22,672
С7 1 29,750-29,040 С16 1 14,099
2 29,750-29,040 2 31,895
3 29,750-29,040 3 14,099
С8 1 29,750-29,040 С17 2 22,672
2 27,159 С18 2 14,099
3 29,750-29,040 СНО 68,852
С9 1 29,750-29,040 СН2О 62,076
2 129,687
3 29,750-29,040
Пример 15. Получение 1,2-диолеин-3-стеарина.
Раствор масла семян коикса, полученный в тетрагидрофуране (750 мг/мл), предварительно разделяли на устройстве для препаративной ВЭЖХ СНЕЕТАН-НР100 (колонка: Venusil XBP C18 (2), 50x250 мм, 5 мкм, 100 А; подвижная фаза: ацетонитрил/тетрагидрофуран - 78:22 (об./об.); объем вводимой пробы составлял 2 мл (1,5 г); расход - 80 мл/мин; УФ-детекция длины волны - 205 нм/280 нм). Пиковые фракции при времени выхода пика 29-38 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе с получением неочищенного продукта.
Вторичную очистку проводили на колонке Venusil XBP C18(L) (30x150 мм, 5 мкм, 150 А) с ацетонитрилом:дихлорметаном (65/35) в качестве подвижной фазы при расходе 32 мл/мин. Раствор полученного ранее неочищенного продукта (10 мг/мл) получали в дихлорметане, и объем вводимой пробы для каждого разделения составлял 2 мл. УФ-детектирование проводили при 205 нм/280 нм. Пиковую фракцию при времени выхода пика 17 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе. Остатки переносили хлороформом в 10 мл пробирку и высушивали в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенный образец 1,2-диолеина-3-стеарина замораживали в холодильнике.
HR-EI-MS: m/z составляло 886,8011 (рассчитано 886,7991, C57H106O6), степень ненасыщенности составляла 5.
IR (пленка KBr): 1747, 1166, 1095; 2926, 2856, 722; 3003, 1654 см-1 (слабое). Данные 1Н-ЯМР (CDCl3) показаны в табл. 7.
Таблица 7. Спектральные данные 1Н-ЯМР соединения примера 15
- 15 033647
Таблица 8. Спектральные данные 13С-ЯМР (CDC13) соединения примера 15
Position Chemical shift Position Chemical shift
С1 1 173,258 СЮ 1 129,999
2 172,839 2 129,999
3 173,282 3 29,00-30,00
С2 1 34,028 С11 1 27,206
2 34,179 2 27,206
3 34,028 3 29,00-30,00
СЗ 1 24,848 С12 1 29,00-30,00
2 24,848 2 29,00-30,00
3 24,848 3 29,00-30,00
С4 1 30,00-29,00 С13 1 29,00-30,00
2 30,00-29,00 2 29,00-30,00
3 30,00-29,00 3 29,00-30,00
С5 1 30,00-29,00 С14 1 29,00-30,00
2 30,00-29,00 2 29,00-30,00
3 30,00-29,00 3 31,895
С6 1 30,00-29,00 С15 1 29,00-30,00
2 30,00-29,00 2 29,00-30,00
3 30,00-29,00 3 22,672
С7 1 30,00-29,00 С16 1 31,895
2 30,00-29,00 2 31,895
3 30,00-29,00 3 31,895
С8 1 27,159 С17 1 22,672
2 27,159 2 22,672
3 29,00-30,00 3 22,672
С9 1 129,687 С18 1 14,099
2 129,669 2 14,099
3 29,00-30,00 3 14,099
β-CHO- 68,852
а-СН2О- 62,076
Пример 16. Получение 1-олеин-2-линолеин-3-стеарина.
Раствор масла семян коикса, полученный в тетрагидрофуране (750 мг/мл), предварительно разделяли на устройстве для препаративной ВЭЖХ СНЕЕТАН-НР100 (колонка: Venusil XBP C18 (2), 50x250 мм, 5 мкм, 100 А; подвижная фаза: ацетонитрил/тетрагидрофуран - 78:22 (об./об.); расход - 80 мл/мин; объем вводимой пробы составлял 2 мл (1,5 г); УФ-детекция длины волны - 205 нм/280 нм). Пиковые фракции при времени выхода пика 29-38 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе с получением неочищенного продукта.
Вторичную очистку проводили на колонке Venusil XBP C18(L) (30x150 мм, 5 мкм, 150 А) с ацетонитрилом:дихлорметаном (65/35) в качестве подвижной фазы при расходе 32 мл/мин. Раствор полученного ранее неочищенного продукта (10 мг/мл) получали в дихлорметане, и объем вводимой пробы для каждого разделения составлял 2 мл. УФ-детектирование проводили при 205 нм/280 нм. Пиковую фракцию в период времени удержания 19 мин собирали и концентрировали в вакууме в атмосфере азота в роторном испарителе. Остатки переносили хлороформом в 10 мл пробирку и высушивали в вакуумной печи при 35°C в течение 6 ч. После заполнения азотом высушенный образец 1-олеина-2-линолеин-3стеарина замораживали в холодильнике.
HR-EI-MS: m/z составляло 884,7832 (рассчитано 884,7848, С57Н104О6), степень ненасыщенности составляла 6.
IR (пленка KBr): 1747, 1164, 1098; 2925, 2855, 723; 3008, 1655 см-1 (слабое).
Данные 1Н-ЯМР (CDC13) показаны в табл. 9.
- 16 033647
Таблица 9. Спектральные данные 1Н-ЯМР соединения примера 16
Положение Химический сдвиг Количество Н, пик и константа взаимодействия
Н-С=С 5,35 6Н, m
СН-ОСО 5,26 1Н, m
-СН2-ОСО 4,29 2Н, dd, 11,4, 4,2
-СНг-ОСО 4,14 2Н, d, 12,0, 6,0
-СН2СОО 2,32 2Н, m
-СН2СОО 2,30 4Н, m
-СН2-СН= 2,03 8Н, m
-СН=СН-СН2сн=сн- 2,77 2Н, t, 6,6
-СН2СН2СОО 1,61 6Н, m
-сн2 1,38-1,26 64Н, гл
-СНз 0,88 9Н, t, 6,6
Данные 'Х-ЯМР (CDCl3) показаны в табл. 10.
Таблица 10. Спектральные данные 'Х-ЯМР (CDCl3) соединения примера 16
Положение Химический сдвиг Положение Химический сдвиг
С1 1 173,25 СЮ 1 129,97
2 172,83 2 128,08
3 173,25 3 29,04-29,76
С2 1 34,03 С11 1 27,19
2 34,18 2 25,62
3 34,04 3 29,04-29,76
СЗ 1 24,86 С12 1 29,04-29,76
2“ 24,86 2 127,88
3 24,86 3 29,04-29,76
С4 1 29,04-29,76 С13 1 29,04-29,76
2Ь 29,04-29,76 2 130,22
3 29,04-29,76 3 29,04-29,76
С5 1 29,04-29,76 С14 1 31,89
2Ь 29,04-29,76 2 29,04-29,76
3 29,04-29,76 3 31,89
С6 1 29,04-29,76 С15 1 22,67
2Ь 29,04-29,76 2Ь 22,56
3 29,04-29,76 3 22,67
С7 1 29,04-29,76 С16 1 31,91
2Ь 29,04-29,76 2 31,52
3 29,04-29,76 3 31,89
С8 1 29,04-29,76 С17 1 22,67
2 27,19 2 22,56
3 29,04-29,76 3 22,67
С9 1 129,70 С18 1 14,09
2 130,01 2 14,05
3 29,04-29,76 3 14,09
СН-0 68,89
2СН2-О 62,08
Пример 17. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
- 17 033647
Композиция:
Масло семян коикса 100г
Соевый лецитин для инъекции10 г
Глицерин для инъекции15 г
Воду для инъекции добавляли до 10ОО мл где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 1 -олеин-2,3-дилинолеин 6,10% 16,18%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 6,56%
1,3-диолеин-2-линолеин 16,69%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 12,96%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,88%
триолеин 1 -пальмитин-2,3-диолеин 18,30% 10,18%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,3-дипальмитин-2-олеин 1,72% 1,88%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,60%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, отдельно нагревали до 60°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 6 МПа и высокое давление составляло 30 МПа. Гомогенизацию повторяли 4 раза до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 8,5 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 18. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 300 г
Соевый лецитин, пригодный для инъекции 40 г
Глицерин, пригодный для инъекции 50 г
Воду для инъекции добавляли до 1000 мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 4,87%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 13,00%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 5,25%
1,3-диолеин-2-линолеин 15,13%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 10,26%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 3,05%
триолеин 20,46%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 11,50%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,95%
1,3-дипальмитин-2-олеин 2,16%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,84%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким уси- 18 033647 лием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, отдельно нагревали до 70°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 12 МПа и высокое давление составляло 45 МПа. Гомогенизацию повторяли 3 раза до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 7,1 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 19. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса200 г
Соевый лецитин для инъекции 25г
Глицерин, пригодный для инъекции30 г
Воду для инъекции добавляли до 10ОО мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 1 -олеин-2,3-дилинолеин 5,47% 14,75%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 1,3-диолеин-2-линолеин 6,01% 18,19%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 14,11%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,60%
триолеин 1 -пальмитин-2,3-диолеин 16,25% 9,11%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,88%
1,3-дипальмитин-2-олеин 2,09%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,76%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, нагревали отдельно до 65°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 10 МПа и высокое давление составляло 30 МПа. Гомогенизацию повторяли 5 раз до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 4,8 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 20. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 150 г
Соевый лецитин, пригодный для инъекции 35 г
Глицерин, пригодный для инъекции 30 г
Воду для инъекции добавляли до 1000 мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
- 19 033647
трилинолеин 5,96%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 15,93%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 6,43%
1,3-диолеин-2-линолеин 16,20%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 12,57%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,79%
триолеин 17,69%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 9,87%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,75%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,92%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,66%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, нагревали отдельно до 68°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 7 МПа и высокое давление составляло 35 МПа. Гомогенизацию повторяли 3 раза до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 6,8 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 21. Получение капсулы с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 200 г
Витамин Е 0,20 г для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,20%
1-олеин-2,3-дилинолеин 16,58%
-пальмитин-2,3-дилинолеин 6,69% |1,3-диолеин-2-линолеин 16,87%
-пальмитин-2-линолеин-З-олеин 13,09%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,91 % триолеин 18,42%
-пальмитин-2,3-диолеин 10,27%
-олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,67%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,86%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,56%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин, 10% раствор этилпарабена взвешивали в массовом соотношении 1:1,2:0,8:0,01. Глицерин, очищенную воду и 10% раствор этилпарабена последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 70°C. Затем добавляли желатин и постоянно перемешивали в вакууме до его полного растворения. Клей фильтровали и хранили при 60°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и витамина E добавляли в резервуар для ингредиентов и непрерывно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при
- 20 033647 температуре 18°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали. Пример 22. Получение капсулы с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 800 г
Твин 80 0,60 г для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,69%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 17,88%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 7,21%
1,3-диолеин-2-линолеин 14,92%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 11,55%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 3,14%
триолеин 19,86%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 11,08%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,50%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,70%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,43%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин, бензойную кислоту взвешивали в массовом соотношении 1:1,2:0,8:0,01. Глицерин, очищенную воду и бензойную кислоту последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 90°C. Затем добавляли желатин и постоянно перемешивали в вакууме до его полного растворения. Клей фильтровали и хранили при 56°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и Твин 80 добавляли в резервуар для ингредиентов и непрерывно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при температуре 26°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали. Пример 23. Получение капсулы с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 500 г
Витамин Е 0,40 г для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,99%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 18,69%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 7,54%
1,3-диолеин-2-линолеин 19,02%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 14,75%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 3,28%
триолеин 15,96%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 8,11%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,38%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,52%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,29%
Способ
- 21 033647
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин сорбат калия взвешивали в массовом соотношении
1:0,9:0,6:0,005. Глицерин, очищенную воду и сорбат калия последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 80°C. Затем желатин добавляли и постоянно перемешивали в вакууме до полного растворения желатина. Клей фильтровали и хранили при 62°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и витамина E добавляли в резервуар для ингредиентов и постоянно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при температуре 28°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали.
Пример 24. Получение капсулы с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 600 г
Твин 80 0,3 г для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,15%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 16,31%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 6,66%
1,3-диолеин-2-линолеин 16,77%
1 -пальмитин-2-линолеин-3-олеин 12,89%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,88%
триолеин 18,30%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 10,18%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,81%
1,3-дипальмитин-2-олеин 2,08%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,81%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин и хлоргексидина ацетат взвешивали в массовом соотношении 1:1,0:0,5:0,008. Глицерин, очищенную воду и хлоргексидина ацетат последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 85°C. Затем желатин добавляли и постоянно перемешивали в вакууме до полного растворения желатина. Клей фильтровали и хранили при 56°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и Твин 80 добавляли в резервуар для ингредиентов и постоянно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при температуре 30°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали.
Пример 25. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 100 г
Соевый лецитин для инъекции Юг
Глицерин для инъекции 15 г
Воду для инъекций добавляли до 1000 мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
- 22 033647
трилинолеин 5,13%
1 -олеин-2,3-дилинолеин 14,09%
1 -пальмитин-2,3-дилинолеин 5,74%
1,3-диолеин-2-линолеин 18,61%
1 -пальмитин-2-линолеин-З-олеин 11,90%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,88%
триолеин 20,75%
1 -пальмитин-2,3-диолеин 11,19%
1 -олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,92%
1,3-дипальмитин-2-олеин 2,11%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,84%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, нагревали отдельно до 60°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 7 МПа и высокое давление составляло 26 МПа. Гомогенизацию повторяли 5 раз до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 6,8 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 26. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 300 г
Соевый лецитин, пригодный для инъекций 40 г
Глицерин, пригодный для инъекций 50 г
Воду для инъекции добавляли до 1000 мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 5,71%
1-олеин-2,3-дилинолеин 15,11%
-пальмитин-2,3-дилинолеин 6,02%
1.3- диолеин-2-линолеин 15,45%
-пальмитин-2-линолеин-З-олеин 14,20%
1.3- дипальмитин-2-линолеин 3,20%
Триолеин 19,91%
1-пальмитин-2,3-диолеин 9,22%
-олеин-2-линолеин-З-стеарин 1,78%
1.3- дипальмитин-2-олеин 2,01%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,70%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина, пригодного для инъекции, добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина, пригодного для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, нагревали отдельно до 70°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 11 МПа и высокое давление составляло 48 МПа. Гомогенизацию повторяли 6 раз до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH
- 23 033647 до 7,5 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 27. Получение инъекции с маслом семян коикса согласно изобретению.
Состав:
Масло семян коикса200 г
Соевый лецитин для инъекции25 г
Глицерин, пригодный для инъекции30 г
Воду для инъекций добавляли до 10ОО мл, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,18%
1-олеин-2,3-дилинолеин 16,03%
-пальмитин-2,3-дилинолеин 6,51 %
1.3- диолеин-2-линолеин 16,30%
-пальмитин-2-линолеин-3-олеин 12,83%
1.3- дипальмитин-2-линолеин 2,81 % триолеин 18,10%
1-пальмитин-2,3-диолеин 9,95%
-олеин-2-линолеин-З-стеарин 1,71 %
1.3- дипальмитин-2-олеин 1,97%
1,2-д нолей н-3-стеарин 1,69%
Способ
К рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции добавляли соответствующее количество воды для инъекции. Смесь диспергировали с помощью диспергирующего эмульгатора с высоким усилием сдвига в дисперсию, не содержащую крупных фрагментов или гранул. Добавляли рецептурное количество глицерина, пригодного для инъекции. Затем добавляли воду для инъекции до указанного количества и смесь перемешивали с получением водной фазы.
Рецептурное количество масла семян коикса взвешивали. Навеску масла и водную фазу, полученную ранее, нагревали отдельно до 65°C, затем смешивали и эмульгировали в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляло 8 МПа и высокое давление составляло 40 МПа. Г омогенизацию повторяли 4 раза до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм становилось не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не определялись. При необходимости для доведения pH до 6,5 использовали NaOH или HCl.
Полученную гомогенную эмульсию фильтровали под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр с размером пор 3 мкм или менее, затем заполняли в атмосфере азота и, наконец, стерилизовали и охлаждали с получением инъекции.
Пример 28. Получение капсулы с маслом семян коикса по изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 200 г
Витамин Е 0,20 г
Для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,51%
1-олеин-2,3-дилинолеин 17,26%
1-пальмитин-2,3-дилинолеин 6,84%
1.3- диолеин-2-линолеин 17,56%
-пальмитин-2-линолеин-З-олеин 13,56%
1.3- дипальмитин-2-линолеин 3,07% триолеин 19,33%
1-пальмитин-2,3-диолеин 8,69%
- 24 033647
-олеин-2-л инолеин-3-стеарин 1,59%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,73%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,49%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин и 10% раствор этилпарабена взвешивали в массовом соотношении 1:1,2:0,8:0,01. Глицерин, очищенную воду и 10% раствор этилпарабена последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 70°C. Затем желатин добавляли и постоянно перемешивали в вакууме до полного растворения желатина. Клей фильтровали и хранили при 59°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и витамина E добавляли в резервуар для ингредиентов и постоянно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при температуре 16°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали.
Пример 29. Получение капсулы с маслом семян коикса по изобретению.
Композиция:
Масло семян коикса 800 г
Твин 80 0,60 г для получения 1000 капсул, где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,71%
1-олеин-2,3-дилинолеин 18,01%
-пальмитин-2,3-дилинолеин 7,25%
11,3-диолеин-2-линолеин 18,50%
-пальмитин-2-линолеин-З-олеин 10,95%
1,3-дипальмитин-2-линолеин 2,63% триолеин 17,14%
1-пальмитин-2,3-диолеин 9,78%
-олеин-2-линолеин-З-стеарин 1,42%
1,3-дипальмитин-2-олеин 1,60%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,31%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин и бензойную кислоту взвешивали в массовом соотношении 1:1,2:0,8:0,01. Глицерин, очищенную воду и бензойную кислоту последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 90°C. Затем желатин добавляли и постоянно перемешивали в вакууме до полного растворения желатина. Клей фильтровали и хранили при 60°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и Твин 80 добавляли в резервуар для ингредиентов и постоянно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсулы прессовали при температуре 26°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали.
Пример 30. Получение капсулы с маслом семян коикса согласно изобретению.
Композиция:
IМасло семян коикса 500 г
Витамин Е 0,40 г
Для получения 1000 капсул,
- 25 033647 где масло семян коикса содержит следующие триглицеридные ингредиенты:
трилинолеин 6,85%
-олеин-2,3-дилинолеин 18,24%
-пальмитин-2,3-дилинолеин 7,25%
1.3- диолеин-2-линолеин 15,01%
-пальмитин-2-линолеин-З-олеин 12,03%
1.3- дипальмитин-2-линолеин 3,01 %
Триолеин 18,60%
1-пальмитин-2,3-диолеин 10,80%
-олеин-2-линолеин-3-стеарин 1,39%
1.3- дипальмитин-2-олеин 1,53%
1,2-диолеин-З-стеарин 1,30%
Способ
Композиция клея
Желатин, очищенную воду, глицерин и сорбат калия взвешивали в массовом соотношении 1:0,9:0,6:0,005. Глицерин, очищенную воду и сорбат калия последовательно добавляли в резервуар для плавления клея и нагревали до 80°C. Затем желатин добавляли и постоянное перемешивали в вакууме до полного растворения желатина. Клей фильтровали и хранили при 62°C перед использованием.
Композиция лекарственной жидкости
Рецептурное количество масла семян коикса и витамина E добавляли в резервуар для ингредиентов и постоянно перемешивали до полного смешивания.
Прессование капсул
Подходящие пресс-формы подбирали в зависимости от размера капсулы. Капсула прессовали при температуре 20°C и относительной влажности менее чем 35%, затем формовали и сушили. После удаления капсул ненормального размера капсулы нормального размера промывали 95% медицинским этанолом и непрерывно сушили до достижения содержания влаги менее чем 12%. Непригодные капсулы удаляли в результате визуального контроля и на конечные продукты наносили печать и упаковывали.

Claims (13)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Композиция масла семян коикса, предназначенная для приготовления противоопухолевого лекарственного средства, применяемого для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака легкого, рака печени, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, рака яичника, рака молочной железы на ранней, средней или поздней стадии, состоящая из 11 триглицеридных ингредиентов в следующих мас.%: 4,87-6,99 трилинолеина, 13,00-18,69 1-олеин-2,3-дилинолеина, 5,25-7,54 1-пальмитин-
  2. 2,3-дилилолеин, 13,23-19,02 1,3-диолеин-2-линолеина, 10,26-14,75 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина, 2,28-3,28 1,3-дипальмитин-2-линолеина, 14,44-20,76 триолеина, 8,06-11,58 1-пальмитин-2,3-диолеина, 1,37-1,97 1-олеин-2-линолеин-3-стеарина, 1,52- 2,19 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,29-1,86 1,2-диолеин-3стеарина.
    2. Композиция масла семян коикса по п.1, имеющая следующие физико-химические константы, основанные на обнаружении жирного масла: удельный вес при 20°C составляет 0,917-0,920, показатель преломления при 20°C составляет 1,471-1,474, кислотное число составляет менее 0,2, йодное число составляет 100-106, число омыления составляет 188-195, где массовое процентное содержание указанных триглицеридных ингредиентов составляет: 5,476,69 трилинолеина, 14,63-17,88 1-олеин-2,3-дилилолеина, 5,90-7,21 1-пальмитин-2,3-дилинолеина, 14,8818,19 1,3-диолеин-2-линолеина, 11,55-14,11 1-пальмитин-2-линолеин-3-олеина, 2,57-3,14 1,3дипальмитин-2-линолеина, 16,25-19,86 триолеина, 9,07-11,08 1-пальмитин-2,3-диолеина, 1,54-1,88 1олеин-2-линеолеин-3-стеарина, 1,71-2,09 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,45-1,78 1,2-диолеин-3-стеарина.
  3. 3. Композиция масла семян коикса по п.2, в которой массовое процентное содержание указанных триглицеридных ингредиентов составляет: 5,96-6,20 трилинолеина, 15,93-16,58 1-олеин-2,3-дилилолеина, 6,43-6,69 1-пальмитин-2,3-дилинолеина, 16,20-16,87 1,3-диолеин-2-линолеина, 12,57-13,09 1-пальмитин2-линолеин-3-олеина, 2,79-2,91 1,3-дипальмитин-2-линолеина, 17,69-18,42 триолеина, 9,87-10,27 1пальмитин-2,3-диолеина, 1,68-1,74 1-олеин-2-линеолеин-3-стеарина, 1,86-1,94 1,3-дипальмитин-2-олеина и 1,58-1,65 1,2-диолеин-3-стеарина.
  4. 4. Способ получения композиции масла семян коикса по п.1, включающий следующие стадии:
    (1) сверхкритическая экстракция диоксидом углерода:
    a) измельчение семян коикса в порошок с размером частиц 20-60 меш и помещение указанного порошка в экстрактор;
    b) нагревание подогревателя CO2, экстрактора и разделительной колонки горячей водой, циркули-
    - 26 033647 рующей в рубашке, для достижения температуры экстракции и температуры разделения 33-45 и 30-45°C соответственно и поддержание температуры на выходе сепаратора I и сепаратора II на уровне 20-50 и 1535°C соответственно;
    c) подача подавлением жидкого CO2 при расходе от 2,5 до приблизительно 7,5 кг/ч-кг (относительно массы порошка семян коикса) в подогреватель CO2 через насос высокого давления, превращая его во флюид в сверхкритическом состоянии;
    d) экстракция масла флюидом CO2 под давлением 19-23 МПа;
    e) отправка флюида CO2 с этим маслом в разделительную колонку, в которой давление контролируют на уровне 7-10 МПа для отделения этого масла;
    f) отправка газообразного CO2 из разделительной колонки последовательно в сепаратор I и сепаратор II, в которых давление поддерживают на уровне 5-7 и 4-6 МПа соответственно, отбрасывание примесей, таких как вода;
    g) превращение в конденсаторе газообразного CO2 в жидкий CO2 для повторного использования;
    h) и непрерывная экстракция в течение 2-3 ч для получения неочищенного масла коикса, и (2) процесс очистки, включающий следующие стадии:
    добавление 55% петролейного эфира (температура кипения 60-90°C) относительно массы масла в неочищенное масло семян коикса, полученное сверхкритической экстракцией CO2, и добавление 2% водного раствора NaOH в количестве от 36 до 56% относительно массы масла в соответствии с кислотным числом, после перемешивания смеси в течение 10 мин и выдерживания в течение 18-24 ч удаление нижнего грязного слоя;
    b) промывание верхнего слоя очищенной водой, выдерживание в течение 18-24 ч, затем удаление нижнего слоя отработанной воды;
    c) повторное промывание верхнего слоя очищенной водой, выдерживание в течение еще 40-50 ч, затем удаление нижнего слоя отработанной воды и деэмульгирование верхнего слоя ацетоном в количестве 70-90% относительно массы масла, выдерживание в течение 2-4 ч, затем удаление нижнего слоя отработанного ацетона;
    e) добавление от 3 до 8% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла в верхний масляный слой, перемешивание смеси в течение 30 мин, затем фильтрование осадка;
    f) нагревание фильтрата и добавление от 2 до 6% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивание смеси в течение 30 мин при 40-50°C и последующее фильтрование осадка;
    g) концентрирование фильтрата при пониженном давлении для удаления растворителя и повторное промывание концентрата очищенной водой, после выдерживания в течение 1-2 ч удаление нижнего слоя отработанной воды, нагревание верхнего масляного слоя и его вакуумная сушка в атмосфере азота,
    h) добавление 8-12% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла, перемешивание смеси и поддержание в охлажденном состоянии;
    i) после фильтрования - стерилизация отфильтрованного масла путем сухого нагревания в вакууме при 160-170°C в течение 1-2 ч, после охлаждения - фильтрование масла через 0,2 мкм микропористую мембрану, затем раздельная загрузка полученного масла семян коикса в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и герметизация колб.
  5. 5. Способ по п.4, в котором указанный процесс очистки включает следующие стадии:
    a) добавление 55% петролейного эфира (температура кипения 60-90°C) относительно массы масла в неочищенное масло семян коикса, полученное сверхкритической экстракцией CO2, и добавление 2% водного раствора NaOH в количестве от 36 до 56% относительно массы масла в соответствии с кислотным числом, удаление нижнего грязного слоя после перемешивания смеси в течение 10 мин и выдерживания в течение 20 ч;
    b) промывание верхнего слоя очищенной водой, выдерживание в течение 22 ч, затем удаление нижнего слоя отработанной воды;
    c) повторное промывание верхнего слоя очищенной водой, выдерживание в течение еще 46 ч, затем удаление нижнего слоя отработанной воды;
    d) деэмульгирование верхнего слоя ацетоном в количестве 70-90% относительно массы неочищенного масла и выдерживание в течение 3 ч, затем удаление нижнего слоя отработанного ацетона;
    e) добавление 5% активированного нейтрального оксида алюминия относительно массы неочищенного масла в верхний масляный слой, перемешивание смеси в течение 30 мин, затем фильтрование осадка;
    f) нагревание фильтрата и добавление от 4% активированного каолина относительно массы неочищенного масла, перемешивание смеси в течение 30 мин при 40-50°C и последующее фильтрование осадка;
    g) концентрирование фильтрата при пониженном давлении для удаления растворителя и промывание концентрата очищенной водой, удаление нижнего слоя отработанной воды после выдерживания в течение 1 ч, нагревание верхнего масляного слоя и его вакуумная сушка в атмосфере азота;
    - 27 033647
    h) добавление 10% активированного нейтрального оксида алюминия, перемешивание смеси и поддержание в охлажденном состоянии;
    i) стерилизация масла путем сухого нагревания в вакууме при 160-170°C в течение 2 ч после фильтрования, фильтрование масла через 0,2 мкм микропористую мембрану после охлаждения, затем раздельная загрузка полученного масла семян коикса в 500 мл стеклянные инфузионные колбы и герметизация колб.
  6. 6. Фармацевтический препарат, содержащий терапевтически эффективное количество композиции масла семян коикса по любому из пп.1-3 и один или более чем один фармацевтически приемлемый носитель, выбранный из фармацевтических разбавителей, эксципиентов, наполнителей, эмульгаторов, связующих веществ, смазывающих веществ, ускорителей абсорбции, поверхностно-активных веществ, разрыхлителей, смазывающих веществ и антиоксидантов, ароматизаторов, подсластителей, консервантов и/или красителей.
  7. 7. Фармацевтический препарат по п.6, в котором указанный фармацевтически приемлемый носитель выбирают из одного или более из группы, состоящей из маннита, сорбита, метабисульфита натрия, бисульфита натрия, тиосульфата натрия, цистеина гидрохлорида, тиогликолевой кислоты, метионина, соевого лецитина, витамина C, витамина E, динатриевой ЭДТА, кальций натриевой ЭДТА, карбоната одновалентного щелочного металла, ацетата, фосфата или его водного раствора, соляной кислоты, уксусной кислоты, серной кислоты, фосфорной кислоты, аминокислоты, хлорида натрия, хлорида калия, лактата натрия, раствора этилпарабена, бензойной кислоты, сорбата калия, хлоргексидин ацетата, ксилита, мальтозы, глюкозы, фруктозы, декстрана, глицина, крахмала, сахарозы, лактозы, маннита, кремневых, целлюлозы, альгинатов, желатина, поливинилпирролидона, глицерина, Твин 80, агар-агара, карбоната кальция, бикарбоната кальция, поверхностно-активных веществ, полиэтиленгликоля, циклодекстрина, βциклодекстрина, фосфолипидного материала, каолина, талька и стеарата кальция или стеарата магния.
  8. 8. Фармацевтический препарат по п.6, который представляет собой пероральный твердый препарат, выбранный из любого из капсул, таблеток, микропиллюль, гранул и концентрированных пилюль, пероральный жидкий препарат, выбранный из любого из водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров, и указанный жидкий препарат может быть в сухой форме и может быть восстановлен водой или другим подходящим носителем перед применением, или инъекцию, выбранную из любой из наносуспензий, липосом, эмульсий, лиофилизированного порошка для инъекции и водной инъекции.
  9. 9. Фармацевтический препарат по п.8, где указанная инъекция содержит следующие компоненты: композиция масла семян коикса - 50-350 г, соевый лецитин для инъекции или соевый лецитин, пригодный для инъекции - 10-40 г, глицерин для инъекции или глицерин, пригодный для инъекции - 15-50 г, вода для инъекции до 1000 мл.
  10. 10. Способ получения фармацевтического препарата по п.9, включающий следующие стадии: добавление соответствующего количества воды для инъекции к рецептурному количеству соевого лецитина для инъекции или соевого лецитина, пригодного для инъекции, диспергирование смеси диспергирующим эмульгатором с высоким усилием сдвига с получением дисперсии без гранул, добавление рецептурного количества глицерина для инъекции или глицерина, пригодного для инъекции, затем добавление воды для инъекции до указанного количества и перемешивание смеси до получения водной фазы;
    взвешивание рецептурного количества композиции масла семян коикса, раздельное нагревание навески масла и водной фазы до 60-70°C, затем их смешивание и эмульгирование смеси в гомогенизаторе высокого давления, в котором низкое давление составляет 5-12 МПа и высокое давление составляет 2550 МПа, повторение цикла гомогенизации 3-6 раз до тех пор, пока количество частиц размером менее 2 мкм будет составлять не менее чем 95%, а частицы размером более 5 мкм не будут обнаруживаться, использование NaOH или HCl для доведения pH до 4,8-8,5;
    фильтрование полученной гомогенной эмульсии под давлением в атмосфере азота через микропористый фильтр 3 мкм или менее, обработка эмульсии азотом, стерилизация и охлаждение для получения инъекции.
  11. 11. Фармацевтический препарат по п.8, где указанная капсула содержит следующие компоненты: композиция масла семян коикса - 200-800 г, антиоксидант(ы) и/или эмульгатор(ы) - 0,20-0,60 г для получения 1000 капсул.
  12. 12. Способ получения фармацевтического препарата по п.11, включающий следующие стадии: получение раствора клея: взвешивание желатина, очищенной воды, глицерина и консерванта в массовом соотношении 1:(0,6-1,2):(0,3-0,8):(0,0001-0,01), последовательное добавление глицерина, очищенной воды и консерванта (выбранного из любого из 10% раствора этилпарабена, бензойной кислоты, сорбата калия и хлоргексидин ацетата) в резервуар для плавления клея, нагревание до 70-90°C, затем добавление желатина и постоянное перемешивание смеси в вакууме до полного растворения желатина, фильтрация раствора клея и хранение отфильтрованного раствора клея при 56-62°C перед использованием;
    приготовление лекарственной жидкости: добавление рецептурного количества композиции масла
    - 28 033647 семян коикса, антиоксиданта(ов) и/или эмульгатора(ов) в дозатор и постоянное перемешивание смеси до достижения гомогенности;
    прессование капсул: выбор подходящих пресс-форм в зависимости от размера капсулы, прессование капсул при температуре 15-30°C и относительной влажности менее 35%, сушка прессованных и формованных капсул, после удаления капсул неподходящего размера промывание капсул нормального размера 95% медицинским этанолом и продолжительная сушка до достижения содержания влаги менее 12%, визуальный контроль и удаление неподходящих капсул, затем нанесение печати и упаковка с получением капсул;
    где указанный консервант выбирают из любого из 10% раствора этилпарабена, бензойной кислоты, сорбата калия и хлоргексидина ацетата, причем указанный антиоксидант представляет собой витамин E и указанный эмульгатор представляет собой Твин 80.
  13. 13. Применение масла семян коикса по п.1 для получения противоопухолевого лекарственного средства, применяемого для лечения рака, выбранного из группы, состоящей из рака легкого, рака печени, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, рака яичника, рака молочной железы на ранней, средней или поздней стадии.
EA201790119A 2014-07-18 2015-07-17 Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение EA033647B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410343083.4A CN105250804A (zh) 2014-07-18 2014-07-18 含有11种甘油三酯的薏苡仁油、制剂及其应用
PCT/CN2015/084297 WO2016008442A1 (zh) 2014-07-18 2015-07-17 含有11种甘油三酯的薏苡仁油、制剂及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201790119A1 EA201790119A1 (ru) 2017-07-31
EA033647B1 true EA033647B1 (ru) 2019-11-13

Family

ID=55077928

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201790119A EA033647B1 (ru) 2014-07-18 2015-07-17 Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение

Country Status (12)

Country Link
US (1) US10314878B2 (ru)
EP (1) EP3170496A4 (ru)
JP (1) JP6473811B2 (ru)
KR (1) KR101919386B1 (ru)
CN (2) CN105250804A (ru)
AP (1) AP2017009707A0 (ru)
AU (1) AU2015291531B2 (ru)
CA (1) CA2954796C (ru)
EA (1) EA033647B1 (ru)
NZ (1) NZ726575A (ru)
SG (1) SG11201700123UA (ru)
WO (1) WO2016008442A1 (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110835523B (zh) * 2018-08-17 2022-02-15 中国石油化工股份有限公司 一种用于稠油冷采的乳化降粘剂及其制备方法
CN109576051A (zh) * 2018-12-06 2019-04-05 江西省药明扬海医药科技有限公司 一种氧化铝废渣中薏苡仁油的提取方法
CN109432004A (zh) * 2018-12-26 2019-03-08 江苏盈科生物制药有限公司 一种脂肪乳注射液的制备方法
KR102555338B1 (ko) * 2020-09-11 2023-07-13 에스에스바이오팜 주식회사 호박씨 오일을 함유하는 식품 조성물.
CN112538017B (zh) * 2020-12-15 2022-09-09 浙江工商大学 一种提取制备薏苡仁外皮抗氧化活性酚酸成分的方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1080176A (zh) * 1993-01-01 1994-01-05 浙江省中医院 薏苡仁中性油脂乳剂
CN1485072A (zh) * 2002-09-28 2004-03-31 治疗前列腺疾病的薏苡仁油软胶囊及其应用
CN1485418A (zh) * 2002-09-28 2004-03-31 李大鹏 超临界二氧化碳提取薏苡仁粗油方法
CN104173824A (zh) * 2014-07-18 2014-12-03 浙江康莱特集团有限公司 含有8种甘油三酯的薏苡仁油、制剂及其应用
US20140370129A1 (en) * 2013-06-14 2014-12-18 Zhejiang Kanglaite Group Co., Ltd. Dosing regimen and method for treating cancer using a coix seed oil emulsion

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PH30249A (en) * 1992-09-16 1997-02-05 Zhejiang Provincial Hospital O Neutral lipids from endosperm of job's tears
CN1029662C (zh) * 1992-09-17 1995-09-06 李大鹏 薏苡仁中性油脂及其提取方法
JP2002212586A (ja) * 2001-01-19 2002-07-31 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd 油脂の精製方法
CN1234828C (zh) * 2002-11-21 2006-01-04 上海高科联合生物技术研发有限公司 超临界二氧化碳萃取薏苡仁油的方法
CN1778380A (zh) * 2004-11-23 2006-05-31 乔志亚生技股份有限公司 薏仁油萃取的方法及组成分及其疗效
CN101036761B (zh) * 2007-04-23 2010-05-19 肖志勇 一种薏苡仁油的制备方法
CN101940738A (zh) * 2010-07-27 2011-01-12 辽宁中医药大学 薏苡仁抗癌中药及其制备方法
CN102177978B (zh) * 2011-04-14 2013-01-30 西南大学 薏苡仁米糠及其运用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1080176A (zh) * 1993-01-01 1994-01-05 浙江省中医院 薏苡仁中性油脂乳剂
CN1485072A (zh) * 2002-09-28 2004-03-31 治疗前列腺疾病的薏苡仁油软胶囊及其应用
CN1485418A (zh) * 2002-09-28 2004-03-31 李大鹏 超临界二氧化碳提取薏苡仁粗油方法
US20140370129A1 (en) * 2013-06-14 2014-12-18 Zhejiang Kanglaite Group Co., Ltd. Dosing regimen and method for treating cancer using a coix seed oil emulsion
CN104173824A (zh) * 2014-07-18 2014-12-03 浙江康莱特集团有限公司 含有8种甘油三酯的薏苡仁油、制剂及其应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
XIANG, Zhimin et al., Identification of Triacylglycerols in Coix Oil by High Performance Liquid Chromatography-Atmospheric Pressure Chemical Ionization-Mass Spectrometry, China Journal of Chinese Materia Medica, vol. 33, no. 18, 30 September 2005 (30.09.2005), pages 1436 to 1438 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106413702A (zh) 2017-02-15
JP6473811B2 (ja) 2019-02-20
AP2017009707A0 (en) 2017-01-31
CA2954796A1 (en) 2016-01-21
WO2016008442A1 (zh) 2016-01-21
US20170209517A1 (en) 2017-07-27
CN105250804A (zh) 2016-01-20
EP3170496A1 (en) 2017-05-24
CA2954796C (en) 2019-10-29
KR20170019448A (ko) 2017-02-21
AU2015291531A1 (en) 2016-12-08
AU2015291531B2 (en) 2018-03-29
SG11201700123UA (en) 2017-03-30
EP3170496A4 (en) 2018-03-28
NZ726575A (en) 2018-01-26
US10314878B2 (en) 2019-06-11
KR101919386B1 (ko) 2018-11-16
JP2017522441A (ja) 2017-08-10
EA201790119A1 (ru) 2017-07-31
CN106413702B (zh) 2017-09-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA033647B1 (ru) Масло семян коикса, содержащее 11 триглицеридов, и его фармацевтический препарат и его применение
US9855310B2 (en) Coix seed oil containing 8 triglycerides, and pharmaceutical preparation and use thereof
US10596218B2 (en) Coix seed oil containing 16 glycerides, and pharmaceutical preparation and use thereof
CA2954688C (en) Coix seed oil comprising 13 glycerides, formulation and application thereof
US20160015669A1 (en) Compound, 1, 3-diolein-2-linolein, and pharmaceutical preparation and use thereof
US20160015670A1 (en) Compound, 1-palmitin-2-linolein-3-olein, and pharmaceutical preparation and use thereof
US9585858B2 (en) Pharmaceutical composition containing 13 triglycerides, and preparations and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KZ KG TJ TM