EA027784B1 - Комбинированная вакцина против кори и вируса папилломы человека - Google Patents

Комбинированная вакцина против кори и вируса папилломы человека Download PDF

Info

Publication number
EA027784B1
EA027784B1 EA201071366A EA201071366A EA027784B1 EA 027784 B1 EA027784 B1 EA 027784B1 EA 201071366 A EA201071366 A EA 201071366A EA 201071366 A EA201071366 A EA 201071366A EA 027784 B1 EA027784 B1 EA 027784B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
nru
measles
combination vaccine
recombinant
vaccine according
Prior art date
Application number
EA201071366A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201071366A1 (ru
Inventor
Санджив К. Мендиретта
Рейнхард Глюэк
Вивиана Джаннино
Джузеппина Кантарелла
Франческа Скудери
Мартэн Бийетер
Агата Фаццио
Original Assignee
Кадила Хелзкэр Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кадила Хелзкэр Лимитед filed Critical Кадила Хелзкэр Лимитед
Publication of EA201071366A1 publication Critical patent/EA201071366A1/ru
Publication of EA027784B1 publication Critical patent/EA027784B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/002—Protozoa antigens
    • A61K39/015—Hemosporidia antigens, e.g. Plasmodium antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A61K39/165—Mumps or measles virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K2039/55527—Interleukins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55522—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K2039/55527—Interleukins
    • A61K2039/55533—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18441—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2760/18443—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/10—Plasmid DNA
    • C12N2800/101—Plasmid DNA for bacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/10—Plasmid DNA
    • C12N2800/106—Plasmid DNA for vertebrates
    • C12N2800/107—Plasmid DNA for vertebrates for mammalian

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к комбинированным вакцинам против вируса кори и вируса папилломы человека (HPV). В частности, данное изобретение относится к векторным рекомбинантным вирусам кори, содержащим в себе гетерологичные нуклеиновые кислоты, кодирующие один или несколько антигенов, полученных из HPV, предпочтительно главный капсидный антиген L1, малый капсидный антиген L2, онкопротеины раннего гена E6 и раннего гена E7 HPV типа 16 и, не обязательно, типов 18, 6 и 11. В первом варианте осуществления разработаны профилактические вакцины, экспрессирующие антигены HPV, предпочтительно L1 и/или L2, так что они индуцируют сильную продолжительную иммунную реакцию у млекопитающих, предпочтительно у человека, для защиты от заражения HPV и MV. В другом варианте осуществления разработаны терапевтические вакцины, экспрессирующие белки E6 и E7 и, при желании, L1 и L2, так что индуцируемые ими сильные иммунные реакции будут устранять персистентные инфекции HPV на ранней или поздней стадиях, включая карциному шейки матки, индуцированную HPV. В предпочтительном варианте осуществления данные комбинированные вакцины являются легко производимыми в промышленных масштабах и могут быть распространены по низкой стоимости.

Description

Настоящее изобретение относится к комбинированным вакцинам против кори и вируса папилломы человека (НРУ). В частности, настоящее изобретение относится к рекомбинантному вирусу кори, служащиму вектором, который содержит гетерогенную нуклеиновую кислоту, кодирующую один или несколько антигенов, полученных из НРУ, предпочтительно главный капсидный антиген Ь1, малый капсидный антиген Ь2, ранний ген Е6 и ранний ген Е7 онкобелков НРУ 16 типа, и, при желании, типов 18, 6 и 11.
В первом варианте осуществления предложены профилактические вакцины, экспрессирующие антигены НРУ, предпочтительно Ь1 и/или Ь2, которые вызывают сильный продолжительный иммунный ответ у млекопитающих, предпочтительно у человека, для защиты от инфекции НРУ и МУ. В другом варианте осуществления предложены терапевтические вакцины, экспрессирующие белки Е6 и Е7, и, необязательно, Ь1 и Ь2, которые вызывают сильные иммунные ответы, устраняющие персистентные инфекции НРУ на ранней или поздней стадиях, включая карциному шейки матки, вызванную НРУ. В предпочтительном варианте осуществления комбинированные вакцины могут быть легко получены в промышленных масштабах и продаваться по привлекательной цене.
Предпосылки к созданию изобретения Белки, вызываемые вирусом папилломы человека
Каждый год в мире регистрируется приблизительно полмиллиона новых случаев рака шейки матки, в частности в развивающихся странах, который является второй по распространенности причиной смертности у женщин. Вирусы папилломы человека (НРУ) являются первичным возбудителем карциномы шейки матки; ДНК НРУ может быть обнаружена в более чем 95% случаях этого рака (1). Начиная с 1998 г. профилактические и лечебные подходы, главным образом, основываются на массовых обследованиях для выявления и устранения предракового заболевания. Тем не менее, использование тестов на НРУ ограничено социальными причинами и, в настоящее время, основным препятствием к их использованию является высокая стоимость. Таким образом, разработка вакцин, которые предотвращают инфекцию НРУ, является важной возможностью профилактики развития рака шейки матки, тогда как терапевтическая иммунизация для лечения предракового и ракового заболевания является дорогостоящей.
НРУ принадлежат к крупному семейству малых вирусов с двухцепочечной ДНК, которые инфицируют сквамозный эпителий (современный полный обзор папилломавирусов представлен у Но\у1су. Р.М. апб Ьо^у, Ό.Κ. (2007) в Ρίβΐάδ Уно1о§у, ΓίΓιΗ ебйюп, ебк.-ш-сЫеГ Кшре, Ό.Μ. &. Но\у1су. Р.М. Ырртсой ^ййатк & \νί11<ίη8„ РЫ1абе1рЫа РА 19106, И8А, рр. 2299-2354). До настоящего времени было описано более 100 генотипов, среди которых по меньшей мере 35 типов инфицируют половые пути. Несмотря на то, что большинство типов НРУ вызывают доброкачественные поражения, небольшая субпопуляция генотипов неразрывно связана с развитием выраженных внутриэпителиальных поражений сквамозного эпителия и рака шейки матки. Эта субпопуляция была обозначена как субпопуляция с высокой степенью риска и установлено, что НРУ-16 является причиной приблизительно 60% случаев рака шейки матки, а НРУ-18 добавляет еще 10-20%. К другим типам с высокой степенью риска относятся типы 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 и 73. НРУ с низкой степенью риска, например, НРУ-6 и НРУ-11, являются причиной доброкачественных остроконечных кондилом (в 90% случаях доброкачественных остроконечных кондилом выявляется НРУ-6 или 11). Бивалентные вакцины против 16/18, устраняющие наиболее частые типы с высокой степенью риска, также могут обеспечить защиту от типов с низкой степенью риска. Идеальная вакцина должна защищать от других типов НРУ за счет использования антигенов различных типов и/или антигенов, содержащих консервативные области.
Геном НРУ кодирует восемь белков. Поздние гены Ь1 и Ь2 кодируют капсидные белки; ранние белки Е1 и Е2 отвечают за вирусную репликацию и транскрипцию, а Е4 участвует в высвобождении вируса из инфицированных клеток. Интеграция вирусной ДНК НРУ с высокой степенью риска в геномхозяина приводит к потере транскрипционного контроля, опосредованного белками Е1 и Е2, и, соответственно, к сверхэкспрессии белков Е6 и Е7, ответственных за процесс злокачественного перерождения (2). Структурный белок Ь1 типов с высокой степенью риска представляет собой оптимальную мишень для профилактических вакцин. С другой стороны, белки Е6 и Е7 являются очевидными терапевтическими мишенями.
В действительности, существует несколько профилактических композиций вакцины против НРУ, основанных на главном капсидном белке Ь1 вируса, либо в виде мономера, либо в виде вирусоподобной частицы (УЬР) типов НРУ-16 и 18, и в некоторых случаях содержащих дополнительные типы (νθ 94/00152, νθ 94/20137, νθ 93/02184 и νθ 94/05792). УЬР могут дополнительно содержать белки Ь2, например вакцины на основе Ь2, описанные в νθ 93/00436. Эти вакцины являются чрезвычайно иммуногенными и являются безопасными; однако их высокая стоимость препятствует их широкому применению в группе риска, а их специфичность к типам НРУ является еще одним ограничением к применению. Таким образом, остается потребность в разработке дополнительных улучшенных вакцин против НРУ, которые должны быть недорогими. Кроме того, вакцинация антигеном в большинстве случаев вызывает специфический гуморальный иммунный ответ, который имеет незначительное благоприятное воздействие, или не воздействует на существующую инфекцию НРУ и связанного с ней заболевания.
- 1 027784
Разработка терапевтической вакцины основана не только на получении нейтрализующих антител, но, главным образом, на индукции специфических клеточных иммунных ответов, которые являются основными компонентами для устранения развившейся инфекции. Таким образом, терапевтические вакцины должны включать несколько антигенных детерминантов, полученных из ранних белков НРУ, а не из поздних белков. Ранние гены типов НРУ с высокой степенью риска (Е6 и Е7) кодируют основные трансформирующие белки. Эти гены способны иммортилизировать эпителиальные клетки и, как полагают, играют роль в инициации онкогенного процесса. Белковые продукты этих ранних генов препятствуют нормальной функции генов, супрессирующих опухоль. Белок Е6 НРУ способен взаимодействовать с р53, что приводит к его дисфункции, и, таким образом, к ослаблению его способности блокировать клеточный цикл, в случае ошибок в ДНК. Белок Е6 также сохраняет длину теломеразы выше ее критической точки, защищая клетку от апоптоза. Белок Е7 НРУ связывается с белком ретинобластомы (рКЬ) и активирует гены, которые запускают клеточный цикл, что приводит к пролиферации ткани. Белки Е6 и Е7 являются хорошими мишенями, и были описаны различные подходы к созданию терапевтических вакцин против НРУ на основе белка Е6. В последние несколько лет был описан целый ряд подходов иммунизации на пептидной/белковой основе, или генетической иммунизации, для индукции НРУ специфической СТЬ активности. Обзор о прогрессе развития вакцин против НРУ дан в ссылке (3). Были предприняты попытки получения ДНК-вакцин (плазмидная ДНК, кодирующая белки НРУ) с известной способностью стимулировать, главным образом, клеточный ответ. Несмотря на то, что ДНК-вакцины эффективны в моделях на мышах, многочисленные клинические испытания не смогли дать принципиальных доказательств их эффективности у человека. Основные недостатки, связанные с подходом на основе пептидов, включают проблему МНС-полиморфизма и риск развития скорее Т-клеточной толерантности, а не Т-клеточной активации. В результате индукции специфической Т-клеточной толерантности, было показано, что вакцинация опухолеспецифическим пептидом приводит к усиленному росту опухоли. Иммунизация более крупными белками решила бы эти проблемы, но для них требуется эффективная экспрессирующая система ίη νίνο и/или безопасные адъюванты для примирования эффективного клеточного иммунного ответа. Подходы, связанные с применением рекомбинантных вакцин на основе вирусных векторов, находятся в процессе разработки (поксвирусы, аденовирус, альфавирус, вирус полиомиелита и вирус герпеса). Например, в И8 2007269409 (АО 200404417б), описана вакцина на основе аденовируса, которая кодирует белок Е6 или Е7 НРУ. Эта вакцина, основанная на аденовирусе, способна индуцировать стойкий иммунитет; однако сохраняется возможность интеграции ДНК НРУ в геном хозяина, что может ограничивать безопасность. В связи с вышеизложенными недостатками, использование вируса кори в качестве вектора экспрессии антигенов НРУ, представляет собой новую стратегию для разработки профилактической комбинированной вакцины против вируса кори и НРУ, а также терапевтической вакцины против НРУ.
Векторы на основе вируса кори для иммунизации. Вирус кори (МУ) является членом семейства Рагату.\о\зпбас. Несегментированный геном МУ имеет антисмысловую полярность, что приводит к формированию геномной РНК, которая после очищения не транслируется ни ίη νίνο, ни ίη νίίτο, и не является инфекционной. Транскрипция и репликация несегментированной (-)-нити РНК вирусов, и их сборка в вирусные частицы, были исследованы и опубликованы (4). Транскрипция и репликация вируса кори не затрагивает ядер инфицированных клеток, а происходит в цитоплазме указанных клеток. Геном вируса кори содержит гены, кодирующие шесть главных структурных белков этих шести генов (обозначены как Ν, Р, М, Р, Н и Ь), и дополнительно два неструктурных белка гена Р. МУ является главной причиной острой лихорадки у детей первого года жизни и детей младшего возраста. По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), каждый год от кори умирает один миллион детей младшего возраста. Эти огромные цифры, главным образом, связаны со смертностью в развивающихся странах, но в последние годы в промышленно развитых странах, например США, также была отмечена эпидемия кори, главным образом, по причине неполного соблюдения программ иммунизации (5). В настоящее время используется несколько вакцин, основанных на аттенуированных штаммах МУ (в том числе штаммах Шварца, Моратена и Эдмонстона-Загреба), почти все из них получены из первичного штамма Эдмонстона (6) в результате серийных пассажей в клетках, не являющихся клетками человека. Доказано, что вакцины МУ являются одними из самых безопасных, наиболее стабильных и эффективных вакцин человека, разработанных в настоящее время. Производимая в промышленных масштабах в большинстве стран и распространяемая по низкой стоимости в рамках длительной программы иммунизации (Е\1спбсб Ргодгат оп ΙιηιηιιηίζαΟοη. ЕР1) ВОЗ эта вакцина вызывает пожизненный иммунитет после единственной инъекции (4, 7) и бустерной иммунизации. Защита связана как с антителами, так и с СЭ4 и СЭ8 Т-клетками. Персистирование антител и СЭ8-клеток была показана в течение 25 лет после иммунизации (7).
Майт ВП1с1сг с коллегами впервые создали эффективную инвертированную генетическую процедуру для получения вирусной несегментированной РНК минус-цепь из клонированной дезоксирибонуклеиновой кислоты (кДНК), выделенной из МУ штамма Эдмонстона, как описано в ссылке 8 и АО 97/06270, схема организации антигенома р(+)МУЕ2 вируса кори приведена на фиг. 1. Во-первых, эти технологические приемы делают возможным проведение сайт-направленного мутагенеза, что обеспечивает понимание целого ряда важных аспектов биологии этих вирусов. Параллельно были встроены чу- 2 027784 жеродные кодирующие последовательности а) для локализации репликации вируса ίη νίνο посредством маркера экспрессии гена, Ь) для разработки подходящей поливалентной вакцины против кори и других патогенных микроорганизмов и с) для создания подходящих онколитических вирусов. Эффективность применения этих вирусов в виде векторов была экспериментально подтверждена ярко выраженной генетической стабильностью рекомбинантных генов, неожиданной для РНК-содержащих вирусов, и высокой нагрузкой встраиваемого генетического материала свыше 6 т.п.н. Таким образом, известные полученные качества были дополнены, такие как небольшой размер генома вектора по сравнению с ДНКсодержащими вирусами, обширный клинический опыт применения аттенуированого МУ в качестве вакцины с доказанной высокой безопасностью и эффективностью и низкая стоимость производства одной вакцинационной дозы.
Нуклеотидная последовательность рекомбинантного вируса кори должна содержать репликон с общим числом нуклеотидов, кратным шести. Это правило шести выражается в том, что общее число нуклеотидов, находящееся в рекомбинантной кДНК, в конечном итоге должно быть равно числу нуклеотидов, кратному шести, что делает возможным эффективную репликацию геномной РНК вируса кори.
Гетерологичную ДНК клонируют в вектор МУ в пределах дополнительной транскрипционной единицы (АТи), встроенной в кДНК соответствующей антигеномной РНК вируса кори. Расположение АТИ может изменяться на протяжении указанной кДНК, однако она расположена в таком месте, которое является выгодным с точки зрения градиента экспрессии вируса кори. По этой причине АТи или любой другой инсерционный сайт, подходящий для клонирования последовательности гетерологичной ДНК, могут быть распространены на всем протяжении данной кДНК с предпочтительным вариантом для инсерционного сайта и особенно в АТи, существующей в Ν-терминальной области данной последовательности, и особенно в пределах участка, находящегося в 3'-5' направлении относительно гена Ь вируса кори, предпочтительно находящегося в 3'-5' направлении относительно гена М указанного вируса кори и более предпочтительно в 3'-5' направлении относительно гена N указанного вируса.
Благоприятные иммунологические свойства рекомбинантных вирусов кори могут быть продемонстрированы на животной модели, где животное выбрано из животного с подверженным воздействием вируса кори, и в который вырабатывается гуморальный и/или клеточный ответ на гетерологичный антиген и/или против вируса кори. Среди таких животных, подходящих для использования в качестве модели для описания иммунной реакции, специалист в уровне техники может, главным образом, использовать трансгенных мышей, экспрессирующих СЭ46 специфический рецептор для МУ, или обезьян.
Этот технологический прием позволяет производить сохраненные вирусы, содержащие и стабильно экспрессирующие чужеродные гены, подходящие для использования в качестве комбинированных вакцин МУ. В качестве доказательного эксперимента МУ использовали для экспрессии антигенов, полученных из 81У, Н1У, вируса гепатита В, вируса паротита, вируса Западного Нила (ΑΝ) и 8АК8СоУ (9-12). В большинстве этих исследований рекомбинантные МУ, которые экспрессируют гетерологичные антигены, участвовали в индукции специфических гуморальных нейтрализующих антител в модели на трансгенных мышах (13) и было показано, что они индуцируют клеточный иммунный ответ на некоторые белки (9, 11). В настоящее время клинические испытания любых возможных рекомбинантных вакцин, основанных на МУ, находятся только на этапе планирования, однако экспериментальные результаты подтверждают гипотезу, что МУ комбинированные вакцины должны быть эффективными для установления длительной иммунной защиты против других патогенов по сравнению с векторным вирусом как таковым. В действительности, в случае МУ, экспрессирующего дрЕ ΑΝΑ. абсолютная защита до шести месяцев была документально подтверждена у обезьян (14), и МУ, экспрессирующий антиген вируса Денге, индуцировал длительную выработку нейтрализующих антител (15). Кроме того, у трансгенных мышей и макак восстановленный МУ был способен индуцировать специфический гуморальный иммунный ответ на гетерологичный антиген при наличии предсуществующей невосприимчивости к МУ (9, 11, 16).
Получение восстановленных живых рекомбинантных вакцин МУ в промышленных масштабах большинстве стран не вызывает затруднений, и данные вакцины могут продаваться по низкой стоимости. Что касается безопасности, то репликация МУ происходит исключительно в цитоплазме, что исключает возможность интеграции в ДНК хозяина. Эти свойства делают восстановленную рекомбинантную МУ вакцину привлекательным кандидатом для использования в качестве мультивалентного вакцинационного вектора для антигенов НРУ. Взрослое население, даже те, кто иммунизированы против МУ, тем не менее также может извлечь пользу из иммунизации рекомбинантной МУ, поскольку повторное введение вируса МУ в виде рекомбинантной формы по настоящему изобретению может привести к повышению титра антител против МУ (11).
До настоящего времени не был разработан способ получения вакцины, способной индуцировать невосприимчивость к МУ, комбинированную с иммунитетом против НРУ.
Настоящее изобретение относится, в частности, к получению рекомбинантных вирусов кори, несущих гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую антигены НРУ.
Подробное описание изобретения
Целью настоящего изобретения является получение комбинированных вакцин против кори-НРУ, из рекомбинантного векторного вируса кори, способного содержать стабильно интегрированные нуклео- 3 027784 тидные последовательности, которые кодируют белки Ь1, 1.2, Е6 и/или Е7 различных типов НРУ.
Настоящее изобретение относится к восстановлению рекомбинантных вирусов МУ-НРУ, способных к инфицированию, репликации и экспрессии белка Ь1, Е2, Е6 или Е7 у восприимчивых рекомбинантных мышей, обезьян и человека.
Кроме того, настоящее изобретение относится к конструированию мультивалентных рекомбинантных корь-НРУ векторов, в которых два различных антигена одновременно клонированы и экспрессированы в одном и том же векторе, передавая иммунитет против них обоих.
Более того, изобретение относится к композиции различных рекомбинантных корь-НРУ вирусов, каждый из которых несет в себе и экспрессирует ген отличного типа НРУ, для индукции иммунного ответа в организме хозяина, направленного против различных типов НРУ.
Кроме того, изобретение относится к способу получения вакцины, содержащей указанные рекомбинантные вирусы.
Более того, настоящее изобретение также относится к применению интерлейкина-2 в качестве адъюванта для повышения ответа комбинированной вакцины.
Наконец, изобретение относится к вакцине, которая способна индуцировать сильную и пожизненную иммунную реакцию против НРУ и вируса кори, и предотвратить инфицирование и/или лечить инфекционные заболевания.
Сыворотка/иммунизация Титр НРУ в ИФА Титр НРУ в нейтрализующем анализе
Μν2ΕΖ-ΗΡν-Σ1 №1 2560 10240
Μν2ΕΖ-ΗΡν-Σ1 №2 10240 40960
Μν2ΕΖ-ΗΡν-ΙΛ №3 10240 10240
Μν2ΕΖ-ΗΡν-ΙΛ №4 10240 10240
Μν2ΕΖ-ΗΡν-ΙΛ №5 10240 10240
Μν2ΕΖ-ΗΡν-ΙΛ №6 10240 40960
РВЗ (объединенная сыворотка) 40 40
ΜνΕΖ (объединенная сыворотка) 40 40
Μν, инактивированный посредством УФ (объединенная сыворотка) 40 40
Описание чертежей
Фиг. 1 - схематическое изображение антигеномной р(+)МУ вируса кори. ρ(+)Μν-ΕΖ представляет собой плазмиду, полученную из вектора рЫиезспр!, содержащего полную последовательность вируса кори (Эдмонстона-Загреба), под контролем промотора Т7 РНК-полимеразы (Т7), содержащего три ЛТИ соответственно в положении 1 (перед геном N данного вируса кори), 2 (между генами Р и М данного вируса кори), и 3 (между генами Н и Б данного вируса кори), и строго ограничены посредством рибозима вируса гепатита дельта и терминатора Т7 РНК-полимеразы (Τ7ΐ). Размер данной плазмиды составляет 18 941 п.н.
Фиг. 2 - схематическое изображение рекомбинантной плазмиды корь-папиллома, ρ(+)ΜΥ2-ΕΖ-Ε1. Эта плазмида получена из р^МУ-ΕΖ, содержащей ген НРУ-Б1 (тип 16), 1518 п.н., клонированный во втором положении генома данного вируса кори посредством расщепления с помощью ВззНП-АаШ. Размер данной рекомбинантной плазмиды составляет 20561 п.н.
Фиг. 3 - схематическое изображение рекомбинантной плазмиды корь-папиллома, ρ(+)ΜУ3-ΕΖ-НРУЬ1. Эта плазмида получена из ρ(+)ΜУ-ΕΖ, содержащей ген НРУ-Б1 (тип 16), 1518 п.н., клонированный в третьем положении генома данного вируса кори посредством расщепления с помощью ВззНП-АаШ. Размер рекомбинантной плазмиды ρ(+)ΜУ3-ΕΖ-НРУ-^1 составляет 20561 п.н.
Фиг. 4а - полноразмерная нуклеотидная последовательность плазмиды ρ(+)ΜУ2-ΕΖ-ΘРР (19774 п.н.). Последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
592-608 промотор Т7,
609-17335 антигеном МУ Эдмонстона-Загреба,
4049-4054 сайт рестрикции М1и1,
4060-4065 сайт рестрикции ВззНП,
4066-4782 открытая рамка считывания зеленого флуоресцентного белка (ОРР),
4786-4791 сайт рестрикции ВззНП,
- 4 027784
4798-4803 сайт рестрикции ЛаШ,
17336-17561 рибозим НОУ и терминатор Т7.
Фиг. 4Ь - полноразмерная нуклеотидная последовательность ρ(+)Μν3-ΕΖ-ΟΡΡ (19774 п.н.). Последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
592-608 промотор Т7,
609-17335 антигеном МУ Эдмонстона-Загреба,
9851-9856 сайт рестрикции М1и1,
9862-9867 сайт рестрикции ΒδδΗΙΙ,
9868-10584 открытая рамка считывания зеленого флуоресцентного белка (ΟΡΡ),
10588-10593 сайт рестрикции ΒδδΗΙΙ,
10600-10605 сайт рестрикции ЛаШ,
17336-17561 рибозим НОУ и терминатор Т7.
Фиг. 5а - ΑΝΕ1ΤΕ: это последовательность открытой рамки считывания НРУ16-Ы (1518 п.н.), клонированная авторами изобретения. Последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-1515 открытая рамка считывания НРУ-Ь1,
1516-1518 стоп-кодон.
Фиг. 5Ь - последовательность открытой рамки считывания НРУ16-Ь2. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-1419 открытая рамка считывания НРУ-Ь2,
1420-1422 стоп-кодон.
Фиг. 5с - последовательность открытой рамки считывания НРУ16-Е6. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-474 открытая рамка считывания НРУ-Е6,
475-477 стоп-кодон.
Фиг. 56 - последовательность открытой рамки считывания НРУ16-Е7. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-294 открытая рамка считывания НРУ-Е7,
295-297 стоп-кодон.
Фиг. 5е - последовательность открытой рамки считывания НРУ18-Ы. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-1704 открытая рамка считывания НРУ-Ь1,
1705-1707 стоп-кодон.
Фиг. 5£ - последовательность открытой рамки считывания НРУ18-Ь2. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-138 6 открытая рамка считывания НРУ-Ь2,
1387-1389 стоп-кодон.
Фиг. 5д - последовательность открытой рамки считывания НРУ18-Е6. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-474 открытая рамка считывания НРУ-Е6,
475-477 стоп-кодон.
Фиг. 51т - последовательность открытой рамки считывания НРУ18-Е7. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-315 открытая рамка считывания НРУ-Е7,
316-318 стоп-кодон.
Фиг. 5ί - последовательность открытой рамки считывания НРУ6-Ы. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-1500 открытая рамка считывания НРУ-Ь1,
1501-1503 стоп-кодон.
Фиг. 5_) - последовательность открытой рамки считывания НРУ6-Ь2. Данная последовательность может быть описана следующим образом со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-1377 открытая рамка считывания НРУ-Ь2,
- 5 027784
1378-1380 стоп-кодон.
Фиг. 5к - последовательность открытой рамки считывания НРУб-Еб. Данная последовательность может быть описана следующим образом, со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-450 открытая рамка считывания НРУ-Еб,
451-453 стоп-кодон.
Фиг. 51 - последовательность открытой рамки считывания НРУ6-Е7. Данная последовательность может быть описана следующим образом, со ссылкой на положение данных нуклеотидов:
1-3 стартовый кодон,
4-2 94 открытая рамка считывания НРУ-Е7,
295-297 стоп-кодон.
Фиг. б - восстановление рекомбинантного вируса МУ2-Е2-Ь1 в клетках-хелперах 293-3-46. Клетки были совместно трансфецированы с помощью 25 нг рЕМСЬа и 5 мкг рекомбинантной плазмиды р(+)МУ2-Е2-Ь1.
Фиг. 7 - образование синцития в клетках Уего, трансфецированных МУ2-Е2-Ь1. На 24 ч после инфицирования (п.и.) клетки фиксировали с помощью этанола и окрашивали кристаллическим фиолетовым.
Фиг. 8 - кривые роста клеточно-ассоцированного (СА) и бесклеточного (СР) вируса в клетках МК.С5. Монослойные культуры инфицировали вирусом МУ2-Е2-Ы и МУЕ2 при значении МО1, равном 0,05.
Фиг. 9 - экспрессия НРУ-1 рекомбинантными МУ в результате иммунофлуоресцентного анализа. Клетки Уего инфицировали либо с помощью МУ2-Е2-Ы (А), либо МУЕ2 (В), при значении МО1, равном 0,05, в течение 48 ч и подвергали непрямой иммунофлуоресценции. На верхних панелях специфические сигналы НРУ-Ь1 были определены с мышиным моноклональным анти-НРУ-Ы антителом, с последующим определением с конъюгатом козье антимышиное антитело - Р1ТС, на нижних панелях те же самые препараты были окрашены с помощью ЭАР1 (4',б-диамидино-2-фенилиндол хлоргидрат), и исследовали, соответственно, под флуоресцентным или естественным освещением.
Фиг. 10 - экспрессия НРУ-1 рекомбинантными МУ посредством вестерн-блоттинга. Клетки Уего инфицировали с помощью либо МУЕ2 (1), либо МУ2-Е2-Ы (2) в течение 48 ч при значении МО1, равном 0,05. Экспрессия НРУ-Ь1 в супернатанте (А) и клеточном лизате (В) после инфицирования с помощью МУЕ2 (линия 1) или МУ2-Е2-Ь1 (линия 2).
Фиг. 11 - вестерн-блот анализ НРУ-Ь1 с С§С1 различных фракций.
Данные примеры описывают данное изобретение.
Пример 1. Конструкция рекомбинантных плазмид р(+)МУ2-Е2-НРУ и р(+)МУ3-Е2-НРУ.
В основном, все процедуры клонирования были, как описанные в БатЬгоок е! а1. (1989).
Все рестрикционные ферменты были фирмы №ν Еп§1аиб ВюЬаЬк; олигонуклеотидные праймеры для ПЦР были фирмы 1пуйгодеп.
Последовательность Ь1 амплифицировали посредством ПЦР и напрямую клонировали в оптимальные векторы МУ, получая в результате две рекомбинантные МУ-НРУ1б-Е1 плазмиды: р(+)МУ2-Е2НРУ-Ь1 и р(+)МУ3-Е2-НРУ-Ь1.
ПЦР-амплификацию проводили, используя корректирующую ДНК-полимеразу РГи (81га1адепе). Последовательности ДНК синтетических олигонуклеотидных праймеров представлены заглавными буквами для МУ нуклеотидов, а строчными буквами для не-МУ нуклеотидов; последовательности участков распознавания соответствующих эндонуклеаз рестрикции подчеркнуты. Были использованы следующие праймеры: РОК.-Б1 5'-й§дсдсдссАТСАСССТСТСССТСССС-3'; КЕУ-Ь1 5'-а1ааса1сТСАСАССТ ТССТСТТСТТССТС-3'.
Праймер Рог-Ь1 содержит в себе липкий конец (строчные буквы) с сайтом рестрикции ВккНП (дсдсдс), после защитного участка длиной 3-п.н. (11§).
Праймер Кеу-Ь1 содержит в себе липкий конец (строчные буквы) с сайтом рестрикции Аа!11 (дасд!с).
Полученный продукт ПЦР-НРУ1б-Е1 (153б п.н.) клонировали в вектор р(+)МУЕ2 (фиг. 1) между генами белков Р и М (положение 2, фиг. 2) или между Н и Ь (положение 3, фиг. 3) после расщепления посредством ВккНП+АаШ. Лигирования проводили в течение ночи при 1б°С в эквимолярном соотношении относительно предварительно расщепленных с помощью ВккНП+АаШ векторов МеУ2-Е2 и МеУ3Ей (длина 19 т.п.н.), используя 1 единицу ДНК-лигазы Т4, получая, соответственно, р(+)МУ2-Е2-Ь1 (205б1 п.н.) и р(+)МУ3-Е2-Ь1 (205б1 п.н). На фиг. 4 и 5 представлены, соответственно, последовательности данных векторов р(+)МУ2-Е2-СРР и р (+)МУ3-Е2-СРР.
Химически компетентные клетки ХЬ10 Со1б затем трансформировали с использованием всего объема лигационной смеси, следуя стандартному протоколу трансформации (БатЬгоок е! а1., 1989), высевали и селектировали на чашках Петри с ЬВ-агаром на устойчивость к ампициллину. Колонии проверяли посредством получения плазмидной ДНК (Э1АСЕН мини-, миди-, и максинабор) и расщеплением ферментом рестрикции. Нужные клоны были отправлены в М\УС для секвенирования: данные последова027784 тельности, выровненные с предполагаемыми последовательностями с использованием программного обеспечения ΌΝΆ 81г1Йсг. показали 100% идентичность. Нуклеотидная последовательность, кодирующая НРУ16-Б1, представлена на фиг. 5а.
Все остальные антигены Ь2, Е6 и Е7 из НРУ16 и Ь1, Ь2, Е6, и Е7 из НРУ 18 и 6 типов были клонированы так же, как подробно описано выше.
Последовательности открытых рамок считывания представлены на фиг. 5 (5Ь-51).
Список рекомбинантных плазмид МУ-НРУ из НРУ 16, 18 и 6 типов:
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ16-Ь1
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ16-Ь1
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ16-Ь2
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ16-Ь2
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ16-Е6
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ16-Е6
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ16-Е7
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ16-Е7.
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ18-Ь1
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ18-Ь1
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ18-Ь2
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ18-Ь2
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ18-Е6
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ18-Е6
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ18-Е7
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ18-Е7
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ6-Ь1
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ6-Ь1
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ6-Ь2
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ6-Ь2
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ6-Е6
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ6-Е6
Плазмида р(+)МУ2-Е2-НРУ6-Е7
Плазмида р(+)МУ3-Е2-НРУ6-Е7.
Пример 2. Клетки и вирусы.
Клетки поддерживали в виде монослойных культур в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ИМЕМ), дополненной 5% фетальной телячьей сывороткой (ЕС8) для клеток Уего (почки африканской зеленой мартышки) и 10% РС8 и 1% пенициллин/стрептомицин для клеток 293Т (почки эмбриона человека); ИМЕМ, дополненной С1и1ашах (Р12) и 10% РС8 для МКС-5 (фибробласты эмбриона человека); ИМЕМ, дополненной РС8 и 1,2 мг/мл С 418 для 293-3-46.
Для того чтобы вырастить популяции вируса МУ до титров приблизительно 107 БОЕ/мл, рекомбинантные вирусы и вакцину штамма Эдмонстона-Загреба размножали в клетках МКС-5: очищение бляшек проводили посредством переноса синцития на 35 мм клеточную культуру МКС-5, которая сначала росла на чашке диаметром 10 см, а затем во флаконе 175 см. Вирусные популяции были выделены из 175 см2 культур, в которых образование синцития было выражено приблизительно на 90%. Среду, соответствующую так называемой бесклеточной вирусной фракции собирали, замораживали и растаивали три раза и осаждали для того, чтобы избавиться от клеточного дебриса. Данную среду затем хранили при -80°С. Клетки, соответствующие так называемой клеточно-ассоциированной вирусной фракции, соскабливали в 3 мл ОРТ1МЕМ (СЬсо ВКЬ), с последующими тремя циклами замораживание-оттаивание, осаждали и данный очищенный супернатант хранили при -80°С.
Пример 3. Трансфецирование плазмид и восстановление вирусов МУ.
Рекомбинантные вакцинные вирусы корь-НРУ получали, используя хелперные клетки 293-3-46 (клетки почек эмбриона человека), стабильно экспрессирующие белки N и Р вируса кори, а также РНКполимеразу Т7. Данная вирусная РНК-полимераза (большой белок, Ь) была экспрессирована посредством совместной трансфекции клеток 15 нг плазмидной реМСЬа. Для трансфекции использовали кальций-фосфатный метод.
Клетки 293Т-3-46 высевали в 35 мм ячейки, чтобы получить ~50-70% слияния при трансфекции. За 4 ч перед трансфекцией данную среду заменяли 3 мл среды ИМЕМ, содержащей в себе 10% РС8. Все рекомбинантные плазмиды были получены в соответствии с набором для получения плазмид ф1АСЕИ Данный набор для Са2+ фосфатной копреципитации ДНК приобретен в фирме 1пуйгодеи.
Клетки были совместно трансфецированы плазмидами в следующих конечных концентрациях: 25 нг рЕМСЬа и 5 мкг рекомбинантной плазмиды р(+)МУ2-Е2-Ь1. Все плазмиды, разбавленные Н2О, добавляли в пробирку Эппендорфа, содержащую в себе 2М СаС12, данную смесь добавляли в другую пробирку Эппендорфа, содержащую в себе буфер НЕРЕ8, в условиях встряхивания и инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре (КТ). Следующим образом, данные копреципитаты добавляли по
- 7 027784 капле в данную культуру и проводили трансфекцию при 37°С и 5% СО2 в течение приблизительно 18 ч. Затем данную трансфекционную среду заменяли 3 мл среды ΌΜΕΜ, содержащей в себе 10% РС8.
Первый синцитий проявился через 3-4 дня после трансфекции, когда клетки все еще были субконфлюэнтными, как показано на фиг. 6. Для того чтобы обеспечить более легкий прогресс образования синцития, монослойные культуры почти сливающихся клеток из каждой 35 мм ячейки, затем переносили на чашку диаметром 10 см. Каждый синцитий был забран в 300 мкл трансфекционной среды и помещен в стерильную пробирку Эппендорфа, содержащую в себе 700 мкл ΟΡΤΙΜΕΜ, подвергнут трем циклам замораживание-оттаивание и хранился при -80°С.
Пример 4. Титрование вируса посредством анализа бляшкообразования.
Серийное 10-разовое разведение вирусных препаратов проводили с использованием ΟΡΤΙΜΕΜ до конечного объема 0,5 мл. Каждое разведение было добавлено в 35 мм культуры клеток Уето. После 1 ч вирусной адсорбции данный инокулум удаляли, а инфицированные клетки покрывали 2 мл среды ΌΜΕΜ, содержащей в себе 5% РС8 и 1% легкоплавкой агарозы (агароза ΡΜΡ). После 5 дней инкубирования при 37°С и 5% СО2 культуры фиксировали с помощью 1 мл 10% ТСА в течение 1 ч, затем структурировали под УФ в течение 30 мин. После удаления агарозного покрытия монослойные клеточные культуры окрашивали кристаллическим фиолетовым, разведенным в 4% этаноле, отмывали водой и бляшки подсчитывали с помощью инвертационного микроскопа (фиг. 7).
Пример 5. ΜΚΠ-5 вирусные серийные пассажи рекомбинантных вирусов.
Провели 10 раз серийные пассажи восстановленных вирусов в клетках ΜΚΡ5, посеянных в чашках диаметром 10 см, которые были заражены стандартным и рекомбинантным Μν вирусами при значении ΜΟΙ, равном 0,01 БОЕ/клетка. После того как монослойная культура была полностью инфецирована, 1% каждой культуры использовали для инфицирования последующей монослойной культуры клеток ΜΚΠ5. Для проверки трансгенной экспрессии и стабильности вирусы из пассажей 1, 5 и 10 использовали для дополнительного описания характеристик экспрессии посредством вестерн-блоттинга и иммунофлуоресценции.
Пример 6. Кривая кинетики роста.
Клетки ΜΚΠ5, посеянные на 35 мм чашку (1-5x105), проверяли на 90% слияние и инфицировали очищенной вирусной суспензией, полученной из клеточно-ассоциированной вирусной фракции, при значении ΜΟΙ, равном 0,05, включая ΜνΕΖ в качестве контроля. Образцы, соответствующие так называемой бесклеточной вирусной фракции и так называемой клеточно-ассоциированной вирусной фракции, собирали ежедневно в течение одной недели и титровали. При сравнении кривой роста интересно, что репликация Μν2-ΕΖ-Ε1 была лишь незначительно уменьшена: рекомбинантный вирус достиг пикового титра 6,12x106 ТЦИД50с/мл 48 ч п.и., в то время как ΜνΕΖ показал конечный титр 6,8x106 ТЦИД50с/мл 36 ч п.и. (фиг. 8). Незначительно замедленная прогрессия репликации также отражалась в некоторой степени уменьшенным размером бляшек. Μν2-ΕΖ-Ε1 вырабатывал бляшки со средним диаметром 0,83 мм, в то время как ΜνΕΖ вырабатывал бляшки со средним диаметром 0,91 мм.
Пример 7. Анализ экспрессии белка.
Для анализа экспрессии антигена Μν и антигена ΗΡν были проведены иммунофлуоресцентный анализ, вестерн-блоттинг и выделение ΑΕΡ.
Иммунофлуоресцентный анализ.
Клетки Уего высевали на покровные стекла размером 24x24 мм в 35-мм ячейках, культивировали в течение ночи и инфицировали восстановленным рекомбинантным вирусом Μν2-ΕΖ-Ε1 или вирусом отрицательного контроля ΜνΕΖ при значении Μ.Ο.Ι., равном 0,05Ь. Через 48 ч после инфицирования клетки на покровных стеклах фиксировали с помощью 4% параформальдегида в ΡΒ8 и нарушали проницаемость мембраны клеток с помощью 0,1% ЕХ-100, отмывали в блокирующем растворе (ΡΒ8, содержащий в себе 1% Β8Α) в течение 1 ч и окрашивали с использованием специфического моноклонального антитела ΗΡν-Ы мыши (Вюдепе818) и с помощью ΡΙΤΟΗ, конъюгированного с козьим антимышиным вторичным антителом.
Все синцитии восстановленного Μν2-ΕΖ-Ε1 продемонстрировали положительный сигнал (фиг. 9, верхняя панель, левые изображения), между тем, как синцитии восстановленного ΜνΕΖ (фиг. 9, верхняя панель, правые изображения) не показали флуоресценцию, что служит признаком того, что все синцитии, индуцированные посредством Μν2-ΕΖ-Ε1, экспрессировали антиген Ь1.
Вестерн-блоттинг.
Для вестерн-блоттинга клетки Уего. высеянные на 35 мм чашку (1-5x105), на следующий день проверяли на наличие 90% слияния и инфицировали очищенной вирусной суспензией из клеточноассоциированной вирусной фракции, используя 0,005 ΜΟΙ (множественность заражения), включая ΜνΕΖ в качестве контроля. Когда наблюдалось приблизительно 80% образование синцития, проводили анализ белков среды и клеток. Клетки сначала отмывали с помощью ΡΒ8, а затем соскребали в 1 мл ΡΒ8 и собирали в пробирку Эппендорфа, центрифугировали при 2000 об/мин в течение 4 мин. Затем клетки лизировали 5 мин/комнатная температура с помощью 70 мкл лизирующего буфера (1% ΝΡ-40, 50 мМ Ττίδ ρΗ 8, 150 мМ №С1), дополненного смесью ингибиторов протеаз (Сошр1е1е Μίηί, Косбе, 1 836 153).
- 8 027784
Супернатанты очищали посредством центрифугирования при 13000 об/мин в течение 5 мин и переносили в новую пробирку, добавляли 30 мкл 4х загрузочного буфера (Ιηνίΐτο^εη); образцы перемешивали и кипятили при 95°С в течение 2 мин, осаждали и хранили при -20°С.
Был осуществлен электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия, проводя электрофорез ΝηΡΆΟΕ 12% бисакриламидного геля в восстановительных условиях, используя 1х подвижный буфер, в течение 50 мин при 200 В (начало 100-125 мА, окончание 60-80 мА). Затем использовали полусухой метод для переноса разделенных клеток-белков на нитроцеллюлозную мембрану при 14 В/1 ч 30 мин.
Моноклональное антитело мыши против НРУ-Ь1 (Вюдепе515) использовали в качестве первого антитела. Вторичным антителом было козье антимышиное антитело, меченное пероксидазой хрена, позволяющей визуализировать полосы с использованием набора для усиленной хемолюминисценции (ЕСЬТМ, АшегзНат ЬИеБаепсе).
Анти-НРУЫ антитело реагировало с белком, размером приблизительно 55 кДа, высвобожденным в культуральной среде МУ2-Е2-Ь1-инфицированных клеток, тогда как в культуральной среде Μ'ΫΕΖинфицированных клеток такой белок не был обнаружен (фиг. 10, панель А), а также с белком приблизительно 55 кДа, синтезированным в ΜУ2-ЕΖ-^1-инфицированных клетках, между тем как в лизатах ΜνΕΖ-инфицированных клеток такой белок не был выявлен (фиг. 10, панель В). Этот результат свидетельствует о том, что ΜУ2-ЕΖ-^1-инфицированные клетки экспрессируют и секретируют белок Ь1, схожий по размеру с аутентичным белком Ь1 из НРУ.
Выделение УЪР.
Монослойную культуру выросших клеток Уего инфицировали при значении ΜΟΙ, равном 0,1, рекомбинантным вирусом Μν2-ΕΖ-Ε1, или вирусом ΜνΕΖ в качестве отрицательного контроля и инкубировали при 37°С. Через 1 ч вирусной адсорбции среду заменили на ΌΜΕΜ, содержащую в себе 5% РС8, и инкубировали при 37°С в течение 48 ч для получения 90% синцития. Среду из-под инфицированных клеток собирали, центрифугировали и для отделения белков от частиц подвергали центрифугированию в 40% (вес./об.) слое сахарозы при 11000хд в течение 2,5 ч при 4°С. Осадок последовательно растворяли в 27% хлориде цезия (вес./вес.) в РВ§ и подвергали анализу посредством центрифугирования в градиенте плотности хлорида цезия 27% (вес./вес.) в РВ§ в течение расценивались как положительная реакция.
Присутствие НРУЫ-специфических антител в сыворотке крови иммунизированных мышей СЭ46 определяли с помощью ИФА и анализа нейтрализации.
Вкратце, для ИФА на 96-микролуночные планшеты наносили покрытие антигена НРУЪ1, разведенного карбонатным буфером, рН 9,4, в концентрации 2-50 нг/лунка. Данные планшеты инкубировали в течение ночи при 4°С, отмывали с помощью РВ§/0,05% Тетееп 20 (РТ). Затем неспецифические взаимодействия блокировали с помощью 10% обезжиренного молока, разведенного в РТ, в течение 1 ч при 37°С и лунки отмывали еще раз с помощью РТ. Данные планшеты были последовательно инкубированы с различными разведениями мышиной сыворотки (начиная с 1:200, с последующими серийными двухкратными разведениями), козьим антимышиным 1дС. конъюгированным с пероксидазой хрена, и с субстратом ΟΡΌ. Значения оптической плотности определяли при 490 нм. Значения выше точки отсечки фонового уровня (среднее значение для сыворотки мышей, иммунизированных с Μν, умноженное на коэффициент 2,1), оценивали как положительные. Титры были представлены как нейтрализующие титрования в конечной точке.
Для анализа нейтрализующих антител двухкратные разведения сыворотки инкубировали с 50 БОЕ рекомбинанта в течение 1 ч при 37°С и высевали 104 клетки Уего/лунка (96-луночный планшет) в двух повторностях. Через пять дней определяли титры при помощи микроскопа. Титр в конечной точке рассчитывали как наибольшее тестированное разведение сыворотки, которое снижает количество БОЕ по меньшей мере на 50%.
Специфические иммунные реакции на НРУ-Ы представлены в табл. 1. Титры в обоих исследованиях, ИФА и нейтрализующем анализе, схожи с титрами, обнаруживаемыми у женщин или мышей после трех инъекций УЪР. Более того, очень похожие титры, наблюдаемые в данных двух испытаниях, указывают на то, что большинство экспрессируемого Ь1 конформационно безошибочно.
- 9 027784
Список литературы
1. Иа1Ьоотегз ЛМ, ЛасоЬз МУ, Мапоз ММ, еН а1. Нитап ρηρίΙΙοιηηνίΓυε Ϊ3 а песеззагу саизе о£ ίηνηείνε οθΓνίοΒΐ сапсег иог1сН0с1е. Л РаННо1 1999; 189: 12- 19
2. Ре1 ХЕ1. ТНе Нитап ρηρί11οιηηνίΓυ5 Е6/Е7 депез 1пс1исе сНзсогНапП сНапдез ίη ТНе ехргезз1оп о£ се11 дговдНН геди1аНогу ргоНе1пз. Сагс1подепез1з 1996; 17: 1395-1401
3. Т/ЛпНегз и, КоНеп К, КиПсИепег Н апб ЗНегп Р. Ргодгезз ίη ННе ΗενοΙοριηοηΠ о£ а сез^1са1 сапсег νηοοίηε.ТНегареиНИсз апб СИп1са1 Пзк МападетепН 2006; 2 259-269.
4. 6Γί££ίη ϋ. Είείάε У1го1оду, £ί£ΗΗ θάίΗίοη (2007), еНз.ίη-οΗίθ£ Кп1ре, ϋ.Μ. &. Новд1еу, Р.М. Ырр1псоНН ИНПатз & ИИк1пз, РНИаНе1рН1а РА 19106, иЗА
5. С1етепНз СЛ апб СиННз ЕТ. ТНе ер1с!ет1о1оду о£ теаз1ез: НН1гНу уеагз о£ νηοοίηθΕίοη.1995 Сигг Тор М1сгоЫо1 1ттипо1. 1995; 191: 13-33
6. ЕпНегз ЛЕ апб РееЫез ТС, РгорадаН1оп ίη Н1ззие си1Нигез о£ суНораННодеп1с адепНз £гот раН1епНз ЫПИ теаз1ез. Ргос Зое Ехр ΒίοΙ Μθά 1954; 86: 277-86
7. ΟνερηηηίΗονη 16., Κθίά, К.С., ЛасоЬзоп, К.М., ОЬегд,
A. Ь., К1ее, 6.6., Ро1апН, 6.А. (2003). 6уНок1пе ргобисЫоп раННегпз апб апкМообу гезропзе Но теаз1ез νοοοίηε. Уасс1пе, 21 (25-26) : 3946-53.
8. КаНеске, Е., Р. Зр1е1Но£ег, Н. ЗсНпе1Нег, К. КаеПп, М. НиЬег, К. ОоНзсН, 6. 6Нг1зН1апзеп, апб М. ВШеНег. (1995). Кезсие о£ теаз1ез νίπΐ8θ8 £гот с1опеН ϋΝΑ. ЕМВО 0Гоигпа1. 14:
5773-5784 .
9. Ьог1п 6, Мо11еН Ь, Ое1еЬесдие Е, ботЬгеНеН 6, НигНге1
B, бНагпеаи Р, еН а1. А з1пд1е ίη^θθΠίοη о£ гесотЫпапН теаз1ез νίτηε νθοοίηθε ехргезз1пд Нитап 1ттипоНе£1с1епсу νίτηε (Ηΐν) Нуре 1 с1аНе В θηνθίορθ д1усоргоНе1пз ИпНисез пеиНгаИгИпд апПМоосНез апб се11и1аг Иттипе гезропзез Но Ηΐν. Л νίτοί 2004; 78 (1) : 146-57.
10. ЗИпдН М, баННапео К, ВШеНег МА. А гесотЫпапН теаз1ез νίτηε ехргезз1пд НераН1Н1з В νίτηε зигНасе апН1деп гпНисез Нитога! гттипе гезропзез ίη депеНгсаНу тосННгеН тгее.
- 10 027784 σ νίτοί 1999; 73(6):4823-8.
11. Иапд Ζ, НапдагРпег Ь, Согпи ΤΙ, МагИп ЬК, гип1да А, ВШеРег МА, еР а1. КесотЫпапР теаз1ез ч1гизез ехргезз1пд ЬеРего1одоиз апПдепз оР титрз апб з1т1ап 1ттипобеР1с1епсу ч1гизез. Уасстпе 2001; 19(17-19): 2329- 36.
12. Оезргез Р, СотЬгебеР С, Егепк1е1 МР, Ьог1п С, ВгаЫс М, Тапду В. Ыче теаз1ез часЫпе ехргезз1пд РЬе зесгеРеб Рогт оР РЬе ИезР Νίΐθ νίπΐ8 епче1оре д1усоргоРе1п ргоРесРз ада1пзР ИезР Νίΐθ νίπΐδ епсерЬаИР1з. б 1пРесР ϋίε 2005; 191(2):207-14.
13. ЕеЬг Т, Ма1гп ΗΥ, ВасЬтапп МВ, 0сЬзепЬе1п АВ, Зр1е1ЬоРег Р, ВисЬег Е, еР а1. Т-се11 1пберепбепР 1дМ апб епбиг1пд ргоРесР1че 1д6 апР1Ьоб1ез 1пбисеб Ьу сЫтепс теаз1ез ч1гизез. МаР Меб 1998; 4(8): 945-8.
14. Вгапб1ег 5, Тапду Е (2007) КесотЫпапР чесРог бег1чеб Ргот Ιίνθ аРРепиаРеб теаз1ез νίπΐδ: РоРепР1а1 Рог Р1ач1ч1гиз часЫпез. Сотр 1ттипо1 М1сгоЫо1 1пРесР ϋίδ
15. Вгапб1ег 3, Ьисаз-Ноигап1 Μ, МоЫз А, Егепк1е1 МР, СотЬгебеР С, Еёчг1ег М, ВебоиеНе Н, ЗсЬвдагРг О, Оезргез Р апб Тапдиу Е. Реб1аРг1с теаз1ез часЫпе ехргезз1пд а Оепдие апР1деп 1пбисез бигаЫе зегоРуре-зрес1Е1с пеиРга1уг1пд апР1Ьоб1ез Ро Оепдие νίπίδ. (2007) Р1оз Мед1 Тгор ϋίε 1(3):е96)
16. Тапду Е, Ма1т ΗΥ. Ыче аРРепиаРеб теаз1ез часЫпе аз а роРепР1а1 ти1Р1ча1епР реб1аРг1с часс1паР1оп чесРог. Ыга1 Тттипо! 2005; 18(2):317-26.
- 11 027784
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> КАДИЛА ХЕЛЗКЭР ЛИМИТЕД
МепДпгеЕЕа, Сап^ееч Китаг <120> КОМБИНИРОВАННАЯ ВАКЦИНА ПРОТИВ КОРИ И ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА <130> 1113-мим-08 <150> ΙΝ 1113/МиМ/2008 <151> 2008-05-26 <160> 14 <170> РаЕепЕ1п чегзЧоп 3.3 <210> 1 <211> 19774 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 1
сассЕаааЕЕ дЕаадсдЕЕа аЕаЕЕЕЕдЕЕ ааааЕЕсдсд ЕЕаааЕЕЕЕЕ дЕЕаааЕсад 60
сЕсаЕЕЕЕЕЕ аассааЕадд ссдаааЕсдд сааааЕсссЕ ЕаЕаааЕсаа аадааЕадас 120
сдадаЕаддд ЕЕдадЕдЕЕд ЕЕссадЕЕЕд даасаададЕ ссасЕаЕЕаа адаасдЕдда 180
сЕссаасдЕс ааадддсдаа ааассдЕсЕа ЕсадддсдаЕ ддсссасЕас дЕдаассаЕс 240
асссЕааЕса адЕЕЕЕЕЕдд ддЕсдаддЕд ссдЕааадса сЕаааЕсдда асссЕааадд 300
дадсссссда ЕЕЕададсЕЕ дасддддааа дссддссаЕЕ ЕаддссаЕад ддсдсЕддса 360
адЕдЕадсдд ЕсасдсЕдсд сдЕаассасс асасссдссд сдсЕЕааЕдс дссдсЕасад 420
ддсдсдЕссс аЕЕсдссаЕЕ саддсЕдсдс аасЕдЕЕддд аадддсдаЕс ддЕдсдддсс 480
ЕсЕЕсдсЕаЕ ЕасдссадсЕ ддсдаааддд ддаЕдЕдсЕд сааддсдаЕЕ аадЕЕдддЕа 540
асдссадддЕ ЕЕЕсссадЕс асдасдЕЕдЕ аааасдасдд ссадЕдааЕЕ дЕааЕасдас 600
ЕсасЕаЕаас сааасааадЕ ЕдддЕаадда ЕадЕЕсааЕс ааЕдаЕсаЕс ЕЕсЕадЕдса 660
сЕЕаддаЕЕс аадаЕссЕаЕ ЕаЕсадддас аададсадда ЕЕадддаЕаЕ сЕдадаЕддс 720
сасасЕЕЕЕа аддадсЕЕад саЕЕдЕЕсаа аадааасаад дасааассас ссаЕЕасаЕс 780
аддаЕссддЕ ддадссаЕса даддааЕсаа асасаЕЕаЕЕ аЕадЕассаа ЕсссЕддада 840
ЕЕссЕсааЕЕ ассасЕсдаЕ ссадасЕЕсЕ ддассддЕЕд дЕсаддЕЕаа ЕЕддааассс 900
ддаЕдЕдадс дддсссааас Еаасаддддс асЕааЕаддЕ аЕаЕЕаЕссЕ ЕаЕЕЕдЕдда 960
дЕсЕссаддЕ сааЕЕдаЕЕс ададдаЕсас сдаЕдасссЕ дасдЕЕадса ЕааддсЕдЕЕ 1020
ададдЕЕдЕс сададЕдасс адЕсасааЕс ЕддссЕЕасс ЕЕсдсаЕсаа даддЕассаа 1080
саЕддаддаЕ даддсддасс ааЕасЕЕЕЕс асаЕдаЕдаЕ ссааЕЕадЕа дЕдаЕсааЕс 1140
саддЕЕсдда ЕддЕЕсдада асааддаааЕ сЕсадаЕаЕЕ даадЕдсаад асссЕдаддд 1200
аЕЕсаасаЕд аЕЕсЕдддЕа ссаЕссЕадс ссаааЕЕЕдд дЕсЕЕдсЕсд саааддсддЕ 1260
- 12 027784
Еасддсссса дасасддсад сЕдаЕЕсдда дсЕаадаадд ЕддаЕааадЕ асасссааса 1320
аадаадддЕа дЕЕддЕдааЕ ЕЕадаЕЕдда дадааааЕдд ЕЕддаЕдЕдд Едаддаасад 1380
даЕЕдссдад дассЕсЕссЕ ЕасдссдаЕЕ саЕддЕсдсЕ сЕааЕссЕдд аЕаЕсаадад 1440
аасасссдда аасааассса ддаЕЕдсЕда ааЕдаЕаЕдЕ дасаЕЕдаЕа саЕаЕаЕсдЕ 1500
ададдсадда ЕЕадссадЕЕ ЕЕаЕссЕдас ЕаЕЕаадЕЕЕ дддаЕадааа сЕаЕдЕаЕсс 1560
ЕдсЕсЕЕдда сЕдсаЕдааЕ ЕЕдсЕддЕда дЕЕаЕссаса сЕЕдадЕссЕ ЕдаЕдаассЕ 1620
ЕЕассадсаа аЕдддддааа сЕдсасссЕа саЕддЕааЕс сЕддадаасЕ сааЕЕсадаа 1680
саадЕЕсадЕ дсаддаЕсаЕ асссЕсЕдсЕ сЕддадсЕаЕ дссаЕдддад ЕаддадЕдда 1740
асЕЕдаааас ЕссаЕддддд дЕЕЕдаасЕЕ ЕддссдаЕсЕ ЕасЕЕЕдаЕс садсаЕаЕЕЕ 1800
ЕадаЕЕаддд саададаЕдд ЕааддаддЕс адсЕддааад дЕсадЕЕсса саЕЕддсаЕс 1860
ЕдаасЕсддЕ аЕсасЕдссд аддаЕдсаад дсЕЕдЕЕЕса дадаЕЕдсаа ЕдсаЕасЕас 1920
Едаддасаад аЕсадЕадад сддЕЕддасс садасаадсс саадЕаЕсаЕ ЕЕсЕасасдд 1980
ЕдаЕсааадЕ дадааЕдадс ЕассдадаЕЕ ддддддсаад даадаЕадда дддЕсаааса 2040
дадЕсдадда даадссаддд ададсЕасад адааассддд сссадсадад саадЕдаЕдс 2100
дададсЕдсс саЕсЕЕссаа ссддсасасс ссЕадасаЕЕ дасасЕдсаЕ сддадЕссад 2160
ссаадаЕссд саддасадЕс дааддЕсадс ЕдасдсссЕд сЕЕаддсЕдс аадссаЕддс 2220
аддааЕсЕсд даадаасаад дсЕсадасас ддасассссЕ аЕадЕдЕаса аЕдасадааа 2280
ЕсЕЕсЕадас ЕаддЕдсдад аддссдаддд ссадаасаас аЕссдссЕас ссЕссаЕсаЕ 2340
ЕдЕЕаЕаааа аасЕЕаддаа ссаддЕссас асадссдсса дсссаЕсаас саЕссасЕсс 2400
сасдаЕЕдда дссааЕддЕа даададсадд сасдссаЕдЕ сааааасдда сЕддааЕдса 2460
ЕссдддсЕсЕ сааддссдад сссаЕсддсЕ сасЕддссаЕ сдаддаадсЕ аЕддсадсаЕ 2520
ддЕсадаааЕ аЕсадасаас ссаддасадд адсдадссас сЕдсадддаа дадааддсад 2580
дсадЕЕсддд ЕсЕсадаааа ссаЕдссЕсЕ садсааЕЕдд аЕсаасЕдаа ддсддЕдсас 2640
сЕсдсаЕссд сддЕсаддда ссЕддадада дсдаЕдасда сдсЕдааасЕ ЕЕдддааЕсс 2700
ссссаадааа ЕсЕссаддса ЕсаадсасЕд ддЕЕасадЕд ЕЕаЕЕасдЕЕ ЕаЕдаЕсаса 2760
дсддЕдаадс ддЕЕааддда аЕссаадаЕд сЕдасЕсЕаЕ саЕддЕЕсаа ЕсаддссЕЕд 2820
аЕддЕдаЕад сасссЕсЕса ддаддадаса аЕдааЕсЕда ааасадсдаЕ дЕддаЕаЕЕд 2880
дсдаассЕда Еассдаддда ЕаЕдсЕаЕса сЕдассдддд аЕсЕдсЕссс аЕсЕсЕаЕдд 2940
ддЕЕсадддс ЕЕсЕдаЕдЕЕ дааасЕдсад ааддадддда даЕссасдад сЕссЕдадас 3000
ЕссааЕссад аддсаасаас ЕЕЕссдаадс ЕЕдддаааас ЕсЕсааЕдЕЕ ссЕссдсссс 3060
сддассссдд Еадддссадс асЕЕссддда сасссаЕЕаа ааадддсаса дасдсдадаЕ 3120
- 13 027784
ЕадссЕсаЕЕ Еддаасддад аЕсдсдЕсЕЕ ЕаЕЕдасадд ЕддЕдсаасс сааЕдЕдсЕс 3180
дааадЕсасс сЕсддаасса Есадддссад дЕдсассЕдс ддддааЕдЕс сссдадЕдЕд 3240
ЕдадсааЕдс сдсасЕдаЕа саддадЕдда сасссдааЕс ЕддЕассаса аЕсЕссссда 3300
даЕсссадаа ЕааЕдаадаа дддддадасЕ аЕЕаЕдаЕда ЕдадсЕдЕЕс ЕсЕдаЕдЕсс 3360
аадаЕаЕЕаа аасадссЕЕд дссааааЕас асдаддаЕаа ЕсадаадаЕа аЕсЕссаадс 3420
ЕадааЕсасЕ дсЕдЕЕаЕЕд аадддадаад ЕЕдадЕсааЕ Еаадаадсад аЕсаасаддс 3480
ааааЕаЕсад саЕаЕссасс сЕддааддас ассЕсЕсаад саЕсаЕдаЕс дссаЕЕссЕд 3540
дасЕЕдддаа ддаЕсссаас дассссасЕд садаЕдЕсда ааЕсааЕссс дасЕЕдааас 3600
ссаЕсаЕадд сададаЕЕса ддссдадсас ЕддссдаадЕ ЕсЕсаадааа сссдЕЕдсса 3660
дссдасаасЕ ссааддааЕд асаааЕддас ддассадЕЕс сададдасад сЕдсЕдаадд 3720
ааЕЕЕсадсЕ ааадссдаЕс дддааааада ЕдадсЕсадс сдЕсдддЕЕЕ дЕЕссЕдаса 3780
ссддсссЕдс аЕсасдсадЕ дЕааЕссдсЕ ссаЕЕаЕааа аЕссадссдд сЕададдадд 3840
аЕсддаадсд ЕЕассЕдаЕд асЕсЕссЕЕд аЕдаЕаЕсаа аддадссааЕ даЕсЕЕдсса 3900
адЕЕссасса даЕдсЕдаЕд аадаЕааЕаа ЕдаадЕадсЕ асадсЕсаас ЕЕассЕдсса 3960
ассссаЕдсс адЕсдассса асЕадЕсЕас ссЕссаЕсаЕ ЕдЕЕаЕаааа аасЕЕаддаа 4020
ссаддЕссас асадссдсса дсссаЕсаас дсдЕасдЕад сдсдсаЕдад Еаааддадаа 4080
даасЕЕЕЕса сЕддадЕЕдЕ сссааЕЕсЕЕ дЕЕдааЕЕад аЕддЕдаЕдЕ ЕааЕдддсас 4140
аааЕЕЕЕсЕд ЕсадЕддада дддЕдааддЕ даЕдсаасаЕ асддаааасЕ ЕасссЕЕааа 4200
ЕЕЕаЕЕЕдса сЕасЕддааа асЕассЕдЕЕ ссаЕддссаа сасЕЕдЕсас ЕасЕЕЕсасс 4260
ЕаЕддЕдЕЕс ааЕдсЕЕЕЕс аадаЕассса даЕсаЕаЕда аасддсаЕда сЕЕЕЕЕсаад 4320
адЕдссаЕдс ссдааддЕЕа сдЕасаддаа адаасЕаЕаЕ ЕЕЕЕсааада Едасдддаас 4380
Еасаадасас дЕдсЕдаадЕ саадЕЕЕдаа ддЕдаЕассс ЕЕдЕЕааЕад ааЕсдадЕЕа 4440
аааддЕаЕЕд аЕЕЕЕааада адаЕддааас аЕЕсЕЕддас асаааЕЕдда аЕасаасЕаЕ 4500
аасЕсасаса аЕдЕаЕасаЕ саЕддсадас ааасаааада аЕддааЕсад адЕЕаасЕЕс 4560
ааааЕЕадас асаасаЕЕда адаЕддаадс дЕЕсаасЕад садассаЕЕа ЕсаасааааЕ 4620
асЕссааЕЕд дсдаЕддссс ЕдЕссЕЕЕЕа ссадасаасс аЕЕассЕдЕс сасасааЕсЕ 4680
дсссЕЕЕсда аадаЕсссаа сдаааадада дассасаЕдд ЕссЕЕсЕЕда дЕЕЕдЕааса 4740
дсЕдсЕддда ЕЕасасаЕдд саЕддаЕдаа сЕаЕасаааЕ адЕдадсдсд садсдсЕдас 4800
дЕсЕсдсдаЕ даЕасЕадЕа саассЕаааЕ ссаЕсаЕааа ааасЕЕадда дсааадЕдаЕ 4860
ЕдссЕсссаа дЕЕссасааЕ дасададаЕс ЕасдасЕЕсд асаадЕсддс аЕдддасаЕс 4920
ааадддЕсда ЕсдсЕссдаЕ асаасссасс ассЕасадЕд аЕддсаддсЕ ддЕдссссад 4980
дЕсададЕса ЕадаЕссЕдд ЕсЕаддсдас аддааддаЕд ааЕдсЕЕЕаЕ дЕасаЕдЕЕЕ 5040
- 14 027784
сбдсбддддд ббдббдадда садддаббсс сбадддссбс саабсдддсд адсабббддд 5100
бсссбдсссб баддбдббдд садабссаса дсааадсссд ааааасбссб сааададдсс 5160
асбдадсббд асабадббдб бадасдбаса дсадддсбса абдааааасб ддбдббсбас 5220
аасаасассс сасбаасбсб ссбсасассб бддадааадд бссбаасаас адддадбдбс 5280
ббсаасдсаа ассаадбдбд саабдсддбб аабсбдабас сдсбсдабас сссдсададд 5340
ббссдбдббд бббабабдад сабсасссдб сбббсддаба асдддбабба сассдббссб 5400
адаадаабдс бддааббсад абсддбсааб дсадбддссб бсаассбдсб ддбдасссбб 5460
аддаббдаса аддсдабадд сссбдддаад абсабсдаса абасададса асббссбдад 5520
дсаасаббба бадбссасаб сдддаасббс аддадааада ададбдаадб сбасбсбдсс 5580
даббаббдса ааабдааааб сдаааадабд ддссбддббб ббдсасббдд бдддабаддд 5640
ддсассадбс ббсасаббад аадсасаддс аааабдадса адасбсбсаа бдсасаасбс 5700
дддббсаада адассббабд ббасссдсбд абддабабса абдаадассб баабсдабба 5760
сбсбддадда дсадабдсаа дабадбаада абссаддсад ббббдсадсс абсадббссб 5820
саадааббсс дсабббасда сдасдбдабс абааабдабд ассааддасб аббсааадбб 5880
сбдбадассд бадбдсссад саабдсссда ааасдасссс ссбсасаабд асадссадаа 5940
ддсссддаса ааааадсссс сбссдааада сбссасддас саадсдадад дссадссадс 6000
адссдасддс аадсдсдаас ассаддсддс сссадсасад аасадсссбд асасааддсс 6060
ассассадсс ассссаабсб дсабссбссб сдбдддассс ссдаддасса асссссаадд 6120
сбдсссссда бссааассас саассдсабс сссассассс ссдддааада аасссссадс 6180
ааббддаадд ссссбссссс бсббссбсаа сасаадаасб ссасаассда ассдсасаад 6240
сдассдаддб дасссаассд саддсабссд асбсссбада садабссбсб сбссссддса 6300
аасбааасаа аасббадддс сааддаасаб асасасссаа садаасссад ассссддссс 6360
асддсдссдс дсссссаасс сссдасаасс ададддадсс сссаассааб сссдссддсб 6420
сссссддбдс ссасаддсад ддасассаас ссссдаасад асссадсасс саассабсда 6480
саабссаада сдддддддсс сссссааааа ааадссссса ддддссдаса дссадсассд 6540
сдаддаадсс сасссасссс асасасдасс асддсаасса аассадаасс садассассс 6600
бдддссасса дсбсссадас бсддссабса ссссдсадаа аддаааддсс асаасссдсд 6660
сассссадсс ссдабссддс ддддадссас ссаасссдаа ссадсассса ададсдабсс 6720
ссдааддасс сссдаассдс аааддасабс адбабсссас адссбсбсса адбсссссдд 6780
бсбссбссбс ббсбсдаадд дассаааада бсаабссасс асасссдасд асасбсаасб 6840
ссссассссб аааддадаса ссдддаабсс садаабсаад асбсабссаа бдбссабсаб 6900
- 15 027784
дддЕсЕсаад дЕдаасдЕсЕ сЕдссаЕаЕЕ саЕддсадЕа сЕдЕЕаасЕс Ессааасасс 6960
сассддЕсаа аЕссаЕЕддд дсааЕсЕсЕс ЕаадаЕаддд дЕддЕаддаа ЕаддаадЕдс 7020
аадсЕасааа дЕЕаЕдасЕс дЕЕссадсса ЕсааЕсаЕЕа дЕсаЕааааЕ ЕааЕдсссаа 7080
ЕаЕаасЕсЕс сЕсааЕаасЕ дсасдадддЕ ададаЕЕдса дааЕасадда дасЕасЕдад 7140
аасадЕЕЕЕд даассааЕЕа дадаЕдсасЕ ЕааЕдсааЕд асссадааЕа ЕаадассддЕ 7200
ЕсададЕдЕа дсЕЕсаадЕа ддадасасаа дадаЕЕЕдсд ддадЕадЕсс ЕддсаддЕдс 7260
ддсссЕаддс дЕЕдссасад сЕдсЕсадаЕ аасддссддс аЕЕдсасЕЕс ассадЕссаЕ 7320
дсЕдаасЕсЕ саадссаЕсд асааЕсЕдад адсдадссЕд дааасЕасЕа аЕсаддсааЕ 7380
ЕдаддсааЕс адасаадсад ддсаддадаЕ даЕаЕЕддсЕ дЕЕсадддЕд ЕссаадасЕа 7440
саЕсааЕааЕ дадсЕдаЕас сдЕсЕаЕдаа ссаасЕаЕсЕ ЕдЕдаЕЕЕаа Есддссадаа 7500
дсЕсдддсЕс аааЕЕдсЕса даЕасЕаЕас адаааЕссЕд ЕсаЕЕаЕЕЕд дссссадЕЕЕ 7560
асдддасссс аЕаЕсЕдсдд адаЕаЕсЕаЕ ссаддсЕЕЕд адсЕаЕдсдс ЕЕддаддада 7620
саЕсааЕаад дЕдЕЕадааа адсЕсддаЕа садЕддаддЕ даЕЕЕасЕдд дсаЕсЕЕада 7680
дадсададда аЕаааддссс ддаЕаасЕса сдЕсдасаса дадЕссЕасЕ ЕсаЕЕдЕссЕ 7740
садЕаЕадсс ЕаЕссдасдс ЕдЕссдадаЕ ЕаадддддЕд аЕЕдЕссасс ддсЕададдд 7800
ддЕсЕсдЕас аасаЕаддсЕ сЕсаададЕд дЕаЕассасЕ дЕдсссаадЕ аЕдЕЕдсаас 7860
ссаадддЕас сЕЕаЕсЕсда аЕЕЕЕдаЕда дЕсаЕсдЕдЕ асЕЕЕсаЕдс сададдддас 7920
ЕдЕдЕдсадс сааааЕдссЕ ЕдЕасссдаЕ дадЕссЕсЕд сЕссаадааЕ дссЕссдддд 7980
дЕасассаад ЕссЕдЕдсЕс дЕасасЕсдЕ аЕссдддЕсЕ ЕЕЕдддаасс ддЕЕсаЕЕЕЕ 8040
аЕсасааддд аассЕааЕад ссааЕЕдЕдс аЕсааЕссЕЕ ЕдсаадЕдЕЕ асасаасадд 8100
аасдаЕсаЕЕ ааЕсаадасс сЕдасаадаЕ ссЕаасаЕас аЕЕдсЕдссд аЕсасЕдссс 8160
ддЕадЕсдад дЕдаасддсд ЕдассаЕсса адЕсдддадс аддаддЕаЕс садасдсЕдЕ 8220
дЕасЕЕдсас адааЕЕдасс ЕсддЕссЕсс саЕаЕсаЕЕд дададдЕЕдд асдЕадддас 8280
аааЕсЕдддд ааЕдсааЕЕд сЕаадЕЕдда ддаЕдссаад дааЕЕдЕЕдд адЕсаЕсдда 8340
ссадаЕаЕЕд аддадЕаЕда ааддЕЕЕаЕс дадсасЕадс аЕадЕсЕаса ЕссЕдаЕЕдс 8400
адЕдЕдЕсЕЕ ддадддЕЕда ЕадддаЕссс сдсЕЕЕааЕа ЕдЕЕдсЕдса дддддсдЕЕд 8460
Еаасааааад ддадаасаад ЕЕддЕаЕдЕс аадассаддс сЕааадссЕд аЕсЕЕасддд 8520
аасаЕсаааа ЕссЕаЕдЕаа ддЕсдсЕсЕд аЕссЕсЕаса асЕсЕЕдааа сасаааЕдЕс 8580
ссасаадЕсЕ ссЕсЕЕсдЕс аЕсаадсаас сассдсассс адсаЕсаадс ссассЕдааа 8640
ЕЕаЕсЕссдд сЕЕсссЕсЕд дссдаасааЕ аЕсддЕадЕЕ ааЕЕаааасЕ ЕадддЕдсаа 8700
даЕсаЕссас ааЕдЕсасса саасдадасс ддаЕаааЕдс сЕЕсЕасааа даЕаассссс 8760
аЕсссааддд аадЕаддаЕа дЕсаЕЕааса дадаасаЕсЕ ЕаЕдаЕЕдаЕ адассЕЕаЕд 8820
- 16 027784
ЕЕЕЕдсЕддс ЕдЕЕсЕдЕЕЕ дЕсаЕдЕЕЕс ЕдадсЕЕдаЕ сдддЕЕдсЕа дссаЕЕдсад 8880
дсаЕЕадасЕ ЕсаЕсдддса дссаЕсЕаса ссдсададаЕ ссаЕаааадс сЕсадсасса 8940
аЕсЕадаЕдЕ аасЕаасЕса аЕсдадсаЕс аддЕсаадда сдЕдсЕдаса ссасЕсЕЕса 9000
аааЕсаЕсдд ЕдаЕдаадЕд ддссЕдадда сассЕсадад аЕЕсасЕдас сЕадЕдаааЕ 9060
ЕсаЕсЕсЕда саадаЕЕааа ЕЕссЕЕааЕс сддаЕаддда дЕасдасЕЕс ададаЕсЕса 9120
сЕЕддЕдЕаЕ саасссдсса дададааЕса ааЕЕддаЕЕа ЕдаЕсааЕас ЕдЕдсадаЕд 9180
ЕддсЕдсЕда ададсЕсаЕд ааЕдсаЕЕдд ЕдаасЕсаас ЕсЕасЕддад ассадаасаа 9240
ссааЕсадЕЕ ссЕадсЕдЕс Есааадддаа асЕдсЕсадд дсссасЕаса аЕсададдЕс 9300
ааЕЕсЕсааа саЕдЕсдсЕд ЕсссЕдЕЕад асЕЕдЕаЕЕЕ аддЕсдаддЕ ЕасааЕдЕдЕ 9360
саЕсЕаЕадЕ сасЕаЕдаса Есссадддаа ЕдЕаЕддддд аасЕЕассЕа дЕддаааадс 9420
сЕааЕсЕдад садсаааадд ЕсададЕЕдЕ сасаасЕдад саЕдЕассда дЕдЕЕЕдаад 9480
ЕаддЕдЕЕаЕ садаааЕссд ддЕЕЕддддд сЕссддЕдЕЕ ссаЕаЕдаса аасЕаЕсЕЕд 9540
адсаассадЕ садЕааЕдаЕ сЕсадсаасЕ дЕаЕддЕддс ЕЕЕдддддад сЕсааасЕсд 9600
садсссЕЕЕд Есасддддаа даЕЕсЕаЕса сааЕЕсссЕа ЕсадддаЕса дддаааддЕд 9660
ЕсадсЕЕсса дсЕсдЕсаад сЕаддЕдЕсЕ ддаааЕсссс аассдасаЕд сааЕссЕддд 9720
ЕссссЕЕаЕс аасддаЕдаЕ ссадЕдаЕад асаддсЕЕЕа ссЕсЕсаЕсЕ сасададдЕд 9780
ЕЕаЕсдсЕда сааЕсаадса аааЕдддсЕд Есссдасаас асдаасадаЕ дасаадЕЕдс 9840
дааЕддадас аЕдсЕЕссаа саддсдЕдЕа адддЕааааЕ ссаадсасЕс ЕдсдадааЕс 9900
ссдадЕдддс ассаЕЕдаад даЕаасадда ЕЕссЕЕсаЕа сддддЕсЕЕд ЕсЕдЕЕдаЕс 9960
ЕдадЕсЕдас адЕЕдадсЕЕ ааааЕсаааа ЕЕдсЕЕсддд аЕЕсдддсса ЕЕдаЕсасас 10020
асддЕЕсадд даЕддассЕа ЕасаааЕсса ассасаасаа ЕдЕдЕаЕЕдд сЕдасЕаЕсс 10080
сдссааЕдаа даассЕадсс ЕЕаддЕдЕаа ЕсаасасаЕЕ ддадЕддаЕа ссдадаЕЕса 10140
аддЕЕадЕсс сЕассЕсЕЕс асЕдЕсссаа ЕЕааддаадс аддсдаадас ЕдссаЕдссс 10200
саасаЕассЕ ассЕдсддад дЕддаЕддЕд аЕдЕсааасЕ садЕЕссааЕ сЕддЕдаЕЕс 10260
ЕассЕддЕса адаЕсЕссаа ЕаЕдЕЕЕЕдд саассЕасда ЕасЕЕссадд дЕЕдаасаЕд 10320
сЕдЕддЕЕЕа ЕЕасдЕЕЕас адсссаддсс дсЕсаЕЕЕЕс ЕЕасЕЕЕЕаЕ ссЕЕЕЕаддЕ 10380
ЕдссЕаЕааа дддддЕсссс аЕсдааЕЕас аадЕддааЕд сЕЕсасаЕдд дассааааас 10440
ЕсЕддЕдссд ЕсасЕЕсЕдЕ дЕдсЕЕдсдд асЕсадааЕс ЕддЕддасаЕ аЕсасЕсасЕ 10500
сЕдддаЕддЕ дддсаЕддда дЕсадсЕдса садЕсасссд ддаадаЕдда ассааЕсдса 10560
даЕадддсЕд сЕадЕдаасс ааЕсасаЕда ЕдЕсасссад асаЕсаддса ЕасссасЕад 10620
ЕдЕдаааЕад асаЕсадааЕ Еаадааааас дЕадддЕсса адЕддЕЕссс сдЕЕаЕддас 10680
- 17 027784
ЕсдсЕаЕсЕд ЕсаассадаЕ сЕЕаЕасссЕ даадЕЕсасс ЕадаЕадссс даЕадЕЕасс 10740
ааЕаадаЕад ЕадссаЕссЕ ддадЕаЕдсЕ сдадЕсссЕс асдсЕЕасад ссЕддаддас 10800
ссЕасасЕдЕ дЕсадаасаЕ саадсассдс сЕаааааасд даЕЕЕЕссаа ссаааЕдаЕЕ 10860
аЕааасааЕд ЕддаадЕЕдд дааЕдЕсаЕс аадЕссаадс ЕЕаддадЕЕа Ессддсссас 10920
ЕсЕсаЕаЕЕс саЕаЕссааа ЕЕдЕааЕсад даЕЕЕаЕЕЕа асаЕадаада сааададЕса 10980
асдаддаада ЕссдЕдаасЕ ссЕсааааад дддааЕЕсдс ЕдЕасЕссаа адЕсадЕдаЕ 11040
ааддЕЕЕЕсс ааЕдсЕЕаад ддасасЕаас ЕсасддсЕЕд дссЕаддсЕс сдааЕЕдадд 11100
даддасаЕса аддадааадЕ ЕаЕЕаасЕЕд ддадЕЕЕаса ЕдсасадсЕс ссадЕддЕЕЕ 11160
дадсссЕЕЕс ЕдЕЕЕЕддЕЕ ЕасадЕсаад асЕдадаЕда ддЕсадЕдаЕ ЕаааЕсасаа 11220
асссаЕасЕЕ дссаЕаддад дадасасаса ссЕдЕаЕЕсЕ ЕсасЕддЕад ЕЕсадЕЕдад 11280
ЕЕдсЕааЕсЕ сЕсдЕдассЕ ЕдЕЕдсЕаЕа аЕсадЕааад адЕсЕсааса ЕдЕаЕаЕЕас 11340
сЕдасаЕЕЕд аасЕддЕЕЕЕ даЕдЕаЕЕдЕ даЕдЕсаЕад аддддаддЕЕ ааЕдасадад 11400
ассдсЕаЕда сЕаЕЕдаЕдс ЕаддЕаЕаса дадсЕЕсЕад даададЕсад аЕасаЕдЕдд 11460
ааасЕдаЕад аЕддЕЕЕсЕЕ сссЕдсасЕс дддааЕссаа сЕЕаЕсаааЕ ЕдЕадсааЕд 11520
сЕддадссЕс ЕЕЕсасЕЕдс ЕЕассЕдсад сЕдадддаЕа ЕаасадЕада асЕсададдЕ 11580
дсЕЕЕссЕЕа ассасЕдсЕЕ ЕасЕдаааЕа саЕдаЕдЕЕс ЕЕдассаааа сдддЕЕЕЕсЕ 11640
даЕдааддЕа сЕЕаЕсаЕда дЕЕааЕЕдаа дсЕсЕадаЕЕ асаЕЕЕЕсаЕ аасЕдаЕдас 11700
аЕасаЕсЕда саддддадаЕ ЕЕЕсЕсаЕЕЕ ЕЕсадаадЕЕ Есддссассс садасЕЕдаа 11760
дсадЕаасдд сЕдсЕдаааа ЕдЕЕаддааа ЕасаЕдааЕс адссЕааадЕ саЕЕдЕдЕаЕ 11820
дадасЕсЕда ЕдаааддЕса ЕдссаЕаЕЕЕ ЕдЕддааЕса ЕааЕсаасдд сЕаЕсдЕдас 11880
аддсасддад дсадЕЕддсс ассдсЕдасс сЕсссссЕдс аЕдсЕдсада сасааЕссдд 11940
ааЕдсЕсаад сЕЕсаддЕда адддЕЕааса саЕдадсадЕ дсдЕЕдаЕаа сЕддаааЕсЕ 12000
ЕЕЕдсЕддад ЕдаааЕЕЕдд сЕдсЕЕЕаЕд ссЕсЕЕадсс ЕддаЕадЕда ЕсЕдасааЕд 12060
ЕассЕааадд асааддсасЕ ЕдсЕдсЕсЕс сааадддааЕ дддаЕЕсадЕ ЕЕасссдааа 12120
дадЕЕссЕдс дЕЕасдассс Есссааддда ассдддЕсас ддаддсЕЕдЕ адаЕдЕЕЕЕс 12180
сЕЕааЕдаЕЕ сдадсЕЕЕда сссаЕаЕдаЕ дЕдаЕааЕдЕ аЕдЕЕдЕаад ЕддадсЕЕас 12240
сЕссаЕдасс сЕдадЕЕсаа ссЕдЕсЕЕас адссЕдааад ааааддадаЕ сааддаааса 12300
ддЕадасЕЕЕ ЕЕдсЕааааЕ дасЕЕасааа аЕдадддсаЕ дссаадЕдаЕ ЕдсЕдааааЕ 12360
сЕааЕсЕсаа асдддаЕЕдд саааЕаЕЕЕЕ ааддасааЕд ддаЕддссаа ддаЕдадсас 12420
даЕЕЕдасЕа аддсасЕсса сасЕсЕадсЕ дЕсЕсаддад Ессссааада ЕсЕсааадаа 12480
адЕсасаддд дддддссадЕ сЕЕааааасс ЕасЕсссдаа дсссадЕсса сасаадЕасс 12540
аддаасдЕда дадсадсааа адддЕЕЕаЕа дддЕЕсссЕс аадЕааЕЕсд дсаддассаа 12600
- 18 027784
дасасЕдаЕс аЕссддадаа ЕаЕддаадсЕ Еасдадасад ЕсадЕдсаЕЕ ЕаЕсасдасЕ 12660
даЕсЕсаада адЕасЕдссЕ ЕааЕЕддада ЕаЕдадасса ЕсадсЕЕдЕЕ Едсасададд 12720
сЕаааЕдада ЕЕЕасддаЕЕ дсссЕсаЕЕЕ ЕЕссадЕддс ЕдсаЕаадад дсЕЕдадасс 12780
ЕсЕдЕссЕдЕ аЕдЕаадЕда сссЕсаЕЕдс ссссссдасс ЕЕдасдссса ЕаЕсссдЕЕа 12840
ЕаЕааадЕсс ссааЕдаЕса ааЕсЕЕсаЕЕ аадЕасссЕа ЕдддаддЕаЕ адаадддЕаЕ 12900
ЕдЕсадаадс ЕдЕддассаЕ садсассаЕЕ сссЕаЕсЕаЕ ассЕддсЕдс ЕЕаЕдададс 12960
ддадЕаадда ЕЕдсЕЕсдЕЕ адЕдсааддд дасааЕсада ссаЕадссдЕ аасааааадд 13020
дЕасссадса саЕддсссЕа саассЕЕаад ааасдддаад сЕдсЕададЕ аасЕададаЕ 13080
ЕасЕЕЕдЕаа ЕЕсЕЕаддса ааддсЕасаЕ даЕаЕЕддсс аЕсассЕсаа ддсаааЕдад 13140
асааЕЕдЕЕЕ саЕсасаЕЕЕ ЕЕЕЕдЕсЕаЕ Есааааддаа ЕаЕаЕЕаЕда ЕдддсЕасЕЕ 13200
дЕдЕсссааЕ сасЕсаадад саЕсдсаада ЕдЕдЕаЕЕсЕ ддЕсададас ЕаЕадЕЕдаЕ 13260
дааасааддд садсаЕдсад ЕааЕаЕЕдсЕ асаасааЕдд сЕаааадсаЕ сдадададдЕ 13320
ЕаЕдассдЕЕ ассЕЕдсаЕа ЕЕсссЕдаас дЕссЕаааад ЕдаЕасадса ааЕЕсЕдаЕс 13380
ЕсЕсЕЕддсЕ ЕсасааЕсаа ЕЕсаассаЕд асссдддаЕд ЕадЕсаЕасс ссЕссЕсаса 13440
аасаасдасс ЕсЕЕааЕаад даЕддсасЕд ЕЕдсссдсЕс сЕаЕЕддддд даЕдааЕЕаЕ 13500
сЕдааЕаЕда дсаддсЕдЕЕ ЕдЕсадааас аЕсддЕдаЕс садЕаасаЕс аЕсааЕЕдсЕ 13560
даЕсЕсаада дааЕдаЕЕсЕ сдссЕсасЕа аЕдссЕдаад адасссЕсса ЕсаадЕааЕд 13620
асасаасаас сдддддасЕс ЕЕсаЕЕссЕа дасЕдддсЕа дсдасссЕЕа сЕсадсаааЕ 13680
сЕЕдЕаЕдЕд ЕссададсаЕ сасЕадасЕс сЕсаадааса ЕаасЕдсаад дЕЕЕдЕссЕд 13740
аЕссаЕадЕс сааасссааЕ дЕЕаааадда ЕЕаЕЕссаЕд аЕдасадЕаа адаададдас 13800
дадддасЕдд сддсаЕЕссЕ саЕддасадд саЕаЕЕаЕад ЕассЕадддс адсЕсаЕдаа 13860
аЕссЕддаЕс аЕадЕдЕсас аддддсаада дадЕсЕаЕЕд саддсаЕдсЕ ддаЕассаса 13920
аааддсЕЕда ЕЕсдадссад саЕдаддаад ддддддЕЕаа ссЕсЕсдадЕ даЕаассада 13980
ЕЕдЕссааЕЕ аЕдасЕаЕда асааЕЕсада дсадддаЕдд ЕдсЕаЕЕдас аддаадааад 14040
адаааЕдЕсс ЕсаЕЕдасаа ададЕсаЕдЕ ЕсадЕдсадс Еддсдададс ЕсЕаадаадс 14100
саЕаЕдЕддд сдаддсЕадс Есдаддасдд ссЕаЕЕЕасд дссЕЕдаддЕ сссЕдаЕдЕа 14160
сЕадааЕсЕа Едсдаддсса ссЕЕаЕЕсдд сдЕсаЕдада саЕдЕдЕсаЕ сЕдсдадЕдЕ 14220
ддаЕсадЕса асЕасддаЕд дЕЕЕЕЕЕдЕс сссЕсдддЕЕ дссаасЕдда ЕдаЕаЕЕдас 14280
ааддааасаЕ саЕссЕЕдад адЕсссаЕаЕ аЕЕддЕЕсЕа ссасЕдаЕда дадаасадас 14340
аЕдаадсЕЕд ссЕЕсдЕаад адссссаадЕ сдаЕссЕЕдс даЕсЕдсЕдЕ ЕадааЕадса 14400
асадЕдЕасЕ саЕдддсЕЕа сддЕдаЕдаЕ даЕадсЕсЕЕ ддаасдаадс сЕддЕЕдЕЕд 14460
- 19 027784
дсЕаддсааа дддссааЕдЕ дадссЕддад дадсЕааддд ЕдаЕсасЕсс саЕсЕсаасЕ 14520
ЕсдасЕааЕЕ ЕадсдсаЕад дЕЕдадддаЕ сдЕадсасЕс аадЕдаааЕа сЕсаддЕаса 14580
ЕсссЕЕдЕсс дадЕддсдад дЕаЕассаса аЕсЕссаасд асааЕсЕсЕс аЕЕЕдЕсаЕа 14640
ЕсадаЕаада аддЕЕдаЕас ЕаасЕЕЕаЕа Еассаасаад дааЕдсЕссЕ адддЕЕдддЕ 14700
дЕЕЕЕадааа саЕЕдЕЕЕсд асЕсдадааа даЕассддаЕ саЕсЕаасас ддЕаЕЕасаЕ 14760
сЕЕсасдЕсд ааасадаЕЕд ЕЕдсдЕдаЕс ссдаЕдаЕад аЕсаЕсссад даЕасссадс 14820
Есссдсаадс ЕададсЕдад ддсададсЕа ЕдЕассаасс саЕЕдаЕаЕа ЕдаЕааЕдса 14880
ссЕЕЕааЕЕд асададаЕдс аасааддсЕа Еасасссада дссаЕаддад дсассЕЕдЕд 14940
дааЕЕЕдЕЕа саЕддЕссас ассссаасЕа ЕаЕсасаЕЕЕ ЕадсЕаадЕс сасадсасЕа 15000
ЕсЕаЕдаЕЕд ассЕддЕаас ааааЕЕЕдад ааддассаЕа ЕдааЕдаааЕ ЕЕсадсЕсЕс 15060
аЕаддддаЕд асдаЕаЕсаа ЕадЕЕЕсаЕа асЕдадЕЕЕс ЕдсЕсаЕада дссаадаЕЕа 15120
ЕЕсасЕаЕсЕ асЕЕдддсса дЕдЕдсддсс аЕсааЕЕддд саЕЕЕдаЕдЕ асаЕЕаЕсаЕ 15180
адассаЕсад ддаааЕаЕса даЕдддЕдад сЕдЕЕдЕсаЕ сдЕЕссЕЕЕс ЕадааЕдадс 15240
аааддадЕдЕ ЕЕааддЕдсЕ ЕдЕсааЕдсЕ сЕаадссасс сааадаЕсЕа саадаааЕЕс 15300
ЕддсаЕЕдЕд дЕаЕЕаЕада дссЕаЕссаЕ ддЕссЕЕсас ЕЕдаЕдсЕса ааасЕЕдсас 15360
асаасЕдЕдЕ дсаасаЕддЕ ЕЕасасаЕдс ЕаЕаЕдассЕ ассЕсдассЕ дЕЕдЕЕдааЕ 15420
даададЕЕад аададЕЕсас аЕЕЕсЕсЕЕд ЕдЕдааадсд асдаддаЕдЕ адЕассддас 15480
адаЕЕсдаса асаЕссаддс аааасасЕЕа ЕдЕдЕЕсЕдд садаЕЕЕдЕа сЕдЕсаасса 15540
дддассЕдсс сассааЕЕсд аддЕсЕаада ссддЕадада ааЕдЕдсадЕ ЕсЕаассдас 15600
саЕаЕсаадд сададдсЕаЕ дЕЕаЕсЕсса дсаддаЕсЕЕ сдЕддаасаЕ аааЕссааЕЕ 15660
аЕЕдЕадасс аЕЕасЕсаЕд сЕсЕсЕдасЕ ЕаЕсЕссддс даддаЕсдаЕ сааасадаЕа 15720
адаЕЕдадад ЕЕдаЕссадд аЕЕсаЕЕЕЕс дасдсссЕсд сЕдаддЕааа ЕдЕсадЕсад 15780
ссааадаЕсд дсадсаасаа саЕсЕсаааЕ аЕдадсаЕса аддсЕЕЕсад асссссасас 15840
даЕдаЕдЕЕд сааааЕЕдсЕ сааадаЕаЕс аасасаадса адсасааЕсЕ ЕсссаЕЕЕса 15900
дддддсааЕс ЕсдссааЕЕа ЕдаааЕссаЕ дсЕЕЕссдса дааЕсдддЕЕ даасЕсаЕсЕ 15960
дсЕЕдсЕаса аадсЕдЕЕда даЕаЕсааса ЕЕааЕЕадда даЕдссЕЕда дссаддддад 16020
дасддсЕЕдЕ ЕсЕЕдддЕда дддаЕсдддЕ ЕсЕаЕдЕЕда ЕсасЕЕаЕаа ддадаЕасЕЕ 16080
ааасЕаааса адЕдсЕЕсЕа ЕааЕадЕддд дЕЕЕссдсса аЕЕсЕадаЕс ЕддЕсааадд 16140
дааЕЕадсас ссЕаЕсссЕс сдаадЕЕддс сЕЕдЕсдаас асадааЕддд адЕаддЕааЕ 16200
аЕЕдЕсааад ЕдсЕсЕЕЕаа сдддаддссс даадЕсасдЕ дддЕаддсад ЕдЕадаЕЕдс 16260
ЕЕсааЕЕЕса ЕадЕЕадЕаа ЕаЕсссЕасс ЕсЕадЕдЕдд ддЕЕЕаЕсса ЕЕсадаЕаЕа 16320
дадассЕЕдс сЕдасааада ЕасЕаЕадад аадсЕададд ааЕЕддсадс саЕсЕЕаЕсд 16380
- 20 027784
аЕддсЕсЕдс ЕссЕдддсаа ааЕаддаЕса аЕасЕддЕда ЕЕаадсЕЕаЕ дссЕЕЕсадс 16440
ддддаЕЕЕЕд ЕЕсадддаЕЕ ЕаЕаадЕЕаЕ дЕадддЕсЕс аЕЕаЕадада адЕдаассЕЕ 16500
дЕаЕасссЕа даЕасадсаа сЕЕсаЕаЕсЕ асЕдааЕсЕЕ аЕЕЕддЕЕаЕ дасадаЕсЕс 16560
ааддсЕаасс ддсЕааЕдаа ЕссЕдаааад аЕЕаадсадс адаЕааЕЕда аЕсаЕсЕдЕд 16620
аддасЕЕсас сЕддасЕЕаЕ аддЕсасаЕс сЕаЕссаЕЕа адсаасЕаад сЕдсаЕасаа 16680
дсааЕЕдЕдд дадасдсадЕ ЕадЕададдЕ даЕаЕсааЕс сЕасЕсЕдаа аааасЕЕаса 16740
ссЕаЕададс аддЕдсЕдаЕ сааЕЕдсддд ЕЕддсааЕЕа асддассЕаа дсЕдЕдсааа 16800
дааЕЕдаЕсс ассаЕдаЕдЕ ЕдссЕсаддд саадаЕддаЕ ЕдсЕЕааЕЕс ЕаЕасЕсаЕс 16860
сЕсЕасаддд адЕЕддсаад аЕЕсааадас аассааадаа дЕсаасаадд даЕдЕЕссас 16920
дсЕЕассссд ЕаЕЕддЕаад Еадсаддсаа сдадаасЕЕа ЕаЕсЕаддаЕ сасссдсааа 16980
ЕЕЕЕдддддс асаЕЕсЕЕсЕ ЕЕасЕссддд аасадааадЕ ЕдаЕаааЕаа дЕЕЕаЕссад 17040
ааЕсЕсаадЕ ссддсЕаЕсЕ даЕасЕадас ЕЕасассада аЕаЕсЕЕсдЕ ЕаадааЕсЕа 17100
ЕссаадЕсад адааасадаЕ ЕаЕЕаЕдасд дддддЕЕЕда аасдЕдадЕд ддЕЕЕЕЕаад 17160
дЕаасадЕса аддадассаа адааЕддЕаЕ аадЕЕадЕсд даЕасадЕдс ссЕдаЕЕаад 17220
дасЕааЕЕдд ЕЕдаасЕссд даасссЕааЕ ссЕдсссЕад дЕддЕЕаддс аЕЕаЕЕЕдса 17280
аЕаЕаЕЕааа даааасЕЕЕд ааааЕасдаа дЕЕЕсЕаЕЕс ссадсЕЕЕдЕ сЕддЕддссд 17340
дсаЕддЕссс адссЕссЕсд сЕддсдссдд сЕдддсааса ЕЕссдадддд ассдЕссссЕ 17400
сддЕааЕддс дааЕдддасд сддссдаЕсс ддсЕдсЕаас ааадсссдаа аддаадсЕда 17460
дЕЕддсЕдсЕ дссассдсЕд адсааЕаасЕ адсаЕаассс сЕЕддддссЕ сЕааасдддЕ 17520
сЕЕдаддддЕ ЕЕЕЕЕдсЕда ааддаддаас ЕаЕаЕссдда Едсддссдса ддЕасссадс 17580
ЕЕЕЕдЕЕссс ЕЕЕадЕдадд дЕЕааЕЕЕсд адсЕЕддсдЕ ааЕсаЕддЕс аЕадсЕдЕЕЕ 17640
ссЕдЕдЕдаа аЕЕдЕЕаЕсс дсЕсасааЕЕ ссасасааса Еасдадссдд аадсаЕааад 17700
ЕдЕааадссЕ ддддЕдссЕа аЕдадЕдадс ЕаасЕсасаЕ ЕааЕЕдсдЕЕ дсдсЕсасЕд 17760
сссдсЕЕЕсс адЕсдддааа ссЕдЕсдЕдс садсЕдсаЕЕ ааЕдааЕсдд ссаасдсдсд 17820
дддададдсд дЕЕЕдсдЕаЕ ЕдддсдсЕсЕ ЕссдсЕЕссЕ сдсЕсасЕда сЕсдсЕдсдс 17880
ЕсддЕсдЕЕс ддсЕдсддсд адсддЕаЕса дсЕсасЕсаа аддсддЕааЕ асддЕЕаЕсс 17940
асадааЕсад дддаЕаасдс аддааадаас аЕдЕдадсаа ааддссадса аааддссадд 18000
аассдЕаааа аддссдсдЕЕ дсЕддсдЕЕЕ ЕЕссаЕаддс Ессдсссссс ЕдасдадсаЕ 18060
сасаааааЕс дасдсЕсаад ЕсададдЕдд сдааасссда саддасЕаЕа аадаЕассад 18120
дсдЕЕЕсссс сЕддаадсЕс ссЕсдЕдсдс ЕсЕссЕдЕЕс сдасссЕдсс дсЕЕассдда 18180
ЕассЕдЕссд ссЕЕЕсЕссс ЕЕсдддаадс дЕддсдсЕЕЕ сЕсаЕадсЕс асдсЕдЕадд 18240
- 21 027784
ВаВсВсадВВ сддВдВаддВ сдВВсдсВсс аадсВдддсВ дВдВдсасда ассссссдВВ 18300
садсссдасс дсВдсдссВВ аВссддВаас ВаВсдВсВВд адВссаассс ддВаадасас 18360
дасВВаВсдс сасВддсадс адссасВддВ аасаддаВВа дсададсдад дВаВдВаддс 18420
ддВдсВасад адВВсВВдаа дВддВддссВ аасВасддсВ асасВадаад дасадВаВВВ 18480
ддВаВсВдсд сВсВдсВдаа дссадВВасс ВВсддааааа дадВВддВад сВсВВдаВсс 18540
ддсааасааа ссассдсВдд ВадсддВддВ ВВВВВВдВВВ дсаадсадса даВВасдсдс 18600
адааааааад даВсВсаада адаВссВВВд аВсВВВВсВа сддддВсВда сдсВсадВдд 18660
аасдаааасВ сасдВВаадд даВВВВддВс аВдадаВВаВ саааааддаВ сВВсассВад 18720
аВссВВВВаа аВВаааааВд аадВВВВааа ВсааВсВааа дВаВаВаВда дВааасВВдд 18780
ВсВдасадВВ ассааВдсВВ ааВсадВдад дсассВаВсВ садсдаВсВд ВсВаВВВсдВ 18840
ВсаВссаВад ВВдссВдасВ ссссдВсдВд ВадаВаасВа сдаВасддда дддсВВасса 18900
ВсВддсссса дВдсВдсааВ даВассдсда дасссасдсВ сассддсВсс адаВВВаВса 18960
дсааВааасс адссадссдд аадддссдад сдсадаадВд дВссВдсаас ВВВаВссдсс 19020
ВссаВссадВ сВаВВааВВд ВВдссдддаа дсВададВаа дВадВВсдсс адВВааВадВ 19080
ВВдсдсаасд ВВдВВдссаВ ВдсВасаддс аВсдВддВдВ сасдсВсдВс дВВВддВаВд 19140
дсВВсаВВса дсВссддВВс ссаасдаВса аддсдадВВа саВдаВсссс саВдВВдВдс 19200
аааааадсдд ВВадсВссВВ сддВссВссд аВсдВВдВса даадВаадВВ ддссдсадВд 19260
ВВаВсасВса ВддВВаВддс адсасВдсаВ ааВВсВсВВа сВдВсаВдсс аВссдВаада 19320
ВдсВВВВсВд ВдасВддВда дВасВсаасс аадВсаВВсВ дадааВадВд ВаВдсддсда 19380
ссдадВВдсВ сВВдсссддс дВсааВасдд даВааВассд сдссасаВад садаасВВВа 19440
ааадВдсВса ВсаВВддааа асдВВсВВсд дддсдаааас ВсВсааддаВ сВВассдсВд 19500
ВВдадаВсса дВВсдаВдВа асссасВсдВ дсасссаасВ даВсВВсадс аВсВВВВасВ 19560
ВВсассадсд ВВВсВдддВд адсаааааса ддааддсааа аВдссдсааа ааадддааВа 19620
адддсдасас ддаааВдВВд ааВасВсаВа сВсВВссВВВ ВВсааВаВВа ВВдаадсаВВ 19680
ВаВсадддВВ аВВдВсВсаВ дадсддаВас аВаВВВдааВ дВаВВВадаа аааВааасаа 19740
аВаддддВВс сдсдсасаВВ Вссссдаааа дВдс 19774
<210> 2 <211> 19774 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 2 сассВаааВВ дВаадсдВВа аВаВВВВдВВ ааааВВсдсд ВВаааВВВВВ дВВаааВсад 60 сВсаВВВВВВ аассааВадд ссдаааВсдд сааааВсссВ ВаВаааВсаа аадааВадас 120
- 22 027784
сдадаЕаддд ЕЕдадЕдЕЕд ЕЕссадЕЕЕд даасаададЕ ссасЕаЕЕаа адаасдЕдда 180
сЕссаасдЕс ааадддсдаа ааассдЕсЕа ЕсадддсдаЕ ддсссасЕас дЕдаассаЕс 240
асссЕааЕса адЕЕЕЕЕЕдд ддЕсдаддЕд ссдЕааадса сЕаааЕсдда асссЕааадд 300
дадсссссда ЕЕЕададсЕЕ дасддддааа дссддссаЕЕ ЕаддссаЕад ддсдсЕддса 360
адЕдЕадсдд ЕсасдсЕдсд сдЕаассасс асасссдссд сдсЕЕааЕдс дссдсЕасад 420
ддсдсдЕссс аЕЕсдссаЕЕ саддсЕдсдс аасЕдЕЕддд аадддсдаЕс ддЕдсдддсс 480
ЕсЕЕсдсЕаЕ ЕасдссадсЕ ддсдаааддд ддаЕдЕдсЕд сааддсдаЕЕ аадЕЕдддЕа 540
асдссадддЕ ЕЕЕсссадЕс асдасдЕЕдЕ аааасдасдд ссадЕдааЕЕ дЕааЕасдас 600
ЕсасЕаЕаас сааасааадЕ ЕдддЕаадда ЕадЕЕсааЕс ааЕдаЕсаЕс ЕЕсЕадЕдса 660
сЕЕаддаЕЕс аадаЕссЕаЕ ЕаЕсадддас аададсадда ЕЕадддаЕаЕ сЕдадаЕддс 720
сасасЕЕЕЕа аддадсЕЕад саЕЕдЕЕсаа аадааасаад дасааассас ссаЕЕасаЕс 780
аддаЕссддЕ ддадссаЕса даддааЕсаа асасаЕЕаЕЕ аЕадЕассаа ЕсссЕддада 840
ЕЕссЕсааЕЕ ассасЕсдаЕ ссадасЕЕсЕ ддассддЕЕд дЕсаддЕЕаа ЕЕддааассс 900
ддаЕдЕдадс дддсссааас Еаасаддддс асЕааЕаддЕ аЕаЕЕаЕссЕ ЕаЕЕЕдЕдда 960
дЕсЕссаддЕ сааЕЕдаЕЕс ададдаЕсас сдаЕдасссЕ дасдЕЕадса ЕааддсЕдЕЕ 1020
ададдЕЕдЕс сададЕдасс адЕсасааЕс ЕддссЕЕасс ЕЕсдсаЕсаа даддЕассаа 1080
саЕддаддаЕ даддсддасс ааЕасЕЕЕЕс асаЕдаЕдаЕ ссааЕЕадЕа дЕдаЕсааЕс 1140
саддЕЕсдда ЕддЕЕсдада асааддаааЕ сЕсадаЕаЕЕ даадЕдсаад асссЕдаддд 1200
аЕЕсаасаЕд аЕЕсЕдддЕа ссаЕссЕадс ссаааЕЕЕдд дЕсЕЕдсЕсд саааддсддЕ 1260
Еасддсссса дасасддсад сЕдаЕЕсдда дсЕаадаадд ЕддаЕааадЕ асасссааса 1320
аадаадддЕа дЕЕддЕдааЕ ЕЕадаЕЕдда дадааааЕдд ЕЕддаЕдЕдд Едаддаасад 1380
даЕЕдссдад дассЕсЕссЕ ЕасдссдаЕЕ саЕддЕсдсЕ сЕааЕссЕдд аЕаЕсаадад 1440
аасасссдда аасааассса ддаЕЕдсЕда ааЕдаЕаЕдЕ дасаЕЕдаЕа саЕаЕаЕсдЕ 1500
ададдсадда ЕЕадссадЕЕ ЕЕаЕссЕдас ЕаЕЕаадЕЕЕ дддаЕадааа сЕаЕдЕаЕсс 1560
ЕдсЕсЕЕдда сЕдсаЕдааЕ ЕЕдсЕддЕда дЕЕаЕссаса сЕЕдадЕссЕ ЕдаЕдаассЕ 1620
ЕЕассадсаа аЕдддддааа сЕдсасссЕа саЕддЕааЕс сЕддадаасЕ сааЕЕсадаа 1680
саадЕЕсадЕ дсаддаЕсаЕ асссЕсЕдсЕ сЕддадсЕаЕ дссаЕдддад ЕаддадЕдда 1740
асЕЕдаааас ЕссаЕддддд дЕЕЕдаасЕЕ ЕддссдаЕсЕ ЕасЕЕЕдаЕс садсаЕаЕЕЕ 1800
ЕадаЕЕаддд саададаЕдд ЕааддаддЕс адсЕддааад дЕсадЕЕсса саЕЕддсаЕс 1860
ЕдаасЕсддЕ аЕсасЕдссд аддаЕдсаад дсЕЕдЕЕЕса дадаЕЕдсаа ЕдсаЕасЕас 1920
Едаддасаад аЕсадЕадад сддЕЕддасс садасаадсс саадЕаЕсаЕ ЕЕсЕасасдд 1980
ЕдаЕсааадЕ дадааЕдадс ЕассдадаЕЕ ддддддсаад даадаЕадда дддЕсаааса 2040
- 23 027784
дадЕсдадда даадссаддд ададсЕасад адааассддд сссадсадад саадЕдаЕдс 2100
дададсЕдсс саЕсЕЕссаа ссддсасасс ссЕадасаЕЕ дасасЕдсаЕ сддадЕссад 2160
ссаадаЕссд саддасадЕс дааддЕсадс ЕдасдсссЕд сЕЕаддсЕдс аадссаЕддс 2220
аддааЕсЕсд даадаасаад дсЕсадасас ддасассссЕ аЕадЕдЕаса аЕдасадааа 2280
ЕсЕЕсЕадас ЕаддЕдсдад аддссдаддд ссадаасаас аЕссдссЕас ссЕссаЕсаЕ 2340
ЕдЕЕаЕаааа аасЕЕаддаа ссаддЕссас асадссдсса дсссаЕсаас саЕссасЕсс 2400
сасдаЕЕдда дссааЕддЕа даададсадд сасдссаЕдЕ сааааасдда сЕддааЕдса 2460
ЕссдддсЕсЕ сааддссдад сссаЕсддсЕ сасЕддссаЕ сдаддаадсЕ аЕддсадсаЕ 2520
ддЕсадаааЕ аЕсадасаас ссаддасадд адсдадссас сЕдсадддаа дадааддсад 2580
дсадЕЕсддд ЕсЕсадаааа ссаЕдссЕсЕ садсааЕЕдд аЕсаасЕдаа ддсддЕдсас 2640
сЕсдсаЕссд сддЕсаддда ссЕддадада дсдаЕдасда сдсЕдааасЕ ЕЕдддааЕсс 2700
ссссаадааа ЕсЕссаддса ЕсаадсасЕд ддЕЕасадЕд ЕЕаЕЕасдЕЕ ЕаЕдаЕсаса 2760
дсддЕдаадс ддЕЕааддда аЕссаадаЕд сЕдасЕсЕаЕ саЕддЕЕсаа ЕсаддссЕЕд 2820
аЕддЕдаЕад сасссЕсЕса ддаддадаса аЕдааЕсЕда ааасадсдаЕ дЕддаЕаЕЕд 2880
дсдаассЕда Еассдаддда ЕаЕдсЕаЕса сЕдассдддд аЕсЕдсЕссс аЕсЕсЕаЕдд 2940
ддЕЕсадддс ЕЕсЕдаЕдЕЕ дааасЕдсад ааддадддда даЕссасдад сЕссЕдадас 3000
ЕссааЕссад аддсаасаас ЕЕЕссдаадс ЕЕдддаааас ЕсЕсааЕдЕЕ ссЕссдсссс 3060
сддассссдд Еадддссадс асЕЕссддда сасссаЕЕаа ааадддсаса дасдсдадаЕ 3120
ЕадссЕсаЕЕ Еддаасддад аЕсдсдЕсЕЕ ЕаЕЕдасадд ЕддЕдсаасс сааЕдЕдсЕс 3180
дааадЕсасс сЕсддаасса Есадддссад дЕдсассЕдс ддддааЕдЕс сссдадЕдЕд 3240
ЕдадсааЕдс сдсасЕдаЕа саддадЕдда сасссдааЕс ЕддЕассаса аЕсЕссссда 3300
даЕсссадаа ЕааЕдаадаа дддддадасЕ аЕЕаЕдаЕда ЕдадсЕдЕЕс ЕсЕдаЕдЕсс 3360
аадаЕаЕЕаа аасадссЕЕд дссааааЕас асдаддаЕаа ЕсадаадаЕа аЕсЕссаадс 3420
ЕадааЕсасЕ дсЕдЕЕаЕЕд аадддадаад ЕЕдадЕсааЕ Еаадаадсад аЕсаасаддс 3480
ааааЕаЕсад саЕаЕссасс сЕддааддас ассЕсЕсаад саЕсаЕдаЕс дссаЕЕссЕд 3540
дасЕЕдддаа ддаЕсссаас дассссасЕд садаЕдЕсда ааЕсааЕссс дасЕЕдааас 3600
ссаЕсаЕадд сададаЕЕса ддссдадсас ЕддссдаадЕ ЕсЕсаадааа сссдЕЕдсса 3660
дссдасаасЕ ссааддааЕд асаааЕддас ддассадЕЕс сададдасад сЕдсЕдаадд 3720
ааЕЕЕсадсЕ ааадссдаЕс дддааааада ЕдадсЕсадс сдЕсдддЕЕЕ дЕЕссЕдаса 3780
ссддсссЕдс аЕсасдсадЕ дЕааЕссдсЕ ссаЕЕаЕааа аЕссадссдд сЕададдадд 3840
аЕсддаадсд ЕЕассЕдаЕд асЕсЕссЕЕд аЕдаЕаЕсаа аддадссааЕ даЕсЕЕдсса 3900
- 24 027784
ас+;ссасса даЁдсЁдаЁд аадаЁааЁаа ЁдаадЁадсЁ асадсЁсаас ЁЁассЁдсса 3960
ассссаЁдсс адЁсдассса асЁадЁасаа ссЁаааЁсса ЁсаЁаааааа сЁЁаддадса 4020
аадЁдаЁЁдс сЁсссаадЁЁ ссасааЁдас ададаЁсЁас дасЁЁсдаса адЁсддсаЁд 4080
ддасаЁсааа дддЁсдаЁсд сЁссдаЁаса асссассасс ЁасадЁдаЁд дсаддсЁддЁ 4140
дссссаддЁс ададЁсаЁад аЁссЁддЁсЁ аддсдасадд ааддаЁдааЁ дсЁЁЁаЁдЁа 4200
саЁдЁЁЁсЁд сЁдддддЁЁд ЁЁдаддасад ддаЁЁсссЁа дддссЁссаа Ёсдддсдадс 4260
аЁЁЁдддЁсс сЁдсссЁЁад дЁдЁЁддсад аЁссасадса аадсссдааа аасЁссЁсаа 4320
ададдссасЁ дадсЁЁдаса ЁадЁЁдЁЁад асдЁасадса дддсЁсааЁд ааааасЁддЁ 4380
дЁЁсЁасаас аасассссас ЁаасЁсЁссЁ сасассЁЁдд адаааддЁсс Ёаасаасадд 4440
дадЁдЁсЁЁс аасдсааасс аадЁдЁдсаа ЁдсддЁЁааЁ сЁдаЁассдс ЁсдаЁасссс 4500
дсададдЁЁс сдЁдЁЁдЁЁЁ аЁаЁдадсаЁ сасссдЁсЁЁ ЁсддаЁаасд ддЁаЁЁасас 4560
сдЁЁссЁада адааЁдсЁдд ааЁЁсадаЁс ддЁсааЁдса дЁддссЁЁса ассЁдсЁддЁ 4620
дасссЁЁадд аЁЁдасаадд сдаЁаддссс ЁдддаадаЁс аЁсдасааЁа сададсаасЁ 4680
ЁссЁдаддса асаЁЁЁаЁад ЁссасаЁсдд даасЁЁсадд адааадаада дЁдаадЁсЁа 4740
сЁсЁдссдаЁ ЁаЁЁдсаааа ЁдааааЁсда ааадаЁдддс сЁддЁЁЁЁЁд сасЁЁддЁдд 4800
даЁадддддс ассадЁсЁЁс асаЁЁадаад сасаддсааа аЁдадсаада сЁсЁсааЁдс 4860
асаасЁсддд ЁЁсаадаада ссЁЁаЁдЁЁа сссдсЁдаЁд даЁаЁсааЁд аадассЁЁаа 4920
ЁсдаЁЁасЁс Ёддаддадса даЁдсаадаЁ адЁаадааЁс саддсадЁЁЁ ЁдсадссаЁс 4980
адЁЁссЁсаа дааЁЁссдса ЁЁЁасдасда сдЁдаЁсаЁа ааЁдаЁдасс ааддасЁаЁЁ 5040
сааадЁЁсЁд ЁадассдЁад Ёдсссадсаа Ёдсссдаааа сдассссссЁ сасааЁдаса 5100
дссадааддс ссддасаааа аадсссссЁс сдааадасЁс сасддассаа дсдададдсс 5160
адссадсадс сдасддсаад сдсдаасасс аддсддсссс адсасадаас адсссЁдаса 5220
сааддссасс ассадссасс ссааЁсЁдса ЁссЁссЁсдЁ дддасссссд аддассаасс 5280
сссааддсЁд сссссдаЁсс ааассассаа ссдсаЁсссс ассасссссд ддааадааас 5340
ссссадсааЁ Ёддааддссс сёсссссёсё ЁссЁсаасас аадаасЁсса саассдаасс 5400
дсасаадсда ссдаддЁдас ссаассдсад дсаЁссдасЁ сссЁадасад аЁссЁсЁсЁс 5460
сссддсааас Ёааасаааас ЁЁадддссаа ддаасаЁаса сасссаасад аасссадасс 5520
ссддсссасд дсдссдсдсс сссаассссс дасаассада дддадссссс аассааЁссс 5580
дссддсЁссс ссддЁдссса саддсаддда сассаасссс сдаасадасс садсасссаа 5640
ссаЁсдасаа Ёссаадасдд дддддссссс ссаааааааа дсссссаддд дссдасадсс 5700
адсассдсда ддаадсссас ссассссаса сасдассасд дсаассааас садаасссад 5760
ассасссЁдд дссассадсЁ сссадасЁсд дссаЁсассс сдсадааадд аааддссаса 5820
- 25 027784
асссдсдсас сссадссссд абссддсддд дадссассса асссдаасса дсасссаада 5880
дсдабссссд ааддассссс даассдсааа ддасабсадб абсссасадс сбсбссаадб 5940
сссссддбсб ссбссбсббс бсдаадддас саааадабса абссассаса сссдасдаса 6000
сбсаасбссс сассссбааа ддадасассд ддаабсссад аабсаадасб сабссаабдб 6060
ссабсабддд бсбсааддбд аасдбсбсбд ссабаббсаб ддсадбасбд ббаасбсбсс 6120
ааасасссас сддбсааабс саббддддса абсбсбсбаа дабаддддбд дбаддаабад 6180
даадбдсаад сбасааадбб абдасбсдбб ссадссабса абсаббадбс абааааббаа 6240
бдсссаабаб аасбсбссбс аабаасбдса сдадддбада даббдсадаа басаддадас 6300
басбдадаас адббббддаа ссааббадад абдсасббаа бдсаабдасс садаабабаа 6360
дассддббса дадбдбадсб бсаадбадда дасасаадад абббдсддда дбадбссбдд 6420
саддбдсддс ссбаддсдбб дссасадсбд сбсадабаас ддссддсабб дсасббсасс 6480
адбссабдсб даасбсбсаа дссабсдаса абсбдададс дадссбддаа асбасбаабс 6540
аддсааббда ддсаабсада саадсадддс аддадабдаб аббддсбдбб садддбдбсс 6600
аадасбасаб саабаабдад сбдабассдб сбабдаасса асбабсббдб дабббаабсд 6660
дссадаадсб сдддсбсааа ббдсбсадаб асбабасада аабссбдбса ббабббддсс 6720
ссадбббасд ддассссаба бсбдсддада бабсбабсса ддсбббдадс бабдсдсббд 6780
даддадасаб саабааддбд ббадаааадс бсддабасад бддаддбдаб ббасбдддса 6840
бсббададад сададдааба ааддсссдда баасбсасдб сдасасадад бссбасббса 6900
ббдбссбсад бабадссбаб ссдасдсбдб ссдадаббаа дддддбдабб дбссассддс 6960
бададддддб сбсдбасаас абаддсбсбс аададбддба бассасбдбд сссаадбабд 7020
ббдсаассса адддбассбб абсбсдаабб ббдабдадбс абсдбдбасб ббсабдссад 7080
аддддасбдб дбдсадссаа аабдссббдб асссдабдад бссбсбдсбс саадаабдсс 7140
бссдддддба сассаадбсс бдбдсбсдба сасбсдбабс сдддбсбббб дддаассддб 7200
бсаббббабс асаадддаас сбаабадсса аббдбдсабс аабссбббдс аадбдббаса 7260
саасаддаас дабсаббааб саадасссбд асаадабссб аасабасабб дсбдссдабс 7320
асбдсссддб адбсдаддбд аасддсдбда ссабссаадб сдддадсадд аддбабссад 7380
асдсбдбдба сббдсасада аббдассбсд дбссбсссаб абсаббддад аддббддасд 7440
бадддасааа бсбддддааб дсааббдсба адббддадда бдссааддаа ббдббддадб 7500
сабсддасса дабаббдадд адбабдааад дбббабсдад сасбадсаба дбсбасабсс 7560
бдаббдсадб дбдбсббдда дддббдабад ддабссссдс бббаабабдб бдсбдсаддд 7620
ддсдббдбаа саааааддда даасаадббд дбабдбсаад ассаддссба аадссбдабс 7680
- 26 027784
ЕЕасдддаас аЕсааааЕсс ЕаЕдЕааддЕ сдсЕсЕдаЕс сЕсЕасаасЕ сЕЕдааасас 7740
аааЕдЕссса саадЕсЕссЕ сЕЕсдЕсаЕс аадсаассас сдсасссадс аЕсаадссса 7800
ссЕдаааЕЕа ЕсЕссддсЕЕ сссЕсЕддсс даасааЕаЕс ддЕадЕЕааЕ ЕаааасЕЕад 7860
ддЕдсаадаЕ саЕссасааЕ дЕсассасаа сдадассдда ЕаааЕдссЕЕ сЕасааадаЕ 7920
аасссссаЕс ссаадддаад ЕаддаЕадЕс аЕЕаасадад аасаЕсЕЕаЕ даЕЕдаЕада 7980
ссЕЕаЕдЕЕЕ ЕдсЕддсЕдЕ ЕсЕдЕЕЕдЕс аЕдЕЕЕсЕда дсЕЕдаЕсдд дЕЕдсЕадсс 8040
аЕЕдсаддса ЕЕадасЕЕса Есдддсадсс аЕсЕасассд сададаЕсса ЕаааадссЕс 8100
адсассааЕс ЕадаЕдЕаас ЕаасЕсааЕс дадсаЕсадд ЕсааддасдЕ дсЕдасасса 8160
сЕсЕЕсаааа ЕсаЕсддЕда ЕдаадЕдддс сЕдаддасас сЕсададаЕЕ сасЕдассЕа 8220
дЕдаааЕЕса ЕсЕсЕдасаа даЕЕаааЕЕс сЕЕааЕссдд аЕадддадЕа сдасЕЕсада 8280
даЕсЕсасЕЕ ддЕдЕаЕсаа сссдссадад адааЕсаааЕ ЕддаЕЕаЕда ЕсааЕасЕдЕ 8340
дсадаЕдЕдд сЕдсЕдаада дсЕсаЕдааЕ дсаЕЕддЕда асЕсаасЕсЕ асЕддадасс 8400
адаасаасса аЕсадЕЕссЕ адсЕдЕсЕса аадддааасЕ дсЕсадддсс сасЕасааЕс 8460
ададдЕсааЕ ЕсЕсааасаЕ дЕсдсЕдЕсс сЕдЕЕадасЕ ЕдЕаЕЕЕадд ЕсдаддЕЕас 8520
ааЕдЕдЕсаЕ сЕаЕадЕсас ЕаЕдасаЕсс садддааЕдЕ аЕдддддаас ЕЕассЕадЕд 8580
даааадссЕа аЕсЕдадсад сааааддЕса дадЕЕдЕсас аасЕдадсаЕ дЕассдадЕд 8640
ЕЕЕдаадЕад дЕдЕЕаЕсад аааЕссдддЕ ЕЕдддддсЕс сддЕдЕЕсса ЕаЕдасааас 8700
ЕаЕсЕЕдадс аассадЕсад ЕааЕдаЕсЕс адсаасЕдЕа ЕддЕддсЕЕЕ дддддадсЕс 8760
ааасЕсдсад сссЕЕЕдЕса сддддаадаЕ ЕсЕаЕсасаа ЕЕсссЕаЕса дддаЕсаддд 8820
аааддЕдЕса дсЕЕссадсЕ сдЕсаадсЕа ддЕдЕсЕдда ааЕссссаас сдасаЕдсаа 8880
ЕссЕдддЕсс ссЕЕаЕсаас ддаЕдаЕсса дЕдаЕадаса ддсЕЕЕассЕ сЕсаЕсЕсас 8940
ададдЕдЕЕа ЕсдсЕдасаа Есаадсаааа ЕдддсЕдЕсс сдасаасасд аасадаЕдас 9000
аадЕЕдсдаа ЕддадасаЕд сЕЕссаасад дсдЕдЕаадд дЕааааЕсса адсасЕсЕдс 9060
дадааЕсссд адЕдддсасс аЕЕдааддаЕ аасаддаЕЕс сЕЕсаЕасдд ддЕсЕЕдЕсЕ 9120
дЕЕдаЕсЕда дЕсЕдасадЕ ЕдадсЕЕааа аЕсааааЕЕд сЕЕсдддаЕЕ сдддссаЕЕд 9180
аЕсасасасд дЕЕсадддаЕ ддассЕаЕас аааЕссаасс асаасааЕдЕ дЕаЕЕддсЕд 9240
асЕаЕсссдс сааЕдаадаа ссЕадссЕЕа ддЕдЕааЕса асасаЕЕдда дЕддаЕассд 9300
адаЕЕсаадд ЕЕадЕсссЕа ссЕсЕЕсасЕ дЕсссааЕЕа аддаадсадд сдаадасЕдс 9360
саЕдссссаа саЕассЕасс ЕдсддаддЕд даЕддЕдаЕд ЕсааасЕсад ЕЕссааЕсЕд 9420
дЕдаЕЕсЕас сЕддЕсаада ЕсЕссааЕаЕ дЕЕЕЕддсаа ссЕасдаЕас ЕЕссадддЕЕ 9480
даасаЕдсЕд ЕддЕЕЕаЕЕа сдЕЕЕасадс ссаддссдсЕ саЕЕЕЕсЕЕа сЕЕЕЕаЕссЕ 9540
ЕЕЕаддЕЕдс сЕаЕаааддд ддЕссссаЕс дааЕЕасаад ЕддааЕдсЕЕ сасаЕдддас 9600
- 27 027784
сааааасЕсЕ ддЕдссдЕса сЕЕсЕдЕдЕд сЕЕдсддасЕ садааЕсЕдд ЕддасаЕаЕс 9660
асЕсасЕсЕд ддаЕддЕддд саЕдддадЕс адсЕдсасад Есасссддда адаЕддаасс 9720
ааЕсдсадаЕ адддсЕдсЕа дЕдаассааЕ сасаЕдаЕдЕ сасссадаса ЕсаддсаЕас 9780
ссасЕадЕсЕ асссЕссаЕс аЕЕдЕЕаЕаа аааасЕЕадд аассаддЕсс асасадссдс 9840
садсссаЕса асдсдЕасдЕ адсдсдсаЕд адЕаааддад аадаасЕЕЕЕ сасЕддадЕЕ 9900
дЕсссааЕЕс ЕЕдЕЕдааЕЕ адаЕддЕдаЕ дЕЕааЕдддс асаааЕЕЕЕс ЕдЕсадЕдда 9960
дадддЕдаад дЕдаЕдсаас аЕасддаааа сЕЕасссЕЕа ааЕЕЕаЕЕЕд сасЕасЕдда 10020
ааасЕассЕд ЕЕссаЕддсс аасасЕЕдЕс асЕасЕЕЕса ссЕаЕддЕдЕ ЕсааЕдсЕЕЕ 10080
ЕсаадаЕасс садаЕсаЕаЕ дааасддсаЕ дасЕЕЕЕЕса ададЕдссаЕ дсссдааддЕ 10140
ЕасдЕасадд ааадаасЕаЕ аЕЕЕЕЕсааа даЕдасддда асЕасаадас асдЕдсЕдаа 10200
дЕсаадЕЕЕд ааддЕдаЕас ссЕЕдЕЕааЕ адааЕсдадЕ ЕааааддЕаЕ ЕдаЕЕЕЕааа 10260
даадаЕддаа асаЕЕсЕЕдд асасаааЕЕд дааЕасаасЕ аЕаасЕсаса сааЕдЕаЕас 10320
аЕсаЕддсад асааасаааа дааЕддааЕс ададЕЕаасЕ ЕсааааЕЕад асасаасаЕЕ 10380
даадаЕддаа дсдЕЕсаасЕ адсадассаЕ ЕаЕсаасааа аЕасЕссааЕ ЕддсдаЕддс 10440
ссЕдЕссЕЕЕ Еассадасаа ссаЕЕассЕд ЕссасасааЕ сЕдсссЕЕЕс дааадаЕссс 10500
аасдаааада дадассасаЕ ддЕссЕЕсЕЕ дадЕЕЕдЕаа садсЕдсЕдд даЕЕасасаЕ 10560
ддсаЕддаЕд аасЕаЕасаа аЕадЕдадсд сдсадсдсЕд асдЕсЕсдсд аЕдаЕасЕад 10620
ЕдЕдаааЕад асаЕсадааЕ Еаадааааас дЕадддЕсса адЕддЕЕссс сдЕЕаЕддас 10680
ЕсдсЕаЕсЕд ЕсаассадаЕ сЕЕаЕасссЕ даадЕЕсасс ЕадаЕадссс даЕадЕЕасс 10740
ааЕаадаЕад ЕадссаЕссЕ ддадЕаЕдсЕ сдадЕсссЕс асдсЕЕасад ссЕддаддас 10800
ссЕасасЕдЕ дЕсадаасаЕ саадсассдс сЕаааааасд даЕЕЕЕссаа ссаааЕдаЕЕ 10860
аЕааасааЕд ЕддаадЕЕдд дааЕдЕсаЕс аадЕссаадс ЕЕаддадЕЕа Ессддсссас 10920
ЕсЕсаЕаЕЕс саЕаЕссааа ЕЕдЕааЕсад даЕЕЕаЕЕЕа асаЕадаада сааададЕса 10980
асдаддаада ЕссдЕдаасЕ ссЕсааааад дддааЕЕсдс ЕдЕасЕссаа адЕсадЕдаЕ 11040
ааддЕЕЕЕсс ааЕдсЕЕаад ддасасЕаас ЕсасддсЕЕд дссЕаддсЕс сдааЕЕдадд 11100
даддасаЕса аддадааадЕ ЕаЕЕаасЕЕд ддадЕЕЕаса ЕдсасадсЕс ссадЕддЕЕЕ 11160
дадсссЕЕЕс ЕдЕЕЕЕддЕЕ ЕасадЕсаад асЕдадаЕда ддЕсадЕдаЕ ЕаааЕсасаа 11220
асссаЕасЕЕ дссаЕаддад дадасасаса ссЕдЕаЕЕсЕ ЕсасЕддЕад ЕЕсадЕЕдад 11280
ЕЕдсЕааЕсЕ сЕсдЕдассЕ ЕдЕЕдсЕаЕа аЕсадЕааад адЕсЕсааса ЕдЕаЕаЕЕас 11340
сЕдасаЕЕЕд аасЕддЕЕЕЕ даЕдЕаЕЕдЕ даЕдЕсаЕад аддддаддЕЕ ааЕдасадад 11400
ассдсЕаЕда сЕаЕЕдаЕдс ЕаддЕаЕаса дадсЕЕсЕад даададЕсад аЕасаЕдЕдд 11460
- 28 027784
ааасЕдаЕад аЕддЕЕЕсЕЕ сссЕдсасЕс дддааЕссаа сЕЕаЕсаааЕ ЕдЕадсааЕд 11520
сЕддадссЕс ЕЕЕсасЕЕдс ЕЕассЕдсад сЕдадддаЕа ЕаасадЕада асЕсададдЕ 11580
дсЕЕЕссЕЕа ассасЕдсЕЕ ЕасЕдаааЕа саЕдаЕдЕЕс ЕЕдассаааа сдддЕЕЕЕсЕ 11640
даЕдааддЕа сЕЕаЕсаЕда дЕЕааЕЕдаа дсЕсЕадаЕЕ асаЕЕЕЕсаЕ аасЕдаЕдас 11700
аЕасаЕсЕда саддддадаЕ ЕЕЕсЕсаЕЕЕ ЕЕсадаадЕЕ Есддссассс садасЕЕдаа 11760
дсадЕаасдд сЕдсЕдаааа ЕдЕЕаддааа ЕасаЕдааЕс адссЕааадЕ саЕЕдЕдЕаЕ 11820
дадасЕсЕда ЕдаааддЕса ЕдссаЕаЕЕЕ ЕдЕддааЕса ЕааЕсаасдд сЕаЕсдЕдас 11880
аддсасддад дсадЕЕддсс ассдсЕдасс сЕсссссЕдс аЕдсЕдсада сасааЕссдд 11940
ааЕдсЕсаад сЕЕсаддЕда адддЕЕааса саЕдадсадЕ дсдЕЕдаЕаа сЕддаааЕсЕ 12000
ЕЕЕдсЕддад ЕдаааЕЕЕдд сЕдсЕЕЕаЕд ссЕсЕЕадсс ЕддаЕадЕда ЕсЕдасааЕд 12060
ЕассЕааадд асааддсасЕ ЕдсЕдсЕсЕс сааадддааЕ дддаЕЕсадЕ ЕЕасссдааа 12120
дадЕЕссЕдс дЕЕасдассс Есссааддда ассдддЕсас ддаддсЕЕдЕ адаЕдЕЕЕЕс 12180
сЕЕааЕдаЕЕ сдадсЕЕЕда сссаЕаЕдаЕ дЕдаЕааЕдЕ аЕдЕЕдЕаад ЕддадсЕЕас 12240
сЕссаЕдасс сЕдадЕЕсаа ссЕдЕсЕЕас адссЕдааад ааааддадаЕ сааддаааса 12300
ддЕадасЕЕЕ ЕЕдсЕааааЕ дасЕЕасааа аЕдадддсаЕ дссаадЕдаЕ ЕдсЕдааааЕ 12360
сЕааЕсЕсаа асдддаЕЕдд саааЕаЕЕЕЕ ааддасааЕд ддаЕддссаа ддаЕдадсас 12420
даЕЕЕдасЕа аддсасЕсса сасЕсЕадсЕ дЕсЕсаддад Ессссааада ЕсЕсааадаа 12480
адЕсасаддд дддддссадЕ сЕЕааааасс ЕасЕсссдаа дсссадЕсса сасаадЕасс 12540
аддаасдЕда дадсадсааа адддЕЕЕаЕа дддЕЕсссЕс аадЕааЕЕсд дсаддассаа 12600
дасасЕдаЕс аЕссддадаа ЕаЕддаадсЕ Еасдадасад ЕсадЕдсаЕЕ ЕаЕсасдасЕ 12660
даЕсЕсаада адЕасЕдссЕ ЕааЕЕддада ЕаЕдадасса ЕсадсЕЕдЕЕ Едсасададд 12720
сЕаааЕдада ЕЕЕасддаЕЕ дсссЕсаЕЕЕ ЕЕссадЕддс ЕдсаЕаадад дсЕЕдадасс 12780
ЕсЕдЕссЕдЕ аЕдЕаадЕда сссЕсаЕЕдс ссссссдасс ЕЕдасдссса ЕаЕсссдЕЕа 12840
ЕаЕааадЕсс ссааЕдаЕса ааЕсЕЕсаЕЕ аадЕасссЕа ЕдддаддЕаЕ адаадддЕаЕ 12900
ЕдЕсадаадс ЕдЕддассаЕ садсассаЕЕ сссЕаЕсЕаЕ ассЕддсЕдс ЕЕаЕдададс 12960
ддадЕаадда ЕЕдсЕЕсдЕЕ адЕдсааддд дасааЕсада ссаЕадссдЕ аасааааадд 13020
дЕасссадса саЕддсссЕа саассЕЕаад ааасдддаад сЕдсЕададЕ аасЕададаЕ 13080
ЕасЕЕЕдЕаа ЕЕсЕЕаддса ааддсЕасаЕ даЕаЕЕддсс аЕсассЕсаа ддсаааЕдад 13140
асааЕЕдЕЕЕ саЕсасаЕЕЕ ЕЕЕЕдЕсЕаЕ Есааааддаа ЕаЕаЕЕаЕда ЕдддсЕасЕЕ 13200
дЕдЕсссааЕ сасЕсаадад саЕсдсаада ЕдЕдЕаЕЕсЕ ддЕсададас ЕаЕадЕЕдаЕ 13260
дааасааддд садсаЕдсад ЕааЕаЕЕдсЕ асаасааЕдд сЕаааадсаЕ сдадададдЕ 13320
ЕаЕдассдЕЕ ассЕЕдсаЕа ЕЕсссЕдаас дЕссЕаааад ЕдаЕасадса ааЕЕсЕдаЕс 13380
- 29 027784
ЕсЕсЕЕддсЕ ЕсасааЕсаа ЕЕсаассаЕд асссдддаЕд ЕадЕсаЕасс ссЕссЕсаса 13440
аасаасдасс ЕсЕЕааЕаад даЕддсасЕд ЕЕдсссдсЕс сЕаЕЕддддд даЕдааЕЕаЕ 13500
сЕдааЕаЕда дсаддсЕдЕЕ ЕдЕсадааас аЕсддЕдаЕс садЕаасаЕс аЕсааЕЕдсЕ 13560
даЕсЕсаада дааЕдаЕЕсЕ сдссЕсасЕа аЕдссЕдаад адасссЕсса ЕсаадЕааЕд 13620
асасаасаас сдддддасЕс ЕЕсаЕЕссЕа дасЕдддсЕа дсдасссЕЕа сЕсадсаааЕ 13680
сЕЕдЕаЕдЕд ЕссададсаЕ сасЕадасЕс сЕсаадааса ЕаасЕдсаад дЕЕЕдЕссЕд 13740
аЕссаЕадЕс сааасссааЕ дЕЕаааадда ЕЕаЕЕссаЕд аЕдасадЕаа адаададдас 13800
дадддасЕдд сддсаЕЕссЕ саЕддасадд саЕаЕЕаЕад ЕассЕадддс адсЕсаЕдаа 13860
аЕссЕддаЕс аЕадЕдЕсас аддддсаада дадЕсЕаЕЕд саддсаЕдсЕ ддаЕассаса 13920
аааддсЕЕда ЕЕсдадссад саЕдаддаад ддддддЕЕаа ссЕсЕсдадЕ даЕаассада 13980
ЕЕдЕссааЕЕ аЕдасЕаЕда асааЕЕсада дсадддаЕдд ЕдсЕаЕЕдас аддаадааад 14040
адаааЕдЕсс ЕсаЕЕдасаа ададЕсаЕдЕ ЕсадЕдсадс Еддсдададс ЕсЕаадаадс 14100
саЕаЕдЕддд сдаддсЕадс Есдаддасдд ссЕаЕЕЕасд дссЕЕдаддЕ сссЕдаЕдЕа 14160
сЕадааЕсЕа Едсдаддсса ссЕЕаЕЕсдд сдЕсаЕдада саЕдЕдЕсаЕ сЕдсдадЕдЕ 14220
ддаЕсадЕса асЕасддаЕд дЕЕЕЕЕЕдЕс сссЕсдддЕЕ дссаасЕдда ЕдаЕаЕЕдас 14280
ааддааасаЕ саЕссЕЕдад адЕсссаЕаЕ аЕЕддЕЕсЕа ссасЕдаЕда дадаасадас 14340
аЕдаадсЕЕд ссЕЕсдЕаад адссссаадЕ сдаЕссЕЕдс даЕсЕдсЕдЕ ЕадааЕадса 14400
асадЕдЕасЕ саЕдддсЕЕа сддЕдаЕдаЕ даЕадсЕсЕЕ ддаасдаадс сЕддЕЕдЕЕд 14460
дсЕаддсааа дддссааЕдЕ дадссЕддад дадсЕааддд ЕдаЕсасЕсс саЕсЕсаасЕ 14520
ЕсдасЕааЕЕ ЕадсдсаЕад дЕЕдадддаЕ сдЕадсасЕс аадЕдаааЕа сЕсаддЕаса 14580
ЕсссЕЕдЕсс дадЕддсдад дЕаЕассаса аЕсЕссаасд асааЕсЕсЕс аЕЕЕдЕсаЕа 14640
ЕсадаЕаада аддЕЕдаЕас ЕаасЕЕЕаЕа Еассаасаад дааЕдсЕссЕ адддЕЕдддЕ 14700
дЕЕЕЕадааа саЕЕдЕЕЕсд асЕсдадааа даЕассддаЕ саЕсЕаасас ддЕаЕЕасаЕ 14760
сЕЕсасдЕсд ааасадаЕЕд ЕЕдсдЕдаЕс ссдаЕдаЕад аЕсаЕсссад даЕасссадс 14820
Есссдсаадс ЕададсЕдад ддсададсЕа ЕдЕассаасс саЕЕдаЕаЕа ЕдаЕааЕдса 14880
ссЕЕЕааЕЕд асададаЕдс аасааддсЕа Еасасссада дссаЕаддад дсассЕЕдЕд 14940
дааЕЕЕдЕЕа саЕддЕссас ассссаасЕа ЕаЕсасаЕЕЕ ЕадсЕаадЕс сасадсасЕа 15000
ЕсЕаЕдаЕЕд ассЕддЕаас ааааЕЕЕдад ааддассаЕа ЕдааЕдаааЕ ЕЕсадсЕсЕс 15060
аЕаддддаЕд асдаЕаЕсаа ЕадЕЕЕсаЕа асЕдадЕЕЕс ЕдсЕсаЕада дссаадаЕЕа 15120
ЕЕсасЕаЕсЕ асЕЕдддсса дЕдЕдсддсс аЕсааЕЕддд саЕЕЕдаЕдЕ асаЕЕаЕсаЕ 15180
адассаЕсад ддаааЕаЕса даЕдддЕдад сЕдЕЕдЕсаЕ сдЕЕссЕЕЕс ЕадааЕдадс 15240
- 30 027784
аааддадбдб ббааддбдсб бдбсаабдсб сбаадссасс сааадабсба саадаааббс 15300
бддсаббдбд дбаббабада дссбабссаб ддбссббсас ббдабдсбса ааасббдсас 15360
асаасбдбдб дсаасабддб ббасасабдс бабабдассб ассбсдассб дббдббдааб 15420
даададббад аададббсас абббсбсббд бдбдааадсд асдаддабдб адбассддас 15480
адаббсдаса асабссаддс аааасасбба бдбдббсбдд садабббдба сбдбсаасса 15540
дддассбдсс сассааббсд аддбсбаада ссддбадада аабдбдсадб бсбаассдас 15600
сабабсаадд сададдсбаб дббабсбсса дсаддабсбб сдбддаасаб ааабссаабб 15660
аббдбадасс аббасбсабд сбсбсбдасб бабсбссддс даддабсдаб сааасадаба 15720
адаббдадад ббдабссадд аббсаббббс дасдсссбсд сбдаддбааа бдбсадбсад 15780
ссааадабсд дсадсаасаа сабсбсаааб абдадсабса аддсбббсад асссссасас 15840
дабдабдббд сааааббдсб сааадабабс аасасаадса адсасаабсб бсссабббса 15900
дддддсаабс бсдссаабба бдааабссаб дсбббссдса даабсдддбб даасбсабсб 15960
дсббдсбаса аадсбдббда дабабсааса ббааббадда дабдссббда дссаддддад 16020
дасддсббдб бсббдддбда дддабсдддб бсбабдббда бсасббабаа ддадабасбб 16080
ааасбаааса адбдсббсба баабадбддд дбббссдсса аббсбадабс бддбсааадд 16140
дааббадсас ссбабсссбс сдаадббддс сббдбсдаас асадаабддд адбаддбааб 16200
аббдбсааад бдсбсбббаа сдддаддссс даадбсасдб дддбаддсад бдбадаббдс 16260
ббсаабббса бадббадбаа бабсссбасс бсбадбдбдд ддбббабсса ббсадабаба 16320
дадассббдс сбдасааада басбабадад аадсбададд ааббддсадс сабсббабсд 16380
абддсбсбдс бссбдддсаа аабаддабса абасбддбда ббаадсббаб дссбббсадс 16440
ддддаббббд ббсадддабб бабаадббаб дбадддбсбс аббабадада адбдаассбб 16500
дбабасссба дабасадсаа сббсабабсб асбдаабсбб абббддббаб дасадабсбс 16560
ааддсбаасс ддсбаабдаа бссбдаааад аббаадсадс адабааббда абсабсбдбд 16620
аддасббсас сбддасббаб аддбсасабс сбабссабба адсаасбаад сбдсабасаа 16680
дсааббдбдд дадасдсадб бадбададдб дабабсаабс сбасбсбдаа аааасббаса 16740
ссбабададс аддбдсбдаб сааббдсддд ббддсаабба асддассбаа дсбдбдсааа 16800
дааббдабсс ассабдабдб бдссбсаддд саадабддаб бдсббааббс бабасбсабс 16860
сбсбасаддд адббддсаад аббсааадас аассааадаа дбсаасаадд дабдббссас 16920
дсббассссд баббддбаад бадсаддсаа сдадаасбба бабсбаддаб сасссдсааа 16980
ббббдддддс асаббсббсб ббасбссддд аасадааадб бдабааабаа дбббабссад 17040
аабсбсаадб ссддсбабсб дабасбадас ббасассада абабсббсдб баадаабсба 17100
бссаадбсад адааасадаб баббабдасд дддддбббда аасдбдадбд ддбббббаад 17160
- 31 027784
дЕаасадЕса аддадассаа адааЕддЕаЕ аадЕЕадЕсд даЕасадЕдс ссЕдаЕЕаад 17220
дасЕааЕЕдд ЕЕдаасЕссд даасссЕааЕ ссЕдсссЕад дЕддЕЕаддс аЕЕаЕЕЕдса 17280
аЕаЕаЕЕааа даааасЕЕЕд ааааЕасдаа дЕЕЕсЕаЕЕс ссадсЕЕЕдЕ сЕддЕддссд 17340
дсаЕддЕссс адссЕссЕсд сЕддсдссдд сЕдддсааса ЕЕссдадддд ассдЕссссЕ 17400
сддЕааЕддс дааЕдддасд сддссдаЕсс ддсЕдсЕаас ааадсссдаа аддаадсЕда 17460
дЕЕддсЕдсЕ дссассдсЕд адсааЕаасЕ адсаЕаассс сЕЕддддссЕ сЕааасдддЕ 17520
сЕЕдаддддЕ ЕЕЕЕЕдсЕда ааддаддаас ЕаЕаЕссдда Едсддссдса ддЕасссадс 17580
ЕЕЕЕдЕЕссс ЕЕЕадЕдадд дЕЕааЕЕЕсд адсЕЕддсдЕ ааЕсаЕддЕс аЕадсЕдЕЕЕ 17640
ссЕдЕдЕдаа аЕЕдЕЕаЕсс дсЕсасааЕЕ ссасасааса Еасдадссдд аадсаЕааад 17700
ЕдЕааадссЕ ддддЕдссЕа аЕдадЕдадс ЕаасЕсасаЕ ЕааЕЕдсдЕЕ дсдсЕсасЕд 17760
сссдсЕЕЕсс адЕсдддааа ссЕдЕсдЕдс садсЕдсаЕЕ ааЕдааЕсдд ссаасдсдсд 17820
дддададдсд дЕЕЕдсдЕаЕ ЕдддсдсЕсЕ ЕссдсЕЕссЕ сдсЕсасЕда сЕсдсЕдсдс 17880
ЕсддЕсдЕЕс ддсЕдсддсд адсддЕаЕса дсЕсасЕсаа аддсддЕааЕ асддЕЕаЕсс 17940
асадааЕсад дддаЕаасдс аддааадаас аЕдЕдадсаа ааддссадса аааддссадд 18000
аассдЕаааа аддссдсдЕЕ дсЕддсдЕЕЕ ЕЕссаЕаддс Ессдсссссс ЕдасдадсаЕ 18060
сасаааааЕс дасдсЕсаад ЕсададдЕдд сдааасссда саддасЕаЕа аадаЕассад 18120
дсдЕЕЕсссс сЕддаадсЕс ссЕсдЕдсдс ЕсЕссЕдЕЕс сдасссЕдсс дсЕЕассдда 18180
ЕассЕдЕссд ссЕЕЕсЕссс ЕЕсдддаадс дЕддсдсЕЕЕ сЕсаЕадсЕс асдсЕдЕадд 18240
ЕаЕсЕсадЕЕ сддЕдЕаддЕ сдЕЕсдсЕсс аадсЕдддсЕ дЕдЕдсасда ассссссдЕЕ 18300
садсссдасс дсЕдсдссЕЕ аЕссддЕаас ЕаЕсдЕсЕЕд адЕссаассс ддЕаадасас 18360
дасЕЕаЕсдс сасЕддсадс адссасЕддЕ аасаддаЕЕа дсададсдад дЕаЕдЕаддс 18420
ддЕдсЕасад адЕЕсЕЕдаа дЕддЕддссЕ аасЕасддсЕ асасЕадаад дасадЕаЕЕЕ 18480
ддЕаЕсЕдсд сЕсЕдсЕдаа дссадЕЕасс ЕЕсддааааа дадЕЕддЕад сЕсЕЕдаЕсс 18540
ддсааасааа ссассдсЕдд ЕадсддЕддЕ ЕЕЕЕЕЕдЕЕЕ дсаадсадса даЕЕасдсдс 18600
адааааааад даЕсЕсаада адаЕссЕЕЕд аЕсЕЕЕЕсЕа сддддЕсЕда сдсЕсадЕдд 18660
аасдаааасЕ сасдЕЕаадд даЕЕЕЕддЕс аЕдадаЕЕаЕ саааааддаЕ сЕЕсассЕад 18720
аЕссЕЕЕЕаа аЕЕаааааЕд аадЕЕЕЕааа ЕсааЕсЕааа дЕаЕаЕаЕда дЕааасЕЕдд 18780
ЕсЕдасадЕЕ ассааЕдсЕЕ ааЕсадЕдад дсассЕаЕсЕ садсдаЕсЕд ЕсЕаЕЕЕсдЕ 18840
ЕсаЕссаЕад ЕЕдссЕдасЕ ссссдЕсдЕд ЕадаЕаасЕа сдаЕасддда дддсЕЕасса 18900
ЕсЕддсссса дЕдсЕдсааЕ даЕассдсда дасссасдсЕ сассддсЕсс адаЕЕЕаЕса 18960
дсааЕааасс адссадссдд аадддссдад сдсадаадЕд дЕссЕдсаас ЕЕЕаЕссдсс 19020
- 32 027784
ЕссаЕссадЕ сЕаЕЕааЕЕд ЕЕдссдддаа дсЕададЕаа дЕадЕЕсдсс адЕЕааЕадЕ 19080
ЕЕдсдсаасд ЕЕдЕЕдссаЕ ЕдсЕасаддс аЕсдЕддЕдЕ сасдсЕсдЕс дЕЕЕддЕаЕд 19140
дсЕЕсаЕЕса дсЕссддЕЕс ссаасдаЕса аддсдадЕЕа саЕдаЕсссс саЕдЕЕдЕдс 19200
аааааадсдд ЕЕадсЕссЕЕ сддЕссЕссд аЕсдЕЕдЕса даадЕаадЕЕ ддссдсадЕд 19260
ЕЕаЕсасЕса ЕддЕЕаЕддс адсасЕдсаЕ ааЕЕсЕсЕЕа сЕдЕсаЕдсс аЕссдЕаада 19320
ЕдсЕЕЕЕсЕд ЕдасЕддЕда дЕасЕсаасс аадЕсаЕЕсЕ дадааЕадЕд ЕаЕдсддсда 19380
ссдадЕЕдсЕ сЕЕдсссддс дЕсааЕасдд даЕааЕассд сдссасаЕад садаасЕЕЕа 19440
ааадЕдсЕса ЕсаЕЕддааа асдЕЕсЕЕсд дддсдаааас ЕсЕсааддаЕ сЕЕассдсЕд 19500
ЕЕдадаЕсса дЕЕсдаЕдЕа асссасЕсдЕ дсасссаасЕ даЕсЕЕсадс аЕсЕЕЕЕасЕ 19560
ЕЕсассадсд ЕЕЕсЕдддЕд адсаааааса ддааддсааа аЕдссдсааа ааадддааЕа 19620
адддсдасас ддаааЕдЕЕд ааЕасЕсаЕа сЕсЕЕссЕЕЕ ЕЕсааЕаЕЕа ЕЕдаадсаЕЕ 19680
ЕаЕсадддЕЕ аЕЕдЕсЕсаЕ дадсддаЕас аЕаЕЕЕдааЕ дЕаЕЕЕадаа аааЕааасаа 19740
аЕаддддЕЕс сдсдсасаЕЕ Ессссдаааа дЕдс 19774
<210> 3 <211> 1518 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 3
аЕдадссЕдЕ ддсЕдсссад сдаддссасс дЕдЕассЕдс сссссдЕдсс сдЕдадсаад 60
дЕддЕдадса ссдасдадЕа сдЕддссадд ассаасаЕсЕ асЕассасдс сддсассадс 120
аддсЕдсЕдд ссдЕдддсса ссссЕасЕЕс сссаЕсаада адсссаасаа саасаадаЕс 180
сЕддЕдссса аддЕдадсдд ссЕдсадЕас адддЕдЕЕса ддаЕссассЕ дсссдасссс 240
аасаадЕЕсд дсЕЕссссда сассадсЕЕс Еасаассссд асасссадад дсЕддЕдЕдд 300
дссЕдсдЕдд дсдЕддаддЕ дддсаддддс садссссЕдд дсдЕдддсаЕ садсддссас 360
ссссЕдсЕда асаадсЕдда сдасассдад аасдссадсд ссЕасдссдс саасдссддс 420
дЕддасааса дддадЕдсаЕ садсаЕддас Еасаадсада сссадсЕдЕд ссЕдаЕсддс 480
Едсаадсссс ссаЕсддсда дсасЕддддс аадддсадсс ссЕдсассаа сдЕддссдЕд 540
аассссддсд асЕдсссссс ссЕддадсЕд аЕсаасассд ЕдаЕссадда сддсдасаЕд 600
дЕддасассд дсЕЕсддсдс саЕддасЕЕс ассасссЕдс аддссаасаа дадсдаддЕд 660
ссссЕддаса ЕсЕдсассад саЕсЕдсаад ЕассссдасЕ асаЕсаадаЕ ддЕдадсдад 720
сссЕасддсд асадссЕдЕЕ сЕЕсЕассЕд аддадддадс адаЕдЕЕсдЕ даддсассЕд 780
ЕЕсаасаддд ссддсдссдЕ дддсдадаас дЕдсссдасд ассЕдЕасаЕ саадддсадс 840
ддсадсассд ссаассЕддс садсадсаас ЕасЕЕсссса сссссадсдд садсаЕддЕд 900
- 33 027784
ассадсдасд сссадаЕсЕЕ саасаадссс ЕасЕддсЕдс ададддссса дддссасаас 960
аасддсаЕсЕ дсЕддддсаа ссадсЕдЕЕс дЕдассдЕдд Еддасассас саддадсасс 1020
аасаЕдадсс ЕдЕдсдссдс саЕсадсасс адсдадасса ссЕасаадаа сассаасЕЕс 1080
ааддадЕасс Едаддсасдд сдаддадЕас дассЕдсадЕ ЕсаЕсЕЕсса дсЕдЕдсаад 1140
аЕсасссЕда ссдссдасдЕ даЕдассЕас аЕссасадса Едаасадсас саЕссЕддад 1200
дасЕддаасЕ ЕсддссЕдса дссссссссс ддсддсассс Еддаддасас сЕасаддЕЕс 1260
дЕдассадсс аддссаЕсдс сЕдссадаад сасасссссс ссдсссссаа ддаддасссс 1320
сЕдаадаадЕ асассЕЕсЕд ддаддЕдаас сЕдааддада адЕЕсадсдс сдассЕддас 1380
садЕЕссссс Едддсаддаа дЕЕссЕдсЕд саддссддсс Едааддссаа дсссаадЕЕс 1440
асссЕдддса ададдааддс сасссссасс ассадсадса ссадсассас сдссаададд 1500
аадаададда адсЕдЕда 1518
<210> 4 <211> 1422 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 4
аЕдсдасаса аасдЕЕсЕдс аааасдсаса ааасдЕдсаЕ сддсЕассса асЕЕЕаЕааа 60
асаЕдсааас аддсаддЕас аЕдЕссассЕ дасаЕЕаЕас сЕааддЕЕда аддсаааасЕ 120
аЕЕдсЕдаас аааЕаЕЕаса аЕаЕддаадЕ аЕдддЕдЕаЕ ЕЕЕЕЕддЕдд дЕЕаддааЕЕ 180
ддаасадддЕ сдддЕасадд сддасдсасЕ дддЕаЕаЕЕс саЕЕдддаас ааддссЕссс 240
асадсЕасад аЕасасЕЕдс ЕссЕдЕаада сссссЕЕЕаа садЕадаЕсс ЕдЕдддсссЕ 300
ЕсЕдаЕссЕЕ сЕаЕадЕЕЕс ЕЕЕадЕддаа дааасЕадЕЕ ЕЕаЕЕдаЕдс ЕддЕдсасса 360
асаЕсЕдЕас сЕЕссаЕЕсс сссадаЕдЕа ЕсаддаЕЕЕа дЕаЕЕасЕас ЕЕсаасЕдаЕ 420
ассасассЕд сЕаЕаЕЕада ЕаЕЕааЕааЕ асЕдЕЕасЕа сЕдЕЕасЕас асаЕааЕааЕ 480
сссасЕЕЕса сЕдасссаЕс ЕдЕаЕЕдсад ссЕссаасас сЕдсадааас ЕддадддсаЕ 540
ЕЕЕасасЕЕЕ саЕсаЕссас ЕаЕЕадЕаса саЕааЕЕаЕд аадаааЕЕсс ЕаЕддаЕаса 600
ЕЕЕаЕЕдЕЕа дсасааассс ЕаасасадЕа асЕадЕадса сасссаЕасс адддЕсЕсдс 660
ссадЕддсас дссЕаддаЕЕ аЕаЕадЕсдс асаасасаас аддЕЕааадЕ ЕдЕадасссЕ 720
дсЕЕЕЕдЕаа ссасЕсссас ЕааасЕЕаЕЕ асаЕаЕдаЕа аЕссЕдсаЕа ЕдааддЕаЕа 780
даЕдЕддаЕа аЕасаЕЕаЕа ЕЕЕЕЕсЕадЕ ааЕдаЕааЕа дЕаЕЕааЕаЕ адсЕссадаЕ 840
ссЕдасЕЕЕЕ ЕддаЕаЕадЕ ЕдсЕЕЕасаЕ аддссадсаЕ ЕаассЕсЕад дсдЕасЕддс 900
аЕЕаддЕаса дЕадааЕЕдд ЕааЕааасаа асасЕасдЕа сЕсдЕадЕдд ааааЕсЕаЕа 960
ддЕдсЕаадд ЕасаЕЕаЕЕа ЕЕаЕдаЕЕЕа адЕасЕаЕЕд аЕссЕдсада адаааЕадаа 1020
- 34 027784
ЕЕасааасЕа ЕаасассЕЕс ЕасаЕаЕасЕ ассасЕЕсас аЕдсадссЕс ассЕасЕЕсЕ 1080
аЕЕааЕааЕд даЕЕаЕаЕда ЕаЕЕЕаЕдса даЕдасЕЕЕа ЕЕасадаЕас ЕЕсЕасаасс 1140
ссддЕассаЕ сЕдЕасссЕс ЕасаЕсЕЕЕа ЕсаддЕЕаЕа ЕЕссЕдсааа ЕасаасааЕЕ 1200
ссЕЕЕЕддЕд дЕдсаЕасаа ЕаЕЕссЕЕЕа дЕаЕсаддЕс сЕдаЕаЕасс саЕЕааЕаЕа 1260
асЕдассаад сЕссЕЕсаЕЕ ааЕЕссЕаЕа дЕЕссадддЕ сЕссасааЕа ЕасааЕЕаЕЕ 1320
дсЕдаЕдсад дЕдасЕЕЕЕа ЕЕЕасаЕссЕ адЕЕаЕЕаса ЕдЕЕасдааа асдасдЕааа 1380
сдЕЕЕассаЕ аЕЕЕЕЕЕЕЕс адаЕдЕсЕсЕ ЕЕддсЕдссЕ ад 1422
<210> 5 <211> 477 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека
<400> 5 аЕдсассааа ададаасЕдс ааЕдЕЕЕсад дасссасадд адсдасссад ааадЕЕасса 60
садЕЕаЕдса сададсЕдса аасаасЕаЕа саЕдаЕаЕаа ЕаЕЕадааЕд ЕдЕдЕасЕдс 120
аадсаасадЕ ЕасЕдсдасд ЕдаддЕаЕаЕ дасЕЕЕдсЕЕ ЕЕсдддаЕЕЕ аЕдсаЕадЕа 180
ЕаЕададаЕд ддааЕссаЕа ЕдсЕдЕаЕдЕ даЕаааЕдЕЕ ЕааадЕЕЕЕа ЕЕсЕааааЕЕ 240
адЕдадЕаЕа дасаЕЕаЕЕд ЕЕаЕадЕЕЕд ЕаЕддаасаа саЕЕадааса дсааЕасаас 300
ааассдЕЕдЕ дЕдаЕЕЕдЕЕ ааЕЕаддЕдЕ аЕЕаасЕдЕс аааадссасЕ дЕдЕссЕдаа 360
даааадсааа дасаЕсЕдда сааааадсаа адаЕЕссаЕа аЕаЕаадддд ЕсддЕддасс 420
ддЕсдаЕдЕа ЕдЕсЕЕдЕЕд садаЕсаЕса адаасасдЕа дадааассса дсЕдЕаа 477
<210> 6 <211> 297 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 6 аЕдсаЕддад аЕасассЕас аЕЕдсаЕдаа ЕаЕаЕдЕЕад аЕЕЕдсаасс ададасаасЕ 60 даЕсЕсЕасЕ дЕЕаЕдадса аЕЕаааЕдас адсЕсададд аддаддаЕда ааЕадаЕддЕ 120 ссадсЕддас аадсадаасс ддасададсс саЕЕасааЕа ЕЕдЕаассЕЕ ЕЕдЕЕдсаад 180
ЕдЕдасЕсЕа сдсЕЕсддЕЕ дЕдсдЕасаа адсасасасд ЕадасаЕЕсд ЕасЕЕЕддаа 240 дассЕдЕЕаа ЕдддсасасЕ аддааЕЕдЕд ЕдссссаЕсЕ дЕЕсЕсадаа ассаЕаа 297 <210> 7 <211> 1707 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 7 аЕдЕдссЕдЕ аЕасасдддЕ ссЕдаЕаЕЕа саЕЕассаЕс ЕасЕассЕсЕ дЕаЕддссса 60
- 35 027784
ЕЕдЕаЕсасс сасддссссЕ дссЕсЕасас адЕаЕаЕЕдд ЕаЕасаЕддЕ асасаЕЕаЕЕ 120 аЕЕЕдЕддсс аЕЕаЕаЕЕаЕ ЕЕЕаЕЕссЕа адааасдЕаа асдЕдЕЕссс ЕаЕЕЕЕЕЕЕд 180 садаЕддсЕЕ ЕдЕддсддсс ЕадЕдасааЕ ассдЕаЕаЕс ЕЕссассЕсс ЕЕсЕдЕддса 240 ададЕЕдЕаа аЕассдаЕда ЕЕаЕдЕдасЕ сссасаадса ЕаЕЕЕЕаЕса ЕдсЕддсадс 300
ЕсЕадаЕЕаЕ ЕаасЕдЕЕдд ЕааЕссаЕаЕ ЕЕЕадддЕЕс сЕдсаддЕдд ЕддсааЕаад 360 саддаЕаЕЕс сЕааддЕЕЕс ЕдсаЕассаа ЕаЕададЕаЕ ЕЕадддЕдса дЕЕассЕдас 420 ссаааЕаааЕ ЕЕддЕЕЕасс ЕдаЕасЕадЕ аЕЕЕаЕааЕс сЕдааасаса асдЕЕЕадЕд 480
ЕдддссЕдЕд сЕддадЕдда ааЕЕддссдЕ ддЕсадссЕЕ ЕаддЕдЕЕдд ссЕЕадЕддд 540 саЕссаЕЕЕЕ аЕааЕаааЕЕ адаЕдасасЕ дааадЕЕссс аЕдссдссас дЕсЕааЕдЕЕ 600
ЕсЕдаддасд ЕЕадддасаа ЕдЕдЕсЕдЕа даЕЕаЕаадс адасасадЕЕ аЕдЕаЕЕЕЕд 660 ддсЕдЕдссс сЕдсЕаЕЕдд ддаасасЕдд дсЕаааддса сЕдсЕЕдЕаа аЕсдсдЕссЕ 720
ЕЕаЕсасадд дсдаЕЕдссс сссЕЕЕадаа сЕЕаааааса садЕЕЕЕдда адаЕддЕдаЕ 780 аЕддЕадаЕа сЕддаЕаЕдд ЕдссаЕддас ЕЕЕадЕасаЕ ЕдсаадаЕас ЕаааЕдЕдад 840 дЕассаЕЕдд аЕаЕЕЕдЕса дЕсЕаЕЕЕдЕ аааЕаЕссЕд аЕЕаЕЕЕаса ааЕдЕсЕдса 900 даЕссЕЕаЕд дддаЕЕссаЕ дЕЕЕЕЕЕЕдс ЕЕасддсдЕд адсадсЕЕЕЕ ЕдсЕаддсаЕ 960
ЕЕЕЕддааЕа дадсаддЕас ЕаЕдддЕдас асЕдЕдссЕс ааЕссЕЕаЕа ЕаЕЕаааддс 1020 асаддЕаЕдс сЕдсЕЕсасс ЕддсадсЕдЕ дЕдЕаЕЕсЕс ссЕсЕссаад ЕддсЕсЕаЕЕ 1080 дЕЕассЕсЕд асЕсссадЕЕ дЕЕЕааЕааа ссаЕаЕЕддЕ ЕасаЕааддс асадддЕсаЕ 1140 аасааЕддЕд ЕЕЕдсЕддса ЕааЕсааЕЕа ЕЕЕдЕЕасЕд ЕддЕадаЕас сасЕсссадЕ 1200 ассааЕЕЕаа сааЕаЕдЕдс ЕЕсЕасасад ЕсЕссЕдЕас сЕдддсааЕа ЕдаЕдсЕасс 1260 аааЕЕЕаадс адЕаЕадсад асаЕдЕЕдад дааЕаЕдаЕЕ ЕдсадЕЕЕаЕ ЕЕЕЕсадЕЕд 1320
ЕдЕасЕаЕЕа сЕЕЕаасЕдс адаЕдЕЕаЕд ЕссЕаЕаЕЕс аЕадЕаЕдаа ЕадсадЕаЕЕ 1380
ЕЕададдаЕЕ ддаасЕЕЕдд ЕдЕЕсссссс сссссаасЕа сЕадЕЕЕддЕ ддаЕасаЕаЕ 1440 сдЕЕЕЕдЕас ааЕсЕдЕЕдс ЕаЕЕассЕдЕ сааааддаЕд сЕдсассддс ЕдааааЕаад 1500 даЕсссЕаЕд аЕаадЕЕааа дЕЕЕЕддааЕ дЕддаЕЕЕаа аддаааадЕЕ ЕЕсЕЕЕадас 1560
ЕЕадаЕсааЕ аЕссссЕЕдд асдЕаааЕЕЕ ЕЕддЕЕсадд сЕддаЕЕдсд Есдсаадссс 1620 ассаЕаддсс сЕсдсааасд ЕЕсЕдсЕсса ЕсЕдссасЕа сдЕсЕЕсЕаа ассЕдссаад 1680 сдЕдЕдсдЕд ЕасдЕдссад даадЕаа 1707 <210> 8 <211> 1389 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 8
- 36 027784
аЕддЕаЕссс ассдЕдссдс асдасдсааа сдддсЕЕсдд ЕаасЕдасЕЕ аЕаЕааааса 60
ЕдЕааасааЕ сЕддЕасаЕд ЕссассЕдаЕ дЕЕдЕЕссЕа аддЕддаддд сассасдЕЕа 120
дсадаЕаааа ЕаЕЕдсааЕд дЕсаадссЕЕ ддЕаЕаЕЕЕЕ ЕдддЕддасЕ ЕддсаЕаддЕ 180
асЕддсадЕд дЕасаддддд ЕсдЕасаддд ЕасаЕЕссаЕ ЕдддЕдддсд ЕЕссааЕаса 240
дЕддЕддаЕд ЕЕддЕссЕас асдЕссссса дЕддЕЕаЕЕд аассЕдЕддд ссссасадас 300
ссаЕсЕаЕЕд ЕЕасаЕЕааЕ ададдасЕсс адЕдЕддЕЕа саЕсаддЕдс ассЕаддссЕ 360
асдЕЕЕасЕд дсасдЕсЕдд дЕЕЕдаЕаЕа асаЕсЕдсдд дЕасаасЕас ассЕдсддЕЕ 420
ЕЕддаЕаЕса сассЕЕсдЕс ЕассЕсЕдЕд ЕсЕаЕЕЕсса саассааЕЕЕ ЕассааЕссЕ 480
дсаЕЕЕЕсЕд аЕссдЕссаЕ ЕаЕЕдаадЕЕ ссасааасЕд дддаддЕддс аддЕааЕдЕа 540
ЕЕЕдЕЕддЕа ссссЕасаЕс ЕддаасасаЕ дддЕаЕдадд аааЕассЕЕЕ асааасаЕЕЕ 600
дсЕЕсЕЕсЕд дЕасддддда ддаасссаЕЕ адЕадЕассс саЕЕдссЕас ЕдЕдсддсдЕ 660
дЕадсаддЕс сссдссЕЕЕа садЕадддсс Еассаасаад ЕдЕсадЕддс ЕаасссЕдад 720
ЕЕЕсЕЕасас дЕссаЕссЕс ЕЕЕааЕЕаса ЕаЕдасаасс сддссЕЕЕда дссЕдЕддас 780
асЕасаЕЕаа саЕЕЕдаЕсс ЕсдЕадЕдаЕ дЕЕссЕдаЕЕ садаЕЕЕЕаЕ ддаЕаЕЕаЕс 840
сдЕсЕасаЕа ддссЕдсЕЕЕ аасаЕссадд сдЕдддасЕд ЕЕсдсЕЕЕад ЕадаЕЕаддЕ 900
саасдддсаа сЕаЕдЕЕЕас ссдсадсддЕ асасаааЕад дЕдсЕадддЕ ЕсасЕЕЕЕаЕ 960
саЕдаЕаЕаа дЕссЕаЕЕдс ассЕЕсссса дааЕаЕаЕЕд аасЕдсадсс ЕЕЕадЕаЕсЕ 1020
дссасддадд асааЕдасЕЕ дЕЕЕдаЕаЕа ЕаЕдсадаЕд асаЕддассс ЕдсадЕдссЕ 1080
дЕассаЕсдс дЕЕсЕасЕас сЕссЕЕЕдса ЕЕЕЕЕЕаааЕ аЕЕсдсссас ЕаЕаЕсЕЕсЕ 1140
дссЕсЕЕссЕ аЕадЕааЕдЕ аасддЕсссЕ ЕЕаассЕссЕ сЕЕдддаЕдЕ дссЕдЕаЕас 1200
асдддЕссЕд аЕаЕЕасаЕЕ ассаЕсЕасЕ ассЕсЕдЕаЕ ддсссаЕЕдЕ аЕсасссасд 1260
дссссЕдссЕ сЕасасадЕа ЕаЕЕддЕаЕа саЕддЕасас аЕЕаЕЕаЕЕЕ дЕддссаЕЕа 1320
ЕаЕЕаЕЕЕЕа ЕЕссЕаадаа асдЕааасдЕ дЕЕсссЕаЕЕ ЕЕЕЕЕдсада ЕддсЕЕЕдЕд 1380
дсддссЕад 1389 <210> 9 <211> 477 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека
<400> 9 аЕддсдсдсЕ ЕЕдаддаЕсс аасасддсда сссЕасаадс ЕассЕдаЕсЕ дЕдсасддаа 60
сЕдаасасЕЕ сасЕдсаада саЕадаааЕа ассЕдЕдЕаЕ аЕЕдсаадас адЕаЕЕддаа 120
сЕЕасададд ЕаЕЕЕдааЕЕ ЕдсаЕЕЕааа даЕЕЕаЕЕЕд ЕддЕдЕаЕад адасадЕаЕа 180
ссссаЕдсЕд саЕдссаЕаа аЕдЕаЕадаЕ ЕЕЕЕаЕЕсЕа дааЕЕадада аЕЕаадасаЕ 240
- 37 027784
ВаВВсадасВ сВдВдВаВдд адасасаВВд дааааасВаа сВаасасВдд дВВаВасааВ 300
ВВаВВааВаа ддВдссВдсд дВдссадааа ссдВВдааВс садсадаааа асВВадасас 360
сВВааВдааа аасдасдаВВ ВсасаасаВа дсВдддсасВ аВададдсса дВдссаВВсд 420
ВдсВдсаасс дадсасдаса ддаасдасВс саасдасдса дадааасаса адВаВаа 477
<210> 10 <211> 318 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 10 аВдсаВддас сВааддсаас аВВдсаадас аВВдВаВВдс аВВВададсс ссааааВдаа 60 аВВссддВВд ассВВсВаВд Всасдадсаа ВВаадсдасВ сададдаада ааасдаВдаа 120 аВадаВддад ВВааВсаВса асаВВВасса дсссдасдад ссдаассаса асдВсасаса 180 аВдВВдВдВа ВдВдВВдВаа дВдВдаадсс адааВВдадс ВадВадВада аадсВсадса 240 дасдассВВс дадсаВВсса дсадсВдВВВ сВдаасассс ВдВссВВВдВ дВдВссдВдд 300
ВдВдсаВссс адсадВаа 318 <210> 11 <211> 1503 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 11
аВдВддсддс сВадсдасад сасадВаВаВ дВдссВссВс сВаасссВдВ аВссааадВВ 60
дВВдссасдд аВдсВВаВдВ ВасВсдсасс аасаВаВВВВ аВсаВдссад садВВсВада 120
сВВсВВдсад ВдддВсаВсс ВВаВВВВВсс аВаааасддд сВаасаааас ВдВВдВдсса 180
ааддВдВсад даВаВсааВа садддВаВВВ ааддВддВдВ ВассадаВсс ВаасаааВВВ 240
дсаВВдссВд асВсдВсВсВ ВВВВдаВссс асаасасаас дВВВддВаВд ддсаВдсаса 300
ддссВададд Вдддсадддд асадссаВВа ддВдВдддВд ВаадВддаса ВссВВВссВа 360
ааВаааВаВд аВдаВдВВда аааВВсаддд адВддВддВа асссВддаса ддаВаасадд 420
дВВааВдВВд дВаВддаВВа Вааасаааса сааВВаВдса ВддВВддаВд ВдсссссссВ 480
ВВдддсдадс аВВддддВаа аддВааасад ВдВасВааВа сассВдВаса ддсВддВдас 540
ВдсссдсссВ ВадаасВВаВ ВассадВдВВ аВасаддаВд дсдаВаВддВ Вдасасаддс 600
ВВВддВдсВа ВдааВВВВдс ВдаВВВдсад ассааВаааВ садаВдВВсс ВаВВВасаВа 660
ВдВддсасВа саВдВаааВа ВссадаВВаВ ВВасаааВдд сВдсадассс аВаВддВдаВ 720
адаВВаВВВВ ВВВВВсВасд дааддаасаа аВдВВВдсса дасаВВВВВВ ВаасадддсВ 780
ддсдаддВдд дддаассВдВ дссВдаВасВ сВВаВааВВа адддВадВдд аааВсдаасд 840
ВсВдВаддда дВадВаВаВа ВдВВаасасс ссаадсддсВ сВВВддВдВс сВсВдаддса 900
- 38 027784
сааЕЕдЕЕЕа аЕаадссаЕа ЕЕддсЕасаа ааадсссадд дасаЕаасаа ЕддЕаЕЕЕдЕ 960
ЕддддЕааЕс аасЕдЕЕЕдЕ ЕасЕдЕддЕа даЕассасас дсадЕассаа саЕдасаЕЕа 1020
ЕдЕдсаЕссд ЕаасЕасаЕс ЕЕссасаЕас ассааЕЕсЕд аЕЕаЕааада дЕасаЕдсдЕ 1080
саЕдЕддаад адЕаЕдаЕЕЕ асааЕЕЕаЕЕ ЕЕЕсааЕЕаЕ дЕадсаЕЕас аЕЕдЕсЕдсЕ 1140
даадЕааЕдд ссЕаЕаЕЕса сасааЕдааЕ сссЕсЕдЕЕЕ ЕддаадасЕд даасЕЕЕддд 1200
ЕЕаЕсдссЕс ссссаааЕдд ЕасаЕЕадаа даЕассЕаЕа ддЕаЕдЕдса дЕсасаддсс 1260
аЕЕассЕдЕс аааадсссас ЕссЕдаааад даааадссад аЕсссЕаЕаа даассЕЕадЕ 1320
ЕЕЕЕдддадд ЕЕааЕЕЕааа адаааадЕЕЕ ЕсЕадЕдааЕ ЕддаЕсадЕа ЕссЕЕЕддда 1380
сдсаадЕЕЕЕ ЕдЕЕасааад ЕддаЕаЕадд ддасддЕссЕ сЕаЕЕсдЕас сддЕдЕЕаад 1440
сдсссЕдсЕд ЕЕЕссааадс сЕсЕдсЕдсс ссЕааасдЕа адсдсдссаа аассаааадд 1500
Еаа 1503 <210> 12 <211> 1380
<212> ДНК
<213> Вирус папилломы человека <400> 12 аЕддсасаЕа дЕадддсссд асдасдсаад сдЕдсдЕсад сЕасасадсЕ аЕаЕсаааса 60
ЕдЕааасЕса сЕддаасаЕд ссссссадаЕ дЕааЕЕссЕа аддЕддааса саасассаЕЕ 120
дсадаЕсааа ЕаЕЕааааЕд ддддадЕЕЕд ддддЕдЕЕЕЕ ЕЕддадддЕЕ дддЕаЕаддс 180
ассддЕЕссд дсасЕддддд ЕсдЕасЕддс ЕаЕдЕЕсссЕ ЕаддаасЕЕс ЕдсаааассЕ 240
ЕсЕаЕЕасЕа дЕдддссЕаЕ ддсЕсдЕссЕ ссЕдЕддЕдд ЕддадссЕдЕ ддссссЕЕсд 300
даЕссаЕсса ЕЕдЕдЕсЕЕЕ ааЕЕдаадаа ЕсддсааЕса ЕЕаасдсадд ддсдссЕдаа 360
аЕЕдЕдсссс сЕдсасасдд ЕдддЕЕЕаса аЕЕасаЕссЕ сЕдааасаас ЕассссЕдса 420
аЕаЕЕддаЕд ЕаЕсадЕЕас ЕадЕсаЕасЕ асЕасЕадЕа ЕаЕЕЕадааа ЕссЕдЕсЕЕЕ 480
асадаассЕЕ сЕдЕаасаса ассссаасса сссдЕддадд сЕааЕддаса ЕаЕаЕЕааЕЕ 540
ЕсЕдсассса сЕаЕаасдЕс асасссЕаЕа даддаааЕЕс сЕЕЕадаЕас ЕЕЕЕдЕдаЕа 600
ЕссЕсЕадЕд аЕадсддЕсс ЕасаЕссадЕ ассссЕдЕЕс сЕддЕасЕдс ассЕсддссЕ 660
сдЕдЕдддсс ЕаЕаЕадЕсд ЕдсаЕЕдсас саддЕдсадд ЕЕасадассс ЕдсаЕЕЕсЕЕ 720
ЕссасЕссЕс аасдсЕЕааЕ ЕасаЕаЕдаЕ аасссЕдЕаЕ аЕдаадддда ддаЕдЕЕадЕ 780
дЕасааЕЕЕа дЕсаЕдаЕЕс ЕаЕасасааЕ дсассЕдаЕд аддсЕЕЕЕаЕ ддасаЕааЕЕ 840
сдЕЕЕдсаса дассЕдсЕаЕ ЕдсдЕсссда сдЕддссЕЕд ЕдсддЕасад ЕсдсаЕЕдда 900
саасдддддЕ сЕаЕдсасас Есдсадсдда аадсасаЕад дддсссдсаЕ ЕсаЕЕаЕЕЕЕ 960
ЕаЕдаЕаЕЕЕ сассЕаЕЕдс асаадсЕдса даадаааЕад аааЕдсассс ЕсЕЕдЕддсЕ 1020
- 39 027784
дсасаддаад аЕасаЕЕЕда ЕаЕЕЕаЕдсЕ дааЕсЕЕЕЕд аассЕдасаЕ ЕаасссЕасс 1080
саасасссЕд ЕЕасаааЕаЕ аЕсадаЕаса ЕаЕЕЕаасЕЕ ссасассЕаа ЕасадЕЕаса 1140
саассдЕддд дЕаасассас адЕЕссаЕЕд ЕсааЕЕссЕа аЕдассЕдЕЕ ЕЕЕасадЕсЕ 1200
ддсссЕдаЕа ЕаасЕЕЕЕсс ЕасЕдсассЕ аЕдддаасас ссЕЕЕадЕсс ЕдЕаасЕссЕ 1260
дсЕЕЕассЕа саддсссЕдЕ ЕЕЕсаЕЕаса ддЕЕсЕддаЕ ЕЕЕаЕЕЕдса ЕссЕдсаЕдд 1320
ЕаЕЕЕЕдсас дЕааасдссд ЕааасдЕаЕЕ сссЕЕаЕЕЕЕ ЕЕЕсадаЕдЕ ддсддссЕад 1380
<210> 13 <211> 453 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 13
аЕддааадЕд саааЕдссЕс сасдЕсЕдса асдассаЕад ассадЕЕдЕд саадасдЕЕЕ 60
ааЕсЕаЕсЕа ЕдсаЕасдЕЕ дсаааЕЕааЕ ЕдЕдЕдЕЕЕЕ дсаадааЕдс асЕдассасЕ 120
дсададаЕЕЕ аЕЕсаЕаЕдс аЕаЕааасад сЕаааддЕсс ЕдЕЕЕсдадд сддсЕаЕсса 180
ЕаЕдсадссЕ дсдсдЕдсЕд ссЕадааЕЕЕ саЕддааааа ЕЕаассааЕа ЕадасасЕЕЕ 240
даЕЕаЕдсЕд даЕаЕдсаас аасЕдЕЕдаа даадааасЕа аасаадасаЕ ЕЕЕадасдЕд 300
сЕааЕЕсддЕ дсЕассЕдЕд Есасааассд сЕдЕдЕдаад ЕадааааддЕ аааасаЕаЕа 360
сЕаассаадд сасддЕЕсаЕ ааадсЕаааЕ ЕдЕасдЕдда адддЕсдсЕд ссЕасасЕдс 420
ЕддасаасаЕ дсаЕддаада саЕдЕЕассс Еаа 453
<210> 14 <211> 297 <212> ДНК <213> Вирус папилломы человека <400> 14
аЕдсаЕддаа дасаЕдЕЕас ссЕаааддаЕ аЕЕдЕаЕЕад ассЕдсаасс ЕссадасссЕ 60
дЕадддЕЕас аЕЕдсЕаЕда дсааЕЕадЕа дасадсЕсад аадаЕдаддЕ ддасдаадЕд 120
дасддасаад аЕЕсасаасс ЕЕЕаааасаа саЕЕассааа ЕадЕдассЕд ЕЕдсЕдЕдда 180
ЕдЕдасадса асдЕЕсдасЕ ддЕЕдЕдсад ЕдЕасадааа садасаЕсад адаадЕдсаа 240
садсЕЕсЕдЕ ЕдддаасасЕ ааасаЕадЕд ЕдЕсссаЕсЕ дсдсассдаа дасаЕаа 297

Claims (40)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Комбинированная вакцина корь-НРУ, содержащая рекомбинантные вакцинные вирусы кори, которые продуцируют один или более антигенов НРУ, выбранных из Ь1, Ь2, Е6 и Е7, и антигены кори, которая способна вызывать иммунный ответ и обеспечивать защиту как от кори, так и от НРУ.
  2. 2. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.1, где рекомбинантные вакцинные вирусы кори продуцируют по меньшей мере один из белков Ь1 различных типов НРУ.
    - 40 027784
  3. 3. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.2, где белок Ь1 выбран из НРУ16-Ы, НРУ18-Ы, НРУ6-Ь1 и НРУ11-Ы.
  4. 4. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат встроенную нуклеотидную последовательность, кодирующую антиген НРУ, выбранный из группы НРУ16-Ы, НРУ18-Ы, НРУ6-Ь1 и НРУ11-Ы.
  5. 5. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.1, где рекомбинантные вакцинные вирусы кори продуцируют по меньшей мере один из белков Ь2 различных типов НРУ.
  6. 6. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.5, где белок Ь2 выбран из НРУ16-Ь2, НРУ18-Ь2, НРУ6-Ь2 и НРУ11-Ь2.
  7. 7. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат встроенную нуклеотидную последовательность, кодирующую антиген НРУ, выбранный из группы НРУ16-Ь2, НРУ18-Ь2, НРУ6-Ь2 и НРУ11-Ь2.
  8. 8. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.1, где рекомбинантные вакцинные вирусы кори продуцируют по меньшей мере один из белков Е6 или Е7 различных типов НРУ.
  9. 9. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.8, где белок Е6 выбран из НРУ16-Е6, НРУ18-Е6 и НРУ6-Е6.
  10. 10. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат встроенную нуклеотидную последовательность, кодирующую антиген НРУ, выбранный из группы НРУ16-Е6, НРУ18-Е6 и НРУ6-Е6.
  11. 11. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.8, где белок Е7 выбран из НРУ16-Е7, НРУ18-Е7 и НРУ6-Е7.
  12. 12. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат встроенную нуклеотидную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген НРУ, выбранный из группы НРУ16-Е7, НРУ18-Е7 и НРУ6-Е7.
  13. 13. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат встроенную последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую антиген НРУ, выбранный из НРУ16-Ы, или НРУ18-Ы, или НРУ6-Ь1, или НРУ11-Ы, или НРУ16-Ь2, или НРУ18-Ь2, или НРУ6-Ь2, или НРУ11-Ь2, или НРУ16-Е6, или НРУ18-Е6, или НРУ6-Е6, или НРУ16-Е7, или НРУ18Е7, или НРУ6-Е7, или любой их комбинации.
  14. 14. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат по меньшей мере две или три встроенные нуклеотидные последовательности, кодирующие антигены НРУ.
  15. 15. Комбинированная вакцина корь-НРУ по любому из предшествующих пунктов, где антигены НРУ продуцируются в экспрессионной системе млекопитающего.
  16. 16. Комбинированная вакцина корь-НРУ по п.15, где экспрессионная система млекопитающего представляет собой экспрессионную систему на основе клеток 293Т-3-46.
  17. 17. Комбинированная вакцина по п.1, где рекомбинантные вирусы кори происходят из вакцинного штамма вируса Эдмонстона-Загреба.
  18. 18. Комбинированная вакцина по п.1, где рекомбинантные вирусы кори содержат кодирующие последовательности антигенов НРУ, описанные на фиг. 5а-51.
  19. 19. Комбинированная вакцина по любому из предшествующих пунктов, где рекомбинантные вирусы кори содержат в дополнение к антигенам НРУ нуклеотидные последовательности, кодирующие белки с адъювантными свойствами.
  20. 20. Комбинированная вакцина по п.19, где белок с адъювантными свойствами представляет собой интерлейкин, предпочтительно интерлейкин 2.
  21. 21. Комбинированная вакцина по п.1, где вакцина состоит по меньшей мере из одного рекомбинантного вируса или смеси двух или нескольких таких вирусов.
  22. 22. Комбинированная вакцина по п.1, где рекомбинантные вирусы лишены дефектных интерферирующих частиц (ΌΙ).
  23. 23. Комбинированная вакцина по п.22, где вакцина получена путем удаления частиц ΌΙ посредством очистки бляшек.
  24. 24. Комбинированная вакцина по п.22, где вакцина получена путем удаления частиц ΌΙ посредством конечного разведения.
  25. 25. Комбинированная вакцина по п.22, где вакцина получена путем удаления частиц ΌΙ физическими способами.
  26. 26. Комбинированная вакцина по п.22, где вакцина получена путем удаления частиц ΌΙ физическим способом, которым является центрифугирование.
  27. 27. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая один или более компонентов комбинированной вакцины, выбранных из аттенуированных естественным образом вирусов краснухи, паротита, ветряной оспы или других живых аттенуированных вакцинных вирусов, в частности рекомбинантных вирусов.
  28. 28. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая
    - 41 027784 подходящий стабилизатор и сорбитол для парентерального применения.
  29. 29. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая подходящий стабилизатор и/или адъювант, подходящий для интраназального применения.
  30. 30. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая подходящий стабилизатор и/или адъювант, подходящий для ингаляционного применения.
  31. 31. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая подходящий стабилизатор и/или адъювант, подходящий для перорального применения.
  32. 32. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая подходящий стабилизатор и/или адъювант, подходящий для любого состава суппозитория.
  33. 33. Комбинированная вакцина по любому предшествующему пункту, дополнительно содержащая подходящий стабилизатор и/или адъювант, подходящий для чрескожного применения.
  34. 34. Вектор для получения вакцины по п.1, содержащий нуклеотидные последовательности антигенов НРУ, выбранных из Ь1, Ь2, Е6 и Е7 различных типов НРУ, и антигена кори, указанных в п.1.
  35. 35. Вектор по п.34, содержащий нуклеотидную последовательность, выбранную из последовательностей, описанных на фиг. 5а-51.
  36. 36. Вектор по п.34, дополнительно содержащий нуклеотидные последовательности, выбранные из описанных на фиг. 4а и 4Ь.
  37. 37. Вектор по п.34, где антиген выбран из белка Ь1, Б2, Е6 или Е7 типов НРУ-16, НРУ-18, НРУ-6 и
    НРУ-11.
  38. 38. Вектор по п.34, где последовательность белка Б1 клонирована между белками Р и М или между белками Н и Б последовательности вируса кори.
  39. 39. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.34.
  40. 40. Клетка-хозяин по п.39, которая выбрана из Е.соН или клеточной линии млекопитающего.
EA201071366A 2008-05-26 2009-05-26 Комбинированная вакцина против кори и вируса папилломы человека EA027784B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IN1113MU2008 2008-05-26
PCT/IN2009/000302 WO2010079505A2 (en) 2008-05-26 2009-05-26 Combined measles-human papilloma vaccine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201071366A1 EA201071366A1 (ru) 2011-06-30
EA027784B1 true EA027784B1 (ru) 2017-09-29

Family

ID=42316922

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201071366A EA027784B1 (ru) 2008-05-26 2009-05-26 Комбинированная вакцина против кори и вируса папилломы человека

Country Status (13)

Country Link
US (1) US9623098B2 (ru)
EP (1) EP2280728B1 (ru)
JP (1) JP5726727B2 (ru)
CN (2) CN102099053A (ru)
AR (1) AR071910A1 (ru)
AU (1) AU2009336562B2 (ru)
BR (1) BRPI0909547A2 (ru)
CA (1) CA2722847C (ru)
EA (1) EA027784B1 (ru)
ES (1) ES2565846T3 (ru)
TW (1) TWI561244B (ru)
WO (1) WO2010079505A2 (ru)
ZA (1) ZA201007595B (ru)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1268985A1 (en) 2000-03-31 2003-01-02 NORTHERN RESEARCH &amp; ENGINEERING CORPORATION Solid-fueled power generation system with carbon dioxide sequestration and method therefor
ES2427139T3 (es) 2002-06-20 2013-10-29 Institut Pasteur Virus recombinantes del sarampión que expresan epítopos de antígenos de virus de ARN y uso de los virus recombinantes para la preparación de composiciones de vacuna
ATE437175T1 (de) * 2002-06-20 2009-08-15 Pasteur Institut Infektiöse cdna eines zugelassenen impfstammes des masern virus. verwendung in immunogenen zusammensetzungen
CA2432738A1 (en) 2003-02-26 2004-08-26 Philippe Despres New dengue and west nile viruses proteins and genes coding the foregoing, and their use in vaccinal, therapeutic and diagnostic applications
MY175250A (en) * 2009-05-05 2020-06-17 Cadila Healthcare Ltd Combined measles-malaria vaccine
EP3443982A1 (en) * 2011-10-12 2019-02-20 The Trustees of the University of Pennsylvania Vaccines for human papilloma virus and methods for using the same
EP2780034A1 (en) * 2011-11-14 2014-09-24 Crucell Holland B.V. Heterologous prime-boost immunization using measles virus-based vaccines
ES2752190T3 (es) 2012-09-14 2020-04-03 Us Health Proteína Brachyury, vectores adenovirales que codifican proteína Brachyury y su uso
EA034056B1 (ru) 2013-03-12 2019-12-23 Дзе Трастиз Оф Дзе Юниверсити Оф Пенсильвания Усовершенствованные вакцины против вируса папилломы человека и способы их применения
CN105801704B (zh) * 2014-12-31 2020-06-02 艾托金生物医药（苏州）有限公司 一种具有抗宫颈癌细胞活性的重组疫苗构建方法及应用
CN104830869B (zh) * 2015-04-30 2018-06-01 武汉凯德维斯生物技术有限公司 与宫颈癌发生相关的hpv整合的基因位点及其应用
CN108289940B (zh) 2015-08-03 2023-01-13 美国卫生和人力服务部 Brachyury缺失突变体、编码brachyury缺失突变体的非酵母载体及其用途
RU2681174C1 (ru) * 2018-07-12 2019-03-04 Закрытое акционерное общество научно-производственная компания "Комбиотех" Способ получения рекомбинантной вакцины для профилактики папилломавирусной инфекции человека, рекомбинантная вакцина

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004076619A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Institut Pasteur New dengue and west nile viruses proteins and genes coding the foregoing, and their use in vaccinal, therapeutic and diagnostic applications

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9113809D0 (en) 1991-06-26 1991-08-14 Cancer Res Campaign Tech Papillomavirus l2 protein
DE122007000085I1 (de) 1991-07-19 2008-03-27 Univ Queensland St Lucia Polynukleotidabschnitt des HPV16-Genoms
DE122007000098I1 (de) 1992-06-25 2008-03-27 Papillomavirus vakzine
US5437951A (en) 1992-09-03 1995-08-01 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Self-assembling recombinant papillomavirus capsid proteins
DE122007000014I1 (de) 1993-03-09 2007-05-24 Univ Rochester Herstellung von menschlichem Papillomavirus Hüllprotein und virus-ähnlichen Teilchen
DE69510207T3 (de) 1995-08-09 2007-02-15 Schweiz. Serum- & Impfinstitut Bern Verfahren zur Herstellung von infektiösen minussträngigen RNA-Viren
DE69933200T2 (de) * 1998-03-09 2007-02-22 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Kombinierte impfstoffzusammensetzungen
DE69935606T9 (de) * 1998-10-16 2021-03-11 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Adjuvanzsysteme und impfstoffe
GB0110431D0 (en) * 2001-04-27 2001-06-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compounds
ES2427139T3 (es) * 2002-06-20 2013-10-29 Institut Pasteur Virus recombinantes del sarampión que expresan epítopos de antígenos de virus de ARN y uso de los virus recombinantes para la preparación de composiciones de vacuna
EP1563074B1 (en) 2002-11-12 2018-01-10 VAXum, LLC. Adenoviral vector vaccine
MY139500A (en) * 2003-11-12 2009-10-30 Merck Sharp & Dohme Optimized expression of hpv 58 l1 in yeast
JP2008537683A (ja) * 2005-01-12 2008-09-25 ザ ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ，レプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー，デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシズ 減弱されたヒトパラインフルエンザウイルス、その方法および使用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004076619A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Institut Pasteur New dengue and west nile viruses proteins and genes coding the foregoing, and their use in vaccinal, therapeutic and diagnostic applications

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CORONA GUTIERREZ CARLOS MANUAL, ET AL: "Clinical protocol. A phase II study: efficacy of the gene therapy of the MVA E2 recombinant virus in the treatment of precancerous lesions (NIC I and NIC II) associated with infection of oncogenic human papillomavirus.", HUMAN GENE THERAPY, MARY ANN LIEBERT, INC. PUBLISHERS, US, vol. 13, no. 9, 10 June 2002 (2002-06-10), US, pages 1127 - 1140, XP002598091, ISSN: 1043-0342 *
DREXLER, I. STAIB, C. SUTTER, G.: "Modified vaccinia virus Ankara as antigen delivery system: how can we best use its potential?", CURRENT OPINION IN BIOTECHNOLOGY., LONDON, GB, vol. 15, no. 6, 1 December 2004 (2004-12-01), GB, pages 506 - 512, XP004653482, ISSN: 0958-1669, DOI: 10.1016/j.copbio.2004.09.001 *
ROUZIER R, UZAN C, COLLINET P: "Vaccination HPV: principes, résultats et perspectives", JOURNAL DE GYNECOLOGIE OBSTETRIQUE ET BIOLOGIE DE LAREPRODUCTION., MASSON, PARIS., FR, vol. 36, 1 January 2007 (2007-01-01), FR, pages 13 - 18, XP002598090, ISSN: 0368-2315, DOI: 10.1016/J.JGYN.2006.10.006 *
STANLEY MARGARET A: "Human papillomavirus vaccines.", REVIEWS IN MEDICAL VIROLOGY, CHICHESTER, GB, vol. 16, no. 3, 1 May 2006 (2006-05-01), GB, pages 139 - 149, XP002598089, ISSN: 1052-9276, DOI: 10.1002/RMV.498 *
TANGY F, NAIM H Y: "Live attenuated measles vaccine as a potential multivalent pediatric vaccination vector", VIRAL IMMUNOLOGY., MARY ANN LIEBERT, INC., NEW YORK., US, vol. 18, no. 2, 1 June 2005 (2005-06-01), US, pages 317 - 326, XP008088160, ISSN: 0882-8245, DOI: 10.1089/vim.2005.18.317 *

Also Published As

Publication number Publication date
EA201071366A1 (ru) 2011-06-30
JP2011524863A (ja) 2011-09-08
US9623098B2 (en) 2017-04-18
CN106377767A (zh) 2017-02-08
TW201010718A (en) 2010-03-16
JP5726727B2 (ja) 2015-06-03
BRPI0909547A2 (pt) 2019-03-06
AR071910A1 (es) 2010-07-21
EP2280728A2 (en) 2011-02-09
TWI561244B (en) 2016-12-11
ES2565846T3 (es) 2016-04-07
AU2009336562B2 (en) 2012-12-20
WO2010079505A3 (en) 2010-11-04
AU2009336562A1 (en) 2010-07-15
WO2010079505A2 (en) 2010-07-15
CA2722847C (en) 2019-12-17
CA2722847A1 (en) 2010-07-15
CN102099053A (zh) 2011-06-15
ZA201007595B (en) 2011-09-28
US20110129493A1 (en) 2011-06-02
EP2280728B1 (en) 2016-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA027784B1 (ru) Комбинированная вакцина против кори и вируса папилломы человека
JP6845266B2 (ja) 多価組換型鳥ヘルペスウイルス及び鳥類を免疫化するためのワクチン
WO2021185310A1 (zh) mVSV病毒载体及其病毒载体疫苗、一种基于mVSV介导的新冠肺炎疫苗
ES2189185T5 (es) Reactivos para vacunacion que generan una respuesta inmunitaria de los linfocitos t cd8.
JP5508252B2 (ja) 鳥インフルエンザ遺伝子を含有する組み換え七面鳥ヘルペスウイルス
US20240123053A1 (en) Coronavirus vaccine through nasal immunization
US9750801B2 (en) Replicating recombinant adenovirus vectors, compositions, and methods of use thereof
EA012037B1 (ru) Поливалентные вакцины, содержащие рекомбинантные вирусные векторы
EP3394085B1 (en) Feline calicivirus vaccine
EA026620B1 (ru) Вакцина против rsv
US10653769B2 (en) iDNA vaccines and methods for using the same
Martins et al. Immunogenicity of ORFV-based vectors expressing the rabies virus glycoprotein in livestock species
WO2023092863A1 (zh) 一种非洲猪瘟病毒asfv基因的重组病毒组合及由其制备的疫苗
US11179459B1 (en) Vaccine composition for preventing human infection of SARS coronavirus and alleviating infection symptoms
Guo et al. Intranasal administration of a recombinant adenovirus expressing the norovirus capsid protein stimulates specific humoral, mucosal, and cellular immune responses in mice
JP2021500876A (ja) 複数の異種抗原をコードする組換え非病原性マレック病ウイルス構築物
JP2021534182A (ja) 免疫原性組成物及びその使用
JP7046014B2 (ja) 伝染性喉頭気管炎ウイルスおよび伝染性ファブリキウス嚢病ウイルスの抗原をコードする組換え非病原性マレック病ウイルスコンストラクト
KR20150074714A (ko) 돼지유행성 설사 바이러스의 전장 뉴클레오티드를 포함하는 감염성 클론
CN116904489B (zh) 一种鸭坦布苏病毒核酸疫苗及应用
JP3926887B2 (ja) 多分子発現カセット及びその利用
WO2005094415A2 (en) Recombinant vectors and methods for inducing an immune response

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU