EA026686B1

EA026686B1 - 6-((s)-1-{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1h-пиразол-3-ил}этил)-3h-1,3-бензотиазол-2-он в качестве антагониста tarp-гамма8-зависимого ampa-рецептора

Info

Publication number: EA026686B1
Application number: EA201590823A
Authority: EA
Inventors: Джон Кэвин Рил; Уоррен Джей Портер; Джеффри Майкл Уиткин
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 2012-11-27
Filing date: 2013-11-20
Publication date: 2017-05-31
Also published as: WO2014085153A1; ZA201503733B; IL238831A0; CR20150267A; EP2925754B1; PE20151728A1; CA2889243A1; BR112015011200A2; MX2015006697A; JP6246227B2; MA38126B1; AP2015008489A0; US8765960B2; WO2014085153A8; PH12015501154A1; HK1209116A1; PL2925754T3; TN2015000200A1; JP2016501219A; HUE033447T2

Abstract

В изобретении предложен антагонист TARPγ8-зависимых АМРА-рецепторов, имеющий формулуего фармацевтически приемлемые соли, применения и способы его получения.

Description

Эпилепсией страдает свыше 50 млн человек по всему миру, при этом 30-40% получающих лечение пациентов невосприимчивы к современным фармакотерапевтическим способам лечения, и только у примерно 8% получающих лечение пациентов сохраняется состояние без эпилептических припадков. Эпилепсию часто определяют как состояние, при котором у человека возникают два или более неспровоцированных эпилептических припадков. Согласно определению Международной противоэпилептической лиги (1ЬАЕ) эпилептический припадок представляет собой транзиторное появление признаков и/или симптомов, вызванных аномальной чрезмерной или синхронной активностью нейронов головного мозга. Как полагают, припадки обусловлены целым рядом причин, что вносит дополнительные трудности в лечение эпилепсии. Эпилептические припадки подразделяют в соответствии с их клиническими проявлениями, включая генерализованные эпилептические припадки (абсансы, атонические, тоникоклонические (большие эпилептические припадки) и миоклонические), простые и сложные парциальные эпилептические припадки, геластические приступы, дакристические приступы и эпилептический статус. Современные способы лечения нацелены на ряд механизмов, включая применение агонистов рецепторов ГАМК (γ-аминомасляной кислоты), блокаторов кальциевых каналов Т-типа, модуляторов натриевых каналов, модулирование белка синаптических везикул §У2А и ингибирование ГАМК-трансаминазы. Недавно также были исследованы антагонисты АМРА-рецепторов для лечения эпилептических припадков.

АМРА-рецепторы (рецепторы а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовой кислоты) представляют собой глутаматчувствительные ионные каналы на постсинаптических мембранах возбуждающих синапсов в центральной нервной системе и главным образом отвечают за опосредованную быструю нейропередачу через синаптические щели. Антагонисты АМРА-рецепторов являются известными противосудорожными средствами, и их способность к отрицательному модулированию возбуждающей нейропередачи является ключевой для их противоэпилептического терапевтического потенциала. Однако, поскольку активность АМРА-рецепторов настолько распространена в ЦНС, применение антагонистов общего действия затрагивает большинство областей ЦНС, что приводит к нежелательным эффектам, таким как атаксия, седативный эффект и/или головокружение, которые характерны для всех известных антагонистов АМРА-рецепторов общего действия. Как правило, эти антагонисты общего действия имеют очень узкое терапевтическое окно, т.е. обычно дозы, необходимые для получения противосудорожной активности, близки к или частично совпадают с дозами, при которых наблюдаются нежелательные эффекты. (Мюйае1 А. Рода^Ы Ре\л5Птд АМРА РесерЮге аз ап Аийерйерйе Эгид ТатдеО, Ерйерку Сштеп18, 11.2 (2011).)

Белки-регуляторы трансмембранных АМРА-рецепторов (ТАРР) представляют собой относительно недавно открытое семейство белков, которые, как было обнаружено, связываются с АМРА-рецепторами и модулируют активность последних. Некоторые ТАРР являются достаточно региоспецифичными в головном мозге, что приводит к физиологической дифференциации активности АМРА-рецепторов. Например, ТАРРγ2 (старгазин)-зависимые АМРА-рецепторы локализованы преимущественно в мозжечке и коре головного мозга, а ТАРРγ8-зависимые АМРА-рецепторы локализованы преимущественно в гиппокампе, область которого особенно связана с возникновением и/или развитием эпилептических припадков. Было выдвинуто предположение о том, что направленное воздействие на отдельные ТАРР может обеспечить селективное модулирование конкретных нейронных цепей головного мозга без глобального влияния на синаптическую передачу (ОШ, Майи В. аиб ВтеШ, Эа\аб 8., №игор8усЬорЬагтасо1оду, 36(1): 362-363 (2011).)

Леветирацетам ((8)-2-(2-оксопирролидин-1-ил)бутанамид), габапентин (2-[1-(аминометил)циклогексил]уксусная кислота), топирамат (2,3:4,5-бис-О-(1-метилэтилиден)-бета-О-фруктопиранозы сульфамат) и карбамазепин (5Н-дибензо[Ъ,Р]азепин-5-карбоксамид) представляют собой современные ведущие лекарственные средства для лечения эпилептических припадков. Ни одно из одобренных на данный момент лекарственных средств, по-видимому, не действует исключительно за счет модулирования АМРАрецепторов.

Талампанел ((8Р.)-7-ацетил-5-(4-аминофенил)-8,9-дигидро-8-метил-7Н-1,3-диоксоло[4,5-Ь][2,3]бензодиазепин), селурампанел (ВОО492) (Ы-[7-изопропил-6-(2-метил-2Н-пиразол-3-ил)-2,4-диоксо-1,4дигидро-2Н-хиназолин-3-ил]метансульфонамид) и перампанел (рагатраие1) (5'-(2-цианофенил)-1'-фенил2,3'-бипиридинил-6'(1Н)-он) являются антагонистами АМРА-рецепторов общего действия (ТАРРнезависимыми/неселективными), исследуемыми в настоящее время в качестве противоэпилептических средств.

Авторы настоящего изобретения полагают, что селективный неконкурентный антагонист ТАРРγ8зависимых АМРА-рецепторов может быть эффективным противосудорожным/противоэпилептическим терапевтическим средством, не имеющим побочных эффектов (например, седативного эффекта, атаксии и/или головокружения), характерных для антагонистов АМРА-рецепторов общего действия (ТАРРнезависимых/неселективных) или антагонистов ТАРРγ2-зависимых АМРА-рецепторов, которые в большей степени ассоциированы с антагонизмом АМРА-рецепторов мозжечка.

Согласно настоящему изобретению предложено соединение, которое демонстрирует активность мощного и селективного антагониста ТАРРγ8-зависимых АМРА-рецепторов ίη νίίτο, а также является

- 1 026686 эффективным в животных моделях судорог и боли. Таким образом, согласно настоящему изобретению предложено соединение, которое, как полагают, подходит для лечения эпилептических припадков у пациентов с эпилепсией, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первично и/или вторично-генерализованные эпилептические припадки. Кроме того, соединение согласно изобретению также может подходить для лечения боли. В частности, согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I

(т.е. 6-((§)-1-{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2он) или его фармацевтически приемлемая соль.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. Кроме того, согласно этому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция для лечения эпилептических припадков, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первично и/или вторично-генерализованные эпилептические припадки, у пациентов с эпилепсией, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, носителей или разбавителей. Кроме того, согласно этому аспекту изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, второй терапевтический агент, который представляет собой противоэпилептическое средство, такое как, например, леветирацетам, габапентин, топирамат или карбамазепин, и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ.

Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения эпилептических припадков, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первичнои/или вторично-генерализованные эпилептические припадки, у млекопитающего с эпилепсией, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В другом варианте реализации этого аспекта настоящего изобретения указанный способ дополнительно включает введение в виде одновременной, раздельной или последовательной комбинации второго терапевтического агента, представляющего собой противоэпилептическое средство, такого как, например, леветирацетам, габапентин, топирамат или карбамазепин. В одном конкретном варианте реализации этих способов лечения указанное млекопитающее представляет собой человека.

Согласно настоящему изобретению также предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии. В рамках этого аспекта согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении эпилептических припадков, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первично- и/или вторично-генерализованные эпилептические припадки, у млекопитающего, в частности у человека, с эпилепсией. Кроме того, согласно этому аспекту изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в виде одновременной, раздельной или последовательной комбинации с противоэпилептическим средством, таким как, например, леветирацетам, габапентин, топирамат или карбамазепин для лечения эпилептических припадков у млекопитающего, в частности у человека, с эпилепсией.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения эпилептических припадков, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первично- и/или вторично-генерализованные эпилептические припадки, у млекопитающего, в частности у человека, с эпилепсией. Кроме того, согласно настоящему изобретению предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения эпилептических припадков, таких как, например, простые и/или сложные парциальные эпилептические припадки и/или первично- и/или вторично-генерализованные эпилептические припадки, у млекопитающего, в частности у человека, с эпилепсией, при этом указанное лекарственное средство вводят в виде одновременной, раздельной или последовательной комбинации со вторым терапевтическим агентом, представляющим собой противоэпилептическое средство, такое как, например, леветирацетам, габапентин, топирамат или карбамазепин.

Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиции

- 2 026686 для лечения боли, содержащая соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль и одно или более фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ, носителей или разбавителей.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ лечения боли у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. В одном конкретном варианте реализации этого способа лечения указанное млекопитающее представляет собой человека.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в лечении боли, в частности у человека.

Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для лечения боли.

Соединения согласно настоящему изобретению содержат основные и кислотные фрагменты и соответственно вступают в реакции с рядом органических и неорганических кислот и оснований с образованием фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли соединения согласно настоящему изобретению также находятся в рамках настоящей заявки. В настоящем тексте термин фармацевтически приемлемая соль относится к любой соли соединения согласно настоящему изобретению, которая, по существу, нетоксична для живых организмов. Такие фармацевтически приемлемые соли и общая методология их получения хорошо известны в данной области техники; см., например, Р. 81аЫ, е1 а1., ΗΛΝΏΒΘΘΚ ОР РНАКМАСЕиПСЛЬ 8АЬТ8: РКОРЕКПЕ8, ЗЕЬЕСПОК ΑΝΏ И8Е, (УСНАЖйеу-УСН, 2008) и 8.М. Вегде, е1 а1., РЬаттасеийса1 δαίΐδ, 1оитпа1 о£ Рйагтасеийса1 Заепсек, Уо1. 66, Νο. 1, 1апиату 1977.

Сокращения, используемые в настоящем тексте, определены следующим образом:

АМРА означает а-амино-3-гидрокси-5-метил-4-изоксазолпропионовую кислоту, солевой раствор означает насыщенный №С1,

СНО означает яичник китайского хомячка,

ΟΤΖ означает циклотиазид,

ДХМ означает дихлорметан,

ЭМЕМ означает модифицированную по способу Дульбекко минимальную среду Игла,

ДМСО означает диметилсульфоксид (пердейтерированный [66] в случае применения для ЯМР),

ΈΌ₅₀ означает дозу, обеспечивающую 50% от максимального наблюдаемого эффекта, экв означает молярный эквивалент,

ЕЮАс означает этилацетат,

ЕЮН означает этанол,

РЫРК. означает флуоресцентный планшетный спектрофотометр,

НВ88 означает буферный солевой раствор Хэнкса,

НЕРЕ8 означает 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту,

ВЭЖХ означает жидкостную хроматографию высокого давления, ч означает час или часы, 'ТС₅о означает концентрацию, при которой достигается 50% от максимального ингибирования,

ЖХМС означает жидкостную хроматографию с масс-спектрометрией,

МеОН означает метанол, мин означает минуты,

МС означает масс-спектроскопию или масс-спектр,

п.о. означает перорально, через рот,

ПТЗ означает пентилентетразол, _уд означает время удерживания,

п.к. означает подкожно,

СО означает стандартную ошибку среднего,

ТАКР означает регуляторный белок трансмембранных АМРА-рецепторов,

ТГФ означает тетрагидрофуран,

ККД означает колебательный круговой дихроизм,

ХКРЭ означает порошковую рентгеновскую дифракцию.

Общие способы химического синтеза

Соединение согласно настоящему изобретению может быть получено общими способами, хорошо известными и признанными в данной области техники. Подходящие условия реакций для стадий в соответствии с этими схемами хорошо известны в данной области техники, и соответствующие замены растворителей и сореагентов известны специалистам в данной области техники. Также специалистам в данной области техники будет понятно, что синтетические промежуточные соединения при необходимости или желании могут быть выделены и/или очищены различными хорошо известными способами, и что зачастую возможно использование различных промежуточных соединений непосредственно в последующих стадиях синтеза с незначительной очисткой или без таковой. Кроме того, специалисту в данной области техники будет понятно, что в некоторых случаях порядок введения фрагментов молекулы не является существенным.

- 3 026686

В следующих иллюстративных способах получения и примерах растворители обычно удаляли при пониженном давлении (выпаривали). Для некоторых методик указанные выходы представляют собой типичные выходы неочищенных продуктов, которые выделяли путем выпаривания или фильтрования и использовали непосредственно без дополнительной очистки.

Способ получения 1. 6-Ацетил-3-(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он

Карбонат цезия (1,5 экв., 310,5 ммоль, 101,1 г) добавляли к раствору 6-ацетил-3Н-1,3-бензотиазол2-она (40,0 г, 207 ммоль) в диметилформамиде (690 мл). Добавляли по каплям хлорметилметиловый эфир (1,3 экв., 269 ммоль, 20,4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Переносили в делительную воронку, добавляли ЕЮАс (1 л), промывали водой (2x200 мл) и затем солевым раствором (200 мл). Обратно экстрагировали ДХМ (300 мл). Объединенные органические слои сушили над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали. Суспендировали концентрат в 200 мл смеси гексан/ЕЮАс (75:25) и фильтровали с получением 6-ацетил-3-(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-она в виде белого твердого вещества (37,0 г, 156 ммоль, выход 75%). ЖХМС (слабый пик) ΐ _уд = 1,68 мин, М+1 = 238.

Способ получения 2. 6-[1-Гидрокси-1-(1-тетрагидрофуран-2-ил-1Н-пиразол-5-ил)этил]-3(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (рацемическая смесь диастереомеров)

1-Тетрагидропиран-2-ил-пиразол (1,5 экв., 202 ммоль, 30,8 г) (АЮг1сП) и ТГФ (900 мл) добавляли в высушенную в пламени трехгорлую круглодонную колбу объемом 2 л и охлаждали до -78°С (баня со смесью сухой лед/ацетон). Добавляли по каплям трет-бутиллитий (2,5 М в ТГФ) (1,5 экв., 202 ммоль, 81,0 мл), поддерживая температуру по меньшей мере -68°С, и перемешивали в течение 60 мин при -78°С. Добавляли по каплям раствор 6-ацетил-3-(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-она (32,0 г, 134 ммоль) в ТГФ (450 мл) в течение 45 мин и перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Удаляли баню с сухим льдом и оставляли нагреваться до -50°С и перемешивали в течение 1 ч (не допускали подъема температуры выше -45°С). Реакцию останавливали метанолом (80 мл). Переносили в делительную воронку, добавляли ЕЮАс (2000 мл) и промывали водой (500 мл) и затем солевым раствором (500 мл). Органический слой сушили над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали с получением неочищенного желтого масла. Вещество очищали посредством ВЭЖХ, элюируя смесью гексан/ЕЮАс (6:4) с получением 6-[1гидрокси-1-(1 -тетрагидропиран-2-ил-1Н-пиразол-5-ил)этил] -3 -(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-она в виде белой пены (44 г, 113 ммоль, выход 84%) (рацемическая смесь диастереомеров). ЖХМС (слабый пик) ΐ _уд = 1,76 мин, М+1 = 288 и ΐ _уд = 1,86 мин, М+1 = 288.

Способ получения 3. 3-(Метоксиметил)-6-[1-(1Н-пиразол-5-ил)этенил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-он

Трифторуксусную кислоту (20 экв. (молярных), 2,26 моль, 170 мл) добавляли к раствору 6-[1гидрокси-1-(1-тетрагидропиран-2-ил-1Н-пиразол-5-ил)этил]-3-(метоксиметил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-она (44 г, 113 ммоль) в ДХМ (0,2 М, 8,81 моль, 565 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи (~16 ч). Полученную темно-фиолетовую реакционную смесь концентрировали, растворяли ее в ЕЮАс (2 л) и нейтрализовали раствор путем медленного добавления насыщенного водного бикарбоната натрия. Переносили в делительную воронку и экстрагировали ЕЮАс, промывали водой (300 мл) и затем солевым раствором (300 мл). Сушили над Ыа₂8О₄, фильтровали и концентрировали. Вещество очищали посредством ВЭЖХ, элюируя смесью ЕЮАс/гексан (1:1) с получением 3-(метоксиметил)-6-[1-(1Нпиразол-5-ил)этенил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-она (30 г, 104 ммоль, выход 92%) в виде густого желтого масла. ЖХМС (слабый пик): пик целевого продукта с ΐ уд = 1,82 мин, М+1 = 288.

- 4 026686

Способ получения 4. 3-(Метоксиметил)-6-[1-(1Н-пиразол-5-ил)этил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-он

5% палладий на угле (15 г, 7,0 ммоль) добавляли в продуваемую Ν₂ колбу и добавляли ЕЮАс (250 мл). Добавляли 3-(метоксиметил)-6-[1-(1Н-пиразол-5-ил)этенил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (29 г, 101 ммоль) в виде раствора в ЕЮАс (250 мл). Дегазировали под вакуумом и обеспечивали подачу водорода через баллон. Перемешивали в течение ночи, удаляли избыток водорода под давлением и продували Ν₂. Фильтровали через кизельгур и концентрировали с получением 3-(метоксиметил)-6-[1-(1Н-пиразол-5ил)этил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-она в виде густого желтого масла (27 г, 93 ммоль, выход 92%). Вещество можно было вводить в следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХМС (слабый пик) ΐ _уд = 1,73 мин, М+1 = 290.

Способ получения 5. 2-Фтор-5-[2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси]пиридин

Карбонат цезия (3 экв., 53,05 ммоль, 17,2 г) добавляли к раствору 2-фтор-5-гидроксипиридина (2,0 г, 1,00 экв., 17,68 ммоль) в диметилформамиде (0,3 М, 762,37 ммоль, 59,0 мл) с последующим добавлением 2-(2-бромэтокси)тетрагидро-2Н-пирана (17,7 ммоль, 3,7 г) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Переносили в делительную воронку и добавляли ЕЮАс (500 мл). Промывали органический слой, промывали водой (300 мл) и затем солевым раствором (200 мл). Сушили над Να₂δϋ₄. фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали посредством ВЭЖХ, элюируя смесью гексан/ЕЮАс 7/3 с получением 2-фтор-5-[2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси]пиридина в виде бледно-желтого масла (3,9 г, 16,2 ммоль, выход 91%). ЖХМС (слабый пик) ΐ _уд = 1,8 мин, М+1 = 242.

Способ получения 6. 3-(Метоксиметил)-6-{1-[1-(5-{2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси}пиридин-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил]этил}-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (рацемическая смесь диастереомеров)

3-(Метоксиметил)-6-[1-(1Н-пиразол-5-ил)этил]-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (7,7 г, 26,6 ммоль) растворяли в диметилформамиде (0,2 М, 133 мл). Добавляли трет-бутоксид лития ((1,5 экв. в виде 1,00 М раствора в ТГФ), 39,9 ммоль, 39,9 мл)) и перемешивали 15 мин. Добавляли 2-фтор-5-[2-(тетрагидро-2Нпиран-2-илокси)этокси]пиридин (2,00 экв., 53,2 ммоль, 12,8 г). Реакционную смесь нагревали на масляной бане до 140°С и продували Ν₂ для удаления ТГФ. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 ч. Охлаждали смесь до комнатной температуры, и реакцию останавливали насыщенным хлоридом аммония. Экстрагировали ЕЮАс (2x200 мл), промывали водой (2x100 мл) и затем солевым раствором (200 мл). Сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Очищали посредством ВЭЖХ (силикагель), элюируя 40% ЕЮАс в гексане с получением 3-(метоксиметил)-6-{1-[1-(5-{2(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси}пиридин-2-ил)-1Н-пиразол-3-ил]этил}-3Н-1,3-бензотиазол-2-она в виде бледно-желтого масла (10 г, 19,6 ммоль, выход 74%). ЖХМС (слабый пик) ΐ _уд = 2,6, М+1 = 511.

Пример 1. 6-(1-{1-[5-(2-Гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол2-он, рацемат

3-(Метоксиметил)-6-{1-[1-(5-{2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси}пиридин-2-ил)-1Н-пиразол- 5 026686

3-ил]этил}-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (140 мг, 274,18 мкмоль) растворяли в трифторуксусной кислоте (0,05 М, 73 ммоль, 5,5 мл) и кипятили с обратным холодильником (~72°С) в атмосфере Ν₂ в течение 2 ч (наблюдали появление оранжевого цвета через примерно 10 мин и при 70°С). Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в ТГФ (0,05 М, 67 ммоль, 5,5 мл), добавляли 28% гидроксид аммония (0,2 М, 9,9 ммоль, 1,4 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ~1 ч. Разбавляли ЕЮАс (100 мл), промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Очищали посредством жидкостной хроматографии на колонке с силикагелем массой 25 г, элюируя градиентом 60-80% ЕЮАс в гексане с получением 6-(1-{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2она в виде белой пены (80 мг; 209 мкмоль, выход 76%). ЖХМС (слабый пик) 1 _уд =1,8 мин, М+1 = 383.

Пример 2. 6-((8)-1-{1-[5-(2-Гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3бензотиазол-2-он (изомер 1)

6-(1-{1-[5-(2-Гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (330 мг) растворяли в МеОН (3,0 мл) и ДХМ (2,5 мл) и разделяли на энантиомеры посредством хиральной хроматографии с применением колонки СЫга1се1® О1-Н (2,1x15 см, 5 мкм, СПга1 Тсс1то1ощс5 Еигоре) с элюцией 40% МеОН в жидком СО₂, скоростью потока 70 мл/мин, детекцией при длине волны 225 нм, с введением аликвот объемом 300 мкл для каждого анализа. Фракции, содержащие разделенные энантиомеры, объединяли и концентрировали в вакууме с получением изомера 1 (150 мг) и изомера 2 (169 мг) в виде аморфных белых твердых веществ. Посредством аналитической хиральной хроматографии с применением колонки СЫга1се1® О1-Н (4,6x150 мм, 5 мкм, СЫга1 Тес11по1още5 Еигоре) с элюцией 40% МеОН в жидком СО2, скоростью потока 5 мл/мин, детекцией при длине волны 225 нм получали характеристики изомера 1, имеющего 1 _уд = 2,03 мин, и изомера 2, имеющего I _уд = 2,66 мин. ЖХМС (слабые пики): изомер 1, ΐ _уд = 1,8 мин, М+1 = 383; изомер 2, ΐ _уд =1,8 мин, М+1 = 383.

Кристаллизация. Форма I.

6-((8)-1-{1-[5-(2-Гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (изомер 1) (56,9 мг) растворяли в смеси ЕЮН:гептан 1:1 (3,0 мл), перемешивали в течение 20 мин при 70°С. Раствор фильтровали в горячем состоянии и разделяли на две равные части, одну из которых переносили в емкость при комнатной температуре, закрывали крышкой и перемешивали в течение ночи при 5°С. Твердые вещества выделяли фильтрованием и сушили в атмосфере азота с получением кристаллической формы I (23,9 мг, выход 84%).

Абсолютную стереохимическую конфигурацию изомера I, соответствующую 6-((8)-1-{1-[5-(2гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-ону, подтверждали посредством рентгеновской кристаллографии на монокристаллах.

Порошковая рентгеновская дифракция.

Порошковые рентгенограммы кристаллических твердых веществ получали на рентгеновском порошковом дифрактометре Вгикег Ό4 Епйеауог, оснащенном источником излучения СиКа (λ = 1,54060 А) и детектором УаШес с рабочими параметрами 35 кВ и 50 мА. Образец сканировали в диапазоне от 4 до 40° 2Θ с размером шага 0,0087° 2Θ и скоростью сканирования 0,5 с/шаг и с расходимостью 0,6 мм, фиксированной шириной противорассеивающего устройства 5,28 мм и шириной щелей детектора 9,5 мм. Сухой порошок помещали в кварцевый держатель для образца и получали гладкую поверхность с помощью предметного стекла. Как хорошо известно в области кристаллографии, для любой заданной кристаллической формы относительные интенсивности дифракционных пиков могут варьировать в зависимости от предпочтительной ориентации, являющейся результатом таких факторов, как морфология и габитус кристалла. В случаях, где присутствуют эффекты предпочтительной ориентации, интенсивности пиков изменены, но положения характеристических пиков полиморфа неизменны; см., например, Т1е и. 8. РЬагшасоре1а 33 - Ыайопа1 Рогши1агу 28 СЬар1ег < 941> СЬагасЮп/аЦоп о! Сгу81а11ше БоШк Ьу Х-гау Ро\\'Ьег ОйТгасйоп (ΧΚΡΌ) О£йаа1 ОсЮЬег 1, 2010-РеЬгиагу 1, 2011. Кроме того, в области кристаллографии также хорошо известно, что для любой заданной кристаллической формы угловые положения пиков могут незначительно варьировать. Например, положения пиков могут смещаться вследствие колебания температуры или влажности, при которых проводят анализ образца, перемещения образца или присутствия или отсутствия внутреннего стандарта. В данном случае вариабельность положения пика, составляющая ± 0,2 в 2Θ, будет учитывать эти потенциальные колебания, не препятствуя однозначной идентификации указанной кристаллической формы. Подтверждение кристаллической формы может быть получено на основе любой уникальной комбинации отличительных пиков (в единицах °2Θ), как правило, наи- 6 026686 более выраженных пиков. Дифрактограммы кристаллической формы, полученные при комнатной температуре и относительной влажности, корректируют по пикам при 8,85 и 26,77° 2-θ согласно стандарту ΝΊ8Ί' 675.

6-((8)-1-{1-[5-(2-Гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Н-пиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он (изомер 1) характеризуется порошковой рентгенограммой, полученной с применением излучения СиКа, которая содержит дифракционные пики (значения 2-θ), представленные в таблице ниже. Конкретно, указанная рентгенограмма содержит пик при 15,81 в сочетании с одним или более пиков, выбранных из группы, состоящей из 16,62, 14,39, 14,05, 11,54 и 10,99 с допустимым отклонением для углов дифракции, составляющим 0,2°.

Пики порошковой рентгенограммы формы 1 6-((8)-1-{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Нпиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-она (изомера 1)

Пик	Угол (2-тета°)	Интенсивность (%)
1	5,44	8
2	7,85	21
3	10,99	44
4	11,54	34
5	14,05	75
6	14,39	26
7	15,81	100
8	16,62	27
9	20,22	8
10	21,61	16
11	22,69	8
12	23,41	14
13	25,05	15
14	26,24	9
15	28,40	8
16	35,08	11

Данные, полученные ίη νίίτο и в исследованиях на животных, подтверждают роль антагонистов ТАКРу8-зависимых АМРА-рецепторов и, в частности, соединений согласно настоящему изобретению для лечения эпилептических припадков. Конкретно было обнаружено, что соединение согласно настоящему изобретению действовало с высокой эффективностью в качестве селективного антагониста ТАКРу8-зависимых АМРА-рецепторов и предотвращало эпилептические припадки в крысиной модели пентилентетразол (ПТЗ)-индуцированных судорог. Соединение согласно настоящему изобретению также демонстрировало обезболивающее действие в мышиной модели формалин-индуцированной боли.

Для дополнительной иллюстрации свойств соединений согласно настоящему изобретению последние могут быть подвергнуты следующим анализам ίη νίίτο и ίη νίνο.

Функциональный анализ антагонистов с применением флуоресцентного планшетного спектрофотометра (РЬ1РК).

Селективность соединений-антагонистов по отношению к ТАКР-подтипу АМРА-рецепторов была показана путем сравнения активности соединений по отношению к С1иА1-субъединицам флопизоформы АМРА-рецептора, совместно экспрессируемым в клетках линии СНО-δ либо с гиппокампальной формой ТАКР (ТАКРу-8), либо с мозжечковой формой ТАКР (ТАКРу-2). ТАКР-зависимость соединений-антагонистов АМРА-рецепторов была показана путем сравнения вышеуказанных активностей с активностью по отношению к О1иА1-субъединицам флип-изоформы АМРА-рецептора, экспрессируемым в клетках линии СНО-8 в отсутствие совместно экспрессируемых ТАКР.

Вкратце, клетки линии СНО-8 (ΙηνίΐΓο^βη) выращивали в суспензии в специальной среде 50/50 до плотности 1х10⁷ клеток/мл. (Специальная среда 50/50 представляет собой среду с низким содержанием кальция, приготовленную в виде смеси 1:1 (об./об.) среды СО СНО (среды с определенным химическим составом, оптимизированной для выращивания клеток СНО) (№ по каталогу 10743, ΟΛοο) и специальной полной среды. Специальную полную среду получали путем добавления 0,40 мг/л трополона, 5,00 мг/л инсулина, 20 мМ НЕРЕ8 и 0,075% Плюроника Р68 (Р1игошс® Р68) к специальной основной среде, имеющей следующий состав (значения в мг/л, если не указано иное): 11,01 безводный хлорид кальция, 0,050 нитрат железа(111)х9Н₂О, 0,420 сульфат железа(П)х7Н₂О, 28,64 безводный хлорид магния, 48,84 безводный сульфат магния, 312,14 КС1, 5505,96 №С1, 62,57 однозамещенный фосфат натрия, 71,28 безводный двузамещенный фосфат натрия, 0,432 сульфат цинках7Н₂О, 10.0 этаноламинхНС1, 6000 Όглюкоза (декстроза), 0,210 ОЬ-липоевая (тиоктовая) кислота, 0,081 путресцин х2НС1, 4,78 гипоксантин

- 7 026686 натрия, 220,24 пируват натрия, 0,730 тимидин, 8,90 Ь-аланин, 211,23 Ь-аргининхНС1, 15,02 ЬаспарагинхН₂О, 13,31 Ь-аспарагиновая кислота, 62,67 цистинх2НС1, 7,360 Ь-глутаминовая кислота, 146,16 Ь-глутамин, 30,0 глицин, 42,04 Ь-гистидинхНС1х2Н₂О, 105,11 Ь-изолейцин, 105,11 Ь-лейцин, 146,16 Ь-лизинхНС1, 30,03 Ь-метионин, 66,07 Ь-фенилаланин, 17,27 Ь-пролин, 42,04 Ь-серин, 95,1 Ьтреонин, 16,02 Ь-триптофан, 104,11 динатриевая соль Ь-тирозина, 94.1 Ь-валин, 8,99 холина хлорид, 4,00 фолиевая кислота, 12,61 Ь-инозит, 4,00 ниацинамид, 4,00 пиридоксальхНС1, 0,031 пиридоксинхНС1, 0,400 рибофлавин, 4,00 пантотенат натрия, 4,00 тиаминхНС1, 0,680 витамин В12 и 2200 бикарбонат натрия.) Клетки центрифугировали при 1000хд в течение 15 мин и ресуспендировали в свежей специальной среде 50/50 до плотности 2х10⁶ клеток/мл. Для процедуры трансфекции применяли 2 мг образца (образцов) тотальной ДНК на каждый 1 л клеток. Для О1иА1-у8-варианта трансфекции клеток СНО-δ ДНК человека в составе вектора С1иА1ОГ1ор-Саспд8-рВибСЕ4.1 (01адеп) и ДНК человека в составе вектора ЕААТ3 ρΑΝ104 (О1адсп. транспортер глутамина) смешивали в соотношении 2:3. Для С1иА1-у2-варианта трансфекции клеток СНО-δ применяли ДНК человека в составе вектора О1иА1рЯор-Сасп§2-рВибСЕ4.1 (01адеп). Для С1иА1-флип-варианта трансфекции клеток СНО-δ применяли ДНК человека в составе вектора С1иА1Шр рсНЫА3.1 (Ц1адеп). Образец (образцы) ДНК и реагент для трансфекции Ρπ;οδΐγ1ο^ΙΛ1 МАХ (№ по каталогу 16447-500, Гпуйтодеп) добавляли в специальную основную среду (см. выше) в соотношениях 10 мкг тотальной ДНК: 10 мкл реагента Ρ^ееδίу1е™ МАХ:1 мл среды с образованием ДНКкомплекса. Через 15 мин соответствующий объем (20% об./об.) ДНК-комплекса добавляли в подготовленную культуру клеток. Временно трансфицированные клетки СНО-δ собирали через 48 ч и замораживали в аликвотах для последующего использования. Функциональные и фармакологические характеристики АМРА-рецепторов в трансфицированных клетках проверяли как на свежеприготовленных, так и размороженных аликвотах клеток.

Замороженные трансфицированные клетки СНО-δ, экспрессирующие АМРА-рецепторы, размораживали и засевали в модифицированную по способу Дульбекко среду Игла (среду ИМЕМ) (№ по каталогу 11960, ОФсо), содержащую 5% диализованной фетальной бычьей сыворотки (№ по каталогу 26400036, СФсо) и 20 мМ ΠΕΡΕδ, в количестве 50000 клеток на лунку в 384-луночные планшеты, покрытые поли-И-лизином (№ по каталогу 354663, Вес1оп Июкшкоп), и культивировали в течение ночи при 37°С. В день эксперимента готовили два буфера для внесения флуоресцентных красителей. Буфер для внесения красителя Р1ио-4 АМ состоял из 5 мкМ красителя Р1ио-4 АМ (№ по каталогу Р-14202, Мо1еси1аг РтоЬек) в сбалансированном солевом растворе Хэнкса (Μδδ), содержащего 20 мМ 4ΕΡΕδ (рН 7,4), 2,5 мМ пробенецида (№ по каталогу Р8761, δί§ιη;Γ ингибирует клеточные транспортеры, предотвращая выкачивание красителя из клетки) и 5 нМ Плюроника Р-127 (Р1итошс® Р-127) (№ по каталогу Р3000МР, Мо1еси1аг РтоЬек). Буфер для внесения красителя Р1ио-4 ΝΑ получали путем добавления 100 мл ΒΒδδ, содержащего 20 мМ 4ΕΡΕδ (рН 7,4) и 2,5 мМ пробенецида, в один флакон красителя Р1ио-4 ΝΑ (№ по каталогу Р36205, крупносерийная упаковка, Мо1еси1аг РтоЬек). В культивируемые О1иА1-у8-клетки и О1иА1-у2клетки СНО-δ добавляли буфер для внесения красителя Р1ио-4 АМ и инкубировали при 22°С в течение 2 ч. В О1иА1флип-клетки СНО-δ добавляли буфер для внесения красителя Р1ио-4 ΝΑ и инкубировали при 37°С в течение 30 мин с последующей дополнительной инкубацией при 22°С в течение 90 мин. Прежде чем подвергнуть клетки воздействию соединений, буфер для внесения красителей в планшете для клеток удаляли, и добавляли свежий буфер для анализа. Буфер для анализа состоял из 4Βδδ с 20 мМ 4ΕΡΕδ (рН 7,4), 2,5 мМ пробенецидом и 4 мМ СаС1₂. Анализ инициировали путем добавления соединений с последующим стимулированием клеток глутаматом (конечная концентрация = 45 мкМ) и циклотиазидом (ΟΓΖ, конечная концентрация = 20 мкМ) в буфере для анализа. Кинетику изменения внутриклеточной концентрации [Са++] регистрировали с применением флуоресцентного планшетного спектофотометра (РЬГРК). Ингибирование эффекта глутамата под действием исследуемых соединений выражали как процент от ответов, стимулированных глутаматом плюс ΟΓΖ в присутствии исследуемых соединений, относительно эффекта, наблюдаемого в отсутствие соединений. Относительные ГС₅₀ рассчитывали с применением 4-параметрического нелинейного логистического уравнения. Аналогично анализировали соединения с применением клеток СНО-δ, экспрессирующих исключительно О1иА1флип или О1иА1флоп-у2, с целью подтверждения ТАКР-зависимой и ТАКР-селективной активности.

Соединение согласно примеру 2 анализировали, по существу, как описано выше и как было обнаружено, оно ингибировало глутамат плюс СК-индуцированную активацию ТАКРу8-зависимых О1иА1флоп-рецепторов на примерно 85,6 ± 0,7% (среднее ± СО, п = 9) с ГС₅₀, составляющей 74,5 ± 17,8 нМ (среднее ± СО, п = 9), но не ингибировало ни флип-изоформу, не связанную с ТАКР, ни ТАКРу2зависимые О1иА1флоп-рецепторы (величины ГС₅₀ > предельного значения для анализа, составляющего 9260 нМ).

Таким образом, физиологически подходящие дозы соединений согласно настоящему изобретению, как ожидается, обеспечивают существенное ингибирование ТАКРу8-зависимых АМРА-рецепторов ш утуо, вместе с тем, по существу, не взаимодействуя с другими физиологически связанными рецепторами, такими как, например, ТАКР-независимые рецепторы или ТАКРу2-зависимые рецепторы, и, таким обра- 8 026686 зом, могут подходить для лечения эпилептических припадков, не оказывая при этом нежелательных эффектов, ассоциированных с антагонистами ТАКР-независимых АМРА-рецепторов.

Крысиная модель пентилентетразол (ПТЗ)-индуцированных судорог.

Крыс-самцов линии Зргадие Эа\у1еу (от Наг1ап Зргадие Эа\у1еу. 1пб1апароЬз, ΙΝ) массой 90-110 г на момент исследования размещали в количестве 5 особей в каждую клетку в условиях обеспечения пищи и воды аб ЬЬЬит в большой комнате для содержания со стандартным световым циклом (включение света в 6 ч утра, выключение в 6 ч вечера). Животных выдерживали в комнате для содержания в течение по меньшей мере 3 дней до эксперимента. Животных перемещали в тихую комнату за 1 ч до начала эксперимента. Животных использовали только один раз.

Животных доставали из клеток и вводили им исследуемое соединение или переносящую среду (5% ДМСО, 10% камедь и 0,05% противовспенивающий агент Эо\у Сотшпд® 1510-υδ) п.о. в дозе 10 мл/кг и возвращали их в свои клетки. Через двадцать пять мин после введения животных помещали на экран, и экран переворачивали на 180° для проверки двигательной недостаточности. Животных оценивали в течение 60 с после переворачивания экрана следующим образом: 0, если животное вылезало на верх экрана; 1, если животное висело снизу экрана; 2, если животное падало с экрана. После завершения теста на экране животным вводили п.к. в дозе 35 мг/кг ПТЗ в физиологическом растворе в объеме 1 мл/кг. Затем животных помещали в клетку для наблюдения и наблюдали в течение 30 мин после введения ПТЗ. Клонус определяли как клонические судороги передних и/или задних конечностей, во время которых крысы демонстрировали потерю способности к выпрямлению. Тонические судороги определяли как потерю способности к выпрямлению с увеличением тонуса мышц задних конечностей. Также регистрировали летальность в течение периода наблюдения. Животных оценивали в соответствии с присутствием конкретного типа судорог в любое время в течение периода наблюдения. Данные представлены в виде числа животных, имеющих данный тип судорог (например, клонические судороги 4/5 означает, что 4 из 5 животных демонстрировали по меньшей мере один клонический припадок любой продолжительности в любое время в течение периода наблюдения).

Соединение согласно примеру 2 исследовали, по существу, как описано выше в диапазоне доз 1-10 мг/кг и как было обнаружено, оно предотвращало ПТЗ-индуцированные судороги у крыс с ΕΌ₅₀, составляющей приблизительно 1,74 мг/кг, и обеспечивало 100% защитный эффект в дозе 10 мг/кг, без какойлибо обнаруженной двигательной недостаточности, определяемой посредством теста с переворачиванием экрана. Эти данные указывают на то, что соединение согласно примеру 2 было эффективным в крысиной модели судорог и, таким образом, что соединения согласно настоящему изобретению могут подходить для лечения эпилептических припадков, не оказывая при этом нежелательных эффектов, ассоциированных с антагонистами ТЛКР-независимых АМРА-рецепторов.

Мышиная модель формалин-индуцированной боли.

Мышиная модель формалин-индуцированной боли хорошо известна для скрининга соединений на обезболивающие свойства (Модб Ι.δ. е1 а1., НетЬаЬбЬу οί пос1сербоп I: Кезропзез οί 11 шЪтеб тоизе з!ташз оп 12 теазигез οί посюербоп. Рат 80 (1999) 67-82). Анализ проводили в клетках Р1ех1д1аз® размером приблизительно 10x10x10 см. Зеркало, помещенное в заднюю часть клетки, обеспечивало беспрепятственное наблюдение за лапой, в которую вводили формалин. Мышей-самцов (Наг1ап (ΗδΌ) СЭ1-1сг), получавших пищу, размещали индивидуально в небольшие клетки по меньшей мере за 60 мин до эксперимента. Все исследование проводили в промежутке времени от 08:00 до 16:00 ч и температуру в опытной комнате поддерживали при 21-23°С. Несколько доз исследуемого соединения (3, 10 и 30 мг/кг), переносящую среду (5% ДМСО в 10% камеди, 0,05% противовспенивающий агент) и положительный контроль (трамадол 80 мг/кг в 1% гидроксиэтилцеллюлозе (ГЭЦ), 0,25% Твин 80, 0,05% противовспенивающий агент) вводили периферически (п.о.) в различные моменты времени до воздействия формалином. Формалин (20 мкл 5% раствора в 0,9% физиологическом растворе) вводили подкожно в подошвенную поверхность левой задней лапы с помощью иглы 27 калибра. Наблюдение начинали незамедлительно после инъекции формалина. Интенсивность формалин-индуцированной боли оценивали количественно, регистрируя длительность каждого эпизода зализывания в секундах за 5-минутные интервалы. Оценку боли проводили в течение 60 мин после инъекции формалина. Наблюдали две фазы болевого поведения, описанные ранее (^Ьее1ег-Асе!о, Н., Роггеса, Р. апб Соуап, А., ТЬе та! ра\у ЬэгтаНп 1ез1: сотрапзоп οί похюиз адеп!з, Рат 40 (1990) 229-238.). Ранняя фаза начиналась сразу после инъекции формалина и длилась приблизительно 5 мин, а затем наступала поздняя стадия, которая начиналась через 10-15 мин с максимальным ответом, обычно наблюдаемым через примерно 25-40 мин после инъекции формалина. После 60-минутного периода наблюдения животных умерщвляли с помощью СО₂ с последующим смещением шейных позвонков. Среди различных параметров оценки, приводимых для теста с формалином, наиболее значимым, как полагают, является общее время зализывания и кусания подвергнутой инъекции лапы (АЬЬо!! е! а1., ТЬе &гта1ш 1ез1: зсоппд рторетбез οί !Ье Пгз1 апб зесопб рЬазез οί !Ье раш гезропзе ш га!з, Раш 60 (1995) 91-102; Собегге е! а1., ТЬе ЬэттаЬп 1ез1: а уаИбабоп οί !Ье \уещЬ1еб-зсогез те!Ьоб οί !Ье ЬеЬауюга1 рат габпд, Раш 54 (1993) 43-50)). Оценка на ранней фазе представляла собой суммарное время, затраченное на зализывание (в секундах), в интервале времени от 0 до 5 мин. Оценку на поздней фазе

- 9 026686 получали путем добавления общего количества секунд, затраченных на зализывание, от момента 15 мин до момента 55 мин периода наблюдения. Данные представлены в виде средних значений со стандартными ошибками среднего (± СО). Данные оценивали посредством однофакторного дисперсионного анализа (ΑΝΟνΑ), а соответствующие контрасты анализировали с применением ΐ-теста Даннета для двусторонних сравнений. Различия считали значимыми, если величина Р была меньше чем 0,05 (АЬЬой, кирга; Сойегге, кирга апй \УНсс1сг-Асс1о. кирга).

Соединение согласно примеру 2 исследовали, по существу, как описано выше и как было обнаружено, оно значительно уменьшало болевое поведение с ΕΌ₅₀, составляющей 2,61 мг/кг, полученной из следующих данных по зависимости эффекта от дозы:

Доза (мг/кг п.о.) % уменьшения общего СО времени зализывания 90,0 80.4 53,9

3,4%

8,6%

7,2%

Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению могут подходить для лечения боли.

Наряду с тем что соединения, применяемые в соответствии со способами согласно настоящему изобретению, можно вводить непосредственно без получения какого-либо состава, обычно указанные соединения вводят в форме фармацевтических композиций, содержащих соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в качестве активного ингредиента и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или вспомогательное вещество. Эти композиции можно вводить различными способами, включая пероральный, сублингвальный, назальный, подкожный, внутривенный и внутримышечный пути введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники; см., например, РспипдЮп: ТЬе 8с1спсс апй РгасЬсе οί РЬатшасу (итуеткЬу οί 1Ье 8аепсек ίη РЬЬайе1рЫа, ей., 21^к1 ей., Ырр1псоП ^ЬЬашк & \νί11<ίηκ Со., 2005).

Композиции предпочтительно готовят в виде единичной лекарственной формы, при этом каждая доза содержит от примерно 25 до примерно 1000 мг, чаще от примерно 50 до примерно 500 мг, например приблизительно 100 мг активного ингредиента. Термин единичная лекарственная форма относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве единичных доз для людей и других млекопитающих, причем каждая единица содержит предварительно установленное количество активного вещества, рассчитанное для обеспечения желаемого терапевтического эффекта, в сочетании по меньшей мере с одним подходящим фармацевтически приемлемым носителем, разбавителем и/или вспомогательным веществом.

Соединения формулы I, как правило, являются эффективными в широком диапазоне доз. Например, суточные дозы обычно находятся в пределах диапазона от примерно 0,3 до примерно 15 мг/кг, чаще от примерно 0,7 до примерно 7,5 мг/кг и, например, приблизительно 1,5 мг/кг из расчета на массу тела. В некоторых случаях уровни доз меньше нижнего предела вышеуказанного диапазона могут быть более чем достаточными, тогда как в других случаях могут применяться еще более высокие дозы без какоголибо вредного побочного эффекта, и, следовательно, вышеуказанные диапазоны доз никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения. Также может быть предпочтительным введение суточной дозы по частям в течение каждого дня (например, '/₂ дозы два раза в день или '/₃ дозы три раза в день). Следует понимать, что фактически вводимое количество соединения будет определено лечащим врачом в свете соответствующих обстоятельств, включая состояние, которое лечат, выбранный путь введения, фактически вводимое соединение или соединения, возраст, массу тела и реакцию отдельного пациента и тяжесть симптомов пациента.

Следует понимать, что соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, например, в фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению применяют для лечения эпилептических припадков путем постоянного введения для предотвращения таких эпилептических припадков и/или однократного введения для контроля или прекращения текущих припадков.

Claims

1. Соединение формулы

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, представляющее собой 6-((8)-1 -{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Нпиразол-3 -ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он.

3. Фармацевтическая композиция, содержащая 6-((8)-1-{1-[5-(2-гидроксиэтокси)пиридин-2-ил]-1Нпиразол-3-ил}этил)-3Н-1,3-бензотиазол-2-он или его фармацевтически приемлемую соль и один или более фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ.