EA025393B1 - Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы - Google Patents

Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы Download PDF

Info

Publication number
EA025393B1
EA025393B1 EA201590391A EA201590391A EA025393B1 EA 025393 B1 EA025393 B1 EA 025393B1 EA 201590391 A EA201590391 A EA 201590391A EA 201590391 A EA201590391 A EA 201590391A EA 025393 B1 EA025393 B1 EA 025393B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
amino
pyrazol
ureido
oxy
benzamide
Prior art date
Application number
EA201590391A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201590391A1 (ru
Inventor
Клэр Энн Мари Кариу
Кэтрин Элизабет Чаррон
Юэн Александер Фрэйзер Фордайс
Дэниел Хамза
Мэттью Колин Тор Файф
Кадзухиро Ито
Джон Кинг-Андервуд
Питер Джон Мюррей
Стюарт Томас Онионз
Стефен Малкольм Том
Хейли Теган Анджела Уотсон
Джонатан Гарет Уилльямс
Original Assignee
Респайверт Лимитед
Топайверт Фарма Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Респайверт Лимитед, Топайверт Фарма Лимитед filed Critical Респайверт Лимитед
Publication of EA201590391A1 publication Critical patent/EA201590391A1/ru
Publication of EA025393B1 publication Critical patent/EA025393B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

В изобретении предоставлены соединения формулы (I)где R, R, R, R, Q, X и Y имеют значения, приведенные в описании изобретения, которые обладают противовоспалительной активностью (например, в результате ингибирования ими одного или более представителей семейства ферментов p38 митоген-активируемых протеинкиназ; Syk киназы и представителей Src семейства тирозинкиназ) и применяются в терапии, в том числе в фармацевтических комбинациях, в частности, при лечении воспалительных заболеваний, включая воспалительные заболевания легких, глаз и кишечника.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к соединениям, которые являются ингибиторами семейства ферментов р38 митоген-активированных протеинкиназ (называемых в данном описании ингибиторами р38 МАР киназы), например их альфа и гамма субтипов, и 8ук киназы и 8гс семейства тирозинкиназ, и к их применению в терапии, в том числе в фармацевтических комбинациях, в частности, при лечении воспалительных заболеваний, в частности воспалительных заболеваний легких, таких как астма и хроническое обструктивное заболевание легких (СОРИ), а также заболеваний желудочно-кишечного тракта, таких как язвенный колит и болезнь Крона, и заболеваний глаз, таких как увеит.
Уровень техники
Перечень или обсуждение в описании настоящего изобретения ранее опубликованного документа не следует обязательно принимать за признание того, что документ является частью существующего уровня техники или представляет собой общеизвестные сведения.
Были идентифицированы четыре изоформы р38 МАРК (альфа, бета, гамма и дельта соответственно), каждая из которых обнаруживает различные особенности экспрессии в тканях. В организме альфа и бета изоформы р38 МАРК обнаруживаются повсеместно, присутствуя во многих различных типах клеток. Альфа изоформа хорошо изучена с точки зрения ее роли при воспалении. Несмотря на то что исследования на мышах с использованием подхода на основе химической генетики указывают, что бета изоформа р38 МАРК не играет какой-либо роли при воспалении (О'КссГс. 8.1. с! а1., 1. ΒίοΙ. СЬет., 2007, 282(48):34663-71), тем не менее, она может принимать участие в механизмах возникновения боли в результате регуляции СОХ2 экспрессии (Рбгыттопк, В.Ь. с! а1., №итогерогЕ, 2010, 21 (4): 313-7). Эти изоформы ингибируются рядом ранее описанных соединений с небольшой молекулярной массой. Ранее известные классы ингибиторов были высокотоксичными вследствие распределения этих изоформ в широком спектре тканей, что приводило к множественным нецелевым воздействиям соединений. Более того, разработка значительного числа ингибиторов была прекращена из-за неприемлемых результатов исследования безопасности этих препаратов в клинических исследованиях (РеЕЕик, Ь.Н. и ХУиг/, К..Р., Сигг. Тор. Меб. СЬет., 2008, 8(16): 1452-67). Так как эти негативные воздействия изменяются в зависимости от химического типа, и каждое из этих соединений имеет отличающиеся значения селективности в отношении киназы, наблюдаемые степени токсичности могут быть связаны со структурой соединений, а не с р38 механизмом.
Меньше известно о гамма и дельта изоформах р38 МАРК, которые, в отличие от альфа и бета изоферментов, экспрессируются в специфических тканях и клетках. Дельта изоформа р38 МАРК в большей степени экспрессируется в поджелудочной железе, яичках, легких, тонком кишечнике и почках. Она также распространена в макрофагах и обнаруживается в нейтрофилах, СГО4+ Т-клетках и эндотелиальных клетках (8ЬтиеЬ, О. еЕ а1., СотрЕек Кепбик Вю1од1ек, 2003, 326(10-11): 1067-1072; 8т1ЕЬ, 8.1. Вг. 1. РЬагтасо1., 2006, 149:393-404; На1е, К.К., 1. 1ттипо1., 1999, 162 (7):4246-52; Уапд, Х.8. еЕ а1., 1. Вю1. СЬет., 1997, 272(38):23668-23674). Очень мало известно о распределении гамма р38 МАРК, хотя она в большей степени экспрессируется в головном мозге, скелетных мышцах и сердце, а также в лимфоцитах и макрофагах (8ЬтиеЬ, О. еЕ а1., СотрЕек Кепбик Вю1од1ек, 2003, 326(10-11): 1067-1072, (2003); На1е, К.К., 1. 1ттипо1., 1999, 162(7):4246-52; СоигЕ, Ы.У. еЕ а1., 1. Мо1. Се11. Сагбю1., 2002, 34(4):413-26; МегЕепк, 8. еЕ а1., РЕВ8 ЬеЕЕ., 1996, 383(3):273-6.).
В настоящее время не существует селективных низкомолекулярных ингибиторов гамма р38 МАРК и дельта р38 МАРК, хотя известно, что одно ранее раскрытое соединение, ВШВ 796, обладает ингибирующей активностью в отношении всех изоформ. Ингибирование гамма и дельта изоформ р38 МАРК наблюдается при более высоких концентрациях соединения, чем концентрации, которые требуются для ингибирования альфа р38 МАРК и бета р38 (Кита, Υ. 1. Вю1. СЬет., 2005, 280:19472-19479). Кроме того, В1КВ 796 также нарушал фосфорилирование р38 МАРК или 1ΝΙ< с помощью вышележащей киназы МКК6 или МКК4. В приведенной выше публикации обсуждалась возможность того, что конформационное изменение, вызванное связыванием ингибитора с белком МАРК, может повреждать структуру как места фосфорилирования киназы, так и места стыковки для вышележащего активатора, в результате чего нарушается фосфорилирование р38 МАРК или 1ΝΙ<.
Считается, что р38 МАР киназа играет ключевую роль во многих сигнальных путях, которые принимают участие в инициировании и поддержании хронического стойкого воспаления при заболеваниях человека, например при тяжелой астме, хроническом обструктивном заболевании легких (СЬипд, Р., СЬекЕ, 2011, 139(6): 1470-1479) и воспалительном заболевании кишечника (1ВЭ). В настоящее время имеется большое количество публикаций, в которых показано, что р38 МАР киназа активируется целым рядом провоспалительных цитокинов и что ее активация приводит к рекрутингу и высвобождению дополнительных провоспалительных цитокинов. Действительно, данные некоторых клинических исследований демонстрируют положительные изменения в активности течения заболевания у пациентов при лечении ингибиторами р38 МАР киназы. Например, описано ингибирующее действие ингибиторов р38 МАР киназы на высвобождение ΤΝΡα (но не 1Ь-8) из мононуклеарных клеток периферической крови (РВМС) человека (8т1ЕЬ, 8.1., Вг. 1. РЬагтасо1., 2006, 149:393-404).
Было также предложено применение ингибиторов р38 МАР киназы при лечении хронического об- 1 025393 структивного заболевания легких и воспалительного заболевания кишечника. Было доказано, что низкомолекулярные ингибиторы, нацеленные на р38 МАРК α/β, являются эффективными при уменьшении различных параметров воспаления в клетках и тканях, полученных от пациентов с хроническим обструктивным заболеванием легких, которые обычно невосприимчивы к действию кортикостероидов (8тПЬ 8.Р, Вг. 1. РЬагтасо1., 2006, 149:393-404);
в биоптатах от пациентов с воспалительным заболеванием кишечника (Эосепа, О. е! а1., 1. о£ Тгапз. 1ттипо1., 2010, 162:108-115);
на животных моделях ίη У1уо (Ипйетеоой, Э.С. е! а1., Ат. 1. РЬузю1., 2000, 279:Ь895-902; Ыа1й, Р. е! а1., Еиг. 1. РЬагтасо1., 2006, 544:160-167).
Также было сделано предположение, что р38 МАРК α/β играет определенную роль в невосприимчивости к действию кортикостероидов посредством понижения аффинности связывания глюкокортикоидного рецептора (ОК) в ядре (1гизеп, Е. е! а1., 1. А11егду Сйп. 1ттипо1., 2002, 109:649-657). Были описаны клинические испытания целого ряда ингибиторов р38 МАР киназы, в том числе АМО548, В1КВ 796, УХ702, 8С10469 и 8С10323 (Ьее, М.К. и Потшдие/, С., Сиггеп! Мей. СЬет., 2005, 12:2979-2994). Однако главной проблемой, препятствующей применению ингибиторов р38 МАР киназы при лечении хронических воспалительных заболеваний у человека, была наблюдаемая у пациентов токсичность. Это было достаточно веской причиной для отказа от клинических испытаний многих перспективных соединений, включая все приведенные выше соединения.
СОРЭ представляет собой состояние, при котором, как известно, лежащее в основе воспаление является, по существу, резистентным к противовоспалительному действию кортикостероидов, вводимых ингаляционным путем. Следовательно, самой лучшей стратегией для лечения СОРЭ может быть разработка терапии, которая будет обладать как противовоспалительным действием, так и способностью повышать чувствительность тканей легких пациентов, страдающих СОРЭ, к ингалируемым кортикостероидам. В недавнем исследовании (Мегсайо, Ν., е! а1., Мо1. РЬагтасо1., 2011, 80(6):1128-1135) продемонстрировано, что сайленсинг р38 МАРК гамма дает возможность восстанавливать чувствительность к действию кортикостероидов. Соответственно при использовании ингибитора р38 МАР киназы для лечения СОРЭ и тяжелой астмы у пациентов, может быть достигнут двойной положительный эффект.
Многие пациенты с диагнозом астмы или СОРЭ постоянно страдают от неконтролируемых симптомов и от обострения их состояния здоровья, что может приводить к госпитализации. Это происходит, несмотря на применение доступных в настоящее время самых современных курсов лечения, включающих комбинацию продуктов ингалируемого кортикостероида и длительно действующего β-агониста. Накопленные за последние десять лет данные указывают, что неудача в эффективном лечении воспалительного компонента, лежащего в основе заболевания легких, является наиболее вероятной причиной возникновения обострений. Принимая во внимание хорошо известную эффективность кортикостероидов в качестве противовоспалительных средств и, в частности, ингалируемых кортикостероидов, при лечении астмы, эти выводы вызвали проведение интенсивных исследований. В результате в этих исследованиях было выявлено, что некоторые неблагоприятные элементы и факторы окружающей среды вызывают невосприимчивые к действию кортикостероидов воспалительные изменения в легких пациентов. Примером является ответная реакция, возникающая при вирусных инфекциях верхних дыхательных путей (ИКП), которая существенно увеличивает частоту осложнений, связанных с астмой и СОРЭ.
Эпидемиологические исследования выявили сильную взаимосвязь между вирусными инфекциями верхних дыхательных путей и значительным процентом обострений, испытываемых пациентами после того, как у них диагностировали хронические респираторные заболевания. Некоторые из наиболее веских данных по этому поводу получены при долгосрочных исследованиях детей, страдающих астмой (Рарайорои1оз, Ν.Ο., Рарр А., Рзаггаз, 8. и 1оЬпз!оп, 8.Ь., Раей1а1г. Кезри. Кеу., 2004, 5(3):255-260). Целый ряд дополнительных исследований подтверждают вывод о том, что вирусная инфекция может вызывать обострения и усугублять тяжесть заболевания. Например, сообщается, что экспериментально вызываемые в клинике инфекции с помощью риновируса приводят к возникновению бронхиальной гиперчувствительности к гистамину у астматиков, которые невосприимчивы к лечению кортикостероидами (ОгипЬегд, К., 8Ьагоп, К.Р., е! а1., Ат. 1. Кезрй. СгП. Саге Мей., 2001, 164(10): 1816-1822). Дополнительное доказательство получено в результате обнаружения взаимосвязи между обострениями заболевания у пациентов с кистозным фиброзом поджелудочной железы и папилломавирусными инфекциями (^а!, Ό., Ое1йег, С, е! а1., 1. Суз!. ИЬгоз., 2008, 7:320-328). С этими основными данными также согласуется вывод о том, что респираторные вирусные инфекции, включая риновирус, представляют собой независимый фактор риска, который характеризуется обратной зависимостью от частоты выживания детей с трансплантированными легкими в течение 12 месяцев (Ыи, М., ^ог1еу, 8., е! а1., Тгапзр1. 1пГес1. Όΐ3., 2009, 11 (4): 304-312).
Клиническое исследование показывает, что существует прямая зависимость между вирусной нагрузкой и наблюдаемыми симптомами и осложнениями, и косвенная связь с тяжестью воспаления. Например, после экспериментального инфицирования риновирусом, симптомы поражения нижних дыхательных путей и бронхиальная гиперчувствительность значимо коррелировали с вирусной нагрузкой
- 2 025393 (Меккаде, 8.Ό., Ьа/а-81апса, V., е! а1., ΡΝΆ8, 2008; 105(36):13562-13567). Аналогично, в отсутствии других вирусных возбудителей, риновирусные инфекции обычно ассоциировались с инфекциями нижних дыхательных путей и бронхообструктивным синдромом при высокой вирусной нагрузке у иммунокомпетентных педиатрических пациентов (Оегпа, О., Р1га11а, А., е! а1., 1. Мей. νίτοί., 2009, 81(8):1498-1507).
Интересно отметить, что недавно было сообщено о том, что предварительное воздействие риновируса снижало цитокиновые ответы, вызываемые бактериальными продуктами в альвеолярных макрофагах человека (ОПуег. В.О., Вт, 8., е! а1., ТЬога\, 2008, 63:519-525). Кроме того, было документально подтверждено, что инфицирование назальных эпителиальных клеток риновирусом промотирует адгезию бактерии, включая 8. Аигеик (золотистый стафилококк) и Н. 1пГ1иеп/а (гемофильная палочка) (^апд, РН., К^оп, Нй. и Уои§, ТТ, ТЬе Ьагупдоксоре, 2009, 119(7):1406-1411). Такие клеточные эффекты могут способствовать повышению вероятности возникновения у пациентов инфекции нижних дыхательных путей после инфекции в верхних дыхательных путях. Соответственно с терапевтической точки зрения важно сосредоточить внимание на возможности новых видов лечения снижать вирусную нагрузку в ряде ш νί!го систем, что может быть использовано в качестве псевдопрогностического фактора оценки их возможного применения в клинической практике.
Группы высокого риска, для которых риновирусная инфекция в верхних дыхательных путях может приводить к тяжелым вторичным осложнениям, не ограничиваются пациентами с хроническим респираторным заболеванием. Они включают, например, пациентов с пониженным иммунитетом, которые склонны к инфекции нижних дыхательных путей, а также пациентов, подвергнутых химиотерапии, которые сталкиваются с опасной для жизни острой формой лихорадки. Было также сделано предположение, что другие хронические заболевания, такие как диабет, связаны с нарушением ответной защитной иммунной реакции. Это повышает как вероятность инфицирования дыхательных путей, так и, вследствие этого, вероятность госпитализации (Ре1ед, Α.Υ., ^еегагаШпа, Т., е! а1., Э|аЬе1ек Ме(аЬ. Кек. Рем, 2007, 23(1):3-13; Котит, ТВ., Решат, е! а1., 1ТаЬе1ек Саге, 2008, 31 (8): 1541-1545).
Кроме того, что вирусные инфекции верхних дыхательных путей являются причиной значительной частоты заболеваний и смертности пациентов с основным заболеванием или другими факторами риска; они еще и требуют значительных расходов здравоохранения для населения в целом и являются главной причиной пропущенных дней в школе и потери времени на рабочем месте (КоШпдег, ТМ. и 8сЬт1й(ке, М., Мей. Кек. Рем, 2010, Эо1 10.1002/тей.20176). Эти соображения ясно дают понять, что для профилактики и лечения инфекций верхних дыхательных путей, опосредованных риновирусом, срочно требуются новые лекарственные препараты, которые обладают повышенной эффективностью по сравнению с применяемыми в настоящее время препаратами. Обычно стратегии, выбираемые для создания улучшенных противовирусных лекарственных средств, направлены на различные белки, продуцируемые вирусом, в качестве мишени для терапевтического воздействия. Однако разнообразие серологических типов риновируса заставляет следовать этому особенно перспективному подходу и объясняет, почему в настоящее время лекарственный препарат для профилактики и лечения риновирусных инфекций все еще должен получать одобрение какого-либо государственного органа управления.
Проникновение вируса в клетку организма-носителя связано с активацией ряда внутриклеточных сигнальных путей, контролируемых соответствующей активацией и инактивацией специфических киназ, которые, как считают, играют важную роль в инициировании воспалительных процессов (обзор ЬийМд, 8, 2007; 81дпа1 Тгапкйисйоп, 7:81-88) и размножения вируса и его последующего высвобождения.
Ранее было обнаружено, что соединения, которые ингибируют активность как с-8гс, так и 8ук киназ являются эффективными лекарственными средствами против репликации риновируса (СЬаггоп, С.Е. е! а1., \УО 2011/158042), и что соединения, которые ингибируют р59-НСК, являются эффективными против репликации вируса гриппа (СЬаггоп, С.Е. е! а1., \УО 2011/070369). В силу указанных выше причин, в комбинации с ингибированием р38 МАРК киназ, они приобретают особенно перспективные свойства, присущие соединениям, предназначенным для лечения хронических респираторных заболеваний.
Были также описаны конкретные ингибиторы р38 МАРК в качестве ингибиторов репликации респираторного синцитиального вируса (Сакк, Ь. е! а1., \УО 2011/158039).
Этиология воспалительного заболевания кишечника в настоящее время точно не известна, но, считают, что возникновение этой болезни может быть связано с генетическими факторами и факторами воздействия окружающей среды, которые при взаимодействии провоцируют избыточную и плохо контролируемую ответную воспалительную реакцию слизистой оболочки, направленную против компонентов микрофлоры просвета кишечника. Эта ответная реакция опосредована инфильтрацией воспалительных нейтрофилов, дендритных клеток и Т-клеток из периферии. Вследствие повсеместной экспрессии р38 киназы в воспалительных клетках, она стала очевидной мишенью для исследований на моделях воспалительного заболевания кишечника. Исследования, изучающие эффективность ингибиторов р38 на животных моделях воспалительного заболевания кишечника и на биоптатах пациентов, страдающих воспалительным заболеванием кишечника, показали, что р38 может быть мишенью при лечении воспалительного заболевания кишечника (Нονе, Т. !еп е! а1., Ои!, 2002, 50:507-512, Иосепа, О. е! а1., 1. оГ Тгапк. 1ттипо1., 2010, 162:108-115). Однако эти выводы полностью не согласуются с другими группами пациентов, по поводу которых сообщалось об отсутствии эффекта при применении ингибиторов р38 (Ма1ати!
- 3 025393
О. е! а1., И1д. Όίδ. δοΐ, 2006, 51:1443-1453). Клиническое исследование пациентов с болезнью Крона с использованием р38 альфа ингибитора ΒΙΚΒ796 продемонстрировало перспективный клинический результат по улучшению уровней С-реактивного белка. Однако это улучшение было временным, и к восьмой неделе значения возвращались к исходному уровню (Ьсйгекег 8. е! а1., Сйи. ОаЧго. Нера1о1оду. 2006, 4:325-334). Небольшое клиническое исследование, в котором изучали эффективность ΟΝΙ-1493, ингибитора р38 и 1ик у пациентов с тяжелой формой болезни Крона, продемонстрировало значительное улучшение клинических показателей в течение 8 недель (Ноттек, И. е! а1., Оа8!гоеп!его1оду. 2002 122:7-14).
Известно, что Т-клетки играют ключевую роль в опосредовании воспаления желудочно-кишечного тракта. В основополагающем исследовании (Ро\упе Р. е! а1., Ιη! 1ттипо1. 1993 5:1461-71) было показано, что перенос не подвергавшихся лечению СИ4+ клеток животным с тяжелой формой иммунодефицита (8СГО) приводит к развитию колита, которое зависит от присутствия комменсальной бактерии. Более того, исследование мембран слизистой оболочки пациентов с воспалительным заболеванием кишечника показало повышенную регуляцию СИ4+ клеток, направление дифференцировки которых смещалось либо в сторону Тй1 (ΙΡΝγ/ΙΗ-2), либо Тй2 (1Ь5/Т0Рв), в зависимости от того, страдал ли пациент болезнью Крона или язвенным колитом (Ри88 Н. е! а1., 1. Iттиηо1. 1996 157:1261-70.). Аналогично, известно, что Тклетки играют ключевую роль в воспалительных заболеваниях глаз, причем в некоторых исследованиях сообщалось о повышенных уровнях связанных с Т-клетками цитокинов (Ш-17 и Ш-23) в сыворотках пациентов с болезнью Бехчета (Сй е! а1., Шуек! Орй!йа1то1 νί8 8сг 2008 49:3058-64). В подтверждение, было продемонстрировано (ИиезкепеИ Н. е! а1., 1. АНегду Сйп Iттиηо1. 2011 128:665-6), что пациенты с болезнью Бехчета имели повышенное содержание Тй17 клеток и пониженное содержание Тгед клеток в периферической крови.
Одним подходом для ингибирования активации Т-клеток является целенаправленное воздействие на киназы, которые вовлечены в активацию сигнального комплекса рецептора Т-клеток. Известно, что киназы 8ук и 8гс семейства играют ключевую роль в этом сигнальном пути, где киназы 8гс семейства, Руп и Ьск, являются первыми сигнальными молекулами, активируемыми лежащими ниже рецепторами Т-клеток (Вагйег ЕК. е! а1., ΡΝΑ8 1989 86:3277-81). Они инициируют фосфорилирование тирозина рецептора Т-клеток, что приводит к рекрутингу киназы семейства 8ук, ΖΑΡ-70. Исследования на животных показали, что нокаут ΖΑΡ-70 приводит в результате к фенотипу тяжелой формы иммунодефицита (Сйап АС. е! а1., 8шепсе. 1994 10; 264 (5165):1599-601).
Клиническое испытание ингибитора 8ук фостаматиниба у пациентов с ревматоидным артритом продемонстрировало перспективность 8ук в качестве мишени для противовоспалительного воздействия у пациентов, показав улучшенные клинические результаты и пониженные уровни Ш-6 и ММР-3 в сыворотке (ЛУетЫаП МЕ. е! а1., АцйпОк Кйеит. 2008 58:3309-18). Киназа 8ук широко экспрессируется в клетках гематопоэтической системы, особенно в В-клетках и зрелых Т-клетках. Через взаимодействие с иммунорецепторными тирозиновыми активирующими мотивами ОТАМ) она играет важную роль в регуляции роста Т-клеток и В-клеток, а также в опосредовании передачи сигнала рецептора врожденного иммунитета в воспалительных клетках. Активация 8ук приводит к высвобождению Ш-6 и ММР - медиаторов воспаления, обычно обнаруживаемых в состоянии повышенной регуляции при воспалительных заболеваниях, включая воспалительные заболевания кишечника и ревматоидный артрит (^апд УИ. е! а1., \Уог1й 1. Оаз!гоеп!его1 2007; 13:5926-5932, Ыйпзку Ι е! а1., Су!окше. 2006 1ап 33:106-10).
Помимо того, что киназные ферменты играют ключевую роль при передаче клеточных сигналов, которые контролируют активность провоспалительных путей, в настоящее время является общепризнанной их роль в регуляции активности целого ряда клеточных функций. К таким функциям, которые недавно уже были обсуждены, относятся сохранение целостности ДНК (8Ы1о, Υ. №!иге Ре\ае\У8 Рак, 2003, 3: 155-168) и координация сложных процессов клеточного деления. Иллюстрацией недавно полученных результатов является публикация, в которой описано влияние группы ингибиторов, действующих на так называемые киназы О1айаг8ку, на частоту образования микроядер ш уйго (О1айаг8ку, А.1. е! а1., РЬо8 Сотри!. Вю1., 2009, 5(7):е1000446.). Образование микроядер подразумевает нарушение митотических процессов или связано с ним и, поэтому, является нежелательным проявлением потенциальной токсичности. Было обнаружено, что ингибирование гликоген-синтазы-киназы-3а (О8К3а) является особо важным фактором, который повышает вероятность провоцирования ингибитором киназы образования микроядер. Недавно, было также сообщено, что ингибирование киназы Ο8Κ3β с помощью ΚΝΑί способствует образованию микроядер (Ндйе, А. е! а1., ВМС Се11 Вю1оду, 2007, 8:34).
По-видимому, можно уменьшить побочные эффекты, возникающие в результате взаимодействий лекарственных средств с киназами О1айаг8ку, такими как О8К3а, путем оптимизации дозы и/или путем изменения способа введения. Однако было бы более целесообразно терапевтически выявить подходящие молекулы, которые демонстрируют низкую или необнаруживаемую активность в отношении этих, не являющихся мишенями ферментов, и, следовательно, уменьшить или полностью исключить нарушение митотических процессов, которое может быть определено при исследованиях митоза.
Из приведенного выше обсуждения цитируемой литературы становится очевидным, что сохраняется необходимость в выявлении и создании новых ингибиторов р38 МАР киназы, которые обладают более
- 4 025393 высокими терапевтическими возможностями по сравнению с доступными в настоящее время лекарственными средствами. Желательными являются такие соединения, которые характеризуются превосходящим терапевтическим индексом при оказании, по меньшей мере, равного по эффективности эффекта по сравнению с ранее известными лекарственными средствами, но которые, с точки зрения одного или более аспектов, являются менее токсичными при релевантной терапевтической дозе. Поэтому, настоящее изобретение, наряду с прочим, обеспечивает такие новые соединения, которые ингибируют ферментную активность р38 МАР киназы, например, со специфичностью к конкретным субтипам, необязательно, вместе с киназой 8ук и тирозинкиназами в рамках семейства 8гс (в частности, с-8гс), и которые в связи с этим обладают хорошими противовоспалительными свойствами и подходят для применения в терапии.
В одном или более вариантах осуществления соединения проявляют длительное действие и/или непрерывное действие по сравнению с другими, ранее раскрытыми аллостерическими ингибиторами киназы р38 МАР, такими как, например, ΒΙΡΒ796 (РагдеШк, С. е1 а1., Ыа1иге 81гисР ΒίοΙ., 2002, 9(4):268-272).
Сущность изобретения
В первом аспекте изобретение предоставляет соединение формулы (I)
где Ц представляет собой тиенил, фенил или пиридинил, каждый из которых может необязательно нести 1-3 заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, Ο-6галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, ΝΗ2, Ы(Н)-С1-6-алкила, Ы(С1-6алкил)2, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С0-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла;
X представляет собой СН или Ν;
Υ представляет собой ΝΚ2Κ3 или 4-10-членный гетероцикл, необязательно присоединенный через гетероатом, где указанный гетероцикл несет 0 или 1 заместитель, выбранный из галогена, ОН, С1-6-алкила, С1-4-галогеналкила, С0-3-алкилен-О-С0-6-алкила, С0-3-алкилен-О-С1-3-галогеналкила, С0-6-алкиленарила, С0-3-алкилен-О-С0-3-алкиленарила, С0-6-алкиленгетероарила, С0-3-алкилен-О-С0-3-алкиленгетероарила, С(О)С1-6-алкила, 8ОНВ4Р5. С0-3-алкиленИР4Р5. С0-3-алкиленИР48О2Р5 и С0-3-алкилен^К4С(О)К5;
К представляет собой С1-6-алкил, С2-6-алкенил, С1-6-гидроксиалкил, С1-6-галогеналкил, С1-6-алкил, замещенный С1-3-алкокси или циано, С0-2-алкилен-С3-8-циклоалкил, необязательно замещенный С1-3-алкилом, или 4-5-членный гетероцикл, необязательно замещенный С1-3-алкилом;
Ка и Кь, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо, которое необязательно замещено одним или более заместителями, выбранными из С1-3-алкила, С1-3-галогеналкила, циано и галогена, или один из Ка и Кь представляет собой Н, галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил, и другой независимо представляет собой галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил;
К1 выбирают из водорода, ОН, галогена, ΟΝ, С1-6-алкила, С2-6-алкенила, С2-6-алкинила, С1-6-галогеналкила, С0-3-алкилен-С3-6-циклоалкила, С0-3-алкилен-О-С1-3-алкилен-С3-6-циклоалкила,
С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С0-3-алкилен-8О2С1-3-алкила, С0-3-алкилен8О2NК4К5 и Со^-алкилен-Ж'Х7, и С0-3-алкилен^СОК6К7;
К2 и К3, каждый независимо, выбирают из Н, С1-8-алкила, С0-6-алкиленарила, С0-6-алкиленгетероарила, С0-6-алкилен-4-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С0-6-алкилен-4-10-членного гетероцикла при условии, что когда указанный гетероцикл соединен через азот, имеются по меньшей мере два атома углерода в алкиленовой цепи, которые связывают этот атом азота с основным атомом кислорода заместителя, где независимо каждая алкильная или алкиленовая группа необязательно несет 1 оксозаместитель и необязательно один или два атома углерода в алкильной или алкиленовой цепи, каждый, могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, N или 8(О)р, так что когда указанный алкил или алкилен содержит амин, указанная аминогруппа представляет собой третичный амин, где каждый 4-10членный гетероцикл необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из галогена, ОН, С1-6-алкила, С1-4-галогеналкила, С0-3-алкилен-О-С0-6-алкила, С0-3-алкилен-О-С1-3-галогеналкила, С0-6-алкиленарила, С0-3-алкилен-О-С0-3-алкиленарила, С0-6-алкиленгетероарила, С0-3-алкилен-О-С0-3-алкиленгетероарила, С(О)С1-6-алкила, 8ОПК К и С0-3-алкиленПК К , С0-3-алкиленПК 8О2К и С0-3-алкилен]МК8С(О)К9;
К4 представляет собой Н или С1-4-алкил;
К5 представляет собой Н или С1-4-алкил;
К6 представляет собой Н или С1-4-алкил, С(О)С1-3-алкил и 8О2С1-3-алкил;
К7 представляет собой Н или С1-4-алкил, С(О)С1-3-алкил и 8О2С1-3-алкил;
К8 представляет собой Н или С1-4-алкил;
- 5 025393
К9 представляет собой Н или Сг.д-алкил; р равен 0, 1 или 2 или его фармацевтически приемлемую соль, включая все его стереоизомеры и таутомеры.
Соединения изобретения являются ингибиторами р38 МАР киназы, в частности, субтипа альфа.
По меньшей мере, в некоторых вариантах осуществления соединения настоящего изобретения характеризуются низким В-КаГ связыванием, например менее чем 40% ингибированием связывания киназы при 500 нМ, например 30% ингибированием или менее при проведении исследования методом ΚΙΝΘΜΕκααη.
В-РаГ является представителем семейства КаГ киназ серин/треонин-специфических протеинкиназ. Этот белок играет определенную роль в регуляции сигнального пути МАР киназа/внеклеточно регулируемые киназы (ЕКК), который воздействует на клеточное деление, дифференцировку и секрецию. Мутацию гена связывают с раком у людей (Иау1ек, Н. еБ а1., №Бите, 2002, 417(6892):949-54).
Система клеточных сигналов может обходить селективное ингибирование В-КаГ с нежелательными последствиями (Ьо, Р.8.. Се11 КекеагсЬ, абуаиее ои1ше риЬЬеаБюи 8 Мау 2012; άοί: 10.1038/сг.2012.78). Поэтому предпочтительно, чтобы ингибиторы киназ, предназначенные для применения в качестве противовоспалительных средств, имели минимальную возможность взаимодействия с В-КаГ.
Настоящие соединения также проявляют низкую аффинность в отношении ΟδΚ3α киназы при исследованиях связывания, что рассматривается в качестве положительного свойства с точки зрения терапии, в частности, в отношении минимизации токсичности ίη νίνο.
По меньшей мере, в некоторых вариантах осуществления соединения настоящего изобретения обладают ингибирующей активностью в отношении р59-НСК, что может также существенно улучшать их терапевтические свойства.
Подробное описание изобретения
Используемый в данном описании термин алкил относится к алкилу с линейной или разветвленной цепью, такому как, но без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, бутил, н-бутил и третбутил. В одном варианте осуществления алкил относится к алкилу с линейной цепью.
Используемый в данном описании термин алкокси относится к алкоксигруппе с линейной или разветвленной цепью, например метокси, этокси, пропокси, бутокси. Используемый в данном описании термин алкокси также распространяется на варианты осуществления, в которых атом кислорода (например, единственный атом кислорода) расположен внутри алкильной цепи, например -С1-3-алкил-ОС1-3алкил, такой как -СН2СН2ОСН3 или -СН2ОСН3. Так, в одном варианте осуществления алкокси связан через углерод с остальной частью молекулы, например -С6-п-алкил-О-С6-т-алкил, в котором η=1-5, т=1-5 и п+т=6-10. В одном варианте осуществления алкокси связан через кислород с остальной частью молекулы, например -ОСг-6-алкил. В одном варианте осуществления изобретение относится к алкокси с линейной цепью. В одном варианте осуществления алкокси связан через кислород с остальной частью молекулы, но алкоксигруппа содержит дополнительный атом кислорода, например, -ОСН2СН2ОСН3.
Галоген включает фтор, хлор, бром или йод, в частности фтор, хлор или бром, особенно фтор или хлор.
Используемый в данном описании термин алкил, замещенный галогеном (галогеналкил) относится к алкильным группам, имеющим 1-6 атомов галогена, например 1-5 атомов галогена, таким как пергалогеналкил, в частности перфторалкил, более конкретно -СР2СР3 или СР3.
Используемый в данном описании термин алкил, замещенный гидроксигруппой (гидроксиалкил) относится к алкильным группам, имеющим 1-3 гидроксигрупп, например 1 или 2 гидроксизаместителя, например -СН2СН2ОН, -С(СН3)СН2ОН, -С(СН3)2СН2ОН или аналогичные группы.
Используемый в данном описании термин алкокси, замещенный галогеном (галогеналкокси) относится к алкоксигруппам, имеющим 1-6 атомов галогена, например 1-5 атомов галогена, таким как пергалогеналкокси, в частности перфторалкокси, более конкретно -ОСР2СР3 или -ОСР3.
Если не указано иное, то используемый в данном описании термин алкилен означает линейную или разветвленную соединительную группу из атомов углерода, например, включающую метилены, между двумя другими фрагментами. Для специалистов в данной области будет очевидно, что группы, определяемые, например, как С2-8-алкенил и С2-8-алкинил, могут включать алкиленовую часть. Во избежание неоднозначности толкования, используемый в данном описании термин н-алкилен, относится к алкилену с линейной цепью.
Для специалистов в данной области будет очевидно, что гетероатом может заменять первичный, вторичный или третичный углерод, то есть в группе СН3, -СН2-, -СН-, и если это теоретически возможно, то водород или разветвление в алкильной или алкиленовой цепи будут заполнять валентность гетероатома в соответствующем положении, например в случае замены концевого первичного углерода на гетероатом кислорода, концевая группа становится спиртом.
С1-6-алкил включает Сь С2, С3, С4, С5 и С6.
С1-6-алкокси включает Сь С2, С3, С4, С5 и С6.
Используемый в данном описании термин 5-10-членный гетероцикл относится к 5-10-членному насыщенному или частично ненасыщенному неароматическому кольцу, включающему один или более,
- 6 025393 например 1, 2, 3 или 4, гетероатомов, независимо выбранных из О, N и 8, где необязательно один или два углерода в кольце могут нести оксозаместитель. Любые валентности гетероатома, не использованные при формировании или сохранении кольцевой структуры, могут быть соответствующим образом заполнены водородом или заместителем. Так, необязательные заместители на гетероциклах могут в случае необходимости быть присоединены к углероду или к гетероатому, такому как азот. Примеры 5-10членных гетероциклов включают пирролин, пирролидин, тетрагидрофуран, тиепан, оксепан пиперидин, пиперазин, морфолин, тиоморфолин, диоксан, тетрагидротиофен, пиразолин, имидазолин, пиразолидин, оксоимидазолидин, диоксолан, тиазолидин, изоксазолидин, дигидропиран, дигидроинден, дигидроизобензофуран, изоиндолин-1-он, хроман, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин, 2,3-дигидробензо[Ь][1,4]диоксиназокан и другие подобные гетероциклы.
Используемый в данном описании термин 5-6-членный гетероцикл относится к 5-6-членному насыщенному или частично ненасыщенному неароматическому кольцу, включающему один или более, например 1, 2, 3 или 4, гетероатомов, независимо выбранных из О, N и 8, где необязательно один или два углерода в кольце могут нести оксозаместитель. Используемое в изобретение определение С5-6гетероцикла относится к 5-6-членному насыщенному или частично ненасыщенному неароматическому карбоциклическому кольцу, включающему один или более, например 1, 2, 3 или 4, гетероатомов, независимо выбранных из О, N и 8, где каждый гетероатом заменяет атом углерода и необязательно один или два углерода могут нести оксозаместитель. Очевидно, что любые валентности гетероатома, не использованные при формировании или сохранении кольцевой структуры, могут быть соответствующим образом заполнены водородом или заместителем. Так, заместители на гетероциклах могут в случае необходимости присутствовать на углероде или на гетероатоме, таком как N. Примеры гетероциклов и С5-6гетероциклов включают пирролин, пирролидин, тетрагидрофуран, тетрагидротиофен, пиразолин, имидазолин, пиразолидин, имидазолидин, оксоимидазолидин, диоксолан, тиазолидин, изоксазолидин, пиран, дигидропиран, пиперидин, пиперазин, морфолин, диоксан, тиоморфолин и оксатиан.
Используемая в данном описании морфолинильная группа соответственно представляет собой N морфолинил.
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (1а1) или, в частности,
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (1Ь1) или, в частности, формулы (1Ь2)
где К, Ка, КЬ, К1, О. X и Υ являются такими, как определено выше для соединений формулы (I).
- 7 025393
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (1с1) или, в частности, формулы (1с2)
где К, К3, Кь, К1, О и Υ являются такими, как определено выше для соединений формулы (I).
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (И1) или, в частности, формулы (И2)
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (1е1) или, в частности, формулы (1е2)
где К, Ка, Кь, К1, О и Υ являются такими, как определено выше для соединений формулы (I).
- 8 025393
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (1д1) или, в частности,
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формулы (Ι1ι1) или, в частности, формулы (1Ь2)
где К, Ка, Кь, К1, X, Ц и Υ являются такими, как определено выше для соединений формулы (I).
Обычно в заместителях, таких как Со-з-алкилен-0-Со-б-алкилен-5-10-членный гетероцикл, например, как определено для К2 или К3, в случае, когда указанный гетероцикл связан через азот, группа будет определяться как С0-3-алкилен-0-С2-6-алкилен-5-10-членный гетероцикл.
Обычно в случае, когда О включает фенил или пиридин, замещенный С1-6-алкилен-5-10-членным гетероциклом или С0-3-алкилен-О-С0-6-алкилен-5-10-членным гетероциклом, К2 и К3 независимо выбирают из Н, С1-8-алкила, где независимо каждая алкильная или алкиленовая группа необязательно несет 1 оксозаместитель, и необязательно до двух атомов углерода в алкильной или алкиленовой цепи могут быть заменены на гетероатом, выбранный из О, N или 8(О)Р, так что когда алкил или алкилен включают амин, указанная аминогруппа представляет собой третичный амин.
- 9 025393
В одном варианте осуществления О представляет собой фенил, несущий один или два заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6гидроксиалкила, Ы(С1-6-алкил)2, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-510-членного гетероцикла (например, один или два заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла). В одном варианте осуществления О представляет собой фенил, несущий метил, метокси, -Ы(СН3)2 или -ОСН2СН2ОСН3 (например, метил, метокси или -ОСН2СН2ОСН3), например один из указанных заместителей, в частности, в параположении.
В одном варианте осуществления О представляет собой диметилфенил, например, в котором метильные заместители находятся в мета- и пара-положении.
В одном варианте осуществления О представляет собой пиридинил, несущий один заместитель, независимо выбранный из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, Οι_6гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла.
В одном варианте осуществления О представляет собой метоксипиридинил, например 6метоксипиридин-3 -ил.
В одном варианте осуществления О представляет собой тиенил, необязательно несущий один заместитель, независимо выбранный из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6алкилен-5-10-членного гетероцикла.
В одном варианте осуществления Υ представляет собой ЫК2К3.
В одном варианте осуществления Υ представляет собой 5-10-членный гетероцикл, например 6членный гетероцикл, несущий С1-6-алкильный заместитель.
В одном варианте осуществления Υ представляет собой морфолинил, пиперазинил или (метил)пиперазинил, например 4-метилпиперазин-1-ил.
В одном варианте осуществления К представляет собой этил, изопропил, трет-бутил, циклопропил, 1-метилциклопропил, пропен-2-ил, СР3, С2Р5, оксетанил, (метил) оксетанил или тетрагидрофуранил (например, этил, изопропил, трет-бутил, циклопропил, 1-метилциклопропил, СР3, С2Р5, оксетанил, (метил)оксетанил или тетрагидрофуранил), например изопропил или трет-бутил.
В одном варианте осуществления К представляет собой С(СН3)2СН2ОН или СН(СН3)СН2ОН.
В одном варианте осуществления К представляет собой 1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил.
В одном варианте осуществления К1 представляет собой Н, Вг, С1, СН3, СЫ, Ы(СН3)2, СР3, этинил, ОСН3, ОСН2СН3 или ОСН2(СН3)2.
Обычно атомы заместителей К2 и К3 в группе ЫК2К3, которые связаны с азотом, независимо выбирают из водорода и углерода.
В одном варианте осуществления К2 представляет собой Н, СН3, -СН2СН2СН3, -(СН2)2ОН, -(СН2)2ОСН3, -(СН2)2Ы(СН3)2, (СН2)2морфолинил, -(СН2)2пиперазинил или -(СН2)2(4-метил)пиперазинил.
В одном варианте осуществления К3 представляет собой Н или СН3.
В одном варианте осуществления К4 представляет собой Н или метил.
В одном варианте осуществления К5 представляет собой Н или метил.
В одном варианте осуществления К6 представляет собой Н или метил.
В одном варианте осуществления К7 представляет собой Н или метил.
В одном варианте осуществления К8 представляет собой Н или метил.
В одном варианте осуществления К9 представляет собой Н или метил.
Варианты осуществления изобретения, которые могут быть приведены, включают соединения формул (I), (1а1), (1а2), (1Ы), (1Ь2), (И), (1с2), (И1), (М2), (1е1), (М2), (Ι11), (И2), (Ι§1), (Ι§2), (1Ь1) и (ΙΠ2), где
О представляет собой фенил, несущий один или два заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, Ы(С1-6-алкил)2, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла (например, О представляет собой фенил, монозамещенный (например, в пара-положении) метилом, метокси, -Ы(СН3)2 или -ОСН2СН2ОСН3 или дизамещенный (например, в мета- и пара-положениях) метилом), или О представляет собой пиридинил, несущий один заместитель, независимо выбранный из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла (например, О представляет собой метоксипиридинил, такой как 6-метоксипиридин-3-ил);
Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо, или один из Ка и КЬ представляет собой галоген, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил, и другой независимо представляет собой галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил (например, Ка и КЬ, оба, представляют метил, фтор или хлор);
К представляет собой С1-6-алкил, необязательно замещенный гидрокси, циано или метокси или одной или более фтор-группами, С2-6-алкенил или С3-4-циклоалкил, где последняя группа необязательно
- 10 025393 замещена С|-3алкилом. (например, К представляет собой этил, изопропил, н-пропил, трет-бутил, циклопропил, 1-метилциклопропил, СР3, С2Р5, С(СН3)2СР3-оксетанил, (метил)оксетанил, тетрагидрофуранил или пропен-2-ил, например изопропил, пропен-2-ил или трет-бутил); и/или
К1 представляет собой Н, галоген (например, Р, Вг или С1), СЫ, С1-4-алкил (например, метил или этил), С2-4-алкинил (например, этинил), С1-4-фторалкил (например, СР3), С1-4-алкокси (например, ОСН3, ОСН2СН3 или ОСН2(СН3)2), или ΝΚ6Κ7 (например, Ы(СН3)2) (например, К1 представляет собой этинил или ОСН3).
Более конкретные варианты осуществления изобретения, которые могут быть приведены, включают соединения формул (I), (1а1), (1а2), (ГЫ), (ГЬ2), (Гс1), (Гс2), (М1), (М2), (1е1), (1е2), (ИГ), (И2), (1д1), (1д2), (ГЫ) и (ГЬ2), где
Ц представляет собой фенил, монозамещенный (например, в пара-положении) С1-6-алкилом (например, метилом), С1-6-алкокси (например, метокси), С1-6-галогеналкокси или Ы(С1-6-алкил)2 (например, Ы(СН3)2) (например, О представляет собой фенил, замещенный в пара-положении метилом, метокси или диметиламино);
Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо;
К представляет собой С1-4-алкил, необязательно замещенный одной или более фтор-группами, С3-4алкенил или С3-4-циклоалкил, где последняя группа необязательно замещена метилом (например, К представляет собой этил, циклопропил, СР3, С2Р5, -С(СН3)2СР3 или, в частности, изопропил, 1метилциклопропил, пропен-2-ил или трет-бутил); и/или
К1 представляет собой Вг, С1, СЫ, метил, этил, СР3, ОСН2СН3, ОСН2(СН3)2, Ы(СН3)2 или, в частности, этинил или ОСН3.
Конкретные варианты осуществления изобретения включают следующие.
(1) Соединение формул (I), (Га1), (1а2), (ГЬ1), (1Ь2), (Гс1), (1с2), (И1), (Ы2), (Ге1), (Ге2), (ИГ), (И2), (1д1), (Ι§2), (ГЫ) или (Ι1ι2)„ как определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль.
(2) Соединение или соль согласно варианту осуществления (1), где О представляет собой фенил, несущий один или два заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С!-6алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, Ы(С1-6-алкил)2, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла (например, один или два заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С!-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С!-6гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла).
(3) Соединение или соль согласно варианту осуществления (1) или варианту осуществления (2), где Ц представляет собой фенил, несущий метил, метокси, -Ы(СН3)2 или -ОСН2СН2ОСН3 (например, метил, метокси или -ОСН2СН2ОСН3).
(4) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(3), где О представляет собой фенил, замещенный в пара-положении метилом, метокси, -Ы(СН3)2 или ОСН2СН2ОСН3 (например, метилом, метокси или -ОСН2СН2ОСН3).
(5) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(3), где О представляет собой диметилфенил, например, где метильные заместители находятся в мета- и пара-положении.
(7) Соединение или соль согласно варианту осуществления (1), где О представляет собой пиридинил, несущий один заместитель, независимо выбранный из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, Οι_6алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла.
(8) Соединение или соль согласно варианту осуществления (7), где О представляет собой метоксипиридинил, например 6-метоксипиридин-3-ил.
(9) Соединение или соль согласно варианту осуществления (1), где О представляет собой тиенил, необязательно несущий один заместитель, независимо выбранный из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3алкилен-О-С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла.
(10) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(9), где Υ представляет собой ЫК2К3.
(11) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(9), где Υ представляет собой 5-10-членный гетероцикл, например 6-членный гетероцикл, несущий С1-6-алкильный заместитель.
(12) Соединение или соль согласно варианту осуществления (11), где Υ представляет собой морфолинил, пиперазинил или (метил)пиперазинил, например 4-метилпиперазин-1-ил.
(13) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(12), где К представляет собой этил, изопропил, трет-бутил, циклопропил, 1-метилциклопропил, СР3, С2Р5, оксетанил, (метил)оксетанил или тетрагидрофуранил, например изопропил или трет-бутил.
(14) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(12), где К представляет собой С(СН3)2СН2ОН или СН(СН3)СН2ОН.
(15) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(12), где К представляет со- 11 025393 бой 1-гидрокси-2-метилпропан-2-ил.
(16) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(15), где К1 представляет собой Н, Вг, С1, СН3, СЧ ^СН3)2, СР3, этинил, ОСН3, ОСН2СН3 или ОСН2(СН3)2.
(17) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(16), где К2 представляет собой Н, СН3, СН2СН2СН3, -(СН2)2ОН, -(СН2)2ОСН3, -(СН2)2Ы(СН3)2, (СН2)2морфолинил, -(СН2)2пиперазинил или -(СН2)2(4-метил)пиперазинил.
(18) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(17), где К3 представляет собой Н или СН3.
(19) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(18), где К4 представляет собой Н или метил.
(20) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(19), где К5 представляет собой Н или метил.
(21) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(20), где К6 представляет собой Н или метил.
(22) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(21), где К7 представляет собой Н или метил.
(23) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(22), где К8 представляет собой Н или метил.
(24) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(23), где К9 представляет собой Н или метил.
(25) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1) и (10)-(24), где О представляет собой фенил, монозамещенный (например, в пара-положении) С1-6-алкилом (например, метилом), С1.6алкокси (например, метокси), С1-6-галогеналкокси или ^С^-алкилЬ (например, ^СНДД.
(26) Соединение или соль согласно варианту осуществления (25), где О представляет собой фенил, замещенный в пара-положении метилом, метокси или диметиламино.
(27) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(26), где Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо.
(28) Соединение или соль по любому из вариантов осуществления (1)-(10) и (13)-(27), где К3 представляет собой Н.
(29) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(12) и (16)-(28), где К представляет собой С1-4алкил, необязательно замещенный одной или более фтор-группами, С3-4алкенил или С3-4циклоалкил, где последняя группа необязательно замещена метилом (например, К представляет собой этил, циклопропил, СР3, С2Р5, -С(СН3)2СР3 или, в частности, изопропил, 1-метилциклопропил, пропен-2-ил или трет-бутил).
(30) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(15) и (17)-(29), где К1 представляет собой Вг, С1, СЦ метил, этил, СР3, ОСН2СН3, ОСН2(СН3)2, N(04^, этинил или ОСН3.
(31) Соединение или соль согласно варианту осуществления (30), где К1 представляет собой этинил или ОСН3.
(32) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(31), где соединение имеет структурную формулу
где О представляет собой тиенил, фенил или пиридинил, каждый из которых может необязательно нести 1-3 заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1.6галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С0-6алкилен-5 - 10-членного гетероцикла;
К представляет собой С1-6-алкил, С1-6-гидроксиалкил, С1-6-галогеналкил, С0-2-алкилен-С3-8циклоалкил, необязательно замещенный С1-3-алкилом, С1-6-галогеналкилом или 4-5-членным гетероциклом, необязательно замещенным С1-3-алкилом; и/или
К2 и К3, каждый независимо, выбирают из Н, С1-8-алкила, С0-6-алкиленарила, С0-6алкиленгетероарила, С0-6-алкилен-4-10-членного гетероцикла и С0-3-алкилен-О-С0-6-алкилен-4-10членного гетероцикла, при условии, что когда указанный гетероцикл присоединен через азот, имеются по меньшей мере два атома углерода в алкиленовой цепи, которые связывают этот атом азота с основным атомом О заместителя, где независимо каждая алкильная или алкиленовая группа необязательно несет 1 оксозаместитель, и необязательно один или два атома углерода в алкильной или алкиленовой цепи каждый может быть заменен гетероатомом, выбранным из О, N или 8(О)Р, так что когда указанный алкил или алкилен содержит амин, указанная аминогруппа представляет собой третичный амин, где каж- 12 025393 дый 4-10-членный гетероцикл необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из галогена, ОН, С^б-алкила, С1-4-галогеналкила, С0-3-алкилен-О-С0-6-алкила, С0-3-алкилен-О-С1-3галогеналкила, С0-6-алкиленарила, С0-3-алкилен-О-С0-3-алкиленарила, С0-6-алкиленгетероарила, С0-3алкилен-О-С0-3-алкиленгетероарила, С(О)С1-6-алкила, §О2NК8К9 и С0-3-алкилен-NК8К9, С0-3-алкиленNК8§О2К9 и С0-3-алкилен-NК8С(О)К9 (33) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(31), где
Ц представляет собой тиенил, фенил или пиридинил, каждый из которых замещен ΝΗ2, Ν(Η)-Ομ 6алкилом или ЖС1-6-алкил)2 и необязательно дополнительно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, Οι_6гидроксиалкила, ΝΗ2, ЖН)-С1-6-алкила. ЖС1-6-алкил)2. С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и С0-3алкилен-О-С0-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла;
К представляет собой С2-6-алкенил (например, С3-4-алкенил, такой как пропен-2-ил) или С1-6-алкил, замещенный С1-3-алкокси или циано (например, вторичный С3-6-алкил, замещенный метокси или циано, такой как -С(СН3)2ОСН3 или -С(СН3)2С№); и/или
Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо, которое замещено одним или более заместителями, выбранными из С1-3-алкила, С3-3галогеналкила, циано и галогена, или один из Ка и К представляет собой Н, галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил, и другой независимо представляет собой галоген, циано, С1-3-алкил или С3-3галогеналкил.
(34) Соединение или соль согласно любому из вариантов осуществления (1)-(33), где К представляет собой нормальный С1-6-алкил, разветвленный С4-6-алкил, С2-6-алкенил, С1-6-гидроксиалкил, С3-6галогеналкил, С1-6-алкил, замещенный С1-3-алкокси или циано, С0-2-алкилен-С3-8-циклоалкил, необязательно замещенный С1-3-алкилом, или 4-5-членный гетероцикл, необязательно замещенный С1-3-алкилом, (например, К представляет собой этил, циклопропил, СР3, С2Р5, -С(СН3)2СР3 или, в частности, 1метилциклопропил, пропен-2-ил или трет-бутил).
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формул (I), (1Ь2), (1с2), (Ι62) или (1д2), как определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение не является 3((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-^(2-морфолиноэтил)бензамидом или его фармацевтически приемлемой солью.
В одном варианте осуществления предоставляется соединение формул (I), (1Ь2), (1с2), (Ι62) или (1д2), как определено выше, или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение не является 3((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-^(2-морфолиноэтил)бензамидом.
- 13 025393
Примеры соединения формулы (I) выбирают из группы, состоящей из
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталии-1-ил)окси)пиридин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамида;
3- ((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамида;
4- ((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталии-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2гидроксиэтил)-3-метоксибензамида;
Ν-(2-(диметиламино)этил)-3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метоксибензамида;
Ν-(2-(диметиламино)этил)-3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамида;
3- ( (4-((4-(3-( 3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталии-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Н· (2-морфолиноэтил)бензамида;
- 14 025393
З-метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(3(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(6-метоксипиридин-3-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5· метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-метоксиэтил)бензамида;
1-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-(4 - ( (2- ( (3метокси-5-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пиримидин-4ил)окси)нафталин-1-ил)мочевины;
5- ( (4- ( (4- (3- (3- (трет-бутил) -1- (п-толил) -Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-2-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3- ( (6- ( (4- (3- (З-изопропил-1- (4-метоксифенил)-Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиридин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3- ( (4- ( (4- (3- (3- (трет-бутил) -1- (п-толил) -Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Νметилбензамида;
3-(4-(4-(3-(3-трет-бутил-1-(4-метоксифенил)-Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-илокси)пиримидин-2-иламино)-Νпропилбензамида;
3- ( (4- ( (4- (3- (3- (трет-бутил) -1- (п-толил) -Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-Шил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-И-(2(диметиламино)этил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамида;
3- ( (4- ( (4- (3- (З-изопропил-1- (4-метоксифенил)-Ш-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамида;
- 15 025393
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν12-морфолиноэтил) бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(З-метилоксетан-З-ил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν· (2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3-(З-метилоксетан-З-ил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метилтиофен-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-И-(2-(4метил-пиперазин-1-ил)этил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν,Ыдиметилбензамида;
1-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-(4-((2((3-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пиримидин-4ил)окси)нафталин-1-ил)мочевины;
Ы-(2-(диметиламино)этил)-3-((4-((4-(3-( 3-изопропил-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2(диметиламино)этил)-4-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метокси-№ (2-морфолиноэтил)бензамида;
Ы- (2-гидроксиэтил)-3-((4- ((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метоксибензамида;
- 16 025393
3- ((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2гидроксиэтил)-4-метоксибензамида;
Ν- (2-гидроксиэтил)-3-( (4- ( (4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензамида;
Ν-(2-(диметиламино)этил)-4-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(птолил)-ΙΗ-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метоксибензамида;
4- ((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-З-метокси-Ν(2-морфолиноэтил)бензамида;
- ( (4 - ( (4- (3- (3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-З-метокси-Ν(2-морфолиноэтил)бензамида;
4-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-З-метокси-Ν(2-морфолиноэтил)бензамида;
Ν-(2-гидроксиэтил)-4-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метилбензамида;
3- ( (4- ( (4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-ΙΗпиразол-5-ил) уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метоксибензамида;
3-бром-5-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-ΙΗпиразол- 5-ил) уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)бензамида;
3- ( (4- ( (4- (3- (3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2(диметиламино)этил)-5-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-( З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метил-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
- 17 025393
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пира зол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метил-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пира зол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамида;
З-метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(1-(п-толил)-3(трифторметил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-этил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-циклопропил-1-(п-толил)-ΙΗ-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-метокси-5-((4-((4-(3-(3-(1-метилциклопропил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)—Ы—(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(3-(2-метоксиэтокси)фенил) 1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(1-(3,4-диметилфенил)-3-изопропил-1Н-пиразол5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксиΝ-(2-морфолинозтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(б-метоксипиридин-3-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамида;
- 18 025393
З-метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3(тетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Фил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3(тетрагидрофуран-3-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-хлор-5-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамида;
З-хлор-5-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν· (2-морфолиноэтил)бензамида;
З-бром-5-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν· (2-морфолиноэтил)бензамида;
Ы—(2-гидроксиэтил)-3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2гидроксиэтил)-5-метоксибензамида;
Ы-(2-гидроксиэтил)-3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-метоксиэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-метоксиэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ыметил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамида;
1-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-(4-((2-((3метокси-5-(4-метилпиперазине-1-карбонил)фенил)амино)пиримидин4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевины;
- 19 025393
5-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-2-метокси-№ (2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((6-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((6-( (4- (3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-ΙΗ-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-этинил-5-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(б-метоксипиридин-3-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5· этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)-5- ((4-((4- (3- (3(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(1-(п-толил)-3(1,1, 1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(2-цианопропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
З-этинил-5-((4-((4-(3-(3-(2-метоксипропан-2-ил)-1-ίπтолил) -1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-(диметиламино)фенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
- 20 025393 (3)-3-( (4-( (4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (п-толил) -1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы(1-морфолинопропан-2-ил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (п-толил) -1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Б-этинил-Ν(2-метил-1-морфолинопропан-2-ил)бензамида;
(К)-3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы(1-морфолинопропан-2-ил)бензамида;
3-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (4-метоксифенил) -1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Н-(2-метоксиэтил)бензамида;
(5)-3-( (4 - ( (4-(3- (3- (трет-бутил) -1- (4-метоксифенил) -1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Ν-(1-метоксипропан-2-ил)бензамида;
З-метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3-(проп-1-ен-2ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида;
3- ((4-(2,3-дихлор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-ΙΗпиразол- 5-ил) уреидо) фенокси) пиримидин-2-ил) амино) -5-этинил-11(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-(2,3-дифтор-4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-5-зтинил-Ы(2-морфолиноэтил)бензамида;
3-((4-(2,3-дихлор-4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-ΙΗпиразол- 5-ил) уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинилбензамида;
3-((4-(2,3-дихлор-4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-12(диметиламино)этил)-5-этинилбензамида;
3-((6-(4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол5-ил)уреидо)-2,3-диметилфенокси)пиримидин-4-ил)амино)-5метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамида, и их фармацевтически приемлемых солей.
Так, в одном варианте осуществления соединение изобретения представляет собой 3-((4-((4-(3-(3изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси^(2-морфолиноэтил)бензамид или его фармацевтически приемлемую соль.
Подразумевается, что фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли соединений формулы (I) включают терапевтически активные нетоксичные кислотно-аддитивные соли, которые соединения формулы (I) способны образовывать. Эти фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть легко получены путем обработки формы свободного основания соответствующими кислотами в подходящем растворителе или смеси растворителей. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогеноводородные кислоты, например хлористо-водородная или бромисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорные кислоты и другие подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, гидроксиуксуная, молочная, пировиноградная, малоновая, янтарная, малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, паминосалициловая, памовая кислоты и другие подобные кислоты.
И наоборот, указанные солевые формы могут быть преобразованы путем обработки соответствующим основанием в форму свободного основания.
Используемые в изобретении стереоизомеры относятся к изомерным молекулам, которые имеют одинаковую формулу и последовательность соединенных атомов (химическое строение), но которые различаются только ориентациями их атомов в пространстве. Они отличаются от структурных изомеров, которые имеют одинаковую молекулярную формулу, но в которых химические связи и/или их порядок являются различными между атомами/группами. В стереоизомерах, порядок и химические связи входя- 21 025393 щих в молекулу атомов остаются одинаковыми, но различается их ориентация в пространстве.
Предполагается, что используемое далее определение соединений формулы (I) включает все таутомеры указанных соединений и сольваты указанных соединений (в том числе сольваты солей указанных соединений), если специально не указано иное. Примеры сольватов включают гидраты.
Предлагаемое изобретение охватывает пролекарства соединения формулы (I), то есть соединения, которые распадаются и/или метаболизируются ίη νίνο с образованием активного соединения формулы (I). Типичные примеры пролекарств включают обычные сложные эфиры и другие эфиры, такие как смешанные карбонатные эфиры, карбаматы, гликозиды, простые эфиры, ацетали и кетали.
В дополнительном аспекте изобретения предоставляется один или более метаболитов соединения формулы (I), в частности метаболит, который сохраняет один или более видов терапевтической активности соединения формулы (I). Используемый в изобретении метаболит представляет собой соединение, которое образуется ίη νίνο в результате метаболизма соединения формулы (I), такое как, но без ограничения, окислительные метаболиты и/или метаболиты, образующиеся, например, в результате Одеалкилирования.
Соединения изобретения включают соединения, в котором указанный атом является природным или не встречающимся в природе изотопом. В одном варианте осуществления изотоп является стабильным изотопом. Так, например, соединения изобретения включают дейтерийсодержащие соединения и другие подобные соединения.
Изобретение также охватывает все полиморфные формы раскрываемых соединений.
Общие способы синтеза, с помощью которых примеры соединений изобретения могут быть достаточно просто получены, приведены ниже. Эти пути синтеза являются конкретными примерами способов получения соединений формулы (I), где К3 и Кь, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо. Однако соединения формулы (I), имеющие другие определения для Ка и Кь, могут быть также получены аналогичными способами.
Так, например, соединения формулы (I) могут быть получены по общей методике (схема 1, путь синтеза А), посредством которой предшественник нафтиламин, представленный промежуточным соединением В, подвергают реакции сочетания с активированным электрофильным производным промежуточным соединением А*, полученным из соответствующего предшественника амина промежуточного соединения А (О=Н). Аминный радикал МКаКь в промежуточном соединении В либо содержит группу Υ, определенную выше для соединений формулы (I), либо ее защищенное производное. Фрагмент ЬО1 в промежуточном соединении А* представляет собой подходящую уходящую группу, такую как имидазолильный (Ο3Η3Ν2) или арилоксирадикал, например, феноксигруппу (С6Н5О). Для специалистов в данной области будет очевидно, что, в одних случаях, соединение, представленное промежуточным соединением А*, может быть выделено, и в других случаях, может представлять собой неустойчивое промежуточное соединение, то есть не выделяемое, но образующееся ίη кйи и используемое непосредственно.
В случае, когда ЬО1 представляет собой имидазолил, соединения, представленные промежуточным соединением А*, получают взаимодействием соответствующего амина с активирующим реагентом, таким как СЭк в неполярном апротонном растворителе, таком как ИСМ, и они легко образуются ίη κίίτι при комнатной температуре и затем подвергаются взаимодействию без выделения с соединениями, представленными промежуточным соединением В.
В случае, когда ЬО1 представляет собой арилокси, требуемый активированный амин может быть получен путем обработки предшественника амина подходящим хлорформиатом, таким как, например, фенилхлорформиат, в присутствии основания. В некоторых случаях, предпочтительно проводить процесс активации в условиях реакции типа Шоттена-Баумана, при которых используют водный раствор основания, такой как водный раствор карбоната натрия, в двухфазной системе. В результате, могут необязательно образовываться ίη кйи производные активированного амина, представленные промежуточным соединением А*, где ЬО1 представляет собой арилокси, например фенокси, и затем подвергаться взаимодействию без выделения с соединениями, представленными промежуточным соединением В, с получением соединений примеров формулы (I).
Соединения формулы (I) могут включать соединения, в которых заместитель Υ вводит одну или более функциональных групп, которые были защищены во время проведения реакции сочетания, и, поэтому, требуют последующего снятия защиты. Примером такой методики является удаление третбутоксикарбонильной (Вое) группы из вторичного амина путем обработки соответствующей кислотой.
Альтернативно, примеры соединений формулы (I) могут быть получены МАг реакцией замещения
- 22 025393 между электрофильным гетероарилоксифрагментом, представленным промежуточным соединением С, где ЬО2 представляет собой подходящую уходящую группу, обычно атом галогена, например атом хлора, и анилиновым компонентом, представленным промежуточным соединением Ό (схема 2, путь синтеза В). Реакция протекает в кислотных условиях, например, в присутствии р-Т8А, и в полярном апротонном растворителе, таком как ТГФ, и обычно при повышенных температурах, например при 70°С.
Необязательно, но примеры соединений изобретения могут быть получены общим синтетическим способом, включающим реакцию образования амидной связи между производным карбоновой кислоты и амином Ρ''ΡΙ:ιΝΗ (схема 3, пути синтеза С1 и С2), в результате которой ΝΡ'ΡΙ:ι включает Υ или его защищенную производную, и в последнем случае, соединения формулы (Ι) получают после соответствующей стадии(ий) снятия защиты. Амидное сочетание может быть проведено на алкиловом эфире, представленном промежуточным соединением Е (Рс=алкил), например метиловом эфире, с амином, в присутствии триалкилалюминия, например триметилалюминия (схема 3, путь синтеза С1). Реакцию удобно проводить в апротонном растворителе, таком как ТГФ, и при температурах окружающей среды или слегка повышенных температурах, обычно от комнатной температуры до 40°С.
Альтернативно, амидные продукты формулы (Ι) могут быть получены из исходных карбоновых кислот, представленных промежуточным соединением Р (Рс=Н), путем взаимодействия с амином Ρ'ΡΙ:ιΝΗ при воздействии амидного (пептидного) агента сочетания и в присутствии ненуклеофильного основания (схема 3, путь синтеза С2). Примером агента, часто используемого для таких преобразований, является НАТИ, и подходящие основания включают ЭГРЕА и Ν-метилморфолин и другие подобные основания. Реакцию амидирования обычно проводят в полярных апротонных растворителях, таких как ТГФ, и при температуре окружающей среды.
Соединения, представленные промежуточным соединением А, либо коммерчески доступны, либо могут быть получены способами синтеза, хорошо известными в данной области. Например, соединения с такой общей структурой могут быть получены конденсацией соответствующего гидразина, необязательно, в форме его защищенного производного или подходящей соли, с соответствующим кетонитрилом (схема 4).
Схема 4
НС1, ЕЮН [т.е. К*1 = »ег<-Ви]
О
Промежуточное соединение А
Примером соответствующей соли является гидрохлоридная соль, и подходящей защитной группой для такого преобразования является неустойчивый к действию кислоты карбамат, например Вос группа (Ра=трет-Ви), которая легко удаляется в условиях реакции циклизации, с образованием ш 8Йи исходного гидразина. Реакцию конденсации/циклизации удобно проводить в полярном протонном растворителе, таком как этанол, и в присутствии сильной кислоты, например концентрированной хлористо-водородной кислоты, и при повышенных температурах, обычно при кипячении с обратным холодильником.
В некоторых случаях может быть предпочтительным получать такие промежуточные соединения с помощью одной или другой альтернативных методик, которая лучше всего подходит с точки зрения доступности исходных веществ и/или функциональных групп, представленных в соединениях, и/или необходимости защиты одной или более функциональных групп в процессе проведения данного синтеза или при последующих преобразованиях. Например, соединения, представленные промежуточным соединением А, могут быть также получены катализируемой медью (Ι) реакцией сочетания между 1Н-пиразол-5- 23 025393 амином и подходящим ареном б-ЬО3, где О представляет собой необязательно замещенное ароматическое ядро, как определено для соединений формулы (I), и ЬО3 представляет собой галогенид, такой как атом йода (схема 5).
Схема 5
Реакцию удобно проводить в апротонном неполярном растворителе, таком как толуол, используя соль медиД) в качестве катализатора, например йодид медиД), и в присутствии лиганда, образующего с медью координационное соединение, такого как Ч,Ч-диметилциклогексан-1,2-диамин, и в присутствии основания, например карбоната калия, и обычно при повышенной температуре, например при кипячении с обратным холодильником.
Для специалистов в данной области будет очевидно, что предпочтительно преобразовывать одно описанное в изобретении промежуточное соединение в другой пример этого промежуточного соединения путем одного или более преобразований, которые хорошо известны и опробованы на практике, и в результате получать дополнительные соединения изобретения. В качестве примера такого способа, соединения, представленные промежуточным соединением А, где О представляет собой фенильное кольцо, замещенное алкоксигруппой (ОКе, где Ке представляет собой алкил), такой как метоксигруппа, могут быть преобразованы в соответствующий фенол реакцией О-деалкилирования (схема 6). Этот тип преобразования может быть осуществлен с использованием тригалогенида бора, например трибромида бора, в неполярном апротонном растворителе, таком как ЭСМ, при пониженных температурах, например, от -5 до 0°С.
щищенным производным (схема 7).
Дополнительной демонстрацией преобразования одного промежуточного соединения в другое соединение аналогичного типа является функционализация фенольных примеров описанного выше промежуточного соединения А. Например, промежуточные соединения такого строения могут легко быть алкилированы по фенольному кислороду взаимодействием с алкилгалогенидом, например с простым алкилбромидом. Альтернативно, фенольные продукты могут быть подвергнуты функционализации алкилгалогенидом, например азотистым ипритом, то есть солью 2-галогенэтиламина формулы КГ(СН2)2ЬО4, где ЬО4 представляет собой галоген, такой как хлор, и Кг выбирают таким образом, чтобы О(СН2)2КГ подходил под определение О в соединениях формулы (I) или являлся его соответствующим образом заСхема 7
К’<СН2|2ЦС4 ньс41 Основание или гг'(сн2)2он, Р(Аг)3 Κ»Ο20Ν=Ν0Ο2Κί [т.е. К® = изопропил] <(0(СН2)2Ке
Примером соли 2-галогенэтиламина, которая может быть использована при О-алкилированиях такого типа, является гидрохлорид 4-(2-хлорэтил)морфолина. Реакцию этого типа обычно проводят в полярных непротонных растворителях, таких как ацетонитрил или ДМФА, и в присутствии основания, такого как карбонат калия, и при нагревании, если это необходимо.
В некоторых случаях, может быть предпочтительным проведение О-алкилирования в условиях реакции Мицунобу путем взаимодействия фенола с соответствующим спиртом КГ(СН2)2ОН в присутствии триарилфосфина, такого как трифенилфосфин, вместе с подходящим диазодикарбоксилатным агентом сочетания, например диизопропилдиазен-1,2-дикарбоксилатом. Такие реакции обычно проводят в неполярных апротонных растворителях, таких как ТГФ, при температурах от пониженных до температуры окружающей среды, например от -50°С до комнатной температуры.
Соединения, представленные промежуточным соединением В, могут быть получены 8νΑγ реакциями замещения между электрофильными арилоксинафтиламинами, представленными промежуточным соединением О, где ЬО2 представляет собой подходящую уходящую группу, такую как атом галогена, например хлор, и анилиновым компонентом, представленным промежуточным соединением Ό (схема 8).
- 24 025393
Реакция сочетания может быть проведена с незащищенным нафтиламином (й=Н) или, необязательно, с целью контролирования хемоселективности и соответственно повышения эффективности, с его защищенным производным, промежуточным соединением О(Р) (О1=защитная группа). Реакция протекает в кислотных условиях, например, в присутствии р-Т§А, и в полярном апротонном растворителе, таком как ТГФ, и обычно при повышенных температурах, например при 70°С. В тех случаях, когда использована защитная группа, продукты, представленные промежуточным соединением В, затем выделяют на соответствующей стадии(ях) снятия защиты. Например, для защиты азота в нафтиламине (О1=третВиО2С) при проведении §νΆγ реакции сочетания, может быть использован карбамат, такой как Вос группа, и затем может быть удален путем обработки сильной кислотой, например ТТЛ.
Описанные выше способы синтеза (пути синтеза С1 и С2, схема 3) могут быть также использованы для получения соединений, представленных промежуточным соединением В (схема 9). Так, примеры промежуточного соединения В могут быть получены взаимодействием активированного производного карбоновой кислоты, представленного промежуточным соединением 1 (Кс=О1=Н), или его защищенным производным промежуточным соединением 1(Р) (О1 защитная группа), с амином КаКЬЫН, в результате чего ЫКаКЬ включает Υ или его защищенную производную. Альтернативно, может быть проведено взаимное преобразование эфира промежуточного соединения Н (Кс=алкил, О1=Н) или его защищенного производного промежуточного соединения Н(Р) (Кс=алкил, О1 защитная группа) и амина КаКЬЫН в присутствии триалкилалюминия, как описано выше.
Подходящей защитной группой для таких преобразований является производное уретана (О1=КЬО2С), и в этом случае, требуемые анилины (О1=Н), представленные промежуточным соединением В, получают после проведения соответствующей процедуры снятия защиты. Примером уретановой защитной группы, которая является подходящей для этой цели, является Вос группа (О1=трет-ВиО2С), которая может быть удалена после проведения реакции амидирования путем обработки кислотой.
Предшественники эфира и кислоты, представленные промежуточными соединениями Е и Р, могут быть получены путем использования таких же или аналогичных методик, описанных выше (схема 1), которые позволяют получать примеры соединений настоящего изобретения. Таким образом, промежуточные соединения Е и Р удобно получать взаимодействием промежуточных соединений Н и 1 соответственно с активированными производными аминопиразола, промежуточными соединениями А* (схема 10). Для специалистов в данной области будет очевидно, что эфиры, промежуточные соединения Н и Е, могут быть легко преобразованы в соответствующие карбоновые кислоты, промежуточные соединения 1 и Р, путем гидролиза в подходящих кислотных или щелочных условиях. Например, такое преобразование может быть осуществлено путем омыления с использованием основания, такого как гидроксид лития, в протонном растворителе или смеси растворителей, например ТГФ и воды, и при умеренно повышенных температурах, обычно от комнатной температуры до 40°С.
- 25 025393
Предшественники, представленные промежуточным соединением О, удобно получать §νΆγ реакцией замещения между 4-аминонафталин-1-олом, либо в форме соли, либо в форме соответствующего защищенного производного, и электрофильным гетероароматическим соединением (схема 11), например дигалогенгетероароматическим соединением, где обе уходящие группы ЬО2 и ЬО5 являются атомами галогена, такими как атомы хлора.
Подходящей защитной группой для такого преобразования является Вос группа (О1=трет-ВиО2С), которая может быть сохранена с целью регулирования хемоселективности в процессе одного или более последующих преобразований, как описано выше (схемы 8 и 9). Стадию замещения удобно проводить в полярном апротонном растворителе, таком как ацетонитрил, и в присутствии пространственно затрудненного основания, например ИВИ, и при пониженной температуре, например при 0°С.
Соединения, представленные промежуточными соединениями Н и 1, получали методами синтеза, аналогично описанным выше (схема 8) для получения промежуточных соединений В, используя содержащие фрагменты анилина кислоты или эфиры, представленные промежуточным соединением К, вместо промежуточного соединения И (схема 12). Аналогичным образом, может быть проведена катализируемая кислотой §νΆγ реакция сочетания незащищенного нафтиламина, промежуточного соединения О (О2=Н), или, необязательно, используя его защищенное производное, промежуточное соединение О(Р) (О1=защитная группа), для поддержания требуемой хемоселективности в этом и/или последующих преобразованиях. §νΑγ реакцию сочетания удобно проводить в полярном непротонном растворителе, например ТГФ, или ΙΡΑ, или ДМФА, и в присутствии кислотного катализатора, такого как ρ-ΤδΛ или ТРА, и чаще всего при повышенных температурах, обычно при 60-70°С.
Известные анилиновые компоненты, представленные промежуточным соединением И и промежуточным соединением К, либо коммерчески доступны, либо получены в соответствии с опубликованными в литературе методиками. Раскрытые в изобретении новые примеры соединений синтезировали из коммерчески доступных исходных соединений, используя взаимопреобразование функциональных групп, которое хорошо известно в данной области (схема 13). Например, (уходящая) группа ЬО6 может быть заменена на требуемую К1 группу путем §νΑγ реакции или реакции сочетания, катализируемой переходными металлами. В некоторых случаях, требуемые анилины можно легко получить из соответственно замещенных аминобензойных кислот (Кс=О2=Н) и/или аминобензойных эфиров (Кс=алкил О2=Н), которые могут быть необязательно Ν-защищенными (О2=РО) для обеспечения эффективного проведения последующих реакций.
Схема 13
Аминобензоймые кислоты;
КС = Н
Эфиры аминобензойной кислоты; г θ2 ~ Н Кс = Алкил
Промежуточное соединение К;
С2 = Н
Промежуточное _ соединение О;
б, = Н
Введение заместителя Кь вместо группы К1, определенной для соединения формулы (Ι), дает соединения, представленные промежуточным соединением К, которые могут быть подвергнуты гидролизу и реакции амидного сочетания, с получением примеров промежуточного соединения И после удаления
- 26 025393 защитной группы на азоте, если она использовалась.
Дополнительные примеры промежуточного соединения Ό могут быть легко получены из коммерчески доступных нитробензойных кислот, которые подвергают замещению подходящей уходящей группой ЬС6, такой как галоген, например фтор. Соединения этой структуры могут быть преобразованы в примеры требуемых анилинов путем последовательного проведения реакции амидного сочетания, затем 8-.,-Лг реакции замещения и реакции восстановления нитрогруппы в амин.
Соединения формулы (I), альтернативно, могут быть получены путем реакции сочетания промежуточного соединение В в соединение пиразол-5-изоцианата, промежуточное соединение Ь. В этом синтезе промежуточное соединение Ь, например, может быть удобно получено путем катализируемой меди(11) реакции Чана-Лама (см., например, ТейаЬебгоп Ьей. 1998, 39, 2941-2944), где эфир соответствующей пиразол-5-карбоновой кислоты подвергают реакции сочетания с арил- или гетероарилбороновыми кислотами. Полученный эфир Ν-арилпиразолкарбоновой кислоты омыляют с получением соответствующей карбоновой кислоты (промежуточного соединения М), которую преобразовывают в ацилазид (например, используя источник для уходящей группы и активированный азидный ион, такой как дифенилфосфоразидат (ΌΡΡΑ); см., например, ТейаЬебгоп 1974, 30, 2151-2157)) и затем проводят перегруппировку Куртиса с получением промежуточного соединения Ь.
Для специалистов в данной области будет очевидно, что, в некоторых случаях, теоретически предпочтительно использовать альтернативные защитные группы и/или проводить описанные выше преобразования таким же образом, но в другом порядке, для того чтобы повысить общую эффективность методов синтеза.
Защитные группы и способы их удаления описаны в монографии РгоЮсЦуе Сгоирз ίη Огдашс 8уп1Ьез1з, Ьу ТЬеобога Сгеепе и Ре1ег С.М. \УШ5. рцЪЬзЬеб Ьу 1оЬп \УПеу & 8опз 1пс; 41Ь Кеу Еб., 2006, Ι8ΒΝ-10: 0471697540.
Новые промежуточные соединения, описанные в изобретении, представляют собой аспект изобретения. В этой связи, дополнительные аспекты изобретения относятся к:
(ίί) соединению формулы (III)
где Υ и К1 являются такими, как определено выше, или его соли или его защищенному производному.
Соединения формул (II) и (III), которые могут быть приведены, включают соединения, в которых Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо, которое необязательно замещено одним или более заместителями, выбранными из С1.3алкила, С1-3-галогеналкила, циано и галогена;
- 27 025393
X представляет собой Ν;
Υ представляет собой ΝΡ2Ρ3 и/или Р1 представляет собой С2-6-алкинил.
Конкретные соединения формул (ΙΙ) и (ΙΙΙ), которые могут быть приведены, включают соединения формул (Па) и (Ша) соответственно
где X, Р1 и Υ являются такими, как определено выше.
Соединения формул (Па) и (Ша), которые могут быть приведены, включают соединения, в которых
X представляет собой Ν;
Υ представляет собой ^Н)-СН2СН2-(морфолин-1-ил) и/или
Р1 представляет собой С2-3-алкинил (например, -С=С-Н).
Защищенные производные соединений формул (ΙΙ) и (ΙΙΙ) включают соединения, в которых основная ΝΉ2 группа является защищенной. В этой связи, такие защищенные производные включают амиды или, в частности, карбаматы этих соединений. Например, эти защищенные производные включают соединения, в которых атом Н в ΝΉ2 группе заменен на
Р'-С(О)-, где Р' представляет собой Н, С!-8алкил, фенил или бензил, где последние две группы необязательно замещены одной или более группами, выбранными из галогена, гидроксила, метила и метокси; или
Р-О-С(О)-, где Р представляет собой трет-бутил, фенил, бензил или флуоренил, где последние три группы необязательно замещены одной или более группами, выбранными из галогена, гидроксила, метила и метокси.
Соединения формулы (Ι) являются ингибиторами р38 МАР киназы (в частности, альфа субтипа) и в одном аспекте соединения применяют при лечении воспалительных заболеваний, например хронического обструктивного заболевания легких и/или астмы.
Неожиданно, но, по меньшей мере, в некоторых вариантах осуществления соединения формулы (Ι) проявляют продолжительное действие и/или постоянство действия по сравнению с другими ранее раскрытыми аллостерическими ингибиторами р38 МАР киназы, такими как, например, ВШВ796 (РагдеШк, С. е! а1., №!иге 81гис!. Вю1., 2002, 9(4):268-272).
В одном варианте осуществления соединения формулы (Ι) сильно не ингибируют или не связывают О8К 3α, например они имеют значение Ιί\0 в отношении О8К 3α, равное 1500 нМ или более; например 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000 или 10000 нМ или более.
Используемое в данном описании понятие постоянство действия связано со скоростью диссоциации или константой диссоциации соединения при воздействии его на мишень (такую как рецептор). Низкая скорость диссоциации может приводить к постоянству действия.
Низкая скорость диссоциации в комбинации с высокой скоростью ассоциации обычно обеспечивает эффективное терапевтическое применение.
Предполагается, что соединения формулы (Ι) оказывают эффективное действие ш νί\Ό.
Разработанные до настоящего времени соединения известного уровня техники были обычно предназначены для перорального введения. Эта стратегия включает оптимизацию фармакокинетических свойств лекарственных веществ с целью достижения соответствующей длительности действия. Таким путем устанавливают и поддерживают достаточно высокую концентрацию лекарственного средства в период между введением доз для достижения устойчивого положительного клинического эффекта. Неизбежным последствием такого подхода является то, что все ткани организма и, в частности, печень и кишечник, могут подвергаться воздействию слишком высоких терапевтически активных концентраций лекарственного средства, независимо от того, оказывает или не оказывает на эти органы неблагоприятное воздействие заболевание, подвергаемое лечению.
Альтернативной стратегией является разработка стандартных способов лечения, при которых лекарственное средство вводится непосредственно в воспаленный орган, то есть использования местного введения. Пока еще этот подход не применяется для лечения всех хронических воспалительных заболеваний, он пока используется при легочных заболеваниях, таких как астма и хроническое обструктивное заболевание легких; при кожных заболеваниях, например против атопического дерматита и псориаза; при болезненных состояниях носовой полости, типичным представителем которых является аллергиче- 28 025393 ский ринит; и при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, таких как язвенный колит и болезнь Крона, и воспалительных заболеваниях глаз, таких как увеит.
При местной терапии одним способом достижения эффективности является применение лекарственного средства, которое имеет продолжительную длительность действия и удерживается в соответствующем органе, что в результате минимизирует риск возникновения системной токсичности. Альтернативно, в некоторых случаях, может быть разработана лекарственная форма, которая образует резервуар действующего лекарственного средства, способный постоянно поддерживать требуемые воздействия лекарственного средства. Примером первого подхода является антихолинергическое средство тиотропий (спирива). Это соединение вводят местно в легкие для лечения хронического обструктивного заболевания легких, и оно имеет исключительно высокую аффинность в отношении рецептора-мишени, следствием чего является очень низкая скорость диссоциации, и, следовательно, характеризуется продолжительной длительностью действия.
В одном аспекте изобретения соединения формулы (Ι) специально применяют для местного введения, такого как местное введение в легкие, в частности, для лечения респираторного заболевания, например хронических респираторных заболеваний, таких как хроническое обструктивное заболевание легких и/или астма.
В одном варианте осуществления соединения формулы (Ι) применяют для пациентов, восприимчивых к лечению кортикостероидом, но которые стали резистентными к таким схемам лечения.
Соединения формулы (Ι) могут обладать противовирусными свойствами, например способностью предотвращать инфицирование клеток (таких как клетки респираторного эпителия) пикорнавирусом, в частности риновирусом, вирусом гриппа или респираторно-синцитиальным вирусом.
Поэтому, считают, что соединение является противовирусным средством, в частности, применяемым для профилактики, лечения или уменьшения интенсивности пикорнавирусных инфекций, таких как риновирусная инфекция, грипп или респираторно-синцитиальная вирусная инфекция.
В одном варианте осуществления соединения формулы (Ι) способны уменьшать воспаление, вызванное вирусной инфекцией, такой как риновирусная инфекция, и, в частности, вирусными инфекциями, которые в результате приводят к высвобождению цитокинов, таких как ΙΕ-8, в частности ίη νίνο. Например, эта активность может быть определена ίη νίίτο, используя исследование высвобождения ΙΕ-8, индуцированного риновирусом, описанное в примерах изобретения.
В одном варианте осуществления соединения формулы (Ι) способны уменьшать экспрессию Ι0ΑΜ1, вызванную риновирусом, в частности ίη νίνο. Ιί'ΆΜ1 представляет собой рецепторный механизм, используемый так называемыми большими бороздками серологических типов риновирусов для инфицирования клеток. Эта активность может быть определена, например, методом, описанным в примерах изобретения.
Предполагается, что приведенные выше свойства делают соединения формулы (Ι) особенно подходящими для применения при лечении (в том числе профилактики) обострений воспалительных заболеваний, в частности вирусных обострений, или при лечении вирусных инфекций у пациентов с одним или более хроническими болезненными состояниями, такими как хроническая сердечная недостаточность, хроническое обструктивное заболевание легких, астма, диабет, рак, и/или у пациентов после курса иммуносупрессивной терапии, например после трансплантации органа. Такое применение может осуществляться в комбинации с противовирусными средствами, такими как занамивир, осельтамивир (например, осельтамивира фосфат), перамивир или ланинамивир.
В целом, соединения формулы (Ι) могут применяться при лечении одного или более болезненных состояний, характеризующихся наличием воспалительного компонента, который соответственно может быть подвергнут местному или локальному лечению.
В частности, соединения формулы (Ι) могут применяться при лечении одного или более респираторных заболеваний, включающих хроническое обструктивное заболевание легких (в том числе хронический бронхит и эмфизему), астму, детскую астму, кистозный фиброз поджелудочной железы, саркоидоз, идиопатический легочный фиброз, аллергический ринит, ринит и синусит, в частности астму или хроническое обструктивное заболевание легких (в том числе хронический бронхит и эмфизему).
Соединения формулы (Ι) могут применяться при лечении глазных заболеваний или расстройств, включающих сухой кератоконъюнктивит (сухость глаз), аллергический конъюнктивит, конъюнктивит, диабетическую ретинопатию, макулярный отек (включая влажный макулярный отек и сухой макулярный отек), воспаление после операции по удалению катаракты или, в частности, увеит (включая задний увеит, передний увеит и панувеит) (например, глазные заболевания или расстройства, включающие аллергический конъюнктивит, конъюнктивит, диабетическую ретинопатию, макулярный отек (включая влажный макулярный отек и сухой макулярный отек), воспаление после операции по удалению катаракты или, в частности, увеит (включая задний увеит, передний увеит и панувеит)).
Соединения формулы (Ι) могут применяться при лечении заболеваний или нарушений кожи, включающих аллергический дерматит, контактный дерматит, атопический дерматит или псориаз.
Соединения формулы (Ι) могут применяться при лечении желудочно-кишечных заболеваний или расстройств, включающих язвенный колит или болезнь Крона.
- 29 025393
Соединения формулы (I) могут применяться при лечении заболеваний или поражений суставов, включающих ревматоидный артрит или остеоартрит и, в частности, вторичное воспаление суставов при таких болезненных состояниях.
Соединения формулы (I) могут применяться при лечении рака, включая рак желудка, и для ингибирования роста и метастазирования опухолей, включая немелкоклеточную карциному легких, карциному желудка, колоректальные карциномы и злокачественную меланому.
Также предполагается, что соединения формулы (I) могут применяться при лечении ряда других болезненных состояний, включающих периодонтит, гингивит и фарингит.
Соединения формулы (I) могут также восстанавливать восприимчивость страдающего болезненным состоянием пациента к лечению кортикостероидом, после того как у страдающего болезненным состоянием пациента уже развилась резистентность к такому лечению.
Кроме того, настоящее изобретение предлагает фармацевтические композиции, содержащие соединение согласно изобретению, необязательно, в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.
Разбавители и носители могут включать такие, которые применяют для парентерального, перорального, местного, мукозального и ректального введения.
Настоящее изобретение также предоставляет способ получения такой фармацевтической композиции (например, фармацевтической композиции для парентерального, перорального, местного, мукозального и ректального введения), где указанный способ включает смешение ингредиентов.
Как указано выше, такие композиции могут быть приготовлены, например, для парентерального, подкожного, внутримышечного, внутривенного, внутрисуставного или околосуставного введения, в частности, в форме жидких растворов или суспензий; для перорального введения, в частности, в форме таблеток или капсул; для местного введения, например пульмонального или интраназального введения, в частности, в форме порошков, назальных капель или аэрозолей, и трансдермального введения; для мукозального введения, например, в слизистую оболочку ротовой полости, под язык или слизистую оболочку влагалища, и для ректального введения, например, в форме суппозитория.
Композиции могут быть удобно введены в виде единичной дозированной формы и могут быть приготовлены любым из способов, известных в фармацевтике, например, описанных в монографии Кештдΐοη'δ РЬагтасеиЬса1 8с1еисе5, 171Н еб., Маск РиЬНкЫид Сотрапу, ЕакГои, РА., (1985). Лекарственные формы для парентерального введения могут содержать в качестве эксципиентов стерильную воду или физиологический раствор, алкиленгликоли, такие как пропиленгликоль, полиалкиленгликоли, такие как полиэтиленгликоль, масла растительного происхождения, гидрированные нафталины и другие подобные вещества. Лекарственные формы для назального введения могут быть твердыми и могут содержать эксципиенты, например лактозу или декстран, или могут быть водными или масляными растворами для применения в форме назальных капель или дозируемых спреев. Для буккального введения типичные эксципиенты включают сахара, стеарат кальция, стеарат магния, желатинизированный крахмал и другие подобные вещества.
Композиции, применяемые для перорального введения, могут включать один или более физиологически совместимых носителей и/или эксципиентов и могут быть в твердой или жидкой форме. Таблетки и капсулы могут быть приготовлены вместе со связующими веществами, например сиропом, гуммиарабиком, желатином, сорбитом, трагакантовой камедью или поливинилпироллидоном; наполнителями, такими как лактоза, сахароза, кукурузный крахмал, фосфат кальция, сорбит или глицин; лубрикантами, такими как стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния; и поверхностно-активными веществами, такими как лаурилсульфат натрия. Жидкие композиции могут содержать традиционные добавки, такие как суспендирующие агенты, например сироп сорбита, метилцеллюлоза, сахарный сироп, желатин, карбоксиметилцеллюлоза или пищевые жиры; эмульгаторы, такие как лецитин или гуммиарабик; растительные масла, такие как миндальное масло, кокосовое масло, жир печени трески или арахисовое масло; консерванты, такие как бутилированный гидроксианизол (ВНА) и бутилированный гидрокситолуол (ВНТ). Жидкие композиции могут быть инкапсулированы, например, в желатин для получения единичной дозированной формы.
Твердые пероральные лекарственные формы включают таблетки, состоящие из двух частей капсулы с твердой оболочкой и мягкие эластичные желатиновые капсулы (8ЕО).
Состав сухой оболочки обычно включает приблизительно от 40 до 60% мас./мас. желатина, приблизительно от 20 до 30% пластификатора (такого как глицерин, сорбит или пропиленгликоль) и приблизительно от 30 до 40% воды. Могут также присутствовать другие вещества, такие как консерванты, красители, замутняющие вещества и ароматизаторы. Жидкий заполняющий материал включает твердое лекарственное средство, которое было растворено, солюбилизировано или диспергировано (с помощью диспергирующих агентов, таких как пчелиный воск, гидрированное касторовое масло или полиэтиленгликоль 4000), или жидкое лекарственное средство в средах или комбинациях сред, таких как минеральное масло, растительные масла, триглицериды, гликоли, полиолы и поверхностно-активные вещества.
Соединение формулы (I) удобно вводить местно в легкое, глаз или кишечник. Поэтому авторы изобретения предлагают фармацевтическую композицию, содержащую соединение изобретения необяза- 30 025393 тельно в комбинации с одним или более приемлемых с точки зрения местного введения разбавителей или носителей.
Местное введение в легкое может достигаться за счет применения аэрозольной лекарственной формы. Аэрозольные лекарственные формы обычно включают активный ингредиент, суспендированный или растворенный в подходящем аэрозольном пропелленте, таком как хлорфторуглерод (СРС) или гидрофторуглерод (НРС). Подходящие СРС пропелленты включают трихлормонофторметан (пропеллент 11), дихлортетрафторметан (пропеллент 114) и дихлордифторметан (пропеллент 12). Подходящие НРС пропелленты включают тетрафторэтан (НРС-134а) и гептафторпропан (НРС-227). Пропеллент обычно составляет от 40 до 99,5%, например от 40 до 90% мас./мас., от суммарной массы ингаляционной композиции. Лекарственная форма может включать эксципиенты, в том числе сорастворители (например, этанол) и поверхностно-активные вещества (например, лецитин, триолеат сорбитана и другие подобные вещества). Аэрозольные лекарственные формы фасуют в баллончики, и соответствующая доза вводится с помощью дозирующего клапана (например, производимого фирмами Векрак, Уа1о15 или 3М).
Местное введение в легкое может также достигаться за счет применения не находящейся под давлением лекарственной формы, такой как водный раствор или суспензия. Она может быть введена с помощью небулайзера. Местное введение в легкое может также достигаться за счет применения лекарственной формы в виде сухого порошка. Лекарственная форма в виде сухого порошка может содержать соединение изобретения в тонко измельченном виде, обычно с масс-медианным аэродинамическим диаметром (ММАЭ) 1-10 мкм. Лекарственная форма обычно может содержать приемлемый с точки зрения местного введения разбавитель, такой как лактоза, обычно с большим размером частиц, например, с ММАЭ порядка 100 мкм или более. Примеры систем доставки сухого порошка включают 5>РШНАЕЕК, ОЮКНАЕ-ЕК, ТиКВОНАЬЕК, 1ЖКЕ§ и СЫСКНАЬЕК..
Соединения настоящего изобретения (то есть определенные выше соединения формул (I), (Ш1), Ца2), (ГЫ), (ГЬ2), (Гс1), (Гс2), (И1), (И2), (Ге1), (Ге2), (Γί^1), (Γί2), (Γ§1), (Σ§2), (ГЬ1) или (ГЬ2) или их фармацевтически приемлемые соли) могут быть также введены ректально, например, в форме суппозиториев или клизм, которые содержат водные или масляные растворы, а также суспензии и эмульсии. Такие композиции готовят стандартными способами, хорошо известными специалистам в данной области. Например, суппозитории могут быть получены смешиванием активного ингредиента с традиционной суппозиторной основой, такой как масло какао или другие глицериды. В этом случае, лекарственное средство смешивают с подходящим не обладающим раздражающим действием эксципиентом, который является твердым при обычных температурах, но становится жидким при температуре в прямой кишке и, следовательно, будет плавиться в прямой кишке с высвобождением лекарственного средства. Такими материалами являются масло какао и полиэтиленгликоли.
Обычно для композиций, предназначенных для местного введения в глаз в форме глазных капель или глазных мазей, суммарное количество ингибитора будет составлять приблизительно от 0,0001 до менее чем 4,0% (мас./мас.).
В случае местного введения в глаз предпочтительно, чтобы вводимые композиции согласно настоящему изобретению готовили в виде растворов, суспензий, эмульсий и других лекарственных форм. Водные растворы обычно являются предпочтительными, исходя из легкости приготовления, а также удобства для пациента при введении таких композиций путем закапывания одной или двух капель раствора в пораженные заболеванием глаза. Однако композиции могут также представлять собой суспензии, вязкие или полувязкие гели или другие типы твердых или полутвердых композиций. Суспензии могут быть предпочтительной формой для соединений, которые плохо растворимы в воде.
Альтернативным способом введения в глаз является инъекция в стекловидное тело глаза раствора или суспензии соединения настоящего изобретения. Кроме того, соединение настоящего изобретения может также быть введено с помощью офтальмологических имплантатов и вкладышей.
Вводимые композиции согласно настоящему изобретению могут также включать различные другие ингредиенты, включая, но, не ограничиваясь ими, вещества, регулирующие тоничность, буферы, поверхностно-активные вещества, стабилизирующий полимер, консерванты, сорастворители и загустители. Предпочтительные фармацевтические композиции настоящего изобретения содержат ингибитор вместе с веществом, регулирующим тоничность, и буфером. Фармацевтические композиции настоящего изобретения могут дополнительно необязательно содержать поверхностно-активное вещество и/или паллиативное средство и/или стабилизирующий полимер.
В случае офтальмологических композиций для корректировки тоничности композиции предпочтительно до тоничности натуральных слез могут быть использованы различные вещества, регулирующие тоничность. Для достижения физиологической тоничности в композицию могут быть добавлены, например, хлорид натрия, хлорид калия, хлорид магния, хлорид кальция, простые сахара, такие как декстроза, фруктоза, галактоза, и/или простые полиолы, такие как сахароспирты маннит, сорбит, ксилит, лактит, изомальтит, мальтит, и гидрированные гидролизаты крахмала. Количество вещества, регулирующего тоничность, будет варьировать в зависимости от добавляемого конкретного вещества. Обычно, однако, композиции могут содержать вещество, регулирующее тоничность, в количестве, достаточном для того, чтобы готовая композиция имела приемлемую с офтальмологической точки зрения осмоляльность
- 31 025393 (обычно около 150-450 мосмоль, предпочтительно 250-350 мосмоль и наиболее предпочтительно приблизительно 290 мосмоль). Обычно вещества изобретения, регулирующие тоничность, будут присутствовать в диапазоне от 2 до 4% мас./мас. Предпочтительные вещества изобретения, регулирующие тоничность, включают простые сахара или сахароспирты, такие как Ό-маннит.
Для предотвращения сдвига рН в условиях хранения к композициям может быть добавлена соответствующая буферная система (например, фосфат натрия, ацетат натрия, цитрат натрия, борат натрия или борная кислота). Конкретная концентрация может варьировать в зависимости от используемого вещества. Однако предпочтительно, чтобы выбранный буфер поддерживал заданный рН в интервале от 5 до 8 и более предпочтительно от 5 до 7.
Поверхностно-активные вещества могут необязательно использоваться для доставки более высоких концентраций ингибитора. Функция поверхностно-активных веществ заключается в солюбилизации ингибитора и стабилизации коллоидной дисперсии, такой как мицеллярный раствор, микроэмульсия, эмульсия и суспензия. Примеры поверхностно-активных веществ, которые могут необязательно быть использованы, включают полисорбат, полоксамер, полиосил 40 стеарат, полиоксилированное касторовое масло, тилоксапол, тритон и монолаурат сорбитана.
Предпочтительные поверхностно-активные вещества, используемые в изобретении, имеют гидрофильно-липофильный баланс НЬВ в диапазоне от 12,4 до 13,2, и приемлемыми для офтальмологического применения являются такие вещества, как ТгЪопХ114 и тилоксапол.
Дополнительными средствами, которые могут быть добавлены к офтальмологическим композициям настоящего изобретения, являются мягчительные средства, которые действуют в качестве стабилизирующего полимера. Стабилизирующий полимер должен быть ионным/заряженным полимером преимущественно для местного офтальмологического применения, более конкретно, полимером, который несет отрицательный заряд на своей поверхности, который может проявлять дзета-потенциал (-)10-50 мв для физической стабильности, и который способен образовывать дисперсию в воде (то есть должен быть растворимым в воде). Предпочтительным стабилизирующим полимером изобретения может быть полиэлектролит, или полиэлектролиты, при наличии более одного, из семейства сшитых полиакрилатов, таких как карбомеры и Рети1еп(К), в частности СагЬотег 974р (полиакриловая кислота), при концентрации 0,1-0,5% мас./мас.
Для увеличения вязкости носителя в офтальмологические композиции настоящего изобретения могут также быть добавлены другие соединения. Примеры веществ, увеличивающих вязкость, включают, но, не ограничиваясь ими, полисахариды, такие как гиалуроновая кислота и ее соли, хондроитинсульфат и его соли, декстраны, различные полимеры семейства целлюлозы, виниловые полимеры и полимеры акриловой кислоты.
Офтальмологические продукты для местного применения обычно расфасовывают в виде многодозовой формы. В связи с этим, требуются консерванты для предотвращения микробной контаминации в процессе применения. Подходящие консерванты включают бензалконийхлорид, хлорбутанол, бензододецинийбромид, метилпарабен, пропилпарабен, фенилэтиловый спирт, эдентат динатрия, сорбиновую кислоту, поликватерний-1 или другие вещества, известные специалистам в данной области. Такие консерванты обычно используют при концентрации от 0,001 до 1,0% в отношении массы к объему. Композиции одноразовой дозы настоящего изобретения могут быть стерильными, и обычно без добавления консервантов. Такие композиции, поэтому, обычно не содержат консервантов.
Для лечащего врача или другого специалиста в области медицины не будет представлять труда определить подходящую дозу для соединения изобретения и соответственно количество соединения изобретения, которое необходимо вводить в любой конкретный фармацевтический препарат (либо в единичную дозированную форму, либо в другие формы).
Соединение формулы (Ι) обладают терапевтической активностью. В дополнительном аспекте настоящее изобретение предоставляет раскрываемое соединение для применения в качестве лекарственного средства. Поэтому, в дополнительном аспекте настоящее изобретение предоставляет описываемое соединение для применения при лечении одного или более из приведенных выше болезненных состояний.
В одном варианте осуществления лекарственная форма в виде сухого порошка согласно настоящему изобретению включает стеарат магния и кальция. Такие лекарственные формы могут обладать исключительной химической и/или физической стабильностью, особенно, когда такие формы также содержат лактозу.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение предоставляет применение описанного в изобретении соединения для производства лекарственного препарата для лечения одного или более приведенных выше болезненных состояний.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение предоставляет способ лечения одного или более приведенных выше болезненных состояний, включающий введение субъекту эффективного количества соединения изобретения или фармацевтической композиции, содержащей соединение.
Предполагается, что термин лечение включает профилактику, а также терапевтическое лечение. Лечение болезненных состояний или расстройств также включает лечение их обострений.
- 32 025393
Соединение изобретения может также быть введено в комбинации с одним или более другими активными ингредиентами, например активными ингредиентами, применяемыми для лечения приведенных выше болезненных состояний.
Например, возможные комбинации для лечения респираторных заболеваний включают комбинации со стероидами (например, будезонидом, беклометазона дипропионатом, флутиказона пропионатом, мометазона фуроатом, флутиказона фуроатом), бета агонистами (например, тербуталином, сальбутамолом, салметеролом, формотеролом), ксантинами (например, теофиллином), антихолинергическим средством (например, ипратропием или тиотропием, например, в форме бромида) и противовирусными средствами (например, занамивиром, осельтамивиром, например, в форме фосфата, перамивиром и ланинамивиром).
Кроме того, для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта (таких как болезнь Крона или язвенный колит), возможные комбинации включают комбинации, например, с одним или более средствами, выбранными из перечня, включающего
5-аминосалициловую кислоту или ее пролекарство (такие как сульфасалазин, олсалазин или бисалазид);
кортикостероиды (например, преднизолон, метилпреднизолон, или будезонид); иммунодепрессанты (например, циклоспорин, такролимус, метотрексат, азатиоприн или 6меркаптопурин);
анти-ΤΝΡα антитела (например, инфликсимаб, адалимумаб, цертолизумаб пегол или голимумаб); анти-1Ь12/1Ь23 антитела (например, устекинумаб) или низкомолекулярные ингибиторы 1Ь12/1Ь23 (например, арпилимод);
анти-а4в7 антитела (например, ведолизумаб);
МА6СлМ-1 блокаторы (например, РР-00547659);
антитела против молекулы клеточной адгезии а4-интегрина (например, натализумаб); антитела против субединицы рецептора 1Ь2 (например, даклизумаб или базиликсимаб); ингибиторы 1ЛК3 (например, тофацитиниб или К348);
ингибиторы §ук и их пролекарства (например, фостаматиниб и К-406); ингибиторы фосфодиэстеразы-4 (например, тетомиласт);
НМРЬ-004;
пробнотики;
дерсалазин;
семапимод/СР81-2364 и ингибиторы протеинкиназы С (например, АЕВ-071).
Для лечения заболеваний глаз (таких как сухой кератоконъюнктивит или увеит), возможные комбинации включают комбинации, например, с одним или более средствами, выбранными из перечня, включающего кортикостероиды (например, дексаметазон, преднизолон, триамцинолона ацетонид, дифлупреднат или флуоцинолона ацетонид);
иммунодепрессанты (например, циклоспорин, воклоспорин, азатиоприн, метотрексат, мофетила микофенолат или такролимус);
анти-ΤΝΡα антитела (например, инфликсимаб, адалимумаб, цертолизумаб пегол, Е8ВА-105 или голимумаб);
анти-1Ь-17А антитела (например, секукинумаб); ингибиторы тТОК (например, сиролимус);
УСХ-1027;
ингибиторы 1ЛК3 (например, тофацитиниб или К348) и ингибиторы протеинкинызы С (например, АЕВ-071).
Поэтому, другой аспект изобретения предоставляет соединение формулы (I) в комбинации с одним или более дополнительными активными ингредиентами, например с одним или более активными ингредиентами, описанными выше.
Аналогично, другой аспект изобретения предоставляет комбинированный продукт, включающий:
(A) соединение настоящего изобретения (то есть соединение формул (I), (1а1), (1а2), (1Ы), (1Ь2), (1с1), (1с2), (161), (162), (1е1), (1е2), (ΙΓ1), (ΙΓ2), (1д1), (1д2), (ΪΗ1) или (1Ь2), определенное выше, или его фармацевтически приемлемую соль);
(B) другое терапевтическое средство, где каждый из компонентов (А) и (В) изготовлен в виде смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем.
В этом аспекте изобретения комбинированный продукт может представлять собой либо единственную (комбинированную) фармацевтическую композицию, либо набор активных компонентов.
Таким образом, данный аспект изобретения охватывает фармацевтическую композицию, содержащую соединение настоящего изобретения и другое терапевтическое средство в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем (где данная композиция в данном описании называется комбинированным препаратом).
- 33 025393
Изобретение также охватывает набор активных компонентов, включающий:
(ί) фармацевтическую композицию, содержащую соединение настоящего изобретения в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем; и (ίί) фармацевтическую композицию, содержащую другое терапевтическое средство в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем, где каждый из компонентов (ί) и (ίί) предоставлен в форме, которая подходит для введения в сочетании с другой формой.
Компонент (ί) набора активных компонентов представляет собой, таким образом, приведенный выше компонент (Α) в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем. Аналогично, компонент (ίί) представляет собой приведенный выше компонент (В) в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом, разбавителем или носителем.
Другое терапевтическое средство (то есть приведенный выше компонент (В)) может представлять собой, например, любое из средств, приведенных выше в связи с лечением респираторных заболеваний, заболеваний желудочно-кишечного тракта и глазных заболеваний.
Комбинированный продукт (либо комбинированный препарат, либо набор активных компонентов) данного аспекта изобретения может быть использован при лечении или профилактике воспалительного заболевания (например, воспалительных заболеваний, приведенных выше, таких как респираторные заболевания, включающие хроническое обструктивное заболевание легких (в том числе хронический бронхит и эмфизему), астму, детскую астму, кистозный фиброз поджелудочной железы, саркоидоз, идиопатический легочный фиброз, аллергический ринит, ринит и синусит, в частности астму или хроническое обструктивное заболевание легких (в том числе хронический бронхит и эмфизему);
заболевания или поражения глаз, включающие аллергический конъюнктивит, конъюнктивит, сухой кератоконъюнктивит (сухость глаз), глаукому, диабетическую ретинопатию, макулярный отек (включая диабетический макулярный отек), окклюзию центральной вены сетчатки (СКУО), сухую или влажную форму возрастной макулярной дегенерации (АМИ), воспаление после операции по удалению катаракты или, в частности, увеит (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжение трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток;
заболевания или поражения кожи, включающие аллергический дерматит, контактный дерматит, атопический дерматит или псориаз; и заболевания или поражения желудочно-кишечного тракта, включающие глютензависимую энтеропатию (целиакию), эозинофильный эзофагит, интестинальную реакцию трансплантат против хозяина или, в частности, язвенный колит или болезнь Крона.
Описанные аспекты изобретения (например, приведенные выше соединение, комбинации, способы и применения) могут обладать преимуществом, которое заключается в том, что при лечении описанных в изобретении болезненных состояний, они могут быть более удобными для врача или пациента, могут быть более эффективными, могут быть менее токсичными, обладать более длительным периодом действия, иметь более высокую селективность, иметь более широкий спектр действия, могут быть более активными, вызывать меньше побочных эффектов, обладать лучшими фармакокинетическими и/или фармакодинамическими свойствами, иметь более подходящую морфологию в твердом состоянии, иметь более высокую стабильность или могут иметь другие полезные фармакологические свойства по сравнению с аналогичными соединениями, комбинациями, способами (лечения) или применениями известного уровня техники, при использовании для лечения указанных болезненных состояний или других заболеваний.
По сравнению с соединениями известного уровня техники, соединения формулы (I) могут дополнительно (или альтернативно) обладать свойствами, которые особенно подходят для местного/локального введения (например, после местного/локального введения, возникают высокие концентрации соединений формулы (I) в ткани-мишени, но низкие концентрации в плазме и/или происходит быстрое выведение соединений формулы (I) из плазмы);
иметь более низкую вероятность экстраваскулярного воздействия после внутривенного введения (например, вследствие низкого объема распределения для соединений формулы (I));
проявлять очень высокую активность в отношении выбранных киназ (например, 8ук и/или панели киназ, таких как 8ук, 8гс и р38 МАРКа);
характеризоваться пониженным индуцированием β-катенина и/или ингибированием митоза в клетках;
не проявлять совсем или проявлять в меньшей степени изменяющееся во времени ингибирование в отношении представителей суперсемейства цитохрома Р450 и/или продуцировать меньше проблемных (например, менее токсичных) метаболитов, например, после введения пациенту.
- 34 025393
Экспериментальный раздел
Используемые в изобретении условные обозначения определены ниже (табл. 1). Предполагается, что любые условные обозначения, которые не приводятся ниже в таблице, имеют общепринятые значения.
Таблица 1
Условные обозначения
Ас ОН
ВОДН .
АТФ
В АЬГ ушир.
ΒΞΑ
СаДСагД®
СМ
СОВ-ϋ с-Згс д
ΌΟΜ
ЭМЕМ
ДМСО
М5 б-иэз7 клетки
1Е5 + )
ЕД
ЕДОАс
ЕС5
ГРЕТ
СР
СЗКЗсс
НБЕС ч
НРБ
НРУ
ΙΒΡ
1САМ-1
1Ь-8
ΑΝΚ
ЬРЗ ίΜ+Η)+ МАРК
МАРКАР-К2
Ме
МеСЫ
МеОН
МГц
ММАБ
ΜΟΙ мин
МРО
Ледяная уксусная кислота водный аденозин-5’-трифосфат жидкость бронхоальвеолярного лаважа уширенный бычий сывороточный альбумин каталитический картридж
Ι,1-карбонилдиимидазол хроническое обструктивное заболевание легких киназа в клетках саркомы дуплет дихлорметан среда Игла, модифицированная по способу
Дульбекко диметилсульфоксид декстран сульфата натрия дифференцированные форболмиристатацетатом и-937 клетки ионизация электрораспылением, режим с положительными ионами этил этилацетат фетальная бычья сыворотка метод резонансного переноса энергии флуоресценции глюкокортикоидный рецептор гликоген-синтаза-киназа-Зсс первичные эпителиальные клетки бронхов человека час (часы) пероксидаза хрена риновирус человека воспалительное заболевание кишечника молекула межклеточной адгезии 1 интерлейкин-8 с-Дип Ν-терминальная киназа липополисахарид протонированныи молекулярный ион митоген-активированная протеинкиназа митоген-активированная протеинкиназаактивированная протеинкиназа-2 метил ацетонитрил метанол мегагерц масс-медианный аэродинамический диаметр множественность заражения минут а (минут) миелопероксидаза
- 35 025393 мтт т/ζ:
ЯМР
ΝΤ
РВМС
РВЗ
РС
РН
РИА
РМА р-ТЗА
КВ кт
ОФ ВЭЖХ
Р.ЗУ с
нас.
ЗСХ
3ϋ3
5мАг
Зук
Т
ТЗР тввмз
ΤΟΙϋ50
ТГФ тмв
ΤΝΒ3
ΤΝΓα
ИВ
3- (4/5-диметилтиазол-2-ил)-2,5дифенилтетразолийбромид отношение массы к заряду ядерный магнитный резонанс (спектроскопия) испытания не проводились мононуклеарные клетки периферической крови забуференный фосфатом физиологический раствор защитная группа фенил фит о г ема г глютинин форболмиристатацетат
4- метилбензолсульфоновая кислота квартет комнатная температура высокоэффективная жидкостная хроматография с обращенной фазой респираторно-синцитиальный вирус синглет насыщенный твердые катионообменники (смолы) додецилсульфат натрия нуклеофильное ароматическое замещение тирозинкиназы клеток селезенки триплет циклический ангидрид 1-пропанфосфорной кислоты трет-бутилдиметилсилил доза 50% заражения культуры ткани тетрагидрофуран
3,3’, 5,5’-тетраметилбензидин
2,4,6-тринитробензолсульфоновая кислота фактор некроза опухолей альфа промывочный буфер
Общие способы
Все исходные вещества и растворители приобретали у фирм-производителей или синтезировали в соответствии с методиками, опубликованными в литературе. Если не указано иное, то все реакции проводили при перемешивании. Органические растворы сушили стандартным методом над безводным сульфатом магния. Реакции гидрирования осуществляли в проточном реакторе ТНа1с5 Н-сиЬе при указанных условиях.
Колоночную хроматографию осуществляли на предварительно загруженных диоксидом кремния (230-400 меш, 40-63 мкм) картриджах, используя указанные количества. Твердые катионообменники (8СХ) приобретали у фирмы 8ире1со и обрабатывали 1 М хлористо-водородной кислотой перед использованием. Если не указано иное, то реакционную смесь, подвергаемую очистке, сначала разбавляли МеОН и подкисляли несколькими каплями АсОН. Полученный раствор загружали непосредственно в 8СХ и промывали МеОН. Требуемый материал затем элюировали путем промывки 0,7 М NN в МеОН.
Препаративная высокоэффективная жидкостная хроматография с обращенной фазой.
Колонка АдЛеШ 8са1аг С18, 5 мкм (21,2x50 мм), расход 28 мл-мин-1, элюирование градиентом Н2ОМеСЦ содержащим 0,1% об./об. муравьиной кислоты, в течение 10 мин с УФ-детектированием при 215 и 254 нм. Информация по градиенту: 0,0-0,5 мин; 95% Н2О-5% МеСЦ 0,5-7,0 мин; снижение от 95% Н2О-5% МеСN до 5% Н2О-95% МеСЦ 7,0-7,9 мин; выдержка при 5% Н2О-95% МеСЦ 7,9-8,0 мин; возвращение к 95% Н2О-5% МеСЦ 8,0-10,0 мин; выдержка при 95% Н2О-5% МеСК
Аналитические методы.
Высокоэффективная жидкостная хроматография с обращенной фазой.
Метод 1. Колонка АдЛеШ 8са1аг С18, 5 мкм (4,6x50 мм) или колонка \Уа1ег5 ХВЛЛде С18, 5 мкм (4,6x50 мм) расход 2,5 мл-мин-1, элюирование Н2О-МеСN градиентом, содержащим либо 0,1% об./об. муравьиной кислоты (метод 1, кислотный), либо МН3 (метод 1, щелочной) в течение 7 мин, с УФдетектированием при 215 и 254 нм. Информация по градиенту: 0,0-0,1 мин, 95% Н2О-5% МеСЦ 0,1-5,0 мин, снижение от 95% Н2О-5% МеСN до 5% Н2О-95% МеСЦ 5,0-5,5 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСЦ 5,5-5,6 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСЦ увеличение расхода до 3,5 мл-мин-1; 5,6-6,6 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСЦ расход 3,5 мл-мин-1; 6,6-6,75 мин, возвращение к 95% Н2О-5% МеСЦ
- 36 025393 расход 3,5 мл-мин-1; 6,75-6,9 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, расход 3,5 мл-мин-1; 6,9-7,0 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 2,5 мл-мин-1.
Метод 2. Колонка АдПеШ Ех!епб С18, 1,8 мкм (4,6x30 мм) при 40°С; расход 2,5-4,5 мл-мин-1, элюирование Н2О-МеСП градиентом, содержащим либо 0,1% об./об. муравьиной кислоты (метод 2, кислотный), либо НН3 (метод 2, щелочной), в течение 4 мин с УФ-детектированием при 254 нм. Информация по градиенту: 0-3,00 мин, снижение от 95% Н2О-5% МеСН до 5% Н2О-95% МеСН; 3,00-3,01 мин, выдержка при 5% Н2О -95% МеСН, увеличение расхода до 4,5 мл-мин-1; 3,01-3,50 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН; 3,50-3,60 мин, возвращение к 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 3,50 мл-мин-1; 3,60-3,90 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН; 3,90-4,00 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 2,5 мл-мин-1.
Метод 3. Колонка \Уа1ег5 Х§е1ес1 С8Н С18 3,5 мкм (4,6x50 мм), расход 2,5 мл-мин-1, элюирование Н2О-МеСН градиентом, содержащим 0,1% об./об. муравьиной кислоты, в течение 7 мин с УФдетектированием при 215 и 254 нм. Информация по градиенту: 0,0-0,1 мин, 95% Н2О-5% МеСН; 0,1-5,0 мин, снижение от 95% Н2О-5% МеСН до 5% Н2О-95% МеСН; 5,0-5,5 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН; 5,5-5,6 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН, увеличение расхода до 3,5 мл-мин-1; 5,6-6,6 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН, расход 3,5 мл-мин-1; 6,6-6,75 мин, возвращение к 95% Н2О-5% МеСН, расход 3,5 мл-мин-1; 6,75-6,9 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, расход 3,5 мл-мин-1; 6,9-7,0 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 2,5 мл-мин-1.
Метод 4. Колонка \Уа1ег5 Х§е1ес1 С8Н С18 3,5 мкм (4,6x50 мм); расход 2,5-4,5 мл-мин-1, элюирование Н2О-МеСН градиентом, содержащим 0,1% об./об. муравьиной кислоты, в течение 4 мин с УФдетектированием при 254 нм. Информация по градиенту: 0-3,00 мин, снижение от 95% Н2О-5% МеСН до 5% Н2О-95% МеСН; 3,00-3,01 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН, увеличение расхода до 4,5 мл-мин-1; 3,01-3,50 мин, выдержка при 5% Н2О-95% МеСН; 3,50-3,60 мин, возвращение к 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 3,50 мл-мин-1; 3,60-3,90 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН; 3,90-4,00 мин, выдержка при 95% Н2О-5% МеСН, снижение расхода до 2,5 мл-мин-1.
1Н ЯМР спектроскопия.
1Н ЯМР спектры регистрировали на спектрометре Вгикег Ауапсе III при 400 Мгц, используя остаточный недейтерированный растворитель в качестве сравнения и, если не указано иное, то исследования проводили в ДМСО-б6. Промежуточные соединения, использовавшиеся для получения примеров по помощью методикам, ссылки на которые приведены ниже (табл. 2). Дополнительные промежуточные соединения синтезировали описанными в данном описании обычными способами.
Таблица 2
Промежуточные соединения № Структура Название, данные ЖХМС и ссылки
1-(п-толил)-3-(трифторметил)-1Нпиразол-5-амин.
Кг 2,10 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 228 (М+Н)+, (Е3+) .
АЬгаАат, 5. еФ а1., ИО 2009/117080, 24 Зер 2009.
Ж
З-этил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-амин.
К1 3,30 мин (метод 1, кислотный); т/ζ 202 (М+Н)+, (Е3+) .
По, К. еФ а1., ИО 2010/067130, 17 Оип 2010.
3- (перфторэтил)-1-(п-толил)-ΙΗпиразол-5-амин.
К1, 2,39 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 292 (М+Н)+, (Е3+) .
Ре Ρίθ3, А. еФ а1., ИО 2007/ 053346, 10 Мау 2007.
З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5амин.
ь- 3,14 мин (метод 1, кислотный, колонка Х-5е1есФ); т/ζ 216 (М+Н)+, (Е3+) .
1Фо, К. еФ а1., ИО 2010/067130, 17 Липе 2010
- 37 025393
Аб
А7
ОМе ' к ν νη2
►Г ΝΗ2
З-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-амин.
1/ 1,04 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 232 (М+Н)+, (Е3+) АЬгапат, 3. еЕ а1., ЙО 2009/117080, 24 Зер 2009.
3-циклопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол5-амин.
Кт 3,35 мин (метод 1, кислотный); т/ζ 214 (М+Н) \ (ЕЗЭ .
К1пд-ипс1егмоос1, Л еЕ а1., ИО
2011/124930, 13 ОсЕ 2011.
3-(1-метилциклопропил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-амин.
Кг 3,72 мин (метод 1, кислотный); т/ζ 228 (М+Н)\ (Е5+) .
Ре Ртоз, А. еЕ а1., ИО 2007/053346, 10 Мау 2007.
А8 *Ви^_ |0к у+|нг Λ 3-трет-бутил-1-п-толил-1Н-пиразол-5-
амин. Р? 2,46 мин 230 (М+НГ, (метод 1, (Е3+) . щелочной); ш/ζ
и Ст11о, Р. Г. е£ а1. , ИО 2000/43384,
Т 27 ФЯ 2000.
Ме
А8*
фенил(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)карбамат.
ЖХМС т/ζ 350 (М+Н) + (Е5+) ; 348 (М-Н) (ЕЗ-) .
КарасИа, 3. К. еЕ а1., из 6492529, 10 Рес 2002.
З-трет-бутил-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-амин.
Р/' 1,32 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 246 (М+Н)+, (Е3+) .
МаЕЫаз, Л. Р. еЕ а1., из 2006/0035922, 10 Аид 2005.
фенил(3-(трет-бутил)-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)карбамат ЖХМС т/ζ 366 (М+Н)+ (Е3+) ; 364 (М-Н) (ЕЗ-) .
АЬгапат, 3. еЕ а1., ИО 2009/117080, 24 Зер 2009.
- 38 025393
А10
Ν ΝΗ2
АН
3-(трет-бутил)-1-(6-метилпиридин-Зил)-1Н-пиразол-5-амин,
7' 1,25 мин (метод 2, кислотный) ; т/ζ 231 (М+Н)+, (Е5+) Вагоп, Оатез А. еб а1., ИО 2001/032627, 10 Мау 2001.
З-трет-бутил-1-(б-метоксипиридин-3ил)-1Н-пиразол-5-амин.
Ег 1,38 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 247 (М+Н)\ (Е5+) .
АЬгаНат, 3. еб а1., ИО 2009/117080, 24 Зер 2009.
Ν
ОМе
4- ( (2-хлорпиридин-4-ил)окси)нафталин-
7'Г° 1-амин.
С1 07 Е/ 3,13 мин (метод 3); т/ζ 271/273 (М+Н)+, (Е3+) .
43 С1 Но, К. еб а1., ИО 2010/112936, 07 Осб 2010
4-((2-хлорпиримидин-4ил)окси)нафталин-1-амин.
Е^ 1,30 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 272/274 (М+Н)+, (Е3+) .
С1г111о, Ρ. Г. еб а1., ИО 2002/92576, 21 Νον 2000.
Θ2
<32 (Р)
ВосНЫ
трет-бутил(4-((2-хлорпиримидин-4ил)окси)нафталин-1-ил)карбамат.
Е* 2,43 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 372/374 (М+Н)+, (Е3+) .
1бо, К. еб а1., НО 2010/067130, 17 Иип 2010
Промежуточное соединение А3*. Фенил(3-(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)карбамат
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения А3 (3,00 г, 10,30 ммоль) и №-1НСО3, (1,70 г, 20,24 ммоль) в ЭСМ (25 мл) и ТГФ (10 мл) добавляли фенилхлорформиат (1,40 мл, 11,14 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Добавляли еще 0,2 экв. фенилхлорформиата и перемешивание продолжали в течение еще 60 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и ЭСМ и смесь пропускали через картридж для разделения фаз. Полученный желтый фильтрат концентрировали в вакууме с получением оранжевого масла, которое отверждалось в бледно-оранжевое твердое вещество при добавлении небольшого объема гексана и интенсивном растирании. Твердое вещество растирали в гексане и выделяли фильтрованием. Продукт промывали дополнительным количеством изогексана с получением промежуточного соединения А3* (3,86 г) в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц; СИСЬ) δ 7,38-7,43 (м, 6Н), 7,25-7,29 (м, 1Н), 6,89-7,14 (м, 4Н), 2,46 (с, 3Н).
ЖХМС т/ζ 412 (М+Н)+ (Е8+); 410 (М-Н)- (Е8-).
Промежуточное соединение А4*. Фенил(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)карбамат
К двухфазной смеси изопропилацетата (300 мл) и раствора №-13СО3 (15,0 г, 142 ммоль) в воде (100 мл) добавляли промежуточное соединение А4 (25,0 г, 116 ммоль). Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре до тех пор, пока все твердое вещество не растворилось (приблизительно 10 мин), затем обрабатывали фенилхлорформиатом (16,0 мл, 128 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли воду (200 мл) и слои разделяли. Органическую фазу промывали водой (2x100 мл) и насыщенным раствором соли (100 мл), затем сушили и концентрировали в вакууме. Полученное вязкое желтое масло растирали с 5% диэтиловым эфиром в изогексанах (приблизительно 250 мл), и полученное таким образом твердое вещество выделяли фильтрованием и промывали изогексаном (50 мл) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А4*, в виде белого порошка (28,4 г, 72%);
КБ 3,48 мин (метод 1, кислотный);
- 39 025393 т/ζ 336 (М+Н)+ (Е8+);
Ή ЯМР δ: 1,23 (6Н, д), 2,37 (3Н, с), 2,91 (1Н, септ.), 6,29 (1Н, с), 7,05-7,45 (9Н, перекрывающийся м), 9,95 (1Н, с).
Промежуточное соединение А11*. Фенил(3-(трет-бутил)-1-(6-метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5ил)карбамат
ОМе
К перемешиваемой суспензии промежуточного соединения А11 (780 мг, 3,17 ммоль) и ХаНСО3 (532 мг, 6,33 ммоль) в ЭСМ (8 мл) и ТГФ (2 мл) добавляли фенилхлорформиат (481 мкл, 3,80 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь распределяли между ЭСМ (100 мл) и водой (100 мл). Водную фазу повторно экстрагировали ЭСМ (100 мл), и объединенные органические экстракты сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением масла, которое растирали со смесью диэтилового эфира и изогексана, с получением промежуточного соединения А11* (736 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) 400 МГц, δ: 10,12 (с, 1Н), 8,32-8,31 (м, 1Н), 7,85-7,82 (м, 1Н), 7,41-7,37 (м, 2Н), 7,24 (т, 1Н), 7,10 (ушир.с, 2Н), 7,00 (д, 1Н), 6,37 (с, 1Н), 3,92 (с, 3Н), 1,28 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 367 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение А12. 1-(4-Метоксифенил)-3-(тетрагидрофуран-3-ил)-1Н-пиразол-5амин
К раствору 3-оксо-3-(тетрагидрофуран-3-ил)пропаннитрила (718 мг, 4,64 ммоль) в ЕЕОН (20 мл) добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (0,387 мл, 4,64 ммоль) и гидрохлорид (4метоксифенил)гидразина (7 37 мг, 4,22 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 4 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и доводили до рН 8 добавлением водного раствора №ГОН (2 М, <5 мл). Полученную смесь распределяли между водой (20 мл) и ЕЕ2О (25 мл), и водный слой отделяли и экстрагировали эфиром (25 мл). Объединенные органические экстракты сушили и упаривали в вакууме, остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 40 г, 0-5% МеОН в ЭСМ, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А12, в виде бледно-оранжевого твердого вещества (503 мг, 45%);
КЕ 1,04 мин (метод 2); т/ζ 260 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение А13. 3-(3-Метилоксетан-3-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-амин
Раствор п-толилгидразина (79 мг, 0,65 ммоль) и 3-(3-метилоксетан-3-ил)-3-оксопропаннитрила, (АЬгаЬат, 8. еЕ а1., УО 2011/022473, 24 РеЬ 2011) (100 мг, 0,65 ммоль) в безводном толуоле (3,0 мл) нагревали до 110°С в течение 6 ч и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч. Реакционную смесь упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, элюировали 10-40% ЕЕОАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А13 (117 мг, 87% чистота по данным ВЭЖХ, 65%); КЕ 1,50 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 244 (М+Н)+, (Е8+). Полученное таким образом вещество использовали в последующих реакциях без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение А14. 1-(4-Метоксифенил)-3-(3-метилоксетан-3-ил)-1Н-пиразол-5-амин
- 40 025393
Раствор 3-(3-метилоксетан-3-ил)-3-оксопропаннитрила (750 мг, 5,40 ммоль) и (4метоксифенил)гидразина (750 мг, 5,40 ммоль) в безводном толуоле (7,0 мл) нагревали до 110°С в течение 4 ч в аппарате, снабженном насадкой Дина-Старка. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 40 г, 10-75%, ЕЮАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А14, в виде голубого твердого вещества (980 мг, 66%); К1 1,24 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 260 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение А15. 3-(трет-Бутил)-1-(3-(2-метоксиэтокси)фенил)-1Н-пиразол-5-амин
К раствору 1-йод-3-(2-метоксиэтокси)бензола (1,18 г, 4,05 ммоль) в безводном толуоле (7,0 мл) добавляли 3-(трет-бутил)-1Н-пиразол-5-амин (619 мг, 4,45 ммоль) и затем (1К.2К)-Ы1.Ы2диметилциклогексан-1,2-диамин (255 мкл, 1,62 ммоль) и карбонат калия (1,96 г, 14,2 ммоль). Смесь продували азотом, после чего добавляли йодид медиД) (77 мг, 0,41 ммоль), и реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 18 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между ЕЮАс (250 мл) и водой (250 мл). Органический слой отделяли, промывали водой (2x250 мл) и насыщенным раствором соли (250 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (ЗЮ2, 120 г, 0-5% [0,7 М ЫН3 в МеОН] в ОСМ, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А15, в виде коричневой смолы (1,04 г, 84%); К1 2,20 мин (метод 1, кислотный); т/ζ 290 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение А16. 3-Изопропил-1-(6-метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5-амин
Раствор 4-метил-3-оксопентаннитрила (599 мг, 5,39 ммоль) и 5-гидразинил-2-метоксипиридина (750 мг, 5,40 ммоль) в безводном толуоле (7,0 мл) нагревали до 110°С в течение 4 ч в аппарате, снабженном насадкой Дина-Старка. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (ЗЮ2, 40 г, 10-80%, ЕЮАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А16, в виде бледно-желтого твердого вещества (825 мг, 63%); К1 1,15 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 233 (М+Н)+, (ЕЗ+).
Промежуточное соединение А17. 1-(4-Метоксифенил)-3-(тетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиразол-5амин
К раствору 2-метилпропан-2-олата калия (5,74 г, 51,2 ммоль) в ТГФ (30 мл) добавляли в течение 25 мин раствор тетрагидрофуран-2-метилкарбоксилата (4,0 мл, 34 ммоль) и МеСЫ (2,7 мл, 51 ммоль) в ТГФ (13,0 мл). Полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем гасили добавлением 1 М хлористо-водородной кислоты (30 мл) с получением двухфазной смеси. Фазы разделяли, органическую фазу сохраняли, и водную фазу экстрагировали ЕьО (2x30 мл) и ОСМ (2x30 мл). Исходную органическую фазу и оба органических экстракта объединяли и полученный раствор сушили и затем осторожно концентрировали в вакууме с получением смеси, которая состояла из 3-оксо-3(тетрагидрофуран-2-ил)пропаннитрила, ТГФ и 'ВиОН (в приблизительном соотношении 1:1:1 мас./мас./мас.) (9,07 г, ~30% мас./мас., по данным 'Н-ЯМР, ~60%);
Ή ЯМР (400 МГц; СОСЕ) δ 1,90-2,10 (3Н, перекрывающийся м), 2,26 (1Н, м), 3,79 (1Н, д), 3,90-3,99 (2Н, перекрывающийся м), 4, 39 (1Н, м).
Полученное вещество использовали в последующих реакциях без дополнительной очистки.
К раствору описанного выше неочищенного кетонитрила (1,0 г, ~30% чистоты, ~2,0 ммоль) и гидрохлорида (4-метоксифенил)гидразина (148 мг, 0,849 ммоль) в ЕЮН (11,0 мл) добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (80 мкл, 12 М, 1 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме.
- 41 025393
Остаток распределяли между ЭСМ (5,0 мл) и насыщенным водным раствором ЫаНСОз (5,0 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЭСМ (3x5 мл) и объединенные органические экстракты упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (§Ю2, 40 г, 0-10% [0,7 М ΝΗ3 в МеОН] в ЭСМ. градиентное элюирование, затем §Ю2, 40 г, 0-100%, ЕЮАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А17, в виде оранжевого масла (51 мг, 21%); К1 1,14 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 260 (М+Н)+, (Е§+).
Промежуточное соединение А18. 1-(3,4-Диметилфенил)-3-изопропил-1Н-пиразол-5-амин
К раствору гидрохлорида (3,4-диметилфенил)гидразина (3,0 г, 17 ммоль) и 4-метил-3оксопентаннитрила (2,3 мл, 19 ммоль) в ЕЮН (20 мл) добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту (1,7 мл, 12 М, 20 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 18 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме. Остаток распределяли между ЭСМ (50 мл) и водой (20 мл). Водную фазу отделяли и экстрагировали ЭСМ (2x50 мл). Объединенные органические экстракты сушили и упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной флэшхроматографией (§Ю2, 80 г, 0-100% Е12О в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения А18, в виде оранжевого масла (2,69 г, 67%); К1 1,49 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 230 (М+Н)+, (Е§+).
Промежуточное соединение А19*. Фенил(1-(п-толил)-3-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)карбамат
п-Толилгидразин, НС1 (3,2 г, 19,97 ммоль) и 5,5,5-трифтор-4,4-диметил-3-оксопентаннитрил (4,3 г, 20,40 ммоль) кипятили с обратным холодильником в этаноле (15 мл) в течение 8 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого масла. Добавляли насыщенный раствор NаΗСО3 (50 мл) и воду (50 мл), и смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3x50 мл). Объединенные органические фазы концентрировали и остаток очищали хроматографией в системе СотЫИакй Сотрапίοη (40 г колонка, 0-50% диэтиловый эфир/изогексан) с получением оранжевого масла, которое кристаллизовалось при стоянии. Перекристаллизация в циклогексане (30 мл) и последующая промывка изогексаном (2x30 мл) давали 1-(п-толил)-3-(1,1,1-трифтор-2-метилпропан-2-ил)-1Н-пиразол-5-амин (промежуточное соединение А19, 1,75 г) в виде бесцветного кристаллического твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; СССЫ δ 7,42 (д, 2Н), 7,26 (д, 2Н), 5,67-5,64 (м, 1Н), 3,72 (с, 2Н), 2,39 (с, 3Н), 1,52 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 284 (М+Н)+ (Е8+).
К перемешиваемой при комнатной температуре смеси промежуточного соединения А19 (1,75 г, 6,18 ммоль) и NаΗСО3 (1,05 г, 12,50 ммоль) в ЭСМ (20 мл) и ТГФ (15 мл) добавляли фенилхлорформиат (0,85 мл, 6,79 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч и затем распределяли между ЭСМ (50 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли, сушили (Мд§О4) и упаривали при пониженном давлении с получением бесцветного масла. Масло кристаллизовали из циклогексана с получением промежуточного соединения А19* (2,14 г) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (СОС13) 400 МГц, δ: 7,43-7,31 (м, 6Н), 7,30-7,22 (м, 1Н), 7,20-7,07 (м, 2Н), 7,05-6,88 (м, 1Н), 6,68-6,55 (м, 1Н), 2,44 (с, 3Н), 1,56 (с, 6Н).
Промежуточное соединение А20*. Фенил(3-(2-цианопропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)карбамат
Смесь гидрохлорида п-толилгидразина (6,5 г, 41,0 ммоль) и 2,2-диметил-3-оксопентандинитрила (5,58 г, 20,49 ммоль) в ЕЮН (80 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждали, и растворитель упаривали при пониженном давлении. Остаток распределяли между ЕЮАс (200 мл) и
- 42 025393 водным раствором NаΗСО3 (100 мл), органический слой отделяли, промывали водой (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (120 г колонка, 0-40% ЕГОАс/изогексан) с получением 2-(5-амино-1-(п-толил)1Н-пиразол-3-ил)-2-метилпропаннитрила (промежуточного соединения А20, 2,834 г) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; СОСЪ) δ 7,40 (д, 2Н), 7,27 (д, 2Н), 5,67 (с, 1Н), 3,80 (с, 2Н), 2,39 (с, 3Н), 1,73 (с,
6Н).
ЖХМС т/ζ 241 (М+Н)+ (Е8+).
К перемешиваемой смеси промежуточного соединение А20 (2,83 г, 11,78 ммоль) и NаΗСО3 (2 г, 23,81 ммоль) в ОСМ (40 мл) и ТГФ (10 мл) при комнатной температуре добавляли фенилхлорформиат (1,6 мл, 12,77 ммоль). Смесь перемешивали в течение 18 ч, затем распределяли между ЭСМ (100 мл) и водой (100 мл).
Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток растирали со смесью эфир/изогексан, твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением промежуточного соединения А20* (3,86 г).
ЖХМС т/ζ 361 (М+Н)+ (Е8+); 359 (М-Н)- (Е8-).
Промежуточное соединение А21. 3-(Проп-1-ен-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-амин
Смесь 4-фтор-4-метил-3-оксопентаннитрила (5,5 г, 36,2 ммоль) и гидрохлорида п-толилгидразина (8,61 г, 54,3 ммоль) в ЕЮН (80 мл) нагревали при 80°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали, растворитель упаривали, и остаток распределяли между эфиром (200 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (200 мл). Органический слой отделяли, промывали водой (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (120 г колонка, 0-40% ЕЮАс/изогексан) с получением промежуточного соединения А21 (3,51 г).
Ή ЯМР (400 МГц; СОС1;) δ 7,44 (д, 2Н), 7,26 (д, 2Н), 5,77 (с, 1Н), 5,46 (с, 1Н), 5,06 (с, 1Н), 3,73 (с, 2Н), 2,39 (с, 3Н), 2,13 (с, 3Н).
ЖХМС т/ζ 214 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение А22*. Фенил(3-(2-метоксипропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)карбамат
Смесь промежуточного соединения А21 (2 г, 9,38 ммоль) и 4 М НС1 в диоксане (5 мл, 20 ммоль) в МеОН (20 мл) нагревали при 60°С в герметизированной пробирке в течение 72 ч. Растворитель упаривали, и остаток распределяли между ЕГОАс (150 мл) и водным раствором NаΗСО3 (100 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (80 г колонка, 0-50% ЕГОАс/изогексан) с получением 3-(2-метоксипропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5амина (промежуточного соединения А22, 1,202 г) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; СОСЪ) δ 7,42 (д, 2Н), 7,26 (д, 2Н), 5,63 (с, 1Н), 3,74 (с, 2Н), 3,17 (с, 3Н), 2,39 (с, 3Н), 1,55 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 246 (М+Н)+ (Е8+).
К перемешиваемой смеси промежуточного соединения А22 (1,95 г, 7,95 ммоль) и NаΗСО3 (1,4 г, 16,67 ммоль) в ОСМ (25 мл) и ТГФ (7 мл) при комнатной температуре добавляли фенилхлорформиат (1,1 мл, 8,78 ммоль). Смесь перемешивали в течение 3 ч, затем распределяли между ЭСМ (150 мл) и водой (200 мл). Органический слой отделяли, промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывали из циклогексана, твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,568 г).
- 43 025393
Ή ЯМР (400 МГц; СОСЕ) δ 7,41-7,23 (м, 7Н), 7,17 (ушир.с, 2Н), 6,97 (ушир.с, 1Н), 6,59 (ушир.с, 1Н), 3,18 (с, 3Н), 2,44 (с, 3Н), 1,58 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 366 (М-Н)' (Е8+); 364 (М-Н)- (Е8-).
Промежуточное соединение В1. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиридин-2-ил)амино)-6метокси^-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения О1 (485 мг, 1,79 ммоль) в NМΡ (5,0 мл) добавляли 3амино-5-метокси-^(2-морфолиноэтил)бензамид (500 мг, 1,79 ммоль) и раствор НС1 в диоксане (4,0 М, 900 мкл, 3,6 ммоль), и полученную смесь нагревали при 120°С в герметизированной пробирке в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли дополнительную аликвоту НС1 в диоксане (450 мкл, 1,8 ммоль), смесь нагревали при 120°С в течение еще 24 ч и затем повторно охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь подвергали катионообменной очистке и полученный таким образом неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 120 г, 30-100% Е!ОАс в изогексане, градиентное элюирование, и затем 0-20% МеОН в ЭСМ, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В1, в виде пурпурного твердого вещества (459 мг, 80% чистоты по данным ВЭЖХ, 40%); К! 1,73 мин (метод 3, 80% чистоты); т/ζ 514 (М+Н)+, (Е8+). Полученное вещество использовали на последующих стадиях без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение В2. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)^пропилбензамид
К раствору промежуточного соединения Л (50 мг, 0,13 ммоль), пропан-1-амина (13 мкл, 0,16 ммоль) и Э1РЕА (47 мкл, 0,27 ммоль) в ДМФА (2,0 мл) добавляли НАТИ (61 мг, 0,16 ммоль), и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре. Дополнительные порции НАТИ (61 мг, 0,16 ммоль) добавляли через 17 ч и через 24 ч и еще через 18 ч при комнатной температуре. Смесь распределяли между Е!ОАс (5,0 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (5,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x5,0 мл), затем сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В2, в виде пурпурного твердого вещества (37 мг, 63%); К! 1,78 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 414 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В3. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-^(2морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Л (247 мг, 0,617 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (100 мкл, 0,760 ммоль) и Л1РЕА (550 мкл, 3,2 ммоль) в ДМФА (2,0 мл) добавляли НАТИ (285 мг, 0,750 ммоль), и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем распределяли между Е!ОАс (20 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (20 мл). Органическую фазу отделяли и экстрагировали хлористо-водородной кислотой (1,0 М, 20 мл). Кислотный экстракт нейтрализовали добавлением водного раствора №ГОН (2,0 М, 10 мл), и полученную водную фазу экстрагировали Е!ОАс (2x30 мл). Экстракты из нейтрализованной водной фазы объединяли и промывали водой (2x30 мл) и насыщенным раствором соли (2x30 мл), затем сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В3, в виде бледно-красного твердого вещества (226 мг, 68%); К! 1,38 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 485 (М+Н)+, (Е8+).
- 44 025393
Промежуточное соединение В4. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-^(2(диметиламино)этил)-4-метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения 12(Р) (243 мг, 0,451 ммоль), ^,^-диметилэтан-1,2диамина (74 мкл, 0,68 ммоль) и ΌΙΡΕΛ (160 мкл, 0,9 ммоль) в ДМФА (25 мл) при 0°С добавляли НАТИ (257 мг, 0,676 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и через 3 дня распределяли между ЭСМ (10,0 мл) и водным раствором №ЮН (1,0 М, 10,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (2x15 мл) и насыщенным раствором соли (2x15 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (ЗЮ2, 12 г, 0-10% [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((5-((2-(диметиламино)этил)карбамоил)2-метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде оранжевого твердого вещества (137 мг, 80% чистоты, 43%); К1 2,66 мин (метод 3); т/ζ 573 (М+Н)+, (Ε8+). Полученное вещество использовали на последующей стадии снятия защиты без дополнительной очистки.
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (137 мг, 80% чистоты, 0,239 ммоль) в ЭСМ (3,0 мл) добавляли ТРА (0,50 мл, 6,7 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В4, в виде бледно-розового твердого вещества (108 мг, 92%); К1 1,96 мин (метод 3); т/ζ 473 (М+Н)+, (Ε8+).
Промежуточное соединение В5. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4метокси^-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения 12 (Р) (500 мг, 0,930 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (183 мкл, 1,39 ммоль) и ΌΙΡΕΛ (320 мкл, 0,900 ммоль) в ДМФА (3,0 мл) при 0°С добавляли НАТИ (529 мг, 1,39 ммоль) и полученную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 10 мин образовывался осадок и через 30 мин твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали водой и затем сушили в вакууме с получением трет-бутил(4-((2-((2-метокси-5-((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде желтовато-белого твердого вещества (511 мг, 84%); К1 2,69 мин (метод 3); т/ζ 615 (М+Н)+, (Ε8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (508 мг, 0,826 ммоль) в ЭСМ (10,0 мл) добавляли ТРА (2,0 мл, 27 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между СН2С12 (10,0 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (10,0 мл). Органическую фазу отделяли, промывали водой (2x20 мл) и насыщенным раствором соли (2x20 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В5, в виде бледно-розового твердого вещества (162 мг, 85% чистоты по данным ВЭЖХ, 32%); К1 1,24 мин (метод 3); т/ζ 515 (М+Н)+, (Ε8+). Полученное вещество использовали на последующих стадиях без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение В6. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-^(2гидроксиэтил)-4-метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения 12 (Р) (411 мг, 0,763 ммоль), 2-аминоэтанола (69 мкл, 1,1 ммоль) и ΌΙΡΕΛ (270 мкл, 1,50 ммоль) в ДМФА (25 мл) при 0°С добавляли НАТИ (435 мг, 1,14 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 18 ч и затем распределяли между водным раствором №ОН (1,0 М, 10,0 мл) и ЭСМ (10,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x15 мл) и водой (2x15 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Полученный таким образом остаток объединяли с неочищенным продуктом из проведенной ранее реакции в
- 45 025393 меньшими загрузками веществ (100 мг промежуточного соединения 12(Р)), которую проводили аналогичным образом, и объединенные вещества очищали колоночной флэш-хроматографией (8ίΟ2, 40 г, 0-5% [0,7 М ΝΗ3 в МеОН] в ИСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((3-((2гидроксиэтил)карбамоил)-2-метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-розового твердого вещества (230 мг, 43%); К1 3,23 мин (метод 3); т/ζ 546 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (228 мг, 0,418 ммоль) в ИСМ (5,0 мл) добавляли ТРА (1,0 мл, 13 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток растворяли в ТГФ (4,0 мл) и добавляли раствор ЫОН (15 мг, 0,62 ммоль) в водном растворе МеОН (1:1 об./об., 2,0 мл), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней [для омыления трифторацетата, который образуется при проведении стадии снятия защиты] и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В6, в виде оранжевого твердого вещества (169 мг, 48%); К1 2,31 мин (метод 3); т/ζ 446 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В7. 4-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ш(2(диметиламино)этил)-3-метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения 13(Р) (355 мг, 0,706 ммоль), ,1,,1-диметилэтан-1,2диамина (116 мкл, 1,06 ммоль) и ИГОЕА (250 мкл, 1,40 ммоль) в ДМФА (1,5 мл) добавляли НАТИ (403 мг, 0,676 ммоль), и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем распределяли между ИСМ (15 мл) и водным раствором №ГОН (1,0М, 15 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x15 мл) и водой (2x15 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 40 г, 0-10% [0,7 М ΝΗ3 в МеОН] в ИСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((4-((2-(диметиламино)этил)карбамоил)2-метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде оранжевого твердого вещества (284 мг, 67%); К1 2,74 мин (метод 3); т/ζ 573 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (137 мг, 80% чистоты, 0,239 ммоль) в ИСМ (3,0 мл) добавляли ТРА (1,0 мл, 13 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В7, в виде бледно-оранжевого твердого вещества (208 мг, 88%); К1 2,20 мин (метод 3); т/ζ 473 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В8. 4-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3метокси-,-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения 13 (320 мг, 0,810 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (159 мкл, 1,21 ммоль) и ИГОЕА (280 мкл, 1,60 ммоль) в ДМФА (2,0 мл) при 0°С добавляли НАТИ (459 мг, 1,21 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и через 3 ч распределяли между ИСМ (10,0 мл) и водным раствором №ОН (1,0 М, 10,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (2x20 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, 0-60% [0,7 М Ν43 в МеОН] в ИСМ, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В8, в виде бледно-розового твердого вещества (338 мг, 78%); К1 1,53 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 515 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В9. 4-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ш(2гидроксиэтил)-3 -метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения 13(Р) (370 мг, 0,736 ммоль), 2-аминоэтанола (67 мкл, 1,1 ммоль) и ИГОЕА (260 мкл, 1,50 ммоль) в ДМФА (1,5 мл) добавляли НАТИ (529 мг, 1,39 ммоль). Полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем распределяли между ИСМ (15 мл) и водным раствором №ОН (1,0 М, 15 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой
- 46 025393 (2x15 мл) и насыщенным раствором соли (2x15 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 40 г, 0-7%, [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((4-((2-гидроксиэтил)карбамоил)-2-метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-розового твердого вещества (318 мг, 77%); КЕ 3,45 мин (метод 3); т/ζ 546 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (316 мг, 0,579 ммоль) в ЭСМ (6,0 мл) добавляли ТРА (0,80 мл, 11 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение
1,5 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток растворяли в ТГФ (5,0 мл) и обрабатывали раствором ЫОН (10 мг, 0,44 ммоль) в водном МеОН (1:1 об./об., 2,0 мл), и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В9, в виде бледно-пурпурного твердого вещества (253 мг, 81%); КЕ 2,66 мин (метод 3); т/ζ 446 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В10. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6хлор-Х-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Л4(Р) (500 мг, 1,00 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (229 мкл, 1,75 ммоль) и О1РЕА (360 мкл, 1,50 ммоль) в ДМФА (2,0 мл) при 0°С добавляли НАТИ (586 мг, 1,10 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и через 4 ч разбавляли водой (20 мл). Полученную суспензию подвергали действию ультразвука в течение 10 мин и затем отделяли осадок фильтрованием с получением трет-бутил(4-((2-((3-метил-5-((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-коричневого твердого вещества (589 мг, 89%); КЕ 2,77 мин (метод 3); т/ζ 599 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (580 мг, 0,900 ммоль) в ЭСМ (10,0 мл) добавляли ТРА (2,0 мл, 27 ммоль), реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение
3,5 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В10, в виде коричневого твердого вещества (475 мг, 100%); КЕ 2,14 мин (метод 3); т/ζ 499 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В11. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ж (2-морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Л5(Р) (577 мг, 1,07 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (210 мкл, 1,6 ммоль) и Р1РЕА (370 мкл, 2,1 ммоль) в ДМФА (2,0 мл) при 0°С добавляли НАТИ (609 мг, 1,60 ммоль). Реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 3 ч, затем разбавляли водой (40 мл), и полученную суспензию подвергали действию ультразвука в течение 5 мин. Осадок выделяли фильтрованием с получением трет-бутил(4-((2-((3-((2-морфолиноэтил)карбамоил)-5-(трифторметил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-коричневого твердого вещества (640 мг, 87%); КЕ 2,97 мин (метод 3); т/ζ 653 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (637 мг, 0,976 ммоль) в ЭСМ (12,0 мл) добавляли ТРА (2,0 мл, 27 ммоль). Через 3 ч реакционную смесь упаривали в вакууме при комнатной температуре и остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В11, в виде коричневого твердого вещества (515 мг, 91%); КЕ 2,41 мин (метод 3); т/ζ 553 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В12. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Х(2-(диметиламино)этил)-5-метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения Ч6(Р) (647 мг, 1,19 ммоль), ХЕ,ХЕ-диметилэтан-1,2-диамина
- 47 025393 (142 мкл, 1,30 ммоль) и ИЮЕА (330 мкл, 1,90 ммоль) в ИСМ (25 мл) при 0°С добавляли НАТИ (540 мг, 1,42 ммоль) и через 10 мин полученную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 18 ч реакционную смесь промывали водным раствором №ЮН (1,0 М, 25 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (§Ю2, 120 г, 0-10% [0,7 М Ν^ в МеОН] в ИСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((3-((2-(диметиламино)этил)карбамоил)-5метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде оранжевого масла (425 мг, 60%); К1 1,67 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 573 (М+Н)+, (Εδ').
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (425 мг, 0,742 ммоль) в ИСМ (5,0 мл) добавляли ТРА (0,60 мл, 8,0 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 5 ч. Добавляли вторую аликвоту ТРА (0,60 мл, 8,0 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней и затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между ЕЮАс (20 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСОз (20 мл), органическую фазу отделяли, сушили и затем упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В12, в виде оранжевого масла (277 мг, 75%); К1 1,28 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 473 (М+Н)+, (Εδ+).
Промежуточное соединение В13. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6метокси^-(2-морфолиноэтил)бензамид
Суспензию промежуточного соединения О2(Р) (15,0 г, 40,0 ммоль), р-Т§А (12,2 г, 64,0 ммоль) и 3амино-5-метокси-^(2-морфолиноэтил)бензамида (15,0 г, 52,0 ммоль) в ТГФ (150 мл) нагревали до 60°С в течение 20 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, и остаток растирали с насыщенным водным раствором NаΗСОз (250 мл). Образовавшееся твердое вещество выделяли фильтрованием, растворяли в ИСМ (500 мл) и промывали водным насыщенным раствором NаΗСОз (2x200 мл) и водой (2x250 мл). Органическую фазу концентрировали в вакууме с получением коричневого твердого вещества. Промывные воды после промывки насыщенным водным раствором NаΗСОз фильтровали с получением дополнительного количества вещества. Твердые коричневые вещества объединяли и сушили при пониженном давлении с получением смеси (приблизительно 30:70) указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В13, и соответствующего Ν-Вос производного: трет-бутил(4-((2-((3-метокси-5((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата. Полученное вещество использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительных манипуляций.
Описанную выше неочищенную смесь суспендировали в ИСМ (300 мл), охлаждали до 0°С и обрабатывали по каплям ТРА (60 мл, 0,80 моль) в течение 10 мин. Полученный темный раствор перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в ИСМ (500 мл) и промывали насыщенным водным раствором NаΗСОз (2x250 мл). Объединенную водную фазу экстрагировали ИСМ (200 мл), и объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли (2x200 мл), затем сушили и концентрировали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В13, в виде коричневого твердого вещества (13,4 г, 55% выход за 2 стадии); К1 1,78 мин (метод 1, щелочной); т/ζ 515 (М+Н)+ (Εδ+).
Промежуточное соединение В14. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6хлор-^(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения 17(Р) (372 мг, 0,734 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (144 мкл, 1,10 ммоль) и ЭРЕА (260 мкл, 1,5 ммоль) в ДМФА (1,5 мл) при 0°С добавляли НАТИ (419 мг, 1,10 ммоль), и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Через 18 ч смесь разбавляли водой (30 мл) и полученную суспензию подвергали действию ультразвука в течение 5 мин. Осадок выделяли фильтрованием и сушили с получением трет-бутил(4-((2-((3-хлор-5-((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-коричневого твердого вещества (300 мг, 63%); К1 2,86 мин (метод 3); т/ζ 619 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (300 мг, 0,485 ммоль) в ИСМ (5,0 мл) добавляли ТРА (0,80 мл, 11 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение
3,5 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В14, в виде коричневого твердого вещества (248
- 48 025393 мг, 94%); К 2,25 мин (метод 3); т/ζ 519 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В15. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5броми-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Э8(Р) (1,28 г, 2,32 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (0,52 мл, 4,0 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,81 мл, 4,6 ммоль) в ДМФА (4,5 мл) при 0°С добавляли НАТИ (1,32 г, 3,48 ммоль), и реакционную смесь затем нагревали до комнатной температуры в течение 18 ч. Смесь разбавляли водой (50 мл) и полученную таким образом суспензию подвергали действию ультразвука в течение 20 мин. Полученный таким образом осадок выделяли фильтрованием с получением трет-бутил(4-((2-((3-бром-5((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-серого твердого вещества (1,55 г, 96%); К1 2,89 мин (метод 3); т/ζ 663/665 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (633 мг, 0,954 ммоль) в ОСМ (11,0 мл) добавляли ТРА (2,5 мл, 34 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь упаривали в вакууме, и остаток распределяли между ОСМ (50 мл) и насыщенным водным раствором NаНСОз (50 мл). Органическую фазу отделяли и промывали последовательно насыщенным водным раствором NаНСОз (40 мл), водой (2x30 мл) и насыщенным раствором соли (2x30 мл), затем сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В15, в виде коричневого твердого вещества (515 мг, 91%); К1 1,41 мин (метод 4); т/ζ 563/565 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В16. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метоксиГ-метилГ-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Э6(Р) (926 мг, 1,71 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере Ν2 добавляли ЕЭС-НО (657 мг, 3,43 ммоль) и Гметил-2-морфолиноэтанамин (531 мг, 3,69 ммоль). Полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч, нагревали до 40°С в течение 24 ч и затем охлаждали до комнатной температуры в течение еще 3 дней. Добавляли дополнительную порцию Гметил-2-морфолиноэтанамина (266 мг, 1,84 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение еще 5 ч и затем распределяли между водой (50 мл) и ЕЮАс (50 мл). Органическую фазу отделяли, сушили и упаривали в вакууме, остаток очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 80 г, 0-10% [0,7 М ΝΗ3 в МеОН] в ОСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((3-метокси-5-(метил(2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-коричневого твердого вещества (612 мг, 91% чистоты по данным ВЭЖХ, 52%); К1 1,74 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 629 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (612 мг, 91% чистоты, 0,886 ммоль) в ОСМ (5,0 мл) добавляли ТРА (1,5 мл, 20 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между ЕЮАс (20 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (20 мл). Органическую фазу отделяли, сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В16, в виде оранжевого масла (355 мг, 94% чистоты по данным ВЭЖХ, 71%); К1 1,27 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 529 (М+Н)+, (Е8+). Полученное вещество использовали на последующих стадиях без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение В17. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)^(2-гидроксиэтил)-5-метоксибензамид
К раствору промежуточного соединения Э6(Р) (795 мг, 1,46 ммоль), 2-аминоэтанола (97 мкл, 1,6 ммоль) и Э1РЕА (0,41 мл, 2,3 ммоль) в ОСМ (25 мл) при 0°С добавляли НАТИ (664 мг, 1,75 ммоль), по- 49 025393 лученную смесь выдерживали при 0°С в течение 10 мин и затем нагревали до комнатной температуры. Через 18 ч реакционную смесь разбавляли ДМФА (5,0 мл) и выдерживали при комнатной температуре в течение еще 24 ч. Добавляли вторую аликвоту ДМФА (5,0 мл), и полученную смесь нагревали до 40°С в течение 4 дней, затем охлаждали и распределяли между водным раствором ЫаОН (1,0 М, 100 мл) и ЕЮАс (150 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x100 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 80 г, 010% [0,7 М ЫН3 в МеОН] в ОСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((3-((2гидроксиэтил)карбамоил)-5-метоксифенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде бледно-коричневого твердого вещества (399 мг, 49%); К1 2,09 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 546 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (399 мг, 0,731 ммоль) в ОСМ (5,0 мл) добавляли ТРА (0,60 мл, 8,0 ммоль). Через 5 ч при комнатной температуре добавляли дополнительную аликвоту ТРА (0,60 мл, 8,0 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение еще 3 дней и затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между ЕЮАс (20 мл) и насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (20 мл), и органическую фазу отделяли, сушили и затем упаривали в вакууме. Остаток растворяли в смеси ТГФ (2,0 мл), воды (1,0 мл) и МеОН (0,5 мл) и обрабатывали раствором ЫОН (18 мг, 0,73 ммоль) в воде (1,0 мл) при комнатной температуре в течение 16 ч. Полученную смесь нейтрализовали добавлением водного раствора хлористо-водородной кислоты (1,0 М, 0,5 мл) и распределяли между водой (20 мл) и ЕЮАс (20 мл). Органическую фазу отделяли, сушили и затем упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В17, в виде коричневого твердого вещества (160 мг, 48%); К1 1,51 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 446 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В18. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6метокси-Ы-(2-метоксиэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Ч5(Р) (841 мг, 1,67 ммоль), 2-метоксиэтанамина (190 мкл, 2,2 ммоль) и ЭРЕА (470 мкл, 2,7 ммоль) в ОСМ (10,0 мл) добавляли НАТИ (115 мг, 0,301 ммоль). Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем промывали водным раствором ЫаОН (1,0 М, 50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ОСМ (50 мл), и объединенные органические фазы промывали водой (2x50 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 120 г, 0-10% [0,7 М ЫН3 в МеОН] в ОСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((3-метокси-5-((2-метоксиэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде желтого твердого вещества (900 мг, 86%); К1 2,36 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 560 (М+Н)+, (Е8+).
К раствору описанного выше Вос-защищенного амина (900 мг, 1,61 ммоль) в ОСМ (10,0 мл) добавляли ТРА (1,2 мл, 16 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 5 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток распределяли между Е1ОАс (40 мл) и насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (40 мл), органическую фазу отделяли, сушили и затем упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В18, (549 мг, 72%); К1 1,70 мин (метод 3); т/ζ 460 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В19. 5-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-2метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
К смеси промежуточного соединения О2(Р) (950 мг, 2,56 ммоль) и 5-амино-2-метокси-Ы-(2морфолиноэтил)бензамида (1,07 г, 3,32 ммоль) в ТГФ (10,0 мл) добавляли р-Т8А-Н2О (778 мг, 4,09 ммоль). Полученную суспензию нагревали при 60°С в течение 18 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и распределяли между дихлорметаном (50 мл) и насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (50 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (2x50 мл) и насыщенным раствором соли (2x50 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, 0-80% [0,7 М ЫН3 в МеОН] в ОСМ, градиентное элюирование) с получением трет-бутил(4-((2-((4метокси-3-((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде твердого вещества персикового цвета (566 мг, 34%); К1 2,72 мин (метод 3); т/ζ 615 (М+Н)+, (Е8+).
- 50 025393
К суспензии описанного выше Вос-защищенного аминонафталина (566 мг, 0,875 ммоль) в ЭСМ (10,0 мл) добавляли по каплям ТРА (2,0 мл, 27 ммоль), полученный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток очищали на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В19, в виде бледнорозового твердого вещества (479 мг, 90% чистота по данным ВЭЖХ, 98%); К! 2,05 мин (метод 3); т/ζ 515 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В20. 3-((6-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-6метокси-Х-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения Э9(Р) (0,50 г, 1,0 ммоль) и ЕЭС (381 мг, 1,99 ммоль) в ТГФ (6,0 мл) добавляли 2-морфолиноэтанамин (261 мкл, 1,99 ммоль), реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем разбавляли водой (15 мл). Полученный осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (3x5,0 мл) и эфиром (3x5,0 мл) и затем ресуспендировали в ТГФ (5,0 мл) при комнатной температуре в течение 3 дней. Твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали ТГФ (2x5,0 мл) и эфиром (2x5,0 мл) и сушили в вакууме с получением трет-бутил(4-((6-((3-метокси-5((2-морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата в виде белого твердого вещества (227 мг, 36%); К! 2,68 мин (метод 4); т/ζ 615 (М+Н)+, (Е8+).
К суспензии описанного выше Вос-защищенного амина (227 мг, 0,370 ммоль) в МеОН (3,5 мл) добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (0,90 мл, 10 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученную смесь очищали непосредственно на катионообменной смоле с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения В20, в виде коричневого твердого вещества (181 мг, 89%); К! 2,14 мин (метод 4); т/ζ 515 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение В21. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5этинил-Х-(2-морфолиноэтил)бензамид
Промежуточное соединение О2(Р) (6,46 г, 17,37 ммоль), промежуточное соединение Ό1 (7,12 г, 26,0 ммоль) и моногидрат р-Т8А (5,62 г, 29,5 ммоль) в ДМФА (60 мл) нагревали при 60°С (температура нагревательного блока, 55°С внутренняя температура) в течение 7 ч. Смесь охлаждали и добавляли по каплям к насыщенному водному раствору NаНСО3 (1 л). Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (50 мл), затем изогексаном (100 мл). Аморфное твердое вещество перемешивали в МеОН (200 мл), и продукт кристаллизовали. Суспендировали в течение ночи, затем фильтровали, твердое вещество промывали МеОН (20 мл) и сушили с получением трет-бутил(4-((2-((3-этинил-5-((2морфолиноэтил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата (промежуточного соединения В21(Р), 8 г).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,76 (с, 1Н), 9,32 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,41-8,33 (м, 1Н), 8,16-8,03 (м, 2Н), 7,90 (т, 1Н), 7,85-7,78 (м, 1Н), 7,67-7,51 (м, 3Н), 7,48-7,37 (м, 2Н), 6,58 (д, 1Н), 4,16 (с, 1Н), 3,56 (т, 4Н), 3,46-3,27 (м, 2Н), 2,49-2,30 (м, 6Н), 1,52 (с, 9Н).
10% мас./мас. соединения со снятой ВОС-защитой.
ЖХМС т/ζ 609 (М+Н)+ (Е8+).
Добавляли по каплям ТРА (22 мл, 286 ммоль) к перемешиваемому раствору промежуточного соединения В21(Р) (9 г, 14,05 ммоль) в ЭСМ (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем добавляли по каплям к перемешиваемой воде (100 мл) и 1 М раствору карбоната калия (280 мл, 280 ммоль) и перемешивание продолжали до тех пор, пока не прекращалось выделение пузырьков газа. Смесь экстрагировали дихлорметаном (2x250 мл), затем объединенные органические фазы сушили (Мд8О4) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫР1а8Ь Сотратои (120 г колонка, от 2% МеОН:ЭСМ до 6%) с получением промежуточного соединения В21 (6,7 г) в виде бледно-коричневой пены.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,77 (с, 1Н), 8,39 (т, 1Н), 8,36 (д, 1Н), 8,17-8,10 (м, 1Н), 8,06 (с, 1Н), 7,94 (дд, 1Н), 7,67-7,59 (м, 1Н), 7,49-7,38 (м, 3Н), 7,15 (д, 1Н), 6,70 (д, 1Н), 6,37 (д, 1Н), 5,79 (с, 2Н), 4,20
- 51 025393 (с, 1Н), 3,56 (т, 4Н), 3,41-3,30 (м, 2Н), 2,48-2,34 (м, 6Н).
ЖХМС т/ζ 509 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение В22. (8)-3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)6-этинил-№(1-морфолинопропан-2-ил)бензамид
К перемешиваемому раствору (8)-1-морфолинопропан-2-амина, НС1 (72,6 мг, 0,402 ммоль), промежуточного соединения Л0(Р) (200 мг, 0,402 ммоль) и НАТИ (200 мг, 0,526 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли основание Хунига (280 мкл, 1,608 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой, в результате чего выпадал бежевый твердый осадок. Суспензию перемешивали в течение еще 20 мин, затем твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая водой. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИазЬ Сотратоп (40 г колонка, 0-5% МеОН в ОСМ) с получением (8)-трет-бутил(4-((2-((3-этинил-5-((1-морфолинопропан-2ил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата (133 мг) в виде бледнооранжевого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,73 (с, 1Н), 9,30 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,08-8,15 (м, 3Н), 7,91 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,54-7,63 (м, 3Н), 7,46 (с, 1Н), 7,42 (д, 1Н), 6,57 (д, 1Н), 4,13-4,20 (м, 1Н), 4,15 (с, 1Н), 3,54 (т, 4Н), 2,23-2,44 (м, 6Н), 1,52 (с, 9Н), 1,13 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 312 (М+2Н)2+ (Е8+).
К перемешиваемому раствору продукта с описанной выше стадии (133 мг, 0,214 ммоль) в ОСМ (10 мл) добавляли ТРА (2000 мкл, 26,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток загружали в картридж с предварительно подвергнутой специальной обработке катионообменной смолой. Смолу промывали МеОН, затем продукт выделяли в 1% ΝΉ3 в МеОН и концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения В22 (100 мг) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,73 (с, 1Н), 8,36 (д, 1Н), 8,12-8,15 (м, 2Н), 8,05 (с, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,62-7,65 (м, 1Н), 7,41-7,46 (м, 3Н), 7,14 (д, 1Н), 6,71 (д, 1Н), 6,36 (д, 1Н), 5,77 (с, 2Н), 4,12-4,20 (м, 1Н),
4,18 (с, 1Н), 3,54 (т, 4Н), 2,24-2,45 (м, 6Н), 1,13 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 523 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение В23. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6этинил-№(2-метил-1-морфолинопропан-2-ил)бензамид
К перемешиваемому раствору 2-метил-1-морфолинопропан-2-амина (64,0 мг, 0,404 ммоль), промежуточного соединения Л0(Р) (200 мг, 0,402 ммоль) и НАТИ (200 мг, 0,526 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли основание Хунига (280 мкл, 1,608 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой, в результате чего происходило образование осадка желтоватобелого твердого вещества, и суспензию продолжали перемешивать в течение 20 мин. Суспензию фильтровали в вакууме и твердое вещество промывали водой с получением трет-бутил(4-((2-((3-этинил-5-((2метил-1-морфолинопропан-2-ил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата (промежуточное соединение В23(Р), 245 мг) в виде твердого вещества кремового цвета, которое сушили при 40°С в вакууме в течение 2 ч.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,70 (с, 1Н), 9,30 (с, 1Н), 8,43 (д, 1Н), 8,10 (д, 1Н), 8,00 (с, 1Н), 7,89 (с, 1Н), 7,81 (д, 1Н), 7,53-7,62 (м, 4Н), 7,41 (д, 1Н), 7,37 (с, 1Н), 7,57 (д, 1Н), 4,13 (с, 1Н), 3,51-3,54 (м, 4Н), 2,61 (с, 2Н), 2,45-2,47 (м, 4Н), 1,51 (с, 9Н), 1,30 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 637 (М+Н)+ (Е8+).
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения В23(Р) (245 мг, 0,385 ммоль) в ЛСМ (10 мл) добавляли ТРА (2000 мкл, 26,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь концентрировали в вакууме, и остаток загружали в картридж с предварительно подвергнутой специальной обработке катионообменной смолой. Смолу промывали МеОН, затем продукт выделяли в 1% ΝΉ3 в МеОН и концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения В23 (200 мг) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,71 (с, 1Н), 8,36 (д, 1Н), 8,12-8,15 (м, 1Н), 7,95 (д, 2Н), 7,62-7,63 (м,
- 52 025393
2Н), 7,41-7,46 (м, 2Н), 7,36 (с, 1Н), 7,14 (д, 1Н), 6,70 (д, 1Н), 6,36 (д, 1Н), 5,77 (с, 2Н), 4,17 (с, 1Н), 3,523,55 (м, 4Н), 2,61 (с, 2Н), 2,46-2,48 (м, 4Н), 1,31 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 537 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение В24. (К)-3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)6-этинил^-(1-морфолинопропан-2-ил)бензамид
К перемешиваемому раствору (К)-1-морфолинопропан-2-амина, НС1 (73 мг, 0,404 ммоль), промежуточного соединения Л0(Р) (200 мг, 0,402 ммоль) и НАТИ (200 мг, 0,526 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли основание Хунига (280 мкл, 1,608 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой, в результате чего происходило образование осадка бежевого твердого вещества. Суспензию перемешивали в течение еще 20 мин, затем твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая водой. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакЬ Сотратои (40 г колонка, 0-5% МеОН в ОСМ) с получением (К)-трет-бутил(4-((2-((3-этинил-5-((1морфолинопропан-2-ил)карбамоил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)карбамата (промежуточного соединения В24(Р), 153 мг) в виде бледно-оранжевого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) 400 МГц, δ: 9,73 (с, 1Н), 9,30 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,09-8,15 (м, 3Н), 7,91 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,54-7,63 (м, 3Н), 7,46 (с, 1Н), 7,42 (д, 1Н), 6,57 (д, 1Н), 4,13-4,20 (м, 1Н), 4,15 (с, 1Н), 3,54 (т, 4Н), 2,23-2,44 (м, 6Н), 1,52 (с, 9Н), 1,13 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 312 (М+2Н)2+ (Е8+).
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения В24(Р) (153 мг, 0,246 ммоль) в ОСМ (10 мл) добавляли ТРА (2000 мкл, 26,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток загружали в картридж с предварительно подвергнутой специальной обработке катионообменной смолой. Смолу промывали МеОН, затем продукт выделяли в 1% N4 в МеОН и концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения В24 (120 мг) в виде бледно-коричневого стеклообразного твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-б6) 400 МГц, δ: 9,73 (с, 1Н), 8,36 (д, 1Н), 8,12-8,15 (м, 2Н), 8,04 (с, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,62-7,65 (м, 1Н), 7,41-7,46 (м, 3Н), 7,14 (д, 1Н), 6,71 (д, 1Н), 6,36 (д, 1Н), 5,77 (с, 2Н), 4,13-4,20 (м, 1Н),
4,18 (с, 1Н), 3,54 (т, 4Н), 2,24-2,45 (м, 6Н), 1,13 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 262 (М+2Н)2+ (Е8+).
Промежуточное соединение С1. 1-(4-(2-Хлорпиримидин-4-илокси)нафталин-1-ил)-3-(3-изопропил1-п-толил-1Н-пиразол-5-ил)мочевина
К раствору промежуточного соединения О2 (5,00 г, 18,4 ммоль) в смеси изопропилацетата (50 мл) и безводного ТГФ (50 мл) добавляли порциями фенил(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)карбамат, промежуточное соединение А4* (7,72 г, 23,0 ммоль), затем триэтиламин (0,64 мл, 4,6 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. В течение этого времени образовывался объемный осадок пурпурового цвета, который выделяли фильтрованием и затем промывали смесью изопропилацетата и ТГФ (1:1 об./об., 3x40 мл). Твердое вещество очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 330 г, 0-5% МеОН в ОСМ, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения С1, в виде бледно-пурпурного твердого вещества (5,72 г, 47%); КГ 2,48 мин (метод 4); т/ζ 513 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение С2. 1-(3-(трет-Бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-(4-((2хлорпиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина
Перемешиваемую суспензию промежуточного соединения А8* (3 г, 8,59 ммоль) и промежуточного соединения О2 (2,333 г, 8,59 ммоль) в изопропилацетате (100 мл) обрабатывали триэтиламином (0,3 мл, 2,152 ммоль) и перемешивали при 60°С (баня) в течение 1 ч. Раствор разбавляли этилацетатом (300 мл),
- 53 025393 промывали водой (2x100 мл), затем насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (На28О4) и упаривали. Остаток очищали на картридже КеЛ8ер с загруженным диоксидом кремния в количестве 220 г, используя сначала 5% и затем 40% ацетона в толуоле для 17 объемов колонки в качестве элюента, и затем на другом картридже КеЛ8ер с загруженным диоксидом кремния в количестве 220 г, используя от 0 до 3% МеОН/ИСМ в качестве элюента,, с получением промежуточного соединения С2 (3,703 г) в виде светло-коричневой пены.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб) δ 9,14 (с, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 8,65 (д, 1Н), 8,09 (д, 1Н), 7,96 (д, 1Н), 7,79 (д, 1Н), 7,67-7,64 (м, 1Н), 7,60-7,56 (м, 1Н), 7,47-7,37 (м, 5Н), 7,26 (д, 1Н), 6,41 (с, 1Н), 2,40 (с, 3Н), 1,28 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 527/529 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение С3. 1-(3-(трет-Бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)-3-(4-((2хлорпиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина
В колбе объемом 100 мл обрабатывали триэтиламином (113 мкл, 0,813 ммоль) раствор промежуточного соединения А9* (1917 мг, 5,24 ммоль) и промежуточного соединения С2 (1500 мг, 5,24 ммоль) в изопропилацетате (58 мл). Полученный коричневый раствор нагревали при 70°С в течение 2 ч, затем растворитель удаляли в вакууме с получением вязкого коричневого масла. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (120 г колонка, ЕЮАс 0-15% в ИСМ) с получением промежуточного соединения С3 (2,169 г) в виде белого кристаллического твердого вещества.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 9,14 (с, 1Н), 8,75 (с, 1Н), 8,66 (д, 1Н), 8,09 (д, 1Н), 7,97 (д, 1Н), 7,827,77 (м, 1Н), 7,69-7,62 (м, 1Н), 7,58 (ддд, 1Н), 7,51-7,46 (м, 2Н), 7,43 (д, 1Н), 7,27 (д, 1Н), 7,15-7,10 (м, 2Н), 6,40 (с, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 1,29 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 544 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение С4. 1-(2,3-Дихлор-4-((2-хлорпиримидин-4-ил)окси)фенил)-3-(3изопропил-1 -(п-толил) -1Н-пиразол-5 -ил)мочевина
К смеси промежуточного соединения А4* (1556 мг, 4,64 ммоль) и промежуточного соединения 04 (1348 мг, 4,64 ммоль) в 1РгОАс (30 мл) добавляли Е!3Н (0,1 мл, 0,717 ммоль) и нагревали при 60°С в течение 7 ч. Смесь распределяли между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором соли (100 мл), органический слой отделяли, промывали водой, сушили (Мд8О4) и упаривали при пониженном давлении. Остаток растирали с эфиром, фильтровали, промывали 1РгОАс, эфиром и сушили с получением промежуточного соединения С4 (986 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; ДМСО-б6) δ 9,23 (с, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,71 (д, 1Н), 8,15 (д, 1Н), 7,47 (д, 1Н), 7,42 (д, 2Н), 7,37-7,35 (м, 3Н), 6,35 (с, 1Н), 2,89 (септет, 1Н), 2,39 (с, 3Н), 1,23 (д, 6Н).
ЖХМС т/ζ 531/3 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение С5. 1-(4-((2-Хлорпиримидин-4-ил)окси)-2,3-дифторфенил)-3-(3изопропил-1 -(п-толил) -1Н-пиразол-5 -ил)мочевина
К смеси промежуточного соединения А4* (1,55 6 г, 4,64 ммоль) и промежуточного соединения 05 (1,195 г, 4,64 ммоль) в 1РгОАс (30 мл) добавляли Е!3Н (0,1 мл, 0,717 ммоль) и нагревали при 60°С в течение 7 ч. Смесь распределяли между ЕЮАс (200 мл) и насыщенным раствором соли (100 мл), органический слой отделяли, промывали водой, сушили (Мд8О4) и упаривали при пониженном давлении. Остаток растирали со смесью этил/изогексан, фильтровали и сушили с получением промежуточного соединения С5 (1,708 г) в виде светло-бежевого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; СОСЪ) δ 8,48 (д, 1Н), 7,94-7,89 (м, 1Н), 7,54 (с, 1Н), 7,26 (д, 2Н), 7,19 (д, 2Н), 6,97-6,92 (м, 3Н), 6,34 (с, 1Н), 2,97 (септет, 1Н), 2,34 (с, 3Н), 1,29 (д, 6Н).
ЖХМС т/ζ 499/501 (М+Н)+ (Е8+).
- 54 025393
Промежуточное соединение Ό1. 3-Амино-6-этинил-^(2-морфолиноэтил)бензамид
К суспензии Т3Р (2,76 мл, 4,63 ммоль), 3-амино-5-бромбензойной кислоты (1,00 г, 4,63 ммоль) и Βί3Ν (1,9 мл, 14 ммоль) в ЭСМ (20 мл) при 0°С добавляли 2-морфолиноэтанамин (0,91 мл, 6,9 ммоль), и смесь нагревали до комнатной температуры в течение 18 ч. Добавляли дополнительные аликвоты Т3Р (2,76 мл, 4,63 ммоль) и 2-морфолиноэтанамина (0,91 мл, 6,9 ммоль), и через 1 ч полученную смесь распределяли с использованием насыщенного водного раствора NаНСОз (20 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЭСМ (20 мл), и объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 40 г, МеОН в ЭСМ, 2-5%, градиентное элюирование) с получением 3-амино-5-бром-^(2морфолиноэтил)бензамида в виде желтого кристаллического твердого вещества (1,4 г, 92%); К! 0,16 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 328/330 (М+Н)+ (Е8+).
К полученной выше дегазированной суспензии бензамида (500 мг, 1,52 ммоль), йодида меди(1) (29,0 мг, 0,152 ммоль) и этинилтриизопропилсилана (0,51 мл, 2,3 ммоль) в смеси Е!зN (3,0 мл) и ДМФА (3,0 мл) добавляли Рй(РРЬ3)4 (176 мг, 0,152 ммоль), и смесь нагревали до 80°С в течение 1 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Твердые вещества удаляли фильтрованием через целит и легколетучие вещества упаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, МеОН в ЭСМ, 5-10%, градиентное элюирование) с получением 3амино-^(2-морфолиноэтил)-5-((триизопропилсилил)этинил)бензамида в виде бледно-желтой смолы (600 мг, 92%); К! 1,8 4 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 430 (М+Н)+ (Е8+).
К полученному выше раствору алкинилсилана (500 мг, 1,164 ммоль) в ТГФ (5,0 мл) добавляли ТВАР (116 мл, 1,16 ммоль), и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли дополнительную аликвоту ТВАР (114 мкл, 1,16 ммоль) и через 30 мин реакционную смесь распределяли между водой (10 мл) и этилацетатом (10 мл). Органический слой отделяли и промывали насыщенным раствором соли, затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 12 г, МеОН в ЭСМ, 2-5%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Ό1, в виде бесцветной смолы (260 мг, 82%); К! 1,17 мин (метод 2 щелочной); ЖХМС т/ζ 274 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Ό2. 3-Амино-6-метокси-^(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору 3-амино-5-метоксибензойной кислоты (2,00 г, 12,0 ммоль) в ЭСМ (20 мл) при 0°С добавляли 2-морфолиноэтанамин (1,90 мл, 14,5 ммоль) и Э1РЕА (4,20 мл, 24,1 ммоль) и затем добавляли порциями НАТИ (5,46 г, 14,4 ммоль) в течение 2 ч.
В течение этого времени образовывался объемный бежевый осадок, добавляли дополнительное количество ЭСМ (13 мл) для облегчения перемешивания, и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 18 ч. Полученный раствор разбавляли ЭСМ (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором NаНСО3 (40 мл), насыщенным водным раствором ΝΉ4Ο (40 мл) и насыщенным раствором соли (40 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 80 г, [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, 0-10%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Ό2, в виде бесцветного масла (1,95 г, 58%); К! 0,75 мин (метод 4); т/ζ 280 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Ό3. 3-Амино-5-бром-^(2-метоксиэтил)бензамид
К перемешиваемому раствору 3-амино-5-бромбензойной кислоты (1,90 г, 8,53 ммоль), 2метоксиэтанамина (1,50 мл, 17,08 ммоль) и триэтиламина (3,60 мл, 25,8 ммоль) в ЭСМ (30 мл) при 0°С добавляли 50 мас.% Т3Р в Е!ОАс (7,65 мл, 12,85 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем кипятили с обратным холодильником в течение 90 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли дополнительное количество триэтиламина (3,60 мл, 25,8 ммоль). Реакционный сосуд затем охлаждали на ледяной бане и добавляли
- 55 025393 мас.% Т3Р в ЕЮАс (7,65 мл, 12,85 ммоль) из только что открытой бутыли. Ледяную баню удаляли, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между насыщенным водным раствором NаΗСО3 (50 мл) и ЭСМ (50 мл). Водную фазу повторно экстрагировали свежей порцией ЭСМ (50 мл). Объединенные органические экстракты сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением оранжевого масла (3,12 г). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (80 г колонка, 010% МеОН в ЭСМ) с получением промежуточного соединения Ό3 (1,96 г) в виде оранжевого масла.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,37 (т, 1Н), 7,08 (т, 1Н), 7,00-6,99 (м, 1Н), 6,84 (т, 1Н), 5,57 (с, 2Н), 3,44-3,41 (м, 2Н), 3,39-3,33 (м, 2Н), 3,25 (с, 3Н). ЖХМС т/ζ 273/275 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Ό4. 3-Амино-6-этинил-^(2-метоксиэтил)бензамид
К дегазированной суспензии промежуточного соединения Ό3 (1,91 г, 6,85 ммоль), йодида меди(1) (0,065 г, 0,343 ммоль) и этинилтриизопропилсилана (2,30 мл, 10,25 ммоль) в ТЕА (4,1 мл, 29,4 ммоль) и ДМФА (20 мл) добавляли Рй(РРЬ3)4 (0,396 г, 0,343 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 85°С (внешняя температура) в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем распределяли между ЕЮАс (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Водную фазу повторно экстрагировали ЕЮАс (50 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением коричневого масла (3,41 г). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (120 г колонка, 0-100% ЕЮАс в изогексане) с получением 3-амино^-(2-метоксиэтил)-5-((триизопропилсилил)этинил)бензамида (1,34 г) в виде желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,43 (т, 1Н), 7,06-7,03 (м, 2Н), 6,78-6,77 (м, 1Н), 5,45 (с, 2Н), 3,433,40 (м, 2Н), 3,38-3,34 (м, 2Н), 3,25 (с, 3Н), 1,10 (с, 21Н). ЖХМС т/ζ 375 (М+Н)+ (Е8+). К полученному выше перемешиваемому раствору (триизопропилсилил)этинил-замещенного бензамида (1,32 г, 3,52 ммоль) в ЕЮАс (21 мл) сразу добавляли 1 М ТВАР в ТГФ (3,52 мл, 3,52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между водой (50 мл) и ЕЮАс (50 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором соли (50 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали с получением оранжевого масла. Неочищенный продукт растворяли в минимальном количестве МеОН и загружали в колонку с катионообменной смолой. Колонку элюировали МеОН, затем 1% Ν^ в МеОН. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением промежуточного соединения Ό4 (534 мг) в виде коричневого масла.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,37 (т, 1Н), 7,07-7,04 (м, 2Н), 6,75-6,74 (м, 1Н), 5,45 (с, 2Н), 4,07 (с, 1Н), 3,44-3,40 (м, 2Н), 3,38-3,34 (м, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
ЖХМС т/ζ 219 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Ό5. (8)-3-Амино-5-бром-^(1-метоксипропан-2-ил)бензамид
Вг
Перемешиваемую смесь 3-амино-5-бромбензойной кислоты (900 мг, 4,04 ммоль), (8)-1метоксипропан-2-амина (860 мкл, 8,14 ммоль) и триэтиламина (1,7 мл, 12,20 ммоль) в ЭСМ (15 мл) охлаждали на ледяной бане. Добавляли по каплям 50 мас.% Т3Р в ЕЮАс (3,6 мл, 6,05 ммоль), ледяную баню удаляли, и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры. Добавляли ДМФА (2 мл) для улучшения растворимости, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь распределяли между насыщенным водным раствором NаΗСО3 (50 мл) и ЭСМ (50 мл). Водную фазу повторно экстрагировали свежей порцией ЭСМ (50 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением оранжевого масла. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, 0-5% МеОН в ЭСМ) с получением промежуточного соединения Ό5 (1,07 г) в виде оранжевого масла.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,11 (д, 1Н), 7,08 (т, 1Н), 6,99-6,98 (м, 1Н), 6,84 (т, 1Н), 5,56 (с, 2Н), 4,18-4,08 (м, 1Н), 3,39-3,35 (м, 1Н), 3,26-3,22 (м, 1Н), 3,25 (с, 3Н), 1,09 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 287/289 (М+Н)+ (Е8+).
- 56 025393
Промежуточное соединение Ό6. (8)-3-Амино-6-этинил-^(1-метоксипропан-2-ил)бензамид
К дегазированному раствору промежуточного соединения Ό5 (970 мг, 3,31 ммоль), этинилтриизопропилсилана (1,12 мл, 4,99 ммоль), йодида медиД) (32 мг, 0,168 ммоль) и ΤΕА (2 мл, 14,35 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли Рб(РРЬ3)4 (193 мг, 0,167 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем распределяли между ΕΐОАс (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл). Водную фазу повторно экстрагировали ΕΐОАс (50 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным раствором соли (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением оранжевого масла (1,5 г). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (80 г колонка, 0-3% МеОН в ЭСМ) с получением (8)-3-амино-^(1-метоксипропан-2-ил)-5-((триизопропилсилил)этинил)бензамида (894 мг) в виде оранжевого масла.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,13 (д, 1Н), 7,04-7,03 (м, 1Н), 7,01 (т, 1Н), 6,79-6,78 (м, 1Н), 5,42 (с, 2Н), 4,18-4,11 (м, 1Н), 3,40-3,36 (м, 1Н), 3,26-3,22 (м, 4Н), 1,11-1,09 (м, 24Н).
ЖХМС т/ζ 389 (М+Н)+ (Ε8+).
К перемешиваемому раствору полученного выше (триизопропилсилил)этинил-замещенного бензамида (875 мг, 2,026 ммоль) в ΕΐοАс (12 мл) сразу добавляли 1 М ТВАР в ТГФ (2026 мкл, 2,026 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между водой (30 мл) и ΕΐОАс (20 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором соли (20 мл), сушили (МдЗО4), фильтровали и концентрировали с получением оранжевого масла (876 мг). Неочищенный продукт растворяли в минимальном количестве МеОН и загружали на колонку с катионообменной смолой. Колонку элюировали МеОН, затем 1% ΝΉ3 в МеОН. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением коричневого масла, которое очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, 0-5% МеОН в ЭСМ) с получением промежуточного соединения Ό6 (307 мг) в виде оранжевого масла.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 8,11 (д, 1Н), 7,07-7,03 (м, 2Н), 6,75-6,74 (м, 1Н), 5,44 (с, 2Н), 4,174,12 (м, 1Н), 3,39-3,34 (м, 1Н), 3,25-3,21 (м, 4Н), 1,09 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 233 (М+Н)+ (Ε8+).
Промежуточное соединение Ό7. 3-Амино-5-этинилбензамид
Рб(РРЬ3)4 (0,269 г, 0,233 ммоль) добавляли к дегазированной суспензии 3-амино-5-бромбензамида (0,5 г, 2,325 ммоль), Си! (0,044 г, 0,233 ммоль) и этинилтриизопропилсилана (0,782 мл, 3,49 ммоль) в ΤΕА (2 мл) и ДМФА (2 мл). Нагревали при 80°С (температура нагревательного блока) в течение 1 ч, затем охлаждали и фильтровали (через фильтры из микростекловолокна ОР/А фирмы \УНа1тап). Растворители упаривали, и остаток распределяли между ΕΐОАс (20 мл) и 20% мас./мас. раствором №-)С1 (25 мл). Органический слой отделяли, сушили (МдЗО4), фильтровали, и растворитель упаривали с получением вязкого коричневого масла. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫНа^Н Сотрапюп (40 г колонка, от 2% МеОНИСМ до 8%) с получением 3-амино-5-((триизопропилсилил)этинил)бензамида (475 мг) в виде бледно-коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 7,87 (с, 1Н), 7,21 (с, 1Н), 7,13-7,02 (м, 2Н), 6,79 (дд, 1Н), 5,40 (с, 2Н), 1,11 (с, 21Н).
ЖХМС т/ζ 317 (М+Н)+ (Ε8+).
Полученный выше (триизопропилсилил)этинил-замещенный бензамид (475 мг, 1,501 ммоль) сразу растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли 1 М ТВАР в ТГФ (1501 мкл, 1,501 ммоль). Перемешивали в течение 1 ч, затем распределяли между водой (20 мл) и этилацетатом (20 мл), органический слой отделяли, сушили (М§8О4), фильтровали и растворитель упаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫР1а5Н Сотрапюп (12 г колонка, от 5% МеОНПСМ до 10%) с получением промежуточного соединения Ό7 (145 мг) в виде бесцветного кристаллического твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Э.) δ 7,82 (с, 1Н), 7,22 (с, 1Н), 7,09 (дт, 2Н), 6,76 (дд, 1Н), 5,41 (с, 2Н), 4,06 (с, 1Н).
ЖХМС т/ζ 161 (М+Н)+ (Ε8+).
- 57 025393
Промежуточное соединение И8. 3-Амино-,-(2-диметиламино)этил)-5-этинилбензамид
Рб(РРЬ3)4 (0,218 г, 0,189 ммоль) добавляли к дегазированной суспензии 3-амино-5-бром-Ш(2(диметиламино)этил)бензамида (0,54 г, 1,887 ммоль), СЫ (0,036 г, 0,189 ммоль) и этинилтриизопропилсилана (0,635 мл, 2,83 ммоль) в ТЕА (2 мл) и ДМФА (2 мл). Нагревали до 80°С (температура нагревательного блока) в течение 1 ч, затем охлаждали и фильтровали (через фильтры из микростекловолокна СР/А фирмы ^Ьа1тап). Растворители упаривали и остаток распределяли между Е1ОАс (20 мл) 20% мас./мас. раствором ΝηΟ (25 мл). Органический слой отделяли, сушили (М§8О4), фильтровали и растворитель упаривали с получением вязкого коричневого масла. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫР1азЬ Сотрашоп (с колонкой 40 г, 10% МеОН:ИСМ) с получением 3-амино-,(2-(диметиламино)этил)-5-((триизопропилсилил)этинил)бензамида (600 мг) в виде бесцветной смолы, которая затвердевала при стоянии.
' Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,27 (т, 1Н), 7,04 (дд, 1Н), 7,02 (т, 1Н), 6,79 (дд, 1Н), 5,43 (с, 2Н), 3,33-3,26 (м, 2Н), 2,37 (т, 2Н), 2,17 (с, 6Н), 1,11 (с, 21Н).
ЖХМС т/ζ 388 (М+Н)+ (Е8+).
Полученный выше (триизопропилсилил)этинил-замещенный бензамид (600 мг, 1,548 ммоль) сразу растворяли в ТГФ (50 мл) и добавляли 1 М ТВАР в ТГФ (1548 мкл, 1,548 ммоль). Перемешивали в течение 1 ч, затем распределяли между водой (100 мл) и этилацетатом (100 мл), органический слой отделяли, промывали 20% мас./мас. раствором №·ιθ (100 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и упаривали. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫР1азЬ Сотратоп (12 г колонка, 10% МеОН:ИСМ) с получением промежуточного соединения И8 (240 мг) в виде бледно-желтой смолы.
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ 8,22 (т, 1Н), 7,10-6,99 (м, 2Н), 6,76 (дд, 1Н), 5,44 (с, 2Н), 4,07 (с, 1Н), 3,32-3,24 (м, 2Н), 2,37 (т, 2Н), 2,17 (с, 6Н).
Промежуточное соединение Е1. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)метилбензоат
К раствору Ста (1,47 г, 9,08 ммоль) в ИСМ (35 мл) добавляли промежуточное соединение А8 (2,08 г, 9,08 ммоль) и активацию реакционной смеси проводили при комнатной температуре в течение 18 ч, затем добавляли по каплям к раствору промежуточного соединения Н1 (1,3 г, 60% чистоты, 2,0 ммоль) в ИСМ (20 мл). Через 2 ч выдерживания при комнатной температуре реакционную смесь промывали смесью насыщенного водного раствора ,аНСО3 (100 мл), воды (100 мл) и насыщенного раствора соли (100 мл), и органический слой отделяли и упаривали в вакууме. Остаток растирали с МеОН (100 мл) и полученное твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали МеОН (50 мл) и сушили в вакууме. Аналогичным образом выделяли вторую порцию из фильтрата и две порции твердых веществ объединяли с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Е1, в виде пурпурного твердого вещества (755 мг, 85% чистоты, 50%); К1 2,64 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 642 (М+Н)+(Е8+). Полученное вещество использовали на следующей стадии, описанной ниже, без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение Е2. Метил 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино) -5 -метилбензоат
К раствору Ста (364 мг, 2,25 ммоль) в ИСМ (10,0 мл) добавляли промежуточное соединение А8 (515 мг, 2,25 ммоль), и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем аликвоту полученного раствора (5,0 мл, 1,1 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения Н4 (2 00 мг, 0,499 ммоль) в ИСМ (3,0 мл), затем объединенную реакционную смесь разбавляли ТГФ для облегчения перемешивания (5,0 мл) и выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию останавливали добавлением МеОН (10 мл) и полученный осадок выделяли фильтрованием, промывали МеОН (20
- 58 025393 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Е2, в виде бледно-розового твердого вещества (178 мг, 54%); КЕ 2,69 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 656 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Е3. Метил 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензоат
К раствору СГО1 (82 мг, 0,50 ммоль) в ЭСМ (2,0 мл) добавляли промежуточное соединение А9 (124 мг, 0,50 ммоль) и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли аликвоту полученного раствора (1,0 мл, 0,25 ммоль) к раствору промежуточного соединения Н5 (70 мг, 0,17 ммоль) в ЭСМ (2,0 мл), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем гасили добавлением МеОН (3,0 мл). Полученную смесь упаривали в вакууме, и остаток распределяли между ЭСМ (6,0 мл) и насыщенным водным раствором ХаНСО3 (6,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (10 мл) и насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток растирали с МеОН (10 мл), продукт выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Е3, в виде бледно-розового твердого вещества (116 мг, 100%); КЕ 2,65 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 688 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Е4. 3-Бром-5-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)метилбензоат
К раствору СГО1 (73 мг, 0,45 ммоль) в ЭСМ (2,0 мл) добавляли промежуточное соединение А9 (111 мг, 0,45 ммоль), и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляли аликвоту полученного раствора (1,0 мл, 0,23 ммоль) к раствору промежуточного соединения Н6 (60 мг, 0,13 ммоль) в ЭСМ (2,0 мл), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем гасили добавлением МеОН (3,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме, и остаток распределяли между ЭСМ (6,0 мл) и насыщенным водным раствором ХаНСО3 (6,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (10 мл) и насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток растирали с МеОН (10 мл), полученные таким образом твердые вещества выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Е4, в виде желтовато-белого твердого вещества (58 мг, 61%); КЕ 2,90 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 736/738 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Е5. Метил 3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензоат
К раствору СГО1 (320 мг, 1,98 ммоль) в ЭСМ (2,0 мл) добавляли промежуточное соединение А4 (425 мг, 1,98 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученный раствор добавляли к раствору промежуточного соединения Н5 (329 мг, 0,790 ммоль) в ТГФ (2,0 мл) при комнатной температуре и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч, в течение которых образовывался осадок. Твердые вещества выделяли фильтрованием, промывали ТГФ (10 мл) и затем сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Е5, в виде белого твердого вещества (407 мг, 76%); КЕ 2,65 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 658 (М+Н)+ (Е8+).
- 59 025393
Промежуточное соединение Р1. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензойная кислота
К суспензии полученного, как описано выше, промежуточного соединения Е1 (750 мг, 0,993 ммоль) в ТГФ (6,0 мл) добавляли ЫОН (36 мг, 1,5 ммоль) в смеси воды (1,0 мл) и МеОН (1,0 мл), полученную гетерогенную смесь нагревали при 40°С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч. Смесь концентрировали в вакууме до половины исходного объема и затем выливали в хлористо-водородную кислоту (1,0 М, 40 мл). Смесь разбавляли ЕЮАс (10 мл) и подвергали действию ультразвука в течение 10 мин с получением белого осадка в водной фазе, который выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Р1, в виде желтовато-белого твердого вещества (300 мг, 47%); К1 2,51 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 628 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Р2. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино) -5 -метилбензойная кислота
К суспензии полученного выше промежуточного соединения Е2 (175 мг, 0,267 ммоль) в ТГФ (6,0 мл) добавляли ЫОН (9,6 мг, 0,40 ммоль) в смеси воды (1,0 мл) и МеОН (1,0 мл), полученную гетерогенную смесь нагревали при 50°С в течение 5 ч и охлаждали до комнатной температуры. Через 18 ч реакционную смесь повторно нагревали до 50°С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры и подкисляли добавлением хлористо-водородной кислоты (1,0 М, 4,0 мл). Смесь разбавляли водой (6,0 мл) и образовавшийся осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (3,0 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Р2, в виде белого твердого вещества (161 мг, 92%); К1 2,59 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 642 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Р3. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензойная кислота
К суспензии промежуточного соединения Е3 (116 мг, 0,174 ммоль) в ТГФ (6,0 мл) добавляли ЫОН (6,3 мг, 0,26 ммоль) в смеси воды (1,0 мл) и МеОН (1,0 мл), полученную гетерогенную смесь нагревали при 40°С в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Через 18 ч смесь разбавляли ТГФ (2,0 мл) и повторно нагревали до 50°С в течение 1 ч, в течение которого образовывался раствор. После охлаждения до комнатной температуры смесь подкисляли хлористо-водородной кислотой (1,0 М, 3,0 мл) и затем разбавляли водой (5,0 мл). Образовавшийся в результате осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (3,0 мл) и затем сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Р3 в виде бледно-коричневого твердого вещества (67 мг, 52%); К1 2,38 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 674 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Р4. 3-Бром-5-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензойная кислота
К суспензии промежуточного соединения Е4 (58 мг, 0,079 ммоль) в ТГФ (6,0 мл) добавляли ЫОН (2,8 мг, 0,12 ммоль) в смеси воды (1,0 мл) и МеОН (1,0 мл), полученную гетерогенную смесь нагревали при 40°С в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Через 18 ч смесь разбавляли ТГФ
- 60 025393 (2,0 мл), нагревали до 50°С в течение 3 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. После еще 24 ч реакционную смесь подкисляли хлористо-водородной кислотой (1,0 М, 3,0 мл) и разбавляли водой (5,0 мл). Образовавшийся в результате осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (3,0 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Р4, в виде бледно-розового твердого вещества (42 мг, 74%); К1 2,70 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 722/724 (М+Н)+(Е8+).
Промежуточное ил)карбамат соединение С1(Р). трет-Бутил(4-((2-хлорпиридин-4 -ил)окси)нафталин-1 -
Смесь промежуточного соединения 01 (1000 мг, 3,69 ммоль) и дитрет-бутилдикарбоната (750 мг, 3,44 ммоль) в 1-ВиОН (10 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 ч. Смесь разбавляли водой (15 мл) и выделяли фильтрованием. Твердое вещество растирали в диэтиловом эфире с получением промежуточного соединения 01(Р) (1002 мг) в виде бледно-серого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-66) 400 МГц, δ: 9,37 (с, 1Н), 8,28 (д, 1Н), 8,16 (д, 1Н), 8,82 (дд, 1Н), 7,66 (д, 1Н), 7,66-7,54 (м, 2Н), 7,40 (д, 1Н), 7,03 (д, 1Н), 6,91 (дд, 1Н), 1,52 (с, 9Н).
Промежуточное соединение 03. 4-((6-Хлорпиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-амин
К раствору гидрохлорида 4-аминонафталин-1-ола (6,82 г, 31,4 ммоль) в ацетонитриле (80 мл) при 0°С добавляли по каплям ΌΒυ (11,0 мл, 75,0 ммоль). Через 10 мин добавляли порциями 4,6дихлорпиримидин (5,00 г, 34,0 ммоль) в течение 5 мин, реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 3 ч и затем упаривали в вакууме. Остаток разбавляли водой (250 мл), подвергали действию ультразвука в течение 15 мин и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Полученный осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (3x100 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 03, в виде серого твердого вещества (8,27 г, 97%); К1 1,85 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 272 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение 03(Р). трет-Бутил(4-((6-хлорпиримидин-4-ил)окси)нафталин-1ил)карбамат
К раствору трет-бутил(4-гидроксинафталин-1-ил)карбамата (10,0 г, 29,3 ммоль) и 4,6дихлорпиримидина (4,37 г, 29,3 ммоль) в МеСN (75 мл) в атмосфере Ν2 добавляли ΌΒυ (5,3 мл, 35 ммоль) с такой скоростью, чтобы внутренняя температура сохранялась в диапазоне 18-21°С. Через 1 ч добавляли воду (75 мл) и полученную гетерогенную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученный осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (2x75 мл) и затем сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 03 (Р), в виде коричневого твердого вещества (10,4 г, 95%); К1 2,57 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 372 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение 04. 2,3-Дихлор-4-((2-хлорпиримидин-4-ил)окси)анилин
ΌΒυ (11,85 мл, 79 ммоль) добавляли в течение 5 мин к перемешиваемой смеси 4-амино-2,3дихлорфенола (10 г, 56,2 ммоль) в МеСN (150 мл) при 0-5°С. После перемешивания в течение 5 мин добавляли порциями 2,4-дихлорпиримидин (8,95 г, 60,1 ммоль) в течение 5 мин, затем смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Растворитель упаривали при пониженном давлении и остаток распределяли между эфиром (200 мл) и водой (200 мл). Водный слой экстрагировали эфиром (200 мл), затем объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (200 мл), сушили (М§8О4), фильтровали через слой диоксида кремния и упаривали при пониженном давлении. Остаток растирали со смесью эфир-изогексан, фильтровали и сушили с получением промежуточного
- 61 025393 соединения 04 (14,403 г) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (ΟϋΟ13) 400 МГц, δ: 8,45 (д, 1Н), 6,96 (д, 1Н), 6,84 (д, 1Н), 6,73 (д, 1Н), 4,22 (с, 2Н). ЖХМС т/ζ 290/2/4 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение 05. 4-((2-Хлорпиримидин-4-ил)окси-2,3-дифторанилин
ΌΒυ (7,27 мл, 48,2 ммоль) добавляли в течение 5 мин к перемешиваемой смеси 4-амино-2,3дифторфенола (5 г, 34,5 ммоль) в МеСN (100 мл) при 0-5°С. После перемешивания в течение 5 мин добавляли порциями 2,4-дихлорпиримидин (5,49 г, 36,9 ммоль) в течение 5 мин, затем смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч. Растворитель упаривали при пониженном давлении, и остаток распределяли между эфиром (200 мл) и водой (200 мл). Водный слой экстрагировали эфиром (200 мл), затем объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (200 мл), сушили (Мд8О4) и упаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (120 г колонка, 0-40% ЕЮАс/изогексан) с получением промежуточного соединения 05 (4,827 г) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц; СПС13) δ 8,46 (д, 1Н), 6,89 (д, 1Н), 6,81-6,77 (м, 1Н), 6,58-6,53 (м, 1Н), 3,85 (с, 2Н). ЖХМС т/ζ 258/260 (М+Н)+ (Е8+).
Промежуточное соединение Н1. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)метилбензоат
К раствору промежуточного соединения 02 (5,20 г, 17,0 ммоль) и 3-аминометилбензоата (5,90 г, 39,0 ммоль) в ТГФ (60 мл) добавляли р-Т8А (592 мг, 3,11 ммоль) и полученную суспензию кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и суспендированные твердые вещества выделяли фильтрованием, промывали ТГФ (2x50 мл) и Е!2О (2x50 мл) и затем сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Н1, в виде пурпурного твердого вещества (1,91 г, 29%); К! 2,06 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 387 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н2(Р). Метил 3-((4-((4-((трет-бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензоат
К дегазированной суспензии промежуточного соединения 02(Р) (2,0 г, 5,4 ммоль) в изопропилацетате (15 мл) добавляли метил 3-амино-4-метоксибензоат (1,95 г, 10,8 ммоль) и ТРА (0,42 мл, 5,6 ммоль). Реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом для облегчения перемешивания (15 мл), нагревали до 65°С в течение 3 дней и затем охлаждали до комнатной температуры. Образовывался осадок, который удаляли фильтрованием. Анализ твердого вещества ЖХМС показывал, что он не содержит требуемого продукта, и материал отбрасывали. Фильтрат распределяли между ЕЮАс (100 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (100 мл) и органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x50 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 80 г, 0-50%, ЕЮАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Н2(Р), в виде бледно-розового твердого вещества (1,79 г, 64%); К! 2,70 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 517 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н3. Метил 4-((4-((4-аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3 -метоксибензоат
К раствору промежуточного соединения 02 (1,5 г, 5,5 ммоль) в ДМФА (6,5 мл) добавляли метил 4амино-3-метоксибензоат (1,20 г, 6,62 ммоль) и моногидрат р-Т8А (1,57 г, 8,28 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 6 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и распределяли ме- 62 025393 жду ЕГОАс (50 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (50 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (2x50 мл). Образовывался осадок, который выделяли фильтрованием. Анализ твердого вещества ЖХМС показывал, что он не содержит требуемого продукта, и материал отбрасывали. Фильтрат упаривали в вакууме с образованием красного масла, которое очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 80 г, 0-70% ЕГОАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением промежуточного соединения Н3 в виде темно-пурпурного твердого вещества (459 мг, 20%); КГ 2,26 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 417 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н3(Р). Метил 4-((4-((4-((трет-бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3-метоксибензоат
К дегазированной суспензии промежуточного соединения О2(Р) (4,08 г, 11,0 ммоль) в изопропилацетате (30,0 мл) добавляли метил 4-амино-3-метоксибензоат (2,98 г, 16,5 ммоль) и ТРА (0,85 мл, 11 ммоль). Реакционную смесь разбавляли изопропилацетатом (30 мл) для облегчения перемешивания, полученную суспензию нагревали до 65°С в течение 3 дней и затем охлаждали до комнатной температуры. Суспендированные твердые вещества выделяли фильтрованием, промывали изопропилацетатом и полученный таким образом неочищенный продукт очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 80 г, 0100% ЕГОАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Н3(Р), в виде бледно-пурпурного твердого вещества (1,65 г, 28%); КГ 2,80 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 517 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н4. Метил 3-((4-((4-аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метилбензоат
К раствору промежуточного соединения О2 (806 мг, 2,97 ммоль) и метил 3-амино-5-метилбензоата (490 мг, 2,97 ммоль) в ДМФА (20 мл) добавляли р-Т8А (1,13 г, 5,93 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 60°С в течение 16 ч. После охлаждения до комнатной температуры, смесь распределяли между ЕГОАс (30 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (30 мл). Органическую фазу отделяли и промывали водой (30 мл) и насыщенным раствором соли (40 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12,0 г, 0-100% ЕГОАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Н4, в виде красного масла (680 мг, 25%); КГ 2,13 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 401 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н5. Метил 3-((4-((4-аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метоксибензоат
К смеси промежуточного соединения О2(Р) (41,0 г, 110 ммоль) и метил 3-амино-5-метоксибензоата (20,3 г, 111 ммоль) в ТГФ (200 мл) добавляли р-Т8А (592 мг, 3,11 ммоль) и полученную суспензию нагревали при 60°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и суспендированные твердые вещества выделяли фильтрованием, промывали ТГФ (2x100 мл) и затем ресуспендировали в растворе N4 в МеОН (0,7 М) и интенсивно перемешивали. Через 30 мин твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали N4 в МеОН (0,7 М) и затем сушили в вакууме с получением метил 3-((4-((4-((трет-бутоксикарбонил)амино)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензоата, промежуточного соединения Н5(Р), в виде бежевого твердого вещества (34,0 г, 92% чистоты по данным ВЭЖХ, 56%).
К суспензии промежуточного соединения Н5(Р) (10,2 г, 92% риге, 18,2 ммоль) в ОСМ (50 мл) добавляли по каплям ТРА (10 мл, 130 ммоль) и полученный черный раствор выдерживали при комнатной температуре в течение 21 ч. Добавляли дополнительную аликвоту ТРА (5,0 мл, 67 ммоль) и через 3 ч реакционную смесь упаривали в вакууме. Остаток упаривали совместно с толуолом (100 мл), затем с раствором N4 в МеОН (0,7 М, 2x100 мл), растирали с МеОН (100 мл), затем полученное твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали МеОН (50 мл) и сушили в вакууме с получением указанного в
- 63 025393 заголовке соединения, промежуточного соединения Н5, в виде бежевого твердого вещества (7,9 г, 99%); К1 2,15 мин (метод 2, кислотный, 92% чистота); т/ζ 417 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Н6. Метил 3-((4-((4-аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-бромбензоат
К раствору промежуточного соединения 02 (236 мг, 0,869 ммоль) и метил 3-амино-5-бромбензоата (200 мг, 0,869 ммоль) в ДМФА (6,0 мл) добавляли р-Т8А (331 мг, 1,74 ммоль) и полученную смесь нагревали при 60°С в течение 8 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь распределяли между ЕЮАс (10 мл) и насыщенным водным раствором НаНСО3 (10 мл). Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли (10 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, 0-100% ЕЮАс в изогексане, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Н6, в виде коричневого твердого вещества (124 мг, 82% чистоты по данным ВЭЖХ, 25%); К1 2,15 мин (метод 2, кислотный, 82% чистота); т/ζ 465/467 (М+Н)+, (Е8+). Полученное вещество использовали на последующих стадиях без дополнительной очистки.
Промежуточное соединение Л. 3-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)бензойная кислота
К раствору промежуточного соединения Н1, (905 мг, 2,34 ммоль) в смеси ТГФ (5,0 мл) и воды (2,0 мл) добавляли водный раствор НаОН (2,0 М, 1,4 мл, 2,8 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Полученную смесь подкисляли до рН 6 добавлением 2 М хлористо-водородной кислоты, что приводило к образованию пурпурного осадка. Твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Л, в виде бледно-пурпурного твердого вещества (643 мг, 73%); К1 1,62 мин (метод 2 щелочной); т/ζ 373 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Э2(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензойная кислота
К суспензии метилового эфира промежуточного соединения Н2(Р), (1,75 г, 3,39 ммоль) в ТГФ (12 мл) добавляли раствор ЫОН (122 мг, 5,08 ммоль) в водном МеОН (1:1 об./об., 6,0 мл). Реакционную смесь нагревали до 40°С в течение 40 мин, охлаждали до комнатной температуры в течение 18 ч и затем повторно нагревали до 40°С в течение 2 ч. Добавляли вторую порцию ЫОН (41 мг, 1,7 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 24 ч и затем упаривали в вакууме до половины ее исходного объема. Концентрат выливали в хлористо-водородную кислоту (1,0 М, 20 мл), в результате чего образовывался желтовато-белый осадок. Твердое вещество выделяли фильтрованием, промывали водой и затем сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Э2(Р), в виде белого твердого вещества (1,25 г, 64%); К1 2,46 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 503 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение 13. 4-((4-((4-Аминонафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3метоксибензойная кислота
К суспензии промежуточного соединения Н3, (450 мг, 1,08 ммоль) в ТГФ (4,0 мл) добавляли раствор ЫОН (39 мг, 1,6 ммоль) в смеси воды и МеОН (1:1 об./об., 2,0 мл), реакционную смесь нагревали до
- 64 025393
40°С в течение 4 ч и затем выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней. Полученную смесь концентрировали до половины ее исходного объема в вакууме и концентрат выливали в водный раствор хлористо-водородной кислоты (1,0 М, 10,0 мл). Смесь нейтрализовали водным раствором ЫаОН (2,0 М) и экстрагировали ОСМ. Органический экстракт промывали насыщенным раствором соли (2x30 мл), затем сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 13, в виде коричневого твердого вещества (328 мг, 72%); К1 1,92 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 403 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение 13(Р). 4-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3 -метоксибензойная кислота
К суспензии метилового эфира промежуточного соединения Н3(Р) (1,65 г, 3,19 ммоль) в ТГФ (12 мл) добавляли раствор ЫОН (115 мг, 4,79 ммоль) в водном МеОН (1:1 об./об., 6,0 мл) и смесь нагревали до 40°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь упаривали в вакууме до половины ее исходного объема и полученный концентрат затем выливали в хлористо-водородную кислоту (1,0 М, 20 мл). Образовывался осадок, который выделяли фильтрованием, промывали водой и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 13(Р), в виде бледно-розового твердого вещества (1,12 г, 68%); К1 3,86 мин (метод 3); т/ζ 503 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Э4(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -метилбензойная кислота
К раствору промежуточного соединения 02 (Р) (950 мг, 2,56 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) добавляли 3-амино-5-метилбензойную кислоту (772 мг, 5,11 ммоль) и моногидрат р-Т8А (97 мг, 0,51 ммоль), реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 24 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь разбавляли ЫН3 в МеОН (0,7 М, 50 мл) и повторно упаривали в вакууме. Остаток растирали с МеОН (30 мл) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 14(Р), в виде коричневого твердого вещества (727 мг, 56%); К1 3,81 мин (метод 3); т/ζ 487 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Э5(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -(трифторметил)бензойная кислота
К дегазированному раствору промежуточного соединения 02(Р) (1,00 г, 2,71 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) добавляли 3-амино-5-(трифторметил)бензойную кислоту (1,11 г, 5,42 ммоль) и моногидрат р-Т8А (103 мг, 0,542 ммоль), смесь нагревали до 65°С в течение 24 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученную смесь разбавляли ЫН3 в МеОН (0,7 М, 30 мл) и повторно упаривали в вакууме, остаток ресуспендировали в ЫН3 в МеОН (0,7 М, 60 мл) и упаривали в вакууме. Совместное упаривание повторяли еще раз, и полученный таким образом остаток растирали с МеОН (20 мл). Твердый продукт выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 15(Р), в виде бледно-коричневого твердого вещества (577 мг, 37%); К1 4,02 мин (метод 3); т/ζ 541 (М+Н)+, (Е8+).
- 65 025393
Промежуточное соединение Й6(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -метоксибензойная кислота
К дегазированному раствору промежуточного соединения О2(Р) (10,0 г, 27,0 ммоль) в безводном ТГФ (150 мл) добавляли 3-амино-5-метоксибензойную кислоту (8,99 г, 53,8 ммоль) и моногидрат р-Т8А (1,02 г, 5,38 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 24 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и упаривали в вакууме. Остаток суспендировали в ΝΉ3 в МеОН (0,7 М, 100 мл) и упаривали в вакууме. Эту методику повторяли (0,7 М в МеОН, 250 мл) и полученное таким образом вещество объединяли с неочищенным продуктом той же самой реакции, проведенной с тем же самым количеством используемых веществ. Объединенные вещества ресуспендировали с МеОН (4x125 мл) и полученное твердое вещество выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 16(Р), в виде бледно-коричневого твердого вещества, (11,3 г, 30%); К! 1,60 мин (метод 2 щелочной); т/ζ 503 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Й7(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -хлорбензойная кислота
К раствору промежуточного соединения О2 (Р) (1,01 г, 2,72 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) добавляли 3-амино-5-хлорбензойную кислоту (1,11 г, 5,42 ммоль) и моногидрат р-Т8А (103 мг, 0,542 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 24 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли Ν43 в МеОН (0,7 М, 60 мл) и упаривали в вакууме. Этот процесс повторяли еще два раза и остаток растирали с МеОН (30 мл). Полученное твердое вещество выделяли фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 17(Р), в виде коричневого твердого вещества (374 мг, 27%); К! 4,06 мин (метод 3); т/ζ 507 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Й8(Р). 3-Бром-5-((4-((4-((трет-бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензойная кислота
К дегазированному раствору промежуточного соединения О2(Р) (1,5 г, 4,0 ммоль) в безводном ТГФ (20 мл) добавляли 3-амино-5-бромбензойную кислоту (1,57 г, 7,26 ммоль) и моногидрат р-Т8А (153 мг, 0,807 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 24 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ΝΉ3 в МеОН (0,7 М, 60 мл) и затем упаривали в вакууме. Этот процесс повторяли еще один раз, и полученный таким образом остаток затем растирали с МеОН (60 мл). Полученное таким образом твердое вещество выделяли фильтрованием и сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения Л8(Р), в виде бледно-коричневого твердого вещества (1,33 г, 57%); К! 4,21 мин (метод 3); т/ζ 552/554 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Й9(Р). 3-((6-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5 -метоксибензойная кислота
К раствору промежуточного соединения О3(Р) (5,00 г, 2,56 ммоль) в безводном ТГФ (50 мл) добавляли 3-амино-5-метоксибензойную кислоту (4,50 г, 26,9 ммоль) и моногидрат р-Т8А (512 мг, 2,69 ммоль), реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 18 ч и затем кипятили с обратным холодильником в течение еще 4 ч. Полученную смесь разбавляли ДМФА (20 мл), нагревали до 95°С в течение 2 ч и
- 66 025393 затем выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней. Смесь повторно нагревали до 95°С в течение 24 ч, затем охлаждали и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в МеОН и загружали в катионообменную смолу (25 г). Требуемый материал не сорбировался смолой, и загруженную фракцию собирали и упаривали в вакууме. Остаток два раза совместно упаривали с ΝΉ3 (0,7М, 200 мл), затем растворяли в Е!ОАс/ТГФ (10:1 об./об., 250 мл) и промывали насыщенным раствором соли (3x100 мл). Органическую фазу упаривали в вакууме и остаток растирали с МеОН (100 мл), затем выделяли фильтрованием и промывали дополнительным количеством МеОН (3x10 мл) с получением указанного в заголовке соединения, промежуточного соединения 19(Р), в виде коричневого твердого вещества (2,67 г, 34%); Р! 1,58 мин (метод 2 щелочной); т/ζ 503 (М+Н)+, (Е8+).
Промежуточное соединение Л0(Р). 3-((4-((4-((трет-Бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -этинилбензойная кислота
К суспензии хлорида аммония в частично растворенном состоянии (0,065 г, 1,219 ммоль) в ША (70 мл) добавляли метил 3-этинил-5-нитробензоат (0,5 г, 2,437 ммоль) и смесь порошка железа (1,36 г, 24,35 ммоль) в воде (5 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением оранжевого воскообразного твердого вещества. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакй Сотратоп (40 г колонка, 0-5% МеОН в ЛСМ) с получением метил 3-амино-5-этинилбензоата (332 мг) в виде бледно-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 7,21 (т, 1Н), 7,12 (с, 1Н), 6,87 (т, 1Н), 5,62 (с, 2Н), 4,13 (с, 1Н), 3,81 (с, 3Н).
ЖХМС т/ζ 176 (М+Н)+ (Е8+).
Суспензию промежуточного соединения О2 (Р) (1,5 г, 4,03 ммоль), продукта с проведенной выше стадии (1,41 г, 8,05 ммоль), и моногидрата р-Т8А (0,15 г, 0,789 ммоль) в ТГФ/ДМФА (60 мл, 1:1) нагревали при 60°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между Е!ОАс (60 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (100 мл). Водный слой экстрагировали Е!ОАс (2x60 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (2x100 мл), насыщенным раствором соли (2x50 мл), сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакй Сотратоп (80 г колонка, 0-5% МеОН в ЛСМ) с получением продукта в виде оранжевого твердого вещества. Твердое вещество растирали в смеси МеОН и гексана с получением продукта в виде белого твердого вещества с 90% чистотой. Остальные 10% идентифицировали как вещество со снятой Вос-защитой. Смесь суспендировали в ЛСМ (70 мл), и добавляли небольшой объем ТГФ для улучшения растворимости (5 мл). Добавляли триэтиламин (0,14 мл, 0,8 ммоль), затем дитрет-бутилдикарбонат (90 мг, 0,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали на диоксиде кремния и неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакй Сотратоп (80 г колонка, 10-50% Е!ОАс в гексане) с получением метил 3-((4-((4-((трет-бутоксикарбонил)амино)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинилбензоата (476 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,87 (с, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 8,48 (д, 1Н), 8,30 (с, 1Н), 8,10 (д, 1Н), 8,03 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,49-7,54 (м, 3Н), 7,49 (с, 1Н), 7,43 (д, 1Н), 6,63 (д, 1Н), 4,21 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 1,52 (с, 9Н).
К перемешиваемому раствору полученного на предыдущей стадии продукта (0,476 г, 0,932 ммоль) в ТГФ (10 мл) сразу добавляли 1,0 М водный раствор гидроксид натрия (10 мл, 10,00 ммоль) и реакционную смесь интенсивно перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Температуру реакции повышали до 50°С и перемешивание продолжали в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой (40 мл) и ТГФ удаляли в вакууме с получением мутной суспензии. Суспензию подкисляли до рН 2 добавлением 1 М НС1 и полученное твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая большим количеством воды. Твердое вещество сушили в вакууме при 40°С в течение 4 ч с получением промежуточного соединения Л0(Р) (436 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 13,09 (с, 1Н), 9,84 (с, 1Н), 9,33 (с, 1Н), 8,48 (д, 1Н), 8,28 (с, 1Н), 8,10 (д, 1Н), 8,01 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,54-7,63 (м, 3Н), 7,42-7,48 (м, 2Н), 6,61 (д, 1Н), 4,18 (с, 1Н), 1,52 (с, 9Н).
- 67 025393
Промежуточное соединение М1. 3-(трет-Бутил)-1-(4-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразол-5карбоновая кислота
.ГЧ^
Ме Ме
Пиридин (350 мкл, 4,33 ммоль) после активации молекулярными ситами 4А (0,5 г) добавляли к перемешиваемой смеси (4-(диметиламино)фенил)бороновой кислоты (575 мг, 3,48 ммоль), этил 3-(третбутил)-1Н-пиразол-5-карбоксилата (425 мг, 2,166 ммоль) и ацетата меди(11) (590 мг, 3,25 ммоль) в ЭСМ (15 мл) при комнатной температуре при доступе воздуха. Смесь перемешивали в течение 4 ч. Добавляли смесь эфир/изогексан (3:1, 300 мл), и твердое вещество отфильтровывали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией в системе СотЫИакЬ Сотратоп (80 г колонка, 0-60% эфир/изогексан) с получением 3-(трет-бутил)-1-(4-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразоле5этилкарбоксилата (464 мг) в виде бесцветного масла.
ЖХМС т/ζ 316 (М+Н)+ (Е8+).
М раствор гидроксида натрия (1,5 мл, 1,500 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору продукта с приведенной выше стадии (ί) (0,46 г, 1,458 ммоль) в тетрагидрофуране (3 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре, затем добавляли метанол (1 мл) и смесь перемешивали в течение еще 1 ч. Смесь затем нагревали до 40°С в течение 1 ч, разбавляли водой (10 мл) и промывали диэтиловым эфиром (2x10 мл). Водные фазы обрабатывали 1 М НС1 (1,5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли (10 мл), сушили (МдЗО4) и концентрировали с получением промежуточного соединения М1 (395 мг) в виде желтовато-белого твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц; СОСЕ) δ: 7,28-7,22 (м, 2Н), 6,91 (с, 1Н), 6,74-6,67 (м, 2Н), 2,98 (с, 6Н), 1,35 (с,
9Н).
ЖХМС т/ζ 288 (М+Н)+ (Е8+); 286 (М-Н)- (Е8-).
Примеры соединений по изобретению
Пример 1. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиридин-2-ил)амино)-6-метокси^-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору промежуточного соединения А8 (74 мг, 0,32 ммоль) в ЭСМ (1,0 мл) добавляли СЭ1 (54 мг, 0,34 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при 40°С в течение 2 ч. Аликвоту полученного раствора (310 мкл, 0,099 ммоль), содержащего образовавшийся аддукт пиразола и СЭЕ добавляли к раствору промежуточного соединения В1 (50 мг, 0,078 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при комнатной температуре, и полученную смесь выдерживали при этой температуре в течение 18 ч. Затем добавляли вторую аликвоту аддукта пиразола и СЭ1 (160 мкл, 0,05 ммоль), и через 3 ч реакционную смесь распределяли между ЕБОАс (50 мл) и насыщенным водным раствором NаНСО3 (50 мл) при комнатной температуре. Органическую фазу отделяли и промывали последовательно насыщенным водным раствором NаНСО3 (2x50 мл), водой (2x50 мл) и насыщенным раствором соли (2x50 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 1, в виде бледно-пурпурного твердого вещества (16 мг, 22%);
КБ 2,63 мин (метод 3); т/ζ 767 (М-Н)- (Е8-);
'Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,37-2,45 (9Н, перекрывающийся м), 3,34 (2Н, м), 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м), 3,73 (3Н, с), 6,11 (1Н, д), 6,41 (1Н, с), 6,56 (1Н, дд), 6,85 (1Н, м), 7,34-7,40 (3Н, перекрывающийся м), 7,45-7,50 (3Н, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, м), 7,65 (1Н, м), 7,84 (1Н, д), 7,97 (1Н, д), 8,09-8,12 (2Н, перекрывающийся м), 8,22-8,27 (2Н, перекрывающийся м), 8,84 (1Н, ушир.с), 9,07 (1Н, ушир.с), 9,19 (1Н, ушир.с).
- 68 025393
Пример 2. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид
К суспензии промежуточного соединения Р1 (50 мг, 0,080 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) добавляли Э1РЕА (28 мкл, 0,16 ммоль) и НАТИ (36 мг, 0,096 ммоль) и через 10 мин реакционную смесь обрабатывали ΝΉ4Ο (4,7 мг, 0,088 ммоль) при комнатной температуре. Полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем распределяли между насыщенным водным раствором NаНСОз (3,0 мл) и Е!ОАс (3,0 мл). Органическую фазу отделяли и промывали хлористо-водородной кислотой (1,0 М, 3,0 мл) и насыщенным раствором соли (3,0 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 4,0 г, МеОН в Е!ОАс, 0-100%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 2, в виде белого твердого вещества (8 мг, 16%);
К! 2,30 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 627 (М+Н)+ (Е8+); т/ζ 625 (М-Н)- (Е8-);
Ή ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (3Н, с), 6,42 (1Н, с), 6,55 (1Н, д), 6,99 (1Н, м), 7,23 (1Н, ушир.с), 7,29 (1Н, д), 7,36-7,42 (3Н, перекрывающийся м), 7,44-7,50 (3Н, перекрывающийся м), 7,53-7,65 (2Н, перекрывающийся м), 7,75 (1Н, ушир.с), 7,81 (1Н, д), 7,89-7,94 (2Н, перекрывающийся м), 8,07 (1Н, д), 8,40 (1Н, д), 8,75 (1Н, ушир.с), 9,13 (1Н, ушир.с), 9,60 (1Н, ушир.с).
Пример 3. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-^(2-морфолиноэтил)бензамид
К суспензии промежуточного соединения Р1 (680 мг, 1,08 ммоль) в ЭСМ (10 мл) при 0°С добавляли оксалилхлорид (110 мкл, 1,30 ммоль) и ДМФА (1 каплю), полученную красную смесь выдерживали при 0°С в течение 20 мин и затем нагревали до комнатной температуры. Через 1 ч добавляли вторую аликвоту оксалилхлорида (110 мкл, 1,30 ммоль), полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем упаривали в вакууме с получением красного твердого вещества (800 мг). Полученное вещество использовали в последующей реакции амидного сочетания без очистки или аналитической идентификации. К суспензии порции полученного выше твердого вещества (60 мг, 0,080 ммоль) в ЭСМ (1,5 мл) добавляли Э1РЕА (32 мкл, 0,19 ммоль) и 2-морфолиноэтанамин (13 мкл, 0,10 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Полученную смесь промывали последовательно насыщенным водным раствором NаНСОз (5,0 мл), водой (5,0 мл) и насыщенным раствором соли (5,0 мл) и затем очищали непосредственно колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, МеОН в Е!ОАс, 0-100%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 3, в виде бледно-желтого твердого вещества (35 мг, 50%); К! 1,82 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 740 (М+Н)+ (Е8+);
'Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,36-2,45 (9Н, перекрывающийся м), 3,32 (2Н, м), 3,54-3,56 (4Н, перекрывающийся м), 6,42 (1Н, с), 6,56 (1Н, д), 7,01 (1Н, м), 7,24 (1Н, д), 7,35-7,50 (6Н, перекрывающийся м), 7,53-7,65 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,87 (1Н, ушир.с), 7,92 (1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,18 (1Н, м), 8,40 (1Н, д), 8,75 (1Н, ушир.с), 9,13 (1Н, ушир.с), 9,62 (1Н, ушир.с).
Пример 4. 4-((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-^(2-гидроксиэтил)-3-метоксибензамид
К раствору СЭ1 (55 мг, 0,34 ммоль) в ЭСМ (1,0 мл) добавляли промежуточное соединение А8 (77 мг, 0,34 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Добавляли аликвоту полученного раствора (0,80 мл, 0,27 ммоль) к раствору промежуточного соединения В6 (50 мг, 0,11 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при комнатной температуре и смесь выдерживали при этой температуре в течение 18 ч и затем гасили добавлением МеОН (2,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, 0-10%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 4, в виде
- 69 025393 бледно-розового твердого вещества (28 мг, 34%); К1 3,83 мин (метод 3); т/ζ 701 (М+Н)+ (Е§+);
Ή ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (3Н, с), 3,27 (2Н, м), 3,47 (2Н, м), 3,84 (3Н, с), 4,70 (1Н, м), 6,45 (1Н, с),
6,63 (1Н, д), 7,14 (1Н, м), 7,38-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,54-7,66 (3Н, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,96-7,98 (2Н, перекрывающийся м), 8,09 (1Н, д), 8,25 (1Н, м), 8,43 (1Н, д), 8,81 (1Н, с), 9,17 (1Н, с).
Пример 5. ^(2-(Диметиламино)этил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино) -5 -метоксибензамид
К раствору СП (380 мг, 2,30 ммоль) в ОСМ (5,0 мл) добавляли промежуточное соединение А4 (0,50 г, 2,3 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Аликвоту полученного раствора (1,0 мл, 0,46 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения В12 (50 мг, 0,11 ммоль) в ТГФ (2,0 мл) при комнатной температуре и через 18 ч реакционную смесь гасили добавлением МеОН (3,0 мл). Смесь упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной флэшхроматографией (8Ю2, 12 г [0,7 М ΝΓ, в МеОН] в ОСМ, 3-5%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 5, в виде бледно-розового твердого вещества (60 мг, 76%); К1 1,91 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 714 (М+Н)+ (Е8+);
Ή ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,16 (6Н, с), 2,35 (2Н, т), 2,40 (3Н, с), 2,88 (1Н, м), 3,30 (2Н, м), 3,57 (3Н, с), 6,37 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,86 (1Н, ушир.с), 7,33 (1Н, ушир.с), 7,37-7,40 (3Н, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, д), 7,56-7,63 (3Н, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,93 (1Н, д), 8,05 (1Н, д), 8,16 (1Н, т), 8,41 (1Н, д), 8,78 (1Н, ушир.с), 9,09 (1Н, ушир.с), 9,59 (1Н, ушир.с).
Пример 6. ^(2-(Диметиламино)этил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино) -5 -метоксибензамид
К раствору СП (43 мг, 0,26 ммоль) в ОСМ (2,0 мл) при комнатной температуре добавляли промежуточное соединение А5 (61 мг, 0,26 ммоль), и смесь выдерживали при этой температуре в течение 18 ч. Полученный раствор добавляли к раствору промежуточного соединения В12 (50 мг, 0,11 ммоль) в ТГФ (2,0 мл) при комнатной температуре и через 24 ч реакционную смесь гасили добавлением МеОН (3,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением формиатной соли указанного в заголовке соединения, соединения примера 6, в виде белого твердого вещества (31 мг, 38%); К1 1,78 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 367 (М+2Н)2+ (Е8+);
Ή ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,21 (6Н, с), 2,44 (2Н, т), 2,89 (1Н, м), 3,32 (2Н, м), 3,56 (3Н, с), 3,83 (3Н, с), 6,35 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,86 (1Н, ушир.с), 7,10 (2Н, м), 7,33 (1Н, ушир.с), 7,39 (1Н, д), 7,48 (2Н, м), 7,567,62 (3Н, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,19 (1Н, м), 8,41 (1Н, д), 8,82 (1Н, ушир.с), 9,16 (1Н, ушир.с), 9,59 (1Н, ушир.с).
Пример 7. 3 -((4-((4-(3 -(3 -Изопропил-1 -(п-толил)-1Р-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-и2-морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамид
К раствору СП (380 мг, 2,30 ммоль) в ИСМ (5,0 мл) добавляли промежуточное соединение А4 (500 мг, 2,32 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч. Аликвоту полученного раствора (0,80 мл, 0,37 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения В11 (100 мг, 0,181 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) при комнатной температуре и через 24 ч реакционную смесь гасили добавлением МеОН (2,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (§Ю2, 12 г, [0,7 М ΝΓ, в МеОН] в ИСМ, 0-5%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 7, в виде бледно-розового твердого вещества (52 мг, 34%);
К1 3,03 мин (метод 3); т/ζ 794 (М+Н)+ (Е8+), т/ζ 792 (М-Н)- (Е8-);
- 70 025393
Ή ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,44-2,47 (9Н, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, м), 3,37 (2Н, м), 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м), 6,36 (1Н, с), 6,63 (1Н, д), 7,36-7,42 (3Н, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м), 7,57 (1Н, м), 7,60-7,64 (2Н, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,93 (1Н, д), 8,06 (1Н, м), 8,11 (1Н, ушир.с), 8,28 (1Н, ушир.с), 8,47 (1Н, м), 8,51 (1Н, м), 8,78 (1Н, с), 9, 09 (1Н, с), 9,97 (1Н, с).
Пример 8. 3-((4-((4-(3-(3 -Изопропил-1 -(п-толил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид (Путь синтеза А)
К раствору СТО (12,3 г, 76,0 ммоль) в ИСМ (150 мл) добавляли порциями промежуточное соединение А4 (15,0 г, 69,0 ммоль) и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 5 ч. Аликвоту полученного раствора (60 мл, 28 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения В13 (13,4 г, 22,0 ммоль) в ИСМ (150 мл) при комнатной температуре. Через 2 ч добавляли вторую аликвоту аддукта С^I (9,0 мл, 4,1 ммоль) и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 17 ч и затем распределяли между ИСМ (200 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСОз (200 мл). Водную фазу отделяли и экстрагировали ИСМ (2x200 мл) и объединенные органические экстракты промывали водным раствором №ГОН (2,0 М, 2x200 мл) и затем насыщенным раствором соли (2x200 мл). Промывки водными растворами NаΗСОз и №ГОН объединяли и суспендированные твердые вещества выделяли фильтрованием. Водный фильтрат экстрагировали ИСМ (2x200 мл) и 2-Ме ТГФ (2x200 мл). Все органические экстракты объединяли и затем сушили и концентрировали в вакууме. Остаток объединяли с твердым веществом, выделенным при фильтровании водных промывок, и полученное вещество очищали колоночной флэш-хроматографией (МО2, 330 г, [0,7 М ИН3 в МеОН] в Е1ОАс, 5-10%, градиентное элюирование). Полученный таким образом неочищенный продукт перемешивали в РА (200 мл) в течение 16 ч и затем выделяли фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 8, в виде бледно-коричневого твердого вещества (8,83 г, 52%);
К1 2,30 мин (метод 2 щелочной); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е§+);
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,38-2,44 (9Н, перекрывающийся м), 2,90 (1Н, м), 3,31-3,36 (2Н, перекрывающийся м), 3,54-3,56 (7Н, перекрывающийся м), 6,37 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,85 (1Н, м), 7,31 (1Н, ушир.с), 7,36-7,41 (3Н, перекрывающийся м), 7,45-7,47 (2Н, перекрывающийся м), 7,54-7,64 (3Н, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,94 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,19 (1Н, м), 8,40 (1Н, д), 8,79 (1Н, с), 9,10 (1Н, с).
(Путь синтеза В)
Промежуточное.. Промежуточное соединение ϋ2 соединение С1 -* Пример в
Р-Т8А
К суспензии промежуточного соединения С1 (150 мг, 0,292 ммоль) и промежуточного соединения Ό2 (163 мг, 0,585 ммоль) в ДМФА (1,5 мл) добавляли р-Т8А-Н2О (111 мг, 0,555 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 3 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и выливали в водный насыщенный раствор NаΗСОз (20 мл). Образовавшийся в результате осадок выделяли фильтрованием, промывали водой (2ж 10 мл) и Е12О (20 мл) и затем сушили в вакууме при 50°С в течение 3 ч. Полученное твердое вещество суспендировали в МеОН (10 мл) при перемешивании в течение 5 ч и затем выделяли фильтрованием, промывали МеОН (2x5 мл) и Е12О (2x10 мл) и сушили с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 8, в виде бледно-розового твердого вещества (88 мг, 40%);
К1 1,81 мин (метод 4); т/ζ 378,5 (М+2Н)2+ (Е8+).
Пример 9. 3 -Метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)-5 -((4-((4-(3 -(3 -(перфторэтил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид
К раствору С^I (56 мг, 0,34 ммоль) в ИСМ (0,6 мл) добавляли по каплям раствор промежуточного соединения А3 (100 мг, 0,34 ммоль) в ИСМ (0,6 мл) и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученный раствор добавляли к раствору промежуточного соединения В13 (124 мг, 0,240 ммоль) в ТГФ (0,5 мл) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 ч и затем гасили добавлением МеОН (2,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме и остаток очища- 71 025393 ли препаративной ВЭЖХ. Полученную таким образом формиатную соль распределяли между ЭСМ и насыщенным водным раствором NаΗСО3 и органическую фазу отделяли, сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, [0,7 М Ν^ в МеОН] в ЭСМ, 0,5-6%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 9, в виде желтовато-белого твердого вещества (37 мг, 12%); К1 3,14 мин (метод 3); т/ζ 832 (М+Н)+ (Е8+);
'Н ЯМР δ: 2,36-2,46 (9Н, перекрывающийся м), 3,33 (2Н, м), 3,54-3,57 (7Н, перекрывающийся м), 6,54 (1Н, д), 6,85 (1Н, с), 6,93 (1Н, с), 7,31 (1Н, с), 7,42 (1Н, д), 7,47 (2Н, д), 7,54-7,59 (4Н, перекрывающийся м), 7,63 (1Н, дд), 7,83 (1Н, д), 7,93 (1Н, д), 8,05 (1Н, д), 8,17 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 9,12 (1Н, с), 9,23 (1Н, с), 9,59 (1Н, с).
Пример 10. 3-((4-((4-(3-(3-Изопропил-1-(6-метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору СЭ1 (59 мг, 0,37 ммоль) в ЭСМ (0,4 мл) добавляли по каплям раствор промежуточного соединения А16 (85 мг, 0,34 ммоль) в ЭСМ (0,6 мл) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 5 ч. Полученный раствор добавляли к раствору промежуточного соединения В13 (47 мг, 0,092 ммоль) в ТГФ (0,3 мл) при комнатной температуре, реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 1,5 ч и затем гасили добавлением МеОН (1,5 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме, и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, 0-10%, градиентное элюирование). Полученный таким образом неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 10, в виде желтовато-белого твердого вещества(18 мг, 6%);
К1 2,68 мин (метод 3); т/ζ 773 (М+Н)+ (Е8+);
Ή ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,36-2,45 (6Н, перекрывающийся м), 2,90 (1Н, септ.), 3,32 (2Н, м), 3,53-3,57 (7Н, перекрывающийся м), 3,94 (3Н, с), 6,39 (1Н, с), 6,54 (1Н, д), 6,85 (1Н, с), 7,03 (1Н, д), 7,32 (1Н, с), 7,40 (1Н, д), 7,53-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, дд), 7,82 (1Н, д), 7,90-7,93 (2Н, перекрывающийся д), 8,05 (1Н, д), 8,21 (1Н, т), 8,39-8,41 (2Н, перекрывающийся м), 8,85 (1Н, с), 9,08 (1Н, с), 9,61 (1Н, с).
Пример 11. 3-((4-((4-(3-(3-Изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-метоксиэтил)бензамид
К раствору СЭ1 (88 мг, 0,54 ммоль) в ЭСМ (1,0 мл) добавляли промежуточное соединение А5 (126 мг, 0,540 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч. Полученный раствор добавляли к раствору промежуточного соединения В18 (50 мг, 0,11 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при комнатной температуре и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем гасили добавлением МеОН (3,0 мл). После выпаривания легколетучих веществ в вакууме остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением формиатной соли указанного в заголовке соединения, соединения примера 11, в виде желтовато-белого твердого вещества (5,0 мг, 6%);
К1 2,22 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 717 (М+Н) + (Е8+);
Ή ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,89 (1Н, м), 3,25 (3Н, с), 3,38-3,42 (4Н, перекрывающийся м), 3,57 (3Н, с), 3,83 (3Н, с), 6,34 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,88 (1Н, т), 7,10 (2Н, м), 7,33 (1Н, ушир.с), 7,40 (1Н, д), 7,49 (2Н, м), 7,55-7,61 (3Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,30 (1Н, т), 8,39 (1Н, д), 8,47 8,93 (1Н, ушир.с), 9,25 (1Н, ушир.с), 9,59 (1Н, ушир.с).
Пример 12. 1-(3 -Изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)-3 -(4-((2-((3 -метокси-5-(морфолин-4карбонил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина
К раствору морфолина (13 мкл, 0,15 ммоль) в ТГФ (3,0 мл) добавляли раствор триметилалюминия
- 72 025393 при комнатной температуре (2 М в гексане, 76 мкл, 0,15 ммоль) и реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 20 мин. Полученную смесь добавляли к раствору промежуточного соединения Е5, (50 мг, 0,076 ммоль) в ТГФ (3,0 мл) и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней. Аналогичным образом готовили вторую аликвоту аддукта морфолинтриметилалюминий, но при использовании в два раза меньших количеств исходных веществ, и добавляли к реакционной смеси. Через 18 ч выдерживания при комнатной температуре смесь нагревали до 40°С в течение 24 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли хлористо-водородной кислотой (1,0 М, 6,0 мл). Смесь распределяли между ЕЕОАс (20 мл) и водой (20 мл), органическую фазу отделяли, затем сушили и упаривали в вакууме с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 12, в виде желтовато-белого твердого вещества (33 мг, 60%);
КЕ 2,38 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 713 (М+Н)+ (Е8+);
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,40 (3Н, с), 2,90 (1Н, м), 3,30 (2Н, м), 3,55-3,58 (9Н, перекрывающийся м), 6,37 (1Н, с), 6,43 (1Н, ушир.с), 6,57 (1Н, д), 7,16 (1Н, ушир.с), 7,25 (1Н, ушир.с), 7,36-7,40 (3Н, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м), 7,56-7,62 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,93 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,42 (1Н, д), 8,80 (1Н, ушир.с), 9,09 (1Н, ушир.с), 9,61 (1Н, ушир.с).
Пример 13. 5-((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-2-метокси-Х-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору СГО1 (44 мг, 0,27 ммоль) в ЭСМ (1,0 мл) добавляли промежуточное соединение А8 (62 мг, 0,27 ммоль) и полученную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 4 дней. Аликвоту полученного раствора (0,50 мл, 0,14 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения В19 (50 мг, 0,089 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при комнатной температуре, реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 3 дней и затем гасили добавлением МеОН (1,0 мл). Легколетучие вещества упаривали в вакууме, остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, 0-5%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 13, в виде бледно-оранжевого твердого вещества (41 мг, 57%);
КЕ 2,98 мин (метод 3); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е8+);
1Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40-2,45 (9Н, перекрывающийся м), 3,36 (2Н, м), 3,57-3,59 (4Н, перекрывающийся м), 3,80 (3Н, с), 6,40 (1Н, с), 6,56 (1Н, д), 6,79 (1Н, м), 7,38-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, м), 7,53-7,63 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (2Н, м), 7,90 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,30 (1Н, м), 8,35 (1Н, д), 8,78 (1Н, с), 9,14 (1Н, с), 9,51 (1Н, с).
Пример 14. 3-((6-((4-(3-(3-Изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Х-(2-морфолиноэтил)бензамид
К раствору СГО1 (44 мг, 0,27 ммоль) в ЭСМ (1,0 мл) добавляли промежуточное соединение А5 (60 мг, 0,26 ммоль), и реакционную смесь выдерживали при 40°С в течение 4 ч. Аликвоту полученного раствора (0,42 мл, 0,11 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения В20 (50 мг, 0,089 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при комнатной температуре, смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 18 ч и затем распределяли между ЕЕОАс (50 мл) и насыщенным водным раствором ХаНСО3 (50 мл). Органическую фазу отделяли и промывали последовательно насыщенным водным раствором ХаНСО3 (2x50 мл), водой (2x50 мл) и насыщенным раствором соли (2x50 мл), затем сушили и упаривали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией (8Ю2, 12 г, [0,7 М ΝΉ3 в МеОН] в ЭСМ, 0-10%, градиентное элюирование) с получением указанного в заголовке соединения, соединения примера 14, в виде бледно-оранжевого твердого вещества (52 мг, 67%);
КЕ 1,68 мин (метод 4); т/ζ 772 (М+Н)+ (Е8+); т/ζ 770 (М-Н)- (Е8-);
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,38-2,47 (6Н, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, м), 3,36 (2Н, м), 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м), 3,77 (3Н, с), 3,84 (3Н, с), 6,16 (1Н, с), 6,35 (1Н, с), 7,02 (1Н, м), 7,12 (2Н, м), 7,35 (1Н, д), 7,46-7,51 (3Н, перекрывающийся м), 7,53-7,66 (3Н, перекрывающийся м), 7,79 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,05 (1Н, д), 8,30-8,35 (2Н, перекрывающийся м), 8,72 (1Н, ушир.с), 9,09 (1Н, ушир.с), 9,67 (1Н, ушир.с).
- 73 025393
Примеры 15-72.
Таблица 3
Дополнительные примеры соединений изобретения
Структура, название и пример №
15: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиридин-2ил) амино) -5-метокси-Ы- (2морфолиноэтил)бензамид
Аналитические данные [Общий метод синтеза]
Еб 2,39 мин (метод 3); т/ζ 771 (М+Н)+ (Е5+) ; т/ζ 769 (ΜΗ)’ (ЕЗ’) ;
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,37-2,45 (6Н, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, м) , 3, 25-3, 45 (2Н, м, частично закрыт пиком Н2О), 3, 55-3, 57 (4Н, перекрывающийся м) , 3,73 (ЗН, с), 3,83 (ЗН, с), 6,10 (1Н, д), 6,34 (1Н, с), 6,57 (1Н, дд), 6,85 (1Н, с), 7,09-7,13 (2Н, перекрывающийся м), 7,36 (1Н, д), 7,47-7,51 (ЗН, перекрывающийся м), 7,547,66 (ЗН, перекрывающийся м), 7,83 (1Н, д), 7,95 (1Н, д), 8,10 (2Н, д) , 8,24 (ΙΗ, τ) , 8,93 (1Н, ушир.с), 9,07 (1Н, ушир.с), 9,28 (1Н, ушир.с).
Ме
16: 3- ( (4- ( (4-(3-(3- (трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Νметилбензамид
Еб 2,38 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 641 (М+Н)+ (Е3+) ;
Ή ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 2,74 (ЗН, д) , 6,41 (1Н, с), 6,56 (1Н, д), 7,01 (1Н, м), 7,23 (1Н, д), 7,35-7,50 (6Н, перекрывающийся м), 7,53-7,65 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,87 (1Н, ушир.с),
7,92 (1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,22 (1Н, м), 8,40 (1Н, д), 8,75 (1Н, ушир.с), 9,12 (1Н, ушир.с), 9,61 (1Н, ушир.с).
17: 3-(4-(4-(3-(3-трет-бутил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-илокси)пиримидин-2иламино)-Ν-пропилбензамид
В? 2,46 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 685 (М+Н)+ (Е3+) ;
Ή ЯМР δ: 0,86 (ЗН, τ) , 1,29 (9Н, с), 1,49 (2Н, м) , 3,17 (2Н, м) , 3,84 (ЗН, с), 6,40 (1Н, с), 6,55 (1Н, д) , 7,01 (1Н, м) , 7,13 (2Н, м) , 7,25 (1Н, д) , 7,41 (1Н, д) ,
7,46-7,49 (ЗН, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, м), 7,62 (1Н, м) , 7,82 (1Н, д), 7,87 (1Н, ушир.с), 7,93 (1Н, д),
8,06 (1Н, д), 8,24 (1Н, т), 8,40 (1Н, д) , 8,70 (1Н, с),
9, 11 (1Н, с) , 9,60 (1Н, с) .
18: 3- ( (4- ( (4- (3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2(диметиламино)этил)бензамид
Еб 1,84 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 698 (М+Н)+ (Е5+) ;
Ή ЯМР б: 1,29 (9Н, с), 2,15 (6Н, с), 2,35 (2Н, т), 2,39 (ЗН, с), 3,29 (2Н, м) , 6,41 (1Н, с), 6,55 (1Н, д) , 7,01 (1Н, м) , 7,24 (1Н, д), 7,37-7,40 (ЗН, перекрывающийся
м) , 7,47-7,48 (ЗН, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, м),
7,62 (1Н, м) , 7,81 (1Н, д) , 7,88 (1Н, с), 7,91 (1Н, д) ,
8,08 (1Н, д), 8,14 (1Н, м), 8,40 (1Н, д), 8,84 (1Н, с),
9,20 (1Н, с), 9,61 (1Н, с) .
19: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид
Еб 1,80 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 726 (М+Н)+ (Е3 + ) , 724 (М-Н)' (ЕЗ) ;
ХН ЯМР б: 1,24 (6Н, д), 2, 32-2, 47 (9Н, перекрывающийся м) , 2,89 (1Н, м) , 3,35 (2Н, м) , 3,51-3,59 (4Н, перекрывающийся м), 6,37 (1Н, с), 6,56 (1Н, д), 7,03 (1Н, м), 7,24 (1Н, д), 7,36-7,42 (ЗН, перекрывающийся
м), 7,45-7,49 (ЗН, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, м), 7,62 (1Н, м) , 7,81 (1Н, м) , 7,88 (1Н, ушир.с), 7,92 (1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,18 (1Н, ушир.с), 8,40 (1Н, д),
8,78 (1Н, с), 9,13 (1Н, с), 9,62 (1Н, с).
метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
Еб 2,71 мин (метод 3); т/ζ 742 (М+Н) + (Е5 + ) ;
ХН ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,37-2, 44 (6Н, перекрывающийся м) , 2,89 (1Н, м) , 3,33 (2Н, м) , 3,53-3,57 (4Н, м) , 3,84 (ЗН, с), 6,36 (1Н, с), 6,55 (1Н, д) , 7,03 (ΙΗ, τ) , 7,13 (2Н, д), 7,24 (1Н, д), 7,40 (1Н, д), 7,45-7,51 (ЗН, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, дд), 7,62 (1Н, дд), 7,81 (1Н, д), 7,87 (1Н, ушир.с), 7,92 (1Н, д), 8,06 (1Н, д),
8,17 (1Н, м), 8,40 (1Н, д), 8,71 (1Н, с), 9,11 (1Н, с),
9, 62 (1Н, с) .
21: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
Еб 1,81 мин (метод 4); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е3+) ; т/ζ 754 (ΜΗ)' (ЕЗ');
ХН ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,36-2,45 (6Н, перекрывающийся м) , 3,32 (2Н, м) , 3,55 (4Н, м) , 3,83 (ЗН, с), 6,39 (1Н,
с), 6,56 (1Н, д), 7,02 (1Н, м) , 7,11 (2Н, м) , 7,24 (1Н,
ц), 7,40 (1Н, д), 7,44-7,64 (5Н, перекрывающийся м),
7,81 (1Н, м) , 7,88 (1Н, ушир.с), 7,91 (1Н, д) , 8,08 (1Н, д), 8,18 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д) , 8,89 (1Н, с), 9,27 (1Н, с), 9,62 (1Н, с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
22: 3-((4-((4-(3-(3-(З-метилоксетан-З-ил)1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
Вб 2,60 мин (метод 3); т/ζ 754 (М+Н)+ (Е5+) ХН ЯМР δ: 1,67 (ЗН, с), 2,37-2,45 (9Н, перекрывающийся м) , 3,34 (2Н, м) , 3, 54-3, 56 (4Н, перекрывающийся м) , 4,48 (2Н, д), 4,86 (2Н, д) , 6,55 (1Н, с), 6,56 (1Н, д) ,
7,03 (1Н, т), 7,24 (1Н, д) , 7,39-7, 42 (ЗН, перекрывающийся м), 7,47 (1Н, д), 7,51 (2Н, д) , 7,56 (1Н, дд), 7,62 (1Н, дд), 7,81 (1Н, д), 7,87 (1Н, с), 7,92 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,17 (1Н, т), 8,39 (1Н, д) ,
8,84 (1Н, с), 9,15 (1Н, с), 9,62 (1Н, с).
- 74 025393
2,52 мин (метод 3); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е3+) ;
1Н ЯМР δ: 1,67 (ЗН, с), 2,36-2,45 (6Н, перекрывающийся м), 3,33 (2Н, м) , 3, 54-3, 56 (4Н, перекрывающийся м) ,
3,85 (ЗН, с), 4,47 (2Н, д) , 4,85 (2Н, д) , 6,54 (1Н, с), (1Н, т), 7,14 (2Н, м), 7,24 (1Н, д) , (1Н, д) , 7,51-7,58 (ЗН,
7,62 (1Н, дд), 7,81 (1Н, д) , 7,87 (1Н, ушир.с), 7,92 (1Н, д) , 8,06 (1Н, д), 8,17 (1Н, т), 3,39 (1Н, д) , 8,79 (1Н, с), 9,14 (1Н, с), 9,62 (1Н, с).
23: 3-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3-(3метилоксетан-3-ил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
6,55 (1Н, д) , 7,02 7,41 (1Н, Д), 7,47 перекрывающийся м) ,
24: 3-((4- ( (4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4метилтиофен-2-ил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
1,98 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 746 (М+Н)+ (Е3+) ; ХН ЯМР б: 1,27 (9Н, с), 2,27 (ЗН, д), 2,40 (6Н, ушир.с), 3,35 (2Н, м) , 3,56 (4Н, ушир.с), 6,41 (1Н, с), 6,57 (1Н, д), 7,02 (1Н, м), 7,09-7,12 (2Н, перекрывающийся м), 7,24 (1Н, д), 7,42 (1Н, д), 7,47 (1Н, ушир.д), 7,58
1Н, м), 7,65 (1Н, м), 7,83 (1Н, м), 7,88 (1Н, ушир.с),
7,92 (1Н, д), 8,14 (1Н, д), 8,18 (1Н, ушир.с), 8,40 (1Н, д) , 8,85 (1Н, с), 9,26 (1Н, с), 9,63 (1Н, с).
25: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-ίπтолил) -1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2-(4метилпиперазин-1-ил)этил)бензамид
X 1,91 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 753 (М+Н)+ (Е5+) ; Н ЯМР б: 1,29 (9Н, с), 2,12 (ЗН, с), 2,28-2,43 (12Н, [ерекрывающийся м) , 3,29 (ЗН, м) , 6,41 (1Н, с), 6,56 1Н, д), 7,01 (ΙΗ, τ), 7,23 (1Н, д), 7,37-7,40 (ЗН, [ерекрывающийся м) , 7,45-7, 48 (ЗН, перекрывающийся м) , ,56 (1Н, м) , 7,62 ,1тт п 01 ,1тт п ,91 (1Н, д) ,
м) , 7, 62 (1Н, м) , 7,81 (1Н, д)
д), 8,08 (1Н, д), 8,15 (1Н, м)
С) , 9,21 (1Н, С) , 9, 61 (1Н, с)
Ме
26: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν,Νдиметилбензамид
8? 2,49 мин (метод 2); т/ζ 655 (М+Н)+ (Е5+) ;
ХН ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 2,80 (ЗН, ушир.с), 2,93 (ЗН, ушир.с), 6,41 (1Н, с), 6,59 (1Н, д), 6,80 (1Н, д) , 7,01 (1Н, м), 7, 37-7, 39 (4Н, перекрывающийся м), 7, 46-7, 48 (ЗН, перекрывающийся м), 7,56 (1Н, м), 7,62 (1Н, м) , 7,81 (1Н, д) , 7,91 (1Н, д), 8,07 (1Н, д) , Я (1Н, д), 8,76 (1Н, с), 9,12 (1Н, с), 9,64 (1Н, с).
Ме
27: 1-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Нпиразол-5-ил)-3-(4-((2-((3-(морфолин-4карбонил)фенил)амино)пиримидин-4ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина
Р/ 2,36 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 697 (М+Н) + (Е3+) ;
ХН ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 3,56 (8Н, ушир.с)
6,41 (1Н, с) , 6, 58 (1Н, д), 6,83 (1Н, д), 7,03 (1Н, м)
7,39-7,40 (4Н, перекрывающийся м) , 7,47 (2Н, м) , 7,51
(1Н, м) , 7,56 (1Н, м) , 7, 62 (1Н, м) , 7,81 (1Н, Д) , 7,9
(1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,41 (1Н, Д), 8,76 (1Н, с), 9,1
(1Н, с), 9, 65 (1Н, с) .
28: Ν-(2-(диметиламино)этил)-3-((4-((4-(3(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метоксибензамид
X 2,77 мин (метод 3); т/ζ 714 (М+Н)+ (Е3+) ;
Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,18 (6Н, с), 2,38-2,41 (5Н, юрекрывающийся м) , 2,90 (1Н, м) , 3,33 (2Н, м) , 3,79 (ЗН, с), 6,38 (1Н, с), 6,42 (1Н, д) , 7,03 (1Н, д) ,
Я 37-7,42 (ЗН, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, м), 7,54Я 66 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,83 (1Н, м) , 7,91 (1Н, ι) , 8,06 (1Н, д) , 8,16-8,19 (2Н, перекрывающийся м) , ί,28 (1Н, м) , 8,32 (1Н, д) , 8,80 (1Н, с), 9,10 (1Н, с)
29: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил) -111-пиразол-5-ил) уреидо) нафталин -1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2(диметиламино)этил)-4-метоксибензамид
2,92 мин (метод 3); т/ζ 728 (М+Н)+ (Е3+) ;
1НЯМРб: 1,29 (9Н, с), 2,16 (6Н, с), 2,36-2,40 (5Н, перекрывающийся м), 3,31 (2Н, м), 3,78 (ЗН, с), 6,406,41 (2Н, перекрывающийся м) , 7,02 (1Н, д) , 7,36-7,41 (ЗН, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м), 7,53-7,64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,91 (1Н, д), 8,05 (1Н, д), 8,15-8,18 (2Н, перекрывающийся м), 8,28 (1Н, м) , 8,31 (1Н, д) , 8,77 (1Н, с), 9,09 (1Н, с).
30: 3- ( (4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамид ь 1,83 мин (метод 4); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е3+) ;
Н ЯМР б: 1,24 (6Н, д), 2,40-2,46 (9Н, перекрывающийся ;) , 2,89 (1Н, м) , 3,37 (2Н, м) , 3,53-3,56 (4Н, ерекрывающийся м), 3,78 (ЗН, с), 6,37 (1Н, с), 6,42 1Н, д), 7,03 (1Н, д), 7,36-7,41 (ЗН, перекрывающийся ;) , 7,46 (2Н, м) , 7,52-7, 64 (ЗН, перекрывающийся м) , ,82 (1Н, м) , 7,90 (1Н, д) , 8,05 (1Н, д) , 8,16-8,21 2Н, перекрывающийся м), 8,26 (1Н, м), 8,31 (1Н, д), , 83 (1Н, с), 9,12 (1Н, с) .
31: 3- ( (4- ( (4- (3-(3-(трет-бутил)-1-ίπтолил) -1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамид ь 2,95 мин (метод 3); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е3+) ;
ЯМР б: 1,28 (9Н, с), 2,40-2,46 (9Н, перекрывающийся ), 3,35 (2Н, м), 3,53-3,56 (4Н, перекрывающийся м) , ,78 (ЗН, с), 6,41-6,42 (2Н, перекрывающийся м) , 7,02 1Н, д), 7,36-7,41 (ЗН, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, ), 7,57-7,64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), ,90 (1Н, д) , 8,05 (1Н, д) , 8,15-8,19 (2Н, ерекрывающийся м), 8,27 (1Н, д), 8,31 (1Н, д), 8,81 1Н, с), 9,13 (1Н, с) .
- 75 025393
ΧαΟΧα /--+¾ [X 3,35 мин (метод 3); т/ζ 687 (М+Н)+ (Е5+) ; ’Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,40 (ЗН, с), 2,89 (1Н, м) , 3,30 (2Н, м) , 3,50 (2Н, м) , 3,79 (ЗН, с), 4,69 (1Н, м) , 6,37 (1Н, с), 6,40 (1Н, д), 7,02 (1Н, д) , 7,36-7,41 (ЗН,
Ме НСи^'М0о Η 32 : Ν- (2-гидроксиэтил) -3- ((4-((4-(3-(3изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метоксибензамид перекрывающийся м) , 7,46 (2Н, м) , 7, 56-7, 65 (ЗН, перекрывающийся м), 7,83 (1Н, м), 7,90 (1Н, д), 8,05 (1Н, д), 8,13 (1Н, с), 8,20 (1Н, м) , 8,28-8, 32 (2Н, перекрывающийся м), 8,77 (1Н, с), 9,08 (1Н, с).
0ΛΧΟΧ. 0Н нХи0 р/ 3,57 мин (метод 3); т/ζ 701 (М+Н)+ (Е5+) ; ’н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 3,30 (2Н, м) , 3,49 (2Н, м) , 3,79 (ЗН, с), 4,69 (1Н, м) , 6,39-6,41 (2Н,
τ I Ме Н 33: 3- ( (4- ( (4- (3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2гидроксиэтил)-4-метоксибензамид перекрывающийся м), 7,02 (1Н, д), 7,37-7,41 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,46 (2Н, м) , 7,56-7, 64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, м), 7,90 (1Н, д), 8,05 (1Н, д) , 8,13 (1Н, с), 8,20 (1Н, м) , 8,29-8,32 (2Н, перекрывающийся м), 8,75 (1Н, с), 9,08 (1Н, с).
р/ 3,22 мин (метод 3); т/ζ 703 (М+Н)+ (Е5+) ; ’н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,88 (1Н, м) , 3,30 (2Н, м) , 3,49 (2Н, м) , 3,79 (ЗН, с), 3,84 (ЗН, с), 4,69 (1Н, м) , 6,35
ОМе ΗΟ+_χ^·Ν0ο Н 34: Ν-(2-гидроксиэтил)-3- ((4 — ((4-(3-(3изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метоксибензамид (1Н, с), 6,39 (1Н, д) , 7,03 (1Н, д) , 7,12 (2Н, м) , 7,40 (1Н, д), 7,48 (2Н, м), 7,56-7,64 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,83 (1Н, м) , 7,90 (1Н, д) , 8,04 (1Н, д) , 8,13 (1Н, с), 8,20 (1Н, м), 8,29-8,32 (2Н, перекрывающийся м), 8,72 (1Н, с), 9,07 (1Н, с).
ЧЛ/1?? г· Ме О 35: Ν-(2-(диметиламино)этил)-4-((4 — ((4-(3(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метоксибензамид 8е 2,90 мин (метод 3); т/ζ 714 (М+Н)+ (Е5+) , т/ζ 712 (ΜΗ)’ (Е8~) ; ’Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,14 (6Н, с), 2,33 (2Н, м) , 2,40 (ЗН, с), 2,90 (1Н, м) , 3,28 (2Н, м) , 3,83 (ЗН, с), 6,40 (1Н, с), 6,64 (1Н, д) , 7,10 (1Н, д) , 7,37-7, 42 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,56 (1Н, м), 7,607,65 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, м), 7,96-7,98 (2Н, перекрывающийся м) , 8,09 (1Н, д) , 8,14 (1Н, м) , 8,43 (1Н, д) , 8,82 (1Н, с), 9,16 (1Н, с).
4,1X69 0 Ме О 36: 4-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-З-метокси-Ν(2-морфолиноэтил)бензамид Р? 2,91 мин (метод 3); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е5+) ; ’н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,36-2, 42 (9Н, перекрывающийся м) , 2,90 (1Н, м) , 3,29 (2Н, ушир.с), 3,53-3,56 (4Н, перекрывающийся м), 3,83 (ЗН, с), 6,40 (1Н, с), 6,64 (1Н, д), 7,10 (1Н, м), 7,36-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,54-7,65 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,95-7,98 (2Н, перекрывающийся м), 8,09 (1Н, д) , 8,15 (1Н, м) , 8,42 (1Н, д) , 8,81 (1Н, с), 9,15 (1Н, с) .
Ме О 37: 4-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-З-метокси-Ν(2-морфолиноэтил)бензамид К* 3,06 мин (метод 3); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е5 + ) ; ’н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,37-2, 42 (9Н, перекрывающийся м), 3,29 (2Н, м), 3,53-3,56 (4Н, перекрывающийся м), 3,83 (ЗН, с), 6,45 (1Н, с), 6,65 (1Н, д) , 7,10 (1Н, м) , 7,36-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,567,63 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, м), 7,96-7,98 (2Н, перекрывающийся м), 8,10 (1Н, д), 8,15 (1Н, м), 8,42 (1Н, д), 8,80 (1Н, с), 9,16 (1Н, с).
Ча-ОХ 0 ХХ> ОМе Ь 38: 4-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-З-метокси-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид р/ 2,83 мин (метод 3); т/ζ 772 (М+Н)+ (Е3+) ; ’н ЯМР б: 1,25 (6Н, д) , 2, 44-2, 48 (6Н, перекрывающийся м) , 2,90 (1Н, м) , 3,31 (2Н, м) , 3,56-3,58 (4Н, перекрывающийся м), 3,83 (ЗН, с), 3,84 (ЗН, с), 6,39 (1Н, с), 6,66 (1Н, д), 7,10-7,15 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,38 (1Н, м) , 7,43 (1Н, д) , 7,51 (2Н, м) , 7,55-7,66 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,96-8,00 (2Н, перекрывающийся м), 8,09 (1Н, д), 8,20 (1Н, м), 8,42 (1Н, д), 8,80 (1Н, с), 9,18 (1Н, с).
Υ ϊ γΎ°ί4ι φ· Ме Ь 39: Ν-(2-гидроксиэтил)-4-((4-((4-(3-(3изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метоксибензамид Р? 3,61 мин (метод 3); т/ζ 687 (М+Н)+ (Е5+) ; ’н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,40 (ЗН, с), 2,90 (1Н, м) , 3,28 (2Н, м) , 3,48 (2Н, м) , 3,84 (ЗН, с), 4,70 (1Н, м) , 6,40 (1Н, с), 6,63 (1Н, д), 7,13 (1Н, д), 7, 38-7, 43 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,54-7,65 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, м), 7,95-7,97 (2Н, перекрывающийся м), 8,09 (1Н, д), 8,25 (1Н, м), 8,42 (1Н, д) , 8,82 (1Н, с), 9,17 (1Н, с).
ХаОХ А н н ЕА НН /;:: ,СОННг [X 2,46 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 641 (М+Н)+ (Е5+) ; ’Н ЯМР δ: 1,37 (9Н, с), 2,05 (ЗН, с), 2,47 (ЗН, с), 6,48
у у (1Н, с), 6,60 (1Н, д) , 7,14 (1Н, ушир.с), 7,31-7,35
Ме Ме 40: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5метилбензамид (2Н, перекрывающийся м), 7,38-7,45 (4Н, перекрывающийся м), 7,51-7,59 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д) , 7,89 (1Н, д) , 7,96 (1Н, д) , 8,36 (1Н, д) .
- 76 025393
41: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метоксибензамид
В? 2,20 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 673 (М+Н)+ (Е5+) ;
1Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 3,57 (ЗН, с), 3,83 (ЗН, с), 6,39 (1Н, с), 6,54 (1Н, д), 6,92 (1Н, м) , 7,11 (2Н, м) , 7,24 (1Н, с), 7,31 (1Н, с), 7,40 (1Н, д), 7,49 (2Н, м) , 7,53-7,64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,75 (1Н, ушир.с), 7,81 (1Н, дд), 7,94 (1Н, д) , 8,11 (1Н, д) , 8,41 (1Н, ц) , 8,87 (1Н, ушир.с), 9,20 (1Н, ушир.с), 9,61 (1Н, ушир.с).
42: З-бром-5-((4- ((4-(3-(3-(трет-бутил)-1(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)бензамид
2,33 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 721,723 (М+Н) + (Е5+) ;
‘Н НИР δ: 1,29 (9Н, с), 3,83 (ЗН, с), 6,38 (1Н, с), 6,65 (1Н, д), 7,10 (2Н, м), 7,36-7,42 (2Н, перекрывающийся м) , 7,47-7, 63 (6Н, перекрывающийся м), 7,79 (1Н, д), 7,87-7,92 (2Н, перекрывающийся м), 7,97 (1Н, д), 8,17 (1Н, д), 8,46 (1Н, д), 9,04 (1Н, ушир.с), 9,32 (1Н, ушир.с), 9,88 (1Н, ушир.с).
43: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2(диметиламино)этил)-5-метоксибензамид
ЕГ 1,92 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 728 (М+Н)+ (Е5+) ;
Ή ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,16 (6Н, с), 2,36 (2Н, т), 2,40 (ЗН, с), 3,29 (2Н, м) , 3,56 (ЗН, с), 6,41 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,86 (1Н, ушир.с), 7,33 (1Н, ушир.с), 7,377,39 (ЗН, перекрывающийся м), 7,45 (2Н, д), 7,56-7,62 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,94 (1Н, д),
8,07 (1Н, д), 8,15 (1Н, т), 8,41 (1Н, д), 8,77 (1Н, ушир.с), 9,09 (1Н, ушир.с), 9,59 (1Н, ушир.с).
44: 3-((4-((4-(3- (З-изопропил-1- (п-толил) 1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метил-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид
Р? 2,86 мин (метод 3); т/ζ 740 (М+Н)+ (Е5+) , т/ζ 738 (ΜΗ)’ (Е5~) ;
+ ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 1,96 (ЗН, с), 2,37-2,43 (ЭН, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, м), 3,34 (2Н, м), 3,533,56 (4Н, перекрывающийся м) , 6,37 (1Н, с), 6,59 (1Н, д), 7,04 (1Н, с), 7,30 (1Н, с), 7,37-7,42 (ЗН, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м), 7,54-7,64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, м), 7,97 (1Н, д), 8,068,13 (2Н, перекрывающийся м), 8,40 (1Н, д), 8,78 (1Н, с), 9,10 (1Н, с), 9,58 (1Н, с).
45: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метил-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид
Р? 2,78 мин (метод 3); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е5+) , т/ζ 754 (ΜΗ)’ (Е5~) ;
1НЯМРв: 1,24 (6Н, д), 1,96 (ЗН, с), 2,36-2,43 (6Н, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, м), 3,36 (2Н, м), 3,533,56 (4Н, перекрывающийся м), 3,84 (ЗН, с), 6,35 (1Н, с), 6,58 (1Н, д) , 7,04 (1Н, с), 7,12 (2Н, м) , 7,30 (1Н, ушир.с), 7,41 (1Н, д) , 7,48 (2Н, м) , 7,53-7, 64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,97 (1Н, д), 8,06 (1Н, д) , 8,11 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д) , 8,73 (1Н, с), 9,09 (1Н, с) , 9,58 (1Н, с) .
46: З-этинил-5-((4-((4-(3-(З-изопропил-1(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид
ЕГ 1,97 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 750 (М+Н)+ (Е5 + ) ; 1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,39-2,46 (9Н, перекрывающийся м) , 2,90 (1Н, м) , 3,34 (2Н, м) , 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м), 4,11 (1Н, с), 6,37 (1Н, с), 6,56 (1Н, д), 7,37-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м) , 7,55-7, 65 (2Н, перекрывающийся м) , 7,81-7,87 (2Н, перекрывающийся м), 7,93 (1Н, д), 8,06-8,08 (2Н, перекрывающийся м), 8,35 (1Н, м), 8,43 (1Н, д), 8,82 (1Н, с), 9,12 (1Н, с), 9,75 (1Н, с).
47: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)-5(трифторметил)бензамид [Г 2,95 мин (метод 3); т/ζ 810 (М+Н)+ (Е5+) , т/ζ 808 (ΜΗ)’ (Е5~);
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,38-2,46 (6Н, перекрывающийся м) , 2,88 (1Н, м) , 3,37 (2Н, м) , 3, 54-3, 56 (4Н, перекрывающийся м) , 3,84 (ЗН, с), 6,35 (1Н, с), 6,62 (1Н, д), 7,12 (2Н, м) , 7,41 (1Н, д), 7,48 (2Н, м) ,
7,54-7,64 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, м), 7,93 (1Н, м) , 8,05 (1Н, д) , 8,11 (1Н, ушир.с), 8,28 (1Н, ушир.с), 8,47 (1Н, д), 8,51 (1Н, т), 8,73 (1Н, с), 9,07 (1Н, с) , 9,96 (1Н, с) .
48: З-метокси-Ν-(2-морфолиноэтил)-5-((4((4-(3-(1-(п-толил)-3-(трифторметил)-ΙΗпиразол- 5 -ил ) уреидо)нафталии-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид
ЕГ 2,97 мин (метод 3); т/ζ 782 (М+Н)+ (Е5 + ) ;
ХН ЯМР б: 2,36-2, 45 (9Н, перекрывающийся м) , 3,34 (2Н, м) , 3,54-3,57 (7Н, перекрывающийся м), 6,54 (1Н, д), 6,85 (1Н, с), 6,91 (1Н, с), 7,31 (1Н, с), 7,42 (1Н, д) , 7,46 (2Н, д), 7,54-7,59 (4Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, дд), 7,83 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,04 (1Н, д),
8,18 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 9,13 (1Н, с), 9,24 (1Н, с), 9, 59 (1Н, с) .
: 3-((4-((4-(3- (З-этил-1- (п-толил) -1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Я(2-морфолиноэтил)бензамид
ЕГ 2,70 мин (метод 3); т/ζ 742 (М+Н)+ (Е5 + ) ;
ХН ЯМР δ: 1,21 (ЗН, т), 2,38-2, 45 (9Н, перекрывающийся м) , 2,58 (2Н, кв), 3,33 (2Н, м) , 3,53-3,58 (7Н, перекрывающийся м) , 6,35 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, с), 7,32 (1Н, с), 7,37 (2Н, д), 7,40 (1Н, д), 7,45 (2Н, д), 7,54-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, дд), 7,82 (1Н, д), 7,94 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,18 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 8,78 (1Н, с), 9,08 (1Н, с), 9,59 (1Н, с).
- 77 025393
Д Н и ΗΝ , ΟΜ. А 2,74 мин (метод 3); т/ζ 754 (М+Н)+ (Е5+); А ЯМР δ: 0,69 (2Н, м) , 0,89 (2Н, м) , 1,89 (1Н, м) , 2,38-2,45 (9Н, перекрывающийся м), 3,33 (2Н, м), 3,54-
н 50: 3-((4-((4-(3-(З-циклопропил-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы- (2-морфолиноэтил)бензамид 3,56 (7Н, перекрывающийся м) , 6,21 (1Н, с), 6,54 (1Н, Ц), 6,85 (1Н, С), 7,32 (1Н, С), 7,37 (2Н, д) , 7,40 (1Н, ц), 7,44 (2Н, д) , 7, 53-7, 58 (2Н, перекрывающийся м) , 7,62 (1Н, дд), 7,82 (1Н, д) , 7,92 (1Н, д) , 8,05 (1Н, ц), 8,17 (1Н, т), 8,40 (1Н, д) , 8,76 (1Н, с), 9,07 (1Н, С) , 9,59 (1Н, С) .
Ашх* ί н μ и ΗΝγνοΜ. 2,89 мин (метод 3); т/ζ 768 (М+Н)+ (Е3+) ; ЯМР δ: 0,72 (2Н, м), 0,92 (2Н, м) , 1,41 (ЗН, с), 2,38-2,45 (9Н, перекрывающийся м), 3,33 (2Н, м), 3,54-
Η 51: З-метокси-5-((4-( (4-(3-(3-(1метилциклопропил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид 3,56 (7Н, перекрывающийся м), 6,27 (1Н, с), 6,54 (1Н, ц) , 6,85 (1Н, с), 7,32 (1Н, с), 7,37 (2Н, д) , 7,40 (1Н, д), 7,44 (2Н, д), 7,54-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, дд) , 7,82 (1Н, д) , 7,93 (1Н, д) , 8,05 (1Н, ц) , 8,18 (1Н, т) , 8,40 (1Н, д) , 8,76 (1Н, с), 9,07 (1Н, с) , 9, 59 (1Н, с) .
Аа/А А Н Н АА ΗΝ-^^ΟΜβ 1,93 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е5+) ; 1Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,37-2,46 (9Н, перекрывающийся
9 υ У ме <<Ν^νΛ0 н 52: 3-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы- (2-морфолиноэтил)бензамид м) , 3,35 (2Н, м) , 3,54-3,56 (7Н, перекрывающийся м) , 6,41 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, м) , 7,31 (1Н, м) , 7,36-7,41 (ЗН, перекрывающийся м), 7,48 (2Н, м), 7,547,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, м), 7,82 (1Н, м) , 7,94 (1Н, д) , 8,06 (1Н, м) , 8,17 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д) , 8,79 (1Н, с), 9,11 (1Н, с), 9,59 (1Н, с).
^ААСО 1 » и ΗΝγγ». А 2,22 мин (метод 2 щелочной); т/ζ 772 (М+Н)+ (Е5+), 770 (М-Н)' (Е5~); 1Н ЯМР δ: 1,23 (6Н, д), 2,37-2,44 (6Н, перекрывающийся
ΟΜβ А-И^/уА^ Η 53: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1- (4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид м) , 2,88 (1Н, м) , 3,35 (2Н, м) , 3, 54-3, 56 (7Н, перекрывающийся м) , 3,83 (ЗН, с), 6,35 (1Н, с), 6,54 (1Н, д), 6,85 (1Н, м) , 7,12 (2Н, м) , 7,31 (1Н, ушир.с), 7,40 (1Н, д), . 7,48 (2Н, м) , 7, 54-7, 58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, м), 7,81 (1Н, м) , 7,94 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,20 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д) , 8,77 (1Н, с), 9,11 (1Н, с), 9,61 (1Н, с).
'ЪлАОА А н и ду, р/ 1,88 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 786 (М+Н)+ (Е8+) ; А ЯМР б: 1,28 (9Н, с), 2,38-2,44 (6Н, перекрывающийся
Т от оме '>ζΝ·'·'·'Άο м) , 3,35 (2Н, м) , 3,54-3,56 (7Н, перекрывающийся м) , 3,84 (ЗН, с), 6,39 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, м) ,
54: 3- ( (4- ( (4- (3-(3-(трет-бутил)-1-(4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид 7,12 (2Н, м) , 7,32 (1Н, м) , 7,40 (1Н, д) , 7,48 (2Н, м) , 7,54-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, м), 7,82 (1Н, д), 7,94 (1Н, д), 8,06 (1Н, д) , 8,17 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д), 8,73 (1Н, с), 9,09 (1Н, с), 9,59 (1Н, с).
АААОт Дн н А А 2,91 мин (метод 3); т/ζ 830 (М+Н)+ (Е5+) ; 1Н ЯМР δ: 1,30 (9Н, с), 2,37-2, 44 (6Н, перекрывающийся м) , 3,29 (ЗН, с), 3,34 (2Н, м) , 3,53-3,58 (7Н,
кА у у Д^ЭМе перекрывающийся м) , 3,67 (2Н, м) , 4,18 (2Н, м) , 6,43 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, с), 7,00-7,04 (1Н, д) ,
55: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(3-(2метоксиэтокси)фенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2 ил)амино)-5-метокси-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид 7,17-7,20 (2Н, перекрывающийся м), 7,33 (1Н, с), 7,40 (1Н, д), 7,46 (1Н, м), 7,54-7,64 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,82 (1Н, д) , 7,92 (1Н, д) , 8,08 (1Н, д) , 8,17 (1Н, м) , 8,40 (1Н, д) , 8,82 (1Н, с), 9,13 (1Н, с), 9,59 (1Н, с) .
ЧиАОА ί«- и ду». 1,74 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е3 + ) ; ‘Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,30 (ЗН, с), 2,32 (ЗН, с), 2,36-2,44 (6Н, перекрывающийся м), 2,89 (1Н, септ.),
т · о т Ье Α-^^^Αθ н 56: 3-((4-((4-(3-(1-(3,4-диметилфенил)-3изопропил-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксиΝ-(2-морфолиноэтил)бензамид 3,32 (2Н, м), 3,54-3,57 (7Н, перекрывающийся м), 6,36 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, с), 7,26-7,36 (4Н, перекрывающийся м), 7,40 (1Н, д), 7,53-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,61 (1Н, дд), 7,82 (1Н, д), 7,94 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,17 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 8,75 (1Н, с), 9,08 (1Н, с), 9,59 (1Н, с).
Υ-ΑΧΟΟ Φ Α ν ОМв Α'ν>^'νΑο 57: 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(6метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2морфолиноэтил)бензамид Рь 1,89 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 787 (М+Н)+ (Е3+) ; 2Η ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,38-2,45 (6Н, перекрывающийся м), 3,35 (2Н, м) , 3, 54-3, 56 (7Н, перекрывающийся м) , 3,94 (ЗН, с), 6,43 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,85 (1Н, м) , 7,03 (1Н, д), 7,32 (1Н, с), 7,40 (1Н, д) , 7,54-7,58 (2Н, перекрывающийся м), 7,62 (1Н, м) , 7,82 (1Н, д) , 7,91 (2Н, перекрывающийся м), 8,04 (1Н, д), 8,18 (1Н, т), 8,39-8,42 (2Н, перекрывающийся м), 8,81 (1Н, с), 9, 07 (1Н, с), 9,59 (1Н, с) .
Ааа. ЕА 2,55 мин (метод 3); т/ζ 800 (М+Н)+ (Е3+) ; 2Η ЯМР δ: 1,89-2,04 (ЗН, перекрывающийся м), 2,17 (1Н, м), 2,36-2, 44 (6Н, перекрывающийся м), 3,32 (2Н, м),
к оЛГ н 58: З-метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4метоксифенил)-3-(тетрагидрофуран-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид 3, 54-3,57 (7Н, перекрывающийся м) , 3,76 (1Н, м) , 3,84 (ЗН, с), 3,88 (1Н, м) , 4,78 (1Н, м) , 6,44 (1Н, с), 6,54 (1Н, д) , 6,85 (1Н, с), 7,13 (2Н, д) , 7,31 (1Н, с), 7,41 (1Н, д), 7,49 (2Н, д), 7,53-7,58 (2Н, перекрывающийся м) , 7,61 (1Н, дд), 7,81 (1Н, д) , 7,93 (1Н, д) , 8,05 (1Н, д), 8,20 (1Н, т), 8,40 (1Н, д) , 8,83 (1Н, с), 9,14 (1Н, с) , 9, 61 (1Н, с) .
- 78 025393
1 Н М НГК/^. ,ОМе А 2,51 мин (метод 3); т/ζ 800 (М+Н)+ (Е5+) ; ХН ЯМР δ: 2,05 (ΤΗ, м), 2,26 (1Н, м) , 2,36-2, 45 (6Η, перекрывающийся м), 3,29-3,41 (ЗН, перекрывающийся м),
9 θ V ОМе 0-'ν-~^'-νΑο 3, 53-3, 56 (7Н, перекрывающийся м) , 3,69 (ТН, т), 3,763,90 (5Н, перекрывающийся м) , 4,02 (ТН, т), 6,40 (1Н, с), 6,53 (ТН, д), 6,85 (ТН, с), 7,12 (2Н, д) , 7,32 (ТН,
59: З-метокси-5-((4-((4- (3- (1- (4метоксифенил)-3-(тетрагидрофуран-3-ил)ΊΗпиразол- 5-ил) уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид с), 7,40 (ТН, д), 7,49 (2Н, д) , 7,54-7, 62 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,82 (ТН, д) , 7,93 (ТН, д) , 8,05 (ТН, д) , 8,18 (ТН, т), 8,40 (ТН, д) , 8,77 (ТН, с), 9,09 (1Н, с), 9,59 (1Н, с) .
1,91 мин (метод 4); т/ζ 761 (М+Н) + (Е5 + ) , т/ζ 759 (ΜΗ)’ (ЕЗ) ; ХН ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2, 36-2, 44 (9Н, перекрывающийся
2 оЛ? н 60: З-хлор-5-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид м) , 2,89 (1Н, м) , 3,34 (2Н, м) , 3,53-3,56 (4Н, перекрывающийся м) , 6,36 (1Н, с), 6,65 (1Н, д) , 7,27 (1Н, м) , 7,36-7,42 (ЗН, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м) , 7,55 (1Н, м) , 7,61 (1Н, м) , 7,68 (1Н, ушир.с), 7,79-7,81 (2Н, перекрывающийся м), 7,97 (1Н, д), 8,07 (1Н, д) , 8,33 (1Н, т) , 8,45 (1Н, д) , 8,84 (1Н, с), 9,13 (1Н, с), 9,87 (1Н, с).
ΉλοΟ?· у 0 ν ОМе Η 61: З-хлор-5- ((4-((4-(3-( З-изопропил-1- (4метоксифенил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид 2,84 мин (метод 3); т/ζ 776, 778 (М+Н)+ (Е2 + ) , т/ζ 774, 776 (М-Н)' (ЕЗ'); ХН ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2, 37-2, 44 (6Н, перекрывающийся м) , 2,88 (1Н, м) , 3,37 (2Н, м) , 3,54-3,56 (4Н, перекрывающийся м) , 3,84 (ЗН, с), 6,35 (1Н, с), 6,65 (1Н, д), 7,12 (2Н, м) , 7,27 (1Н, с), 7,41 (1Н, д), 7,48 (2Н, м) , 7,56 (1Н, м) , 7,61 (1Н, м) , 7,68 (1Н, ушир.с), 7,79-7,81 (2Н, перекрывающийся м), 7,98 (1Н, д) , 8,06 (1Н, д) , 8,33 (ΙΗ, τ) , 8,45 (1Н, д) , 8,73 (1Н, с), 9,08 (1Н, с) , 9,87 (1Н, с) .
А н и Ау' А 2.02 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 818, 820 (М+Н)+ (Е5+) ; т/ζ 816, 818 (М-Н)' (ЕЗ); ХН ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,37-2,44 (9Н, перекрывающийся м), 3,33 (2Н, м), 3, 53-3, 56 (4Н, перекрывающийся м),
Т Ох Н 62: З-бром-5-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2морфолиноэтил)бензамид 6,40 (1Н, с), 6,64 (1Н, д), 7, 37-7, 42 (4Н, перекрывающийся м) , 7,46 (2Н, м) , 7,56 (1Н, м) , 7,62 (1Н, м) , 7,80 (1Н, м) , 7,86 (2Н, ушир.с), 7,97 (1Н, д) , 8,08 (1Н, м) , 8,34 (1Н, м) , 8,45 (1Н, д) , 8,80 (1Н, с), 9,12 (1Н, с), 9,85 (1Н, с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
| Η Н Ху) Ηί 0Μβ А 2,13 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 687 (М+Н)+ (Е3+) ; ХН ЯМР б: 1,24 (6Н, д) , 2,39 (ЗН, с), 2,90 (1Н, м) , 3,29 (2Н, м) , 3,47 (2Н, м) , 3,57 (ЗН, с), 4,70 (1Н, ушир.с),
о Ха 6,35 (1Н, с), 6,53 (1Н, д) , 6,89 (1Н, м) , 7,33-7,38
V т Ме МСО-''''''ν'Ά) Н 63: Ν-(2-гидроксиэтил)-3-((4-((4-(3-(3изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метоксибензамид (4Н, перекрывающийся м) , 7,46 (2Н, м) , 7,56-7,61 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,08 (1Н, д), 8,23 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 9,00 (1Н, ушир.с), 9,28 (1Н, ушир.с), 9,58 (1Н, ушир.с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
'Ви /\Л/\ ХкАЛСф 1 Н Н О ΗΝ ,, ΟΜί А 2,29 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 701 (М+Н)+ (Е5+) ; ‘Н ЯИР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 3,29 (2Н, м), 3,48 (2Н, т) , 3,57 (ЗН, с), 4,69 (1Н, ушир.с), 6,40 (1Н, с),
О ХА 6,53 (1Н, д), 6,89 (1Н, м) , 7,33 (1Н, ушир.с), 7,36-
V т Ме Н 64: 3-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ν-(2гидроксиэтил)-5-метоксибензамид 7,41 (ЗН, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, м), 7,56-7,62 (ЗН, перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,93 (1Н, д), 8,07 (1Н, д), 8,22 (1Н, т), 8,40 (1Н, д), 8,84 (1Н, ушир . с) , 9,16 (1Н, ушир . с) , 9,58 (1Н, ушир . с) . [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
ЪАмХ’ХХ’1 1 н н ху „Х 0Ме 8е 2,04 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 703 (М+Н)+ (Е5+) ; ХН ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,89 (1Н, м) , 3,29 (2Н, м) , 3,48 (2Н, т), 3,57 (ЗН, с), 3,83 (ЗН, с), 4,70 (1Н, ушир.с),
у У 6.33 (1Н, с), 6,53 (1Н, д), 6,90 (1Н, м) , 7,10 (2Н, м) , 7.34 (1Н, ушир.с), 7,39 (1Н, д) , 7,49 (2Н, м) , 7,55-
Н 65: Ν-(2-гидроксиэтил)-3-((4-((4-(3-(3изопропил-Т-(4-метоксифенил)-ТН-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2- ил)амино)-5-метоксибензамид 7,60 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д) , 7,91 (1Н, ц), 8,09 (1Н, д), 8,23 (1Н, т), 8,40 (1Н, д) , 9,06 (1Н, ушир .с), 9,36 (1Η, ушир .с), 9,58 (1Η, ушир. с) . [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
А -0“ А 2,32 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 701 (М+Н)+ (Е3+) ; 4Н ЯМР δ: 1,25 (6Н, д), 2,40 (ЗН, с), 2,90 (1Н, м), 3,26 (ЗН, с), 3,37-3,43 (4Н, перекрывающийся м), 3,58 (ЗН, с), 6,36 (1Н, с), 6,54 (1Н, д) , 6,89 (1Н, с), 7,36-7,40 (4Н, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, д), 7,56-7,65 (ЗН,
Ме Μβ0>Ί^ΝΧ0 Н 66: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-метоксиэтил)бензамид перекрывающийся м), 7,82 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,09 (1Н, д), 8,32 (1Н, т), 8,41 (1Н, д), 9,00 (1Н, ушир.с), 9,27 (1Н, ушир.с), 9,59 (1Н, ушир.с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
АОО А и ΗΝγΥ· А 2,46 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 715 (М+Н)+ (Е5+) ; ‘Н ЯИР δ: 1,29 (9Н, с), 2,40 (ЗН, с), 3,25 (ЗН, с), 3,38-3,42 (4Н, перекрывающийся м), 3,57 (ЗН, ушир.с),
т т 6,42 (1Н, с), 6,54 (1Н, д) , 6,88 (1Н, ушир.т), 7,32
Ме ΜβΟ-^>^·ΝΑο Н 67: 3-((4-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (птолил)-ТН-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы- (2-метоксиэтил)бензамид (1Н, ушир.с), 7,38-7,40 (ЗН, перекрывающийся м), 7,46 (2Н, м) , 7, 54-7,58 (2Н, перекрывающийся м) , 7,62 (1Н, м) , 7,82 (1Н, д) , 7,95 (1Н, д) , 8,07 (1Н, д) , 8,34 (1Н, т), 8,41 (1Н, д), 8,79 (1Н, ушир.с), 9,11 (1Н, ушир.с), 9,61 (1Н, ушир.с) .
- 79 025393
Ме
68: 3-((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ь-метокси-Νметил-Ν-(2-морфолиноэтил)бензамид
69: 1-(З-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол5-ил)-3-(4-((2-((З-метокси-5-(4метилпиперазин-1карбонил)фенил)амино)пиримидин-4ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина
1,80 мин (метод 2, кислотный); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е5+) ; ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,13 (2Н, ушир.с), 2,35-2,40 (7Н, перекрывающийся м), 2,80-2,91 (4Н, перекрывающийся м), 3,22 (1Н, ушир.с), 3,43 (2Н, ушир.с), 3,55 (6Н, ушир.с), 6,36 (2Н, с), 6,56 (1Н, д) , 7,14-7,20 (2Н, перекрывающийся м), 7,38 (ЗН, τ), 7,46 (2Н, д), 7,567,62 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 7,07 (1Н, д), 8,42 (1Н, д), 8,83 (1Н, с), 9,12 (1Н, ушир.с), 9,61 (1Н, ушир.с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты. ]_
Р? 1,70 мин (метод 2, кислотный); ια/ζ 726 (М+Н)+ (Е5+) ;
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д), 2,31-2,43 (7Н, перекрывающийся м) , 2,90 (1Н, м) , 3,44-3,54 (ЮН, перекрывающийся м) , 6,36 (1Н, с), 6,41 (1Н, с), 6,57 (1Н, д) , 7,16 (1Н, ушир.с), 7,25 (1Н, ушир.с), 7,37-7,39 (ЗН, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, д), 7,56-7,62 (2Н, перекрывающийся м), 7,80 (1Н, д), 7,93 (1Н, д), 8,11 (1Н, д), 8,42 (1Н, д), 8,93 (1Н, ушир.с), 9,19 (1Н, ушир.с), 9,63 (1Н, ушир.с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты. ]
70: 5- ((4-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-2-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамид
В? 2,83 мин (метод 3); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е5+) ;
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2, 40-2, 45 (9Н, перекрывающийся м) , 2,89 (1Н, м) , 3,36 (2Н, м) , 3,57-3,59 (4Н, перекрывающийся м), 3,80 (ЗН, с), 6,36 (1Н, с), 6,55 (1Н, д), 6,78 (1Н, м), 7,37-7,43 (4Н, перекрывающийся м), 7,47 (2Н, м), 7,53-7,63 (2Н, перекрывающийся м), 7,81 (2Н, м) , 7,90 (1Н, д) , 8,06 (1Н, д) , 8,30 (1Н, м) , 8,35 (1Н, д) , 8,79 (1Н, с), 9,14 (1Н, с), 9,50 (1Н, с).
71: 3-((6-((4-(3-(З-изопропил-1-(п-толил)1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамид
72: 3-((6-((4-(3-(3- (трет-бутил) -1- (птолил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-Тил) окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы(2-морфолиноэтил)бензамид
Рь 1,74 мин (метод 4); т/ζ 756 (М+Н)+ (Е3+) ; т/ζ 754 (ΜΗ)’ (Е5~) ;
1Н ЯМР δ: 1,24 (6Н, д) , 2,38-2, 52 (9Н, перекрывающийся м) , 2,89 (1Н, м) , 3,34 (2Н, м) , 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м) , 3,75 (ЗН, с), 6,15 (1Н, с), 6,37 (1Н, с), 7,02 (1Н, м), 7,34-7,40 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,44-7,49 (ЗН, перекрывающийся м) , 7,54-7,61 (ЗН, перекрывающийся м), 7,81 (1Н, д), 7,92 (1Н, д), 8,06 (1Н, д), 8,30-8,37 (2Н, перекрывающийся м), 8,77 (1Н, ушир.с), 9,10 (1Н, ушир.с), 9,67 (1Н, ушир.с) .
Рь 1,86 мин (метод 4); т/ζ 770 (М+Н)+ (Е3+) ; т/ζ 768 (ΜΗ)’ (ЕЗ-);
1Н ЯМР δ: 1,29 (9Н, с), 2,38-2, 53 (9Н, перекрывающийся м) , 3,35 (2Н, м) , 3,55-3,57 (4Н, перекрывающийся м) , 3,77 (ЗН, с), 6,15 (1Н, м) , 6,41 (1Н, с), 7,02 (1Н, м) , 7,34-7,40 (ЗН, перекрывающийся м), 7,44-7,50 (ЗН, перекрывающийся м), 7,53-7,66 (ЗН, перекрывающийся м), 7,80 (1Н, д) , 7,92 (1Н, д) , 8,07 (1Н, д) , 8,30-8,35 (2Н, перекрывающийся м), 8,79 (1Н, ушир.с), 9,14 (1Н, ушир.с), 9,67 (1Н, ушир.с). [Соединение, выделенное препаративной ВЭЖХ и охарактеризованное в виде его соли муравьиной кислоты.]
Пример 73. 3-((4-((4-(3-(3 -(трет-Бутил)-1 -(6-метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения А11* (150 мг, 0,389 ммоль) и промежуточного соединения В21 (198 мг, 0,389 ммоль) в изопропилацетате (5 мл) добавляли триэтиламин (10 мкл, 0,072 ммоль). Полученную смесь нагревали при 70°С в течение 90 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и растворитель удаляли в вакууме. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, 0-10% МеОН в ОСМ) с получением белого твердого вещества, которое растирали с диэтиловым эфиром, с получением указанного в заголовке соединения (198 мг) в виде белого твердого вещества.
!Н ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,76 (с, 1Н), 9,07 (с, 1Н), 8,82 (с, 1Н), 8,43 (д, 1Н), 8,41-8,40 (м, 1Н), 8,39-8,34 (ушир.м, 1Н), 8,05-8,03 (м, 2Н), 7,93-7,90 (м, 2Н), 7,87-7,83 (ушир.с, 1Н), 7,83-7,80 (м, 1Н), 7,647,60 (м, 1Н), 7,59-7,55 (м, 1Н), 7,43-7,41 (м, 2Н), 7,04-7,02 (м, 1Н), 6,56 (д, 1Н), 6,43 (с, 1Н), 4,12 (с, 1Н), 3,94 (с, 3Н), 3,58-3,52 (ушир.м, 4Н), 2Н под Н2О при 3,34 м.д., 2,47-2,34 (м, 6Н), 1,29 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 781 (М+Н)+ (Е8+); 779 (М-Н) (Е8-).
Пример 74. 3-Этинил-№(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(3-(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид
- 80 025393
Триэтиламин (4,00 мкл, 0,029 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А3* (56,6 мг, 0,138 ммоль) и промежуточного соединения В21 (70 мг, 0,138 ммоль) в изопропилацетате (1,6 мл), и смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч, и за это время образовывалась густая суспензия. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли ЭСМ и МеОН (3:1, 15 мл). Раствор концентрировали на селикагеле. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакЬ Сотратоп (40 г колонка, 0-10% МеОН в ЭСМ) с получением указанного в заголовке соединения (78 мг) в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 9,77 (с, 1Н), 9,24 (с, 1Н), 9,13 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,37 (т, 1Н), 8,048,06 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,82-7,85 (м, 2Н), 7,56-7,66 (м, 4Н), 7,43-7,49 (м, 4Н), 6,94 (с, 1Н), 6,58 (д, 1Н), 4,13 (с, 1Н), 3,55 (т, 4Н), 3,32-3,37 (м, 2Н), 2,39-2,45 (м, 9Н).
ЖХМС т/ζ 826 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 75. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-^(морфолиноэтил)бензамид
К промежуточному соединению А8* (150 мг, 0,429 ммоль), перемешиваемому в изопропилацетате (5 мл) в атмосфере Ν2 при комнатной температуре, добавляли промежуточное соединение В21 (218 мг, 0,429 ммоль), затем триэтиламин (9,27 мкл, 0,067 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 70°С в течение 90 мин. Реакцию останавливали, и смесь разбавляли ЕБОАс (5 мл), затем фильтровали и промывали дополнительным количеством ЕБОАс (2x20 мл). Осадок сушили в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (228 мг) в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ 9,76 (с, 1Н), 9,10 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,42 (ушир.с, 1Н), 8,04 (д, 2Н), 7,93 (д, 1Н), 7,85 (ушир.с, 1Н), 7,81(д, 1Н), 7,63 (т, 1Н), 7,57 (т, 1Н), 7,42 (м, 6Н), 6,56 (д, 1Н), 6,41 (с, 1Н), 4,12 (с, 1Н), 3,55 (ушир.с, 4Н), 3,33 (м, 2Н), 2,40 (м, 9Н), 1,29 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 764 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 76. 3 -Этинил-^(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3 -(1 -(п-толил)-3 -(1,1,1 -трифтор-2метилпропан-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид
Триэтиламин (5 мкл, 0,036 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А19* (70 мг, 0,174 ммоль) и промежуточного соединения В21 (100 мг, 0,189 ммоль) в изопропилацетате (2 мл), и смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Полученное твердое вещество выделяли фильтрованием и промывали изопропилацетатом (2 мл), затем изогексаном (2 мл). Осадок на фильтре ресуспендировали в ацетонитриле (2 мл) и выделяли фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (65 мг) в виде белого твердого вещества.
'Н ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 9,75 (с, 1Н), 9,14 (с, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,35 (д, 1Н), 8,108,01 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,89-7,79 (м, 2Н), 7,68-7,54 (м, 2Н), 7,54-7,37 (м, 6Н), 6,60 (с, 1Н), 6,56 (д, 1Н), 4,11 (с, 1Н), 3,60-3,51 (м, 4Н), 2Н под пиком воды, 2,48-2,31 (м, 6Н), 2,42 (с, 3Н), 1, 53 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 818 (М+Н)+ (Е8+); 816 (М-Н)- (Е8-).
Пример 77. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-^(2-морфолиноэтил)бензамид
Триэтиламин (5 мкл, 0,036 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А9* (70 мг, 0,192 ммоль) и промежуточного соединения В21 (111 мг, 0,209 ммоль) в изопропилацетате (2 мл), и
- 81 025393 смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Полученное твердое вещество выделяли фильтрованием и промывали изопропилацетатом (2 мл), затем изогексаном (2 мл). Осадок на фильтре ресуспендировали в ацетонитриле (4 мл) и выделяли фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (45 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,75 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 8,72 (с, 1Н), 8,43 (с, 1Н), 8,39-8,30 (м, 1Н), 8,09-8,01 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,88-7,79 (м, 2Н), 7,66-7,60 (м, 1Н), 7,60-7,54 (м, 1Н), 7,52-7,46 (м, 2Н), 7,45-7,40 (м, 2Н), 7,15-7,10 (м, 2Н), 6,55 (д, 1Н), 6,40 (с, 1Н), 4,11 (с, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,60-3,50 (м, 4Н), 3,39-3,31 (м, 2Н), 2,48-2,32 (м, 6Н), 1,29 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 780 (М+Н)+ (Е8+); 778 (М-Н)- (Е8-).
Пример 78. 3-((4-((4-(3-(3-(2-Цианопропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
Триэтиламин (6,00 мкл, 0,043 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А20* (70 мг, 0,194 ммоль) и промежуточного соединения В21 (99 мг, 0,194 ммоль) в изопропилацетате (2 мл) и смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч, за это время образовывалась густая суспензия. Суспензию фильтровали и полученное твердое вещество сушили при 40°С в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (118 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,77 (с, 1Н), 9,16 (с, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,37 (т, 1Н), 8,058,07 (м, 2Н), 7,95 (д, 1Н), 7,82-7,86 (м, 2Н), 7,56-7,66 (м, 2Н), 7,51 (д, 2Н), 7,42-7,45 (м, 4Н), 6,63 (с, 1Н), 6,57 (д, 1Н), 4,12 (с, 1Н), 3,56 (т, 4Н), 2Н под пиком воды, 2,39-2,45 (м, 6Н), 2,43 (с, 3Н), 1,71 (с, 6Н).
ЖХМС т/ζ 388 (М+2Н)2+ (Е8+).
Пример 79. 3-Этинил-5-((4-((4-(3-(3-(2-метоксипропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
Триэтиламин (6,00 мкл, 0,043 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А22* (70 мг, 0,192 ммоль) и промежуточного соединения В21 (97 мг, 0,192 ммоль) в изопропилацетате (2 мл), и смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч, и за это время образовывалась густая суспензия. Смесь фильтровали и полученное твердое вещество сушили при 40°С в вакууме в течение ночи. Вещество растирали в смеси Е!2О и Е!ОАс (2:1) при воздействии ультразвука, и суспендированное твердое вещество повторно выделяли фильтрованием, промывая Е!ОАс.
Вещество сушили при 40°С в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (38 мг) в виде бледно-серого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,77 (с, 1Н), 9,12 (с, 1Н), 8,85 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,37 (т, 1Н), 8,068,08 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,56-7,65 (м, 2Н), 7,49 (д, 2Н), 7,40-7,45 (м, 4Н), 6,57 (д, 1Н), 6,48 (с, 1Н), 4,13 (с, 1Н), 3,56 (т, 4Н), 2Н под пиком воды, 3,05 (с, 3Н), 2,40-2,45 (м, 6Н), 2,42 (с, 3Н), 1,48 (с, 6Н). ЖХМС т/ζ 391 (М+2Н)2+ (Е8+).
Пример 80. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1-(4-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразол-5 ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6-этинил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
ЭРРА (107 мкл, 0,496 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору промежуточного соединения М1 (95 мг, 0,331 ммоль) и триэтиламина (92 мкл, 0,661 ммоль) в ДМФА (3 мл) при 0°С. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 45 мин. Добавляли промежуточное соединение
- 82 025393
В21 (177 мг, 0,347 ммоль), и смесь нагревали до 100°С в течение 2 ч. Смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x10 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли (10 мл), сушили (М§8О4) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫИакЬ Сотратоп (40 г колонка, 0-10% МеОН/ОСМ) с получением бледно-коричневой смолы. Смолу перемешивали в ацетонитриле в течение 18 ч и осадок выделяли фильтрованием с получением указанного в заголовке соединения (88 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-66) 400 МГц, δ: 9,76 (с, 1Н), 9,13 (с, 1Н), 8,68 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,41-8,31 (м, 1Н), 8,11-8,03 (м, 2Н), 7,97 (д, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,82 (д, 1Н), 7,66-7,60 (м, 1Н), 7,60-7,54 (м, 1Н), 7,45-7,39 (м, 2Н), 7,38-7,31 (м, 2Н), 6,91-6,83 (м, 2Н), 6,46 (д, 1Н), 6,38 (с, 1Н), 4,12 (с, 1Н), 3,60-3,50 (м, 4Н), 2Н под пиком воды, 3,02-2,93 (м, 6Н), 2,48-2,30 (с, 6Н), 1,28 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 793 (М+Н)+ (Е8+); 791 (М-Н)- (Е8 ). ЖХМС т/ζ 813 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 81. (8)-3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -этинил-№( 1 -морфолинопропан-2-ил)бензамид
Триэтиламин (5,00 мкл, 0,036 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А8* (60 мг, 0,172 ммоль) и промежуточного соединения В22 (100 мг, 0,191 ммоль) в изопропилацетате (3 мл) и смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч, за это время образовывалось гелеобразное твердое вещество. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли Е1ОАс. Суспендированное твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая дополнительным количеством Е1ОАс.
Выделенное твердое вещество сушили при 40°С в вакууме в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (87 мг) в виде бежевого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-66) 400 МГц, δ: 9,74 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,13 (д, 1Н), 8,058,08 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,88 (с, 1Н), 7,83 (д, 1Н), 7,56-7,65 (м, 2Н), 7,37-7,48 (м, 6Н), 6,55 (д, 1Н), 6,41 (с, 1Н), 4,13-4,20 (м, 1Н), 4,11 (с, 1Н), 3,53 (т, 4Н), 2,34-2,44 (м, 8Н), 2,26 (дд, 1Н), 1,30 (с, 9Н), 1,12 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 778 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 82. 3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-^(2-метил-1-морфолинопропан-2-ил)бензамид
Триэтиламин (10,0 мкл, 0,072 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А8* (118 мг, 0,339 ммоль) и промежуточного соединения В23 (200 мг, 0,373 ммоль) в изопропилацетате (4 мл) и смесь нагревали при 60°С в течение 1 ч, за это время образовывалось гелеобразное твердое вещество. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли Е1ОАс. Твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая Е1ОАс. Полученное твердое вещество дополнительно сушили при 40°С в вакууме с получением указанного в заголовке соединения (201 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-66) 400 МГц, δ: 9,72 (с, 1Н), 9,09 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,07 (д, 1Н), 7,937,97 (м, 2Н), 7,87 (с, 1Н), 7,83 (д, 1Н), 7,56-7,66 (м, 3Н), 7,37-7,46 (м, 6Н), 6,55 (д, 1Н), 6,41 (с, 1Н), 4,09 (с, 1Н), 3,53 (т, 4Н), 2,61 (с, 2Н), 2,47 (т, 4Н), 2,41 (с, 3Н), 1,31 (с, 6Н), 1,30 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 793 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 83. (К)-3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5 -этинил-№( 1 -морфолинопропан-2-ил)бензамид
Триэтиламин (6,00 мкл, 0,043 ммоль) добавляли к смеси промежуточного соединения А8* (72,9 мг, 0,209 ммоль) и промежуточного соединения В24 (120 мг, 0,230 ммоль) в изопропилацетате (4 мл) и смесь
- 83 025393 нагревали при 60°С в течение 1 ч, за это время образовывалось гелеобразное твердое вещество. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли Е1ОАс. Суспендированное твердое вещество выделяли фильтрованием, промывая дополнительным количеством Е1ОАс.
Выделенное твердое вещество сушили при 40°С в вакууме в течение ночи с получением указанного в заголовке соединения (111 мг) в виде бледно-бежевого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 9,74 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 8,44 (д, 1Н), 8,13 (д, 1Н), 8,058,08 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,88 (с, 1Н), 7,83 (д, 1Н), 7,56-7,65 (м, 2Н), 7,37-7,48 (м, 6Н), 6,55 (д, 1Н), 6,41 (с, 1Н), 4,13-4,20 (м, 1Н), 4,11 (с, 1Н), 3,53 (т, 4Н), 2,34-2,44 (м, 8Н), 2,26 (дд, 1Н), 1,30 (с, 9Н), 1,12 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 390 (М+2Н)2+ (Е8+).
Пример 84. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы-(метоксиэтил)бензамид
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения С3 (152 мг, 0,274 ммоль) и промежуточного соединения Ό4 (95 мг, 0,411 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли моногидрат р-Т8А (26 мг, 0,137 ммоль). Полученный раствор нагревали при 60°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между Е1ОАс (30 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (30 мл). Водную фазу повторно экстрагировали Е1ОАс (30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (2x50 мл), насыщенным раствором соли (50 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением оранжевого твердого вещества (236 мг). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, 0-10% МеОН в ЭСМ) с получением розового твердого вещества, которое растирали с Е12О, с получением указанного в заголовке соединения (79 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 9,75 (с, 1Н), 9,07 (с, 1Н), 8,72 (с, 1Н), 8,47 (т, 1Н), 8,43 (д, 1Н), 8,068,04 (м, 2Н), 7,93 (д, 1Н), 7,86 (ушир.с, 1Н), 7,81 (д, 1Н), 7,64-7,54 (м, 2Н), 7,50-7,46 (м, 2Н), 7,44-7,41 (м, 2Н), 7,14-7,10 (м, 2Н), 6,55 (д, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 4,11 (с, 1Н), 3,84 (с, 3Н), 3,45-3,35 (м, 4Н), 3,25 (с, 3Н), 1,28 (с, 9Н).
ЖХМС т/ζ 725 (М+Н)+ (Е8+); 723 (М-Н)- (Е8-).
Пример 85. (8)-3-((4-((4-(3-(3-(трет-Бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-6-этинил-Ы-(1-метоксипропан-2-ил)бензамид
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения С3 (150 мг, 0,271 ммоль) и промежуточного соединения Ό6 (103 мг, 0,406 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли моногидрат р-Т8А (26 мг, 0,137 ммоль). Полученный раствор нагревали при 60°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и распределяли между Е1ОАс (30 мл) и насыщенным водным раствором NаΗСО3 (30 мл). Водную фазу повторно экстрагировали Е1ОАс (30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (2x50 мл), насыщенным раствором соли (50 мл), сушили (М§8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением оранжевого твердого вещества (221 мг). Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, 0-10% МеОН в ЭСМ) с получением бледно-розового твердого вещества (96 мг), которое растирали с Е12О и затем МеС№, с получением указанного в заголовке соединения (50 мг) в виде бледно-розового твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-а6) 400 МГц, δ: 9,75 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 8,72 (с, 1Н), 8,43 (д, 1Н), 8,21 (д, 1Н), 8,068,04 (м, 2Н), 7,94 (д, 1Н), 7,88 (ушир.с, 1Н), 7,83-7,81 (м, 1Н), 7,64-7,55 (м, 2Н), 7,50-7,46 (м, 3Н), 7,42 (д, 1Н), 7,14-7,10 (м, 2Н), 6,54 (д, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 4,18-4,11 (м, 2Н), 3,84 (с, 3Н), 3,39-3,35 (м, 1Н), 3,26-3,23 (м, 4Н), 1,28 (с, 9Н), 1,10 (д, 3Н).
ЖХМС т/ζ 739 (М+Н)+ (Е8+); 737 (М-Н)- (Е8-).
- 84 025393
Пример 86. 3-Метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3-(проп-1-ен-2-ил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)^-(2-морфолиноэтил)бензамид
Указанное в заголовке соединение может быть получено способами, аналогично описанным выше (например, путем взаимодействия промежуточного соединения А21 с фенилхлорформиатом и последующего взаимодействия полученного фенилкарбамата с промежуточным соединением В13).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,59 (с, 1Н), 9,11 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,40 (д, 1Н), 8,18 (ушир.т, 1Н), 8,05 (д, 1Н), 7,94 (д, 1Н0, 7,82 (д, 1Н), 7,64-7,50 (м, 5Н), 7,41 (д, 1Н), 7,32 (с, 1Н), 7,14 (д, 2Н), 6,85 (с, 1Н), 6,70 (с, 1Н), 6,54 (д, 1Н), 5,52 (с, 1Н), 5,10 (с, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 3,58-3,52 (м, 7Н), 3,37-3,34 (м, 2Н), 2,442,36 (м, 6Н), 2,06 (с, 3Н).
ЖХМС т/ζ 768 (М-Н)- (Е8-).
Пример 87. 3 -((4-(2,3-Дихлор-4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-6-этинил-^(2-морфолиноэтил)бензамид
Промежуточное соединение С4 (150 мг, 0,282 ммоль) растворяли в ДМФА (1,5 мл) и добавляли к промежуточному соединению Ό1 (100 мг, 0,367 ммоль) и моногидрату р-Т8А (80 мг, 0,423 ммоль). Перемешивали при 70°С (температура нагревательного блока) в течение 4 ч, затем выливали в насыщенный водный раствор №-1НСО3, (20 мл), и продукт экстрагировали Е!ОАс (2x20 мл). Органические фазы собирали и промывали 20% мас./мас. насыщенным раствором соли (20 мл), сушили (Мд8О4), фильтровали и упаривали с получением коричневого твердого вещества. Неочищенный продукт очищали хроматографией в системе СотЫР1акЬ Сотратоп (40 г колонка, от 2% МеОНГОСМ до 8%), затем растирали с МеСN (3x3 мл) с получением указанного в заголовке соединения (93 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ 9,87 (с, 1Н), 9,20 (с, 1Н), 8,80 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,37 (с, 1Н), 8,14 (д, 1Н), 7,98 (с, 1Н), 7,84 (с, 1Н), 7,52-7,26 (м, 6Н), 6,63 (д, 1Н), 6,35 (с, 1Н), 4,05 (с, 1Н), 3,59-3,52 (м, 4Н), 2,97-2,82 (м, 1Н), 2,47-2,33 (м, 9Н), 1,23 (д, 6Н). 2Н закрытый пиком воды при 3,32 м.д.
ЖХМС т/ζ 768/770 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 88. 3 -((4-(2,3-Дифтор-4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-6-этинил-^(2-морфолиноэтил)бензамид
К перемешиваемому раствору промежуточного соединения С5 (151 мг, 0,303 ммоль) в ТГФ/ДМФА (4 мл, 1:1) добавляли моногидрат р-Т8А (86 мг, 0,454 ммоль), затем промежуточное соединение Ό1 (124 мг, 0,454 ммоль). Полученную смесь нагревали при 60°С в течение ночи, охлаждали до комнатной температуры и распределяли между Е!ОАс (30 мл) и насыщенным водным раствором NаНСОз (20 мл). Водный слой экстрагировали Е!ОАс (2x30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (3x40 мл), насыщенным раствором соли (50 мл), сушили (Мд8О4), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением кремового твердого вещества. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (80 г колонка, 0-10% МеОН в ЭСМ), затем очищали препаративной ВЭЖХ (^а!егк, кислотный (0,1% муравьиная кислота), колонка \Уа1егк Х-8е1ес! Ргер-С18, 5 мкм, 19x50 мм, 25-50% МеСN в воде) с получением указанного в заголовке соединения в форме соли с 0,2 молями муравьиной кислоты (65 мг) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (ДМСО-й6) 400 МГц, δ: 9,88 (с, 1Н), 9,14 (с, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 8,46 (д, 1Н), 8,34 (т, 1Н), 7,977,92 (ушир.м, 2Н), 7,84 (с, 1Н), 7,43-7,40 (м, 3Н), 7,37-7,35 (м, 2Н), 7,23-7,18 (м, 1Н), 6,65 (д, 1Н), 6,35 (с, 1Н), 4,01 (с, 1Н), 3,56-3,53 (м, 4Н), 2Н под пиком воды при 3,32 м.д., 2,92-2,85 (м, 1Н) 2,43 (т, 2Н) 2,412,35 (ушир.м, 7Н) 1,23 (д, 6Н).
ЖХМС т/ζ 736 (М+Н)+ (Е8+); 734 (М-Н)- (Е8-).
- 85 025393
Пример 89. 3 -((4-(2,3-Дихлор-4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинилбензамид
Промежуточное соединение С4 (150 мг, 0,282 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и добавляли к промежуточному соединению Ό7 (90 мг, 0,564 ммоль) и моногидрату р-Т8А (26,8 мг, 0,141 ммоль). Перемешивали при 70°С (температура нагревательного блока) в течение 4 ч, затем выливали в насыщенный водный раствор NаΗСОз (20 мл), и продукт экстрагировали Е1ОАс (2x20 мл). Собирали органические фазы и промывали 20% мас./мас. насыщенным раствором соли (20 мл), сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали с получением желтого твердого вещества. Абсорбировали на диоксиде кремния и очищали хроматографией на силикагеле (40 г колонка, от 4% МеОНГОСМ до 8%), затем растирали с МеСN (4x3 мл) с получением указанного в заголовке соединения (40 мг) в виде бесцветного твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,83 (с, 1Н), 9,17 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,46 (д, 1Н), 8,01 (с, 1Н), 7,92 (с, 1Н), 7,87 (с, 1Н), 7,49 (т, 2Н), 7,46-7,40 (м, 3Н), 7,39-7,33 (м, 3Н), 6,62 (д, 1Н), 6,35 (с, 1Н), 4,01 (с, 1Н), 2,90 (гепт., 1Н), 2,39 (с, 3Н), 1,24 (д, 6Н).
ЖХМС т/ζ 655/657 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 90. 3-((4-(2,3-Дихлор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-(диметиламино)этил)-5-этинилбензамид
Промежуточное соединение С4 (150 мг, 0,282 ммоль) растворяли в ДМФА (2 мл) и добавляли к промежуточному соединению Ό8 (130 мг, 0,564 ммоль) и моногидрату р-Т8А (80 мг, 0,423 ммоль). Перемешивали при 70°С (температура нагревательного блока) в течение 4 ч, затем выливали в насыщенный водный раствор NаΗСОз (20 мл), и продукт экстрагировали Е1ОАс (2x20 мл). Собирали органические фазы и промывали 20% мас./мас. насыщенным раствором соли (20 мл), сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали с получением бесцветного твердого вещества. Растирали с МеСN (3x2 мл) с получением указанного в заголовке соединения (90 мг).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,84 (с, 1Н), 9,18 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н), 8,34 (т, 1Н), 8,13 (д, 1Н), 7,97 (с, 1Н), 7,85 (с, 1Н), 7,46-7,39 (м, 4Н), 7,38-7,33 (м, 2Н), 6,62 (д, 1Н), 6,35 (с, 1Н), 4,02 (с, 1Н), 3,37-3,26 (м, 2Н), 2,89 (гепт., 1Н), 2,43-2,33 (м, 5Н), 2,17 (с, 6Н), 1,24 (д, 6Н).
ЖХМС т/ζ 726/728 (М+Н)+ (Е8+).
Пример 91. 3 -((6-(4-(3 -(3 -(трет-Бутил)-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)-2,3 диметилфенокси)пиримидин-4-ил)амино)-6-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид
Указанное в заголовке соединение может быть получено способами, аналогично описанным выше.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ 9,70 (с, 1Н), 8,60 (с, 1Н), 8,38-8,35 (м, 2Н), 8,18 (с, 1Н), 7,56-7,43 (м, 5Н), 7,10 (д, 2Н), 7,02 (с, 1Н), 6,94 (д, 1Н), 6,33 (с, 1Н), 6,04 (с, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 3,57 (т, 4Н), 2,47-2,38 (м, 6Н), 2,12 (с, 3Н), 2,02 (с, 3Н), 1,27 (с, 9Н). 2Н под пиком воды при 3,35 м.д.
ЖХМС т/ζ 382,6 (М+2Н)2' (Е8+).
Биологические испытания: методы эксперимента.
Исследования связывания фермента (КШОМЕксаш®).
Активность раскрытых в изобретении соединений по связыванию киназного фермента определяли, используя запатентованный метод анализа, с помощью которого измеряют сайт-направленное активное конкурентное связывание с иммобилизованным лигандом (РаЫащ М.А. е1 а1., №йиге ВюйсНнок 2005, 23:329-336). Эти исследования проводились фирмой Э^согегХ (бывшей АтМ; δаη О1едо, СА). Процент
- 86 025393 ингибирования, продуцированного в результате инкубации с тестируемым соединением, вычисляют относительно неингибированного контроля.
Исследования ингибирования фермента.
Ингибирующую активность описываемых в изобретении соединений в отношении фермента определяют методом резонансного переноса энергии флуоресценции (РКЕТ) с использованием синтетических пептидов, меченных как донорными, так и акцепторными флуорофорами (Ζ-^ΥΤЕ, 1пуйгодеп ЬЕб., Ра1к1еу, ИК).
Ингибирование фермента р38 МАРКа.
Два следующих варианта исследования используют для определения ингибирования р38 МАРКа.
Метод 1.
Ингибирующую активность тестируемых соединений в отношении изоформы р38 МАРКа (МАРК14: 1пу11годеп) косвенно оценивают путем определения уровня активации/фосфорилирования ниже стоящей в каскаде реакций молекулы, МАРКАР-К2. Белок р38 МАРКа (80 нг/мл, 2,5 мкл) смешивают с тестируемым соединением (2,5 мкл либо 4, 0,4, 0,04 либо 0,004 мкг/мл) в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем добавляют перемешанный раствор (2,5 мкл) р38а инактивированной мишени МАРКАР-К2 ОпуЦгодеп, 600 нг/мл) и РКЕТ пептида (8 мкМ; мишень фосфорилирования для МАРКАРК2), и киназную реакцию инициируют добавлением АТФ (40 мкМ, 2,5 мкл). Смесь инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. За 1 ч до детектирования в флуоресцентном планшет-ридере (Уапоккап® Р1акЬ, ТЬегтоРтЬег 8аепййс) добавляют проявляющий реагент (протеазу, 5 мкл).
Метод 2.
Этот метод состоит из таких же стадий, как и приведенный выше метод 1, но в нем для смешения с тестируемым соединением используют более высокую концентрацию белка р38 МАРКа (2,5 мкл 200 нг/мл белка вместо 2,5 мкл 80 нг/мл белка).
Ингибирование фермента р38 МАРКу.
Ингибирующую активность соединений изобретения в отношении р38 МаРКу (МАРК12: 1пу1Егодеп) оценивают таким же образом, как описано выше. Фермент (800 нг/мл, 2,5 мкл) инкубируют с тестируемым соединением (2,5 мкл либо при 4, 0,4, 0,04, либо 0,004 мкг/мл) в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем к смесям ферменты/соединения добавляют РКЕТ пептиды (8 мкМ, 2,5 мкл) и соответствующий раствор АТФ (2,5 мкл, 400 мкМ) и инкубируют в течение 1 ч. За 1 ч до детектирования во флуоресцентном планшет-ридере (Уапоккап® Р1акЬ, ТЬегтоРтЬег 8с1епййс) добавляют проявляющий реагент (протеазу, 5 мкл).
Ингибирование фермента с-8гс и 8ук.
Ингибирующую активность соединений изобретения в отношении ферментов с-8гс и 8ук (1пу1Егодеп) оценивают таким же образом, как описано выше. Исследуемый фермент (3000 или 2000 нг/мл соответственно, 2,5 мкл) инкубируют с тестируемым соединением (либо 4 мкг/мл, 0,4 мкг мл, 0,04 мкг мл, либо 0,004 мкг/мл, 2,5 мкл каждого) в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем к смесям ферменты/соединения добавляют РКЕТ пептиды (8 мкМ, 2,5 мкл) и соответствующие растворы АТФ (2,5 мкл, 800 мкМ для с-8гс и 60 мкМ АТФ для 8ук) и инкубируют в течение 1 ч. За 1 ч до детектирования во флуоресцентном планшет-ридере (Уагюккап® Р1акЬ, ТНегтоНкНег 8аепЕ1Йс) добавляют проявляющий реагент (протеазу, 5 мкл).
Ингибирование фермента С8К 3 а.
Два следующих варианта исследования используют для определения ингибирования С8К 3 а.
Метод 1.
Ингибирующую активность соединений изобретения в отношении изоформы фермента С8К3а (1пуйгодеп) оценивают путем определения уровня активации/фосфорилирования пептидной мишени. Белок С8К3-а (500 нг/мл, 2,5 мкл) смешивают с тестируемым соединением (2,5 мкл при либо 4, 0,4, 0,04 либо 0,004 мкг/мл) в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем к смеси фермент/соединение добавляют РКЕТ пептид (8 мкМ, 2,5 мкл), который является мишенью фосфорилирования для С8К3а, и АТФ (40 мкМ, 2,5 мкл), и полученную смесь инкубируют в течение 1 ч. За 1 ч до детектирования во флуоресцентном планшет-ридере (Уагюккап® Р1акЬ, ТЬегтоРйЬег 8с1епЕ1Йс) добавляют проявляющий реагент (протеазу, 5 мкл).
Во всех случаях сайт-специфичная протеаза расщепляет только нефосфорилированный пептид, и в этом случае РКЕТ сигнал отсутствует. Рассчитывают уровни фосфорилирования для каждой реакции, используя отношение эмиссии кумарина (донора) к эмиссии флуоресцеина (акцептора), при этом высокие значения отношений указывают на высокий уровень фосфорилирования, и низкие значения отношений указывают на низкие уровни фосфорилирования. Процент ингибирования каждой реакции рассчитывают относительно неингибированного контроля, и затем из кривой концентрация-ответ рассчитывают концентрацию, при которой достигается 50% ингибирование (величину 1С50).
- 87 025393
Метод 2.
Этот метод состоит из таких же стадий, как и приведенный выше метод 1, но в нем используют более короткое время для смешения тестируемого соединения с белком О8К3-а (105 мин вместо 2 ч).
Исследования клеток.
(а) Индуцированное липосахаридом (ЬР8) высвобождение ТМЕа/Ш-8 в клетках линии Й-И937.
Клетки моноцитарной линии человека И937 дифференцируют в клетки типа макрофагов инкубированием с форболмиристатацетатом (РМА) (100 нг/мл) в течение 48-72 ч. Клетки предварительно инкубируют с конечными концентрациями тестируемого соединения в течение 2 ч и затем стимулируют с помощью ЬР8 (0,1 мкг/мл; £гот Е. Сой: 0111:В4, 81дта) в течение 4 ч. Супернатант собирают для определения концентраций ΊΝΕα и Ш-8 твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) сэндвич-типа (Эио-8е!, Р&Э 8у8!етк). Ингибирование продуцирования ΨΝΕα рассчитывают как процент, который достигается с помощью 10 пг/мл ВЙРВ796 при каждой концентрации тестируемого соединения, по сравнению с плацебо, используемого в качестве контроля. Относительную 50% эффективную концентрацию (РЕС50) определяют из полученной кривой концентрация-ответ. Ингибирование продуцирования Ш-8 рассчитывают при каждой концентрации тестируемого соединения по сравнению с плацебо, используемого в качестве контроля. Из полученной кривой концентрация-ответ определяют концентрацию, при которой достигается 50% ингибирование (Ш5С1).
(Ι) Индуцированное липосахаридом (ЬР8) высвобождение ТМЕа/Ш-8 в мононуклеарных клетках периферической крови (РВМС).
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) здоровых субъектов выделяют из цельной крови с использованием градиента плотности (Ьутрйоргер, А\18-8Ые1й Неа1!йсаге). Мононуклеарные клетки периферической крови высевают в 96-луночных планшетах и обрабатывают соединениями при желаемой концентрации за 2 ч до добавления 1 нг/мл липосахарида (Е8сйепсй1а Сой 0111:В4 фирмы 81дта А1йпсй) и инкубируют в течение 24 ч в нормальных условиях культивирования клеток тканей (37°С, 5% СО2). Супернатант собирают для определения концентраций Ш-8 и ТЛЕа твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) сэндвич-типа (Эио-8е!, Р&Э 8у8!ет8), и результаты считывают на флуоресцентном планшет-ридере ^агю8кап® Р1а8й, ТйегтоР18йег 8аеп!йю). Из кривой доза-ответ рассчитывают концентрацию при 50% ингибировании (Ш50) продуцирования Ш-8 и ТНЕа.
(с) Высвобождение Ш-2 и интерферона (ΙΕΝ) гамма в мононуклеарных клетках периферической крови, стимулированных с помощвю СЭ3/СЭ28.
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) здоровых субъектов выделяют из цельной крови с использованием градиента плотности (Ьутрйоргер, А\18-8й1е1й Неа1!йсаге). Клетки добавляют в 96-луночный планшет, на который предварительно нанесена смесь СЭ3/СЭ38 моноклональных антител (0,3 мкг/мл еВю8с1епсе и 3 мкг/мл ВЭ Рйагтшдеп соответственно). Затем в лунки добавляют соединение при требуемой концентрации, и планшет выдерживают в течение 3 дней в нормальных условиях культивирования клеток тканей. Супернатанты собирают и определяют высвобождение Ш-2 и ΙΕΝ гамма твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) сэндвич-типа (Эио-8е!, Ρ&Ό 8у8!ет). Из кривой дозаответ определяют значение ΙΟ50.
(й) Индуцированное с помощью ΙΗ-1 β высвобождение Ш-8 в клетках линии НТ29.
Клетки линии НТ29, клетки аденокарциномы толстой кишки человека, высевают в 96-луночном планшете (24 ч) и предварительно обрабатывают соединениями при требуемой концентрации за 2 ч до добавления 5 нг/мл Ш-1 β (Айеат) и выдерживают в течение 24 ч. Собирают супернатанты для количественного определения Ш-8 твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) сэндвич-типа (Эио-8е!, Ρ&Ό 8у8!ет). Из кривой доза-ответ определяют значение Ш50.
(е) Индуцированное липосахаридом (ЬР8) высвобождение Ш-8 и ТНЕа в первичных макрофагах.
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) здоровых субъектов выделяют из цельной крови с использованием градиента плотности (Ьутрйоргер, А\18-8й1е1й Неа1!йсаге). Клетки инкубируют в течение 2 ч, и неслипшиеся клетки удаляют промыванием. Для дифференцировки клеток в макрофаги, клетки инкубируют с 5 нг/мл гранулоцитарно-макрофагальным колониестимулирующим фактором (ОМС8Е) (Рерго!есй) в течение 7 дней в нормальных условиях культивирования клеток тканей. Затем к клеткам добавляют соединения при требуемой концентрации за 2 ч перед предварительной обработкой перед стимуляцией с помощью 10 нг/мл липосахарида в течение 24 ч. Собирают супернатанты и определяют высвобождение Ш-8 и ТНЕа твердофазным иммуноферментным анализом (ЕЫ8А) сэндвич-типа (Эио8е!, Ρ&Ό 8у8!ет). Из кривой доза-ответ определяют значение Ш50.
(ί) Экспрессия ШАМ-1 в клетках ВЕА82В, индуцированная поли (инозиновой-полицитидиловой) кислотой (Ро1у ЬС) Ро1у ЬС используют в этих исследованиях в качестве простого мимика РНК вируса. Смесь Ро1у ЬС-олигофектамин (1 мкг/мл Ро1у ЬС, ±2% олигофектамин, 25 мкл; фирмы йпзуодеп Ь!й., 8ап Э|едо, СА и фирмы Шуйгодеп, Сагкйай, СА соответственно) трансфицируют в клетки ВЕА82В (клетки бронхиального эпителия человека, Американская коллекция типовых культур). Клетки предварительно инкубируют с конечными концентрациями тестируемых соединений в течение 2 ч, и определяют уровень экспрессии ШАМ1 на поверхности клеток с помощью клеточного твердофазного иммуно- 88 025393 ферментного анализа (ЕЫ8А). Через 18 ч после Ро1у 1:С трансфекции клетки фиксируют 4% формальдегидом в забуференном фосфатом физиологическом растворе (РВ§) (100 мкл) и затем эндогенную пероксидазу блокируют добавлением промывочного буфера (100 мкл, 0,05% Т\\ееп в РВ§: РВ8-Т\уееп), содержащего 0,1% азида натрия и 1% пероксида водорода. Клетки промывают промывочным буфером (3x200 мкл) и после блокирования лунок с помощью 5% молока в РВЗ-Тетееп (100 мкл) в течение 1 ч клетки инкубируют с человеческим анти-1САМ-1 антителом (50 мкл; Се11 81дпаШп§ ТесЬпо1оду, Эапуегк, МА) в 1% В8А РВ§ в течение ночи при 4°С.
Клетки промывают ΡΒδ-Тетееп (3x200 мкл) и инкубируют со вторичным антителом (100 мкл; НКРконъюгированный антикроличий 1дС, Эако ЬБа., С1окБгир, Эептагк). Клетки затем инкубируют с субстратом (50 мкл) в течение 2-20 мин, затем добавляют останавливающий раствор (50 мкл, 1н. Н2§О4). Сигнал 1САМ-1 детектируют путем регистрации на спектрофотометре поглощения при 450 нм в сопоставлении с опорной длиной волны 655 нм. Клетки затем промывают РВ8-Т\уееп (3x200 мкл), и определяют суммарное число клеток в каждой лунке путем регистрации поглощения при 595 нм после окрашивания кристаллическим фиолетовым (50 мкл 2% раствора в РВ§) разведения с помощью 1% δΌδ раствора (100 мкл) в дистиллированной воде. Полученные данные по поглощения при длинах волн 450-655 нм корректируют с учетом числа клеток для каждой лунки путем деления на данные по поглощению при длине волны 595 нм. Ингибирование экспрессии 1САМ-1 рассчитывают для каждой концентрации тестируемого соединения путем сравнения с плацебо, используемого в качестве контроля. Из полученной кривой концентрация-ответ определяют концентрацию 50% ингибирования (1С50). (д) Пролиферация Тклеток.
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) здоровых субъектов выделяют из цельной крови с использованием градиента плотности (ЬутрЬоргер, АхБк^ЫеШ Неа1БЬсаге). Фракцию лимфоцитов сначала обогащают СЭ4+ Т-клетками путем проведения негативной магнитной сортировки клеток в соответствии с инструкциями фирмы-производителя (МШепуа ВюБес 130-091-155). Затем отделяют не подвергавшиеся воздействию СЭ4+ Т-клетки путем проведения позитивной магнитной сортировки СО45КА+ клеток с использованием микробусинок в соответствии с инструкциями фирмы-производителя (130-045-901). Клетки высевают при плотности 2x105 клеток на лунку в 100 мкл КРМ1/10% ΡΒδ на 96луночном планшете с плоским дном (Согшпд СокБаг). Разводят 25 мкл тестируемого соединения до соответствующей концентрации (8ж конечной концентрации) в нормальной среде и добавляют в дублирующие лунки на планшете с целью достижения дозозависимого эффекта в диапазоне 0,03-250 нг/мл. Добавляют ДМСО в качестве негативного контроля. Планшеты предварительно инкубируют за 2 ч до стимуляции с помощью 1 мкг/мл анти-СЭ3 (ОКТ3; еВюкаепсе). Через 72 ч среду в каждой лунке заменяют на 150 мкл свежей среды, содержащей 10 мкМ 5-бромдезоксиуридин (Вгаи) (КосЬе). Через 16 ч удаляют супернатант, планшет сушат и клетки фиксируют добавлением 100 мкл фиксирующего/денатурирующего раствора в каждую лунку в течение 20 мин в соответствии с инструкциями фирмыпроизводителя (КосЬе). Планшеты промывают один раз РВδ перед добавлением анти-Вгаи идентифицирующего антитела и инкубируют в течение 90 мин при комнатной температуре. Планшеты затем осторожно промывают 3 раза промывочным буфером и проявляют добавлением 100 мкл раствора субстрата. Реакцию останавливают добавлением 50 мкл 1 М Н^О4, и считывают данные по поглощению при 450 нм на планшет-ридере (Уапоккап® Р1акЬ, ТЬегтоРЬЬег δс^епι^Г^с). Из кривой дозовой зависимости определяют значение 1С50.
(Ь) Исследование биоптатов человека.
Биоптаты слизистой оболочки кишки получают из воспаленных областей толстой кишки пациентов с воспалительным заболеванием кишечника. Биоптат разрезают на небольшие кусочки (2-3 мм) и помещают на стальные решетки в камеру для культивирования клеток органов при 37°С в атмосферу 5% СО2/95% О2 в бессывороточную среду. К ткани добавляют ДМСО в качестве контроля или тестируемые соединения при желаемой концентрации и инкубируют в течение 24 ч в камере для культивирования клеток органов. Собирают супернатант для определения уровней 1Ь-6, 1Ь-8, ΙΌ-β и ΊΝΡα твердофазным иммуноферментным анализом (Ек-ΙδΛ) фирмы К&О δукБет. Процент ингибирования высвобождения цитокинов тестируемыми соединениями рассчитывают относительно высвобождения цитокинов, определенного для ДМСО контроля (100%).
(ί) Исследование митоза в клетках.
Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) здоровых субъектов выделяют из цельной крови (ОитБЛек, Ьопаоп, ИК) с использованием градиента плотности (Н|к1орацие®-1077, δ^дта-Λ1а^^сЬ. Роо1е, ϋΚ). Мононуклеарные клетки периферической крови (3 млн клеток на образец) последовательно обрабатывают 2% РНА (фитогемагглютинина) ^дта-АМисЬ, Роо1е, ИК) в течение 48 ч, затем подвергают в течение 20 ч воздействию меняющихся концентраций тестируемых соединений. За 2 ч до собирания клеток, мононуклеарные клетки периферической крови обрабатывают демеколцином (0,1 мкг/мл; 1пу1Бгодеп, РаШеу, ИК) для блокирования клеток на стадии метафазы. Для наблюдения митотических клеток, мононуклеарные клетки периферической крови пермеабилизируют и фиксируют добавлением реактива 1пБгаРгер (50 мкл; Весктап Сои1Бег, Ргапсе), и окрашивают с помощью анти-фосфогистона 3
- 89 025393 (0,26 нг/мл; #9701; Се11 81дпаШп§, Эапусг5. МА) и пропидий йодида (1 мг/мл; δίβΐηα-ΛΙύπαΙι. Роо1е, ИК), как описано ранее в публикации МиеЫЪаиег Р.А. и δοΙιιι^Γ М.Т, МШаОоп КекеагсЬ, 2003, 537:117-130. Флуоресценцию регистрируют на проточном цитометре ΑΤΤυΝΕ (1пуйтодеп, Ра1к1еу, ИК), гейтированном на лимфоциты. Процент ингибирования митоза рассчитывают для каждой обработки относительно обработки с помощью плацебо (0,5% ДМСО).
(ί) Оценка индуцированного с помощвю НКУ16 цитопатогенного эффекта (СРЕ) в клетках МКС5.
Клетки МКС-5 инфицируют с помощью НКУ16 при множественности заражения (МО1) 1 в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ИМЕМ), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (РСδ) и 1,5 мМ хлорида магния, затем инкубируют в течение 1 ч при 33°С для промотирования адсорбции. Отсасывают супернатанты, затем добавляют свежую среду и инкубируют в течение 4 дней. В необходимых случаях, клетки предварительно инкубируют с соединением или ДМСО в течение 2 ч, и соединения и ДМСО снова добавляют после промывки от вируса. Супернатанты отсасывают и инкубируют с раствором метиленового синего (100 мкл, 2% формальдегида, 10% метанола и 0,175% метиленового синего) в течение 2 ч при комнатной температуре. После промывки в каждую лунку добавляют 1% додецилсульфата натрия (δΌδ) в дистиллированной воде (100 мкл) и планшеты слегка встряхивают в течение 1-2 ч перед регистрацией поглощения при 660 нм. Рассчитывают процент ингибирования для каждой лунки. Значение 1С50 вычисляют из кривой концентрация-ответ, полученной путем последовательных разбавлений тестируемых соединений.
(k) 1п уйго загрузка респираторно-синцитиального вируса (Κδν) в первичные эпиталиальные клетки бронхов.
Нормальные эпиталиальные клетки бронхов человека (ΝΗΒΕΕ), выращенные в 96-луночных планшетах, инфицируют с помощью Κδν А2 ^1таш А2, НРА, δа1^5Ъшу, ИК) при множественности заражения (МО1) 0,001 в среде ЬНС8 МеФа:КРМ1-1640 (50:50), содержащей 15 мМ хлорида магния, и инкубируют в течение 1 ч при 37°С для адсорбции. Клетки затем промывают ΡΒδ (3x200 мкл), добавляют свежую среду (200 мкл) и непрерывно инкубируют в течение 4 дней. В необходимых случаях клетки предварительно инкубируют с соединением или ДМСО в течение 2 ч и затем снова добавляют после промывки от вируса.
Клетки фиксируют раствором 4% формальдегида в ΡΒδ (50 мкл) в течение 20 мин, промывают νΒ (3x200 мкл) (промывочный буфер, представляющий собой ΡΒδ, включающий 0,5% ΒδΑ и 0,05% Т\гееп20) и инкубируют с блокирующим раствором (5% концентрированного молока в ΡΒδ) в течение 1 ч. Клетки затем промывают νΒ (3x200 мкл) и инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре с анти-Κδν (2Р7) Р-фузоген антителом (40 мкл; мышиное моноклональное, 1о1 798760, Сак №№43812, АЪеат) в 5% ΒδΑ в ΡΒδ-ι\γееη. После промывки, клетки инкубируют с раствором НКРконъюгированного вторичного антитела (50 мкл) в 5% ΒδΑ в ΡΒδ-Τ\γееη (1о1 00053170, Сак №. Р0447, Иако), и затем добавляют тетраметилбензидиновый (ТМВ) субстрат (50 мкл; набор субстрата реагента (раск), 1ок 269472, Сак №. ΌΥ999, К&И δу5ΐет5, 1пс.). Эту реакцию останавливают добавлением 2н. Н^О4 (50 мкл), и полученный сигнал регистрируют калориметрически (поглощение: при 450 нм с опорной длиной волны 655 нм) на планшет-ридере ^атюккап® Р1акЬ, ТЬегтоР15Ьег δ№πΟΓ®).
Затем клетки промывают и наносят 2,5% раствор кристаллического фиолетового (50 мкл; 1о! 8 656, Сак №. РЬ7000, Рто-ЬаЪ И1адпо5ЙС5) в течение 30 мин. После промывки νΒ, в каждую лунку добавляют 1% δΌδ в дистиллированной воде (100 мкл), и планшеты слегка встряхивают на установке для встряхивания в течение 1 ч перед считыванием поглощения при 595 нм. Измеренные величины поглощений ОИ450-655 корректируют с учетом числа клеток путем деления значений ОИ450-655 на значения ОИ595. Для каждой лунки вычисляют процент ингибирования, и рассчитывают значение 1С50 из кривой концентрация-ответ, полученной последовательным разведением концентрации соединения.
(l) Влияние тестируемых соединений на жизнеспособность клеток: исследование с МТТ (тетразолиевым красителем).
Дифференцированные клетки И937 предварительно инкубируют с каждым тестируемым соединением (с конечной концентраций 1 пг/мл или 10 мкг/мл в 200 мкл указанной ниже среды) в соответствии с двумя протоколами: с первым, в течение 4 ч в 5% РСδ в среде КРМ1 1640 и со вторым, в 10% РСδ в среде КРМ11640 в течение 24 ч. Супернатант заменяют новой средой (200 мкл) и в каждую лунку добавляют исходный раствор МТТ (10 мкл, 5 мг/мл). После инкубирования в течение 1 ч, среду удаляют, в каждую лунку добавляют ДМСО (200 мкл) и планшеты слегка встряхивают в течение 1 ч перед считыванием поглощения при 550 нм. Процент потери жизнеспособности клетками рассчитывают для каждой лунки относительно обработки с помощью плацебо (0,5% ДМСО). Затем существенное увеличение жизнеспособности клеток в случае обработки лекарственным средством относительно обработки с помощью плацебо табулируют в виде отрицательного процента.
(т) Аккумуляция β-катенина в клетках 6-И937.
Клетки моноцитарной линии человека И937 дифференцируют в клетки типа макрофагов инкубированием с форболмиристатацетатом (РМА) (100 нг/мл) в течение от 48 до 72 ч. Клетки затем инкубируют либо с конечными концентрациями тестируемого соединения, либо с плацебо, в течение 18 ч. Индуциро- 90 025393 вание β-катенина тестируемыми соединениями останавливают путем замены среды на 4% раствор формальдегида. Эндогенную пероксидную активность нейтрализуют путем инкубирования с блокирующим буфером (100 мкл, 0,1% азида натрия, 1% Н2О2 в РВ8 с 0,05% Т\уееп-20) в течение 20 мин. Клетки промывают промывочным буфером (200 мкл; РВ8, содержащий 0,05% Ттаеп-20) и инкубируют с блокирующим раствором (200 мкл; 5% молока в РВ8) в течение 1 ч, повторно промывают промывочным буфером (200 мкл) и затем инкубируют в течение ночи с раствором анти-в-катенин антителом (50 мкл) в 1% В8А/РВ8 (ВО, ОхГогб, иК).
После промывки промывочным буфером (3x200 мкл; РВ8, содержащий 0,05% Ттаеп-20) клетки инкубируют с раствором НКР-конъюгированного вторичного антитела (100 мкл) в 1% В8А/РВ8 (Эако, СатЬпбде, иК) и полученный сигнал регистрируют колориметрически (поглощение: 450 нм с опорной длиной волны 655 нм), используя тетраметилбензидиновый субстрат (50 мкл; К&Э 8у81ет8, АЬшдбоп, иК). Эту реакцию останавливают добавлением 1н. раствора Н28О4 (50 мкл). Клетки затем промывают промывочным буфером и наносят 2% раствор кристаллического фиолетового (50 мкл) в течение 30 мин. После промывания промывочным буфером (3x200 мкл), в каждую лунку добавляют 1% 8Ό8 (100 мкл) и планшеты слегка встряхивают в течение 1 ч перед измерением поглощения при 595 нм (Уагюккап® Р1а§Ь, Ткегто-Р18кег 8теп11Йс).
Измеренные поглощения ОО450-655 при длинах волн 450-655 нм корректируют с учетом числа клеток путем деления поглощений ОО450-655 на поглощение ОО595 при длине волны 595 нм. Рассчитывают процент индуцирования для каждой лунки относительно плацебо и коэффициент индуцирования, нормализованный относительно индуцирования, вызываемого стандартным контролем, включающим эталонное соединение ^-(4-(4-(3-(3-трет-бутил-1-п-толил-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-илокси)пиридин-2ил)-2-метоксиацетамид) (1 мкг/мл), которое принимают за единицу. Сигнал с интенсивностью меньше, чем 0,15 (15%) от сигнала, наблюдаемого для стандартного контроля, обозначается как -уе.
(п) Высвобождение 1Ь-2 и ΙΡΝγ в СЭ3/СЭ28 стимулированных мононуклеарных клетках 1ат1па ргорпа (ЬРМС) пациентов с воспалительным заболеванием кишечника.
Мононуклеарные клетки 1апипа ргорпа (ЬРМС) выделяют и очищают из операционных препаратов воспаленной слизистой оболочки при воспалительном заболевании кишечника или из операционных препаратов нормальной слизистой оболочки следующим образом.
Слизистую оболочку отделяют от более глубоких слоев операционных препаратов скальпелем и разрезают на фрагменты размером 3-4 мм. Эпителий удаляют путем промывания фрагментов ткани три раза 1 мМ ЕЭТА (818та-А1бпск Роо1е, иК) в НВ88 (8щта-А1бпс11) при перемешивании магнитной мешалкой, отбрасывая после каждой промывки супернатант. Затем образец обрабатывают коллагеназой типа 1А (1 мг/мл; 8щта-А1бпс11) в течение 1 ч при перемешивании при 37°С. Полученную суспензию клеток затем фильтруют через сито с размером отверстий 100 мкм, два раза промывают, ресуспендируют в среде КРМ1-1640 (81дта-А1бпсЬ), содержащей 10% фетальной телячьей сыворотки, 100 ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина, и используют для культивирования клеток.
Свежевыделенные ЬРМС (2x10я клеток/лунка) стимулируют с помощью 1 мкг/мл а-СЭ3/а-СЭ28 в течение 48 ч в присутствии либо ДМСО в качестве контроля, либо соответствующих концентраций соединения. Через 48 ч супернатант удаляют и анализируют на присутствие ТОТа и ΙΡΝγ методом твердофазного иммуноферментного анализа (ЕЫ8А) фирмы К&Э 8у§1ет.
Рассчитывают процент ингибирования высвобождения цитокинов тестируемыми соединениями относительно высвобождения цитокинов, определенного для ДМСО, используемого в качестве контроля (100%).
(о) Ингибирование высвобождения цитокинов из миофибробластов, выделенных у пациентов с воспалительным заболеванием кишечника.
Миофибробласты из воспаленной слизистой оболочки пациентов с воспалительным заболеванием кишечника выделяют следующим образом.
Слизистую оболочку иссекают и отслаивают, и образцы слизистой оболочки размером 1 мм культивируют при 37°С в увлажненном СО2 инкубаторе в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (ЭМЕМ, 81дта-А1бпсЬ), дополненной 20% РВ8, 1% неосновных аминокислот (1пу11годеп, Ра181еу, иК), 100 ед/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 50 мкг/мл гентамицина и 1 мкг/мл амфотерицина (8щта-А1бпс11). Образовавшиеся колонии миофибробластов высевают в колбах для культур площадью 25 см2 и культивируют в среде ЭМЕМ, дополненной 20% РВ8 и антибиотиками, в течение по меньшей мере 4 пассажей с целью получения достаточного количества для использования в экспериментах по стимуляции.
Субконфлюэнтные монослои миофибробластов затем высевают в 12-луночных планшетах при плотности 3x105 клеток на лунку, выдерживают при минимальном питании в бессывороточной среде в течение 24 ч при 37°С и 5% СО2, затем культивируют в течение 24 ч в присутствии либо ДМСО в качестве контроля, либо соответствующих концентраций соединения. Через 24 ч супернатант удаляют и анализируют на присутствие 1Ь-8 и 1Ь-6 методом твердофазного иммуноферментного анализа (ЕЫ8А) фирмы К&Э 8у§1ет. Рассчитывают процент ингибирования высвобождения цитокинов тестируемыми со- 91 025393 единениями относительно высвобождения цитокинов, определенного для ДМСО, используемого в качестве контроля (100%).
(р) Дегрануляция человеческих нейтрофилов.
Нейтрофилы выделяют из периферической крови человека следующим образом.
Кровь собирают путем венопункции и антикоагулируют добавлением 1:1 смеси ЕЭТАхтерильный забуференный фосфатом физиологический раствор (РВ8, не содержащий Са+/Мд+). Добавляют декстран (3% мас./об.) (1 часть раствора декстрана к 4 частям крови), и кровь выдерживают в течение приблизительно 20 мин при комнатной температуре. Супернатант осторожно расслаивают на градиенте плотности (Ьутрйоргер, Ах15-8Ше1а НеаННсаге) и центрифугируют (15 мин, 2000 об/мин, без торможения). Супернатант отсасывают, и осадок клеток ресуспендируют в стерильном физиологическом растворе (0,2%) в течение не более чем 60 с (для лизирования загрязненных эритроцитов). Затем добавляют в 10 раз больший объем РВ8, и клетки центрифугируют (5 мин, 1200 об/мин). Клетки ресуспендируют в НВ88+ (буферированном солевом растворе Хэнкса (без фенола красного), содержащем цитохалазин В (5 мкг/мл) и 1 мМ СаС12) для достижения 5x 106 клеток/мл.
В каждую лунку 96-луночного планшета с У-образным дном добавляют 5x104 клеток и инкубируют (30 мин, 37°С) с соответствующей концентрацией тестируемого соединения (0,3-1000 нг/мл) или плацебо (ДМСО, конечная концентрация 0,5%). Дегрануляцию стимулируют добавлением формилметионинлейцин-фенилаланина (£МЬР) (с конечной концентрацией 1 мкМ) и после дополнительного инкубирования (30 мин, 37°С) клетки удаляют центрифугированием (5 мин, 1500 об/мин), супернатанты переносят в 96-луночный планшет с плоским дном. Добавляют равный объем тетраметилбензидина (ТМВ) и через 10 мин реакцию прерывают добавлением равного объема серной кислоты (0,5 М), считывают поглощение при 450 нм (вычитают фон при 655 нм). Из полученной кривой концентрация-ответ определяют концентрацию при 50% ингибировании (1С50).
(ц) Исследование клеточной цитотоксичности 5x104 клеток ТК6 (лимфобластной Т-клеточной линии) добавляют в соответствующее число лунок 96-луночного планшета в 195 мкл среды (среда КРМ1, дополненная 10% фетальной бычьей сывороткой). В лунки добавляют 5 мкл ДМСО в качестве контроля (конечная концентрация 0,5% об./об.) или тестируемого соединения (конечная концентрация либо 5, либо 1 мкг/мл) и инкубируют при 37°С и 5% СО2. Через 24 ч планшет центрифугируют при 1300 об/мин в течение 3 мин и супернатант отбрасывают. Затем клетки ресуспендируют в 7,5 мкг/мл пропидий йодида (Р1) в РВ8. Через 15 мин клетки анализируют методом проточной цитометрии (ΒΌ ассип). Процент жизнеспособности рассчитывают как процент клеток, которые являются Р1 негативными в лунках с тестируемыми соединениями, нормализованный по отношению к ДМСО в качестве контроля.
Ιη νίνο скрининг: фармакодинамика и противовоспалительная активность.
(A) Индуцированная липополисахаридом (ЬР8) аккумуляция нейтрофилов у мышей.
Не подвергавшимся голоданию мышам линии Ва1Ь/с вводят интратрахеально либо плацебо, либо тестируемое соединение в указанные моменты времени (в диапазоне 2-8 ч) и затем стимулируют ответную воспалительную реакцию путем использования ЬР8. В момент времени Т=0 мышей помещают в специальную камеру и подвергают воздействию ЬР8 (7,0 мл, раствор 0,5 мг/мл в РВ8) в течение 30 мин. Через 8 ч животных анестезируют, их трахеи канюлируют и извлекают жидкость бронхоальвеолярного лаважа (ВАЬР) путем инфузии и затем вывода из легких 1,0 мл РВ8 через трахеальный катетер. В образцах ВАЬР определяют общую формулу крови и дифференциальные лейкоцитарные формулы в счетной камере Нейбауэра. Цитоспиновые мазки образцов ВАЬР готовят центрифугированием при 200 об/мин в течение 5 мин при комнатной температуре и окрашивают с использованием системы для окрашивания ЭгйРшк (Эаае ВеНгшд). Клетки подсчитывают методом микроскопии с объективом масляной иммерсии. Данные по числу нейтрофилов в ВАЬР приведены в виде среднего значения±стандартная ошибка среднего (8ЕМ). Процент ингибирования аккумуляции нейтрофилов рассчитывают для каждой обработки относительно обработки с помощью плацебо.
(B) Индуцированный декстраном сульфата натрия (Ό88) колит у мышей.
Не подвергавшимся голоданию самцам мышей линии ВЭР1 в возрасте 10-12 недель вводят перорально через зонд два раза в сутки либо плацебо, либо соединение для сравнения 5-аминосалициловую кислоту (5-А8А), либо тестируемое соединение за один день (день -1) до стимуляции ответной воспалительной реакции путем обработки с помощью Ό88. В день 0 исследования, вводят с питьевой водой Ό88 (5% мас./об.) и затем вводят два раза в сутки плацебо (5 мл/кг), соединение для сравнения (100 мг/кг) или тестируемое соединение (5 мг/кг) в течение 7 дней. Питьевую воду с Ό88 пополняют каждые 3 дня. В процессе исследования животных взвешивают каждый день, проводят наблюдения за их экскрементами и регистрируют в виде показателя в баллах, отражающего консистентность экскрементов. В момент умерщвление подопытного животного на день +6, удаляют толстую кишку и регистрируют ее длину и массу. Срезы толстой кишки берут либо для миелопероксидазного анализа с целью определения инфильтрации нейтрофилов, либо для гистопатологической оценки в баллах с целью определения тяжести заболевания.
- 92 025393 (С) Индуцированный тринитробензолсульфоновой кислотой 0Ν88) колит у мышей.
Не подвергавшимся голоданию самцам мышей линии ВЭР1 в возрасте 10-12 недель вводят перорально через зонд два раза в сутки либо плацебо (5 мл/кг), либо соединение для сравнения (будезонид 2,5 мг/кг), либо тестируемое соединение (1,5 или 50 мг/кг) за один день (день -1) до стимуляции ответной воспалительной реакции путем обработки 2,4,6-тринитрибензолсульфоновой кислотой (ТNВ8) (15 мг/мл в смеси 50% этанол/50% физиологический раствор). В день 0 исследования, вводят внутрь толстой кишки через пластмассовый катетер ТNВ8 (200 мкл) и затем два раза в сутки вводят плацебо, соединение для сравнения или тестируемое соединение в течение от 2 до 4 дней. В процессе исследования, животных взвешивают каждый день и проводят наблюдения за их экскрементами и регистрируют в виде показателя в баллах, отражающего консистентность экскрементов. В момент умерщвление подопытного животного на день 2 (или день 4), удаляют толстую кишку и регистрируют ее длину и массу. Срезы толстой кишки берут либо для миелопероксидазного анализа с целью определения инфильтрации нейтрофилов, либо для гистопатологической оценки в баллах с целью определения тяжести заболевания.
(Ό) Адоптивный перенос у мышей.
На день 0 исследования, умерщвляют самок мышей линии Ва1Ь/С и извлекают из них селезенки для выделения клеток СО45КВ1 д11 (используя протокол для выделения клеток тяжелой формы комбинированного иммунодефицита при воспалительном заболевании кишечника). Затем приблизительно 4x105 клеток СЭ4 5КВЫдЬ/мл вводят интраперитонеально (100 мкл/мышь) самкам животных с тяжелой формы комбинированного иммунодефицита. На день 14 исследования 14, мышей взвешивают и рандомизируют, исходя из массы тела, на подвергаемые обработке группы. На день 21, через пероральный зонд вводят два раза в сутки соединения в среде арахисового масла при указанных ниже уровнях доз и объеме дозы 5 мл/кг. Обработку проводят непрерывно вплоть до дня 42 исследования, и в этот день животных умерщвляют через 4 ч после введения препаратов. Регистрируют длину и массу толстой кишки и используют в качестве второстепенного критерия оценки при исследовании в качестве показателя отечности толстой кишки. Толстую кишку затем разделяют на шесть поперечных срезов, четыре из которых используют для гистопатологической оценки в баллах (основной оценки), и два среза гомогенизируют для анализа на цитокины. Данные приводят в виде % ингибирования интервала индуцирования между животными, которых не использовали в эксперименте, и животными, которым вводили плацебо, где более высокое ингибирование подразумевает близость к фенотипу не заболевшего, не использовавшегося в эксперименте животного.
Результаты ίπ уйго и ίπ νί\Ό скрининга.
Исследования, проведенные ЬеайНип!ег Эйсоуег 8егуюек (ЭйсоуеКх Согрогайоп, Ргетоп!, СА) с использованием технологии КШОМЕксап™, показали, что соединение примера 77 никак не влияло на связывание киназ В-КаГ и В-КаГ 0600е) с их стандартными лигандами.
1п νίΐго свойства примеров соединений настоящего изобретения, определенные в соответствии с описанными выше протоколами, представлены ниже (табл. 4а-с). Приводится сравнение с близким по структуре соединением сравнения, которое представляет собой: ^(4-(4-(3-(3-трет-бутил-1-п-толил-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-илокси)пиридин-2-ил)-2-метоксиацетамид, ранее описанный в качестве сильнодействующего противовоспалительного средства с противовирусной активностью (1!о, К. е! а1., АО 2010/112936, РСТ/ОВ2010/050575, 7 Ос! 2010 и 1!о, К. е! а1., АО 2010/067130, РСТ/ОВ2009/051702, 17 Лт 2010). Соединения настоящего изобретения в пределах исследований киназных ферментов демонстрируют ингибирующие свойства, очень похожие на свойства соединения сравнения, но с явно выраженным отличием в отношении ингибирования фермента О8К3а, которое является значительно более слабым, чем ингибирование, проявляемое соединением сравнения (табл. 4а).
- 93 025393
Таблица 4а1
Ингибирующие свойства соединений примеров в отношении фермента р38 МАРК (метод 1), с-Згс, Зук и ОЗК3а (метод 1)
Тестируемое Значения ХСбо для ингибирования фермента (нМ)
соединение примера № р38 МАРКа. с-Згс Зук СЗКЗа
Соединение сравнения 12 5 42 45
1 40 5 10 2860
2 27 5 250 1260
3 7 1 11 286
4 26 49 124 >14300
5 1 2 7 1470
6 1 2 5 634
7 34 13 50 >12600
8 2 <1 3 7950
9 49 2 41 8030
10 б 2 4 >12900
11 25 8 75 >14000
12 б 5 16 509
13 24 2 16 672
14 <1 4 >1300 355
15 7 4 16 3180
16 34 9 1390 1400
17 54 3 35 309
18 12 7 >1440 295
19 2 2 4 1240
20 5 2 15 317
21 10 5 14 356
22 <1 <1 292 930
23 <1 <1 203 2990
24 11 1 14 207
25 13 4 >1330 285
26 12 б 14 390
27 17 4 39 311
28 <1 <1 54 >14000
29 <1 <1 147 3210
30 3 1 103 >13200
31 8 3 51 9630
32 1 <2 152 >14600
33 4 3 98 >14300
34 <1 2 85 >14200
35 <1 <1 30 >14000
36 13 8 169 >13200
37 44 27 149 >13000
38 12 9 54 >13000
39 7 8 130 >14600
40 52 3 9 1340
41 50 10 15 1200
42 167 20 67 >1390
- 94 025393 _4_2_7_197 _<1_9_17_3950 £5_4_4_>1320_1630 _47_10_5_12_2850 _48_18_5_78_>12800 _2_1_57_>13500 _2_<1_32_>13300 _15_<1_649_>13000 _13_3_6_247 _2_<0._3_>13000 _12_2_5_217 _9_3_4_281 _<1_5_12_>13000 _5_<1_5_283 _<1_<1_296_8470 _2_<1_12_1190 ^0_16_13_60_>13200 _61_20_9_32_6940 _22_7_13_995 _45_37_865_13000 _8_2_13_122 _23_8_61_>14200 _24_6_234_>14300 £7_24_4_40_452 _68_<1_<1_2_111 _2_1_8_282
5 2 22 525
2 <1 547 5770
Т2._<1_4_202_>13000
86_10_8_20_>12989
91_9, 6_<1,3_131_3516
Таблица 4а2
Ингибирующие свойства соединений примеров в отношении фермента р38 МАРК (метод 2), с-8гс, 8ук и С8К3а (метод 2)
Тестируемое Значения ТС50 для ингибирования фермента (нМ)
соединение примера № рЗб МАРКа с-5гс Зук сзкза
1 50 27 66 6969
7 116 27 34 12064
б 44 41 224 13230
9 174 21 43 6513
11 104 15 126 9947
Зб ΝΤ ΝΤ ΝΤ 13230
46 41 14 22 11322
49 ΝΤ ЫТ ΝΤ 13480
50 ΝΤ ЫТ ЫТ 13265
53 37 8 ΝΤ 7264
73 47 ЫТ ΝΤ 402
74 1211 ЫТ ЫТ 12110
75 49 11 28 1374
76 233 45 34 1777
77 22 12 18 5946
78 ΝΤ 8 23 2815
79 ΝΤ ЫТ ыт 756
80 437 19 25 12612
81 138 21 61 10356
82 ЫТ ЫТ ЫТ 12151
83 261 26 59 11675
84 105 15 33 13797
85 158 33 92 7950
87 408 22 27 5837
88 ΝΤ ЫТ ЫТ 172
89 ΝΤ ЫТ ыт 15255
90 ΝΤ ЫТ ыт 154
Приведенные в табл. 4а2 данные были получены в исследованиях, которые проводили в соответствии с такими же методиками, которые использовали для получения данных, приведенных в табл. 4а1 (за исключением данных по ингибированию для р38 МАРК и С8К3а, каждые из которых получали на основе вариантов метода 2 исследования, вместо вариантов метода 1 исследования, использовавшихся для получения данных, приведенных в табл. 4а1); и в другой лаборатории.
Свойства по связыванию киназы соединения примера 8 и соединения сравнения в отношении ВКАР р38 МАРК, НСК, с8гс, 8ук, и С8К3а исследовались при 500 нМ. Соединение примера 8 демонстрировало фенотип, аналогичный фенотипу соединения сравнения, при котором обнаруживалось полное ингибирование связывания в отношении киназ р38 МАРК, НСК, с8гс и 8ук. Однако существенное различие заключалось в том, что соединение примера 8 характеризовалось значительно меньшим ингибированием связывания с В-Ка£ и С8К3а, чем в случае соединения сравнения (табл. 4Ь).
- 95 025393
Таблица 4Ь
Сравнения свойств соединения примера 8 с соединением сравнения по связыванию фермента
Тестируемое соединение примера № Соединение сравнение
Соединения настоящего изобретения при проведении клеточных исследований демонстрируют такие же свойства, как и у соединения сравнения, обнаруживая противовоспалительное действие в отношении опосредованного эндотоксином высвобождения как ΊΝϊα, так и ^-8, а также в отношении мимика вируса РНКс: экспрессии ТСАМ-1, индуцированной Ро1у ГС (табл. 4с).
Таблица 4с1
Ингибирование соединениями примеров индуцированного липолисахаридом (ЬРЗ) высвобождения ТNРα и Р-8 (приведенное выше исследование (а)) и экспрессии ТСАМ-1, индуцированной Ро1у Т:С
Индуцированное ЬРЗ Индуцированная
Тестируемо е высвобождение цитокинов в Ро1у 1:С
соединение клетках ά-υ937 (нМ) экспрессия 1САМ1
примера № ΤΝΡα КЕСбо 1Ь-8 1С5О в ВЕА32Б (нМ) 1С50
Соединение сравнения 0, 13 1, 3 2, 1
1 0/ 7 1, θ 3, 4
2 0, 8 4, 5 1, 0
3 0, 6 1, 6 0, 7
4 0, 7 6, 6 4, 6
5 0, 2 1, 3 0, 2
6 0, 2 1, 9 1, 2
7 0, 2 1, 5 1, 5
б 0, 8 0, 3 1, 1
9 0, 9 1, 4 6, 9
10 1, з 1χ θ 7, 3
11 0, 2 1, 3 1, 2
12 0, 5 1, о 2, 5
13 0, 4 0, 3 1, 7
14 1, 2 5, 0 3, 0
15 0/ 4 1, 6 26,2
16 1, 3 1, Ί 1, 9
17 1, 5 1, θ 2, 6
18 1, 5 1/ 8 2, 3
19 0, 3 0, 2 2, 1
20 1, 4 2, 0 2, 0
- 96 025393
21 1/ з 1/ 9 0, 8
22 4, 5 1, з 4, 1
23 5, 2 2, 3 27, 7
24 1, 4 0, 3 1, о
25 0, б 1, 5 1, 9
26 0, 5 2, 3 11/1
27 1, 4 4, 1 11, 6
28 2, 2 32,4 140
29 3, 8 13,7 15, 1
30 2, 1 9, 0 117
31 2, 8 7, 1 12, 0
32 3, 1 17,1 86, 7
33 1, 5 4, 2 143
34 14,2 73,5 79, 9
35 27,8 3, 2 140
36 4, 7 46, 0 82, 3
37 3, 7 24,1 19, 6
38 20,2 60, 6 35, 7
39 3, 6 15, 7 146
40 0, 2 2, 2 0, 7
41 0, 4 0, 4 2, 0
42 1, 5 2, 0 2, 3
43 0, 2 0, 6 0, 4
44 0, 2 0, 3 1, 9
45 1, 6 о, 7 135
46 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
47 0, 8 1, 4 3, б
48 3, 5 20,6 32, 3
49 9, 2 17,2 33, 0
50 5, 2 8, 0 16, 6
51 1/ 0 0, б 3, б
52 0, 3 1, 5 5, 0
53 0, 3 1, 1 4, 0
54 0, 2 0, 8 2, 0
55 3, 3 2, 1 5, 8
56 1/ 4 1, 7 85, 4
57 0, б 1, 5 1/ 9
58 11,7 46, 3 2, 1
59 2, 0 б, 8 39, 7
60 1, 1 3, 9 132
61 1, 1 2, 0 129
62 1, 4 1, 8 1/ о
63 0/ 7 1, 4 10, 1
64 0, 4 0, 8 1/ о
65 1/ 7 0, б 8, 3
66 1, б 3, 4 2, 2
67 0, 1 1, 0 140
68 0, 2 0, 5 3, 9
69 0, 2 0, 3 7, 5
70 0, б 1, 5 8, 9
71 2, 7 1, 9 7, 3
72 1, 2 2, 1 2, 6
86 - 1/ 5 -
Биологические свойства соединений настоящего изобретения аналогичны свойствам, проявляемым соединением сравнения в клеточных системах, при исследовании воздействия на репликацию респираторного вируса, определяемого для индуцированного риновирусом человека (НКУ) цитопатогенного эффекта (СРЕ) (табл. 4й).
- 97 025393
Таблица 4с2
Ингибирование высвобождения цитокинов в стимулированных клетках (приведенные выше исследования (а)-(й))
Тестируемое соединение ' примере № * Значения 1С&о для ингибирования высвобождения цитокинов (нМ)
клетки 60937 клетки РВМС клетки ΗΤ29
11,-8 ΤΝΓα 11,-8 11,-2 ΙΕΝγ ΙΙ.-8
1 2, 8 2, 1 2, 4 84,3 3, 0 10, 2
7 ΝΤ 2, 7 2, 4 260, 0 ΝΤ ΝΤ
8 1, 4 1/ 1 1/ 0 35, 3 ΝΤ 4, 1
9 ΝΤ ΝΤ 2,3 131, 8 7, 3 ΝΤ
11 ΝΤ 0, 3 3, 0 27,5 ΝΤ ΝΤ
36 ΝΤ ΝΤ 30, 4 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
46 2, 4 1, ι 1,1 59, 5 2, Ί 5, 4
49 ΝΤ ΝΤ 19, 0 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
50 ΝΤ ΝΤ 7,3 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
53 ΝΤ 0, 7 з, 1 44,1 ΝΤ ΝΤ
73 ΝΤ ΝΤ 0, 5 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
74 ΝΤ ΝΤ 4, 1 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
75 0, 3 0, 4 1, 0 76, 9 3, 0 1,3
76 ΝΤ ΝΤ 2, 1 187, 5 1, 8 3,0
77 0, 9 0, 4 1,1 42,8 0, 8 2,0
78 ΝΤ ΝΤ 0, 9 27,3 2, 4 ΝΤ
79 ΝΤ ΝΤ 1,1 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
80 0, 5 0, 3 1,5 2, 3 1, 8 6,2
81 1, 5 1, 4 3, 2 112, 0 1, 8 7,4
82 ΝΤ ΝΤ 7, 1 37,4 3, 9 ΝΤ
83 ΝΤ ΝΤ 3, 8 124, 1 1, 8 5, 3
84 ΝΤ ΝΤ 1, б 16, 0 2, 2 ΝΤ
85 ΝΤ ΝΤ 2, 8 27,3 3, 1 ΝΤ
87 ΝΤ ΝΤ 9, 4 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
88 ΝΤ ΝΤ 13, 1 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
89 ΝΤ ΝΤ 14,6 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
90 ΝΤ ΝΤ 7, 8 ΝΤ ΝΤ ΝΤ
Данные в табл. 4с2, обусловленные исследованием (а), были получены при исследованиях, которые проводили в соответствии с такими же методиками, которые использовали для получения данных при исследовании (а), приведенных в табл. 4с1, но в другой лаборатории.
Таблица 4й
Воздействие соединений примеров на размножение вируса: цитопатогенный эффект (СРЕ), индуцированный вирусом НРУ-16
Цитопатогенный эффект Тестируемое (СРЕ), индуцированный соединение риновирусом человека примера № (ΗΚΥ) в клетках МКС5
Значения Ю50 (нМ)
Соединение сравнения 4,7
1 2,9
8 5, 4
9 1,7
23 22,3
30 0, 43
40 2,9
42 2,2
50 6, 8
51 1,9
53 2,0
Однако преимуществом соединений настоящего изобретения является, как правило, значительно меньшая активность, выявленная при исследованиях их влияния на выживаемость клеток и деление клеток (митоз), что указывает на то, что они, вероятно, обладают улучшенным профилем побочного действия и превосходящим терапевтическим индексом относительно соединения сравнения (табл. 4е).
Таблица 4е
Влияние соединений примеров на жизнеспособность клеток и деление клеток Тестируемое Жизнеспособность клеток % Ингибирование соединение <1-11937 в указанный митоза в клетках РВМС примера № момент времени1 при 5 мкг/мп ч 24 ч
Соединение сравнение
Ϊ
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе +уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
-уе
37, 8
39, 3 46, 5 ΝΤ ΝΤ
28, 3 ΝΤ 20, 6 15, 3
- 98 025393
9 -νθ -νθ 20, 7
10 -νθ -νβ ΝΤ
11 -νθ -νθ 50, 7
12 -νθ -νθ 27, 8
13 -νθ -νθ ΝΤ
14 -νθ +νθ ΝΤ
15 -νθ -νθ ΝΤ
16 -νθ -νθ ΝΤ
17 -νθ -νθ ΝΤ
18 -νθ -νθ ΝΤ
19 -νθ -νθ 25, 3
20 -νθ -νθ ΝΤ
21 -νθ -νθ ΝΤ
22 -νθ -νθ ΝΤ
23 -νθ -νθ 35, 6
24 -νθ -νθ ΝΤ
25 -νθ -νθ ΝΤ
26 -νθ -νθ ΝΤ
27 -νθ -νθ ΝΤ
28 -νθ -νθ ΝΤ
29 -νθ -νθ ΝΤ
30 -νθ -νθ ΝΤ
31 -νθ -νθ ΝΤ
32 -νθ -νθ ΝΤ
33 -νθ -νθ ΝΤ
34 + νθ -νθ ΝΤ
35 -νθ -νθ ΝΤ
36 -νθ -νθ ΝΤ
37 -νθ -νθ ΝΤ
38 -νθ -νθ ΝΤ
39 -νθ -νθ ΝΤ
40 -νθ -νθ ΝΤ
41 -νθ -νθ ΝΤ
42 -νθ -νθ 12, 9
43 -νθ -νθ ΝΤ
44 -νθ -νθ 37, 2
45 -νθ -νθ ΝΤ
46 -νθ -νθ -6, Ί
47 -νθ -νθ ΝΤ
48 -νθ -νθ ΝΤ
49 -νθ -νθ ΝΤ
50 -νθ -νθ ΝΤ
51 -νθ -νθ 20, 0
52 -νθ -νθ ΝΤ
53 -νθ -νθ 39, 4
54 -νθ -νθ ΝΤ
55 -νθ -νθ ΝΤ
56 -νθ -νθ ΝΤ
57 -νθ -νθ ΝΤ
58 -νθ -νθ ΝΤ
59 -νθ -νθ ΝΤ
60 -νθ -νθ ΝΤ
61 -νθ -νθ ΝΤ
62 -νθ + νθ ΝΤ
63 -νθ -νθ ΝΤ
64 -νθ -νθ ΝΤ
65 -νθ -νθ 36, 7
66 -νθ -νθ ΝΤ
67 -νθ -νθ ΝΤ
68 -νθ -νθ ΝΤ
69 -νθ -νθ ΝΤ
70 -νθ -νθ ΝΤ
71 -νθ -νθ ΝΤ
72 -νθ -νθ ΝΤ
75 ΝΤ ΝΤ 2, 8
76 ΝΤ ΝΤ 23, 0
77 ΝΤ ΝΤ -0, 3
78 ΝΤ ΝΤ 2, 1
80 ΝΤ ΝΤ 10, 4
81 ΝΤ ΝΤ -2, 6
82 ΝΤ ΝΤ -6, 3
83 ΝΤ ΝΤ 20, 9
84 ΝΤ ΝΤ 0, 5
85 ΝΤ ΝΤ 6, 6
86 -νθ -νθ ΝΤ
1 Скрининг жизнеспособности клеток (исследование с МТТ (тетразолиевым красителем)): -νο и +νе указывают, что значение является более низким или более высоким соответственно пороговой величины отсутствия значимого эффекта, определяемой как 30% ингибирования при 1 мкг/мл в указанный момент времени.
Соединение примера 8, соединение примера 9 и соединение примера 86 изобретения были выбраны для дополнительного исследования свойств ίη νίνο. Были оценены свойства этих соединений увеличи- 99 025393 вать концентрации β-катенина в клетках, и было обнаружено, что они являются отрицательными, то есть индуцирующий эффект соединений при исследуемой концентрации 10 мкг/мл составлял менее 15% от эффекта, продуцируемого соединением сравнения при 1 мкг/мл. Результаты приведенного выше исследования (т) для дополнительных соединений примеров приведены в табл. 4£ ниже.
Таблица 4£
Влияние соединений примеров на индуцирование β-катенина (где означает, что испытание не проводили)
Тестируемое соединение % Индуцирования β-катенина Концентрация тестируемого соединения
1 мкг/мл 5 мкг/мл 10 мкг/мл
Соединение сравнения 208 ΝΤ ΝΤ
1 -7 -6 ΝΤ
11 -1 1 1
73 17 -7 7
75 -14 -10 ΝΤ
76 -3 -1 ΝΤ
77 1 0 -8
78 9 0 ΝΤ
80 14 8 ΝΤ
81 3 -3 ΝΤ
82 0 9 ΝΤ
83 -3 -6 ΝΤ
84 3 3 5
85 7 3 6
Было обнаружено, что обработка мышей тестируемыми соединениями продуцирует значительное ингибирующее воздействие на индуцируемую липополисахаридом (ЬРЗ) аккумуляцию нейтрофилов в легких. Так как соединения вводили только один раз, за 8 ч до стимуляции эндотоксином, эти эксперименты выявили, что лекарственные вещества обладали длительным периодом действия в этой модели воспаления (табл. 5а).
Таблица 5а
Влияние обработки выбранными соединениями примеров на индуцируемую липополисахаридом (ЬРЗ) нейтрофилию дыхательных путей у мышей
Тестируемое соединение
Пример №
Соединение сравнение
Число нейтрофилов (х105/мл, ±ЗЕМ) в бронхоальвеолярном лаваже (ВАЬ) для лекарственных веществ, дозируемых за 8 часов до стимуляции ЬРЗ (% ингибирования)1
Плацебо в качестве Тестируемое вещество при контроля_0,2 мг/мл
14,0+2,3 5,6+0,86 (60) _14,1+2,3_6,1±1,2 (57)_
16, 4+2, 3_8,0±1,6 (51)
N=8 животных в группе, среднее значение±стандартная ошибка среднего значения (8ЕМ).
Кроме того, было обнаружено, что обработка мышей соединением примера 8 продуцирует дозозависимое ингибирование аккумуляции нейтрофилов в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (ВАЬР) после стимуляции эндотоксином, и ингибирующие эффекты были также обнаружены даже тогда, когда обработку проводили за 12 ч до воздействия эндотоксина (табл. 5Ь).
Таблица 5Ь
Влияние обработки соединением примера 8 на индуцируемую липополисахаридом (ЬРЗ) нейтрофилию дыхательных путей у мышей
Число нейтрофилов (х105/мл) в
Соединение 8 бронхоальвеолярном лаваже (ВАЬ) в указанные (мг/мл) моменты времени до дозирования (% _ингибирования)_ часа 12 часов 18 часов
Плацебо 16,1+2,4 - 0,05_9,6+2,0 (40)_;_;_
0,2_6,6+1,4 (59) 9,1+1,7 (43) 14,6+2,5 (9) _1,0_3,7+0,61 (77)_2_Ζ_
N=8 в группе, среднее значение±стандартная ошибка среднего значения (ЗЕМ).
Было изучено влияние обработки соединением примера 8 на аккумуляцию макрофагов и нейтрофилов в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (ВАЬР) у мышей на модели сигаретного дыма (табл. 5). Используемая в этом исследовании модель сигаретного дыма представляет собой неконтролируемую кортикостероидами систему, как указано в публикации МеакЬег1а З. е1 а1., ί. РЬагтасо1. Ехр. ТЬег., 2008, 324 (3): 921-9, и было подтверждено, что флутиказона пропионат не ингибировал аккумуляцию в дыха- 100 025393 тельных путях ни нейтрофилов, ни макрофагов, при дозе 1,75 мкг/мышь (35 мкл, два раза в сутки, интраназально), при той же дозе, которая продуцировала >80% ингибирования аккумуляцию нейтрофилов, индуцированную липополисахаридрм (ЬР8).
Таблица 5
Влияние обработки соединением примера 8 на индуцированную табачным дымом нейтрофилию дыхательных путей у мышей
Обработка соединением 8 (мкг/мл) - Число клеток в ВАЬх104/мл ингибирование)
Макрофаги нейтрофилы
Плацебо+воздух 3,3+0,27 1,8+0,10
Плацебо+табачный дым 18,4+0,18 18,2+0, 49
1,6 14,0+0,50 (29) 13,6+0,51 (28)
б 10,9+0,42 (50) 10, 2+0,33 (49)
40 8,3+0,38 (67) 8,2+0,58 (61)
200 5,9+0,31 (83) 5, 6+0, 39 (77)
Данные по числу клеток приведены как среднее значение± стандартная ошибка среднего значения (8ЕМ), N=6.
Как показано ниже в табл. 6а и 6Ь, был также проведен скрининг соединений примеров 46 и 77 в описанных выше исследованиях биоптатов человека (Ь) и ш У1уо исследованиях (С), проводимых в течение 2 дней. Гистопатологический анализ показал, что соединения примеров 46 и 77, оба, проявляют значительную активность на ш У1уо модели воспаления толстой кишки. В частности, соединения, которые вводили перорально в дозе 5 мг/кг, демонстрировали заметное улучшение в состоянии язвы и в регенерации эпителия по сравнению с плацебо, используемым в качестве контроля. Кроме того, соединения примеров 46 и 77 продуцировали заметное уменьшение клеток воспалительного инфильтрата в ретикулярной зоне и зоне основы слизистой оболочки. Соединения примеров 46 и 77 также демонстрировали заметное противовоспалительное действие в биоптатах пациентов с язвенным колитом (ИС). Было показано, что, в отличие от здоровых добровольцев, биоптаты слизистой оболочки кишечника пациентов с язвенным колитом самопроизвольно высвобождают провоспалительные цитокины ш уйго (Опкеп, кЕ. е! а1., 1. СПп 1ттипо1, 2008, 126(3): 345-352). Добавление соединений примеров 46 и 77 в биоптаты ш νίΙΐΌ заметно снижало высвобождение 1Ь-1Ь, 1Ь-6 и 1Ь-8.
Таблица 6а
Результаты исследований индуцированного 2,4,6-тринитробензолсульфроновой кислотой ^ΝΒ8) колита у мышей
3ксперимент № Подвергаемая обработке группа ΤΝΒ5
п Состояние язвы ЬР воспаление
1 Не болевшие 6 0,2+0, 2 0, 3+0,2
1 ТЫВЗ+Плацебо 12 4,0+0, 5 3, 9+0,3
1 ТЫВЗ+будезонид (2,5 мг/кг) 11 2,9±0,6 2,5+0,4
1 ТЫВЗ+Пример 46 (1 мг/кг) 12 3,4+0,6 3, 1+0,6
1 ТЫВЗ+Пример 46 (5 мг/кг) 12 2,4+0, 6 2,0+0,5
2 Не болевшие 6 0,0+0, 0 0, 3+0,2
2 ΤΝΒΞ+Плацебо 24 3,6+0,3 3, 9+0,3
2 ТЫВЗ+Пример 77 (1 мг/кг) 12 3,1+0,5 2,4+0,3
2 ТЫВЗ+Пример 77 (5 мг/кг) 11 2,4+0, 5 2,1+0,3
Таблица 6Ь
Результаты исследований биоптатов слизистой оболочки кишечника из воспаленных областей толстой кишки различных пациентов, страдающих язвенным колитом (формой воспалительного заболевания кишечника)
- 101 025393
Как показано ниже в табл. 7, соединение примера 77 также было подвергнуто скринингу в описанном выше ш У1уо исследовании (Ό) (адоптивного переноса). Анализ отношения массы толстой кишки к ее длине и относительного ингибирования высвобождения цитокинов показал, что соединение примера 77 также проявляет значительную активность на этой дополнительной ш У1уо модели воспаления толстой кишки.
Таблица 7 реноса на мышах
Результаты исследования на модели адоптивного пе
Пример 7 7 (5 мг/кг) % Ингибирование исходя из отношения массы толстой кишки к ее длине % Ингибирование высвобождения 1Ь-8 % Ингибирование исходя из общей гистопатологической оценки в баллах
68/
ΝΤ
Р<0,05 вариационный анализ АNОVА по отношению к плацебо;
Ν® не проводилась.
Результаты дополнительных исследований.
Определение фармакокинетических параметров.
(ί) Исследования на мышах.
Исследования по изучению фармакокинетики и распределению в тканях всей толстой кишки соединения примера 77 у самцов мышей линии С57ВЬ/6 после введения им пероральной разовой дозы проводились фирмой δ;·ιί ЫГе δ^ιτ^κ (Нт)е№аа1, Рипе, 1па1а).
Группе из двадцати одного самца мышей вводили соединение примера 77 при дозе 5 мг/кг в виде суспензии (в арахисовом масле). Образцы крови (приблизительно 60 мкл) отбирали из ретроорбитального синуса в моменты времени через 1, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 ч после введения. Образцы крови отбирали из группы из трех мышей в каждый момент времени в маркированную центрифужную микропробирку, содержащую К2ЕОТА в качестве антикуагулянта. Образцы плазмы выделяли центрифугированием цельной крови при 4000 об/мин в течение 10 мин и хранили при температуре ниже -70°С до проведения биологического анализа. После сбора образцов крови, животных гуманно умерщвляли с помощью диоксида углерода для сбора тканей всей толстой кишки. Толстые кишки промывали холодным забуференным фосфатом физиологическим раствором (рН 7,4) для удаления содержимого. Ткань всей толстой кишки гомогенизировали с помощью холодного забуференного фосфатом физиологического раствора (рН 7,4), взятого по массе в два раза больше массы тканей толстой кишки, и хранили при температуре ниже -70°С. Суммарный объем был в три раза больше суммарной массы тканей толстых кишок. Для анализа все образцы подвергали обработке путем осаждения белка с использованием ацетонитрила и анализировали разработанным методом жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) (нижний предел количественного определения: 2,02 нг/мл в плазме и 1,01 нг/мл в ткани толстой кишки). Рассчитывали фармакокинетические параметры с помощью программного обеспечения РЬоетх \νίπ№пПп® (уегыоп 6.3) для анализа без использования камерной модели.
(ίί) Исследования на крысах.
Исследования по изучению фармакокинетики, а также распределению в плазме и распределению в суммарных тканях толстой кишки, соединения примера 77 у самцов крыс линии \νίκΙ;·π после разового внутривенного или перорального введения проводились фирмой δ;·ιί ПГе δ^ΐ'^κ (Нт)е№аа1, Рипе, Π^ίη).
самцов крыс линии \νίκΙ;·ΐΓ разделяли на две группы: группа I (перорально: 5 мг/кг; 27 крыс) и группа ΙΙ (внутривенно 0,25 мг/кг; 3 крысы). Животным в группе Ι перорально вводили соединение примера 77 в дозе 5 мг/кг в виде водной суспензии (содержащей 2% гидроксипропилметилцеллюлозы и 0,5% Т\уееп 80). Животным в группе II внутривенно вводили соединение примера 77 в дозе 0,25 мг/кг в виде раствора (5% ДМСО об./об., 7,5% мас./об. δο1иБο1 Н8 15 и 87,5% физиологического раствора (0,9% мас./об. №С1)). У каждой крысы отбирали образцы крови (приблизительно 120 мкл) из ретроорбитального синуса в моменты времени через 0,05, 0,13, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8 и 24 ч после внутривенного введения заданной дозы и через 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 ч после перорального введения заданной дозы. Сразу после отбора крови, отделяли плазму от крови центрифугированием и хранили при температуре -70°С до момента проведения анализа. После отбора образцов крови животных (группы I) гуманно умерщвляли с помощью диоксида углерода. Всю полностью толстую кишку извлекали, промывали холодным забуференным фосфатом физиологическим раствором (рН 7,4) для удаления содержимого и взвешивали. Все ткани полностью толстой кишки гомогенизировали с помощью очень холодного забуференного фосфатом физиологического раствора с рН 7,4. Объем буфера, используемого для гомогенизации, был в два раза больше массы ткани. Все образцы хранили при температуре ниже -70°С до момента проведения биологического анализа. Общий объем гомогената ткани толстой кишки был в три раза больше. Образцы плазмы и ткани толстой кишки подвергали анализу методом жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) (нижний предел количественного определения: в плазме и ткани толстой кишки = 0,5 нг/мл).
- 102 025393 (ίί) Исследования на собаках породы бигль.
Исследования по изучению фармакокинетики соединения примера 77 в плазме у самцов собак породы бигль после разового внутривенного или перорального введения проводились фирмой δοί ЫГе δαепсек (Н1и)е№аЙ1, Рипе, 1пЛа).
Группе из трех самцов собак породы бигль перорально вводили соединение примера 77 в дозе 1 мг/кг в виде водной суспензии (содержащей 2% НРМС и 0,5% Т\\ееп 80). Кроме того, группе из трех самцов собак породы бигль внутривенно вводили соединение примера 77 в дозе 0,05 мг/кг в виде раствора (5% ДМСО об./об., 7,5% δо1иΐо1 Н8 15 мас./об. и 87,5% физиологического раствора (0,9% мас./об. №С1)). Образцы крови (приблизительно 1,5 мл) отбирали из яремной вены в моменты времени через 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после перорального введения заданной дозы и через 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 12, 24 и 32 ч после внутривенного введения заданной дозы. Образцы крови отбирали из группы из трех собак в каждый момент времени в маркированную центрифужную микропробирку, содержащую К2ЕИТА в качестве антикуагулянта. Образы плазмы выделяли центрифугированием цельной крови при 2500 д в течение 10 мин и хранили при температуре ниже -70°С до проведения биологического анализа. Для анализа, все образцы подвергали обработке путем осаждения белка с использованием ацетонитрила и анализировали методом жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) (нижний предел количественного определения = 0,50 нг/мл). Рассчитывали фармакокинетические параметры с помощью программного обеспечения РЬоетх V^ηNоη1^η® (уегкюп 6.3) для анализа без использования камерной модели.
Как показано ниже в табл. 8а, пероральное введение соединения примера 77 давало в результате значительно более высокое содержание соединения в ткани толстой кишки, чем в плазме, особенно при исследовании на собаках (когда присутствие соединения в плазме вообще не наблюдалось).
Таблица 8а
Фармакокинетические параметры, определенные при исследованиях, включающих пероральное введение соединения примера 77
Доза и способ введения Мышь Крыса Собака
5 мг/кг перорально 5 мг/кг перорально 1 мг/кг перорально
В1оМаСг1х Плазма Вся толстая кишка Плазма Вся толстая кишка Плазма
т,»х (ч) 1 4 6 4 -
Стх (нг/мл) 3,5 1071 2,5 2504 -
Аис„5т (ч·нг/мл) 22 7475 17, 5 20492 -
АиСгиг (Ч'Нг/мл) 29 9276 17,5 20720 -
( § ) - - 0, 1 - 0
Таблица 8Ъ
Фармакокинетические параметры, определенные при исследованиях, включающих внутривенное введение соединения примера 77
Крыса Собака
Доза 0,25 мг/кг 0, 05 мг/кг
Со (нг/мл) 4026 282,7
АиСщ5Т (ч·нг/мл) 1179 33, 6
АиС1ИР· (ч-нг/мл) 1187 37, 0
Тш (ч) 0,8 2,5
СЪ (мл/мин/кг) 3,5 25, 4
(л/кг) 0,1 1,8
Определение параметров АЭМЕ.
Оценка ш уйго ряда параметров АЭМЕ (адсорбции, распределения, метаболизма и экскреции) для соединений примеров 77 и 80 была проведена фирмой БюРосик (ЪаГГгоп Vа1άеп, ИК).
(ί) Метаболическая стабильность.
Стабильность в микросомах печени.
Исследования микросомальной стабильности осуществляли путем инкубации тестируемых соединений при 0,1 мкМ (п=2, конечная концентрация ДМСО 0,25%) со смешанными микросомами печени человека, собаки и крысы фирмы Хепо1есй (Ьо1к 1210153, 0810143 и 1110042 соответственно) при 0,25 мг белок/мл в присутствии кофактора, восстановленного никотинамидаденин-динуклеотидфосфата (ЦАЭРН). Инкубацию осуществляли при 37°С с аликвотами 100 мкл, отобранными при инкубации в моменты времени 0, 2, 5, 10 и 20 мин, и реакции останавливали добавлением 100 мкл ацетонитрила, содержащего карбамазепин в качестве аналитического внутреннего стандарта. Образцы центрифугировали, и супернатантные фракции анализировали методом жидкостной хроматографии/тандемной массспектрометрии (ЖХ-МС/МС).
Для определения процента оставшегося соединения характеристики прибора (высоты пиков) корректировали по образцам в нулевой момент времени (принимая их за 100%).
Ьп кривые % оставшегося соединения в случае каждого соединения использовали для определения времени полужизни при микросомальных инкубациях. Значения времени полужизни рассчитывали из
- 103 025393 зависимости
Τχ/2 (мин) =-0,693/λ, где λ представляла собой наклон кривой концентрации от времени в натуральных логарифмических координатах.
Рассчитывали собственный клиренс ш у1Его, С11пЕ (мл/мин/кг), и приводили его в соответствие с коэффициентами экстракции печенью, используя следующие параметры масштабирования и формулы.
Параметры.
Параметры
Значение
Человек Собака Крыса
Концентрация микросомального белка в инкубации (мг/мл) 0,25 0, 25 0,25
Микросомы/г печени (мг) 52 78 45
Масса печени/кг массы тела (г) 25 32 50
Печеночный кровоток (мл/мин/кг) 21 31 60
Формулы.
С11пЕ (тканевой клиренс) мл/мин/кг= [0,693/Е1/2 (мин^р/концентрация микросомального белка мг/мл] x[мг микросомы/г печень] x [г печень/кг масса тела];
С11пЕ (печеночный клиренс) мл/мин/кг=печеночный кровоток С1тЕ/(печеночный кровоток+С1тЕ); коэффициент экстракции печенью (ЕЬ)=С11пЕ (печеночный клиренс)мл/мин/кг/печеночный кровоток (мл/мин/кг).
Стабильность криосохраненных гепатоцитов.
Исследования стабильности гепатоцитов осуществляли путем инкубации тестируемых соединений (исходная концентрация 0,1 мкМ, п=2) со смешанными криосохраненными гепатоцитами человека, собаки и крысы фирмы Се1к1к (ЬоЕ питЬегк ККУ, КЫ и УАР соответственно) при плотности клеток 0,5 млн клеток/мл. Инкубации осуществляли при 37°С со 100 мкл образцов, взятых из инкубации в моменты времени 0, 10, 20, 45 и 90 мин, и реакции останавливали добавлением 100 мкл ацетонитрила, содержащего карбамазепин в качестве аналитического внутреннего стандарта. Образцы центрифугировали и супернатантные фракции анализировали методом жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС).
Для определения процента оставшегося соединения, характеристики прибора (высоты пиков) корректировали по образцам в нулевой момент времени (принимая их за 100%).
Ьп кривые % оставшегося соединения в случае каждого соединения использовали для определения времени полужизни при инкубациях гепатоцитов. Значения времени полужизни рассчитывали из зависимости
Τχ/2 (мин)=-0,693/λ, где λ представляла собой наклон кривой концентрации от времени в натуральных логарифмических координатах.
План исследования включает использование стандартных соединений, таких как тестостерон, мидазолам и 4-метил-умбеллиферон. Эти соединения дают представление о метаболической емкости криосохраненных препаратов как в фазе I, так и в фазе II реакций.
Рассчитывали ш у1Его собственный клиренс (С11пЕ) в виде мкл/мин/млн клеток путем применения следующей формулы для значений времени полужизни:
С11пЕ=0,693/Т1/2 (минЦобъем инкубации (мкл)/млн клеток.
Значения времени полужизни также приводили в соответствие с коэффициентами экстракции печенью, используя следующие параметры масштабирования и формулы.
Параметры.
Параметр
Концентрация гепатоцитов в инкубации (миллион клеток/мл)_
Насыщенность гепатоцитами (миллион клеток/г печени)_
Масса печени/кг массы тела (г)_
Печеночный кровоток (мл/мин/кг)
Человек 0, 5
120
Т5~
Формулы.
С11пЕ (тканевой клиренс) мл/мин/кг=[0, 693/Е1/2 (минОр |1/концентрация непатоцитов (млн клеток/мл^ [млн клеток/г печени] x [г печени/кг массы тела];
С11пЕ (печеночный клиренс) мл/мин/кг=печеночный кровотокС1тЕ/(печеночный кровоток+С1тЕ); коэффициент экстракции печенью (ЕЬ)=С11пЕ (печеночный клиренс)мл/мин/кг/печеночный кровоток (мл/мин/кг).
Результаты, приведенные в табл. 9а и 9Ь, указывают, что соединения примеров 77 и 80 проявляют высокий печеночный клиренс, характерное свойство, приводящее к более низким системным воздействиям применении ш У1уо.
- 104 025393
Таблица 9а
Результаты испытаний стабильности в микросомах печени для соединений примеров 77 и 80 (данные приводятся в виде среднего арифметического значения двух экспериментов)
Источник микросом печени Среднее значение собственного клиренса (мкл/мин/мг белка) Среднее значение коэффициента экстракции печенью (ЕЬ)
Пример 7 7 Пример θ 0 Пример 77 Пример 8 0
Человек 308 216 0, 94 0, 93
Собака 189 146 0, 94 0, 91
Крыса 120 91 0, 82 0, 77
Таблица 9Ь
Результаты испытаний стабильности гепатоцитов для соединений примеров 77 и 80 (данные приводятся в виде среднего арифметического значения двух экспериментов)
Источник гепатоцитов Среднее значение собственного клиренса (мкл/мин/миллион клеток) Среднее значение коэффициента экстракции печенью (ЕЬ)
Пример 7 7 Пример 80 Пример 7 7 Пример 8 0
Человек 16 <11 0, 69 <0, 61
Собака 26 11 0, 87 0, 73
Крыса 12 <8 0, 55 <0, 44
(ίί) Изменяющееся во времени ингибирование цитохромов.
Исследования изменяющегося во времени ингибирования (ТЭ1) СУР450 проводили с тестируемым соединением при шести концентрациях от 0,062 до 15 мкМ (п=2). Тестируемые соединения предварительно инкубировали в течение 30 мин со смешанными микросомами печени человека в 0,1 М Тпк буфере, рН 7,4, при 37°С в присутствии кофактора NΑ^ΡН. Параллельные серии инкубации (п=2) готовили без предварительной инкубации. Затем добавляли маркерные субстраты (с дополнительным кофактором) и затем инкубировали в течение указанного времени. Концентрации маркерных субстратов, использованных при инкубации, были оптимизированы для поддержания условий протекания реакций первого порядка.
Реакции останавливали ацетонитрилом, содержащим аналитический внутренний стандарт (карбамазепин), затем образцы центрифугировали для удаления микросомального белка и анализировали методом жидкостной хроматографии/тандемной масс-спектрометрии (ЖХ-МС/МС) в оптимизированных условиях. Данные масс-спектров нормализовали к внутреннему стандарту и сравнивали с соответствующими растворителями в качестве контролей для определения количества метаболита, образовавшегося из маркерного субстрата, относительно неингибированных контролей. Результаты представлены в виде % ингибирования. Эти значения затем изображали графически, используя сигмоидальную зависимость доза-ответ (показанную ниже), и вычисляли значения 1С50.
У=низшее значение+((высшее значение-низшее значение)/1 + 10Л((Ьод1С50-Х)* угол наклона прямой Хилла)),
Х=логарифмическая концентрация,
У=ответная реакция.
Значение 1С50 приводится в мкМ, то есть момент времени, при котором ингибирование составляет 50% от контрольного значения.
Ингибиторы с изменяющимся во времени положительным и отрицательным действием были использованы для демонстрации возможности специфических и эффективных взаимодействий в использованных условиях. Вариация метаболизма маркерного субстрата между лунками планшета означает, что зарегистрированные значения ингибирования ниже 10-15%, могут считаться незначимыми.
Характеристика специфических условий приведена в таблице ниже.
Изоформа цитохрома Р450 Концентрация микросом (мг/мл) Маркерный субстрат Время инкубации (мин)
Название Концент рация (мкМ) Метаболит
ЗА4 0, 25 Мидазолам 7 1'-ОН- мидазолам 15
2С9 0,25 Диклофенак 15 1'-ОН- диклофенак 15
- 105 025393
Таблица 10
Результаты исследования ингибирования цитохрома Р450 с помощью соединения примера 77 (результаты приведены в виде среднего арифметического значения двух экспериментов)
Изоформа цитохрома Р450 0 мин преинкубации 30 мин преинкубации
15 мкМ % ингибирования 1С50 (мкМ) 15 мкМ % ингибирования 1С5О (мкМ)
СУРЗА4 15 >15 35 >15
СУР2С9 -4 >15 1 >15
Исследования ингибирования гена специфических калиевых каналов сердца (ЬЕК0).
Соединения примеров 75, 77, 80 и 81 испытывали на ингибирование гена специфических калиевых каналов сердца (1ЕК0), используя электрофизиологическую фиксацию потенциала (пэтч-кламп) 1опАогкк™, в лаборатории фирмы Еккеп Вюкаепсе (\Уе1\\уп Оагбеп СНу, Епд1апб). Кривые концентраций строили по восьми точкам, используя последовательные 3-кратные разведения максимальной конечной концентрации исследования (3 мкМ).
Электрофизиологические показатели регистрировали на легочных клетках китайского хомячка, стабильно экспрессирующих полноразмерный 1ЕК0 канал. Ионные токи одной клетки измеряли в конфигурации перфорированного пэтч-клампа (100 мкг/мл амфотерицин) при комнатной температуре (2123°С), используя прибор 1опАогкк. Внутренний раствор содержал (мМ): 140 КС1, 1 М§С12, 1 Е0ТА, 20 НЕРЕ8, а также забуферен до рН 7,3. Внешний раствор содержал (мМ): 138 №С1, 2,7 КС1, 0,9 СаС12, 0,5 МдС12, 8 №'ЬНРО+ 1,5 КН2РО4, а также забуферен до рН 7,3. Клетки клампировали при исходном потенциале -70 мв в течение 30 с и затем потенциал изменяли с шагом +40 мв за 1 с. За этим следовала стадия увеличения поляризации длительностью 1 с до -30 мв для индуцирования ЬЕК0 следового тока. Эту последовательность повторяли 5 раз при частоте 0,25 Гц. Токи измеряли на стадии возникновения следового тока при 5-том импульсе и соотносили с исходным током. Соединения затем инкубировали в течение 6-7 мин и проводили второе измерение ЬЕК0 сигнала, используя аналогичную последовательность импульсов. Кривые концентраций строили по восьми точкам, используя последовательные 3-кратные разведения максимальной конечной концентрации исследования (3 мкМ).
Эти исследования показали, что соединения примеров 75, 77, 80 и 81, все имеют значения 1С50 для 1ЕК0 канала больше чем 3 мкМ.
Характеристика многообразия биологического воздействия.
Исследования по изучению связывания соединения примера 77 с рецепторами различных типов и изучению либо ингибирования, либо активации выбранных ферментов (профиль разнообразного воздействия, включающий суммарно 71 рецептор и 26 ферментов) проводились фирмой Сегер (Се11еЬеуексаиИ, Ргапсе).
При проведении исследований при концентрации 300 нМ соединение примера 77 существенно не связывало какой-либо из рецепторов или не ингибировало/не активировало исследуемые ферменты (то есть при проведении исследований на связывание рецептора или фермента оно ингибировало контрольное специфическое связывание меньше чем на 25%, что оценивалось путем использования соответствующего радиолиганда для каждого рецептора или соответствующего эталонного субстрата для каждого фермента).
Оценка мутагенности (скрининг обратных мутаций на бактериях).
Исследования по оценке способности соединения примера 77 индуцировать ш νίΙΐΌ мутации в двух гистидин-зависимых ауксотрофных мутантах сальмонелы 8а1топе11а 1урЫтигшт, штампах ТА98 и ТА100, проводились фирмой 8едиат (ЬебЬигу, НегеГогбкЫге, иК).
Скрининг мутаций проводили, используя тест Эймса (метод глубинного посева в чашки), который осуществляли как в присутствии, так и отсутствии смеси 8-9 (постмитохондиальной фракции печени, полученной из печени обработанных с помощью реагента Кесо1ог 1254 крыс). Бактерии подвергали воздействию соединения примера 77, растворенного в диметилсульфоксиде, растворителе, который также используют в качестве отрицательного контроля. Уровень используемых доз составлял 0,32, 1,6, 8, 40, 200, 1000 или 5000 мкг/чашка.
Соединение примера 77 не показало связанные с дозой или статистически значимые увеличения колоний ревертанта ни для одного из штампов 8а1топе11а 1урЫтштит в присутствии или отсутствии смеси 8-9. Это указывает на отсутствие каких-либо мутагенных эффектов у соединения примера 77 при исследовании на штампах 8а1топе11а 1ур1йтипит.
Выявленные выше биологические свойства соединений примеров настоящего изобретения указывают, что соединения формулы (Ι) обладают противовоспалительными свойствами, аналогично свойствам соединения сравнения, раскрытого ранее. Кроме того, фармакологические эффекты сохраняются ш У1уо в течение по меньшей мере 12 ч, что позволяет предположить, что эти соединения будут проявлять длительную продолжительность действия при терапевтическом применении. Очень важно, что соединения формулы (Ι) обладают ингибирующей активностью в отношении более узкого спектра киназ, чем соединение сравнения, которое является типичным представителем многих соединений известного уров- 106 025393 ня техники, предназначенных для этой цели, и соединения формулы (Ι) оказывают меньше нежелательных побочных эффектов на выживаемость клеток и деление клеток. Вследствие этого, фармакологические свойства, проявляемые соединениями формулы (Ι), позволяют отнести соединения формулы (Ι) к эффективным противовоспалительным средствам, которые характеризуются пониженным риском индуцирования токсичности при клиническом использовании.
В описании настоящего изобретения и формуле изобретения, приведенной ниже, если не указано иное, термин включать и его вариации, такие как включает и включающий, подразумевает включение заявленного целого числа, стадии, группы целых чисел или группы стадий, но не исключает любое другое целое число, стадию, группу целых чисел или группу стадий.
Содержание всех приведенных в настоящем описании патентов и патентных заявок включено в данное описание посредством ссылки.
Данная заявка, для которой данное описание и формула изобретения являются ее частью, может быть использована в качестве основы для испрашивания приоритета в отношении любой последующей заявки. Пункты формулы изобретения такой последующей заявки могут относиться к любому характерному признаку или комбинации характерных признаков, описанных в данном описании. Они могут принимать форму пунктов на продукт, композицию, способ или применение и могут включать в качестве примера и без ограничения данную формулу изобретения.

Claims (5)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (Ι) где 0 представляет собой тиенил, фенил или пиридинил, каждый из которых может необязательно нести 1-3 заместителя, независимо выбранных из гидроксила, галогена, С1-6-алкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, Ν^, Х(Н)-С1-6-алкила, ЖС1-6-алкил)2, С1-6-алкилен-5-10-членного гетероцикла и [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-6-алкилен]0-1-5-10-членного гетероцикла;
    X представляет собой СН или Ν;
    Υ представляет собой МК2К3 или 4-10-членный гетероцикл, необязательно присоединенный через гетероатом, где указанный гетероцикл несет 0 или 1 заместитель, выбранный из галогена, ОН, С1-6-алкила, С!-4-галогеналкила, [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-6-алкила]0-1, [С1-3-алкилен]0-1-О-С1-3-галогеналкила, [С1-6-алкилен]0-1-арила, [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-3-алкилен]0-1-арила, [С1-6-алкилен]0-1-гетероарила, [С!-3-алкилен]0-1 -О-[С1-3-алкилен|0-1 -гетероарила, С(О)С1-6-алкила, 8О2ИК4К5, [С1-3-алкилен]0-1 -ХК4К5, [С1-3-алкилен]0-1-ХК48О2К5 и [С1-3-алкилен]0-1-ХК4С(О)К5;
    К представляет собой С1-6-алкил, С2-6-алкенил, С1-6-гидроксиалкил, С1-6-галогеналкил, С1-6-алкил, замещенный С1-3-алкокси или циано, [С1-2-алкилен]0-1-С3-8-циклоалкил, необязательно замещенный С1-3-алкилом, или 4-5-членный гетероцикл, необязательно замещенный С1-3-алкилом;
    Ка и КЬ, вместе с атомами углерода, к которым они присоединены, образуют конденсированное фенильное кольцо, которое необязательно замещено одним или более заместителями, выбранными из С1-3-алкила, С1-3-галогеналкила, циано и галогена, или один из Ка и КЬ представляет собой Н, галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил и другой независимо представляет собой галоген, циано, С1-3-алкил или С1-3-галогеналкил;
    К1 выбирают из водорода, ОН, галогена, ΟΝ, С1-6-алкила, С2-6-алкенила, С2-6-алкинила, С1-6-галогеналкила, [С1-3-алкилен]0-1-С3-6-циклоалкила, [С1-3-алкилен]0-1-О-С1-3-алкилен-С3-6-циклоалкила, С1-6-алкокси, С1-6-галогеналкокси, С1-6-гидроксиалкила, [С1-3-алкилен]0-1-8О2С1-3-алкила, [С1-3-алкилен]0-1-8О2ХК4К5 и [С1-3-алкилен]0-1-ХК6К7 и [С1-3-алкилен]0-1-ЫСОК6К7;
    К2 и К3, каждый независимо, выбирают из Н, С1-8-алкила, [С1-6-алкилен]0-1-арила, [С1-6-алкилен]0-1гетероарила, [С1-6-алкилен]0-1-4-10-членного гетероцикла и [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-6-алкилен]0-1-4-10членного гетероцикла при условии, что, когда указанный гетероцикл соединен через азот, имеются по меньшей мере два атома углерода в алкиленовой цепи, которые связывают этот атом азота с основным атомом кислорода заместителя, где независимо каждая алкильная или алкиленовая группа необязательно несет 1 оксозаместитель и необязательно один или два атома углерода в алкильной или алкиленовой цепи, каждый, могут быть заменены гетероатомом, выбранным из О, Ν или 8(О)р, так что, когда указанный алкил или алкилен содержит амин, указанная аминогруппа представляет собой третичный амин, где каждый 4-10-членный гетероцикл необязательно замещен 1 или 2 группами, независимо выбранными из галогена, ОН, С1-6-алкила, С!-4-галогеналкила, [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-6-алкила]0-1, [С1-3-алкилен]0-1-О-С1-3-галогеналкила, [С1-6-алкилен]0-1-арила, [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-3-алкилен]0-1-арила, [С1-6-алкилен]0-1-гетероарила, [С1-3-алкилен]0-1-О-[С1-3-алкилен]0-1-гетероарила, С(О)С1-6-алкила,
    - 107 025393 /О;\К8К' и [С1-3-алкилен]0-1-МК8К9, [С1-з-алкилен]ο-1-NК88О2К9 и [С1-з-алкилен]ο-1-NК8С(О)К9;
    К4 представляет собой Н или С1-4-алкил;
    К5 представляет собой Н или С1-4-алкил;
    К6 представляет собой Н или С1-4-алкил, С(О)С!-3-алкил и 8О2С1-3-алкил;
    К7 представляет собой Н или С1-4-алкил, С(О)С!-3-алкил и 8О2С1-3-алкил;
    К8 представляет собой Н или С1-4-алкил и
    К9 представляет собой Н или С!-4-алкил; р равен 0, 1 или 2 или его фармацевтически приемлемая соль, включая все его стереоизомеры и таутомеры, при условии, что соединение не является 3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-\-(2-морфолиноэтил)бензамидом.
  2. 2. Соединение по п.1 формулы (1а2) где К, К1, О и Υ являются такими, как определено в п.1. 3. Соединение по п.1 формулы (1Ь2) где К, К1, О, X и Υ являются такими, как определено в п.1. 4. Соединение по п.1 формулы (1с2) где К, К1, О и Υ являются такими, как определено в п.1. 5. Соединение по п.1 формулы (И2) где К, К1, О и Υ являются такими, как определено в п.1. 6. Соединение по п.1 формулы (1е2) где К, К1, О и Υ являются такими, как определено в п.1. 7. Соединение по п.1 формулы (Н2)
    в.
    где К, К1, О и Υ являются такими, как определено в п.1. 8. Соединение по п.1 формулы (1д2)
    - 108 025393 где К, К1, X, О и Υ являются такими, как определено в п.1.
    9. Соединение или соль по любому из пп.1-8, где К представляет собой нормальный С1-6-алкил, разветвленный С4-6-алкил, С2-6-алкенил, С1-6-гидроксиалкил, С1-6-галогеналкил, С1-6-алкил, замещенный Срз-алкокси или циано, [С1-2-алкилен]0-1-Сз-8-циклоалкил, необязательно замещенный С^з-алкилом, или 4-5-членный гетероцикл, необязательно замещенный С1-3-алкилом.
    10. Соединение по п.1, выбранное из группы
  3. 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиридин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3- ((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
  4. 4- ((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-гидроксиэтил)-3-метоксибензамид;
    ^(2-(диметиламино)этил)-3 -((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамид;
    ^(2-(диметиламино)этил)-3 -((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамид;
    3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(3-(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(6-метоксипиридин-3-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-метоксиэтил)бензамид;
    1 -(3 -изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)-3 -(4-((2-((3-метокси-5-(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина;
  5. 5- ((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-2-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((6-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиридин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-метилбензамид;
    3 -(4-(4-(3 -(3 -трет-бутил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -илокси)пиримидин-2-иламино)-И-пропилбензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-(диметиламино)этил)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -изопропил-1 -(п-толил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -(трет-бутил) -1 -(4-метоксифенил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(3 -метилоксетан-3 -ил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(1 -(4-метоксифенил)-3 -(3 -метилоксетан-3 -ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(4-метилтиофен-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    - 109 025393
    3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-(4-метилпиперазин-1 -ил)этил)бензамид;
    3- ((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-N,N-диметилбензамид;
    1 -(3 -(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)-3 -(4-((2-((3 -(морфолин-4-карбонил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина;
    N-(2-(диметиламино)этил)-3 -((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-(диметиламино)этил)-4-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-4-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    N-(2-гидроксиэтил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-гидроксиэтил)-4-метоксибензамид;
    N-(2-гидроксиэтил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-4-метоксибензамид;
    N-(2-(диметиламино)этил)-4-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3-метоксибензамид;
    4- ((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    4-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-3-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    4-((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    N-(2-гидроксиэтил)-4-((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-3-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метилбензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -(трет-бутил) -1 -(4-метоксифенил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамид;
    3 -бром-5-((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-(диметиламино)этил)-5-метоксибензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -изопропил-1 -(п-толил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)-5-(трифторметил)бензамид;
    3-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(1-(п-толил)-3-(трифторметил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -этил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -циклопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -метокси-5-((4-((4-(3 -(3 -(1 -метилциклопропил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -(трет-бутил) -1 -(4-метоксифенил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(3 -(2-метоксиэтокси)фенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(1 -(3,4-диметилфенил)-3 -изопропил-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    - 110 025393
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(6-метоксипиридин-3 -ил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метокси-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-метокси-5-((4-((4-(3-(1-(4-метоксифенил)-3-(тетрагидрофуран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -метокси-5-((4-((4-(3 -(1 -(4-метоксифенил)-3 -(тетрагидрофуран-3 -ил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -хлор-5-((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -хлор-5-((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -бром-5-((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    №(2-гидроксиэтил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-№(2-гидроксиэтил)-5-метоксибензамид;
    №(2-гидроксиэтил)-3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-метоксибензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-№(2-метоксиэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-№(2-метоксиэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-метокси-№метил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    1 -(3 -изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)-3 -(4-((2-((3-метокси-5-(4-метилпиперазин-1 -карбонил)фенил)амино)пиримидин-4-ил)окси)нафталин-1-ил)мочевина;
    5-((4-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-2-метокси-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((6-((4-(3 -(3 -изопропил-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-4ил)амино)-5-метокси-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((6-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-4ил)амино)-5-метокси-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-этинил-5-((4-((4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(6-метоксипиридин-3 -ил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-этинил-№(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3-(3-(перфторэтил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -этинил-№(2-морфолиноэтил)-5-((4-((4-(3 -(1 -(п-толил)-3 -(1,1,1 -трифтор-2-метилпропан-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -(трет-бутил) -1 -(4-метоксифенил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(2-цианопропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -этинил-5-((4-((4-(3 -(3 -(2-метоксипропан-2-ил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(4-(диметиламино)фенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    (8)-3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(1-морфолинопропан-2-ил)бензамид;
    3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2ил)амино)-5-этинил-№(2-метил-1-морфолинопропан-2-ил)бензамид;
    (К)-3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(1-морфолинопропан-2-ил)бензамид;
    3-((4-((4-(3-(3 -(трет-бутил) -1 -(4-метоксифенил) -1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(2-метоксиэтил)бензамид;
    (8)-3 -((4-((4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1 -ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-№(1-метоксипропан-2-ил)бензамид;
    3 -метокси-5-((4-((4-(3 -(1 -(4-метоксифенил)-3 -(проп-1-ен-2-ил)-1Н-пиразол-5 -ил)уреидо)нафталин1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-№(2-морфолиноэтил)бензамид;
    - 111 025393
    3-((4-(2,3-дихлор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2ил)амино)-5-этинил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-((4-(2,3-дифтор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2ил)амино)-5-этинил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид;
    3-((4-(2,3-дихлор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2ил)амино)-5-этинилбензамид;
    3-((4-(2,3-дихлор-4-(3-(3-изопропил-1-(п-толил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)фенокси)пиримидин-2ил)амино)-Ы-(2-(диметиламино)этил)-5-этинилбензамид;
    3 -((6-(4-(3 -(3 -(трет-бутил)-1 -(4-метоксифенил)-1Н-пиразол-5-ил)уреидо)-2,3-диметилфенокси)пиримидин-4-ил)амино)-5-метокси-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид и их фармацевтически приемлемых солей.
    11. Соединение по п.1, которое представляет собой 3-((4-((4-(3-(3-(трет-бутил)-1-(4-метоксифенил)-1Нпиразол-5-ил)уреидо)нафталин-1-ил)окси)пиримидин-2-ил)амино)-5-этинил-Ы-(2-морфолиноэтил)бензамид или его фармацевтически приемлемую соль.
    12. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-11, но без исключения, в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми разбавителями или носителями.
    13. Применение соединения по любому из пп.1-11, но без исключения, для лечения хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМО), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита или остеоартрита.
    14. Применение композиции по п.12 для лечения хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМО), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита или остеоартрита.
    15. Применение соединения по любому из пп.1-11, но без исключения, для лечения хронического обструктивного заболевания легких, астмы, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), болезни Крона или язвенного колита.
    16. Применение композиции по п.12 для лечения хронического обструктивного заболевания легких, астмы, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), болезни Крона или язвенного колита.
    17. Применение соединения по любому из пп.1-11, но без исключения, для производства лекарственного средства для лечения хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМО), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита или остеоартрита.
    18. Применение композиции по п.12 для производства лекарственного средства для лечения хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМО), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбаль- 112 025393 ных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита или остеоартрита.
    19. Способ лечения болезненного состояния, выбранного из хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМЭ), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита и остеоартрита, включающий введение субъекту эффективного количества соединения по любому из пп.1-11, но без исключения.
    20. Способ лечения болезненного состояния, выбранного из хронического обструктивного заболевания легких (включая хронический бронхит и эмфизему), астмы, кистозного фиброза поджелудочной железы, саркоидоза, идиопатического легочного фиброза, аллергического ринита, ринита, синусита, аллергического конъюнктивита, конъюнктивита, сухого кератоконъюнктивита (сухости глаз), глаукомы, диабетической ретинопатии, макулярного отека (включая диабетический макулярный отек), окклюзии центральной вены сетчатки (СКУО), сухой или влажной формы возрастной макулярной дегенерации (АМЭ), воспаления после операции по удалению катаракты, увеита (включая задний увеит, передний увеит и панувеит), отторжения трансплантата роговицы и трансплантата лимбальных клеток, глютензависимой энтеропатии (целиакии), эозинофильного эзофагита, интестинальной реакции трансплантат против хозяина, болезни Крона, язвенного колита, ревматоидного артрита и остеоартрита, включающий введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции по п.12.
    21. Применение соединения по любому из пп.1-11, но без исключения, для лечения обострений воспалительных заболеваний, в частности вирусных обострений, или для лечения вирусных инфекций у пациентов с одним или более хроническими болезненными состояниями, такими как хроническая сердечная недостаточность, хроническое обструктивное заболевание легких, астма, диабет, рак, и/или у пациентов после курса иммуносупрессивной терапии, например после трансплантации органа.
    22. Применение композиции по п.12 для лечения обострений воспалительных заболеваний, в частности вирусных обострений, или для лечения вирусных инфекций у пациентов с одним или более хроническими болезненными состояниями, такими как хроническая сердечная недостаточность, хроническое обструктивное заболевание легких, астма, диабет, рак, и/или у пациентов после курса иммуносупрессивной терапии, например после трансплантации органа.
EA201590391A 2012-08-17 2013-08-16 Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы EA025393B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1214750.0A GB201214750D0 (en) 2012-08-17 2012-08-17 Compounds
US201361782793P 2013-03-14 2013-03-14
PCT/GB2013/052184 WO2014027209A1 (en) 2012-08-17 2013-08-16 Pyrazolyl-ureas as kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201590391A1 EA201590391A1 (ru) 2015-06-30
EA025393B1 true EA025393B1 (ru) 2016-12-30

Family

ID=47016978

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201590391A EA025393B1 (ru) 2012-08-17 2013-08-16 Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы

Country Status (12)

Country Link
US (2) US20140057915A1 (ru)
EP (1) EP2885284B1 (ru)
JP (1) JP2015524837A (ru)
KR (1) KR20150056777A (ru)
CN (1) CN105073725A (ru)
AU (1) AU2013303922A1 (ru)
BR (1) BR112015003218A2 (ru)
CA (1) CA2881914A1 (ru)
EA (1) EA025393B1 (ru)
GB (1) GB201214750D0 (ru)
MX (1) MX2015002044A (ru)
WO (1) WO2014027209A1 (ru)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060036220A1 (en) * 2003-01-22 2006-02-16 Kohji Kawahara Percutaneous absorption preparation for treating ophthalmic disease, use thereof and method for migration of ophthalmic remedy into topical tissue in eye
WO2009077766A1 (en) 2007-12-19 2009-06-25 Cancer Research Technology Limited Pyrido[2,3-b]pyrazine-8-substituted compounds and their use
JP5760010B2 (ja) 2010-02-01 2015-08-05 キャンサー・リサーチ・テクノロジー・リミテッド １−（５−ｔｅｒｔ−ブチル−２−フェニル−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−３−［２−フルオロ−４−（１−メチル−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［４，５−Ｂ］ピリジン−７−イルオキシ）−フェニル］−尿素および関連化合物ならびに治療におけるそれらの使用
EP2578582A1 (en) 2011-10-03 2013-04-10 Respivert Limited 1-Pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl)ureas as p38 MAP kinase inhibitors
US9108950B2 (en) 2011-10-03 2015-08-18 Respivert, Ltd. 1-pyrazolyl-3-(4-((2-anilinopyrimidin-4-yl)oxy)napththalen-1-yl) ureas as p38 MAP kinase inhibitors
GB201214750D0 (en) 2012-08-17 2012-10-03 Respivert Ltd Compounds
WO2014033447A2 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
GB201215357D0 (en) 2012-08-29 2012-10-10 Respivert Ltd Compounds
EP2890701B1 (en) 2012-08-29 2017-03-29 Respivert Limited Kinase inhibitors
US20150210722A1 (en) 2012-08-29 2015-07-30 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014076484A1 (en) 2012-11-16 2014-05-22 Respivert Limited Kinase inhibitors
US20160016934A1 (en) 2013-03-14 2016-01-21 Respivert Limited Kinase inhibitors
US9481648B2 (en) * 2013-04-02 2016-11-01 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2981534B1 (en) 2013-04-02 2017-07-19 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
GB201320732D0 (en) 2013-11-25 2014-01-08 Cancer Rec Tech Ltd Methods of chemical synthesis
GB201320729D0 (en) 2013-11-25 2014-01-08 Cancer Rec Tech Ltd Therapeutic compounds and their use
AU2014369449B2 (en) 2013-12-20 2018-07-05 Oxular Acquisitions Limited Urea derivatives useful as kinase inhibitors
JP6630280B2 (ja) 2014-02-14 2020-01-15 レスピバート・リミテツド 抗炎症化合物としての芳香族複素環化合物
MA40775A (fr) 2014-10-01 2017-08-08 Respivert Ltd Dérivé d'acide 4-(4-(4-phényluréido-naphtalén -1-yl) oxy-pyridin-2-yl) amino-benzoïque utilisé en tant qu'inhibiteur de la kinase p38
EP3302382A4 (en) * 2015-05-29 2019-02-20 Allergan, Inc. IMPLANT FOR THE TREATMENT OF OCULAR DISEASE
PE20220507A1 (es) * 2015-12-16 2022-04-07 Loxo Oncology Inc Compuestos utiles como inhibidores de cinasa
US10072034B2 (en) * 2016-04-06 2018-09-11 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP3448359B1 (en) * 2016-04-29 2023-06-07 Laurentia Holding B.V. Liposomal corticosteroids for topical injection in inflamed lesions or areas
CN106771117B (zh) * 2016-11-25 2018-09-14 王婧 一种中性粒细胞抗原底片的制备方法
US11479770B2 (en) 2017-10-05 2022-10-25 Fulcrum Therapeutics, Inc. Use of p38 inhibitors to reduce expression of DUX4
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010067130A1 (en) * 2008-12-11 2010-06-17 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
WO2011124930A1 (en) * 2010-04-08 2011-10-13 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
WO2011158042A2 (en) * 2010-06-17 2011-12-22 Respivert Limited Methods
WO2013050757A1 (en) * 2011-10-03 2013-04-11 Respivert Limited 1-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p38 map kinase inhibitors
WO2013050756A1 (en) * 2011-10-03 2013-04-11 Respivert Limited L-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p3i map kinase inhibitors

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU765412B2 (en) 1997-12-22 2003-09-18 Bayer Healthcare Llc Inhibition of RAF kinase using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas
US20080300281A1 (en) 1997-12-22 2008-12-04 Jacques Dumas Inhibition of p38 Kinase Activity Using Aryl and Heteroaryl Substituted Heterocyclic Ureas
DK1043995T3 (da) 1997-12-22 2007-03-05 Bayer Pharmaceuticals Corp Inhibering af p38 kinaseaktivitet ved anvendelse af aryl- og heteroaryl-substituerede, heterocykliske urinstoffer
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
WO2001004115A2 (en) 1999-07-09 2001-01-18 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Novel process for synthesis of heteroaryl-substituted urea compounds
US6492393B1 (en) 1999-11-16 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6492529B1 (en) 2000-01-18 2002-12-10 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Bis pyrazole-1H-pyrazole intermediates and their synthesis
DK1259485T3 (da) 2000-02-29 2006-04-10 Millennium Pharm Inc Benzamider og beslægtede inhibitorer for faktor Xa
CA2445003A1 (en) 2001-05-16 2002-11-21 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Diarylurea derivatives useful as anti-inflammatory agents
DE60219793T2 (de) 2001-07-11 2008-01-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Verfahren zur Behandlung von Cytokin-Vermittelten Erkrankungen
EP2324825A1 (en) 2002-02-11 2011-05-25 Bayer Healthcare LLC Aryl ureas with angiogenesis inhibiting activity
WO2003068229A1 (en) 2002-02-11 2003-08-21 Bayer Pharmaceuticals Corporation Pyridine, quinoline, and isoquinoline n-oxides as kinase inhibitors
WO2003072569A1 (en) 2002-02-25 2003-09-04 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. 1,4-disubstituted benzofused cycloalkyl urea compounds useful in treating cytokine mediated diseases
CN101010315A (zh) 2004-04-30 2007-08-01 拜耳制药公司 用于治疗癌症的取代的吡唑基脲衍生物
PL1778686T3 (pl) 2004-08-12 2009-04-30 Pfizer Pochodne triazolopirydynylosulfanylowe jako inhibitory kinazy MAP P38
GB0500435D0 (en) 2005-01-10 2005-02-16 Novartis Ag Organic compounds
AR058128A1 (es) 2005-10-28 2008-01-23 Lilly Co Eli Compuesto de pirazolil carbamato y formulacion farmaceutica que lo comprende
MY161576A (en) 2008-03-17 2017-04-28 Ambit Biosciences Corp Quinazoline derivatives as raf kinase modulators and methods of use thereof
GB0818033D0 (en) 2008-10-02 2008-11-05 Respivert Ltd Novel compound
PE20110598A1 (es) 2008-10-02 2011-08-31 Respivert Ltd Inhibidores de las enzimas de proteina cinasa activadas por mitogeno p38
CN102245604A (zh) 2008-12-23 2011-11-16 雅培制药有限公司 抗病毒化合物
CN102264737A (zh) 2008-12-23 2011-11-30 雅培制药有限公司 抗病毒化合物
WO2010072155A1 (zh) 2008-12-26 2010-07-01 复旦大学 一种嘧啶类衍生物及其制备方法和用途
GB0905955D0 (en) 2009-04-06 2009-05-20 Respivert Ltd Novel compounds
GB0921730D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Method of treatment
GB0921731D0 (en) 2009-12-11 2010-01-27 Respivert Ltd Theraputic uses
ES2676918T3 (es) 2010-03-15 2018-07-26 Ube Industries, Ltd. Método para producir un compuesto de amida
GB201005589D0 (en) 2010-04-01 2010-05-19 Respivert Ltd Novel compounds
JP5787976B2 (ja) 2010-04-08 2015-09-30 レスピバート・リミテツド Ｐ３８ｍａｐキナーゼ阻害剤としてのピラゾリルウレア
WO2011153553A2 (en) 2010-06-04 2011-12-08 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for kinase inhibition
GB201010193D0 (en) 2010-06-17 2010-07-21 Respivert Ltd Medicinal use
JP5973426B2 (ja) 2010-06-17 2016-08-23 レスピバート・リミテツド Ｐ３８ｍａｐｋ阻害剤を含む呼吸器用製剤
PT2788349T (pt) 2011-12-09 2017-02-02 Chiesi Farm Spa Inibidores de cinase
GB201214750D0 (en) 2012-08-17 2012-10-03 Respivert Ltd Compounds
GB201215357D0 (en) 2012-08-29 2012-10-10 Respivert Ltd Compounds
US20150210722A1 (en) 2012-08-29 2015-07-30 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014033447A2 (en) 2012-08-29 2014-03-06 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2890701B1 (en) 2012-08-29 2017-03-29 Respivert Limited Kinase inhibitors
WO2014076484A1 (en) 2012-11-16 2014-05-22 Respivert Limited Kinase inhibitors
US20160016934A1 (en) 2013-03-14 2016-01-21 Respivert Limited Kinase inhibitors
US9481648B2 (en) 2013-04-02 2016-11-01 Respivert Limited Kinase inhibitors
EP2981534B1 (en) 2013-04-02 2017-07-19 Topivert Pharma Limited Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles
JP6630280B2 (ja) 2014-02-14 2020-01-15 レスピバート・リミテツド 抗炎症化合物としての芳香族複素環化合物
MA40775A (fr) 2014-10-01 2017-08-08 Respivert Ltd Dérivé d'acide 4-(4-(4-phényluréido-naphtalén -1-yl) oxy-pyridin-2-yl) amino-benzoïque utilisé en tant qu'inhibiteur de la kinase p38

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010067130A1 (en) * 2008-12-11 2010-06-17 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
WO2011124930A1 (en) * 2010-04-08 2011-10-13 Respivert Limited P38 map kinase inhibitors
WO2011158042A2 (en) * 2010-06-17 2011-12-22 Respivert Limited Methods
WO2013050757A1 (en) * 2011-10-03 2013-04-11 Respivert Limited 1-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p38 map kinase inhibitors
WO2013050756A1 (en) * 2011-10-03 2013-04-11 Respivert Limited L-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p3i map kinase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
GB201214750D0 (en) 2012-10-03
EA201590391A1 (ru) 2015-06-30
EP2885284A1 (en) 2015-06-24
JP2015524837A (ja) 2015-08-27
MX2015002044A (es) 2016-01-22
US20150218137A1 (en) 2015-08-06
BR112015003218A2 (pt) 2019-09-24
WO2014027209A1 (en) 2014-02-20
CN105073725A (zh) 2015-11-18
US20140057915A1 (en) 2014-02-27
KR20150056777A (ko) 2015-05-27
AU2013303922A1 (en) 2015-02-19
CA2881914A1 (en) 2014-02-20
US9701670B2 (en) 2017-07-11
EP2885284B1 (en) 2016-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA025393B1 (ru) Пиразолилмочевины в качестве ингибиторов киназы
JP6841891B2 (ja) 抗炎症化合物としての芳香族複素環化合物
US9790209B2 (en) Kinase inhibitors
JP6514703B2 (ja) キナーゼインヒビターとして有用な尿素誘導体
EP2925742B1 (en) Kinase inhibitors
EP2890701B1 (en) Kinase inhibitors
EA027782B1 (ru) Ингибитор киназ
WO2016051186A1 (en) N-phenyl-3-quinazolin-6-yl-benzamide derivatives as p38 kinase inhibitors
EP2981534A1 (en) Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU