CN105073725A - 作为激酶抑制剂的吡唑基-脲 - Google Patents
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Abstract
提供式I的化合物，其中R、R1、Ra、Rb、Q、X和Y具有说明书中给出的含义，所述化合物具有抗炎活性(例如通过抑制p38促分裂原-活化蛋白激酶家族的一个或多个成员；Syk激酶；和酪氨酸激酶的Src家族的成员)并具有治疗用途，包括在药物组合中，特别是治疗炎性疾病，包括肺、眼和肠的炎性疾病。
Description
发明领域
本发明涉及化合物，其为p38促分裂原活化蛋白激酶酶家族例如其α和γ亚型的抑制剂(本文称为p38 MAP激酶抑制剂)，和Syk激酶和酪氨酸激酶的Src家族的抑制剂，并涉及它们在治疗中的用途，包括在药物组合中的用途，特别是治疗炎性疾病、特别是肺的炎性疾病例如哮喘和COPD，以及胃肠道的炎性疾病例如溃疡性结肠炎和克罗恩病，和眼的炎性疾病例如葡萄膜炎。
发明背景
本说明书中明显在先公开资料的列表或论述不应必然被认为承认所述资料是现有技术的一部分或者是共知常识。
已鉴定了四种p38 MAPK同种型(分别为α、β、γ和δ)，各自显示不同的组织表达模式。p38 MAPK α和β同种型普遍存在于体内，存在于许多不同的细胞类型中。α同种型关于其在炎症中的作用被良好表征。尽管在小鼠中使用化学遗传方法的研究表明，p38 MAPK β同种型在炎症中不起作用(O’Keefe,
S.J.等, J Biol Chem., 2007, 282(48):34663-71)，但其可能通过调节COX2表达而涉及疼痛机制(Fitzsimmons, B.L.等, Neuroreport,
2010, 21(4):313-7)。这些同种型受大量先前描述的小分子量化合物抑制。早期类型的抑制剂由于这些同种型的广泛组织分布(这导致化合物的多重脱靶(off-target)作用)而具有高度毒性。此外，由于临床研究中不可接受的安全概况，大量的抑制剂的开发被终止(Pettus, L.H.和Wurz,
R.P., Curr. Top. Med.
Chem., 2008, 8(16):1452-67)。由于这些不良作用随化学型而不同，并且这些化合物中的每种具有不同的激酶选择性模式，观察到的毒性可能是基于结构的，而非基于p38机制。
关于p38 MAPK γ和δ同种型了解较少，不像α和β同工酶，其在特定组织和细胞中表达。p38 MAPK-δ同种型在胰腺、睾丸、肺、小肠和肾中更高度表达。其还富含在巨噬细胞中，并且在中性粒细胞、CD4+ T细胞和在内皮细胞中可检测到(Shmueli, O.等, Comptes Rendus Biologies, 2003,326(10-11):1067-1072; Smith, S. J. Br.
J. Pharmacol., 2006, 149:393-404; Hale, K. K., J. Immunol.,
1999, 162(7):4246-52; Wang, X. S.等, J. Biol. Chem., 1997, 272(38):23668-23674)。极少了解p38 MAPK γ的分布，尽管其在脑、骨骼肌和心脏中以及在淋巴细胞和巨噬细胞中更高度表达(Shmueli, O.等, Comptes Rendus Biologies, 2003,326(10-11):1067-1072, (2003)/; Hale, K.
K., J. Immunol., 1999, 162(7):4246-52: Court, N. W.等, J. Mol. Cell. Cardiol., 2002,
34(4):413-26; Mertens, S.等, FEBS Lett., 1996, 383(3):273-6)。
p38 MAPK γ和p38 MAPK δ的选择性的小分子抑制剂当前不可得，尽管一种先前公开的化合物BIRB 796已知具有泛-同种型抑制活性。在高于抑制p38 MAPK α和p38 β所需浓度的化合物浓度下观察到p38 MAPK γ和δ同种型的抑制(Kuma, Y. J. Biol. Chem., 2005, 280:19472-19479)。此外，BIRB 796还通过上游激酶MKK6或MKK4损害p38 MAPK或JNK的磷酸化。Kuma讨论了以下可能性：由抑制剂与MAPK蛋白的结合所致的构象改变可能影响其磷酸化位点和下游激活剂的停靠位点两者的结构，从而损害p38 MAPK或JNK的磷酸化。
p38 MAP激酶被认为在参与引发和维持人类疾病的慢性、持续性炎症的许多信号转导途径中起关键作用，所述疾病例如严重哮喘、COPD (Chung, F., Chest, 2011, 139(6):1470-1479)和炎性肠病(IBD)。目前有大量文献证实，p38 MAP激酶被大量促炎性细胞因子活化，并且其活化导致其它促炎性细胞因子的募集和释放。事实上，一些临床研究的数据证实在用p38 MAP激酶抑制剂治疗期间患者的疾病活动的有益改变。例如，Smith描述p38 MAP激酶抑制剂对自人PBMC的TNFα (而非IL-8)释放的抑制作用。
还已经提议p38 MAP激酶抑制剂在治疗COPD和IBD中的用途。靶向p38 MAPK α/β的小分子抑制剂已经证明在减少以下的炎症的各种参数中有效：
-自COPD患者获得的细胞和组织，所述患者通常是皮质类固醇不敏感的(Smith, S. J., Br. J. Pharmacol., 2006, 149:393-404)；
-自IBD患者的活检组织(Docena, G.等, J. of Trans. Immunol., 2010, 162:108-115)；和
-体内动物模型(Underwood, D. C.等, Am. J. Physiol.,
2000, 279:L895-902; Nath, P.等, Eur. J. Pharmacol., 2006, 544:160-167.)。
Irusen和同事们还建议了通过减少细胞核中糖皮质激素受体(GR)的结合亲和力，p38 MAPKα/β参与皮质类固醇不敏感性的可能性(Irusen, E.等, J. Allergy Clin. Immunol., 2002, 109:649-657)。已描述了大量p38 MAP激酶抑制剂包括AMG548 、 BIRB 796、VX702、SCIO469和SCIO323 的临床经验(Lee, M. R.和Dominguez, C., Current Med. Chem., 2005, 12:2979-2994.)。然而，阻碍p38 MAP激酶抑制剂用于治疗人慢性炎性疾病的主要障碍是在患者中观察到的毒性。这足够严重而导致撤销许多进行中的化合物的临床研发，包括所有上文特别提及的那些。
COPD是其中潜在炎症报告为对吸入的皮质类固醇的抗炎作用有显著抵抗的病况。因此，治疗COPD的优良策略是开发具有固有的抗炎作用和增加COPD患者的肺组织对吸入的皮质激素的敏感性的能力两者的介入。Mercado的近期公布(Mercado, N.等, Mol. Pharmacol., 2011, 80(6):1128-1135)证实沉默p38 MAPK γ具有恢复对皮质类固醇的敏感性的可能。因此，使用p38 MAP激酶抑制剂以治疗COPD和严重哮喘可能对患者具有双重益处。
诊断患有哮喘或患有COPD的许多患者持续遭受不受控制的症状和其医学病况的恶化，这可导致住院。尽管使用最先进的当前可得的治疗方案(包括吸入皮质类固醇和长效β-激动剂的组合产品)，这还是发生。近十年积累的数据表明，有效管理肺部疾病的潜在炎性组分的失败是恶化发生的最可能原因。鉴于已确定的皮质类固醇作为抗炎药的功效，以及特别是吸入的皮质类固醇在治疗哮喘中的功效，这些发现引起深度的研究。结果研究已确定，一些环境损害引起患者肺中的皮质类固醇-不敏感的炎性改变。一个实例是自病毒介导的上呼吸道感染(URTI)引起的反应，所述感染在与哮喘和COPD相关的死亡率增加中具有特别的重要性。
流行病学研究揭示，上呼吸道的病毒感染和已诊断患有慢性呼吸道疾病的患者所遭受的高百分比的恶化之间强相关。在该方面，一些最有说服力的数据来源于患有哮喘的儿童的纵向研究(Papadopoulos, N.G., Papi, A., Psarras, S.和Johnston, S.L., Paediatr.
Respir. Rev,. 2004, 5(3):255-260)。多种其它的研究支持以下结论：病毒感染可加剧恶化和增加疾病严重性。例如，用鼻病毒的实验性临床感染已报道在哮喘中引起组胺的支气管高反应性，其对用皮质类固醇的治疗是无反应的(Grunberg, K., Sharon, R.F.等, Am. J. Respir.
Crit. Care Med., 2001, 164(10):1816-1822)。进一步的证据来自于在囊性纤维化的患者的疾病恶化和HRV感染之间观察到的相关性(Wat,
D., Gelder, C.等, J.
Cyst. Fibros,. 2008, 7:320-328)。还与该大量数据一致的是以下发现：呼吸病毒感染，包括鼻病毒，代表与儿科肺移植接受者中的12个月存活率负相关的独立的风险因素(Liu, M., Worley, S.等, Transpl. Infect. Dis,. 2009, 11(4):304-312)。
临床研究表明，病毒载量与观察到的症状和并发症成比例，并且暗示与炎症的严重性成比例。例如，在实验性鼻病毒感染后，下呼吸道症状和支气管高反应性与病毒载量显著相关(Message, S.D., Laza-Stanca, V.等, PNAS, 2008; 105(36):13562-13567)。类似地，在缺少其它病毒剂的情况下，当病毒载量在免疫活性儿科患者中高时，鼻病毒感染通常与下呼吸道感染和喘鸣相关(Gerna, G., Piralla, A.等, J. Med. Virol,.
2009, 81(8):1498-1507)。
令人感兴趣地是，近期已报道对鼻病毒的在先暴露降低由人肺泡巨噬细胞中的细菌产物引起的细胞因子反应(Oliver, B.G., Lim, S.等, Thorax, 2008,
63:519-525)。此外，已经记载用鼻病毒感染鼻上皮细胞促进细菌包括金黄色葡萄球菌(S.
aureus)和流感杆菌(H.
influenzae)的附着(Wang, J.H., Kwon, H.J.和Yong, J.J., The
Laryngoscope, 2009, 119(7):1406-1411)。这样的细胞作用可促进患有下呼吸道感染接着上呼吸道感染的患者的可能性增加。因此，治疗上相关的是，集中于新的介入降低各种体外系统中的病毒载量的能力，作为其在临床环境中的益处的替代预测因子。
上呼吸道的鼻病毒感染可导致严重次级并发症的高危人群，不局限于慢性呼吸疾病的患者。他们包括例如，易患下呼吸道感染的免疫力缺乏患者以及面对急性危及生命的发烧的经历化学疗法的患者。还表明，其它慢性疾病，例如糖尿病，与免疫防御缺乏反应相关。因此这增加获得呼吸道感染的可能性和增加住院的可能性两者(Peleg, A.Y., Weerarathna, T.等, Diabetes Metab.
Res. Rev., 2007, 23(1):3-13;
Kornum, J.B., Reimar, W.等, Diabetes Care, 2008, 31(8):1541-1545)。
尽管上呼吸道病毒感染是患有潜在疾病或其它风险因素的那些患者中大量发病率和死亡率的原因；但它们还代表在普通人群中显著的健康护理负担，并且是休学和失业的主要原因(Rollinger, J.M.和Schmidtke,
M., Med. Res. Rev., 2010, Doi
10.1002/med.20176)。这些考虑清楚表明，急切需要对当前疗法具有改进的功效的新的药物，以预防和治疗鼻病毒介导的上呼吸道感染。一般而言，用于发现改进的抗病毒药的策略已靶向病毒产生的各种蛋白，作为治疗干预点。然而，各种各样的鼻病毒血清型使这成为特别具有挑战性的寻求方法，并且可以解释当前用于预防和治疗鼻病毒感染的药物仍未获得任何监管机构批准的原因。
病毒进入宿主细胞与大量细胞内信号转导途径的活化有关，所述途径受特定激酶的相对活化和失活的控制，所述激酶被认为在引发炎性过程(综述于Ludwig,
S, 2007; Signal Transduction, 7:81-88)和病毒繁殖以及随后的释放中起突出作用。
先前已公开了抑制c-Src和Syk激酶两者的活性的化合物是针对鼻病毒复制的有效药(Charron, C.E.等, WO 2011/158042)并且抑制p59-HCK的化合物有效针对流感病毒复制(Charron, C.E.等, WO 2011/070369)。因为上文概述的原因，以及p38 MAPK的抑制，对于经设计以治疗慢性呼吸疾病的化合物，这些是特别有利的固有性质。
某些p38 MAPK抑制剂还已描述为呼吸道合胞体病毒的复制的抑制剂(Cass, L.等, WO 2011/158039)。
IBD的精确病因学未知，但认为受遗传和环境因素支配，所述因素相互作用以促进过度和较弱控制的针对腔微生物群组分的粘膜炎性反应。该反应通过来自外周的炎性中性粒细胞、树突细胞和T-细胞的侵润介导。由于p38在炎性细胞中的普遍表达，其成为IBD模型研究中的明显靶标。调查p38抑制剂在IBD动物模型中的功效的研究和IBD患者的人活检表明，p38可能是治疗IBD的靶标(Hove, T. ten等, Gut, 2002, 50:507-512, Docena, G.等, J. of Trans. Immunol,. 2010, 162:108-115)。然而，这些发现不完全与报告p38抑制剂无作用的其它组一致(Malamut G.等, Dig. Dis. Sci, 2006, 51:1443-1453)。使用p38 α抑制剂BIRB796的克罗恩病患者的临床研究证实潜在的临床益处，具有C-反应蛋白水平的改进。然而，该改进是暂时的，在第8周返回基线(Schreiber, S.等, Clin. Gastro. Hepatology, 2006,
4:325-334)。在患有严重克罗恩病的患者中调查CNI-1493 (一种p38和Jnk抑制剂)功效的小临床研究表明经8周临床评分的显著改进(Hommes, D.等Gastroenterology. 2002 122:7-14)。
T细胞已知在介导胃肠道的炎症中起关键作用。Powrie和同事们的先驱工作证实，将幼稚CD4+细胞转移至严重免疫力缺乏的免疫缺陷(SCID)动物中导致发生依赖于共生细菌的存在的结肠炎(Powrie F.等 Int Immunol. 1993 5:1461-71)。此外，自IBD患者的粘膜研究表明CD4+细胞的增量调节，其是Th1 (IFNγ/IL-2)或Th2
(IL5/TGFβ)偏好的，取决于患者患有克罗恩病并还是溃疡性结肠炎(Fuss IJ.等 J Immunol. 1996 157:1261-70.)。类似地，T细胞已知在眼的炎性病症中起关键作用，数个研究报道在BehÇets患者的血清中T细胞相关的细胞因子水平增加(IL-17和IL-23)(Chi W.等Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008 49:3058-64)。作为支持，Direskeneli和同事们证实BehÇets患者在其外周血中Th17细胞增加和Treg细胞减少(Direskeneli H.等J
Allergy Clin Immunol. 2011 128:665-6)。
抑制T细胞活化的一种方法是靶向参与T细胞受体信号转导复合物的活化的激酶。Syk和Src家族激酶已知在该途径中起关键作用，其中Src家族激酶Fyn和Lck是T细胞受体下游被活化的第一信号转导分子(Barber EK.等PNAS 1989 86:3277-81)。它们引发T细胞受体的酪氨酸磷酸化，导致Syk家族激酶ZAP-70的募集。动物研究表明，ZAP-70敲除导致SCID表型(Chan AC等Science. 1994 10;264(5165):1599-601)。
用Syk抑制剂Fostamatinib的类风湿性关节炎患者的临床试验证实，Syk作为显示临床结果改进和IL-6和MMP-3血清水平降低的患者的抗炎靶标的可能性(Weinblatt ME.等Arthritis Rheum. 2008 58:3309-18)。Syk激酶在造血系统的细胞中广泛表达，在B细胞和成熟T细胞中最显著。通过与基于免疫受体酪氨酸的激活(ITAM)基序相互作用，其在调节T细胞和B细胞扩大以及介导炎性细胞的免疫受体信号转导中起重要作用。Syk激活导致IL-6和MMP释放– 通常发现炎性介质在炎性病症包括IBD和类风湿性关节炎中增量调节(Wang YD.等World
J Gastroenterol 2007; 13: 5926-5932, Litinsky I等Cytokine. 2006 Jan 33:106-10)。
除了在控制促炎性途径的活动的细胞信号转导事件中起关键作用以外，激酶目前还被认为调节大量细胞功能的活动。最近被讨论的那些包括维持DNA完整性(Shilo, Y. Nature Reviews Cancer, 2003, 3:155-168)和协调细胞分裂的复杂过程。最近研究结果的说明是描述一组作用于所谓的“Olaharsky激酶”的抑制剂对体外微核形成的频率的影响的出版物(Olaharsky, A.J.等, PLoS Comput. Biol.,2009, 5(7):e1000446.)。微核形成涉及有丝分裂过程的破坏或与其有关，因此是不合乎需要的潜在毒性表现。糖原合酶激酶3α (GSK3α)的抑制经发现是特别显著的因子，其增加激酶抑制剂促进微核形成的可能性。最近，亦报道激酶GSK3β用RNAi抑制促进微核形成(Tighe, A.等, BMC 细胞 Biology,2007, 8:34)。
通过优化剂量和/或通过改变给药途径，有可能减弱自与Olaharsky激酶例如GSK3α的药物相互作用产生的有害作用。然而，更有利地是，鉴定治疗有用的分子，所述分子显示出针对这些脱靶酶的低或不可检测的活性，因而引起很少破坏或不破坏有丝分裂过程，如在有丝分裂测定法中所测量。
考虑到上文引用的文献，明显的是，仍有需要鉴定和开发新的p38 MAP激酶抑制剂，相比于目前可得的治疗，其具有改进的治疗潜力。合乎需要的化合物是显示优良治疗指数的那些，其通过至少发挥与先前的药物等同的有效作用，但在一个或多个方面，在相关的治疗剂量下具有较少毒性。本发明因此特别提供这样的新化合物，其抑制p38 MAP激酶(例如具有某些亚型特异性)的酶活性，任选连同抑制Src家族内的Syk激酶和酪氨酸激酶(特别是c-Src)的酶活性，从而具有良好的抗炎性质，和适合用于疗法。
在一个或多个实施方案中，与其它先前公开的变构p38 MAP激酶抑制剂例如BIRB796 (Pargellis, C.等, Nature Struct. Biol., 2002, 9(4):268-272)相比，所述化合物显示长的作用持续时间和/或作用持久性。
发明简述
在第一方面，本发明提供式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，包括其所有立体异构体和互变异构体
其中：
Q表示噻吩基、苯基或吡啶基，其每一个可任选具有1-3个独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、NH2、N(H)-C1-6烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环的取代基；
X表示CH或N，
Y表示NR2R3或任选通过杂原子连接的4-10杂环，其中所述杂环具有0或1个选自卤代、OH、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C0-3亚烷基-O-C0-6烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3卤代烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基杂芳基、C(O)C1-6烷基、SO2NR4R5、C0-3亚烷基-NR4R5、C0-3亚烷基-NR4SO2R5和C0-3亚烷基-NR4C(O)R5的取代基；
R是
C1-6烷基，
C2-6烯基，
C1-6羟基烷基，
C1-6卤代烷基，
被C1-3烷氧基或氰基取代的C1-6烷基，
任选被C1-3烷基取代的C0-2亚烷基-C3-8环烷基，或
任选被C1-3烷基取代的4-5元杂环；
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环，其任选被一个或多个选自C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氰基和卤代的取代基取代，
或者Ra和Rb中的一个表示H、卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基和另一个独立表示卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R1选自氢、OH、卤素、CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、C0-3亚烷基-C3-6环烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3亚烷基-C3-6环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C0-3亚烷基-SO2C1-3烷基、C0-3亚烷基-SO2NR4R5和C0-3亚烷基-NR6R7和C0-3亚烷基-NCOR6R7；
R2和R3各自独立选自H、C1-8烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-6亚烷基-4-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-4-10元杂环，条件是当所述杂环通过氮连接时，在将所述氮原子连接至取代基的必需O原子上的亚烷基链中存在至少两个C原子，其中独立地，各个烷基或亚烷基任选具有1个氧代取代基，和在烷基或亚烷基链中的任选一个或两个碳原子可各自被选自O、N或S(O)p的杂原子替代，使得当所述烷基或亚烷基包含胺时，所述氨基是叔胺，
其中各个4-10元杂环任选被1或2个独立选自卤代、OH、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C0-3亚烷基-O-C0-6烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3卤代烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基杂芳基、C(O)C1-6烷基、SO2NR8R9和C0-3亚烷基-NR8R9、C0-3亚烷基-NR8SO2R9和C0-3亚烷基-NR8C(O)R9的基团取代；
R4是H或C1-4烷基；
R5是H或C1-4烷基；
R6是H或C1-4烷基、C(O)C1-3烷基和SO2C1-3烷基；
R7是H或C1-4烷基、C(O)C1-3烷基和SO2C1-3烷基；
R8是H或C1-4烷基；和
R9是H或C1-4烷基；
P是0、1或2。
本发明的化合物是特别具有α亚型的p38 MAP激酶的抑制剂。
在至少一些实施方案中，在测定法例如Kinomescan方法中，本发明的化合物具有低的B-Raf结合，例如在500 nM时低于40%的激酶结合抑制，例如30%抑制或更少。
B-Raf是丝氨酸/苏氨酸-特异性蛋白激酶的Raf激酶家族的成员。该蛋白在调节MAP激酶/ERK信号转导途径中起作用，所述途径影响细胞分裂、分化和分泌。该基因的突变与人类中的癌症有关(Davies, H.等, Nature, 2002, 417(6892):949–54)。
细胞信号转导可绕过具有不合需要的后果的B-Raf的选择性抑制(Lo, R.S., Cell Research, advance online
publication 8 May 2012; doi: 10.1038/cr.2012.78)。因此优选的是，意图用作抗炎药的激酶抑制剂应具有与B-Raf相互作用的最小可能性。
本发明化合物还显示在结合测定法中与GSK3α激酶的低亲和力，这被认为在治疗背景中是有益的，特别是与使体内毒性降到最低有关。
在至少一些实施方案中，本发明的化合物具有p59-HCK抑制活性，其亦可增加它们的有利治疗特征。
发明详述
本文所用的烷基指直链或支链烷基，例如而不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、正丁基和叔丁基。在一个实施方案中烷基指直链烷基。
本文所用的烷氧基指直链或支链烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基。本文所用的烷氧基还延伸至其中所述氧原子或一个氧原子(例如单个氧原子)位于烷基链内的实施方案，例如-C1-3烷基OC1-3烷基，例如–CH2CH2OCH3或–CH2OCH3。因此，在一个实施方案中烷氧基通过碳与分子的剩余部分连接，例如–C6-n烷基-O-C6-m烷基，其中n=1-5、m=1-5和n+m=6-10。在一个实施方案中烷氧基通过氧与分子的剩余部分连接，例如-OC1-6烷基。在一个实施方案中，本公开内容涉及直链烷氧基。在一个实施方案中烷氧基通过氧与分子的剩余部分连接，但烷氧基含有另一个氧原子，例如–OCH2CH2OCH3。
卤代或卤素包括氟代、氯代、溴代或碘代，特别是氟代、氯代或溴代，尤其是氟代或氯代。
被卤代取代的烷基(卤代烷基)，如本文所用，是指具有1-6个卤素原子例如1-5个卤素的烷基，例如全卤代烷基，特别是全氟代烷基，更特别是–CF2CF3或CF3。
被羟基取代的烷基(羟基烷基)，如本文所用，是指其上具有1-3个羟基例如1或2个羟基取代基的烷基，例如–CH2CH2OH、–C(CH3)CH2OH、–C(CH3)2CH2OH等。
被卤代取代的烷氧基(卤代烷氧基)，如本文所用，是指具有1-6个卤素原子例如1-5个卤素的烷氧基，例如全卤代烷氧基，特别是全氟代烷氧基，更特别是–OCF2CF3或-OCF3。
除非另外指明，否则如本文所用的亚烷基是直链或支链碳连接基团，例如在两个其它部分之间包括亚甲基。对本领域技术人员显然的是，所定义的基团例如C2-8烯基和C2-8炔基可包含亚烷基部分。为避免疑惑，术语"正亚烷基"，当在本文中使用时，是指直链亚烷基。
对本领域技术人员显然的是，如技术上合适的，杂原子可替换伯、仲或叔碳，即CH3、-CH2-或–CH–基团，并且位置合适时，氢或烷基或亚烷基链中的分支将填充杂原子的价位，例如在末端伯碳被氧杂原子替换时，末端基团将是醇。
C1-6烷基包括C1、C2、C3、C4、C5和C6。
C1-6烷氧基包括C1、C2、C3、C4、C5和C6。
术语5-10元杂环，如本文所用，是指5-10元饱和或部分不饱和非芳族环，其包含一个或多个例如1、2、3或4个独立选自O、N和S的杂原子，其中环中的任选一个或两个碳可带有氧取代基。不用于形成或保留环结构的杂原子的任何价位可填充有氢或取代基(合适时)。因此，杂环上的任选取代基可连接至碳或在杂原子上，例如氮(合适时)。5-10元杂环的实例包括吡咯啉、吡咯烷、四氢呋喃、硫杂环庚烷、氧杂环庚烷、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、二氧杂环己烷、四氢噻吩、吡唑啉、咪唑啉、吡唑烷、氧代咪唑烷、二氧杂环戊烷、噻唑烷、异噁唑烷、二氢吡喃、二氢茚、二氢异苯并呋喃、异二氢吲哚-1-酮、色满、1,2,3,4-四氢喹啉、2,3-二氢苯并[b][1,4]二噁英氮杂环辛烷(dioxineazocane)等。
术语5-6元杂环，如本文所用，指5-6元饱和或部分不饱和非芳族环，其包含一个或多个例如1、2、3或4个独立选自O、N和S的杂原子，其中环中的任选一个或两个碳可带有氧代取代基。C5-6杂环的定义，如本文所用，指5-6元饱和或部分不饱和非芳族碳环，其包含一个或多个例如1、2、3或4个独立选自O、N和S的杂原子，其中每个杂原子置换碳原子和任选一个或两个碳可带有氧代取代基。明显的是，合适时，不用于形成或维持环结构的杂原子的任何价位可被氢或取代基填充。因此，杂环上的取代基可以在碳上或在杂原子上，例如合适时为N。杂环和C5-6杂环的实例包括吡咯啉、吡咯烷、四氢呋喃、四氢噻吩、吡唑啉、咪唑啉、吡唑烷、咪唑烷、氧代咪唑烷、二氧杂环戊烷、噻唑烷、异噁唑烷、吡喃、二氢吡喃、哌啶、哌嗪、吗啉、二氧杂环己烷、硫代吗啉和氧硫杂环己烷。
当用于本文时，基团吗啉基合适地表示N-吗啉基。
在一个实施方案中，提供式(Ia1)的化合物，或者特别是式(Ia2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q和Y如上文对式(I)化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Ib1)的化合物，或者特别是式(Ib2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q、X和Y如上文对式(I)化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Ic1)的化合物，或者特别是式(Ic2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q和Y如上文对式(I)化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Id1)的化合物，或者特别是式(Id2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q和Y如上文对式(I)的化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Ie1)的化合物，或者特别是式(Ie2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q和Y如上文对式(I)的化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(If1)的化合物，或者特别是式(If2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、Q和Y如上文对式(I)的化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Ig1)的化合物，或者特别是式(Ig2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、X、Q和Y如上文对式(I)的化合物所定义。
在一个实施方案中，提供式(Ih1)的化合物，或者特别是式(Ih2)的化合物：
其中R、Ra、Rb、R1、X、Q和Y如上文对式(I)的化合物所定义。
通常在取代基例如C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环中，例如如对R2或R3所定义，当所述杂环通过氮连接时，则所述基团将定义为C0-3亚烷基-O-C2-6亚烷基-5-10元杂环。
通常当Q包括被C1-6亚烷基-5-10元杂环或C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环取代的苯基或吡啶时，则R2和R3独立选自H、C1-8烷基，其中独立地，各个烷基或亚烷基任选带有1个氧代取代基，并且在烷基或亚烷基链上的任选至多两个碳原子可被选自O、N或S(O)p的杂原子置换，使得当烷基或亚烷基包含胺时，所述氨基是叔胺。
在一个实施方案中，Q表示带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环(例如一个或两个取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环)。
在一个实施方案中，Q表示带有甲基、甲氧基、-N(CH3)2或–OCH2CH2OCH3 (例如甲基、甲氧基或–OCH2CH2OCH3)的苯基，例如所述取代基之一特别是在对位上。
在一个实施方案中，Q是二甲基苯基，例如其中甲基取代基在间位和对位上。
在一个实施方案中，Q表示带有一个取代基的吡啶基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环。
在一个实施方案中，Q是甲氧基吡啶基，例如6-甲氧基吡啶-3-基。
在一个实施方案中，Q表示任选带有一个取代基的噻吩基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环。
在一个实施方案中Y是NR2R3。
在一个实施方案中Y是5-10元杂环，例如带有C1-6烷基取代基的6元杂环。
在一个实施方案中Y是吗啉基、哌嗪基或(甲基)哌嗪基，例如4-甲基哌嗪-1-基。
在一个实施方案中R是乙基、异丙基、叔丁基、环丙基、1-甲基环丙基、丙烯-2-基、CF3、C2F5、氧杂环丁烷基、(甲基)氧杂环丁烷基或四氢呋喃基(例如乙基、异丙基、叔丁基、环丙基、1-甲基环丙基、CF3、C2F5、氧杂环丁烷基、(甲基)氧杂环丁烷基或四氢呋喃基)，例如异丙基或叔丁基。
在一个实施方案中R是C(CH3)2CH2OH或CH(CH3)CH2OH。
在一个实施方案中R是1-羟基-2-甲基丙烷-2-基。
在一个实施方案中R1是H、Br、Cl、CH3、CN、N(CH3)2、CF3、乙炔基、OCH3、OCH2CH3或OCH2(CH3)2。
通常在基团NR2R3中结合到氮的取代基R2和R3的原子，独立选自氢和碳。
在一个实施方案中R2是H、CH3、-CH2CH2CH3、-(CH2)2OH、-(CH2)2OCH3、-(CH2)2N(CH3)2、-(CH2)2吗啉基、-(CH2)2哌嗪基或-(CH2)2(4-甲基)哌嗪基。
在一个实施方案中R3是H或CH3。
在一个实施方案中R4是H或甲基。
在一个实施方案中R5是H或甲基。
在一个实施方案中R6是H或甲基。
在一个实施方案中R7是H或甲基。
在一个实施方案中R8是H或甲基。
在一个实施方案中R9是H或甲基。
可提及的本发明的实施方案包括式(I)、(Ia1)、(Ia2)、(Ib1)、(Ib2)、(Ic1)、(Ic2)、(Id1)、(Id2)、(Ie1)、(Ie2)、(If1)、(If2)、(Ig1)、(Ig2)、(Ih1)和(Ih2)的化合物，其中：
Q表示带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环(例如Q表示被甲基、甲氧基、-N(CH3)2或–OCH2CH2OCH3一取代的苯基(例如在对位上)或被甲基二取代的苯基(例如在间位和对位上))，
或者Q表示带有一个取代基的吡啶基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环(例如Q表示甲氧基吡啶基，例如6-甲氧基吡啶-3-基)；
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环，或Ra和Rb中的一个表示卤代、C1-3烷基或C1-3卤代烷基，和另一个独立表示卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基(例如Ra和Rb两者表示甲基、氟代或氯代)；
R表示
任选被羟基、氰基或甲氧基或被一个或多个氟代基团取代的C1-6烷基，
C2-6烯基，或者
C3-4环烷基，其后一基团任选被C1-3烷基取代
(例如R表示乙基、异丙基、正丙基、叔丁基、环丙基、1-甲基环丙基、CF3、C2F5、-C(CH3)2CF3、氧杂环丁烷基、(甲基)氧杂环丁烷基、四氢呋喃基或丙烯-2-基，例如异丙基、丙烯-2-基或叔丁基)；和/或
R1表示H、卤素(例如F、Br或Cl)、CN、C1-4烷基(例如甲基或乙基)、C2-4炔基(例如乙炔基)、C1-4氟代烷基(例如CF3)、C1-4烷氧基(例如OCH3、OCH2CH3或OCH2(CH3)2)或NR6R7 (例如N(CH3)2) (例如R1表示乙炔基或OCH3)。
可提及的本发明更具体的实施方案包括式(I)、(Ia1)、(Ia2)、(Ib1)、(Ib2)、(Ic1)、(Ic2)、(Id1)、(Id2)、(Ie1)、(Ie2)、(If1)、(If2)、(Ig1)、(Ig2)、(Ih1)和(Ih2)的化合物，其中：
Q表示被C1-6烷基(例如甲基)、C1-6烷氧基(例如甲氧基)、C1-6卤代烷氧基或N(C1-6烷基)2 (例如N(CH3)2)一取代(例如在对位上)的苯基(例如Q表示在对位上被甲基、甲氧基或二甲基氨基取代的苯基)；
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环；
R表示任选被一个或多个氟代基团取代的C1-4烷基、C3-4烯基或C3-4环烷基，后一基团任选被甲基取代(例如R表示乙基、环丙基、CF3、C2F5、-C(CH3)2CF3或者特别是异丙基、1-甲基环丙基、丙烯-2-基或叔丁基)；和/或
R1表示Br、Cl、CN、甲基、乙基、CF3、OCH2CH3、OCH2(CH3)2、N(CH3)2或特别是乙炔基或OCH3。
本发明具体的实施方案包括以下。
(1) 如上文定义的式(I)、(Ia1)、(Ia2)、(Ib1)、(Ib2)、(Ic1)、(Ic2)、(Id1)、(Id2)、(Ie1)、(Ie2)、(If1)、(If2)、(Ig1)、(Ig2)、(Ih1)或(Ih2)的化合物或其药学上可接受的盐。
(2) 实施方案(1)的化合物或盐，其中Q表示带有一个或两个取代基的苯基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环(例如一个或两个取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环)。
(3) 实施方案(1)或实施方案(2)的化合物或盐，其中Q表示带有甲基、甲氧基、-N(CH3)2或–OCH2CH2OCH3 (例如甲基、甲氧基或–OCH2CH2OCH3)的苯基。
(4) 实施方案(1)-(3)中任一项的化合物或盐，其中Q表示在对位上被甲基、甲氧基、-N(CH3)2或–OCH2CH2OCH3 (例如被甲基、甲氧基或–OCH2CH2OCH3)取代的苯基。
(5) 实施方案(1)-(3)中任一项的化合物或盐，其中Q是二甲基苯基，例如其中甲基取代基在间位和对位上。
(7) 实施方案(1)的化合物或盐，其中Q表示带有一个取代基的吡啶基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环。
(8) 实施方案(7)的化合物或盐，其中Q是甲氧基吡啶基，例如6-甲氧基吡啶-3-基。
(9) 实施方案(1)的化合物或盐，其中Q表示任选带有一个取代基的噻吩基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C1-6亚烷基-5-10元杂环。
(10) 实施方案(1)-(9)中任一项的化合物或盐，其中Y是NR2R3。
(11) 实施方案(1)-(9)中任一项的化合物或盐，其中Y是5-10元杂环，例如带有C1-6烷基取代基的6元杂环。
(12) 实施方案(11)的化合物或盐，其中Y是吗啉基、哌嗪基或(甲基)哌嗪基，例如4-甲基哌嗪-1-基。
(13) 实施方案(1)-(12)中任一项的化合物或盐，其中R是乙基、异丙基、叔丁基、环丙基、1-甲基环丙基、CF3、C2F5、氧杂环丁烷基、(甲基)氧杂环丁烷基或四氢呋喃基，例如异丙基或叔丁基。
(14) 实施方案(1)-(12)中任一项的化合物或盐，其中R是C(CH3)2CH2OH或CH(CH3)CH2OH。
(15) 实施方案(1)-(12)中任一项的化合物或盐，其中R是1-羟基-2-甲基丙烷-2-基。
(16) 实施方案(1)-(15)中任一项的化合物或盐，其中R1是H、Br、Cl、CH3、CN、N(CH3)2、CF3、乙炔基、OCH3、OCH2CH3或OCH2(CH3)2。
(17) 实施方案(1)-(16)中任一项的化合物或盐，其中R2是H、CH3、-CH2CH2CH3、-(CH2)2OH、-(CH2)2OCH3、-(CH2)2N(CH3)2、-(CH2)2吗啉基、-(CH2)2哌嗪基或-(CH2)2(4-甲基)哌嗪基。
(18) 实施方案(1)-(17)中任一项的化合物或盐，其中R3是H或CH3。
(19) 实施方案(1)-(18)中任一项的化合物或盐，其中R4是H或甲基。
(20) 实施方案(1)-(19)中任一项的化合物或盐，其中R5是H或甲基。
(21) 实施方案(1)-(20)中任一项的化合物或盐，其中R6是H或甲基。
(22) 实施方案(1)-(21)中任一项的化合物或盐，其中R7是H或甲基。
(23) 实施方案(1)-(22)中任一项的化合物或盐，其中R8是H或甲基。
(24) 实施方案(1)-(23)中任一项的化合物或盐，其中R9是H或甲基。
(25) 实施方案(1)和(10)-(24)中任一项的化合物或盐，其中Q表示被C1-6烷基(例如甲基)、C1-6烷氧基(例如甲氧基)、C1-6卤代烷氧基或N(C1-6烷基)2 (例如N(CH3)2) (例如在对位上)一取代的苯基。
(26) 实施方案(25)的化合物或盐，其中Q表示在对位上被甲基、甲氧基或二甲基氨基取代的苯基。
(27) 实施方案(1)-(26)中任一项的化合物或盐，其中Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环。
(28) 实施方案(1)-(10)和(13)-(27)中任一项的化合物或盐，其中R3表示H。
(29) 实施方案(1)-(12)和(16)-(28)中任一项的化合物或盐，其中R表示任选被一个或多个氟代基团取代的C1-4烷基、C3-4烯基或C3-4环烷基，后一基团任选被甲基取代(例如R表示乙基、环丙基、CF3、C2F5、-C(CH3)2CF3或者特别是异丙基、1-甲基环丙基、丙烯-2-基或叔丁基)。
(30) 实施方案(1)-(15)和(17)-(29)中任一项的化合物或盐，其中R1表示Br、Cl、CN、甲基、乙基、CF3、OCH2CH3、OCH2(CH3)2、N(CH3)2、乙炔基或OCH3。
(31)实施方案(30)的化合物或盐，其中R1表示乙炔基或OCH3。
(32) 上文实施方案(1)-(31)中任一项的化合物或盐，其中所述化合物具有结构式
其中：
Q表示噻吩基、苯基或吡啶基，其中任一个可任选带有1-3个取代基，其独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环；
R是C1-6烷基、C1-6羟基烷基、C1-6卤代烷基、任选被C1-3烷基取代的C0-2亚烷基-C3-8环烷基、C1-6卤代烷基或任选被C1-3烷基取代的4-5元杂环；和/或
R2和R3各自独立选自H、C1-8烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-6亚烷基-4-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-4-10元杂环，条件是当所述杂环通过氮连接时，将氮原子连接至取代基的必需O原子上的亚烷基链上存在至少两个C原子，其中独立地，各个烷基或亚烷基任选带有1个氧代取代基，并且烷基或亚烷基链上的任选一个或两个碳原子可各自被选自O、N或S(O)p的杂原子置换，使得当所述烷基或亚烷基包含胺时所述氨基是叔胺，
其中各个4-10元杂环任选被1或2个独立选自卤代、OH、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C0-3亚烷基-O-C0-6烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3卤代烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基杂芳基、C(O)C1-6烷基、SO2NR8R9和C0-3亚烷基-NR8R9、C0-3亚烷基-NR8SO2R9和C0-3亚烷基-NR8C(O)R9的基团取代。
(33)上文实施方案(1)-(31)中任一项的化合物或盐，其中：
Q表示噻吩基、苯基或吡啶基，其中任一个被NH2、N(H)-C1-6烷基或N(C1-6烷基)2取代，和任选还被1或2个取代基取代，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、NH2、N(H)-C1-6烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环；
R表示C2-6烯基(例如C3-4烯基例如丙烯-2-基)或被C1-3烷氧基或氰基取代的C1-6烷基(例如C3-6仲烷基被甲氧基或氰基取代，例如-C(CH3)2OCH3或-C(CH3)2CN)；和/或
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环，其被一个或多个取代基取代，所述取代基选自C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氰基和卤代，
或者Ra和Rb之一表示H、卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基和另一个独立表示卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基。
(34)
上文实施方案(1)-(33)中任一项的化合物或盐，其中R表示：
C1-6正烷基，
C4-6支链烷基，
C2-6烯基，
C1-6羟基烷基，
C1-6卤代烷基，
被C1-3烷氧基或氰基取代的C1-6烷基，
任选被C1-3烷基取代的C0-2亚烷基-C3-8环烷基，或者
任选被C1-3烷基取代的4-5元杂环
(例如R表示乙基、环丙基、CF3、C2F5、-C(CH3)2CF3或者特别是1-甲基环丙基、丙烯-2-基或叔丁基)。
在一个实施方案中，提供如上文定义的式(I)、(Ib2)、(Ic2)、(Id2)或(Ig2)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中所述化合物不是3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺或其药学上可接受的盐。
在一个实施方案中，提供如上文定义的式(I)、(Ib2)、(Ic2)、(Id2)或(Ig2)的化合物，或其药学上可接受的盐，其中所述化合物不是3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺。
式(I)的示例性化合物选自：
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-5-(三氟代甲基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(3-(全氟代乙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
1-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-甲基苯甲酰胺；
3-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)嘧啶-2-基氨基)-正丙基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N,N-二甲基苯甲酰胺；
1-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-溴代-5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-5-(三氟代甲基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(1-(对甲苯基)-3-(三氟代甲基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-乙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-环丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(3-(1-甲基环丙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-异丙基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-氯代-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-氯代-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-溴代-5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
1-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(3-(全氟代乙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(1-(对甲苯基)-3-(1,1,1-三氟代-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(2-氰基丙烷-2-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-5-((4-((4-(3-(3-(2-甲氧基丙烷-2-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-(二甲基氨基)苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-甲基-1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
(R)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-甲氧基丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氟代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-乙炔基苯甲酰胺；
3-((6-(4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-2,3-二甲基苯氧基)-嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺，
和其药学上可接受的盐。
因此，在一个实施方案中，本发明的化合物是3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺或其药学上可接受的盐。
式(I)化合物的药学上可接受的酸加成盐意指包括式(I)化合物能够形成的治疗活性的非毒性酸加成盐。这些药学上可接受的酸加成盐可合适地通过用这样的合适的酸在合适溶剂或溶剂混合物中处理游离碱形式而获得。合适的酸包括例如，无机酸，例如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸，例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环拉酸、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸等。
相反地，所述盐形式可通过用合适的碱处理而转化成游离碱形式。
如本文所用的立体异构体是指具有相同的分子式和键合原子顺序(结构)，但仅在这些原子的空间三维定向上不同的异构分子。这与结构异构体形成对比，所述结构异构体共有相同的分子式，但键连接和/或它们的次序在不同的原子/基团之间不同。在立体异构体中，构成原子的次序和键连接保持相同，但它们的空间定向不同。
如下文所用，式(I)化合物的定义意指包括所述化合物的所有互变异构体，和所述化合物的溶剂合物(包括所述化合物的盐的溶剂合物)，除非上下文特别另外指明。溶剂合物的实例包括水合物。
本文提供的发明延伸至式(I)化合物的前药，即，体内分解和/或代谢以提供式(I)的活性化合物的化合物。前药的一般实例包括单酯和其它酯例如混合的碳酸酯、氨基甲酸酯、糖苷、醚、缩醛和缩酮。
在本发明的另一方面，提供式(I)化合物的一种或多种代谢物，特别是保留式(I)化合物的治疗活性中的一种或多种的代谢物。如本文所用的代谢物，是自式(I)化合物的代谢体内产生的化合物，例如不限于氧化代谢物和/或自例如O-去烷基化产生的代谢物。
本公开的化合物包括其中指定的原子是天然存在或非天然存在的同位素的那些。在一个实施方案中，同位素是稳定的同位素。因此，本公开的化合物包括例如含氘的化合物等。
本公开还延伸至本文定义的化合物的所有多晶形式。
本发明的化合物实例可适宜制备的一般途径在下文中概述。这些途径特别举例了其中Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环的式(I)化合物。然而，Ra和Rb具有其它定义的式(I)化合物可通过类似途径制备。
因此，例如，式(I)的化合物可通过通用方法(流程1, 途径A)获得，由此中间体B表示的萘胺前体与活化的亲电子衍生物中间体A*偶联，所述A*自相应的胺前体中间体A (G = H)制备。中间体B化合物中的胺基团NRaRb包含如对于上文式(I)化合物所定义的基团Y或所述基团的受保护衍生物。中间体A*中的部分LG1是合适的离去基团，例如咪唑基(C3H3N2)或芳基氧基基团，例如苯氧基(C6H5O)。本领域技术人员将理解，在一些情况下，中间体A*表示的化合物可以是分离的，或在其它情况下可以是暂时的中间体，其不是分离的，而是在原位产生和直接使用的。
流程
1
在其中LG1是咪唑基的情况下，中间体A*代表的化合物通过相应的胺与活化剂例如CDI在非极性非质子溶剂例如DCM中反应而获得，和适宜在RT下在原位产生，然后无需分离与中间体B代表的化合物反应。
在其中LG1是芳基氧基的情况下，所需的活化胺可通过用合适的氯甲酸酯例如氯甲酸苯酯在碱存在下处理胺前体而产生。在一些情况下，有利的是，在Schotten-Baumann型条件下进行活化过程，其在双相条件下使用水性碱，例如水性碳酸钠。中间体A*表示的活化胺衍生物(其中LG1是芳基氧基例如苯氧基)可由此任选原位产生，然后无需分离与中间体B表示的化合物反应，提供式(I)的化合物实例。
式(I)的化合物可包括其中取代基Y掺有一个或多个官能团的那些，所述官能团已在偶联过程期间受到保护和因此需要后续的脱保护。这样的程序的实例是通过用合适的酸处理从仲胺上除去叔丁氧基羰基(Boc)。
或者，式(I)的化合物实例可通过在中间体C (其中LG2是合适的离去基团，通常为卤素原子例如氯)表示的亲电子杂芳基氧基部分和中间体D表示的苯胺部分之间的SNAr置换反应而产生(流程2, 途径B)。该反应在酸性条件下进行，例如在p-TSA存在下和在极性非质子溶剂例如THF中，通常在升高的温度下，例如在70℃下。
流程
2
任选地，本发明的化合物实例可通过通用合成过程制备，其包括在羧酸衍生物与胺RaRbNH之间的酰胺键形成反应(流程 3, 途径C1 和C2 )，由此NRaRb包含Y或其受保护的衍生物，其中在后者情况下，式(I)化合物在合适的脱保护步骤之后显现出来。酰胺偶联可在三烷基铝(例如三甲基铝)的存在下，在由中间体 E (Rc =烷基)表示的烷基酯(例如甲基酯)与胺上进行(流程 3, 途径C1 )。该反应合适在非质子溶剂例如THF中，在环境温度或略微升高的温度下进行，通常RT至40℃。
流程
3
或者，式(I)的酰胺产物可来源于由中间体 F (Rc = H)表示的母体羧酸，通过与胺RaRbNH在酰胺(肽)偶联试剂的影响下和在非亲核碱的存在下反应(流程 3, 途径 C2 )。通常用于这些转换的试剂的实例是HATU和合适的碱，包括DIPEA和N-甲基吗啉等。酰胺化反应通常在极性非质子溶剂例如THF和环境温度下进行。
由中间体 A表示的化合物是市售可得的，或可通过本领域充分建立的合成方法制备。例如该通用结构的化合物可通过合适的肼(任选呈其受保护的衍生物或合适的盐形式)与相关的酮腈的缩合来制备(流程 4)。合适的盐的实例是盐酸盐，并且该转化的合适的保护基是酸不稳定性氨基甲酸酯，例如Boc基团(Rd
= 叔丁基)，其在环化条件下容易除去以原位产生母体肼。该缩合/环化反应适合在极性质子溶剂例如乙醇中，在强酸例如浓盐酸的存在下和在升高的温度下，通常在回流下进行。
流程
4
在一些情况下，可能有利的是，当对于所述合成过程期间或在后续转化中起始材料的可用性和/或化合物中存在的官能团和/或保护其中一个或多个的需要而言最合适时，通过一种或其它备选方法制备这样的中间体。例如由中间体 A表示的化合物也可在1H-吡唑-5-胺和合适的芳烃Q-LG3之间经由铜(I)介导的偶联反应获得，其中Q是如对式(I)化合物所定义的任选取代的芳族核和LG3是卤素例如碘原子(流程 5)。该反应合适在非质子非极性溶剂例如甲苯中，采用铜(I)盐作为催化剂，例如碘化铜(I)和在铜配位配体例如N 1,N 2-二甲基环己烷-1,2-二胺的存在下和在碱例如碳酸钾存在下和通常在升高的温度下例如在回流下进行。
流程
5
对本领域技术人员显然的是，可能有利的是，通过在先熟知的一种或多种转化将本文所述的一种中间体转化成所述中间体的另一实例，由此获得另外的本发明化合物。作为这样的过程的实例，由中间体 A表示的那些化合物(其中Q是用烷氧基(ORe 其中Re是烷基)例如甲氧基取代的苯环)通过O-脱烷基化反应可被转化成相应的酚(流程 6)。该类型的转化可用三卤化硼例如三溴化硼，在非极性非质子溶剂例如DCM中在降低的温度例如-5至0℃下实现。
流程
6
通过上文所述的中间体A的酚实例的官能化，提供将一种中间体转化成相同类形式的另一种化合物的另一示范。例如该组成的中间体可合适地在酚氧上通过与卤化烷基，例如与单一的溴化烷基反应而烷基化。或者，酚产物可与官能化的卤化烷基，例如与氮芥，即与式Rf(CH2)2LG4的2-卤代乙基胺的盐反应，其中LG4是卤素例如氯，Rf经选择使得O(CH2)2Rf通过式(I)化合物的Q定义而可容许，或者是其经合适保护的衍生物(流程 7)。能用于该类型的O-烷基化的2-卤代乙基胺的盐的实例是4-(2-氯代乙基)吗啉盐酸盐。该类型的反应在极性非质子溶剂例如乙腈或DMF中，在碱例如碳酸钾存在下，如果需要同时加热有效进行。
流程
7
在一些情况下，可能有利的是，在Mitsunobu条件下，在三芳基膦例如三苯基膦连同合适的重氮基二羧酸酯偶联试剂例如二氮烯-1,2-二甲酸二异丙酯存在下，通过酚与相应的醇Rf(CH2)2OH相互作用，实现O-烷基化。这样的反应通常在非极性非质子溶剂例如THF中在降低至环境温度下进行，例如在-50℃至RT。
由中间体 B表示的化合物可获自在由中间体 G表示的亲电子芳基氧基萘基胺(其中LG2是合适的离去基团例如卤素原子例如氯)与由中间体 D 表示的苯胺部分之间的SNAr置换反应(流程 8)。该偶联反应可对游离萘胺(G1 = H)进行，或任选为了控制化学选择性和由此提高效率，对其受保护的衍生物中间体 G(P) (G1
= 保护基)进行。反应在酸性条件下，例如在p-TSA存在下和在极性非质子溶剂例如THF中和通常在升高温度下例如在70℃进行。在其中使用保护基的那些情况下，由中间体B表示的产物随后通过合适的脱保护步骤显示。例如氨基甲酸酯，例如Boc基团，可用于在SNAr偶联反应期间保护萘胺氮(G1 = tert-BuO2C)，并之后通过用强酸例如用TFA处理除去。
流程
8
同样可利用上文所述的合成过程(途径C1和C2, 流程3)以获得由中间体B表示的化合物(流程9)。因此，中间体B的实例可通过由中间体J表示的羧酸的活化衍生物(Rc = G1
= H)或其受保护衍生物中间体J(P) (G1= 保护基)与胺RaRbNH反应制备，其中NRaRb包含Y或其受保护的衍生物。或者，可用胺RaRbNH对酯中间体H (Rc =烷基, G1
= H)或其受保护的衍生物中间体H(P) (Rc =烷基, G1= 保护基)在三烷基铝存在下进行相互转化，如已所述。这些转化的合适的保护基是尿烷衍生物(G1 = RhO2C)，在该情况下，所需的由中间体B表示的苯胺(G1 = H)在合适的脱保护程序后获得。适合用于该目的的尿烷保护基的实例是Boc基团(G1
= tert-BuO2C)，其可在通过用酸处理的酰胺化反应后被除去。
流程
9
由中间体E和F表示的酯和酸前体可通过使用与上文所公开的提供本发明化合物实例的那些程序(流程 1)相同或类似的程序获得。以这种方式，中间体E和F适宜通过中间体H和J分别与活化氨基吡唑衍生物中间体A*反应获得(流程10)。对本领域技术人员明显的是，通过在合适的酸或碱条件下水解，酯：中间体H和E可容易转化成相应的羧酸：中间体J和F。例如该转化可使用碱例如氢氧化锂在质子溶剂或溶剂混合物中例如THF和水，和在适当升高温度下，通常RT至40℃，通过皂化实现。
流程
10
由中间体G表示的前体适当地通过在4-氨基萘-1-醇(呈盐或合适的受保护衍生物的形式)和亲电子杂芳族化合物之间的SNAr置换反应制备(流程 11)，例如二卤代杂芳族化合物，其中离去基团LG2和LG5都是卤素原子例如氯。该转化的合适保护基是Boc基团(G1
= tert-BuO2C)，其可在一个或多个后续转化例如上文所述的那些(流程 8和9)期间，被保留以控制化学选择性。置换步骤合适在极性非质子溶剂例如乙腈中，在位阻碱例如DBU存在下，在降低的温度例如在0℃进行。
流程
11
由中间体H和J表示的那些化合物通过与上文已描述的那些(流程8)类似的合成程序装配，用于通过取代由中间体K (代替中间体D)表示的苯胺基酸或苯胺基酯制备中间体B(流程12)。以类似的方式，酸介导的SNAr偶联可对游离萘胺中间体G (G1
= H)进行，或任选地，使用所述中间体的受保护的衍生物中间体G(P) (G1 = 保护基)，以维持在该转化和/或后续转化中所需的化学选择性。SNAr偶联合适在极性非质子溶剂例如THF或IPA或DMF中，和在酸催化剂例如p-TSA或TFA存在下，和最通常在升高的温度下，通常在60-70℃进行。
流程
12
由中间体 D和中间体 K表示的已知的苯胺部分自市售来源获得或按照公布的程序制备。本文公开的新的实例自市售可得的起始材料，使用本领域充分建立的官能团互变合成(流程 13)。例如，(离去)基团LG6可被所需的R1基团经由SNAr反应或过渡金属催化的偶联而置换。在一些情况下，所需的苯胺容易自合适取代的氨基苯甲酸(Rc = G2 = H)和/或氨基苯甲酸酯(Rc =烷基 G2 = H)获得，其可任选N-保护(G2 = PG)以确保后续反应可有效进行。取代基Rh置换成如对式(I)化合物所定义的基团R1，提供由中间体K表示的化合物，其可经水解和经受酰胺偶联反应，以在除去氮保护基(在使用的情况下)之后，提供中间体D的实例。
流程
13
中间体 D的另外实例自市售可得的硝基苯甲酸容易制备，其被合适的离去基团LG6例如卤素例如氟取代。该组成的化合物可通过一系列反应被转化成所需苯胺的实例，所述反应包括酰胺偶联，接着SNAr置换反应和硝基还原为胺。
或者，式(I)化合物可通过中间体 B与吡唑-5-异氰酸酯化合物中间体 L偶联而获得。在该途径中，中间体 L可例如合适地经由铜(II)-介导的Chan–Lam反应制备(见例如：Tetrahedron Lett. 1998, 39, 2941–2944)，其中合适的吡唑-5-羧酸的酯与芳基-或杂芳基-硼酸偶联。得到的N-芳基吡唑酸酯经皂化得到相应的羧酸(中间体 M)，所述酸被转化成酰基叠氮化物(例如使用离去基团和活化叠氮化物离子的来源，例如二苯基磷酰基叠氮化物(DPPA)；见例如Tetrahedron 1974, 30,
2151–2157)，然后进行Curtis重排得到中间体 L。
流程
14
对本领域技术人员明显的是，在一些情况下，技术上有利的是，使用备选的保护基和/或以类似的方式但以不同的顺序进行上文所述的转化，以提高合成过程的总体效率。
保护基和其去除的方式描述于Theodora W. Greene和Peter G. M. Wuts的“Protective
Groups in Organic Synthesis”，由John Wiley & Sons
Inc出版；第四次修订版本，2006, ISBN-10: 0471697540。
本文所述的新的中间体构成本发明的一个方面。在这点上，本发明的另一方面涉及：
(i) 式(II)的化合物
其中Ra、Rb、X、Y和R1如前文所定义，或其盐或受保护的衍生物；和
(ii)式(III)的化合物，
其中Y和R1如前文所定义，或其盐或受保护的衍生物。
可提及的式(II)和(III)的化合物包括这样的化合物，其中：
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环，其任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氰基和卤代；
X表示N；
Y表示NR2R3；和/或
R1表示C2-6炔基。
可提及的式(II)和(III)的具体化合物分别包括式(IIa)和(IIIa)的那些：
其中X、R1和Y如前文所定义。
可提及的(IIa)和(IIIa)的化合物包括这样的化合物，其中：
X表示N；
Y表示N(H)-CH2CH2-(吗啉-1-基)；和/或
R1表示C2-3炔基(例如-C≡C-H)。
式(II)和(III)化合物的受保护衍生物包括其中必需的NH2基团受保护的那些。在这一点上，这样的受保护衍生物包括那些化合物的酰胺或特别是氨基甲酸酯。例如，那些受保护的衍生物包括其中NH2基团的H原子被以下置换的化合物：
R’-C(O)-，其中R’是H、C1-8烷基、苯基或苄基，后两个基团任选被选自卤代、羟基、甲基和甲氧基的一个或多个基团取代；或者
R’’-O-C(O)-，其中R’’是叔丁基、苯基、苄基或芴基，后三个基团任选被选自卤代、羟基、甲基和甲氧基的一个或多个基团取代。
式(I)的化合物是p38 MAP激酶抑制剂(特别具有α亚型)和在一个方面，所述化合物可用于治疗炎性疾病，例如COPD和/或哮喘。
意想不到的是，在至少一些实施方案中，与其它先前公开的异构p38 MAP激酶抑制剂例如BIRB796 (Pargellis, C等, Nature Struct. Biol., 2002, 9(4):268-272)相比，式(I)的化合物显示长的作用持续时间和/或作用持久性。
在一个实施方案中，式(I)的化合物不强烈抑制或结合GSK 3α，例如它们对GSK 3α的IC50值是1500 nM或更高；例如2,000、3,000、4,000、5,000、6,000、7,000、8,000、9,000或10,000 nM或更高。
本文所用的作用持久性涉及化合物与靶标(例如受体)的离解速率或离解常数。低的离解率可导致持久。
低的离解速率以及高的结合速率易于提供有效的治疗实体。
式(I)的化合物预期是体内有效的。
通常，发展至今的现有技术化合物预期用于口服给予。该策略涉及优化药物的药代动力学概况，以实现足够的作用持续时间。以此方式，在剂量间建立和维持足够高的药物浓度，以提供持久的临床益处。该方法的必然结果是所有身体组织，特别是肝和肠，可能暴露于超过治疗活性浓度的药物，而不管它们是否受待治疗疾病的不利影响。
备选的策略是涉及治疗范例，其中将药物直接给予至发炎的器官，即，利用局部给药。尽管该方法不适合用于治疗所有慢性炎性疾病，其已在肺部病症例如哮喘和COPD；皮肤疾病例如针对特应性皮炎和银屑病；鼻部病况，例如过敏性鼻炎；和胃肠道疾病例如溃疡性结肠炎和克罗恩病；和眼部的炎性疾病例如葡萄膜炎中使用。
在局部疗法中，可获得功效的一种方式是通过使用具有持续作用持续时间和保持在相关器官中的药物，从而将系统毒性的风险最小化。或者，在一些情况下，可开发产生活性药物“储库”的制剂，其可用于维持其所需的效果。第一种方法例如抗胆碱能药物tiotropium (Spiriva)。该化合物将局部给予至肺部，作为COPD的治疗，和对其靶标受体具有特别高的亲和力，导致非常慢的离解速率，因而显示持续的作用持续时间。
本公开的一个方面中，式(I)的化合物特别适合用于局部递送，例如局部递送至肺部，特别用于治疗呼吸疾病，例如慢性呼吸疾病例如COPD和/或哮喘。
在一个实施方案中，式(I)的化合物适合用于敏化用皮质类固醇治疗的患者，所述患者已经变得难以用这样的治疗方案治疗。
式(I)的化合物可具有抗病毒性质，例如预防细胞(例如呼吸道上皮细胞)被小RNA病毒，特别是鼻病毒、流感病毒或呼吸道合胞体病毒感染的能力。
因此，认为所述化合物是抗病毒剂，特别适用于预防、治疗或改善小RNA病毒感染，例如鼻病毒感染、流感病毒感染或呼吸道合胞体病毒感染。
在一个实施方案中，式(I)的化合物能够减少由病毒感染引起的炎症，例如鼻病毒感染，特别是导致细胞因子例如IL-8释放的病毒感染，特别是在体内。该活性可例如体外使用鼻病毒诱导的IL-8测定法来测定，其如在本文实施例中所述。
在一个实施方案中，式(I)的化合物能够降低受鼻病毒诱导的ICAM1表达，特别是在体内。ICAM1是受体机制，其被所谓的大沟鼻病毒血清型用于感染细胞。该活性可例如被本文实施例所述的方法测量。
预期上述性质致使式(I)化合物特别适合用于在患有一种或多种慢性病况的患者中和/或在免疫抑制患者中例如在器官移植后，治疗(包括预防)炎性疾病的恶化，特别是病毒性恶化，或治疗病毒感染，所述慢性病况例如充血性心力衰竭、COPD、哮喘、糖尿病、癌症。这样的用途可与抗病毒剂例如扎那米韦、奥塞米韦(例如磷酸奥塞米韦)、帕拉米韦(peramivir)或拉尼米韦(laninamivir)组合。
通常，式(I)的化合物可用于治疗具有炎性组分的一种或多种病况，其可适合通过非全身或局部疗法治疗。
具体而言，式(I)的化合物可用于治疗一种或多种呼吸道病症，包括COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、囊性纤维化、肉状瘤病、特发性肺部纤维化、过敏性鼻炎、鼻炎和鼻窦炎，特别是哮喘或COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)。
式(I)的化合物可用于治疗眼部疾病或病症，包括干燥性角膜结膜炎(干眼)、过敏性结膜炎、结膜炎、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括湿性黄斑水肿和干性黄斑水肿)、白内障手术后的炎症或特别是葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎) (例如眼部疾病或病症，包括过敏性结膜炎、结膜炎、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括湿黄斑水肿和干黄斑水肿)、白内障手术后的炎症或特别是葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎))。
式(I)的化合物可用于治疗皮肤疾病或病症，包括过敏性皮炎、接触性皮炎、特应性皮炎或银屑病。
式(I)的化合物可用于治疗胃肠道疾病或病症，包括溃疡性结肠炎或克罗恩病。
式(I)的化合物可用于治疗关节疾病或病症，包括类风湿性关节炎或骨关节炎，和特别是继发于所述病况的发炎关节。
式(I)的化合物可用于治疗癌症，包括胃部癌症，和可用于抑制肿瘤的生长和转移，包括非小细胞肺癌、胃癌、结肠直肠癌和恶性黑素瘤。
还预期式(I)的化合物可用于治疗某些其它病况，包括牙周炎、齿龈炎和咽炎。
式(I)的化合物还可使患者的病况对用皮质类固醇的治疗再敏感，当患者的病况已变得对所述治疗难治时。
此外，本发明提供药物组合物，其包含本公开的化合物，任选与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体组合。
稀释剂和载体可包括适合用于胃肠外、口服、局部、粘膜和直肠给药的那些。
本发明还提供用于制备这样的药物组合物的方法(例如用于胃肠外、口服、局部、粘膜或直肠给药的药物组合物)，所述方法包括将各成分混合。
如上文提到的，可制备这样的组合物例如用于胃肠外、皮下、肌内、静脉内、关节内或关节周围给药，特别是呈液体溶液或混悬液的形式；用于口服给药，特别是呈片剂或胶囊剂的形式；用于局部例如肺部或鼻内给药，特别是呈粉剂、滴鼻剂或气雾剂的形式和经皮肤给药；用于粘膜给药，例如给予至颊、舌下或阴道粘膜；和用于直肠给药，例如呈栓剂形式。
组合物可适宜地以单位剂量形式给予，可通过制药领域熟知的任何方法制备，例如在Remington's Pharmaceutical Sciences, 第17版, Mack Publishing
Company, Easton, PA., (1985)中所述。用于胃肠外给予的制剂可含有作为辅料的无菌水或盐水、亚烷基二醇例如丙二醇、聚亚烷基二醇例如聚乙二醇、植物来源的油、氢化萘等。经鼻给予的制剂可以是固体的，可包含辅料例如乳糖或葡聚糖，或可以是水性或油性溶液用于呈滴鼻剂或计量喷雾剂的形式。对于经颊给药，局部辅料包括糖、硬脂酸钙、硬脂酸镁、预胶化淀粉等。
适合用于口服给药的组合物可包含一种或多种生理学相容的载体和/或辅料，和可以是固体或液体形式。片剂和胶囊剂可用以下制备：粘合剂例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、西黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂例如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；润滑剂例如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；和表面活性剂例如月桂基硫酸钠。液体组合物可含有常规的添加剂例如助悬剂，例如山梨糖醇浆、甲基纤维素、糖浆、明胶、羧甲基-纤维素或可食用脂肪；乳化剂例如卵磷脂或阿拉伯胶；植物油例如杏仁油、椰子油、鱼肝油或花生油；防腐剂例如丁基羟基茴香醚(BHA)和丁基羟基甲苯(BHT)。液体组合物可被包封在例如明胶中以提供单位剂量形式。
液体口服剂量形式包括片剂、两部分组成的(two-piece)硬壳胶囊和软弹性明胶(SEG)胶囊。
干外壳制剂通常含有约40%-60% w/w浓度的明胶、约20%-30%浓度的增塑剂(例如甘油、山梨糖醇或丙二醇)和约30%-40%浓度的水。其它材料例如防腐剂、染料、遮光剂和矫味剂也可存在。液体填充材料包括已溶解、增溶或分散的固体药物(用助悬剂例如蜂蜡、氢化蓖麻油或聚乙二醇4000)或在溶媒或溶媒组合中的液体药物，所述溶媒例如矿物油、植物油、三甘油酯、二醇、多元醇和表面活性剂。
合适的是，式(I)的化合物经局部给予至肺、眼或肠。因此，我们提供本发明的药物组合物，其包含本公开的化合物，任选与一种或多种局部可接受的稀释剂或载体组合。
局部给予至肺可通过使用气雾剂制剂实现。气雾剂制剂通常含有悬浮或溶于合适的气雾抛射剂中的活性成分，所述抛射剂例如氯氟化碳(CFC)或氢氟化碳(HFC)。合适的CFC抛射剂包括三氯一氟甲烷(抛射剂11)、二氯四氟甲烷(抛射剂114)和二氯二氟甲烷(抛射剂12)。合适的HFC抛射剂包括四氟乙烷(HFC-134a)和七氟丙烷(HFC-227)。抛射剂通常占总吸入组合物的40%-99.5%例如40%-90%重量。制剂可包含辅料，其包括助溶剂(例如乙醇)和表面活性剂(例如卵磷脂、去水山梨糖醇三油酸酯等)。气雾剂制剂被包装在罐中，合适的剂量通过计量阀递送(例如由Bespak,
Valois或3M提供)。
局部给药至肺还可通过使用非增压制剂例如含水溶液或混悬液实现。这可借助喷雾器给予。局部给药至肺还可通过使用干粉制剂实现。干粉制剂含有呈细粉形式的本公开的化合物，通常具有1-10 µm的总气体动力学中位数直径(MMAD)。所述制剂通常含有局部可接受的稀释剂例如乳糖，通常具有大的颗粒尺寸，例如100 µm或更大的MMAD。干粉递送系统的实例包括SPINHALER、DISKHALER、TURBOHALER、DISKUS和CLICKHALER。
本发明的化合物(即式(I)、(Ia1)、(Ia2)、(Ib1)、(Ib2)、(Ic1)、(Ic2)、(Id1)、(Id2)、(Ie1)、(Ie2)、(If1)、(If2)、(Ig1)、(Ig2)、(Ih1)或(Ih2)的化合物，如上文所定义，或其药学上可接受的盐)还可经直肠给予，例如呈栓剂或灌肠剂的形式，其包括含水性或油性溶液以及混悬液和乳液。这样的组合物按本领域技术人员熟知的标准程序制备。例如，栓剂可通过将活性成分与常规栓剂基质例如可可脂或其它甘油酯混合来制备。在该情况下，药物与合适的无刺激辅料混合，所述辅料在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此将在直肠中融解以释放药物。这样的材料为可可脂和聚乙二醇。
通常，对于预期局部给予至眼的呈滴眼剂或眼用软膏的组合物，抑制剂的总量为约0.0001至少于4.0%
(w/w)。
优选地，对于局部眼给药，按照本发明给予的组合物配制为溶液、混悬液、乳液和其它剂型。根据配制的容易性以及患者容易借助滴入1-2滴溶液到受影响的眼中给予这样的组合物的能力，含水溶液通常是优选的。然而，所述组合物还可以是混悬液、粘性或半粘性凝胶或其它类型的固体或半固体组合物。对于难溶于水的化合物，混悬液可能是优选的。
给药至眼的备选方法是玻璃体内注射本发明化合物的溶液或混悬液。此外，本发明化合物还可借助眼睛植入物或插入物引入。
按照本发明给予的组合物还可包括各种其它成分，包括但不限于张度剂、缓冲剂、表面活性剂、稳定聚合物、防腐剂、助溶剂和粘度建立剂。本发明的优选药物组合物包括抑制剂与张度剂和缓冲剂。本发明的药物组合物还可任选包含表面活性剂和/或姑息剂和/或稳定聚合物。
各种张度剂可用于调整组合物的张度，对于眼用组合物优选调整至天然眼泪的张度。例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、单糖(例如葡萄糖、果糖、半乳糖)和/或简单多元醇(例如糖醇甘露糖醇、山梨糖醇、木糖醇、拉克替醇、异麦芽糖醇、麦芽糖醇和氢化淀粉水解产物)可被添加至组合物中至接近生理张度。这样的张度剂的量根据待添加的具体试剂而改变。然而一般而言，组合物具有足以导致最终组合物具有眼可接受的渗透度的量的张度剂(通常约150-450
mOsm，优选250-350 mOsm和最优选接近290
mOsm)。一般而言，本发明的张度剂的存在范围为2-4% w/w。本发明的优选张度剂包括单糖或糖醇，例如D-甘露糖醇。
合适的缓冲系统(例如，磷酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠或硼酸)可被添加至组合物中，以防止在储藏条件下pH改变。具体的浓度根据所用的试剂而改变。然而，优选地，选择缓冲剂以维持靶pH在pH 5-8的范围内，和更优选至pH 5-7的靶pH。
表面活性剂可任选用于递送较高浓度的抑制剂。表面活性剂用于溶解抑制剂和稳定胶体分散剂，例如胶束溶液、微乳剂、乳剂和混悬液。可任选使用的表面活性剂的实例包括聚山梨醇酯、泊洛沙姆、polyosyl 40硬脂酸酯、多羟基蓖麻油、泰洛沙泊、triton和去水山梨糖醇单月桂酸酯。本发明中使用的优选表面活性剂的亲水性/亲脂性/平衡"HLB"范围为12.4-13.2，和对于眼用是可接受的，例如TritonX114和泰洛沙泊。
可添加至本发明的眼用组合物中的另外试剂是润药(demulcent)，其用作稳定聚合物。稳定聚合物应是离子/带电荷实例，优先用于局部眼用，更特别是，在其表面上携带负电荷的聚合物，其可显示物理稳定性的ζ-电位为(–)10–50 mV，和能够制备水中的分散液(即水溶的)。本发明的优选稳定聚合物是0.1–0.5% w/w的聚合电解质，或多种聚合电解质(如果超过一种)，其来自交联聚丙烯酸酯家族，例如卡波姆和Pemulen(R)，特别是卡波姆974p (聚丙烯酸)。
其它化合物也可添加至本发明的眼用组合物中，以增加载体的粘度。粘度增强剂的实例包括但不限于：多糖，例如透明质酸和其盐、硫酸软骨素和其盐、葡聚糖、纤维素家族的各种聚合物；乙烯聚合物；和丙烯酸聚合物。
局部眼用产品通常以多剂形式包装。因此，需要防腐剂以防止使用期间的微生物污染。合适的防腐剂包括：苯扎氯铵、氯丁醇、苯扎溴铵(benzododecinium bromide)、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯基乙基醇、依地酸二钠、山梨酸、聚季铵盐(polyquaternium)-1或本领域技术人员已知的其它试剂。这样的防腐剂通常以0.001-1.0% w/v的水平使用。本发明的单位剂量组合物是无菌的，但通常是非防腐的。因此这样的组合物通常不含防腐剂。
医学从业人员或其他技术人员将能够确定本发明化合物的合适剂量，因此确定应包括在任何特定药物制剂中的本发明化合物的量(无论呈单位剂型或其他形式)。
式(I)的化合物具有治疗活性。在进一步的方面，本发明提供用作药物的本公开的化合物。因此，在进一步的方面，本发明提供本文所述的化合物，其用于治疗一种或多种上文所述的病况。
在一个实施方案中，本公开的干粉制剂包含硬脂酸镁或硬脂酸钙。这样的制剂可具有优良的化学和/或物理稳定性，特别是当这样的制剂还包含乳糖时。
在进一步的方面，本发明提供本文所述的化合物在制备用于治疗一种或多种上文所述病况的药物中的用途。
在进一步的方面，本发明提供治疗一种或多种上文所述病况的方法，包括给予受试者有效量的本公开的化合物或包含所述化合物的药物组合物。
词语“治疗”意指包括预防性治疗以及治疗性治疗。病况或病症的治疗还包括其恶化的治疗。
本公开的化合物还可与一种或多种其他活性成分组合给予，例如适合用于治疗上述病况的活性成分。
例如，用于治疗呼吸道病症的可能组合包括与类固醇(例如布地奈德、二丙酸倍氯米松、丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、糠酸氟替卡松)、β激动剂(例如叔丁喘宁、柳丁氨醇、沙美特罗、福莫特罗)、黄嘌呤(例如茶碱)、抗胆碱能类(例如异丙托铵或tiotropium，例如作为溴化物)和抗病毒剂(例如扎那米韦、奥塞米韦，例如作为磷酸盐，帕拉米韦和拉尼米韦)的组合。
此外，为了治疗胃肠道病症(例如克罗恩病或溃疡性结肠炎)，可能的组合包括与例如一种或多种选自以下的试剂组合：
- 5-氨基水杨酸或其前药(例如柳氮磺吡啶、奥沙拉秦或bisalazide)；
- 皮质类固醇(例如泼尼松龙、甲基泼尼松龙或布地奈德)；
- 免疫抑制剂(例如环孢菌素、他克莫司、氨甲喋呤、硫唑嘌呤或6-巯基嘌呤)；
- 抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、certolizumab pegol或golimumab)；
- 抗-IL12/IL23抗体(例如，ustekinumab)或小分子IL12/IL23抑制剂(例如，apilimod)；
- 抗-α4β7抗体(例如，vedolizumab)；
- MAdCAM-1阻断剂(例如，PF-00547659)；
- 针对细胞粘附分子α4-整联蛋白的抗体(例如，那他珠单抗)；
- 针对IL2受体α亚单位的抗体(例如，达克珠单抗或巴利昔单抗)；
- JAK3抑制剂(例如，tofacitinib或R348)；
- Syk抑制剂和其前药(例如，fostamatinib和R-406)；
- 磷酸二酯酶-4抑制剂(例如，tetomilast)；
- HMPL-004；
- 益生元(probiotics)；
- Dersalazine；
- semapimod/CPSI-2364；和
- 蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
对于眼睛病症的治疗(例如干燥性角膜结膜炎或葡萄膜炎)，可能的组合包括与例如选自以下的一种或多种试剂的组合：
- 皮质类固醇(例如地塞米松、泼尼松龙、曲安奈德、二氟泼尼酯或氟西奈德)；
- 免疫抑制剂(例如环孢菌素、voclosporin、硫唑嘌呤、氨甲喋呤、麦考酚酸吗乙酯或他克莫司)；
- 抗-TNFα抗体(例如，英夫利昔单抗、阿达木单抗、certolizumab pegol、ESBA-105或golimumab)；
- 抗-IL-17A抗体(例如，secukinumab);
- mTOR抑制剂(例如，西罗莫司)；
- VGX-1027；
- JAK3抑制剂(例如，tofacitinib或R348)；和
- 蛋白激酶C抑制剂(例如AEB-071)。
因此，本发明的另一方面提供式(I)的化合物与一种或多种其它活性成分的组合，例如上文所述的一种或多种活性成分。
类似地，本发明的另一方面提供组合产品，包含：
(A)本发明的化合物(即式(I)、(Ia1)、(Ia2)、(Ib1)、(Ib2)、(Ic1)、(Ic2)、(Id1)、(Id2)、(Ie1)、(Ie2)、(If1)、(If2)、(Ig1)、(Ig2)、(Ih1)或(Ih2)的化合物，如上文所定义，或其药学上可接受的盐)；和
(B)另一治疗剂，
其中组分(A)和(B)各自与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合配制。
在本发明的该方面，组合产品可以是单一(组合)药物制剂或部分药盒。
因此，本发明的该方面包括包含本发明的化合物和另一治疗剂的药物制剂，其与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合(所述制剂在下文被称为“组合制剂”)。
还包括包含以下组分的部分药盒：
(i)药物制剂，包含本发明的化合物与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体的混合物；和
(ii)药物制剂，包含另一治疗剂与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体的混合物，
所述组分(i)和(ii)各自以适合于与另一种组合给药的形式提供。
部分药盒的组分(i)因此是上述的组分(A)与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体的混合物。同样地，组分(ii)是上述的组分(B)与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体的混合物。
其它治疗剂(即上述的组分(B))可以是例如，上文提及的与治疗呼吸道、胃肠道和眼部病症有关的任何药剂。
本发明该方面的组合产品(组合制剂或部分药盒)可用于治疗或预防炎性疾病(例如上文提及的炎性疾病，例如：
- 呼吸道病症，包括COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、囊性纤维化、肉状瘤病、特发性肺纤维化、过敏性鼻炎、鼻炎和鼻窦炎，特别是哮喘或COPD (包括慢性支气管炎和肺气肿)；
- 眼部疾病或病症，包括过敏性结膜炎、结膜炎、干燥性角膜结膜炎(干眼)、青光眼、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病性黄斑水肿)、视网膜中央静脉闭塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、白内障手术后的炎症或者特别是葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥；
- 皮肤疾病或病症，包括过敏性皮炎、接触性皮炎、特应性皮炎或银屑病；和
- 胃肠道疾病或病症，包括谷蛋白敏感性肠病(腹腔疾病)、嗜酸性细胞食管炎、肠移植物抗宿主病或特别是溃疡性结肠炎或克罗恩病。
本文所述的本发明的各方面(例如上述化合物、组合、方法和用途)可具有以下优点：在治疗本文所述的病况中，对于医生和/或患者而言，相比现有技术已知的用于治疗那些病况或其他病况的类似化合物、组合、方法(治疗)或用途，本文所述的本发明的各方面可能是更合适的，更有效的，更少毒性的，更长效的，具有更好的选择性，具有更广范围的活性，更有效力的，产生更少的副作用，具有更好的药代动力学和/或药效学概况，或可具有更合适的固态形态学，具有更好的稳定性，或可具有其它有用的药理学性质。
相对于现有技术的化合物，式(I)的化合物可另外(或者，备选地)：
- 显示特别适合于非全身/局部给药的性质(例如式(I)的化合物在非全身/局部给药后，产生高的靶组织浓度，但低的血浆浓度，和/或从血浆中快速清除式(I)化合物)；
- 在静脉内给药后，具有降低风险的血管外暴露(例如由于式(I)化合物的少量分布)；
- 对于所选的激酶(例如Syk和/或一组激酶，例如Syk、Src和p38 MAPKα)，显示优良的效力；
- 显示β-连环蛋白诱导降低和/或抑制细胞的有丝分裂；
- 显示没有或较少的细胞色素P450超家族成员的时间依赖性抑制；和/或
- 产生较少有问题的(例如较少毒性)代谢产物，例如在给予患者后。
实验部分
本文所用的缩略语定义如下(表1)。未定义的任何缩略语意在表示其通常接受的含义。
表
1
：缩略语
通用程序
所有起始材料和溶剂获自市售来源或按照文献引文制备。除非另外说明，否则搅拌所有反应物。有机溶液经无水硫酸镁常规干燥。在Thales H-cube流动反应器上在所述条件下进行氢化。
在预填充的二氧化硅(230-400筛，40-63
µm)柱上使用指定量进行柱色谱。SCX购自Supelco和用1M盐酸处理，然后使用。除非另外指明，否则待纯化的反应混合物首先用MeOH稀释，和用几滴AcOH酸化。将该溶液直接上样到SCX上，和用MeOH洗涤。然后通过用含0.7 M
NH3的MeOH洗涤将所需的物质洗脱。
制备型反相高效液相色谱
Agilent Scalar柱C18, 5 µm (21.2 x 50 mm)，流速28 mL
min-1用含有0.1% v/v甲酸的H2O-MeCN梯度经10 min洗脱，使用在215和254 nm的UV检测。梯度信息：0.0-0.5 min；95% H2O-5% MeCN；0.5-7.0
min；从95% H2O-5% MeCN匀变至5% H2O-95% MeCN；7.0-7.9
min；保持在5% H2O-95% MeCN；7.9-8.0 min；返回至95% H2O-5%
MeCN；8.0-10.0 min；保持在95% H2O-5%
MeCN。
分析方法
反相高效液相色谱
方法 1 ：Agilent Scalar柱C18, 5
µm (4.6 x 50 mm)或Waters XBridge C18, 5
µm (4.6 x 50 mm)流速2.5 mL min-1用含0.1% v/v甲酸方法1酸性)或NH3 (方法1碱性)的H2O-MeCN梯度经7 min洗脱，采用在215和254 nm的UV检测。梯度信息：0.0-0.1 min, 95% H2O-5%
MeCN; 0.1-5.0 min, 从95% H2O-5%
MeCN匀变至5% H2O-95% MeCN; 5.0–5.5 min, 保持在5% H2O-95% MeCN; 5.5–5.6 min, 保持在5% H2O-95% MeCN,流速增加至3.5 mL
min-1; 5.6-6.6 min, 保持在5% H2O-95%
MeCN,流速3.5 mL min-1; 6.6-6.75 min, 返回至95% H2O-5% MeCN,流速3.5 mL
min-1; 6.75-6.9 min, 保持在95% H2O-5%
MeCN,流速3.5 mL.min-1; 6.9-7.0 min, 保持在95% H2O-5% MeCN,流速降低至2.5 mL
min-1。
方法 2: Agilent Extend C18柱, 1.8 µm (4.6 x 30 mm)在40℃;流速2.5-4.5 mL min-1用含0.1%
v/v甲酸(方法2酸性)或NH3 (方法2碱性)的H2O-MeCN梯度经4 min洗脱，采用在254 nm的UV检测。梯度信息：0-3.00 min, 从95% H2O-5%
MeCN匀变至5% H2O-95% MeCN; 3.00-3.01 min, 保持在5% H2O-95% MeCN,流速增加至4.5 mL
min-1; 3.01 3.50 min, 保持在5% H2O-95%
MeCN; 3.50-3.60 min, 返回至95% H2O-5%
MeCN,流速降低至3.50 mL min-1; 3.60-3.90 min, 保持在95% H2O-5% MeCN; 3.90-4.00 min, 保持在95% H2O-5% MeCN,流速降低至2.5 mL
min-1。
方法 3: Waters Xselect CSH C18 3.5 µm (4.6 x 50 mm)流速2.5 mL
min-1用含0.1% v/v甲酸的H2O-MeCN梯度经7 min洗脱，采用在215和254 nm的UV检测。梯度信息：0.0-0.1 min, 95% H2O-5%
MeCN; 0.1-5.0 min, 从95% H2O-5%
MeCN匀变至5% H2O-95% MeCN; 5.0–5.5 min, 保持在5% H2O-95% MeCN; 5.5-5.6 min, 保持在5% H2O-95% MeCN,流速增加至3.5 mL
min-1; 5.6-6.6 min, 保持在5% H2O-95%
MeCN,流速3.5 mL min-1; 6.6-6.75 min, 返回至95% H2O-5% MeCN,流速3.5 mL
min-1; 6.75-6.9 min, 保持在95% H2O-5%
MeCN,流速3.5 mL.min-1; 6.9-7.0 min, 保持在95% H2O-5% MeCN,流速降低至2.5 mL
min-1。
方法 4: Waters Xselect CSH C18 3.5 µm (4.6 x 50 mm);流速2.5-4.5 mL min-1用含0.1%
v/v甲酸的H2O-MeCN梯度经4 min洗脱，采用在254 nm的UV检测。梯度信息：0-3.00 min, 从95% H2O-5% MeCN匀变至5% H2O-95%
MeCN; 3.00-3.01 min, 保持在5% H2O-95%
MeCN,流速增加至4.5 mL min-1; 3.01 3.50 min, 保持在5% H2O-95% MeCN; 3.50-3.60 min, 返回至95% H2O-5% MeCN,流速降低至3.50
mL min-1; 3.60-3.90 min, 保持在95% H2O-5%
MeCN; 3.90-4.00 min, 保持在95% H2O-5%
MeCN,流速降低至2.5 mL min-1。
1
H NMR
光谱学
1H NMR光谱在Bruker
Avance III光谱仪上以400 MHz获得，使用残留的未氘化溶剂作为参比，除非另外指明，否则以DMSO-d6运行。
先前已公开的用于制备本发明的化合物实施例的那些中间体，使用在下文(表2)引用的参考文献中包含的程序获得。其它中间体通过本文所述的代表性合成方法制备。
表
2
：化合物中间体
中间体
A3*: (3-(
全氟代乙基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
氨基甲酸苯基酯
向中间体 A3 (3.00 g, 10.30 mmol)和NaHCO3 (1.70 g, 20.24 mmol)在DCM (25 mL)和THF (10 mL)中的搅拌溶液添加氯甲酸苯酯(1.40 ml, 11.14 mmol)和将得到的混合物搅拌过夜。添加另外0.2 eq.的氯甲酸苯酯和继续搅拌另外60h。将反应物用水和DCM稀释，将混合物通过相分离柱。将得到的黄色滤液在真空中浓缩，得到橙色油状物，在添加小体积的己烷和剧烈刮擦后，将其固体化成浅橙色固体。将固体在异己烷中研磨，通过过滤收集。将产物用另外的异己烷洗涤，得到中间体 A3* (3.86 g)，为白色固体。
1H NMR (400MHz;
CDCl3) δ 7.38-7.43 (m,
6H), 7.25-7.29 (m, 1H), 6.89-7.14 (m, 4H), 2.46 (s, 3H).
LCMS m/z 412 (M+H)+ (ES+); 410 (M-H)-
(ES-)。
中间体
A4*: (3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
氨基甲酸苯酯
向乙酸异丙酯(300 mL)和Na2CO3 (15.0 g, 142 mmol)水(100 mL)溶液的双相混合物中添加中间体 A4 (25.0 g, 116 mmol)。将得到的混悬液在RT下搅拌，直到所有固体溶解(ca. 10 mins)，然后用氯甲酸苯酯(16.0 mL, 128 mmol)处理，将混合物在RT下搅拌2 hr。添加水(200 mL)和分离各层。有机相用水(2 x 100 mL)和盐水(100
mL)洗涤，然后干燥和真空浓缩。将得到的稠黄色油状物用含5%乙醚的异己烷(ca. 250 mL)研磨和通过过滤收集如此产生的固体，和用异己烷洗涤(50 mL)，得到标题化合物中间体 A4* ，为白色粉末(28.4 g, 72%); Rt
3.48 min (方法1 酸性); m/z 336 (M+H)+ (ES+); 1H NMR δ: 1.23 (6H, d), 2.37 (3H, s), 2.91 (1H, sept),
6.29 (1H, s), 7.05-7.45 (9H, 重叠m), 9.95 (1H, s)。
中间体
A11*: (3-(
叔丁基
)-1-(6-
甲氧基吡啶
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-
氨基甲酸苯酯
向中间体 A11 (780 mg, 3.17 mmol)和NaHCO3 (532 mg, 6.33 mmol)在DCM (8 mL)和THF (2 mL)中的搅拌混悬液添加氯甲酸苯酯(481 µL, 3.80 mmol)。将得到的混合物在rt下搅拌过夜。将反应混合物在DCM (100 mL)和水(100 mL)之间分配。水相用DCM (100 mL)反萃取，合并的有机萃取物经干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到油状物，其用乙醚和异己烷的混合物研磨，得到中间体 A11* (736 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 10.12 (s, 1H),
8.32-8.31 (m, 1H), 7.85-7.82 (m, 1H), 7.41-7.37 (m, 2H), 7.24 (t, 1H), 7.10 (br
s, 2H), 7.00 (d, 1H), 6.37 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 1.28 (s, 9H).
LCMS m/z
367 (M+H)+ (ES+)。
中间体
A12: 1-(4-
甲氧基苯基
)-3-(
四氢呋喃
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
向3-氧代-3-(四氢呋喃-3-基)丙腈(718 mg, 4.64 mmol)在EtOH (20 mL)的溶液中添加浓盐酸(0.387
mL, 4.64 mmol)和(4-甲氧基苯基)肼盐酸盐(737 mg, 4.22 mmol)。将反应混合物加热至80℃达4 hr，然后冷却至RT和通过添加aq NaOH (2M, <5 mL)调整至pH 8。将得到的混合物在水(20 mL)和Et2O (25 mL)之间分配，分离水层，用乙醚萃取(25 mL)。合并的有机萃取物经干燥和真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 含0-5% MeOH的DCM, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A12 ，为浅橙色固体(503
mg, 45%); Rt 1.04 min (方法2);
m/z 260 (M+H)+, (ES+)。
中间体
A13: 3-(3-
甲基氧杂环丁烷
-3-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
将对甲苯基肼(79 mg, 0.65 mmol)和3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-3-氧代丙腈(Abraham,
S.等, WO
2011/022473, 24 Feb 2011) (100 mg, 0.65
mmol)在无水甲苯(3.0 mL)中的溶液加热至110℃达6 hr，然后冷却至RT达18 hr。将反应混合物真空蒸发和将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, 用含10-40% EtOAc的异己烷洗脱，梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A13 (117
mg, 通过HPLC 87%纯度,
65%); Rt 1.50 min (方法2 酸性); m/z 244 (M+H)+, (ES+)。如此获得的物质用于后续反应，无需另外纯化。
中间体
A14: 1-(4-
甲氧基苯基
)-3-(3-
甲基氧杂环丁烷
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
将3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-3-氧代丙腈(750 mg, 5.40 mmol)和(4-甲氧基苯基)肼(750 mg, 5.40 mmol)在无水甲苯(7.0 mL)中的溶液在装配有Dean-Stark蒸馏阱的装置中加热至110℃达4 hr。将反应混合物冷却至RT 18 hr，然后真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
40 g, 含10-75% EtOAc的异己烷，梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A14，为蓝色固体(980 mg, 66%); Rt
1.24 min (方法2 酸性); m/z
260 (M+H)+, (ES+)。
中间体
A15: 3-(
叔丁基
)-1-(3-(2-
甲氧基乙氧基
)
苯基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
向1-碘代-3-(2-甲氧基乙氧基)苯(1.18 g, 4.05 mmol)在无水甲苯(7.0 mL)中的溶液添加3-(叔丁基)-1H-吡唑-5-胺(619 mg, 4.45 mmol)，然后添加(1R,2R)-N 1,N 2-二甲基环己烷-1,2-二胺(255 μL, 1.62 mmol)和碳酸钾(1.96 g, 14.2 mmol)。将混合物用氮气吹洗，之后添加碘化铜(I) (77 mg, 0.41 mmol)，将反应混合物在氮气下加热回流18 hr。将得到的混合物冷却至RT和在EtOAc (250 mL)和水(250
mL)之间分配。分离有机层，用水(2 x 250 mL)和盐水(250
mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 120 g, 含0-5% [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM，梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A15，为棕色胶状物(1.04 g, 84%); Rt 2.20 min (方法1, 酸性); m/z 290 (M+H)+
(ES+)。
中间体
A16: 3-
异丙基
-1-(6-
甲氧基吡啶
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
将含4-甲基-3-氧代戊腈(599 mg, 5.39 mmol)和5-肼基-2-甲氧基吡啶(750 mg, 5.40 mmol)的无水甲苯(7.0
mL)溶液在装配有Dean-Stark蒸馏阱的装置中加热至110℃ 4 hr。将反应混合物冷却至RT 18
hr，然后真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 10-80%, EtOAc/异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A16，为浅黄色固体(825 mg, 63%); Rt
1.15 min (方法2 酸性); m/z
233 (M+H)+, (ES+)。
中间体
A17: 1-(4-
甲氧基苯基
)-3-(
四氢呋喃
-2-
基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
向2-甲基丙烷-2-醇钾(5.74 g, 51.2 mmol)在THF (30 mL)中的溶液经25 min添加四氢呋喃-2-甲酸甲酯(4.0 mL, 34 mmol)和MeCN (2.7 mL, 51 mmol)在THF (13.0 mL)中的溶液。将得到的混合物保持在RT 18 hr，然后通过添加1M盐酸(30 mL)淬灭，得到双相混合物。分离各相，保留有机相，用Et2O
(2 x 30 mL)和DCM (2 x 30 mL)萃取水相。合并原始的有机相和两种有机萃取物，将得到的溶液经干燥，然后小心真空浓缩，得到包含3-氧代-3-(四氢呋喃-2-基)丙腈、THF和tBuOH的混合物(近似比率为1:1:1 w/w/w) (9.07 g,
~30% w/w，通过1H-NMR, ~60%); 1H NMR δ: 1.90-2.10 (3H, 重叠m), 2.26 (1H, m), 3.70 (1H, d), 3.76 (1H, d), 3.90-3.99
(2H, 重叠m), 4.39 (1H, m)。该物质用于后续反应，无需另外纯化。
向上文所述的粗制酮腈(1.0 g, ~30%纯度, ~2.0 mmol)和(4-甲氧基苯基)肼盐酸盐(148 mg, 0.849 mmol)在EtOH (11.0 mL)中的溶液中添加浓盐酸(80
µL, 12 M, 1 mmol)。将反应混合物加热至回流4 hr，然后冷却至RT和真空蒸发。将残余物在DCM (5.0 mL)和饱和NaHCO3水溶液(5.0
mL)之间分配。分离水层和用DCM (3 x 5 mL)萃取，将合并的有机萃取物经真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 含0-10%
[含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱，然后SiO2, 40 g, 含0-100%
EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A17，为橙色油状物(51 mg, 21%); Rt
1.14 min (方法2 酸性); m/z
260 (M+H)+, (ES+)。
中间体
A18: 1-(3,4-
二甲基苯基
)-3-
异丙基
-1H-
吡唑
-5-
胺
向(3,4-二甲基苯基)肼盐酸盐(3.0 g, 17 mmol)和4-甲基-3-氧代戊腈(2.3 mL, 19 mmol)在EtOH
(20 mL)中的溶液添加浓盐酸(1.7 mL, 12 M, 20 mmol)。将反应混合物加热至回流18 hr，然后冷却至RT和真空蒸发。将残余物在DCM (50 mL)和水(20
mL)之间分配。分离水相，用DCM (2 x 50 mL)萃取。将合并的有机萃取物干燥和真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 80 g, 含0-100%
Et2O的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 A18，为橙色油状物(2.69 g, 67%); Rt 1.49 min (方法2 酸性); m/z 230 (M+H)+,
(ES+)。
中间体
A19*: (1-(
对甲苯基
)-3-(1,1,1-
三氟代
-2-
甲基丙烷
-2-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
氨基甲酸苯酯
将对甲苯基肼, HCl (3.2 g, 19.97 mmol)和5,5,5-三氟代-4,4-二甲基-3-氧代戊腈(4.3 g, 20.40
mmol)在乙醇(15 mL)中加热至回流8 h。将混合物在减压下浓缩，得到棕色油状物。添加饱和NaHCO3 (50 mL)和水(50 mL)，将混合物用乙醚(3 x 50 mL)萃取。合并的有机相经浓缩，将残余物通过色谱在Companion (40 g柱, 0-50%乙醚/异己烷)上纯化，得到橙色油状物，将其静置结晶。在环己烷(30 mL)中重结晶后，用异己烷(2 x 30 mL)洗涤，得到1-(对甲苯基)-3-(1,1,1-三氟代-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吡唑-5-胺(中间体 A19, 1.75 g)，为无色结晶固体。
1H NMR (400MHz; CDCl3) δ 7.42 (d,
2H), 7.26 (d, 2H), 5.67-5.64 (m, 1H), 3.72 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.52 (s, 6H).
LCMS m/z 284 (M+H)+
(ES+)。
将氯甲酸苯酯(0.85 ml, 6.79 mmol)在rt下添加至中间体 A19 (1.75 g, 6.18 mmol)和NaHCO3 (1.05
g, 12.50 mmol)在DCM (20 mL)和THF (15 mL)的搅拌混合物中。将混合物搅拌2h，然后在DCM (50 mL)和水(50 mL)之间分配。分离有机层，干燥 (MgSO4)和在减压下蒸发，得到无色油状物。将油状物自环己烷结晶，得到中间体 A19* (2.14 g)，为白色固体。
1H NMR (CDCl3) 400 MHz, δ:
7.43-7.31 (m, 6H), 7.30-7.22 (m, 1H), 7.20-7.07 (m, 2H), 7.05-6.88 (m, 1H),
6.68-6.55 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 1.56 (s, 6H)。
中间体
A20*: (3-(2-
氰基丙烷
-2-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-
氨基甲酸苯酯
将对甲苯基肼盐酸盐(6.5 g, 41.0 mmol)和2,2-二甲基-3-氧代戊二腈(5.58 g, 20.49 mmol)在EtOH (80 mL)中的混合物在回流下加热2h。将混合物冷却，在减压下蒸发溶剂。将残余物在EtOAc (200 mL)和NaHCO3水溶液(100 mL)之间分配，分离有机层，用水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(120 g柱, 0-40% EtOAc/异己烷)，得到2-(5-氨基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-3-基)-2-甲基丙腈(中间体 A20, 2.834 g)，为白色固体。
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ 7.40 (d,
2H), 7.27 (d, 2H), 5.67 (s, 1H), 3.80 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.73 (s, 6H).
LCMS m/z 241 (M+H)+
(ES+)。
将氯甲酸苯酯(1.6 ml, 12.77 mmol)在rt下加热至中间体 A20 (2.83 g, 11.78 mmol)和NaHCO3 (2 g,
23.81 mmol)在DCM (40 mL)和THF (10 mL)的搅拌混合物中。将混合物搅拌18h，然后在DCM (100 mL)和水(100 mL)之间分配。分离有机层，用盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。将残余物用乙醚/异己烷研磨，滤出固体和干燥，得到中间体 A20* (3.86 g)
LCMS m/z 361 (M+H)+
(ES+); 359 (M-H)- (ES-)。
中间体
A21: 3-(
丙
-1-
烯
-2-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
胺
将4-氟代-4-甲基-3-氧代戊腈(5.5 g, 36.2 mmol)和对甲苯基肼盐酸盐(8.61 g, 54.3
mmol)在EtOH (80 mL)中的混合物在80℃下加热3h。将混合物冷却，蒸发溶剂，将残余物在乙醚(200 mL)和饱和NaHCO3水溶液(200 mL)之间分配。分离有机层，用水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。粗产物通过色谱在硅胶上纯化(120 g柱, 0-40% EtOAc/异己烷)，得到中间体 A21 (3.51g)。
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ 7.44 (d,
2H), 7.26 (d, 2H), 5.77 (s, 1H), 5.46 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 3.73 (s, 2H), 2.39
(s, 3H), 2.13 (s, 3H).
LCMS m/z 214 (M+H)+
(ES+)。
中间体
A22*: (3-(2-
甲氧基丙烷
-2-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-
氨基甲酸苯酯
将中间体 A21
(2 g, 9.38
mmol)和含4M HCl的二氧杂环己烷(5 mL, 20 mmol)在MeOH (20 mL)中的混合物在60℃在密封管中加热72h。蒸发溶剂和将残余物在EtOAc (150 mL)和NaHCO3水溶液(100 mL)之间分配。分离有机层，用盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(80 g柱, 0-50% EtOAc/异己烷)，得到3-(2-甲氧基丙烷-2-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-胺(中间体 A22, 1.202 g)，为白色固体。
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ 7.42 (d,
2H), 7.26 (d, 2H), 5.63 (s, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 1.55
(s, 6H).
LCMS m/z 246 (M+H)+
(ES+)。
在rt下，将氯甲酸苯酯(1.1 ml, 8.78 mmol)添加至中间体 A22 (1.95 g, 7.95 mmol)和NaHCO3 (1.4
g, 16.67 mmol)在DCM (25 mL)和THF (7 mL)中的搅拌混合物中。将混合物搅拌3 h，然后在DCM (150 mL)和水(200 mL)之间分配。分离有机层，用盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在减压下蒸发。将残余物自环己烷重结晶，过滤固体和干燥，得到子标题化合物 (1.568 g)。
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ
7.41-7.23 (m, 7H), 7.17 (brs, 2H), 6.97 (brs, 1H), 6.59 (brs, 1H), 3.18 (s,
3H), 2.44 (s, 3H), 1.58 (s, 6H).
LCMS m/z 366 (M+H)+
(ES+); 364 (M-H)- (ES-)。
中间体
B1: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
吡啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 G1 (485 mg,
1.79 mmol)在NMP (5.0
mL)中的溶液添加3-氨基-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺(500 mg, 1.79 mmol)和含HCl的二氧杂环己烷溶液(4.0 M, 900 µL, 3.6 mmol)，将得到的混合物在120℃下在密封管中加热24 hr。将反应混合物冷却至RT，添加另外部分的含HCl的二氧杂环己烷(450 µL, 1.8 mmol)，将混合物在120℃下加热另外24 hr，然后再冷却至RT。将得到的混合物经过SCX捕获和释放，将如此获得的粗产物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 120 g, 含30-100% EtOAc的异己烷, 梯度洗脱，然后含0-20% MeOH的DCM, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 B1 ，为紫色固体(459 mg, 通过HPLC 80%纯度, 40%); Rt 1.73 min (方法3, 80%纯度); m/z 514 (M+H)+, (ES+)。该物质用于后续步骤，无需另外纯化。
中间体
B2: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-
正丙基
苯甲酰胺
向中间体 J1 (50 mg, 0.13 mmol)、丙烷-1-胺(13 μL, 0.16 mmol)和DIPEA (47 µL, 0.27 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液添加HATU (61 mg, 0.16
mmol)，将得到的混合物维持在室温下。17 hr后和24 hr后，添加另外部分的HATU (61 mg, 0.16 mmol)，和另外18 hr后，在室温下将混合物在EtOAc (5.0 mL)和饱和NaHCO3
(5.0 mL)水溶液之间分配。分离有机相和用盐水(2 x 5.0 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发，得到标题化合物中间体 B2 ，为紫色固体(37 mg, 63%); Rt
1.78 min (方法2 酸性); m/z 414 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B3: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J1 (247 mg, 0.617 mmol)、2-吗啉代乙胺(100 μL, 0.760 mmol)和DIPEA (550 μL, 3.2 mmol)在DMF (2.0 mL)的溶液中添加HATU (285 mg, 0.750 mmol)，将得到的混合物维持在室温下3 hr，然后在EtOAc (20 mL)和饱和NaHCO3水溶液(20 mL)之间分配。分离有机相和用盐酸(1.0 M, 20 mL)萃取。酸性萃取物通过添加NaOH水溶液(2.0 M, 10 mL)中和，将得到的水相用EtOAc
(2 x 30 mL)萃取。将自中和的水相的萃取物合并，用水(2 x 30 mL)和盐水(2 x
30 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发，得到标题化合物中间体 B3，为浅红色固体(226
mg, 68%); Rt 1.38 min (方法2 酸性); m/z 485 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B4: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-4-
甲氧基苯甲酰胺
在0℃，向中间体 J2(P) (243 mg, 0.451
mmol)、N 1 ,N 1 -二甲基乙烷-1,2-二胺(74 µL, 0.68 mmol)和DIPEA (160 µL, 0.9 mmol)在DMF (25 mL)的溶液添加HATU (257 mg, 0.676 mmol)。将得到的混合物升温至RT，3天后在DCM (10.0 mL)和NaOH水溶液(1.0 M, 10.0 mL)之间分配。分离有机相，用水(2 x 15 mL)和盐水(2 x
15 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, 含0-10% [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((5-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为橙色固体(137 mg, 80%纯度,
43%); Rt 2.66 min (方法3); m/z 573 (M+H)+, (ES+)。将该物质用于后续脱保护步骤，无需另外纯化。
向上述Boc-保护的胺(137 mg, 80%纯度,
0.239 mmol)在DCM (3.0 mL)的溶液中添加TFA
(0.50 mL, 6.7 mmol)，将反应混合物保持在室温下3 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B4 ，为浅粉红色固体(108 mg, 92%); Rt
1.96 min (方法3); m/z 473 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B5: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-4-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
在0℃下，向中间体 J2(P) (500 mg, 0.930
mmol)、2-吗啉代乙胺(183 µL, 1.39 mmol)和DIPEA (320 µL, 0.900 mmol)在DMF (3.0 mL)的溶液中添加HATU (529 mg, 1.39 mmol)，将得到的混合物升温至RT。10 min后和30 min后形成沉淀物，通过过滤收集固体物质，将其用水洗涤，然后真空干燥，得到(4-((2-((2-甲氧基-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为灰白色固体(511 mg, 84%); Rt 2.69 min (方法3); m/z 615 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(508 mg, 0.826 mmol)在DCM (10.0 mL)中的溶液添加TFA (2.0 mL, 27 mmol)，将反应混合物保持在RT下18 hr，然后真空蒸发。将残余物在CH2Cl2 (10.0 mL)和饱和NaHCO3水溶液(10.0
mL)之间分配。分离有机相，用水(2 x 20 mL)和盐水(2 x
20 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B5，为浅粉红色固体(162 mg, 通过HPLC 85%纯度, 32%); Rt 1.24 min
(方法3); m/z 515 (M+H)+, (ES+)。将该物质用于后续步骤，无需另外纯化。
中间体
B6: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
羟基乙基
)-4-
甲氧基苯甲酰胺
向中间体 J2(P) (411 mg, 0.763 mmol)、2-氨基乙醇(69 µL, 1.1 mmol)和DIPEA (270 µL, 1.50 mmol)在DMF (25 mL)的溶液中在0℃添加HATU (435 mg, 1.14
mmol)。将得到的混合物升温至RT达18 hr，然后在NaOH水溶液(1.0 M, 10.0 mL)和DCM (10.0 mL)之间分配。分离有机相和用盐水(2 x 15 mL)和水(2 x 15 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将如此获得的残余物与以相同方式进行的早期小规模反应的粗产物(100 mg的中间体 J2(P))合并，将合并的物质通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 含0-5% [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((3-((2-羟基乙基)氨基甲酰基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅粉红色固体(230 mg, 43%); Rt
3.23 min (方法3); m/z 546 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(228 mg, 0.418 mmol)在DCM (5.0 mL)的溶液中添加TFA (1.0 mL, 13 mmol)，将反应混合物保持在RT下18 hr，然后真空蒸发。将残余物溶于THF (4.0 mL)，添加含LiOH
(15 mg, 0.62 mmol)的水性MeOH(1:1 v/v, 2.0 mL)溶液，将反应混合物维持在室温下3天[为了皂化来自之前脱保护步骤的三氟乙酸盐]，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B6，为橙色固体(169
mg, 48%); Rt 2.31 min (方法3); m/z 446 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B7: 4-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-3-
甲氧基苯甲酰胺
向中间体 J3(P) (355 mg, 0.706 mmol)、N 1 ,N 1 -二甲基乙烷-1,2-二胺(116 µL, 1.06 mmol)和DIPEA (250 µL, 1.40
mmol)在DMF (1.5 mL)的溶液中添加HATU (403 mg, 0.676 mmol)，将得到的混合物保持在室温下3 hr，然后在DCM (15 mL)和NaOH水溶液(1.0 M, 15 mL)之间分配。分离有机相和用盐水(2 x 15 mL)和水(2 x
15 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 含0-10% [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((4-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁基酯，为橙色固体(284 mg, 67%); Rt
2.74 min (方法3); m/z 573 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(137 mg, 80%纯度,
0.239 mmol)在DCM (3.0 mL)的溶液中添加TFA
(1.0 mL, 13 mmol)，将反应混合物维持在室温下18 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B7，为浅橙色固体(208 mg, 88%); Rt
2.20 min (方法3); m/z 473 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B8: 4-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-3-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J3 (320 mg, 0.810 mmol)、2-吗啉代乙胺(159 µL, 1.21 mmol)和DIPEA (280 µL, 1.60 mmol)在DMF (2.0 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (459 mg, 1.21 mmol)。将得到的混合物升温至RT，3 hr后在DCM (10.0 mL)和NaOH水溶液(1.0 M, 10.0 mL)之间分配。分离有机相和用水(2 x 20 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
12 g, 含0-60% [含0.7 M
NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 B8，为浅粉红色固体(338 mg, 78%); Rt
1.53 min (方法2 酸性); m/z 515 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B9: 4-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
羟基乙基
)-3-
甲氧基苯甲酰胺
向中间体 J3(P) (370 mg, 0.736 mmol)、2-氨基乙醇(67 µL, 1.1 mmol)和DIPEA (260 µL, 1.50 mmol)在DMF (1.5 mL)的溶液中添加HATU (529 mg, 1.39 mmol)。将得到的混合物维持在室温下3 hr，然后在DCM (15 mL)和NaOH水溶液(1.0 M, 15 mL)之间分配。分离有机相，用水(2 x 15 mL)和盐水(2 x
15 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 40 g, 含0-7% [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((4-((2-羟基乙基)氨基甲酰基)-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅粉红色固体(318 mg, 77%); Rt
3.45 min (方法3); m/z 546 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(316 mg, 0.579 mmol)在DCM (6.0 mL)的溶液中添加TFA (0.80 mL, 11 mmol)和将反应混合物保持在室温下1.5 hr，然后真空蒸发。将残余物溶于THF (5.0 mL)和用含LiOH
(10 mg, 0.44 mmol)的水性MeOH (1:1 v/v, 2.0 mL)溶液处理，将混合物维持在室温下18 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B9，为浅紫色固体(253 mg, 81%); Rt 2.66 min (方法3); m/z 446 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B10: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
氯代
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J4(P) (500 mg, 1.00 mmol)、2-吗啉代乙胺(229 µL, 1.75 mmol)和DIPEA (360 µL, 1.50 mmol)在DMF (2.0 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (586 mg, 1.10
mmol)。将得到的混合物升温至RT，4 hr后用水(20 mL)稀释。将得到的混悬液超声处理10 min，然后通过过滤收集沉淀物，得到(4-((2-((3-甲基-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅棕色固体(589 mg, 89%); Rt
2.77 min (方法3); m/z 599 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(580 mg, 0.900 mmol)在DCM (10.0 mL)的溶液中添加TFA (2.0 mL, 27 mmol)，将反应混合物保持在室温下3.5 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B10，为棕色固体(475 mg, 100%); Rt
2.14 min (方法3); m/z 499 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B11: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)-5-(
三氟代甲基
)
苯甲酰胺
向中间体 J5(P) (577 mg, 1.07 mmol)、2-吗啉代乙胺(210 µL, 1.6 mmol)和DIPEA (370 µL, 2.1 mmol)在DMF (2.0 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (609 mg, 1.60 mmol)。将反应混合物升温至RT 3 hr，然后用水(40 mL)稀释，将得到的混悬液超声处理5 min。通过过滤收集沉淀物，得到(4-((2-((3-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟代甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅棕色固体(640 mg, 87%); Rt
2.97 min (方法3); m/z 653 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(637 mg, 0.976 mmol)在DCM
(12.0 mL)的溶液中添加TFA (2.0 mL, 27 mmol)。3 hr后在室温下将反应混合物真空蒸发，将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B11，为棕色固体(515 mg, 91%); Rt 2.41 min (方法3); m/z 553 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B12: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-5-
甲氧基苯甲酰胺
向中间体 J6(P) (647 mg, 1.19 mmol)、N 1 ,N 1 -二甲基乙烷-1,2-二胺(142 µL, 1.30 mmol)和DIPEA (330 µL, 1.90
mmol)在DCM (25 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (540 mg, 1.42
mmol)，10 min后将得到的混合物升温至RT。18 hr后，将反应混合物用NaOH水溶液(1.0 M, 25 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 120 g, 含0-10%
[含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基甲酰基)-5-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为橙色油状物(425 mg, 60%); Rt
1.67 min (方法2 酸性); m/z 573 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(425 mg, 0.742 mmol)在DCM (5.0 mL)的溶液中添加TFA (0.60 mL, 8.0 mmol)，将反应混合物保持在室温下5 hr。添加第二份TFA (0.60 mL, 8.0 mmol)，将反应混合物维持在室温下3天，然后真空蒸发。将残余物在EtOAc (20 mL)和饱和NaHCO3水溶液(20 mL)之间分配，分离有机相，干燥，然后真空蒸发，得到标题化合物中间体 B12，为橙色油状物(277 mg, 75%); Rt
1.28 min (方法2 酸性); m/z 473 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B13: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将中间体 G2(P) (15.0 g, 40.0 mmol)、p-TSA (12.2 g, 64.0 mmol)和3-氨基-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺(15.0 g, 52.0 mmol)在THF
(150 mL)中的混悬液加热至60℃ 20 h。将反应混合物真空浓缩，将残余物用饱和NaHCO3水溶液(250 mL)研磨。将形成的固体通过过滤收集，溶于DCM
(500 mL)，用饱和NaHCO3水溶液(2 x
200 mL)和水(2 x 250 mL)洗涤。将有机相经真空浓缩，得到棕色固体。将饱和NaHCO3水溶液洗出物过滤，得到另外的物质。将棕色固体合并，在减压下干燥，得到标题化合物中间体 B13和相应的N-Boc衍生物的混合物(约30 :
70)：(4-((2-((3-甲氧基-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯。将该物质直接用于下一步骤，无需进一步处理。
将上述粗混合物悬浮于DCM (300 mL)，冷却至0℃和用TFA (60 mL, 0.80 mol)逐滴处理10 min。将得到的深色溶液经在RT下搅拌2 h，然后真空浓缩。将残余物溶于DCM (500 mL)和用饱和NaHCO3水溶液(2 x 250 mL)洗涤。将合并的水相用DCM
(200 mL)萃取，将合并的有机萃取物用盐水(2 x 200 mL)洗涤，然后干燥和真空浓缩，得到标题化合物中间体 B13，为棕色固体(13.4 g, 55%产率，经2个步骤); Rt 1.78 min (方法1 碱性); m/z 515 (M+H)+ (ES+)。
中间体
B14: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
氯代
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J7(P) (372 mg, 0.734 mmol)、2-吗啉代乙胺(144 µL, 1.10 mmol)和DIPEA (260 µL, 1.5 mmol)在DMF (1.5 mL)的溶液中在0℃添加HATU (419 mg, 1.10 mmol)，将反应混合物升温至RT。18 hr后将混合物用水(30 mL)稀释，将得到的混悬液超声处理5 min。通过过滤收集沉淀物和干燥，得到(4-((2-((3-氯代-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅棕色固体(300 mg, 63%); Rt
2.86 min (方法3); m/z 619 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(300 mg, 0.485 mmol)在DCM
(5.0 mL)的溶液中添加TFA (0.80 mL, 11 mmol)，将反应混合物保持在室温下3.5 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B14，为棕色固体(248 mg, 94%); Rt 2.25 min (方法3); m/z 519 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B15: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
溴代
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J8(P) (1.28 g, 2.32 mmol)、2-吗啉代乙胺(0.52 mL, 4.0 mmol)和DIPEA (0.81 mL, 4.6 mmol)在DMF (4.5 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (1.32 g, 3.48
mmol)，然后将反应混合物升温至RT 18 hr。将混合物用水(50 mL)稀释，将由此获得的混悬液超声处理20 min。通过过滤收集如此形成的沉淀物，得到(4-((2-((3-溴代-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅灰色固体(1.55 g, 96%); Rt
2.89 min (方法3); m/z 663/665 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(633 mg, 0.954 mmol)在DCM
(11.0 mL)的溶液中添加TFA (2.5 mL, 34 mmol)，将反应混合物维持在室温下18 hr。将混合物真空蒸发，将残余物在DCM (50 mL)和饱和NaHCO3水溶液(50
mL)之间分配。分离有机相和连续用饱和NaHCO3水溶液(40
mL)、水(2 x 30 mL)和盐水(2 x
30 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发，得到标题化合物中间体 B15，为棕色固体(515
mg, 91%); Rt 1.41 min (方法4); m/z 563/565 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B16: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-
甲基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J6(P) (926 mg, 1.71 mmol)在THF (10 mL)的溶液中在N2下添加EDC.HCl (657 mg, 3.43 mmol)和N-甲基-2-吗啉代乙胺(531 mg, 3.69 mmol)。将得到的混合物保持在室温下18 hr，加热至40℃ 24 hr，然后冷却至室温另外3天。添加另一份N-甲基-2-吗啉代乙胺(266 mg, 1.84 mmol)和将反应混合物维持在室温下另外5 hr，然后在水(50 mL)和EtOAc (50 mL)之间分配。分离有机相，干燥和真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 80 g, 含0-10%
[含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((3-甲氧基-5-(甲基(2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅棕色固体(612 mg, 通过HPLC 91%纯度, 52%); Rt 1.74 min
(方法2 酸性); m/z 629 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(612 mg, 91%纯度,
0.886 mmol)在DCM (5.0 mL)的溶液中添加TFA
(1.5 mL, 20 mmol)，将反应混合物维持在18 hr，然后真空蒸发。将残余物在EtOAc (20 mL)和饱和NaHCO3水溶液(20 mL)之间分配。分离有机相，干燥和真空蒸发，得到标题化合物中间体 B16，为橙色油状物(355 mg, 通过HPLC 94%纯度, 71%); Rt 1.27 min
(方法2 酸性); m/z 529 (M+H)+, (ES+)。将该物质用于后续步骤，无需另外纯化。
中间体
B17: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
羟基乙基
)-5-
甲氧基苯甲酰胺
向中间体 J6(P) (795 mg, 1.46 mmol)、2-氨基乙醇(97 µL, 1.6 mmol)和DIPEA (0.41 mL, 2.3 mmol)在DCM (25 mL)的溶液中在0℃下添加HATU (664 mg, 1.75
mmol)，将得到的混合物保持在0℃下10 min，然后升温至RT。18 hr后，将反应混合物用DMF (5.0 mL)稀释，和维持在RT下另外24 hr。添加第二份DMF (5.0 mL)，将得到的混合物加热至40℃ 4天，然后冷却和在NaOH水溶液(1.0 M, 100 mL)和EtOAc (150 mL)之间分配。分离有机相和用盐水(2 x 100 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
80 g, 含0-10% [含0.7 M
NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((3-((2-羟基乙基)氨基甲酰基)-5-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为浅棕色固体(399 mg, 49%); Rt
2.09 min (方法2 酸性); m/z 546 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(399 mg, 0.731 mmol)在DCM (5.0 mL)的溶液中添加TFA (0.60 mL, 8.0 mmol)。5 hr后在RT下添加另一份TFA (0.60 mL, 8.0 mmol)和将反应混合物保持在RT下另外3天，然后真空蒸发。将残余物在EtOAc (20 mL)和饱和NaHCO3水溶液(20
mL)之间分配，分离有机相和干燥，然后真空蒸发。将残余物溶于THF (2.0 mL)、水(1.0
mL)和MeOH (0.5 mL)的混合物中，用含LiOH
(18 mg, 0.73 mmol)的水溶液(1.0 mL)在RT下处理16 hr。将得到的混合物通过添加水性盐酸(1.0 M, 0.5 mL)中和，在水(20
mL)和EtOAc (20 mL)之间分配。分离有机相和干燥，然后真空蒸发，得到标题化合物中间体 B17，为棕色固体(160 mg, 48%); Rt 1.51 min (方法2 酸性); m/z 446 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B18: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
甲氧基乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J5(P) (841 mg, 1.67 mmol)、2-甲氧基乙胺(190 µL, 2.2 mmol)和DIPEA (470 µL, 2.7 mmol)在DCM (10.0 mL)的溶液中添加HATU (115 mg, 0.301 mmol)。将反应混合物维持在RT下18 hr，然后用NaOH水溶液(1.0 M, 50 mL)洗涤。分离水层，用DCM (50 mL)萃取，将合并的有机相用水(2 x 50 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
120 g, 含0-10% [含0.7 M
NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((3-甲氧基-5-((2-甲氧基乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(900 mg, 86%); Rt
2.36 min (方法2 酸性); m/z 560 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的胺(900 mg, 1.61 mmol)在DCM (10.0 mL)的溶液中添加TFA (1.2 mL, 16 mmol)和将反应混合物维持在RT下5 hr，然后真空蒸发。将残余物在EtOAc (40 mL)和饱和NaHCO3水溶液(40 mL)之间分配，分离有机相和干燥，然后真空蒸发，得到标题化合物中间体 B18, (549 mg, 72%); Rt
1.70 min (方法3); m/z 460 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B19: 5-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-2-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 G2(P) (950 mg, 2.56 mmol)和5-氨基-2-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺(1.07 g, 3.32 mmol)在THF (10.0 mL)的混合物中添加p-TSA.H2O
(778 mg, 4.09 mmol)。将得到的混悬液在60℃加热18 hr，然后冷却至RT和在二氯甲烷(50 mL)和饱和NaHCO3水溶液(50 mL)之间分配。分离有机相和用水(2 x 50 mL)和盐水(2 x 50 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, 含0-80%
[含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 梯度洗脱)，得到(4-((2-((4-甲氧基-3-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为桃色固体(566 mg, 34%); Rt 2.72 min (方法3); m/z 615 (M+H)+, (ES+)。
向上述Boc-保护的氨基萘(566 mg, 0.875 mmol)在DCM (10.0 mL)的混悬液中逐滴添加TFA (2.0 mL, 27 mmol)，将得到的溶液保持在RT下18 hr，然后真空蒸发。将残余物通过SCX捕获和释放纯化，得到标题化合物中间体 B19，为浅粉红色固体(479 mg, 通过HPLC 90%纯度, 98%); Rt 2.05 min (方法3); m/z 515 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B20: 3-((6-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-4-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 J9(P) (0.50 g, 1.0 mmol)和EDC
(381 mg, 1.99 mmol)在THF (6.0 mL)的溶液中添加2-吗啉代乙胺(261 µL, 1.99 mmol)，将反应混合物维持在室温下18 hr，然后用水(15 mL)稀释。通过过滤收集得到的沉淀物，用水(3 x 5.0 mL)和乙醚(3 x
5.0 mL)洗涤，然后在室温下重悬于THF (5.0 mL) 3天。通过过滤收集固体，用THF (2 x 5.0 mL)和乙醚(2 x 5.0 mL)洗涤，真空干燥，得到(4-((6-((3-甲氧基-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯，为白色固体(227 mg, 36%); Rt 2.68 min (方法4); m/z 615 (M+H)+, (ES+)。
向含上述Boc-保护的胺(227 mg, 0.370 mmol)的MeOH
(3.5 mL)的混悬液中添加浓盐酸(0.90 mL, 10 mmol)，将反应混合物保持在室温下18 hr。将得到的混合物通过SCX捕获和释放直接纯化，得到标题化合物中间体 B20，为棕色固体(181 mg, 89%); Rt 2.14 min (方法4); m/z 515 (M+H)+, (ES+)。
中间体
B21: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将中间体 G2(P) (6.46 g, 17.37 mmol)、中间体 D1 (7.12 g, 26.0 mmol)和p-TSA一水合物(5.62 g, 29.5 mmol)在DMF (60 mL)中在60℃下(加热块温度，内部温度为55℃)加热7h。将混合物冷却和逐滴添加至饱和NaHCO3水溶液中(1 L)。将固体过滤，用水(50 mL)然后异己烷(100 mL)洗涤。将无定形固体在MeOH (200 mL)中搅拌，将产物结晶。浆化过夜，然后过滤和用MeOH (20 ml)洗涤固体，经干燥得到(4-((2-((3-乙炔基-5-((2-吗啉代乙基)氨基甲酰基)-苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体 B21(P), 8 g)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.76 (s, 1H),
9.32 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.41 - 8.33 (m, 1H), 8.16 - 8.03 (m, 2H), 7.90 (t,
1H), 7.85 - 7.78 (m, 1H), 7.67 - 7.51 (m, 3H), 7.48 - 7.37 (m, 2H), 6.58 (d,
1H), 4.16 (s, 1H), 3.56 (t, 4H), 3.46 - 3.27 (m, 2H), 2.49 - 2.30 (m, 6H), 1.52
(s, 9H). 10%w/w 脱-BOC化合物。
LCMS m/z 609 (M+H)+
(ES+)
将TFA (22 ml,
286 mmol)逐滴添加至中间体 B21(P) (9 g, 14.05 mmol)在DCM (50 mL)中的搅拌溶液中。将反应物在室温下搅拌2 h，然后逐滴添加至搅拌的水(100 mL)和1M碳酸钾溶液(280 mL, 280 mmol)中，继续搅拌直到泡腾停止。将混合物用二氯甲烷(2 x 250 mL)萃取，然后将合并的有机相干燥(MgSO4)和在减压下浓缩。将粗产物通过色谱在Companion (120 g柱, 2% MeOH:DCM至6%)上纯化，得到中间体 B21 (6.7 g)，为浅棕色泡沫。
1H NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ 9.77 (s, 1H),
8.39 (t, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.17 - 8.10 (m, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.94 (dd, 1H),
7.67 - 7.59 (m, 1H),
7.49 - 7.38 (m, 3H), 7.15 (d, 1H), 6.70 (d, 1H), 6.37 (d, 1H), 5.79 (s, 2H),
4.20 (s, 1H), 3.56 (t, 4H), 3.41 - 3.30 (m, 2H), 2.48 - 2.34 (m, 6H).
LCMS m/z 509 (M+H)+ (ES+)。
中间体
B22: (S)-3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
向(S)-1-吗啉代丙烷-2-胺, HCl (72.6 mg, 0.402 mmol)、中间体 J10(P) (200 mg, 0.402 mmol)和HATU (200 mg, 0.526 mmol)在DMF (4 mL)的搅拌溶液中添加Hunig’s碱(280 µL, 1.608 mmol)，将反应物搅拌过夜。将反应物用水稀释，得到米色固体沉淀。将混悬液搅拌另外20分钟，然后通过过滤收集固体，用水洗涤。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)上纯化，得到(S)-(4-((2-((3-乙炔基-5-((1-吗啉代丙烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(133 mg)，为浅橙色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.73 (s, 1H),
9.30 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.08-8.15 (m, 3H), 7.91 (s, 1H), 7.82 (d, 1H),
7.54-7.63 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.13-4.20 (m, 1H),
4.15 (s, 1H), 3.54 (t, 4H), 2.23-2.44 (m, 6H), 1.52 (s, 9H), 1.13 (d, 3H).
LCMS m/z 312 (M+2H)2+
(ES+)。
向紧接上述步骤的产物(133 mg, 0.214 mmol)在DCM (10 ml)的搅拌溶液中添加TFA (2000 µL, 26.0 mmol)和将反应物在室温下搅拌2h。将混合物真空浓缩，将残余物负载到预调节的SCX树脂柱上。树脂用MeOH洗涤，然后将产物在含1% NH3的MeOH中释放和真空浓缩，得到中间体 B22 (100 mg)，为浅棕色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.73 (s, 1H),
8.36 (d, 1H), 8.12-8.15 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.62-7.65 (m, 1H),
7.41-7.46 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 6.71 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.77 (s, 2H),
4.12-4.20 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.54 (t, 4H), 2.24-2.45 (m, 6H), 1.13 (d, 3H).
LCMS m/z 523 (M+H)+
(ES+)。
中间体
B23: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
甲基
-1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
向2-甲基-1-吗啉代丙烷-2-胺(64.0 mg, 0.404 mmol)、中间体 J10(P) (200 mg, 0.402 mmol)和HATU (200 mg, 0.526 mmol)在DMF (4 mL)的搅拌溶液中添加Hunig’s碱(280 µL, 1.608 mmol)和将反应物搅拌过夜。将反应物用水稀释，得到灰白色固体的沉淀，将混悬液置于搅拌中20分钟。将混悬液真空过滤，和用水洗涤固体，得到(4-((2-((3-乙炔基-5-((2-甲基-1-吗啉代丙烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体 B23(P), 245 mg)，为奶油色固体，其经真空下40℃干燥2h。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.70 (s, 1H),
9.30 (s, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.81 (d,
1H), 7.53-7.62 (m, 4H), 7.41 (d, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.57 (d, 1H), 4.13 (s, 1H),
3.51-3.54 (m, 4H), 2.61 (s, 2H), 2.45-2.47 (m, 4H), 1.51 (s, 9H), 1.30 (s, 6H).
LCMS m/z 637 (M+H)+ (ES+)。
向中间体 B23(P) (245 mg, 0.385 mmol)在DCM (10 mL)的搅拌溶液中添加TFA (2000 µL, 26.0 mmol)和将反应物在室温下搅拌4h。将混合物真空浓缩和将残余物负载到预调节的SCX树脂柱上。树脂用MeOH洗涤，然后将产物在含1% NH3的MeOH中释放和真空浓缩，得到中间体 B23 (200 mg)，为浅棕色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.71 (s, 1H),
8.36 (d, 1H), 8.12-8.15 (m, 1H), 7.95 (d, 2H), 7.62-7.63 (m, 2H), 7.41-7.46 (m,
2H), 7.36 (s, 1H), 7.14 (d, 1H), 6.70 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.77 (s, 2H), 4.17
(s, 1H), 3.52-3.55 (m, 4H), 2.61 (s, 2H), 2.46-2.48 (m, 4H), 1.31 (s, 6H).
LCMS m/z 537 (M+H)+ (ES+)。
中间体
B24: (R)-3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
向(R)-1-吗啉代丙烷-2-胺, HCl (73 mg, 0.404 mmol)、中间体 J10(P) (200 mg, 0.402 mmol)和HATU (200 mg, 0.526 mmol)在DMF (4 mL)的搅拌溶液中添加Hunig’s碱(280 µL, 1.608 mmol)和将反应物搅拌过夜。将反应物用水稀释，得到米色固体沉淀。将混悬液搅拌另外20分钟，然后通过过滤收集固体，用水洗涤。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)上纯化，得到(R)-(4-((2-((3-乙炔基-5-((1-吗啉代丙烷-2-基)氨基甲酰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体 B24(P), 153 mg)，为浅橙色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.73 (s, 1H),
9.30 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.09-8.15 (m, 3H), 7.91 (s, 1H), 7.82 (d, 1H),
7.54-7.63 (m, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.13-4.20 (m, 1H),
4.15 (s, 1H), 3.54 (t, 4H), 2.23-2.44 (m, 6H), 1.52 (s, 9H), 1.13 (d, 3H).
LCMS m/z 312 (M+2H)2+ (ES+)。
向含中间体 B24(P) (153 mg, 0.246 mmol)的DCM (10 mL)搅拌溶液中添加TFA (2000 µL,
26.0 mmol)和将反应物在室温下搅拌2h。将混合物真空浓缩和将残余物负载到预调节的SCX树脂柱上。树脂用MeOH洗涤，然后将产物在含1% NH3的MeOH中释放和真空浓缩，得到中间体 B24 (120 mg)，为浅棕色玻璃状固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.73 (s, 1H),
8.36 (d, 1H), 8.12-8.15 (m, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.62-7.65 (m, 1H),
7.41-7.46 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 6.71 (d, 1H), 6.36 (d, 1H), 5.77 (s, 2H),
4.13-4.20 (m, 1H), 4.18 (s, 1H), 3.54 (t, 4H), 2.24-2.45 (m, 6H), 1.13 (d, 3H).
LCMS m/z 262 (M+2H)2+ (ES+)。
中间体
C1: 1-(4-(2-
氯代嘧啶
-4-
基氧基
)
萘
-1-
基
)-3-(3-
异丙基
-1-
对甲苯基
-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲
向中间体 G2 (5.00 g, 18.4 mmol)在乙酸异丙酯(50 mL)和无水THF (50 mL)的混合物的溶液中分批添加(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苯酯中间体 A4* (7.72
g, 23.0 mmol)，然后添加三乙基胺(0.64 mL, 4.6 mmol)和将反应混合物在室温下维持18 hr。在该间隔时间期间，形成稠的紫色沉淀，其通过过滤收集，然后用乙酸异丙酯和THF (1:1 v/v, 3 x 40 mL)的混合物洗涤。将固体通过快速柱色谱纯化(SiO2, 330 g, 含0-5%
MeOH的DCM, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 C1，为浅紫色固体(5.72 g, 47%); Rt 2.48 min (方法4); m/z 513 (M+H)+ (ES+)。
中间体
C2: 1-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-3-(4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
基
)
脲
将中间体 A8* (3 g, 8.59 mmol)和中间体 G2 (2.333 g, 8.59 mmol)/乙酸异丙酯(100 mL)的搅拌混悬液用三乙基胺(0.3 mL, 2.152
mmol)处理和在60℃ (浴)搅拌1h。将溶液用乙酸乙酯(300 mL)稀释，用水(2x 100 mL)然后盐水(100 mL)洗涤，干燥(Na2SO4)和蒸发。将残余物在220 g redisep二氧化硅柱上纯化，使用含5% (对于17柱体积)和然后40%丙酮的甲苯作为洗脱液，然后在另一220 g redisep二氧化硅柱上使用0-3% MeOH/DCM作为洗脱液，得到中间体 C2 (3.703 g)，为米黄色泡沫。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.14 (s, 1H),
8.79 (s, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.79 (d, 1H), 7.67-7.64
(m, 1H), 7.60-7.56 (m, 1H), 7.47-7.37 (m, 5H), 7.26 (d, 1H), 6.41 (s, 1H), 2.40
(s, 3H), 1.28 (s, 9H).
LCMS m/z 527/529 (M+H)+ (ES+)。
中间体
C3: 1-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-3-(4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
基
)
脲
在100 mL烧瓶中，将中间体 A9* (1917 mg, 5.24 mmol)和中间体 G2 (1500mg, 5.24 mmol)的乙酸异丙酯(58
mL)溶液用三乙基胺(113
µL, 0.813 mmol)处理。将所得棕色溶液在70℃加热2 h，然后真空除去溶剂，得到稠的棕色油状物。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(120 g柱, 含EtOAc 0-15%的DCM)，得到中间体 C3 (2.169 g)，为白色结晶固体。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.14 (s, 1H),
8.75 (s, 1H), 8.66 (d, 1H), 8.09 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.82 - 7.77 (m, 1H),
7.69 - 7.62 (m, 1H), 7.58 (ddd, 1H), 7.51 - 7.46 (m, 2H), 7.43 (d, 1H), 7.27
(d, 1H), 7.15 - 7.10 (m, 2H), 6.40 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 1.29 (s, 9H).
LCMS m/z 544 (M+H)+
(ES+)。
中间体
C4: 1-(2,3-
二氯代
-4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
苯基
)-3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲
将Et3N
(0.1 ml, 0.717 mmol)添加至中间体 A4* (1556 mg, 4.64 mmol)和中间体 G4 (1348 mg, 4.64 mmol)在iPrOAc (30 mL)的混合物中，在60℃加热7h。将混合物在EtOAc (200 mL)和盐水(100 mL)之间分配，分离有机层，用水洗涤，干燥(MgSO4)和在减压下蒸发。将残余物用乙醚研磨，过滤，用iPrOAc、乙醚洗涤和干燥，得到中间体 C4 (986 mg)，为白色固体。
1H NMR (400MHz; DMSO-d6) δ 9.23 (s, 1H), 8.88
(s, 1H), 8.71 (d, 1H), 8.15 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.37-7.35 (m,
3H), 6.35 (s, 1H), 2.89 (七重峰, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.23 (d, 6H).
LCMS m/z 531/3 (M+H)+
(ES+)。
中间体
C5: 1-(4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)-2,3-
二氟代苯基
)-3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲
将Et3N
(0.1 ml, 0.717 mmol)添加至中间体 A4* (1.556 g, 4.64 mmol)和中间体 G5 (1.195 g, 4.64 mmol)在iPrOAc (30 mL)中的混合物中，在60℃加热7h。将混合物在EtOAc (200 mL)和盐水(100 mL)之间分配，分离有机层，用水洗涤，干燥(MgSO4)和在减压下蒸发。将残余物用乙醚/异己烷研磨，过滤和干燥，得到中间体 C5 (1.708 g)，为浅褐色固体。
1H NMR (400MHz; CDCl3) δ 8.48 (d,
1H), 7.94-7.89 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.26 (d, 2H), 7.19 (d, 2H), 6.97-6.92 (m,
3H), 6.34 (s, 1H), 2.97 (七重峰, 1H), 2.34 (s, 3H), 1.29 (d, 6H).
LCMS m/z 499/501 (M+H)+
(ES+)。
中间体
D1: 3-
氨基
-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向T3P (2.76 mL,
4.63 mmol)、3-氨基-5-溴代苯甲酸(1.00 g, 4.63 mmol)和Et3N
(1.9 mL, 14 mmol)在DCM (20 mL)的混悬液中在0℃下添加2-吗啉代乙胺(0.91 mL, 6.9 mmol)，将混合物升温至RT达18 hr。添加另外部分的T3P (2.76 mL, 4.63 mmol)和2-吗啉代乙胺(0.91
mL, 6.9 mmol)，1hr后将得到的混合物用饱和NaHCO3 (20 mL)水溶液分配。分离水层和用DCM (20 mL)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
40 g, 含MeOH的DCM, 2-5%, 梯度洗脱)，得到3-氨基-5-溴代-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺，为黄色结晶固体(1.4
g, 92%); Rt 0.16 min (方法2 酸性); m/z 328/330 (M+H)+ (ES+)。
向上文获得的苯甲酰胺(500 mg, 1.52 mmol)、碘化铜(I)(29.0 mg, 0.152 mmol)和乙炔基三异丙基甲硅烷(0.51 mL, 2.3 mmol)在Et3N (3.0 mL)和DMF (3.0 mL)混合物中的脱气混悬液中添加Pd(PPh3)4
(176 mg, 0.152 mmol)，将混合物加热至80℃达1hr，然后冷却至室温。通过过滤通过硅藻土除去固体，将挥发物真空蒸发，得到粗产物，其通过快速柱色谱纯化(SiO2,12 g, 含MeOH的DCM, 5-10%, 梯度洗脱)，得到3-氨基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酰胺，为浅黄色胶状物(600
mg, 92%); Rt 1.84 min (方法2 酸性); m/z 430 (M+H)+ (ES+)。
向上文获得的炔基甲硅烷(500 mg, 1.164 mmol)的THF (5.0 mL)溶液中添加TBAF
(116 mL, 1.16 mmol)，将混合物维持在室温下1h。添加另外部分的TBAF
(114 µL, 1.16 mmol)，30
min后将反应混合物在水(10 mL)和乙酸乙酯(10 mL)之间分配。分离有机层和用盐水洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,12
g, 含MeOH的DCM, 2-5%, 梯度洗脱)得到标题化合物中间体 D1，为无色胶状物(260
mg, 82%); Rt 1.17 min (方法2 碱性); LCMS m/z 274 (M+H)+ (ES+)。
中间体
D2: 3-
氨基
-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向3-氨基-5-甲氧基苯甲酸(2.00 g, 12.0 mmol)在DCM (20 mL)的溶液中在0℃添加2-吗啉代乙胺(1.90 mL, 14.5 mmol)和DIPEA (4.20 mL, 24.1 mmol)，然后经2小时分批添加HATU (5.46 g, 14.4 mmol)。在该时间期间，形成稠的米色沉淀物，添加另外的DCM (13 mL)以促进搅拌，将反应混合物升温至室温达18 hr。得到的溶液用DCM (50 mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(40 mL)、饱和NH4Cl水溶液(40 mL)和盐水(40 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
80 g, 含[含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 0-10%, 梯度洗脱)得到标题化合物中间体 D2，为无色油状物(1.95 g, 58%); Rt 0.75 min (方法4); m/z 280 (M+H)+ (ES+)。
中间体
D3: 3-
氨基
-5-
溴代
-N-(2-
甲氧基乙基
)
苯甲酰胺
向3-氨基-5-溴代苯甲酸(1.90 g, 8.53 mmol)、2-甲氧基-乙胺(1.50 ml, 17.08 mmol)和三乙基胺(3.60
mL, 25.8 mmol)在DCM
(30 mL)的搅拌溶液中在0℃添加含50 wt% T3P的EtOAc (7.65
ml, 12.85 mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜，然后回流90 min。将反应物冷却至室温，向其中添加另一分量的三乙基胺(3.60 ml, 25.8 mmol)。然后将反应容器在冰浴中冷却，添加来自新瓶中的含50 wt% T3P的EtOAc (7.65 ml, 12.85 mmol)。除去冰浴，将反应物升温至室温，在该温度下搅拌1 h。将反应物在饱和NaHCO3 (50 mL)和DCM (50 mL)之间分配。水相用新的DCM (50 mL)反萃取。合并的有机萃取物经干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到橙色油状物(3.12 g)。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(80 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)，得到中间体 D3 (1.96 g)，为橙色油状物。
1H NMR (DMSO-d6) 400
MHz, δ: 8.37 (t, 1H), 7.08
(t, 1H), 7.00-6.99 (m, 1H), 6.84 (t, 1H), 5.57 (s, 2H), 3.44-3.41 (m, 2H),
3.39-3.33 (m, 2H), 3.25 (s, 3H).
LCMS m/z 273/275 (M+H)+
(ES+)。
中间体
D4: 3-
氨基
-5-
乙炔基
-N-(2-
甲氧基乙基
)
苯甲酰胺
向中间体 D3 (1.91 g, 6.85 mmol)、碘化铜(I) (0.065 g,
0.343 mmol)和乙炔基三异丙基甲硅烷(2.30 mL,
10.25 mmol)在TEA
(4.1 mL, 29.4 mmol)和DMF (20
mL)的脱气混悬液中添加Pd(PPh3)4 (0.396 g,
0.343 mmol)。将反应物在85℃(外部温度)加热4h。将反应物冷却至室温，然后在EtOAc (50 mL)和盐水(50 mL)之间分配。水相用EtOAc (50 mL)反萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到棕色油状物(3.41 g)。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(120 g柱, 含0-100% EtOAc的异己烷)，得到3-氨基-N-(2-甲氧基乙基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酰胺(1.34 g)，为黄色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 8.43 (t, 1H),
7.06-7.03 (m, 2H), 6.78-6.77 (m, 1H), 5.45 (s, 2H), 3.43-3.40 (m, 2H),
3.38-3.34 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 1.10 (s, 21H).
LCMS m/z 375 (M+H)+
(ES+)。
向紧接上文获得的(三异丙基甲硅烷基)乙炔基-取代的苯甲酰胺(1.32 g, 3.52 mmol)在EtOAc (21 mL)的搅拌溶液中添加含1M TBAF的THF (3.52 mL, 3.52 mmol)。将反应物在室温下搅拌1h。将反应混合物在水(50 mL)和EtOAc (50 mL)之间分配。有机层用盐水(50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，得到橙色油状物。将粗产物溶于最小量的MeOH中和负载到SCX上。柱用MeOH然后含1% NH3的MeOH洗脱。滤出液经真空浓缩，得到中间体 D4 (534 mg)，为棕色油状物。
1H NMR (DMSO-d6)
400 MHz, δ: 8.37 (t, 1H),
7.07-7.04 (m, 2H), 6.75-6.74 (m, 1H), 5.45 (s, 2H), 4.07 (s, 1H), 3.44-3.40 (m, 2H), 3.38-3.34 (m, 2H), 3.25 (s,
3H).
LCMS m/z 219 (M+H)+
(ES+)。
中间体
D5: (S)-3-
氨基
-5-
溴代
-N-(1-
甲氧基丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
将3-氨基-5-溴代苯甲酸(900 mg, 4.04 mmol)、(S)-1-甲氧基丙烷-2-胺(860 µL, 8.14 mmol)和三乙基胺(1.7
mL, 12.20 mmol)在DCM (15 mL)的搅拌混合物在冰浴中冷却。逐滴添加含50 wt% T3P的EtOAc (3.6 mL,
6.05 mmol)，除去冰浴和将反应混合物升温至室温。添加DMF (2 mL)以助于溶解和将反应物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在饱和NaHCO3水溶液(50 mL)和DCM (50 mL)之间分配。水相用新的DCM (50 mL)反萃取。合并的有机萃取物用水(100 mL)、盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到橙色油状物。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(40 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)，得到中间体 D5 (1.07 g)，为橙色油状物。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 8.11 (d, 1H),
7.08 (t, 1H), 6.99-6.98 (m, 1H), 6.84 (t, 1H), 5.56 (s, 2H), 4.18-4.08 (m, 1H),
3.39-3.35 (m, 1H), 3.26-3.22 (m, 1H), 3.25 (s, 3H), 1.09 (d, 3H).
LCMS m/z 287/289 (M+H)+ (ES+)。
中间体
D6: (S)-3-
氨基
-5-
乙炔基
-N-(1-
甲氧基丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
向中间体 D5 (970 mg, 3.31 mmol)、乙炔基三异丙基甲硅烷(1.12 mL, 4.99
mmol)、碘化铜(I)
(32 mg, 0.168 mmol)和TEA (2
mL, 14.35 mmol)在DMF (10 mL)的脱气溶液中添加Pd(PPh3)4
(193 mg, 0.167 mmol)。将反应物在85℃加热3 h。将反应物冷却至室温，然后在EtOAc (50 mL)和盐水(50 mL)之间分配。水相用EtOAc (50 mL)反萃取。合并的有机萃取物用盐水(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到橙色油状物(1.5 g)。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(80 g柱, 含0-3% MeOH的DCM)，得到(S)-3-氨基-N-(1-甲氧基丙烷-2-基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酰胺(894 mg)，为橙色油状物。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 8.13 (d, 1H),
7.04-7.03 (m, 1H), 7.01 (t, 1H), 6.79-6.78 (m, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.18-4.11 (m,
1H), 3.40-3.36 (m, 1H), 3.26-3.22 (m, 4H), 1.11-1.09 (m, 24H).
LCMS m/z 389 (M+H)+ (ES+)。
向紧接上文获得的(三异丙基甲硅烷基)乙炔基-取代的苯甲酰胺(875 mg, 2.026 mmol)在EtOAc (12 mL)的搅拌溶液中添加含1M TBAF的THF (2026 µL, 2.026 mmol)。将反应物在室温下搅拌1h。将反应混合物在水(30 mL)和EtOAc (20 mL)之间分配。有机层用盐水(20 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和浓缩，得到橙色油状物(876 mg)。将粗产物溶于最小量的MeOH中和负载到SCX上。柱用MeOH然后含1% NH3的MeOH洗脱。滤出液经真空浓缩，得到棕色油状物，其通过色谱在硅胶上纯化(40 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)，得到中间体 D6 (307 mg)，为橙色油状物。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 8.11 (d, 1H),
7.07-7.03 (m, 2H), 6.75-6.74 (m, 1H), 5.44 (s, 2H), 4.17-4.12 (m, 1H),
3.39-3.34 (m, 1H), 3.25-3.21 (m, 4H), 1.09 (d, 3H).
LCMS m/z 233 (M+H)+ (ES+)。
中间体
D7: 3-
氨基
-5-
乙炔基苯甲酰胺
将Pd(PPh3)4
(0.269 g, 0.233 mmol)添加至3-氨基-5-溴代苯甲酰胺(0.5 g, 2.325 mmol)、CuI (0.044 g,
0.233 mmol)和乙炔基三异丙基甲硅烷(0.782 mL,
3.49 mmol)在TEA
(2 mL)和DMF (2
mL)的脱气混悬液中。在80℃ (加热块温度)加热1 h，然后冷却和过滤(Whatman玻璃纤维垫GF/A)。蒸发溶剂，将残余物在EtOAc (20 mL)和20%w/w NaCl溶液(25 mL)之间分配。有机层经分离，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发溶剂至稠的棕色油状物。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 2% MeOH:DCM至8%)上纯化，得到3-氨基-5-((三异丙基甲硅烷基)-乙炔基)苯甲酰胺(475 mg)，为浅褐色固体。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.87 (s, 1H),
7.21 (s, 1H), 7.13 - 7.02 (m, 2H), 6.79 (dd, 1H), 5.40 (s, 2H), 1.11 (s, 21H).
LCMS m/z 317 (M+H)+
(ES+)。
将紧接上文获得的(三异丙基甲硅烷基)乙炔基-取代的苯甲酰胺(475 mg, 1.501 mmol)溶于THF (5 mL)，添加含1M TBAF的THF (1501 µL, 1.501 mmol)。搅拌1 h然后在水(20 mL)和乙酸乙酯(20 mL)之间分配，分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发溶剂。将粗产物通过色谱在Companion (12 g柱, 5% MeOH:DCM至10%)上纯化，得到中间体 D7 (145 mg)，为无色结晶固体。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.82 (s, 1H),
7.22 (s, 1H), 7.09 (dt, 2H), 6.76 (dd, 1H), 5.41 (s, 2H), 4.06 (s, 1H).
LCMS m/z 161 (M+H)+
(ES+)。
中间体
D8: 3-
氨基
-N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-5-
乙炔基苯甲酰胺
将Pd(PPh3)4
(0.218 g, 0.189 mmol)添加至3-氨基-5-溴代-N-(2-(二甲基氨基)乙基)苯甲酰胺(0.54 g, 1.887 mmol)、CuI (0.036 g,
0.189 mmol)和乙炔基三异丙基甲硅烷(0.635 mL,
2.83 mmol)在TEA
(2 mL)和DMF (2mL)的脱气混悬液中。在80℃ (加热块温度)加热1h，然后冷却和过滤(Whatman玻璃纤维垫GF/A)。蒸发溶剂和将残余物在EtOAc (20 mL)和20%w/w NaCl溶液(25 mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发溶剂至稠的棕色油状物。将粗产物通过色谱在Companion 40g柱, 10% MeOH:DCM上纯化，得到3-氨基-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)苯甲酰胺(600 mg)，为无色胶状物，其静置固化。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (t, 1H),
7.04 (dd, 1H), 7.02 (t, 1H), 6.79 (dd, 1H), 5.43 (s, 2H), 3.33 - 3.26 (m, 2H),
2.37 (t, 2H), 2.17 (s, 6H), 1.11 (s, 21H).
LCMS m/z 388 (M+H)+
(ES+)。
将紧接上文获得的(三异丙基甲硅烷基)乙炔基-取代的苯甲酰胺(600 mg, 1.548 mmol)溶于THF (50 mL)和添加含1M TBAF的THF (1548 µL, 1.548 mmol)。搅拌1h，然后在水(100 mL)和乙酸乙酯(100 mL)之间分配，分离有机层，用20%w/w NaCl溶液(100 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发。将粗产物通过色谱在Companion (12 g柱, 10% MeOH:DCM)上纯化，得到中间体 D8 (240 mg)，为浅黄色胶状物。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (t, 1H), 7.10 -
6.99 (m, 2H), 6.76 (dd, 1H), 5.44 (s, 2H), 4.07 (s, 1H), 3.32 - 3.24 (m, 2H),
2.37 (t, 2H), 2.17 (s, 6H)。
中间体
E1: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸甲酯
向含CDI (1.47 g, 9.08 mmol)的DCM (35 mL)溶液中添加中间体 A8 (2.08 g, 9.08 mmol)，将激活反应混合物保持在室温下18 hr，然后将其逐滴添加至含中间体 H1 (1.3 g, 60%纯度, 2.0
mmol)的DCM (20 mL)溶液。2 hr后，在室温下将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(100
mL)、水(100 mL)和盐水(100
mL)的混合物洗涤，分离有机层和真空蒸发。残余物用MeOH (100 mL)研磨，将得到的固体通过过滤收集，用MeOH (50 mL)洗涤和真空干燥。以类似方式从滤液中分离第二批，合并两种固体，得到标题化合物中间体 E1，为紫色固体(755 mg, 85%纯度, 50%); Rt 2.64 min (方法2 酸性); m/z 642 (M+H)+
(ES+)。将该物质用于后续步骤，无需进一步纯化。
中间体
E2: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲基苯甲酸甲酯
向含CDI (364 mg, 2.25 mmol)的DCM (10.0 mL)溶液添加中间体 A8 (515 mg, 2.25 mmol)，将混合物维持在室温下1 hr。然后将一部分所得溶液(5.0 mL, 1.1 mmol)添加至含中间体 H4 (200
mg, 0.499 mmol)的DCM (3.0 mL)溶液，之后将合并的反应混合物用THF稀释，以助搅拌(5.0 mL)和保持在室温下2 hr。通过添加MeOH (10 mL)淬灭反应，通过过滤收集得到的沉淀物，用MeOH (20 mL)洗涤，真空干燥，得到甲基标题化合物中间体 E2，为浅粉色固体(178 mg, 54%); Rt 2.69 min (方法2 酸性); m/z 656 (M+H)+
(ES+)。
中间体
E3: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含CDI (82 mg, 0.50 mmol)的DCM (2.0 mL)溶液添加中间体 A9 (124 mg, 0.50 mmol)和将混合物保持在室温下18 hr。将一份该溶液(1.0 mL, 0.25 mmol)添加至含中间体 H5 (70
mg, 0.17 mmol)的DCM (2.0 mL)溶液中，将反应混合物维持在室温下2 h，然后通过添加MeOH (3.0 mL)淬灭。将得到的混合物经真空蒸发，将残余物在DCM (6.0 mL)和饱和NaHCO3水溶液(6.0 mL)之间分配。分离有机相和用水(10 mL)和盐水(10 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。残余物用MeOH
(10 mL)研磨，通过过滤收集产物，真空干燥，得到标题化合物中间体E3，为浅粉色固体(116 mg, 100%); Rt 2.65 min (方法2 酸性); m/z 688 (M+H)+
(ES+)。
中间体
E4: 3-
溴代
-5-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸甲酯
向含CDI (73 mg, 0.45 mmol)的DCM (2.0 mL)溶液添加中间体 A9 (111 mg, 0.45 mmol)，将混合物维持在室温下18 hr。将一份所得溶液(1.0 mL, 0.23 mmol)添加至含中间体 H6 (60
mg, 0.13 mmol)的DCM (2.0 mL)溶液中，将反应混合物维持在室温下2 hr，然后通过添加MeOH (3.0 mL)淬灭。将挥发物真空蒸发，将残余物在DCM (6.0 mL)和饱和NaHCO3水溶液(6.0 mL)之间分配。分离有机相，用水(10 mL)和盐水(10 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。残余物用MeOH
(10 mL)研磨，通过过滤收集如此获得的固体，真空干燥，得到标题化合物中间体 E4，为灰白色固体(58
mg, 61%); Rt 2.90 min (方法2 酸性); m/z 736/738 (M+H)+ (ES+)。
中间体
E5
：
3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含CDI (320 mg, 1.98 mmol)的DCM (2.0 mL)溶液中添加中间体 A4 (425 mg, 1.98 mmol)，将反应混合物维持在室温下18 hr。将得到的溶液在室温下添加至含中间体 H5 (329
mg, 0.790 mmol)的THF (2.0 mL)溶液中，将反应混合物维持在室温下2 hr，此时形成沉淀。通过过滤收集固体，用THF (10 mL)洗涤，然后真空干燥得到标题化合物中间体 E5，为白色固体(407 mg, 76%); Rt 2.65 min (方法2 酸性); m/z 658 (M+H)+
(ES+)。
中间体
F1: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸
向按上文所述获得的中间体 E1 (750 mg, 0.993 mmol)的THF (6.0 mL)混悬液中添加含LiOH (36mg, 1.5 mmol)的水(1.0
mL)和MeOH (1.0 mL)混合物，将得到的异质混合物在40℃加热3 hr，然后冷却至室温18 hr。将混合物真空浓缩至其初始体积的一半，然后倾入盐酸(1.0 M, 40 mL)中。将混合物用EtOAc
(10 mL)稀释，和超声处理10 min，在水相中得到白色沉淀物，其通过过滤收集，和真空干燥得到标题化合物中间体 F1，为灰白色固体(300 mg, 47%); Rt
2.51 min (方法2 酸性); m/z
628 (M+H)+ (ES+)。
中间体
F2: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲基苯甲酸
向上文获得的中间体 E2 (175 mg, 0.267 mmol)在THF (6.0 mL)的混悬液中添加含LiOH
(9.6 mg, 0.40 mmol)的水(1.0 mL)和MeOH (1.0 mL)混合物，将得到的异质混合物在50℃加热5 hr，冷却至室温。18 hr后，将反应物再加热至50℃达3 hr，然后冷却至室温，通过添加盐酸(1.0 M, 4.0 mL)酸化。将混合物用水(6.0
mL)稀释，形成的沉淀物通过过滤收集，用水(3.0 mL)洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 F2，为白色固体(161 mg, 92%); Rt 2.59 min (方法2 酸性); m/z 642 (M+H)+
(ES+)。
中间体
F3: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸
向含中间体 E3 (116 mg, 0.174 mmol)的THF (6.0 mL)混悬液中添加含LiOH
(6.3 mg, 0.26 mmol)的水(1.0 mL)和MeOH (1.0 mL)混合物，将得到的异质混合物在40℃加热2 hr，然后冷却至室温。18 hr后，将混合物用THF (2.0 mL)稀释，再加热至50℃达1 hr，在这时间期间获得溶液。冷却至室温后，将混合物用盐酸(1.0
M, 3.0 mL)酸化，然后用水(5.0 mL)稀释。如此形成的沉淀物通过过滤收集，用水(3.0 mL)洗涤，然后真空干燥，得到标题化合物中间体 F3，为浅棕色固体(67 mg, 52%); Rt 2.38 min (方法2 酸性); m/z 674 (M+H)+
(ES+)。
中间体
F4: 3-
溴代
-5-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸
向含中间体 E4 (58 mg, 0.079 mmol)的THF (6.0 mL)混悬液中添加含LiOH
(2.8 mg, 0.12 mmol)的水(1.0 mL)和MeOH (1.0 mL)混合物，将得到的异质混合物在40℃加热2 hr，然后冷却至室温。18 hr后，将混合物用THF (2.0 mL)稀释，加热至50℃达3 hr，然后冷却至室温。另外24 hr后，将反应混合物用盐酸(1.0 M, 3.0 mL)酸化，用水(5.0
mL)稀释。由此形成的沉淀物通过过滤收集，用水(3.0 mL)洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 F4，为浅粉色固体(42 mg, 74%); Rt 2.70 min (方法2 酸性); m/z 722/724 (M+H)+
(ES+)。
中间体
G1(P):
(4-((2-
氯代吡啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
基
)
氨基甲酸叔丁酯
将含中间体 G1 (1000 mg, 3.69 mmol)、二-叔丁基二碳酸酯(750 mg, 3.44 mmol)的t-BuOH (10 mL)混合物在回流下搅拌18 h。将混合物用水(15 mL)稀释，通过过滤收集。将固体在乙醚中研磨，得到中间体 G1(P) (1002 mg)，为浅灰色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.37 (s, 1H),
8.28 (d, 1H), 8.16 (d, 1H), 8.82 (dd, 1H), 7.66 (d, 1H), 7.66-7.54 (m, 2H),
7.40 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.91 (dd, 1H), 1.52 (s, 9H).LCMS m/z 371 (M+H)+
(ES+); 369 (M-H)- (ES-)。
中间体
G3: 4-((6-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
胺
向含4-氨基萘-1-醇盐酸盐(6.82 g, 31.4 mmol)的乙腈(80 mL)溶液在0℃逐滴添加DBU (11.0 mL, 75.0 mmol)。10 min后，经5 min分批添加4,6-二氯代嘧啶(5.00 g, 34.0 mmol)，将反应混合物升温至室温达3 hr，然后真空蒸发。将残余物用水(250 mL)稀释和超声处理15 min，然后室温下搅拌16 hr。将得到的沉淀物通过过滤分离，用水(3 x
100 mL)洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 G3，为灰色固体(8.27
g, 97%); Rt 1.85 min (方法2, 酸性); m/z 272 (M+H)+, (ES+)。
中间体
G3(P): (4-((6-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
基
)
氨基甲酸叔丁酯
向含(4-羟基萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(10.0 g, 29.3 mmol)和4,6-二氯代嘧啶(4.37 g, 29.3 mmol)的MeCN (75 mL)溶液中在N2下添加DBU (5.3 mL, 35 mmol)，其速率使得内部温度保持在18-21℃的范围。1 hr后，添加水(75 mL)，将得到的异质混合物维持在室温下18 hr。得到的沉淀物通过过滤收集，用水(2 x 75 mL)洗涤，然后真空干燥，得到标题化合物中间体 G3(P)，为棕色固体(10.4 g, 95%); Rt 2.57 min (方法2 酸性); m/z 372 (M+H)+,
(ES+)。
中间体
G4: 2,3-
二氯代
-4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
苯胺
将DBU (11.85 mL,
79 mmol)经5
min在0-5℃添加至含4-氨基-2,3-二氯代苯酚(10 g, 56.2
mmol)的MeCN
(150 mL)的搅拌混合物。搅拌5 min后，经5 min分批添加2,4-二氯代嘧啶(8.95 g, 60.1
mmol)，然后将混合物升温至室温和搅拌2h。将溶剂在减压下蒸发，将残余物在乙醚(200 mL)和水(200 mL)之间分配。将水层用乙醚萃取(200 mL)，然后合并的有机层用盐水(200 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤通过二氧化硅垫和在减压下蒸发。将残余物用乙醚-异己烷研磨，过滤和干燥，得到中间体 G4 (14.403 g)，为浅棕色固体。
1H NMR (CDCl3) 400 MHz, δ: 8.45
(d, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.84 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 4.22 (s, 2H).
LCMS m/z 290/2/4 (M+H)+ (ES+)。
中间体
G5: 4-((2-
氯代嘧啶
-4-
基
)
氧基
)-2,3-
二氟代苯胺
将DBU (7.27 ml,
48.2 mmol)经5
min在0-5℃添加至含4-氨基-2,3-二氟代苯酚(5 g, 34.5
mmol)的MeCN
(100 mL)搅拌混合物中。搅拌5 min后，经5 min分批添加2,4-二氯代嘧啶(5.49 g, 36.9
mmol)，然后将混合物升温至室温和搅拌2h。将溶剂在减压下蒸发，将残余物在乙醚(200 mL)和水(200 mL)之间分配。水层用乙醚(200 mL)萃取，然后合并的有机层用盐水(200 mL)洗涤，干燥(MgSO4)和在减压下蒸发。粗产物通过色谱在硅胶上纯化(120 g柱, 0-40% EtOAc/异己烷)，得到中间体 G5 (4.827 g)，为固体。
1H NMR (400MHz; CDCl3) δ 8.46 (d,
1H), 6.89 (d, 1H), 6.81-6.77 (m, 1H), 6.58-6.53 (m, 1H), 3.85 (s, 2H).
LCMS m/z 258/260 (M+H)+
(ES+)。
中间体
H1: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸甲酯
向含中间体 G2 (5.20 g, 17.0 mmol)和3-氨基苯甲酸甲酯(5.90 g, 39.0 mmol)的THF (60 mL)溶液中添加p-TSA (592 mg, 3.11 mmol)，将得到的混悬液在回流下加热16 hr。将反应混合物冷却至RT，通过过滤收集悬浮的固体，用THF (2 x 50 mL)和Et2O (2 x 50 mL)洗涤，然后真空干燥，得到标题化合物中间体 H1，为紫色固体(1.91 g, 29%); Rt 2.06 min (方法2 酸性); m/z 387 (M+H)+,
(ES+)。
中间体
H2(P): 3-((4-((4-((
叔
-
丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-4-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含中间体 G2(P) (2.0 g, 5.4 mmol)的乙酸异丙酯(15 mL)脱气混悬液中添加3-氨基-4-甲氧基苯甲酸甲酯(1.95 g, 10.8 mmol)和TFA (0.42 mL, 5.6 mmol)。将反应混合物用乙酸异丙酯稀释，以利于混合(15
mL)和加热至65℃达3天，然后冷却至室温。形成沉淀物，将其通过过滤除去。通过LCMS分析固体表明，其不含有所需产物，因而将该物质弃去。将滤液在EtOAc (100 mL)和饱和NaHCO3水溶液[100 mL]之间分配，分离有机相和用盐水(2 x 50 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 80 g, 含0-50% EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 H2(P)，为浅粉色固体(1.79 g, 64%); Rt
2.70 min (方法2 酸性); m/z 517 (M+H)+, (ES+)。
中间体
H3: 4-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-3-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含中间体 G2 (1.5 g, 5.5 mmol)的DMF (6.5 mL)溶液中添加4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(1.20 g, 6.62 mmol)和p-TSA一水合物(1.57 g, 8.28 mmol)。将反应混合物加热至60℃达6 hr，然后冷却至室温和在EtOAc (50 mL)和饱和NaHCO3水溶液(50
mL)之间分配。分离有机相和用盐水(2 x 50 mL)洗涤。形成沉淀物，将其通过过滤收集。通过LCMS分析固体表明，其不含所需产物，因而将该物质弃去。将滤液真空蒸发，得到红色油状物，其通过快速柱色谱纯化(SiO2, 80 g, 含0-70%
EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到中间体 H3，为深紫色固体(459 mg, 20%); Rt
2.26 min (方法2 酸性); m/z 417 (M+H)+, (ES+)。
中间体
H3(P): 4-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-3-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含中间体 G2(P) (4.08 g, 11.0 mmol)的乙酸异丙酯(30.0 mL)脱气混悬液中添加4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(2.98 g, 16.5 mmol)和TFA (0.85 mL, 11 mmol)。将反应混合物用乙酸异丙酯(30 mL)稀释，以利于搅拌，将得到的混悬液加热至65℃达3天，然后冷却至室温。通过过滤收集悬浮固体，用乙酸异丙酯洗涤，将如此获得的粗产物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 80 g, 含0-100% EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 H3(P)，为浅紫色固体(1.65 g, 28%); Rt
2.80 min (方法2 酸性); m/z 517 (M+H)+, (ES+)。
中间体
H4: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲基苯甲酸甲酯
向含中间体 G2 (806 mg, 2.97 mmol)和3-氨基-5-甲基苯甲酸甲酯(490 mg, 2.97 mmol)的DMF (20 mL)溶液添加p-TSA (1.13 g, 5.93
mmol)，将反应混合物加热至60℃达16 hr。冷却至室温后，将混合物在EtOAc (30 mL)和饱和NaHCO3水溶液(30 mL)之间分配。分离有机相，用水(30 mL)和盐水(40 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2,
12.0 g, 含0-100% EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 4，为红色油状物(680 mg, 25%); Rt 2.13 min (方法2 酸性); m/z 401 (M+H)+,
(ES+)。
中间体
H5: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸甲酯
向含中间体 G2(P) (41.0 g, 110 mmol)和3-氨基-5-甲氧基苯甲酸甲酯(20.3 g, 111 mmol)的THF (200 mL)混合物中添加p-TSA (592 mg, 3.11
mmol)，将得到的混悬液在60℃加热18 hr。将反应混合物冷却至室温，将悬浮的固体通过过滤收集，用THF (2 x 100 mL)洗涤，然后重悬浮于含NH3的MeOH (0.7 M)溶液中，剧烈搅拌。30 min后，通过过滤收集固体，用含NH3的MeOH
(0.7 M)洗涤，然后真空干燥，得到3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯，中间体 H5(P)，为米色固体(34.0 g, 通过HPLC 92%纯度, 56%)。
向含中间体 H5(P) (10.2 g, 92%纯度, 18.2 mmol)的DCM (50 mL)混悬液中逐滴添加TFA (10 mL, 130 mmol)，将得到的黑色溶液保持在室温下21 hr。添加另外部分的TFA (5.0 mL, 67 mmol)，另外3 hr后，将反应混合物真空蒸发。将残余物与甲苯(100 mL)然后与含NH3的MeOH (0.7 M, 2 x 100 mL)溶液共蒸发，用MeOH
(100 mL)研磨，然后通过过滤收集得到的固体，用MeOH (50 mL)洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 H5，为米色固体(7.9 g, 99%); Rt 2.15 min (方法2 酸性, 92%纯度); m/z 417 (M+H)+, (ES+)。
中间体
H6: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
溴代苯甲酸甲酯
向含中间体 G2 (236 mg, 0.869 mmol)和3-氨基-5-溴代苯甲酸甲酯(200 mg, 0.869 mmol)的DMF (6.0 mL)溶液中添加p-TSA (331 mg, 1.74
mmol)，将得到的混合物在60℃加热8 hr。冷却至室温后，将反应混合物在EtOAc (10 mL)和饱和NaHCO3水溶液(10 mL)之间分配。分离有机相，用盐水(10 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, 含0-100% EtOAc的异己烷, 梯度洗脱)，得到标题化合物中间体 H6，为棕色固体(124 mg, 通过HPLC 82%纯度, 25%); Rt 2.15 min (方法2 酸性, 82%纯度); m/z 465/467 (M+H)+, (ES+)。将该物质用于后续步骤无需另外纯化。
中间体
J1: 3-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸
向含中间体 H1, (905 mg, 2.34 mmol)的THF (5.0 mL)和水(2.0
mL)的混合物溶液中添加NaOH水溶液(2.0
M, 1.4 mL, 2.8 mmol)，将反应混合物维持在室温下3 hr。得到的混合物通过添加2 M盐酸酸化至pH 6，这产生紫色沉淀物。通过过滤收集固体，用水洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 J1，为浅紫色固体(643
mg, 73%); Rt 1.62 min (方法2 碱性); m/z 373 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J2(P): 3-((4-((4-((
叔丁氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-4-
甲氧基苯甲酸
向甲基酯中间体 H2(P) (1.75 g, 3.39 mmol)的THF (12 mL)混悬液中添加含LiOH (122 mg, 5.08
mmol)的含水MeOH (1:1 v/v, 6.0
mL)溶液。将反应混合物加热至40℃达40 min，冷却至室温达18 hr，然后再加热至40℃达2 hr。添加第二批LiOH (41 mg, 1.7 mmol)，将反应混合物维持在室温下24 hr，然后真空蒸发至其初始体积的一半。将浓缩物倾到盐酸(1.0
M, 20 mL)上，得到灰白色沉淀物。通过过滤收集固体，用水洗涤，然后真空干燥，得到标题化合物中间体 J2(P)，为白色固体(1.25 g, 64%); Rt 2.46 min (方法2 酸性); m/z 503 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J3: 4-((4-((4-
氨基萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-3-
甲氧基苯甲酸
向含中间体 H3 (450
mg, 1.08 mmol)的THF (4.0 mL)混悬液中添加含LiOH (39 mg, 1.6 mmol)的水和MeOH
(1:1 v/v, 2.0 mL)混合物溶液，将反应混合物加热至40℃达4 hr，然后维持在室温下3天。将得到的混合物真空浓缩至其初始体积的一半，将浓缩物倾入盐酸水溶液(1.0 M, 10.0 mL)。混合物用NaOH水溶液(2.0 M)中和，用DCM萃取。用盐水(2 x 30 mL)洗涤有机萃取物，然后干燥和真空蒸发，得到标题化合物中间体 J3，为棕色固体(328 mg, 72%); Rt 1.92 min (方法2 酸性); m/z 403 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J3(P): 4-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-3-
甲氧基苯甲酸
向甲基酯中间体 H3(P) (1.65 g, 3.19 mmol)的THF (12 mL)混悬液中添加含LiOH (115 mg, 4.79
mmol)的含水MeOH (1:1 v/v, 6.0
mL)溶液，将混合物加热至40℃达18 hr。冷却至室温后，将混合物真空蒸发至其初始体积的一半，然后将得到的浓缩物倾入盐酸(1.0 M, 20 mL)中。形成沉淀物，将其通过过滤收集，用水洗涤和真空干燥，得到标题化合物中间体 J3(P)，为浅粉色固体(1.12 g, 68%); Rt 3.86 min (方法3); m/z 503 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J4(P): 3-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲基苯甲酸
向含中间体 G2(P) (950 mg, 2.56 mmol)的无水THF (15 mL)溶液中添加3-氨基-5-甲基苯甲酸(772 mg, 5.11 mmol)和p-TSA一水合物(97 mg, 0.51 mmol)，将反应混合物加热至65℃达24 hr，然后冷却至室温。得到的混合物用含NH3的MeOH
(0.7 M, 50 mL)稀释，再次真空蒸发。残余物用MeOH (30 mL)研磨，得到标题化合物中间体 J4(P)，为棕色固体(727 mg, 56%); Rt
3.81 min (方法3); m/z 487 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J5(P): 3-((4-((4-((
叔丁氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-(
三氟代甲基
)
苯甲酸
向含中间体 G2(P) (1.00 g, 2.71 mmol)的无水THF (15 mL)脱气溶液中添加3-氨基-5-(三氟代甲基)苯甲酸(1.11 g, 5.42 mmol)和p-TSA一水合物(103 mg, 0.542 mmol)，将混合物加热至65℃达24 hr，然后冷却至室温。得到的混合物用含NH3的MeOH
(0.7 M, 30 mL)稀释，再次真空蒸发，残余物重悬浮于含NH3的MeOH
(0.7 M, 60 mL)，在真空蒸发。再重复共蒸发一次，将如此获得的残余物用MeOH (20 mL)研磨。固体产物通过过滤收集和真空干燥，得到标题化合物中间体 J5(P)，为浅棕色固体(577 mg, 37%); Rt 4.02 min (方法3); m/z 541 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J6(P): 3-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸
向含中间体 G2(P) (10.0 g, 27.0 mmol)的无水THF (150 mL)的脱气溶液中添加3-氨基-5-甲氧基苯甲酸(8.99 g, 53.8 mmol)和p-TSA一水合物(1.02 g, 5.38 mmol)，将反应混合物加热至65℃达24 hr，然后冷却至室温和真空蒸发。将残余物悬浮于含NH3的MeOH
(0.7 M, 100 mL)，在真空蒸发。重复该程序(含0.7 M的MeOH, 250 mL)，将如此获得的物质与以相同规模进行的相同反应的粗产物合并。合并的物质用MeOH (4 x 125 mL)浆化，得到的固体通过过滤收集，真空干燥，得到标题化合物，为浅棕色固体中间体 J6(P),
(11.3 g, 30%); Rt 1.60 min (方法2 碱性); m/z 503 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J7(P): 3-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
氯代苯甲酸
向含中间体 G2(P) (1.01 g, 2.72 mmol)的无水THF (15 mL)溶液中添加3-氨基-5-氯代苯甲酸(1.11 g, 5.42 mmol)和p-TSA一水合物(103 mg, 0.542 mmol)，将反应混合物加热至65℃达24 hr。将得到的混合物冷却至RT，用含NH3的MeOH (0.7 M, 60 mL)稀释和真空蒸发。然后再重复相同过程两次，将残余物用MeOH (30 mL)研磨。得到的固体通过过滤收集，得到标题化合物中间体 J7(P)，为棕色固体(374 mg, 27%); Rt
4.06 min (方法3); m/z 507 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J8(P): 3-
溴代
-5-((4-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酸
向含中间体 G2(P) (1.5 g, 4.0 mmol)的无水THF (20 mL)的脱气溶液中添加3-氨基-5-溴代苯甲酸(1.57 g, 7.26 mmol)和p-TSA一水合物(153 mg, 0.807 mmol)，将反应混合物加热至65℃达24 hr。将得到的混合物冷却至RT，用含NH3的MeOH (0.7 M, 60 mL)稀释，然后真空蒸发。再重复相同的过程，如此获得的残余物然后用MeOH (60 mL)研磨。如此获得的固体通过过滤收集，和真空干燥，得到标题化合物中间体 J8(P)，为浅棕色固体(1.33 g, 57%); Rt 4.21 min (方法3); m/z 552/554 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J9(P): 3-((6-((4-((
叔丁
氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-4-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酸
向含中间体 G3(P) (5.00 g, 2.56 mmol)的无水THF (50 mL)溶液添加3-氨基-5-甲氧基苯甲酸(4.50 g, 26.9 mmol)和p-TSA一水合物(512 mg, 2.69 mmol)，将反应混合物加热至65℃达18 hr，然后在回流下加热另外4 hr。将得到的混合物用DMF (20 mL)稀释，加热至95℃达2 hr，然后保持在室温下3天。将混合物再加热至95℃达24 hr，然后冷却和真空蒸发。将残余物溶于MeOH和负载到SCX树脂(25 g)上。所需的物质不保留在树脂上，收集负载的流分和真空蒸发。将残余物与NH3 (0.7 M, 200 mL)共蒸发两次，然后溶于EtOAc/THF
(10:1 v/v, 250 mL)和用盐水(3 x 100 mL)洗涤。有机相经真空蒸发和残余物用MeOH (100 mL)研磨，然后通过过滤收集和用另外的MeOH (3 x 10 mL)洗涤，得到标题化合物中间体 J9(P)，为棕色固体(2.67 g, 34%); Rt
1.58 min (方法2 碱性); m/z 503 (M+H)+, (ES+)。
中间体
J10(P): 3-((4-((4-((
叔丁氧基羰基
)
氨基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)-
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基苯甲酸
向含氯化铵(0.065 g,
1.219 mmol)的IPA
(70 mL)的部分溶解的混悬液中添加3-乙炔基-5-硝基苯甲酸甲酯(0.5 g, 2.437 mmol)和铁粉(1.36 g, 24.35 mmol)/水(5 mL)的混合物。将反应物回流加热2h。将反应物冷却至室温和过滤通过硅藻土。滤液经真空浓缩，得到橙色蜡状固体。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)上纯化，得到3-氨基-5-乙炔基苯甲酸甲酯(332 mg)，为浅黄色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 7.21 (t, 1H),
7.12 (s, 1H), 6.87 (t, 1H), 5.62 (s, 2H), 4.13 (s, 1H), 3.81 (s, 3H).
LCMS m/z 176 (M+H)+
(ES+)。
将中间体 G2(P) (1.5 g, 4.03 mmol)、紧接上文步骤的产物(1.41 g, 8.05 mmol)和p-TSA一水合物(0.15 g, 0.789 mmol)的THF/DMF (60 mL, 1:1)混悬液在60℃加热过夜。将反应物冷却至室温和在EtOAc (60 mL)和饱和NaHCO3水溶液(100 mL)之间分配。水层用EtOAc (2 x 60 mL)萃取。合并的有机萃取物用水(2 x 100 mL)、盐水(2 x 50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩。粗产物通过色谱在Companion (80 g柱, 含0-5% MeOH的DCM)上纯化，得到产物，为橙色固体。将固体在MeOH和己烷的混合物中研磨，得到产物，为白色固体，纯度90%。剩余的10%经鉴定为脱-boc物质。将混合物悬浮于DCM (70 ml)，添加小体积的THF用于溶解(5 ml)。添加三乙基胺(0.14ml, 0.8mmol)，然后添加二-叔丁基二碳酸酯(90 mg, 0.4mmol)。将反应物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在二氧化硅上浓缩，将粗产物通过色谱在Companion (80 g柱, 含10-50% EtOAc的己烷)上纯化，得到3-((4-((4-((叔丁氧基羰基)氨基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯甲酸甲酯(476 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.87 (s, 1H),
9.34 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.82 (d,
1H), 7.49-7.54 (m, 3H), 7.49 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 4.21 (s, 1H),
3.83 (s, 3H), 1.52 (s, 9H)。
向紧接上文步骤的产物(0.476 g, 0.932 mmol)的THF (10 mL)搅拌溶液添加氢氧化钠(1.0 M aq.) (10 mL, 10.00 mmol)，将反应物在室温下剧烈搅拌过夜。将反应温度增加至50℃，继续搅拌6h。将反应物冷却至室温，用水(40 ml)稀释和真空除去THF，得到浑浊混悬液。将混悬液用1M HCl酸化至pH 2，通过过滤分离得到的固体，用更多水洗涤。将固体在40℃真空干燥4h，得到中间体 J10(P) (436 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 13.09 (s, 1H),
9.84 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 8.48 (d, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.01 (s,
1H), 7.82 (d, 1H), 7.54-7.63 (m, 3H), 7.42-7.48 (m, 2H), 6.61 (d, 1H), 4.18 (s,
1H), 1.52 (s, 9H)。
中间体
M1: 3-(
叔丁基
)-1-(4-(
二甲基氨基
)
苯基
)-1H-
吡唑
-5-
甲酸
在室温下暴露至空气中，将吡啶(350
µL, 4.33 mmol)然后是活化的4A分子筛(0.5 g)添加至(4-(二甲基氨基)苯基)硼酸(575 mg, 3.48 mmol)、3-(叔丁基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(425 mg, 2.166 mmol)和乙酸铜(II) (590 mg,
3.25 mmol)的DCM
(15 mL)搅拌混合物中。将混合物搅拌4h。添加乙醚/异己烷(3:1, 300 mL)混合物，滤出固体。将滤液在减压下蒸发，将残余物通过色谱在Companion (80 g柱, 0-60%乙醚/异己烷)上纯化，得到3-(叔丁基)-1-(4-(二甲基氨基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(464 mg)，为无色油状物。
LCMS m/z 316 (M+H)+
(ES+)。
将1 M氢氧化钠溶液(1.5 mL, 1.500 mmol)在室温下添加至上文步骤(i)的产物(0.46 g, 1.458
mmol)的四氢呋喃 (3 mL)搅拌溶液中。将混合物在室温下搅拌3h，然后添加甲醇(1 mL)，将混合物搅拌另外1 h。然后将混合物加热至40℃ 1 h，用水(10 mL)稀释和用乙醚(2 x 10 mL)洗涤。水相用1 M HCl (1.5 mL)处理和用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取。合并的有机相用饱和盐水(10 mL)洗涤，干燥(MgSO4)和浓缩，得到中间体 M1 (395 mg)，为灰白色固体。
1H NMR (400 MHz; CDCl3) δ:
7.28-7.22 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.74-6.67 (m, 2H), 2.98 (s, 6H), 1.35 (s, 9H).
LCMS
m/z 288 (M+H)+ (ES+); 286 (M-H)- (ES-)。
本发明的化合物实施例
实施例
1: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
吡啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含中间体 A8 (74 mg,
0.32 mmol)的DCM (1.0
mL)溶液中添加CDI (54 mg, 0.34 mmol)，将反应混合物保持在40℃下2 hr。将部分的该溶液(310 µL, 0.099 mmol) (含有预形成的吡唑CDI加合物)在室温下添加至含中间体 B1 (50 mg,
0.078 mmol)的THF (1.0
mL)溶液，将得到的混合物在该温度下维持18 hr。然后添加另一份吡唑CDI加合物(160 µL, 0.05 mmol)，3 hr后在室温下将反应混合物在EtOAc (50 mL)和饱和NaHCO3水溶液(50 mL)之间分配。分离有机相，序贯用饱和NaHCO3水溶液(2 x 50 mL)、水(2 x 50 mL)和盐水(2 x 50 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物实施例1，为浅紫色固体(16 mg, 22%); Rt 2.63 min (方法3);
m/z 767 (M-H)- (ES-);
1H NMR δ: 1.29 (9H, s), 2.37-2.45 (9H, 重叠 m), 3.34 (2H, m), 3.55-3.57 (4H, 重叠 m), 3.73 (3H, s), 6.11 (1H, d), 6.41 (1H, s), 6.56 (1H,
dd), 6.85 (1H, m), 7.34-7.40 (3H, 重叠 m),
7.45-7.50 (3H, 重叠 m), 7.56 (1H, m), 7.65
(1H, m), 7.84 (1H, d), 7.97 (1H, d), 8.09-8.12 (2H, 重叠 m), 8.22-8.27 (2H, 重叠 m),
8.84 (1H, br s), 9.07 (1H, br s), 9.19 (1H, br s)。
实施例
2: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酰胺
向含中间体 F1 (50 mg,
0.080 mmol)的THF (1.5
mL)混悬液中添加DIPEA (28 µL, 0.16 mmol)和HATU (36 mg, 0.096 mmol)，10 min后在室温下将反应混合物用NH4Cl (4.7 mg, 0.088 mmol)处理。将得到的混合物保持在室温下18 hr，然后在饱和NaHCO3水溶液(3.0 mL)和EtOAc (3.0 mL)之间分配。分离有机相和用盐酸(1.0 M, 3.0 mL)和盐水(3.0 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 4.0g, 含MeOH的EtOAc, 0-100%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例2，为白色固体(8 mg, 16%); Rt 2.30 min (方法2 酸性); m/z 627
(M+H)+ (ES+); m/z 625
(M-H)- (ES-); 1H NMR δ: 1.29 (9H, s), 2.40
(3H, s), 6.42 (1H, s), 6.55 (1H, d), 6.99 (1H, m), 7.23 (1H, br s), 7.29 (1H,
d), 7.36-7.42 (3H, 重叠 m), 7.44-7.50 (3H, 重叠 m), 7.53-7.65 (2H, 重叠 m),
7.75 (1H, br s), 7.81 (1H, d), 7.89-7.94 (2H, 重叠 m),
8.07 (1H, d), 8.40 (1H, d), 8.75 (1H, br s), 9.13 (1H, br s), 9.60 (1H, br s)。
实施例
3: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含中间体 F1 (680 mg,
1.08 mmol)的DCM (10 mL)混悬液中在0℃添加草酰氯(110 µL, 1.30 mmol)和DMF (1滴)，将得到的红色混合物在0℃下保持20 min，然后升温至室温。1 hr后，添加另一份草酰氯(110 µL, 1.30 mmol)，将得到的混合物保持在室温下2 hr，然后真空蒸发，得到红色固体(800 mg)。将该物质用于后续酰胺偶联，无需纯化或表征。向含上文获得的固体的一部分(60 mg, 0.080 mmol)的DCM (1.5 mL) 混悬液中添加DIPEA (32 µL, 0.19 mmol)和2-吗啉代乙胺(13 µL, 0.10 mmol)，将反应混合物维持在室温3 hr。将得到的混合物序贯用饱和NaHCO3水溶液(5.0 mL)、水(5.0 mL)和盐水(5.0 mL)洗涤，然后直接通过快速柱色谱(SiO2,
12 g, 含MeOH的EtOAc, 0-100%, 梯度洗脱)纯化，得到标题化合物实施例3，为浅黄色固体(35 mg, 50%); Rt 1.82 min (方法2 酸性); m/z 740
(M+H)+ (ES+); 1H NMR δ: 1.29 (9H, s),
2.36-2.45 (9H, 重叠 m), 3.32 (2H, m),
3.54-3.56 (4H, 重叠 m), 6.42 (1H, s), 6.56
(1H, d), 7.01 (1H, m), 7.24 (1H, d), 7.35-7.50 (6H, 重叠 m), 7.53-7.65 (2H, 重叠 m),
7.81 (1H, d), 7.87 (1H, br s), 7.92 (1H, d), 8.07 (1H, d), 8.18 (1H, m), 8.40
(1H, d), 8.75 (1H, br s), 9.13 (1H, br s), 9.62 (1H, br s)。
实施例
4: 4-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
羟基乙基
)-3-
甲氧基苯甲酰胺
向含CDI (55 mg,
0.34 mmol)的DCM (1.0
mL)溶液中添加中间体 A8 (77 mg, 0.34 mmol)，将反应混合物保持在室温下3 hr。将部分该溶液(0.80 mL, 0.27 mmol)在室温下添加至含中间体 B6 (50 mg, 0.11 mmol)的THF (1.0 mL)溶液，将混合物保持在该温度下18 hr，然后通过添加MeOH (2.0 mL)淬灭。将挥发物在真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 含12 g [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 0-10%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例4，为浅粉色固体(28 mg, 34%); Rt 3.83 min (方法3);
m/z 701 (M+H)+ (ES+);
1H NMR δ: 1.29 (9H, s), 2.40 (3H, s), 3.27 (2H, m), 3.47 (2H, m),
3.84 (3H, s), 4.70 (1H, m), 6.45 (1H, s), 6.63 (1H, d), 7.14 (1H, m), 7.38-7.43
(4H, 重叠 m), 7.48 (2H, m), 7.54-7.66 (3H, 重叠 m), 7.82 (1H, m), 7.96-7.98 (2H, 重叠 m), 8.09 (1H, d), 8.25 (1H, m), 8.43 (1H, d), 8.81 (1H,
s), 9.17 (1H, s)。
实施例
5: N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酰胺
向含CDI (380
mg, 2.30 mmol)的DCM (5.0
mL)溶液中添加中间体 A4 (0.50 g, 2.3 mmol)，将反应混合物保持在室温下3 hr。在室温下将部分的所得溶液(1.0 mL, 0.46 mmol)添加至含中间体 B12 (50 mg, 0.11 mmol)的THF (2.0 mL)溶液，18 hr后，反应混合物通过添加MeOH (3.0 mL)淬灭。混合物经真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 含12 g [含0.7 M NH3的MeOH]的DCM, 3-5%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例5，为浅粉色固体(60 mg,
76%); Rt 1.91 min
(方法2, 酸性); m/z
714 (M+H)+ (ES+); 1H NMR δ: 1.24 (6H, d), 2.16
(6H, s), 2.35 (2H, t), 2.40 (3H, s), 2.88 (1H, m), 3.30 (2H, m), 3.57 (3H, s),
6.37 (1H, s), 6.53 (1H, d), 6.86 (1H, br s), 7.33 (1H, br s), 7.37-7.40 (3H, 重叠 m), 7.47 (2H, d), 7.56-7.63 (3H, 重叠 m), 7.82 (1H, d), 7.93 (1H, d), 8.05 (1H, d), 8.16 (1H,
t), 8.41 (1H, d), 8.78 (1H, br s), 9.09 (1H, br s), 9.59 (1H, br s)。
实施例
6: N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基苯甲酰胺
向含CDI (43 mg,
0.26 mmol)的DCM (2.0
mL)溶液中在室温下添加中间体 A5 (61 mg, 0.26 mmol)，将混合物保持在该温度下18 hr。在室温下将得到的溶液添加至含中间体 B12 (50 mg, 0.11 mmol)的THF (2.0 mL)溶液，24 hr后，反应混合物通过添加MeOH (3.0 mL)淬灭。将挥发物经真空蒸发，将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物实施例6的甲酸盐，为白色固体(31 mg, 38%); Rt 1.78 min (方法2 酸性); m/z 367 (M+2H)2+ (ES+); 1H
NMR δ: 1.24 (6H, d), 2.21 (6H, s), 2.44 (2H, t), 2.89 (1H, m), 3.32 (2H, m),
3.56 (3H, s), 3.83 (3H, s), 6.35 (1H, s), 6.53 (1H, d), 6.86 (1H, br s), 7.10
(2H, m), 7.33 (1H, br s), 7.39 (1H, d), 7.48 (2H, m), 7.56-7.62 (3H, 重叠 m), 7.82 (1H, d), 7.92 (1H, d), 8.06 (1H, d), 8.19 (1H,
m), 8.41 (1H, d), 8.82 (1H, br s), 9.16 (1H, br s), 9.59 (1H, br s)。
实施例
7: 3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)-5-(
三氟代甲基
)
苯甲酰胺
向含CDI (380
mg, 2.30 mmol)的DCM (5.0
mL)溶液中添加中间体 A4 (500 mg, 2.32 mmol)，将反应混合物保持在室温下3 hr。将部分的所得溶液(0.80 mL, 0.37 mmol)在室温下添加至含中间体 B11 (100 mg, 0.181 mmol)的THF (1.5 mL)溶液，24 hr后，反应混合物通过添加MeOH (2.0 mL)淬灭。将挥发物经真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, [含0.7 M
NH3的MeOH]/DCM, 0-5%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例7，为浅粉色固体(52 mg,
34%); Rt 3.03 min
(方法3); m/z 794 (M+H)+ (ES+),
m/z 792 (M-H)- (ES-); 1H NMR δ: 1.24 (6H, d),
2.44-2.47 (9H, 重叠 m), 2.89 (1H, m), 3.37
(2H, m), 3.55-3.57 (4H, 重叠 m), 6.36 (1H, s), 6.63
(1H, d), 7.36-7.42 (3H, 重叠 m), 7.46 (2H, m), 7.57
(1H, m), 7.60-7.64 (2H, 重叠 m), 7.82 (1H, m), 7.93
(1H, d), 8.06 (1H, m), 8.11 (1H, br s), 8.28 (1H, br s), 8.47 (1H, m), 8.51
(1H, m), 8.78 (1H, s), 9.09 (1H, s), 9.97 (1H, s)。
实施例
8: 3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
(
途径
A)
向含CDI (12.3 g, 76.0 mmol)的DCM (150 mL)溶液分批添加中间体 A4 (15.0 g, 69.0 mmol)，将得到的混合物保持在室温下5 hr。在室温下将部分的该溶液(60 mL, 28 mmol)添加至含中间体 B13 (13.4
g, 22.0 mmol)的DCM (150 mL)溶液。2 hr后，添加另一份CDI加合物(9.0 mL, 4.1 mmol)，将得到的混合物保持在室温下17 hr，然后在DCM (200 mL)和饱和NaHCO3水溶液(200
mL)之间分配。分离水相和用DCM (2 x 200 mL)萃取，合并的有机萃取物用NaOH水溶液(2.0 M, 2 x 200 mL)然后盐水(2 x 200 mL)洗涤。合并含水NaHCO3和NaOH洗出液，通过过滤分离悬浮的固体。含水滤出液用DCM (2
x 200 mL)和2-Me THF (2 x 200 mL)萃取。合并所有的有机萃取物，然后干燥和真空浓缩。将残余物与自含水洗出液过滤分离的固体合并，将该物质通过快速柱色谱纯化(SiO2, 330 g, [含0.7 M NH3的MeOH]/EtOAc,
5-10%, 梯度洗脱)。将如此获得的粗产物在IPA
(200 mL)中搅拌16 hr，然后通过过滤分离，得到标题化合物实施例8，为浅棕色固体(8.83
g, 52%); Rt 2.30 min (方法2 碱性); m/z 756
(M+H)+ (ES+); 1H NMR
δ: 1.24 (6H, d), 2.38-2.44 (9H, 重叠m),
2.90 (1H, m), 3.31-3.36 (2H, 重叠m), 3.54-3.56 (7H, 重叠m), 6.37 (1H, s), 6.53 (1H, d), 6.85 (1H, m), 7.31 (1H,
br. s), 7.36-7.41 (3H, 重叠m), 7.45-7.47 (2H, 重叠m), 7.54-7.64 (3H, 重叠m),
7.82 (1H, m), 7.94 (1H, d), 8.06 (1H, d), 8.19 (1H, m), 8.40 (1H, d), 8.79 (1H,
s), 9.10 (1H, s)。
(
途径
B)
向含中间体 C1 (150 mg, 0.292 mmol)和中间体 D2 (163 mg, 0.585 mmol)的DMF (1.5 mL)混悬液添加p-TSA.H2O (111 mg, 0.555 mmol)，将反应混合物加热至70℃达3 hr，然后冷却至室温和倾倒至饱和NaHCO3水溶液(20 mL)上。将如此形成的沉淀物通过过滤收集和用水(2 x
10 mL)和Et2O (20 mL)洗涤，然后在50℃真空干燥3 hr。将得到的固体悬浮于MeOH (10 mL)中，同时搅拌5 hr，然后通过过滤收集，用MeOH (2 x 5 mL)和Et2O
(2 x10 mL)洗涤，干燥，得到标题化合物实施例8，为浅粉色固体(88 mg, 40%); Rt 1.81
min (方法4); m/z 378.5 (M+2H)2+ (ES+)。
实施例
9: 3-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)-5-((4-((4-(3-(3-(
全氟代乙基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酰胺
向含CDI (56 mg,
0.34 mmol)的DCM (0.6
mL)溶液逐滴添加含中间体 A3 (100
mg, 0.34 mmol)的DCM (0.6 mL)溶液，将混合物保持在室温下18 hr。将得到的溶液添加至含中间体 B13 (124
mg, 0.240 mmol)的THF (0.5 mL)溶液，将反应混合物保持在室温下3 hr，然后通过添加MeOH (2.0 mL)淬灭。将挥发物经真空蒸发，将残余物通过制备型HPLC纯化。将如此获得的甲酸盐在DCM和饱和NaHCO3水溶液之间分配，分离有机相，干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, [0.7 M NH3的MeOH]/DCM, 0.5-6%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例9，为灰白色固体(37
mg, 12%); Rt 3.14 min (方法3);
m/z 832 (M+H)+ (ES+);
1H NMR δ: 2.36-2.46 (9H, 重叠 m),
3.33 (2H, m), 3.54-3.57 (7H, 重叠 m), 6.54 (1H, d), 6.85
(1H, s), 6.93 (1H, s), 7.31 (1H, s), 7.42 (1H, d), 7.47 (2H, d), 7.54-7.59 (4H,
重叠 m), 7.63 (1H, dd), 7.83 (1H, d), 7.93 (1H, d),
8.05 (1H, d), 8.17 (1H, t), 8.40 (1H, d), 9.12 (1H, s), 9.23 (1H, s), 9.59 (1H,
s)。
实施例
10: 3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(6-
甲氧基吡啶
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含CDI (59 mg, 0.37 mmol)的DCM (0.4 mL)溶液逐滴添加含中间体 A16 (85 mg, 0.34 mmol)的DCM
(0.6 mL)溶液，将反应混合物保持在室温下5 hr。在室温下将得到的溶液添加至含中间体 B13 (47 mg, 0.092 mmol)的THF (0.3 mL)溶液，将反应混合物保持在室温下1.5 hr，然后通过添加MeOH (1.5 mL)淬灭。将挥发物经真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, [0.7 M NH3的MeOH]/DCM, 0-10%, 梯度洗脱)。将如此获得的不纯物质通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物实施例10，为灰白色固体(18
mg, 6%); Rt 2.68 min (方法3);
m/z 773 (M+H)+ (ES+);
1H NMR δ: 1.24 (6H, d), 2.36-2.45 (6H, 重叠 m), 2.90 (1H, sept), 3.32 (2H, m), 3.53-3.57 (7H, 重叠 m), 3.94 (3H, s), 6.39 (1H, s), 6.54 (1H, d), 6.85 (1H,
s), 7.03 (1H, d), 7.32 (1H, s), 7.40 (1H, d), 7.53-7.58 (2H, 重叠 m), 7.62 (1H, dd), 7.82 (1H, d), 7.90-7.93 (2H, 重叠 d), 8.05 (1H, d), 8.21 (1H, t), 8.39-8.41 (2H, 重叠 m), 8.85 (1H, s), 9.08 (1H, s), 9.61 (1H, s)。
实施例
11: 3-((4-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
甲氧基乙基
)
苯甲酰胺
向含CDI (88 mg, 0.54 mmol)的DCM (1.0 mL)溶液添加中间体 A5 (126 mg, 0.540 mmol)，将反应混合物保持在室温下18 hr。在室温下将得到的溶液添加至含中间体 B18 (50
mg, 0.11 mmol)的THF (1.0 mL)溶液，将混合物保持在室温下5 hr，然后通过添加MeOH (3.0 mL)淬灭。真空蒸发挥发物后，将残余物通过制备型HPLC纯化，得到标题化合物实施例11的甲酸盐，为灰白色固体(5.0
mg, 6%); Rt 2.22 min (方法2 酸性); m/z 717 (M+H)+ (ES+); 1H
NMR δ: 1.24 (6H, d), 2.89 (1H, m), 3.25 (3H, s), 3.38-3.42 (4H, 重叠 m), 3.57 (3H, s), 3.83 (3H, s), 6.34 (1H, s), 6.53 (1H,
d), 6.88 (1H, t), 7.10 (2H, m), 7.33 (1H, br s), 7.40 (1H, d), 7.49 (2H, m),
7.55-7.61 (3H, 重叠 m), 7.81 (1H, d), 7.92
(1H, d), 8.07 (1H, d), 8.30 (1H, t), 8.39 (1H, d), 8.47 8.93 (1H, br s), 9.25
(1H, br s), 9.59 (1H, br s)。
实施例
12: 1-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)-3-(4-((2-((3-
甲氧基
-5-(
吗啉
-4-
羰基
)
苯基
)
氨基
)
嘧啶
-4-
基
)
氧基
)
萘
-1-
基
)
脲
在室温下向含吗啉(13 µL,
0.15 mmol)的THF (3.0
mL)溶液添加三甲基铝溶液(2M在己烷中, 76 µL, 0.15 mmol)，将反应混合物保持在室温下20 min。将得到的混合物添加至含中间体 E5 (50 mg, 0.076 mmol)的THF (3.0 mL)溶液，将混合物保持在室温下3天。以初始规模的一半，以相同方式制备另一份吗啉-三甲基铝加合物，将其添加至反应混合物。18 hr后在室温下将混合物加热至40℃达24 hr，然后冷却至室温和用盐酸(1.0 M, 6.0 mL)稀释。将混合物在EtOAc (20 mL)和水(20 mL)之间分配，分离有机相和然后干燥和真空蒸发，得到标题化合物实施例12，为灰白色固体(33 mg,
60%); Rt 2.38 min
(方法2, 酸性); m/z
713 (M+H)+ (ES+); 1H NMR δ: 1.24 (6H, d), 2.40
(3H, s), 2.90 (1H, m), 3.30 (2H, m), 3.55-3.58 (9H, 重叠 m), 6.37 (1H, s), 6.43 (1H, br s), 6.57 (1H, d), 7.16
(1H, br s), 7.25 (1H, br s), 7.36-7.40 (3H, 重叠 m),
7.46 (2H, m), 7.56-7.62 (2H, 重叠 m), 7.81 (1H, d), 7.93
(1H, d), 8.06 (1H, d), 8.42 (1H, d), 8.80 (1H, br s), 9.09 (1H, br s), 9.61
(1H, br s)。
实施例
13: 5-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-2-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含CDI (44 mg,
0.27 mmol)的DCM (1.0
mL)溶液中添加中间体 A8 (62
mg, 0.27 mmol)，将得到的混合物保持在室温下4天。在室温下添加另一份该溶液(0.50 mL, 0.14 mmol)至含中间体 B19 (50 mg, 0.089 mmol)的THF (1.0 mL)溶液，将反应混合物保持在室温下3天，然后通过添加MeOH (1.0 mL)淬灭。将挥发物经真空蒸发，将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, [含0.7 M
NH3的MeOH]/DCM, 0-5%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例13，为浅橙色固体(41
mg, 57%); Rt 2.98 min (方法3);
m/z 770 (M+H)+ (ES+);
1H NMR δ: 1.29 (9H, s), 2.40-2.45 (9H, 重叠 m), 3.36 (2H, m), 3.57-3.59 (4H, 重叠 m), 3.80 (3H, s), 6.40 (1H, s), 6.56 (1H, d), 6.79 (1H,
m), 7.38-7.43 (4H, 重叠 m), 7.47 (2H, m),
7.53-7.63 (2H, 重叠 m), 7.81 (2H, m), 7.90
(1H, d), 8.06 (1H, d), 8.30 (1H, m), 8.35 (1H, d), 8.78 (1H, s), 9.14 (1H, s),
9.51 (1H, s)。
实施例
14: 3-((6-((4-(3-(3-
异丙基
-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-4-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含CDI (44 mg,
0.27 mmol)的DCM (1.0
mL)溶液添加中间体 A5 (60
mg, 0.26 mmol)，将反应混合物保持在40℃下4 hr。将部分的所得溶液(0.42 mL, 0.11 mmol)在室温下添加至含中间体 B20 (50 mg, 0.089 mmol)的THF (1.0 mL)溶液，将混合物保持在室温下18 hr，然后在EtOAc (50 mL)和饱和NaHCO3水溶液(50 mL)之间分配。分离有机相，序贯用饱和NaHCO3水溶液(2 x 50 mL)、水(2 x
50 mL)和盐水(2 x 50 mL)洗涤，然后干燥和真空蒸发。将残余物通过快速柱色谱纯化(SiO2, 12 g, [含0.7 M
NH3的MeOH]/DCM, 0-10%, 梯度洗脱)，得到标题化合物实施例14，为浅橙色固体(52 mg, 67%); Rt
1.68 min (方法4); m/z 772
(M+H)+ (ES+); m/z 770
(M-H)- (ES-); 1H NMR δ: 1.24 (6H, d),
2.38-2.47 (6H, 重叠 m), 2.89 (1H, m), 3.36
(2H, m), 3.55-3.57 (4H, 重叠 m), 3.77 (3H, s), 3.84
(3H, s), 6.16 (1H, s), 6.35 (1H, s), 7.02 (1H, m), 7.12 (2H, m), 7.35 (1H, d),
7.46-7.51 (3H, 重叠 m), 7.53-7.66 (3H, 重叠 m), 7.79 (1H, d), 7.92 (1H, d), 8.05 (1H, d), 8.30-8.35
(2H, 重叠 m), 8.72 (1H, br s), 9.09 (1H, br s), 9.67
(1H, br s)。
实施例
15-72
表
3:
本发明的其它化合物实施例
实施例
73: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(6-
甲氧基吡啶
-3-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含中间体 A11* (150 mg, 0.389 mmol)和中间体 B21 (198 mg, 0.389 mmol)的乙酸异丙酯(5
mL)搅拌溶液中添加三乙基胺(10
µL, 0.072 mmol)。将得到的混合物在70℃加热90 min。将反应物冷却至室温和真空除去溶剂。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(40 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)，得到白色固体，其用乙醚研磨，得到标题化合物(198 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.76 (s, 1H),
9.07 (s, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.41-8.40 (m, 1H), 8.39-8.34 (br m,
1H), 8.05-8.03 (m, 2H), 7.93-7.90 (m, 2H), 7.87-7.83 (br s, 1H), 7.83-7.80 (m,
1H), 7.64-7.60 (m, 1H), 7.59-7.55 (m, 1H), 7.43-7.41 (m, 2H), 7.04-7.02 (m,
1H), 6.56 (d, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.58-3.52 (br m,
4H), 2H under H2O at 3.34 ppm, 2.47-2.34 (m, 6H), 1.29 (s, 9H).
LCMS m/z 781 (M+H)+
(ES+); 779 (M-H)- (ES-)。
实施例
74: 3-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)-5-((4-((4-(3-(3-(
全氟代乙基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(4.00 µL, 0.029 mmol)添加至含中间体 A3* (56.6 mg, 0.138
mmol)和中间体 B21 (70 mg, 0.138 mmol)的乙酸异丙酯(1.6 mL)混合物，将混合物在60℃下加热1 h，在该时间期间，形成稠的混悬液。将反应物冷却至室温和用DCM和MeOH (3:1, 15 mL)稀释。将溶液在硅胶上浓缩。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)上纯化，得到标题化合物(78 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.77 (s, 1H), 9.24 (s,
1H), 9.13 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.37 (t, 1H), 8.04-8.06 (m, 2H), 7.94 (d, 1H),
7.82-7.85 (m, 2H), 7.56-7.66 (m, 4H), 7.43-7.49 (m, 4H), 6.94 (s, 1H), 6.58 (d,
1H), 4.13 (s, 1H), 3.55 (t, 4H), 3.32-3.37 (m, 2H), 2.39-2.45 (m, 9H).
LCMS m/z 826 (M+H)+
(ES+)。
实施例
75:
3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向在乙酸异丙酯(5 mL)中在N2下在室温搅拌的中间体 A8* (150 mg, 0.429
mmol)中添加中间体 B21 (218 mg, 0.429 mmol)，然后添加三乙基胺(9.27 µL, 0.067 mmol)，将反应混合物加热至70℃达90 min。停止反应，混合物用EtOAc (5 mL)稀释，然后过滤和用另外的EtOAc (2 x 20 mL)洗涤。将沉淀物在真空下干燥，得到标题化合物(228 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ 9.76 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 8.78 (s, 1H),
8.44 (d, 1H), 8.42 (br s, 1H), 8.04 (d, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.85 (br s, 1H),
7.81(d, 1H), 7.63 (t, 1H), 7.57 (t, 1H), 7.42 (m, 6H), 6.56 (d, 1H), 6.41 (s,
1H), 4.12 (s, 1H), 3.55 (br s, 4H), 3.33 (m, 2H), 2.40 (m, 9H), 1.29 (s, 9H).
LCMS m/z 764 (M+H)+
(ES+)。
实施例
76: 3-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)-5-((4-((4-(3-(1-(
对甲苯基
)-3-(1,1,1-
三氟代
-2-
甲基丙烷
-2-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-
苯甲酰胺
将三乙基胺(5
µL, 0.036 mmol)添加至含中间体 A19* (70 mg, 0.174 mmol)和中间体 B21 (100 mg, 0.189 mmol)的乙酸异丙酯(2
mL)的混合物中，将混合物在50℃加热2 h。将得到的固体通过过滤收集和用乙酸异丙酯(2 mL)然后异己烷(2 mL)洗涤。将滤饼重悬浮于乙腈(2 mL)，通过过滤收集，得到标题化合物(65 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.75 (s, 1H),
9.14 (s, 1H), 8.88 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.35 (d, 1H), 8.10-8.01 (m, 2H), 7.94
(d, 1H), 7.89-7.79 (m, 2H), 7.68-7.54 (m, 2H), 7.54-7.37 (m, 6H), 6.60 (s, 1H),
6.56 (d, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.60-3.51 (m, 4H), 2H 在水峰下, 2.48-2.31
(m, 6H), 2.42 (s, 3H), 1.53 (s, 6H).
LCMS m/z 818 (M+H)+
(ES+); 816 (M-H)- (ES-)。
实施例
77:
3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(5
µL, 0.036 mmol)添加至含中间体 A9* (70 mg, 0.192 mmol)和中间体 B21 (111 mg, 0.209 mmol)的乙酸异丙酯(2
mL)的混合物中，将混合物在50℃加热2 h。将得到的固体通过过滤收集和用乙酸异丙酯(2 mL)然后异己烷(2 mL)洗涤。将滤饼重悬浮于乙腈(4 mL)，通过过滤收集，得到标题化合物(45 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.75 (s, 1H),
9.08 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.39-8.30 (m, 1H), 8.09-8.01 (m, 2H),
7.94 (d, 1H), 7.88-7.79 (m, 2H), 7.66-7.60 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H),
7.52-7.46 (m, 2H), 7.45-7.40 (m, 2H), 7.15-7.10 (m, 2H), 6.55 (d, 1H), 6.40 (s,
1H), 4.11 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.60-3.50 (m, 4H), 3.39-3.31 (m, 2H),
2.48-2.32 (m 6H), 1.29 (s, 9H).
LCMS m/z 780 (M+H)+
(ES+); 778 (M-H)- (ES-)。
实施例
78:
3-((4-((4-(3-(3-(2-
氰基丙烷
-2-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(6.00 µL, 0.043 mmol)添加至含中间体 A20* (70 mg, 0.194
mmol)和中间体 B21 (99 mg, 0.194 mmol)的乙酸异丙酯(2 mL)的混合物中，将混合物在60℃加热1 h，在该时间期间，形成稠的混悬液。混悬液经过滤，将获得的固体在40℃真空干燥，得到标题化合物(118 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.77 (s, 1H),
9.16 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.37 (t, 1H), 8.05-8.07 (m, 2H), 7.95
(d, 1H), 7.82-7.86 (m, 2H), 7.56-7.66 (m, 2H), 7.51 (d, 2H), 7.42-7.45 (m, 4H),
6.63 (s, 1H), 6.57 (d, 1H), 4.12 (s, 1H), 3.56 (t, 4H), 2H 在水峰下, 2.39-2.45
(m, 6H), 2.43 (s, 3H), 1.71 (s, 6H).
LCMS m/z 388 (M+2H)2+
(ES+)。
实施例
79: 3-
乙炔基
-5-((4-((4-(3-(3-(2-
甲氧基丙烷
-2-
基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(6.00 µL, 0.043 mmol)添加至中间体 A22* (70 mg, 0.192
mmol)和中间体 B21 (97 mg, 0.192 mmol)的乙酸异丙酯(2 mL)混合物中，将混合物在60℃加热1 h，在该时间期间形成稠的混悬液。将混合物过滤，将得到的固体在40℃真空干燥过夜。将该物质在Et2O和EtOAc (2:1)的混合物中研磨，同时超声处理，通过过滤再分离悬浮的固体，用EtOAc洗涤。该物质在40℃经真空干燥，得到标题化合物(38 mg)，为浅灰色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.77 (s, 1H),
9.12 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.37 (t, 1H), 8.06-8.08 (m, 2H), 7.94
(d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.49 (d, 2H), 7.40-7.45
(m, 4H), 6.57 (d, 1H), 6.48 (s, 1H), 4.13 (s, 1H), 3.56 (t, 4H), 2H 在水峰下, 3.05 (s,
3H), 2.40-2.45 (m, 6H), 2.42 (s, 3H), 1.48 (s, 6H).
LCMS m/z 391 (M+2H)2+ (ES+)。
实施例
80:
3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-(
二甲基氨基
)
苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)-
苯甲酰胺
将DPPA (107 µL,
0.496 mmol)在0℃添加至含中间体 M1 (95 mg, 0.331 mmol)和三乙基胺(92
µL, 0.661 mmol)的DMF (3 mL)搅拌溶液中。将混合物升温至室温和搅拌45 min。添加中间体 B21 (177 mg, 0.347
mmol)和将混合物加热至100℃达2 h。将混合物用水(10 mL)稀释和用乙酸乙酯(3 x 10 mL)萃取。合并的有机相用饱和盐水(10 mL)洗涤，干燥(MgSO4)和减压浓缩。将粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 0-10% MeOH/DCM)上纯化，得到浅棕色胶状物。将胶状物在乙腈中搅拌18 h，通过过滤收集沉淀物，得到标题化合物(88 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.76 (s, 1H),
9.13 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.41-8.31 (m, 1H), 8.11-8.03 (m, 2H),
7.97 (d, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.82 (d, 1H), 7.66-7.60 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 1H),
7.45-7.39 (m, 2H), 7.38-7.31 (m, 2H), 6.91-6.83 (m, 2H), 6.46 (d, 1H), 6.38 (s,
1H), 4.12 (s, 1H), 3.60-3.50 (m, 4H), 2H under water peak, 3.02-2.93 (m, 6H),
2.48-2.30 (s, 6H), 1.28 (s, 9H).
LCMS m/z 793 (M+H)+
(ES+); 791 (M-H)- (ES-)
LCMS m/z 813 (M+H)+
(ES+)。
实施例
81:
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(5.00 µl, 0.036 mmol)添加至含中间体 A8* (60 mg, 0.172
mmol)和中间体 B22 (100 mg, 0.191 mmol)的乙酸异丙酯(3 mL)的混合物中，将混合物在60℃加热1 h，在该时间期间，形成胶状固体。将反应物冷却至室温，用EtOAc稀释。通过过滤收集悬浮的固体，用另外的EtOAc洗涤。将回收的固体在40℃真空干燥过夜，得到标题化合物(87 mg)，为米色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.74 (s, 1H),
9.08 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.05-8.08 (m, 2H), 7.94
(d, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.37-7.48 (m, 6H), 6.55
(d, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.13-4.20 (m, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.53 (t, 4H), 2.34-2.44
(m, 8H), 2.26 (dd, 1H), 1.30 (s, 9H), 1.12 (d, 3H).
LCMS m/z 778 (M+H)+
(ES+)。
实施例
82: 3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
甲基
-1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)-
苯甲酰胺
将三乙基胺(10.0 µl, 0.072 mmol)添加至含中间体 A8* (118 mg, 0.339
mmol)和中间体 B23 (200 mg, 0.373 mmol)的乙酸异丙酯(4 mL)混合物中，将混合物在60℃加热1 h，在该时间期间，形成胶状固体。将反应混合物冷却至室温和用EtOAc稀释。通过过滤收集固体，用EtOAc洗涤。将获得的固体在40℃在真空下进一步干燥，得到标题化合物(201 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.72 (s, 1H),
9.09 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.93-7.97 (m, 2H), 7.87
(s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.56-7.66 (m, 3H), 7.37-7.46 (m, 6H), 6.55 (d, 1H), 6.41
(s, 1H), 4.09 (s, 1H), 3.53 (t, 4H), 2.61 (s, 2H), 2.47 (t, 4H), 2.41 (s, 3H),
1.31 (s, 6H), 1.30 (s, 9H).
LCMS m/z 793 (M+H)+ (ES+)。
实施例
83: (R)-3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(1-
吗啉代丙烷
-2-
基
)
苯甲酰胺
将三乙基胺(6.00 µL, 0.043 mmol)添加至含中间体 A8* (72.9 mg, 0.209
mmol)和中间体 B24 (120 mg, 0.230 mmol)的乙酸异丙酯(4 mL)混合物中，将混合物在60℃加热1 h，在该时间期间，形成胶状固体。将反应物冷却至室温和用EtOAc稀释。通过过滤收集悬浮的固体，用另外的EtOAc洗涤。将回收的固体在40℃在真空下干燥过夜，得到标题化合物(111 mg)，为浅米色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.74 (s, 1H),
9.08 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.44 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.05-8.08 (m, 2H), 7.94
(d, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.56-7.65 (m, 2H), 7.37-7.48 (m, 6H), 6.55
(d, 1H), 6.41 (s, 1H), 4.13-4.20 (m, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.53 (t, 4H), 2.34-2.44
(m, 8H), 2.26 (dd, 1H), 1.30 (s, 9H), 1.12 (d, 3H).
LCMS m/z 390 (M+2H)2+ (ES+)。
实施例
84:
3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
甲氧基乙基
)
苯甲酰胺
向含中间体 C3 (152 mg, 0.274 mmol)和中间体 D4 (95 mg, 0.411 mmol)的DMF (4 mL)的搅拌溶液中添加p-TSA一水合物(26 mg, 0.137 mmol)。将得到的溶液在60℃加热过夜。将反应物冷却至室温和在EtOAc (30 mL)和饱和NaHCO3水溶液(30 mL)之间分配。水相用EtOAc (30 mL)反萃取。将合并的有机萃取物用水(2 x 50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到橙色固体(236 mg)。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(40 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)，得到粉色固体，其用Et2O研磨，得到标题化合物(79 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.75 (s, 1H),
9.07 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.47 (t, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.06-8.04 (m, 2H), 7.93
(d, 1H), 7.86 (br s, 1H), 7.81 (d,1H), 7.64-7.54 (m, 2H), 7.50-7.46 (m, 2H),
7.44-7.41 (m, 2H), 7.14-7.10 (m, 2H), 6.55 (d, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.11 (s, 1H),
3.84 (s, 3H), 3.45-3.35 (m, 4H), 3.25 (s, 3H), 1.28 (s, 9H).
LCMS m/z 725 (M+H)+
(ES+); 723 (M-H)- (ES-)。
实施例
85:
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(1-
甲氧基丙烷
-2-
基
)-
苯甲酰胺
向含中间体 C3 (150 mg, 0.271 mmol)和中间体 D6 (103 mg, 0.406 mmol)的DMF (4 mL)搅拌溶液中添加p-TSA一水合物(26 mg, 0.137 mmol)。将得到的溶液在60℃加热过夜。将反应物冷却至室温和在EtOAc (30 mL)和饱和NaHCO3水溶液(30 mL)之间分配。水相用EtOAc (30 mL)反萃取。将合并的有机萃取物用水(2 x 50 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到橙色固体(221 mg)。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(40 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)，得到浅粉色固体(96 mg)，其用Et2O然后MeCN研磨，得到标题化合物(50 mg)，为浅粉色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.75 (s, 1H),
9.08 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.43 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.06-8.04 (m, 2H), 7.94
(d, 1H), 7.88 (br s, 1H), 7.83-7.81 (m,1H), 7.64-7.55 (m, 2H), 7.50-7.46 (m,
3H), 7.42 (d, 1H), 7.14-7.10 (m, 2H), 6.54 (d, 1H), 6.39 (s, 1H), 4.18-4.11 (m,
2H), 3.84 (s, 3H), 3.39-3.35 (m, 1H), 3.26-3.23 (m, 4H), 1.28 (s, 9H), 1.10 (d,
3H).
LCMS m/z 739 (M+H)+
(ES+); 737 (M-H)- (ES-)。
实施例
86: 3-
甲氧基
-5-((4-((4-(3-(1-(4-
甲氧基苯基
)-3-(
丙
-1-
烯
-2-
基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)
萘
-1-
基
)
氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-
吗啉代乙基
)-
苯甲酰胺
标题化合物可使用类似于上述那些的方法制备(例如通过中间体 A21与氯甲酸苯酯反应，接着将得到的氨基甲酸苯酯与中间体 B13反应)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.59 (s, 1H), 9.11
(s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.40 (d, 1H), 8.18 (br t, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.94 (d,
1H0, 7.82 (d, 1H), 7.64-7.50 (m, 5H), 7.41(d, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.14 (d, 2H),
6.85 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.54 (d, 1H), 5.52 (s, 1H), 5.10 (s, 1H), 3.85 (s,
3H), 3.58-3.52 (m, 7H), 3.37-3.34 (m, 2H), 2.44-2.36 (m, 6H), 2.06 (s, 3H).
LCMS m/z 768 (M-H)- (ES-)。
实施例
87: 3-((4-(2,3-
二氯代
-4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
苯氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
将中间体 C4 (150 mg, 0.282 mmol)溶于DMF (1.5 mL)和添加到中间体 D1 (100 mg, 0.367
mmol)和p-TSA一水合物(80 mg, 0.423
mmol)。在70℃ (加热块温度)搅拌4h，然后倾入饱和NaHCO3水溶液(20 mL)，产物用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。收集有机物和用20%w/w盐水溶液(20 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发至棕色固体。粗产物通过色谱在Companion (40 g柱, 2% MeOH:DCM至8%)上纯化，然后用3 x MeCN (3ml)研磨，得到标题化合物(93 mg)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.87 (s, 1H),
9.20 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.98 (s,
1H), 7.84 (s, 1H), 7.52 - 7.26 (m, 6H), 6.63 (d, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.05 (s,
1H), 3.59 - 3.52 (m, 4H), 2.97 - 2.82 (m, 1H), 2.47 - 2.33 (m, 9H), 1.23 (d,
6H). 2H 被水峰掩盖 3.32ppm
LCMS m/z 768/770
(M+H)+ (ES+)。
实施例
88: 3-((4-(2,3-
二氟代
-4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
苯氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
向含中间体 C5 (151 mg, 0.303 mmol)的THF/DMF (4
mL,1:1)搅拌溶液中添加p-TSA一水合物(86 mg, 0.454 mmol)，然后添加中间体 D1 (124 mg, 0.454 mmol)。将得到的混合物在60℃加热过夜，冷却至室温和在EtOAc (30 mL)和饱和NaHCO3水溶液(20 mL)之间分配。水层用EtOAc (2 x 30 mL)萃取。合并的有机萃取物用水(3 x 40 mL)、盐水(50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩，得到膏状固体。将粗产物通过色谱在硅胶上纯化(80 g柱, 含0-10% MeOH的DCM)，然后通过制备型HPLC (Waters, 酸性(0.1%甲酸), Waters X-Select Prep-C18, 5 μm, 19x50 mm柱, 含25-50% MeCN的水)纯化，得到标题化合物0.2甲酸(65 mg)，为白色固体。
1H NMR (DMSO-d6) 400 MHz, δ: 9.88 (s, 1H)
9.14 (s, 1H) 8.88 (s, 1H) 8.46 (d, 1H) 8.34 (t, 1H) 7.97-7.92 (br m, 2H) 7.84
(s, 1H) 7.43-7.40 (m, 3H) 7.37-7.35 (m, 2H) 7.23-7.18 (m, 1H) 6.65 (d, 1H) 6.35
(s, 1H) 4.01 (s, 1H) 3.56-3.53 (m, 4H), 2H 以3.32 ppm在水峰下, 2.92-2.85 (m, 1H) 2.43 (t, 2H) 2.41-2.35
(br m, 7H) 1.23 (d, 6H).
LCMS m/z 736 (M+H)+
(ES+); 734 (M-H)- (ES-)。
实施例
89: 3-((4-(2,3-
二氯代
-4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
苯氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-5-
乙炔基苯甲酰胺
将中间体 C4 (150 mg, 0.282 mmol)溶于DMF (2 mL)和添加至中间体 D7 (90 mg, 0.564
mmol)和p-TSA一水合物(26.8 mg, 0.141
mmol)。在70℃ (加热块温度)搅拌4 h，然后倾入饱和NaHCO3水溶液(20 mL)，产物用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。收集有机物，用20%w/w盐水溶液(20 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发至黄色固体。预吸附至二氧化硅和通过色谱在硅胶(40 g柱, 4%MeOH:DCM至8%)上纯化，然后用MeCN (4 x 3 mL)研磨，得到标题化合物(40 mg)，为无色固体。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.83 (s, 1H),
9.17 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.46 (d, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.87 (s,
1H), 7.49 (t, 2H), 7.46 - 7.40 (m, 3H), 7.39 - 7.33 (m, 3H), 6.62 (d, 1H), 6.35
(s, 1H), 4.01 (s, 1H), 2.90 (hept, 1H), 2.39 (s, 3H), 1.24 (d, 6H).
LCMS m/z 655/657(M+H)+
(ES+)。
实施例
90: 3-((4-(2,3-
二氯代
-4-(3-(3-
异丙基
-1-(
对甲苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-
苯氧基
)
嘧啶
-2-
基
)
氨基
)-N-(2-(
二甲基氨基
)
乙基
)-5-
乙炔基苯甲酰胺
将中间体 C4 (150 mg, 0.282 mmol)溶于DMF (2 mL)和添加至中间体 D8 (130 mg, 0.564
mmol)和p-TSA一水合物(80 mg, 0.423
mmol)。在70℃ (加热块温度)搅拌4h，然后倾入饱和NaHCO3溶液(20 mL)，将产物用EtOAc (2 x 20 mL)萃取。收集有机物和用20%w/w盐水溶液(20 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和蒸发至无色固体。用MeCN (3 x 2 mL)研磨，得到标题化合物(90 mg)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.84 (s, 1H),
9.18 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.45 (d, 1H), 8.34 (t, 1H), 8.13 (d,1H), 7.97 (s,
1H), 7.85 (s, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 4H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 6.62 (d, 1H), 6.35
(s, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.37 - 3.26 (m, 2H), 2.89 (hept, 1H), 2.43 - 2.33 (m,
5H), 2.17 (s, 6H), 1.24 (d, 6H).
LCMS m/z 726/728 (M+H)+
(ES+)。
实施例
91:
3-((6-(4-(3-(3-(
叔丁基
)-1-(4-
甲氧基苯基
)-1H-
吡唑
-5-
基
)
脲基
)-2,3-
二甲基苯氧基
)
嘧啶
-4-
基
)
氨基
)-5-
甲氧基
-N-(2-
吗啉代乙基
)
苯甲酰胺
标题化合物可使用类似于上述那些的方法制备。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.70 (s, 1H),
8.60 (s, 1H), 8.38-8.35 (m, 2H), 8.18 (s, 1H), 7.56-7.43 (m, 5H), 7.10 (d, 2H),
7.02 (s, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.33 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.79 (s,
3H), 3.57 (t, 4H), 2.47-2.38 (m, 6H), 2.12 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.27 (s, 9H).
2H
以3.35在水峰下
LCMS m/z 382.6 (M+2H)2+ (ES+)。
生物学试验：实验方法
酶结合测定法
(Kinomescan)
本文公开的化合物的激酶结合活性使用专有的测定法测量，其测量与固定化配体的活性位点-定向的竞争结合(Fabian,
M.A.等, Nature
Biotechnol., 2005, 23:329-336)。这些测定法通过DiscoverX (从前的Ambit;
San Diego, CA)进行。通过用试验化合物孵育产生的抑制百分比相对于非抑制对照来计算。
酶抑制测定法
本文公开的化合物的酶抑制活性通过FRET测定，使用被供体和受体荧光团两者标记的合成肽(Z-LYTE, Invitrogen Ltd., Paisley, UK)。
p38 MAPKα
酶抑制
以下两种测定法变体用于测定p38 MAPKα抑制。
方法
1
试验化合物针对p38 MAPKα同种型(MAPK14:
Invitrogen)的抑制活性通过测定下游分子MAPKAP-K2的活化/磷酸化水平间接评价。将p38 MAPKα蛋白(80 ng/mL, 2.5 µL)与试验化合物(2.5 µL 4 µg/mL、0.4
µg/mL、0.04 µg/mL或0.004
µg/mL)在室温下混合2 hr。然后添加p38α无活性靶标MAPKAP-K2 (Invitrogen, 600 ng/mL)和FRET肽(8 μM; MAPKAP-K2的磷酸化靶标)的混合溶液(2.5 µL)，通过添加ATP (40 μM, 2.5µL)启动激酶反应。将混合物在室温下孵育1 hr。在荧光微量读板器(Varioskan® Flash,
ThermoFisher Scientific)上检测之前1 hr，添加显影试剂(蛋白酶, 5 µL)。
方法
2
该方法遵循与上述方法1相同的步骤方法，只是利用更高浓度的p38 MAPKα蛋白(2.5 µL 200 ng/mL蛋白而非2.5 µL 80 ng/mL蛋白)用于与试验化合物混合。
p38 MAPKγ酶抑制
本发明的化合物针对p38MAPKγ
(MAPK12: Invitrogen)的抑制活性以与上文所述类似的方式评价。将酶(800 ng/mL, 2.5 µL)与试验化合物(2.5µL 4 µg/mL、0.4 µg/mL、0.04 µg/mL或0.004 µg/mL)在室温下孵育2 hr。然后将FRET肽(8 μM, 2.5 µL)和合适的ATP溶液(2.5 μL, 400 μM)添加至酶/化合物混合物中并孵育1 hr。在荧光微量读板器(Varioskan® Flash, Thermo Scientific)上检测之前1 hr，添加显影试剂(蛋白酶, 5 µL)。
c-Src
和
Syk
酶抑制
本发明的化合物针对c-Src和Syk酶(Invitrogen)的抑制活性以类似于上文所述的方式评价。将相关的酶(分别3000
ng/mL或2000 ng/mL，2.5
µL)与试验化合物(4 µg/mL、0.4
µg/mL、0.04 µg/mL或0.004
µg/mL, 各自2.5 µL)在室温下孵育2 hr。然后将FRET肽(8 μM, 2.5 µL)和合适的ATP溶液(2.5 μL, 对于c-Src为800 μM和对于Syk为60 μM ATP)添加至酶/化合物混合物中并孵育1 hr。在荧光微量读板器(Varioskan® Flash,
ThermoFisher Scientific)上检测之前1 hr，添加显影试剂(蛋白酶, 5 µL)。
GSK 3α
酶抑制
以下两种测定法变体用于测定GSK 3α抑制。
方法
1
本发明的化合物针对GSK 3α酶同种型(Invitrogen)的抑制活性通过测定靶向肽的活化/磷酸化水平来评价。将GSK3-α蛋白(500 ng/mL, 2.5 µL)与试验化合物(2.5
µL 4 µg/mL、0.4 µg/mL、0.04
µg/mL或0.004 µg/mL)在室温下混合2 hr。然后将FRET肽(8 μM, 2.5 µL) (其是GSK3α的磷酸化靶标)和ATP (40 μM, 2.5 µL)添加至酶/化合物混合物中，将得到的混合物孵育1 hr。在荧光微量读板器(Varioskan®
Flash, ThermoFisher Scientific)上检测之前1 hr，添加显影试剂(蛋白酶, 5 µL)。
在所有情况下，位点特异性蛋白酶仅切割非磷酸化肽和消除FRET信号。各反应的磷酸化水平使用香豆素发射(供体)与荧光素发射(受体)的比率计算，对此高比率表明高的磷酸化水平而低比率表明低的磷酸化水平。各反应的抑制百分比相对于非抑制对照计算，然后自浓度-反应曲线计算50%抑制浓度(IC50值)。
方法
2
该方法遵循与上文方法1相同的步骤，只是利用更短的时间混合试验化合物(105分钟而非2小时)与GSK3-α蛋白。
细胞测定法
(a) d-U937 细胞中 LPS- 诱导的 TNFα / IL-8 释放
U937细胞(人单核细胞系)通过与PMA (100 ng/mL)孵育48-72
hr分化成巨噬细胞型细胞。将细胞与终浓度的试验化合物预孵育2 hr，然后用LPS
(0.1 μg/mL; 来自大肠杆菌(E. Coli):
O111:B4, Sigma)刺激4 hr。收集上清液，用于通过夹心ELISA (Duo-set, R&D systems)测定TNFα和IL-8浓度。TNFα生产的抑制计算为与溶媒对照相比，在各浓度的试验化合物下通过10 μg/mL的BIRB796取得的生产的百分比。相对50%有效浓度(REC50)自所得的浓度-反应曲线测定。通过与溶媒对照比较，IL-8生产的抑制以各浓度的试验化合物来计算。50%抑制浓度(IC50)自所得的浓度-反应曲线来测定。
(b) PBMC 细胞中 LPS- 诱导的 TNFα / IL-8 释放
来自健康受试者的外周血单核细胞(PBMC)使用密度梯度(Lymphoprep,
Axis-Shield Healthcare)自全血分离。将PBMC接种在96孔板中，用所需浓度的化合物处理2小时，然后添加1 ng/ml LPS (大肠杆菌0111:B4，来自Sigma Aldrich)，在正常组织培养条件下(37oC,
5%CO2)达24小时。收获上清液用于通过夹心ELISA (Duo-set, R&D systems)测定TNFα浓度和在荧光微量读板器(Varioskan® Flash,
ThermoFisher Scientific)上读数。在IL-8和TNFα生产的50%抑制(IC50)时的浓度自剂量反应曲线计算。
(c) 在 CD3/CD28 刺激的 PBMC 细胞中 IL-2 和 IFN γ 释放
使用密度梯度(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)自全血分离来自健康受试者的PBMC。将细胞添加至用CD3/CD38单克隆抗体混合物(分别为0.3ug/ml eBioscience和3ug/ml BD Pharmingen)预包被的96孔板。然后将所需浓度的化合物添加至各孔，将板在正常组织培养条件下放置3天。收获上清液，通过夹心ELISA (Duo-set, R&D System)测定IL-2和IFN γ释放。自剂量反应曲线测定IC50。
(d) HT29 细胞中 IL-1β- 诱导的 IL-8 释放
将HT29细胞(人结肠腺癌细胞系)置于96孔板(24小时)，用所需浓度的化合物预处理2小时，然后添加5ng/ml的IL-1β (Abcam)达24小时。收获上清液用于通过夹心ELISA (Duo-set, R&D System)的IL-8定量测定。自剂量反应曲线测定IC50。
(e) 原代巨噬细胞中 LPS- 诱导的 IL-8 和 TNFα 释放
使用密度梯度(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)自全血分离来自健康受试者的PBMC。将细胞孵育2小时，通过洗涤除去非粘附细胞。为将细胞分化成巨噬细胞，将细胞用5ng/ml的GM-CSF
(Peprotech)在正常组织培养条件下孵育7天。然后将化合物以所需浓度添加至细胞中进行2小时预处理，然后用10 ng/ml LPS刺激24小时。收获上清液，通过夹心ELISA (Duo-set,
R&D System)测定IL-8和TNFα释放。自剂量反应曲线测定IC50。
(f) BEAS2B 细胞中 Poly
I:C- 诱导的 ICAM-1 表达
在这些研究中Poly I:C用作简单的RNA病毒模拟物。将Poly I:C-Oligofectamine混合物(1
μg/mL Poly I:C, ± 2% Oligofectamine, 25 μL; 分别Invivogen
Ltd., San Diego, CA和Invitrogen, Carlsbad,
CA)转染至BEAS2B细胞(人支气管上皮细胞ATCC)。细胞用终浓度的试验化合物预孵育2 hr，通过基于细胞的ELISA测定细胞表面的ICAM1表达水平。在poly I:C转然后18小时的一个时间点，将细胞用含4%甲醛的PBS (100 μL)固定，然后通过添加包含0.1%叠氮化钠和1%过氧化氢的洗涤缓冲液(100 μL, 含0.05% Tween的PBS: PBS-Tween)淬灭内源过氧化物酶。细胞用洗涤缓冲液(3 x 200 μL)洗涤，在用含5%牛奶的PBS-Tween (100 μL)封闭各孔1 hr后，细胞用含抗人ICAM-1抗体(50 μL; Cell Signalling
Technology, Danvers, MA)的1% BSA PBS在4℃孵育过夜。
细胞用PBS-Tween (3 x 200 μL)洗涤和用第二抗体(100 μL; HRP-缀合的抗兔IgG,
Dako Ltd., Glostrup, Denmark)孵育。然后将细胞用底物(50 μL)孵育2-20min，接着添加终止溶液(50 μL, 1N H2SO4)。ICAM-1信号通过使用分光光度计，相对于655 nm参比波长，读取450 nm的吸光度来检测。然后细胞用PBS-Tween (3 x 200
μL)洗涤，各孔中的总细胞数通过在结晶紫染色(50 μL的2%溶液，在PBS中)和通过含1% SDS溶液(100 μL)的蒸馏水洗脱后，读取595 nm的吸光度来测定。测量的OD 450-655读数通过除以各孔的OD595读数对细胞数作校正。ICAM-1表达的抑制通过与溶媒对照比较，在各浓度的试验化合物下计算。50%抑制浓度(IC50)自得到的浓度-反应曲线测定。
(g) T 细胞增殖
使用密度梯度(Lymphoprep, Axis-Shield Healthcare)自全血分离来自健康受试者的PBMC。对于CD4+ T细胞，按照生产商说明书(Miltenyi Biotec 130-091-155)，通过负磁性细胞分选，首先富集淋巴细胞部分。然后按生产商说明书(130-045-901)，使用CD45RA+细胞的正磁性选择，使用微珠，分离幼稚CD4+ T细胞。将细胞以2x105细胞/孔铺板在96孔平底板的100 μL RPMI/10%FBS中(Corning
Costar)。在正常培养基中将25 μL试验化合物稀释至合适浓度(8x终浓度)，并加入到板上的一式两份孔中，达到0.03 ng/mL – 250 ng/mL的剂量反应范围。添加DMSO作为阴性对照。允许板预孵育2小时，然后用1 μg/mL抗-CD3 (OKT3; eBioscience)刺激。72 h后，各孔中的培养基用含10 μM BrdU (Roche)的150 μL新鲜培养基置换。16 h后，除去上清液，按生产商的说明书(Roche)，将板干燥，通过添加100 μL固定/变性溶液至各孔中达20 min将细胞固定。用PBS洗板一次，然后添加抗-BrdU检测抗体，在室温下孵育90分钟。然后将板轻轻用提供的洗涤缓冲液洗涤3次，通过添加100 μL底物溶液显色。通过添加50 μL 1 M H2SO4终止反应，在读板器(Varioskan® Flash, ThermoFisher Scientific)上读出450 nm的吸光度。自剂量反应曲线确定IC50。
(h) 人活检测定法
自IBD患者的结肠的发炎区域获得肠粘膜活检组织。将活检材料切成小片(2–3 mm)，在器官培养室在37℃下在5% CO2/95%
O2气氛中在无血清培养基中置于钢网格上。添加DMSO对照或所需浓度的试验化合物到组织中，在器官培养室中孵育24 hr。收获上清液，以通过R&D ELISA测定IL-6、IL-8、IL-1β和TNFα水平。通过试验化合物的细胞因子释放的抑制百分比相对于针对DMSO对照测定的细胞因子释放(100%)计算。
(i) 细胞有丝分裂测定法
使用密度梯度(Histopaque®-1077,
Sigma-Aldrich, Poole, UK)自全血分离(Quintiles, London, UK)来自健康受试者的PBMC。PBMC (300万细胞/样品)随后用2% PHA (Sigma-Aldrich, Poole, UK)处理48 hr，接着暴露于不同浓度的试验化合物20 hr。收集前2 hr，PBMC用秋水仙胺(0.1 µg/mL; Invitrogen, Paisley, UK)处理以使细胞停滞在分裂中期。为观察有丝分裂的细胞，通过添加Intraprep (50 µL; Beckman Coulter, France)使PBMC透化和固定，用抗-磷酸-组蛋白3 (0.26 ng/L; #9701; Cell
Signalling, Danvers, MA)和碘化丙锭(1 mg/mL;
Sigma-Aldrich, Poole, UK)染色，如前所述(Muehlbauer P.A.和Schuler M.J., Mutation
Research, 2003, 537:117-130)。使用ATTUNE流式细胞仪(Invitrogen, Paisley,
UK)观察荧光，对淋巴细胞进行门控。对各个处理，有丝分裂的抑制百分比相对于溶媒(0.5% DMSO)处理计算。
(j) MRC5 细胞中的 HRV16 诱导的 CPE 的评价
MRC-5细胞以1的MOI在含有5% FCS和1.5 mM氯化镁的DMEM中用HRV16感染，接着在33℃孵育1 hr以促进吸附。吸出上清液，然后添加新的培养基，接着孵育4天。合适时，细胞用化合物或DMSO预孵育2 hr，在病毒清除后再次添加化合物和DMSO。
吸出上清液和用亚甲基蓝溶液(100 μL, 2%甲醛, 10%甲醇和0.175 %亚甲基蓝)在室温下孵育2 hr。洗涤后，添加含1% SDS的蒸馏水(100 μL)到各孔中，将板轻轻振摇1-2 hr，然后读出660 nm的吸光度。计算各孔的抑制百分比。自通过系列稀释的试验化合物产生的浓度-反应曲线计算IC50值。
(k) 原代支气管上皮细胞中的体外 RSV 病毒载量
在96孔板上生长的正常人支气管上皮细胞(NHBEC)用RSV A2 (毒株A2, HPA, Salisbury,
UK)以0.001的MOI在含有15 mM氯化镁的LHC8培养基：RPMI-1640 (50:50)感染，在37℃孵育1小时用于吸附。然后用PBS (3 x 200 μL)洗涤细胞，添加新的培养基(200 μL)和继续孵育4天。合适时，细胞用化合物或DMSO预孵育2 hr，然后在清除病毒后再次添加化合物或DMSO。
细胞用含4%甲醛的PBS溶液(50 μL)固定20 min，用WB (3 x 200 μL) (洗涤缓冲液，包含0.5% BSA和0.05% Tween-20的PBS)洗涤，用封闭溶液(含5%浓缩牛奶的PBS)孵育1 hr。然后用WB (3 x 200 μL)洗涤细胞和在室温下用含抗-RSV (2F7) F-融合蛋白抗体(40 μL; 小鼠单克隆抗体, lot 798760, Cat. No.ab43812, Abcam)的5% BSA/PBS-tween孵育1小时。洗涤后，细胞用含HRP-缀合的第二抗体溶液(50 μL)的5% BSA/PBS-Tween (lot 00053170, Cat.No. P0447,
Dako)孵育，然后添加TMB底物(50 μL; 底物试剂包, lot 269472, Cat. No. DY999, R&D Systems, Inc.)。通过添加2N H2SO4
(50 µL)终止反应，在微量读板器(Varioskan® Flash,
ThermoFisher Scientific)中通过色度法测定得到的信号(OD: 450 nm，参比波长655 nm)。
然后洗涤细胞和应用2.5%结晶紫溶液(50 μL; lot 8656,
Cat. No. PL7000, Pro-Lab Diagnostics) 30 min。用WB洗涤后，添加含1% SDS的蒸馏水(100 μL)到各孔中，在振荡器上轻轻振摇板1 hr，然后读出595 nm的吸光度。测得的OD450-655读数通过将OD450-655除以OD595读数对细胞数进行校正。计算各孔的抑制百分比，自从系列稀释的化合物产生的浓度-反应曲线计算IC50值。
(l) 试验化合物对细胞存活力的作用 : MTT 测定法
在两种方案下，分化的U937细胞用各试验化合物(终浓度1 μg/mL或10 μg/mL，在下文指示的200 μL培养基中)预孵育：第一方案是在5% FCS RPMI1640培养基中4 hr，第二方案是在10% FCS RPMI1640培养基中24 h。上清液被新的培养基(200 μL)置换，添加MTT贮存溶液(10 μL, 5 mg/mL)到各孔中。孵育1 hr后，除去培养基，添加DMSO (200 μL)到各孔中，轻轻振摇板1 hr，然后读出550 nm的吸光度。相对于溶媒(0.5% DMSO)处理，计算各孔的细胞存活力的损失百分比。因此，药物治疗相对于溶媒的细胞存活力的表观增加表示为负百分比。
(m) β 连环蛋白在 d-U937 细胞中的积聚
U937细胞(人单核细胞系)通过用PMA (100 ng/mL)孵育48-72
hr分化成巨噬细胞-型细胞。然后用终浓度的试验化合物或溶媒孵育细胞18 hr。试验化合物对β-连环蛋白的诱导通过置换培养基为4%甲醛溶液而终止。内源过氧化物活性通过用淬灭缓冲液(100
μL, 0.1%叠氮化钠, 1% H2O2，在PBS/0.05% Tween-20中)孵育20 min而中和。细胞用洗涤缓冲液(200 µL; 含0.05% Tween-20的PBS)洗涤和用封闭溶液(200 µL; 含5%牛奶的PBS)孵育1 hr，用洗涤缓冲液(200 µL)再次洗涤，然后用含抗-β-连环蛋白抗体的1% BSA/PBS溶液(50
μL) (BD, Oxford, UK)孵育过夜。
用洗涤缓冲液(3 x 200 µL; 含0.05%
Tween-20的PBS)洗涤后，用HRP-缀合的第二抗体溶液(100 μL)/1% BSA/PBS (Dako, Cambridge, UK)孵育细胞，使用TMB底物(50 µL; R&D
Systems, Abingdon, UK)，通过色度法测定得到的信号(OD: 450 nm，参比波长655 nm)。该反应通过添加1N H2SO4溶液(50 μL)而终止。然后细胞用洗涤缓冲液洗涤，应用2%结晶紫溶液(50 μL) 30 min。用洗涤缓冲液(3 x
200 µL)洗涤后，添加1% SDS (100 μL)到各孔中，将板轻轻振摇1 hr，然后测定595 nm的吸光度(Varioskan® Flash, Thermo-Fisher
Scientific)。
通过将OD450-655除以OD595读数，测得的OD450-655读数针对细胞数进行校正。相对于溶媒计算各孔的诱导百分比，并与标准对照产生的诱导相比，将诱导比率归一化，标准对照包含参比化合物(N-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-对甲苯基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酰胺) (1 μg/mL)，其被定义为均一的。低于标准对照观察到的信号的0.15 (15%)的信号用“-ve”表示。
(n) IBD 患者的 CD3/CD28 刺激的 LPMC 细胞中的 IL-2 和 IFN γ 释放
粘膜固有层单核细胞(LPMC)自外科手术标本的发炎的IBD粘膜或自外科手术标本的正常粘膜分离和纯化如下：
用手术刀从外科手术标本的较深层取出粘膜，切成3-4mm大小的片段。通过用含1 mM
EDTA (Sigma-Aldrich, Poole, UK)的HBSS (Sigma-Aldrich)洗涤组织片段三次，同时使用磁力搅拌器搅拌，每次洗涤后弃去上清液，取出上皮细胞。随后用1A型胶原蛋白酶(1
mg/mL; Sigma-Aldrich)在37℃处理样品1 h，同时搅拌。然后将得到的细胞混悬液使用100 μm细胞过滤器过滤，洗涤两次，重悬于含有10%胎牛血清、100
U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素的RPMI-1640培养基(Sigma-Aldrich)，并用于细胞培养。
在DMSO对照或合适浓度的化合物存在下，将新鲜分离的LPMC (2x105细胞/孔)用1 µg/mL α-CD3/α-CD28刺激48 h。48 h后，去除上清液，通过R&D ELISA测定TNFα和IFNγ的存在。通过试验化合物的细胞因子释放的抑制百分比相对于针对DMSO对照测定的细胞因子释放(100%)来计算。
(o) 自 IBD 患者分离的成肌纤维细胞的细胞因子释放的抑制
来自发炎的IBD粘膜的成肌纤维细胞分离如下：
将粘膜切开并弃去，将1 mm大小的粘膜样品在37℃在潮湿CO2培养箱中在添加有20%
FBS、1%非必需氨基酸(Invitrogen,
Paisley, UK)、100 U/mL青霉素、100
μg/mL链霉素、50 μg/mL庆大霉素和1
μg/mL两性霉素(Sigma-Aldrich)的Dulbecco’s改良Eagle’s培养基(DMEM, Sigma-Aldrich)中培养。将确定的成肌纤维细胞集落接种到25-cm2培养瓶和在添加有20%
FBS和抗生素的DMEM中培养至至少4代，得到足够的数量用于刺激实验。
然后将接近汇合的单层成肌纤维细胞以3x105细胞/孔接种到12-孔板中，在无血清培养基中在37℃, 5%CO2中饥饿24 h，然后在DMSO对照或合适浓度的化合物的存在下培养24 h。24 h后，除去上清液，通过R&D ELISA测定IL-8和IL-6的存在。通过试验化合物的细胞因子释放的抑制百分比相对于针对DMSO对照测定的细胞因子释放(100%)来计算。
(p) 人中性粒细胞脱粒
中性粒细胞如下分离自人外周血：
通过静脉穿刺收集血液，并通过添加1:1 EDTA: 无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS, 无Ca+/Mg+)抗凝。添加葡聚糖(3% w/v) (1份葡聚糖溶液对4份血液)，将血液在室温下静置约20分钟。在密度梯度上小心将上清液分层(Lymphoprep,
Axis-Shield Healthcare)和离心(15分钟, 2000rpm, 不制动)。吸出上清液，将细胞沉淀重悬于无菌盐水(0.2%)中不超过60秒(以裂解污染的红细胞)。然后添加10倍体积的PBS，将细胞离心(5分钟, 1200 rpm)。将细胞重悬于HBSS+ (含有细胞松弛素B (5 μg/mL)和1 mM CaCl2的Hanks缓冲的盐溶液(无酚红))，得到5 x 106细胞/mL。
将5 x 104细胞添加至V-底96孔板的各孔和用合适浓度的试验化合物(0.3 – 1000 ng/mL)或溶媒(DMSO, 0.5%终浓度)孵育(30分钟, 37℃)。通过添加fMLP (终浓度1 μM)刺激脱粒，进一步孵育(30分钟, 37℃)后通过离心将细胞除去(5分钟, 1500 rpm)，将上清液转移至平底96孔板。添加等体积的四甲基联苯胺(TMB)，10分钟后通过添加等体积的硫酸(0.5 M)终止反应，在450 nm读出吸光度(减去655nm的背景)。从得到的浓度-反应曲线测定50%抑制浓度(IC50)。
(q) 细胞毒性测定法
将在195 µL培养基(添加有10%胎牛血清的RPMI)中的5 x 104 TK6细胞(成淋巴细胞T细胞系)添加至96孔板的合适数量的孔中。添加5 µL DMSO对照(终浓度0.5% v/v)或试验化合物(终浓度5或1 µg/mL)至各孔中并在37℃, 5% CO2孵育。24小时后，将板在1300 rpm离心3分钟并弃去上清液。然后将细胞重悬浮于含7.5
µg/mL碘化丙锭(PI)的PBS中。15分钟后，通过流式细胞术分析细胞(BD accuri)。%存活力计算为归一化至DMSO对照的试验孔中PI阴性的细胞%。
体内筛选：药效学和抗
-
炎活性
(A) 小鼠中 LPS- 诱导的中性粒细胞积聚
在指定的时间(在范围2-8 hr内)将溶媒或试验物质通过气管内途径给予未禁食的Balb/c小鼠，然后通过施用LPS攻击刺激炎性反应。在T = 0时，将小鼠置于暴露室内，并暴露于LPS (7.0 mL, 0.5 mg/mL溶液，在PBS中) 30 min。另外8 hr后，麻醉动物，将它们的气管插管，通过灌注提取BALF，然后通过气管导管从它们的肺中取回1.0 mL PBS。BALF样品中的总白细胞和差异白细胞计数使用Neubaur血球计测量。通过在室温下在200 rpm离心5 min制备BALF样品的细胞离心涂片，使用DiffQuik染色系统(Dade Behring)染色。使用油浸显微镜对细胞计数。BAL中的中性粒细胞数的数据显示为平均值 ± S.E.M. (平均值的标准误差)。相对于溶媒处理，计算各处理的中性粒细胞积聚的抑制百分比。
(B) 小鼠中 DSS- 诱导的结肠炎
在通过用DSS处理而刺激炎性反应的前一天(第-1天)，将溶媒、参比物(5-ASA)或试验化合物通过口服强饲每日两次给予未禁食的10-12周龄雄性BDF1小鼠。在研究的第0天，在饮用水中给予DSS (5% w/v)，接着BID给予溶媒(5 mL/kg)、参比(100 mg/kg)或试验化合物(5 mg/kg)达7天。含DSS的饮用水每3天装满。研究期间，每天称重动物，观察粪便并根据粪便稠度记录为分值。在第+6天处死时，取出大肠，记录长度和重量。取出结肠部分用于MPO分析以确定中性粒细胞侵润或用于组织病理学评分以确定疾病严重性。
(C) 小鼠中 TNBS- 诱导的结肠炎
通过用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS) (15 mg/mL在50%乙醇/50%盐水中)处理而刺激炎性反应的前一天(第-1天)，将溶媒(5 mL/kg)、参比物(布地奈德2.5 mg/kg)或试验化合物(1、5或50 mg/kg)通过口服强饲每天两次给予未禁食10-12周龄雄性BDF1小鼠。在研究的第0天，通过塑料导管经结肠内给予TNBS (200 µL)，接着BID给予溶媒、参比或试验化合物达2或4天。研究期间，每天称重动物，观察粪便，根据粪便稠度记录为评分。在第2天(或第4天)处死时，取出大肠，记录长度和重量。取出结肠部分，用于MPO分析以确定中性粒细胞侵润或用于涉及组织病理学的评分以确定疾病严重性。
(D) 小鼠中的继承性转移
在研究第0天，处死雌性Balb/C小鼠，获得脾用于CD45RBhigh细胞分离(使用SCID IBD细胞分离方案)。然后将约4X105细胞/mL
CD45RBhigh细胞经IP注射(100 µL/小鼠)至雌性SCID动物。在研究第14天，称重小鼠，根据体重随机化成治疗组。在第21天，在花生油溶媒中以下述剂量水平和5 mL/kg的剂量体积，通过口服强饲BID给予化合物。继续治疗直至研究第42天，在此点在am给予后4小时，对动物进行尸检。记录结肠长度和重量并用作研究的次要终点作为结肠浮肿的度量。然后将结肠分成六个截面，其中四个用于组织病理学评分(主要终点)，两个经匀浆用于细胞因子分析。显示的数据为在幼稚动物和溶媒动物之间的诱导窗的%抑制，其中较高的抑制意味着与未病变的幼稚表型更近。
体外和体内筛选结果概述
LeadHunter Discover Services
(DiscoveRx Corporation, Fremont, CA)使用KINOMEscanTM技术进行的研究确定，实施例77的化合物对激酶B-Raf和B-Raf (V600e)与它们的标准配体的结合不具有任何作用。
本发明的化合物实施例的体外概况，如使用上述方案所测定，在下文中提供(表4a-c)。与结构相关的参比化合物进行比较，参比化合物是：N-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-对甲苯基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酰胺，其先前已描述为具有抗病毒活性的有效的抗炎药(Ito,
K.等, WO
2010/112936, PCT/GB2010/050575, 7 Oct 2010和Ito,
K.等, WO
2010/067130, PCT/GB2009/051702, 17 Jun 2010)。本发明的化合物在激酶测定法的范围内显示出与参比化合物非常类似的抑制特征，显著例外是它们对酶GSK3α具有的抑制作用，其比参比化合物所显示的弱得多(表4a)。
表 4a1 ：化合物实施例的p38 MAPK (方法1)、c-Src、Syk和GSK3α (方法1)酶特征
表 4a2 ：化合物实施例的p38 MAPK (方法2)、c-Src、Syk和GSK3α (方法2)酶特征
表4a2的数据获自以下进行的测定法：
- 按照用于获得表4a1的数据的相同程序(除了p38 MAPK和GSK3α抑制数据，其各自通过方法2测定法变体获得，而不是用于获得表4a1的数据的方法1测定法变体)；和
- 在不同的实验室。
化合物实施例(8)和参比化合物对于B-RAF、p38
MAPK、HCK、cSrc、Syk和GSK3α的激酶结合特征以500 nM进行研究。化合物实施例8显示类似于参比化合物的表型，其中对于p38
MAPK、HCK、cSrc和Syk激酶的结合的显著抑制得到证实。然而，显著的区别是与参比化合物相比，化合物实施例(8)显示与B-Raf和GSK3α的结合的低得多的抑制(表4b)。
表 4b ：化合物实施例(8)与参比化合物的酶结合特征的比较
在细胞测定法中，本发明的化合物显示出与参比化合物类似的特征，该测定法揭示针对内毒素介导的TNFα和IL-8两者释放的抗炎特性以及对抗RNA病毒模拟物：polyIC诱导的ICAM-1表达(表 4c)。
表 4c1 ：化合物实施例的LPS诱导的TNFα和IL-8释放(上述测定法(a))和PolyIC诱导的ICAM-1表达的抑制
本发明化合物的生物学特征在测量它们对呼吸道病毒复制的作用的细胞系统中类似于参比化合物显示的那些特征，如对于HRV诱导的CPE表达所测定(表4d)。
表 4c2 ：在受刺激的细胞中细胞因子释放的抑制(上述测定法(a)、(b)、(c)和(d))
得自测定法(a)的表4c2的数据获自以下进行的测定法：
- 按照用于获得表4c1测定法(a)数据的相同程序；但
- 在不同的实验室。
表 4d ：化合物实施例对病毒繁殖的作用：HRV-16诱导的CPE表达
然而，有利的是，在测量它们对细胞存活力和细胞分裂(有丝分裂)的影响的测定法系统中本发明的化合物通常显示显著较低的活性，表明相对于参比化合物，它们可能具有改进的副作用特征和优良的治疗指数(表4e)。
表 4e ：化合物实施例对细胞存活力和细胞分裂的作用
1. 细胞存活力筛选(MTT测定法)：–ve和+ve表示该值分别低于和高于无显著作用的阈值，其定义为以1
μg/mL在所示时间点的30%抑制。
选择本发明的化合物实施例(8)、化合物实施例(9)和化合物实施例(86)进行另外的体内表征(profiling)。评估这些化合物增加细胞β-连环蛋白浓度的可能性，并发现是阴性的，即它们在10 μg/mL的试验浓度下的诱导作用低于1 μg/mL的参比化合物产生的作用的15%。其他化合物实施例的上文测定法(m)的结果在下表4f中提供。
表 4f ：化合物实施例对β-连环蛋白诱导的作用(其中NT表示未测试)
发现小鼠用试验物质处理对肺中LPS-诱导的中性粒细胞积聚产生显著的抑制作用。因为在内毒素攻击前8 hr仅给予一次化合物，因此这些实验揭示药物在该炎性模型中具有长的作用持续时间(表5a)。
表 5a ：用选择的化合物实施例处理对小鼠中LPS-诱导的气道中性粒细胞增多症的作用
N = 8只动物/组，平均值 +/- SEM
此外，发现用化合物实施例(8)处理小鼠，对内毒素刺激后BALF中的中性粒细胞积聚产生剂量依赖性抑制，甚至当处理发生在暴露于内毒素之前12 hr时也发现抑制作用(表5b)。
表 5b ：用化合物实施例(8)处理对小鼠中LPS-诱导的气道中性粒细胞增多症的作用
N=8/组, 平均值 +/- SEM
在小鼠吸烟模型中，研究了用化合物实施例(8)处理对BALF中巨噬细胞和中性粒细胞积聚的结果(表5)。用于本研究的吸烟模型经报告为皮质类固醇难治性系统(Medicherla S.等, J. Pharmacol. Exp. Ther ., 2008, 324(3):921-9.)，证实1.75 μg/小鼠(35 μL, bid, i.n.)的丙酸氟替卡松不抑制中性粒细胞或巨噬细胞积聚在气道中，而相同剂量对LPS-诱导的中性粒细胞积聚产生>80%抑制。
表 5 ：用化合物实施例(8)处理对小鼠中烟草烟雾-诱导的气道中性粒细胞增多症的作用
细胞数的数据表示为平均值 ± SEM, N=6
如下表6a和6b所示，实施例46和77的化合物还在上文的人活检测定法(h)和体内测定法(C)(在2天内进行)中进行筛选。组织病理学分析揭示，实施例46和77的化合物两者都在结肠炎症的体内模型中显示出显著活性。具体而言，这些化合物当以5 mg/kg口服给予时，与溶媒对照比较，显示出溃疡等级和上皮修复的显著改进。此外，实施例46和77的化合物在网状区和粘膜固有区产生炎性细胞侵润的显著降低。实施例46和77的化合物还证明在溃疡性结肠炎(UC)患者的活检中显著的抗炎作用。与健康志愿者相比，UC患者的肠粘膜活检已证明体外自发释放促炎细胞因子(Onken,J.E.等, J Clin Immunol, 2008, 126(3):
345-352)。体外添加实施例46和77到活检中显著降低IL-1b、IL-6和IL-8释放。
表 6a ：对小鼠中TNBS-诱导的结肠炎的研究的结果概述
表 6b ：使用患有溃疡性结肠炎(IBD的一种形式)的不同患者的结肠发炎区的肠粘膜活检的测定法的结果概述
如下表7所示，实施例77的化合物还在上述体内(继承性转移)测定法(D)中筛选。结肠重量：长度的比率的分析和细胞因子释放的相对抑制揭示，实施例77化合物在该进一步的结肠炎症体内模型中也显示显著活性。
表 7 ：继承性转移小鼠模型的结果概述
其他研究简述
药代动力学参数测定
(i) 小鼠研究
通过Sai Life Sciences (Hinjewadi, Pune, India)进行研究以调查在单次口服给药后的雄性C57BL/6小鼠中实施例77化合物的药代动力学和总结肠组织分布。
给予一组21只雄性小鼠实施例77化合物的混悬液制剂(在花生油中)，剂量为5 mg/kg。血样(约60 μL)从眶后丛收集，使得样品在1、2、4、6、8、12和24 hr获得。在每一时间点，血样从一组三只小鼠收集到含有K2EDTA作为抗凝剂的标记微型离心管中。通过在4000 rpm对全血离心10 min而分离血浆样品，将其储存在-70℃以下直到生物分析。在血样收集后，将动物通过二氧化碳窒息而人道安乐死，以收集总结肠组织。用冷的磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)冲洗结肠，以除去内容物。总结肠组织用两倍结肠组织重量的冷的磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)匀浆和储存在-70℃以下。总量是总结肠组织重量的三倍。处理全部样品用于使用乙腈通过蛋白质沉淀的分析和用开发的LC-MS/MS方法进行分析(LLOQ:
2.02 ng/mL在血浆中和1.01 ng/mL在结肠组织中)。使用Phoenix WinNonlin®软件(6.3版)的非区室分析工具计算药代动力学参数。
(ii) 大鼠研究
通过Sai Life Sciences (Hinjewadi, Pune, India)进行研究已调查在单次静脉内或口服给药后的雄性Wistar大鼠中实施例77化合物的药代动力学以及血浆和总结肠组织分布。
将30只雄性Wistar大鼠分成两组：组I (p.o.: 5 mg/kg; 27只大鼠)和组II (i.v.: 0.25 mg/kg; 3只大鼠)。口服给予组I的动物实施例77化合物的含水混悬液制剂(具有2% HPMC和0.5% Tween 80)，其剂量为5
mg/kg。静脉内给予组II的动物实施例77化合物的溶液制剂(在5% v/v DMSO, 7.5% w/v Solutol HS
15和87.5%盐水(0.9% w/v NaCl)中)，其剂量为0.25 mg/kg。从每只大鼠的眶后丛收集血样(约120 μL)，使得样品在给药前、0.05、0.13、0.25、0.5、1、2、4、8和24 hr (i.v.)和给药前、0.5、1、2、4、6、8、12和24 hr (p.o.)获得。紧接收集后，通过离心从血液中收获血浆，将其储存在-70℃直到分析。收集血液样品后，将动物(组I)通过二氧化碳窒息而人道安乐死。分离总结肠，用冷的磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)冲洗，以除去内容物和称重。总结肠组织用冰冷的磷酸盐缓冲盐水pH 7.4匀浆。用于匀浆的缓冲液量是组织重量的两倍。将所有样品储存在-70℃以下直到生物分析。总结肠组织匀浆量是三倍。血浆和总结肠组织样品通过LC-MS/MS方法定量测定(在血浆和总结肠组织中的LLOQ =
0.5 ng/mL)。
(ii) 比格犬研究
通过Sai Life Sciences (Hinjewadi, Pune, India)进行研究以调查在单次静脉内或口服给药后的雄性比格犬中实施例77化合物的血浆药代动力学。
口服给予一组三只雄性比格犬实施例77化合物的含水混悬液制剂(具有2% HPMC和0.5% Tween 80)，其剂量为1 mg/kg。此外，静脉内给予一组三只雄性比格犬实施例77化合物的溶液制剂(在5% v/v DMSO, 7.5% w/v Solutol HS
15和87.5%盐水(0.9% w/v NaCl)中)，其剂量为0.05 mg/kg。血样(约1.5 mL)自颈静脉收集，使得样品在给药前、给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8和24 hr (p.o.)和给药前、给药后0.08、0.25、0.5、1、2、4、8、12、24和32 hr (i.v.)获得。在各时间点，自一组三只犬中收集血样到含有K2EDTA作为抗凝剂的标记微量离心管中。通过在2500g离心全血10分钟而分离血浆样品，将其储存在-70℃以下直到生物分析。处理所有样品用于使用乙腈通过蛋白质沉淀的分析和用LC-MS/MS方法(LLOQ = 0.50 ng/mL)进行分析。使用Phoenix WinNonlin® (6.3版)的非区室分析工具计算药代动力学参数。
如下表8a所示，实施例77化合物的口服给予导致比血浆暴露更高的结肠组织暴露，特别是在犬研究中(其中根本未观察到血浆暴露)。
表 8a ：包括口服给予实施例77化合物的研究中测定的药代动力学参数
表 8b ：包括静脉内给予实施例77化合物的研究中测定的药代动力学参数
ADME
参数测定
通过BioFocus (Saffron Walden, UK)对实施例77和80化合物的某些体外ADME (吸收、分布、代谢和排泄)参数进行评价。
(i) 代谢稳定性
肝微粒体稳定性
用0.1 µM
(n=2, 终DMSO浓度为0.25%)的试验化合物孵育进行微粒体稳定性测定，使用来自Xenotech (批号分别为1210153,
0810143和1110042)的合并的人、犬和大鼠肝微粒体以0.25 mg蛋白/mL在辅助因子NADPH存在下进行。在37℃进行孵育，在0、2、5、10和20分钟自孵育液获得100 µL等分试样，通过添加100 µL含有卡马西平作为分析内标的乙腈终止反应。将样品离心，通过LC-MS/MS分析上清液部分。
将仪器反应(峰高度)参照为0时间点样品(作为100%)以测定化合物剩余的百分比。
使用各化合物的%剩余的ln曲线以测定微粒体孵育的半寿期。半寿期值自以下关系计算：
T1/2 (min) = -0.693/λ
其中λ是ln浓度相对于时间曲线的斜率。
计算体外固有清除率Clint
(mL/min/kg)，使用以下换算参数和公式将其换算成肝提取率。
参数
公式
Clint
(组织清除率) mL/min/kg = [0.693 /t½ (min)] x [1/微粒体蛋白浓度mg/mL] x [mg微粒体/g肝] x [g肝/kg体重]
Clint (肝清除率) mL/min/kg = 肝血流量X Clint / (肝血流量+ Clint)
肝提取率(Eh) = Clint (肝清除率) mL/min/kg /肝血流量(mL/min/kg)
冷冻保存的肝细胞稳定性
用试验化合物(0.1 µM起始浓度,
n=2)孵育进行肝细胞稳定性测定法，用来自Celsis (批号分别为RRW,
KLI和WAP)的合并的人、犬和大鼠冷冻保藏的肝细胞进行，细胞密度为50万细胞/孔。在37℃进行孵育，在0、10、20、45和90分钟从孵育液采集100 µL样品，通过添加100 µL含有卡马西平作为分析内标的乙腈终止反应。将样品离心，通过LC-MS/MS分析上清液部分。
将仪器反应(峰高度)参照为0时间点样品(作为100%)以测定化合物剩余的百分比。
使用各化合物%剩余的ln曲线以测定肝细胞孵育的半寿期。半寿期值自以下关系计算：
T1/2 (min) = -0.693/λ
其中λ是ln浓度相对于时间曲线的斜率。
标准化合物睾酮、咪达唑仑和4-甲基伞形酮包括在测定法设计中。对于阶段I和阶段II反应两者而言，这些化合物给出冷冻保藏的制备物的代谢能力的指示。
体外固有清除率(Clint) (µL/min/百万细胞)通过应用下式至半寿期值来计算：
Clint = 0.693/T½ (min) x 孵育体积(μL)/百万细胞
使用以下比例因子和公式，半寿期值还被换算为肝提取率。
参数
Clint
(组织清除率) mL/min/kg = [0.693/t½ (min)] x [1/肝细胞浓度(百万细胞/mL)] x [百万细胞/g肝] x [g肝/kg体重]
Clint (肝清除率) mL/min/kg = 肝血流量 X Clint / (肝血流量 + Clint)
肝提取率(Eh) = Clint (肝清除率) mL/min/kg /肝血流量(mL/min/kg)
表 9a和9b所列结果表明，实施例77和80化合物显示高的肝清除率，这是一种导致体内环境中较低全身暴露的特征。
表 9a ：实施例77和80化合物的肝微粒体稳定性试验概要(报告的结果是两次实验的算术平均值)
表 9b ：实施例77和80化合物的肝细胞稳定性试验概要(报告的结果是两次实验的算术平均值)
(ii) 细胞色素的时间依赖性抑制
CYP450时间依赖性抑制(TDI)测定法用6个试验浓度(0.062 µM至15 µM)的试验化合物进行(n=2)。试验化合物用在0.1 M Tris缓冲液, pH 7.4中的合并的人肝微粒体在37℃在辅助因子NADPH的存在下预孵育30分钟。以未预孵育制备平行系列的孵育液(n=2)。然后添加探针底物(具有另外的辅助因子)，进一步孵育指定的时间。用于孵育的探针底物浓度已被优化以维持一级反应条件。
用含有分析内标(卡马西平)的乙腈终止反应，然后将样品离心以除去微粒体蛋白和使用优化的LC/MS-MS条件分析。将MS数据标准化成内标，并与合适的溶剂对照比较以测定相对于“未抑制”对照，探针底物所形成的代谢物的量。结果表示为%抑制。然后使用S型剂量反应方程式(下文所示)将这些值作图并计算IC50。
Y = 底值 + ((顶值-底值)/1 + 10^((Log IC50 – X) * Hill斜率))
X =
Log浓度
Y = 反应
IC50以µM表示，即抑制为对照值的50%的点。
阳性和阴性时间依赖性抑制剂被包括在内以证实在所用条件下特定和有效的相互作用的可能性。在板孔之间探针周转量(probe turnover)的变化意味着记录低于10 -
15%的抑制值可能不是有效的。
特定条件概述显示在下表中。
表 10 ：实施例77化合物的CYP抑制研究概述(报告的结果是两次实验的算术平均值)
hERG
抑制研究
使用Essen Bioscience (Welwyn Garden City, England)的IonWorksTM膜片钳电生理学，测试实施例75、77、80和81的化合物对人乙醚a go-go (hERG)通道的抑制。八点浓度曲线使用自最大终测定浓度(3 μM)的连续3倍稀释液产生。自稳定表达全长hERG通道的中国仓鼠肺细胞系进行电生理记录。在穿孔的膜片钳配制(100
μg/mL)两性霉素)中在室温(21-23℃)使用IonWorks
Quattro仪器测量单个细胞离子电流。内部溶液含有(mM)：140
KCl、1 MgCl2、1 EGTA、20 HEPES并缓冲至pH 7.3。外部溶液含有(mM)：138 NaCl、2.7 KCl、0.9 CaCl2、0.5
MgCl2、8 Na2HPO4、1.5 KH2PO4，亦缓冲至pH 7.3。在保持电位为-70 mV下夹住细胞30 s，然后步进至+40 mV达1 s。接着1s的超极化步骤至-30 mV以引起hERG尾电流。以0.25 Hz的频率重复该顺序5次。以第5次脉冲测量尾步骤的电流，并参比至保持电流。然后将化合物孵育6-7分钟，然后使用相同的脉冲顺序第二次测量hERG信号。八点浓度曲线使用自最大终测定浓度(3 μM)的连续3倍稀释液产生。
这些研究确定，实施例75、77、80和81的化合物对hERG通道的IC50值都大于3 μM。
多样性谱
通过Cerep (Celle-Lévescault, France)进行研究以调查实施例77化合物与多样性选择的受体的结合，和调查选择的酶的抑制或激活(“多样性谱”包含总共71种受体和26种酶)。
当以300 nM的浓度研究时，实施例77的化合物不与任何受体有效结合，或抑制/激活所测试的酶(即其在受体结合测定法或酶测定法中抑制对照特异性结合低于25%，如使用各受体的合适放射性配体或各酶的合适参比底物所评价)。
诱变性评价
(
细菌回复突变筛选
)
通过Sequani (Ledbury, Herefordshire, UK)进行研究，以体外评价实施例77的化合物在鼠伤寒沙门氏菌的两个组氨酸依赖性营养缺陷型突变体菌株TA98和TA100中诱导突变的能力。
突变筛选使用平板掺入方法进行，在S-9 mix (肝线粒体后部分，来自Aroclor
1254处理的大鼠的肝)的存在和不存在下同时进行。将细菌暴露于溶于二甲基亚砜的实施例77的化合物，该溶剂也用作阴性对照。所用的剂量水平是0.32、1.6、8、40、200、1000或5000 μg/板。
在S-9 mix的存在或不存在下，在任一鼠伤寒沙门氏菌菌株的回复突变克隆中，实施例77的化合物未显示剂量相关的或统计学显著的增加。这表明，实施例77的化合物在所研究的鼠伤寒沙门氏菌菌株中缺少任何诱变效应。
上文揭示的本发明的化合物实施例的生物学特征表明，式(I)的化合物具有类似于较早公开的参比化合物的抗炎特性。此外，体内药理学作用保持至少12小时，这表明在治疗用途中它们显示长的作用持续时间。有利的是，式(I)的化合物具有比参比化合物更窄的激酶抑制活性谱，这是经设计用于该目的的许多现有技术分子所特有的，并显示对细胞存活力和细胞分裂的副作用可能性降低。式(I)的化合物所显示的药理学特征由此与临床应用中诱发毒性的风险降低相关的有效抗炎药一致。
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Claims (21)
1. 式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，包括其所有立体异构体和互变异构体：
Q表示噻吩基、苯基或吡啶基，其中任一个可任选带有1-3个取代基，所述取代基独立选自羟基、卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、NH2、N(H)-C1-6烷基、N(C1-6烷基)2、C1-6亚烷基-5-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-5-10元杂环；
X表示CH或N，
Y表示NR2R3或任选通过杂原子连接的4-10元杂环，其中所述杂环带有0或1个取代基，所述取代基选自卤代、OH、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C0-3亚烷基-O-C0-6烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3卤代烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基杂芳基、C(O)C1-6烷基、SO2NR4R5、C0-3亚烷基-NR4R5、C0-3亚烷基-NR4SO2R5和C0-3亚烷基-NR4C(O)R5；
R是
C1-6烷基，
C2-6烯基，
C1-6羟基烷基，
C1-6卤代烷基，
被C1-3烷氧基或氰基取代的C1-6烷基，
被C1-3烷基任选取代的C0-2亚烷基-C3-8环烷基，或
被C1-3烷基任选取代的4-5元杂环；
Ra和Rb连同它们所连接的C原子一起形成稠合苯环，其被一个或多个取代基任选取代，所述取代基选自C1-3烷基、C1-3卤代烷基、氰基和卤代，
或者Ra和Rb中的一个表示H、卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基而另一个独立地表示卤代、氰基、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；
R1选自氢、OH、卤素、CN、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C1-6卤代烷基、C0-3亚烷基-C3-6环烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3亚烷基-C3-6环烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6羟基烷基、C0-3亚烷基-SO2C1-3烷基、C0-3亚烷基-SO2NR4R5和C0-3亚烷基-NR6R7和C0-3亚烷基-NCOR6R7；
R2和R3各自独立选自H、C1-8烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-6亚烷基-4-10元杂环和C0-3亚烷基-O-C0-6亚烷基-4-10元杂环，条件是当所述杂环通过氮连接时，将氮原子连接至取代基的必需O原子的亚烷基链上存在至少两个C原子，其中独立地，各烷基或亚烷基任选带有1个氧代取代基，且烷基或亚烷基链上的任选一个或两个碳原子可各自被选自O、N或S(O)p的杂原子置换，使得当所述烷基或亚烷基包含胺时，所述氨基基团是叔胺，
其中各4-10元杂环被1或2个基团任选取代，所述基团独立选自卤代、OH、C1-6烷基、C1-4卤代烷基、C0-3亚烷基-O-C0-6烷基、C0-3亚烷基-O-C1-3卤代烷基、C0-6亚烷基芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基芳基、C0-6亚烷基杂芳基、C0-3亚烷基-O-C0-3亚烷基杂芳基、C(O)C1-6烷基、SO2NR8R9和C0-3亚烷基-NR8R9、C0-3亚烷基-NR8SO2R9和C0-3亚烷基-NR8C(O)R9；
R4是H或C1-4烷基；
R5是H或C1-4烷基；
R6是H或C1-4烷基、C(O)C1-3烷基和SO2C1-3烷基；
R7是H或C1-4烷基、C(O)C1-3烷基和SO2C1-3烷基；
R8是H或C1-4烷基；和
R9是H或C1-4烷基；
P是0、1或2。
2. 式(Ia2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q和Y如权利要求1中所定义。
3. 式(Ib2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q、X和Y如权利要求1中所定义。
4. 式(Ic)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q和Y如权利要求1中所定义。
5. 式(Id2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q和Y如权利要求1中所定义。
6. 式(Ie2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q和Y如权利要求1中所定义。
7. 式(If2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、Q和Y如权利要求1中所定义。
8. 式(Ig2)的权利要求1的化合物，
其中R、R1、X、Q和Y如权利要求1中所定义。
9. 权利要求1-8中任一项的化合物或盐，其中R表示：
C1-6正-烷基，
C4-6支链烷基，
C2-6烯基，
C1-6羟基烷基，
C1-6卤代烷基，
被C1-3烷氧基或氰基取代的C1-6烷基，
被C1-3烷基任选取代的C0-2亚烷基-C3-8环烷基，或
被C1-3烷基任选取代的4-5元杂环。
10. 权利要求1的化合物和其药学上可接受的盐，所述化合物选自包括以下的组或由以下组成的组：
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-5-(三氟代甲基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(3-(全氟代乙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
1-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-甲基苯甲酰胺；
3-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)嘧啶-2-基氨基)-正丙基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲基噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N,N-二甲基苯甲酰胺；
1-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-(吗啉-4-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-4-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-(二甲基氨基)乙基)-4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-4-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-3-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-溴代-5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-5-(三氟代甲基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(1-(对甲苯基)-3-(三氟代甲基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-乙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-环丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(3-(1-甲基环丙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(1-(3,4-二甲基苯基)-3-异丙基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-氯代-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-氯代-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-溴代-5-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-羟基乙基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
N-(2-羟基乙基)-3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-甲基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
1-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((3-甲氧基-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)氧基)萘-1-基)脲；
5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-2-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((6-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-5-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(3-(全氟代乙基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)-5-((4-((4-(3-(1-(对甲苯基)-3-(1,1,1-三氟代-2-甲基丙烷-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(2-氰基丙烷-2-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-乙炔基-5-((4-((4-(3-(3-(2-甲氧基丙烷-2-基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-(二甲基氨基)苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-甲基-1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
(R)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-吗啉代丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-甲氧基乙基)苯甲酰胺；
(S)-3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(1-甲氧基丙烷-2-基)苯甲酰胺；
3-甲氧基-5-((4-((4-(3-(1-(4-甲氧基苯基)-3-(丙-1-烯-2-基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)-嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氟代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)-嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)-嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基苯甲酰胺；
3-((4-(2,3-二氯代-4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)苯氧基)-嘧啶-2-基)氨基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)-5-乙炔基苯甲酰胺；
3-((6-(4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)-2,3-二甲基苯氧基)嘧啶-4-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺。
11. 权利要求1、3-5、8和10中任一项的化合物，其中所述化合物不是3-((4-((4-(3-(3-异丙基-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-甲氧基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺。
12. 权利要求1的化合物，其是3-((4-((4-(3-(3-(叔丁基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基)氧基)嘧啶-2-基)氨基)-5-乙炔基-N-(2-吗啉代乙基)苯甲酰胺或其药学上可接受的盐。
13. 药物组合物，其包含权利要求1-12中任一项的化合物与一种或多种药学上可接受的稀释剂或载体的组合。
14. 组合产品，其包含：
(A) 权利要求1-12中任一项的化合物；和
(B) 另一种治疗药，
其中组分(A)和(B)的每一种与药学上可接受的辅剂、稀释剂或载体混合配制。
15. 权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的组合物或权利要求14的组合产品，其用作药物。
16. 权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的组合物或权利要求14的组合产品，其用于治疗COPD
(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、囊性纤维化、肉状瘤病、特发性肺部纤维化、过敏性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、过敏性结膜炎、结膜炎、干燥性角膜结膜炎(干眼)、青光眼、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病性黄斑水肿)、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、白内障手术后的炎症、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥、谷蛋白敏感性肠病(腹腔疾病)、嗜酸性细胞食管炎、肠移植物抗宿主病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎或骨关节炎。
17. 权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的组合物或权利要求14的组合产品，其用于治疗COPD、哮喘、干燥性角膜结膜炎(干眼)、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎)、克罗恩病或溃疡性结肠炎。
18. 权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的组合物或权利要求14的组合产品在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途：COPD
(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、囊性纤维化、肉状瘤病、特发性肺部纤维化、过敏性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、过敏性结膜炎、结膜炎、干燥性角膜结膜炎(干眼)、青光眼、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病性黄斑水肿)、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、白内障手术后的炎症、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥、谷蛋白敏感性肠病(腹腔疾病)、嗜酸性细胞食管炎、肠移植物抗宿主病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎或骨关节炎。
19. 治疗选自以下病况的方法：COPD
(包括慢性支气管炎和肺气肿)、哮喘、儿科哮喘、囊性纤维化、肉状瘤病、特发性肺部纤维化、过敏性鼻炎、鼻炎、鼻窦炎、过敏性结膜炎、结膜炎、干燥性角膜结膜炎(干眼)、青光眼、糖尿病性视网膜病、黄斑水肿(包括糖尿病性黄斑水肿)、视网膜中央静脉阻塞(CRVO)、干性和/或湿性年龄相关性黄斑变性(AMD)、白内障手术后的炎症、葡萄膜炎(包括后葡萄膜炎、前葡萄膜炎和全葡萄膜炎)、角膜移植和缘细胞移植排斥、谷蛋白敏感性肠病(腹腔疾病)、嗜酸性细胞食管炎、肠移植物抗宿主病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎或骨关节炎，所述方法包括给予受试者有效量的权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的药物组合物或权利要求14的组合产品。
20. 权利要求1-12中任一项的化合物、权利要求13的组合物或权利要求14的组合产品，其用于在患有一种或多种慢性病况例如充血性心力衰竭、COPD、哮喘、糖尿病、癌症的患者和/或免疫抑制的患者中例如器官移植后，治疗炎性疾病的恶化，特别是病毒性恶化，或者用于治疗病毒感染。
21. 权利要求20的化合物、组合物或组合产品，其与抗病毒疗法例如扎那米韦、奥塞米韦(例如磷酸奥塞米韦)、帕拉米韦或拉尼米韦组合使用。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106771117A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-05-31 | 王婧 | 一种中性粒细胞抗原底片的制备方法 |
| CN114573510A (zh) * | 2015-12-16 | 2022-06-03 | 洛克索肿瘤学股份有限公司 | 可用作激酶抑制剂的化合物 |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2534904T3 (es) * | 2003-01-22 | 2015-04-30 | Senju Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparación de absorción percutánea para el tratamiento de enfermedad oftálmica, uso del mismo y método para la migración del remedio oftálmico en el tejido tópico en los ojos |
| AU2008337286B2 (en) | 2007-12-19 | 2014-08-07 | Cancer Research Technology Limited | Pyrido[2,3-b]pyrazine-8-substituted compounds and their use |
| US8815896B2 (en) | 2010-02-01 | 2014-08-26 | The Institute Of Cancer Research: Royal Cancer Hospital | 1-(5-tert-butyl-2-phenyl-2H-pyrazol-3-yl)-3-[2-fluoro-4-(1-methyl-2-oxo-2,3-dihydro-1H-imidazo[4,5-B]pyridin-7-yloxy)-phenyl]-urea and related compounds and their use in therapy |
| ES2583853T3 (es) | 2011-10-03 | 2016-09-22 | Respivert Limited | 1-Pirazolil-3-(4-((2-anilinopirimidin-4-il)oxi)naftalen-1-il)ureas como inhibidores de p38 MAP cinasa |
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| BR112015024678B1 (pt) * | 2013-04-02 | 2023-02-23 | Oxular Acquisitions Limited | Composto inibidor da cinase, formulação farmacêutica que compreende o mesmo, seus usos, processo para sua preparação e intermediários |
| EP2981534B1 (en) | 2013-04-02 | 2017-07-19 | Topivert Pharma Limited | Kinase inhibitors based upon n-alkyl pyrazoles |
| GB201320729D0 (en) | 2013-11-25 | 2014-01-08 | Cancer Rec Tech Ltd | Therapeutic compounds and their use |
| GB201320732D0 (en) | 2013-11-25 | 2014-01-08 | Cancer Rec Tech Ltd | Methods of chemical synthesis |
| JP6514703B2 (ja) | 2013-12-20 | 2019-05-15 | トピバート ファーマ リミテッド | キナーゼインヒビターとして有用な尿素誘導体 |
| CN106573914B (zh) | 2014-02-14 | 2021-05-28 | 瑞斯比维特有限公司 | 作为激酶抑制剂的吡唑基-脲 |
| MA40774A (fr) * | 2014-10-01 | 2017-08-08 | Respivert Ltd | Dérivés de diaryle-urée en tant qu'inhibiteurs de kinase p38 |
| WO2016196365A1 (en) * | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Envisia Therapeutics, Inc. | Implant for treatment of an ocular condition |
| CN109071505B (zh) | 2016-04-06 | 2021-11-16 | 奥苏拉收购有限公司 | 激酶抑制剂 |
| CN109906075A (zh) * | 2016-04-29 | 2019-06-18 | 恩瑟拉德斯医药有限公司 | 用于在发炎病灶或区域中局部注射的脂质体皮质类固醇 |
| BR112020006677A2 (pt) | 2017-10-05 | 2020-10-06 | Fulcrum Therapeutics, Inc. | uso de inibidores p38 para reduzir a expressão de dux4 |
| US10342786B2 (en) | 2017-10-05 | 2019-07-09 | Fulcrum Therapeutics, Inc. | P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2011124930A1 (en) * | 2010-04-08 | 2011-10-13 | Respivert Limited | P38 map kinase inhibitors |
| WO2011158042A2 (en) * | 2010-06-17 | 2011-12-22 | Respivert Limited | Methods |
| CN102333770A (zh) * | 2008-12-11 | 2012-01-25 | 瑞斯比维特有限公司 | P38map激酶抑制剂 |
| WO2013050757A1 (en) * | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Respivert Limited | 1-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p38 map kinase inhibitors |
| WO2013050756A1 (en) * | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Respivert Limited | L-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p3i map kinase inhibitors |
Family Cites Families (45)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR9814361A (pt) | 1997-12-22 | 2001-11-27 | Bayer Ag | Inibição de quinase raf usando uréiasheterocìclicas substituìdas por arila eheteroarila |
| AU762077B2 (en) | 1997-12-22 | 2003-06-19 | Bayer Healthcare Llc | Inhibition of p38 kinase activity using aryl and heteroaryl substituted heterocyclic ureas |
| US20080300281A1 (en) | 1997-12-22 | 2008-12-04 | Jacques Dumas | Inhibition of p38 Kinase Activity Using Aryl and Heteroaryl Substituted Heterocyclic Ureas |
| UA73492C2 (en) | 1999-01-19 | 2005-08-15 | Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents | |
| ATE312823T1 (de) | 1999-07-09 | 2005-12-15 | Boehringer Ingelheim Pharma | Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen |
| US6492393B1 (en) | 1999-11-16 | 2002-12-10 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Compounds useful as anti-inflammatory agents |
| US6492529B1 (en) | 2000-01-18 | 2002-12-10 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Bis pyrazole-1H-pyrazole intermediates and their synthesis |
| US6525046B1 (en) | 2000-01-18 | 2003-02-25 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents |
| US6376515B2 (en) | 2000-02-29 | 2002-04-23 | Cor Therapeutics, Inc. | Benzamides and related inhibitors of factor Xa |
| CA2445003A1 (en) | 2001-05-16 | 2002-11-21 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Diarylurea derivatives useful as anti-inflammatory agents |
| ES2284887T3 (es) | 2001-07-11 | 2007-11-16 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. | Metodos para tratar enfermedades transmitidas por citocinas. |
| AU2003209119A1 (en) | 2002-02-11 | 2003-09-04 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | Pyridine, quinoline, and isoquinoline n-oxides as kinase inhibitors |
| PT1478358E (pt) | 2002-02-11 | 2013-09-11 | Bayer Healthcare Llc | Tosilato de sorafenib para o tratamento de doenças caracterizadas por angiogénese anormal |
| WO2003072569A1 (en) | 2002-02-25 | 2003-09-04 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | 1,4-disubstituted benzofused cycloalkyl urea compounds useful in treating cytokine mediated diseases |
| EP1751139B1 (en) | 2004-04-30 | 2011-07-27 | Bayer HealthCare LLC | Substituted pyrazolyl urea derivatives useful in the treatment of cancer |
| NZ552868A (en) | 2004-08-12 | 2009-07-31 | Pfizer | Triazolopyridinylsulfanyl derivatives as P38 MAP kinase inhibitors |
| GB0500435D0 (en) | 2005-01-10 | 2005-02-16 | Novartis Ag | Organic compounds |
| PE20070640A1 (es) | 2005-10-28 | 2007-08-10 | Lilly Co Eli | Compuestos derivados de pirazol-isoquinolina urea como inhibidores de la cinasa p38 |
| EP3147281A1 (en) | 2008-03-17 | 2017-03-29 | Ambit Biosciences Corporation | Quinazoline derivatives as raf kinase modulators and methods of use thereof |
| US8293748B2 (en) | 2008-10-02 | 2012-10-23 | Respivert Ltd. | p38 MAP kinase inhibitors |
| GB0818033D0 (en) | 2008-10-02 | 2008-11-05 | Respivert Ltd | Novel compound |
| CN102264737A (zh) | 2008-12-23 | 2011-11-30 | 雅培制药有限公司 | 抗病毒化合物 |
| RU2505539C2 (ru) | 2008-12-23 | 2014-01-27 | Эбботт Лэборетриз | Антивирусные соединения |
| US8809343B2 (en) | 2008-12-26 | 2014-08-19 | Fudan University | Pyrimidine derivative, preparation method and use thereof |
| GB0905955D0 (en) | 2009-04-06 | 2009-05-20 | Respivert Ltd | Novel compounds |
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| GB0921731D0 (en) | 2009-12-11 | 2010-01-27 | Respivert Ltd | Theraputic uses |
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| WO2011153553A2 (en) | 2010-06-04 | 2011-12-08 | The Regents Of The University Of California | Methods and compositions for kinase inhibition |
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| EP2582700B1 (en) | 2010-06-17 | 2016-11-02 | Respivert Limited | Respiratory formulations containing p38 mapk inhibitors |
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| CN106573914B (zh) | 2014-02-14 | 2021-05-28 | 瑞斯比维特有限公司 | 作为激酶抑制剂的吡唑基-脲 |
| MA40774A (fr) | 2014-10-01 | 2017-08-08 | Respivert Ltd | Dérivés de diaryle-urée en tant qu'inhibiteurs de kinase p38 |
-
2012
- 2012-08-17 GB GBGB1214750.0A patent/GB201214750D0/en not_active Ceased
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102333770A (zh) * | 2008-12-11 | 2012-01-25 | 瑞斯比维特有限公司 | P38map激酶抑制剂 |
| WO2011124930A1 (en) * | 2010-04-08 | 2011-10-13 | Respivert Limited | P38 map kinase inhibitors |
| WO2011158042A2 (en) * | 2010-06-17 | 2011-12-22 | Respivert Limited | Methods |
| WO2013050757A1 (en) * | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Respivert Limited | 1-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p38 map kinase inhibitors |
| WO2013050756A1 (en) * | 2011-10-03 | 2013-04-11 | Respivert Limited | L-pyrazolyl-3- (4- ( (2 -anilinopyrimidin- 4 - yl) oxy) napththalen- 1 - yl) ureas as p3i map kinase inhibitors |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114573510A (zh) * | 2015-12-16 | 2022-06-03 | 洛克索肿瘤学股份有限公司 | 可用作激酶抑制剂的化合物 |
| CN114634447A (zh) * | 2015-12-16 | 2022-06-17 | 洛克索肿瘤学股份有限公司 | 可用作激酶抑制剂的化合物 |
| CN106771117A (zh) * | 2016-11-25 | 2017-05-31 | 王婧 | 一种中性粒细胞抗原底片的制备方法 |
| CN106771117B (zh) * | 2016-11-25 | 2018-09-14 | 王婧 | 一种中性粒细胞抗原底片的制备方法 |
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