EA024391B1 - Производные бензамида для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1 - Google Patents

Производные бензамида для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1 Download PDF

Info

Publication number
EA024391B1
EA024391B1 EA201491824A EA201491824A EA024391B1 EA 024391 B1 EA024391 B1 EA 024391B1 EA 201491824 A EA201491824 A EA 201491824A EA 201491824 A EA201491824 A EA 201491824A EA 024391 B1 EA024391 B1 EA 024391B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
phenyl
nicotinamide
mmol
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
EA201491824A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491824A1 (ru
Inventor
Стефани Кей Додд
Паскаль Фюре
Роберт Мартин Гротцфельд
Вольфганг Янке
Дэррил Бринли Джоунс
Пол Манли
Андреас Марцинцик
Ксавье Франсуа Андре Пелле
Баха Салем
Йозеф Шепфер
Original Assignee
Новартис Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48670630&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA024391(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Новартис Аг filed Critical Новартис Аг
Publication of EA201491824A1 publication Critical patent/EA201491824A1/ru
Publication of EA024391B1 publication Critical patent/EA024391B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07F9/576—Six-membered rings
    • C07F9/58—Pyridine rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы (I)где Y, Y, R, R, Rи Rопределены в "Кратком описании изобретения"; способным к ингибированию активности BCR-ABL1 и его мутантов. Изобретение также обеспечивает способ получения соединений по изобретению, фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы применения таких соединений при лечении рака.

Description

Настоящая заявка испрашивает приоритет к предварительной заявке США № 61/647174, поданной 15 мая 2012 г., и предварительной заявке США № 61/790967, поданной 15 марта 2013 г., каждая из которых включена в настоящую заявку в качестве ссылки в полном объеме.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к соединениям, способным к ингибированию тирозинкиназной ферментативной активности белка Абельсона (АВЬ1), Абельсон-родственного белка (АВЬ2) и родственных химерных белков, в частности ВСК-АВШ. Изобретение также обеспечивает способ получения соединений по настоящему изобретению, фармацевтических препаратов, содержащих такие соединения, и способы применения таких соединений при лечении рака.
Предпосылки создания изобретения
Тирозинкиназная активность АВЬ1 белка обычно жестко регулируется Ν-концевой кэппирующей областью 8Н3 домена, играющей важную роль. Один регуляторный механизм включает миристоилирование глицин-2 остатка на Ν-концевом кэп-сайте и затем взаимодействие с миристатсвязывающим сайтом в 8Н1 каталитическом домене. Отличительным признаком хронического миелогенного лейкоза (СМЬ) является хромосома РШ1абе1рШа (Рй), образованная в результате 1(9,22) реципрокальной хромосомной транслокации в гемтатопоэтической стволовой клетке. Эта хромосома несет ВСК-АВШ онкоген, который кодирует химерный ВСК-АВШ белок, который не содержит Ν-концевой кэп и содержит конститутивно активный тирозинкиназный домен.
Хотя лекарственные средства, которые ингибируют тирозинкиназную активность ВСК-АВШ через АТР-конкуретный механизм, такие как О1ееуес®/ОИуес® (иматиниб), Та81диа® (нилотиниб) и 8ргусе1® (дасатиниб), являются эффективными для лечения СМЬ, у некоторых пациентов возникает рецидив из-за возникновения лекарственно-резистентных клонов, в которых мутации в 8Н1 домене мешают связыванию с ингибитором. Хотя Та81диа® и 8ргусе1® сохраняют эффективность в отношении многих С1ееуесрезистентных мутантных форм ВСК-АВШ, мутация, в которой треонин-315 остаток заменен изолейцином (Т3151), остается нечувствительной ко всем трем лекарственным средствам и может привести к развитию резистентности к терапии у СМЬ пациентов. Поэтому ингибование ВСК-АВШ мутаций, таких как Т3151, остается неудовлетворенной медицинской потребностью. Помимо СМЬ, ВСК-АВШ гибридные белки являются причиной, вызывающей определенный процент острых лимфоцитарных лейкозов, и лекарственные средства, прицельно действующие на АВЬ киназную активность, также являются полезными для этого показания.
Средства, прицельно действующие на миристоилсвязывающий сайт (так называемые аллостерические ингибиторы), обладают потенциалом для лечения ВСК-АВШ расстройств (1. Ζΐιηηβ. Р.1. Абпап, XV. 1айпке, 8.ν. СотеапПасоЬ, А.О. Ы, К.Е. 1асоЬ, Т. 81т, 1. Ротеегк, С. П1егк8, Р. 8ип, О.-К. Оио, О. Ишд, В. Окгат, Υ. Сйок А. \Vо^с^ес1ю\Υ5кк X. Иеид, О. Ьш, О. Репбпсй, А. §1гаи88, Ν. Уа.)ра1, 8. Сг/емек, Т. Тип11апб, Υ. Ьш, В. Виг8и1ауа, М. А/ат, Ρ.ν. Мап1еу, 1.К. Епдеп, С.О. Иа1еу, М. Vа^ти1й., Ν.8. Огау. Тагде1шд ВСК-АВЬ Ьу сотЫтпд а11о81епс \γί11ι АТР-Ьшбшд-8Йе шШЬйоге. №йиге 2010/ 463:501-6). Для предотвращения возникновения лекарственной резистентности в результате использования АТР ингибитора и/или аллостерического ингибитора может быть разработано комбинированное лечение с использованием обоих типов ингибитора для лечения ВСК-АВШ-связанных расстройств. В частности, существует потребность в малых молекулах или их комбинациях, которые ингибируют активность ВСК-АВШ и ВСК-АВЬ1-мутации через АТР связывающий сайт, миристоилсвязывающий сайт или комбинацию обоих сайтов.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению в качестве ингибиторов АВЬ1 киназной активности имеют потенциал для использования в качестве терапевтических средств для лечения метастатических инвазивных карцином и вирусных инфекций, таких как покс-вирус и вирус Эбола.
Соединения по настоящему изобретению также обладают потенциалом для лечения или профилактики заболеваний или расстройств, ассоциированных с аномально активированной киназной активностью АВЬ1 дикого типа, включая незлокачественные заболевания или расстройства, такие как заболевания ЦНС, в частности нейродегенеративные заболевания (например, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона), заболевания двигательных нейронов (амиотрофический боковой склероз), мышечные дистрофии, аутоиммунные и воспалительные заболевания (диабет и фиброз легких), вирусные инфекции, прионовые заболевания.
- 1 024391
Краткое описание изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединения формулы (I)
где К! представляет собой пиразолил; где указанный пиразолил является незамещенным или замещен 1-2 группами К6;
К2 представляет собой пирролидинил; где указанный пирролидинил замещен одной группой К7;
К3 выбирают из водорода и галогена;
Кд выбирают из -ЗР5 и -У2-СР2-У3;
Кб в каждом случае независимо выбирают из водорода, гидрокси, метила, метокси, циано, трифторметила, гидроксиметила, галогена, амино, фторэтила, этила и циклопропила;
К7 выбирают из гидрокси, метила, галогена, метокси, гидроксиметила, амино, метиламино, аминометила, трифторметила, 2-гидроксипропан-2-ила, метилкарбониламино, диметиламино, 2-амино-3метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила, фосфоноокси, циано и аминокарбонила;
Υ выбирают из СН и Ν;
Υ1 выбирают из СН и Ν;
Υ2 выбирают из СР2, О и 3(О)0-2 и
Υ3 выбирают из водорода, хлора, фтора, метила, дифторметила и трифторметила.
Во втором аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, которая содержит соединение формулы (I) или его Ν-оксидное производное, индивидуальные изомеры и смесь изомеров, или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с одним или несколькими подходящими эксципиентами.
В третьем аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ лечения заболевания у животного, где модуляция ВСК-АВЫ активности может предотвращать, ингибировать или облегчать патологию и/или симптоматологию заболеваний, при этом способ включает введение животному терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) или его Ν-оксидного производного, индивидуальных изомеров и смеси изомеров или его фармацевтически приемлемой соли.
В четвертом аспекте настоящее изобретение обеспечивает применение соединения формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения заболевания у животного, в котором ВСК-АВЫ активность способствует патологии и/или симптоматологии заболевания.
В пятом аспекте настоящее изобретение обеспечивает соединение формулы (I) для применения в терапии для животного, в котором ВСК-АВЫ активность способствует патологии и/или симптоматологии заболевания.
В шестом аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ получения соединений формулы (I) и их Ν-оксидных производных, пролекарственных производных, защищенных производных, индивидуальных изомеров и смеси изомеров и их фармацевтически приемлемых солей.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 - порошковая рентгеновская дифрактограмма (с использованием медного источника (лямбда=1,54А) для измерения) для аморфной твердодисперсной композиции примера 9 (см. пример 41), с 25% нагрузкой соединения примера 9 с ΡΥΡ УА64 (37,5%) и Рйагшаеоа! 603 (37,5%).
Фиг. 2 - животные с подкожными КСЬ-22 ксенотрансплантатами, которые получали ежедневное лечение соединением примера 9. Продемонстрирована дозозависимая противоопухолевая активность.
Фиг. 3 - КСЬ-22 клетки выращивали в качестве подкожных ксенотрансплантатов, и четыре животных получали дозу 75 мг/кг Нилотиниба ВГО (два раза в день). Когда у опухолей развивалась резистентность к лечению Нилотинибом, дозировку изменяли до 30 мг/кг соединения примера 9 два раза в день. Лечение нилотинибрезистентных опухолей соединением примера 9 привело к регрессии опухолей. Каждая линия представляет отдельное животное.
Фиг. 4 - животным с подкожными КСЬ-22 ксенотрансплантатами вводили дозу в комбинации 30 мг/кг соединения примера 9 два раза в день и 75 мг/кг Нилотиниба два раза в день. Каждая линия представляет отдельное животное. Полную регрессию опухоли наблюдали у всех животных и поддерживали до конца исследования.
Определения.
Общие термины, используемые выше и ниже в настоящей заявке, предпочтительно имеют в контексте настоящего раскрытия следующие значения, если не указано иное, при этом более общие термины, где бы они ни использовались, независимо друг от друга, могут быть заменены более конкретными определениями или сохраняться, таким образом определяя более подробные варианты воплощения на- 2 024391 стоящего изобретения.
Алкил относится к разветвленным или неразветвленным углеводородным группам, содержащим от 1 до 7 атомов углерода (С^алкил) или от 1 до 4 атомов углерода (С^алкил). Репрезентативные примеры алкила включают, но не ограничиваются этим, метил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, вторбутил, изо-бутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил, неопентил, н-гексил, 3-метилгексил, 2,2диметилпентил, 2,3-диметилпентил, н-гептил, н-октил, н-нонил, н-децил и подобные. Замещенный алкил представляет собой алкильную группу, содержащую один или несколько, например один, два или три, заместителей, выбранных из галогена, гидрокси или алкоксигрупп. Г алогензамещенный алкил и галогензамещенный алкокси может быть либо линейным, либо разветвленным и включает метокси, этокси, дифторметил, трифторметил, пентафторэтил, дифторметокси, трифторметокси и подобные.
Арил означает моноциклическую или конденсированную бициклическую ароматическую кольцевую структуру, содержащую от шести до десяти кольцевых атомов углерода. Например, арил может представлять собой фенил или нафтил, предпочтительно фенил. Арилен означает двухвалентный радикал, образованный из арильной группы.
ВСК-АБЫ относится к гибридному белку, образованному из Ν-концевых экзонов гена, включающего область с кластером точечных разрывов (ВСК), и основной С-концевой части (экзоны 2-11) АЬе18Оп(АВЬ1) гена. Наиболее распространенные гибридные транскрипты кодируют 210-кДа белок (р210ВСК-АВЬ1), хотя более редкие транскрипты кодируют 190-кДа белок (р190ВСК-АВЬ1) и 230-кДа белок (р230ВСК-АВЬ1). АВЬ1 последовательности этих белков содержат АВЬ1 тирозинкиназный домен, который является жестко регулируемым в белке дикого типа, но конститутивно активированным в ВСКАВЬ1 гибридных белках. Эта тирозинкиназа с нарушенной регуляцией взаимодействует с несколькими клеточными сигнальными путями, приводя к трансформации и нарушенной регуляции пролиферации клеток.
ВСК-АВЫ мутанты относятся к многочисленным моносайтовым мутациям в ВСК-АВЫ, включающим С1и255>лизин, С1и255>валин, Тйг315>изолейцин, Ме1244>Уа1, Рйе317>Ьеи, Ьеи24 8>Уа1, Ме1343- >Т1и. С1у250>А1а, Ме1351- >Т1и. С1у250->С.1и. С1и355- >С.1\. С1п252->Ηΐδ, Рйе358>А1а,
С1п252>Агд, Р1е359—Уа1, Туг253— Ηΐδ, Уа1379>11е, Туг253—Р1е, Р1е382—Ьеи, С1и255>Ьу5,
Ьеи387—М — е1, С1и255>Уа1, Н1§396-Рго, Р1е311-11е, Ηί5396>Агд, Рйе311>Ьеи, 8ег417>Туг, Тйг315>11е, С1и459—Ьу5 и Р1е486 >8ег.
Соединения по настоящему изобретению являются чувствительными к замещению на К3/К4 замещенном кольце в положении, которое представляет собой орто относительно точки присоединения ΝΗί'.’(ϋ) группы. Для сравнения предоставлены, например, следующие соединения формулы (I). Значение ИК50 примера 2 составляет 1 нМ в сравнении с хлор- или метилзамещением, где значение ИК50 составляет 1,6 и 1,8 мкМ соответственно:
- 3 024391
Приме 0.00 ί
р2
нм-Ч
р Ν η 1.6
н и N
Р Υ ΥΥ ? нм-м
] .ίί
н ί д
Гетероарил имеет значение, определенное для арила выше, где один или несколько из кольцевых членов представляет собой гетероатом. Например, 5-8-членный гетероарил содержит минимум 5 членов кольца, выбранных из углерода, азота, кислорода и серы. Следовательно, 5-8-членный гетероарил включает пиридил, индолил, индазолил, хиноксалинил, хинолинил, бензофуранил, бензопиранил, бензотиопиранил, бензо[1,3]диоксол, имидазолил, бензоимидазолил, пиримидинил, фуранил, оксазолил, изоксазолил, триазолил, тетразолил, пиразолил, тиенил и т.д.
Циклоалкил означает насыщенную, моноциклическую, бициклическую или связанную мостиковой связью полициклическую кольцевую структуру, содержащую указанное количество кольцевых атомов. Например, С3-10циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.д. Частично ненасыщенный циклоалкил означает циклоалкил, как определено выше, по меньшей мере с одной двойной связью.
Гетероциклоалкил означает циклоалкил, как он определен в настоящей заявке, при условии, что один или несколько из указанных кольцевых атомов углерода замещены группой, выбранной из -Ο-, -Ν=, -ΝΚ-, -С (О)-, -8-, -8(0)- или -8(0)2-, где К представляет собой водород, С1-4алкил или азот-защитную группу (например, карбобензилокси, пара-метоксибензилкарбонил, трет-бутилоксикарбонил, ацетил, бензоил, бензил, пара-метокси-бензил, пара-метокси-фенил, 3,4-диметоксибензил и подобные). Например, 3-8-членный гетероциклоалкил включает морфолино, пирролидинил, пирролидинил-2-он, пиперазинил, пиперидинил, пиперидинилон, 1,4-диокса-8-аза-спиро[4,5]дец-8-ил, тиоморфолино, сульфаноморфолино, сульфономорфолино и т.д.
Галоген (или гало) предпочтительно представляет собой хлор или фтор, но также может быть бромом или йодом.
ОЬЕЕУЕС® (иматиниб мезилаты) показан для лечения пациентов с ΚΙΤ (СЭ117)-положительными неоперабельными и/или метастатическими злокачественными гастроинтестинальными стромальными опухолями (ΟΙ8Τ). Он также показан для лечения взрослых пациентов после полной макроскопической резекции ΚΙΤ (СЭ117)-положительных 0Ι8Τ. Он также показан для лечения впервые диагносцированных взрослых пациентов и пациентов детского возраста с филадельфийская хромосома-положительным хроническим миелоцитарным лейкозом с (Ρ1ι+ СМЬ) в хронической фазе и пациентов с Ρ1ι+ СМЬ в бластном кризе (ВС), фазе акселерации (АР) или в хронической фазе (СР) после неудачи применения интерферональфа терапии. Он может также быть использован в качестве прицельно действующего лекарственного средства для лечения следующих редких заболеваний с ограниченными возможностями лечения: рецидивного или резистентного филадельфийская хромосома-положительного острого лимфобластного лейкоза (Ρ1ι+ ЛЬЕ); миелодиспластических/миелопролиферативных заболеваний (ΜΌ8/ΜΡΌ), связанных с перегруппировкой генов рецепторов тромбоцитарного фактора роста (ΡΌΟΡΚ); агрессивного системного мастоцитоза (А8М) без Ό816ν с-ΚΙΤ мутации или с неизвестным мутационным статусом с-ΚΙΤ; гиперэозинофильного синдрома/хронического эозинофильного лейкоза (НЕ8/СЕЬ) с ΡΙΡ1Ε1-ΡΌΟΡΚα гибридной киназой (мутационный анализ или ΡΙ8Η демонстрация делеции СШС2 аллеля) и для пациентов с НЕ8 и/или СЕЬ, которые являются ΡΙΡ1Ε1-ΡΌΟΡΚα гибридная киназа-отрицательными или это неизвестно; и неоперабельных, рецидивирующих и/или метастатических выбухающих дерматофибросарком (ΌΡ8Ρ).
ΤΑ8Ι0ΝΑ® (нилотиниб) показан для лечения взрослых пациентов с впервые диагностированным филадельфийская хромосома-положительным хроническим миелоцитарным лейкозом (Ρΐι+СМЕ) в хронической фазе. Он может быть использован для лечения взрослых пациентов, которые больше не полу- 4 024391 чают положительного результата или не переносят другие терапии, включая иматиниб (ОЬЕЕУЕС®), или получали другие терапии, включая иматиниб (ОЬЕЕУЕС), но не могут переносить их.
8РКУСЕЬ® (дазатиниб) представляет собой рецептурное лекарственное средство для лечения взрослых пациентов с впервые диагностированным филадельфийская хромосома-положительным (Рй+) хроническим миелоцитарным лейкозом (СМЬ) в хронической фазе и для лечения взрослых пациентов, которые больше не получают положительного результата или не переносят другие терапии, а также для пациентов с ЛЬЕ.
ВО8иЫР® (босутиниб) представляет собой рецептурное лекарственное средство для лечения взрослых пациентов с впервые диагностированным филадельфийская хромосома-положительным (Рй+) хроническим миелоцитарным лейкозом (СМЬ) в хронической фазе и для лечения взрослых пациентов, которые больше не получают положительного результата или не переносят другие терапии, а также для пациентов с ЛЬЕ.
Соединения формулы (I) могут иметь различные изомерные формы. Например, любой асимметричный атом углерода может присутствовать в (К)-, (8)- или (К,8)-конфигурации, предпочтительно в (К)или (8)-конфигурации. Заместители на двойной связи или особенно на кольце могут присутствовать в цис-ί-Ζ-) или транс-(=Е-) форме. Соединения, таким образом, могут присутствовать в виде смесей изомеров или предпочтительно в виде чистых изомеров, предпочтительно в виде чистых диастереомеров или чистых энантиомеров. Следующие соединения формулы (I) могут существовать в таутомерной форме
Для иллюстрации таутомерии со следующими конкретными примерами (Κ)-Ν-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид (правая структура, ниже) представляет собой таутомер (К)-Л-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-3-ил)никотинамида (левая структура, ниже), и наоборот:
Когда используется форма множественного числа (например, соединения, соли), она включает и единственное число (например, одно соединение, одна соль). Соединение не исключает, что присутствует (например, в фармацевтической композиции) более чем одно соединение формулы (I) (или его соль), артикль а просто представляет неопределенный артикль. А, таким образом, предпочтительно следует понимать как один или несколько, менее предпочтительно, альтернативно, как один.
Термин и/или его Ν-оксид, его таутомер и/или его (предпочтительно фармацевтически приемлемая) соль, главным образом, означает, что соединение формулы (I) может присутствовать как таковое или в смеси с его Ν-оксидом, в виде таутомера (например, в результате кето-енольной, лактамлактимной, амид-имидокислотной или енамин-иминовой таутомерии), или в виде (например, вызванной эквивалентной реакцией) смеси с его таутомером, или в виде соли соединения формулы (I) и/или любой из этих форм или смесей двух или более таких форм.
Любые формулы, представленные в настоящей заявке, предназначены также для представления немеченых форм, а также изотопно меченых форм соединений. Изотопно меченые соединения имеют структуры, отображенные формулами, приведенными в настоящей заявке, за исключением того, что один или несколько атомов заменены атомом, имеющим выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по настоящему изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как 2Н, 3Н, С. 13С, 14С, 15Ν,
18р 31р 32р 358 36С1, 123Т 124ф Ι2'Ί соответственно. Изобретение включает различные изотопно меченные соединения, как определено в настоящей заявке, например, те, в которых радиоактивные изотопы, такие как 3Н и 14С, или те, в которых нерадиоактивные изотопы, такие как 2Н и 13С присутствуют. Такие изотопномеченые соединения полезны в метаболических исследованиях (с 14С), в исследованиях кинетики реакций (с, например, 2Н или 3Н), методах детекции или визуализации, таких как позитронно- 5 024391 эмиссионная томография (РЕТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (БРЕСТ), включая анализы распределения лекарственных средств или тканей субстрата или в радиоактивной терапии пациентов. В частности, 18Р или меченое соединение могут быть особенно желательными для РЕТ или БРЕСТ исследований. Изотопно меченые соединения по настоящему изобретению, как правило, могут быть получены обычными способами, известными специалистам в данной области техники, или способами, аналогичными тем, которые описаны в прилагаемых Примерах, с использованием подходящих изотопно меченых реагентов.
Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, особенно дейтерием (т.е. 2Н или Ό), может давать определенные терапевтические преимущества в результате более высокой метаболической стабильности, например больший период полужизни ίη νίνο или снижение уровня необходимых доз или улучшение терапевтического индекса. Понятно, что дейтерий в этом контексте рассматривается в качестве заместителя соединения по настоящему изобретению. Концентрация такого тяжелого изотопа, особенно дейтерия, может быть определена при помощи изотопного коэффициента обогащения. Термин изотопный коэффициент обогащения, используемый в настоящей заявке, означает соотношение между распространенностью изотопа и природной распространенностью конкретного изотопа. Если заместитель в соединении по данному изобретению обозначен как дейтерий, такое соединение имеет изотопный коэффициент обогащения для каждого указанного атома дейтерия по меньшей мере 3500 (52,5% включения дейтерия в каждом определенном атоме дейтерия), по меньшей мере 4000 (60% включения дейтерия), по меньшей мере 4500 (67,5% включения дейтерия), по меньшей мере 5000 (75% включения дейтерия), по меньшей мере 5500 (82,5% включения дейтерия), по меньшей мере 6000 (90% включения дейтерия), по меньшей мере 6333,3 (95% включения дейтерия), по меньшей мере 6466,7 (97% включения дейтерия), по меньшей мере 6600 (99% включения дейтерия) или по меньшей мере 6633,3 (99,5% включения дейтерия).
Например, соединение формулы (1Ь), представленное в настоящей заявке, где К3 представляет собой водород и Υ представляет собой СН, может включать дейтерий на пирролидинильном кольце, как показано:
Эта дейтерированная форма менее склонна к метаболической трансформации (слева выше) по сравнению с недейтерированной формой (справа выше).
Описание предпочтительных вариантов воплощения Настоящее изобретение относится к соединениям, способным к ингибированию активности ВСКЛВЬ1 или мутантов ВСК-ЛВЫ через аллостерический миристоилсвязывающий сайт.
В одном варианте воплощения, относящемся к соединениям по настоящему изобретению, пред-
где К3 выбирают из водорода и галогена; К4 выбирают из -БР5 и -Υ2^Ρ2-Υ3; Кб, когда связан с азотом пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила, гидроксиэтила, фторэтила, этила и циклопропила и К6, когда связан с атомом углерода пиразолильного кольца, выбирают из водорода, гидрокси, метила, метокси, циано, трифторметила, гидроксиметила, галогена, амино, фторэтила, этила и циклопропила; К7 выбирают из гидрокси, метила, галогена, метокси, гидроксиметила, амино, метиламино, аминометила, трифторметила, 2-гидроксипропан-2-ила, метилкарбониламино, диметиламино, 2-амино-3метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила, фосфоноокси, циано и аминокарбонила; Υ1 выбирают из СН и Ν; Υ2 выбирают из СР2, О и Б(О)0-2; Υ3 выбирают из водорода, фтора, хлора, метила, дифторметила и трифторметила; или их фармацевтически приемлемые соли.
- 6 024391
В следующем варианте воплощения представлены соединения формулы (1с)
где К3 выбирают из водорода и галогена; выбирают из -8Р5 и -Υ2-ί.Έ2-Υ3; Кб, когда связан с азотом пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила, гидроксиэтила, фторэтила, этила и циклопропила и К6, когда связан с атомом углерода пиразолильного кольца, выбирают из водорода, гидрокси, метила, метокси, циано, трифторметила, гидроксиметила, галогена, амино, фторэтила, этила и циклопропила; К7 выбирают из гидрокси, метила, галогена, метокси, гидроксиметила, амино, метиламино, аминометила, трифторметила, 2-гидроксипропан-2-ила, метилкарбониламино, диметиламино, 2-амино-3метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила, фосфоноокси, циано и аминокарбонила; Υι выбирают из СН и Ν; Υ2 выбирают из СР2, О и δ(Ο)0-2; Υ3 выбирают из водорода, фтора, хлора, метила, дифторметила и трифторметила; или их фармацевтически приемлемые соли.
В другом варианте воплощения представлены соединения формулы (I) или их фармацевтически приемлемые соли, где Κι представляет собой пиразолил; где указанный пиразолил является незамещенным или замещен от 1 до 2 групп К6.
В следующем варианте воплощения К1 представляет собой незамещенный пиразолил.
В следующем варианте воплощения К1 представляет собой пиразолил, замещенный одной группой Кб.
В следующем варианте воплощения К1 представляет собой пиразолил, замещенный двумя группами К6.
В другом варианте воплощения К2 представляет собой пирролидин-1-ил, замещенный одной группой К7.
В другом варианте воплощения Υ выбирают из СН и Ν.
В следующем варианте воплощения Υ представляет собой Ν.
В следующем варианте воплощения Υ представляет собой СН.
В другом варианте воплощения Υ1 выбирают из СН и Ν.
В следующем варианте воплощения Υ1 представляет собой Ν.
В следующем варианте воплощения Υ1 представляет собой СН.
Следующие дополнительные варианты относятся к соединениям любой одной из формул (I), (1Ь) или (1с) или их фармацевтически приемлемым солям.
В другом варианте воплощения К3 выбирают из водорода и галогена.
В другом варианте воплощения Кд выбирают из -§Р5 и -Υ2-ΗΡ2-Υ3.
В следующем варианте воплощения Кд представляет собой хлордифторметокси.
В следующем варианте воплощения Кд представляет собой трифторметокси.
В другом варианте воплощения К6 в каждом случае независимо выбирают из водорода, гидрокси, метила, метокси, циано, трифторметила, гидроксиметила, галогена, амино, фторэтила, этила и циклопропила.
В следующем варианте воплощения К6, когда связан с азотом пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила, гидроксиэтила, фторэтила, этила и циклопропила.
В следующем варианте воплощения К6, когда связан с атомом углерода пиразолильного кольца, выбирают из водорода, гидрокси, метила, метокси, циано, трифторметила, гидроксиметила, галогена, амино, фторэтила, этила и циклопропила.
В другом варианте воплощения К7 выбирают из гидрокси, метила, галогена, метокси, гидроксиметила, амино, метиламино, амино-метила, трифторметила, 2-гидроксипропан-2-ила, метилкарбониламино, диметиламино, 2-амино-3-метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила, фосфоноокси, циано и аминокарбонила.
В другом варианте воплощения Υ2 выбирают из СР2, О и δ(Ο)0-2.
В следующем варианте воплощения Υ2 представляет собой О.
В следующем варианте воплощения Υ2 представляет собой СР2.
В следующем варианте воплощения Υ2 представляет собой δ(Ο)0-2.
В другом варианте воплощения Υ3 выбирают из водорода, хлора, фтора, метила, дифторметила и трифторметила.
В следующем варианте воплощения Υ3 представляет собой хлор.
В следующем варианте воплощения Υ3 представляет собой фтор.
В следующем варианте воплощения представлены соединения или их фармацевтически приемлемые соли, выбранные из
- 7 024391
>ЛП й нП
Г Р А. А л А Υ Г^й
^О-,0н
Ά0- X 9 “'/'А О «Ν-1
Р Р 'ΆτΥΥΊί
н Υο..οη
В другом варианте воплощения представлены соединения или их фармацевтически приемлемые соли, выбранные из
Рр р г ч 0 |Г> ζΙ λ Л и (ί 1 н ν Р/ мнг ΥΌ.Λ Η ΗΝ-Ν Ορ Ν Ο °Η
Р Р Ρ Р ίΎ о /гр 1 1 ιί Ον Υ°ΌΑ Η нмД
Η 1 I Η Ν θ-ΟΒ Ν Οχ
РГ ° |рм α·χαΆ ° ην-Ν
Р Р Μ Ιί Η Α
ν Тра, ^Ό,-ΟΗ
ΡΡ Ρ Ρ ΟΛ Η Ρν _ £ Η Α/\η V5- 4 ίΡί Μχ Н 0 ΗΝ-Ν λΟρ Ν Ν^.ζΟΗ
Ρ0' Υϊι 0 ΗΝ-Ν Υ8ί Λ 1 Ρ<
ρ ЧЛА ίί Ά γΥΊί
Ο}-** 4ΛνΡ _ Υ/^ΟΗ
ρ5χ Ύι ί ΗΝ-Ν 'υΧ Π ϊ Ρν
ρ Γ- 4Λ„Λ ρ с ρ+ν-
μ Ό 0Η ΧΡνΛ Χ-/^ΟΗ
·;Κ η || Ρν ΆΆ' I η Ρα, ь 0 ΗΝ-Ν υΡ
ΥΆ·,θΗ Ο0Η
Α» αΡ Ά Ε Ρ»
XI1 ην-ν Μγ ιΡγη
Η ύρ -ΆΆή ν Ά οη
V- Ρ Ρ Υι 0 ΑΑ Ρν ρΆ Υ ίΧ^’ι ρρ Α >ΡΗ ΡΟγΝ
~Ν Α^0Η χυά
ρ ϊ,ζ 1 Λ ΗΝ-\ ν>·^ ? С1 Ίζ Χ,Λ ΗΝ-Κ
К 1 Ν Ατ Η
- 8 024391
_ СЕ τ°Υ*Ί) ° ΗΝΛ ' У ОУуГ С1 Е-',.ц НН-Ν Ν V \'А ,ОН О''Р'ОН
н Т I н .ю ОН 'р-ОН 0'
В другом варианте воплощения представлены соединения или их фармацевтически приемлемые соли, выбранные из
“Ε'ΎΧ О ζ-оч Ϊ°ΤΊ ? τν
„он н %Лм-\ Ν * -ОК
ει'Κ°ΎΧ ° Έ. ОО хОв От
Ε-Έ0ι %Έ0 -он
ОО хОв {РТн 'ήχ
X 4% -он
Ν^·Ν0,ιοΗ
г Υχ> ®Άν0·οη С1 ХЛ'кн ΗΝ-Ν р. г Ν ΐ Χ-.ΙΟΗ
Ο,,α^Β ρΥ°ΥΧ| θ γ=ν· Ρ ЦХ Λ Λ Χ/Ν~ Η^ι
ν 0-ОН %Χ0-οη
ΟΌ В Оз ОТТ и >70. гОв ^ΧΕτϊ
°н ν г0-он
В другом варианте воплощения представлено соединение или его фармацевтически приемлемая соль, которое представляет собой
В другом варианте воплощения представлены соединения, выбранные из
- 9 024391
Жц н ! , о ХХ 'Άΐφ.,ΟΗ
О - Ат? тоАуу,
« Υ**
Фармакология и полезность.
На основании исследований ингибирования, описанных в разделе Анализ ниже, соединение формулы (I) в соответствии с настоящим изобретением демонстрирует терапевтическую эффективность, особенно против расстройств, зависимых от ВСК-АВЫ активности. В частности, соединения по настоящему изобретению ингибируют аллостерический или миристоилсвязывающий сайт ВСК-АБЫ (включая ВСК-АБЫ дикого типа и/или его мутации).
Объединение АТР-конкурентного ингибитора ВСК-АВЫ с аллостерическим ингибитором ВСКАБЫ замедляет приобретенную резистентность в ВСК-АВЫ+КСЬ-22 клетках ίη νίίτο. К удивлению, ВСК-АВЫ+КСЬ-22 клетки, которые обрабатывали через каждые 3-4 дня соединением по настоящему изобретению, показали приобретенную резистентность после приблизительно 28 дней, тогда как те же самые клетки, которые обрабатывали через каждые 3-4 дня нилотинибом или дасатинибом, показали приобретенную резистентность уже через 18-21 день. Еще более удивительно, когда ВСК-АВЫ+КСЕ-22 клетки обрабатывали через каждые 3-4 дня комбинацией соединения по настоящему изобретению с либо нилотинибом, либо дасатинибом, не наблюдали никакую приобретенную резистентность, по меньшей мере, в течение первых 60 дней. Поэтому соединения по настоящему изобретению, связывающиеся с миристоилсвязывающим сайтом, в комбинаци с ингибиторами ВСК-АВЫ, которые связываются с сайтом связывания АТР, имеют особенно важное значение для лечения пролиферативных заболеваний, в которых имеет место положительная регуляция АВЬ1 киназной активности, как в случае с ВСК-АВЫ гибридными белками в СМЬ и подвидах других гематологических злокачественных заболеваний, таких как АЕЬ и АМЬ.
Клетки карциномы используют ίηναροάία для разрушения внеклеточного матрикса в процессе инвазии и метастазирования опухоли. АВЬ киназная активность необходима для 8КС-индуцированного образования ίηναροάία. регуляции отдельных стадий сборки и функции ίηναροάία. Поэтому соединения по настоящему изобретению, в качестве ингибиторов АВЬ, имеют потенциал для использования в качестве терапевтических средств для лечения метастатических инвазивных карцином.
Аллостерический ингибитор АВЬ1 киназы можно использовать для лечения рака головного мозга: включая глиобластому, которая является наиболее распространенной и наиболее агрессивной злокачественной первичной опухолью головного мозга, в которой экспрессия АВЬ1 иммуногистохимически определяется в субпопуляции пациентов (НаЬет1ет С., Ое1р1 Е., Маго81 С., ΡοδδΙοΓ К., Випег Р., Вибка Н., Наш£е11пет кА. IттиηοН^8!οсНет^са1 апа1у818 οΓ р1а!е1е!-бегщеб дго\\1Н ГасЮг гесерФт-афНа, Ье1а, с-К1Т, АВЬ1 и АВЬ2 рго1е1п8 ίη д1юЫа8Юта: рο88^Ь1е 1трНса!юп8 Γοτ рабеп! 8е1ес1юп Гэг 1та!ш1Ь ше8у1а1е Легару. 1. №иτοοη^1. 2006 1ап; 76 (2):105-9). Однако клинические испытания с использованием Ο1ееνес® не были успешными у пациентов с глиобластомой (Кеагбцп Э.А., Эгезетапп О., ТаППЬеП 8., Сатрοηе М., νаη беп Веп! М., С1етеп1 Р., В^тцшз! Е., Οογ6ο\\^ Ь., 8с1ш11/ Н., Ра1/ег 1., Наи Р., Еаза\у 1., Οίΐ М., Τοππ 1., ΟίрепЬеек А., 8сН1еде1 и., Вегд81гот Р., Огееп 8., \УеН А., Νί1<ο1ο\τι Ζ. МиШсейте рйазе II 81иб1е8 еνа1иаί^ηд 1та11шЬ р1и8 Нубгохуигеа ш раИеп18 \νί11ι р^οд^е88^νе д1^οЬ1а8!οта. Вг 1. Сапсег. 2009 Эес 15; 101 (12):19952004; Ра/18 Е., 8еМапб18 Р., ^аЬ^οрοи1ο8 8., Νοητ8 ЕЬ., Ζΐιιι М.к, 8οι^ Ό.Ό., Ка1еЫс Т., ΤοπΌΐ'ΐ8 М., Ка1οдега-Ροиηΐζ^1а А., Кагка\'е1а8 О., Кагапа81а81 8., Р1е!сНег кА., ΕονιπίζίΕ^ О. РНа8е II 8!ибу οΓ ηеοаб^иνаη! 1табп1Ь ш д1^οЬ1а8!οта: еνа1иаί^οη οΓ сНтса1 апб ιηοΕαιΕίΓ еГГес!8 οΓ !Не 1геа1теп1. С1ш Сапсег Ке8. 2009 Ос! 1; 15(19):6258-66; Эге8етапп О. !таПп1Ь апб Нубгохуигеа ш рге1геа1еб ргодге88Й'е д1^οЬ1а8ΐοта тиШΓοπι^: а раНеп! 8епе8. Апп Опток 2005 Ос!; 16(10): 1702-8), возможно по причине плохого внутриопухолевого воздействия лекарственного средства в головном мозге и в отсутствие нарушенного гематоэнцефалического барьера ^οΦΗοΓΓ е! а1., 1. №ιιγοοικο1. 2010; 97(2):241-5). Действительно, в предклинических исследованиях было показано, что транспорт Ο1ееνес® через гемато-энцефалический барьер ограничивается активным транспортом вытекающих веществ, таких как Р-гликопротеин. Это также относится и к дазатинибу (СНеп Υ., Адаг\уа1 8., 8На1к Ν/М., СНеп С., Уапд Ζ., Е1тци181 ^.Ρ. Р-д^тортой^ апб Ьгеа8! сапсег ге8181апсе рго!ет шЯиепсе Ьгат б181пЬтюп οΓ ба8а1ниЬ. 1. РНагтаток Ехр ТНег. 2009 8ер; 330 (3): 956-63). Известно, что облучение усиливает открытие гемато-энцефалического барьера. В мышиных моделях, ответ мультиформной глиобластомы на Ο1ееνес® соотносился с увеличением задержки опухолевого роста и повышением выживания, когда Ο1ееνес® вводили в сочетании с ежедневным облучением
- 10 024391 (Сепд Ь., 81йпоНага Е.Т., Кт Ό., Тап 1., Окикку К., 81уг Υ., На11а1ап ΌΕ. 8Т1571 (О1ееуес) ипргоуек Штог дго\\Й1 йе1ау апй кшутуа1 ш КгаШаЮй тоике тойе1к οί дПоЫайота. ΙπΙ I. Рай1а1 Опсо1 Βίο1 Рйук. 2006 Ет 1; 64(1):263-71). Поэтому новый ингибитор ЛВЬ1 с высокой экспозицией в головном мозге представляет собой серьезный терапевтический подход для лечения глиобластомы и других опухолей головного мозга.
ЦНС-СМЬ: сообщалось о ЦНС бласткризисе и неблагоприятном исходе у некоторых СМЬ пациентов, которых лечили препаратом С1ееуес®, и это можно объяснить низкой экспозицией С1ееуес® в головном мозге. (К1т Н.Е, йтд ('.V., Ктт К., Апп Е8., К1т ν.8., Рагк К., Ко Υ.Η., Капд \У.К.. Рагк К. 1ко1а1ей Ыай сййк ш СЫ8 ш а райеп! \νί11ι сйтотс туе1одепоик 1еикепиа тапИаттд та.)ог суЮдепеОс гекропке айег 1тайтЪ. ί. С1ш. Опсо1. 2006 Аид 20; 24(24): 4028-9; КайШка Ν., МшаккЫ М., Ки)екЬ М., Мапак В.К., Эеерак Китаг М. Сеп1га1 пегуоик кук1ет Ыай сййк ш сйтотс туе1оШ 1еикепиа оп 1тайтЪ теку1а1е Легару: герой оГ ΐνο сакек. 1пй1ап I. Нета1о1. В1оой ТгапкГик. 2011 Маг; 27(1):51-4). Действительно, у СМЬ пациентов концентрация С1ееуес® на самом деле намного ниже (в ~100 раз) в ЦНС, чем в плазме (Ьек ЕР., 81ерап Ό.Ε., Ситйп Р.Т., Рогй ЕМ., Репд В., 8сйиЪасй 8., Эгикег В.Е, Ма/1аг/ К.Т. Сепйа1 пегуоик куйет Гайите ш райеШк \\йк сйтотс туе1одепоик 1еикет1а 1утрйо1й Ыай сййк апй Р1и1айе1р1йа сйтотокоте роййуе асШе 1утрйоЪ1акйс 1еикет1а 1геа1ей \νί11ι 1тайтЪ (8Т1-571). Ьеик Ьутрйота. 2004 Арг; 45(4):695-8). Поэтому ингибиторы АВЬ1 по настоящему изобретению, которые демонстрируют высокую экспозицию в головном мозге, представляют собой эффективный подход для разработки терапевтических средств против СМЬ, включая ЦНС-СМЬ.
Соединения по настоящему изобретению могут быть полезными в лечении вирусных инфекций. Например, вирусные инфекции могут быть опосредованы АВЬ1 киназной активностью, как в случае покс-вирусов и вируса Эбола. Было показано, что С1ееуес® и Тайдпа® останавливают высвобождение частиц вируса Эбола из инфицированных клеток, ш νίΐτο (Ка1тап, Эап1е1; Вогптапп, V^11^ат Сегагй, Мейюйк оГ ике оГ поп-АТР сотреййуе 1утокше Шпаке ЫЫЬПогк ΐο 1геа1 раЛодетс ЫГесЦоп, РСТ 1п1. Арр1. 2007, νθ 2007002441; Сатаа Мауга; Соорег Апк; 8Ы Vе^; Вогптапп V^11^ат; Сатоп Кюагйо; Ка1тап Эаше1; №Ъе1 Сагу I. Ргойисйуе Керйсайоп оГ ЕЪо1а Уник 1к Кеди1а1ей Ъу Ле АВЬ1 Тутойпе Шпаке. 8аепсе 1гапк1айопа1 тейюше 2012; 4:123га24). Поэтому можно ожидать, что соединения по настоящему изобретению, которые ингибируют АВЬ1 киназу, будут снижать способность патогена к репликации.
Соединения по настоящему изобретению также могут быть полезными в лечении нервной дегенерации. Хотя нативная АВЬ1 тирозиновая киназа остается в относительном состоянии покоя в головном мозге здорового взрослого человека, она может активироваться в головном мозге пациентов с ЦНС заболеваниями, включая нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера (АО), болезнь Паркинсона (АО), фронтотемпоральная деменция (РТЭ), болезнь Пика, болезнь Ниманна-Пика С типа (№С) и другие дегенеративные, воспалительные и аутоиммунные заболевания и старение.
Болезнь Паркинсона является вторым наиболее распространенным хроническим нейродегенеративным заболеванием, при этом наиболее распространенная наследственная аутосомально-рецессивная форма вызвана мутациями в Е3 убихитинлигазе, раткш. Последние исследования показали, что активированный АВЫ/АВЕ2 был обнаружен в полосатом теле у пациентов с спорадической болезнью Паркинсона. Одновременно с этим, раткш был тирозин-фосфорилированным, вызывая потерю его убихитинлигазы и цитозащитных действий, на что указывала аккумуляция раткш субстратов (Ко Н.8., Ьее Υ., 8йЛ ЕН., Катиррадоипйег 8.8., Сайай В.8., Ко1екке А.Е, Р1еίп^кονа О., Тгопсоко ЕС., Эа\укоп У.Ь., Эа\укоп Т.М. Рйокрйоту1айоп Ъу Не с-АЪ1 ргоЮт 1утокше Шпаке 1пШЪйк ратШп'к иЫцшйпайоп апй ргоЮсЦуе Гипсйоп. Ргос Νηΐ1 Асай 8а И8А. 2010 8ер 21; 107(38):16691-6; 1тат 8.Ζ., ΖΙιοιι Ц., Υататοΐο А., Уа1еп1е А.Е, Ай 8.Р., Ватк М., КоЪейк ЕЬ., Кай1е Р.Е, С1агк К.А., Ы 8. Nονе1 геди1айоп оГ рагШп Гипсйоп Лтоидй с-АЪ1теЫаЮй 1утокше рйокрйогу1айоп: ипрПсайопк Гог РагШпкоп'к Лкеаке. ί. №итоксЕ 2011 Ет 5; 31(1):157-63). Эти два исследования также показали, что в клетке или животных моделях болезни Паркинсона фармакологическое ингибирование АВЬ1 киназы или генетический АВЬ1 нокдаун препятствовали фосфорилированию тирозина белка рагШп и восстанавливали активность его Е3 лигазы и цитозащитную функцию как ш νίίτο, так и ш νίνο. Эти результаты показывают, что АВЫ-зависимое фосфорилирование тирозина белка раткш представляет собой основную посттрансляционную модификацию, которая приводит к потере функции раткш и прогрессированию заболевания в спорадической РЭ. Поэтому способность соединений по настоящему изобретению ингибировать миристатсвязывающий сайт АВЬ1, как можно ожидать, откроет новые терапевтические возможности для блокирования развития болезни Паркинсона.
Болезнь Альцгеймера характеризуется двумя основными особенностями: внеклеточные отложения нейротоксичного амилоида-β, что приводит к развитию амилоидных бляшек и внутриклеточной аккумуляции гиперфосфорилированного 1ап, что способствует развитию нейрофибриллярных сплетений (ΝΕΈ).
Уровень амилоида-β снижается после интратекального введения С1ееνес® в головном мозге морских свинок дикого типа и в клеточных моделях (№1/ег \ν.Ε, Эоп Р., Са1 Ό., Уеасй Ό., 1еап 8., Ы Υ., Вогптапп ν.Η, С1агккоп В., Хи Н., Сгеепдагй Р. С1ееνес 1пШЪйк Ье1а-ату1о1й ргойисйоп Ьп1 по! ΝοίΗι с1еауаде. Ргос №Ы Асай 8а И8А. 2003 Ос! 14; 100 (21): 12444-9). Этой же группой было сделано предположение, что С1ееνес® достигает амилоид-β-снижающего эффекта через новый механизм, препятствующий С8АР взаимодействию с гамма-секретазным субстратом, АРР-СТР (Не С., Ьио V., Ы Р., КетШетк
- 11 024391
С., №1/сг ν.Ι., Нспбпск 1., ВсПаусЬ К., Р1а)о1е1 М., СогсПск Р., \Усппод1с Ь.Р., Огсспдагб Р. Оатта8ссгс1а8с асОуаРпд ртоЮш 18 а (НсгарсиОс 1агдс1 Юг Л1/кс1тсг'8 б18са8с. Ыа1игс. 2010 8ср 2; 467(7311):95-8). В этом исследовании эффект О1ссусс®, такой как ингибирование О8АР/АРР-СТР, наблюдали только при микромолярных концентрациях. Другая группа показала, что фосфорилирование тирозина внутриклеточного домена АРР (т.е. Туг682) регулирует процессинг амилоидогенного АРР, ускоряя образование амилоида-Р ίη νίνο (ВагЬада11о А.Р., \Ус1боп К., Татаусу К., ΖΙιοιι Ό., СШЬсПо Ь., Рогстап О., О'Абапио Ь. Туг(682) ίη Юс 1п1гасс11и1ат ботат оГ АРР гсди1а1с8 атуЫбодстс АРР ргосс88шд ш νί\Ό. РЬо8 Опс. 2010 Νσν 16; 5 (11):с15503). Другие исследования показали, что АРР является тирозин-фосфорилированным в клетках, экспрессирующих конститутивно активную форму АВЬ1 онкогена ^атЬтапо Ν., Втиш Р., МшороЬ О., Мо8са К., МоЬпо Ό., Ки88о С., ЗсНсШт О., 8ибо1 М., Ки88о Т. ТНс Ьс1а-ату1о1б ргссшъот ргоЮт АРР ΐδ 1уго81пс-рЬо8рЬоту1а1сб ш сс118 схргс88шд а соп8111и11ус1у асрус Гогт оГ Юс АЬ1 ргоЮпсодспс. ί. Вю1. СНст. 2001 Лт 8; 276(23):19787-92). Эти данные, взятые вместе, предполагают АВЫ-зависимый процессинг амилоидогенного АРР для образования токсичного амилоид-β пептида и последующих амилоидных бляшек. Поэтому можно ожидать, что ингибитор АВЬ1 будет снижать образование амилоидных бляшек у пациентов с болезнью Альцгеймера.
Было показано, что Таи фосфорилируется АВЬ1 киназой по тирозинам 18, 197, 310 и 394 в клеточных моделях, и было показано, что 1аи рУ394 присутствует в поражениях ΝΡΓ в головном мозге АО пациентов.
АВЬ1 активирован в головном мозге пациентов с спорадической болезнью Альцгеймера, как показано по его фосфорилированию либо по Υ412, индикатору активации, который ко-локализует грануловаскулярную дегенерацию, либо по Т735, который ко-локализован с типичными поражениями, амилоидными бляшками, нейрофибриллярными сплетениями (№Т), в дополнение к ОАО. Амилоид-β и окислительный стресс активируют АВЬ1 киназу в культурах нервных клеток, и интрацеребральная инъекция фибриллярного амилоидного пептида приводит к повышенной экспрессии АВЬ1 и далее на этом пути эффектора р73. Трансгенные мыши (АРР/З^с мышиная модель АО) показали повышенные уровни АВЬ1 в головном мозге, и, когда этих мышей обрабатывали ингибитором АВЬ1 О1ссусс®, 1аи фосфорилирование снижалось в головном мозге животных. Трансгенная мышиная модель, экспрессирующая конститутивно активный АВЬ1 в нейронах переднего мозга, демонстрировала потерю нейронов, тяжелое нейровоспаление и тирозин-фосфорилированный 1аи в головном мозге (см. обзор в ЗсЫаЛстсг δ.ϋ., Асксг С.М., Оаую8 Р. с-АЬ1 ш псигобсдспсгабус б18са8с. 1. Мо1. №ито8ск 2011 Ш; 45(3):445-52).
На основании всех этих результатов существует доказательство роли АВЬ1 киназы в патогенезе болезни Альцгеймера для развития обоих поражений - амилоидных бляшек и нейрофибриллярных сплетений.
Кроме того, активированный АВЬ1 также присутствует в других таупатиях, помимо спорадической болезни Альцгеймера, в том числе в головном мозге пациентов с фронтотемпоральной деменцией с Ν279Κ и Р301Б мутациями, болезнью Пика и Гуам Паркинсон-деменцией (ЗсЫаЛстсг δ.ϋ., Асксг С.М., Оаую8 Р. с-АЬ1 ш псигобсдспсгабус б18са8с. 1. Мо1. №ито8ск 2011 Ш; 45(3):445-52).
Поэтому соединения по настоящему изобретению, ингибирующие АВЬ1 в ЦНС, представляют собой эффективный подход для разработки терапевтических средств против болезни Альцгеймера, а также других β-амилоидозов, таких как сосудистая деменция и другие таупатии, такие как фронтотемпоральная деменция и болезнь Пика.
Болезнь Ниманна-Пика С типа (№С) представляет собой фатальное аутосомальное рецессивное расстройство, характеризующееся аккумуляцией свободного холестерина и гликосфинголипидов в эндосомальной-лизосомальной системе и прогрессирующей гибелью нейронов, особенно мозжечковых нервных клеток Пуркинье. В мышиной модели NРС проапоптический АВЬ1, находящаяся далее по ходу транскрипции мишень, а также р73 гены-мишени экспрессируются в мозжечке. Ингибирование АВЬ1 при помощи О1ссусс® предотвращало потерю нервных клеток Пуркинье, улучшало неврологические симптомы и повышало выживаемость. Этот эффект провыживания О1ссусс® соотносился с пониженными уровнями мРНК р73 проапоптических генов-мишеней (А1уагс/ А.К., К1сш А., Са81го ί.. Сапсто О.1., Апидо ί., Мо8цис1га М., Уагда8 Ь.М., Υсνспс8 Ь.Р., ВгопГтап Р.С., Ζап1ипдο 8. 1таНп1Ь (Нсгару Ь1оск8 ссгсЬс11аг арорЮ818 апб 1тргоус8 псиго1одюа1 8утрЮт8 ш а тои8с тобс1 оГ №стапп-Рюк 1урс С б18са8с. РА8ЕВ ί. 2008 Ос!; 22(10):3617-27). Поэтому соединения по настоящему изобретению, ингибирующие АВЬ1 киназу, представляют собой эффективный подход для разработки терапевтических средств против заболеваний, вызванных проапоптическим путем АВЬ1/р73, таких как №С\
В моделях прионовых заболеваний О1ссусс® показал благоприятные эффекты: он замедлял прионовую нейроинвазию путем ингибирования распространения приона с периферии в ЦНС (Υιιπ 8.ν., Ейтст А., Р1сс118Щ Е., ОбсН 8., Кюбстсг Р., Осг1асН М., 8сНа1/1 Н.М., К1сш М.А. ТНс 1уто8тс к1па8с шЫЬЛот ипаРтЬ тс8у1а1с бс1ау8 рпоп псиготуа8юп Ьу тЫЬШпд рпоп ргорадаРоп щ Юс рспрНсгу. ί. №иго\Ло1. 2007 Аид; 13 (4):328-37). О1ссусс® и дефицит АВЬ1 индуцировали клеточный клиренс РгР8с в прионинфицированных клетках (Ейтст А., ОПсН 8., Υип 8.ν., Р1ссЙ81д Е., К1сЬ1 В., 81с1п-Осг1асН М., К1сш М.А., 8сНа1/1 Н.М. ТНс 1уто8тс к1па8с тЫЬРог 8Т1571 тбисс8 сс11и1аг с1сагапсс оГ РгР8с ш рпоп-шГссЮб
- 12 024391 се118. 1. ΒίοΙ. СЬет. 2004 Ос! 1; 279 (40):41918-27). Поэтому, новые ингибиторы ЛВЬ1 по настоящему изобретению также представляют собой эффективный терапевтический подход для лечения прионовых заболеваний, таких как болезнь Крейцфельда-Якоба.
Причиной Х-связанной рецессивной мышечной дистрофии Эмери-Дрейфуса являются мутации эмерина, ядерно-мембранного белка, играющего роль в ядерной архитектуре, генной регуляции и передаче сигналов. Недавно проведенное исследование показало, что эмерин тирозин-фосфорилируется непосредственно при помощи ЛВЬ1 в клеточных моделях и что статус фосфорилирования эмерина изменяет связывание эмерина с другими белками, такими как ВАР. Это, в свою очередь, может объяснить мислокализацию мутантного эмерина из ядерного в цитозольные компартменты и соответствующие изменения в расположенном далее на этом пути эффекторе и сигнальном интеграторе для сигнального пути (путей) на ядерной оболочке (ТйП К.Е., ВгабЪигу К.А., Акоп К.Ь. Туго8ше рЬо8рЬогу1айои οί иис1еагтетЪгаие рго!еш етегш Ъу 8КС, АВЬ1 апб о!Ьег кшазез. 1. Се11 8ск 2009 Ос! 15; 122 (Р1 20):3780-90). Изменения в эмерин-ламин взаимодействиях как в фазе митоза, так и в интерфазе являются важными для патологии мышечной дистрофии. Кроме того, результаты другого исследования показывают, что С1ееуес® ослабляет скелетно-мышечную дистрофию у тбх мышей (Ниаид Р., 2Ьао Х.8., Р1е1б8 М., Каи5о1юГГ К.М., 2Ьои Ь. 1табтЪ а!!еииа!е8 8ке1е1а1 тикс1е бу81горку ш тбх тке. РА8ЕВ 1. 2009 Аид; 23(8):2539-48).
Поэтому новые ингибиторы АВЬ1 по настоящему изобретению также представляют собой терапевтические подходы для лечения скелетных и мышечных дистрофий.
Кроме того, АВЬ1 киназа играет роль в воспалении и окислительном стрессе, двух механизмах, которые вовлечены в различные заболевания человека, от острых заболеваний ЦНС, таких как удар и травматические поражения головного мозга или спинного мозга, хронических заболеваний ЦНС, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, болезнь Г ентингтона и заболевания двигательных нейронов, до не связанных с ЦНС воспалительных и аутоиммунных заболеваний, таких как диабет, фиброз легких.
Например, С1ееуес® предотвращает фиброз в различных предклинических моделях системного склероза и индуцирует регрессию установившегося фиброза (АкЬтекЫиа А., Уеиайк Р., Эее8 С., Ви8сЬ Ν., Ζ\\όππ;·ι 1., 8сЬей С., Э|811ег О., Э|811ег кН. Тгеа1теи1 \νί6ι ипаОшЪ ргеуеик йЪго818 ш бкйегеи! ргесйтса1 тобе18 ой 8у81ет1с 8с1его818 аиб шбисе8 гедге88юи ой е8!аЪЙ8Ьеб йЪго818. АйЬпЙ8 КЬеит. 2009 1аи; 60(1):219-24), и он демонстрирует антифибротические эффекты в блеомицин-индуцированном фиброзе легких у мышей (Аоио Υ., №8Ыока Υ., 1иауата М., Ида1 М., Κΐ8ΐί 1., ИеЬага Н, Ιζιιιηί К., 8оие 8. 1та0шЬ а8 а иоуе1 аиййЪгойс адеи! ш Ъкотусш-шбисеб ри1тоиагу йЪго818 ш тке. Ат 1. Ке8рй. СгЪ Саге Меб. 2005 1ии 1; 171 (11):1279-85). Другое исследование показало, что как иматиниб, так и нилотиниб уменьшали блеомицин-индуцированное острое легочное поражение и фиброз легких у мышей (КЬее С.К., Ьее 8.Н., Υοοи Н.К., К1т 8.С., Ьее 8.Υ., К^ои 8.8., К1т ΥΚ.. К1т К.Н., К1т Т.Е, К1т Ι.ν. ЕГйес! ой т1ойшЪ ои Ъкотусш-шбисеб аси!е 1иид т)игу аиб ри1тоиагу йЪго818 ш тке. Ке8риайои. 2011; 82(3):273-87). Хотя в этих исследованиях авторы были сфокусированы на участии механизма, связанного с РЭСРК, который представлял интерес, в исследовании КЬее е! а1. (Ке8рйайои. 2011; 82(3):273-87) нилотиниб, который является значительно более сильным ингибитором с-АВЬ, чем иматиниб, показал более высокие терапевтические антифибротические эффекты, таким образом подтверждая терапевтическую применимость ингибиторов с-АВЬ для лечения заболеваний человека с легочным воспалением. В другом исследовании гипероксия, вызываемая у мышей, повышала активацию АВЬ1, которая необходима для фосфорилирования динамина 2 и продукции реактивных видов кислорода и легочного просачивания (8шд1е!ои Р.А., Реибуа1а 8., СогеЬкоуа 1.А., МатЪекайеу Ν., МоЬга 1., Сагша ЕС, №1ага)аи V. Пуиатги 2 аиб с-АЪ1 аге иоуе1 геди1а!ог8 ой Ьурегох1а-теб1а!еб NА^РН ох1ба8е асйуайои аиб геасйуе охудеи 8реск8 ргобисйои ш сауеойи-еткЬеб ткгоботаиъ ой !Ье еибоИейит. 1. Вю1. СЬет. 2009 Эес 11; 284 (50):34964-75).
Поэтому эти данные показывают, что новые ингибиторы с-АВЬ по настоящему изобретению имеют терапевтическую применимость для лечения заболеваний человека с легочным воспалением.
Активация АВЬ1 инсулином, через модификацию РАК ответа, может играть важную роль в направлении митогенного против метаболического сигнала инсулинового рецептора (Сеииа М., Ранбии С., Са88апио М.Р., Ме88ша К.Ь., Рга8са Р. с-АЪ1 аиб Ш8и1ш гесер!ог 8120:-111412. А!ат Ногт. 2009; 80:77-105). Было показано, что ингибиторы с-АЪ1, такие как С1ееуес®, обеспечивают регрессию диабета 1 типа у не страдающих ожирением диабетических мышей (Ьоиуе! С., 8ζο! С.Ь., Ьаид 1., Ьее М.К., Магйшег Ν., Во11ад С., ΖΗιι 8., \Уе188 А., В1ие8!оие ЕА. Туго8ше ките тЬкНоге геуегее !уре 1 б1аЪе!е8 ш иоиоЪе8е б1аЪейс тке. Ргос Ν;-ιΐ1 Асаб 8с1 И8А. 2008 Эес 2; 105 (48):18895-900). Облегчение тяжести диабета при помощи С1ееуес® имитировали путем 81РНК-опосредованного нокдауна АВЬ1 мРНК (Надегку18! К., 8аибкг 8., МокЬ!ап Ό., ХУеЕЬ Ν. Атейогайои ой б1аЪе!е8 Ъу ПиаНтЬ те8у1а!е (С1ееуес): го1е ой Ъе!а-се11 ΝΡ-карраВ асйуайои аиб аий-арор!ойс ргесоибЬктид. РА8ЕВ 1. 2007 РеЪ; 21 (2):618-28).
Поэтому новые ингибиторы АВЬ1 по настоящему изобретению имеют терапевтическую применимость для лечения диабета у человека.
Ингибитор АВЬ1 по настоящему изобретению можно использовать в комбинации с одним или несколькими из существующих лечений указанных выше заболеваний, например ингибитор АВЬ1 по на- 13 024391 стоящему изобретению можно использовать в комбинации с Ьеуойора или другими Ь-ЭОРАсодержащими лекарственными средствами или допаминовым агонистом для лечения болезни Паркинсона, или в комбинации с ингибитором холинэстеразы, таким как Ехе1оп капсула или чрескожный пластырь, для лечения болезни Альцгеймера.
В хроническом миелогенном лейкозе (СМЬ), реципрокная сбалансированная хромосомная транслокация в гематопоэтических стволовых клетках (Н8С) образует ВСК-АВЫ гибридный ген. Этот ген кодирует онкогенный ВСК-АВЫ гибридный белок. Тогда как АВЬ1 кодирует жестко регулируемую тирозиновую протеинкиназу, которая играет фундаментальную роль в регуляции клеточной пролиферации, адгезии и апоптоза, ВСК-АВЫ гибридный ген кодирует как конститутивно активированная киназа. Эта активированная киназа трансформирует Н8С с образованием фенотипа, демонстрирующего нарушенную регуляцию клональной пролиферации, пониженную способность к адгезии к строме костного мозга и пониженный апоптический ответ на мутагенные стимулы, приводя к прогрессивно более злокачественным трансформациям. Полученные в результате гранулоциты не могут развиваться в зрелые лимфоциты и высвобождаются в кровоток, приводя к дефициту зрелых клеток и повышенной восприимчивости к инфекции. Было показано, что АТР-конкурентные ингибиторы ВСК-АВЫ препятствуют киназной активации митогенного и антиапоптического путей (например, ΡΙ-3 киназа и 8ТАТ5), приводя к гибели клеток с ВСК-АВЫ фенотипом и, таким образом, обеспечивая эффективную терапию против СМЬ. КСЬ-22 клеточная линия (полученная от ΌδΜΖ, БчЬгЫ 1п5111и1е. Оетшапу) выделена из плевральной эффузии 32летней женщины при помощи аппарата хромосомно-позитивного СМЬ РЫ1айе1рЫа в бластном кризе в 1981 г. и описана для содержания 1(9; 22), приводящего к гибридному гену ВСК-АВЫ и мутации р53. КСЬ-22 клеточная линия может быть использована в модели Хеподтай для демонстрации ίη νίνο эффективности соединений изобретения (см. Аккау кесйоп, шйа). Соединения по настоящему изобретению, в качестве ингибиторов ВСК-АВЫ, включая его мутанты, являются, таким образом, особенно подходящими для лечения заболеваний, связанных с его чрезмерной экспрессией, таких как АСЬ или СМЬ лейкозы.
Также было показано, что соединения по настоящему изобретению обладают противоопухолевой активностью ίη νίΙΐΌ: ίη \йго противоопухолевую активность испытывают, например, с использованием лейкозных клеточных линий, таких как Ва/Р3-ВСК-АВЫ, КСЬ-22, К-562, МЕС-01, ΚΥΟ-1, ЬАМА-84, КИ812, ЕМ-2, СМЬ-Т1, ВУ-173 или АЬЬ-§1Ь.
Настоящее изобретение включает способ лечения рака, включающий введение субъекту, наждующемуся в таком лечении, эффективного количества соединения по настоящему изобретению или фармацевтической композиции.
Следующий вариант воплощения включает введение субъекту дополнительного терапевтического средства.
В следующем варианте воплощения дополнительное терапевтическое средство представляет собой другой ингибитор ВСК-АВЫ, выбранный из иматиниба, нилотиниба, дасатиниба, досутиниба, радотиниба, понатиниба и бафетиниба.
В другом варианте воплощения представлен способ лечения состояния, опосредованного ВСКАВЬ1, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по настоящему изобретению или фармацевтической композиции.
ВСК-АВЫ содержит одну или несколько мутаций. Примеры таких мутаций включают У299Ь, Τ315Ι, Ρ317Ι, Р317Ь, Υ253Ρ, Υ253Η, Е255К, Е255У, Р359С и Р359У (Шапе Р. Аррег1еу. Раг1 1: МесЬашкш о£ тек151апсе 1о ипаОшЬ ш сЬтошс шуе1о1Й 1еикаеш1а. Ьапсе1 Опсо1оду 2007; 8:1018).
В следующем варианте воплощения представлен способ лечения состояния, опосредованного ВСКАВЫ, где ВСК-АВЫ содержит одну или несколько мутаций, выбранных из У299Ь, Τ315Ι, Ρ317Ι, Р317Ь, Υ253Ρ, Υ253Η, Е255К, Е255У, Р359С и Р359У.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанное соединение вводят парентерально.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанное соединение вводят внутримышечно, внутривенно, подкожно, перорально, внутрилегочно, интратекально, местно или интраназально.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанное соединение вводят системно.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанный пациент представляет собой млекопитающее.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанный пациент представляет собой примата.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к указанному выше способу, где указанный пациент представляет собой человека.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения АВЫ/ВСК-АВЫопосредованного расстройства, включающему следующую стадию: введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества химиотерапевтического средства в комбинации с тера- 14 024391 певтически эффективным количеством соединения формулы (I).
В другом аспекте представлено соединение формулы (I) или любые конкретные варианты его воплощения, описанные выше, для использования при лечении рака.
В еще одном аспекте рак представляет собой лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (ЛЬЬ).
В другом аспекте представлено соединение формулы (I) или любые конкретные варианты его воплощения для использования при лечении рака в комбинации с дополнительным соединением, выбранным из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
В еще одном аспекте соединение формулы (I) представляет собой (К)-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5 -(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид.
В еще одном аспекте соединение формулы (I) представляет собой фармацевтически приемлемую соль (К)-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида.
В еще одном аспекте дополнительное соединение вводят последовательно.
В еще одном аспекте дополнительное соединение вводят одновременно.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой нилотиниб.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой иматиниб.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой дазатиниб.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой босутиниб.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой понатиниб.
В еще одном аспекте дополнительное соединение представляет собой бафетиниб.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения ЛВЫ/ВСК-ЛВЫопосредованного расстройства, включающему следующую стадию: введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества химиотерапевтического средства в комбинации с терапевтически эффективным количеством соединения формулы (I).
Фармацевтические композиции.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтически приемлемые композиции, которые включают терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений, описанных выше, сформулированных вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями (добавками) и/или разбавителями. Как описано подробно ниже, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть специально сформулированы для введения в твердой или жидкой форме, включая композиции, предназначенные для следующего: (1) перорального введения, например смачивающие препараты (водные или неводные растворы или суспензии), таблетки, например, предназначенные для буккального, сублингвального введения и системной абсорбции, болюсы, порошки, гранулы, пасты для нанесения на язык; (2) парентерального введения, например, при помощи подкожной, внутримышечной, внутривенной или эпидуральной инъекции, например, в виде стерильного раствора или суспензии или композиции замедленного высвобождения; (3) местного нанесения, например, в виде крема, мази или пластыря с контролируемым высвобождением или спрея, наносимого на кожу; (4) интравагинального или интраректального введения, например, в виде пессария, крема или пены; (5) сублингвального введения; (6) глазного введения; (7) чрескожного введения; (8) назального введения; (9) внутрилегочного введения или (10) интратекального введения.
Фраза терапевтически эффективное количество, как это используется в настоящей заявке, означает такое количество соединения, вещества или композиции, включающей соединение по настоящему изобретению, которое является эффективным для получения некоторого желаемого терапевтического эффекта в, по меньшей мере, субпопуляции клеток у животного при разумном соотношении польза/риск в применении к любому медицинскому лечению.
Фраза фармацевтически приемлемый, как это используется в настоящей заявке, относится к тем соединениям, веществам, композициям и/или лекарственным формам, которые, согласно взвешенной медицинской оценке, являются подходящими для использования в контакте с тканями человека и животных, без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений, соответствуя разумному соотношению польза/риск.
Фраза фармацевтически приемлемый носитель, как это используется в настоящей заявке, означает фармацевтически приемлемое вещество, композицию или носитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, технологическая добавка (например, смазывающее вещество, тальк, стеарат магния, кальция или цинка или стеариновая кислота) или растворяемое инкапсулирующее вещество, участвующее в переносе или транспортировании соединения по настоящему изобретению из одного органа или части тела к другому органу или части тела. Каждый носитель должен быть приемлемым, в том смысле, что он должен быть совместимым с другими ингредиентами композиции и не быть вредным для пациента. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5)
- 15 024391 солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; (9) масло, такое как арахисовое масло, масло семян хлопчатника, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) рН буферные растворы; (21) сложные полиэфиры, поликарбонаты и/или полиангидриды и (22) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических композициях.
Как описано выше, некоторые варианты воплощения соединений по настоящему изобретению могут содержать щелочную функциональную группу, такую как амино или алкиламино, и, таким образом, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми кислотами. Термин фармацевтически приемлемые соли, в этом отношении, относится к относительно нетоксичным неорганическим и органическим кислотно-аддитивным солям соединений по настоящему изобретению. Эти соли можно получить ίη зПн в процессе получения носителя для введения или лекарственной формы, или путем отдельного взаимодействия очищенного соединения по настоящему изобретению в форме свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой и выделения образованной таким образом соли в процессе последующей очистки. Репрезентативные соли включают гидробромид, гидрохлорид, сульфат, бисульфат, фосфат, нитрат, ацетат, валерат, олеат, пальмитат, стеарат, лаурат, бензоат, лактат, фосфат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, сукцинат, тартрат, наптилат, мезилат, глюкогептаноат, лактобионат и лаурилсульфонат и подобные (см., например, Вегде с1 а1. (1977) РЬагтасеийса1 ЗаИз, 1. РЬагт. Зек 66:1-19).
Фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению включают традиционные нетоксичные соли или четвертичные аммониевые соли соединений, например, образованные из нетоксичных органических или неорганических кислот. Например, такие традиционные нетоксичные соли включают соли, образованные из неорганических кислот, таких как хлористо-водородная, бромисто-водородная, серная, сульфаминовая, фосфорная, азотная и подобные; и соли, образованные из органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, пальмитиновая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая, изотионовая и подобные.
В других случаях соединения по настоящему изобретению могут содержать одну или несколько кислотных функциональных групп и, таким образом, могут образовывать фармацевтически приемлемые соли с фармацевтически приемлемыми основаниями. Термин фармацевтически приемлемые соли в этих случаях относится к относительно нетоксичным неорганическим и органическим основноаддитивным солям соединений по настоящему изобретению. Эти соли также можно получить ίη δίΐιι в процессе получения носителя для введения или лекарственной формы или путем отдельного взаимодействия очищенного соединения по настоящему изобретению в форме свободной кислоты с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат фармацевтически приемлемого металлического катиона, с аммиаком или с фармацевтически приемлемым органическим первичным, вторичным или третичным амином. Репрезентативные соли щелочных или щелочно-земельных металлов включают соли лития, натрия, калия, кальция, магния и алюминия и подобные. Репрезентативные органические амины, полезные для образования основно-аддитивных солей, включают этиламин, диэтиламин, этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперазин и подобные (см., например, Вегде е1 а1., 8ирга).
Смачивающие вещества, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, агенты высвобождения, вещества покрытий, подсластители, отдушки и ароматизаторы, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композициях.
Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают: (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, цистеин гидрохлорид, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и подобные; (2) маслорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол (ВНА), бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и подобные; и (3) металло-хелатные вещества, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (ΕΌΤΑ), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и подобные.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению включают композиции, подходящие для перорального, назального введения, местного (включая буккальное и сублингвальное), ректального, вагинального и/или парентерального введения. Композиции удобным образом могут быть представлены в стандартной лекарственной форме и могут быть получены любыми способами, хорошо известными в фармацевтике. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществомносителем для получения одной лекарственной дозы, варьируется в зависимости от хозяина, который принимает лечение, конкретного способа введения. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществом-носителем для получения одной лекарственной дозы, как правило, составляет такое количество соединения, которое обеспечивает терапевтический эффект. Как правило, исходя
- 16 024391 из 100%, это количество будет находиться в пределах от около 0,1 до около 99% активного ингредиента, предпочтительно от около 5 до около 70%, наиболее предпочтительно от около 10 до около 30%.
В некоторых вариантах воплощения композиция по настоящему изобретению включает эксципиент, выбранный из группы, включающей циклодекстрины, целлюлозы, липосомы, мицеллообразующие вещества, например желчные кислоты, и полимерные носители, например сложные полиэфиры и полиангидриды; и соединение по настоящему изобретению. В некоторых вариантах воплощения указанная выше композиция делает соединение по настоящему изобретению перорально биодоступным.
Способы получения этих составов или композиций включают стадию приведения соединения по настоящему изобретению в ассоциацию с носителем и, необязательно, одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Как правило, композиции получают путем однородного и гомогенного смешивания для приведения в ассоциацию соединения по настоящему изобретению с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями, или и теми и другими, и затем, если это необходимо, формования продукта.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть в форме капсул, саше, пилюль, таблеток, лепешек (с использованием содержащей отдушки основы, обычно такой как сахароза и аравийская камедь или трагакант), порошков, гранул или в виде раствора, суспензии или твердой дисперсии в водной или неводной жидкости, или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь), и/или в виде полосканий для рта и т.п., при этом каждая такая форма содержит предварительно определенное количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Соединение по настоящему изобретению также можно вводить в виде болюса, электуария или пасты.
Фармацевтическая композиция в виде твердой дисперсии по настоящему изобретению включает, например, аморфную дисперсию соединения по настоящему изобретению, эксципиент (сополимеры, такие как поливинилпирролидинон (РУР) УЛ6Д (КоШбои® УЛ6Д или СороуМоие) и подобные). Твердая дисперсия может быть дополнительно усилена при помощи гидроксилпропилметилцеллюлоз (НРМС) с низкой вязкостью (таких как РЕагшасоа! 603, Мс11юсс1 Е3 или подобные); см. пример Д1 ниже для получения более детальной информации для получения фармацевтической композиции в виде твердой дисперсии по настоящему изобретению.
В одном варианте воплощения настоящего изобретения представлена фармацевтическая композиция, включающая аморфную дисперсию (К)-^(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) и от 1 до 2 эксципиентов; где эксципиент выбирают из НРМС Άδ, РЬагшасоа! 603, ЕибгадИ Ь100, РУР К30, РУР УА6Д и ЕибгадИ ЕРО.
В следующем варианте воплощения эксципиенты представляют собой РУР УА6Д и РЬагшасоа! 603.
В следующем варианте воплощения процентное содержание РЕагшасоа! 603 находится в диапазоне от 30 до Д5%, процентное содержание РУР УА6Д находится в диапазоне от 30 до Д5%, и процентное содержание (К)-ОТ(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамида (пример 9) находится в диапазоне от 20 до 30%.
В следующем варианте воплощения процентное содержание РЬагшасоа! 603 составляет 37,5%, процентное содержание РУР УА6Д составляет 37,5%, и процентное содержание (К)-ОТ(Д(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) составляет 25%.
В твердых лекарственных формах по настоящему изобретению для перорального введения (капсулы, таблетки, пилюли, драже, порошки, гранулы, лепешки и подобное) активный ингредиент смешан с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или дикальций фосфат, и/или любым из следующих: (1) наполнители или создающие объем вещества, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремневая кислота; (2) связующие, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или аравийская камедь; (3) увлажнители, такие как глицерин; (Д) разрыхлители, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; (5) замедляющие растворение вещества, такие как парафин; (6) ускорители абсорбциии, такие как четвертичные аммониевые соединения, и поверхностно-активные вещества, такие как полоксамер и лаурилсульфат натрия; (7) смачивающие вещества, такие как, например, цетиловый спирт, глицеринмоностеарат и неионные поверхностно-активные вещества; (8) абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина; (9) смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, стеарат цинка, стеарат натрия, стеариновая кислота и их смеси; (10) красители; и (11) контролирующие высвобождение вещества, такие как кросповидон или этилцеллюлоза. В случае капсул, таблеток и пилюль, фармацевтические композиции также могут включать буферные вещества. Твердые композиции подобного типа также можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов, как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярных полиэтиленгликолей и подобных.
Таблетку можно получить путем прессования или формования, необязательно с использованием
- 17 024391 одного или нескольких вспомогательных ингредиентов. Прессованные таблетки можно получить с использованием связующего (например, желатин или гидроксипропилметилцеллюлоза), смазывающего вещества, инертного разбавителя, консерванта, разрыхлителя (например, натрий крахмалгликолят или сшитая натрий карбоксиметилцеллюлоза), поверхностно-активного или диспергирующего вещества.
Формованные таблетки можно получить путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного соединения, смоченного инертным жидким разбавителем.
Таблетки и другие твердые лекарственные формы фармацевтических композиций по настоящему изобретению, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, необязательно могут иметь насечку или могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области фармацевтического формулирования. Они также могут быть сформулированы таким образом, чтобы обеспечивать медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента, содержащегося в них, с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в разных пропорциях для обеспечения желаемого профиля высвобождения, других полимерных матриц, липосом и/или микросфер. Они могут быть сформулированы для быстрого высвобождения, например, с использованием сушки замораживанием. Они могут быть стерилизованы, например, путем фильтрования через удерживающий бактерии фильтр или путем включения стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворить в стерильной воде или какой-либо другой стерильной среде для инъекций непосредственно перед использованием. Эти композиции также могут, но необязательно, содержать вещества, делающие композицию непрозрачной, и могут иметь такую композицию, которая обеспечивает высвобождение активного ингредиента (ингредиентов) только или преимущественно в определенной части желудочно-кишечного тракта, необязательно замедленным образом. Примеры композиций, предназначенных для включения в них лекарственного средства, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент также может быть в микроинкапсулированной форме, если это является подходящим, с одним или несколькими описанными выше эксципиентами.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения соединений по настоящему изобретению включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активного ингредиента жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие вещества и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3бутиленгликоль, масла (в частности, масло семян хлопчатника, масло земляного ореха, кукурузное масло, масло из проростков семян, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и их смеси.
Помимо инертных разбавителей пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как смачивающие вещества, эмульгаторы и суспендирующие вещества, подсластители, отдушки, красители, ароматизаторы и консерванты.
Суспензии, помимо активных соединений, могут содержать суспендирующие вещества, например этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбитана, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант и их смеси.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению для ректального или вагинального введения могут быть представлены в виде суппозитория, который можно получить путем смешивания одного или нескольких соединений по настоящему изобретению с одним или несколькими подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, включая, например, масло какао, полиэтиленгликоль, воск для суппозиториев или салицилат, и который является твердым при комнатной температуре, но жидким при температуре тела и поэтому будет плавиться в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождать активное соединение.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, которые являются подходящими для вагинального введения, также включают пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или композиции спреев, содержащие такие носители, которые известны из уровня техники как подходящие.
Лекарственные формы для местного или чрескожного введения соединения по настоящему изобретению включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и препараты для ингаляций. Активное соединение может быть смешано в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут потребоваться.
Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, помимо активного соединения по настоящему изобретению, эксципиенты, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремневая кислота, тальк и оксид цинка или их смеси.
Порошки и спреи могут содержать, помимо соединения по настоящему изобретению, эксципиенты, такие как лактоза, тальк, кремневая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси таких веществ. Спреи дополнительно могут содержать традиционные пропелленты,
- 18 024391 такие как хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.
Чрескожные пластыри имеют дополнительное преимущество, обеспечивая контролируемую доставку соединения по настоящему изобретению в организм. Такие лекарственные формы можно получить путем растворения или диспергирования соединения в подходящей среде. Усилители абсорбции также можно использовать для увеличения потока соединения через кожу. Скорость такого потока можно контролировать либо путем обеспечения контролирующей скорость мембраны, либо путем диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.
Офтальмические композиции, глазные мази, порошки, растворы и т.п. также предусматриваются как охватываемые объемом настоящего изобретения.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, подходящие для парентерального введения, включают одно или несколько соединений по настоящему изобретению в объединении с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми стерильными изотоническими водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями или стерильными порошками, которые могут быть реструктурированы с получением стерильных растворов или дисперсий для инъекций непосредственно перед использованием, которые могут содержать сахара, спирты, антиоксиданты, буферы, бактериостатические вещества, растворенные вещества, которые делают композицию изотонической с кровью предполагаемого реципиента, или суспендирующие вещества или загустители.
Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые можно использовать в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и подобные) и подходящие смеси таких веществ, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, с использованием веществ для покрытия, таких как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и путем использования поверхностно-активных веществ.
Эти композиции также могут содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие вещества, эмульгаторы и диспергирующие вещества. Предотвращение действия микроорганизмов на соединения по настоящему изобретению можно обеспечить путем включения различных антибактериальных и противогрибковых средств, например парабена, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и подобных. Также может быть желательным включение в композиции изотонических веществ, таких как сахара, хлорид натрия и подобные. Кроме того, пролонгированную абсорбцию фармацевтической формы для инъекций можно получить путем включения веществ, которые замедляют абсорбцию, таких как моностеарат алюминия и желатин.
В некоторых случаях для пролонгирования действия лекарственного средства желательно замедлить абсорбцию лекарственного средства из подкожной или внутримышечной инъекции. Это можно осуществить с использованием жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества, имеющего плохую водорастворимость. Скорость абсорбции лекарственного средства в этом случае зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и кристаллической формы. Альтернативно, замедленную абсорбцию парентерально вводимой лекарственной формы получают путем растворения или суспендирования лекарственного средства в масляном носителе.
Депо формы для инъекций получают путем формирования матрицы для микроинкапсулирования соединений по настоящему изобретению в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактидполигликолид. В зависимости от отношения лекарственного средства к полимеру и природы конкретного используемого полимера скорость высвобождения лекарственного средства можно контролировать. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Депо формы для инъекций также получают путем заключения лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканью организма.
Когда соединения по настоящему изобретению вводят в виде фармацевтических средств человеку и животным, их можно вводить рег 5С или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0,1 до 99% (более предпочтительно от 10 до 30%) активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
Препараты по настоящему изобретению можно вводить перорально, парентерально, местно или ректально. Их, безусловно, вводят в формах, подходящих для каждого пути введения. Например, их вводят в форме таблеток или капсул, путем инъекции, ингаляции, в виде глазного лосьона, мази, суппозитория и т.п., введение осуществляют путем инъекции, инфузии или ингаляции; местным путем с использованием лосьона или мази; и ректальным путем с использованием суппозиториев. Пероральные введения являются предпочтительными.
Фразы парентеральное введение и вводимый парентерально, как это используется в настоящей заявке, означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно путем инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, интраартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, интракардиальную, внутрикожную, интраперитонеальную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, интраартикулярную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную и интрастернальную инъекцию и инфузию.
- 19 024391
Фразы системное введение, вводимый системно, периферийное введение и вводимый периферийно, как это используется в настоящей заявке, означают введение соединения, лекарственного средства или другого вещества, отличное от введения непосредственно в центральную нервную систему, так, чтобы оно поступало в систему пациента и таким образом подвергалось метаболизму и другим подобным процессам, например подкожное введение.
Эти соединения можно вводить человеку и другим животным для лечения любым подходящим путем введения, в том числе перорально, назально, например в виде спрея, ректально, интравагинально, парентерально, интрацистернально и местно, например в форме порошков, мазей или капель, включая буккальное и сублингвальное введение.
Независимо от выбранного пути введения, соединения по настоящему изобретению, которые можно использовать в подходящей гидратированной форме, и/или фармацевтические композиции по настоящему изобретению формулируют в фармацевтически приемлемые лекарственные формы традиционными способами, известными специалистам в данной области.
Фактические уровни доз активных ингредиентов в фармацевтических композициях по настоящему изобретению могут варьироваться таким образом, чтобы обеспечивать количество активного ингредиента, которое является эффективным для достижения желаемого терапевтического ответа для конкретного пациента, композиции и пути введения, не являясь при этом токсичными для пациента.
Выбранный уровень доз будет зависеть от различных факторов, включая активность конкретного используемого соединения по настоящему изобретению или его сложного эфира, соли или амида, путь введения, время введения, скорость экскреции или метаболизма конкретного используемого соединения, скорость и степень абсорбции, продолжительность лечения, другие лекарственные средства, соединения и/или вещества, используемые в комбинации с конкретным используемым соединением, возраст, пол, массу тела, состояние, общее состояние здоровья и предыдущую медицинскую историю пациента, которого лечат, и подобные факторы, хорошо известные в медицине.
Лечащий врач или ветеринар со средней квалификацией легко сможет определить и прописать эффективное количество фармацевтической композиции, которая требуется. Например, лечащий врач или ветеринар может начать с доз соединений по настоящему изобретению, используемых в фармацевтической композиции, на уровнях ниже тех, которые необходимы для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозу вплоть до достижения желаемого эффекта.
Как правило, подходящая суточная доза соединения по настоящему изобретению будет представлять собой такое количество соединения, которое представляет собой самую низкую дозу, эффективную для обеспечения терапевтического эффекта. Такая эффективная доза, как правило, зависит от факторов, описанных выше. Как правило, пероральные, внутривенные, интрацеребровентрикулярные и подкожные дозы соединений по настоящему изобретению для пациента, когда их используют для показанных анальгетических эффектов, находятся в пределах от около 0,0001 до около 100 мг на 1 кг массы тела в день.
Если желательно, эффективную суточную дозу активного соединения можно вводить в виде двух, трех, четырех, пяти, шести или более дробных доз, вводимых раздельно с подходящими интервалами времени в течение дня, необязательно, в стандартных лекарственных формах.
РК параметры ш У1уо могут быть использованы для оценки РК параметров человека. С применением различных способов, известных в данной области для прогнозирования РК человека, можно оценить прогнозируемый клиренс человека. Например, (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид (пример 9) по оценкам составляет 3 мл/мин/кг, и объем распределения оценивается как 1 л/кг.
Прогнозируемая эффективная суточная доза для человека для соединения примера 9, поэтому, была определена как находящаяся в пределах от 90 до 130 мг/день.
Хотя соединение по настоящему изобретению можно вводить отдельно, предпочтительным является введение соединения в виде фармацевтического препарата (композиции).
Соединения в соответствии с настоящим изобретением могут быть сформулированы для введения любым удобным путем для применения в лечении человека или в ветеринарии, аналогично другим фармацевтическим средствам.
В другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтически приемлемые композиции, которые включают терапевтически эффективное количество одного или нескольких соединений по настоящему изобретению, описанных выше, сформулированных вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями (добавками) и/или разбавителями. Как подробно описано ниже, фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут быть специально сформулированы для введения в твердой или жидкой форме, включая предназначенные для следующего: (1) перорального введения, например смачивающие препараты (водные или неводные растворы или суспензии), таблетки, болюсы, порошки, гранулы, пасты для нанесения на язык; (2) парентерального введения, например, при помощи подкожной, внутримышечной или внутривенной инъекции, например, в виде стерильного раствора или суспензии; (3) местного нанесения, например, в виде крема, мази или спрея для нанесения на кожу, легкие или слизистые оболочки; (4) интравагинального или интраректального введения, например, в виде пессария, крема или пены; (5) сублингвального или буккального введения; (6) глазного введения;
- 20 024391 (7) чрескожного введения; (8) назального введения.
Термин лечение предназначен для охвата также профилактики, терапии и лечения.
Пациент, принимающий такое лечение, представляет собой любое животное, нуждающееся в этом, включая приматов, в частности человека, и других млекопитающих, таких как лошади, крапный рогатый скот, свиньи и овцы; а также домашнюю птицу и домашних животных в целом.
Технология микроэмульгирования может улучшить биодоступность некоторых липофильных (не растворимых в воде) фармацевтических средств. Примеры включают Триметрин (Эогбипоо, 8.К., е1 а1., Огид Эеуе1ортеп1 апб 1пби51па1 РЬагтасу, 17(12), 1685-1713, 1991) и КЕУ 5901 (8Ьееп, Р.С., е1 а1., 1. РЬагт. 8с1 80(7), 712-714, 1991). Помимо прочего, микроэмульгирование обеспечивает повышенную биодоступность путем преимущественного направления абсорбции на лимфатическую систему вместо системы кровотока, которая, таким образом, обходит печень и предотвращает разложение соединений в гепатобилиарном кровообращении.
Хотя предусматриваются все подходящие амфифильные носители, в настоящем изобретении предпочтительными носителями в основном являются такие, которые имеют официальную маркировку Признан безвредным (Сепега11у-Кесодш/еб-а5-8аГе (СКА8)) и которые могут как растворять соединение по настоящему изобретению, так и микроэмульгировать его на более поздней стадии, когда раствор приходит в контакт с комплексной водной фазой (такой как в желудочно-кишечном тракте человека). Обычно амфифильные ингредиенты, которые удовлетворяют этим требованиям, имеют НЬВ (гидрофильнолипофильный баланс) значения 2-20, и их структуры содержат алифатические радикалы с линейной цепью в пределах от С-6 до С-20. Примерами являются полиэтилен-гликолизированные глицериды жирных кислот и полиэтиленгликоли.
Особенно предусматриваются коммерчески доступные амфифильные носители, включая ряд Гелуцировых носителей, Лабрафил, Лабразол или Лаурогликоль (изготовитель и поставщик всех вышеперечисленных СаЬеГо88е Согрогайоп, 8а1п1 Рг1е81, Ргапсе), РЕС-моно-олеат, РЕС-ди-олеат, РЕС-моно-лаурат и ди-лаурат, Лецитин, Полисорбат 80 и т.п. (производятся и поставляются рядом компаний в США и по всему миру).
Гидрофильные полимеры, подходящие для использования в настоящем изобретении, представляют собой такие, которые являются легко водорастворимыми, могут быть ковалентно связаны с везикулообразующим липидом и которые являются переносимыми ш νίνο без токсических эффектов (т.е. являются биосовместимыми). Подходящие полимеры включают полиэтиленгликоль (РЕС), полимолочную кислоту (также называемую полилактидом), полигликолевую кислоту (также называемую полигликолидом), сополимер полимолочной-полигликолевой кислоты и поливиниловый спирт. Предпочтительные полимеры представляют собой такие, которые имеют молекулярную массу от около 100 или 120 Да до около 5000 или 10000 Да и более предпочтительно от около 300 до около 5000 Да. В особенно предпочтительном варианте воплощения полимер представляет собой полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу от около 100 до около 5000 Да и более предпочтительно имеющий молекулярную массу от около 300 до около 5000 Да. В особенно предпочтительном варианте воплощения полимер представляет собой полиэтиленгликоль с молекулярной массой 750 Да (РЕС(750)). Полимеры также могут определяться по количеству мономеров в них; в предпочтительном варианте воплощения настоящего изобретения используют полимеры, состоящие по меньшей мере из около трех мономеров, такие РЕС полимеры, состоящие из трех мономеров (приблизительно 150 Да).
Другие гидрофильные полимеры, которые могут быть подходящими для использования в настоящем изобретении, включают поливинилпирролидон, полиметоксазолин, полиэтилоксазолин, полигидроксипропил метакриламид, полиметакриламид, полидиметилакриламид и производные целлюлозы, такие как гидроксиметилцеллюлоза или гидроксиэтилцеллюлоза.
В некоторых вариантах воплощения композиция по настоящему изобретению включает биосовместимый полимер, выбранный из группы, включающей полиамиды, поликарбонаты, полиалкилены, полимеры сложных эфиров акриловой и метакриловой кислот, поливиниловые полимеры, полигликолиды, полисилоксаны, полиуретаны и их сополимеры, целлюлозы, полипропилен, полиэтилены, полистирол, полимеры молочной кислоты и гликолевой кислоты, полиангидриды, поли(орто)эфиры, поли(масляную кислоту), поли(валериановую кислоту), поли(лактид-со-капролактон), полисахариды, белки, полигиалуроновые кислоты, полицианоакрилаты и их композиции, смеси или сополимеры.
Циклодекстрины представляют собой циклические олигосахариды, состоящие из 6, 7 или 8 глюкозных звеньев, которые обозначаются греческими буквами альфа, бета или гамма соответственно. Неизвестно о существовании циклодекстринов, содержащих меньше шести глюкозных звеньев. Глюкозные звенья связаны альфа-1,4-глюкозидными связями. Как следствие конформации кресла сахарных звеньев, все вторичные гидроксильные группы (по С-2, С-3) расположены на одной стороне кольца, тогда как все первичные гидроксильные группы по С-6 расположены на другой стороне. Как результат, внешние стороны являются гидрофильными, делая циклодекстрины водорастворимыми. В отличие от этого, полости циклодекстринов являются гидрофобными, поскольку они выстланы водородом атомов С-3 и С-5 и эфир-подобными кислородами. Эти матрицы делают возможным комплексообразование с различными относительно гидрофобными соединениями, включая, например, стероидные соединения, такие как 17- 21 024391 бета-эстрадиол (см., например, ναη ибеп е1 а1. Р1ап1 Се11 Т188. Огд. Си1к 38:1-3-113 (1994)). Комплексообразование происходит посредством ван-дер-ваальсовых взаимодействий и путем образования водородных связей. Общий обзор химии циклодекстринов см. в Аеп/, Лдпете. СЬет. ΣηΙ. Еб. Епд1., 33:803-822 (1994).
Физико-химические свойства циклодекстриновых производных сильно зависят от типа и степени замещения. Например, их растворимость в воде находится в диапазоне от нерастворимых (например, триацетил-бета-циклодекстрин) до растворимости 147% (мас./об.) (Ο-2-бета-циклодекстрин). Кроме того, они растворимы во многих органических растворителях. Свойства циклодекстринов позволяют контролировать растворимость различных компонентов композиции путем увеличения или уменьшения их растворимости.
Были описаны различные циклодекстрины и способы их получения. Например, Рагте1ег (I), е1 а1. (патент США № 3453259) и Сгатега, е1 а1. (патент США № 3459731) описывают электронейтральные циклодекстрины. Другие производные включают циклодекстрины с катионнными свойствами |Рагте1ег (II), патент США № 3453257], нерастворимые сшитые циклодекстрины (Бо1тз, патент США № 3420788) и циклодекстрины с анионными свойствами |Рагте1ег (III), патент США № 3426011]. Из циклодекстриновых производных с анионными свойствами можно указать такие, где карбоновые кислоты, фосфористые кислоты, фосфиновые кислоты, фосфоновые кислоты, фосфорные кислоты, тиофосфоновые кислоты, тиосульфиновые кислоты и сульфоновые кислоты присоединены к родительскому циклодекстрину [см. РагтеЮг (III), зирга]. Кроме того, сульфоалкилэфирные производные циклодекстринов описаны Б1е11а, е1 а1. (патент США № 5134127).
Липосомы состоят по меньшей мере из одной липидной бислойной оболочки, заключающей в себе водный внутренний компартмент. Липосомы могут быть охарактеризованы по типу и по размеру оболочки. Небольшие однослойные везикулы (БИУ) имеют одну оболочку и типичный диаметр в пределах от 0,02 до 0,05 мкм; крупные однослойные везикулы (ШУБ) типично больше, чем 0,05 мкм. Олиголамеллярные крупные везикулы и мультиламеллярные везикулы имеют несколько, обычно концентрических, слоев оболочки, и они типично больше чем 0,1 мкм. Липосомы с несколькими неконцентрическими оболочками, т.е. несколькими более мелкими везикулами, содержащимися в более крупной везикуле, называют мультивезикулярными везикулами.
Один аспект настоящего изобретения относится к композициям, включающим липосомы, содержащие соединение по настоящему изобретению, где оболочка липосомы сформулирована для обеспечения липосомы с повышенной несущей способностью. Альтернативно или в дополнение к этому, соединение по настоящему изобретению может содержаться в, или быть адсорбированным на липосомном бислое липосомы. Соединение по настоящему изобретению может быть агрегировано с липидным поверхностно-активным веществом и может транспортироваться, находясь во внутреннем пространстве липосомы; в этих случаях липосомная оболочка сформулирована так, чтобы быть стойкой к разрушительным эффектам агрегата активное средство-поверхностно-активное вещество.
В соответствии с одним вариантом воплощения настоящего изобретения липидный бислой липосомы содержит липиды, дериватизованные полиэтиленгликолем (РЕС) так, чтобы РЕС цепи простирались от внутренней поверхности липидного бислоя во внутреннее пространство, инкапсулированное липосомой, и простирались от внешней поверхности липидного бислоя в окружующую среду.
Активные вещества, содержащиеся в липосомах по настоящему изобретению, находятся в солюбилизированной форме. Агрегаты, состоящие из поверхностно-активного вещества и активного вещества (такие как эмульсии или мицеллы, содержащие представляющее интерес активное вещество), могут быть заключены во внутреннем пространстве липосом в соответствии с настоящим изобретением. Поверхностно-активное вещество действует как агент, диспергирующий и солюбилизирующий активное вещество, и может быть выбрано из любого подходящего алифатического, циклоалифатического или ароматического поверхностно-активного вещества, включая, но не ограничиваясь этим, биосовместимые лизофосфатидилхолины (ЬРС) с разной длиной цепей (например, от около С14 до около С20). Полимердериватизированные липиды, такие как РЕС-липиды, также можно использовать для мицеллообразования, поскольку их действие направлено на ингибирование слияния мицелла/оболочка, и поскольку присоединение полимера к молекулам поверхностно-активного вещества снижает СМС поверхностноактивного вещества и способствует мицеллообразованию. Предпочтительными являются поверхностноактивные вещества с СМС в микромолярном диапазоне; поверхностно-активные вещества с более высоким СМС можно использовать для получения мицелл, заключенных в липосомы по настоящему изобретению, однако мицеллярные поверхностно-активные мономеры могут влиять на стабильность липосомного бислоя и могут быть движущей силой в разработке липосом желаемой стабильности.
Липосомы в соответствии с настоящим изобретением можно получить любым из различных способов, которые известны из уровня техники; см., например, патент США № 4235871; опубликованные заявки РСТ АО 96/14057; Νον ККС, Ырозотез: А ргасбса1 арргоасЬ, ШЬ Ргезз, О.хГогб (1990), радез 33-104; Ьа81с Ό.Ό., Ырозотез Ггот рЬузюз Ю аррЬсабопз, ЕЬеу^ег Баепсе РиЬЬзЬегз ВУ, Атз1егбат, 1993.
Например, липосомы по настоящему изобретению можно получить путем диффундирования липида, дериватизированного гидрофильным полимером, в предварительно сформированные липосомы, на- 22 024391 пример, подвергая предварительно сформированные липосомы контактированию с мицеллами, образованными из липидпривитых полимеров, при концентрациях липидов, соответствующих конечному мольному проценту дериватизированного липида, который является желательным, в липосоме. Липосомы, содержащие гидрофильный полимер, также могут быть образованы путем гомогенизации, гидратирования липидной области или методами экструзии, как это известно из уровня техники.
В одном аспекте настоящего изобретения липосомы получают так, чтобы они имели, по существу, гомогенные размеры в выбранном размерном диапазоне. Один эффективный способ классификации по размеру включает экструдирование водной суспензии липосом через ряд поликарбонатных мембран, имеющих выбранный одинаковый размер пор; размер пор мембраны должен примерно соответствовать самым большим размерам липосом, которые получают путем экструзии через такую мембрану; см., например, патент США № 4737323 (12 апреля 1988 г.).
Характеристики высвобождения препарата по настоящему изобретению зависят от инкапсулирующего вещества, концентрации инкапсулированного лекарственного средства и присутствия модификаторов высвобождения. Например, высвобождением можно манипулировать, поскольку оно является рН зависимым, например, с использованием рН-чувствительного покрытия, которое высвобождает только при низком рН, как, например, в желудке, или при более высоком рН, как, например, в кишечнике. Энтеросолюбильное покрытие можно использовать для предотвращения высвобождения до тех пор, пока препарат не пройдет через желудок. Можно использовать несколько покрытий или смеси цианамида, инкапсулированного в различных веществах, для получения начального высвобождения в желудке с последующим более поздним высвобождением в кишечнике. Высвобождением также можно манипулировать путем включения солей или порообразующих веществ, которые могут повышать водопоглощение или высвобождать лекарственное средство посредством диффузии из капсулы. Эксципиенты, которые модифицируют растворимость лекарственного средства, также можно использовать для контролирования скорости высвобождения. Вещества, которые усиливают разрушение матрицы или высвобождают из матрицы, также могут быть включены. Они могут быть добавлены к лекарственному средству, добавлены в виде отдельной фазы (т.е. в виде мелких частиц) или могут быть совместно растворены в полимерной фазе, в зависимости от соединения. Во всех случаях количество должно находиться в пределах от 0,1 до 30% (мас./мас.) полимера. Типы веществ, которые усиливают разрушение, включают неорганические соли, такие как сульфат аммония и хлорид аммония, органические кислоты, такие как лимонная кислота, бензойная кислота и аскорбиновая кислота, неорганические основания, такие как карбонат натрия, карбонат калия, карбонат кальция, карбонат цинка и гидроксид цинка, и органические основания, такие как протаминсульфат, спермин, холин, этаноламин, диэтаноламин и триэтаноламин, и поверхностноактивные вещества, такие как Τ^ββη® и ΡΙιιΐΌηίο*. Порообразующие вещества, которые добавляют микроструктуру матрицам (т.е. водорастворимые соединения, такие как неорганические соли и сахара), добавляют в виде твердых частиц. Диапазон должен составлять от 1 до 30% (мас./мас.) полимера.
Поглощением также можно манипулировать путем изменения времени нахождения частиц в кишечнике. Это достигается, например, путем покрытия частиц мукозально-адгезивным полимером или выбора его в качестве инкапсулирующего вещества. Примеры включают большинство полимеров со свободными карбоксильными группами, такие как хитозан, целлюлозы и особенно полиакрилаты (как используется в настоящей заявке, полиакрилаты относятся к полимерам, включающим акрилатные группы и модифицированные акрилатные группы, таким как цианоакрилаты и метакрилаты).
Фармацевтические комбинации.
Изобретение, главным образом, относится к применению соединения формулы (Ι) (или фармацевтической композиции, включающей соединение формулы (Ι)) в лечении одного или нескольких заболеваний, указанных в настоящей заявке; где ответ на лечение является благоприятным, как показано, например, путем частичного или полного устранения одного или нескольких симптомов заболевания, вплоть до полного излечения или ремиссии.
Филадельфийская хромосома-положительный (ΡΗ+) АЬЬ составляет 15-30% от АЬЬ взрослых и до 5% от педиатрических АЬЬ (Рабег1 8., Оагаа-МАпего Ο., Τΐιοιηαδ Ό., е! а1. ΡΗίΙαάοΙρΗία СЬготокоте ΡοδίΙίνο Аси!е ЬутрЬоЫакйс Ьеикетга- Сиггеп! Сопсер15 апб Ри!иге Ρе^δресί^νеδ. Кеу СНп Ехр Нета!о1 2002; 6:142-160). Педиатрический Ρ1ι+ АЬЬ характеризуется более старшим возрастом (в среднем 9-10 лет против приблизительно 4 лет для всех АЬЬ пациентов) и более высоким числом АВС при постановке диагноза. Как у взрослых, так и у детей Ρ1ι+ АЬЬ характеризуется реципрокальной транслокацией между хромосомами 9 и 22 (!(9; 22) (д34; д11)), приводящей к слиянию ВСК гена на хромосоме 22 с АВЬ генными последовательностями, транслоцированными из хромосомы 9, приводя к экспрессии ВСК-АВШ белка. Существуют 2 основных варианта ВСК-АВЫ, р190ВСК-АВЬ1, определяемый у приблизительно 85% Ρ1ι+ АЬЬ пациентов, и р210 ВСК-АВШ, типичный для СМЬ, идентифицированный у приблизительно 15% Ρ1ι+ АЬЬ пациентов (ОотЬге! Н., Оа1Ьег1 1.. Воиоп 1.. е! а1. 0и!соте о£ Шеа^ей ίη АбиШ \νί11ι ΡЬ^1абе1рЬ^а сНготохоте-рохПЮ'е аси!е КтрНоЫахйс 1еикет1а-Ке8и1!8 о£ 1Не ргохресФ'е тиШсеШег ЬАЬА94 1па1. В1ооб 2002; 100:2357-2366; Рабег1 8., Оагаа-МАпего Ο., ΤЬοтаδ Ό., е! а1. ΡЬ^1абе1рЬ^а СНготохоте Ροδ^ί^νе Аси!е ЬутрЬоЫа8Йс Ьеикет1а- Сиггеп! СопсерФ апб Ри!иге Ρе^δресί^νеδ. Ке\' С1ш Ехр Нета!о1 2002; 6:142-160).
- 23 024391
Лечение АЬЬ основано на классификации риска для каждого пациента, с повышением интенсивности лечения для пациентов, которые имеют больший риск рецидива; эта стратегия максимизирует скорости ремиссии, при этом ограничивая ненужные токсичности. Прогресс постепенно увеличивался от введения комбинированной химиотерапии и лечения предсимптоматического лейкоза центральной нервной системы до более новых интенсивных схем лечения для пациентов, которые имеют больший риск рецидива (С.Н. Рш апй Α. Ε. Еуапз АсШе ЬутрЬоЫакДс Ьеикет1а №ν Епд1 ί. Мей 1998; 339:605-615). До разработки иматиниба Ρ1ι+ АЬЬ пациентов лечили при помощи интенсивной химиотерапии с последующей трансплантацией гематопоэтических стволовых клеток (НЗСТ), идеально с подходящим родственным донором, поскольку было показано, что это приводит к улучшенному ЕРЗ против любого НЗСТ с другими донорами или химиотерапии, используемой отдельно. В целом, и в отличие от большинства педиатрических пациентов с АЬЬ, пациенты с Ρ1ι+ АЬЬ имели плохие прогнозы с низким процентом выживания без неблагоприятных событий (ЕРЗ) (Апсо М., УакессЫ М.О., СатШа В., ЗсЬгарре М., СЬе§8е1к 1., ВагисЬе1 А., Оаупоп Р., ЗПуегтап Ь., 1апка-ЗсЬаиЬ О., Катрз Α, е1 а1. №ν Епд1 1. Мей 2000; 342:9981006).
Существующие терапии (такие как ОЬЕЕУЕС®, ΤАЗIОNА®, ЗРКУСЕГ. ВОЗИЫР®, ЮЬиЗЮ™ и подобные) связываются с АТР-связывающим сайтом киназного домена. В отличие от этого, соединения по настоящему изобретению являются мощными ингибиторами ВСК-АВЫ, АВЬ1 и АВЬ2, которые связываются с сайтом на киназном домене, который отличается от АТР-связывающего сайта.
Поэтому соединения по настоящему изобретению с их новым, аллостерическим механизмом действия могут быть использованы в качестве самостоятельной терапии или могут быть использованы последовательно или в комбинации с существующими терапиям, выбранными из ОЬЕЕУЕС®, ΤАЗIОNА®, ЗРОТСЕЬ®, ВОЗИЫР® и ЮЬИЗЮ ™.
В качестве самостоятельной терапии соединения по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения ВСК-АВЫ, АВЬ1 и АВЬ2-родственных заболеваний и расстройств. ВСК-АВЫ может быть дикого типа или мутантным ВСК-АВЫ, выбранным из У299Ь, Т315Ц Р317!/к, Υ253Ρ/Η, Е255К/У и Р359С/У. Соединения по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения пациентов, которые не реагируют на существующие методы лечения в результате мутаций, возникающих в АТР-связывающем сайте. В качестве комбинированной терапии соединения по настоящему изобретению представляют собой уникальную возможность для лечения пациентов с РЬ+ лейкозом с использованием комбинации двух мощных, механистически различных ингибиторов ВСК-АВЬ. Комбинированный подход в клинике может обеспечить пациентов с более глубоким и более устойчивым сокращением опухолевой нагрузки со снижением риска рецидива.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения представлен способ лечения теплокровного животного, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (АЬЬ), включающий введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
В следующем варианте воплощения теплокровное животное представляет собой человека (пациента).
В следующем варианте воплощения соединение по настоящему изобретению представляет собой (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид (пример 9) или его фармацевтически приемлемую соль.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения представлен способ лечения теплокровного животного, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (АЬЬ), включающий последовательное введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
В следующем варианте воплощения теплокровное животное представляет собой человека (пациента).
В следующем варианте воплощения соединение по настоящему изобретению представляет собой (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид (пример 9) или его фармацевтически приемлемую соль.
В следующем варианте воплощения доза (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) составляет 90-130 мг.
В следующем варианте воплощения доза нилотиниба составляет 10-50 мг/кг, иматиниба составляет 50-200 мг/кг, дазатиниба составляет 5-20 мг/кг или понатиниба составляет 2-10 мг/кг.
В следующем варианте воплощения доза босутиниба составляет 500 мг.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения представлен способ лечения теплокровного животного, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (АЬЬ), включающий одновременное введение указанному животному терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемле- 24 024391 мой соли и терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
В следующем варианте воплощения теплокровное животное представляет собой человека (пациента).
В следующем варианте воплощения соединение по настоящему изобретению представляет собой (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид (пример 9) или его фармацевтически приемлемую соль.
В следующем варианте воплощения доза (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) составляет 90-130 мг.
В следующем варианте воплощения доза нилотиниба составляет 10-50 мг/кг, иматиниба составляет 50-200 мг/кг, дазатиниба составляет 5-20 мг/кг или понатиниба составляет 2-10 мг/кг.
В следующем варианте воплощения доза босутиниба составляет 500 мг.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения представлен способ лечения теплокровного животного, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (ЛЬЬ), включающий одновременное введение указанному животному терапевтически эффективного количества (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества нилотиниба.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения представлен способ лечения теплокровного животного, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелолейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (ЛЬЬ), включающий одновременное введение указанному животному терапевтически эффективного количества (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества нилотиниба.
Соединение формулы (I) также можно использовать в комбинации с другими противоопухолевыми соединениями. Такие соединения включают, но не ограничиваются этим, ингибиторы рибонуклеотидредуктазы, ингибиторы топоизомеразы I; 1ЛК ингибиторы, такие как руксолитиниб; ингибиторы δΐηοοίΐιепек, такие как БОЕ225; интерферон; ингибиторы топоизомеразы II; действующие на микротрубочки активные соединения; алкилирующие соединения; ингибиторы гистон деацетилазы; ингибиторы тТОК, такие как ΚΛΌ001; противоопухолевые антиметаболиты; соединения платины; соединения, прицельно действующие на/снижающие протеин- или липидкиназную активность, ингибиторы метионинаминопептидазы; модификаторы биологического ответа; ингибиторы Кае онкогенных изоформ; ингибиторы теломеразы; ингибиторы протеасомы; соединения, используемые в лечении гематологических злокачественных заболеваний, такие как флударабин; соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность РКС, такие как мидостаурин; ингибиторы Н8Р90, такие как 17-ААО (17аллиламиногелданамицин, №С330507), 17-ЭМАО (17-диметиламиноэтиламино-17-деметоксигелданамицин, №С707545), №^504, С№1010, С№'2024, С№1010 от компании Соп&гта ТЬегареийсв, Н8Р990 и АИУ922; темозоломид (ТЕМООАЬ®); ингибиторы кинезинового веретенного белка, такие как 8В715992 или 8В743921 от компании О1ахо8ткНК1ше или пентамидин/хлорпромазин от компании СотЪша&Кх; ингибиторы РЕ3К, такие как ВЕΖ235, ВКМ120 или ВУЪ719; ингибиторы МЕК, такие как АККУ142886 от компании Аггау РюРНагта, ΛΖΩ6244 от компании Авй^еиеса, РО181461 от компании РП/ег, лейковорин, ЕЭО связующие, антилейкемические соединения, ингибиторы 8-аденозилметионин декарбоксилазы, антипролиферативные антитела или другие химиотерапевтические соединения. Кроме того, альтернативно или в дополнение к этому, их можно использовать в комбинации с ионизирующим облучением. Кроме того, в качестве альтернативы или в дополнение, они могут быть использованы в комбинации с 1АК ингибиторами, такими как руксолитиниб.
Кроме того, в качестве альтернативы или в дополнение, они могут быть использованы в комбинации с ингибиторами втооШеиек, такими как БОЕ225.
Кроме того, в качестве альтернативы или в дополнение они могут быть использованы в комбинации с интерфероном.
Термин ингибиторы рибонуклеотидредуктазы относится к пиримидиновым или пуриновым нуклеозидным аналогам, включая, но не ограничиваясь этим, флударабин и/или цитозин арабинозид (ага-С), 6-тиогуанин, 5-фторурацил, кладрибин, 6-меркаптопурин (особенно в комбинации с ага-С против АЬЬ), клофарабин, неларабин (пролекарство 9-в-арабинофуранозилгуанин, ага-О), пентостатин, гидроксимочевину или 2-гидрокси-1Н-изоиндол-1,3-дионовые производные (№пку е1 а1., Ас!а Опсо1од1са 1994; 33:953961).
Термин ингибитор топоизомеразы I, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, топотекан, гиматекан, иринотекан, камптотециан и его аналоги, 9-нитрокамптотецин и макромолекулярный камптотециновый конъюгат РКЦ-166148 (соединение А1 в ЮО99/17804). Иринотекан можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой САМРТО8АК. Топотекан можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например,
- 25 024391 под торговой маркой ΗΥСАΜΤIN.
Термин ингибитор топоизомеразы ΙΙ, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, антрациклины, такие как доксорубицин (включая липосомный препарат, например, СЛЕЕ-УХ), даунорубицин, эпирубицин, идарубицин и неморубицин, антрахиноны митоксантрон и лосоксантрон и подофиллотоксины этопозид и тенипозид. Этопозид можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ЕТОРОРНО8. Тенипозид можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой УМ 26-8^^0^ Доксорубицин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой Л^КIВ^А§ΤIN или Л^КIЛΜΥСIN. Эпирубицин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, под торговой маркой РАКМОКиВЮЫ. Идарубицин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ΖАVЕ^Οδ. Митоксантрон можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ЫОУАМТКОК
Термин действующее на микротрубочки активное соединение относится к стабилизирующим микротрубочки, дестабилизирующим микротрубочки соединениям и ингибиторам полимеризации микротубулина, включающим, но не ограничиваясь этим, таксаны, например паклитаксел и доцетаксел, алкалоиды барвинка, например винбластин, особенно винбластин сульфат, винкристин, особенно винкристин сульфат, и винорелбин, дискодермолиды, кохицин и эпотилоны и их производные, например эпотилон В или Ό или их производные. Паклитаксел можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например ТАХОЬ. Доцетаксел можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ТАХОТЕКЕ. Винбластин сульфат можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой УГИВЬАЗТЕН К.Р. Винкристин сульфат можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой РАКМ^ТШ Дискодермолид можно получить, например, как раскрыто в патенте США № 5010099. Также включены производные эпотилона, которые раскрыты в \УО 98/10121, И8 6194181, \УО 98/25929, \УО 98/08849, \УО 99/43653, \УО 98/22461 и \УО 00/31247. Особенно предпочтительными являются Эпотилон А и/или В.
Термин алкилирующее соединение, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, циклофосфамид, ифосфамид, мелфалан или нитрозомочевину (ВСИИ или СЬайе1). Циклофосфамид можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой СΥС^ΟδΤIN. Ифосфамид можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой НОЬОХАИ.
Термин ингибиторы гистон деацетилазы или ингибиторы НИАС относится к соединениям, которые ингибируют гистон деацетилазу и которые обладают антипролиферативной активностью. Он включает соединения, такие как ЬИН589, раскрытый в \УО 02/22577, особенно И-гидрокси-3-[4-[[(2гидроксиэтил)[2-(1Н-индол-3-ил)этил]-амино]метил]фенил]-2Е-2-пропенамид, И-гидрокси-3-[4-[[[2-(2метил-1Н-индол-3-ил)-этил]-амино]метил]фенил]-2Е-2-пропенамид и его фармацевтически приемлемые соли. Кроме того, этот термин особым образом включает субероиланилид гидроксамовую кислоту (§АНА).
Термин противоопухолевый антиметаболит включает, но не ограничивается этим, 5-фторурацил или 5-Ри, капецитабин, гемицитабин, ДНК деметилирующие соединения, такие как 5-азацитидин и децитабин, метотрексат и эдатрексат, и антагонисты фолиевой кислоты, такие как преметрексед. Капецитабин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ХЕЬОПА. Гемицитабин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, под торговой маркой СЕΜΖЛК.
Термин соединение платины, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, карбоплатин, цис-платин, цисплатину и оксалиплатин. Карбоплатин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой САКВОРЕАТ. Оксалиплатин можно вводить, например, в форме, как он поставляется на рынок, например, под торговой маркой ЕБ-ОХАТЫ.
Термин соединения, прицельно действующие на/снижающие протеин- или липидкиназную активность; или протеин- или липидфосфатазную активность, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, ингибиторы тирозиновой, и/или сериновой, и/или треониновой протеинкиназы или ингибиторы липидкиназы, например:
a) соединения, прицельно действующие на, снижающие или ингибирующие активность членов АВЫ семейства, продукты слияния их генов (например, ВСК-АВЫ киназа) и мутанты, такие как соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность членов АВЫ семейства и продукты слияния их генов, например иматиниб, нилотиниб, дасатиниб, босутиниб, понатиниб, бафетиниб, РИ180970, АС957, И8С 680410 и РП173955;
b) соединения, прицельно действующие на, снижающие или ингибирующие активность членов протеинкиназы С (РКС) и Ка£ семейства сериновых/треониновых киназ, членов МЕК, 8КС, 1АК, РАК, РИК1, РКВ/Ак! и Как/МАРК семейства и/или членов семейства циклинзависимых киназ (СИК), и осо- 26 024391 бенно те стауроспориновые производные, которые раскрыты в патенте США № 5093330, например мидостаурин; примеры других соединений включают, например ИС^01, сафингол, ΒАΥ Д3-9006, Бриостатин 1, Перифосин; Илмофосин; КО 318220 и КО 320Д32; ОО 697 6; Изис 3521; ΕΥ333531/ΕΥ379196; изохинолиновые соединения, такие как соединения, раскрытые в \УО 00/09Д95; РТЕ; ΒΕΖ235 (ингибитор Р13К) или АТ7 519 (ингибитор СОК).
Термин ингибиторы тТОК относится к соединениям, которые ингибируют мишень рапамицина у млекопитающих (тТОК) и которые обладают антипролиферативной активностью, такие как сиролимус (Каратипе®), эверолимус (СеШсап™), СС1-779 и АВТ578.
Термин модификатор биологического ответа, как это используется в настоящей заявке, относится к лимфокину или интерферонам, например интерферону γ.
Термин ингибитор онкогенных изоформ Как, например Н-Как, К-Как или Ν-Как, как это используется в настоящей заявке, относится к соединениям, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют онкогенную активность Как, например ингибитор фарнезилтрансферазы, например Ь7ДД832, ОК8О557 или К115777 ^агпекйа).
Термин ингибитор теломеразы, как это используется в настоящей заявке, относится к соединениям, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность теломеразы. Соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность теломеразы, главным образом, представляют собой соединения, которые ингибируют рецептор теломеразы, например теломестатин.
Термин ингибитор метионинаминопептидазы, как это используется в настоящей заявке, относится к соединениям, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность метионинаминопептидазы. Соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность метионинаминопептидазы, представляют собой, например, бенгамид или его производное.
Термин ингибитор протеасомы, как это используется в настоящей заявке, относится к соединениям, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность протеасомы. Соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность протеасомы, включают, например, Бортезомид (Уе1сабе™) и ΜΕΝ 3Д1.
Термин ингибиторы НБР90, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют собственную АТРазную активность ЖР90; разрушают, прицельно действуют на, снижают или ингибируют ЖР90зависимые белки через убихитинпротеасомный путь. Соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют собственную АТРазную активность ЖР90, главным образом, представляют собой соединения, белки или антитела, которые ингибируют АТРазную активность ЖР90, например 17аллиламино,17-деметоксигелданамицин (17ААО), гелданамициновое производное; другие гелданамицин-родственные соединения; радицикол и ингибиторы НОАС. Примеры ингибиторов ЖР90 включают ЖР990 и АЦУ922.
Для лечения острого миелогенного лейкоза (АМЬ) соединения формулы (I) можно использовать в комбинации со стандартными терапиями лейкоза, особенно в комбинации с терапиями, используемыми для лечения АМЬ. В частности, соединения формулы (I) можно вводить в комбинации с, например, ингибиторами фарнезилтрансферазы и/или другими лекарственными средствами, полезными для лечения АМЬ, такими как Даунорубицин, Адриамицин, Ага-С, УР-16, Тенипозид, Митоксантрон, Идарубицин, Карбоплатинум и РКСД12.
Соединения, которые прицельно действуют на, снижают или ингибируют активность гистондеацетилазы (НОАС), такие как бутират натрия и субероиланилид гидроксамовая кислота (δΛΗΛ). ингибируют активность ферментов, известных как гистондеацетилазы. Конкретные ингибиторы НОАС включают Μδ275, δАНА, РК228 (прежнее название РК901228), Трихостатин А и соединения, раскрытые в патенте США № 6552065, в частности ОТгидрокси-3-[Д-[[[2-(2-метил-1Н-индол-3-ил)этил]амино]метил]фенил]2Е-2-пропенамид или его фармацевтически приемлемую соль и ^гидрокси-3-[Д-[(2-гидроксиэтил){2(1Н-индол-3-ил)этил]амино]метил]фенил]-2Е-2-пропенамид или его фармацевтически приемлемую соль, особенно лактатную соль.
Подходы повреждения опухолевых клеток относятся к подходам, таким как ионизирующее излучение. Термин ионизирующее излучение, используемый выше и далее, означает ионизирующее излучение, которое возникает в виде либо электромагнитных лучей (таких как Х-лучи и гамма-лучи), либо частиц (таких как альфа и бета частицы). Ионизирующее излучение обеспечивается в, но не ограничиваясь этим, лучевой терапии и известно из уровня техники; см. Не11тап, Ргшс1р1ек о£ КаЛайоп ТБегару, Сапсег, ίη Ргшс1р1ек апб Ргасйсе о£ Опсо1оду, ОеуПа е! а1., Ебк., Д'1' ЕФНоп, Уо1. 1, р. 2Д8-275 (1993).
Термин ингибиторы δ-аденозилметиониндекарбоксилазы, как это используется в настоящей заявке, включает, но не ограничивается этим, соединения, раскрытые в патенте США № 5Д61076.
Другие химиотерапевтические соединения включают, но не ограничиваются этим, растительные алкалоиды, гормональные соединения и антагонисты; модификаторы биологического ответа, предпочтительно лимфокины или интерфероны; антисмысловые олигонуклеотиды или олигонуклеотидные производные; к1-РНК или κί-РНК; или различные другие соединения или соединения с другим или неизвест- 27 024391 ным механизмом действия.
Структура активных соединений, определяемых кодовыми номерами, родовыми или торговыми названиями, может быть взята из действующей редакции стандартного справочника ТНе Мегск 1пбех или из баз данных, например Ра1епк 1п1егпа1юпа1 (например, 1М8 Vо^1б РиЬНсаНопк).
Никакое цитирование ссылочных документов, которое можно найти в настоящем раскрытии, не должно рассматриваться как допущение, что эти цитируемые ссылочные документы являются известным уровнем техники, который мог бы негативно повлиять на патентоспособность настоящего изобретения.
Способы получения соединений по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение также включает способы получения соединений по настоящему изобретению. В описанных реакциях может быть необходимо защитить реакционноспособные функциональные группы, например гидрокси, амино, имино, тио или карбоксигруппы, где эти группы являются желательными в конечном продукте, для избежания их нежелательного участия в реакциях. Обычные защитные группы можно использовать в соответствии со стандартной практикой, например, см. IV. Огеепе и Р.О.М. ίπ Рго1ес11уе Огоирк ш Огдашс СНет181гу, 1оНп νίΕν и §оп8, 1991.
К значениям температур, указанным ранее или далее в заявке, должно быть добавлено около как незначительные отклонения от приведенных числовых значений, например отклонения ±10% являются допустимыми. Все реакции могут осуществляться в присутствии одного или нескольких разбавителей и/или растворителей. Исходные материалы можно использовать в эквимолярных количествах; с другой стороны, соединение можно использовать в избытке, например, для функционирования в качестве растворителя или для смещения равновесия в целом или, в большинстве слечаев, для ускорения скорости реакции. Реакционные реагенты, такие как кислоты, щелочи или катализаторы, можно добавлять в подходящих количествах, как известно в данной области, требуемых для реакции, и в соответствии с общеизвестными процедурами.
Соединения формулы (I) можно получить аналогично представленному в следующей схеме реакций I.
в которой Υ, Υι, К1, К2, К3 и К4 являются такими, как определено для формулы (I) в Кратком описании изобретения, и Х1 и Х2 представляют собой атомы галогена, Х1 может быть выбран из хлора, брома или йода, и Х2 может быть выбран из хлора или фтора.
Стадия а. Соединение формулы (4) можно получить путем взаимодействия хлорангидрида кислоты соединения формулы (2) с соединением формулы (3) в присутствии подходящего растворителя (например, тетрагидрофурана или подобного) и органического основания (например, диизопропилэтиламина или подобного). Реакция протекает при температуре от около 0°С до примерно комнатной температуры и может протекать примерно до 2 ч до полного завершения.
Хлорангидрид кислоты соединения формулы (2) можно получить с использованием хлорирующего агента (например, тионилхлорида или оксалилхлорида или подобного) в присутствии катализатора (например, диметилформамида или подобного) и подходящего растворителя (например, толуола или подобного). Реакция протекает при температуре от комнатной или при нагревании до около 85°С и может протекать примерно до 2 ч до полного завершения.
Стадия Ь. Соединение формулы (5) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (4) с К2-Н, где К2 такой, как определено в Кратком описании изобретения, в присутствии подходящего растворителя (например, 2-пропанола или диметилсульфоксида или подобного) и подходящего органического основания (например, диизопропилэтиламина или триэтиламина или подобного). Реакция протекает при температуре от около 90 до около 140°С и может занять от около 30 мин до около 72 ч до завершения.
Стадия с. Соединение формулы (6) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (4), где Х1 предпочтительно представляет собой бром или йод, с Βι-Ζ^ где К! такой, как определено в
- 28 024391 настоящей заявке, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), в присутствии подходящего растворителя (например, диметоксиэтана или смеси диметоксиэтана и воды или подобного), подходящего неорганического основания (например, карбоната натрия или подобного) и палладиевого катализатора (например, бис-(трифенилфосфин)палладий(11) дихлорида или комплекса 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(11)дихлорида с дихлорметаном или тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) или подобного) и, необязательно, сорастворителя (например, этанола или подобного). Реакция протекает при температуре от примерно 80 до около 130°С и может занять от 20 мин до около 18 ч до завершения.
В качестве альтернативы стадию с можно осуществить путем взаимодействия соединения формулы (4) , где Х1 предпочтительно представляет собой бром или йод, с Κι-Ζ2, где Κι такой, как определено в настоящей заявке, Ζ2 предпочтительно представляет собой реагент на основе триалкилолова (реакция Стилла), в присутствии подходящего растворителя (например, диметилсульфоксида или подобного) и палладиевого катализатора (например, тетракис(трифенилфосфин)палладий(0)). Реакция протекает при температуре от около 140°С и может занять в целом до около 18 ч.
Стадия б. Соединение формулы (I) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (5) , где Х1 предпочтительно представляет собой бром или йод, с Κ^Ζμ где Κ! такой, как определено в настоящей заявке, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), в присутствии подходящего растворителя (например, диметоксиэтана или смеси диметоксиэтана и воды или подобного), неорганического основания (например, карбоната натрия или подобного) и палладиевого катализатора (например, бис-(трифенилфосфин)палладий(11) дихлорида или комплекса 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(11)дихлорида с дихлорметаном или тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) или подобного) и, необязательно, сорастворителя (например, этанола или подобного). Реакция протекает при температуре от около 80-130°С и может занять от около 20 мин до 2 ч до завершения.
Стадия е. Соединение формулы (I) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (6) с Κ2-Η, где К2 такой, как определено в настоящей заявке, в присутствии подходящего растворителя (например, 2-пропанола или диметилсульфоксида или подобного), органического основания (например, диизопропилэтиламина или триэтиламина или подобного). Реакция протекает при температуре от около 90-140°С и может занять от около 30 мин до 72 ч до завершения.
Соединения формулы (I) можно получить аналогично тому, как описано в следующей схеме реакций II.
в которой Υ, Υι, Κι, К2, К3 и К4 являются такими, как определено для формулы (I) в Кратком описании изобретения, и Х1 и Х2 представляют собой атомы галогена, Χμ в частности хлор, бром или йод, Х2, в частности хлор или фтор, и А1к представляет собой цепь низшего алкила, в частности метил.
Стадия £. Соединение формулы (8) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (7) с Κ2-Η, где Κ2 такой, как определено в настоящей заявке, по аналогии со стадией Ь.
Стадия д. Соединение формулы (9) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (8), где Х1 предпочтительно представляет собой бром или йод, с Κ^Ζμ где Κ! такой, как определено в настоящей заявке, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), по аналогии со стадией б.
Стадия 1. Соединение формулы (10) можно получить путем гидролиза сложного эфира соединения формулы (9) в присутствии подходящего растворителя (например, воды или подобного), неорганического основания (например, гидроксида натрия или подобного). Реакция протекает при комнатной температуре и может занять в целом до около 2 ч.
Стадия ΐ. Соединение формулы (I) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (10) с соединением формулы (3) в присутствии связующего реагента (такого как 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорид и гидроксибензотриазол или подобного), подходящего основания (такого как Ν-метилморфолин, диизопропилэтиламин или подобного) и подходящего растворителя (такого как дихлорметан, диметилформамид или подобного). Реакция протекает при комнатной температуре и может занять приблизительно 12 ч до завершения.
- 29 024391
Соединения формулы (I) можно получить аналогично тому, как описано в следующей схеме реакций III.
в которой Υ, Υι, К1, К2, К3 и К4 являются такими, как определено для формулы (I) в Кратком описании изобретения, и Х1 и Х2 представляют собой атомы галогена, Χι, в частности хлор, бром или йод, Х2, в частности хлор или фтор, Рго! представляет собой защитную группу, в частности тетрагидро-2Нпиран-2-ил (ТНР) или 2-(триметилсилил)этокси]метил (8ЕМ), когда К! представляет собой пиразол со свободным ΝΗ.
Стадия 1. Соединение формулы (12) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (4) с Рго!-К1-21, где К! такой, как определено в настоящей заявке, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), Рго! представляет собой, в частности, ТНР или 8ЕМ., по аналогии со стадией с.
Стадия т. Соединение формулы (13) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (12) с К2-Н, где К2 такой, как определено в настоящей заявке, по аналогии со стадией е.
Стадия п. Соединение формулы (13) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (5) с Рго!-К1^1, где К1 такой, как определено в настоящей заявке, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), Рго! представляет собой, в частности, ТНР или 8ЕМ., по аналогии со стадией б.
Стадия о. Соединение формулы (I) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (13) с агентом снятия защиты (например, тетра-н-бутиламмонийфторидом или трифторуксусной кислотой или хлористо-водородной кислотой или подобным) в присутствии подходящего растворителя (например, тетрагидрофурана или дихлорметана или подобного). Реакция протекает при комнатной температуре или температуре до около 80°С и может занять от около 2 до 24 ч до завершения.
Соединения формулы (I), где К1 представляет собой пиразол, замещенный группой Кб, можно получить аналогично тому, как описано в следующей схеме реакций ТУ.
в которой Υ, Υμ К2, К3, К4 и Кб являются такими, как определено для формулы (I) в Кратком описании изобретения, и Х1 представляет собой атом галогена, в частности бром или йод, и К6 представляет собой низший алкил, в частности метил.
Стадия р. Соединение формулы (14) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (5) с алкилвинилкетоном (например, метилвинилкетоном или подобным) в присутствии подходящего растворителя (например, диметилформамида или подобного), органического основания (например, триэтиламина или подобного) и палладиевого катализатора (например, три-орто-толилфосфинпалладийдиацетата или подобного). Реакция протекает при температуре от около 130°С и может занять до 16 ч до завершения.
Стадия с|. Соединение формулы (М) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (14) с защищенным гидразидом (например, гидразидом толуол-4-сульфоновой кислоты или подобным) в присутствии подходящего растворителя (например, этанола или подобного). Реакция протекает при температуре от около 80°С и может занять до 2 ч до завершения. Затем защитную группу удаляют ΐπ δίΐιι с использованием алкоголята (например, метоксида натрия или подобного). Снятие защиты происходит при температуре около 80°С и может занять до 48 ч до завершения.
- 30 024391
Соединения формулы (I) можно получить аналогично тому, как описано в следующей схеме реакций V.
в которой Υ, Υι, К1, К2, К3 и К4 являются такими, как определено для формулы (I) в Кратком описании изобретения, Х1 и Х2 представляют собой атомы галогена, Х1, в частности хлор, бром или йод, Х2, в частности хлор или фтор, и А1к представляет собой цепь низшего алкила, в частности метил, Рго1 представляет собой защитную группу, в частности тетрагидро-2Н-пиран-2-ил (ТНР), когда К1 представляет собой пиразол с свободным N4.
Стадия г. Соединение формулы (15) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (8), где Х1 предпочтительно представляет собой бром или йод, с Рю^К^ь где К! такой, как определено в настоящей заявке, Рго1 представляет собой, в частности, тетрагидро-2Н-пиран-2-ил (ТНР), когда К! представляет собой пиразол со свободным N4, Ζ1 предпочтительно представляет собой бороновую кислоту или сложный эфир (реакция Сузуки), по аналогии со стадией б.
Стадия δ. Соединение формулы (16) можно получить путем гидролиза сложного эфира соединения формулы (15) в присутствии подходящего растворителя (например, воды и метанола или подобного), неорганического основания (например, гидроксида натрия или подобного). Реакция протекает при комнатной температуре и может занять приблизительно 14 ч до завершения.
Стадия 1. Соединение формулы (17) можно получить путем взаимодействия соединения (16) с соединением формулы (3) в присутствии связующего реагента (такого как 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид и гидроксибензотриазол или подобного), подходящего основания (такого как Ν-метилморфолин или подобного) и подходящего растворителя (такого как тетрагидрофуран или подобного). Реакция протекает при температуре от около 25-65°С и может занять до около 2 дней до завершения.
Стадия и. Соединение формулы (I) можно получить путем взаимодействия соединения формулы (17) с агентом снятия защиты (например, хлористо-водородной кислотой или подобным) в присутствии подходящего растворителя (например, тетрагидрофурана и метанола или подобного). Реакция протекает при комнатной температуре около 2 ч до завершения.
Подробные примеры синтеза соединений формулы (I) можно найти в разделе примеры ниже. Дополнительные способы получения соединений по настоящему изобретению
Соединение по настоящему изобретению можно получить в виде фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли путем взаимодействия формы свободного основания соединения с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой. В качестве альтернативы, фармацевтически приемлемую основно-аддитивную соль соединения по настоящему изобретению можно получить путем взаимодействия формы свободной кислоты соединения с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием.
Соединения формулы (I) также можно модифицировать путем добавления соответствующих функциональных групп для усиления селективных биологических свойств. Модификации подобного рода известны в данной области техники и включают те, которые увеличивают проникновение в данную биологическую систему (например, кровь, лимфатическую систему, центральную нервную систему, семенники), увеличивают биодоступность, повышают растворимость для возможности произвести парентеральное введение (например, инъекцию, инфузию), изменяют метаболизм и/или изменяют скорость секреции. Примеры этого типа модификаций включают, но не ограничиваются этим, этерификацию, например, с полиэтиленгликолями, дериватизацию с заместителями пивалоилокси или жирными кислотами, преобразование в карбаматы, гидроксилирование ароматических колец и гетероатомное замещение в ароматических кольцах. Везде, где упоминаются соединения формулы (I) и/или Ν-оксиды, таутомеры и/или (предпочтительно фармацевтически приемлемые) соли, это включает такие модифицированные формулы, хотя предпочтительно подразумеваются молекулы формулы (I), их Ν-оксиды, их таутомеры и/или их соли.
В качестве альтернативы, формы солей соединений по настоящему изобретению можно получить с использованием солей исходных веществ или промежуточных соединений. Ввиду тесной взаимосвязи между новыми соединениями формулы (I) в свободной форме и соединениями в форме их солей, вклю- 31 024391 чая те соли, которые могут быть использованы в качестве промежуточных соединений, например в очистке или идентификации новых соединений, любую ссылку на соединения или соединение формулы (I) выше и далее в настоящей заявке следует понимать как ссылку на соединение в свободной форме и/или также на одну или несколько его солей, как это является подходящим и целесообразным, а также на один или несколько сольватов, например гидратов.
Соли получают, например, в виде кислотно-аддитивных солей, предпочтительно с органическими или неорганическими кислотами, из соединений формулы (I) с основным атомом азота, особенно в виде фармацевтически приемлемых солей. Подходящие неорганические кислоты представляют собой, например, галогеновые кислоты, такие как хлористо-водородная кислота, серная кислота или фосфорная кислота. Подходящие органические кислоты представляют собой, например, карбоновые, фосфоновые, сульфоновые или сульфаминовые кислоты, например уксусную кислоту, пропионовую кислоту, октановую кислоту, декановую кислоту, додекановую кислоту, гликолевую кислоту, молочную кислоту, фумаровую кислоту, янтарную кислоту, малоновую кислоту, адипиновую кислоту, пимелиновую кислоту, субериновую кислоту, азелаиновую кислоту, яблочную кислоту, винную кислоту, лимонную кислоту, аминокислоты, такие как глутаминовая кислота или аспарагиновая кислота, малеиновую кислоту, гидроксималеиновую кислоту, метилмалеиновую кислоту, циклогексанкарбоновую кислоту, адамантанкарбоновую кислоту, бензойную кислоту, салициловую кислоту, 4-аминосалициловую кислоту, фталевую кислоту, фенилуксусную кислоту, миндальную кислоту, коричную кислоту, метан- или этансульфоновую кислоту, 2-гидроксиэтансульфоновую кислоту, этан-1,2-дисульфоновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, 4-толуолсульфоновую кислоту, 2-нафталинсульфоновую кислоту, 1,5-нафталин-дисульфоновую кислоту, 2- или 3-метилбензолсульфоновую кислоту, метилсерную кислоту, этилсерную кислоту, додецилсерную кислоту, Ν-циклогексилсульфаминовую кислоту, Ν-метил-, Ν-этил- или Ν-пропилсульфаминовую кислоту или другую органическую протонную кислоту, такую как аскорбиновая кислота. Соли обычно могут быть преобразованы в свободные соединения, например, путем обработки подходящими основными соединениями, например карбонатами щелочных металлов, гидрокарбонатами щелочных металлов или гидроксидами щелочных металлов, обычно карбонатом калия или гидроксидом натрия.
Для целей выделения или очистки также является возможным использование фармацевтически неприемлемых солей, например пикратов или перхлоратов. Для терапевтического применения применяют только фармацевтически приемлемые соли или свободные соединения (где это применимо в форме фармацевтических препаратов), и, вследствие этого, они являются предпочтительными.
Формы свободной кислоты или свободного основания соединений по настоящему изобретению можно получить из соответствующей соли присоединения основания или кислотно-аддитивной соли соответственно. Например, соединение по настоящему изобретению в форме кислотно-аддитивной соли может быть преобразовано в соответствующее свободное основание путем обработки подходящим основанием (например, раствором гидроксида аммония, гидроксида натрия и т.п.). Соединение по настоящему изобретению в форме соли присоединения основания может быть преобразовано в соответствующую свободную кислоту путем обработки подходящей кислотой (например, хлористо-водородной кислотой и т.д.).
Соединения по настоящему изобретению в неокисленной форме можно получить из Ν-оксидов соединений по настоящему изобретению путем обработки восстанавливающим агентом (например, серой, диоксидом серы, трифенилфосфином, боргидридом лития, боргидридом натрия, трихлоридом фосфора, трибромидом или подобным) в подходящем инертном органическом растворителе (например, ацетонитриле, этаноле, водном растворе диоксана или подобном) при температуре от 0 до 80°С.
Пролекарственные производные соединений по настоящему изобретению можно получить способами, известными специалистам в данной области техники (например, подробнее см. 8аи1тег М.О., Ьапд1еу О.К., ΙΚ·ι6ο\υ ΙΡ., 8еп!ег РЮ, Ктре 1.О., Тип М.М., Ууа8 О.М. и ^οу1е Т.^. (1994) 8уп!Не818 οΓ е!οрο8^бе рЬс8рНа!е, БМΥ-4048 1: а \ν;·ι^Γ8ο1ιιΗΚ сНтса11у асШе ргобгид οΓ е!οрο8^бе. Είοοι^ Меб СНет Ье!! 4:2567-2572; и Каи!ю 1., Китри1ашеп Н., НешЬасН Т., ОБут К., ОН Ό., Билзпеп Т. и 8аνο1а^ηеη 1. (2008); Ргобгид8: бе81дп апб сНтса1 аррПса1гоп8. Ν;·ιΙ Ке\' Огид Όΐ8^ν. 7:255-70). Например, соединение по настоящему изобретению может образовывать фосфатный сложный эфир гидроксильной группы. Более конкретно, соединение по настоящему изобретению может образовывать пролекарство, как показано:
- 32 024391
Кроме того, соединение по настоящему изобретению может быть пролекарством другого соединения по настоящему изобретению. Для иллюстрации, соединение примера 36 представляет собой пролекарство соединения примера 37, и соединение примера 37 представляет собой потенциальный метаболит соединения примера 36.
Защищенные производные соединений по настоящему изобретению можно получить способами, известными специалистам в данной области техники. Если одна или несколько других функциональных групп, например карбокси, гидрокси, амино, сульфгидрил или подобные, являются защищенными или их необходимо защитить в исходном веществе, описанном в настоящей заявке, или в любом другом предшественнике, потому что они не должны принимать участие в реакции или мешают реакции, это такие группы, которые обычно используют в синтезе пептидных соединений и также цефалоспоринов и пенициллинов, а также производных нуклеиновой кислоты и сахаров. Защитные группы представляют собой такие группы, которые не присутствуют в конечных соединениях, как только их удаляют, в то время как группы, которые остаются в качестве заместителей, не являются защитными группами в том смысле, который используют в настоящей заявке, они представляют собой группы, которые добавляют на стадии исходного вещества или промежуточного соединения и удаляют с получением конечного соединения. Также в случае преобразований соединений формулы (I) в другое соединение формулы (I) защитные группы могут быть введены и удалены, если это необходимо или полезно. Защитные группы уже могут присутствовать в предшественниках и должны защищать указанные функциональные группы от нежелательных побочных реакций, таких как реакции ацилирования, этерификации, эстерификации, окисления, сольволиза и подобные реакции. Характеристикой защитных групп является то, что они легко поддаются, т.е. без нежелательных побочных реакций, удалению, как правило, при помощи реакции ацетолиза, протонолиза, сольволиза, восстановления, фотолиза или также в результате ферментативной активности, например, в условиях, аналогичных физиологическим условиям, и что они не присутствуют в конечных продуктах. Специалист знает или может легко установить, какие защитные группы являются подходящими в реакциях, указанных выше и ниже.
Защита таких функциональных групп при помощи таких защитных групп, сами защитные группы и реакции их удаления описаны, например, в стандартных справочниках, таких как 1Е.ХУ. МсОт1е, Рго1есРуе Огоирк ίη Огдашс СНешМгу. Р1епит Ргекк, Ьоибои апб №ν ΥογΕ 1973, в Т.У. Сгеепе, Рго1есРуе Огоирк ίη Огдашс БуШЬекЫ, ТЫгб ебШоп, ХУЖу, №ν ΥογΕ 1999, в ТНе Рерйбек; Уо1ите 3 (ебйогк: Е. Сгокк апб ί. Ме1епЬо£ег), Асабепис Ргекк, Ьопбоп апб №ν ΥογΕ 1981, в МеШобеп бег огдашксНеп СНеипе (МеШобк οί огдашс сНетЫНу), НоиЬеп ХУеу1, 41Н ебНгоп, Уо1ите 15/Σ, Оеогд ТЫете Уег1ад, ЗШИдаП 1974, в Η.-Ό. 1акиЬке апб Н. 1ексНеИ, Атшокаигеп, Рерйбе, РгоШпе (Атто ашбк, рерйбек, рго1етк), Уег1ад СНет1е, ХУетНет!, ОеегПе1б ВеасН апб Ваке1 1982, и в 1осНеп ЬеНтапп, СНет1е бег КоН1епНубга1е: МопокассНапбе ипб Оепуа1е (СНетЫНу οί сагЬоНубга1ек: топокассНапбек апб бепуаЦуек), Оеогд ТЫете Уег1ад, 5>Ц.Шдаг1 1974.
Соединения по настоящему изобретению могут быть легко получены или образованы в процессе осуществления способа по настоящему изобретению в виде сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений по настоящему изобретению можно получить путем перекристаллизации из смеси вода/органический растворитель с использованием органических растворителей, таких как диоксин, тетрагидрофуран или метанол.
Соединения по настоящему изобретению можно получить в виде их индивидуальных стереоизомеров путем взаимодействия рацемической смеси соединения с оптически активным разделяющим агентом с образованием пары диастереоизомерных соединений, разделения диастереомеров и выделения оптически чистых энантиомеров. В то время как растворение энантиомеров может быть осуществлено с использованием ковалентных диастереомерных производных соединений по настоящему изобретению, предпочтительными являются диссоциирующие комплексы (например, кристаллические диастереомерные соли). Диастереомеры имеют различные физические свойства (например, температуру плавления, температуру кипения, растворимость, реактивность и т.д.) и могут быть легко разделены благодаря этим различиям. Смеси диастереомеров, например, можно разделить на их индивидуальные диастереомеры при помощи фракционной кристаллизации, хроматографии, распределения растворителя и аналогичных процедур. Это разделение может происходить либо на уровне исходного соединения, либо в самом соединении формулы (I). Энантиомеры можно разделить путем образования диастереомерных солей, например путем образования соли с энантиомерно-чистой хиральной кислотой, или при помощи хроматографии, например, при помощи ВЭЖХ, с использованием хроматографических субстратов с хиральными лигандами. Оптически чистый энантиомер затем выделяют, вместе с разделяющим агентом, при помощи любых практических средств, которые не будут приводить к рацемизации. Более подробное описание методов, которые можно использовать для разделения стереоизомеров соединений из их рацемической смеси, можно найти в 1еап Ыссщек, Апбге Со11е1, §атие1 Н. ХУПеп, Епапйотегк, Κасетаΐек апб Реко1и11опк, 1оНп ХУПеу апб 8опк, Нсс., 1981.
Обобщая вышесказанное, соединения формулы (I) можно получить способом, который включает:
(a) способы, показанные на схемах реакций Σ-У; и (b) необязательно преобразование соединения по настоящему изобретению в фармацевтически при- 33 024391 емлемую соль;
(с) необязательно преобразование формы соли соединения по настоящему изобретению в несолевую форму;
(б) необязательно преобразование неокисленной формы соединения по настоящему изобретению в фармацевтически приемлемый Ν-оксид;
(е) необязательно преобразование Ν-оксидной формы соединения по настоящему изобретению в его неокисленную форму;
(ί) необязательно выделение отдельного изомера соединения по настоящему изобретению из смеси изомеров;
(д) необязательно преобразование недериватизированного соединения по настоящему изобретению в фармацевтически приемлемое пролекарственное производное; и (Ь) необязательно преобразование пролекарственного производного соединения по настоящему изобретению в его недериватизированную форму.
Поскольку получение исходных веществ практически не описано, такие соединения являются известными, или их можно получить аналогично способам, известным в данной области техники, или как описано далее в разделе примеры.
Специалисту в данной области техники будет понятно, что приведенные выше преобразования представляют собой только репрезентативные способы получения соединений по настоящему изобретению и что другие хорошо известные способы могут быть использованы аналогичным образом.
Примеры
Следующие примеры иллюстрируют изобретение, не ограничивая его объем. В представленных примерах температуры даны в градусах Цельсия. Если не указано иное, реакции протекают при комнатной температуре. Кроме того, если не указано иное, условия аналитической ВЭЖХ являются следующими.
Условие 1: СВЭЖХ-МС, колонка АссцШу ВЕН С18, 1,7 мкм, 2,1x50 мм, температура печи 40°С, элюенты: А = вода + 0,1% муравьиной кислоты и В = МеСN + 0,1% муравьиной кислоты, градиент от 20 до 100% В в течение 4,3 мин, скорость потока 0,7 мл/мин, детекция УФ/У!Б (ΌΑΌ), ЕБI (+/-).
Условие 2: ЬС-МС, колонка АзсепЬз® Ехргезз С18, 2,7 мкм, 2,1x30 мм, 50°С, элюенты: А = вода + 0,05% муравьиной кислоты + 3,75 мМ ацетата аммония и В = МеСN + 0,04% муравьиной кислоты, градиент от 5 до 95% В в течение 3,7 мин, скорость потока от 1,2 мл/мин до 1,4 мл/мин в течение 3,7 мин, детекция УФ/УШ (ΌΑΌ), ЕБI (+ /-).
Условие 3: СВЭЖХ-МС, колонка Ассцзку НББ Т3, 1,8 мкм, 2,1x50 мм, температура печи 50°С, элюенты: А = вода + 0,05% муравьиной кислоты + 3,75 мМ ацетата аммония и В = МеСN + 0,04% муравьиной кислоты, градиент от 2 до 98% В в течение 1,40 мин, затем 98% В в течение 0,75 мин, скорость потока 1,2 мл/мин, детекция УФ/У!Б (ОАО), ЕБI (+/-).
Условие 4: ВЭЖХ, колонка СЬтотоШЬ® РетЕогтапсе, КР-18е, 100x4,6 мм + предколонка 5x4,6 мм при комнатной температуре, элюенты: А = вода + 0,1% муравьиной кислоты и В = МеСN + 0,1% муравьиной кислоты, градиент от 2 до 100% В в течение 8 мин, затем 100% В в течение 2 мин, скорость потока 2,0 мл/мин, детекция УФ/У!Б (ОАО).
Условие 5: ВЭЖХ, колонка СС125/4 ШСеоШ® 100-3 С18НО, 4,0x125 мм, элюенты: А = вода + 0,1% ТРА, и В = МеСN + 0,1% ТРА, градиент от 2 до 100% В в течение 7 мин, затем 100% В в течение 2 мин и в конце от 100% до 2% В в течение 1 мин, скорость потока 1,0 мл/мин, детекция УФ 215 нм.
Условие 6: условие, аналогичное условию 3, температура печи 60°С вместо 50°С.
Условие 7: ВЭЖХ, колонка ЕсЬрзе ХЭВ С18, 5 мкм, 4,6x150 мм, температура печи 25°С, элюенты: А = вода + 0,1% Н3РО4 и В = МеСН градиент от 10% до 95% В в течение 17 мин, скорость потока 1,0 мл/мин, детекция УФ/У!Б (ΌΛΌ) 210 нм.
Условие 8: ЬС-МС, колонка РогозЬеН® 120 БВ-С18, 3,0x50 мм, 2,7 мкм, элюенты: А = вода + 0,1% ТРА и В = МеСН + 0,1% ТРА, градиент от 5% В в течение 0,5 мин, от 5 до 95% В в течение 6,5 мин, 95% В в течение 3 мин, от 95 до 5% В в течение 0,1 мин, 5% В в течение 2 мин, скорость потока 0,8 мл/мин, ИУ/УШ (ЦАЦ), ΞδΣ (+).
Далее, если не указано иное, условия препаративной ВЭЖХ являются следующими.
Условие 9: препаративная ВЭЖХ, колонка: ХВпбде С18 30x100 мм, 5 мкм; скорость потока 30 мл/мин; подвижная фаза: А = вода + 0,1% муравьиной кислоты; В = МеСН переменный градиент, от начального % В до конечного % В, и время выполнения, как определено в примерах.
Условие 10: препаративная ВЭЖХ системы СШон колонка БипРпе™ ргер С18 ОВИ, 5 мкм, 30x100 мм, элюенты: А = вода + 0,1% ТРА и В = МеСК градиент 5% В в течение 2 мин, затем от 5 до 100% В в течение 20 мин и в завершение 100% В в течение 3 мин, скорость потока 30 мл/мин, детекция УФ/УШ.
Препаративную ахиральную БРС осуществляют с использованием следующей системы: Аа1ег8 БРС ТНАК100; скорость потока 100 мл/мин; подвижная фаза: А = сверхкритический СО2; В = МеОН; переменный градиент, от начального % В до конечного % В, время выполнения и колонки, как определено в примерах. Детали для колонок:
- 34 024391 колонка ОЕАР: колонка диэтиламино (250x30 мм, 5 мкм, 60 А), Ргшсе!ои; колонка Эю1: колонка диол (250x30 мм, 5 мкм, 60 А), Ргтсе!ои.
Спектры 'Н-ЯМР записывали на 300 МГц или 400 МГц ЯМР-спектрометре, как указано. Значимые пики представлены в следующем порядке: мультиплетность (с - синглет; д - дублет; т - триплет; кв квартет; м - мультиплет; уш. С - уширенный синглет) и число протонов.
В следующих примерах используют сокращения, приведенные ниже: водн. (водный); ΌΛΌ (детектор на диодной матрице); ЭСМ (дихлорметан); Э1РЕА (диизопропил-этиламин); ЭМР (Ν,Νдиметилформамид); ОМЕ (диметоксиэтан); ЭМСО (диметилсульфоксид); бррй (1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен); экв. (эквиваленты); Е81 (ионизация электрораспылением); Е!ОАс (этилацетат); Е!ОН (этанол); Е!2О (диэтиловый эфир); ч (час); ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография); НV (высокий вакуум); 1РгОН (изопропанол); 1Рг2О (диизопропиловый эфир); ЬС (жидкостная хроматография); М (молярный); МеСN (ацетонитрил); МеОН (метанол); МеТНР (2метилтетрагидрофуран); мин (минуты); мл (миллилитры); МР (макропористый); МРЬС (жидкостная хроматография среднего давления); МС (масс-спектрометрия); М\У (микроволновый нагрев); н-ВиЫ (нбутиллитий); ИММ (Ν-метилморфолин); ИМР (Ν-метилпирролидинон); ИМК (ядерный магнитный резонанс); РЬ (полистирол); РРЬ3 (трифенилфосфин); РТРЕ (политетрафторэтилен); КМ (реакционная смесь); КТ (комнатная температура); нас. (насыщенный); с (секунды); 8РС (сверхкритическая жидкостная хроматография); 81-ТЫо1 (3-силикагель, модифицированый меркаптопропилом); 8РЕ (твердофазная экстракция); ТВАР (тетра-н-бутиламмонийфторид); ТВМЕ (метил трет-бутиловый эфир); ТРА (трифторуксусная кислота); ТНР (тетрагидрофуран); !К (время удерживания); СВЭЖХ (сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография) и υν (ультрафиолет).
Пример 1. (К)-4-(3 -Г идроксипирролидин-1-ил)-3 -(1Н-пиразол-5-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)бензамид
(К)-4-(3 -Г идроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)-3 -(1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)бензамид (стадия 1.1, 149 мг, 0,2 ммоль) добавляли в микроволновый сосуд, который плотно закрывали и продували аргоном. Затем добавляли 1 М раствор ТВАР в ТНР (2,98 мл, 2,98 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 дней. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс (40 мл), промывали насыщенным раствором NаНСО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над №ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи препаративной 8РС (колонка ПЕАР, от 25 до 30% в течение 6 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,98 мин, т^=433,3 [М+Н]+, т^=431,3 [М-Н]-; !Н-ЯМР (400 МГц, ПМ8О-б6) δ млн.д. 1,75 (уш. с, 1Н), 1,86 (уш. с, 1Н), 2,70-2,79 (м, 1Н), 3,03-3,19 (м, 2Н), 3,19-3,28 (м, 1Н), 4,20 (уш. с, 1Н), 4,73-4,92 (м, 1Н), 6,34 (д, 1=11,00 Гц, 1Н), 6,73-6,94 (м, 1Н), 7,32 (д, 1=8,80 Гц, 2Н), 7,65 (д, 1=104,42 Гц, 1Н), 7,81-7,96 (м, 4Н), 10,10 (с,1Н), 12,88 (д, 1=81,67 Гц, 1Н).
Стадия 1.1. (К)-4-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)-3-(1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5 -ил)бензамид
Суспензию (К)-3-бром-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)бензамида (стадия 1.2, 100 мг, 0,225 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола (146 мг, 0,45 ммоль), Рб(РРЬ3)2С12 (17,34 мг, 0,025 ммоль) и №-ьСО3 (119 мг, 1,123 ммоль) в смеси воды (272 мкл), ОМЕ (953 мкл) и Е!ОН (136 мкл) подвергали микроволновому облучению при 125°С в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи ТНР (3 мл), обрабатывали при помощи 81-ТНо1 (8Шсус1е, 1,44 ммоль/г, 94 мг, 0,135 ммоль), фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Кеб18ер®, 4 г, циклогексан/Е!ОАс от 40 до 100% Е!ОАс) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла. СВЭЖХ-МС (условие 1) !К=3,28 мин, т^=563,2 [М+Н]+, т^=561,2 [М-Н]-.
Стадия 1.2. (К)-3-Бром-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)бензамид
- 35 024391
Смесь 3-бром-4-фтор-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)бензамида (стадия 1.3, 100 мг, 0,264 ммоль), (К)-пирролидин-3-ола (46,1 мг, 0,529 ммоль) и ТЕА (147 мкл, 1,058 ммоль) в ИМСО (199 мкл) перемешивали при 90°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи ТВМЕ/ЕЮАс (1:1) (30 мл), промывали 0,5 М раствором НС1 (3x5 мл) и насыщенным солевым раствором (5 мл) и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФЗер®, 4 г, циклогексан/ЕЮАс-ЕЮН + 0,1% ЯН4ОН (8:2), от 30 до 80% ЕЮАс-ЕЮН + 0,1% ЯН4ОН (8:2)) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=2,83 мин, т//=444,9/446,9 [М+Н]+, т//=443,0/445,0 [М-Н]-; ’Н-ЯМР (400 МГц, ОМЗО-й..) δ млн.д. 1,80-1,92 (м, 1Н), 1,92-2,04 (м, 1Н), 3,24-3,30 (м, 1Н), 3,36-3,46 (м, 1Н), 3,60-3,72 (м, 1Н), 3,81 (дд, 1=10,51, 4,65 Гц, 1Н), 4,36 (д, 1=2,69 Гц, 1Н), 4,97 (д, 1=3, 42 Гц, 1Н), 6,93 (д, 1=8,80 Гц, 1Н), 7,34 (д, 1=8,56 Гц, 2Н), 7,80-7,90 (м, 3Н), 8,14 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 10,19 (с, 1Н).
Стадия 1.3. 3-Бром-4-фтор-Н-(4-(трифторметокси)фенил)бензамид
ЗОС12 (2,92 мл, 40,0 ммоль) и ИМР (0,5 мл) добавляли по каплям к суспензии 3-бром-4фторбензойной кислоты (1,752 г, 8 ммоль) в толуоле (20 мл) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 1 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток разбавляли при помощи ТНР (15 мл). Добавляли ИГОЕА (2,79 мл, 16,00 ммоль) и смесь охлаждали до 0°С, обрабатывали раствором 4-трифторметоксианилина (1,181 мл, 8,80 ммоль) в ТНР (5 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Реакционную смесь обрабатывали водным 1 М раствором НС1 (50 мл) и экстрагировали при помощи ТВМЕ. Объединенные экстракты промывали водным 1 М раствором НС1, водным 1 М раствором №ОН и насыщенным солевым раствором, сушили над МдЗО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, кристаллизовали из смеси н-гептан/ИСМ с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=3,18 мин, т//=377, 9/379, 9 [М+Н]+, т//=375,9/377,9 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМЗО-йА δ млн.д. 7,38 (д, 1=8, 6 Гц, 2 Н), 7,56 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 8,00-8,06 (м, 1Н), 8,32 (дд, 1=6,6, 2,2 Гц, 1Н), 10,50 (с, 1Н).
Пример 2. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-3-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Смесь ИМЕ (570 мкл), воды (163 мкл) и ЕЮН (81 мкл) добавляли к смеси (К)-5-бром-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.2, 60 мг, 0,134 ммоль), (1Н-пиразол-3-ил)бороновой кислоты (45,1 мг, 0,403 ммоль), Рй(РРЬ3)2С12 (9,44 мг, 0,013 ммоль), №-ьСО3 (42,8 мг, 0,403 ммоль) в микроволновом сосуде. Сосуд плотно закрывали, откачивали воздух/продували 3 раза аргоном и реакционную смесь подвергали микроволновому облучению при 120°С в течение 10 мин. Добавляли дополнительное количество (1Н-пиразол-3-ил)бороновой кислоты (45,1 мг, 0,403 ммоль) и реакционную смесь подвергали микроволновому облучению при 120°С в течение 30 мин, разбавляли при помощи ТНР (1 мл) и обрабатывали при помощи З1-ТЫо1 (ЗШсус1е 1,27 ммоль/г, 52,9 мг, 0,067 ммоль), фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 9, 15% в течение 0,2 мин, затем от 15 до 45% в течение 14 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
В качестве альтернативы соединение примера 2 получали путем обработки суспензии 6-((К)-3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)-Н-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.1, 68,3 г, 132 ммоль) в ИСМ (1 л) при помощи ТРА (305 мл, 3959 ммоль) при комнатной температуре в течение 5,5 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ЕЮАс (2 л), промывали насыщенным раствором NаНСО3 (3x500 мл) и насыщенным солевым раствором (2x500 мл) и сушили над №-ьЗО4. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток суспендировали в ИСМ (300 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Кристаллическое вещество фильтровали, промывали при помощи ИСМ (200 мл), сушили при пониженном давлении, растворяли в МеОН (500 мл) и обрабатывали при помощи З1-ТЫо1 (Вю1аде, 10,0 г, 13 ммоль) в течение 15 ч при 30°С. Смесь фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (силикагель, 2 кг, ИСМ/МеОН 95:5) и кристаллизовали из МеСN с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества.
Аналитические данные для примера 2: ВЭЖХ (условие 5) 1К=5,37 мин, хиральная ВЭЖХ (СШКАЬРАК® АО-Н, 250x4,6 мм, элюент: ΕЮН/МеСN (98:2), 0,5 мл/мин, ИУ 210 нм) 1К=9,62 мин, СВЭЖХ-МС
- 36 024391 (условие 1) !К=1,79 мин, т//=434,1/435,1 [М+Н]+, т//=432,1/433,1 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-б..) δ млн.д. 1,65-1,76 (м, 1Н), 1,76-1,87 (м, 1Н), 2,97 (д, 1=11,37 Гц, 1Н), 3,19-3,29 (м, 2Н), 3,34-3,48 (м, 1Н), 4,10-4,23 (м, 1Н), 4,89 (уш. с, 1Н), 6,40 (с, 1Н), 7,33 (д, 1=8,70 Гц, 2Н), 7,58/7,82 (уш. с, 1Н), 7,89 (д, 1=8,70 Гц, 2Н), 8,06 (с, 1Н), 8,77 (с, 1Н), 10,21 (с, 1Н), 12,88/13,07 (уш. с, 1Н).
Стадия 2.1. 6-((К)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Пинаколовый сложный эфир 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-бороновой кислоты (59,9 г, 214,4 ммоль), К3РО4 (105,7 г, 4 98,1 ммоль) и Рб(РРЬ3)4 (9,6 г, 8,30 ммоль) добавляли к суспензии (К)-5бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.2, 74 г, 165,8 ммоль) в толуоле (740 мл) и перемешивали при 110°С в течение 2,5 ч в атмосфере аргона. Смесь затем разбавляли при помощи Е!ОАс (2 л), промывали водой (2х 1 л) и сушили над №-ь8О4.
Растворитель выпаривали при пониженном давлении и неочищенный остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (силикагель, 2 кг, ЕЭСМ/МеОН 95:5). Полученное вещество растворяли в смеси МеОН (500 мл) и ТНР (800 мл) и обрабатывали при помощи 81-ТЫо1 (Вю!аде, 15 г, 19,5 ммоль) при комнатной температуре в течение 17 ч. Смесь фильтровали и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который кристаллизовали из МеОН, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) !К=5,99 мин, СВЭЖХ-МС (условие 6) т//=518,2 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГг, 1)\18О-б..) δ млн.д. 1,42 (уш. с, 3Н), 1,631,98 (м, 4Н), 2,20-2,37 (м, 1Н), 2,71-2,94 (м, 1Н), 3,21 (д, 1=6,65 Гц, 3Н), 3,32-3,51 (м, 1Н), 3,69-3,92 (м, 1Н), 4,08-4,24 (м, 1Н), 4,75-4,88 (м, 1Н), 4,89-5,17 (м, 1Н), 6,29-6,49 (м, 1Н), 7,32 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,59 (с, 1Н), 7,78-8,10 (м, 3Н), 8,80 (т, 1=2,54 Гц, 1Н), 10,05-10,28 (м, 1Н).
Стадия 2.2. (К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
(К)-Пирролидин-3-ол (17,1 мл, 211,2 ммоль) и ЕЭГРЕА (67,6 мл, 387,6 ммоль) добавляли к суспензии 5-бром-6-хлор-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.3, 69,6 г, 175,9 ммоль) в !РгОН (120 мл) и перемешивали при 140°С в течение 1 ч. Смесь разбавляли при помощи Е!ОАс (1 л), промывали при помощи 1 N НС1 (2х200 мл), насыщенным раствором NаΗСО3 (200 мл) и насыщенным солевым раствором (2х200 мл) и сушили над №28О4. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и продукт кристаллизовали из смеси Е!ОАс/!Рг2О с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) !к=6,58 мин, СВЭЖХ-МС (условие 6) т//=446, 0/448, 0 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-б..) δ млн.д. 1,78-2,01 (м, 2 Н), 3,55 (д, 1=11,34 Гц, 1Н), 3,643,76 (м, 1Н), 3,79-3,91 (м, 2Н), 4,33 (уш. с, 1Н), 4,97 (д, 1=3, 13 Гц, 1Н), 7,33 (д, 1=9,38 Гц, 2Н), 7,83 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 8,30-8,36 (м, 1Н), 8,66 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 10,20 (с, 1Н).
Стадия 2.3. 5-Бром-6-хлор-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Перемешиваемый раствор 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты (375 г, 1,586 моль) и ЭМР (37 мл) в толуоле (3,1 л) обрабатывали по каплям при помощи 8ОС12 (347 мл, 4,758 моль) при комнатной температуре и затем перемешивали при 85°С в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ТНР (3,1 л), охлаждали до -25°С, обрабатывали сначала при помощи ЕЭГРЕА (543 мл, 3,172 моль) и затем добавлением по каплям раствора 4-(трифторметокси)анилина (295 г, 1,665 моль) в ТНР (3,1 л). Через 30 мин при 10°С растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ТВМЕ (4 л), промывали при помощи 1 N НС1 (2х 1 л), насыщенным раствором NаΗСО3 (1 л) и насыщенным солевым раствором (2х200 мл) и сушили над №28О4. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и продукт кристаллизовали из смеси Е!ОАс/н-гептан с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого кристаллического твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,25 мин, т//=393/395/397 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-б..) δ млн.д. 7,40 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,86 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 8,73 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 8,92 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 10,69 (с, 1Н).
- 37 024391
Пример 3. (К)-6-(3 -Г идроксипирролидин-1 -ил)-5-(3 -метил-1Н-пиразол-5 -ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
(К,Е)-6-(3 -Г идроксипирролидин-1 -ил)-5 -(3 -оксобут-1-ен-1 -ил)-Ю(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид (стадия 3.1, 50 мг, 0,091 ммоль) и гидразид толуол-4-сульфоновой кислоты (34,5 мг, 0,181 ммоль) и ЕЮН (302 мкл) добавляли в микроволновый сосуд, который плотно закрывали и перемешивали при 80°С в течение 1,5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли №ЮМс (17,15 мг, 0,318 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 48 ч. Реакционную смесь подкисляли водным раствором муравьиной кислоты, фильтровали через 0,2 мкм РТРЕ мембранный фильтр и очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 9, от 20 до 50% в тчение 18 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=2,08 мин, т//=44 8,0 [М+Н]+, т0=446,0 [М-Н]-; ’Н-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,68-1,79 (м, 1Н), 1,781,90 (м, 1Н), 2,29 (уш. с, 3Н), 2,98 (д, 1=11,74 Гц, 1Н), 3,25-3,37 (м, 2 Н), 3,40-3,53 (м, 1Н), 4,21 (уш. с, 1Н), 4,83 (уш. с, 1Н), 6,13 (с, 1Н), 7,33 (д, 1=8,31 Гц, 2Н), 7,86 (д, 2Н), 8,01 (уш. с, 1Н), 8,71 (уш. с, 1Н), 10,15 (с, 1Н), 12,57 (уш. с, 1Н).
Стадия 3.1. (К,Е)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(3-оксобут-1-ен-1-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
(К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ю(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид (стадия 2.2, 250 мг, 0,560 ммоль), Рб(ОАс)2 (3,77 мг, 0,017 ммоль), три-о-толилфосфин (20,46 мг, 0,067 ммоль), бут-3ен-2-он (55,1 мкл, 0,672 ммоль) и ТЕА (102 мкл, 0,728 ммоль) добавляли в микроволновый сосуд, который плотно закрывали и продували аргоном. Добавляли ЭМР (1,87 мл) и реакционную смесь перемешивали при 130°С в течение 6 ч. Затем добавляли дополнительное количество бут-3-ен-2-она (22,96 мкл, 0,280 ммоль) и смесь перемешивали при 130°С в течение 16 ч. Реакционную смесь выливали в воду (25 мл) и экстрагировали при помощи ЭСМ (3x20 мл). Объединенные экстракты сушили над Мд8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Ксб18ср®, 12 г, циклогексан/ЕЮАсЕЮН + 0,1% NН4ОН (9:1) от 40 до 75% ЕЮАс-ЕЮН + 0,1% NН4ОН (9:1)). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который подвергали азеотропной перегонке с ксилолом и растирали в порошок с циклогексаном, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=2,39 мин, т0=436,0 [М+Н]+, т0=434,0 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,82-1,91 (м, 1Н), 1,91-2,00 (м, 1Н), 2,35 (с, 3Н), 3,43 (д, 1=11,25 Гц, 1Н), 3,59-3,67 (м, 1Н), 3,78-3,88 (м, 2Н), 4,34 (уш. с, 1Н), 4,99 (д, 1=3,18 Гц, 1Н), 6,61 (д, 1=15,89 Гц, 1Н), 7,36 (д, 1=8,31 Гц, 2Н), 7,81-7,93 (м, 1=16,14, 9,29 Гц, 3Н), 8,29 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 8,71 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
Пример 4. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(4-метил-1Н-пиразол-5-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
О1РЕА (43,9 мкл, 0,252 ммоль) добавляли в раствор 6-хлор-5-(4-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-1Н-пиразол-5-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 4.1, 55 мг, 0,114 ммоль) и (К)пирролидин-3-ола (11,96 мг, 0,137 ммоль) в 1РгОН (114 мкл) в сосуде, который плотно закрывали, и нагревали при 140°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении и неочищенный продукт очищали при помощи флэшхроматографии (колонка с силикагелем Ксб18ср®, ЕЮАс/МсОН 98:2) с получением 6-((К)-3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(4-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида в виде не совсем белой пены. Это промежуточное соединение (39 мг, 0,073 ммоль) растворяли в ЭСМ (0,8 мл), обрабатывали при помощи ТРА (0,262 мл, 3,4 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в 25 мл №-ьСО3, 10% и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении, и неочищенный продукт очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Ксб18ср®, ЭСМ/МсОН от 2 до 10% МеОН) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=4,46 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3)
- 38 024391 !К=0,92 мин, тА=448,4 [М+Н]+; 'ίί-ЯМР (400 МГц, 1)М80-сЕ) δ млн.д. 1,64-1,81 (м, 2Н), 1,86 (с, 3Н), 2,78-2,97 (м, 1Н), 3,07-3,41 (м, 3Н), 4,18 (уш. с, 1Н), 4,81 (уш. с, 1Н), 7,32 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,58 (уш. с, 1Н), 7,85 (д, 1=9,38 Гц, 2Н), 7,93 (уш. с, 1Н,) 8,73 (уш. с, 1Н), 10,14 (с, 1Н), 12,63 (уш. с, 1Н).
Стадия 4.1. 6-Хлор-5-(4-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)-^(4(трифторметокси)фенил)никотинамид
Κ3ΡΟ4 (127 мг, 0,6 ммоль) добавляли в раствор 6-хлор-5-йод-^(4(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 4.2, 89 мг, 0,2 ммоль) и 4-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (58,4 мг, 0,2 ммоль) в диоксане (1 мл) в сосуде, который продували аргоном, нагревали до 110°С и затем добавляли ΡбС12(бррί) (7,32 мг, 0,01 ммоль). Сосуд плотно закрывали и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при 110°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, растворяли в Е!0Ас и промывали насыщенным солевым раствором. Органическую фазу сушили над №2804 и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Кеб18ер®, н-гептан/Е!0Ас от 50 до 100% Е!0Ас) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,24 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,22 мин, т//=481,2 [М+Н]+.
Стадия 4.2. 6-Хлор-5-йод-^(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
ЭМЕ (0,13 мл) и 80С12 (0,734 мл, 10,05 ммоль) добавляли к смеси 6-хлор-5-йодникотиновой кислоты (1,00 г, 3,35 ммоль) и 4-(трифторметокси)анилина (0,623 мг, 3,52 ммоль) в толуоле (7 мл) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 1 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и в атмосфере аргона остаток растворяли в ТОР (7,00 мл) и ЭРЕА (1,17 мл, 6,7 ммоль), охлаждали до 15°С, обрабатывали по каплям раствором 4-(трифторметокси)анилина (0,476 мл, 3,52 ммоль) в тар (7,00 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток обрабатывали водным 1 N раствором НС1 (30 мл) и экстрагировали при помощи ТВМЕ (100 мл). Объединенные экстракты промывали насыщенным водным раствором №ьС03, (30 мл) и насыщенным солевым раствором (30 мл), сушили над №ь804 и растворитель выпаривали при пониженном давлении, пока не начиналась кристаллизация. Продукт растирали в порошок с н-гептаном, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества. вЭжХ (условие 4) !К=6,36 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,23 мин, т//=441,1 [М-Н]-.
Пример 5. (К)-5-(4-Фтор-1Н-пиразол-5 -ил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)^-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
ЭРЕА (71,9 мкл, 0,412 ммоль) добавляли в раствор 6-хлор-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)^-(4(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 5.1, 75 мг, 0,187 ммоль) и (К)-пирролидин-3-ола (19,97 мг, 0,225 ммоль) в ^Ρ^ΟΗ (187 мкл) в сосуде, который плотно закрывали и нагревали при 140°С в течение 1 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в Е!0Ас и промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №-ь804 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Кеб18ер®, ЭСМ/Ме0Н от 2 до 10% МеОН) с получением указанного в заголовке соединения в виде белой пены. ВЭЖХ (условие 4) !К=4,73 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,93 мин, т//=452,4 [М+Н]+; 1Η-ΗΜΡ (400 МГц, 1)М80-сЕ) δ млн.д. 1,64-1,95 (м, 2 Н), 3,00 (д, 1=11,34 Гц, 1Н), 3,18-3,51 (м, 3Н), 4,22 (уш. с, 1Н), 4,86 (уш. с, 1Н), 7,32 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,77-8,11 (м, 4Н), 8,76 (уш. с, 1Н), 10,17 (с, 1Н), 12,90 (уш. с., 1Н).
Стадия 5.1. 6-Хлор-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)^-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Ρ6(ΡΗ3Ρ)4 (17,33 мг, 0,015 ммоль) добавляли в раствор 6-хлор-5-йод-^(4(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 4.2, 133 мг, 0,3 ммоль) и 4-фтор-5-(трибутилстаннил)-1Н- 39 024391 пиразола (101 мг, 0,270 ммоль) в ЭМСО (1 мл) в сосуде в атмосфере аргона. Сосуд плотно закрывали и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 18 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над Ыа2§О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФ§ер®, н-гептан/Е1ОАс от 10% до 50% ЕЮАс) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=5,5 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,05 мин, ιη/ζ=399,2 [М-Н]-.
Пример 6. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Смесь (К)-5 -бром-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.2, 60 мг, 0,134 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (42 мг, 0,202 ммоль), Рй(РРЬ3)2С12 (9,44 мг, 0,013 ммоль), Ыа2СО3 (42,8 мг, 0,403 ммоль), ОМЕ (570 мкл), воды (163 мкл) и ЕЮН (81 мкл) в микроволновом сосуде плотно закрывали, откачивали воздух/продували аргоном и подвергали микроволновому облучению при 120°С в течение 10 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи ТНР (1 мл), обрабатывали при помощи §1-ТЫо1 (§Шсус1е, 1,44 ммоль/г, 46,7 мг, 0,067 ммоль), фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 9, 25% в течение 0,2 мин затем от 15 до 45% в течение 14 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. ЬС-МС (условие 2) 1К=1,61 мин, ιη/ζ=448,2/449,2 [М+Н]+, ιη/ζ=446,1 [М-Н]-; 'Н-НМР (400 МГц, 1)М§О-сЕ) δ млн.д. 1,71-1,80 (м, 1Н), 1,81-1,91 (м, 1Н), 2,98 (д, 1=11,25 Гц, 1Н), 3,25-3,39 (м, 2Н), 3,44-3,53 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 4,22 (с, 1Н), 4,84 (с, 1Н), 7,34 (д, 1=8,56 Гц, 2Н), 7,53 (с, 1Н), 7,84 (д, 1=5,38 Гц, 2 Н), 7,86-7,88 (м, 1Н), 7,94 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 8,67 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 10,14 (с, 1Н).
Пример 7. (§)-6-(3 -(Г идроксиметил)пирролидин-1 -ил)-5-(1Н-пиразол-5 -ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным описанному в примере 2, с использованием (§)-5-бром-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 7.1) и (1Н-пиразол-3-ил)бороновой кислоты с получением твердого вещества белого цвета. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=1,89 мин, т/ζ 448,0 [М+Н]+, т/ζ 446,1 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\1§О-сЕ) δ млн.д. 1,48-1,64 (м, 1Н), 1,77-1,90 (м, 1Н), 2,15-2,28 (м, 1Н), 3,03 (дд, 1=11,25, 6,85 Гц, 1Н), 3,22 (уш. с, 2Н), 3,25-3,31 (м, 2Н), 3,34-3,39 (м, 1Н), 4,62 (уш. с, 1Н), 6,39 (уш. с, 1Н), 7,34 (д, 1=8,56 Гц, 2Н), 7,51-7,84 (м, 1Н), 7,83-7,90 (м, 2Н), 8,03 (с, 1Н), 8,68-8,79 (м, 1Н), 10,19 (с, 1Н), 12,87-13,12 (м, 1Н).
Стадия 7.1. (§)-5-Бром-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Смесь 5-бром-6-хлор-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.3, 500 мг, 1,264 ммоль), (§)-бета-пролинолгидрохлорида (226 мг, 1,643 ммоль), ЭРЕА (662 мкл, 3,79 ммоль) и 1РгОН (1,945 мл) в плотно закрытом сосуде подвергали микроволновому облучению при 140°С в течение 60 мин. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток обрабатывали водным 0,5 М раствором НС1 (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали 0,5 М раствором НС1 (10 мл) и водой, сушили над Мд§О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением продукта, который растирали в порошок с циклогексаном, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 1) 1К=2,76 мин, тт^=460,0/462,0 [М+Н]+, т^=458,0/460,0 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)М§О-сЕ) δ млн.д. 1,59-1,76 (м, 1Н), 1,92-2,04 (м, 1Н), 2,26-2,44 (м, 1Н), 3,37-3,50 (м, 2Н), 3,56 (дд, 1=11,00, 7,34 Гц, 1Н), 3,67-3,85 (м, 3Н), 4,71 (уш. с, 1Н), 7,35 (д, 1=8,56 Гц, 2 Н), 7,85 (д, 1Н), 8,34 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 8,68 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
- 40 024391
Пример 8. (8)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамид
К3РО4 (41,3 мг, 0,195 ммоль) добавляли в раствор (8)-5-бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 8.1, 30 мг, 0,067 ммоль) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (36,2 мг, 0,13 ммоль) в толуоле (0,32 мл) в сосуде, который продували аргоном. Добавляли Рк(РРН3)4 (3,75 мг, 0,032 ммоль). Сосуд плотно закрывали и нагревали при 110°С в течение 18 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФ8ер®, ЭСМ/МеОН от 2 до 5% МеОН) с получением ^(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-((8)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида, часть которого (21 мг, 0,039 ммоль) растворяли в ЭСМ (0,5 мл), обрабатывали при помощи ТРА (0,141 мл, 1,82 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в 10% водный раствор №-ьСО3 (10 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты сушили над №ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФ8ер®, ЭСМ/МеОН от 2 до 5% МеОН) с получением указанного в заголовке соединения. ВЭЖХ (условие 4) 1К=4,49 мин, хиральная ВЭЖХ (СШКАЬСЕЬ® ОЭ-Н, 250x4,6 мм, элюент: н-гептан/ЕЮН/МеОН (85:10:5), 1 мл/мин, ИУ ПАП, 1К=13,32 мин, СВЭЖХМС (условие 3) 1К=0,92 мин, т//=450,3 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-сЕ) δ млн.д. 1,65-1,7 6 (м, 1Н), 1,77-1,92 (м, 1Н), 2,86-2,97 (м, 1Н), 3,18-3,35 (м, 2Н), 3,34-3,47 (м, 1Н), 4,10-4,24 (м, 1Н), 4,66-4,93 (м, 1Н), 6,28-6,42 (м, 1Н), 7,31 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,85 (д, 1=8,99 Гц, 3Н), 7,96-8,05 (м, 1Н), 8,64-8,81 (м, 1Н), 10,17 (с, 1Н), 12, 80-13, 14 (м, 1Н).
Стадия 8.1. (8)-5-Бром-Х-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамид
ЭРЕА (190 мкл, 1,1 ммоль) добавляли в раствор 5-бром-6-хлор-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 9.3, 206 мг, 0,5 ммоль) и (8)-пирролидин-3-ола (52,3 мг, 0,6 ммоль) в 1РгОН (500 мкл) в сосуде, который плотно закрывали и нагревали при 140°С в течение 1 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали 0,5 М водным раствором НС1 и насыщенным солевым раствором, сушили над №ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФ8ер®, н-гептан/ЕЮАс от 20 до 100% ЕЮАс) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=5,59 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,17 мин, т//=462,0/464,1 [М+Н]+.
Пример 9. (К)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамид
Смесь (К)-5-Бром-Х-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2, 100 мг, 0,216 ммоль) и 5-(4, 4, 5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола (215 мг, 0,663 ммоль), Рк(РРН3)2С12 (17 мг, 0,024 ммоль), №2СО3 (115 мг, 1,081 ммоль), ОМЕ (917 мкл), воды (262 мкл) и ЕЮН (131 мкл) в микроволновом сосуде плотно закрывали, откачивали воздух/продували 3 раза аргоном и подвергали микроволновому облучению при 125°С в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи 2 мл ОМЕ, перемешивали с 81-ТЫо1 (8Шсус1е 1,44 ммоль/г, 90 мг, 0,130 ммоль) в течение 3 ч. Смесь центрифугировали и супернатант фильтровали через 0,45 мкм РТ'Е фильтр, и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеФ8ер®, 12 г, циклогексан/ЕЮАс от 40 до 100% ЕЮАс) с получением защищенного промежуточного соединения в виде бесцветного масла. Затем добавляли этилендиамин (96 мкл, 1,428 ммоль) и ТВА' 1 М в ТН' (1,428 мл, 1,428 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80-85°С в течение 5 дней. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ЕЮАс (40 мл), промывали 3 раза насыщенным водным раствором NаНСО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над №ь8О4 и растворитель вы- 41 024391 паривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной δРС (колонка ПЕАР, от 25 до 30% в течение 6 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
В качестве альтернативы соединение примера 9 получали путем добавления ТРА (168 мл, 2182 ммоль) к раствору ОТ(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-((К)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 9.1, 31,3 г, 5Д,6 ммоль) в ЭСМ (600 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в Е!ОАс (1,5 л), промывали насыщенным раствором NаНСΟз (3x500 мл) и насыщенным солевым раствором (500 мл), сушили над №-^ОД и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который суспендировали в ЭСМ (300 мл), перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, фильтровали, промывали при помощи ЭСМ (200 мл), сушили и очищали при помощи хроматографии (силикагель, 1 кг, ЭСМ/МеОН 95:5). Остаток растворяли в МеОН (500 мл) и обрабатывали при помощи δ^-ΤЬ^о1 (Вю1аде, 5,0 г, 6,5 ммоль) в течение 16 ч при 25°С. Смолу отфильтровывали, растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток кристаллизовали из ΜеСN с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества.
В качестве альтернативы, соединение примера 9 получали путем добавления по каплям водного раствора НС1 (7,7 мл 6 М) к раствору ^(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-((К)-3-гидроксипирролидин-1ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 9.1, 3,8 г, 7,12 ммоль) в МеОН (20 мл) и ТНР (10 мл) при охлаждении (ниже 35°С). Смесь перемешивали при 22°С в течение 2 ч и затем добавляли к охлажденному (10°С) 1,2 М раствору №ЮН (22 мл). Во время добавления температуру поддерживали ниже 30°С и рН поддерживали в пределах 9-10. Реакционную смесь затем перемешивали в течение 30 мин при 30°С. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, пока желаемое соединение не осаждалось. Осадок фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.
Аналитические данные для примера 9: ВЭЖХ (условие 5) !К=5,5Д мин, хиральная ВЭЖХ (СШКАЬСЕЬ® ОЭ-Н, 250хД,6 мм, элюент: н-гептан/ЕЮН/МеОН (85:10:5), 1 мл/мин, ИУ 210 нм) !К=10,17 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,93 мин, т//=Д50,3 [М+Н]+, т//=Д9Д,1 [М+муравьиная кислота-Н]-; 1Н-ЯМР (Д00 МГц, ^ΜδΟ-а6) δ млн.д. 1,65-1,76 (м, 1Н), 1,76-1,87 (м, 1Н), 2,93 (д, 1=11,73 Гц, 1Н), 3,19-3,29 (м, 2Н), 3,35-3,51 (м, 1Н), Д,10-Д,25 (м, 1Н), Д,89 (уш. с, 1Н), 6,Д1 (уш. с, 1Н), 7,33 (д, 1=8,50 Гц, 2Н), 7,57/7,83 (уш. с, 1Н), 7,90 (д, 1=8,50 Гц, 2Н), 8,07 (уш. с, 1Н), 8,77 (уш. с, 1Н), 10,23 (с, 1Н), 12,97/13,15 (уш. с, 1Н).
Стадия 9.1. ^(Д-(Хлордифторметокси)фенил) -6-((К) -3 -гидроксипирролидин-1 -ил) -5-(1(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
1-(Тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(Д,Д,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (29,6 г, 102 ммоль), К3РОД (51,6 г, 236 ммоль) и Рй(РРЬ3)Д (Д,55 г, 3,93 ммоль) добавляли к суспензии (К)-5-бром№(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2, 36,Д г, 79 ммоль) в толуоле (360 мл) в атмосфере аргона и смесь перемешивали при 110°С в течение Д ч. Реакционную смесь выливали в насыщенный солевой раствор (500 мл) и экстрагировали при помощи Е!ОАс (2x1 л). Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (500 мл), сушили над №-^ОД и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи хроматографии (колонка с силикагелем, 1,5 кг, ЭСМ/МеОН 95:5) с получением темно-желтой пены, которую растворяли в МеОН/ОСМ (1 л смеси 3:1) и обрабатывали при помощи δ^-ΤЬ^о1 (Вю1аде, 35 г, Д5,5 ммоль) в течение 17 ч при 30°С. Смолу отфильтровывали и растворитель выпаривали при пониженном давлении, пока желаемое соединение кристаллизовалось. Продукт фильтровали, промывали при помощи МеОН и сушили с получением указанного в заголовке соединения.
В качестве альтернативы, соединение стадии 9.1 получали путем добавления Д(хлордифторметокси)анилина (16,6 г, 8Д,9 ммоль), NΜΜ (21,7 г, 212,1 ммоль), гидроксибензотриазолгидрата (НОВРН2О, 11,9 г, 77,77 ммоль) и 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорида (ЕНСРНС1, 20,9 г, 109,0 ммоль) к раствору 6-((К)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Нпиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотиновой кислоты (стадия 9.Д, 29,83 г, 70,7 ммоль) в ТНР (271 мл). Смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 25°С и затем при 65°С в течение 16 ч. После охлаждения реакционной смеси до 35°С добавляли ЕОС.ТНС1 (13,3 г, 69,Д ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч при 35°С, затем снова при 65°С в течение 16 ч. После охлаждения реакционной смеси до 35°С добавляли воду (150 мл), ТНР удаляли при пониженном давлении, добавляли Е!ОАс (180 мл) и смесь перемешивали при 35°С в тчение 1 ч. Два слоя разделяли и водную фазу затем экстрагировали при помощи Е!ОАс (60 мл). Объединенные органические слои промывали водой (90 мл), насыщенным соле- Д2 024391 вым раствором (90 мл). Растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением коричневого твердого вещества, которое очищали при помощи колоночной хроматографии (силикагель, ЭСМ/МеОН от 40:1 до 20:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества.
Аналитические данные для стадии 9.1. ВЭЖХ (условие 5) 1К=6,12 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,06 мин, т//=533,2 [М+Н]+; ’Н-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,36-2,02 (м, 7 Н), 2,23-2,38 (м, 1Н), 3,08-3,29 (м, 2Н), 3,32-3,52 (м, 2Н), 3,73-3,93 (м, 1Н), 4,13-4,25 (м, 1Н), 4,80-4,90 (м, 1Н), 4,95-5,17 (м, 1Н), 6,33-6,50 (м, 1Н), 7,33 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,61 (д, 1=1,56 Гц, 1Н), 7,86 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,97-8,11 (м, 1Н), 8,82 (с, 1Н), 10,13-10,25 (м, 1Н).
Стадия 9.2. (К)-5-Бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамид
(К)-Пирролидин-3-ол (9,55 г, 109,6 ммоль) и ОГРЕЛ (35,1 мл, 201,3 ммоль) добавляли к суспензии 5-бром-6-хлор-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 9.3, 37,7 г, 91,5 ммоль) в 1РгОН (65 мл) и перемешивали при 140°С в течение 1 ч. Добавляли Е1ОАс (700 мл) и раствор промывали 1 Ν раствором НС1 (2x200 мл), насыщенным раствором NаНСОз (200 мл) и насыщенным солевым раствором (2x200 мл), сушили над №28О4 и раствор концентрировали при пониженном давлении, пока не начиналась кристаллизация. Добавляли н-гептан (1 л) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, фильтровали и промывали при помощи 1Рг2О (500 мл) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=6,68 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,10 мин, т//=462,2/464,2 [М+Н]+; ’Н-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-б6) δ млн.д. 1,78-2,01 (м, 2Н), 3,55 (д, 1=11,34 Гц, 1Н), 3,66-3,75 (м, 1Н), 3,79-3,93 (м, 2 Н), 4,34 (уш. с, 1Н), 4,98 (д, 1=3,13 Гц, 1Н), 7,32 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,84 (д, 1=8,99 Гц, 2 Н), 8,33 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 8,66 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
Стадия 9.3. 5-Бром-6-хлор-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)никотинамид
ЭМЕ (2,55 мл, 33,0 ммоль) и §ОС12 (24,08 мл, 330 ммоль) добавляли к суспензии 5-бром-6хлорникотиновой кислоты (26 г, 110 ммоль) в толуоле (220 мл) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 1 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ТНР (220 мл) и охлаждали до -16°С. Добавляли ЭРЕА (38,4 мл, 220 ммоль) с последующим добавлением по каплям раствора 4-(хлордифторметокси) анилина (22,35 г, 115 ммоль) в ТНР (220 мл) в течение 15 мин. Суспензию перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ТВМЕ (700 мл), промывали 1 Ν раствором НС1 (2x200 мл), насыщенным раствором NаНСОз (200 мл) и насыщенным солевым раствором (2x200 мл), сушили над №'Ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением продукта, который кристаллизовали из Е1ОАс-н-гептан с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=7,77 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,24 мин, т/2=409,1/411,1/413,1 [М+Н]+; Ή-НМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 7,38 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,85 (д, 1=8,99 Гц, 2 Н), 8,72 (уш. с, 1Н), 8,92 (уш. с, 1Н), 10,68 (с, 1Н).
Стадия 9.4. 6-((К)-3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5ил)никотиновая кислота
Водный раствор №ЮН (180 мл 2,6 М) добавляли в раствор метил 6-((К)-3-гидроксипирролидин-1ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотината (стадия 9.5, 111 г, 299 ммоль) в МеОН (270 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч. МеОН упаривали при пониженном давлении и водный остаток обрабатывали насыщенным солевым раствором (90 мл), экстрагировали при помощи МеТНР дважды (540 мл + 360 мл) и объединенные органические слои промывали водой (90 мл). Добавляли МеТНР к объединенным водным слоям, двухфазную смесь охлаждали до 0°С и подкисляли (рН 4-4,5) водным раствором НС1 (18%), и экстрагировали при помощи МеТНР. Объединенные органические экстракты промывали насыщенным солевым раствором и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который перекристаллизовывали из смеси Е1ОАс/ТВМЕ (1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого веще- 43 024391 ства. ВЭЖХ (условие 7) 1К=4,74 мин, ЬС-МС (условие δ мл 8) ГК=3,37 мин, ιη/ζ=359,0 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ млн.д. 1,44 (уш. с, 2Н), 1,51 (д, 1=11,54 Гц, 2 Н), 1,64-1,86 (м, 4Н), 1,90 (уш. с, 1Н), 2,31 (д, 1=9,29 Гц, 1Н), 2,77 (уш. с, 1Н), 3,10 (уш. с, 1Н), 3,21 (д, 1=8,78 Гц, 2Н), 3,27-3,51 (м, 4Н), 3,87 (д, 1=11,54 Гц, 1Н), 4,16 (уш. с, 1Н), 4,75-4,93 (м, 1Н), 5,04 (уш. с, 1Н), 6,35 (д, 1=17,32 Гц, 1Н), 7,51-7,64 (м, 1Н), 7,64-7,82 (м, 1Н), 8,67 (д, 1=2,26 Гц, 1Н), 12,58 (уш. с, 1Н).
Стадия 9.5. Метил 6-((К)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)никотинат
Смесь (К)-метил 5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотината (стадия 9.6, 90 г, 299 ммоль), пинаколинового эфира 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-бороновой кислоты (103,9 г, 373,6 ммоль), К3РО4 (126,9 г, 597,7 ммоль), Рй(РР13)2С12 (6,29 г, 8,97 ммоль) в толуоле (900 мл) перемешивали при 92°С и в течение 16 ч. После охлаждения смеси до комнатной температуры раствор промывали водой (450 мл), 5% раствором NаΗСО3 (4 30 мл) и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который использовали без дальнейшей очистки на следующей стадии. ВЭЖХ (условие 7) 1К=6,929 мин, ЬС-МС (условие 8) 1К=4,30 мин, ιη/ζ=373,0 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ млн.д. 1,19-1,28 (м, 1Н), 1,35-1,63 (м, 4Н), 1,63-1,86 (м, 3Н), 1,89 (уш. с, 1Н), 2,12-2,39 (м, 1Н), 3,11 (уш. с, 1Н), 3,18-3,48 (м, 4Н), 3,78 (с, 4 Н), 3,88 (д, 1=11,54 Гц, 1Н), 4,08-4,24 (м, 1Н), 4,86 (дд, 1=18,20, 2,89 Гц, 1Н), 5,02 (д, 1=8,28 Гц, 1Н), 6,39 (уш. с, 1Н), 7,58 (д, 1=1,25 Гц, 1Н), 7,78 (уш. с, 1Н), 8,69 (т, 1=2,01 Гц, 1Н).
Стадия 9.6. (К)-Метил 5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинат
Э1РЕА (105,3 г, 142,2 мл, 814,4 ммоль) добавляли в раствор метил-5-бром-6-хлорникотината (85 г, 339,5 ммоль) и (К)-пирролидин-3-ола (54,2 г, 441,2 ммоль) в изопропилацетате и реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 14 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растворяли в толуоле (850 мл), промывали водой (127 мл) и насыщенным солевым раствором (127 мл) и концентрировали при пониженном давлении пока не начиналось осаждение. В перемешиваемую смесь, которую затем охлаждали до 0°С, медленно добавляли н-гептан (340 мл) при 22°С и продукт фильтровали, промывали смесью толуол/н-гептан (1:1,5) и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 7) !К=8,54 мин, ЬС-МС (условие 8) 1,.4,62 мин, ш/ζτ=300, 9/302, 9 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ млн.д. 1,77-1,99 (м, 2Н), 3,57 (д, 1=11,54 Гц, 1Н), 3,72 (ддд, 1=11,11, 7,97, 3,26 Гц, 1Н), 3,78 (с, 3Н), 3,81-3,90 (м, 2Н), 4,26-4,39 (м, 1Н), 4,99 (уш. с, 1Н), 8,11 (д, 1=2,01 Гц, 1Н), 8,56 (д, 1=1,76 Гц, 1Н).
Пример 10. (8)-^(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Смесь (8)-5-бром-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 10.1, 119 мг, 0,25 ммоль), 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (139 мг, 0,5 ммоль), Рй(РР13)2С12 (0,018 г, 0,025 ммоль), №-ьСО3 (0,106 г, 1,000 ммоль), ОМЕ (1,061 мл), воды (0,303 мл) и ЕЮН (0,152 мл) добавляли в микроволновый сосуд, который плотно закрывали, откачивали воздух/продували 3 раза аргоном, затем подвергали микроволновому облучению при 125°С в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи ОМЕ (2 мл) и перемешивали в течение ночи с 81-Т1йо1 (8Шсус1е 1,43 ммоль/г, 0,105 г, 0,150 ммоль). Смесь центрифугировали и супернатант фильтровали через 0,45 мкм РТРЕ фильтр и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеЛ8ер®, 12 г, циклогексан/ЕЮАс от 20 до 90% ЕЮАс) с получением защищенного промежуточного соединения, которое обрабатывали смесью ОСМ (2,5 мл) и ТРА (0,963 мл, 12,50 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток обрабатывали 7 N раствором ΝΗ в МеОН (2 мл, 14 ммоль). Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали при помощи препаративной 8РС (колонка ОЕАР, изократическое элюирование 28% в течение 9 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла. СВЭЖХ-МС (условие 1) !К=1,87 мин, т/ζ 464,1 [М+Н]+, т/ζ 462,1 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц,
- 44 024391
ЭМ8О-б6) δ млн.д. 1,49-1,65 (м, 1Н), 1,75-1,97 (м, 1Н), 2,14-2,30 (м, 1Н), 3,04 (дд, 1=11,37, 6,97 Гц, 1Н), 3,14-3,26 (м, 2Н), 3,26-3,29 (м, 1Н), 3,35-3,46 (м, 2Н), 4,60 (т, 1=5,14 Гц, 1Н), 6,39 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 7,33 (д, 1=9,05 Гц, 2 Н), 7,76 (уш. с, 1Н), 7,84-7,94 (м, 2 Н), 8,04 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 8,74 (с, 1Н), 10,18 (с, 1Н), 12,87 (уш. с, 1Н).
Стадия 10.1. (8)-5-Бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-И-(4-(хлордифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 9.3) и (8)-1пирролидин-3-ил-метанола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,82 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,14 мин, т//=476,2/478,3 [М+Н]+.
Пример 11. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)-Ы-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 9, с использованием (К)-5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Н-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 11.1) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола с получением твердого вещества белого цвета. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,97 мин, т/ζ 450,2 [М+Н]+, п/ζ 448,1 [М-Н]-; !Н-НМР (400 МГц, 1)\18О-сЕ) δ млн.д. 1,67-1,78 (м, 1Н), 1,78-1,88 (м, 1Н), 2,94 (д, 1=11,92 Гц, 1Н), 3,19-3,34 (м, 2 Н), 3,38-3,50 (м, 1Н), 4,20 (уш. с, 1 Н), 4,814,93 (м, 1Н), 6,33-6,45 (м, 1 Н), 7,83 (м, 1=113,40, 8,20 Гц, 3Н), 7,93 (д, 1=8,66 Гц, 2 Н), 7,99-8,08 (м, 1Н), 8,70-8,81 (м, 1Н), 10,30 (с, 1Н), 12,90-13,16 (м, 1Н).
Стадия 11.1. (К)-5 -Бром-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-И-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
ЭЮЕА (73 мкл, 0,42 ммоль) добавляли в раствор 5-бром-6-хлор-И-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 11.2, 123 мг, 0,3 ммоль) и (К)-пирролидин-3-ола (31,4 мг, 0,36 ммоль) в 1РгОН (300 мкл) в сосуде, который плотно закрывали и нагревали при 140°С в течение 1 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растирали в порошок с 1Рг2О, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=5, 9 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,21 мин, т//=464,1 [М+Н]+.
Стадия 11.2. 5-Бром-6-хлор-Н-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
Добавляли ЭМЕ (0,12 мл) с последующим медленным добавлением 8ОС12 (0,73 мл, 10 ммоль) к смеси 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты (473 мг, 2 ммоль) в толуоле (5 мл) и реакционную смесь затем перемешивали при 80°С в течение 1 ч. После охлаждения при комнатной температуре толуол упаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ТНЕ (0,4 мл). Добавляли ЭЮЕА (0,7 мл, 4 ммоль) и раствор охлаждали до 0°С в атмосфере азота. Затем по каплям добавляли 4-трифторметилсульфаниланилин (438 мг, 2,2 ммоль) в ТНЕ (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи ТВМЕ (50 мл), обрабатывали 1 М раствором НС1 и экстрагировали при помощи ТВМЕ. Объединенные экстракты промывали 1 М водным раствором №ЮН и насыщенным солевым раствором, сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении и продукт кристаллизовали из смеси ТВМЕ/н-гексан с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,63 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,33 мин, т//=411,1 [М+Н]+.
- 45 024391
Пример 12. (Б)-6-(3-(Гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)-Н-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 10, с использованием (Б)-5-бром-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-Н-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 12.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением бледно-желтого порошка. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,99 мин, т/ζ 464,2 [М+Н]+, т// 46)2,2 [М-Н]-; !Н-ЯМР (400 МГц, 1)\1БО-сЕ) δ млн.д. 1,48-1,64 (м, 1 Н), 1,76-1,93 (м, 1 Н), 2,15-2,27 (м, 1 Н), 3,04 (дд, 1=11,49, 7,09 Гц, 1Н), 3,18-3,26 (м, 2 Н), 3,27-3,29 (м, 1Н), 3,32-3,41 (м, 2 Н), 4,60 (уш. с, 1Н), 6,39 (д, 1=1,71 Гц, 1Н), 7,67 (д, 1=8,56 Гц, 2 Н), 7,80 (уш. с, 1Н), 7,87-7,99 (м, 2Н), 8,04 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 8,74 (уш. с, 1Н), 10,28 (с, 1Н), 12,76-13,20 (м, 1Н).
Стадия 12.1. (Б)-5-Бром-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-Н-(4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
ЭРЕА (4,89 мл, 28,0 ммоль) добавляли в раствор 5-бром-6-хлор-Н-(4((трифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 11.2, 2,88 г, 7,0 ммоль) и (Б)-1-пирролидин-3-илметанола (1,156, 8,40 ммоль) в !РгОН (7,0 мл) в сосуде, который плотно закрывали и затем нагревали при 140°С в течение 1 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали водным 0,5 М раствором НС1 и насыщенным солевым раствором, сушили над №2БО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растирали в порошок с 1Рг2О, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,17 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,20 мин, ιιι/ζ 4Ж2/4Ж2 [М+Н]+.
Пример 13. (Κ)-Ν-(3 -Фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Смесь (К) -N-(3 -фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5 -(1 -((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 13.1, 64 мг, 0,11 ммоль), этилендиамина (37,2 мкл, 0,55 ммоль) и 1 М раствора ТВАР в ТНР (1,651 мл, 1,651 ммоль) в микроволновом сосуде плотно закрывали и перемешивали при 80-85°С в течение 20 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в Е!ОАс (40 мл), промывали 3 раза насыщенным водным раствором НаНСО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над №2БО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи препаративной БРС (колонка ПюЕизократическая хроматография 27%) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,95 мин, т//=452,3 [М+Н]+, тб/ 450,3 [М-Н]-; !Н-ЯМР (400 МГц, ЭМБО-б6) δ млн.д. 1,64-1,78 (м, 1Н), 1,78-1,89 (м, 1Н), 2,95 (д, 1=11,74 Гц, 1Н), 3,29 (уш. с, 2Н), 3,37-3,49 (м, 1Н), 4,20 (уш. с, 1Н), 4,83 (уш. с, 1Н), 6,35-6,42 (м, 1Н), 7,52 (т, 1=9,05 Гц, 1Н), 7,62 (д, 1=9,29 Гц, 1Н), 7,74 (уш. с, 1Н), 7,98 (дд, 1=13,20, 2,20 Гц, 1Н), 8,02 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 8,74 (д, 1=1,71 Гц, 1Н), 10,31 (уш. с, 1Н), 12,95 (уш. с, 1Н).
Стадия 13.1. (Κ)-Ν-(3 -Фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5 -(1 -((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
Смесь (К)-5-бром-N-(3 -фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)никотинамида (стадия 13.2, 100 мг, 0,215 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола (104 мг, 0,321 ммоль), Рб(РРЬ3)2С12 (15,2 мг, 0,022 ммоль), №-ьСО3 (91 мг, 0,862 ммоль), ОМЕ (914 мкл), воды (261 мкл) и ЕЮН (131 мкл) в микроволновом сосуде плотно закрывали, откачивали воздух/продували 3 раза аргоном и подвергали микроволновому облучению при 125°С в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи ОМЕ (3 мл), затем пере- 46 024391 мешивали в течение ночи с 81-ТНо1 (8Шсус1е 1,44 ммоль/г, 90 мг, 0,129 ммоль). Смесь центрифугировали и супернатант фильтровали через 0,45 мкм РТРЕ фильтр и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной 8РС (колонка ПЕАР, от 15 до 20% в течение 6 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого прозрачного масла. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,28 мин, μ/ζ=581,2 [М+Н]+, т/ζ 580,4 [М-Н]-.
Стадия 13.2. (К)-5-Бром-Ы-(3 -фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-Ы-(3-фтор-4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 13.3) и (К)пирролидин-3-ола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,82 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,17 мин, т/ζ 4 64,1 [М+Н]+.
Стадия 13.3. 5-Бром-6-хлор-Ы-(3 -фтор-4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2 с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 3-фтор-4-трифторметокси-анилина с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,43 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,29 мин, πι/ζ=413 [М-Н]-.
Пример 14. (8)-Ы-(3-Фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)-5(1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 10, с использованием (8)-5-бром-Ы-(3-фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1ил)никотинамида (стадия 14.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением бледно-желтого порошка. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,96 мин, т/ζ 466,2 [М+Н]+, т/ζ 464,2 [М-Н]-. Ή-ЯМР (400 МГц, ЦМ8О-б6) δ млн.д. 2,77 (с, 3Н), 3,38-3,61 (м, 4Н), 4,61 (уш. с, 1Н), 6,47 (с, 1Н), 7,68 (д, 1=8,56 Гц, 2Н), 7,83 (уш. с, 1Н), 7,93 (д, 1=8,80 Гц, 2Н), 8,15 (уш. с, 1Н), 8,71 (уш. с, 1Н), 10,36 (с, 1Н), 12,83-13,15 (м, 1Н).
Стадия 14.1. (8)-5-Бром-Ы-(3-фтор-4-(трифторметокси)фенил)-6-(3-(гидроксиметил)пирролидин-1ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-Ы-(3-фтор-4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 13.3) и (8)-1пирролидин-3-ил-метанола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,99 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,18 мин, т®=478,1/480,1 [М+Н]+.
Пример 15. (К)-Ы-(3 -Фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 13, с использованием (К)-Ы-(3 -фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5-( 1 -((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 15.1) с получением беловатого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,00 мин, πι/ζ=468,3 [М+Н]+, πι/ζ=466,1 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ8О-б6) δ млн.д. 1,68-1,78 (м, 1Н), 1,79-1,89 (м, 1Н), 2,96 (д, 1=11,74 Гц, 1Н), 3,24-3,30 (м, 2Н), 3,40-3,49 (м, 1Н), 4,20 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 4,84 (уш. с, 1Н), 6,38 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 7,66-7,78 (м, 3Н), 7,98 (дд, 1=11,98, 1,96 Гц, 1Н), 8,03 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 8,75 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 10,24-10,72 (м, 1Н), 12,5913,22 (м, 1Н).
- 47 024391
Стадия 15.1. (К)-Ы-(3 -Фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1-ил)-5-( 1 -((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 13.1, с использованием (К)-5-бром-Ы-(3-фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамида (стадия 15.2) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола с получением желтой смолы. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,33 мин, т^=598,4 [М+Н]+, т^=596,5 [М-Н]-.
Стадия 15.2. (К)-5-Бром-Ы-(3 -фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-Ы-(3-фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 15.3) и (К)пирролидин-3-ола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,11 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,23 мин, т^=480,1 [М+Н]+.
Стадия 15.3. 5-Бром-6-хлор-Ы-(3 -фтор-4-((трифторметил)тио)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 3-фтор-4-трифторметилсульфаниланилина с получением белого кристаллического вещества. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,71 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,34 мин, ιη/ζ=429 [М-Н]-.
Пример 16. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(перфторэтил)фенил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамид
Смесь (К)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(перфторэтил)фенил)-5-(1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 16.1, 68 мг, 0,114 ммоль) и этилендиамина (38,4 мкл, 0,569 ммоль) помещали в микроволновый сосуд и плотно закрывали в атмосфере аргона, добавляли 1 М ТВАР в ТНР (1,707 мл, 1,707 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 20 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ЕЮАс (40 мл), промывали 3 раза насыщенным водным раствором ЫаНСО3 и насыщенным солевым раствором, сушили над Ыа2§О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной §РС (колонка Ою1, изократическая хроматография 27% в течение 9 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,98 мин, т^=468,2 [М+Н]+, т^=466,2 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ§О-с)6) δ млн.д. 1,68-1,78 (м, 1Н), 1,83 (дд, 1=8,80, 4,40 Гц, 1Н), 2,96 (д, 1=11,74 Гц, 1Н), 3,19-3,29 (м, 2Н), 3,403,50 (м, 1Н), 4,20 (уш. с, 1Н), 4,83 (уш. с, 1Н), 6,39 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 7,65 (д, 1=8,80 Гц, 2Н), 7,77 (уш. с, 1Н), 8,02 (д, 1=9,05 Гц, 2Н), 8,05 (д, 1=2,45 Гц, 1Н), 8,76 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 10,33 (с, 1Н), 12,91 (уш. с, 1Н).
Стадия 16.1. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-Н-(4-(перфторэтил)фенил)-5-(1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
Смесь (К)-5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(перфторэтил)фенил)никотинамида (стадия 16.2, 100 мг, 0,208 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола (135 мг, 0,416 ммоль), Рй(РРЬ3)2С12 (14,62 мг, 0,021 ммоль), №-ьСО3 (88 мг, 0,833 ммоль), ОМЕ (883 мкл), воды (252 мкл) и ЕЮН (126 мкл) помещали в микроволновой сосуд, который плотно закрывали, откачивали воздух/продували 3 раза аргоном и подвергали микро- 48 024391 волновому облучению при 125°С в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавляли при помощи 3 мл ОМЕ, затем перемешивали в течение ночи с 81-0101 (8Шсус1е 1,44 ммоль/г, 87 мг, 0,125 ммоль) в течение ночи. Смесь центрифугировали и супернатант фильтровали через 0,45 мкм ΡΤΡΈ фильтр и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи препаративной 8РС (колонка ЭОк от 15 до 20% в течение 6 мин) с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветной прозрачной смолы. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,31 мин, т//=598,4 [М+Н]+, т/ζ 596,3 [М-Н]-.
Стадия 16.2. (К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)^-(4-(перфторэтил)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-^(4-(перфторэтил)фенил)никотинамида (стадия 16.3) и (К)-пирролидин-3ола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,96 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,20 мин, тА-480,2 [М+Н]+.
Стадия 16.3. 5-Бром-6-хлор-^(4-(перфторэтил)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 4-пентафторэтил-анилина с получением белого кристаллического вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=6, 61 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,32 мин, т//=42 9 [М-Н]-.
Пример 17. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)^-(4-(пентафторсульфанил)фенил)-5-(1Н-пиразол5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-5 -бром-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-^(4-(пентафторсульфанил)фенил)никотинамида (стадия 17.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола с получением бежевого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=4,68 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,92 мин, тА=476,3 [М+Н]+; 'ίί-ЯМР (400 МГц, 1)М80-сР) δ млн.д. 1,64-1,91 (м, 2Н), 2,93 (д, 1=11,73 Гц, 1Н), 3,19-3,34 (т, 2Н), 3,36-3,49 (м, 1Н), 4,12-4,24 (м, 1Н), 4,81 (д, 1=3,13 Гц, 1Н), 6,38 (с, 1Н), 7,73-7,89 (м, 3Н), 7,92-8,09 (м, 3Н), 8,73 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 10,37 (с, 1Н), 12,82-13,17 (м, 1Н).
Стадия 17.1. (К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)^-(4-(пентафторсульфанил)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-^(4-(пентафторсульфанил)фенил)никотинамида (стадия 17.2) и (К)пирролидин-3-ола с получением твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,16 мин, т//=490,1 [М+Н]+.
Стадия 17.2. 5-Бром-6-хлор-^(4-(пентафторсульфанил)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 4-аминофенилсерного пентафторида с получением оранжевого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,43 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,27 мин, т//=435,3/437,2 [М+Н]+.
- 49 024391
Пример 18. (К)-^(4-((Хлордифторметил)тио)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-5-бром-^(4-((хлордифторметил)тио)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамида (стадия 18.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением беловатого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К4,94 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,99 мин, т//=466,3 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-с1..) δ млн.д.
1.65- 1,88 (м, 2 Н), 2,86-2,99 (м, 1Н), 3,19-3,33 (м, 2Н), 3,36-3,51 (м, 1Н), 4,13-4,23 (м, 1Н), 4,76-4,90 (м, 1Н), 6,31-6,42 (м, 1Н), 7,65 (д, 1=8,21 Гц, 2Н), 7,76-7,84 (м, 1Н), 7,92 (д, 1=8, 60 Гц, 2Н), 7,98-8,08 (м, 1Н),
8.66- 8,82 (м, 1Н), 10,28 (с, 1Н), 12,82-13,14 (м, 1Н).
Стадия 18.1. (К)-5-Бром-^(4-((хлордифторметил)тио)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-^(4-((хлордифторметил)тио)фенил)никотинамида (стадия 18.2) и (К)пирролидин-3-ола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,97 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,19 мин, т/г==478,2/480,1 [М+Н]+.
Стадия 18.2. 5-Бром-6-хлор-^(4-((хлордифторметил)тио)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 4-((хлор-дифторметил)тио)анилина (стадия 18.3) с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !к=6,78 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,32 мин, т/ζ 425 [М-Η]-.
Стадия 18.3. 4-((Хлордифторметил)тио)анилин
К раствору 4-нитрофенилхлордифторметилсульфида (полученного, как описано в ЭЕ2845997, 627, 67,5 г, 0,28 моль) в этаноле (270 мл) и воды (68 мл), перемешиваемому при 72°С, тремя порциями в течение 10 мин добавляли концентрированный раствор НС1 (3,4 мл, 41,5 ммоль) и порошок железа (203 г, 3,63 моль). Реакционную смесь перемешивали при 82°С в течение 30 мин, фильтровали через СеШе® (Е!ОН), растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением желтого масла, которое растворяли в ЭСМ, и промывали насыщенным раствором NаΗСОз и насыщенным солевым раствором. Органическую фазу сушили над Мд8О4, фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде желтого масла, которое дистиллировали (температура кипения 88-92°С, 0,9 мм рт. ст.) и фильтровали через СеШе®, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого масла. Ή-ЯМР (300 МГЦ, СЭСЕ) δ млн.д. 3,98 (уш. с, 2Н), 6,67 (дд, 2Н), 7,43 (дд, 2 Н).
Пример 19. (К)-6-(3-Г идроксипирролидин-1-ил)^-(4-(перфторэтокси)фенил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-^(4-(перфторэтокси)фенил)никотинамида (стадия 19.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола с получением беловатого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) !к=4,86 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,97 мин, т/ζ 484,4 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-сЕ) δ млн.д. 1,62-1,92 (м, 2Н), 2,94 (д, 1=1,00 Гц, 1Н), 3,18-3,34 (м, 2Н), 3,37-3,51 (м, 1Н), 4,13-4,22 (м, 1Н), 4,70-4,91 (м, 1Н), 6,37 (уш. с, 1Н), 7,31 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,86 (м, 1=9,00 Гц, 3Н), 8,01 (уш. с, 1Н), 8,65-8,83 (м, 1Н), 10,17 (с, 1Н), 12,8413,11 (м, 1Н).
Стадия 19.1. (К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)^-(4-(перфторэтокси)фенил)никотинамид
- 50 024391
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.2, с использованием 5-бром-6-хлор-Ы-(4-(перфторэтокси)фенил)никотинамида (стадия 19.2) и (К)-пирролидин3-ола с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,01 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,17 мин, т//=496,2 [М+Н]+.
Стадия 19.2. 5-Бром-6-хлор-Н-(4-(перфторэтокси)фенил)никотинамид
Р
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.3, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 4-(перфторэтокси)анилина с получением не совсем белого кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,73 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,30 мин, 111//4441 [М-Н]-.
Пример 20. (К)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-3-(1Н-пиразол-5ил)бензамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-3-бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)бензамида (стадия 20.1) и пинаколинового эфира 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-бороновой кислоты с получением беловатого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,99 мин, т//=449,0 [М+Н]+, тХ=493,0 [М+муравьиная кислота-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ИМЗО-й6) δ млн.д. 1,67-1,79 (м, 1Н), 1,80-1,92 (м, 1Н), 2,72 (д, 1=10,88 Гц, 1Н), 3,03-3,18 (м, 2Н), 3,19-3,30 (м, 1Н), 4,19 (уш. с, 1Н), 4,77-4,92 (м, 1Н), 6,22-6,42 (м, 1Н), 6,76-6,93 (м, 1Н), 7,31 (д, 1=8,56 Гц, 2Н), 7,45-7,81 (м, 1 Н), 7,83-7,95 (м, 4Н), 10,12 (с, 1 Н), 12,71-13,12 (м, 1Н).
Стадия 20.1. (К)-3-Бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)бензамид
Смесь 3-бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-фторбензамида (1 г, 2,53 ммоль), (К)пирролидин-3-ола (0,331 г, 3,80 ммоль), ТЕА (0,706 мл, 5,07 ммоль) и ИМСО (2,53 мл) перемешивали при 90°С в течение 20 ч. Реакционную смесь обрабатывали 0,5 М раствором НС1 (50 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали 0,5 М раствором НС1, насыщенным водным раствором NаНСОз и насыщенным солевым раствором, сушили над №2ЗО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэшхроматографии (колонка с силикагелем КеФЗер®, 40 г, циклогексан/ЕЮАс, от 1 до 4,5% ЕЮАс). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растирали в порошок в циклогексане, с получением указанного в заголовке продукта в виде белого аморфного твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,15 мин, т//=462,9 [М+Н]+, тХ=460,9 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМЗО-й6) δ млн.д. 1,81-1,90 (м, 1Н), 1,92-2,03 (м, 1Н), 3,27 (дд, 1=10,39, 1,10 Гц, 1Н), 3,36-3,44 (м, 1 Н), 3,62-3,71 (м, 1Н), 3,81 (дд, 1=10,45, 4,71 Гц, 1Н), 4,32-4,40 (м, 1Н), 4,99 (д, 1=3,42 Гц, 1Н), 6,93 (д, 1=8,80 Гц, 1Н), 7,33 (д, 1=9,05 Гц, 2Н), 7,82-7,91 (м, 3Н), 8,14 (д, 1=2,20 Гц, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
Стадия 20.2. 3-Бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-фторбензамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 1.3, с использованием 3-бром-4-фторбензойной кислоты и 4-(хлордифторметокси)анилина с получением беловатого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,25 мин, т//=394,0 [М+Н]+, т//=391,9 [М-Н]-; 1НЯМР (400 МГц, ИМЗО-й6) δ млн.д. 7,37 (д, 1=9, 17 Гц, 2Н), 7,57 (т, 1=8,68 Гц, 1Н), 7,84-7,91 (м, 2Н), 8,03 (ддд, 1=8,62, 4,83, 2,32 Гц, 1Н), 8,32 (дд, 1=6,60, 2,20 Гц, 1Н), 10,52 (с, 1Н).
Пример 21. (З)-6-(3-(Аминометил)пирролидин-1-ил)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(1Н- 51 024391 пиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (8)-трет-бутил((1-(3-бром-5-((4-(хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-пиридин-2ил)пирролидин-3-ил)метил)карбамата (стадия 21.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) Ц=4,15 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) Ц=0,78 мин, т//=4б3,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ΌΜ8Θ-ά6) δ млн.д. 1,50-1,62 (м, 1Н), 1,91 (д, 1=6,26 Гц, 1Н), 2,27 (с, 1Н), 2,72 (д, 1=7,04 Гц, 2Н), 3,04-3,16 (м, 3Н), 3,30 (уш. с, 2Н), 3,47 (дд, 1=11,34, 7,04 Гц, 1Н), 6,38 (д, 1=1,96 Гц, 2Н), 7,31 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,64-7,91 (м, 2Н), 8,05 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,72 (д, 1=1,95 Гц, 1Н), 10,19 (с, 1 Н), 12,86-13,01 (м, 1Н).
Стадия 21.1. (8)-трет-Бутил((1-(3-бром-5-((4-(хлордифторметокси)фенил)-карбамоил)пиридин-2ил)пирролидин-3 -ил)метил)карбамат
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 8.1, с использованием 5-бром-6-хлор-Х-(4-(хлордифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 9.3) и третбутилового эфира (К)-1-пирролидин-3-илметил-карбаминовой кислоты с получением кристаллического твердого вещества. ВЭЖХ (условие 4) 1в=6,09 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 0=1,36 мин, ш//=577.2 [М+Н]+.
Пример 22. (К)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-4-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-3-(3-метил-1Нпиразол-5-ил)бензамид
3-Метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (стадия 23.1, 128 мг, 0,329 ммоль), К3РО4 (140 мг, 0,658 ммоль) и Рй(РРЬ3)4 (15,22 мг, 0,013 ммоль) добавляли к раствору (К)-3-бром-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-(3-гидроксипирролидин-1ил)бензамида (стадия 20.1, 80 мг, 0,165 ммоль) в толуоле (1,5 мл) в атмосфере аргона и реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, остаток растворяли в ЭСМ (4 мл) и обрабатывали при помощи ТРЛ (0,507 мл, 6,58 ммоль), перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь обрабатывали насыщенным водным раствором Ыа2СО3 (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над Ыа28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 10 - от 20 до 80% В в течение 20 мин). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли, обрабатывали насыщенным водным раствором Ыа2СО3 и МеСЫ выпаривали при пониженном давлении. Водный остаток экстрагировали при помощи ЭСМ и объединенные экстракты сушили над Ыа28О4, фильтровали и фильтрат упаривали при пониженном давлении с получением остатка, который кристаллизовали из смеси ЭСМ/н-гексан с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 0=6,41 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) ΐκ=1,03 мин, ш//=463 [М+Н]+; 1НЯМР (400 МГц, ПМ8О-с16) δ млн.д. 1,67-1,78 (м, 1Н), 1,84 (с, 1Н), 2,16-2,30 (м, 3Н), 2,74 (д, 1=10,56 Гц, 1Н), 3,04-3,33 (м, 3Н), 4,14-4,23 (м, 1Н), 4,76-4,87 (м, 1Н), 6,07 (с, 1Н), 6,73-6,86 (м, 1Н), 7,29 (д, 1=8,21 Гц, 2Н), 7,78-7,90 (м, 1=8,99 Гц, 4Н), 10,07 (с, 1Н), 12,34-12,56 (м, 1Н).
Пример 23. (К)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(3-метил-1Нпиразол-5-ил)никотинамид
3-Метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4, 4, 5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразол (стадия 23.1, 150 мг, 0,359 ммоль), К3РО4 (147 мг, 0,692 ммоль) и Рй(РРЬ3)4 (15,98 мг, 0,014 ммоль) добавляли к раствору (К)-5-бром-Х-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамида (стадия 9.2, 80 мг, 0,173 ммоль) в толуоле (1,5 мл) в атмосфере аргона и реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 2 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в ЭСМ (1,5 мл), обрабатывали при помощи ТРА (0,533 мл, 6,92 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь обрабатывали насыщенным водным
- 52 024391 раствором №-ьСО3 (20 мл) и экстрагировали при помощи Е1ОАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над №ь8О.-| и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэшхроматографии (колонка с силикагелем, 12 г, ЭСМ/МеОН от 99:1 до 92:8) и кристаллизовали из смеси ЭСМ/н-гексан с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=5,92 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,94 мин, т/ζ 464,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,67-1,89 (м, 2Н), 2,19-2,31 (м, 3Н), 2,98 (д, 1=10,95 Гц, 1Н), 3,24-3,35 (м, 2Н), 3,393,52 (м, 1Н), 4,16-4,25 (м, 1Н), 4,80-4,90 (м, 1Н), 6,11-6,17 (м, 1Н), 7,32 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,87 (д, 1=8,99 Гц, 2 Н), 7,97-8,06 (м, 1Н), 8,66-8,78 (м, 1Н), 10,16 (с, 1Н), 12,51-12,70 (м, 1Н).
Стадия 23.1. 3-Метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)-1Н-пиразол
Смесь 3-метилпиразола (3,0 г, 35,4 ммоль), 3,4-дигидро-2Н-пирана (4,97 мл, 53,2 ммоль) и ТРА (0,02 мл, 0,260 ммоль) перемешивали при 85°С в течение 6 ч в атмосфере аргона. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли NаН 60% в минеральном масле (0,061 г, 1,524 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь очищали при помощи перегонки из сосуда в сосуд с получением 3-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразола (температура кипения 150-170°С/12 мбар). Раствор н-ВиЫ в н-гексане (3,38 мл 1,6 М раствора, 5,41 ммоль) добавляли по каплям в течение 10 мин к раствору 3-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразола (1,0 г, 5,41 ммоль) в ТНР (12 мл) при -70°С в атмосфере азота и реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, и затем обрабатывали по каплям 2-метокси-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксабороланом (0,898 г, 5,69 ммоль) и перемешивали при -70°С в течение 1 ч. Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры, обрабатывали при помощи н-гексана и продукт фильтровали, растворяли в воде (10 мл) и подкисляли до рН 6 водным раствором лимонной кислоты (10%). Воду упаривали при пониженном давлении и водный остаток экстрагировали при помощи Е1ОАс, сушили над №-ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке продукта в виде желтой смолы. СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,56 мин, т//=211,2 [М+Н]+.
Пример 24. (К)-Ы-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-3-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)-4-(3гидроксипирролидин-1 -ил)бензамид
Смесь ^(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-фтор-3-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)бензамида (стадия 24.1, 62 мг, 0,147 ммоль), К-3-гидроксипирролидина (0,031 мл, 0,206 ммоль) и ТЕА (0,062 мл, 0,442 ммоль) в ЭМСО (0,5 мл) перемешивали при 100°С в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е1ОАс (30 мл), обрабатывали насыщенным водным раствором №-ьСО3 (20 мл) и экстрагировали при помощи Е1ОАс. Объединенные экстракты промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над М8О4, и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 10). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли, обрабатывали насыщенным водным раствором №38О3 и МеСN удаляли при пониженном давлении. Водный остаток экстрагировали при помощи ЭСМ и объединенные экстракты сушили над №-ь8О3 и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в ЭСМ и обрабатывали при помощи н-гексана с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=6,61 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,01 мин, т/ζ 467,3 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,69-1,95 (м, 2Н), 2,79 (д, 1=10,56 Гц, 1Н), 3,063,20 (м, 2Н), 3,22-3,35 (м, 1Н), 4,13-4,30 (м, 1Н), 4,79-4,96 (м, 1Н), 6,75-6,92 (м, 1Н), 7,31 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,86 (м, 1=9,38 Гц, 5 Н), 10,11 (с, 1Н), 12,67-13,12 (м, 1Н).
Стадия 24.1. №(4-(Хлордифторметокси)фенил)-4-фтор-3-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)бензамид
Смесь 3-бром-Н-(4-(хлордифторметокси)фенил)-4-фторбензамида (стадия 20.2, 200 мг, 0,497 ммоль), 4-фтор-5-(трибутилстаннил)-1Н-пиразола (211 мг, 0,472 ммоль) и Рб(РРН3)4 (28,7 мг, 0,025 ммоль) в ЭМСО (1,5 мл) в плотно закрытом сосуде перемешивали при 100°С в течение 20 ч в атмосфере аргона. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е1ОАс (30 мл), обрабатывали насыщенным водным раствором №-ьСОз (20 мл) и экстрагировали при помощи Е1ОАс. Объединенные экстракты промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над №28О4 и растворитель выпарива- 53 024391 ли при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикателем, 12 г, н-гексан/ЕЮАс от 95:5 до 6:4) с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=7,20 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,12 мин, т//=400,1 [М+Н]+.
Пример 25. (К)-Ю(4-(Хлордифторметокси)фенил)-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 5, с использованием 6-хлор-Ю(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 25.1) и (К)-пирролидин-3-ола с получением белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 0=4,89 мин, хиральная ВЭЖХ (СШКАЬСЕЬ® ОО-Н, 250x4,6 мм, элюент: н-гептан/ЕЮН/МсОН (85:10:5), 1 мл/мин, ИУ 210 нм) 1К 9,34 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0, 96 мин, т// 468,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,67-1,92 (м, 2Н), 3,00 (д, 1=11,73 Гц, 1Н), 3,19-3,33 (м, 2Н), 3,43 (м, 1=7,00 Гц, 1Н), 4,22 (уш. с, 1Н), 4,87 (уш. с, 1Н), 7,31 (д, 1=8,60 Гц, 2 Н), 7,85 (д, 1=8,99 Гц, 2 Н), 7,90-8,10 (м, 2 Н), 8,77 (уш. с, 1Н), 10,18 (с, 1Н), 12,83-13,19 (м, 1Н).
Стадия 25.1. 6-Хлор-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 13.1, с использованием 6-хлор-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-йодникотинамида (стадия 25.2) и 4-фтор-5(трибутилстаннил)-1Н-пиразола с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=5,69 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,09 мин, т//=415 [М-Н]-; Ή-ЯМР (400 МГц, 1)МСО-сР) δ млн.д.
Стадия 25.2. 6-Хлор-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-йодникотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 11.2, с использованием 6-хлор-5-йодникотиновой кислоты и 4-(хлордифторметокси)анилина с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,47 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,26 мин, т//=456,8 [М-Н]-.
Пример 26. (К)-^(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(3(трифторметил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамид
К3РО4 (135 мг, 0,635 ммоль), 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-3-(трифторметил)-1Н-пиразол-5илбороновую кислоту (112 мг, 0,424 ммоль) и Рб(РРН3)4 (12,24 мг, 10,59 мкмоль) добавляли к раствору (К)-5-бром-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2, 100 мг, 0,212 ммоль) в толуоле (2 мл) и реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 2 ч в атмосфере аргона. Реакционную смесь фильтровали через НуГ1о®, промывали водой и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 12 г, ЭСМ/ЕЮН от 99:1 до 94:6). Полученное промежуточное соединение растворяли в ЭСМ (2 мл), обрабатывали при помощи ТРА (0,462 мл, 5,99 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли при помощи ЕЮАс (20 мл), обрабатывали насыщенным водным раствором №-ьСО3 (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 4 г, ЭСМ/ЕЮН от 99:1 до 9:1). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растирали в смеси ЭСМ/н-гексан, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=6,545 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,10 мин, т//=518,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ млн.д. 1,71-1,95 (м, 2Н), 2,94 (д, 1=11,34 Гц, 1Н), 3,24 (м, 2Н), 3,44 (м, 1Н), 4,17-4,32 (м, 1Н), 4,91 (уш. с, 1Н), 6,88 (с, 1Н), 7,34 (д, 1=8,21 Гц, 2Н), 7,86 (д, 1=9,38 Гц, 2Н), 8,12 (с, 1Н), 8,81 (с, 1Н), 10,17 (с, 1Н), 13,94 (с, 1Н).
- 54 024391
Пример 27. (Κ)-N-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-метил-1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 2.1, с использованием (Κ)-5-бром-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2) и 1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) ΐΚ=5,25 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) ΐΚ=0,98 мин, т//=464,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ8О-б6) δ млн.д. 1,65-1,89 (м, 2Н), 2,87-3,00 (м, 1Н), 3,09-3,29 (м, 3Н), 3,59 (с, 3Н), 4,19 (уш. с, 1Н), 4,87 (д, 1=3,13 Гц, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 7,27-7,36 (м, 2Н), 7,50 (дд, 1=1,76, 0,98 Гц, 1Н), 7,78-7,88 (м, 2Н), 8,00 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,78 (дд, 1=2,35, 1,17 Гц, 1Н), 10,15 (с, 1Н).
Пример 28. (Κ)-N-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-метил-1Нпиразол-3-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 2.1, с использованием (Κ)-5-бром-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2) и 1-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) ΐΚ=5,16 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) ΐΚ=0,98 мин, т//=464 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ИМ8О-б6) δ млн.д. 1,64-1,90 (м, 2Н), 2,85-3,00 (м, 1Н), 3,06-3,26 (м, 3Н), 3,59 (с, 3Н), 4,19 (уш. с, 1Н), 4,87 (д, 1=2,74 Гц, 1Н), 6,39 (с, 1Н), 7,31 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,50 (дд, 1=1,76, 0,98 Гц, 1Н), 7,84 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 8,01 (д, 1=2,74 Гц, 1Н), 8,78 (дд, 1=2,54, 0,98 Гц, 1Н), 10,15 (с, 1Н).
Пример 29. (Κ)-N-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-5-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(3гидроксипирролидин-1 -ил)никотинамид
М раствор №-ьСО3, (0,375 мл, 0,75 ммоль) добавляли в раствор (Ю-5-бром-№(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 9.2, 116 мг, 0,25 ммоль) и 1-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола (161 мг, 0,5 ммоль) в ИМЕ (1,0 мл) в атмосфере аргона. Затем добавляли РбС12 (брр^(9,15 мг, 0,013 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в ЕЮАс и промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №-ь8О.-| и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в ИСМ (1,4 мл), охлаждали до 0°С, затем обрабатывали при помощи ТРА (0,77 мл, 10 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в водный 10% раствор №-ьСО3, (15 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем РебШер*, ИСМ/МеОН, от 2 до 10% МеОН) с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) ΐΚ=4,33 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) ίΚ=0,88 мин, т/ζ 494 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ8О-б6) δ млн.д. 1,67-1,88 (м, 2Н), 2,96 (д, 1=11,73 Гц, 0 Н), 3,24-3,37 (м, 2Н), 3,41-3,53 (м, 1Н), 3,75 (кв., 1=5,73 Гц, 2Н), 4,04-4,25 (м, 4Н), 4,81 (д, 1=3,52 Гц, 1Н), 4,86-4,94 (м, 1Н), 7,31 (д, 1=8,21 Гц, 2Н), 7,53-7,59 (м, 1Н), 7,79-7,89 (м, 3Н), 7,93 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,65 (дд, 1=2,35, 0,78 Гц, 1Н), 10,15 (с, 1Н).
Пример 30. (Κ)-N-(4-(1,1-Дифторэтокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5ил)никотинамид
К3РО4 (113 мг, 0,532 ммоль), 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4, 5, 5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (99 мг, 0,355 ммоль) и Рб(РРН3)4 (10,24 мг, 8,86 мкмоль) добавляли к раствору (Κ)-5-бром-N-(4-(1,1-дифторэтокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)никотинамида (стадия 30.1, 80 мг, 0,177 ммоль) в толуоле (1,5 мл) в атмосфере аргона и реакционную смесь перемешивали при 110°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи ЕЮАс (20 мл), обрабатывали насыщенным раствором NаΗСО3 (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили при помощи №-ь8О4 и растворитель выпа- 55 024391 ривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 12 г, ЭСМ/ЕЮН от 97:3 до 95:5) с получением Ν-(4-(1,1дифторэтокси)фенил)-6-((К)-3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5 -(1 -(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол5-ил)никотинамида (66 мг, 0,129 ммоль), который растворяли в ЭСМ (1,5 мл) и обрабатывали при помощи ТРА (0,546 мл, 7,09 ммоль) и перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли при помощи ЕЮАс (20 мл), обрабатывали насыщенным раствором NаНСОз (25 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс (20 мл). Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (20 мл), сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (условие 10). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли, обрабатывали при помощи 0,5 г NаНСОз и МеСN упаривали при пониженном давлении. Водный остаток экстрагировали при помощи ЭСМ с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=5,42 мин, СВЭЖХМС (условие 3) 1К=0,82 мин, т//=430,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, НМ8О-к6) δ млн.д. 1,68-1,87 (м, 2Н), 1,93 (т, 1=13,67 Гц, 3Н), 2,94 (д, 1=11,71 Гц, 1Н), 3,15-3,33 (м, 2Н), 3,38-3,48 (м, 1Н), 4,19 (уш. с, 1Н), 6,37 (с, 1Н), 7,15 (д, 1=9,37 Гц, 2Н), 7,65-7,83 (м, 1=9,37 Гц, 3 Н), 8,03 (д, 1=2,34 Гц, 1Н), 8,73 (д, 1=2,34 Гц, 1Н).
Стадия 30.1. (К)-5-Бром-Ы-(4-(1,1-дифторэтокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамид
Смесь 5-бром-6-хлор-Ы-(4-(1,1-дифторэтокси)фенил)никотинамида (стадия 30.2, 700 мг, 1,752 ммоль), (К)-пирролидин-3-ола (0,170 мл, 2,102 ммоль) и ЭРЕА (0,673 мл, 3,85 ммоль) и 1РгОН (2 мл) в плотно закрытом сосуде нагревали до 120°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи ЕЮАс (80 мл), обрабатывали 10% лимонной кислотой (40 мл; рН~4) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (2x40 мл), сушили над №-ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который промывали при помощи Е12О и н-гексана, и кристаллы сушили с получением указанного в заголовке продукта в виде бежевого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=6,4 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,02 мин, т//=442,1/444, 0 [М+Н]+.
Стадия 30.2. 5-Бром-6-хлор-Н-(4-(1,1-дифторэтокси)фенил)никотинамид
Оксалилхлорид (653 мкл, 7,46 ммоль) добавляли к смеси 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты (1,2 г, 4,97 ммоль) и ЭМЕ (20 мкл, 0,258 ммоль) в ЭСМ (40 мл) в атмосфере азота и реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Растворитель выпаривали, остаток растворяли в ЭСМ (10 мл) и снова выпаривали досуха. Остаток растворяли в ТНЕ (30 мл), добавляли ЭРЕА (1,737 мл, 9,95 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до -15°С. Добавляли по каплям 4-(1,1дифторэтокси)анилин (стадия 30.3, 0,932 г, 5,22 ммоль) в ТНЕ (10 мл) в течение 15 мин и реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток разбавляли при помощи ЕЮАс (100 мл), обрабатывали 10% лимонной кислотой (60 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным водным раствором №-ьСО3, (50 мл) и насыщенным солевым раствором (2x50 мл), сушили над №ь8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который суспендировали в н-гексане, фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке продукта в виде бежевого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=7,3 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,16 мин, т//=391/393 [М+Н]+.
Стадия 30.3. 4-(1,1-Дифторэтокси)анилин
Раствор 1-(1,1-дифторэтокси)-4-нитробензола (стадия 30.4, 2,95 г, 13,94 ммоль) в ЕЮН (100 мл) гидрировали (Νί Ренея 1,0 г; 26,5 ч при комнатной температуре). Реакционную смесь фильтровали через Нуйо® и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного указанного в заголовке продукта в виде коричневого масла. ВЭЖХ (условие 5) 1К=4,5 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,74 мин, т//=174,1 [М+Н]+.
- 56 024391
Стадия 30.Д. 1-(1,1-Дифторэтокси)-Д-нитробензол
Д-Нитроацетофенон (2,Д5 г, 1Д,5Д ммоль) и НР-пиридин (10,11 мл, 116 ммоль) добавляли к смеси ХеР2 (Д,92 г, 29,1 ммоль) и ЭСМ (50 мл) в пластиковом сосуде и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь добавляли осторожно к перемешиваемой смеси ЕЮАс (150 мл) и насыщенного раствора NаНСΟз (250 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (2x100 мл), сушили над №-1АОД и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, Д0 г, н-гексан/ЕЮАс (95:5)) с получением указанного в заголовке продукта в виде желтого масла. ВЭЖХ (условие 5) !К=6,9 мин, СВЭЖХМС (условие 3) !К=1, 05 мин.
Пример 31. (К)-ОТ(Д-(2-Хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-5-бром-№(Д-(2-хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамида (стадия 31.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(Д,Д,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением белого порошка. ВЭЖХ (условие Д) !К=Д,89 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,98 мин, т//=Д8Д,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (Д00 МГц, ^ΜδΟ-а6) δ млн.д. 1,65-1,89 (м, 2 Н), 2,83-2,98 (м, 1Н), 3,18-3,33 (м, 2 Н), 3,36-3,Д9 (м, 1Н), Д,13-Д,2Д (м, 1Н), Д,77-Д,93 (м, 1Н), 6,316,Д3 (м, 1Н), 7,62 (д, 1=8,59 Гц, 2 Н), 7,77-7,8Д (м, 1Н), 7,91-8,09 (м, 3 Н), 8,6Д-8,81 (м, 1Н), 10,31 (с, 1Н), 12,83-12,96 (м, 1Н).
Стадия 31.1. (К)-5-Бром-№(Д-(2-хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 8.1, с использованием 5-бром-6-хлор-№(Д-(2-хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)фенил)никотинамида (стадия 31.2) и (К)-пирролидин-3-ола с получением белого порошка. ВЭЖХ (условие Д) !К=6,05 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,18 мин, т//=Д98 [М+Н]+.
Стадия 31.2. 5-Бром-6-хлор-^(Д-(2-хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.3, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и Д-(2-хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)анилина (стадия 31.3) с получением бежевого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие Д) !К=6,77 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,31 мин, т//=ДДД,8 [М+Н]+.
Стадия 31.3. Д-(2-Хлор-1,1,2,2-тетрафторэтил)анилин
№(РРЬ3)Д (222 мг, 0,2 ммоль) добавляли к смеси анилина (7Д5 мг, 8 ммоль) и 1-хлор-1,1,2,2тетрафтор-2-йодэтана (10Д9 мг, Д ммоль) в ЭМР (10 мл) в микроволновом сосуде в атмосфере аргона. Сосуд плотно закрывали и реакционную смесь перемешивали в течение двух дней при 80°С. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в Е!2О, промывали 10% раствором NаНСΟ3 и насыщенным солевым раствором, сушили над М^ОД и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Κеа^δер®, н-гептан/ЕЮАс, от 0 до 25% ЕЮАс) и далее при помощи хроматографии с обращенной фазой (МРЬС, ЫсЬгоргер® 15-25 мкм колонка, элюенты: вода + 0,1% муравьиной кислоты/ΜеСN + 0,1% муравьиной кислоты, градиент от 10 до 50% ΜеСN + 0,1% муравьиной кислоты). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и ΜеСN упаривали при пониженном давлении с получением водной фазы, которую нейтрализовали при помощи NаНСΟ3 и экстрагировали при помощи Е!2О. Объе- 57 024391 диненные экстракты сушили над Мд8О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения в виде красного масла. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,48 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) Ц=1,04 мин, т/ζ 2 69 [М+Н]+.
Пример 32. (К)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)-Н(6-((трифторметил)тио)пиридин-3 -ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (К)-5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-^(6-((трифторметил)тио)пиридин-3ил)никотинамида (стадия 32.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=4,18 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) Ц=0,82 мин, т^=451,3 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ млн.д. 1,64-1,89 (м, 2Н), 2,94 (д, 1=11,73 Гц, 1Н), 3,18-3,33 (м, 2 Н), 3,36-3,49 (м, 1Н), 4,18 (уш. с, 1Н), 4,81 (д, 1=3,13 Гц, 1Н), 6,38 (с, 1Н), 7,68-7,85 (м, 2Н), 8,02 (д, 1=1,95 Гц, 1Н), 8,32 (дд, 1=8,60, 2,35 Гц, 1Н), 8,73 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,98 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 10,42 (с, 1Н), 12,89-13,12 (м, 1Н).
Стадия 32.1. (К)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-^(6-((трифторметил)тио)пиридин-3ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 8.1, с использованием 5-бром-6-хлор-^(6-((трифторметил)тио)пиридин-3-ил)никотинамида (стадия 32.2) и (К)пирролидин-3-ола с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=5,53 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,01 мин, т^=463,1 [М+Н]+.
Стадия 32.2. 5-Бром-6-хлор-^(6-((трифторметил)тио)пиридин-3-ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 9.3, с использованием 5-бром-6-хлорникотиновой кислоты и 6-(трифторметилтио)пиридин-3-амина с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=6,43 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=1,15 мин, щ^=411,9 [М-Н]-.
Пример 33. (К)-^(4-(Хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(4-метил-1Нпиразол-5-ил)никотинамид
О1РЕА (77 мкл, 0,44 ммоль) добавляли в раствор 6-хлор-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(4метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 33.1, 99 мг, 0,2 ммоль) и (К)-пирролидин-3-ола (20,9 мг, 0,24 ммоль) в 1РгОН (200 мкл) в сосуде, который плотно закрывали и реакционную смесь смесь перемешивали при 140°С в течение 1,5 ч. После охлаждения при комнатной температуре реакционную смесь растворяли в ЕЮАс, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №-ь8О.-| и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в ОСМ (1,1 мл), охлаждали до 0°С, обрабатывали при помощи ТРА (0,616 мл, 8 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в 10% водный раствор №-ьСО3, (10 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем КеЛ8ер®, ОСМ/МеОН от 2 до 10% МеОН) с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого порошка. ВЭЖХ (условие 4) 1К=4,79 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) 1К=0,95 мин, ιη/ζ=464 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ОМ8О-й6) δ млн.д. 1,63-1,92 (м, 5Н), 2,81-2,96 (м, 1Н), 3,053,41 (м, 3Н), 4,17 (уш. с, 1Н), 4,81 (уш. с, 1Н), 7,30 (д, 1=8,60 Гц, 2Н), 7,58 (с, 1Н), 7,79-8,02 (м, 3Н), 8,73 (с, 1Н), 10,15 (с, 1Н), 12,58-12,85 (с, 1Н).
Стадия 33.1. 6-Хлор-^(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(4-метил-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)1Н-пиразол-5 -ил)никотинамид
- 58 024391
К3РО4 (191 мг, 0,9 ммоль) и Рб(РРН3)4 (17,33 мг, 0,015 ммоль) добавляли к раствору 6-хлор-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-5-йодникотинамида (стадия 25.2, 138 мг, 0,3 ммоль) и 4-метил-1(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (131 мг, 0,45 ммоль) в толуоле (1,5 мл) в атмосфере аргона в сосуде, который плотно закрывали и нагревали при 110°С в течение 18 ч. Реакционную смесь выливали в 20 мл воды и экстрагировали при помощи Е!ОАс. Объединенные экстракты сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Кеб18ер®, н-гептан/Е!ОАс, от 5 до 50% Е!ОАс) и кристаллизовали из н-гептана с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=6,8 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,26 мин, т//=495 [М-Н]-.
Пример 34. (8)-6-(3-Гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 8, с использованием (8)-5-бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 34.1) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола с получением не совсем белого порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=4,42 мин, хиральная ВЭЖХ (СШКЛЬРАК® ΛΌ-Н, 250x4,6 мм, элюент: Е!ОН/МеСN (98:2), 0,5 мл/мин, ИУ 210 нм) !К=2 8,27 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,91 мин, т//=434,2 [М+Н]+; !Н-ЯМР (400 МГц, 1)\18О-сЕ) δ млн.д. 1,63-1,88 (м, 2Н), 2,92 (д, 1=11,73 Гц, 1Н), 3,19-3,29 (м, 2Н), 3,34-3,47 (м, 1Н), 4,18 (уш. с, 1Н), 4,80 (д, 1=3,13 Гц, 1Н), 6,37 (с, 1Н), 7,31 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,75-7,89 (м, 3Н), 8,00 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,71 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 10,16 (с, 1Н), 12,85-13,12 (м, 1Н).
Стадия 34.1. (8)-5-Бром-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-Н-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано на стадии 8.1, с использованием 5-бром-6-хлор-Ы-(4-(трифторметокси)фенил)никотинамида (стадия 2.3) и (8)-пирролидин3-ола с получением не совсем белого кристаллического порошка. ВЭЖХ (условие 4) !К=5,83 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,06 мин, т/г= 446,1 [М+Н]+.
Пример 35. (8)-И-(4-(Хлордифторметокси)фенил)-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)-6-(3гидроксипирролидин-1 -ил)никотинамид
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 5, с использованием 6-хлор-И-(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(4-фтор-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 25.1) и (8)-3-пирролидинола с получением твердого вещества белого цвета. ВЭЖХ (условие 5) !К=5,69 мин, хиральная ВЭЖХ (СШКАЕСЕЕ® ОЭ-Н, 250x4,6 мм, элюент: н-гептан/Е!ОН/МеОН (85:10:5), 1 мл/мин, ИУ 210 нм) !К=12,62 мин, СВЭЖХ-МС (условие 6) !К=0,97 мин, т//=468,2 [М+Н]+; !Н-ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б6) δ млн.д. 1,71-1,81 (м, 1Н), 1,81-1,92 (м, 1Н), 3,02 (д, 1=11,34 Гц, 1Н), 3,243,37 (м, 2Н), 3,40-3,49 (м, 1Н), 4,23 (уш. с, 1Н), 4,89 (уш. с, 1Н), 7,32 (д, 1=9,4 Гц, 2Н), 7,76-7,98 (м, 1=9, 00 Гц, 3Н), 8,03 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 8,79 (д, 1=2,35 Гц, 1Н), 10,20 (уш. с, 1Н), 12,99 (уш. с, 1Н).
Пример 36. Метил 1-(5-((4-(хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-3-(1Н-пиразол-5-ил)пиридин-2ил)пирролидин-3 -карбоксилат
ЭРЕА (181 мкл, 1,035 ммоль) добавляли в смеси 6-хлор-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(1(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 36.1, 100 мг, 0,207 ммоль), метил-3пирролидинкарбоксилатгидрохлорида (44,5 мг, 0,269 ммоль) и 1РгОН (414 мкл) в микроволновом сосуде, который продували аргоном, плотно закрывали и перемешивали при 130°С в течение 24 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс, обрабатывали насыщенным солевым раствором и экстрагировали при помощи Е!ОАс. Объединенные экстракты сушили над №28О4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэшхроматографии (колонка с силикагелем, н-гептан/Е!ОАс от 40 до 100% Е!ОАс) с последующей очисткой
- 59 024391 при помощи препаративной ТЬС (силикагель, элюент Е!ОАс). Дополнительная лиофилизация из 1,4диоксана давала указанное в заголовке соединения в виде белого легкого твердого вещества. СВЭЖХМС (условие 6) !К=1,09 мин, т//=492,1 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ8О-б6) δ млн.д. 1,90-2,02 (м, 1Н), 2,02-2,14 (м, 1Н), 3,06-3,20 (м, 1Н), 3,23-3,48 (м, 4Н), 3,61 (с, 3Н), 6,35-6,48 (м, 1Н), 7,34 (д, 1=8,78 Гц, 2Н), 7,79-7,90 (м, 1Н), 7,89 (д, 1=8,80 Гц, 2Н), 8,03-8,13 (м, 1Н), 8,70-8,83 (м, 1Н), 10,26 (с, 1Н).
Стадия 36.1. 6-Хлор-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Нпиразол-5-ил)никотинамид
Пинаколовый эфир 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-бороновой кислоты (9,45 г, 34,0 ммоль), №3СО3 (39,2 мл, 78 ммоль) и РбС12 (бррй)(0,956 г, 1,307 ммоль) добавляли к 6-хлор-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-5-йодникотинамиду (стадия 25.2, 12 г, 26,1 ммоль) в ОМЕ (160 мл). Из смеси откачивали воздух/продували 3 раза аргоном и перемешивали при 80°С в течение 22 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс (350 мл), промывали водой (4x50 мл) и экстрагировали при помощи Е!ОАс. Объединенные экстракты сушили над №38О3 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 850 г, Е!ОАс/н-гексан (1:2)) и кристаллизовали из 1Рг2О/Е!ОАс с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) !К=7,52 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,22 мин, т/ζ 483/485 [М+Н]+.
Пример 37. 1-(5-((4-(Хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-3-(1Н-пиразол-5-ил)пиридин-2ил)пирролидин-3-карбоновая кислота
Водный 1 М раствор ЫОН (0,199 мл, 0,199 ммоль) добавляли в раствор метил 1-(5-((4(хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-3-(1Н-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)пирролидин-3-карбоксилата (пример 36, 24,5 мг, 0,05 ммоль) в МеОН (0,5 мл)/ТНР (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь обрабатывали 1 М раствором НС1 (4 экв.) и органические растворители выпаривали при пониженном давлении. Водную фазу экстрагировали дважды при помощи Е!ОАс и объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором, сушили над №38О3 и растворитель концентрировали при пониженном давлении до объема 0,5 мл. Добавляли нгептан и продукт фильтровали, промывали н-гептаном и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде бежевого твердого вещества. СВЭЖХ-МС (условие 6) !К=0,96 мин, πι/ζ=478,3 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б6) δ млн.д. 1,86-2,12 (м, 2Н), 2,90-3,09 (м, 1Н), 3,17-3,54 (м, 4Н), 6,41 (д, 1=2,08 Гц, 1Н), 7,34 (д, 1=9,05 Гц, 2Н), 7,66-7,83 (м, 1Н), 7,88 (д, 1=9,17 Гц, 2 Н), 8,06 (д, 1=2,44 Гц, 1Н), 8,70-8,84 (м, 1Н), 10,23 (с, 1Н), 12,90 (уш. с, 1Н).
Пример 38. 2-Амино-3-метилбутаноат (8)-(К)-1-(5-((4-(хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-3(1Н-пиразол-5 -ил)пиридин-2-ил)пирролидин-3 -ила
Вос-Ь-валин (726 мг, 3,34 ммоль) и ОМАР (102 мг, 0,836 ммоль) добавляли к смеси (К)-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9, 800 мг, 1,672 ммоль) в ЭСМ (20 мл) и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Затем добавляли Ν,Ν'-диизопропилкарбодиимид (0,521 мл, 3,34 ммоль) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 19 ч. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс (150 мл), промывали водным насыщенным раствором NаНСОз (50 мл) и насыщенным солевым раствором (2x50 мл) и экстрагировали при помощи Е!ОАс. Объединенные экстракты сушили над №38О3 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который суспендировали в Е!ОАс (5 мл), перемешивали при комнатной температуре, фильтровали и промывали при помощи 10 мл Е!ОАс. Фильтрат упаривали досуха при пониженном давлении и полученное промежуточное соединение растворяли в ЭСМ (15 мл), обрабатывали при помощи ТРА (4,09 мл, 53,0 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 92 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток растворяли в Е!ОАс (150 мл), промывали водным насыщенным раствором NаНСОз (50 мл) и водой (2x50 мл), сушили над №38О3 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растворяли в МеОН (20 мл) и обрабатывали при помощи 81-ТЫо1 (Вю!аде 1,3 ммоль/г, 1 г). К
- 60 024391 смеси добавляли силикагель (5 г), растворитель выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем Кеб1Бер®, 120 г, ЭСМ/МеОН 95:5) с последующей очисткой при помощи препаративной БРС (колонка ПЕАР; изократическая хроматография 25% в течение 15 мин). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который растворяли в горячем МеОН (4 мл) и фильтровали через РТРЕ 0,45-мкм фильтр. Фильтрат обрабатывали ультразвуком в течение 5 мин и полученную суспензию белого цвета перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, фильтровали, промывали при помощи МеОН (1 мл) и сушили с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) кК=5,41 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=0,86 мин, т//=549,2 [М+Н]+; ’Н-ЯМР (400 МГц, ЭМБО-б6) δ млн.д. 0,77 (д, 1=6,65 Гц, 3Н), 0,81 (д, 1=6, 65 Гц, 3Н), 1,51-1,64 (м, 2Н), 1,69-1,81 (м, 1Н), 1,84-1,94 (м, 1Н), 1,98-2,12 (м, 1Н), 3,02 (д, 1=5,08 Гц, 1Н), 3,15 (д, 1=12,90 Гц, 1Н), 3,303,43 (м, 2Н), 3,46-3,57 (м, 1Н), 5,13-5,25 (м, 1Н), 6,39 (уш. с, 1Н), 7,31 (д, 1=8,21 Гц, 2Н), 7,76-7,91 (м, 3Н), 8,05 (с, 1Н), 8,73 (уш. с, 1Н), 10,21 (с, 1Н), 12,94 (уш. с, 1Н).
Пример 39. (К)-1-(5-((4-(Хлордифторметокси)фенил)карбамоил)-3 -(1Н-пиразол-5 -ил)пиридин-2-
ТРА (1,227 мл, 15,93 ммоль) добавляли в раствор N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-((К)-3-((Зоксидо-1,5-дигидробензо[е][1,3,2]диоксафосфепин-3-ил)окси)пирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Нпиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 39.1, 620 мг, 0,7 97 ммоль) в ЭСМ (10 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч при комнатной температуре. Добавляли дополнительное количество ТРА (500 мкл) и реакционную смесь перемешивали еще 4 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс (100 мл), обрабатывали насыщенным водным раствором №-ьСО3 (70 мл) и экстрагировали при помощи Е!ОАс (50 мл). Объединенные экстракты промывали насыщенным солевым раствором (50 мл), сушили над №2БО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 12 г ЭСМ/ЕЮН от 9:1 до 4:6). Промежуточное соединение растворяли в МеОН/ТНР (10 мл смеси 1:1) и гидрировали (60 мг Рб/С 5%, 0,1 бар, 22-25°С, 6,5 ч). Реакционную смесь фильтровали через НуПо® и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток растворяли в смеси МеОН/ТНР и обрабатывали РЬ-ТЬю1 МР БРЕ картриждем (Б1га1о8рЬеге8™). Смолу отфильтровывали и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке продукта. ВЭЖХ (условие 5) !К=5,50 мин, СВЭЖХ-МС (условие 6) 1К=0,76 мин, т//=530,2 [М+Н]+; !Н-ЯМР (400 МГц, ОМБО-б6,) δ млн.д. 1,88-2,08 (м, 2Н), 3,12-3,48 (м, 4Н), 4,73 (уш. с, 1Н), 6,37-6,44 (м, 1Н), 7,33 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 7,76 (с, 1Н), 7,87 (д, 1=8,99 Гц, 2Н), 8,04-8,08 (м, 1Н), 8,73-8,78 (м, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
Стадия 39.1. N-(4-(ХлордифтормеΊΌкси)фенил)-6-((К)-3-((3-оксидо-1,5-дигидробензо[е] [ 1,3,2]диоксафосфепин-3 -ил)окси)пирролидин-1 -ил)-5-( 1 -(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамид
N,N-Диэтил-1,5-дигидробензо[е][1,3,2]диоксафосфепин-3-амин (355 мг, 1,483 ммоль) добавляли к смеси N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-((К)-3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1-(тетрагидро-2Н-пиран2-ил)-1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (стадия 9.1, 200 мг, 0,371 ммоль) и тетразола в МеСN (8,240 мл, 3,71 ммоль) в сосуде и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до 5°С, обрабатывали при помощи ТЕА (0,775 мл, 5,56 ммоль) и водным раствором Н2О2 (0,379 мл, 3,71 ммоль) и перемешивали при 0°С в течение 30 мин и еще 3 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь гасили 10% раствором №2Б2О3 (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАс. Объединенные экстракты промывали водой (20 мл) и насыщенным солевым раствором (15 мл), сушили над №2БО4 и растворитель выпаривали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали при помощи флэш-хроматографии (колонка с силикагелем, 12 г ЭСМ/МеОН от 98:2 до 9:1) с получением указанного в заголовке продукта в виде белой пены. ВЭЖХ (условие 5) !К=7,3 мин, СВЭЖХ-МС (условие 3) !К=1,18 мин, т//=716,3 [М+Н]+.
- 61 024391
Пример 40. (К)-1 -(3 -(1Н-Пиразол-5 -ил) -5 -((4-(трифторметокси)фенил)карбамоил)пиридин-2 -
Указанное в заголовке соединение получали аналогичным образом, как описано в примере 39, с использованием (К)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-3-ил)-Ы-(4-(трифторметокси) фенил) никотинамида (стадия 2.1) и Ы,М-диэтил-1,5-дигидробензо[е][1,3,2]диоксафосфепин-3-амина с получением бежевого твердого вещества. ВЭЖХ (условие 5) 1К=5,3 мин, СВЭЖХ-МС (условие 6) 0=0,75 мин, т^=514,4 [М+Н]+; Ή-ЯМР (400 МГц, ПМ§О-Л6) δ млн.д. 1,88-2,07 (м, 2Н), 3,21-3,49 (м, 4Н), 4,66-4,76 (м, 1Н), 6,41 (д, 1=1,96 Гц, 1Н), 7,02-7,15 (м, 1Н), 7,34 (д, 1=8,68 Гц, 2Н), 7,77 (с, 1Н), 7,87 (д, 1=9, 05 Гц, 2Н), 8,06 (д, 1=2,32 Гц, 1Н), 8,75 (д, 1=2,32 Гц, 1Н), 10,21 (с, 1Н).
Пример 41. Фармацевтическая композиция в виде твердой дисперсии.
Фармацевтическая композиция в виде твердой дисперсии может быть получена для соединений по настоящему изобретению, где увеличение их растворимости является эффективным для биодоступности и/или проницаемости.
Фармацевтическую композицию в виде твердой дисперсии получали с использованием аморфной дисперсии (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5-(1Н-пиразол-5 ил)никотинамида (пример 9, см. фиг. 1) с эксципиентами, выбранными из РУР УА64 и РЬагтасоа! 603. Сначала раствор для распылительной сушки получали путем смешивания (К)-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9, 2,5 граммов) с РУР УА 64 (3,75 г) и РЬагтасоа! 603 (3,75 г). Добавляли смесь 50/50 метиленхлорид/этанол, пока все компоненты не растворялись, как показывал чистый раствор, свободный от частиц и мутности (~200 мл). В качестве альтернативы, смесь 50/50 метиленхлорид/этанол можно заменить смесью ацетон/этанол/вода (5:4:1). Сушку распылением осуществляли на минираспылительной сушилке ВисШ В290 с температурой на входе 70°С, аспирация при 85%, поток азота при 50 мм рт. ст., накачивание при 15%, и игла для прочистки сопла было нулевой, с получением 5,5 г (55%). Полученная в результате сушки распылением твердая дисперсия содержала 23,6% лекарственной нагрузки (К)-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил) никотинамида (пример 9), 37,5% РУР УА64 и 37,5% РЬагтасоа! 603. Дисперсия была аморфной с температурой стеклования (Тд) 117°С и содержала приблизительно 1,4% воды, как определяли при помощи термогравиметрического анализа (ТСА). Растворение этой твердой дисперсии в рН 1 с последующим переключением рН на 6,8 через 30 мин показало полное растворение при кислотном уровне рН. Дисперсия оставалась полностью растворенной после изменения рН до нейтрального уровня рН.
Дисперсию суспендировали в фосфатно-буферном солевом растворе (РВ§) при концентрации 3 мг/мл (в качестве лекарственного средства) в течение 12 ч при комнатной температуре. Не было отмечено кристаллизации, размер частиц Ό (0,9; диаметр частицы, где 90% частиц ниже этого установленного значения) составил 14,134 с очень однородным и узким распределением частиц по размерам. Лекарственное средство не кристаллизовалось из суспензии, и никакой химической деградации не было отмечено (как оценивали при помощи СВЭЖХ). Суспензия имела химическую чистоту 99,4%, которая соответствовала Т0 чистоте суспензии и самого лекарственного средства.
Усовершенствованные свойства фармацевтической композиции в виде твердой дисперсии (К)-Ы-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) у собаки могут быть продемонстрированы при помощи таблицы фармакокинетических параметров, представленной ниже.
- 62 024391
Тип фармацевтической композиции Твердая дисперсия Суспензия
Доза [мг/кг] 60 60
Аис [мМ*час] (5ϋ) 671, 9 102,9
Смах [нМ] (5Ό) 47127 7314
ВАУ* [%] (5ϋ) 179,1 27,4
Тгаах [час] (5Ό) 2,00 3, 3
Объем введения [мл/кг] 5 5
Ранговая ЭКСПОЗИЦИЯ/СНак 14,2 14, 1
Фармацевтическая композиция в виде твердой дисперсии (К)^-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил) никотинамида (пример 9) при дозе 60 мг/кг показала в 6,5 раз большую экспозицию, чем кристаллическая суспензия (671,9 против 102,9 мкМ).
Анализы.
Применимость соединений по настоящему изобретению, описанных в настоящей заявке, может быть подтверждена путем испытания в следующих анализах. Соединения по настоящему изобретению оценивали на их способность ингибировать АВЬ1 активность в биохимических анализах и ВСК-АВЫ в клеточных анализах, описанных ниже. Соединения по настоящему изобретению испытывали далее, и было показано, что они являются эффективными ш νί\Ό с использованием модели ксенотрансплантата Κ^-22.
Биохимические анализы.
Экспрессия и очистка протеинкиназы.
Экспрессию и очистку человеческого АВЬ осуществляли с использованием стандартных процедур экспрессии и очистки. АВЬ64-515 белок получали и использовали для ш \з1го киназных анализов. Белок получали с использованием вектора ко-экспрессии, несущего ДНК фрагменты для АВЬ1 (1а изоформа, с Ν-концевой Н1§6-меткой с последующим сайтом расщепления протеазы Ρ^е8с^88^οη) и человеческую протеинтирозинфосфатазу-1В (остатки 1-283, немеченые), с использованием вектора двойной экспрессии рСЭР Оие1-1 (Nονадеη). Шк-АВЬ экспрессировали в Е.соН ВЬ21 (ЭЕ3) и АВЬ белки выделяли Νίаффинным методом на Νί-ΝΊΆ колонке (Ц1адеп). Н18-метку удаляли при помощи Ρ^е8с^88^οη протеазы (ОЕ НеаНЬсаге) и нефосфорилированный АВЬ дополнительно очищали на Мопо О НК 10/10 (ОЕ Неа1!Ьсаге, монофосфорилированный АВЬ составляет около 10-20% от общего количества АВЬ белка) и ЫЬоаб 16/60 8ирегбех 200 вытеснительной по размеру молекул колонке (ОЕ Неа1!Ьсаге). Нефосфорилированные АВЬ64-515 белки анализировали при помощи масс-спектроскопического анализа и быстро замораживали в аликвотах, и хранили при -80°С. 8КС (аминокислоты 83-535 или 8гс83-535) экспрессировали и очищали, как описано (8.А. Соиап-1асоЬ, О. Репбпсй, Ρ.Α. Мап1еу, А. 1айпке, Ό. РаЬЬго, ί. ПеЬе1ап/, Τ. Меуег, с-8гс сгу§1а1 8!гис!иге ргоззбек ίπδίβΐιΐδ ш!о с-8гс асймПюп. 81гис!иге 13 (2005) 861-871).
Радио АВЬ1 (64-515) анализ.
Для определения АВЬ киназной активности использовали радиометрический фильтр-связывающий анализ. Анализ осуществляли путем смешивания 10 мкл соединения, предварительно разбавленного при помощи 10 мкл АТР (20 мкМ АТР с 0,1 мкКи [у-33Р]-АТР) с фосфо-акцепторным пептидом поли|А1а6С.11121лз1 [ВпИИ! = поли-АЖУ) в 20 мМ ΤικΉΠ рН 7,5, 1 мМ ΌΤΤ, 10 мМ МдС12, 0,01 мМ NазVΟ4, 50 мМ №С1. Добавляли 10 мкл фермента (в пределах от 5 до 20 нМ) для инициирования реакции. Пре-инкубацию фермента с соединениями (когда указано) осуществляли, воздействуя на фермент соединениями до добавления смеси субстрата (АТР и/или пептидный субстрат). Через 15 мин при комнатной температуре реакцию останавливали путем добавления 50 мкл 125 мМ Е^ΤΑ и пептидсвязанного 33Р, отделенного на фильтровальных планшетах (ΡνΌΡ или МАГ; МПНроге, Vο1кеι5\γ^1, 8\Уйхег1апб), полученного в соответствии с инструкциями изготовителя. Фильтровальные планшеты промывали 3х при помощи 0,5% Н3РО4, с последующим добавлением 30 мкл сцинтилляционного коктейля (Мюгокст!, Ρе^к^η Е1тег) на лунку и затем анализировали в ^рСои^ ΝΧΤ сцинтилляционном счетчике (Тегкт Е1тег). Результаты выражали как значения ИК50. κ, значения для АТР определяли путем анализа АВЬ киназы с увеличивающимися концентрациями АТР, и поддерживая экзогенный акцепторный белковый субстрат (поли-АЕГУ) при постоянной концентрации (при примерно 2-кратном значении его κ,), и наоборот. κ, и V,,,,,,· рассчитывали в соответствии с Еаб1е-НоГ8!ее, как описано (Ό. РаЬЬго, О. Репбпсй, V. Оиех, Т. Меуег, Ρ. Риге!, ί. Ме§!ап, Ю. ОггГйп, Ρ.Α. Мап1еу, 8.А. Соиап-1асоЬ, Τ,γ^φ6 Шегару χνίΐΐι ппайшЬ: Ап ехсерйоп ог а ги1е? НапбЬоок оГ Ехрептеп1а1 ΡΗπ^α^Φ^ 167, ЮнЬНои, оГ Ρ^ο!е^η Рлпакек апб Ρη^Ρι ΡЬο8рЬа!е8 (2005) 361-389). Данные использовали для построения графика V против ν/8, где
- 63 024391
У представляет собой скорость реакции при данной концентрации субстрата (З), и строили прямую по точкам с использованием анализа линейной регрессии, где угол наклона линии соответствует -Кт, и Υотрезок, отсекаемый от координатной оси, представляет собой Утах.
СаНрег АВЬ1 (64-515) анализ.
Все анализы осуществляли в 384-луночных микротитровальных планшетах. Каждый аналитический планшет содержал 8-точечные серийные разведения для 40 испытываемых соединений, а также четыре 8-точечных серийных разведения стауроспорина в качестве ссылочного соединения, плюс 16 верхних и 16 нижних контролей. Манипуляции с жидкостями и стадии инкубации осуществляли на рабочей станции ТНегто Са1Х, снабженной Iηηоνайуηе №пойгор Ехргезз. Между стадиями пипетирования кончики пипеток очищали с использованием промывочных циклов при помощи промывочного буфера.
Аналитические планшеты подготавливали путем добавления 50 нл на лунку раствора соединения в 90% ИМЗО. Киназные реакции начинали путем постадийного добавления 4,5 мкл на лунку пептид/АТРраствора (50 мМ НЕРЕЗ, рН 7,5, 1 мМ ИТТ, 0,02% ВЗА, 0,6% ЭМЗО, 10 мМ бета-глицерофосфата и 10 мкМ ортованадата натрия, 20 мМ МдС12, 2 мМ МпС12, 4 мкМ АТР, 4 мкМ пептида (ПТС-АНхΕАIΥААΡРАККК-NН2)) и 4,5 мкл на лунку раствора фермента (50 мМ НЕРЕЗ, рН 7,5, 1 мМ ЭТТ, 0,02% ВЗА, 0,6% ИМЗО, 10 мМ бета-глицерофосфата и 10 мкМ ортованадата натрия, 20 мМ МдС12, 2 мМ МпС12, 3,5 нМ АВЬ (АВЬ (64-515), полученного на месте из Е. соП)). Киназные реакции инкубировали при 30°С в течение 60 мин и затем останавливали путем добавления 16 мкл на лунку стоп-раствора (100 мМ НЕРЕЗ рН 7,5, 5% ИМЗО, 0,1% СаНрег реагента покрытия, 10 мМ ЕИТА и 0,015% Вп]35). Планшеты с остановленными киназными реакциями переносили на СаНрег ЬС3000 рабочие станции для считывания. Фосфорилированные и нефосфорилированные пептиды разделяли с использованием СаНрег микрофлюидизированного метода сдвига подвижности. Вкратце, образцы из остановленных киназных реакций наносили на чип. Транспорт аналитов через чип осуществляли при помощи постоянного буферного потока и миграцию пептидного субстрата отслеживали по сигналу флуоресценции его метки.
Фосфорилированный пептид (продукт) и нефосфорилированный пептид (субстрат) разделяли в электрическом поле на основании их отношения заряд/масса. Киназные активности рассчитывали из количеств образованного фосфопептида. Значения ИК50 определяли из процентов ингибирования при различных концентрациях соединения с использованием анализа нелинейной регрессии.
Получение разведений соединений: испытываемые соединения растворяли в ИМЗО (10 мМ) и переносили в 1,4-мл плоскодонные или У-образные МаНтх пробирки, содержащие уникальную 2Ό матрицу. Исходные растворы хранили при +2°С, если не использовали непосредственно сразу. Для процедуры испытания сосуды размораживали и идентифицировали при помощи сканера, получая, таким образом, рабочий лист, который направлял последующие рабочие стадии.
Разведения соединений получали в 96-луночных планшетах. Этот формат позволял осуществить анализ максимально 40 отдельных испытываемых соединений при 8 концентрациях (отдельные точки), включая 4 ссылочных соединения. Протокол разведения включал получение планшетов предразведения, эталонных планшетов и аналитических планшетов.
Планшеты предразведения: полипропиленовые 96-луночные планшеты использовали в качестве планшетов предразведения. Всего было получено 4 планшета предразведения, включающих 10 испытываемых соединений, каждое в положениях планшета А1-А10, одно стандартное соединение в положении А11 и один ИМЗО контроль в положении А12. Все стадии разведения осуществляли на робототехническом устройстве НатШопЗТАК.
Эталонные планшеты: 30 мкл индивидуальных разведений соединений, включая стандартное соединение и контроли из 4 планшетов предразведения, переносили в 384-луночный эталонный планшет, включая следующие концентрации: 1'810, 362, 72,5, 54,6, 14,5, 2,9, 0,58 и 0,12 мкМ соответственно в 90% ИМЗО.
Аналитические планшеты: затем получали идентичные аналитические планшеты путем добавления через пипетку 50 нл каждого из разведений соединений из эталонных планшетов в 384-луночные аналитические планшеты с использованием 384-канального дозирующего устройства НитшшдВНй. Эти планшеты использовали непосредственно для анализа, который осуществляли в общем объеме 9,05 мкл. Это приводило к конечной концентрации соединения 10, 2,0, 0,4, 0,08, 0,016, 0,0032, 0,00064 и 0,000128 мкМ и конечной ИМЗО концентрации 0,5% в анализе.
Клеточные анализы.
Для оценки способности соединений по настоящему изобретению ингибировать ВСК-АВЫ активность в клеточных анализах соединения оценивали на их способность селективно ингибировать пролиферацию клеток, зависящих от ВСК-АВЫ экспрессии, по сравнению с клетками, которые не зависят от ВСК-АВЫ экспрессии.
Происходящую из костного мозга мыши клеточную линию Ва/Р3 использовали для получения подходящих моделей клеточной линии. Ва/Р3 клетки получали от Оегтап Со11есНоп о£ М^с^оо^даη^8Ш8 апй Се11 СиНигез (ИЗМ2, ВгаипзсНетехд апй ИЗМ2 №. АСС 300). Родительские Ва/Р3 клетки зависят от !Б3 для роста и выживания, и их использовали в качестве контрольной клеточной линии, которая не зависит от ВСК-АВЫ активности для роста и выживания. Эти клетки указаны как Ва/Р3-АТ.
- 64 024391
Для получения Ва/Р3 клеток, которые зависят от ВСК-АВЫ экспрессии для роста и выживания, биотехнологическими методами были получены Ва/Р3 клетки для экспрессии ВСК-АВЫ с использованием ретровирусной трансдукции с ретровирусным вектором на основе М§СV, содержащим р210 ВСКАВЫ экспрессирующую кассету. При росте в отсутствие Ы-3 пролиферация клеток зависит от экспрессии ВСК-АВЫ. (Оа1еу, С.р. апб ВаШтоге, Ό. ТгапкГогтаНоп оГ ап Ш1ег1еикШ 3-берепбеШ Нета1оро1ебс се11 1ше Ьу 1йе сйгошс туе1о1б 1еикет1а-8ресШс р210 ВСК-АВЫ рго1еш. РNЛ§ 1988; 85:9312-9316). Эти клетки указаны как Ва/ТЗ-ВСК-АВЕ^Т. Подобный подход использовали для получения Ва/Р3 клеток, которые зависят от ВСК-АВЫ варианта, в котором треонин 315 заменен изолейцином. Эти клетки указаны как Ва/Р3-ВСК-ЛВ^-Т315I.
Ва/Р3ЖТ клетки поддерживали в КРМП640 среде с Ь-глутамином, НЕРЕ8 (Ьоп/а), 10% РВ8 (ОШсо) и 5 нг/мл [Ш-3 (Са1Шосйет). Ва/Р3-ВСК-ЛВ^1-VТ клетки и Ва/Р3-ВСК-ЛВ^1-Т315I клетки поддерживали в КРМП640 среде с Ь-глутамином, НЕРЕ8 (Ъоп/а) и 10% РВ8 (ОЬсо).
Анализ пролиферации.
Для каждой клеточной линии плотность клеток доводили до 50 000 клеток/мл и 50 мкл (2500 клеток) добавляли в каждую лунку 384-луночного аналитического планшета.
Испытываемые соединения ресуспендировали в ОМ8О при концентрации 10 мМ. Серийное трехкратное разведение каждого соединения при помощи ОМ8О осуществляли в 384-луночных планшетах с использованием Шпик Ысциб Экрешег (Регкш Е1тег). Соединение распределяли в аналитические планшеты, содержащие 2500 клеток в 50 мкл объеме, через акустическу доставку из АТ8-100 (ЕОС). Для Ва/ТЗ-ВСК-АВи^Т клеточных анализов 2 нл каждого разведения соединения переносили в аналитический планшет с получением конечных анализируемых концентраций 0,4, 0,13, 0,044, 0,015, 0,005, 0,001, 0,00033, 0,00011, 0,000037, 0,000012 мкМ. Для Ва/Р3-№Т и Ва/Р3-ВСК-ЛВ^1-Т315I клеточных анализов 50 нл каждого разведения соединения переносили в аналитический планшет с получением конечных анализируемых концентраций 10, 3,33, 1,11, 0,37, 0,12, 0,041, 0,014, 0,0046, 0,0015, 0,00051 мкМ.
Клетки инкубировали при 37°С в увлажненной атмосфере 5% диоксида углерода в течение 48 ч. Вп.1еП1е плюс раствор (Регкш Е1тег) получали в соответствии с инструкциями изготовителя и 25 мкл добавляли в каждую лунку аналитического планшета. Планшеты инкубировали в течение 3-5 мин и люминесценцию определяли на Епуыоп МиШтобе планшет-ридере (РегкШ Е1тег). Степень люминесценции коррелирует с количеством клеток в каждой лунке. Поэтому можно рассчитать эффект каждой концентрации ингибитора и получить значения ИК50.
Соединения по настоящему изобретению демонстрируют значения ИК50 в пределах от 0,1 до 12 нМ для ингибирования АВ1 киназной активности в радиометрическом анализе фильтр-связывания (Кабю). Для микрофлюидизированных анализов сдвига подвижности (СаПрег) значения ИК50 находятся в пределах от 0,1 до 10 нМ. Для анализов Ва/ТЗ-ВСК-АВЕ^Т и Т315! клеточной пролиферации СЕ0 значения находятся в пределах от 0,8 до 110 нМ и от 13 нМ до 4,2 мкМ соответственно.
- 65 024391
Таблица биохимических данных
Таблица данных клеточной пролиферации Ва/Р3-ВСК-АВЕ-\УТ и Т315!
Пример я <5 < X & й А н * аа 3 <с л, ώ Л и ё аа ± А и- 3 Н аа Пример 3 аа 3 < 1 й аа к А н а-. -> аа £ 3 < л, и й аа ± Α Ϊ2 г, % ао
ч 0.004 Я 0.135 18 0.0015 0.032
3 0.0075 0.133 19 0.0135 (1.236
4 0.0117 0.327 21 0.004 0.149
5 0,008! 0.134 23 0.0017 0.042
7 0.0060 0.132 24 0.0011 0.022
8 0.0022 0.065 25 0.0011 0.023
9 0.0015 0.035 26 0.0090 0.227
1« 0.0019 0.044 28 0.0075 0.150
II 0.001 0.038 30 0.0318 0.715
12 0.0019 0.038 31 0.0041 0.133
13 0.0096 0.150 33 0.0015 0.032
14 0.0189 0.218 34 0.0150 0.212
15 0.0019 0.031 35 0.0(818 0.013
16 0.0041 0.092 36 0.0019 0.071
17 0.0155 0.199
- 66 024391
Эффективность ίη νίνο в модели ксенотрансплантата КСЬ-22 - лечение одним средством.
Соединения по настоящему изобретению вводили перорально мышиной модели ксенотрансплантата КСЬ-22 в течение 7 дней. 6-8-недельным самкам безтимусных мышей, приобретенным у Наг1ап (ΙηάίапароШ ΙΝ), имплантировали подкожно 5х106 КСЬ-22 клеток 50% в матригеле (ВИ Вюзаепсез, #354234) в правую дорсальную подмышечную область. Медикаментозное лечение начинали, когда объем опухоли достигал в среднем 238 мм3 (10 дней после имплантации опухоли). Соединения по настоящему изобретению в фосфатном буферном солевом растворе получали раз в неделю и дозировали через желудочный зонд при дозе 3-30 мг/кг дважды в день (п=6 мышей на уровень дозы). Объем опухоли определяли дважды в неделю цифровым измерителем диаметра и рассчитывали как длинахширина 2/2.
Соединения по настоящему изобретению показали статистически значимые регрессии. Например, доза 3 мг/кг два раза в день (К)-Ы-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Нпиразол-5-ил)никотинамида (пример 9) привела к ингибированию роста опухоли на 45% по сравнению с мышами, обработанными растворителем, в то время как наблюдали регрессии 56, 88 и 92% при дозах 7,5, 15 и 30 мг/кг при дозировании два раза в день соответственно. В качестве положительного контроля нилотиниб вводили при дозе 75 мг/кг два раза в день, что приводило к регрессии опухоли 82% (фиг. 2).
Эффективность ίη νίνο в модели ксенотрансплантата КСЬ-22 -лечение двумя средствами.
6-8-недельным самкам безтимусных мышей, приобретенным у Наг1ап (Ιηάίηηηροΐίδ ΙΝ), имплантировали подкожно 2х106 КСЬ-22 клеток в 50% матригеле (ВИ Вюзиепсез, #354234) в правую дорсальную подмышечную область. Медикаментозное лечение начинали, когда объем опухоли достигал в среднем 189 мм3 (9 дней после имплантации опухоли). Соединения по настоящему изобретению в фосфатном буферном солевом растворе получали раз в неделю и дозировали через желудочный зонд при дозе 30 мг/кг дважды в день и раствор нилотиниба вводили при 75 мг/кг два раза в день. Животные получали либо только одно средство, либо комбинацию обоих средств одновременно. Объем опухоли определяли дважды в неделю цифровым измерителем диаметра и рассчитывали как длина х ширина 2/2.
Животные, которых лечили только нилотинибом, достигали >84% регрессии опухоли после 4недельного ежедневного лечения, но в большинстве случаев после этого вновь возникали опухоли >500 мм3. Животные с нилотинибрезистентными опухолями затем получали ежедневное лечение соединением примера 9, и продолжался мониторинг ответа опухоли (фиг. 3).
Животные, которых лечили нилотинибом и соединением примера 9 одновременно, демонстрировали полную регрессию опухоли у всех животных к концу исследования (фиг. 4).
Должно быть понятно, что примеры и варианты воплощения, описанные в настоящей заявке, предназначены только для иллюстративных целей и что различные модификации или изменения в свете этих примеров и вариантов воплощения будут подсказаны специалистам в данной области и включены, по сути, в объем настоящей заявки и объем прилагаемой формулы изобретения.

Claims (26)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) где Κι представляет собой пиразолил; где указанный пиразолил является незамещенным или замещен 1 группой К6;
    К2 представляет собой пирролидинил; где указанный пирролидинил замещен одной группой Κ7;
    Κ3 выбирают из водорода и галогена;
    К4 выбирают из -8Р5 и -У2-СР2-У3;
    К6 в каждом случае независимо выбирают из водорода, метила, трифторметила, галогена;
    К7 выбирают из гидрокси, метила, гидроксиметила, (2-амино-3-метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила и фосфоноокси;
    Υ представляет собой СН;
    Υ1 выбирают из СН и Ν;
    Υ2 выбирают из СР2, О и 8(О)0 и Υ3 выбирают из хлора, фтора и трифторметила; или его фармацевтически приемлемые соли.
  2. 2. Соединение по п.1 формулы (1Ь)
    - 67 024391 где К3 выбирают из водорода и галогена;
    К4 выбирают из -8Е5 и -У2-СЕ2-¥3;
    К6, когда связан с азотом пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила и К6, когда связан с атомом углерода пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила, трифторметила и галогена;
    К7 выбирают из гидрокси, метила, гидроксиметила, (2-амино-3-метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила и фосфоноокси;
    Υ1 выбирают из СН и Ν;
    Υ2 выбирают из СЕ2, О и 8(О)0;
    Υ3 выбирают из фтора и трифторметила; или его фармацевтически приемлемые соли.
  3. 3. Соединение по п.2 формулы (Ю) где К3 выбирают из водорода и галогена;
    Кд выбирают из -8Е5 и -Υ2-^2-Υ3;
    К6, когда связан с азотом пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила и К6, когда связан с атомом углерода пиразолильного кольца, выбирают из водорода, метила, трифторметила и галогена;
    К7 выбирают из гидрокси, метила, гидроксиметила, (2-амино-3-метилбутаноил)окси, карбокси, метоксикарбонила и фосфоноокси;
    Υ1 выбирают из СН и Ν;
    Υ2 выбирают из СЕ2, О и 8(О)0;
    Υ3 выбирают из фтора, хлора и трифторметила; или его фармацевтически приемлемые соли.
  4. 4. Соединение по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из
  5. 5. Соединение по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из
    - 68 024391
  6. 6. Соединение по п.3 или его фармацевтически приемлемая соль, выбранное из
    - 69 024391
    Ν \ ..он ΥΆ ί τγ н 1 Л Ν ΌΗ ЖО н 1 „он АО χΑη- η У η ^^'0 ’ΟΗ γγι ° ΥΥ ΗΜ,Ν ι30Η γγΥ Ν Ν \.|ΙΟΗ α тгу Ν V \.»10Η ? Α- Υγ „он ч^О0И >°Ό. ι/Ъ Ν ОН
  7. 7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, которое представляет собой
    „он
  8. 8. Соединение, выбранное из
    г г Η αΑ^,.,οη Ύ°Ύ ο ΧΥΥγγ' ΥΆ ЛХ? Ν ? ΥηΟΗ ο Ο-ν-ν υΑυυ Ν Ν^)..»ΟΜ Αγγ' Ύ0 „ОН
  9. 9. Соединение по п.1, которое представляет собой (К)-ОТ(Д-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид или его фармацевтически приемлемую соль.
  10. 10. Фармацевтическая композиция, содержащая аморфную дисперсию (К)-^(Д- 70 024391 (хлордифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1-ил)-5 -(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида и 1-2 эксципиента, выбранных из РУР УА64 и РНагтасоа! 603.
  11. 11. Композиция по п.10, где процентное содержание РНагтасоа! 603 находится в диапазоне от 30 до 45%, процентное содержание РУР УА64 находится в диапазоне от 30 до 45% и процентное содержание (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида находится в диапазоне от 20 до 30%.
  12. 12. Композиция по п.11, где процентное содержание РНагтасоа! 603 составляет 37,5%, процентное содержание РУР УА64 составляет 37,5% и процентное содержание (Κ)-Ν-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида составляет 25%.
  13. 13. Способ лечения пациента, имеющего лейкоз, выбранный из хронического миелоидного лейкоза (СМЬ) и острого лимфобластного лейкоза (АЬЬ), включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамида или его фармацевтически приемлемой соли и необязательно последовательное или одновременное введение терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
  14. 14. Способ по п.13, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5-(1Н-пиразол-5 ил)никотинамида или его фармацевтически приемлемой соли.
  15. 15. Способ по п.13, включающий последовательное введение терапевтически эффективного количества соединения (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол5-ил)никотинамида или его фармацевтически приемлемой соли и последовательное введение терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
  16. 16. Способ по п.13, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3 -гидроксипирролидин-1 -ил)-5-(1Н-пиразол-5 ил)никотинамида или его фармацевтически приемлемой соли и одновременное введение терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
  17. 17. Способ по п.16, где (Κ)-N-(4-(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид вводят при дозе в пределах 90-130 мг/кг.
  18. 18. Способ по п.17, где нилотиниб вводят при дозе 10-50 мг/кг.
  19. 19. Способ по п.18, где иматиниб вводят при дозе 50-200 мг/кг.
  20. 20. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по любому одному из пп.1-7 и 9 для лечения рака.
  21. 21. Применение по п.20, где рак представляет собой лейкоз, выбранный из хронического миелоидного лейкоза и острого лимфобластного лейкоза.
  22. 22. Применение по п.20 или 21 вместе с дополнительным соединением, выбранным из иматиниба, нилотиниба, дазатиниба, босутиниба, понатиниба и бафетиниба.
  23. 23. Применение по п.22 для последовательного или одновременного введения с указанным дополнительным соединением, где указанное дополнительное соединение представляет собой нилотиниб.
  24. 24. Применение по любому одному из пп.20-23, где соединение представляет собой (Κ)-Ν-(4(хлордифторметокси)фенил)-6-(3-гидроксипирролидин-1-ил)-5-(1Н-пиразол-5-ил)никотинамид или его фармацевтически приемлемую соль.
  25. 25. Применение соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли по п.1 в получении лекарственного средства для лечения рака.
  26. 26. Применение по п.25, где рак представляет собой лейкоз, выбранный из хронического миелоидного лейкоза и острого лимфобластного лейкоза.
EA201491824A 2012-05-15 2013-05-09 Производные бензамида для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1 EA024391B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261647174P 2012-05-15 2012-05-15
US201361790967P 2013-03-15 2013-03-15
PCT/IB2013/053768 WO2013171639A1 (en) 2012-05-15 2013-05-09 Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491824A1 EA201491824A1 (ru) 2015-02-27
EA024391B1 true EA024391B1 (ru) 2016-09-30

Family

ID=48670630

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491824A EA024391B1 (ru) 2012-05-15 2013-05-09 Производные бензамида для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1

Country Status (50)

Country Link
US (2) US8829195B2 (ru)
EP (1) EP2861579B9 (ru)
JP (1) JP6078639B2 (ru)
KR (1) KR102091893B1 (ru)
CN (1) CN104302638B (ru)
AP (1) AP3613A (ru)
AR (1) AR091063A1 (ru)
AU (1) AU2013261127B2 (ru)
BR (1) BR112014026383B1 (ru)
CA (1) CA2868958C (ru)
CL (1) CL2014002757A1 (ru)
CO (1) CO7131380A2 (ru)
CR (1) CR20140519A (ru)
CU (1) CU24265B1 (ru)
CY (2) CY1120235T1 (ru)
DK (1) DK2861579T5 (ru)
DO (1) DOP2014000256A (ru)
EA (1) EA024391B1 (ru)
ES (1) ES2670601T3 (ru)
FR (1) FR22C1053I2 (ru)
GE (1) GEP201606532B (ru)
GT (1) GT201400253A (ru)
HK (1) HK1203495A1 (ru)
HR (1) HRP20180695T1 (ru)
HU (2) HUE039138T2 (ru)
IL (1) IL235566A (ru)
JO (1) JO3453B1 (ru)
LT (2) LT2861579T (ru)
MA (1) MA37519B1 (ru)
ME (1) ME03095B (ru)
MX (1) MX359014B (ru)
MY (1) MY169377A (ru)
NL (1) NL301201I2 (ru)
NO (1) NO2022043I1 (ru)
NZ (1) NZ701626A (ru)
PE (3) PE20150669A1 (ru)
PH (1) PH12014502531B1 (ru)
PL (1) PL2861579T3 (ru)
PT (1) PT2861579T (ru)
RS (1) RS57177B1 (ru)
SG (1) SG11201407152XA (ru)
SI (1) SI2861579T1 (ru)
SV (1) SV2014004850A (ru)
TN (1) TN2014000427A1 (ru)
TR (1) TR201807023T4 (ru)
TW (1) TWI560183B (ru)
UA (1) UA113208C2 (ru)
UY (1) UY34811A (ru)
WO (1) WO2013171639A1 (ru)
ZA (1) ZA201407065B (ru)

Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA026724B1 (ru) 2012-04-26 2017-05-31 Бристол-Майерс Сквибб Компани Производные имидазотиадиазола и имидазопиридазина в качестве ингибиторов активируемых протеазой рецепторов 4 (par4) для лечения агрегации тромбоцитов
CN104302634B (zh) 2012-05-15 2017-02-08 诺华股份有限公司 用于抑制abl1、abl2和bcr‑abl1的活性的苯甲酰胺衍生物
BR112014027181A2 (pt) 2012-05-15 2017-06-27 Novartis Ag derivados de benzamida para a inibição da atividade de abl1, abl2 e bcr-abl1
RS57177B1 (sr) * 2012-05-15 2018-07-31 Novartis Ag Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1
PL2900637T3 (pl) 2012-05-15 2018-01-31 Novartis Ag Pirymidyna podstawiona tiazolem lub imidazolem, amidowe pochodne pirazyny i pirydyny i powiązane związki takie jak inhibitory abl1, abl2 i bcr-abl1 do leczenia nowotworu, specyficznych infekcji wirusowych i specyficznych zaburzeń cns
TWI568722B (zh) 2012-06-15 2017-02-01 葛蘭馬克製藥公司 作爲ｍＰＧＥＳ－１抑制劑之三唑酮化合物
JP6437452B2 (ja) 2013-01-14 2018-12-12 インサイト・ホールディングス・コーポレイションＩｎｃｙｔｅ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｐｉｍキナーゼ阻害剤として有用な二環式芳香族カルボキサミド化合物
KR102311840B1 (ko) 2013-01-15 2021-10-14 인사이트 홀딩스 코포레이션 Pim 키나제 저해제로서 유용한 티아졸카복스아마이드 및 피리딘카복스아마이드 화합물
TW201605866A (zh) 2013-08-23 2016-02-16 英塞特公司 可用作ｐｉｍ激酶抑制劑之呋喃并－及噻吩并－吡啶甲醯胺化合物
CN106414402A (zh) * 2013-11-01 2017-02-15 宇部兴产株式会社 丙烯酰(氧基或氨基)五氟硫烷基苯化合物、其药学可接受的盐及其前药
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
EP3105238A4 (en) 2014-02-13 2017-11-08 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and their uses
BR122024001145A2 (pt) 2014-03-14 2024-02-27 Novartis Ag Molécula de anticorpo isolada capaz de se ligar a lag-3, seu método de produção, composição farmacêutica, ácidos nucleicos, vetor de expressão, método para detecção de lag-3 em uma amostra biológica, e uso das referidas molécula de anticorpo e composição
EP3164136A4 (en) 2014-07-02 2018-04-04 Ligand Pharmaceuticals, Inc. Prodrug compounds and uses therof
US9580418B2 (en) 2014-07-14 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
US9822124B2 (en) 2014-07-14 2017-11-21 Incyte Corporation Bicyclic heteroaromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
ES2952717T3 (es) 2014-10-14 2023-11-03 Novartis Ag Moléculas de anticuerpos contra PD-L1 y usos de las mismas
US20170340733A1 (en) 2014-12-19 2017-11-30 Novartis Ag Combination therapies
CN104478911A (zh) * 2014-12-19 2015-04-01 成都安斯利生物医药有限公司 一种制备3-三氟甲基吡咯硼酸的方法
SG11201705767PA (en) * 2015-01-13 2017-08-30 Univ Kyoto Agent for preventing and/or treating amyotrophic lateral sclerosis
MX2017011597A (es) 2015-03-10 2018-05-11 Aduro Biotech Inc Composiciones y metodos para activar la señalizacion dependiente del "estimulador del gen de interferon".
WO2016196244A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Incyte Corporation Pyridineamine compounds useful as pim kinase inhibitors
EP3317301B1 (en) 2015-07-29 2021-04-07 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to lag-3
EP3316902A1 (en) 2015-07-29 2018-05-09 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
WO2017019896A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
AR105967A1 (es) 2015-09-09 2017-11-29 Incyte Corp Sales de un inhibidor de pim quinasa
TW201718546A (zh) 2015-10-02 2017-06-01 英塞特公司 適用作pim激酶抑制劑之雜環化合物
WO2017079112A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 Janssen Biotech, Inc. Antibodies specifically binding pd-1 and their uses
US20180371093A1 (en) 2015-12-17 2018-12-27 Novartis Ag Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US9931342B2 (en) 2016-02-02 2018-04-03 Duke University Compositions and methods for the treatment of cancer
JP2019515932A (ja) * 2016-04-29 2019-06-13 アスター バイオテック リミテッド ライアビリティ カンパニー チロシンキナーゼｂｃｒ−ａｂｌ阻害剤としての新規複素環化合物
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
EP3519400A1 (en) * 2016-09-27 2019-08-07 Novartis AG Surfactant systems for crystallization of organic compounds
WO2018081372A1 (en) * 2016-10-26 2018-05-03 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of treatment for myeloid leukemia
EP3596049A4 (en) * 2017-03-15 2021-01-13 Sun Pharma Advanced Research Company Limited NEW AMORPHIC DISPERSION OF CYCLOPROPANECARBOXYLIC ACID (5- {5- [N '- (2-CHLORO-6-METHYLBENZOYL) HYDRAZINOCARBONYL] -2-METHYL-PHENYLETHYNYL} -PYRIDIN-2-AMIDE
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
JPWO2018216705A1 (ja) * 2017-05-23 2020-03-26 国立大学法人京都大学 神経変性疾患の予防及び／又は治療剤
EP3642240A1 (en) 2017-06-22 2020-04-29 Novartis AG Antibody molecules to cd73 and uses thereof
AR113922A1 (es) 2017-12-08 2020-07-01 Incyte Corp Terapia de combinación de dosis baja para el tratamiento de neoplasias mieloproliferativas
US11970482B2 (en) 2018-01-09 2024-04-30 Ligand Pharmaceuticals Inc. Acetal compounds and therapeutic uses thereof
WO2019204354A1 (en) * 2018-04-16 2019-10-24 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic compounds
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
KR102618168B1 (ko) * 2018-07-06 2023-12-27 일양약품주식회사 프리온 질환의 예방 또는 치료를 위한 약제학적 조성물
KR102119150B1 (ko) 2018-10-23 2020-06-04 한국원자력의학원 N-1h-벤지미다졸-2-일-3-(1h-피롤-1-일) 벤자미드를 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물
US11236070B2 (en) 2019-05-16 2022-02-01 Novartis Ag Chemical process
US11407735B2 (en) * 2019-05-16 2022-08-09 Novartis Ag Crystalline forms of N-[4-(Chlorodifluoromethoxy)phenyl]-6-[(3R)-3-hydroxypyrrolidin-1-yl]-5-(1H-pyrazol-5-yl)pyridine-3-carboxamide
GB201913110D0 (en) * 2019-09-11 2019-10-23 Benevolentai Bio Ltd New compounds and methods
EP4031578A1 (en) 2019-09-18 2022-07-27 Novartis AG Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies
WO2021143927A1 (zh) * 2020-01-19 2021-07-22 正大天晴药业集团股份有限公司 作为bcr-abl抑制剂的化合物
US20230097240A1 (en) 2020-01-28 2023-03-30 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Solid state forms of asciminib and processes for the preparation thereof
WO2021156360A1 (en) 2020-02-05 2021-08-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for discontinuing a treatment with a tyrosine kinase inhibitor (tki)
CN111321200A (zh) * 2020-02-28 2020-06-23 广州安镝声生物医药科技有限公司 一种细胞外abl1激酶活性检测试剂盒及其应用
CN115124551B (zh) * 2021-03-24 2024-04-30 奥锐特药业(天津)有限公司 一种高纯度米哚妥林的制备方法
WO2022206937A1 (zh) * 2021-04-01 2022-10-06 苏州晶云药物科技股份有限公司 一种吡唑取代的烟酰胺类化合物的盐酸盐新晶型及其制备方法
US20240245666A1 (en) 2021-05-11 2024-07-25 Novartis Ag Dosing regimens
WO2022247919A1 (zh) 2021-05-28 2022-12-01 正大天晴药业集团股份有限公司 作为bcr-abl抑制剂的化合物
CN114149409B (zh) * 2021-11-16 2024-03-22 中国药科大学 一种具有蛋白激酶抑制活性的（杂）芳基酰胺类化合物
CN116135851A (zh) * 2021-11-17 2023-05-19 武汉众诚康健生物医药科技有限公司 一种芳香胺化合物及其应用
EP4447968A2 (en) * 2021-12-13 2024-10-23 The Regents Of The University Of California Abl inhibitors and uses thereof
CN115109048B (zh) * 2022-08-10 2023-12-08 中国药科大学 一种(杂)芳基酰胺类化合物
WO2024100212A1 (en) 2022-11-10 2024-05-16 Synthon B.V. Crystalline form of asciminib hydrochloride

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004005281A1 (en) * 2002-07-05 2004-01-15 Novartis Ag Inhibitors of tyrosine kinases

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH445129A (fr) 1964-04-29 1967-10-15 Nestle Sa Procédé pour la préparation de composés d'inclusion à poids moléculaire élevé
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
US3426011A (en) 1967-02-13 1969-02-04 Corn Products Co Cyclodextrins with anionic properties
US3453257A (en) 1967-02-13 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin with cationic properties
US3453259A (en) 1967-03-22 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin polyol ethers and their oxidation products
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
DE2845997A1 (de) 1978-10-23 1980-04-30 Bayer Ag Pflanzenwachstumsregulierende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur regulierung des pflanzenwachstums
US4737323A (en) 1986-02-13 1988-04-12 Liposome Technology, Inc. Liposome extrusion method
US5093330A (en) 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
WO1989002891A1 (en) 1987-09-23 1989-04-06 F. Hoffmann-La Roche & Co. Aktiengesellschaft Heterocyclic compounds
US5010099A (en) 1989-08-11 1991-04-23 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Discodermolide compounds, compositions containing same and method of preparation and use
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5395855A (en) 1990-05-07 1995-03-07 Ciba-Geigy Corporation Hydrazones
IL115849A0 (en) 1994-11-03 1996-01-31 Merz & Co Gmbh & Co Tangential filtration preparation of liposomal drugs and liposome product thereof
NZ334821A (en) 1996-08-30 2000-12-22 Novartis Ag Method for producing epothilones
EP0938597B1 (en) 1996-09-06 2003-08-20 Obducat Aktiebolag Method for anisotropic etching of structures in conducting materials
CA2269118C (en) 1996-11-18 2012-05-29 Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Epothilone c, d, e and f, production process, and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
GB9721069D0 (en) 1997-10-03 1997-12-03 Pharmacia & Upjohn Spa Polymeric derivatives of camptothecin
US6194181B1 (en) 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
EP1058679B1 (en) 1998-02-25 2005-10-19 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues therof
AU5620299A (en) 1998-08-11 2000-03-06 Novartis Ag Isoquinoline derivatives with angiogenesis inhibiting activity
KR20070087132A (ko) 1998-11-20 2007-08-27 코산 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 에포틸론 및 에포틸론 유도체의 생산을 위한 재조합 방법및 물질
AU2001231143A1 (en) 2000-01-27 2001-08-07 Cytovia, Inc. Substituted nicotinamides and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
PE20020354A1 (es) 2000-09-01 2002-06-12 Novartis Ag Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda)
WO2003039529A1 (en) 2001-11-07 2003-05-15 4Sc A.G. Selective antibacterial agents
WO2003055477A1 (en) 2001-12-21 2003-07-10 7Tm Pharma A/S Method for the treatment of mc receptor related disorders with a chelate and/or a chelator
JP4896518B2 (ja) 2002-12-13 2012-03-14 ワイエム・バイオサイエンシズ・オーストラリア・ピーティーワイ・リミテッド ニコチンアミド系キナーゼ阻害薬
TW200505902A (en) 2003-03-20 2005-02-16 Schering Corp Cannabinoid receptor ligands
US20070054916A1 (en) 2004-10-01 2007-03-08 Amgen Inc. Aryl nitrogen-containing bicyclic compounds and methods of use
US20080167347A1 (en) 2005-01-20 2008-07-10 Shiongi & Co., Ltd. Ctgf Expression Inhibitor
EP1881961A1 (en) 2005-05-11 2008-01-30 Novo Nordisk A/S New haloalkylsulfone substituted compounds useful for treating obesity and diabetes
WO2007002441A1 (en) 2005-06-24 2007-01-04 Emory University Methods of use for non-atp competitive tyrosine kinase inhibitors to treat pathogenic infection
RS51351B (en) 2005-07-20 2011-02-28 Aventis Pharma S.A. 1,4-DIHYDROPYRIDINE-CONDENSED HTEROCYCLES, PROCEDURES FOR THEIR PRODUCTION, USE AND THE COMPOSITIONS CONTAINING THEM
EP2606890A1 (en) * 2006-04-05 2013-06-26 Novartis AG Combinations comprising BCR-ABL/C-KIT/PDGF-R TK inhibitors for treating cancer
WO2008021725A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
KR101079520B1 (ko) 2006-10-20 2011-11-03 아이알엠 엘엘씨 Ｃ-ｋｉｔ 및 ｐｄｇｆｒ 수용체를 조절하기 위한 조성물 및 방법
WO2008059023A1 (en) * 2006-11-15 2008-05-22 High Point Pharmaceuticals, Llc New haloalkylsulfone substituted compounds useful for treating obesity and diabetes
US7851500B2 (en) * 2007-01-05 2010-12-14 Bristol-Myers Squibb Company Aminopyrazole kinase inhibitors
WO2008112695A2 (en) 2007-03-12 2008-09-18 Irm Llc Pyrazolo [3,4-d] pyrimidines and 1, 2, 5, 6-tetraaza- as- indacenes as protein kinase inhibitors for cancer treatment
WO2008124393A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Irm Llc Benzothiazole derivatives and their use as protein kinase inhibitors
WO2008144253A1 (en) 2007-05-14 2008-11-27 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
EP2182935A1 (en) 2007-08-02 2010-05-12 F. Hoffmann-Roche AG The use of benzamide derivatives for the treatment of cns disorders
MX2010002905A (es) 2007-09-17 2010-07-05 Abbott Lab Derivados de uracilo o timina para tratar la hepatitis c.
EA201001847A1 (ru) 2008-06-11 2011-08-30 Айрм Ллк Соединения и композиции, применяемые для лечения малярии
EP2350052B1 (en) 2008-09-29 2014-08-13 Boehringer Ingelheim International GmbH Antiproliferative compounds
WO2011008788A1 (en) 2009-07-14 2011-01-20 Dawei Zhang Fluoro-substituted compounds as kinase inhibitors and methods of use thereof
JP2011057661A (ja) 2009-08-14 2011-03-24 Bayer Cropscience Ag 殺虫性カルボキサミド類
EP2498607B1 (en) 2009-11-13 2016-02-17 Genosco Kinase inhibitors
JO3634B1 (ar) * 2009-11-17 2020-08-27 Novartis Ag طريقة لعلاج اضطرابات تكاثرية وحالات مرضية أخرى متوسطة بنشاط كيناز bcr-abl، c-kit، ddr1، ddr2، أو pdgf-r
WO2011082400A2 (en) 2010-01-04 2011-07-07 President And Fellows Of Harvard College Modulators of immunoinhibitory receptor pd-1, and methods of use thereof
SG182361A1 (en) 2010-01-29 2012-08-30 Hanmi Science Co Ltd THIENO[3,2-d]PYRIMIDINE DERIVATIVES HAVING INHIBITORY ACTIVITY ON PROTEIN KINASES
WO2012129562A2 (en) 2011-03-24 2012-09-27 The Scripps Research Institute Compounds and methods for inducing chondrogenesis
CN102276500A (zh) * 2011-05-05 2011-12-14 西安交通大学 水杨酰胺类抗肿瘤化合物及其合成方法和用途
ES2634716T3 (es) 2011-05-31 2017-09-28 Celgene International Ii Sàrl Nuevos estabilizantes y moduladores del receptor GLP-1
PL2900637T3 (pl) 2012-05-15 2018-01-31 Novartis Ag Pirymidyna podstawiona tiazolem lub imidazolem, amidowe pochodne pirazyny i pirydyny i powiązane związki takie jak inhibitory abl1, abl2 i bcr-abl1 do leczenia nowotworu, specyficznych infekcji wirusowych i specyficznych zaburzeń cns
RS57177B1 (sr) * 2012-05-15 2018-07-31 Novartis Ag Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1
BR112014027181A2 (pt) * 2012-05-15 2017-06-27 Novartis Ag derivados de benzamida para a inibição da atividade de abl1, abl2 e bcr-abl1
CN104302634B (zh) * 2012-05-15 2017-02-08 诺华股份有限公司 用于抑制abl1、abl2和bcr‑abl1的活性的苯甲酰胺衍生物

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004005281A1 (en) * 2002-07-05 2004-01-15 Novartis Ag Inhibitors of tyrosine kinases

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ECK, M.J. ; MANLEY, P.W.: "The interplay of structural information and functional studies in kinase drug design: insights from BCR-Abl", CURRENT OPINION IN CELL BIOLOGY., CURRENT SCIENCE, LONDON., GB, vol. 21, no. 2, 1 April 2009 (2009-04-01), GB, pages 288 - 295, XP026035462, ISSN: 0955-0674, DOI: 10.1016/j.ceb.2009.01.014 *
YUPENG LI, MENGJIE SHEN, ZHANG ZHANG, JINFENG LUO, XIAOFEN PAN, XIAOYUN LU, HUOYOU LONG, DONGHAI WEN, FENGXIANG ZHANG, FANG LENG, : "Design, Synthesis, and Biological Evaluation of 3-(1 H -1,2,3-Triazol-1-yl)benzamide Derivatives as Potent Pan Bcr-Abl Inhibitors Including the Threonine 315 →Isoleucine 315 Mutant", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY, AMERICAN CHEMICAL SOCIETY, vol. 55, no. 22, 26 November 2012 (2012-11-26), pages 10033 - 10046, XP055082710, ISSN: 00222623, DOI: 10.1021/jm301188x *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2670601T3 (es) 2018-05-31
CY1120235T1 (el) 2019-07-10
MX359014B (es) 2018-09-12
LTPA2022523I1 (ru) 2022-12-12
EA201491824A1 (ru) 2015-02-27
LT2861579T (lt) 2018-05-10
DK2861579T3 (en) 2018-05-28
SG11201407152XA (en) 2014-11-27
HK1203495A1 (en) 2015-10-30
CY2022033I2 (el) 2023-01-05
CA2868958A1 (en) 2013-11-21
CL2014002757A1 (es) 2015-01-23
AP3613A (en) 2016-02-29
HUS2200046I1 (hu) 2022-11-28
PE20210667A1 (es) 2021-04-05
DK2861579T5 (da) 2022-10-24
EP2861579B9 (en) 2018-08-29
JO3453B1 (ar) 2020-07-05
GT201400253A (es) 2017-09-28
CU24265B1 (es) 2017-07-04
TW201400471A (zh) 2014-01-01
SV2014004850A (es) 2018-04-04
EP2861579A1 (en) 2015-04-22
NZ701626A (en) 2016-02-26
CN104302638B (zh) 2016-08-24
MA37519B1 (fr) 2017-03-31
DOP2014000256A (es) 2015-02-27
PE20150669A1 (es) 2015-05-17
CN104302638A (zh) 2015-01-21
IL235566A0 (en) 2015-02-01
ES2670601T9 (es) 2022-11-30
ZA201407065B (en) 2016-08-31
US8829195B2 (en) 2014-09-09
PL2861579T3 (pl) 2018-07-31
TN2014000427A1 (en) 2016-03-30
TWI560183B (en) 2016-12-01
RS57177B1 (sr) 2018-07-31
AU2013261127B2 (en) 2015-03-12
CU20140131A7 (es) 2015-04-29
BR112014026383A2 (pt) 2017-06-27
AP2014007992A0 (en) 2014-10-31
KR20150020170A (ko) 2015-02-25
WO2013171639A1 (en) 2013-11-21
MY169377A (en) 2019-03-26
FR22C1053I2 (fr) 2023-11-10
HUE039138T2 (hu) 2018-12-28
MA37519A1 (fr) 2016-06-30
KR102091893B1 (ko) 2020-03-23
PH12014502531A1 (en) 2015-01-12
US20140343086A1 (en) 2014-11-20
HRP20180695T1 (hr) 2018-06-01
UA113208C2 (xx) 2016-12-26
CR20140519A (es) 2015-03-26
EP2861579B1 (en) 2018-02-21
NO2022043I1 (en) 2022-10-25
UY34811A (es) 2013-12-31
JP2015521185A (ja) 2015-07-27
CO7131380A2 (es) 2014-12-01
CA2868958C (en) 2020-09-01
PT2861579T (pt) 2018-04-27
NL301201I2 (nl) 2022-12-07
TR201807023T4 (tr) 2018-06-21
AU2013261127A1 (en) 2014-11-20
GEP201606532B (en) 2016-08-25
IL235566A (en) 2016-09-29
PE20161416A1 (es) 2017-01-08
AR091063A1 (es) 2014-12-30
JP6078639B2 (ja) 2017-02-08
FR22C1053I1 (fr) 2022-12-16
ME03095B (me) 2019-01-20
MX2014013374A (es) 2015-01-16
SI2861579T1 (en) 2018-05-31
PH12014502531B1 (en) 2015-01-12
US20130310395A1 (en) 2013-11-21
BR112014026383B1 (pt) 2020-11-17
CY2022033I1 (el) 2023-01-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA024391B1 (ru) Производные бензамида для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1
US9896444B2 (en) Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
JP6078640B2 (ja) Ａｂｌ１、ａｂｌ２およびｂｃｒ−ａｂｌ１の活性を阻害するためのベンズアミド誘導体
CN110386919B (zh) 核转运调节剂及其用途
EA026559B1 (ru) Соединения и композиции для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1
BR112015032921B1 (pt) Compostos de benzofuranila e benzoxazolila substituídos e utilizações dos mesmos
WO2023215449A1 (en) Tetrahydroisoquinoline heterobifunctional bcl-xl degraders

Legal Events

Date Code Title Description
MA4A Surrender of the eurasian patent at the request of the proprietor in the following designated state(s)

Designated state(s): TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): KG