EA023556B1 - 1,2-дизамещенные-4-аминоимидазохинолины - Google Patents

Abstract

Раскрыты имидазохинолины формулы (I)которые содержат замещенные амидные функциональные группы в положении 1 (где А, В и R1, являются такими, как определено в описании изобретения) и которые эффективны как активаторы Toll-подобных рецепторов 7 (TLR7). Также раскрыты фармацевтические композиции, содержащие соединения формулы (I), и применение этих соединений и композиций для лечения заболеваний, чувствительных к активации TLR7, в частности для лечения вирусного или неопластического заболеваний, а также для улучшения или стимулирования заживления ран и в качестве адъюванта вакцин для выработки клеточного иммунитета.

Description

Изобретение относится к производным имидазохинолина и фармацевтическим композициям, содержащим производные имидазохинолина. Производные имидазохинолина полезны в качестве агонистов ΐοΐΐ-подобных рецепторов/активаторов ΐοΐΐ-подобных рецепторов ТЬК7.

Предшествующий уровень техники

Τοΐΐ-подобные рецепторы (ТЬК), включающие в настоящее время семейство генов 10 рецепторов с различными специфичностями, являются частью клеточной системы распознавания патогенассоциированных паттернов, которая возникла для защиты от различных инфекций (бактерий, вирусов, грибов). Активация ТЬК вызывает цитокиновый ответ, например высвобождение интерферонов и активирование специфических иммунных клеток. Функциональная экспрессия различных ТЬК в тканях существенно различается. Часть рецепторов, таких как ТЬК4 (стимулируемый липополисахаридом Ε.οοΐί. ЬР8), расположены на поверхности клеток, например на эпителиальных клетках, и ТЬК3, 7, 8 и 9 находятся на эндосомальных мембранах в специфических иммунокомпетентных клетках. Последние все активируются нуклеиновыми кислотами, но распознают различные их типы. Например, ТЬК9 активируется одноцепочечной ДНК, содержащей подпоследовательности СрО, ТЬК.7 и 8 активируются одноцепочечной РНК, и ТЬК3 активируется двухцепочечной РНК.

Были идентифицированы некоторые агонисты ТЬК7 или ТЬК8, имеющие небольшие молекулы (8МОЬ). Эти агонисты можно классифицировать на пуриноподобные молекулы, например 7-тиа-8оксогуанозин (ТОО, изаторибин, 15аЮпЬп1е) или на имидазохинолиновый имиквимод (ίιηκιιιίιηού). Имиквимод в настоящее время является единственным разрешенным к применению безусловным агонистом ТЬК, который имеется в продаже в виде 5% крема (производства АЫага). Он вызывает приблизительно 80% избавление от поверхностного базально-клеточного рака на 5 лет, который является наиболее распространенным в мире раком. Имиквимод активирует ТЬК7. По-видимому, функциональная экспрессия ТЬК7 ограничена специфическими иммунокомпетентными клетками, то есть к настоящему времени известно, что у людей только плазмоцитоидные дендритные клетки, В-клетки и, возможно, эозинофилы активируются агонистами ТЬК7.

Последние несколько лет в мире прилагаются серьезные усилия по использованию сильной иммунной активации, вызываемой агонистами ТЬК7, 8 или 9 для лечения рака. Однако иммунотерапия рака имеет долгую безуспешную историю. Тем не менее, в последние годы коренным образом расширились знания об иммунном контроле рака и, тем самым, о функции субпопуляций иммунных клеток. Ведутся клинические исследования применения агонистов ТЬК7 или ТЬК9 для моно- или комбинированной терапии рака или в качестве адъювантов вакцин.

Подход с использованием агонистов ТЬК для иммунотерапии рака отличается от предыдущих попыток, в которых, к примеру, применяли цитокины, интерфероны или моновакцины. Иммунная активация, опосредованная агонистом ТЬК, является плейотропной, то есть происходит посредством специфических иммунокомпетентных клеток (сначала дендритных и В-клеток, а затем и других клеток), что вызывает естественный и адаптивный иммунный ответ. Кроме того, индуцируется не один единственный интерферон, а множество различных изоформ в целом, и не только типа I (альфа, бета), но также (косвенно) и типа II (гамма, ΝΚ-клетки). По меньшей мере, для местного применения АМага представила выдающееся доказательство обоснованности концепции лечения. Это демонстрирует, что опухоли высвобождают антигены и что иммунная терапия может быть успешной при симптомах рака, даже в качестве монотерапии. Однако для системного способа введения подтверждение обоснованности лечения для агонистов ТЬК7 или ТЬК9 находится в рассмотрении, проходя клинические испытания. Представляется очевидным, что для лечения запущенных форм рака и системного применения (предпочтительно подкожным или внутривенным способом введения) такие агонисты ТЬК следует комбинировать с другими видами терапии.

В случае более ранних стадий рака ситуация может отличаться. Метастазы опухоли являются наиболее серьезным аспектом развития опухоли у пациентов, как правило, вследствие слишком позднего обнаружения опухоли, когда уже образовались метастазы. Общепринятая терапия рака в основном включает цитотоксические лекарственные средства с довольно узким терапевтическим окном. Поэтому для лечения на ранних стадиях развития опухоли, когда еще возможно подавление распространения метастазов, высока потребность в новых, хорошо переносимых и безопасных способах терапии.

Активация иммунной системы, и, в частности, активация передачи сигналов ΐοΐΐ-подобными рецепторами (ТЬК) предлагает новые многообещающие подходы. ТЬК9-агонистические СрО олигонуклеотиды, подобные Н2006 и Н1826, и агонисты ТЬК7, подобные гуанозиновому производному изаторибину, или производное имиквимода испытывали на модели авторов изобретения легочных метастазов Кепса у мышей. Все протестированные молекулы практически полностью подавляли появление легочных метастазов при хорошей переносимости. Это дает убедительное обоснование клинического исследования таких молекул для подавления раковых метастазов и указывает на возможность системного применения таких лекарственных средств. Однако для агонистов ТЬК7 8МОЬ-типа известны общепринятые и экономически эффективные способы синтеза, что дает им преимущество по сравнению с агонистами ТЬК9 типа нуклеиновых кислот, и кроме того они хорошо подходят для местного применения.

- 1 023556

В υδ-Β-6573273 описаны имидазохинолиновые и тетрагидроимидазохинолиновые соединения, которые содержат карбамидные, тиокарбамидные, ацилкарбамидные, сульфонилкарбамидные или карбаматные функциональные группы. Утверждается, что эти соединения полезны в качестве иммуномодуляторов.

В υδ-Β-6677349 описаны имидазохинолиновые и тетрагидроимидазохинолиновые соединения, которые содержат сульфонамидную функциональную группу в положении 1. Утверждается, что эти соединения полезны в качестве иммуномодуляторов.

В υδ-Α-2003/0144283 и ^Θ-Ά-00/76505 описаны имидазохинолиновые и тетрагидроимидазохинолиновые соединения, которые содержат амидную функциональную группу в положении 1. Утверждается, что эти соединения полезны в качестве иммуномодуляторов.

В \νϋ-Λ-2005/051324 описаны имидазохинолиновые, пиридиновые и нафтиридиновые кольцевые системы, замещенные по положению 1 оксимной или определенной Ν-оксидной функциональной группой. Утверждается, что эти соединения полезны в качестве иммуномодуляторов.

Краткое изложение сущности изобретения

Обнаружено, что небольшие молекулы, в частности производные имидазохинолин-4-аминов, являются высокоэффективными активаторами ТЬК7. Эти производные имидазохинолина имеют благоприятные физико-химические и фармакокинетические свойства. Соответственно в настоящем изобретении предложены соединения, которые, как обнаружено, являются активаторами ТЬК.7, и которые описаны общей структурной формулой I:

где К₁ выбран из алкила, алкинила, арила, алкокси, гетероциклила и гетероарила, где алкил, алкинил, арил, алкокси, гетероциклил или гетероарил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из -ОН, галогена, -ΟΘ-Ν(Κ₄)₂, -Ν(Κ₄)₂, группы -СО-С_1-10алкил, группы -СО-О-С_1-10алкил, -Ν₃, арила и гетероциклила, где каждый К₄ независимо выбран из -С_1-10алкила, группы -С_1-10алкил-арил или арила;

А представляет собой С₁-С₆алкил;

В представляет собой -Ν(Κ₂)(Κ₃);

К₂ представляет собой -(СО)-К₅;

К₅ выбран из алкила, алкинила, арила, гетероциклила и гетероарила, каждый из которых возможно замещен одним или более заместителями, выбранным из -ОН, галогена, -ΟΝ, -ΝΟ₂, -СООН, -δΗ, группы -СО-С_1-6алкил, группы -СО-О-С_1-6алкил, -Ν₃, арила, гетероциклила, группы -СО-арил и группы -СОгетероциклил;

К₃ выбран из гетероарила, циклоалкила и гетероциклила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, алкокси, галогена, -ОН, -Ν3, трифторметила, группы -алкил-арил, группы -О-алкил-арил, группы -СО-арил, арила, гетероциклила, гетероарила, группы -СО-гетероарил, группы -СО-О-алкил, группы -СО-Ы-алкил, группы -СО-Ы-арил, где гетероарильная группа представляет собой ароматическое кольцо или кольцевую систему, которое(ая) содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, δ и Ν;

гетероциклильная группа представляет собой неароматическую моно-или бициклическую кольцевую систему, которая содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из О, δΟ_x или Ν, где х равен 0, 1 или 2, алкильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 10 атомов углерода, алкенильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную двойную связь, алкинильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную тройную связь, группа алкокси представляет собой алкильную группу, как она определена выше, присоединенную через атом кислорода, циклоалкильная группа является моноциклической или полициклической и имеет от 3 до 10 кольцевых атомов углерода, арил представляет собой фенил, нафтил, дифенил, флуоренил или инденил, и их фармацевтически приемлемые сольваты, соли, Ν-оксиды или стереоизомеры либо их комбинации.

Предпочтительными являются соединения формулы (I), где К₁ представляет собой алкинил или ал- 2 023556 кокси.

Предпочтительными являются соединения формулы (I), где К₃ представляет собой гетероциклил, который возможно замещен одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, галогена и -ОН. Также предпочтительными являются соединения формулы (I), где К₃ выбран из диоксотетрагидротиофенила, пиперидинила, тетрагидрофуранила, пиридинила, тетрагидропиранила и азабициклооктанила, каждый из которых возможно замещен одной или более группами, независимо выбранными из галогена, гидроксила, арила, алкила, алкокси и трифторметила.

Предпочтительными являются соединения формулы (I), где К! представляет собой этил.

Предпочтительными являются соединения формулы (I), где К₅ представляет собой метил.

Также предпочтительными являются соединение, представляющее собой: Ы-[4-(4-амино-2-этил-1 Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-Н-(1,1-диоксидотетрагидро-3-тиенил)ацетамид, Ы-[4-(4-амино-2этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-Н-(1-метил-1-оксидопиперидин-4-ил)ацетамид, 3-{ацетил[4(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентит, Ν[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-Н-(1-бензил-2-метил-1-оксидопирролидин-3ил)ацетамид, и его фармацевтически приемлемая соль.

Согласно настоящему изобретению также предложено применение соединения по изобретению в качестве лекарственного средства для лечения заболеваний, чувствительных к активации То11-подобных рецепторов 7 (ТЬК7).

Согласно настоящему изобретению также предложена фармацевтическая композиция для лечения заболевания, чувствительного к активации ТЬК7, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы I в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем. Предпочтительно, когда фармацевтическая композиция содержит соединение формулы I в количестве, достаточном для обеспечения дозы субъекту от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг соединения.

Также, согласно настоящему изобретению, предложено применение соединения по изобретению и применение фармацевтической композиции по изобретению в лечении вирусного или неопластического заболевания.

Также, согласно настоящему изобретению, предложено применение соединения по изобретению и применение фармацевтической композиции по изобретению в лечении рака, выбранного из группы, включающей рак молочной железы, мочевого пузыря, костей, головного мозга, центральной и периферической нервной системы, толстой кишки, эндокринных желез, пищевода, эндометрия, герминогенный рак, рак головы и шеи, печени, легкого, гортани и гипофаринкса, мезотелиому, саркому, рак яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, прямой кишки, почки, тонкой кишки, мягких тканей, яичка, желудка, кожи, мочеточника, влагалища и вульвы; наследственный рак, ретинобластому и опухоль Вильмса; лейкемию, лимфому, неходжкинскую болезнь (иои-Нобдкт'з Лзеазе), хроническую и острую миелоидную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, болезнь Ходжкина, множественную миелому и Т-клеточную лимфому; миелодиспластический синдром, неоплазию плазматических клеток, паранеопластические синдромы, рак неизвестной первичной локализации и злокачественные опухоли, связанные с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Также, согласно настоящему изобретению, предложено применение соединения по изобретению и применение фармацевтической композиции по изобретению в лечении медицинского состояния, выбранного из группы, включающей остроконечные бородавки; обыкновенные бородавки; роговые бородавки; гепатит В; гепатит С; простой герпес типа I и типа II; контагиозный моллюск; вирус иммунодефицита человека (ВИЧ); цитомегаловирус (СМУ); вирусы ветряной оспы и опоясывающего лишая (νζν); интраэпителиальные неоплазии; грибковые заболевания; неопластические заболевания; паразитарные заболевания; бактериальные инфекции; экзему; эозинофилию; эссенциальную тромбоцитемию; проказу; рассеянный склероз; синдром Омена; дискоидную волчанку; болезнь Боуэна; бовеноидный папулез; атопические заболевания; астму; аллергию; аллергический ринит; системную красную волчанку; рецидивные грибковые заболевания, периодонтит и хламидиоз; или для улучшения или стимулирования заживления ран. Предпочтительное медицинское состояние выбрано из группы, состоящей из интраэпителиальной цервикальной неоплазии, вируса папилломы человека (НРУ), ассоциированных неоплазий, кандидоза, аспергиллеза, криптококкового менингита, базально-клеточной карциномы, волосатоклеточного лейкоза, саркомы Капоши, почечно-клеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы, миелолейкоза, множественной миеломы, меланомы, неходжкинской лимфомы, Т-клеточной лимфомы кожи, пневмоцистной пневмонии, криптоспоридиоза, гистоплазмоза, токсоплазмоза, трипаносомной инфекции, лейшманиоза, туберкулеза, инфекции, вызванной МусоЪас1егшт аущт и атопического дерматита. Предпочтительно, когда раны представляют собой хронические раны.

Также, согласно настоящему изобретению, предложено применение соединения по изобретению и применение фармацевтической композиции по изобретению в качестве адъюванта вакцин для выработки клеточного иммунитета.

Кроме того, согласно настоящему изобретению, предложено применение соединения по изобретению и применение фармацевтической композиции по изобретению для использования в изготовлении лекарственного средства для активации ТЬК7.

- 3 023556

Также описаны способы синтеза соединений формулы I.

Описание графических материалов

На фиг. 1 показано влияние хлорохина на индукцию цитокинов агонистами ТЬК7 в клетках РСРК-1. Экспрессию мРНК 1Ь8 измеряли полимеразной цепной реакцией (ПЦР) ТацМап после 16 ч инкубации клеток с Н2006, липополисахаридом (ЬР8) или Резиквимодом (РсБКЦЙтоб) по отдельности и в комбинации с хлорохином.

На фиг. 2 показан каскадный скрининг агониста ТЬК7.

На фиг. 3 показана индукция мРНК цитокинов в 1РВМС, обработанных 3-{ацетил[4-(4-амино-2этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентитом (пример III, ТЬК агонист 1).

На фиг. 4 показаны исследования эталонных соединений на модели легочных метастазов Кепса (Ье_)а А., НоРтапп Н.Р., Ма1ег Т., ЭгасНе Ό., ОгеЬе С, Иксйег 8., ОиптшсН Р., 8аибег8 К., Оеке1ег V. МеРа8Ра818 оР тигше Кепса ккпеу сапсег се118 Ро Рке 1ипд8 оР Ва1Ь/с тке ίδ 8Ргопд1у 8иррге88еб Ьу ТЬК9 ог ТЬК7 адоп18р8. АЬ8РгасР 3552, Ргос Ат Сапсег Ке8 48, 2007), где ТОО означает 7-тиа-8-оксогуанозин; ΡΜΌΖΟ означает производное имидазохинолина. В частности, самок мышей Ва1Ь/с (п=10) обрабатывали в течение 4 последовательных дней, начиная с первого или восьмого дня после введения опухолевых клеток Кепса Ρ/κΖ. соответственно. Как указано, соединения, имеющие небольшие молекулы (8МОЬ), использовали в 20% полиэтиленгликоле (ПЭГ), ΟΌΝ (олигонуклеотиды) использовали в 0,9% ЫаС1. Легкие иссекали через 25 дней после введения опухолевых клеток (см. фиг. 4А).

Далее, как указано, самок мышей Ва1Ь/с (п=5) обрабатывали в течение 4 последовательных дней. Соединения (8МОЬ) использовали в 20% ПЭГ, ΟΌΝ -в 0,9% №С1. На четвертый день исследования отбирали кровь из ретроорбитального сплетения (огЫРа1 р1ехи8) и иссекали селезенки. Затем выделяли мРНК для анализа экспрессии с помощью с.|ПЦР. Данные нормализовали к контролю с носителем (среднее приведено к 1). Статистическую оценку проводили с помощью теста Манна-Уитни (Мапп-\У1Шпеу Ре8Р) (см. фиг. 4Б).

На фиг. 5 показаны исследования, сходные с приведенными на фиг. 4, но выполненные с использованием 3-{ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4тридезоксипентита (ТЬК агонист 1, пример III) и ^[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил) бутил]-^(1,1-диоксидотетрагидро-3-тиенил)ацетамида (ТЬК агонист 2, пример I) на модели легочных метастазов Кепса.

Подробное описание изобретения

Обнаружено, что подробно описанные ниже производные имидазохинолинов, являются эффективными активаторами ТЬК7 и имеют неожиданные и чрезвычайно полезные свойства.

Кроме того, исходя из вышесказанного, также обнаружено, что определенные фармацевтически приемлемые сольваты, соли, Ν-оксиды или стереоизомеры этих производных имидазохинолинов либо их комбинации, имеют неожиданные и чрезвычайно полезные свойства.

Согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I

где К| выбран из алкила, алкинила, арила, алкокси, гетероциклила и гетероарила, где алкил, алкинил, арил, алкокси, гетероциклил или гетероарил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из -ОН, галогена, -СО-^К₄)₂, -^Кдк, группы -СО-Сы₀алкил, группы -СО-О-Сы^лкил, -Ν₃, арила и гетероциклила, где каждый Кд независимо выбран из -Сыоалкила, группы -Сы₀алкил-арил или арила;

А представляет собой С1-С₆алкил;

В представляет собой -Ы(К₂)(К₃);

К₂ представляет собой -(СО)-К₅;

К₅ выбран из алкила, алкинила, арила, гетероциклила и гетероарила, каждый из которых возможно замещен одним или более заместителями, выбранным из -ОН, галогена, -ΟΝ, -ИО₂, -СООН, -8Н, группы -СО-С_!-6алкил, группы -СО-О-С1_-6алкил, -Ν₃, арила, гетероциклила, группы -СО-арил и группы -СОгетероциклил;

К₃ выбран из гетероарила, циклоалкила и гетероциклила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, алкокси, галогена, -ОН, -Ν3, трифторметила, группы -алкил-арил, группы -О-алкил-арил, группы -СО-арил, арила, гетероциклила, гетероарила, группы -СО-гетероарил, группы -СО-О-алкил, группы -СО-Ы-алкил, группы -СО-И-арил,

Где гетероарильная группа представляет собой ароматическое кольцо или кольцевую систему, которое(ая) содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, 8 и Ν;

- 4 023556 гетероциклильная группа представляет собой неароматическую моно-или бициклическую кольцевую систему, которая содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из О, 8О_Х или Ν, где х равен 0, 1 или 2, алкильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 10 атомов углерода, алкенильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную двойную связь, алкинильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную тройную связь, группа алкокси представляет собой алкильную группу, как она определена выше, присоединенную через атом кислорода, циклоалкильная группа является моноциклической или полициклической и имеет от 3 до 10 кольцевых атомов углерода, арил представляет собой фенил, нафтил, дифенил, флуоренил или инденил, или их фармацевтически приемлемые сольваты, соли, Ν-оксиды или стереоизомеры либо их комбинации.

Использованные здесь термины алкил, алкенил, алкинил и приставка алк- включают как группы с неразветвленной и разветвленной цепью, так и циклические группы, то есть циклоалкил и циклоалкенил. Если не указано иное, эти группы имеют в общем до 10 атомов углерода. Циклические группы могут быть моноциклическими или полициклическими и имеют в кольце 3-10 атомов углерода. Типичные циклические группы включают циклопропил, циклопентил, циклогексил и адамантил.

В частности, термин алкил относится к алкильному радикалу с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющему 1-4 атомов углерода. Примеры включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил. Замещенный алкил является таким, как определено выше.

Далее, термин алкинил относится к алкильной группе, имеющей по меньшей мере два углеродных атома и включающей углерод-углеродную тройную связь. Замещенный алкинил является таким, как определено выше.

Подобным образом, алкенил относится к алкильной группе, имеющей по меньшей мере два углеродных атома и включающей углерод-углеродную двойную связь.

Далее, термин алкокси относится к алкильной группе, присоединенной через атом кислорода.

Использованный здесь термин арил означает фенил, нафтил, дифенил, флуоренил или инденил. В частности, термин арил относится к фенилу или нафтилу. В предпочтительном воплощении арил является фенилом. Замещенный арил является таким, как определено выше.

Термин гетероарил означает ароматическое кольцо или кольцевую систему, которые содержат по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, 8 и Ν. В частности, типичные гетероарильные группы включают фурил, тиенил, пирролил, пиразолил, имидазолил, триазолил, тетразолил, изоксазолил, оксазолил, тиазолил, изотиазолил, оксадиазолил, оксатриазолил, тиадиазолил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, бензофуранил, изобензофуранил, тионафтенил, изотионафтенил, индолил, изоиндолил, индазолил, бензизоксазолил, бензоксазолил, бензотиазолил, бензизотиазолил, пуринил, бензопиранил, хинолинил, изохинолинил, циннолинил, хиназолинил, нафтиридинил и бензоксазинил, которые в каждом случае являются незамещенными или возможно могут быть замещены по одному или более чем одному положению.

Замещенный гетероарил замещен, например, одним или более чем одним галогеном, гидроксилом, арилом, алкилом, аралкилом, алкокси, карбокси, циано, трифторметилом, нитро, диалкиламино или их комбинациями.

Использованный здесь термин гетероциклил относится к неароматической моно- или бициклической кольцевой системе, которая содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из О, 8О_Х или Ν, где х равен 0, 1 или 2. Типичные гетероциклильные группы включают пирролидинил, тетрагидрофуранил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперидинил, пиперазинил, тиазолидинил, имидазолидинил, тетрагидропиранил, азабициклооктанил, такой как 1-азабицикло[2.2.2]октанил, 1-оксо- и диоксотетрагидротиофенил или циклопентилсульфонил, а также их бензоконденсированные формы и/или Νоксиды, которые в каждом случае являются незамещенными или возможно могут быть замещены по одному или более чем одному положению. Замещенный гетероциклил, например, замещен одним или более чем одним галогеном, гидроксилом, арилом, алкилом, аралкилом, алкокси, карбокси, циано, трифторметилом, нитро, диалкиламино или их комбинациями.

Следует понимать, что настоящее изобретение охватывает все комбинации вышеуказанных замещающих групп. В частности, настоящее изобретение охватывает все комбинации вышеуказанных предпочтительных групп.

Фармацевтически приемлемые соли соединений по изобретению включают все соли присоединения неорганических и органических кислот и соли с основаниями, главным образом все фармацевтически приемлемые соли присоединения неорганических и органических кислот и соли с основаниями, в особенности все фармацевтически приемлемые соли присоединения неорганических и органических кислот

- 5 023556 и соли с основаниями, которые обычно используются в фармацевтике.

Примеры солей присоединения кислот включают гидрохлориды, гидробромиды, фосфаты, нитраты, сульфаты, ацетаты, цитраты, Ό-глюконаты, бензоаты, 2-(4-гидроксибензоил)бензоаты, бутираты, сульфосалицилаты, малеаты, лаураты, малаты, фумараты, сукцинаты, оксалаты, тартраты, стеараты, толуолсульфонаты, метансульфонаты, 3-гидрокси-2-нафтоаты и трифторацетаты, но не ограничены ими.

Примеры солей с основаниями включают соли лития, натрия, калия, кальция, алюминия, магния, титана, аммония, меглюмина и гуанидиния. Среди них предпочтительными являются соли натрия и аммония.

Соли включают нерастворимые и, в особенности, растворимые в воде соли.

Соединения по изобретению и их соли могут содержать, например, в случае выделения в кристаллической форме, различные количества растворителей. Тем самым в объем изобретения включены все сольваты соединений формулы (I) и их солей. Гидраты являются предпочтительным примером указанных сольватов.

Ν-оксиды соединений по изобретению и их солей включают соединения, в которых атом азота замещающей группировки окислен.

В некоторых воплощениях соединения по изобретению и их соли могут включать стереоизомеры. Каждый из стереогенных центров, присутствующих в указанных стереоизомерах, может иметь абсолютную конфигурацию К или абсолютную конфигурацию δ (согласно правилам Кана, Ингольда и Прелога). Все такие стереоизомеры и их соли включены в объем изобретения. Кроме того, настоящее изобретение включает все смеси указанных выше стереоизомеров независимо от их соотношения, включая рацематы.

Соединения по изобретению и их соли, содержащие двойную связь, могут существовать в форме Еизомеров и Ζ-изомеров. Оба указанных изомера включены в объем изобретения. Ζ-изомер представляет собой геометрический изомер, в котором углеродные атомы, соединенные двойной связью, имеют две самые старшие группы с одной и той же стороны двойной связи. Е-изомер представляет собой геометрический изомер, в котором углеродные атомы, соединенные двойной связью, имеют две самые старшие группы с противоположных сторон двойной связи.

Некоторые соединения и соли по изобретению могут существовать в различных кристаллических формах (полиморфы); все такие формы включены в объем изобретения.

Кроме того, настоящее изобретение охватывает производные соединений формулы (I) и их солей, которые превращаются в соединение (I) или его соль в биологической системе (биопредшественники или пролекарства). Указанная биологическая система представляет собой, например, организм млекопитающего, в частности человека. Биопредшественник превращается в соединение формулы (I) или его соль, например, в процессе метаболизма.

Согласно одному из предпочтительных воплощений настоящее изобретение относится к соединению формулы ^с), которое является соединением формулы (I), как определено выше, где Κι представляет собой алкинил или алкокси.

В предпочтительном воплощении соединения формулы (I), в том числе соединения формулы ^с), по настоящему изобретению К₃ является гетероциклилом, который возможно замещен одним или более заместителями, как определено выше.

В другом предпочтительном воплощении соединения формулы (I), в том числе соединения формулы ^с), К| является алкилом, более предпочтительно этилом.

В еще одном предпочтительном воплощении соединения формулы (I), в том числе соединения формулы ^с), К₅ является алкилом, более предпочтительно метилом.

В следующем предпочтительном воплощении соединения формулы (I), в том числе соединения формулы ^с), К₃ является гетероциклилом, который возможно замещен одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, галогена или -ОН.

В следующем предпочтительном воплощении соединения формулы (I), в том числе соединения формулы ^с), А является С_2-4алкилом, более предпочтительно С₄алкилом.

Другое предпочтительное воплощение соединений по настоящему изобретению относится к соединениям формулы (I), выбранным из ^[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-^(1,1диоксидотетрагидро-3-тиенил)ацетамида, ^[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]^(1-метил-1-оксидопиперидин-4-ил)ацетамида, 3-{ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентита или ^[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5с]хинолин-1 -ил)бутил] -Ν-( 1 -бензил-2-метил-1-оксидопирролидин-3 -ил)ацетамида, или их фармацевтически приемлемым солям.

Фармацевтические композиции по изобретению содержат терапевтически эффективное количество соединения формулы (I) (в том числе соединения формулы ^с)) по настоящему изобретению в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.

Термин терапевтически эффективное количество означает количество соединения, достаточное чтобы обеспечить терапевтический эффект, такой как активация ТЬК7. Это может вызывать индукцию цитокинов, противоопухолевую активность и/или антивирусную активность. Хотя точное количество активного соединения, используемое в фармацевтической композиции по изобретению, может меняться

- 6 023556 в зависимости от известных специалистам факторов, например, от физической и химической природы соединения, а также от природы носителя и предназначенного режима введения, предполагается, что композиции по изобретению будут содержать активный ингредиент в количестве достаточном, чтобы обеспечить дозу субъекту от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг, предпочтительно от примерно 10 мкг/кг до примерно 5 мг/кг соединения.

Может быть использована любая общепринятая лекарственная форма, такая как таблетки, леденцы, парентеральные препараты, сиропы, кремы, мази, аэрозольные препараты, трансдермальные пластыри, трансмукозальные пластыри и тому подобное.

Соединения по изобретению можно вводить в качестве единственного терапевтического агента в схеме лечения, или их можно вводить с одним или несколькими другими активными агентами, включая дополнительные противораковые агенты, иммуномодуляторы, антивирусные средства, антибиотики и тому подобное.

Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, которые включают по меньшей мере одно из соединений или фармацевтически приемлемых солей по изобретению вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным средством.

Предпочтительно фармацевтические композиции включают одно или два соединения или фармацевтически приемлемые соли по изобретению. Более предпочтительно фармацевтические композиции включают одно соединение или фармацевтически приемлемые соли по изобретению.

В особенно предпочтительном воплощении настоящего изобретения, фармацевтические композиции включают соединение из примеров настоящего изобретения вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным средством.

Фармацевтические композиции могут содержать по меньшей мере одно из соединений или фармацевтически приемлемых солей по изобретению (далее именуемых как активное соединение) в общем количестве 0,1-99,9 мас.%, предпочтительно 5-95 мас.%, более предпочтительно 20-80 мас.%.

В качестве фармацевтически приемлемых вспомогательных средств может быть использовано любое вспомогательное средство, которое известно как пригодное для изготовления фармацевтических композиций. Примеры таких средств включают растворители, эксципиенты, диспергирующие агенты, эмульгаторы, солюбилизаторы, гелеобразователи, основы мазей, антиокислители, консерванты, стабилизаторы, носители, наполнители, связывающие вещества, загустители, комплексообразующий агенты, разрыхлители, буферы, промоторы проникновения, полимеры, смазывающие вещества, покрывающие вещества, пропелленты, агенты, регулирующие тоничность, поверхностно-активные вещества, пигменты, корригенты, подсластители и красители, но не ограничиваются ими. В частности, используют вспомогательные средства такого типа, который подходит для требуемого препарата и требуемого способа введения.

Фармацевтические композиции могут быть изготовлены, например, в виде таблеток, таблеток с оболочкой (драже), пилюль, облаток, капсул (каплет), гранул, порошков, суппозиториев, растворов (например, стерильных растворов), эмульсий, суспензий, мазей, кремов, лосьонов, паст, масел, гелей, спреев и пластырей (например, трансдермальных терапевтических систем). Кроме того, фармацевтические композиции могут быть изготовлены в виде, например, липосомных систем доставки, систем, в которых активное соединение связано с моноклональными антителами, и систем, в которых активное соединение связано с полимерами (например, растворимыми или биоразрушаемыми полимерами).

Фармацевтические композиции, содержащие активное соединение и по меньшей мере одно вспомогательное средство могут быть изготовлены известным специалистам способом, например, с помощью процессов растворения, смешивания, гранулирования, изготовления драже, растирания в порошок, эмульгирования, инкапсулирования, улавливания или лиофилизации.

Выбор лекарственной формы зависит среди прочего от способа введения фармацевтической композиции. Фармацевтические композиции по изобретению можно вводить любым подходящим способом, например, пероральным, сублингвальным, трансбуккальным, внутривенным, внутриартериальным, внутримышечным, подкожным, внутрикожным, местным, трансдермальным, интраназальным, внутриглазным, интраперитонеальным, интрастернальным, внутрикоронарным, трансуретральным, ректальным или вагинальным путем, с помощью ингаляции или инсуффляции. Предпочтительно пероральное введение.

Таблетки, таблетки с оболочкой (драже), пилюли, облатки, капсулы (каплеты), гранулы, растворы, эмульсии и суспензии, например, пригодны для перорального введения. В частности, указанные лекарственные формы могут быть адаптированы так, чтобы представлять собой, например, энтеральную форму, форму с немедленным высвобождением, форму с замедленным высвобождением, форму с многократным высвобождением дозы, форму с длительным высвобождением или форму с непрерывным высвобождением. Указанные формы могут быть получены, например, с помощью покрытия таблеток оболочкой, с помощью распределения таблеток по разным отсекам, разделенным слоями, разрушающимися при различных условиях (например, уровнях рН) или с помощью связывания активного соединения с биоразрушаемым полимером.

Ингаляционное введение предпочтительно осуществляют с использованием аэрозоля. Аэрозоль

- 7 023556 представляет собой дисперсию жидкости в газе, дисперсию твердых частиц в газе или смешанную дисперсию жидкости и твердых частиц в газе.

Аэрозоль можно генерировать с помощью аэрозольных устройств, таких как порошковые ингаляторы (ΌΡΙ), дозирующие ингаляторы под давлением (ΡΜΌΙ) и небулайзеры. В зависимости от типа вводимого активного соединения, аэрозольное устройство может содержать активное соединение в форме порошка, раствора или дисперсии. Порошок может содержать, например, одно или более чем одно из следующих вспомогательных средств: носители, стабилизаторы и наполнители. Раствор может содержать в дополнение к растворителю, например, одно или более чем одно из следующих вспомогательных средств: пропелленты, солюбилизаторы (со-растворители), поверхностно-активные вещества, стабилизаторы, буферы, агенты, регулирующие тоничность, консерванты и корригенты. Дисперсия может содержать в дополнение к диспергирующему агенту, например, одно или более чем одно из следующих вспомогательных средств: пропелленты, поверхностно-активные вещества, стабилизаторы, буферы, консерванты и корригенты. Примеры носителей включают сахариды, например лактозу и глюкозу, но не ограничены ими. Примеры пропеллентов включают фторуглеводороды, например 1,1,1,2-тетрафторэтан и 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан, но не ограничены ими.

Размер частиц аэрозоля (твердых, жидких или твердых/жидких частиц) составляет предпочтительно менее 100 мкм, более предпочтительно он находится в пределах 0,5-10 мкм, в особенности в пределах 26 мкм (значение ГО50, измеренное методом лазерной дифракции).

Конкретные аэрозольные устройства, которые можно использовать для ингаляционного введения, включают ингаляторы Сус1ока1ег®, О|5кка1ег®, КоБаШзк®, ТигЬока1ег®, Ли1ока1ег®, ТигЬока1ег®, Νονοΐί/сг®. Еа8ука1ег®, Легок/ег®, 1е1На1ег®, П18ки8®, икгака1ег® и Музкс®, но не ограничены ими. Аэрозольные устройства можно объединять со спейсерами и расширителями, например ЛегоскатЬег®, ХеЬи1а1ог®, Уо1итакс® и Копко®, для повышения эффективности ингаляции.

В случае местного введения подходящими фармацевтическими формами являются, например, мази, кремы, лосьоны, пасты, гели, порошки, растворы, эмульсии, суспензии, масла, спреи и пластыри (например, трансдермальные терапевтические системы).

Для парентерального способа введения такого как, например, внутривенный, внутриартериальный, внутримышечный, подкожный, внутрикожный, интраперитонеальный и интрастернальный способ, предпочтительно используют растворы (например, стерильные растворы, изотонические растворы). Их предпочтительно вводят с помощью методов инъекции или инфузии.

В случае интраназального введения предпочтительными препаратами, например, являются спреи и растворы, применяемые в капельной форме.

Для внутриглазного введения типичными препаратами являются растворы, применяемые в капельной форме, гели и мази.

Как правило, фармацевтические композиции по изобретению можно вводить так, чтобы доза активного соединения находилась в обычных для активаторов ТЕК7 пределах. В частности, для среднего взрослого пациента, имеющего массу 70 кг, предпочтительна доза в пределах 0,01-4000 мг, предпочтительно 0,1-2000 мг, более предпочтительно 0,5-1000 мг, наиболее предпочтительно 1-500 мг активного соединения в день. В этом отношении следует отметить, что доза зависит от, например, конкретного используемого соединения, биологического вида, подлежащего лечению, возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола и рациона субъекта, проходящего лечение, способа и времени введения, скорости выведения, тяжести заболевания, подлежащего лечению, и комбинации лекарственных средств.

Фармацевтическую композицию можно вводить в виде одной дозы в день или в виде множества субдоз, например 2-4 дозы в день. Единица однократной дозы фармацевтической композиции может содержать, например, 0,01-4000 мг, предпочтительно 0,1-2000 мг, более предпочтительно 0,5-1000 мг, наиболее предпочтительно 1-500 мг активного соединения. Кроме того, фармацевтическая композиция может быть адаптирована для еженедельного, ежемесячного или даже более редкого введения, например, используя имплантат, например подкожный или внутримышечный имплантат, используя активное соединение в форме труднорастворимой соли или используя активное соединение, связанное с полимером.

Как показано в экспериментах, выполненных в соответствии с описанными ниже тестами, соединения по изобретению активируют ТЕК7. Соединения по изобретению полезны в качестве противораковых агентов для тех видов рака, которые чувствительны к активации ТЕК7.

Примеры таких видов рака включают рак молочной железы, мочевого пузыря, костей, головного мозга, центральной и периферической нервной системы, толстой кишки, эндокринных желез, пищевода, эндометрия, герминогенный рак, рак головы и шеи, почки, печени, легкого, гортани и гипофаринкса, мезотелиому, саркому, рак яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, прямой кишки, почки, тонкой кишки, мягких тканей, яичка, желудка, кожи, мочеточника, влагалища и вульвы; наследственный рак, ретинобластому и опухоль Вильмса; лейкемию, лимфому, неходжкинскую болезнь, хроническую и острую миелоидную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, болезнь Ходжкина, множественную миелому и Т-клеточную лимфому, миелодиспластический синдром, неоплазию плазматических клеток, паранеопластические синдромы, рак неизвестной первичной локализации и злокачест- 8 023556 венные опухоли, связанные со СПИДом, но не ограничены ими.

Предпочтительно использовать агонисты ТЬК7 для лечения рака кожи или почки. Чувствительность данного вида рака к активации ТЬК.7 можно оценить путем измерения уменьшения первичной или метастатической опухолевой массы (незначительная, частичная или полная регрессия), изменений гемограммы, изменения концентрации гормонов или цитокинов в крови, подавления дальнейшего увеличения опухолевой массы, стабилизации заболевания у пациента, анализа относящихся к заболеванию биомаркеров или суррогатных маркеров, увеличения общей выживаемости пациентов, увеличения периода до прогрессирования заболевания у пациента, увеличения выживаемости пациентов без прогрессирования заболевания, увеличения выживаемости пациентов без заболевания, возрастания качества жизни пациентов или модуляции сопутствующих заболеванию проявлений (например, боли, кахексии, мобилизации, госпитализации, изменения гемограммы, потери массы, заживления ран, лихорадки), но не ограничиваясь ими.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть полезны в качестве иммуномодуляторов, которые могут модулировать иммунный ответ несколькими различными способами, что делает их пригодными для лечения широкого круга расстройств.

Цитокины, которые могут быть индуцированы введением соединений по изобретению, как правило, включают интерферон (ΙΡΝ) и/или фактор некроза опухоли-α (ΤΝΕ-α). а также определенные интерлейкины (1Ь). Цитокины, биосинтез которых может быть индуцирован соединениями по изобретению, включают ΙΡΝ-α, ΤΝΡ-α, 1Ь-1, 6, 10 и 12, и ряд других цитокинов. Наряду с другими эффектами, цитокины подавляют продуцирование вирусов и рост опухолевых клеток, делая указанные соединения пригодными для лечения опухолей и вирусных заболеваний.

Кроме способности индуцировать продукцию цитокинов соединения по изобретению влияют на другие аспекты врожденного иммунного ответа. Например, может быть стимулирована активность естественных клеток-киллеров, результат, который может быть обусловлен индукцией цитокинов. Соединения могут также активировать макрофаги, которые в свою очередь стимулируют секрецию оксида азота и продуцирование дополнительных цитокинов. Кроме того, соединения могут вызывать пролиферацию и дифференциацию В-лимфоцитов.

Соединения по изобретению также могут влиять на приобретенный иммунный ответ. Например, не имея в виду какую-то конкретную теорию, считается, что не существует никакого непосредственного влияния на Т-клетки или непосредственной индукции цитокинов Т-клетками, но введение соединений косвенно индуцирует продуцирование цитокина ΙΡΝ-γ Т-хелперов типа 1 (ТЫ) и ингибирует продуцирование цитокинов 1Ь-4, 1Ь-5 и 1Ь-13 Т-хелперов типа 2 (ТЬ2). Такая активность означает, что соединения пригодны в лечении заболеваний, где требуется положительная регуляция ответа ТЫ и/или отрицательная регуляция ответа ТЬ2. Принимая во внимание способность определенных соединений формулы I подавлять иммунный ответ ТЬ2, ожидают, что эти соединения пригодны в лечении состояний, которые связаны с чрезмерной стимуляцией ответа ТЬ2, таких как атопические заболевания, например атопический дерматит, астма, аллергия, аллергический ринит, системная красная волчанка, в качестве адъювантов вакцин для выработки клеточного иммунитета, и, возможно, для лечения рецидивных грибковых заболеваний, периодонтита и хламидиоза.

Модифицирующее влияние соединений по изобретению на иммунный ответ делает их пригодными в лечении широкого круга состояний. Вследствие своей способности индуцировать выработку таких цитокинов, как ΙΡΝ-α и/или ТОТ^а и 1Ь-12, соединения в особенности пригодны в лечении вирусных заболеваний и опухолей. Эта иммуномодулирующая активность предполагает, что соединения по изобретению пригодны в лечении заболеваний, таких как вирусные заболевания, включая остроконечные бородавки, обыкновенные бородавки, роговые бородавки, гепатит В, гепатит С, простой герпес типа Ι и типа II, контагиозный моллюск, вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), цитомегаловирус (СМУ), вирусы ветряной оспы и опоясывающего лишая (νζν), интраэпителиальные неоплазии, такие как интраэпителиальная цервикальная неоплазия, вирус папилломы человека (НРУ) и ассоциированные неоплазии, грибковые заболевания, например кандидоз, аспергиллез и криптококковый менингит, неопластические заболевания, например базально-клеточный рак, волосатоклеточный лейкоз, саркома Капоши, почечноклеточный рак, плоскоклеточный рак, миелолейкоз, множественная миелома, меланома, неходжкинская лимфома, Т-клеточная лимфома кожи, и другие виды рака, паразитарные заболевания, например пневмоцистная пневмония, криптоспоридиоз, гистоплазмоз, токсоплазмоз, трипаносомная инфекция и лейшманиоз, и бактериальные инфекции, например туберкулез и инфекция, вызванная МусоЪас1етшт аушт, но не ограничены этими заболеваниями. Кроме того, заболевания или состояния, для лечения которых могут быть использованы соединения по изобретению, включают экзему, эозинофилию, эссенциальную тромбоцитемию, проказу, рассеянный склероз, синдром Омена, дискоидную волчанку, болезнь Боуэна, бовеноидный папулёз; также соединения могут быть использованы для улучшения или стимулирования заживления ран, включая хронические раны.

Соответственно, согласно изобретению раскрыт способ активации ТЬК7 у животного, особенно у млекопитающего, предпочтительно человека, включающий введение животному эффективного количе- 9 023556 ства соединения формулы I. Эффективное количество соединения будет варьироваться в зависимости от известных специалистам факторов, но ожидают, что оно будет составлять дозу от примерно 100 нг/кг до примерно 60 мг/кг, предпочтительно от примерно 10 мкг/кг до примерно 30 мг/кг, соединения, более предпочтительно от примерно 10 мкг/кг до примерно 5 мг/кг.

Также согласно изобретению раскрыт способ лечения вирусной инфекции у животного, включающий введение животному эффективного количества соединения формулы I. Количество, эффективное для лечения или ингибирования вирусной инфекции, представляет собой такое количество, которое вызывает ослабление одного или нескольких проявлений вирусной инфекции, таких как вирусные поражения, вирусная нагрузка, уровень продуцирования вируса и смертность по сравнению с контрольными животными, лечение которых не проводили. Точное количество соединения будет варьироваться в зависимости от известных специалистам факторов, но ожидают, что оно будет составлять такую же дозу, как указанная выше доза для активации ТЬК7, или дозу от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг, предпочтительно от примерно 10 мкг/кг до примерно 5 мг/кг.

Количество, эффективное для лечения неопластического состояния, представляет собой такое количество, которое вызывает уменьшение размера опухоли или сокращение числа опухолевых очагов. Точно также, точное количество соединения будет варьироваться в зависимости от известных специалистам факторов, но ожидают, что оно будет составлять такую же дозу, как указанная выше доза для активации ТЬК7, или дозу от примерно 100 мг/кг до примерно 50 мг/кг, предпочтительно от примерно 10 мг/кг до примерно 5 мг/кг.

Соединения по изобретению могут быть получены, например, как изложено ниже и согласно указанным ниже стадиям реакции, или, в особенности, способами, описанными, в качестве примера, с помощью нижеследующих примеров.

Как показано на реакционной схеме А, соединение формулы 7, где К₃ имеет значение, определенное выше, может быть получено путем обработки хинолин-4-ола азотной кислотой для получения его нитропроизводного формулы 1, которое затем подвергают взаимодействию с оксихлоридом фосфора в присутствии Ν,Ν-диметилформамида с получением 4-хлор-3-нитрохинолина формулы 2. В результате реакции соединения формулы 2 с трет-бутиловым эфиром (4-амино-бутил)-карбаминовой кислоты получают соединение формулы 4, которое затем подвергают взаимодействию с триэтилортопропионатом в присутствии толуола с получением соединения формулы 5. Затем с трет-бутилового эфира [4-(2-этилимидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-бутил]-карбаминовой кислоты формулы 5 снимают защиту с получением 4(2-этил-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-бутиламина формулы 6. После этого соединение формулы 6 обрабатывают подходящими гетероциклическими кетонами с получением требуемого соединения формулы 7.

Как показано на реакционной схеме Б, соединение формулы I, где К₂ представляет собой -СО-К₅, а остальные обозначения имеют значения, определенные выше, может быть получено путем взаимодействия соединения формулы 7 с подходящим ангидридом кислоты формулы К₅-СО-О-СО-К₅ с получением соединения формулы 8, которое затем обрабатывают м-хлорпербензойной кислотой с получением его Νоксидного производного формулы 9. Затем соединение формулы 9 подвергают аминированию с использованием водного раствора аммиака с получением требуемого соединения формулы I.

Как показано на реакционной схеме В, соединение формулы I, где К₂ является водородом, а осталь- 10 023556 ные обозначения имеют значения, определенные выше, может быть получено путем взаимодействия соединения формулы 7 с ди-трет-бутилдикарбонатом с получением соединения формулы 10, которое затем обрабатывают м-хлорпербензойной кислотой с получением его Ν-оксидного производного формулы 11. Далее соединение формулы 11 дополнительно подвергают аминированию с использованием водного раствора аммиака с получением соединения формулы 12, с которого снимают защиту в кислых условиях с получением требуемого соединения формулы I.

Специалистам известно, что если исходное или промежуточное соединение имеет несколько реакционных центров, может быть необходимо временно блокировать один или более чем один реакционный центр защитными группами, чтобы обеспечить протекание реакции именно по требуемому реакционному центру.

Соединения по изобретению выделяют и очищают известными по сути способами, например отгонкой растворителя под вакуумом и перекристаллизацией полученного остатка из подходящего растворителя или с помощью одного из общепринятых способов очистки, такого как колоночная хроматография с подходящем носителем.

Соли соединений формулы (I) по изобретению могут быть получены растворением свободного соединения в подходящем растворителе (например, кетоне, таком как ацетон, метилэтилкетон или метилизобутилкетон, эфире, таком как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран или диоксан, хлорированном углеводороде, таком как метиленхлорид или хлороформ, или низкомолекулярном алифатическом спирте, таком как метанол, этанол или изопропанол), который содержит требуемую кислоту или основание либо к которому добавляют требуемую кислоту или основание. Кислота или основание могут быть использованы для получения соли в эквимолярном количественном соотношении или в другом соотношении, в зависимости от того, является кислота или основание одно- или многоосновными и от того, какая соль требуется. Соли получают фильтрацией, переосаждением, осаждением из растворителя, нерастворяющего соль, или выпариванием растворителя. Полученные соли могут быть превращены в свободные соединения, которые, в свою очередь, могут быть превращены в соли. Таким способом фармацевтически неприемлемые соли, которые могут быть получены, например, как продукты производственного процесса промышленного масштаба, могут быть превращены в фармацевтически приемлемые соли с помощью известных специалистам способов.

Соединения формулы (I) по изобретению могут быть превращены в их Ν-оксиды, например, с использованием перекиси водорода в метаноле или с использованием м-хлорпероксибензойной кислоты в дихлорметане. Специалистам известны условия реакций для получения Ν-оксидов.

Чистые диастереомеры и чистые энантиомеры соединений и солей по изобретению, которые существуют в форме таких стереомеров, могут быть получены, например, ассиметричным синтезом с использованием хиральных исходных соединений или разделением энантиомерных и диастереомерных смесей, полученных при синтезе.

Энантиомерные и диастереомерные смеси могут быть разделены на чистые энантиомеры и чистые диастереомеры известными специалистам способами. Предпочтительно диастереомерные смеси разделяют кристаллизацией, в частности фракционной кристаллизацией или хроматографией. Энантиомерные смеси могут быть разделены, например, путем образования диастереомеров со вспомогательным хиральным агентом, разделения полученных диастереомеров и удаления вспомогательного хирального агента. В качестве вспомогательных хиральных агентов могут быть использованы, например, хиральные кислоты для разделения энантиомерных оснований и хиральные основания для разделения энантиомерных кислот за счет образования диастереомерных солей. Кроме того, диастереомерные производные, такие как диастереомерные сложные эфиры, могут быть получены из энантиомерных смесей спиртов или энантиомерных смесей кислот, с использованием в качестве вспомогательных хиральных агентов хиральных кислот или хиральных спиртов, соответственно. Также для разделения энантиомерных смесей могут быть использованы диастереомерные комплексы или диастереомерные клатраты. Альтернативно,

- 11 023556 энантиомерные смеси могут быть разделены хроматографией с использованием хиральных разделительных колонок. Другим подходящим для выделения энантиомеров способом является ферментативное разделение.

Специалистам понятно, что изобретение не ограничено описанными здесь частными воплощениями, а охватывает все модификации указанных воплощений, которые входят в объем изобретения, определенный в прилагаемой формуле изобретения.

Следующие примеры подробно иллюстрируют настоящее изобретение, но не ограничивают его. Другие соединения по изобретению, получение которых явно не описано, могут быть получены аналогичным образом.

Соединения, которые упомянуты в примерах НУ, и их соли являются предпочтительными воплощениями изобретения.

Примеры

Получение 4-(2-этил-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-бутиламина формулы 6.

Стадия I. 3-Нитро-хинолин-4-ол.

Смесь хинолин-4-ола (1 экв.) и пропионовой кислоты нагревали до 125°С при перемешивании. К перемешиваемому раствору по каплям добавляли азотную кислоту (2,2 экв.), поддерживая температуру реакционной смеси 125°С. Реакционную смесь перемешивали при 125°С в течение 15 мин и охлаждали до температуры окружающей среды. Реакционную смесь разбавляли этанолом, и твердое вещество собирали с помощью вакуумной фильтрации. Твердое вещество промывали последовательно этанолом, водой и снова этанолом. Получившиеся желтое твердое вещество нагревали в этаноле при температуре дефлегмации и фильтровали из горячей смеси с получением чистого 3-нитро-хинолин-4-ола.

Стадия II. 4-Хлор-3-нитро-хинолин.

Оксихлорид фосфора (1,2 экв.) медленно добавляли к хорошо перемешанной суспензии соединения формулы 1, полученного на стадии I, в Ν,Ν-диметилформамиде. Затем реакционную смесь нагревали до 50°С при перемешивании в течение 30 мин. Получившийся раствор охлаждали при температуре окружающей среды и выливали в смесь льда с водой. Твердое вещество собирали фильтрацией и сушили, получая 4-хлор-3-нитро-хинолин.

Стадия III. трет-Бутил-{4-[(3-нитрохинолин-4-ил)амино]бутил}-карбамат.

Соединение формулы 2 (1 экв.) добавляли к раствору трет-бутилового эфира (4-аминобутил)карбаминовой кислоты (1,2 экв.) и триэтиламина (1,5 экв.) в этаноле. Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15 мин и затем разбавляли водой для осаждения неочищенного продукта, который отделяли фильтрацией. К фильтрату добавляли насыщенный раствор гидроксида аммония, выпавший твердый осадок собирали вакуумной фильтрацией и сушили, получая трет-бутил-{4-[(3нитрохинолин-4-ил)амино]бутил}карбамат формулы 3.

Стадия IV. трет-Бутил-{4-[(3 -аминохинолин-4 -ил)амино] бутил}-карбамат.

Суспензию соединения формулы 3 (1 экв.), 5% палладия на углероде (2% по массе) и сульфата магния в этилацетате гидрировали в аппарате Парра при 50 фунт/кв. дюйм (344,8 кПа) газообразным водородом в течение 4 ч. Затем получившуюся реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного твердого вещества. Затем это вещество очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая трет-бутил-{4-[(3-аминохинолин-4ил)амино]бутил}карбамат формулы 4.

Стадия V. трет-Бутил- [4-(2 -этил- 1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-1 -ил)бутил] карбамат.

К раствору соединения формулы 4 (1 экв.) в толуоле добавляли триэтилортопропионат (2 экв.) и получившуюся реакционную смесь нагревали при 80-90°С в течение 5 ч. Затем реакционную смесь охлаждали и растворитель выпаривали до удаления 50% толуола. К оставшейся реакционной смеси добавляли ледяную воду и продукт, выпавший в осадок в виде белого твердого вещества, отделяли вакуумным фильтрованием и сушили, получая трет-бутил-[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил] карбамат формулы 5.

Стадия VI. 4-(2-Этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутан-1-амин.

Раствор трет-бутилового эфира [4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]карбаминовой кислоты формулы 5, полученного на стадии V, в трифторуксусной кислоте перемешивали при 40°С в течение 4 ч. Затем реакционную смесь выливали в смесь льда с водой и экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая 4(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутан-1-амин формулы 6.

Пример I. №[4-(4-Амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-^(1,1-диоксидотетрагидро-3 -тиенил)ацетамид.

Стадия I. ^[4-(2-Этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидротиофен-3-амин.

К суспензии 4-(2-этилимидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутиламина, полученного на стадии VI, в тетрагидрофуране добавляли уксусную кислоту (1 экв.) и дигидротиофен-3-он (1,1 экв.). Получившуюся реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. К реакционной смеси в течение 1 ч добавляли триацетоксиборогидрид натрия (2,2 экв.) и получившуюся суспензию перемешивали в течение 4-5 ч. Затем реакцию останавливали метанолом и смесь концентрировали досуха. Реакционную смесь подщелачивали

- 12 023556 водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая вязкое твердое вещество. Затем продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая [4-(2-этилимидазо[4,5с]хинолин-1 -ил)бутил] -(тетрагидротиофен-3 -ил)амин.

Стадия II. ^[4-(2-Этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-^(тетрагидро-3-тиенил)ацетамид.

К раствору [4-(2-этилимидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил](тетрагидротиофен-3-ил)амина в дихлорметане добавляли триэтиламин (1,5 экв.) и уксусный ангидрид (1,5 экв.) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 4 ч. Затем реакционную смесь разбавляли дихлорметаном и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая ^[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]^(тетрагидро-3 -тиенил)ацетамид.

Стадия III. ^(1,1-Диоксидотетрагидро-3-тиенил)-^[4-(2-этил-5-оксидо-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин1 -ил)бутил] ацетамид.

К раствору ^[4-(2-этил-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-бутил]^-(тетрагидротиофен-3-ил)ацетамида в хлороформе добавляли м-хлорпербензойную кислоту (4 экв.) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Затем реакционную смесь разбавляли хлороформом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая вязкую массу. Продукт затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая ^(1,1-диоксидотетрагидро-3-тиенил)^-[4-(2-этил-5-оксидо-1Н-имидазо [4,5-с] хино лин-1 -ил) -бутил] ацетамид.

Стадия IV. ^[4-(4-Амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-^(1,1-диоксидотетрагидро-3 -тиенил)ацетамид.

К раствору (1,1-диоксотетрагидро-1Х⁶-тиофен-3-ил)-^[4-(2-этил-5-оксиимидазо[4,5-с]хинолин-1ил)-бутил]ацетамида в хлороформе добавляли п-толуолсульфонилхлорид (1,2 экв.), а затем водный раствор гидроксида аммония. Получившуюся реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После этого реакционную смесь разбавляли хлороформом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая липкое твердое вещество, которое затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая указанное в заголовке соединение.

Ή ЯМР (300 МГц, СЭС1_з) δ (млн^-1): 8.29 (йй, 1Н, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 8.21 (йй, 1Н, 1=8,4 Гц, 1=3,0 Гц), 7.65 (т, 2Н), 5.49 (5, 2Н), 4.58 (1, 2Н), 3.78 (1, 2Н), 3.3 (1, 2Н), 3.02 (ф 2Н), 2.34 (й, 2Н), 2.2(1, 1Н), 2.1 (5, 3Н), 2.09 (т, 2Н), 1.9 (т, 2Н), 1.79 (т, 2Н), 1.55 (1, 3Н).

Соединения из примеров 2-4 также получали согласно методике примера 1.

Пример II. ^[4-(4-Амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-^(1-метил-1-оксидопиперидин-4-ил)ацетамид.

¹Н ЯМР (300 МГц, СПСС) δ (млн^-1): 8.24 (йй, 1Н, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 8,19 (йй, 1Н, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 7.60 (т, 2Н), 5.60(5, 2Н), 4.52(1, 2Н), 3,75(1, 2Н), 3.4(т, 1Н), 3.2(т, 4Н), 3.12(ф 2Н), 2.16(5, 3Н), 2.01(т, 2Н), 1.99(т, 4Н), 1.70(т, 2Н), 1.51(1, 3Н).

Пример III. 3-{Ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентит.

¹Н ЯМР (300 МГц, СПСС) δ (млн^-1): 8.35(йй, Щ, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 8.29(йй, 1Н, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 7.63(т, 2Н), 5.56(5, 2Н), 4.50(1, 2Н), 4.42(т, 1Н), 3.70(1, 2Н), 3.62(т, 1Н), 3.35(1, 2Н), 3.12(ф 2Н), 2.15(5, 3Н), 2.05(т, 2Н), 1.92(й, 3Н), 1.8(1, 2Н), 1.70(т,2Н), 1.51 (1, 3Н).

Пример IV. ^[4-(4-Амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]^-(1-бензил-2-метил-1оксидопирролидин-3 -ил)ацетамид.

¹Н ЯМР (300 МГц, СПСС) δ (млн^-1): 8.31(йй, 1Н, 1=8,4 & 1=3,0 Гц), 8.15(йй, 1Н, 1=8.4 Гц, 1=3.0 Гц), 7.62(т, 2Н), 7.55(т, 5Н), 5.59(5, 2Н), 4.50(1, 2Н), 3.71 (1, 2Н), 3.35(1, 2Н), 3.23(5, 2Н), 3.21(ф 2Н), 2.19(й, 2Н), 2.15(1, 1Н), 2.10(5, 3Н), 2.09(т, 2Н), 1.9(т, 2Н), 1.79(т, 2Н), 1.55(1, 3Н).

Дополнительный пример V. 2-Этил-1-[4-(тетрагидро-2Н-пиран-4-иламино)бутил]-1Н-имидазо[4,5с]хинолин-4-амин.

Стадия I. ^[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4-амин.

К суспензии 4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутан-1-амина, полученного на стадии VI примера I, в тетрагидрофуране добавляли уксусную кислоту (1 экв.) и тетрагидропиран-4-он (1,1 экв.). Получившуюся реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. К реакционной смеси в течение 1 часа добавляли триацетоксиборогидрид натрия (2,2 экв.) и получившуюся суспензию затем перемешивали в течение 4 - 5 ч. Затем реакцию останавливали метанолом и смесь концентрировали досуха. Реакционную смесь подщелачивали водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая липкое твердое вещество. Затем продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая ^[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4-амин.

Стадия II. трет-Бутил-[4-(2 -этил- 1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-1 -ил) -бутил] тетрагидро -2Н-пиран-4 - 13 023556 илкарбамат.

К раствору Ш[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4-амина в дихлорметане добавляли триэтиламин (1,5 экв.), а затем ди-трет-бутилдикарбонат (1,5 экв.) и получившуюся реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при температуре окружающей среды. Затем реакционную смесь полностью выпаривали и растворяли в дихлорметане, промывали водой и органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая трет-бутил[4-(2-этил-1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-1 -ил)бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4-илкарбамат.

Стадия III. трет-Бутил-[4-(2-этил-5-оксидо-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Нпиран-4-илкарбамат.

К раствору трет-бутил-[4-(2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)-бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4илкарбамата в хлороформе добавляли м-хлорпербензойную кислоту (4 экв.) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2 ч. Затем реакционную смесь разбавляли хлороформом и промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая вязкую массу. Продукт затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая трет-бутил-[4-(2-этил-5-оксидо-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1ил)бутил]тетрагидро-2Н-пиран-4-илкарбамат.

Стадия IV. трет-Бутил-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Нпиран-4-илкарбамат.

К раствору трет-бутил-[4-(2-этил-5-оксидо-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Нпиран-4-илкарбамата в хлороформе добавляли п-толуолсульфонилхлорид (1,2 экв.), а затем водный раствор гидроксида аммония. Получившуюся реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая липкое твердое вещество, которое затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле, получая трет-бутил-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]тетрагидро-2Нпиран-4-илкарбамат.

Стадия V. 2-Этил-1-[4-(тетрагидро-2Н-пиран-4-иламино)бутил]-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин.

Раствор трет-бутил- [4-(4 -амино -2 -этил-1Н -имидазо [4,5-с] хинолин-1 -ил)бутил] тетрагидро -2Н-пиран-4-илкарбамата в трифторуксусной кислоте перемешивали при 40°С в течение 4 ч. Затем реакционную смесь выливали в смесь льда с водой и экстрагировали хлороформом. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, получая указанное в заголовке соединение.

¹Н ЯМР (300 МГц, МеОИ) δ (млн^-1): 8.2(6, 1Н, 1=8,1 Гц), 7.75(т, 2Н), 7.6(61, 1Н, 1=1,5 & 7,2 Гц), 4.69(1, 2Н), 4.01(6, 1Н), 3.98(6, 1Н), 3.4(т, 3Н), 3.2(т, 2Н), 3.1(т, 2Н), 2.0(т, 4Н), 1.9(т, 4Н), 1.5(1, 3Н).

Соединения из дополнительных примеров 6-7 также получали согласно методике из примера 5.

Дополнительный пример VI. 1-[4-(1-Азабицикло[2.2.2]окт-3-иламино)бутил]-2-этил-1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-4-амин.

¹Н ЯМР (300 МГц, МеОИ) δ (млн^-1): 8.01 (6, 1Н, 1=8,4 Гц), 7.67(66, 1Н, 1=1,2 & 8,4 Гц), 7.4(61, 1Н, 1=1,5 & 7,8 Гц), 7.33(61, 1Н, 1=1,2 & 7,5 Гц), 4.5 (т, 2Н), 4.2(т, 2Н), 3.6(т, 1Н), 3.4(т, 1Н), 3.1(т, 2Н), 3.0(я, 2Н), 2.7(т, 2Н), 1.9(т, 3Н), 1.7(т, 2Н), 1.5(1, 3Н), 1.4(т, 2Н), 1.3(т, 3Н).

Дополнительный пример VII. 1-{4-[(1,1-Диоксидо-3,4-дигидро-2Н-тиохромен-4-ил)амино]бутил}-2этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-4-амин.

¹Н ЯМР (300 МГц, МеОИ) δ (млн^-1): 8.2(6, 1Н, 1=8,1 Гц), 7.80(61, 1Н, 1=1,5 & 6,3 Гц), 7.73(6, 1Н, 1=7.5 Гц), 7.64(61, 1Н, 1=1,5 & 7,5 Гц), 7.5(т, 4Н), 4.59(1, 2Н), 3.97(1, 1Н), 3.70(т, 1Н), 3.02(ц, 2Н), 2.71 (т, 3Н), 2.50(т, 2Н), 1.99(т, 2Н), 1.69(т, 2Н), 1.48(1, 3Н).

Пример А. Анализ профиля ίη νίίΐΌ.

Для тестирования соединений в отношении активации ТЬК7 установлены клеточные анализы с использованием линии клеток рака человека (РСГК-1) или фракций мононуклеарных клеток периферической крови человека (РВМС).

Специфичность к ТЬК7 и 9 проверяли с помощью добавления хлорохина, который блокирует передачу сигналов через эндосомальные ТЬК. Система РСГОМ подходит для измерения связанного с интерфероном цитокина ГР10 с помощью анализа на основе гранул в 384-луночном формате.

Экспрессия мРНК ТЬК в РСТР-1 (ПЦР анализ ТацМап)

ТЬК1 ++ ТЬК2 (+), ТЬК3 + ТЬК4 ++ ТЬК5 (+), ТЬК6 ++ ТЬК7 ++ ТЬК8 -ТЬК9+++, Т1.К 10-.

Обработка этой линии клеток эталонными соединениями агонистами ТЬК ЬР8 (агонист ТЬК4), резиквимодом (имидазохинолин) и Н2006 (СрО олигонуклеотид) вызывает сильную индукцию мРНК цитокинов. Также обнаружен ответ на поли ЬС двухцепочечную РНК (агонист ТЬК3, 40-кратная индукция ГР-10 через 15 ч) и МЛЬР-2 (ТЬК 2/6 гетеродимерный агонист, 100-кратная индукция ГР-10 через 15 ч).

Данные по индукции РНК были подтверждены параллельным анализом Ьитшех, показавшим, в частности, высокий уровень высвобождения цитокинов !Р-10 и !И8, а также существенные уровни белков ГО6, ]Ь12р40/р70 и ^10.

- 14 023556

Передача сигналов посредством ТЙР7 и ТЬР9 (оба экспрессируются в эндосомах) может быть полностью блокирована добавлением хлорохина, который, как известно, нарушает эндосомальный градиент рН. В отличие от этого передача сигналов ТЬР4, вызванная ЬР5, не затронута (фиг. 1).

Современная концепция каскадного скрининга агониста ТЬК в форматах высокой или средней пропускной способности (Ыдй- ог тейит-йгоидИри! Рогта!) суммирована на фиг. 2.

Соединения по настоящему изобретению тестировали на индукцию специфических цитокинов на уровнях мРНК или белка. Соединения показали эффективность в клеточных анализах (фиг. 3).

Пример Б. Анализ профиля ίη νίνο.

Ниже приведены исследования с использованием эталонных соединений и соединений по изобретению на модели легочных метастазов Репса, как описано в Бс|а А., НоРтапп Н.Р., Ма1ег Т., ОгасИе И., СгеЬе С, йзсИег δ., ОнптшсИ Р., Запйегз К., Секе1ег V. Ме!аз!аз1з оРтиппе Репса кйпеу сапсег се11з !о йе 1ипдз оР Ва1Ь/с пнсе ίδ з!гопд1у зирргеззей Ьу ТБР9 ог ТБР7 адошз!з. АЬзйас! 3552, Ргос Ат Сапсег Рез 48, 2007.

На фиг. 4А и 4Б показаны результаты для эталонных соединений (агонисты ТБР9, а также ТБР7, которые являются либо 8МОБ, либо олигонуклеотидами; ТОО обозначает 7-тиа-8-оксогуанозин; ΙΜϋΖΟ обозначает производное имидазохинолина).

В частности, самок мышей Ва1Ь/с (п=10) обрабатывали в течение 4 последовательных дней, начиная с 1 или 8 дня после введения Репса Б-асУ опухолевых клеток, соответственно. 8МОБ использовали в 20% растворе ПЭГ, олигонуклеотиды использовали в 0,9% растворе ЛаСЙ как указано. Легкие иссекали через 25 дней после введения опухолевых клеток (см. фиг. 4А). Далее самок мышей Ва1Ь/с (п=5) обрабатывали в течение 4 последовательных дней, как указано. 8МОЬ использовали в 20% растворе ПЭГ, олигонуклеотиды использовали в 0,9% растворе ПаС1. На четвертый день обработки отбирали кровь из ретроорбитального сплетения и иссекали селезенки. Затем выделяли мРНК для анализа экспрессии с помощью с]ПЦР. Данные нормализовали к контролю с носителем (среднее приведено к 1). Статистическую оценку проводили с помощью теста Манна-Уитни (см. фиг. 4Б).

В тех же самых условиях, описанных выше для 8МОЬ как эталонных соединений, на модели легочных метастазов Репса исследовали соединения по изобретению 3-{ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Нимидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентит (ТЬР агонист 1, пример III) и П-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-Л-(1,1-диоксидотетрагидро-3-тиенил) ацетамид (ТЬР агонист 2, пример I).

3-{Ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентит (ТЬР агонист 1, пример III) демонстрирует мощный антиметастатический эффект с практически полным очищением легких после кратковременного применения (1-4 день) (фиг. 5).

Claims (24)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы I где Р_х выбран из алкила, алкинила, арила, алкокси, гетероциклила и гетероарила, где алкил, алкинил, арил, алкокси, гетероциклил или гетероарил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из -ОН, галогена, -СО-И(Р4)₂, -И(Р₄)₂, группы -СО-Сы₀алкил, группы -СО-О-С^^алкил, -Ν₃, арила и гетероциклила, где каждый Р₄ независимо выбран из -Сы₀алкила, группы -Сы₀алкил-арил или арила;

   А представляет собой Сх-С₆алкил;

   В представляет собой -^Р₂)(Р₃);

   Р₂ представляет собой -(СО)-Р₅;

   Р₅ выбран из алкила, алкинила, арила, гетероциклила и гетероарила, каждый из которых возможно замещен одним или более заместителями, выбранными из -ОН, галогена, -ΟΝ, -ΝΘ₂, -СООН, -δΗ, группы -СО-С_х-6алкил, группы -СО-О-С_х-6алкил, -Ν₃, арила, гетероциклила, группы -СО-арил и группы -СОгетероциклил;

   Р₃ выбран из гетероарила, циклоалкила и гетероциклила, где гетероарил, циклоалкил или гетероциклил возможно замещены одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, алкокси, галогена, -ОН, -Ν₃, трифторметила, группы -алкил-арил, группы -О-алкил-арил, группы -СО-арил, арила, гетероциклила, гетероарила, группы -СО-гетероарил, группы -СО-О-алкил, группы -СО-№алкил, группы -СО-№арил, где гетероарильная группа представляет собой ароматическое кольцо или кольцевую систему, ко- 15 023556 торое(ая) содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, 8 и Ν;

   гетероциклильная группа представляет собой неароматическую моно- или бициклическую кольцевую систему, которая содержит по меньшей мере один кольцевой гетероатом, выбранный из О, 8О_х или Ν, где х равен 0, 1 или 2, алкильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 1 до 10 атомов углерода, алкенильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную двойную связь, алкинильная группа представляет собой группу с неразветвленной цепью или разветвленной цепью, содержащую от 2 до 10 атомов углерода и включающую углерод-углеродную тройную связь, группа алкокси представляет собой алкильную группу, как она определена выше, присоединенную через атом кислорода, циклоалкильная группа является моноциклической или полициклической и имеет от 3 до 10 кольцевых атомов углерода, арил представляет собой фенил, нафтил, дифенил, флуоренил или инденил, или его фармацевтически приемлемые сольваты, соли, Ν-оксиды или стереоизомеры либо их комбинации.
2. 2. Соединение формулы I по п.1, где К! представляет собой алкинил или алкокси.
3. 3. Соединение формулы I по п.1 или 2, где К₃ представляет собой гетероциклил, который возможно замещен одним или более заместителями, выбранными из алкила, алкенила, галогена и -ОН.
4. 4. Соединение формулы I по п.1 или 2, где К₃ выбран из диоксотетрагидротиофенила, пиперидинила, тетрагидрофуранила, пиридинила, тетрагидропиранила и азабициклооктанила, каждый из которых возможно замещен одной или более группами, независимо выбранными из галогена, гидроксила, арила, алкила, алкокси и трифторметила.
5. 5. Соединение формулы I по любому из пп.1, 3 или 4, где К! представляет собой этил.
6. 6. Соединение формулы I по любому из пп.1-5, где К₅ представляет собой метил.
7. 7. Соединение по п.1, которое представляет собой

   N-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-1 -ил)бутил] -Ν-(1,1 -диоксидотетрагидро-3 -тиенил) ацетамид,

   N-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]-N-(1-метил-1-оксидопиперидин-4-ил) ацетамид,

   3-{ацетил[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо[4,5-с]хинолин-1-ил)бутил]амино}-2,5-ангидро-1,3,4-тридезоксипентит,

   N-[4-(4-амино-2-этил-1Н-имидазо [4,5-с]хинолин-1 -ил)бутил] -Ν-( 1 -бензил-2-метил-1 -оксидопирролидин-3 -ил)ацетамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
8. 8. Применение соединения по любому из пп.1-7 в качестве лекарственного средства для лечения заболеваний, чувствительных к активации То11-подобных рецепторов 7 (ТЬК7).
9. 9. Фармацевтическая композиция для лечения заболевания, чувствительного к активации То11подобных рецепторов 7 (ТЬК7), содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы I по любому из пп.1-7 в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
10. 10. Фармацевтическая композиция по п.9, содержащая соединение формулы I в количестве, достаточном для обеспечения дозы субъекту от примерно 100 нг/кг до примерно 50 мг/кг соединения.
11. 11. Применение соединения по любому из пп.1-7 в лечении вирусного или неопластического заболевания.
12. 12. Применение фармацевтической композиции по п.9 или 10 в лечении вирусного или неопластического заболевания.
13. 13. Применение соединения по любому из пп.1-7 в лечении рака, выбранного из группы, включающей рак молочной железы, мочевого пузыря, костей, головного мозга, центральной и периферической нервной системы, толстой кишки, эндокринных желез, пищевода, эндометрия, герминогенный рак, рак головы и шеи, печени, легкого, гортани и гипофаринкса, мезотелиому, саркому, рак яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, прямой кишки, почки, тонкой кишки, мягких тканей, яичка, желудка, кожи, мочеточника, влагалища и вульвы; наследственный рак, ретинобластому и опухоль Вильмса; лейкемию, лимфому, неходжкинскую болезнь (поп-Ноб§кш'8 Ф8еа8е), хроническую и острую миелоидную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, болезнь Ходжкина, множественную миелому и Тклеточную лимфому; миелодиспластический синдром, неоплазию плазматических клеток, паранеопластические синдромы, рак неизвестной первичной локализации и злокачественные опухоли, связанные с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД).
14. 14. Применение фармацевтической композиции по п.9 или 10 в лечении рака, выбранного из группы, включающей рак молочной железы, мочевого пузыря, костей, головного мозга, центральной и периферической нервной системы, толстой кишки, эндокринных желез, пищевода, эндометрия, герминоген- 16 023556 ный рак, рак головы и шеи, печени, легкого, гортани и гипофаринкса, мезотелиому, саркому, рак яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, прямой кишки, почки, тонкой кишки, мягких тканей, яичка, желудка, кожи, мочеточника, влагалища и вульвы; наследственный рак, ретинобластому и опухоль Вильмса; лейкемию, лимфому, неходжкинскую болезнь, хроническую и острую миелоидную лейкемию, острую лимфобластную лейкемию, болезнь Ходжкина, множественную миелому и Тклеточную лимфому; миелодиспластический синдром, неоплазию плазматических клеток, паранеопластические синдромы, рак неизвестной первичной локализации и злокачественные опухоли, связанные со СПИДом.
15. 15. Применение соединения по любому из пп.1-7 в лечении медицинского состояния, выбранного из группы, включающей остроконечные бородавки; обыкновенные бородавки; роговые бородавки; гепатит В; гепатит С; простой герпес типа I и типа II; контагиозный моллюск; вирус иммунодефицита человека (ВИЧ); цитомегаловирус (СМУ); вирусы ветряной оспы и опоясывающего лишая (νζν); интраэпителиальные неоплазии; грибковые заболевания; неопластические заболевания; паразитарные заболевания; бактериальные инфекции; экзему; эозинофилию; эссенциальную тромбоцитемию; проказу; рассеянный склероз; синдром Омена; дискоидную волчанку; болезнь Боуэна; бовеноидный папулез; атопические заболевания; астму; аллергию; аллергический ринит; системную красную волчанку; рецидивные грибковые заболевания, периодонтит и хламидиоз; или для улучшения или стимулирования заживления ран.
16. 16. Применение по п.15, где медицинское состояние выбрано из группы, состоящей из интраэпителиальной цервикальной неоплазии, вируса папилломы человека (НРУ), ассоциированных неоплазий, кандидоза, аспергиллеза, криптококкового менингита, базально-клеточной карциномы, волосатоклеточного лейкоза, саркомы Капоши, почечно-клеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы, миелолейкоза, множественной миеломы, меланомы, неходжкинской лимфомы, Т-клеточной лимфомы кожи, пневмоцистной пневмонии, криптоспоридиоза, гистоплазмоза, токсоплазмоза, трипаносомной инфекции, лейшманиоза, туберкулеза, инфекции, вызванной МусоЬасЮгшт аушт. и атопического дерматита.
17. 17. Применение по п.15, где раны представляют собой хронические раны.
18. 18. Применение соединения по любому из пп.1-7 в качестве адъюванта вакцин для выработки клеточного иммунитета.
19. 19. Применение соединения по любому из пп.1-7 для использования в изготовлении лекарственного средства для активации ТЬК7.
20. 20. Применение фармацевтической композиции по п.9 или 10 в лечении медицинского состояния, выбранного из группы, включающей остроконечные бородавки; обыкновенные бородавки; роговые бородавки; гепатит В; гепатит С; простой герпес типа I и типа II; контагиозный моллюск; вирус иммунодефицита человека (ВИЧ); цитомегаловирус (СМУ); вирусы ветряной оспы и опоясывающего лишая (νΖν); интраэпителиальные неоплазии; грибковые заболевания; неопластические заболевания; паразитарные заболевания; бактериальные инфекции; экзему; эозинофилию; эссенциальную тромбоцитемию; проказу; рассеянный склероз; синдром Омена; дискоидную волчанку; болезнь Боуэна; бовеноидный папулез; атопические заболевания; астму; аллергию; аллергический ринит; системную красную волчанку; рецидивные грибковые заболевания, периодонтит и хламидиоз; или для улучшения или стимулирования заживления ран.
21. 21. Применение по п.20, где медицинское состояние выбрано из группы, состоящей из интраэпителиальной цервикальной неоплазии, вируса папилломы человека (НРУ), ассоциированных неоплазий, кандидоза, аспергиллеза, криптококкового менингита, базально-клеточной карциномы, волосатоклеточного лейкоза, саркомы Капоши, почечно-клеточной карциномы, плоскоклеточной карциномы, миелолейкоза, множественной миеломы, меланомы, неходжкинской лимфомы, Т-клеточной лимфомы кожи, пневмоцистной пневмонии, криптоспоридиоза, гистоплазмоза, токсоплазмоза, трипаносомной инфекции, лейшманиоза, туберкулеза, инфекции, вызванной МусоЬасЮпиш аушш, и атопического дерматита.
22. 22. Применение по п.20, где раны представляют собой хронические раны.
23. 23. Применение фармацевтической композиции по п.9 или 10 в качестве адъюванта вакцин для выработки клеточного иммунитета.
24. 24. Применение фармацевтической композиции по п.9 или 10 для использования в изготовлении лекарственного средства для активации ТЬК7.