EA020048B1

EA020048B1 - Дифосфатная соль n-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида и фармацевтическая композиция

Info

Publication number: EA020048B1
Application number: EA201100501A
Authority: EA
Inventors: Джоуджиндер Сингх Баджва; Марилин Де Ла Крус; Стефани Кей Додд; Лиладхар Мурлидхар Уэйкоул; Раинн Ву
Original assignee: Новартис Аг
Priority date: 2008-09-17
Filing date: 2009-09-15
Publication date: 2014-08-29
Also published as: KR20110056325A; CO6351744A2; ECSP11010985A; AR113778A2; JP2012502912A; PE20110292A1; UA103049C2; CA2736751A1; HK1156628A1; IL211412A0; US20120035174A1; EA201100501A1; BR122020009045B1; NZ591420A; ZA201101579B; NI201100051A; MY151100A; PL2342198T3; EP2342198A1; TWI367883B

Abstract

В изобретении описано получение и приведены характеристики дифосфатной соли N-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамидаи фармацевтической композиции, модулирующей активность хэджхог сигнального пути, включающей терапевтически эффективное количество дифосфата N-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, растворитель или эксципиент.

Description

Настоящее изобретение относится к солям, в частности к дифосфатной соли М-[6-(цис-2,6диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида, а также к фармацевтическим композициям, модулирующим активность хэджхог сигнального пути и содержащим эту соль.

Уровень техники

Как следует из \¥О 2007/131201, Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамид имеет формулу (I)

^: (I).

Данное соединение обладает ценными фармакологическими свойствами, и поэтому оно может быть использовано, например, в качестве модулятора активности хэджхог сигнального пути, подходящего для терапии заболеваний, обусловленных модулированием активности хэджхог сигнального пути. \УО 2007/131201 не раскрывает каких-либо конкретных солей, гидратов солей или сольватов Ы-[6-(цис-2,6диметилморфолин-4-ил)-пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.

Было обнаружено, что соли настоящего изобретения демонстрируют, в дополнение к хорошим физико-химическим свойствам, высокую проницаемость и высокую биодоступность.

Краткое изложение изобретения

Настоящее изобретение относится к дифосфату Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида. Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим:

(а) терапевтически эффективное количество заявленной соли Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4 '-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида и (б) по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, растворитель или эксципиент.

Настоящее изобретение может быть использовано в способе лечения заболевания, обусловленного модулированием активности хэджхог сигнального пути, включающем стадию введения субъекту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества заявленной соли - дифосфата Ν[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 карбоксамида.

Краткое описание фигур

На фиг. 1 представлена рентгеновская дифрактограмма дифосфата №[6-(цис-2,6-диметилморфолин4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.

На фиг. 2 представлена рентгеновская дифрактограмма моносульфата №|6-(цис-2.6диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.

На фиг. 3 представлена рентгеновская дифрактограмма моногидрохлорида №[6-(цис-2,6диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.

Подробное описание изобретения

Как используется в данном патенте, термин соль относится к соединению, полученному посредством взаимодействия лекарственного средства на основе органической кислоты или основания с фармацевтически приемлемой органической или неорганической кислотой или основанием; как используется в данном изобретении, термин соль включает гидраты и сольваты солей, полученных в соответствии с изобретением. Примеры фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот или оснований перечислены, например, в табл. 1-8 НапбЬоок οί РйагтасеиИса1 8а115, Еб. Р.Н. 81аЫ и С.6. ХУсгтШк УНСА, ΖιιπΟι 2002, р. 334-345. В частности, соли включают гидрохлоридные, фосфатные, сульфатные, мезилатные, эзилатные и безилатные формы, но не ограничиваются ими. Как используется в данном изобретении, термин полиморф относится к отдельной кристаллической модификации, или полиморфной форме, или кристаллической форме, которые отличаются друг от друга по характеру рентгеновских дифрактограмм, физико-химическим и/или фармакокинетическим свойствам, и термоди

- 1 020048 намической устойчивости.

Один из вариантов осуществления настоящего изобретения относится к дифосфату Ы-[6-(цис-2,6диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.

Настоящее изобретение может быть использовано для лечения карциномы, включая карциному мочевого пузыря (включая прогрессирующий и метастатический рак мочевого пузыря), груди, толстой кишки (включая колоректальный рак), почек, печени, легких (включая мелкоклеточный и немелкоклеточный рак легких и аденокарциному легких), яичников, простаты, яичек, мочеполового тракта, лимфатической системы, прямой кишки, гортани, поджелудочной железы (включая экзокринную и эндокринную карциному поджелудочной железы), пищевода, желудка, желчного пузыря, шеи, щитовидной железы и кожи (включая плоскоклеточную карциному), опухолей центральной и периферической нервных систем, включая астроцитому, нейробластому, глиому, бластому костного мозга и невриному; опухолей мезенхимального происхождения, включая фибросаркому, рабдомиосаркому и остеосаркому, и других опухолей, включая меланому, карциному из клеток Меркеля, пигментную ксеродерму, кератоакантому, семиному, фолликулярный рак щитовидной железы и тератокарциному. Настоящее изобретение может также быть использовано для лечения мастоцитоза, опухолей эмбриональных клеток, детских сарком и прочих видов рака.

Настоящее изобретение также пригодно для ингибирования роста и пролиферации гематобластозов лимфоидного происхождения, таких как лейкемия, включая острый лимфоцитарный лейкоз (АЬЬ), острый лимфобластный лейкоз, В-клеточную лимфому, Т-клеточную лимфому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосато-клеточную лимфому, гистиоцитную лимфому и лимфому Беркитта; и гематобластозов миелоидного происхождения, включая острый и хронический миелолейкоз (СМЬ), миелодиспластический синдром, миелоидную лейкемию и промиелоцитарный лейкоз.

Пример 1.

Получение дифосфатной соли.

В 250-мл трехгорлую колбу в атмосфере азота помещают 7,0 г (0,0144 моль) свободного основания [6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]амида 2-метил-4'-трифторметоксидифенил-3карбоновой кислоты и 178,5 мл ацетонитрила хроматографической чистоты. Суспензию нагревают до 58°С в атмосфере азота в течение 20 мин с получением прозрачного раствора. Затем к реакционному раствору в течение 18 мин добавляют 3,405 г 85% фосфорной кислоты в воде (2 экв.). В течение 5 мин при добавлении фосфорной кислоты осаждается дифосфат Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида. Белую суспензию перемешивают и охлаждают до комнатной температуры в течение 100 мин. После этого суспензию охлаждают до 0±5°С в течение 5 мин и перемешивают 1 ч. Затем смесь фильтруют на воронке Бюхнера и полученное твердое вещество промывают ацетонитрилом (3x9,4 мл). Лекарственное вещество сушат в вакууме при 50°С в течение 16 ч с получением 9,63 г фосфатной соли (выход: 98%).

Пример 2.

Получение моносульфатной соли.

В 100-мл трехгорлую колбу в атмосфере азота помещают 3,0 г (6,18 ммоль) свободного основания Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 карбоксамида и 35 мл ацетонитрила хроматографической чистоты. Суспензию нагревают до 50°С в атмосфере азота в течение 30 мин с получением прозрачного раствора. Затем к смеси в течение 10 мин добавляют 1,5 мл 6 М серной кислоты (1,5 экв). После этого смесь перемешивают при 50°С в течение 3 ч и охлаждают до 25°С в течение 25 мин. В течение 5 мин осаждается твердое вещество. Суспензию перемешивают 16 ч при 25°С. После этого смесь фильтруют на воронке Бюхнера и твердый осадок промывают 10 мл ацетонитрила. Лекарственное вещество сушат в вакууме при 55°С в течение 16 ч с получением 3,0 г сульфатной соли (выход: 83%).

Пример 3.

Получение моногидрохлоридной соли.

В 100-мл трехгорлую колбу в атмосфере азота помещают 3,0 г (6,18 ммоль) свободного основания Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3 -ил] -2-метил-4'-(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 карбоксамида и 25 мл ацетона хроматографической чистоты. Суспензию перемешивают 25 мин при 25°С в атмосфере азота с получением прозрачного раствора. Затем к смеси в течение 10 мин добавляют 1,5 мл 6 М соляной кислоты (1,5 экв). В течение 5 мин осаждается твердое вещество. Суспензию перемешивают 16 ч при 25°С. После этого смесь фильтруют на воронке Бюхнера и твердое вещество промывают 10 мл ацетона. Лекарственное вещество сушат в вакууме при 55°С в течение 16 ч с получением 3,0 г гидрохлоридной соли (выход: 93%).

Пример 4.

В табл. 1 приведены показатели стабильности, измеренные по распаду продуктов (или анализу) и появлению цвета. Распад продуктов (ΌΡ) анализировали методом ВЭЖХ (см. табл. 3). Он рассчитывался как площадь-% продуктов. Композиции смесей (в мас.%) следующие. Смесь 1: лактоза 200 меш/модифицированный кукурузный крахмал 1500 ЬМ/аэросил 200/стеарат магния 78,5:20:0,5:1

- 2 020048 (мас./мас./мас./мас.). Смесь 2: маннит/Лу1се1 РН102/Сибиа НВ (57:38:5) (мас./мас./мас.).

Таблица 1

Условия исследования

Солевая форма
Дифосфат	Моносульфат	Моногцдрохлорцд
ЮР	СЬ	ϋΡ	СЬ	РР	СЬ
1%)		[%]		1%]

Лекарственное вещество до стресс-теста

В сухом виде | 1,02 | - | 0,42 | 0,30

0,2 % растворы или суспензии, 2 недели 50°С

рН 1	0,99	АТ
рНЗ	1,07	аТ
рН 5	1,04	аТ		-
рН7	1,06	АТ		-
рН 9	1,05	аТ		-
рН 11	1,03	аТ		-	-
Вода	1,07	аТ	0,41	АТ	0,31	АТ
Метанол	1,02	А*	0,68	А*	2,06	А*
Ацетонитрил	1,93	А*	0,44	А*	0,38	А*
Ацетонитрил/Вода (50:50)	1,10	А*	0,80	А*	1,72	А*

2% (или 5%) растворы или суспензии, 1 день, комнатная температура

0,5% СМС	-	АТ	0,45	АТ	0,33	АТ
НРМС целлюлоза 4000 0,5%	1,04	АТ	0,47	АТ	0,32	АТ
Т-иееп 80,0,8%	1,07	АТ	0,43	АТ	0,31	АТ

Твердое состояние, 2 недели 50°С, герметичный контейнер

В сухом виде (ВЭЖХ)	1,03	А	0,40	А	0,31	А
В сухом виде (рентгеновская дифракция)	без изменений		без изменений		без изменений

Твердое состояние, 2 недели 80°С, герметичный контейнер

В сухом виде (ВЭЖХ)	1,06	А	0,43	А	0,35	А
В сухом виде (ДСК)	без изменений		без изменений		без изменений

недели 50°С, герметичный контейнер

1% в смеси 1	0,96	А	0,41	А	0,27	А
1 % в смеси 2	1,11	А	0,44	А	0,39	А

Твердое состояние, 2 недели 50°С/ 75% отн. влажн.

В сухом виде (ВЭЖХ)	0,96	А	0,42	А	0,29	А
В сухом виде (рентгеновская дифракция)	небольшие изменения*		без изменений		без изменений

Твердое состояние, 2 недели 80°С/ 75% отн. влажн.

В сухом виде (ВЭЖХ)	1,02	А	1,34	А	0,35	А
В сухом виде (рентгеновская дифракция)	измене- ния**		без изменений		без изменений

недели 50°С/ 75% отн. влажн.

1% в смеси 1	1,59	А	0,70	А	2,85	А
1 % в смеси 2	1,01	А	0,41	А	0,31	А

Ксеноновый свет (приблизительно 1200 клк)

В сухом виде (ВЭЖХ)	1,35	А	1,1	А	1,46	в
В сухом виде (рентгеновская дифракция)	без изменений		без измене- ний		без изменений

Объемный показатель коррозии

- 3 020048

2 дня 80% отн. влажн.	без видимых	без видимых	без видимых
пластина из	изменений на	изменений на	изменении на
нержавеющей стали	поверхности	поверхности	поверхности
	пластины	пластины	пластины

* По сравнению с дифосфатом (до стресс-теста) на рентгеновской дифрактограмме присутствует новый пик.

** Рентгеновская дифрактограмма аналогична дифрактограмме фосфата, но с одним дополнительным пиком.

4- Суспензия

Прозрачный раствор после

- Исследование не проводилось

В Легкое обесцвечивание

О Сильное обесцвечивание стресс-теста

А Нет изменения цвета

С Умеренное обесцвечивание

Пример 5.

В табл. 2 представлены химические и физико-химические характеристики.

Таблица 2

Параметр	Солевая форма
Дифосфат	Моносульфат	Мопогвд	рохлорид
Элементный анализ	расчет.	найдено	расчет.	найдено	расчет.	найдено
%С	45,82	46,06	53,51	53,28	59,83	60,11
%Н	4,73	5	4,84	4,91	5,21	5,06
%Р	8,36	8,35	9,77	9,44	10,92	10,69
%Ν	6,17	6,08	7,2	7,08	8,05	7,88
%0	25,82	25,29	19,19	20,29	9,2	9,93
%Р	9,09	9,22
%8			5,49	5,68
%С1					6,79	6,33

ДСК-чистота

Скорость нагрева	нет данных	нет данных	нет данных
10°С/мин

- 4 020048

	Солевая форма
Параметр	Дифосфат	\| Моносульфат \| Моногццрохлорид

ВЭЖХ-чистота (например, в % площади)

1,02 | 0,42 | 0,30

Температура плавления (ДСК)

Скорость нагрева [°С /мин]	10	10	10
Энтальпия плавления (Дж/г)	нет данных	нет данных	нет данных
рН 1%-го раствора или суспензии
В воде	2,02	1,45	1,69
Растворимость (примерно при 25°С, мг/мл)
0,1 н. НСЬ	0,004 (конечный рН 1,04}	0,003 (конечный рН 1,09)	0,002 (конечный рН 1,02)
Фосфатный буфер, рН 6,8	0,001 (конечный рН 2,86)	0,002 (конечный рН 1,82)	0,000 (конечный рН 5,93)
Вода	0,009 (конечный рН 1,94)	0,007 (конечный рН 1,26)	0,005 (конечный рН 1,67)
Метанол	>40	24,4	>40
Этанол	19,7	19,7	56,4
2-Пропанол	14,3	4	10,3
Ацетон	2,8	1,7	3,2
Этилацетат	0,3	0,09	2,5
Ацетонитрил	0,4	1,4	4,1
Термогравиметрия (% потери массы)
Скорость нагрева 10°С/мин (%)	0,19% при 150°С	1,89% при 150°С	0,48% при 150°С

Остаточные растворители (%)

Гептан:	Ацетонитрил:	Ацетон:
0,0001463,	0,419087,	0,0002356, Вода:
Ацетонитрил,	Вода: 1,36,	0,4,.

Скорость внутреннего растворения (мг мин'¹ см’²)

НС1 0,1 н.	-	-	-
Вода	-	-	-
Вода + ПАВ (808)	-	-	-

ЯМР	изменяется	изменяется	изменяется
	хим.сдвиг	хим.сдвиг	хим.сдвиг

* Попытки измерить скорость внутреннего растворения не были успешными ввиду малой растворимости.

- 5 020048

Пример 6.

В табл. 3 представлены морфологические свойства.

Таблица 3

	Солевая форма
Параметр	Дифосфат	Моносульфат	Моногидрохлорид

Термические свойства

Как есть: - ДСК - рентгеновская дифракция (кристалличность)	213°С кристаллический	нет данных кристаллический	нет данных кристаллический
После нагрева и охлаждения - ДСК - рентгеновская дифракция	нет данных нет данных	нет данных нет данных	нет данных нет данных

Г игроскопичность

Как есть - потеря массы при высушивании по данным ТГА (%)	0,19 при 150°С	1,89 при 150°С	0,48 πρι	а150°С

	погл.	выдел.	погл.	выдел.	ПОГЛ.	выдел.
	масса,	масса,	масса,	масса,	масса,	масса,
Отн, влажность (%)	изм.%.	изм.%	изм.%.	изм.%	изм.%	изм.%
0,0	0,000	-0,038	0,000	1,007	-0,0001	-0,0114
25,0	0,059	0,136	1,232	1,256	0,3334	0,3799
50,0	0,149	0,341	1,455	1,495	0,4660	0,4932
75,0	0,270	1,268	1,634	1,716	0,5753	0,6069
85,0	0,400	1,828	1,835		0,6525	0,6817
95,0	3,420	3,420	2,330	2,330	0,8784	0,8784
- рентгеновская дифракция после теста	без изменений	без изменений	без изменений

- 6 020048

Кристаллическая модификация после 72 ч встряхивания

	ДСК/рентг. дифр-я/ТГ	ДСК/рентг. дифр-я/ТГ	ДСК/рентг. дифр-я/ТГ
Вода	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания. Конечный рН 1,94	Диссоциировал до свободного основания. Конечный рН 1,26	Диссоциировал до свободного основания. Конечный рН 1,94
Буфер с рН 6,8	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания. Конечный рН 2,86	Диссоциировал до свободного основания. Конечный рН 1,82	Форма не изменилась. Конечный рН 5,93
Буфер с рН 3	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания. Конечный рН 2,15	Диссоциировал до свободного основания. Конечный рН 2,00	Диссоциировал до свободного основания. Конечный рН 2,89
0,1 н. раствор НС1	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания.	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания.	Рентг. дифрактограмма изменилась, отличается от свободного основания.
Метанол		Υ, кристаллический на кристаллический

- 7 020048

Параметр	Солевая форма
Дифосфат	Моносульфат	Моногидрохлорид
Этанол	Рентг. дифрактограмма изменилась, кристалличность меньше начальной.	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась
Изопропанол	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась
Этилацетат	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась
Ацетон	Ν, форма не изменилась	Υ, кристаллический на кристаллический	Ν, форма не изменилась
Ацетонитрил	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась	Ν, форма не изменилась

Влияние измельчения

Нет изменений	Нет изменений	Нет изменений
на	на	на
рентгенограмме	рентгенограмме	рентгенограмме

Влияние сжатия

N - нет, Υ - да.

Пример 7.

Данные по ТК на крысах для дифосфата №[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида, дозированного в виде суспензии, с 10кратным увеличением дозы, указывают на 3,1-кратное увеличение при экспозиции от 10 до 100 мг/кг. Экспозиция в группе среди пациентов слегка изменялась, особенно при большой дозе (100 мг/кг) (см. табл. 4).

Таблица 4

дозировка (мг/кг)	крыса	АиСо-24 (нг*ч/мл)	АиСо.гд/доза (нг*ч/мл)/ (мг/кг/день)	^шах (нг/мл)	Стах/я°^за(нг/мл)/ (мг/кг/день)	Цпах (^ч)
10	001	43300	4330	2820	282	8,00
	002	52800	5280	3160	316	8,00
	003	49400	4940	3100	310	4,00

100	004	232000	2320	14800	148	8,00
	005	96800	968	4520	45,2	8,00
	006	131000	1310	7490	74,9	8,00

Пример 8.

Суспензию смеси свободной формы и дифосфата №[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3ил]-2-метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида давали крысам дозами 3 и 2,1 мг/кг соответственно. Было обнаружено, что дифосфатная соль обеспечивает большое (16-кратное) увеличение экспозиции по сравнению со свободной формой, как изложено в табл. 5.

- 8 020048

Таблица 5

Параметр РК	2,1 мг/кг РО дозы в суспензии	3,0 мг/кг РО дозы в суспензии	IV 3 мг/кг**
Дифосфатная соль	Свободное основание*	Свободное основание
среднее	8ϋ	среднее	8Э	среднее	8Э
АиС1аз1 (нМ*ч)	5747	1395	510	153	17500	п=2
АиС1аз1/доза (нМ*ч)/мг/кг	2737	664	170	51	5830	п=2
АиСтг(нМ*ч)	5917	1451	512	140	17500	п=2
АиС\|_П/доза(нМ*ч)/мг/кг	2818	691	171	46.7	5840	п=2
С0/С_тах (нМ)	947	167	237	76,3	6108	п=2
Стах/доза (нМ/мг/кг)	451	79,3	78,9	25,4
Ттах (^ч)	2,00	0,00	0,500	0,00
%Р	48%		3%

Пример 9.

Подробно о методиках, приборах и стандартах, используемых в примерах 4, 5.

1) Значение рН.

Для определения рН примерно 10 мг соли Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2метил-4'-(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида помещают в 20-мл емкость и добавляют 10 мл соответствующего буфера или воды. При измерении рН растворы непрерывно перемешивают.

2) Определение приблизительной растворимости.

Избыток солей приводят в равновесное состояние в растворителях в течение 1 дня при 25±0,5°С. Суспензии отфильтровывают и фильтрат отбирают для определения растворимости методом ВЭЖХ.

3) Гигроскопичность.

Изотермы сорбции/десорбции: прибор - 8шТасе Меакипид 8уйет Όνδ-1, температура 25±0,5°С.

4) Полиморфное поведение.

Суспензии солей Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида перемешивают при высокой скорости в течение 24 ч при 25±0,5°С. Затем суспензии фильтруют и отбирают твердое вещество для ΧΚΡΌ-анализа.

5) Метод ВЭЖХ.

Колонка: 8утте1гу С18, диаметр частиц 3,5 мкм, 4,6x75 мм (\Ма1ег8).

Температура колонки: 35°С.

Скорость потока: 1 мл/мин.

Подвижная фаза: А=0,1% ТРА в воде и В=ацетонитрил.

Таблица градиентов (табл. 6) дана ниже.

Таблица 6

	Время (мин)	Поток (мл/мин)	%А	%В
1		1,00	85	15
2	10	1,00	15	85
3	10,5	1,00	15	85
4	10,6	1,00	85	15

Стабильность полученных образцов для ВЭЖХ-анализа.

К фосфату в буферном растворе с рН 1 добавляют ацетонитрил для разбавления 0,2% суспензии до 0,1% прозрачного раствора. К фосфату в остатке буферных растворов добавляют тетрагидрофуран для разбавления 0,2% суспензии до 0,1% прозрачного раствора. К солям в воде добавляют ацетонитрил для разбавления 0,2% суспензии до 0,1% прозрачного раствора. К солям в метаноле, ацетонитриле или смеси ацетонитрил/вода (50:50, об./об.) добавляют соответствующий растворитель или смесь растворителей для разбавления 0,2% суспензии до 0,1% прозрачного раствора. К солям в 0,5% СМС, 0,5% НРМС целлюлозе или 0,8% Т\\ееп 80 добавляют тетрагидрофуран и воду для разбавления 2% суспензию до 0,1% прозрачного раствора и получения 50:50 (об./об.) тетрагидрофуран/вода. Для объемной стабильности образцов (включая образцы в смесях эксципиентов) добавляют ацетонитрил/воду (80:20, об./об.) для получения 0,1% прозрачного раствора.

Пример 10.

Сульфат и дифосфат Ы-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'(трифторметокси)[1,1'-дифенил]-3-карбоксамида (соединение А в табл. 7) вводят крысам линии ХУМаг в виде суспензии 1 мг/мл в 0,5% метилцеллюлозы/0,5% Т\\ееп 80 в дозировке 10 мл/кг. Обнаружено, что дифосфат демонстрирует в 1,6 раза большую экспозицию в терминах АИС (0-24 ч) нг-ч/мл по сравнению с сульфатом. Результаты показаны в табл. 7.

- 9 020048

Таблица 7

соединение	доза крыса диСп.	Аис₀.24 /доза (нг*ч/мл) /(мг/кг/день)	Стах (нг/мл)	Сщах^Д^за (нг/мл)/ (мг/кг/день)	^тах (ч)
(мг/ кг)	24 (нг*ч/ мл)
Соединение А	10	16	25900	2590	1900	190	4
сульфат
		2Ь	28700	2870	1860	190	2
		36	36200	3620	3560	360	1
Соединение А	10	001	43300	4330	2820	282	8
дифосфат
		002	52800	5280	3160	316	8
		003	49400	4940	3100	310	4

Как показано в табл. 7, среднее !_тах для сульфата (2,3 ч) меньше по сравнению с дифосфатом (6,7 ч). Среднее 1,,,,,,/доза для фосфата составляет 303, а для сульфата - 244. Среднее аис/доза для фосфата составляет 4850, для сульфата - 3030. В целом, сульфат демонстрирует меньшую экспозицию ίη νίνο (примерно на 40% меньше), чем дифосфат.

При описании настоящего изобретения со ссылками на конкретные варианты его осуществления очевидно, что различные его изменения, модификации и вариации могут быть осуществлены без отклонения от описанного здесь основного изобретательского замысла. Соответственно предполагается, что изобретение включает в себя все такие изменения, вариации и модификации, соответствующие его сути и подпадающие под полный объем формулы настоящего изобретения. Все упомянутые патенты, патентные заявки и прочие публикации во всей полноте включены в данное изобретение посредством ссылки.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Дифосфатная соль И-[6-(цис-2,6-диметилморфолин-4-ил)пиридин-3-ил]-2-метил-4'(трифторметокси) [1,1 '-дифенил] -3 -карбоксамида.
2. Фармацевтическая композиция, модулирующая активность хэджхог сигнального пути, включающая:

(а) терапевтически эффективное количество соли по п.1 и (б) по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель, растворитель или эксципиент.