EA019055B1 - Циклопропильное соединение, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета - Google Patents

Циклопропильное соединение, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета Download PDF

Info

Publication number
EA019055B1
EA019055B1 EA201170845A EA201170845A EA019055B1 EA 019055 B1 EA019055 B1 EA 019055B1 EA 201170845 A EA201170845 A EA 201170845A EA 201170845 A EA201170845 A EA 201170845A EA 019055 B1 EA019055 B1 EA 019055B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
diabetes
solution
glucose
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
EA201170845A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170845A1 (ru
Inventor
Ана Белен Буэно Мелендо
Франсиско Хавьер Ахехас-Чичарро
Original Assignee
Эли Лилли Энд Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эли Лилли Энд Компани filed Critical Эли Лилли Энд Компани
Publication of EA201170845A1 publication Critical patent/EA201170845A1/ru
Publication of EA019055B1 publication Critical patent/EA019055B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/38—Nitrogen atoms
    • C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
    • C07D277/46—Acylated amino or imino radicals by carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Соединение формулы (А)и фармацевтические композиции для лечения диабета.

Description

Диабет является прогрессирующим заболеванием, которое негативно сказывается как на продолжительности, так и на качестве жизни. Имеющиеся на сегодняшний день терапевтические средства для перорального приема как по отдельности, так и в комбинации, не проявляют надлежащей или продолжительной эффективности в отношении снижения уровня глюкозы у пациентов, страдающих диабетом. Таким образом, по-прежнему существует потребность в усовершенствованных способах лечения пациентов, страдающих диабетом.
Активаторы глюкокиназы (СКА) представляют собой класс агентов, понижающих уровень глюкозы, действие которых, главным образом, заключается в снижении концентрации глюкозы в крови за счет модулирующего действия в β-клетках поджелудочной железы и печени. Был описан ряд синтетических СКА для лечения диабета, например СКА, предложенные в νΟ 04/063179. По-прежнему существует потребность в альтернативных СКА в качестве терапевтического средства для лечения пациентов, страдающих диабетом.
Было показано, что глюкокиназа (СК) имеет важное значение для опосредования чувствительности к глюкозе в нервных клетках. Активация СК в гипоталамусе ослабляет контррегуляторный ответ на вызываемую инсулином гипогликемию. Таким образом, активация СК в мозге с помощью СКА может приводить к повышению риска развития гипогликемии за счет снижения секреции адреналина, норадреналина и снижения уровня глюкагона при низких уровнях глюкозы. Соединения СКА с ограниченной способностью проникать через гематоэнцефалический барьер могли бы обладать меньшей потенциальной способностью вызывать тяжелую гипогликемию.
Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению активируют глюкокиназу как ίη νίίτο, так и ίη νίνο. Соединения согласно настоящему изобретению, как было показано, проявляют повышенную эффективность по сравнению с существующими СКА. Было обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению проявляют ограниченную способность проникать через гематоэнцефалический барьер.
Настоящее изобретение относится к соединениям, активирующим глюкокиназу, фармацевтическим композициям, содержащим указанные соединения в качестве активного ингредиента, способам лечения расстройств, связанных с нарушением функции глюкокиназы, и их применению для лечения диабета, в частности диабета II типа.
Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
Соединение согласно настоящему изобретению имеет два стереоцентра (*) и, таким образом, четыре возможных стереоизомера. Предполагается, что каждый стереоизомер и рацемические или диастереомерные смеси, чистые или частично чистые, находятся в рамках настоящего изобретения.
Предпочтительный стереоизомер соединения согласно настоящему изобретению имеет структурную формулу
Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
Согласно настоящему изобретению предложены соединение формулы I или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения в терапии. Согласно настоящему изобретению также предложено соединение формулы I или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения для применения при лечении диабета, в частности диабета II типа. Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложено применение соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения лекарственного средства для лечения диабета, в частности диабета II типа.
Согласно настоящему изобретению предложен способ лечения диабета, включающий введение эффективного количества соединения формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения нуждающемуся в этом человеку или животному. Согласно настоящему изобретению также предложен способ лечения диабета II типа, включающий введение эффективного количества соединения
- 1 019055 формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения нуждающемуся в этом человеку или животному.
Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для применения в терапии, содержащая соединение согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. Согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция для применения при диабете, в частности диабете II типа, содержащая соединение согласно настоящему изобретению или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения.
В настоящем описании термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям соединения согласно настоящему изобретению, которые, по существу, не токсичны для живых организмов. Указанные соли и общепринятая методология их получения хорошо известны в данной области техники; см., например, Р. 81аЫ, с1 а1., НапбЬоок о! Рйагтасеибса1 8а1к: Рторетбек 8е1ес1юп апб Ике (УСНАЖйеуУСН, 2002) и 1. Рйатт. 8ск, 66, 2-19 (1977). Предпочтительная фармацевтически приемлемая соль представляет собой гидрохлорид.
Соединения согласно настоящему изобретению предпочтительно приготовлены в виде фармацевтических композиций, вводимых различными способами. Наиболее предпочтительно указанные композиции представляют собой композиции для перорального введения. Такие фармацевтические композиции и способы их получения хорошо известны в данной области техники; см., например, Яеттфоп: Тйе 8с1епсе апб Ртасбсе о! Рйаттасу (А. Сеппато, е1 а1., ебк., 19411 еб., Маск РиЬШЫпд Со., 1995).
Согласно другому аспекту изобретения настоящие соединения вводят в комбинации с одним или более активными веществами. Такие активные вещества включают, например, метформин.
Введение в комбинации включает одновременное, последовательное или раздельное введение.
Названия соединений для следующих примеров получены при помощи программы Аи1оЫот 2000. Общие методики.
Все чувствительные к влаге или воздуху реакции проводили в обезвоженных растворителях в инертной атмосфере. Масс-спектры (МС) были получены на спектрометре Адбеп! серии 1100 Μ8Ό при ионизации электрораспылением. Значения оптического вращения в хлороформе получали на цифровом поляриметре 1А8СО Э1Р-370 при температуре 20°С с использованием Ό-линии натрия.
Пример 1. [5-(2-Пирролидин-1-илэтилсульфанил)тиазол-2-ил]амид (1К,28)-2-циклогексил-1-(4циклопропансульфонилфенил)циклопропанкарбоновой кислоты
А) Этиловый эфир (4-циклопропансульфонилфенил)диазоуксусной кислоты
Смесь этилового эфира (4-циклопропансульфонилфенил)оксоуксусной кислоты (250 г, 806 ммоль) и п-толуолсульфонилгидразида (187 г, 984 ммоль) в 1,5 л этанола перемешивали при комнатной температуре до получения раствора светло-желтого цвета. Затем добавляли концентрированную соляную кислоту (20 мл, 233 ммоль) и полученную в результате смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3,5 ч. Освобождали от летучих компонентов с получением чистого масла светло-желтого цвета, которое растворяли в 1,5 л этилацетата. Полученный раствор затем промывали 1 л насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, а затем 1 л насыщенного водного раствора хлорида натрия. Водные фазы заново экстрагировали этилацетатом (2x500 мл), а органические слои объединяли, сушили над сульфатом магния и фильтровали. Полученный неочищенный раствор гидразона (~2,1 л, предположительно содержащий 363 г промежуточного соединения гидразона) интенсивно перемешивали, при этом медленно добавляли триэтиламин (100 мл, 890 ммоль). Полученный в результате раствор оставляли стоять в течение ночи, за это время некоторое количество твердого вещества выпадало в осадок. Смесь разбавляли этилацетатом до объема 3 л с получением раствора, который промывали 1 л воды, а затем двумя порциями воды по 500 мл, смешанными с насыщенным водным раствором хлорида натрия, что необходимо для разрушения каких-либо эмульсий. Полученную в результате органическую фазу затем сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением влажного твердого вещества, которое растирали с метил-трет-бутиловым эфиром. Полученную в результате суспензию фильтровали с получением твердого вещества светло-желтого цвета, которое сушили в вакууме для получения 155 г указанного в заголовке соединения. Фильтрат концентрировали до получения масла, которое растирали, как указано выше, до тех пор, пока не получали свободнотекучее твердое вещество. Указанное твердое вещество отделяли с помощью фильтрования и сушили с получением дополнительных 10 г указанного в заголовке соединения. ЖХ-МС (т/е): 295 (М+Н).
- 2 019055
В) (1В,28)-2-Циклогексил-1-(4-циклопропансульфонилфенил)циклопропанкарбоновая кислота
К раствору винилциклогексана (300 мл, 2,72 моль) в 150 мл безводного дихлорметана при температуре 25-30°С в инертной атмосфере по каплям добавляли раствор аддукта бис-(этилацетата) тетракисЩфталоил-(В)-трет-лейцинат]диродия (120 мг, 84 мкмоль) в винилциклогексане (40 мл), тогда как этиловый эфир (4-циклопропансульфонилфенил)диазоуксусной кислоты (169,40 г, 575,5 ммоль) добавляли порциями. Скорости добавления регулировали для поддержания внутренней температуры 40°С. Добавление завершали примерно через 1,5 ч и реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 2 ч при 30°С. Затем освобождали от летучих компонентов в вакууме для получения неочищенного этилового эфира (1В,28)-2-циклогексил-1-(4-циклопропансульфонилфенил)циклопропанкарбоновой кислоты в виде вязкого коричневого масла (218 г, 579 ммоль), которое растворяли в 1,1 л метанола для получения раствора желто-коричневого цвета, к которому медленно добавляли 5н. раствор водного гидроксида натрия (500 мл, 2,5 ммоль). Полученную в результате суспензию затем перемешивали при температуре 50°С 1 ч, в течение которого формировался раствор. Метанол удаляли в вакууме и добавляли 1 л этилацетата. Полученную в результате смесь подкисляли путем добавления примерно 550 мл 5% водной соляной кислоты и разделяли на два слоя. Водный слой затем экстрагировали двумя порциями по 500 мл этилацетата. Органические фазы объединяли, промывали 500 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением влажного твердого вещества бледно-желтого цвета. Полученный материал затем растворяли в 1 л метанола. Воду (1 л) добавляли к перемешиваемому раствору в течение 1,5 ч. Полученную в результате суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем фильтровали. Фильтровальную подушку промывали смесью метанол/вода (1:1) и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде кристаллов бледно-желтого цвета (166 г). Точная масса по результатам МС: рассчитано 349,14735; обнаружено 349,14679 (времяпролетный масс-спектрометр для ЖХ Адйеи! 1100 с ионизацией электрораспылением); |α [/=-31°.
Энантиомерный избыток кислоты был определен посредством сравнения интегралов для двух пиков, соответствующих энантиомерам, разделенным с помощью хиральной хроматографии на колонке с фазой ΛΌ-Η (150 мм) при элюировании при 35°С 10% этанолом в гексанах с содержанием 0,05% трифторуксусной кислоты, и составлял 97,7%.
С) 5-(2-Пирролидин-1-илэтилсульфанил)тиазол-2-иламин
Тииран (550 мл, 9,2 моль) добавляли к смеси пирролидина (543 мл, 6,57 моль) в 2,5 л безводного диоксана в инертной атмосфере. Температура медленно повышалась, и когда внутренняя температура достигала 54°С, реакционную смесь охлаждали на ледяной бане. Как только температура падала до 45°С, охлаждающую баню убирали и реакционную смесь нагревали до 60°С. Через 3 ч смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Остаток затем перегоняли при давлении 6 мм рт. ст. и фракцию, испаряющуюся при 50°С, отбирали для получения 2-пирролидин-1-илэтантиола в виде бесцветного масла (643 г). МС (т/е): 132 (М+Н).
К смеси 5-бромтиазол-2-иламингидробромида (1,53 кг, 5,87 моль) в 7,5 л изопропанола медленно добавляли бикарбонат натрия (1,232 кг, 14,7 моль) порциями. Затем добавляли 2-пирролидин-1-илэтантиол (1,060 кг, 8,07 моль) в течение 15 мин и полученную в результате смесь перемешивали при 60°С в течение 96 ч. Температуру повышали до 70°С в течение 1 ч, а затем смесь охлаждали до комнатной температуры. Большую часть изопропанола удаляли в вакууме и полученный остаток помещали в 4 л раствора изопропанол/хлороформ (1:9). Добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия (4 л) и полученную в результате смесь перемешивали в течение 30 мин Слои разделяли и водную фазу экстрагировали тремя порциями по 4 л раствора изопропанол/хлороформ (1:9). Органические слои объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученный в результате остаток растирали с 3 л диэтилового эфира и отфильтровывали с получением первой порции указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества бледно-желтого цвета (410 г). Фильтрат концентрировали с получением твердого вещества оранжевого цвета, которое растирали с 2 л диэтилового эфира и выделяли в виде твердого вещества бежевого цвета путем фильтрации. Полученное твердое вещество затем растворяли в 2 л метанола и раствор нагревали при 45°С в течение 30 мин. При охлаждении до комнатной температуры образовывалось твердое вещество. Данное вещество выделяли путем фильтрования, растирали с диэтиловым эфиром, как указано выше, и сушили под вакуумом с получением дополнительных 310 г указанного в заголовке соединения. МС (т/е): 230 [М+Н].
- 3 019055
Ό) [5-(2-Пирролидин-1 -илэтилсульфанил)тиазол-2-ил]амид (1К,28)-2-циклогексил-1 -(4-циклопропансульфонилфенил)циклопропанкарбоновой кислоты.
Оксалилхлорид (146,89 мл, 1,69 моль) добавляли в течение 15 мин к перемешиваемому раствору (1В,28)-2-циклогексил-1-(4-циклопропансульфонилфенил)циклопропанкарбоновой кислоты (295,00 г, 0,847 моль) в 10 л безводного дихлорметана в инертной атмосфере. Затем одной порцией добавляли диметилформамид (654,61 мкл, 8,5 ммоль) и полученный в результате раствор перемешивали в течение ночи. Затем освобождали от летучих компонентов в вакууме при 40°С с получением масла, которое растворяли в 3 л безводного дихлорметана. Инертная атмосфера восстанавливалась, и раствор охлаждали до <5°С. Затем добавляли по каплям триэтиламин (177 мл, 1,27 моль) в течение 20 мин с получением темного раствора. Добавляли сульфат натрия (120,25 г, 0,847 моль) с последующим добавлением 5-(2пирролидин-1-илэтилсульфанил)тиазол-2-иламина (213,60 г, 0,931 моль).
Внутренняя температура повышалась до 20°С. Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин на холоде, а затем позволяли ей нагреться до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи реакционную смесь выливали в 3 л воды. Полученную в результате смесь перемешивали в течение нескольких минут, а затем разделяли два слоя. Водный слой экстрагировали 1 л дихлорметана и растворы дихлорметана объединяли, сушили над Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом при температуре 40°С. Полученное в результате масло (556 г) переносили на пластинки с силикагелем в виде раствора дихлорметана. Элюирование пластинок смесью 2 М аммиак в метаноле/метил-трет-бутиловый эфир/гептан (1:12:7) с последующим элюированием смесью 2 М аммиак (в метаноле)/этилацетат (1:19) приводило к получению коричневой пены (351 г). Кристаллизация 320 г указанного материала из метилтрет-бутилового эфира и гептана после сушки в течение 2 дней при 45°С приводила к получению указанного в заголовке соединения (279,4 г) в виде твердого вещества грязно-белого цвета. ЖХ-МС (т/е): 560 (М+Н); [а]с 20=-44°.
Исследование глюкокиназы.
Изоформу человеческой СК островков поджелудочной железы экспрессировали в Е. сой в виде (Н18)6-меченного гибридного белка и очищали с помощью металлохелатной аффинной хроматографии, см., например, Т1ебде е1 а1., Вюсйет. Вюрйуз. Ас1а. 1337, 175-190, 1997. Фермент после очистки хранили в аликвотированном виде в концентрации 0,8 мг/мл в растворе, содержащем 25 мМ фосфат натрия, 150 мМ хлорид натрия, 100 мМ имидазол, 1 мМ дитиотреитол и 50% глицерин при -80°С. Анализ проводили в 96-луночных планшетах с плоским дном в конечном инкубационном объеме 100 мкл. Инкубационная смесь содержала 25 мМ 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (НЕРЕ8) (рН 7,4), 50 мМ хлорид калия, 2,5 мМ хлорид магния, 2 мМ дитиотреитол, 4 ед/мл глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы из Ьеисопо51ос те8еп1его1бе8, 5 мМ АТФ, 1 мМ НАД и определенную концентрацию глюкозы. Тестируемые соединения растворяли в диметилсульфоксиде и затем добавляли в реакционную смесь, получая конечную концентрацию диметилсульфоксида 10%. Реакцию инициировали путем добавления 20 мкл СК и проводили в течение 20 мин при 37°С. Количество полученного НАДН оценивали по увеличению абсорбции на длине волны 340 нм с использованием прибора для считывания микропланшетов. Значения абсорбции использовали для расчета ЕС50.
Соединение согласно примеру 1 активировало СК с ЕС50=42±42 нМ (п=5) при концентрации глюкозы 10 мМ. Указанное соединение также повышало активность фермента дозозависимым образом при более низких концентрациях глюкозы.
Исследование гликолиза.
Клетки ГЫ8-1Е инсулиномы крыс выдерживали при 37°С, 5% СО2, 95% влажности в среде 1640 с добавлением 11 мМ глюкозы, 5% эмбриональной бычьей сыворотки, 50 мкМ 2-меркаптоэтанола, 1 мМ пирувата, 10 мМ НЕРЕ8 и антибиотиков. До проведения исследования клетки обрабатывали трипсином, осаждали центрифугированием и высевали в 96-луночные аналитические планшеты для тканевых культур при плотности 30000 клеток на лунку. Клеткам давали прикрепиться и инкубировали их в течение 48 ч при 37°С, 5% СО2. В день проведения анализа клетки промывали и инкубировали в 200 мкл сбалансированного солевого раствора Эрла (ЕВ88) с добавлением 0,1% бычьего сывороточного альбумина (БСА). Через 30 мин инкубации буфер удаляли и к клеткам добавляли 100 мкл буфера ЕВ88, содержащего 0,1% БСА, 8 мМ глюкозу и соединение. Затем сразу добавляли к клеткам 20 мкл реагента СеПТйег 96® АЦиеои8 Опе 8о1ийоп и клетки инкубировали при 37°С в течение еще 1 ч. По окончании инкубации измеряли абсорбцию при длине волны 490 нм. Значения абсорбции использовали для расчета ЕС50.
Соединение согласно примеру 1 стимулировало метаболизм глюкозы в клетках ΙΝ81Έ инсулиномы крыс (средняя ЕС50=579±139 нМ, п=4).
Таким образом, было показано, что соединения согласно настоящему изобретению активируют СК ίη уйго.
Пероральный тест на толерантность к глюкозе (ПТТГ).
Самцов крыс породы ^У1ь1аг массой 225-250 г содержали на обычной диете при нормальном цикле свет/темнота и нормальных условиях. Для проведения исследования крысам не давали пищу в течение ночи до момента измерения их точной массы и случайным образом распределяли по группам животных с
- 4 019055 одинаковой массой (п=4 на группу). Соединение суспендировали в смеси солютол/этанол (1:1) в ультразвуковой ванне (10% от общего объема). Полученную суспензию затем разводили 9 об. 10% водного раствора солютола и соединение вводили перорально в дозах 1, 3, 6, 10, 20 и 30 мг/кг. Крысам давали глюкозу в виде болюсов для перорального приема (2 г/кг) через 2 ч после введения соединения. Кровь забирали из хвоста через 0, 15, 30, 60, 90 и 120 мин после введения глюкозы. Собранную кровь помещали в пробирки с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) в объеме 400 мкл на образец и образцы хранили во льду. Плазму отделяли и хранили при -20°С до момента исследования образцов на предмет содержание глюкозы и соединения. Площадь под кривой содержания глюкозы в плазме (ППК глюкозы) рассчитывали для каждой группы и процентное снижение ППК глюкозы по сравнению с контрольной группой использовали как меру эффективности соединения в отношении снижения уровня глюкозы в плазме.
Соединение согласно примеру 1 снижало уровень глюкозы в плазме дозозависимым образом как натощак, так и после приема пищи. Максимальное снижение ППК глюкозы по сравнению с контрольной группой, не получавшей лечение, наблюдалось при высокой дозе (30 мг/кг) и представляло собой снижение на 42%. В результате интерполяции было выявлено, что снижение ППК глюкозы на 20% происходит при средней концентрации соединения в плазме, равной 99 нг/мл (179 нМ), что соответствует дозе соединения 6,9 мг/кг.
Таким образом, было показано, что соединения согласно настоящему изобретению активируют СК ίη νίνο.
Способность проникать через гематоэнцефалический барьер.
Исходный раствор соединения готовили в диметилсульфоксиде в концентрации 10 мМ. Затем готовили дозированный раствор в концентрации 1 мМ путем разбавления 100 мкл исходного раствора 900 мкл пропиленгликоля. Дозу вводили путем внутривенного болюсного введения (2,2 мл/кг) через хвостовую вену шести самцам мышей линии СР-1 (весом примерно 23 г) в дозе из расчета 2,17 мкмоль/кг. Мышей умерщвляли с использованием СО2 и метода смещения шейных позвонков. Троих мышей усыпляли через 5 мин после введения дозы и троих - через 60 мин после введения дозы. Кровь от каждого животного забирали посредством пункции сердца, получали плазму с использованием ЭДТА натрия, переносили в полипропиленовую пробирку и сразу замораживали с помощью сухого льда. У каждого животного извлекали мозг целиком и рассекали посередине, каждую половину переносили в полипропиленовую пробирку и сразу замораживали с помощью сухого льда. Образцы плазмы готовили для анализа путем преципитации белка с использованием двух частей раствора для экстракции (10% тетрагидрофурана в ацетонитриле) и одной части плазмы и перемешивания с помощью вихревой мешалки. Предполагали, что 1 мг ткани мозга « по объему 1 мкл, и добавляли две части раствора для экстракции к одной части ткани. Образцы сразу гомогенизировали с использованием ультразвукового клеточного дезинтегратора. Калибровочные стандарты готовили путем добавления известных концентраций соединения в контрольный образец плазмы крови мыши, а затем обрабатывали так же, как тестируемые образцы плазмы. Все образцы центрифугировали при относительной центробежной силе, равной 6000, в течение 5 мин. Аликвоту супернатанта из каждого образца переносили в полипропиленовый 96-луночный планшет и запечатывали для анализа с помощью ЖХ/МС/МС.
МС/МС проводили с использованием тройного квадрупольного масс-спектрометра 8с1ех ΑΡΙ 4000, снабженного высокоэффективным распылительным источником ионов. Высокоэффективную жидкостную хроматографию проводили с использованием аналитической колонки Рйепошепех Нутбто КР (100x2,0 мм, 4 мк), нагретой до 50°С, при постоянной скорости потока 0,6 мл/мин. Использовали градиент подвижной фазы при изначальном составе подвижной фазы: 5 мМ водный формиат аммония:5 мМ формиат аммония в метаноле (60:40) с конечным временем выдержки, равным 1 мин, с последующим использованием линейного градиента в течение 2 мин до 5 мМ водный формиат аммония:5 мМ формиат аммония в метаноле, 10:90, с конечным временем выдержки, равным 1 мин. Элюат из колонки отводили в течение 0-2,8 мин, а затем направляли в масс-спектрометр в течение 2,8-4,0 мин. Наблюдали переходы МС/МС 560/84. Количественную оценку соединения в тестируемых образцах проводили путем сравнения полученных значений площади пика со значениями площади пика, рассчитанными согласно квадратному уравнению 1/х2 для заданных концентраций калибровочных стандартов. Верхний и нижний пределы количественного определения получали путем обратного пересчета восстановленных значений калибровочных стандартов, превышающих +/-20% от теоретических значений. Значения концентраций в ткани мозга корректировали с учетом плазматической составляющей при использовании известного из литературы фактора, составляющего 16 мкл плазмы на 1 г ткани мозга мыши.
По результатам исследования ίη νίνο способности соединения согласно примеру 1 проникать через гематоэнцефалический барьер было показано, что среднее отношение концентрация в ткани мозга/концентрация в плазме через 5 мин после введения дозы составляет 0,17, а средняя общая концентрация в мозге через 5 мин после введения дозы составляет 0,539 нмоль/г.
Было показано, что соединения согласно настоящему изобретению имеют ограниченную способность проникать через гематоэнцефалический барьер и, таким образом, обеспечивают ограниченную
- 5 019055 потенциальную возможность вызывать тяжелую гипогликемию. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (5)

1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1 формулы или его фармацевтически приемлемая соль.
3. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по п. 1 или 2 или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.
4. Применение соединения по п.1 или 2 или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для лечения диабета.
5. Применение по п.4 для лечения диабета II типа.
Евразийская патентная организация, ЕАПВ
Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA201170845A 2008-12-19 2009-12-11 Циклопропильное соединение, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета EA019055B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08380341 2008-12-19
US15378109P 2009-02-19 2009-02-19
PCT/US2009/067603 WO2010080333A1 (en) 2008-12-19 2009-12-11 Arylcyclopropylacetamide derivatives useful as glucokinase activators

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170845A1 EA201170845A1 (ru) 2011-12-30
EA019055B1 true EA019055B1 (ru) 2013-12-30

Family

ID=40545955

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170845A EA019055B1 (ru) 2008-12-19 2009-12-11 Циклопропильное соединение, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета

Country Status (34)

Country Link
US (1) US8063079B2 (ru)
EP (1) EP2379517B1 (ru)
JP (1) JP5497064B2 (ru)
KR (1) KR101290437B1 (ru)
CN (1) CN102256952B (ru)
AR (1) AR074470A1 (ru)
AU (1) AU2009335931B2 (ru)
BR (1) BRPI0923183B1 (ru)
CA (1) CA2746746C (ru)
CO (1) CO6382120A2 (ru)
CR (1) CR20110342A (ru)
DK (1) DK2379517T3 (ru)
DO (1) DOP2011000197A (ru)
EA (1) EA019055B1 (ru)
EC (1) ECSP11011150A (ru)
ES (1) ES2435242T3 (ru)
HR (1) HRP20130983T1 (ru)
IL (1) IL213210A (ru)
JO (1) JO2979B1 (ru)
MA (1) MA32902B1 (ru)
MX (1) MX2011006434A (ru)
MY (1) MY180567A (ru)
NZ (1) NZ592930A (ru)
PA (1) PA8851901A1 (ru)
PE (1) PE20120339A1 (ru)
PL (1) PL2379517T3 (ru)
PT (1) PT2379517E (ru)
SG (1) SG172256A1 (ru)
SI (1) SI2379517T1 (ru)
TN (1) TN2011000294A1 (ru)
TW (1) TWI395748B (ru)
UA (1) UA104742C2 (ru)
WO (1) WO2010080333A1 (ru)
ZA (1) ZA201103944B (ru)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102959076B (zh) 2010-03-31 2015-09-16 斯克里普斯研究所 重编程细胞
CA2931056C (en) 2013-11-22 2023-02-28 The University Of Tokyo Carrier for use in delivering drug, conjugate, composition comprising same, and method for administrating same

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004063179A1 (en) * 2003-01-06 2004-07-29 Eli Lilly And Company Substituted arylcyclopropylacetamides as glucokinase activators
WO2006058923A1 (en) * 2004-12-03 2006-06-08 Novo Nordisk A/S Heteroaromatic glucokinase activators
WO2007051847A1 (en) * 2005-11-03 2007-05-10 Prosidion Ltd Tricyclo substituted amides as glucokinase modulators

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1176915C (zh) 2000-05-03 2004-11-24 霍夫曼-拉罗奇有限公司 炔基苯基芳香杂环的菊糖激酶激活剂
JP3839723B2 (ja) 2000-05-08 2006-11-01 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 置換フェニルアセトアミドおよびグルコキナーゼ活性化剤としてのその使用
WO2001085707A1 (en) 2000-05-08 2001-11-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Para-amine substituted phenylamide glucokinase activators
US7132425B2 (en) * 2002-12-12 2006-11-07 Hoffmann-La Roche Inc. 5-substituted-six-membered heteroaromatic glucokinase activators
PL378117A1 (pl) 2003-02-11 2006-03-06 Prosidion Limited Tricyklopodstawione związki amidowe
WO2004072066A1 (en) 2003-02-11 2004-08-26 Prosidion Limited Tri(cyclo) substituted amide glucokinase activator compounds
US7432287B2 (en) * 2003-02-26 2008-10-07 Banyu Pharmeceutical Co., Ltd. Heteroarylcarbamoylbenzene derivative
US20080242869A1 (en) 2004-04-21 2008-10-02 Matthew Fyfe Tri(Cyclo) Substituted Amide Compounds
BRPI0514147A (pt) 2004-08-12 2008-05-27 Prosidion Ltd composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, métodos de tratamento profilático ou terapêutico de uma condição onde a ativação de gk é desejável, de tratamento profilático ou terapêutico da hiperglicemia ou diabete e de prevenção da diabete em um ser humano que demosntra hiperglicemia pré-diabética ou toleráncia à glicose prejudicada, e, processo para a preparação do composto
MX2007016393A (es) 2005-07-01 2008-03-10 Novartis Ag Combinacion de un inhibidor de renina y un potenciador de la secrecion de insulina o un sensibilizante a la insulina.
US7514439B2 (en) 2005-07-11 2009-04-07 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Oxime derivative and preparations thereof
WO2007017649A1 (en) * 2005-08-09 2007-02-15 Astrazeneca Ab Heteroarylcarbamoylbenzene derivatives for the treatment of diabetes
BRPI0618062A2 (pt) 2005-11-03 2011-08-16 Prosidion Ltd composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, uso de um composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e, processo para a preparação de um composto
WO2007051846A1 (en) 2005-11-03 2007-05-10 Prosidion Ltd Tricyclo substituted amides
KR20090025358A (ko) * 2006-07-24 2009-03-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 글루코키나제 활성화제로서의 피라졸
EP2105435A4 (en) * 2007-01-10 2011-06-15 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Hydrazone derivatives
SI2275414T1 (sl) 2008-04-28 2015-10-30 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd., Ciklopentilakrilamidni derivat

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004063179A1 (en) * 2003-01-06 2004-07-29 Eli Lilly And Company Substituted arylcyclopropylacetamides as glucokinase activators
WO2006058923A1 (en) * 2004-12-03 2006-06-08 Novo Nordisk A/S Heteroaromatic glucokinase activators
WO2007051847A1 (en) * 2005-11-03 2007-05-10 Prosidion Ltd Tricyclo substituted amides as glucokinase modulators

Also Published As

Publication number Publication date
EA201170845A1 (ru) 2011-12-30
CR20110342A (es) 2011-09-14
JP5497064B2 (ja) 2014-05-21
TN2011000294A1 (en) 2012-12-17
DK2379517T3 (da) 2013-09-30
CN102256952B (zh) 2013-12-11
EP2379517A1 (en) 2011-10-26
US8063079B2 (en) 2011-11-22
IL213210A0 (en) 2011-07-31
CA2746746C (en) 2013-09-24
ES2435242T3 (es) 2013-12-17
PA8851901A1 (es) 2010-07-27
CO6382120A2 (es) 2012-02-15
PT2379517E (pt) 2013-11-21
JO2979B1 (en) 2016-03-15
AU2009335931B2 (en) 2012-05-31
BRPI0923183A2 (pt) 2016-02-16
SI2379517T1 (sl) 2013-10-30
TWI395748B (zh) 2013-05-11
NZ592930A (en) 2013-01-25
HRP20130983T1 (hr) 2013-11-22
US20100160395A1 (en) 2010-06-24
MX2011006434A (es) 2011-07-19
IL213210A (en) 2015-03-31
MY180567A (en) 2020-12-02
WO2010080333A1 (en) 2010-07-15
PL2379517T3 (pl) 2014-01-31
SG172256A1 (en) 2011-07-28
KR20110086751A (ko) 2011-07-29
MA32902B1 (fr) 2011-12-01
BRPI0923183B1 (pt) 2019-03-19
JP2012512874A (ja) 2012-06-07
UA104742C2 (ru) 2014-03-11
KR101290437B1 (ko) 2013-07-29
ECSP11011150A (es) 2011-07-29
AU2009335931A1 (en) 2011-07-07
CN102256952A (zh) 2011-11-23
EP2379517B1 (en) 2013-08-28
CA2746746A1 (en) 2010-07-15
TW201029999A (en) 2010-08-16
DOP2011000197A (es) 2011-09-15
PE20120339A1 (es) 2012-04-16
ZA201103944B (en) 2012-11-28
AR074470A1 (es) 2011-01-19
BRPI0923183A8 (pt) 2017-09-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230218595A1 (en) Combination therapy using enantiopure, oxy-substituted, deuterium-enriched 5-(benzyl)-5-deutero-thiazolidine-2,4-diones for treatment of medical disorders
KR20170032862A (ko) 셀레노유기 화합물의 조성물 및 그의 사용 방법
JP6795713B2 (ja) カリウムチャンネル開口薬としての有用な新規化合物
US11247970B2 (en) Selective inhibition of gluconeogenic activity
Pietrowska et al. Analysis of pharmaceuticals and small molecules in aqueous humor
EA027987B1 (ru) Оксазолидин-2-онпиримидиновые производные
US20080027052A1 (en) Methods for treating cystic kidney disease
US8765953B2 (en) Compounds and methods for the treatment of pain and other diseases
RU2687490C2 (ru) Ppar-поддерживающие соединения для лечения метаболических заболеваний
US10487045B2 (en) Adamantane derivative and use thereof
EA019055B1 (ru) Циклопропильное соединение, фармацевтическая композиция и способ лечения диабета
RU2716814C2 (ru) Новые производные азетидина, полезные в качестве модуляторов кортикальной катехоламинергической нейротрансмиссии
WO2021235508A1 (ja) 脂肪性肝疾患の治療用医薬
CN105636943A (zh) 作为TCR-Nck相互作用的抑制剂的色烯衍生物
RU2779131C2 (ru) Новые соединения, используемые в качестве открывателей калиевых каналов
RU2779111C2 (ru) Новые соединения, используемые в качестве открывателей калиевых каналов
WO2018170509A1 (en) Fatty acid synthase inhibitors and methods of use

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU