EA015689B1

EA015689B1 - Производные 2-арилиндола в качестве ингибиторов npges-1

Info

Publication number: EA015689B1
Application number: EA200970124A
Authority: EA
Inventors: Мария Алессандра Ализи; Никола Каццолла; Барбара Гарофало; Гвидо Фурлотти; Катерина Мауджери; Розелла Омбрато; Изабелла Колетта; Лоренцо Поленцани; Джорджина Мангано; Беатриче Гарроне; Анджело Гульельмотти
Original assignee: Ацьенде Кимике Рьюните Анджелини Франческо A.K.P.A.Ф. С.П.А.
Priority date: 2006-07-14
Filing date: 2007-06-14
Publication date: 2011-10-31
Also published as: EP2049480B1; BRPI0712889A8; AU2007271865A1; EA200970124A1; UA96759C2; GEP20115166B; DK2049480T3; KR20140091569A; US8017644B2; CA2655750C; AR061973A1; SI2049480T1; BRPI0712889A2; IL196000A0; JP2009543766A; US20090186922A1; PT2049480E; IL196000A; CN101490000B; EP2049480A1

Abstract

Предложены соединение 2-арилиндола, замещенное в положении 5, формулы (I)в котором X, Y, Z, W, A, R и R' имеют значения, указанные в описании, содержащая его фармацевтическая композиция, а также способ их получения и промежуточные соединения.

Description

Настоящее изобретение относится к соединению 2-арилиндола, замещенному в положении 5, к содержащей его фармацевтической композиции, к промежуточным соединениям и к способу его получения.

Более конкретно, настоящее изобретение относится к соединению 2-арилиндола, замещенному в положении 5, обладающему ингибирующей активностью в отношении тРСЕ§-1.

Известно, что простагландины (РС) представляют собой окисленные жирные кислоты, высвобождающиеся после синтеза во внеклеточное пространство и затем попадающие в плазму, мочу и другие биологические жидкости.

Они являются важными биорегуляторами, но также представляют собой медиаторы воспаления, модулирующие внутриклеточные реакции и межклеточные связи.

Простагландины Е₂ (РСЕ₂) выполняют важную физиологическую роль регуляции почечной функции, гомеостаза сосудов, реконструкции костей, возникновения лихорадки, желудочно-кишечной функции и беременности. Помимо перечисленных физиологических функций, РСЕ₂ простагландины выступают в качестве активных медиаторов острого воспаления (включая гипералгезию, расширение сосудов и выброс жидкостей из сосудов: Уаие 1. К. апб ВоФпд К. М. 1997 Апбе1пПашта1огу бгидк апб ΙΗοιγ тесйашкт ок асбоп 1ик1ашт. Ке§. 47 (2): р. 78) и хронического воспаления. В частности, особенно высок уровень РСЕ2 простагландинов при суставных воспалительных патологиях. РСЕ2 простагландины также играют роль в болевых процессах и являются мощным пиретическим средством (АуоиЬ 8. 8. е1 а1., 2004 А се1а-тшорйеп-тбисеб Нуробютиа т писе б теб1а!еб Ьу а ргойад1апбш епборегох1бе купШаке 1 депебепуеб рго1ет. РЫА8 101: 11165-11169; капот А. е1 а1. 2002 РгсБ1ад1апбб'1 Е₂-5уп111е51/тд епхутех т кеуег: б1ккегепба1 1га1Бспрбопа1 геди1а!юп, Ат. Е Рйуыок Кеди1. 1п1едг. Сотр. Рйуыок 283: К1104-К1117).

Ферментом, ответственным за синтез РСЕ₂ простагландинов, является простагландин Е синтаза (РСЕ8), которая превращает эндопероксид РСН₂, полученный из арахидоновой кислоты под действием циклооксигеназы, в РСЕ2. В разных типах клеток была обнаружена активность РСЕ8 как в цитозольной фракции, так и мембраносвязанная.

Были выявлены три формы фермента (Кибо I. е1 а1. 2005 РгоЧадРтбш Е купШаке, а 1егтта1 епхуте ког рго51ад1апбт Е₂ ЬюкупШекк, коита1 ок Вюсйетщбу апб Мо1еси1аг Вю1оду 38, 633-638); среди них микросомный РСЕ8-1 (тРСЕ8-1) представляет собой мембраносвязанный фермент, для активности которого необходим глютатион в качестве необходимого кофактора.

Экспрессия тРСЕ8-1 вызывается противовоспалительными стимулами, такими как 1Б-1в или БР8 (Ргос. №111. Асаб. 8С1. 96: 7220, 1999). Он расположен совместно с СОХ-2 на эндоплазматическом ретикулуме и на оболочке ядра (Бахагпх М. е1 а1. 2002 Вюс11еписа1 сНагас1епхабоп ок тоике ткго8ота1 ргок1ад1апбт Е 8уп1йа§е-1 апб 1Б со1осаНхабоп тейй сус1оохудепа§е-2 ш регйопеа1 тасгорйадек, Агсй. Вюсбет. Вюркъ. 397: 336; Мигакат1 М. е1 а1. 2000 Кеди1абоп ок ргоЧадктбш Е2 Ью5упб1е5Б Ьу тбис1Ь1е тетЬгапе-а88ос1а1еб ргойад1апбт Е2 зупШазе 11т1 асБ ш сопсей χνίΐΗ сус1оохудепа§е-2, Б Вю1. С1ет. 275: 32783; УатадаИ К. е1 а1. 2001 Соехргезыоп ок ткгозотайуре ргойад1апбт Е хупбхБе χνίΐΗ сус1оохудепаке-2 т Ьгат епбо1ВеНа1 се11§ ок гаБ бшгпд епбойхштбисеб кеуег, Б ЫеигокСк 15; 21 (8): 2669-77). Хотя два указанных фермента (СОХ-2 и тРСЕ8-1) имеют функциональную зависимость и экспрессируются совместно, их скорости возбуждения различаются в нескольких клеточных системах, указывая на различные регуляторные механизмы возбуждения (Б 1ттипо1. 167: 469, 2001).

Лекарства, ингибирующие фермент СОХ-2, продемонстрировали эффективность в смягчении воспаления и боли при хронических воспалительных патологиях, таких как артрит, но их длительное использование может вызвать повреждение тканей, обусловленное чрезмерным синтезом цитокинов, например, ΤΝΡα и 1Б-1 β (8к1сЫепокЬ Ό.Θ. 2001 М1сго8ота1 рго81ад1апбт Е купШаке б гедп1а1еб Ьу рготПаттаЮгу суФктек апб д1исосогйсо1б8 ш рптагу г11еитаЮ1б 5упоу1а1 се1к Б 1ттипо1. 167: 469). Кроме того, длительное использование данных лекарств связано с побочными эффектами со стороны сердечнососудистой системы. Это привело к изъятию из продажи некоторых селективных ингибиторов СОХ-2 и к пересмотру показаний для всего класса данных лекарств.

Недавние исследования направлены на преодоление побочных эффектов ингибиторов СОХ-2 с помощью изучения ингибиторов тРСЕ8-1 в целях разработки лекарств, эффективных при лечении воспаления и боли.

Кроме того, многочисленные исследования показали, что РСЕ₂ простагландины являются факторами, провоцирующими развитие опухолей (Сайе11опе М. Ό. е1 а1. 2005 Ргойад1апбт Е₂ ргото1е5 со1оп сапсег дго\\111бпопдб а поуе1 С8-Ахт-В-са1ешп, 8с1епсе 310, 1504-1510; Мейгойа 8., е1 а1. 2006 М1сго§ота1 ргойад1апбш Е₂ т Ьгеай сапсег: а ро1епба1 1агде1 ког Легару, Б Ра11ю1. 208(3): 356-63; Nакаио е1 а1. 2006 бчбисбоп ок тасгорйадк рго81ад1апбт Е₂ купШекк Ьу дйота се11§, Б №иго8игдегу 104(4), 574-582), вовлеченными в процессы ангиогенеза, клеточной пролиферации и клеточной миграции. Обнаружено, что селективные ингибиторы ΡΛΝ8 и СОХ-2 ингибируют также различные типы опухолей, включая колоректальные опухоли, опухоли пищевода, груди, легкого и мочевого пузыря, путем ингибирования РСЕ2. РСЕ2 простагландины, образующиеся из СОХ-2, вызывают рост опухоли за счет связывания с существующими рецепторами и активации сигналов контроля клеточной пролиферации, миграции, апоп

- 1 015689 тоза и ангиогенеза (^апд Ό. е( а1. 2006 Рго81ад1аибт аиб сапсег Си1. 55 (1): 115-22; Нап С. е( а1. 2006 Рго81ад1аибт Е₂ гесер!ог ЕР1 1гап5ас1|уа1с5 ЕСЕЯ/МЕТ гесер!ог (угомпе ктакек апб еийапсез туащуепекк ίη кита и Йера1осе11и1аг сагстота сеШ, 1оигпа1 о£ Се11и1аг Р11у5ю1оду 207: 261-270).

Авторы обнаружили соединение 2-арилиндола, замещенное в положении 5, обладающее селективной ингибирующей активностью в отношении тРСЕ8-1.

В первом аспекте настоящее изобретение относится к соединению 2-арилиндола, замещенному в положении 5, формулы (I)

где

X представляет собой атом галогена или (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро, амино, циано, ди(С₁С₃)алкиламино, гидрокси, (С1-С₃)алкокси, фенильную или (С1-С₃)алкилфенильную группу;

Υ и Ζ, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой Н или атом галогена или (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро, амино, ди(С1-С₃)алкиламино, гидрокси, (С1-С₃)алкокси, фенил, СООН, (С₁-С₃)алкил-СООН, (С₂-С₃)алкенил-СООН, СООЯ, (ΌΝΕ. 8О₂СН₃, 8О_;\НСН_; или 1МН§О₂СН₃группу;

представляет собой атом кислорода или СН₂ или ΝΗ группу;

Я представляет собой атом водорода или (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

Я' представляет собой атом водорода или (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

А представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С1С6)алкила, необязательно замещенного 1-3 гидроксигруппами, трифторметила, нитро, амино, ди(С1С₃)алкиламино, гидрокси, (С₁-С₃)алкокси, бензилокси, СООН, СООЯ, §О₂СН₃, 8О^НСН₃, ΝΗ^^Η^ РОЯ₁Я₂, ОРОЯ₁Я₂, (С₁-С₆)алкил-СООН, (С₂-С₆)алкенил-СООН, фенила и (С₁-С₃)алкилфенила, где, в свою очередь, Я₁ и Я₂, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой (С₁-С₃)алкил;

и его физиологически приемлемым аддитивным солям, стереоизомерам, энантиомерам, гидратам, сольватам и полиморфным формам.

Цепь различных алкильных групп, которые могут присутствовать в соединении формулы (I), может быть линейной или разветвленной.

В случае некоторых заместителей, соединение формулы (I) по настоящему изобретению может содержать асимметрический атом углерода и, следовательно, может находиться в виде стереоизомеров и энантиомеров. Типичными примерами таких заместителей являются 2-бутанол, 2-метилбутил, 2бутеновая кислота, 2-метилпропановая кислота и 1,2-пентандиол.

Предпочтительно галоген представляет собой бром, хлор или фтор.

Предпочтительными значениями X являются галоген, (С₁-С₃)алкил, трифторметил, нитро, циано и (С₁-С₃)алкокси. Особенно предпочтительными значениями X являются С1, Вг, Р, трифторметил и нитро.

Предпочтительными значениями Υ и Ζ являются Н, галоген, нитро, СООН, (С₁-С₃)алкил, трифторметил и (С₁-С₃)алкокси. Особенно предпочтительными значениями Υ и Ζ являются С1, Вг, Р, трифторметил, нитро, СООН, метил, этил, метокси и этокси.

Предпочтительными значениями Я являются метил, этил, пропил, изопропил и циклогексил.

Предпочтительными значениями Я' являются Н, метил, этил, пропил, изопропил и циклогексил.

Предпочтительными значениями А являются фенил, нафтил и пиридин, необязательно замещенные 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С₁С₃)алкила, (С₁-С₃)алкокси и бензилокси.

Первым особенно предпочтительным значением А является фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Р, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

Вторым особенно предпочтительным значением А является нафтил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Р, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

Третьим особенно предпочтительным значением А является пиридин, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Р, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

В зависимости от природы заместителей, соединение формулы (I) может образовывать аддитивные соли с физиологически приемлемыми органическими или минеральными кислотами или основаниями.

- 2 015689

Типичными примерами физиологически приемлемых минеральных кислот являются хлористоводородная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и азотная кислота.

Типичными примерами подходящих физиологически приемлемых органических кислот являются уксусная кислота, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, лимонная кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, паратолуолсульфоновая кислота, янтарная кислота, дубильная кислота и винная кислота.

Типичными примерами подходящих физиологически приемлемых минеральных оснований являются аммиак, кальций, магний, натрий и калий.

Типичными примерами подходящих физиологически приемлемых органических оснований являются аргинин, бетаин, кофеин, холин, Ν,Ν-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-этилморфолин, Ν-этилпиперидин, Νметилглюкамин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, №(2-гидроксиэтил)пиперидин, Ν-(2гидроксиэтил)пирролидин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трометамин.

Во втором аспекте настоящее изобретение относится к способу получения соединения 2арилиндола, замещенного в положении 5, формулы (I)

где А, X, Υ, Ζ, К и К' имеют вышеуказанные значения, и его физиологически приемлемых аддитивных солей, стереоизомеров, энантиомеров, гидратов, сульфатов и полиморфных форм,

а) взаимодействием соединения формулы (II)

где X, Υ и Ζ имеют вышеуказанные значения, и

О представляет собой атом галогена или гидроксигруппу, с соединением формулы (III)

где

К и К' имеют вышеуказанные значения и

С имеет такое значение, как А, или представляет собой атом водорода, с образованием соединения формулы (IV)

где X, Υ, Ζ, ^, С, К и К' имеют вышеуказанные значения, и

Ь) когда С представляет собой Н, взаимодействием соединения формулы (IV) с соединением формулы (V)

ΙΑ (V) где I представляет собой атом йода, и

А имеет вышеуказанные значения, с образованием соединения формулы (I), и

с) образованием, при необходимости, физиологически приемлемой аддитивной соли соединения формулы (IV) со стадии (а), где С отличен от Н, или соединения формулы (I) со стадии (Ь).

Очевидно, что соединение формулы (IV), где С отличен от Н, является ничем иным, как соединением формулы (I). Таким образом, на вышеуказанной стадии (с) всегда получают физиологически приемлемую аддитивную соль соединения формулы (I) по настоящему изобретению.

Согласно первому варианту осуществления вышеуказанную стадию (а) осуществляют взаимодейст

- 3 015689 вием соединения формулы (II), где О представляет собой С1, с амином формулы (III) в присутствии подходящего акцептора кислоты в соответствии со стандартными методиками.

Согласно второму варианту осуществления вышеуказанную стадию (а) осуществляют взаимодействием соединения формулы (II), в котором О представляет собой ОН, с амином формулы (III) в присутствии подходящего агента сочетания в соответствии со стандартными методиками.

Реакцию на вышеуказанной стадии (Ь) между соединением формулы (IV), где С представляет собой Н, и арилиодидом формулы (V) также осуществляют в соответствии со стандартными методиками.

Промежуточные соединения формулы (III) являются новыми.

В третьем аспекте настоящее изобретение также относится к соединению формулы (III)

К'

й (’) где

В представляет собой (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

В' представляет собой атом водорода или (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами,

С представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С₁С₆)алкила, необязательно замещенного 1-3 гидроксигруппами, трифторметила, нитро, амино, ди(С₁-С₃) алкиламино, гидрокси, (С₁-С₃)алкокси, бензилокси, СООН, СООВ, §О₂СН₃, 8Θ₂ΝΗΟΗ₃, НН8О₂СН₃, РОВ₁В₂, ОРОВ₁В₂, (С₁-С₆)алкил-СООН, (С₂-С₆)алкенил-СООН, фенила и (С₁-С₃)алкилфенила, где, в свою очередь, В1 и В2, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой (С₁-С₃)алкил;

при условии, однако, что С не является незамещенной фенильной группой, когда В представляет собой метил и В' представляет собой Н.

Предпочтительными значениями В являются метил, этил, пропил, изопропил и циклогексил.

Предпочтительными значениями В' являются Н, метил, этил, пропил, изопропил и циклогексил.

Первым особенно предпочтительным значением А является фенил, замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Р, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

Исследования биологических свойств соединения формулы (I) по настоящему изобретению показали, что оно обладает неожиданным селективным свойством ингибирования тРСЕ8-1 и ярко выраженным болеутоляющим действием при воспалительной боли.

В четвертом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей эффективное количество соединения формулы (I) или его физиологически приемлемой аддитивной соли, стереоизомера, энантиомера, гидрата, сольвата или полиморфной формы и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный ингредиент.

В настоящем описании и формуле изобретения термин эффективное количество относится к количеству, которое обеспечивает поддающееся оценке улучшение в отношении по меньшей мере одного симптома или параметра определенного нарушения.

Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению пригодна для использования в лечении или профилактике нарушений, связанных с выработкой простагландина Е₂(РСЕ₂), например воспалительных процессов, боли, опухолей, нейродегенеративных заболеваний и атеросклероза.

Преимущественно фармацевтическая композиция по настоящему изобретению пригодна для использования в лечении боли при хронических воспалительных патологиях, таких как артрит, или опухолей, особенно колоректальных опухолей, опухолей пищевода, груди, легкого и мочевого пузыря.

Предпочтительно фармацевтические композиции по настоящему изобретению получают в подходящих дозированных формах, содержащих эффективную дозу по меньшей мере одного соединения формулы (I) или его физиологически приемлемой аддитивной соли, стереоизомера, энантиомера, гидрата, сольвата или полиморфной формы, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный ингредиент.

Примерами подходящих дозированных форм являются таблетки, капсулы, покрытые оболочкой

- 4 015689 таблетки, гранулы, растворы и сиропы для перорального введения; кремы, мази и антисептические пластыри для местного применения; суппозитории для ректального введения и стерильные растворы для введения инъекцией, или аэрозоли, или препараты для введения в глаза.

Дозированные формы могут также содержать другие традиционные ингредиенты, например: консерванты, стабилизаторы, поверхностно-активные вещества, буферные растворы, соли для регулирования осмотического давления, эмульгаторы, подсластители, красители, отдушки и тому подобные.

Если это необходимо для определенных видов терапии, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может содержать другие фармакологически активные ингредиенты, одновременное введение которых оказывает благоприятный эффект.

Количество соединения формулы (I) или его физиологически приемлемой аддитивной соли, стереоизомера, энантиомера, гидрата, сольвата или полиморфной формы и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого инертного ингредиента в фармацевтической композиции по настоящему изобретению может варьироваться в широких пределах, в зависимости от известных факторов, например типа заболевания, которое необходимо вылечить, тяжести заболевания, массы тела пациента, дозированной формы, выбранного способа введения, количества ежедневных введений и эффективности выбранного соединения формулы (I). Однако специалист в данной области техники может легко определить оптимальное количество в обычном порядке.

Обычно, количество соединения формулы (I) или его физиологически приемлемой аддитивной соли, стереоизомера, энантиомера, гидрата, сольвата или полиморфной формы и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого инертного ингредиента в фармацевтической композиции по настоящему изобретению должно быть таким, чтобы обеспечивать уровень введения между 0,0001 и 100 мг/кг/день и более предпочтительно между 0,01 и 10 мг/кг/день.

Очевидно, что нет необходимости содержания в фармацевтических препаратах по настоящему изобретению всего количества соединения формулы (I), так как введение указанного эффективного количества можно обеспечить посредством введения нескольких доз фармацевтической композиции по настоящему изобретению.

Дозированные формы фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно получить согласно методикам, хорошо известным фармацевтическим химикам, включая смешивание, гранулирование, прессование, растворение, стерилизацию и тому подобные.

Последующие примеры служат для дополнительной иллюстрации настоящего изобретения, но не ограничивают его.

Пример 1. Получение промежуточных соединений

a) 1-Метил-2-фенил-1Н-индол-5-амин

К раствору 2-фенил-5-нитроиндола (получен, как описано в 1. Отд. СНет. (1966), 31 (1), 65-9) (1 г; 4,2 ммоль) в ДМФА (10 мл) добавляли гидрид натрия (50%-ная суспензия) (0,20 г; 4,2 ммоль); затем смесь оставляли перемешиваться на 30 мин.

К полученной таким образом смеси затем добавляли по каплям йодметан (0,60 г; 4,2 ммоль), растворенный в ДМФА (10 мл), и полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре на 18 ч. Затем смесь выливали в воду (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (2x50 мл).

Органические фазы объединяли, высушивали над Иа₂8О₄ и раствор упаривали при пониженном давлении. Полученный таким образом остаток очищали флэш-хроматографией (элюент: 7/3 гексан/этилацетат), получая 1 г 1-метил-5-нитро-2-фенил-1Н-индола, который использовали в следующей реакции без какой-либо дальнейшей очистки.

' Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-бб) δ м.д. 3,83 (с, 3 Н), 6,88 (д, 1 = 0,70 Гц, 1 Н), 7,47-7,68 (м, 5 Н), 7,73 (д, 1 = 9,06 Гц, 1 Н), 8,08 (дд, 1 = 9,06, 2,34 Гц, 1 Н), 8,59 (д, 1 = 2,05 Гц, 1 Н).

К суспензии 1-метил-5-нитро-2-фенил-1Н-индола (1 г; 4 ммоль) в 95° этаноле (100 мл) добавляли 10% Рб/С (0,1 г; 0,1 ммоль) и смесь гидрировали в аппарате Парра (30 фунт/кв.дюйм) в течение 4 ч.

Реакционную смесь фильтровали и раствор упаривали при пониженном давлении, получая 1-метил2-фенил-1Н-индол-5-амин (0,8 г), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 3,64 (с, 3 Н), 4,51 (ушир, с, 2 Н), 6,28 (д, 1 = 0,88 Гц, 1 Н), 6,59 (дд, 1 = 8,62, 2,19 Гц, 1 Н), 6,70 (д, 1 = 1,46 Гц, 1 Н), 7,17 (д, 1 = 8,48 Гц, 1 Н), 7,25-7,59 (м, 5 Н).

b) 1-Этил-2-фенил-1Н-индол-5-амин

Использовали способ, описанный выше в примере 1а, за исключением того, что вместо иодметана использовали иодэтан.

1-Этил-5-нитро-2-фенил-1Н-индол:

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) 5 м.д. 1,21 (т, 1 = 7,16 Гц, 3 Н), 4,30 (кв, 1 = 7,16 Гц, 2 Н), 6,83 (д, 1 = 0,58 Гц, 1 Н), 7,48-7,63 (м, 5 Н), 7,77 (д, 1=9,21 Гц, 1 Н), 8,07 (дд, 1 = 9,21, 2,34 Гц, 1 Н), 8,58 (д, 1 = 2,34 Гц, 1 Н).

1-Этил-2-фенил-1Н-индол-5-амин:

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ м.д. 1,28 (т, 1=6, 94 Гц, 3 Н), 3,59 (ушир, с, 2 Н), 4,13 (кв, 1 = 7,16 Гц, 2 Н), 6,37 (д, 1=0,73 Гц, 1 Н), 6,82 (дд, 1 = 8,48, 2,19 Гц, 1 Н), 7,09 (д, 1 = 1,90 Гц, 1 Н), 7,23 (д, 1 = 8,62

- 5 015689

Гц, 1 Н), 7,33-7,54 (м, 5 Н).

с) 1-Изопропил-2-фенил-1Н-индол-5-амин

Использовали способ, описанный выше для стадии а), за исключением того, что вместо йодметана использовали изопропилбромид.

1-Изопропил-5-нитро-2-фенил-1Н-индол:

Моноизотопная масса = 280,1; ЬС/М8 (М+Н)⁺ = 281,2

б) 1 -Этил-2-(2-фторфенил)-1Н-индол-5-амин

К суспензии, содержащей ацетат цезия, высушенный в вакууме в течение ночи при 140°С (3,6 г; 19 ммоль), в Ν,Ν-диметилацетамиде (ДМА, 5 мл), в инертной атмосфере добавляли ацетат палладия (12 мг; 0,05 ммоль), трифенилфосфин (55 мг; 0,21 ммоль), 1-этил-5-нитро-1Н-индол (2 г; 10 ммоль) (полученный по методике, описанной в Вюогд. Меб. СИет. 13 (2005), 3531-3541) и 1-иод-2-фторбензол (2,53 г; 11 ммоль).

Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 140°С в инертной атмосфере в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли дихлорметан (50 мл) и полученную таким образом смесь фильтровали под вакуумом через целит.

Органический раствор переносили в делительную воронку, промывали Н₂О (2x50 мл) и высушивали над Να₂8Θ₄.

Органический растворитель удаляли упариванием при пониженном давлении, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле, получая 1-этил-2-(2-фторфенил)-5-нитро-1Н-индол (0,7 г), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,15 (т, I = 7,16 Гц, 3 Н), 4,18 (кв, I = 7,02 Гц, 2 Н), 6,87 (с, 1 Н), 7,35-7,50 (м, 2 Н), 7,51-7,70 (м, 2 Н), 7,79 (д, I = 9,06 Гц, 1 Н), 8,10 (дд, I = 9,06, 2,34 Гц, 1 Н), 8,62 (д, I =

2,34 Гц, 1 Н).

К суспензии, содержащей 1-этил-2-(2-фторфенил)-5-нитро-1Н-индол (0,78 г; 2,75 ммоль) в 95° этаноле (100 мл), добавляли 10% Рб/С (0,1 г; 0,1 ммоль), и смесь гидрировали в аппарате Парра (30 фунт/кв. дюйм) в течение 4 ч. Смесь фильтровали и раствор упаривали при пониженном давлении, получая 1-этил-2-(2-фторфенил)-1Н-индол-5-амин (0,8 г), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

е) 1-Этил-2-(3-фторфенил)-1Н-индол-5-амин

Использовали способ, описанный выше в примере 1б), за исключением того, что вместо 1-иод-2фторбензола использовали 3-фтор-1-иодбензол.

1-Этил-2-(3 -фторфенил)-5-нитро-1Н-индол:

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,20 (т, I = 7,16 Гц, 3 Н), 4,32 (кв, I = 7,31 Гц, 2 Н), 6,90 (с, 1 Н),

7.31- 7,51 (м, 3 Н), 7,55-7,67 (м, 1 Н), 7,79 (д, I = 9,06 Гц, 1 Н), 8,09 (дд, I = 9,06, 2,34 Гц, 1 Н), 8,59 (д, I = 2,05 Гц, 1 Н).

ί) 1-Этил-2-(4-фторфенил)-1Н-индол-5-амин

Использовали способ, описанный выше в примере 1б), за исключением того, что вместо 1-иод-2фторбензола использовали 4-фтор-1-иодбензол.

1-Этил-2-(4-фторфенил)-5-нитро-1Н-индол:

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,19 (т, I = 7,16 Гц, 3 Н), 4,28 (кв, I = 7,02 Гц, 2 Н), 6,83 (с, 1 Н), 7,34-7,45 (м, 2 Н), 7,60-7,68 (м, 2 Н), 7,77 (д, I = 9,35 Гц, 1 Н), 8,07 (дд, I = 9,35, 2,34 Гц, 1 Н), 8,58 (д, I =

2,34 Гц, 1 Н).

1-Этил-2-(4-фторфенил)-1Н-индол-5-амин:

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ м.д. 1,24 (т, I = 7,16 Гц, 3 Н), 4,08 (кв, I = 7,16 Гц, 2 Н), 6,33 (с, 1 Н), 6,94 (дд, I = 8,55, 2,27 Гц, 1 Н), 7,09-7,25 (м, 4 Н), 7,41 (д, I = 8,77, 5,41 Гц, 2 Н).

д) 1 -Этил-3 -метил-2-фенил-1Н-индол-5-амин

Использовали способ, описанный выше в примере 1а), за исключением того, что вместо 2-фенил-5нитроиндола и йодметана использовали 2-фенил-3-метил-5-нитроиндол (полученный по методике, описанной в Те!гайебгои 1965, Уо1. 21,823-829) и иодэтан.

1-Этил-3-метил-5-нитро-2-фенил-1Н-индол:

'|| ЯМР (300 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,10 (т, I = 7,10 Гц, 3 Н), 2,23 (с, 3 Н), 4,16 (кв, I = 7,27 Гц, 2 Н), 7,44-7,63 (м, 5 Н), 7,71 (д, I = 9,25 Гц, 1 Н), 8,07 (дд, I = 9,25, 2,31 Гц, 1 Н), 8,53 (д, I = 2,31 Гц, 1 Н).

1-Этил-3-метил-2-фенил-1Н-индол-5-амин:

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-б) δ м.д. 1,17 (т, I = 7,16 Гц, 3 Н), 2,16 (с, 3 Н), 3,35 (ушир, с, 2 Н), 4,00 (кв, I = 7,16 Гц, 2 Н), 6,76 (дд, I = 8,48, 2,19 Гц, 1 Н), 6,96 (д, 1=1,75 Гц, 1 Н), 7,17 (д, 1=8,33 Гц, 1 Н),

7.31- 7,53 (м, 5 Н).

И) 5-Амино-2-фенил-1-циклогексилиндол

К суспензии ацетата цезия, высушенного в вакууме в течение ночи при 140°С (1,8 г; 9,5 ммоль), в Ν,Ν-диметилацетамиде (5 мл), в инертной атмосфере добавляли ацетат палладия (6 мг; 0,05 ммоль), трифенилфосфин (28 мг; 0,1 ммоль), 1-циклогексилиндол (полученный по методике, описанной в §уиШе818 1977, 5, 335-336) (1 г; 5 ммоль) и 1-иод-4-метилбензол (1,26 г; 6 ммоль).

- 6 015689

Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 140°С в инертной атмосфере в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли дихлорметан (50 мл). Реакционную смесь фильтровали под вакуумом через целит.

Фильтрат переносили в делительную воронку, и органическую фазу промывали Н₂О (2x50 мл) и высушивали над Ыа₂8О₄.

Органический растворитель удаляли упариванием при пониженном давлении, и остаток очищали флэш-хроматографией на силикагеле (97/3 гексан/этилацетат), получая 1-циклогексил-2-(4-метилфенил)1Н-индол (200 мг), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

¹Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ м.д. 1,13-1,98 (м, 8 Н), 2,25-2,41 (м, 2 Н), 2,43 (с, 3 Н), 4,21 (тт, 1 = 12,42, 3,80 Гц, 1 Н), 6,42 (ушир. с, 1 Н), 7,05-7,11 (м, 1 Н), 7,15 (ддд, 1 = 7,90, 7,20, 1,30 Гц, 1 Н), 7,22-7,35 (м, 4 Н), 7,57-7,67 (м, 2 Н).

К раствору 1-циклогексил-2-(4-метилфенил)-1Н-индола (100 мг, 0,3 ммоль) в 2 мл концентрированной Н₂8О₄ при 5°С добавляли по каплям раствор ΝαΝΟ₃, (34 мг; 0,4 ммоль) в Н₂8О₄ (1 мл) .

По окончании добавления смесь оставляли перемешиваться при 5°С в течение 10 мин. Затем ее выливали в смесь воды и льда (10 мл), и полученное таким образом твердое вещество отфильтровывали и очищали флэш-хроматографией на силикагеле (99/1 гексан/этилацетат), получая 1-циклогексил-2-(4метилфенил)-5-нитро-1Н-индол (45 мг), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ м.д. 1,15-1,42 (м, 4 Н), 1,64-2,01 (м, 4 Н), 2,16-2,41 (м, 2 Н), 2,45 (с, 3 Н), 4,24 (тт, 1 = 12,42, 3,80 Гц, 1 Н), 6,59 (с, 1 Н), 7,28-7,35 (м, 4 Н), 7,64 (д, 1=9,35 Гц, 1 Н), 8,06 (дд, 1 = 9,35,

2,34 Гц, 1 Н) 8,54 (д, 1 = 2,34 Гц, 1 Н).

К суспензии 1-циклогексил-2-(4-метилфенил)-5-нитро-1Н-индола (45 мг; 0,13 ммоль) в абсолютном этаноле (5 мл) добавляли дигидрат хлорида олова (152 мг; 0,67 ммоль) и смесь оставляли перемешиваться при 70°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем выливали в смесь воды и льда (20 мл), добавляли №1НСО₃ (насыщенный раствор) до рН 8 и смесь оставляли перемешиваться на 20 мин.

Затем смесь выливали в делительную воронку и экстрагировали этилацетатом (2x30 мл). Органические фазы объединяли, высушивали над №1₃8О₄ и удаляли растворитель упариванием при пониженном давлении, получая 5-амино-2-(4-метилфенил)-1-циклогексилиндол (30 мг), который использовали без какой-либо дальнейшей очистки.

Ή ЯМР (300 МГц, хлороформ-й) δ м.д. 1,12-1,42 (м, 4 Н), 1,62-1,94 (м, 4 Н), 2,17-2,38 (м, 2 Н), 2,41 (с, 3 Н), 4,05-4,20 (м, 1 Н), 4,23 (ушир. с, 2 Н), 6,25 (с, 1 Н), 6,69 (дд, 1 = 8,62, 2,19 Гц, 1 Н), 6,98 (д, 1 =

2,34 Гц, 1 Н), 7,19-7,33 (м, 4 Н), 7,45 (д, 1 = 8,77 Гц, 1 Н).

ί) 2-Хлор-Ы- (1-этил-1Н-индол-5-ил)бензамид

К раствору 1-этил-1Н-индол-5-амина (полученному по методике, описанной в Вюотд. Мей СНсш. 13 (2005), 3531-3541) (27 г; 170 ммоль) в дихлорметане (300 мл) добавляли Ν,Ν-диизопропилэтилендиамин (26,1 г; 202 ммоль), с последующим добавлением по каплям 2-хлорбензоилхлорида (35,4 г; 202 ммоль), растворенного в дихлорметане (50 мл).

По завершении добавлений, смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем добавляли воду (400 мл), и органическую фазу отделяли и высушивали над №₂8О₄.

Органический раствор упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали кристаллизацией из этилацетата с образованием целевого продукта (37 г).

Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,35 (т, 1 = 7,27 Гц, 3 Н), 4,19 (кв, 1 = 7,05 Гц, 2 Н), 6,41 (дд, 1 = 2,97, 0,66 Гц, 1 Н), 7,34-7,60 (м, 7 Н), 8,00 (д, 1 = 1,32 Гц, 1 Н), 10,26 (с, 1 Н)

Пример 2. Получение соединений по настоящему изобретению

а) Пример первого варианта способа получения

К раствору 5-аминоиндола (III) (2 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавляли триэтиламин (2,2 ммоль), с последующим добавлением по каплям ацилхлорида (II) (2,2 ммоль), растворенного в дихлорметане (10 мл). По завершении добавлений смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем добавляли воду (50 мл), и органическую фазу отделяли и высушивали над №1₃8О₄. Раствор упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт очищали, получая соединение (I), в котором X, Υ, Ζ, К, К' и А имеют вышеуказанные значения.

Ь) Пример второго варианта способа получения

- 7 015689

К суспензии 5-аминоиндола (III) (0,9 ммоль) добавляли смолу АшЬсНуЧ А21 (0,9 г) в дихлорметане (3 мл) и ацилхлорид (II) (0,28 ммоль) в дихлорметане (3 мл). Смесь оставляли перемешиваться в течение 20 ч. Смолу АшЬсНуЫ А21 затем удаляли фильтрованием и промывали дихлорметаном (5 мл). Органические фазы объединяли, разбавляли диметилформамидом (1 мл) и перемешивали со смолой АшЬсНуЫ 15 (0,9 г) в течение 5 ч. Данную обработку повторяли дважды. Смолу АшЬсНуЫ А21 удаляли фильтрованием и раствор упаривали в центрифуге, получая соединение (I), в котором X, Υ, Ζ, Я, Я' и А имеют выше указанные значения.

с) Пример третьего варианта способа получения:

Бензойную кислоту (II) (0,67 ммоль) и 5-аминоиндол (III) (0,45 ммоль) растворяли в дихлорметане (8 мл) и диметилформамиде (0,8 мл) в инертной атмосфере. После перемешивания смеси при комнатной температуре в течение 10 мин добавляли смолу Р8-карбодиимид (0,73 г).

После перемешивания реакционной смеси в течение 20 ч смолу удаляли фильтрованием и промывали дихлорметаном (2x5 мл). Раствор упаривали в центрифуге, получая соединение (I), в котором X, Υ, Ζ, Я, Я' и А имеют вышеуказанные значения,

ά) Пример четвертого варианта способа получения

(II > <Ш> «>

К раствору бензойной кислоты (II) (10 ммоль) в диметилформамиде (40 мл) при 0°С добавляли при перемешивании 1-гидроксибензотриазол (НОВ!) (10 ммоль) и дициклогексилкарбодиимид (ДЦК) (10 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение 30 мин и добавляли 5-аминоиндол (III) (9 ммоль), растворенный в диметилформамиде (20 мл).

Смесь оставляли перемешиваться при 0°С в течение еще 30 мин, и затем при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь фильтровали, добавляли 2н соляную кислоту до рН 2, и полученный таким образом осадок отфильтровывали и очищали, получая соединение (I), в котором X, Υ, Ζ, Я, Я' и А имеют вышеуказанные значения.

е) Пример пятого варианта способа получения

(IV) (V) (О

К суспензии ацетата цезия, высушенного в вакууме в течение ночи при 140°С (6,02 ммоль) в Ν,Νдиметилацетамиде (ДМА) (3 мл), в инертной атмосфере добавляли ацетат палладия (0,017 ммоль), трифенилфосфин (0,067 ммоль), индол (V) (3,35 ммоль) и арилиодид (V) (3,68 ммоль).

Реакционную смесь оставляли перемешиваться при 140°С в инертной атмосфере в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли дихлорметан (50 мл) и полученную смесь фильтровали под вакуумом через целит. Отфильтрованный органический раствор переносили в делительную воронку. Органическую фазу промывали Н₂О (2x50 мл), высушивали над №1₂8О₄ и упаривали при пониженном давлении.

Остаток очищали, получая соединение (I), в котором X, Υ, Ζ, Я, Я' и А имеют вышеуказанные значения.

- 8 015689

Таким образом были получены соединения формулы (I), показанные ниже в табл. 1, в которой Очистка А=Кристаллизация

Очистка В=Флэш-хроматография на силикагеле

1-РгОН=Изопропанол (1-Рг)₂О=Диизопропиловый эфир

ЕЮЛс=Этилацетат

Нех=Гексан

ЕЮН=Этанол

СНС1₃=Хлороформ

МеОН=Метанол

АсОН=Уксусная кислота

Таблица 1

Соединение	Структурная формула	Пример	Очистка	Моноизотопная масса	1С/М5 (М+Н)*	Ή ЯИР ООО МГц)
1	Χ^ν Г-~ . -ц Ж	2{а}	А (ЕЮН 95 ^е)	360,1	361,4	ДМСО-с1_б δ м.Д. 3,75 (с, 3 Н) 6,58 (с, 1 Н) 7,36-7,70 (м, 11 Н) 8,06 (с,1 Н) 10,33 (с, 1 И)
2	ЛХо-о и х	2(а)	А (ί-ргОН/(1- рг)_гО=1/1)	374,1	375,4	ДМСО-Х δ М.Д. 1,19 (дд, 7=7,00 Гц, 3 Н) 4,21 (кв, 7=7,10 Гц, 2 Н) 6,53 (с, 1 Н) 7,39-7,63 (м, 11 Н) 8,04 (д, σ=1,65 Гц, 1 Н) 10,31 (с, 1 Н)
3	«. X ХХхО О Л	2 (а)	А (ЕкОН 95“)	3Θ8,1	389, 3	ДМСО-йб δ М.Д. 1,54 (д, 7=6,95 Гц, 6 Н) 4,51-4,68 (м, 7=7,00, 7,00, 7,00, 7,00, 7,00, 7,00 Гц, 1 Н) 6,43 (с, 1 Н) 7,32- 7,72 (м, 11 Н) 8,04 (д, 7-1,83Гц, 1Н) 10,31 (с,1Н)
4	.ΤΟχΖ	2 (а)	В (Не®/АСОЕС= 8/2}			ДМСО-с1_б б м.д. 1,13 (т, 7=6,94 Гц, 3 Н) 4,08 (кв,7=6,72 Гц, 2 Н) 6,54 (с, 1 Н) 7,30-7,67 (м, 10 И) 8,07 (д, 7=1,65 Гц, 1 Н) 10,34 (с, 1 Н)

5	.ХХхЖ и	2(а)	В (Нех/АсОЕС= 8/2)			ДМСО-й₆ 5 м.Д. 1,19 (т, 1=7,10 Гн, 3 Н) 4,23 (кв, 7=7,27 Гц, 2 Н) 6,61 (с, 1 Н) 7,23-7,65 (м, 10 Н) 8,06 (д, 1-1,98 Гц, 1 . Н) 10,34 (с, 1 Н}
6	'~~^т-	2{а)	В (Нех/АсОЕСв 7/3)			ДМСО-сЦ δ М.Д. 1,18 (т, 7=7,00 Гц, 3 Н) 4,19 (кв, σ=7,27 Гц, 2 Н) 6,53 (с, 1 Н) 7,29-7,67 (м, 10 Н)8,05 (д, 7=1,65 Гц, 1 Н) 10,32 (с, 1 Н)
7	СНз ОО СО V о	2 (а)	В (Нез/АсОЕй»= 9/1)			ДМСО-а_& δ М.Д. 1,08 (т, 7=7,14 Гц, 3 Н) 2 16 Х-З Я) 4-07 'кв- 7=7 03 Гц 2 Н) 7,37-7,64 (м, 11 Н) 8,02 (д, 7-1,39 Гц, 1 Н) 10,32 (с, 1 Н)
8	а X ί .1 X ^сн· Ό-χ	2 (а)	В (Нез/АсОЕ):= 9/1)	442,2	443,3	ХЛОРОФОРМ-0_б δ М.Д. 1,11-1,44 (м, 4 Н) 1,64-1,97 (м, 4 Н) 2,23-2,41 (м, 2 Н) 2,43 (С, 3 Н) 4,20 (ТТ, 1=12,35, 3,65, 3,51 Гц, 1 Н) 6,42 (с, 1 Н) 7,21-7,50 (м, 8 К) 7,61 (д, 1=8,77 Гц, 1 Н) 7,77-7,84 (м, 1 Н) 7,87 (с, 1 Н) 7,93 (д, 1=2,05 Гц, 1 Н)

- 9 015689

14	• и. Ο·)-Ο	2 (с)		416,1	419,3
15	ИХ Хо	2 (с)		354,2	355,4
16	.0 о, Уо	2(с)		385,1	386,3
17	3 ►л	2 (ά) '	δ СНС1₃/МеОН/АсОН = 95/5/0, 1	462,1	463,3	ДМС0-с1_б δ м.д. 1,20 (т, Д=7,06 Гц, 3 Н) 4,21 (кв, Ц=6,86 Гц, 2 Н) 6,54 (с, 1 Н) 7,37-7,61 (м, 7 Н) 7,70 (д, 0=7,67 Гц, 1 Н) 7,98-8,07 (м, 2 Н) 8,17 (д, σ=1,21 Гц, 1 Н) 10,42 (с, 1 Н) 13,46 (уш.с, 1 К)
16	•V, ха>ь 1,1 > - ку	2 (е)	В (Нез/АсОЕС= 8/2)	388,1	389,3	ДМСО-с8₅ δ м.д. 1,05 (т, Э=7,05 Гц, 3 Н) 2,16 (с, 3 Н) 3,95 (кв, σ=6,97 Гц, 2 Н) 6,39 (с, 1 Н) 7,26-7,65 (м, 10 Н) 8,02 (д, σ-1,57 Гц, 1 Н) 10,31 (с, 1 Н)

- 10 015689

В (Нез/АсОЕЕ= в (Нез/АсОЕев (Нез/АсоЕг.=

В (Не5/АсОЕЕ=

В (Нез/АсОЕЕ=

ДМСО-άδ δ м.д.	1/19	(дд, σ=7,00	ГЦ,	3	Н)
2,40 (с,	3 И)	4,21	(кв, Л=6,94	Гц,	2	Н)
6,50 (с,	I Н}	7,20·	-7,67 (м, 10	Н)	8,	03
(д, 3=	1,65	Гц, 1	Н) 10,32 (С	, 1	Н)

дмсо-	•06 £ м.д.	1,22	(т, σ=7,ιο	Гц,	3	Н)
1,35	(с, 9 И}	4,20	(кв, Д=7,10	Гц,	2	Н)
6,49	(с, 1 Н)	7,37·	-7,64 (м, 10	Н)	8,	03
(Д/	. σ-ι,65	Гц, 1	Н) 10,31 (с	, 1	Н)

Пример 3. Биологическая активность ίη νίίτο

Примененный тест дает возможность оценить потенциал ингибирующего действия тестируемых соединений на выработку РСЕ₂ и селективность в отношении выработки ΡΟΡ_2α. Использовали клеточную линию аденокарциномы человека А54 9, которая особенно чувствительна к стимуляции противовоспалительными цитокинами, например ΣΠ-1 β, и в ответ на такую стимуляцию проявляет особенную активность в выработке и высвобождении двух простаноидов: Р6Е₂ и Ρ6Ρ_2α (Тйогеп 8. 1акоЬ88Оп Ρ-Σ, 2000).

Клетки стимулировали ΣΠ-1β (10 нг/мл) и одновременно обрабатывали тестируемым соединением в

- 11 015689 течение 22 ч в подходящей питательной среде (ΌΜΕΜ - модифицированная по способу Дульбекко среда Игла), обогащенной 5% фетальной телячьей сывороткой и Ь-глутамином (конечная концентрация 4 мМ) в инкубаторе при 37°С и концентрации СО₂ 5%.

В конце инкубирования определяли количество выработанного и высвобожденного в супернатант РСЕ₂ и РСР_2о, используя набор ЕМ (производится и поставляется фирмой Саутап СНст1са15. Апп АгЬог, ΜΣ, США).

В качестве соединения сравнения использовали индометацин в концентрации 10 нМ (81дтаАИпсй), представляющий собой нестероидное противовоспалительное лекарственное средство, в одинаковой степени ингибирующее и РСЕ₂, и РСР_2о.

Результаты, выраженные в процентах ингибирования выработки РСЕ₂ и РСР_2о при концентрации 10 мкМ, представлены в табл. 2, в которой н.а. (не активно) означает ингибирующую активность менее 20%.

Таблица 2

Соединение	% ингибирования при 10 мкМ
₽СЕ₂	РСЕ_2с[
1	63	н.а.
2	76	н.а.
3	91	34
4	72	н.а.

5	91	36
6	82	н. а.
7	90	39
9	100	н.а.
10	76	н.а.
12	75	н.а.
13	100	36
16	74	н.а.
18	66	н. а.
19	87	43
20	75	н.а.
21	66	н.а.
22	79	н.а.
24	79	н.а.
25	89	н. а.
28	65	н.а.
29	91	н.а.
30	75	н.а.
Индометацин (10 нМ)	100	100

Для иллюстрации в табл. 3 сопоставлены значения ρΚ’₅₀ некоторых соединений по настоящему изобретению, где ρΚ’₅₀ представляет собой отрицательный логарифм ТС₅₀, который в свою очередь представляет собой концентрацию соединения, при которой наблюдается 50%-ное ингибирование выработки РСЕ₂ или РСР₂о по сравнению с клетками, которые стимулировались, но не обрабатывались тем же соединением.

В табл. 3 и.о. означает не поддается определению.

- 12 015689

Таблица 3

Пример 4. Биологическая активность ίη νίνο

Тестируемое соединение оценивали в мышиной модели судорог, вызываемых уксусной кислотой (81оск 1. Ь. с1 а1., 1 С1ш Ιην 2001, 107: 325-331). Данный тест позволяет оценивать антиноцицептивную активность соединений по настоящему изобретению в модели воспалительной боли.

В тесте использовали самок мышей СО-Ι весом 25-30 г.

Животным внутрибрюшинно вводили тестовое соединение (0,1-10 мг/кг), суспендированное в метилцеллюлозе (МТС). Контрольным животным тем же образом вводили чистый растворитель (МТС).

Через 30 мин после введения животным делали внутрибрюшинную инъекцию уксусной кислоты (0,7 об./об. в физиологическом растворе, 16 мкл/г массы тела) для индуцирования воспалительной боли и определения влияния тестового соединения на ноцицептивный ответ.

Сразу после введения уксусной кислоты и в течение следующих 20 мин подсчитывали количество напряжений, которое представляет собой критерий оценки ноцицептивной реакции.

Как показано в табл. 4, соединение по настоящему изобретению дозозависимым образом вызывало уменьшение количества напряжений в течение 20 мин после введения уксусной кислоты по сравнению с животными, которым вводили только МТС.

Таблица 4

Введено	Доза (мг/кг)	Число судорог	% Ингибирования
Наполнитель	-	52	-
Соединение 2	0,1	38	27
1	36	31
10	25	52

Пример 5. Селективность между изоформами РСЕ8

Примененный тест позволяет оценивать способность соединений по настоящему изобретению ингибировать выработку РСЕ₂ в клеточной линии лимфомы человека И-937, которая предпочтительно экспрессирует изоформу фермента (сРСЕ8). отвечающую за выработку РСЕ₂ в базальных условиях, в отсутствии противовоспалительных стимулов. Данная форма фермента отличается от формы, преимущественно экспрессируемой в клетках А549 (шРСЕ8-1) после провоспалительной стимуляции.

Отсутствие ингибирующей активности в отношении РСЕ₂ в данной клеточной модели с уверенностью свидетельствует о селективности соединения по сравнению с формой фермента, отвечающей за выработку РСЕ₂ в присутствии воспалительных стимулов.

Результаты, выраженные в процентах ингибирования выработки РСЕ₂, представлены в табл. 5, в которой н.а. (неактивно) означает ингибирующую активность менее 20%. В качестве соединения сравнения использовался индометацин в концентрации 10 нМ.

Обнаружено, что соединения по настоящему изобретению незначительно ингибировали образование РСЕ₂, в основном, благодаря действию сРСЕ8.

- 13 015689

Таблица 5

Claims

1. Соединение 2-арилиндола, замещенное в положении 5, формулы (I) где

X представляет собой атом галогена или (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро, циано, (С1-С₃)алкокси или фенильную группу;

Υ и Ζ, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой Н, или атом галогена, или трифторметил, нитро, (С1-С₃)алкокси, СООН, (С1-С₃)алкил-СООН или (С₂-С₃)алкенил-СООН; представляет собой атом кислорода или СН₂ или ΝΗ группу;

Я представляет собой атом водорода или (С1-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

Я' представляет собой атом водорода или (С1-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу;

А представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С1С₆)алкила, трифторметила, амино, (С1-С₃)алкокси, бензилокси, СООЯ, ΝΗ8Ο^Η₃, (С1-С₆)алкил-СООН и (С2-С6)алкенил-СООН, и его физиологически приемлемые аддитивные соли, стереоизомеры, энантиомеры, гидраты, сольваты и полиморфные формы.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что X представляет собой галоген, (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро или (С1-С₃)алкокси.

3. Соединение по п.2, отличающееся тем, что X представляет собой С1, Вг, Е, трифторметил или нитро.

4. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Υ и Ζ независимо друг от друга представляют собой Н, галоген, нитро, СООН, трифторметил или (С1-С3)алкокси.

5. Соединение по п.4, отличающееся тем, что Υ и Ζ независимо друг от друга представляют собой С1, Вг, Е, трифторметил, нитро, СООН, метокси или этокси.

6. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Я представляет собой метил, этил, пропил, изопропил или циклогексил.

7. Соединение по п.1, отличающееся тем, что Я' представляет собой Н, метил, этил, пропил, изопропил или циклогексил.

8. Соединение по п.1, отличающееся тем, что А представляет собой фенил, нафтил или пиридин, необязательно замещенные 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С1-С₃)алкила, (С1-С₃)алкокси и бензилокси.

9. Соединение по п.8, отличающееся тем, что А представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Е, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

10. Соединение по п.8, отличающееся тем, что А представляет собой нафтил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Е, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

- 14 015689

11. Соединение по п.8, отличающееся тем, что А представляет собой пиридин, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из Вг, С1, Р, метила, этила, метокси, этокси и бензилокси.

12. Способ получения соединения 2-арилиндола, замещенного в положении 5, формулы (I) где

X представляет собой атом галогена или (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро, циано, (С)-С₃)алкокси или фенильную группу;

Υ и Ζ, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой Н или атом галогена, или трифторметил, нитро, (С)-С₃)алкокси, СООН, (С)-С₃)алкил-СООН или (С₂-С₃)алкенил-СООН; представляет собой атом О или СН₂ или ΝΗ группу;

К представляет собой атом водорода или (С)-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

К' представляет собой атом Н или (С)-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу;

А представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С1С₆)алкила, трифторметила, амино, (С)-С₃)алкокси, бензилокси, СООК, ΝΗ8Ο^Η₃, (С)-С₆)алкил-СООН и (С2-С6)алкенил-СООН, отличающийся тем, что:

а) соединение формулы (II) где

X, Υ и Ζ имеют вышеуказанные значения и

О представляет собой атом галогена или гидроксигруппу, подвергают взаимодействию с соединением формулы (III) где

К и К' имеют вышеуказанные значения и

С имеет такие же значения, как А, или представляет собой атом водорода, с образованием соединения формулы (IV) где

X, Υ, Ζ, ^, С, К и К' имеют вышеуказанные значения, и

Ь) когда С представляет собой Н, соединение формулы (IV) подвергают взаимодействию с соединением формулы (V)

ΙΑ (V) где

I представляет собой атом йода и

с) при необходимости получают физиологически приемлемую аддитивную соль соединения формулы (IV) со стадии (а), где С отличен от Н, или соединения формулы (I) со стадии (Ь).

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что стадию (а) осуществляют взаимодействием соединения формулы (II), где О представляет собой С1, с амином формулы (III) в присутствии подходящего акцептора кислоты в соответствии со стандартными методиками.

14. Способ по п.12, отличающийся тем, что стадию (а) осуществляют взаимодействием соединения

- 15 015689 формулы (II), где О представляет собой ОН, с амином формулы (III) в присутствии подходящего агента сочетания в соответствии со стандартными методиками.

15. Промежуточное соединение формулы (III) где

К представляет собой (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

К' представляет собой атом Н или (С₁-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу,

О представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С₁С₆)алкила, трифторметила, амино, (С₁-С₃)алкокси, бензилокси, СООК, НН§О₂СН₃, (С₁-С₆)алкил-СООН и (С₂-С₆)алкенил-СООН, при условии, однако, что О не является незамещенной фенильной группой, когда К представляет собой метил и К' представляет собой Н.

16. Промежуточное соединение по п.15, отличающееся тем, что К представляет собой метил, этил, пропил, изопропил или циклогексил.

17. Промежуточное соединение по п.15, отличающееся тем, что К' представляет собой Н, метил, этил, пропил, изопропил или циклогексил.

18. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное количество соединения формулы (I) где

X представляет собой атом галогена или (С1-С₃)алкил, трифторметил, нитро, циано, (С1-С₃)алкокси или фенил;

Υ и Ζ, которые могут быть одинаковыми или разными, представляют собой Н или атом галогена, или трифторметил, нитро, (С1-С₃)алкокси, СООН, (С1-С₃)алкил-СООН или (С₂-С₃) алкенил-СООН; представляет собой атом О или СН₂ или ΝΗ группу;

К представляет собой атом водорода или (С1-С₆)алкильную или (С₃-С₇)циклоалкильную группу, необязательно замещенную 1-3 гидроксигруппами;

К' представляет собой атом Н или (С1-С6) алкильную или (С3-С7)циклоалкильную группу;

А представляет собой фенильную, нафтильную или пиридиновую группу, необязательно замещенную 1-3 заместителями, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из галогена, (С1С₆)алкила, трифторметила, амино, (С_гС₃)алкокси, бензилокси, СООК, ΝΗ8Ο₂ί.’Η₃. (С1-С₆)алкил-СООН и (С2-С6)алкенил-СООН, или его физиологически приемлемой аддитивной соли, стереоизомера, энантиомера, гидрата, сольвата или полиморфной формы, и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный ингредиент.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2