EA015683B1

EA015683B1 - Производные пурина и способы их применения

Info

Publication number: EA015683B1
Application number: EA200801467A
Authority: EA
Inventors: Пракаш Джагтап; Эндрю Л. Салзман
Original assignee: Инотек Фармасьютикалз Корпорейшн
Priority date: 2005-11-30
Filing date: 2006-11-30
Publication date: 2011-10-31
Also published as: AU2006320578A1; KR20080072721A; WO2007064795A3; EP1962597A2; NO20082872L; CN101321460A; JP2009518295A; CA2627319A1; ZA200804688B; WO2007064795A2; BRPI0619261A2; JP5203214B2; US20070191301A1; US7732424B2; NZ568392A; EA200801467A1; EP1962597A4; AU2006320578B2

Abstract

Настоящее изобретение относится к производным пурина, композициям, включающим в себя эффективное количество производного пурина, и способам снижения температуры внутри тела животного, защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии или лечения, или предупреждения сердечно-сосудистого заболевания, неврологического расстройства, офтальмологического патологического состояния, ишемического патологического состояния, реперфузного повреждения, ожирения, синдрома истощения или диабета, включающим в себя введение эффективного количества производного пурина нуждающемуся в этом животному.

Description

Ссылки на родственные заявки

Данная заявка основана на предварительной заявке США № 60/740795, зарегистрированной 30 ноября 2005 года, которая включена здесь в качестве ссылки во всей своей полноте.

Область изобретения

Настоящее изобретение относится к производным пурина; композициям, включающим в себя эффективное количество производного пурина, и способам снижения температуры внутри тела животных, защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии; или лечения, или предупреждения сердечно-сосудистого заболевания, неврологического расстройства, глазного патологического состояния, ишемического патологического состояния, реперфузного повреждения, ожирения, синдрома истощения или диабета, включающим введение эффективного количества производного пурина в организм нуждающегося в этом животного.

Уровень техники изобретения

Аденозин представляет собой пуриновый нуклеозид природного происхождения, который повсюду встречается в типах клеток млекопитающих. Аденозин проявляет свои биологические действия взаимодействием с рецепторами Л!, А₂ (дополнительно подклассифицированными как А_2А и А_2В) и А₃ клеточной поверхности, которые модулируют важные физиологические процессы.

Полагают, что подтипы рецепторов А1 и А_2А играют комплементарные роли в регуляции аденозина снабжения клеточной энергии. Аденозин, который является метаболическим продуктом АТФ, диффундирует из клетки и локально активирует рецептор А1 для уменьшения потребление кислорода или активирует рецептор А2А для увеличения снабжения кислородом, тем самым восстанавливая баланс снабжения и потребления энергии внутри ткани. Объединенное действие подтипов А₁ и А₂ увеличивает количество доступного для ткани кислорода и защищает клетки против повреждения, вызванного кратковременным дисбалансом кислорода.

Одной из важных функций эндогенного аденозина является предупреждение повреждения ткани во время таких травм, как гипоксия, ишемическое патологическое состояние, гипотензия, и активности пароксизма.

Помимо этого модулирование рецепторов А₁ замедляет скорость проводимости в атриовентрикулярном узле сердца, приводя к нормализации суправентрикулярной тахикардии и регулированию вентрикулярного ритма сердца во время мерцательной аритмии и трепетания. Модулирование рецепторов А2А также регулирует коронарную вазодилатацию.

Аденозин также является нейромодулятором, который модулирует молекулярные механизмы, лежащие в основе многих аспектов физиологической функции головного мозга, опосредованием ингибирующих действий центральной нервной системы. Увеличение высвобождения нейротрансмиттеров имеет место после травм, таких как гипоксия, ишемия и пароксизмы. Нейротрансмиттеры, в конечном счете, являются ответственными за невральную дегенерацию и невральную гибель, которая может вызвать повреждение или гибель головного мозга. Полагают, что аденозин является эндогенным противосудорожным агентом, который ингибирует высвобождение глутамата из возбуждающих нейронов и нейрональный всплеск. Поэтому агонисты аденозина являются полезными как противоэпилептические агенты.

Аденозин играет важную роль как кардиозащитный агент.

Уровни эндогенного аденозина увеличиваются в ответ на ишемию и гипоксию и защищают ткань сердца во время и после травмы (прекондиционирование). Поэтому агонисты аденозина являются полезными как кардиозащитные агенты.

Описано получение и применение ряда агонистов рецептора А₁ аденозина (Моок е! а1., 1. Меб. Сйеш., 28:1383-1384 (1985); Тйошркоп е! а1., 1. Меб. Сйеш., 34: 3388-3390 (1991); УйЮп е! а1., 1. Меб. Сйеш., 43:250-260 (2000); Кое1еп е! а1., 1. Меб. Сйеш., 39:1463-1471 (1996); уап бег \епбеп е! а1., 1. Меб. СНет.. 41: 102-108 (1998); Оа1р1ах е! а1., Рйатш. Кек., 18:531-536 (2001), Веакегк е! а1., 1. Меб. СНет.. 46:1492-1503 (2003); И8 Ра!еп! 5589467 !о Ьаи е! а1., ϋδ Ра!еп! 5789416 !о Ьиш е! а1. и С.Е. Ми11ег, Сштеп! Меб1еша1 Сйеш1к!гу, 2000, 7, 1269-1288).

Цитирование любой ссылки в данном разделе настоящей заявки не является признанием того, что ссылка представляет собой известный уровень техники до данной заявки.

Сущность изобретения

В одном варианте осуществления изобретение предоставляет соединения, имеющие формулу (I)

и их фармацевтически приемлемые соли,

- 1 015683 где А представляет собой -СН₂ОН; В и С представляют собой -ОН;

Ό представляет собой

А и В находятся в трансположении относительно друг друга;

В и С находятся в цис-положении относительно друг друга;

С и Ό находятся в цис- и трансположении относительно друг друга;

В¹ представляет собой -галоген, -СЫ, -Ν(Β²)2, -ОК², -8В², -ЫНС(О)В². -ЫНС(О)Ы(В²)2, -ЫНС(О)ОВ². -С(О)ОВ², -С(О)В², С(О)Ы(В²)2, -ОС(О)Ы(В²)2, -С(галоген)з или -ΝΟ-;

каждый В² независимо представляет собой -Н, -С₁-С₁₀ алкил, -С₂-С₆ алкенил, -С₂-С₆ алкинил, -(СН₂)_п-арил, -(СН₂)_п-(3-7-членный моноциклический гетероцикл), -(СН₂)_п-(8-12-членный бициклический гетероцикл), -(СН₂)_п-(С₃-С₈ моноциклический циклоалкил), -(СН₂)_п-(С₃-С₈ моноциклический циклоалкенил), -(СН₂)_п-(С₈-С₁₂ бициклический циклоалкил) или -(СН₂)_п-(С₈-С₁₂ бициклический циклоалкенил);

каждое п равно целому числу в интервале от 0 до 6;

каждое р равно целому числу в интервале от 1 до 6 и каждое с.| равно целому числу в интервале от 1 до 6.

Соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль (производное пурина) применяют для: (ί) лечения или предупреждения сердечно-сосудистого заболевания, неврологического расстройства, глазного патологического состояния, ишемии, реперфузного повреждения, ожирения, синдрома истощения или диабета (каждое являющееся патологическим состоянием); (и) снижения температуры внутри тела животного или (ίίί) защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Изобретение также предоставляет композиции, включающие в себя эффективное количество производного пурина и физиологически приемлемый носитель или среду. Композиции применяют для: (1) лечения или предупреждения патологического состояния; (и) снижения температуры тела животного или (ίίί) защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Изобретение далее предоставляет способы: (ί) лечения или предупреждения патологического состояния; (ίί) снижения температуры внутри тела животного или (ίίί) защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии, включающие введение эффективного количества производного пурина нуждающемуся в этом животному.

Краткое описание чертежей

На фиг. 1 представлено измеренное внутриглазное давление у взрослых новозеландских белых кроликов перед (от -25 ч (за 25 ч до) вплоть до 0 ч) и после лечения (вплоть до 25 ч после лечения) 100 мкл, 0,3 мг/мл соединения 1'-1;

на фиг. 2 представлено измеренное внутриглазное давление у взрослых новозеландских белых кроликов перед (от -25 ч (за 25 ч до) вплоть до 0 ч) и после лечения (вплоть до 25 ч после лечения) 100 мкл, 1,0 мг/мл соединения 1'-1;

на фиг. 3 представлено измеренное внутриглазное давление у взрослых новозеландских белых кроликов перед (от -25 ч (за 25 ч до) вплоть до 0 ч) и после лечения (вплоть до 25 ч после лечения) 100 мкл, 3,0 мг/мл, соединения 1'-1;

на фиг. 4 представлено измеренное внутриглазное давление у взрослых новозеландских белых кроликов перед (от -25 ч (за 25 ч до) вплоть до 0 ч) и после лечения (вплоть до 25 ч после лечения) 100 мкл, 10 мг/мл соединения 1'-1 и на фиг. 5 представлено измеренное внутриглазное давление у взрослых новозеландских белых кроликов перед (от -25 ч (за 25 ч до) вплоть до 0 ч) и после лечения (вплоть до 25 ч после лечения) 100 мкл, 30 мг/мл соединения 1'-1.

Подробное описание изобретения

Определения

Применяемый здесь термин С₁-С₁₀ алкил относится к насыщенному углеводороду с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющему от 1 до 10 атомов углерода. Репрезентативные С₁-С₁₀ алкильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, метил, этил, пропил, изопро

- 2 015683 пил, бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, гексил, изогексил, неогексил, гептил, изогептил, неогептил, октил, изооктил, неооктил, нонил, изононил, неононил, децил, изодецил и неодецил. В одном варианте осуществления Ц-С₁₀ алкильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: галоген, -О-(С₁-С₆ алкил), -ОН, -СЫ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группы, где каждый К.' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С₁ -С₆ алкил. В отсутствие указаний С₁-С₁₀ алкил является незамещенным.

Применяемый здесь термин С₁-С₆ алкил относится к насыщенному углеводороду с неразветвленной или разветвленной цепью, имеющему от 1 до 6 углеродных атомов. Репрезентативные С₁-С₆ алкильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, гексил, изогексил и неогексил.

Применяемый здесь термин С₂-С₆ алкенил относится к углеводороду с неразветвлённой или разветвленной цепью, содержащему 2-6 атомов углерода и по меньшей мере одну двойную связь. Репрезентативные С₂-С₆ алкенильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, этилен, пропилен, 1-бутилен, 2-бутилен, изобутилен, втор-бутилен, 1-пентен, 2-пентен, изопентен, 1-гексен, 2-гексен, 3-гексен и изогексен. В одном варианте осуществления С₂-С₆ алкенильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С₁-С₆ алкильной), -ОН, -ΟΝ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С₁-С₆ алкил. В отсутствие указаний С₂-С₆ алкенильная группа является незамещенной.

Термин С₂-С₆ алкинил относится к углеводороду с разветвленной или неразветвленной цепью, содержащему 2-6 атомов углерода и по меньшей мере одну тройную связь. Репрезентативные С2-С6 алкинильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, ацетилен, пропин, 1-бутин, 2-бутин, изобутин, втор-бутин, 1-пентин, 2-пентин, изопентин, 1-гексин, 2-гексин, 3-гексин и изогексин. В одном варианте осуществления С₂-С₆ алкинильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С₁-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С₁-С₆ алкил. В отсутствие указаний С₂-С₆ алкинильная группа является незамещенной.

Применяемый здесь термин арил относится к фенильной группе или нафтильной группе. В одном варианте осуществления арильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С₁-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С1-С6 алкил. В отсутствие указаний арил является незамещенным.

Применяемый здесь термин С₃-С₈ моноциклический циклоалкил означает 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-членное насыщенное неароматическое моноциклическое циклоалкильное кольцо. Репрезентативные С₃-С₈ моноциклические циклоалкильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил. В одном варианте осуществления С₃-С₈ моноциклическая циклоалкильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С₁-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С₁-С₆алкил. В отсутствие указаний С3-С8 моноциклический циклоалкил является незамещенным.

Применяемый здесь термин С3-С8 моноциклический циклоалкенил означает 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-членное неароматическое моноциклическое карбоциклическое кольцо, имеющее по меньшей мере одну эндоциклическую двойную связь, но не являющееся ароматическим. Понятно, что когда любые две группы вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют С₃-С₈ моноциклическую циклоалкенильную группу, атом углерода, к которому присоединены две группы, остается четырехвалентным. Репрезентативные С3-С8 моноциклические циклоалкенильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, циклопропенил, циклобутенил, 1,3-циклобутадиенил, циклопентенил,

1.3- циклопентадиенил, циклогексенил, 1,3-циклогексадиенил, циклогептенил, 1,3-циклогептадиенил,

1.4- циклогептадиенил, -1,3,5-циклогептатриенил, циклооктенил, 1,3-циклооктадиенил, 1,4-циклооктадиенил, -1,3,5-циклооктатриенил. В одном варианте осуществления С₃-С₈ моноциклическая циклоалкенильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: галогеновой, -О-(С1-С6 алкильной), -ОН, -СЫ, -СООК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С1-С6 алкил. В отсутствие указаний С3-С8 моноциклический циклоалкенил является незамещенным.

Применяемый здесь термин С₈-С₁₂ бициклический циклоалкил означает 8-, 9-, 10-, 11- или 12-членную насыщенную неароматическую бициклическую циклоалкильную кольцевую систему. Репрезентативные С8-С12 бициклические циклоалкильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, декагидронафталин, октагидроинден, декагидробензоциклогептен и додекагидрогептален. В одном варианте осуществления С₈-С₁₂ бициклическая циклоалькильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С₁-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -ССОК', -ОС(О)К', -Ы(К')₂, -ЫНС(О)К' или -С(О)ЫНК' группами, где каждый К' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С1-С6 алкил. В отсутствие указаний С8-С12 бициклический циклоалкил является незамещен

- 3 015683 ным.

Применяемый здесь термин С₈-С1₂ бициклический циклоалкенил означает 8-, 9-, 10-, 11- или 12-членную неароматическую бициклическую циклоалкильную кольцевую систему, имеющую по меньшей мере одну эндоциклическую двойную связь. Понятно, что когда любые две группы вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют С₈-С₁₂ бициклическую циклоалкенильную группу, атом углерода, к которому присоединены две группы, остается четырехвалентным. Репрезентативные С8-С12 бициклические циклоалкенильные группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, октагидронафталин, гексагидронафталин, гексагидроинден, тетрагидроинден, октагидробензоциклогептен, гексагидробензоциклогептен, тетрагидробензоциклогептен, декагидрогептален, октагидрогептален, гексагидрогептален и тетрагидрогептален. В одном варианте осуществления С₈-С₁₂ бициклическая циклоалкильная группа замещена одной или несколькими из следующих групп: галогеновой, -О-(С₁-С₆алкильной), -ОН, -СЫ, -СООР.', -ОС(О)В', -Ы(В')₂, -ЫНС(О)В' или -С(О)ЫНВ' группами, где каждый В' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С₁-С₆ алкил. В отсутствие указаний С₈-С₁₂ бициклический циклоалкенил является незамещенным.

Применяемый здесь термин эффективное количество относится к количеству производного пурина, которое эффективно для: (1) лечения или предупреждения патологического состояния; (и) снижения температуры внутри тела животного или (ш) защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Применяемый здесь термин галоген относится к -Р, -С1, -Вг или -I.

Термин 3-7-членный моноциклический гетероцикл относится к: (1) 3- или 4-членному неароматическому моноциклическому циклоалкилу, в котором 1 из атомов углерода кольца заменен атомом Ν, О или 8; или (й) 5-, 6- или 7-членный ароматический или неароматический моноциклический циклоалкил, в котором 1-4 атома углерода кольца независимо заменены атомом Ν, О или 8. Неароматические 3-7-членные моноциклические гетероциклы могут быть присоединены через атом азота, серы или углерода кольца. Ароматические 3-7-членные моноциклические гетероциклы присоединены через атом углерода кольца. Репрезентативные примеры 3-7-членной моноциклической гетероциклической группы включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, фуранил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, изотиазолил, изоксазолил, морфолинил, оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, оксазолидинил, пиримидинил, фенантридинил, фенантролинил, пиперазинил, пиперидинил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, пиридооксазол, пиридоимидазол, пиридотиазол, пиридинил, пиримидинил, пирролидинил, пирролинил, хинуклидинил, тетрагидрофуранил, тиадиазинил, тиадиазолил, тиенил, тиенотиазолил, тиенооксазолил, тиеноимидазолил, тиоморфолинил, тиофенил, триазинил, триазолил. В одном варианте осуществления 3-7-членная моноциклическая гетероциклическая группа замещена одной или несколькими из следующих групп: -галогеновой, -О-(С1-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -СООР', -ОС(О)В', -Ы(В')₂, -ЫНС(О)В' или -С(О)ЫНВ' группами, где каждый В' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С1-С₆ алкил. В отсутствие указаний 3-7-членный моноциклический гетероцикл является незамещенным.

Термин 8-12-членный бициклический гетероцикл относится к бициклическому 8-12-членному ароматическому или неароматическому бициклическому циклоалкилу, в котором одно или оба кольца бициклической кольцевой системы имеют 1-4 атома углерода кольца, независимо замененных атомом Ν, О или 8. В этот класс включаются 3-7-членные моноциклические гетероциклы, которые конденсированы с бензольным кольцом. Неароматическое кольцо 8-12-членного моноциклического гетероцикла присоединено через атом азота, серы или углерода. Ароматический 8-12-членный моноциклический гетероцикл присоединен через атом углерода кольца. Примеры 8-12-членных бициклических гетероциклов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, бензимидазолил, бензофуранил, бензотиофуранил, бензотиофенил, бензоксазолил, бензтиазолил, бензтриазолил, бензтетразолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолинил, циннолинил, декагидрохинолинил, 1Н-индазолил, индоленил, индолинил, индолизинил, индолил, изобензофуранил, изоиндазолил, изоиндолил, изоиндолинил, изохинолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, хиноксалинил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил и ксантенил. В одном варианте осуществления каждое кольцо из 8-12членной бициклической гетероциклической группы может быть замещено одной или несколькими из следующих групп: галогеновой, -О-(С1-С₆ алкильной), -ОН, -СЫ, -СООВ', -ОС(О)В', -Ν(Β')₂, -ЫНС(О)В' или -С(О)ЫНВ' группами, где каждый В' независимо представляет собой -Н или незамещенный -С1-С₆алкил. В отсутствие указаний 8-12-членный бициклический гетероцикл является незамещенным.

Применяемая здесь фраза фармацевтически приемлемая соль означает соль кислоты и атома азотистого основания производного пурина. Иллюстративные соли включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, соли: сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкаронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)). Фармацевтически приемлемой солью также может быть камфорсульфонатная соль. Термин фармацевтически приемлемая соль также относится к соли произ

- 4 015683 водного пурина, имеющей кислотную функциональную группу, такую как функциональная группа карбоновой кислоты, и основания. Подходящие основания включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, гидроксиды щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий; гидроксиды щелочноземельного металла, такого как кальций и магний; гидроксиды других металлов, таких как алюминий и цинк; аммиак и органические амины, такие как незамещенные или гидроксизамещенные моно-, ди- или триалкиламины, дициклогексиламин; трибутиламин, пиридин, Ν-метил, Ν-этиламин, диэтиламин; триэтиламин; моно-, бис- или трис-(2-ОН-низшие алкиламины), такие как моно-, бис- или трис-(2гидроксиэтил)амин, 2-гидрокси-трет-бутиламин или трис-(гидроксиметил)метиламин, Ν,Ν-динизший алкил-Ы-(гидроксинизший алкил)амины, такие как ^№диметил-Ы-(2-гидроксиэтил)амин или три-(2гидроксиэтил)амин; Ν-метил-Э-глюкамин; и аминокислоты, такие как аргинин, лизин и тому подобное. Термин фармацевтически приемлемая соль также включает в себя гидрат производного пурина.

Животное означает млекопитающее животное, например человек, мышь, крыса, морская свинка, собака, кошка, лошадь, корова, свинья или не относящийся к человеку примат, такой как обезьяна, шимпанзе или бабуин. В одном варианте осуществления обезьяна означает макака резус. В другом варианте осуществления животное означает человека.

Применяемый здесь термин выделенный и очищенный означает отделенный от других компонентов реакционной смеси или природного источника. В некоторых вариантах осуществления изолят содержит по меньшей мере 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 98% производного пурина от массы изолята. В одном варианте осуществления изолят содержит по меньшей мере 95% производного пурина от массы изолята.

Применяемый здесь термин по существу, не содержащий соответствующего противоположного энантиомера означает, что производное пурина содержит не более чем приблизительно 10% от массы его соответствующего противоположного энантиомера. В одном варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего противоположного энантиомера, содержит не более чем приблизительно 5% от массы соответствующего противоположного энантиомера. В следующем варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего противоположного энантиомера, содержит не более чем приблизительно 1% от массы соответствующего противоположного энантиомера. В другом варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего противоположного энантиомера, содержит не более чем приблизительно 0,5% от массы соответствующего противоположного энантиомера. Еще в одном варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего противоположного энантиомера, содержит не более чем 0,1% от массы соответствующего противоположного энантиомера.

Применяемый здесь термин по существу, не содержащий соответствующего другого аномера означает, что производное пурина содержит не более чем приблизительно 10 мас.% соответствующего другого аномера. В другом варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего другого аномера, содержит не более чем приблизительно 5 мас.% соответствующего другого аномера. В следующем варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего другого аномера, содержит не более чем приблизительно 1% от массы соответствующего другого аномера. В другом варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего другого аномера, содержит не более чем приблизительно 0,5% от массы соответствующего другого аномера. Еще в одном варианте осуществления производное пурина, которое, по существу, не содержит соответствующего другого аномера, содержит не более чем приблизительно 0,1% от массы соответствующего другого аномера.

Некоторые химические структуры здесь изображены с применением сплошных и пунктирных линий, чтобы представить химические связи. Эти сплошные и пунктирные линии изображают абсолютную стереохимию. Сплошная линия указывает, что заместитель находится над плоскостью атома углерода, к которому он присоединен, и пунктирная линия указывает, что заместитель находится ниже плоскости атома углерода, к которому он присоединен. Например, на нижеприведенной иллюстрации группа А находится выше плоскости атома углерода, к которому она присоединена, а группа В находится ниже плоскости атома углерода, к которой она присоединена.

- 5 015683

Понятно, что в группе Ό производных пурина формулы (I), изображенной ниже,

группа -(СН₂)рОН может быть соединена с любым атомом углерода группы

к которой она присоединена.

Здесь применяют следующие аббревиатуры и указанные обозначения: АТФ означает аденозинтрифосфат; ССРА означает 2-хлор-К⁶-циклопентиладенозин; СРА означает К⁶-циклопентиладенозин; СНО означает яичник китайского хомячка; Е1 означает этил; Е1ОН означает этанол; НЕК означает эмбриональную почку человека; ЫНМБЗ означает гексаметилдисилазид лития; МеОН означает метанол; М8 означает масс-спектрометрию; ΝΕί’Λ означает аденозин-5'-(К-этил)карбоксамидо; ЯМР означает ядерный магнитный резонанс; Р11 означает фенил; К-Р1А означает К⁶-(2-фенилизопропил)аденозин, К-изомер; ТЕА означает трифторуксусную кислоту; ТГФ означает тетрагидрофуран; ТМ8ОТГ означает триметилсилилтрифторметансульфонат.

Производные пурина Производные пурина формулы (I)

Как указано выше по тексту, настоящее изобретение включает в себе производные пурина, имеющие формулу (I)

В С

0) где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и А и В находятся в трансположении относительно друг друга;

В и С находятся в цис-положении относительно друг друга и

С и Ό находятся в цис- или трансположении относительно друг друга.

В одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Н.

В другом варианте осуществления К¹ представляет собой -галоген.

В конкретном варианте осуществления К¹ представляет собой -С1.

В другом варианте осуществления К¹ представляет собой -СК

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Ν(Ρ²)₂.

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -ОК².

В следующем варианте осуществления К¹ представляет собой -8К².

В другом варианте осуществления К¹ представляет собой -КНС(О)ОК², -КНС(О)К² или -КНС(О)МК);.

В другом варианте осуществления К¹ означает -С(О)ОК², С(О)К², -С(О)К(К²)2 или ОС(О)К(К²)2.

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой СЕ₃.

Еще в одном варианте осуществление К¹ представляет собой -КО₂.

В одном варианте осуществления р равно 1.

В другом варианте осуществления р отличается от 1.

В одном варианте осуществления с.| равно 1.

В другом варианте осуществления с.| равно 2.

Еще в одном варианте осуществления с.| равно 3.

Еще в одном варианте осуществления с.| равно 4.

Еще в одном варианте осуществления с.| равно 3 или 4.

В следующем варианте осуществления с.| равно 5.

В другом варианте осуществления с.| равно 6.

В одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Н, р равно 1 и с.| равно 1.

В другом варианте осуществления К¹ представляет собой -галоген, р равно 1 и с.| равно 1.

- 6 015683

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -С1, р равно 1 и с.| означает 1.

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Н или -галоген и с.| равно 3 или 4,

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Н или -галоген, с.| равно 3 или 4 и р равно 1.

Еще в одном варианте осуществления К¹ представляет собой -Н или -С1, с.| равно 3 или 4 и р равно 1. В одном варианте осуществления С и Ό находятся в цис-положении относительно друг друга. В другом варианте осуществления С и Ό находятся в трансположении относительно друг друга. Настоящее изобретение также предлагает композиции, включающие в себя эффективное количество производного пурина формулы (I) и физиологически приемлемый носитель или среду.

Изобретение далее предлагает производные пурина формулы (I), которые находятся в выделенной и очищенной форме.

Изобретение еще затем предлагает способы лечения или предупреждения патологического состояния, включающие в себя введение эффективного количества производного пурина формулы (I) нуждающемуся в этом животному.

Изобретение далее предлагает способы снижения температуры внутри тела животного, включающие в себя введение эффективного количества производного пурина формулы (I) нуждающемуся в этом животному.

Изобретение далее предлагает способы защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии, включающие в себя введение эффективного количества производного пурина формулы (I) нуждающемуся в этом животному.

Производные пурина формулы (I) могут существовать в форме одного энантиомера, например, такого, который изображается либо формулой (Ш'), либо формулой Да)

(1а’)

Да) где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Производное пурина формулы Да') представляет собой соответствующий противоположный энантиомер производного пурина формулы Да), где группа А производного пурина формулы Да') такая же, как группа А производного пурина формулы (I), и где группа Ό производного пурина формулы Да') такая же, как группа Ό производного пурина формулы Да).

Производное пурина формулы Да) представляет собой соответствующий противоположный энантиомер производного пурина формулы Да'), где группа А производного пурина формулы Да) такая же, как группа А производного пурина формулы Да'), и где группа Ό производного пурина формулы Да) такая же, как группа Ό производного пурина формулы Да').

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу Да'), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό обозначены выше по тексту для производных пурина формулы (I) и где производные пурина формулы Да'), по существу, не содержат соответствующего противоположного энантиомера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу Да), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы Да), по существу, не содержат соответствующего противоположного энантиомера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Да') и производного пурина формулы Да), где количество производного пурина формулы Да') превышает количество производного пурина формулы Да).

В следующем варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Да') и производного пурина формулы Да), где количество производного пурина формулы Да) превышает количество производного пурина формулы Да').

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как рацемическая смесь производного пурина формулы Да') и производного пурина формулы Да).

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) могут существовать в форме

- 7 015683 одного энантиомера, например, такого, который изображается либо формулой (1аа'), либо (1аа)

Даа’)

где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Производное пурина формулы (1аа') представляет собой соответствующий противоположный энантиомер производного пурина формулы (1аа), где группа А производного пурина формулы (1аа') такая же, как группа А производного пурина формулы (1аа), и где группа Ό производного пурина формулы (1аа') такая же, как группа Ό производного пурина формулы (1аа).

Производное пурина формулы (1аа) представляет собой соответствующий противоположный энантиомер производного пурина формулы (1аа'), где группа А производного пурина формулы (1аа) такая же, как группа А производного пурина формулы (1аа'), и где группа Ό производного пурина формулы (1аа) такая же, как группа Ό производного пурина формулы (1аа').

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу (1аа'), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы (1аа'), по существу, не содержат их соответст вующего противоположного энантиомера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу (1аа), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы (!аа). по существу, не содержат их соответст вующего противоположного энантиомера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Даа') и производного пурина формулы Даа), где количество производного пурина формулы Даа') превышает количество производного пурина формулы Даа).

В следующем варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Даа') и производного пурина формулы Даа), где количество производного пурина формулы Даа) превышает количество производного пурина формулы Даа').

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как рацемическая смесь производного пурина формулы Даа') и производного пурина формулы Даа).

Производное пурина формулы Даа') представляет собой соответствующий другой аномер производного пурина формулы Да'), где группа А производного пурина формулы Даа') такая же, как группа А производного пурина формулы Да'), и где группа Ό производного пурина формулы Даа') такая же, как группа Ό производного пурина формулы Да').

Производное пурина формулы Да') представляет собой соответствующий другой аномер производного пурина формулы Даа'), где группа А производного пурина формулы Да') такая же, как группа А производного пурина формулы Даа'), и где группа Ό производного пурина формулы Да') такая же, как группа Ό производного пурина формулы Даа').

Производное пурина формулы Даа) представляет собой соответствующий другой аномер производного пурина формулы Да), где группа А производного пурина формулы Даа) такая же, как группа А производного пурина формулы Да), и где группа Ό производного пурина формулы Даа) такая же, как группа Ό производного пурина формулы Да).

Производное пурина формулы Да) представляет собой соответствующий другой аномер производного пурина формулы Даа), где группа А производного пурина формулы Да) такая же, как группа А производного пурина формулы Даа), и где группа Ό производного пурина формулы Да) такая же, как группа Ό производного пурина формулы Даа).

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу Даа'), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы Даа'), по существу, не содержат их соответст вующего другого аномера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу Даа), изобра

- 8 015683 женную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы (1аа), по существу, не содержат их соответствующего другого аномера.

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу (1а'), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы (1а'), по существу, не содержат их соответствующего другого аномера.

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) имеют формулу (1а), изображенную выше по тексту, где А, В, С и Ό имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I), и где производные пурина формулы Ца), по существу, не содержат их соответствующего другого аномера.

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Ца') и производного пурина формулы Цаа'), где количество производного пурина формулы Ца') превышает количество производного пурина формулы Цаа').

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Ва') и производного пурина формулы Цаа'), где количество производного пурина формулы Цаа') превышает количество производного пурина формулы Ца').

В следующем варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь равных количеств производного пурина формулы Ца') и производного пурина формулы Цаа').

В одном варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Ца) и производного пурина формулы Цаа), где количество производного пурина формулы Ца) превышает количество производного пурина формулы Цаа).

В другом варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь производного пурина формулы Ца) и производного пурина формулы Цаа), где количество производного пурина формулы Цаа) превышает количество производного пурина формулы Ца).

В следующем варианте осуществления производные пурина формулы (I) существуют как смесь равных количеств производного пурина формулы Ца) и производного пурина формулы Цаа).

Иллюстративные производные пурина формулы (I) включают в себя соединения формулы (I'), как представлено ниже по тексту

но он (Г)

- 9 015683

Соединение	К¹	Υ
Г-1	-И	оН
Г-2	-И
Г-3	-н	он. ’:о X
Г-4	-н	он ':р Ί.
Г-5	-н

- 10 015683

Г-6	-н	----
Г-7	-и	А
Г-8	-н
Г-9	-н	^-он Р
Г40	-н
Г-11	-и
Г-12	-н	\э
Г-13	-н	«т со ч

- 11 015683

Г-14	-Н	>он X
Г-15	-н	^.он ~г.
Г-16	-н	г^он X Ί.
Р-17	-н	А г
Г-18	-н	γίΤ
Г-19	-С1	он
Г-20	-С1
Г-21	-С1	он г> ч^' ч

- 12 015683

Г-22	-С1	-------ПП------- ___

Г-23	-С1
		I
Р-24	-С1		5
Г-25	-С1	I ч/ ч	5
Г-26	-С1	С''	-ОН 5
. Г-27	-СИ		^-он >
Г-28	-С1
			э
Г-29	-С1	но 'Пипу
		Ч	ж

- 13 015683

Г-30	-С1	'*Р(5— ··-- - — - V Ύ ΐ 7.
Г-31	-С!	РЮ ...... ‘ Ьо 7,
Г-32	-С1	,ОРГ~ г
Г-33	-С1	г
Г-34	-а	. —эд г
Г-35	-а	г.
Г-Зб	-а	ДТ
Г-37	-си	~ ¹ он У>

- 14 015683

Г-38	-СМ	с -л>
Г-39	-СМ	др----- 'Ό ч
Г-40	-0Ν	он :р
Г-41	-СМ
Г-42	-см	-__др Л
Г-43	-см	------------—др---- р
Г-44	-см	——— тщц
Г-45	-см	Р

- 15 015683

Г-46	-СМ	ν'Ζ

Г-47	-СМ	~яй·· - - \ -
Г-48	-СМ	г.
Г-49	-СМ	НО Ьэ ‘г.
Г-50	-СИ	' ~лЗА Ί.
Г-51	-см	^νΟ
Г-52	-см	-/Ь г
Г-53	-0Ν	г

- 16 015683

Г-54	-СП	_νΟ
Г-55	-мн₂
Г-56	-νη₂	он
Г-57	-ΝΗί	δΗ 'Ό
Г-58	-ΝΗα	ϋΗ
Г-59	-νη₂	от
Г-60	-νη₂	___
Г-61	-νη₂	,ή 4

- 17 015683

Г-62	N[<2	ТТТЯ---- X ...о
Г-63	-ПНг	. ----- ------------------ Л
Г-64	-МЙ2
Г-65	-ш₂	*г^‘\л ‘г.
Г-бб	-Ж₂	X ν\/ г
Г-67	-ΝΗι	яг со
Г-68	-КНэ	>0Н -Л Б
Г-69	од	^: ^ззн ~г.

- 18 015683

Г-70	-МНг	*г.
Г-71	-ин₂	-ОН т.
Г-72	-νη₂	./Г
Г-73	-ОСНз	ϋΗ
Г-74	-ОСНз
Г-75	-ОСНз	эд 'Ό ч
Г-76	-ОСНз	он -Х>
Г-77	-ОСНз	,к>

- 19 015683

Г-78	•ОСНз	А	-


Г-79	-ОСНз	X/ ч/ ч	>
Г-80	-ОСНз	А
Г-81	-ОСНз	А	6ΏΗ
Г-82	-ОСНз	‘г
Г-83	-ОСНз	“Л
Г-84	-ОСНз	М* \-ч
Г-85	-ОСНз	«г

- 20 015683

Г-86	-ОСН₃	“~СН---- ( X) г.
Г-87	-ОСНз	- г
Г-88	-ОСНз	аЬ г
Г-89	-ОСНз	6 г
Г-90	-ОСНз
Г-91 а	-Н	,О^‘
Г-91Ъ	-Н	гл /°^н 1 >ί»ιιηηκ Ч*'·

- 21 015683

Г-91 с	•Н	Ί.
Г-918	И	Ί
Р-92а	-н	4/¼ ^-он т •ЛАЛЛ
Г-92Ъ	-н	ςν «ЛАЛА
Г-92с	-н	Оч/⁰”
Г-928	-н	•лллл
Г-93а	-н	о' (транс) \Л/*ЛЛ

- 22 015683

Г-93Ь	-Н		£
			(Цис) ги’лп
Г-94а	-С1	.[ ·<
Г-94Ъ	-С1	[ X*	-X _гу ΙΙΙΓΗΙΙΙ '
Г’-94с	-С1
Г-946	-С1	*г	/°^н 2 шиши
Г-95а	-С1
Г-95Ъ	-С1
			1 άλλλ

- 23 015683

Г-95с	-а	^Л. ⁼ ХЛ
Г-956	-С1	чЛЛд/ί
Г-96а	-С1	X
		0 (транс) νλ/ΛΤ
Г-96Ь	-С1	X
		ό (Цис) Л’ЛА
Г-97а	-СИ	.О~^°^н
Г-97Ь	-СИ	0..,.ζ^Η Ч''

- 24 015683

Г-97с	! -см	π
Г-970	-сы	X.....^ζ η
Г-98а	-СМ	чЛАЛЛ
Г-98Ь	-СМ	\ЛАА/*
Г-98с	-СМ	чЛ.- V
Р-984	-СМ	мААЛЛ
Г-99а	-СМ	ί (транс) ννΙ·υ>

- 25 015683

Г-99Ъ	-см	г
			1 (цис) ίΛ> νν>
Г-100а	-νη₂		Ο-^“
1’-100Ъ	-КЙ2	ч	ГХ Ζ^Η
Г-100с	-мн₂	Т	0—
г-юоа	-ΝΗϊ	/ π	Γλ Ζ^Η >И1НШК
Г-101а	-νη₂		γν* чЛАЛЛ
1’-101Ь	-νη₂		-4\ЛЛГ»

- 26 015683

ГЛ01С	-νη₂	>а“чл
Г-1016	-ΝΗζ	1	X-
			лЛлл
Г-102а	-νη₂		С
		С \Л/	р (транс) АЛ
Г-102Ъ	-νη₂		юн
		и (Цис) чЛ>'лп
Г-103 а	-ОСН₃	,с	ΛΖ
Г-103Ъ	-ОСНз	£ 4'	Λ Ζ^Η

- 27 015683

Г-ЮЗс	-ОСНз
я	Э-+
г-юза	-ОСНз	г	Ζ^Η
Г-104а	-ОСНз	чЛАЛЛ
' Г-104Б	-ОСНз	[
			1
Г-104с	-ОСНз
Г-104Й	-ОСНз	(

Г-1О5а	-ОСНз		,он
			(транс) ΛΑ

или их фармацевтически приемлемые соли.

Способы получения производных пурина

Производные пурина можно получать с применением синтетических способов, представленных ниже по тексту на схемах 1-5.

На схеме 1 представлены способы получения конкретных стереоизомерных промежуточных про- 28 015683 дуктов синтеза 6-хлораденозина, которые применяют для получения производных пурина формулы (I). Схема 1

Ϊ 3 4

3 6 7, где Я¹ имеет значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Соединение формулы 1 можно сочетать с соединением формулы 2 с применением гексаметилдисилазида лития и триметилсилилтрифлата, с последующим удалением ацетонида с применением трифторуксусной кислоты с получением 6-хлораденозиновых промежуточных продуктов формулы 3 и соответствующих других их аномеров формулы 4. Аналогично, соединение формулы 5 можно сочетать с соединением формулы 2 с применением гексаметилдисилазида лития и триметилсилилтрифлата, с последующим удалением ацетонида с применением трифторуксусной кислоты, с получением соединений формулы 6 и соответствующих других их аномеров формулы 7.

Методология, применяемая для получения производных пурина формулы (I), изображена на схеме 2а.

Схема 2а

Производные пурина формулы (I) , где Я¹, р и с.| имеют значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Соединение формулы 8а взаимодействует с соединением формулы 9а при кипячении с обратным холодильником в этаноле, с получением производных пурина формулы (I).

Методология, применяемая для получения производных пурина формулы (I'), изображена на схеме 2Ь.

Схема 2Ь

где Я¹, р и с.| имеют значения, указанные выше для производных пурина формулы (I').

Соединение формулы 8Ь взаимодействует с соединением формулы 9а при кипячении с обратным холодильником в этаноле, с получением производных пурина формулы (I'). Ряд соединений 9а, включающих в себя конкретные стереоизомеры, являются коммерчески доступными от Асгоз Отдашсз (Сее1, Ве1дшт), ΑΡ.ΤΏ Тйетареийсз Шс. (Ьаизшд, МЦ и 81дта-А1бт1сй (§1.Ьош8, МО). В некоторых вариантах осуществления Я¹ представляет собой -Н или -С1.

На схеме 3 представлена методология, применяемая для получения соединений формулы 9, где р равно 1 и с.| имеет значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

- 29 015683

Схема 3

Аминные промежуточные продукты формулы 9, где р равно 1 где К' представляет собой -Н или метил, р равно 1 и с.| имеет значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Соединение формулы 10 подвергают взаимодействию с гидроксиламином в растворителе, таком как этанол, и полученный оксим восстанавливают с применением, например, литийалюминийгидрида, с получением соединений формулы 9, где р равно 1 и с.| равно 1, 2, 3, 4, 5 или 6.

Соединения формулы 10 являются коммерчески доступными или, в альтернативном случае, их можно получать из коммерчески доступных веществ с применением методов, известных специалисту в данной области органического синтеза. Например, 1,2-замещенные сложные кетоэфиры формулы 10 можно синтезировать взаимодействием циклоалканоненолята, полученного из коммерчески доступного циклоалканона; с алкилхлорформиатом; 1,3-замещенные сложные кетоэфиры формулы 10 можно синтезировать посредством 1,4-присоединения к коммерчески доступному конъюгированному циклоалкенону и 1,4-замещенные сложные кетоэфиры формулы 10 можно синтезировать посредством окисления коммерчески доступных циклоалканолов, замещенных в положении 4 карбоксилатом.

На схеме 4 предложена методология, применяемая для получения соединений формулы 9, где р равно целому числу в интервале от 3 до 6 и с.| имеет значения, указанные выше по тексту для производных пурина формулы (I).

Схема 4

1. да₃он

2. Восстановление /У^¹⁰

3.Окисление —/А _Ϊ1 ч свьоссона^ся^), η

,у,сн<;жсн_г)(С(О)ОСНз Ζ Хг 1$ ⁴

Гидрирование д 01)20112-(0(^0(0)00¾ ------ /Л;

Восстановление

Аминные промежуточные продукты формулы 9, где р равно 3-6 где К' представляет собой -Н или метил, р равно целому числу в интервале от 3 до 6, с.| имеет значения, указанные выше для производных пурина формулы (I), и г равно целому числу в интервале от 0 до 3.

Соединение формулы 10 подвергают взаимодействие с гидроксиламином и полученный оксим восстанавливают с применением, например, диизобутилалюминийгидрида (ИГВАЬ) с получением соединения формулы 11. Соединение формулы 11 может взаимодействовать с соединением формулы 12 по реакции Виттига с получением соединения формулы 13 (см. МагсН. Абуапсеб Огдатс СйетЦру: Кеасбопк, Месйатктк, апб 8!гис!иге, 956-963 (4'¹' еб. 1992)). Гидрированием соединения формулы 13 с применением, например, Н2 и Рб/С получают соединение формулы 14, которое затем можно восстановить с применением, например, литийалюминийгидрида, с получением соединений формулы 9, где р равно целому числу в интервале от 3 до 6 и с.| имеет значения, указанные выше для производных пурина формулы (I).

На схеме 5 представлена методология, применяемая для получения аминных промежуточных продуктов формулы 9, где р равно 2 и с.| имеет значения, указанные выше для производных пурина формулы (I).

Схема 5

Лсооа ],_ΜΕίαΗ \ ’ * 15

2. Восстановление

3. Гомологизация и сложного эфира

Н₂Н

Аминные промежуточные продукты формулы 9, где р равно 2 где р равно целому числу в интервале от 3 до 6 и с.| имеет значения, указанные выше для производ- 30 015683 ных пурина формулы (I).

Соединение формулы 15 можно превратить в соответствующий амин взаимодействием 15 с гидроксиламином с последующим селективным восстановлением полученного оксима с применением, например, магния в присутствии формиата аммония (См. АЫга) с1 а1., 8уп1й. Соттип., 34:599-605 (2004)). Затем вставляют метиленовую группу между этильной сложноэфирной группой и карбоциклическим кольцом 15 с применением, например, гомологизации сложного эфира по реакции Ковальски (Κο\ν;·ι151<ί с1 а1., I. Ат. Сйст. 8ое., 57:1194 (1992)) с получением соединения формулы 16. Затем соединение формулы 16 можно восстановить в соответствующий спирт с применением, например, литийалюминийгидрида, с получением соединений формулы 9, где р равно 2 и с.| имеет значения, указанные выше для производных пурина формулы (I).

Соединения формулы 15 являются коммерчески доступными или, в альтернативном случае, их можно получать из коммерчески доступных исходных веществ с применением способов, известных специалисту в данной области органического синтеза.

Терапевтическое/профилактическое введение и композиции изобретения

Вследствие своей активности производные пурина преимущественно применяют в ветеринарии и для лечения человека.

Как указано выше, производные пурина применяют для (1) лечения или предупреждения патологического состояния нуждающегося в этом животного; (й) снижения температуры внутри тела животного или (ш) защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

При применении для животных производные пурина можно вводить как компонент композиции, которая включает в себя физиологически приемлемый носитель или среду. Настоящие композиции, которые включают в себя производное пурина, можно вводить перорально. Производные пурина также можно вводить любым другим общепринятым путем, например инфузией или инъекцией болюса, абсорбцией через эпителиальные или слизисто-кожные лининги (например, ротовую, ректальную или кишечную слизистую оболочку) и можно вводить вместе с другим биологически активным агентом. Введение может быть системным или локальным. Можно применять различные известные системы доставки, включающие в себя инкапсулирование в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы и капсулы.

Способы введения включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, внутрикожный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, внутриносовой, внутриглазной, эпидуральный, пероральный, подъязычный, интрацеребральный, интравагинальный, чрескожный, ректальный, ингаляционный или локальный пути, в особенности в ухо, нос, глаза или кожу. В некоторых примерах введение будет приводить к высвобождению производных пурина в кровотоке. Способ введения может быть предоставлен на усмотрение практикующего врача.

В одном варианте осуществления производные пурина вводят перорально.

В другом варианте осуществления производные пурина вводят внутривенно.

В другом варианте осуществления, когда производные пурина применяют для снижения температуры внутри тела животного, производные пурина можно вводить путем продолжительной внутривенной инфузии.

В других вариантах осуществления может потребоваться локальное введение производных пурина. Этого можно достигать, например, не ограничиваясь перечисленным, локальной инфузией во время операции, местным нанесением, например, в сочетании с повязкой на рану после операции, инъекцией, катетером, посредством суппозитории или клизмы, посредством имплантата, причем имплантатом является пористое, непористое или гелеобразное вещество, включая мембраны, такие как сиаластиковые мембраны или волокна.

В других вариантах осуществления может потребоваться окулярное введение производных пурина. Окулярного введения можно достигать, применяя капли для глаз или контактные линзы, покрытые или пропитанные производным пурина.

В некоторых вариантах осуществления может потребоваться введение производных пурина в центральную нервную систему, систему кровообращения или желудочно-кишечный тракт любым подходящим путем, включающим в себя интравентрикулярную, внутриоболочечную, параспинальную, эпидуральную инъекцию, клизму и инъекцию в область, смежную с периферическим нервом. Интравентрикулярную инъекцию можно облегчать внутривентрикулярным катетером, например, присоединенным к резервуару, такому как резервуар Оттауа.

Можно также применять легочное введение, например, путем применения ингалятора или распылителя и препарата с распыляющим агентом или через перфузию во фторуглероде или синтетическом легочном поверхностно-активном веществе. В некоторых вариантах осуществления производные пурина можно изготавливать как суппозитории с традиционными связующими и носителями или средами, например триглицеридами.

В другом варианте осуществления производные пурина можно доставлять в везикулах, в особенности липосомах (см. Ьапдег, 8с1епсе, 249:1527-1533 (1990) и Йорсх-Всгсйсш с1 а1., Ырокотек ίη 1Нс Тйегару о£ 1п£ес£юп8 Э^сакс апй Сапссг, 317-327 и 353-365 (1989)).

В другом варианте осуществления производные пурина можно доставлять в системе с регулируе

- 31 015683 мым высвобождением или системе с длительным высвобождением (см., например, Оообзои, ίη Меб1са1 Аррйсабоиз о£ Сои1го11еб Ке1еазе, зирга, νοί. 2, р. 115-138 (1984)). Можно применять другие системы с регулируемым или длительным высвобождением, обсуждаемые в обзоре Ьапдег. 8с1еисе, 249:1527-1533 (1990). В одном варианте осуществления можно применять насос (Баидет 8с1еисе, 249: 1527-1533 (1990); 8ейои, СРС Сгб. Ке£. Вютеб. Еид., 14:201 (1987); Вис11\\а1б е1 а1., 8игдегу, 88:507 (1980) и 8аибек е1 а1., N. Еид1. ί. Меб., 321:574 (1989)). В других вариантах осуществления можно применять полимерные вещества (см. Меб1са1 АррНсабоиз о£ СогИгоПеб Ке1еазе (Ьаидег аиб ^1зе ебз., 1974); СогИгоПеб Эгид В1оата11аЬ1111у, Эгид Ргобис! Эе^ди аиб РегГогтаисе (8то1еи аиб Ва11 ебз., 1984); Каидег аиб Рерраз, I Масгото1. 8сг Рет. Масгото1. СПет., 2:61 (1983); Бету е1 а1., 8с1еисе, 228:190 (1935); Эиппд е1 а1., Аии. №ига1., 25:351 (1989) и Но\\агб е1 а1., I. №иго8игд., 71:105 (1989)).

Еще в одном варианте осуществления систему с регулируемым или длительным высвобождением можно помещать вблизи объекта воздействия для производных пурина, например позвоночного столба, головного мозга, прямой кишки, кожи, сердца, легких, глаза или желудочно-кишечного тракта, требующую поэтому только части системной дозы.

Настоящие композиции могут, необязательно, включать в себя подходящее количество физиологически приемлемого носителя или среды.

Такими физиологически приемлемыми носителями или средами могут быть жидкости, такие как вода, и масла, заключающие в себя масло нефтяного, животного, растительного происхождения или синтетическое, например арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и тому подобное. Физиологически приемлемыми носителями или средами могут быть физиологический раствор, аравийская камедь, желатин, крахмальная паста, тальк, кератин, коллоидный оксид кремния, карбамид и тому подобное. Помимо этого можно применять вспомогательные, стабилизирующие, загущающие, смазывающие и окрашивающие агенты. В одном варианте осуществления физиологически приемлемые носители или среды для введения в организм животного являются стерильными. Вода может быть в особенности полезной, тогда производное пурина вводят внутривенно. Физиологические растворы и водные растворы декстрозы и глицерина также можно применять как жидкие носители или среды, в особенности для инъецируемых растворов. Подходящие физиологически приемлемые носители или среды также включают в себя крахмал, глюкозу, лактозу, сахарозу, желатин, солод, рис, муку, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлористый натрий, сухие молочные сливки, глицерин, пропиленгликоль, воду, этанол и тому подобное. Настоящие композиции, если требуется, могут также содержать минимальные количества увлажняющих или эмульгурующих агентов, или рН-буферные агенты.

Настоящие композиции могут иметь форму растворов, суспензий, эмульсий, таблеток, пилюль, шариков, капсул, капсул, содержащих жидкости, порошков, препаратов с длительным высвобождением, суппозиториев, эмульсий, аэрозолей, спреев, суспензий или любую другую форму, подходящую для применения. В одном варианте осуществления композиция существует в форме капсулы. Другие примеры подходящего физиологически приемлемого носителя или среды описаны в Кетщд1ои'8 Рйагтасеийса1 Заеисез, 1447-1676 (А1£оизо Р. Сеииаго ебз., 19^4Ь еб. 1995), введенной здесь посредством ссылки.

В одном варианте осуществления производные пурина изготавливают в соответствии с рутинными способами как композицию, адаптированную для перорального введения в организм человека. Композиции для пероральной доставки могут быть, например, в форме таблеток, пастилок, водных или масляных суспензий, гранул, порошков, эмульсий, капсул, сиропов или эликсиров. Композиции для перорального введения могут содержать один или несколько агентов, например подслащивающих агентов, таких как фруктоза, аспартам или сахарин; корригенты, такие как перечная мята, винтергреневое масло или вишня; окрашивающие агенты и консервирующие агенты для получения приятного на вкус фармацевтического препарата. Кроме того, когда формой является таблетка или пилюля, композиции могут быть покрытыми для замедления разрушения и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, тем самым обеспечивающими длительное воздействие в течение продолжительного периода времени. Селективно проницаемые мембраны, окружающие осмотически активную платформу, стимулирующую производное пурина, также являются подходящими для перорально вводимых композиций. В этих последних платформах жидкость из окружающей среды капсулы может впитываться стимулирующим соединением, которое набухает, чтобы вытеснить агент или композицию агента через отверстие. Эти платформы для доставки могут обеспечивать, по существу, нулевой порядок профиля доставки в противоположность импульсным профилям препаратов с немедленным высвобождением. Можно также применять вещество, замедляющее время высвобождения, такое как моностеарат глицерина или стеарат глицерина. Пероральные композиции могут включать в себя стандартные носители или среды, такие как маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, сахариннатрий, целлюлоза и карбонат магния. В одном варианте осуществления носители или среды - фармацевтического качества.

В другом варианте осуществления производные пурина можно изготавливать как препарат для внутривенного введения. Обычно композиции для внутривенного введения включают в себя стерильный изотонический водный буфер. В тех случаях, когда необходимо, композиции могут также включать в себя солюбилизирующий агент. Композиции для внутривенного введения могут, необязательно, включать в себя местный анестезирующий агент, такой как лигнокаин, для уменьшения боли в месте инъек

- 32 015683 ции. Компонентами композиций могут быть подаваемые либо по отдельности, либо смешанными вместе в унифицированной лекарственной форме, например, как сухой лиофилизованный порошок или не содержащий воды концентрат в герметично запаянном контейнере, таком как ампула или саше, с указанием количества производного пурина. Когда производные пурина вводят путем инфузии, их можно дозировать, например, с помощью сосуда для инфузии, содержащего стерильную воду или физиологический раствор фармацевтического качества. В тех случаях, когда производные пурина вводят путем инъекции, ампулу стерильной воды для инъекции или физиологический раствор можно приготовить так, чтобы ингредиенты можно было смешивать перед введением.

Производные пурина можно вводить посредством регулируемого высвобождения или длительного высвобождения или устройств для доставки, которые хорошо известны специалистам в данной области. Такие лекарственные формы можно применять для обеспечения регулируемого или длительного высвобождения одного или нескольких активных ингредиентов с применением, например, гидроксипропилметилцеллюлозы, других полимерных матриц, гелей, проницаемых мембран, осмотических систем, многослойных покрытий, микрочастиц, липосом, микросфер или их комбинаций для обеспечения требуемого профиля высвобождения в различных пропорциях. Подходящие препараты с регулируемым или длительным высвобождением, известные специалистам в данной области, включая препараты, описанные здесь, можно легко выбрать для применения с активными ингредиентами изобретения. Таким образом, изобретение включает в себя единые унифицированные лекарственные формы, подходящие для перорального введения, такие как, но не ограничиваясь перечисленными, таблетки, капсулы, формы с гелеобразным покрытием и каплеты, которые адаптированы для регулируемого или длительного высвобождения.

В одном варианте осуществления композиция с регулируемым или длительным высвобождением включает в себя минимальное количество производного пурина для лечения или предупреждения патологического состояния, снижения температуры внутри тела животного или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии за минимальное количество времени. Преимущества композиций с регулируемым или длительным высвобождением включают в себя продолжительную активность лекарственного средства, сниженную частоту дозирования и повышенную комплаентность для пациента. Кроме того, композиции с регулируемым или длительным высвобождением могут благоприятно воздействовать на время начала действия или другие характеристики, такие как уровни производных пурина в крови, и поэтому могут уменьшать проявление неблагоприятных побочных действий.

Препараты с регулируемым или длительным высвобождением могут вначале высвобождать количество производного пурина, которое мгновенно производит требуемое терапевтическое или профилактическое воздействии, и ступенчато или непрерывно высвобождать другие количества производного пурина для поддержания этого уровня терапевтического или профилактического воздействия в течение продолжительного периода времени. Для поддержания постоянного уровня производного пурина в организме производное пурина может высвобождаться из лекарственной формы со скоростью, которая будет заменять количество производного пурина, которое подвергается метаболизму и экскретированию из организма. Регулируемое или длительное высвобождение активного ингредиента можно стимулировать различными внешними условиями, включающими в себя, но не ограниченными перечисленными, изменения рН, изменения температуры, концентрации или пригодности ферментов, концентрации или наличия воды, или другими физиологическими состояниями или соединениями.

Количество производного пурина, которое эффективно для лечения или предупреждения патологического состояния, снижения температуры внутри тела животного или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии, можно определять стандартными клиническими методами. Кроме того, испытания т νίίτο или ш νίνο можно, необязательно, применять, чтобы помочь установить оптимальные интервалы дозы. Точная доза для применения также может зависеть от пути введения и тяжести патологического состояния, подвергаемого лечению, и может быть выбрана согласно решению заботящегося о здоровье практикующего врача. Подходящие количества эффективной дозы, однако, находятся в интервале приблизительно от 10 мкг до 5 г приблизительно на каждые 4 ч, хотя они обычно составляют приблизительно 500 мг или менее на каждые 4 ч. В одном варианте осуществления эффективной дозой является приблизительно 0,01, 0,5, 1, 50, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 мг, 1, 1,2, 1,4, 1,6, 1,8, 2,0, 2,2, 2,4, 2,6, 2,8, 3,0, 3,2, 3,4, 3,6, 3,8, 4,0, 4,2, 4,4, 4,6, 4,8, 5,0 г на каждые 4 ч. Эквивалентные дозы можно вводить в течение различных периодов времени, включающих в себя, но не ограниченных перечисленными, приблизительно каждые 2, 6, 8, 12, 24, 36, 48, 72 ч, каждую неделю, две недели, три недели, каждый месяц, два месяца. Количество и частоту дозирований, соответствующую полному курсу терапии, можно определять согласно решению заботящегося о здоровье практикующего врача. Эффективные количества дозы, описанные здесь, относятся к суммарным введенным количествам; то есть, если вводят более чем одно производное пурина, количества эффективной дозы соответствуют суммарному введенному количеству.

Количество производного пурина, которое эффективно для лечения или предупреждения патологического состояния или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время карди

- 33 015683 оплегии, обычно находится в интервале приблизительно от 0,01 до 100 мг/кг массы тела в день, в одном варианте осуществления приблизительно от 0,1 до 50 мг/кг массы тела в день и в другом варианте осуществления приблизительно от 1 до 20 мг/кг массы тела в день.

Количество производного пурина, которое эффективно для снижения температуры внутри тела животного, обычно находится в интервале приблизительно от 1 мкг/кг до 10 мг/кг, в одном варианте осуществления приблизительно от 0,1 до 5 мг/кг массы тела в день и в другом варианте осуществления приблизительно от 1 до 2,5 мг/кг массы тела в день.

Когда производное пурина является компонентом раствора, который применяют для поддержания жизнеспособности органа ех νίνο, концентрация производного пурина в растворе, которая эффективна для поддержания жизнеспособности органа, находится в интервале приблизительно от 1 нМ до 1 мМ.

Производные пурина можно испытывать ίη νίίτο или ίη νίνο на терапевтическую или профилактическую активность перед применением для человека. Для демонстрации безопасности и эффективности можно применять системы животных моделей.

Настоящие способы лечения и предупреждения патологического состояния, снижения температуры внутри тела животного или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии могут дополнительно включать в себя введение другого терапевтического агента животному, которому вводили производное пурина. В одном варианте осуществления другой терапевтический агент вводят в эффективном количестве.

Эффективные количества других терапевтических агентов хорошо известны специалистам в данной области техники. Однако определение интервала оптимального эффективного количества другого терапевтического агента полностью находится в компетенции специалиста в данной области. В одном варианте осуществления изобретения, когда другой терапевтический агент вводят животному, эффективное количество производного пурина меньше, чем должно быть его эффективное количество в случае, когда не вводят другой терапевтический агент. В этом случае, не основываясь на теории, полагают, что производные пурина и другой терапевтический агент действуют синергически.

В одном варианте осуществления другим терапевтическим агентом является противовоспалительный агент. Примеры применяемых противовоспалительных агентов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, адренокортикостероиды, такие как кортизол, кортизон, фторкортизон, преднизон, преднизолон, 6а-метилпреднизолон, триамцинолон, бетаметазон и дексаметазон, и нестероидные противовоспалительные агенты (Ν8ΑΙΌ), такие как аспирин, ацетаминофен, индометацин, сулиндак, толметин, диклофенак, кеторолак, ибупрофен, напроксен, флурбипрофен, кетопрофен, фенопрофен, оксапрозин, мефенамовая кислота, меклофенамовая кислота, пироксикам, мелоксикам, набуметон, рофекоксиб, целекоксиб, этодолак и нимесулид.

В другом варианте осуществления другим терапевтическим агентом является антидиабетический агент. Примеры применяемых антидиабетических агентов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, глюкагоны; соматостатин; диазоксид; сульфонилуреазы, такие как толбутамид, ацетогексамид, толазамид, хлоропропамид, глибенкламид, глипизид, гликлазид и глимепирид; стимуляторы секреции инсулина, такие как репаглинид и натеглинид; бигуаниды, такие как метформин и фенформин; тиазолидиндионы, такие как пиоглитазон, розиглитазон и троглитазон; и ингибиторы α-глюкозидазы, такие как акарбоза и миглитол.

В другом варианте осуществления другим терапевтическим агентом является антиглаукомный агент. Примеры антиглаукомных агентов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, апраклонидин НС1, бримонидин тартрат, дипивефрин НС1, эпинефрин НС1, бетаксолол НС1, картеолол НС1, левобунолол НС1, метипранолол НС1, тимолол, тимололмалеат, пилокарпин НС1, пилокарпин, дорзоламид НС1, бринзоламид и латанопрост.

В следующем варианте осуществления другим терапевтическим агентом является агент против сердечно-сосудистого заболевания. Примеры применяемых агентов против сердечно-сосудистого заболевания включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, карнитин; тиамин; лидокаин; амиодарон; прокаинамид; мексилетин; бретилийтозилат; пропанолол; соталол и антагонисты мускариновых рецепторов, такие как атропин, скополамин, гоматропин, тропикамид, пирензипин, ипратропий, тиотропий и толтеродин.

В другом варианте осуществления другим терапевтическим агентом является обезболивающий агент. Примеры применяемых обезболивающих агентов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, бупренорфин, меперидин, морфин, кодеин, пропоксифен, фентанил, суфентанил, эторфингидрохлорид, гидрокодон, гидроморфон, налбуфин, буторфанол, оксикодон, аспирин, ибупрофен, напроксеннатрий, ацетаминофен, ксилазин, метедомидин, карпрофен, напросин и пентазоцин.

В специфическом варианте осуществления другим терапевтическим агентом является бупренорфин.

В другом варианте осуществления другим терапевтическим агентом является противорвотный агент. Примеры применяемых противорвотных агентов включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, метоклопромид, домперидон, прохлорперазин, прометазин, хлорпромазин, триметобензамид,

- 34 015683 ондасетрон, гранисетрон, гидроксизин, ацетиллейцинмоноэтаноламин, ализаприд, азасетрон, бензхинамид, биетанаутин, бромоприд, буклизин, клебоприд, циклизин, димонгидринат, дифенидол, доласетрон, меклизин, металлатал, метопримазин, набилон, оксиперидил, пипамазин, скополамин, сулпирид, тетрагидроканнабинол, тиэтилперазин, тиопроперазин, тропизетрон или их смеси.

Производное пурина и другой терапевтический агент могут действовать аддитивно или в одном варианте осуществления синергически. В одном варианте осуществления производное пурина вводят совместно с другим терапевтическим агентом. В одном варианте осуществления можно вводить композицию, включающую в себя эффективное количество производного пурина и эффективное количество другого терапевтического агента. В альтернативном случае можно совместно вводить композицию, включающую в себя эффективное количество производного пурина и другую композицию, включающую в себя эффективное количество другого терапевтического агента. В другом варианте осуществления эффективное количество производного пурина вводят перед или вслед за введением эффективного количества другого терапевтического агента. В этом варианте осуществления производное пурина вводят в то время, когда другой терапевтический агент оказывает свое терапевтическое воздействие, или другой терапевтический агент вводят в то время, когда производное пурина оказывает свое профилактическое или терапевтическое воздействие для лечения или предупреждения патологического состояния, снижения температуры внутри тела животного или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Композицию изобретения можно изготавливать с применением метода, включающего в себя смешивание производного пурина и физиологически приемлемого носителя или среды. Смешивание можно выполнять с применением методов, хорошо известных для смешивания соединения (или соли) и физиологически приемлемого носителя или среды.

Терапевтическое или профилактическое применение производных пурина Лечение или предупреждение сердечно-сосудистого заболевания

Сердечно-сосудистое заболевание можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Сердечно-сосудистые заболевания, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, атеросклероз, застойную сердечную недостаточность, сосудистый шок, кардиомиопатию, трансплантацию сердца, кардиоплегию и сердечную аритмию.

В одном варианте осуществления сердечно-сосудистым заболеванием является сердечная аритмия, застойная сердечная недостаточность, сосудистый шок или кардиомиопатия.

В одном варианте осуществления сердечная аритмия означает тахикардию или идиотопическую аритмию.

Еще в одном варианте осуществления тахикардия означает мерцательную аритмию, суправентрикулярную тахикардию, трепетание предсердий, пароксизмальную суправентрикулярную тахикардию, пароксизмальную атриальную тахикардию, синусную тахикардию, тахикардию атриовентрикулярной экстрасистолы со стойкой циркуляцией импульса возбуждения в миокарде, или тахикардию, вызванную синдромом Вольфа-Паркинсона-Уайта.

В следующем варианте осуществления способы лечения тахикардии включают в себя снижение вентрикулярной сердечной частоты пульса животного до частоты менее чем приблизительно 40 ударов в минуту. В одном варианте осуществления применяют способы снижения вентрикулярной сердечной частоты пульса до частоты приблизительно от 60 до 100 ударов в 1 мин. В другом варианте осуществления применяют способы снижения вентрикулярной сердечной частоты до частоты приблизительно от 100 до 140 ударов в 1 мин.

В другом варианте осуществления производные пурина применяют для превращения сердечной аритмии в нормальный синусный ритм. В соответствии с этим изобретение предлагает способы трансформирований сердечной аритмии в нормальный синусный ритм, включающие в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества производного пурина.

Защита сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии

В одном варианте осуществления изобретение предлагает способы индуцирования кардиоплегии, включающие в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества индуцирующего кардиоплегию агента и производного пурина. Индуцирующие кардиоплегию агенты, применяемые в настоящем изобретении, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, хлористый калий, прокаин, лидокаин, новокаин, бупивокаин, никорандил, пинацидил, галотан, раствор 81. Тйотак, раствор Егетек, моноксим 2,3-бутандиона и эсмолол.

В одном варианте осуществления индуцирующим кардиоплегию агентом является лидокаин.

В одном варианте осуществления индуцирующий кардиоплегию агент и производное пурина присутствуют в одной и той же композиции. Настоящие способы индуцирования кардиоплегии применяют для предупреждения или минимизации возникновения миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Еще в одном варианте осуществления изобретение предлагает способы защиты сердца животного

- 35 015683 против миокардиального повреждения во время кардиоплегии, причем способ включает в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества производного пурина.

Еще в одном варианте осуществления изобретение предлагает способы индуцирования кардиоплегии у животного, наряду с защитой сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии, причем способ включает в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества:

(a) индуцирующего кардиоплегию агента и (b) производного пурина.

В одном варианте осуществления индуцирующий кардиоплегию агент вводят перед введением производного пурина.

В другом варианте осуществления производное пурина вводят перед введением индуцирующего кардиоплегию агента.

В следующем варианте осуществления индуцирующий кардиоплегию агент и производное пурина вводят совместно.

В другом варианте осуществления индуцирующий кардиоплегию агент и производное пурина вводят так, что производное пурина оказывает свое профилактическое воздействие защиты против миокардиального повреждения, в то время как индуцирующий кардиоплегию агент оказывает свое кардиоплегическое воздействие.

Лечение или предупреждение неврологического расстройства

Неврологическое расстройство можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Неврологические расстройства, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, пароксизмальное нарушение, такое как эпилепсия; боль, включающую в себя острую послеоперационную боль, раковую боль, нейропатическую боль, боль в результате операции, родовую боль во время рождения ребенка, синдром психогенной боли и головную боль, включающую в себя мигреневую головную боль и кластерную головную боль; делирий и деменцию, такую как деменцию тельца Леви, болезнь Альцгеймера, болезнь Пика или болезнь Крейтцфельдта-Якоба; нарушение сна, такое как инсомния, гиперсомния, синдром апноэ во сне, синдром усталости ног или парасомния; нарушение черепного нерва, такое как паралич Белла; нарушение движений, такое как тремор, дистония, синдром Туретта, миоклония, болезнь Гентингтона, кортикобазальная дегенерация, хорея, индуцированное лекарственным средством нарушение движения, прогрессирующий надядерный паралич, болезнь Паркинсона или синдром Паркинсона, такой как множественная системная атрофия, болезнь Вильсона или полиинфарктное состояние; демиелинизирующее заболевание, такое как рассеянный склероз или амиотрофический боковой склероз; нейромышечное заболевание, такое как мышечная дистрофия; заболевание сосудов головного мозга, такое как инсульт; нейроофтальмическое нарушение; психическое расстройство, включающее в себя, но не ограничивающееся перечисленным, соматоформное нарушение, такое как ипохондрия или дисморфическое нарушение организма; нарушение взаимосвязи, такое как паническое нарушение, фобическое нарушение или обсессивно-компульсивное расстройство; аффективное расстройство, такое как депрессия или биполярное аффективное расстройство; личностное расстройство; психосексуальное расстройство; суицидное поведение; шизофрения; кратковременное психотическое расстройство и бредовое расстройство.

В одном варианте осуществления неврологическим нарушением, подвергаемым лечению или предупреждению, является эпилепсия, боль или инсульт.

В одном варианте осуществления настоящие способы лечения боли дополнительно включают в себя введение дополнительного обезболивающего агента. В специфическом варианте осуществления дополнительным обезболивающим агентом является бупренорфин.

Лечение или предупреждение офтальмического патологического состояния

Офтальмическое патологическое состояние можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Офтальмические патологические состояния, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, глаукому с нормальным внутриглазным давлением, глаукому с внутриглазной гипертензией, синдром псевдоэксфолиации, ишемическую ретинопатию, диабетическую ретинопатию и острую макулярную дегенерацию.

В одном варианте осуществления неврологическим нарушением, подвергаемым лечению или предотвращению, является глаукома с внутриглазной гипертензией или глаукома с нормальным внутриглазным давлением.

Лечение или предупреждение ишемического патологического состояния

Ишемическое патологическое состояние можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Ишемические патологические состояния, которые можно лечить или предупреждать введением эф

- 36 015683 фективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, стабильную стенокардию, нестабильную стенокардию, миокардиальную ишемию, гепатическую ишемию, мезентериальную артериальную ишемию, интерстинальную ишемию, инфаркт миокарда, критическую ишемию конечности, хроническую критическую ишемию конечности, ишемию головного мозга, острую сердечную ишемию и ишемическое заболевание центральной нервной системы, такое как инсульт или ишемия головного мозга.

В одном варианте осуществления ишемическим патологическим состоянием является миокардиальная ишемия, стабильная стенокардия, нестабильная стенокардия, инсульт, ишемическое сердечное заболевание или ишемия головного мозга.

Лечение или предупреждение реперфузного повреждения

Реперфузное повреждение можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина. Реперфузное повреждение может иметь место после происшедшего приступа, такого как инфаркт миокарда или внезапного приступа, или во время хирургической манипуляции, когда ток крови в сосудах блокируется во время действия или не во время действия.

Реперфузные повреждения, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, кишечное реперфузное повреждение, миокардиальное реперфузное повреждение и реперфузное повреждение в результате операции с аппаратом искусственного кровообращения, операцию репарации торакоабдоминальной аневризмы, операцию каротидной эндартерэктомии или геморрагический шок.

В одном варианте осуществления реперфузное повреждение является результатом операции с аппаратом искусственного кровообращения, операции репарации торакоабдоминальной аневризмы, операции каротидной эндартерэктомии или геморрагического шока.

Лечение или предупреждение диабета

Диабет можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Типы диабета, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, диабет I типа (инсулинозависимый сахарный диабет), диабет II типа (инсулинонезависимый сахарный диабет), гестационный диабет, инсулинопатия, диабет вследствие панкреатического заболевания, диабет, связанный с другим эндокринным заболеванием (таким как синдром Кушинга, акромегалия, феохромацитома, глюкагонома, первичный альдостеронизм или соматостатинома), синдром невосприимчивости инсулина типа А, синдром невосприимчивости инсулина типа В, липатрофический диабет и диабет, индуцированный β-клеточными токсинами.

В одном варианте осуществления диабет означает сахарный диабет I типа.

В другом варианте осуществления диабет означает сахарный диабет II типа.

Способы снижения температуры внутри тела животного

В одном варианте осуществления изобретение предлагает способы снижения температуры внутри тела животного, включающие в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества производного пурина.

Снижение температуры внутри тела животного применяют для замедления метаболизма или снижения потребления кислорода, в особенности, когда доставка кислорода к ткани является неадекватной. Примеры патологических состояний, характеризуемых неадекватной доставкой кислорода к ткани, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными: (1) медицинские манипуляции, такие как операция на сердце, операция на головном мозге, трансплантация органа, механическая окклюзия сосудистого кровоснабжения или сосудистый стеноз; (ίί) расстройство или болезненное состояние, такое как ишемия, нарушение дыхания, дыхательная недостаточность, легочное нарушение, анемия, анафилактический шок, геморрагический шок, обезвоживание, повышение давления в какой-либо анатомической полости, внутрисосудистый тромб, септический шок, муковисцидоз, рак легких, внезапный приступ, ожог или внутреннее кровотечение; (ш) повреждение (травма), такое как при утоплении, размозжение одной или более конечностей, удушье или асфиксия; (ίν) угнетение дыхательных путей вследствие астмы, опухоли, травмы легких или трахеального повреждения; (ν) наружное сдавливание одного или нескольких кровеносных сосудов или (νί) внутренняя обструкция одного или нескольких кровеносных сосудов.

Соответственно настоящее изобретение предлагает способы замедления частоты сердечных сокращений во время операции на сердце; защиты ткани животного от повреждения во время операции, конкретной операции на сердце или головном мозге; для уменьшения внутричерепной гипертензии, вызванной повреждением мозга у животного; или индуцирования гибернации у животного, причем каждый способ включает в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества производного пурина.

Снижение температуры внутри тела животного также применяют для снижения скорости потребления кислорода животным. Соответственно настоящее изобретение предлагает способы уменьшения скорости потребления кислорода животным, причем способ включает в себя введение нуждающемуся в

- 37 015683 этом животному эффективного количества производного пурина.

Снижение температуры внутри тела животного применяют для лечения или предупреждения повреждения ткани или внезапного приступа, являющегося результатом неадекватной подачи кислорода к клетке, ткани, органу или системе органа.

В одном варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают, чтобы повысить рекусситацию выхода из наркоза у травмированного животного.

В другом варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают перед и/или во время операции на сердце. В специфическом варианте осуществления животное означает ребенка, подвергаемого педиатрической операции на сердце.

В другом варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают для лечения нарушения дыхания у животного.

В одном варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают, чтобы способствовать метаболизму ткани у животного, дыхание и вентиляцию которого облегчают респиратором. В специфическом варианте осуществления животное, дыхание и вентиляцию которого облегчают респиратором, означает престарелого человека. В другом специфическом варианте осуществления животное, дыхание и вентиляцию которого облегчают респиратором, означает преждевременно рожденный ребенок.

В одном варианте осуществления орган можно сохранять ех νίνο в композиции, включающей в себя эффективное количество производного пурина. Композицию применяют для сохранения жизнеспособности органа после извлечения из донора и перед трансплантацией органа реципиенту. В одном варианте осуществления донор и реципиент один и тот же.

В другом варианте осуществления изобретения эффективное количество производного пурина можно вводить животному, ожидающему трансплантацию органа, для снижения температуры внутри тела животного перед или во время трансплантации органа.

В одном варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают до температуры приблизительно от 4 до 34°С. В некоторых вариантах осуществления температуру внутри тела животного снижают приблизительно до 34, 30, 25, 20, 15, 10 или 4°С.

В специфическом варианте осуществления температуру внутри тела животного снижают, чтобы индуцировать терапевтическую гипотермию.

Лечение или предупреждение ожирения

Ожирение можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина.

Типы ожирения, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, мужеподобное ожирение, женоподобное ожирение, абдоминальное ожирение, возрастное ожирение, ожирение, вызванное диетой, ожирение, вызванное жиром, гипоталамическое ожирение, ожирение, препятствующее нормальному функционированию организма, мультигенное ожирение и висцеральное ожирение.

В одном варианте осуществления ожирение представляет собой мужеподобное ожирение.

Лечение или предупреждение синдрома истощения

В одном варианте осуществления изобретение предлагает способы лечения или предупреждения синдрома истощения, включающего в себя введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества производного пурина.

Типы синдромов истощения, которые можно лечить или предупреждать введением эффективного количества производного пурина, включают в себя, но не ограничиваются перечисленными, хронический синдром истощения, раковый синдром истощения, синдром истощения при СПИД.

Нижеследующие примеры приведены для помощи понимания изобретения и, конечно, не должны истолковываться как специфически ограничивающие описанное и заявленное здесь изобретение. Полагают, что такие варианты изобретения, включающие в себя замену всех эквивалентов, известных в настоящее время или разработанных позднее, которые должны быть в компетенции специалистов в данной области, и изменения в препарате или незначительные изменения в экспериментальном плане находятся в пределах объема настоящего изобретения.

Примеры

Материалы: [³Н]ИБСА получали от Эи Роп! ΝΕΝ, Оге1е1с11. Оеттапу. Другие немеченые агонисты и антагонисты рецепторов аденозина можно получить от РВЕ №Еск, МаккасйикеИк. 96-луночную микропланшетную фильтрационную систему (МиШ8сгееп МАРС) получали от МИНроте, ЕксйЬотп, Оеттапу. Пенициллин (100 Е/мл), стрептомицин (100 мкг/мл), Ь-глутамин и 0-418 получали от ОЛсо-ЬНе Тес11по1още5 Еддепйет, Оеттапу. Другие материалы можно получать, как описано в публикации Κίοΐζ е! а1., 1. Вю1. Сйет., 260:14659-14664, 1985; Ьойке е! а1., №ипуп-8сйт1ебеЬегд'8 Агсй. Рйаттасо1., 336:204-210, 1987 и Κ^ΐζ е! а1., №ипуп-8сйт1ебеЬегд'8 Агсй. Рйаттасо1., 357:1-9, 1998.

Основные способы: спектры протонного ядерного магнитного резонанса (ЯМР) получали на спектрофотометре Уапап 300 МГц и химические сдвиги представлены в частях на миллион. Соединения охарактеризованы на основе данных ЯМР и масс-спектральных данных (МС). 6-Хлораденозин и 2,6- 38 015683 дихлораденозин приобретали у ТЯС, Ои1апо, Сапаба, АСЯО8 Огдаше, И8А или 8ίβΐηα-Λ16πο1ι (81. Ьошк, МО).

Пример 1. Получение соединения Г-1

Р-1

6-Хлораденозин (1,145 г, 4 ммоль) разбавляли этанолом (50 мл) и к полученному раствору добавляли 1-гидроксиметилциклопентиламин (1,0 г, 8 ммоль). Полученную реакционную смесь нагревали до кипячения с обратным холодильником и позволяли перемешиваться при кипячении с обратным холодильником приблизительно в течение 15 ч. Полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали в вакууме с получением неочищенного остатка. Неочищенный остаток очищали с применением флэш-хроматографии на колонке (в качестве элюента для колонки с силикагелем применяли смесь 8% метанол-дихлорметан) с получением соединения 1'-1 (0,383 г). 'Н ЯМР (ДМСО-б₆): δ 1,51-1,62 (м, 2Н), 1,7-1,82 (м, 4Н), 2,10-2,18 (м, 2Н), 3,16 (д, 6=5,1 Гц, 1Н), 3,50-3,58 (м, 1Н), 3,62-3,68 (м, 2Н), 3,95 (ушир.с, 1Н), 4,09-4,15 (м, 1Н), 4,58-4,66 (м, 1Н), 5,06-5,10 (м, 1Н), 5,18 (д, 1=4,2 Гц, 1Н), 5,35-5,40 (м, 1Н), 5,44 (д, 1=6 Гц, 1Н), 5,87 (д, 1=6 Гц, 1Н), 6,85 (с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 8,36 (с, 1Н); МС (Е8⁺): т/ζ 366 (М+1).

Пример 2. Получение соединения 1'-19

м? Ьн

Г-19

2,6-Дихлораденозин (0,4 г, 0,0012 моль) разбавляли этанолом (25 мл) и к полученному раствору добавляли 1-гидроксиметилциклопентиламин (1 г, 0,008 моль). Полученную реакционную смесь нагревали до кипячения с обратным холодильником и позволяли перемешиваться при кипячении с обратным холодильником приблизительно в течение 6 ч. Затем полученную реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали с применением флэшхроматографии на колонке (в качестве элюента для колонки с силикагелем применяли смесь 8% метанол-дихлорметан) с получением соединения 1'-19 (365 мг, 83%). ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆): δ 1,51-1,62 (м, 2Н), 1,71-1,82 (м, 4Н), 2,10-2,18 (м, 2Н), 3,50-3,58 (м, 1Н), 3,62-3,65 (м, 2Н), 3,94 (ушир.с, 1Н), 4,12 (ушир.с, 1Н), 4,51 (д, 1=5,4 Гц, 1Н), 4,97 (ушир.с, 1Н), 5,07-5,09 (м, 1Н), 5,22-5,24 (м, 1Н), 5,48-5,50 (м, 1Н), 5,77 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 5,80-5,82 (м, 1Н), 7,42 (с, 1Н), 8,40 (с, 1Н); МС (Е8⁺): т/ζ 400 (М+1).

Пример 3. Получение соединений 1'-7, 1'-91а, 1'-92а, Г-92Ь, 1'-93а, 1'-94а, 1'-95а и Г-95Ь.

Соединения 1'-7, 1'-91а, 1'-92а, 1'-92Ь, 1'-93а, 1'-94а, 1'-95а и 1'-95Ь получали согласно общей методике, описанной в примерах 1 и 2 и здесь в другом месте. Эти соединения охарактеризованы массспектрометрией, как представлено в табл. 1 ниже по тексту.

- 39 015683

Таблица 1

Масс-спектроскопическая характеристика для иллюстративных производных пурина

Пример 4.

Получение клеточной культуры и мембраны для исследования связывания аденозиновых рецепторов.

СНО-клетки стабильно трансфицированные человеческим А₁ -рецептором аденозина выращивали и поддерживали в среде Эи1Ьессо'5 МобШеб Еад1е§ Мебшт с питательной смесью Е12 (ΌΜΕΜ/Ρ12) без нуклеозидов, содержащей 10% фетальную телячью сыворотку, пенициллин (100 Е/мл), стрептомицин (100 мкг/мл), Ь-глутамин (2 мМ) и генетицин (6-418, 0,2 мг/мл; А_2В, 0,5 мг/мл) при 37°С в 5% СО₂/95% воздуха. Затем клетки делили 2 или 3 раза еженедельно в отношении от 1:5 до 1:20.

Мембраны для экспериментов радиолигандного связывания получали из свежих или замороженных клеток, как описано в публикации Κίοΐζ е( а1., Паипуи-§сйт1е6еЬегд'8 Агсй. Рйагтасо1., 357:1-9 (1998). Затем суспензию клеток гомогенизировали в охлажденном льдом гипотоническом буфере (5 мМ ТП5/НС1. 2 мМ ЭДТА, рН 7,4) и полученный гомогенат центрифугировали в течение 10 мин (4°С) при 1000 д. Затем мембраны осаждали из супернатанта в течение 30 мин при 100000 д и повторно суспендировали в 50 мМ буфера Тг^/НСТ рН 7,4 (для А₃-рецепторов аденозина: 50 мМ Тп§/НС1, 10 мМ МдС1₂, 1 мМ ЭДТА, рН 8,25), замораживали в жидком азоте при концентрации белка 1-3 мг/мл и хранили при -80°С.

Пример 5. Исследования связывания рецепторов аденозина.

Аффинности выбранных производных пурина в отношении А1-рецепторов аденозина определяли измерением замены специфического связывания [³Н] 2-хлор-И^б-циклопентиладенозина (Регкш-Е1тег Ь1£е 8с1епее5) в СНО-клетках, стабильно трансфицированных человеческим рекомбинантным А1-рецептором аденозина, выраженного как Κ₁ (нМ).

Константы диссоциации немеченых соединений (величины К₁) определяли в конкурирующих экспериментах в 9б-луночных микропланшетах с применением А1-селективного агониста 2-хлор-И^б-[³Н] циклопентиладенозина ([³Н]ССРА, 1 нМ) для характеризации А1-рецепторного связывания. Неспецифическое связывание определяли в присутствии 100 мкМ Р-Р1А и 1 мМ теофиллина соответственно. Подробности см. в публикации Κ1οΐζ е( а1., Иаипуп-8ейт1е6еЬегд'8 Агсй. Рйагтасо1., 357:1-9, 1998. Все данные связывания вычисляли подгонкой кривой с применением программы 8СТЕ1Т (Ие Ьеап е( а1., Мо1. Рйагт., 1982, 21:5-16). Результаты представлены в табл. 2 ниже.

Таблица 2

Аффинности иллюстративных производных пурина в отношении А₁ -, А_2А- и А₃-рецепторов аденозина

Соединение	КИА1)’ (нМ)	К1(А2а)^С (нМ)	Κχ(Α₃)° (нМ)
[³Н] ССРА	0,83 (0,55-1,25)	2270 (1950-2660)	42,3 (32,1-55,8)
1' -1	6,77 (6,00-7,63)	28100 (21200-37300)	7700 (5480-10800)
1' -19	6,47 (5,91-7,09)	24000 (17600-32800}	5960 (4140-3600)

^а Замена специфического связывания [³Н]ССРА в СНО-клетках, стабильно трансфицированных человеческим рекомбинантным А1-рецептором аденозина, выражали как Κι (нМ).

^Ь Замена специфического связывания [³Н]НЕСА в СНО-клетках, стабильно трансфицированных человеческим рекомбинантным А2А-рецептором аденозина, выражали как Κι (нМ).

^с Замена специфического связывания [³Н]НЕСА в ΝΕΚ-клетках, стабильно трансфицированных человеческим рексмбинантным А3-рецептором аденозина, выражали как Κι (нМ). Все данные являются средними геометрическими значениями с 95% доверительными интервалами в круглых скобках.

- 40 015683

Данные, приведенные в табл. 2, демонстрируют, что соединения Ι'-1 и Ι'-9, иллюстративные производные пурина, селективно связывают Άι-рецептор аденозина и соответственно применимы для лечения или предупреждения патологического состояния, замедления скорости метаболизма у животного или защиты сердца животного против миокардиального повреждения во время кардиоплегии.

Пример 6. Определение действий производных пурина на септический шок.

Самцов мышей ВАБВ/с (6-8 недельного возраста) применяла в исследованиях индуцированного липополисахаридом продуцирования цитокинов и выживания. Для продуцирования цитокинов мышей обрабатывали иллюстративным производным пурина (0,03 мг/кг) перорально через желудочный зонд 30 мин и затем подвергали воздействию липополисахарида (1 мг/кг внутрибрюшинно) в течение 90 мин. По окончании этого периода брали кровь и получали сыворотку для анализа. Сыворотку разбавляли 1:5 перед анализом на цитокины с применением видоспецифичных наборов ЕБ18А (В&Б 8уЫст5) для уровней хемокина ΜΙΡ-1α и цитокина ΤΝΡ-α, которые выражали как пг/мл. Для изучения выживания мышей можно обрабатывать иллюстративным производным пурина (пероральное введение 0,03 мг/кг), начиная за 30 мин до того, как мышей подвергали воздействию липополисахарида (55 мг/кг внутрибрюшинно). Выживание мышей прослеживали в течение 72 ч и выражали как процент выживших мышей в каждый момент времени.

Пример 7. Определение антиаритмических действий производных пурина.

Перфузия сердца.

Самцов крыс 8ргадие-Оа^1еу (имеющих массу тела от 250 до 300 г) гепаринизировали с применением гепариннатрия (1000 Е/кг внутрибрюшинно) с последующим введением через 10 мин анестезирующего агента посредством внутрибрюшинного введения пентобарбитала натрия (40 мг/кг). После того как животное анестезировали, вскрывали грудную клетку, быстро извлекали сердце и подвергали перфузии через восходящую аорту с применением буфера КтеЬк-Втдет, включающего в себя ЫаС1 (118 ммоль/л), КС1 (4,75 ммоль/л), КН₂РО₄ (1,18 ммоль/л), Мд8О₄ (1,18 ммоль/л), СаС1₂ (2,5 ммоль/л), ЫаНСОз (25 ммоль/л) и глюкозу (11 ммоль/л). Затем через перфузат барбатировали смесь 95% О₂ и 5% СО₂ при 37°С (вначале сердце подвергали перфузии при постоянном давлении 70 мм Нд). Приблизительно через 10 мин перфузии при постоянном давлении перфузию переводили в перфузию при равномерном течении, достигаемую применением насоса с микротрубочками. Давление при перфузии поддерживали на таком же уровне, как при перфузии при постоянном давлении регулированием скорости потока. После того как устанавливали скорость потока, ее поддерживали на всем протяжении эксперимента. Сердца стимулировали прямоугольными импульсами со скоростью 5 Гц и продолжительностью 2 мс и дважды диастолическим порогом, вызываемым устройством изолированного стимула (ЛБИчЫгишепБ Иб.. Ли81та11а).

Влияние производных пурина на индуцированную ишемией аритмию.

Сердца крыс подвергали перфузии при постоянном давлении 70 мм Нд без стимуляции, как описано выше по тексту. Биполярную эпикардиальную электрокардиограмму (ЕСС) записывали помещением двух электродов на поверхности правого отростка и верхушки легкого. В качестве индифферентного электрода применяли канюлю из нержавеющей стали. ЕСС и частоту сердечных сокращений подвергали непрерывному мониторингу, данные записывали с применением системы восприимчивости данных Ρο\νетБаЬ (ЛБИчЫгитегИ Ыб., ЛийтаПа) в сочетании с компьютером и анализировали с применением компьютерной программы СНаг1.3. По окончании 20-минутного периода равновесия индуцировали регионарную ишемию лигированием левой передней нисходящей (БАБ) коронарной артерии и лигатуру высвобождали через 30 мин после окклюзии. Иллюстративное производное пурина вносили внутрь перфузата за мин перед БАО-лигированием и оно присутствовало во время БАБ-лигирования. Иллюстративное производное пурина тестировали при концентрации 10, 30 и 100 пМ.

Пример 8. Определение влияния производных пурина на восстановление функции после глобальной ишемии/реперфузии.

Влияние иллюстративного производного пурина на восстановление функции после ишемии/реперфузии.

Сердца крыс вначале подвергали перфузии при постоянном давлении 70 мм Нд с применением метода, описанного выше по тексту в примере 7. По окончании периода 20-минутной стабилизации сердца подвергали 30-минутной ишемии, вызванной отсутствием перфузии с последующей 40-минутной реперфузией. В обработанные сердца иллюстративное производное пурина вливали в течение 10 мин перед индуцированием ишемии. Через 30 мин ишемии измеряли показатель +бр/б1_т,,,._: с последующей 40-минутной реперфузией для определения влияния на сократительную способность миокарда (бр/б1).

Пример 9. Определение влияния производных пурина на боль.

Самцов мышей (массой тела 25-35 г) разделили на группы следующим образом: первая группа, которой внутрибрюшинно вводили бупренорфин (0,3 мг/кг), вторая группа, которой внутрибрюшинно вводили бупренорфин (1 мг/кг), третья группа, которой внутрибрюшинно вводили иллюстративное производное пурина (3 мг/кг), четвертая группа, которой внутрибрюшинно совместно вводили иллюстратив

- 41 015683 ное производное пурина (3 мг/кг) и бупренорфин (1,0 мг/кг), и пятая группа, которой внутрибрюшинно совместно вводили иллюстративное производное пурина (3 мг/кг) и бупренорфин (0,3 мг/кг). Обезболивающие действия в организме мышей измеряли с применением устройства для измерения обезболивания 11ТС тобе1 33 ЕаП-ГНк (11ТС 1пс., \Уооб1апб Н1118, СА) в момент времени 0 мин (контроль базовой линии), 5, 15, 30 и 60 мин (в некоторых случаях также 90 и 120 мин) после обработки, обработка соединением или средой. Для каждого момента времени должно применяться среднее зафиксированное значение двух показаний прибора. Для максимально возможного действия обезболивания (% МРЕ) устанавливали базовую линию от 2-4 с времени ожидания для каждой мыши и 10 с время выключения. % МРЕ вычисляли с применением следующей формулы: % МРЕ = [(значение после введения лекарственного средства значение базовой линии)/(время выключения - значение базовой линии)] х 100.

Пример 10. Определение воздействия производных пурина на боль.

Самцам мышей (каждый имеющий массу тела 20-30 г) подкожно вводили 20 мкл 1% раствора формалина в формальдегиде (полученного разведением коммерческого 4% [мас./об.] исходного раствора формалина) в дорсальную область их левой задней лапы. Затем мышей распределяли либо на контрольную группу и вводили среду, либо группу обработки. Затем каждой группе внутрибрюшинно вводили производное пурина (1,0 мг/кг). Затем в обеих группах животных подвергали мониторингу реакцию в течение 30 мин после обработки, чтобы определить, сколько времени каждое животное расходует, зализывая обработанную лапу. Затем время зализывания в контрольной группе (животных, предварительно обработанных средой) сравнивали с временем зализывания в группе, подвергаемой обработке для того, чтобы вычислить обезболивающее действие. 30-минутный период реакции делили на две фазы: раннюю фазу, которая продолжается от 0 до 5 мин после лечения, и позднюю фазу, которая продолжается от 10 до 30 мин после лечения.

Пример 11. Определение воздействия производных пурина на боль.

Мышам ВАЬВ/С (6-8 недельного возраста) внутрибрюшинно вводили стрептозотоцин (40 мг/кг, один раз в день в течение 5 последовательных дней), чтобы вызвать диабет (уровни глюкозы в крови составляют выше 200 мг/мл). Через три недели после первой инъекции стрептозотоцина животным внутрибрюшинно вводили иллюстративное производное пурина (1 мг/кг) в заднюю лапу и после обработки аллодинию можно измерять с применением анестезеометра Е1сс1гогопГгсу (11ТС 1пс., \Уооб1апб НШ§ СА 91367). Обезболивающее действие иллюстративного производного пурина измеряли в момент времени 0 (контроль), 15, 30 и 60 мин после введения иллюстративного производного пурина.

Пример 12. Определение воздействия производных пурина на боль.

Самцов крыс линии Вистар (каждый с массой от 200 до 250 г, выдержанных в условиях без патогенных организмов при 24-25°С и обеспечиваемых стандартной крысиной едой и водой аб 11Ы1ит) анестезировали посредством внутрибрюшинного введения пентобарбитала (50 мг/кг) и помещали в стереотаксическую шину. Атлантозатылочную мембрану обнажали и вставляли катетер РЕ-10 (7,5 см) через разрез в субарахноидальной области. Затем внешний конец катетера фиксировали к черепу, рану закрывали и крысам позволяли восстанавливаться в течение 7 дней после операции. Животных без неврологических нарушений помещали в плексигласовую камеру для наблюдения на поверхность металлической сетки и механические пороги подошвенной поверхности лапы можно определять с применением динамического подошвенного анестезиометра (Идо ВаШе, Йа1у) следующим образом: после акклиматизации под лапу животного помещали устройство стимулятора прикосновения так, чтобы нить располагалась под целевой областью лапы. Затем нить поднимали так, чтобы она контактировала с подушечкой лапы животного и непрерывно обнаруживала увеличение направленной вверх силы на лапу до тех пор, пока животное не отдергивало лапу. Порог отдергивания лапы измеряли таким образом по очереди 5 раз и вычисляли среднее из 5 значений. После того как контрольные измерения порога завершали, вводили подкожно каррагенан (3%, 100 мкл) в заднюю лапу, что приводило к заметному опуханию и покраснению обработанной лапы. Через 3 ч после введения каррагенана снова измеряли пороговые значения. Затем животных делили на контрольную группу (интратекальное введение среды) и группу, подвергаемую обработке (интратекальное введение иллюстративного производного пурина в объеме инъекции 10 мкл). Определения порога повторяли, как описано выше, через 15, 30, 60, 90 и 120 мин после введения среды или иллюстративного производного пурина.

Пример 13. Определение воздействия производных пурина на боль.

Самцов крыс СО (каждый с массой от 220 до 250 г) подготавливали согласно методу, представленному в публикации Ζ. 8е11хег е1 а1., Рат, 43:205-218 (1990). Затем крыс анестезировали посредством внутрибрюшинного введения пентобарбитала натрия (50 мг/кг). Разрез кожи делали выше 1/3 и 2/3 области левого бедра каждой крысы, обнажали левый седалищный нерв и освобождали от окружающей соединительной ткани. Затем применяли 8-0 найлоновые шовные нити для плотного лигирования левого седалищного нерва каждой крысы так, чтобы при перевязке захватить от ¹/3 до ¹/2 толщины спинного (дорсального) нерва. Разрез закрывали с применением 4-0 стерильных шовных нитей. Через семь дней после операции животных включали в четыре группы: первая группа, которой вводили среду (контрольная группа); вторая группа, которой вводили иллюстративное производное пурина, 0,1 мг/кг; третья

- 42 015683 группа, которой вводили бупренорфин, 0,3 мг/кг; и четвертая группа, которой совместно вводили иллюстративное производное пурина, 0,1 мг/кг, и бупренорфина, 0,3 мг/кг. Аллодинию животных во всех четырех группах оценивали немедленно перед лечением и через 10, 20, 30 и 60 мин после лечения с применением теста Уоп Ргеу На1г (6.М. Рйсйег е! а1., 1. №иго8С1 МеШобк, 87:185-93 (1999)).

Пример 14. Определение действия производных пурина на частоту сердечных сокращений.

Взрослых самцов крыс линии Вистар (каждый с массой приблизительно от 350 до 400 г) анестезировали как в примере 12, затем подготавливали для мониторинга кровяного давления и частоты сердечных сокращений. Измеряли частоту сердечных сокращений каждого животного, затем внутривенно вводили иллюстративное производное пурина через бедренную вену в дозе 1, 10 или 1000 нг/кг/мин (п равно 2 животных на величину дозы) в течение общего периода введения 20 мин. Затем повторно измеряли частоту сердечных сокращений каждого животного. Затем частоту сердечных сокращений после лечения сравнивали с частотой сердечных сокращений перед обработкой.

Пример 15. Определение действия производных пурина на температуру внутри тела.

Двух самцов крыс линии §ргадие-Эак1еу массой приблизительно 400 г каждый выдерживали при 13°С и медленно инъецировали 20 мг/мл соединения 1'-1, растворенного в физиологическом растворе, через катетер в шейную вену (IV) в течение приблизительно 2 мин до достижения дозы 15 мг/кг. После того как крысы засыпали, непрерывно инъецировали 20 мг/мл соединения 1'-1 через катетер в шейную вену посредством шприца с насосом в течение 4 ч со скоростью 1 мл/ч. Затем крыс возвращали в их клетки при комнатной температуре. Их ректальную температуру, частоту дыхания и поведение записывали после 5, 10, 20, 30 мин, 1 ч, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5 и 4 ч. Оба животных выжили в эксперименте. Результаты представлены в табл. 3А и 3В.

Таблица 3А

Параметры определения воздействия производных пурина на температуру внутри тела вплоть до 30 мин

Животное й!	Параметры
1	Время	0 мин	5 мин	10 мин	20 мин	30 мин
	Ректальная температура	38	38	37	36	36

	Частота дыхания (/мин)	210		69	66	75
	Поведение	нормаль ное	Сон/дви жение	Сон/дви жение	СОН	СОН
2	Время	0 мин	5 мин	10 ыин	20 мин	30 мин
	Ректальная температура	39	39	38	37	37
	Частота дыхания (/мин)	22 0	99	84	57	51
	Поведение	нормаль ное	нормаль ное	Сон/дви жение	Сон/дви жение	Сон/дви жение

- 43 015683

Таблица ЗВ

Параметры определения воздействия производных пурина на температуру внутри тела через 30 мин

Живот ное №	Параметры
1	Время	1 час	1,5 час	2 час	2,5 час	3 час	3,5 час	4 час
Ректальная температура	32	29	27	25	24	23	21
Частота дыхания (/мин)	42	45	54	51	42	42	42
Поведение	СОН	сон	СОН	СОН	сон	сон	сон
2	Время	1 час	1,5 час	2 час	2 5 час	3 час	3,5 час	4 час
Ректальная температура	33	30	28	27	26	25	25
Частота дыхания (/мин)	36	36	36	30	27	24	27
Поведение	сон	сон	сон	сон	СОН	сон	сон

После экспериментов животных выдерживали в комнате для животных и наблюдали за их поведением. Данные, представленные в табл. ЗА и 3В, показывают, что соединение Г-1, иллюстративное производное пурина, уменьшает температуру внутри тела животного.

Пример 16. Определение воздействия производных пурина при лечении или предупреждении глаукомы с внутриглазной гипертензией.

Воздействие соединения Σ'-1 на внутриглазное давление (ЮР) исследовали на новозеландских белых кроликах. Новозеландских белых кроликов подвергали циркадному изменению внутриглазного давления так, чтобы самая низкая величина давления имела место рано утром и пиковая величина давления имела место после полудня. Этот циркадный ритм продемонстрирован на фиг. 1-5 за день до исследования (т.е. от ΐ = -25 ч до ΐ = 0 ч). Состоятельность измерений показана тем фактом, что внутриглазное давление в момент времени ΐ = -23 ч и ΐ = 25 ч, по существу, то же самое (см. фиг. 1-5).

Соединение Σ'-1 растворяли в физиологическом растворе в концентрации 0,3, 1,0, 3,0, 10,0 и 30,0 мг/мл. Одному кролику вводили каждый раз другой уровень дозы. Одну каплю (приблизительно 100 мкл) физиологического раствора соединения. Σ'-Σ наносили на внешнюю поверхность одного глаза каждого кролика. Соединение Г-1 вводили через ΐ = 0, 3 ч после окончания темного периода в доме животного (лампы появлялись в доме кролика (за 3 ч) в момент ΐ = -3 ч). Поэтому соединение Г-1 вводили, когда уровень внутриглазного давления был ниже по отношению к уровню в другие моменты времени во время дня и ночи. После введения соединения Г-1 внутриглазное давление не увеличивалось до нормальных дневных величин (см. фиг. 1-5). Для всех введенных концентраций соединения Г-1 самые низкие величины внутриглазного давления находились в интервале от 3 до 4 мм Нд в момент времени, в который, как следовало ожидать, новозеландский белый кролик имеет величину внутриглазного давления от 11 до 13 мм Нд. Таким образом, лечение соединением Г-1 привело к снижению величины внутриглазного давления на 8-10 мм Нд относительно ожидаемых величин.

Продолжительность воздействия соединения Г-1 изменяли в соответствии с магнитудой дозы. Восстановление величин внутриглазного давления до нормальных уровней имело место приблизительно через ΐ = 6 ч, когда введенная концентрация соединения Г-1 была 0,3 мг/мл (фиг. 1) и после ΐ = 7 ч, когда введенная концентрация соединения Г-1 была 30 мг/мл (фиг. 5). Раздражение глаза не наблюдали у какого-либо животного.

Данные, представленные на фиг. 1-5, показали, что соединение Г-1, иллюстративное производное пурина, снижает внутриглазное давление и соответственно является полезным для лечения или предупреждения глаукомы с внутриглазной гипертензией.

Настоящее изобретение не ограничивается в объеме конкретными вариантами осуществления, описанными в примерах, которые предназначены в качестве иллюстраций нескольких аспектов изобретения, и любые варианты осуществления, которые являются функционально эквивалентными, находятся в объеме этого изобретения. Действительно различные модификации изобретения, помимо тех, которые представлены и описаны здесь, будут очевидными для специалистов в данной области и предназначены для включения в объем прилагаемой формулы изобретения.

Все цитированные здесь ссылки введены посредством ссылки во всей их полноте.

- 44 015683

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, имеющее формулу

В С ω

или его фармацевтически приемлемая соль, где А представляет собой -СН2ОН;

В и С представляют собой -ОН;

Ό представляет собой группу а)

А и В находятся в положении транс по отношению друг к другу;

В и С находятся в положении цис по отношению друг к другу;

С и Ό находятся в положении цис или транс по отношению друг к другу;

К¹ представляет собой -Н или -галоген;

каждое р равно целому числу в интервале от 1 до 6 и каждое с.| равно целому числу в интервале от 1 до 6.
2. Соединение по п.1, где с.| равно 3.
3. Соединение по п.1, где с.| равно 4.
4. Соединение по п.1, где р равно 1.
5. Соединение по п.2, где р равно 1.
6. Соединение по п.3, где р равно 1.
7. Соединение по п.1, где К¹ представляет собой -Н.
8. Соединение по п.1, где К¹ представляет собой -галоген.
9. Соединение по п.1, где К¹ представляет собой -С1.
10. Соединение по п.2, где р равно 1 и К¹ представляет собой -Н.
11. Соединение по п.2, где р равно 1 и К¹ представляет собой -С1.
12. Соединение по п.3, где р равно 1 и К¹ представляет собой -Н.
13. Соединение по п.3, где р равно 1 и К¹ представляет собой -С1.
14. Соединение по п.1, имеющее структуру

В с (1а’) или его фармацевтически приемлемая соль.

- 45 015683
15. Соединение по п.14, имеющее структуру $ Ь или ΐ ίНО ОН но он или его фармацевтически приемлемая соль.
16. Терапевтическая композиция, включающая эффективное количество соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения по п.1 и физиологически приемлемый носитель или среду.
17. Терапевтическая композиция, включающая эффективное количество соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения по п.14 и физиологически приемлемый носитель или среду.
18. Терапевтическая композиция, включающая эффективное количество соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения по п.15 и физиологически приемлемый носитель или среду.
19. Соединение по п.1, имеющее структуру

- 46 015683

НО ОН ΐ.

¢: 9 но он или или его фармацевтически приемлемая соль.
20. Соединение, имеющее формулу

ΗΝ

4? %· по он где К¹ представляет собой Н, С1, СН ΝΉ₂ или ОСН₃ и Υ представляет собой

- 47 015683 или его фармацевтически приемлемая соль.
21. Соединение по п.20, где Я¹ представляет собой Н.
22. Соединение по п.21, где Υ представляет собой

- 48 015683
23. Соединение по п.20, где К¹ представляет собой С1.
24. Соединение по п.23, где Υ представляет собой
25. Соединение, имеющее формулу ί

н<? Ън или его фармацевтически приемлемая соль.
26. Соединение, имеющее формулу й *>

нс? Ън или его фармацевтически приемлемая соль.
27. Способ лечения офтальмологического патологического состояния путем снижения внутриглазного давления, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения по п.20.
28. Способ снижения температуры внутри тела животного, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли соединения по п.20.

- 49 015683
29. Способ по любому из пп.27 или 28, где указанное соединение выбирают из группы, включающей или его фармацевтически приемлемой соли.

- 50 015683
30. Способ лечения офтальмологического патологического состояния путем снижения внутриглазного давления, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения формулы •ί ч ·$ Чнс? он или его фармацевтически приемлемой соли.
31. Способ снижения температуры внутри тела животного, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения, имеющего формулу

4 ч Н<? он или его фармацевтически приемлемой соли.
32. Способ снижения скорости потребления кислорода животным, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения, имеющего формулу но он или его фармацевтически приемлемой соли.
33. Способ лечения офтальмологического патологического состояния путем снижения внутриглазного давления, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения формулы или его фармацевтически приемлемой соли.

- 51 015683
34. Способ снижения температуры внутри тела животного, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения, имеющего формулу ио* Ън или его фармацевтически приемлемой соли.
35. Способ снижения скорости потребления кислорода животным, включающий введение нуждающемуся в этом животному эффективного количества соединения, имеющего формулу но он или его фармацевтически приемлемой соли.