EA011747B1 - Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, обладающая антирепрессорной активностью, и способы ее применения - Google Patents
Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, обладающая антирепрессорной активностью, и способы ее применения Download PDFInfo
- Publication number
- EA011747B1 EA011747B1 EA200700233A EA200700233A EA011747B1 EA 011747 B1 EA011747 B1 EA 011747B1 EA 200700233 A EA200700233 A EA 200700233A EA 200700233 A EA200700233 A EA 200700233A EA 011747 B1 EA011747 B1 EA 011747B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- sequences
- sequence
- repressor
- promoter
- protein
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к новому антирепрессорному элементу, который пригоден для улучшения экспрессии нуклеиновой кислоты в клетках-хозяевах. Также обеспечиваются способы применения нового антирепрессорного элемента для получения интересующего белка. Изобретение также относится к новым конфигурациям экспрессирующих кассет, содержащих антирепрессорные элементы.
Description
Изобретение относится к области молекулярной биологии и биотехнологии. Конкретнее настоящее изобретение относится к средствам и способам усовершенствования получения одной или нескольких нуклеиновых кислот, которые могут кодировать белки в клетке-хозяине.
Белки могут продуцироваться в различных клетках-хозяевах для широкого ряда применений в биологии и биотехнологии, например, в качестве биологических фармацевтических препаратов. Хорошо разработаны способы такого получения, и в основном они включают экспрессию в клетке-хозяине нуклеиновой кислоты (также относится к «трансгену»), кодирующей интересующий белок.
Одной проблемой, связанной с экспрессией трансгенов, является то, что невозможно спрогнозировать, с большой долей вероятности, что трансген станет неактивным в результате «молчания» гена (МсВигпеу е! а1., 2002), и, следовательно, необходимо тестировать многие клоны клеток-хозяев на высокую экспрессию трансгена. Кроме того, даже при установлении такого клона экспрессия трансгена часто является нестабильной, и часто наблюдают такое явление, как «молчание» экспрессии трансгена во время продолжительного культивирования клетки-хозяина. В клетках позвоночных это может быть вызвано образованием гетерохроматина в локусе трансгена, который препятствует протеканию транскрипции трансгена (^Ы1е1ает е! а1., 2001). «Молчание» трансгена является вероятностным; оно может возникнуть вскоре после интеграции трансгена в геном или только после ряда клеточных делений. Это приводит к образованию неоднородных популяций клеток после продолжительного культивирования, когда некоторые клетки продолжают экспрессировать высокие уровни рекомбинантного белка, в то время как другие экспрессируют низкие или необнаруживаемые уровни количества белка (Майш & ^Ы1е1ает, 1996; МсВигпеу е! а1., 2002). Клеточную линию, которую используют для продукции гетерологичного белка, получают из одной клетки, часто размноженной до и поддерживаемой в течение длительного периода времени при плотности клеток более 10 млн клеток на мл в культиваторах емкостью 1000 л или более. Данные большие клеточные популяции (1014-1016 клеток) проявляют склонность к значительному падению продуктивности в результате «молчания» трансгена (МфНассю е! а1., 2000; 81ги1хепЬегдег е! а1., 1999).
Одной возможностью для преодоления описанных выше проблем является применение так называемых последовательностей 8ТЛВ в экспрессирующей системе. В заявке \¥О 03/004704 описан ряд таких последовательностей 8ТЛВ. Данные последовательности можно использовать для повышения предсказуемости, выхода и/или стабильности продукции белка при использовании экспрессирующих конструкций в некоторых типах клеток-хозяев (\УО 03/004704; К^акк е! а1., 2003).
В международной публикации \УО 03/106674 описывается применение последовательностей 8ТЛВ для экспрессии нуклеиновых кислот, кодирующих рекомбинантные белки в некоторых клеточных линиях.
В международной публикации \УО 03/106684 описывается применение последовательностей 8ТЛВ для экспрессии нуклеиновых кислот, кодирующих мультимерные белки, такие как антитела.
Настоящее изобретение направлено на обеспечение альтернативных средств и способов повышения продукции белка.
Сущность изобретения
В одном аспекте изобретение относится к молекуле рекомбинантной нуклеиновой кислоты, включающей нуклеиново-кислотную последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из: а) последовательности 8ЕО Ш Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8ЕО Ш Νο: 66, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и б) комплементарной последовательности к одному из а)-с); где указанная молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты дополнительно содержит экспрессирующую кассету, где указанная экспрессирующая кассета включает гетерологичный промотор, связанный с интересующей нуклеиновой кислотой, и где указанная интересующая нуклеиновая кислота предпочтительно кодирует весь или часть интересующего белка. В предпочтительном варианте осуществления указанная нуклеиново-кислотная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, расположена слева от указанного промотора в указанной экспрессирующей кассете, и в особо предпочтительных вариантах осуществления указанная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, и указанный промотор разделены менее чем 2 т.п.н. В некоторых вариантах осуществления указанная нуклеиновая кислота, кодирующая интересующий белок, находится в мультицистронном гене, дополнительно кодирующем селектируемый маркерный ген. В некоторых вариантах осуществления указанная молекула дополнительно содержит по меньшей мере одну другую последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, где указанная по меньшей мере одна другая последовательность выбрана из: а) любой из последовательностей 8ЕО Ш Νο: 1-65; Ь) фрагментов любой из последовательностей 8ЕО Ш Νο: 1-65, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и б) комплементарной последовательности к одному из а)-с). Изобретение также относится к молекуле рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащей экспрессирующую кассету,
- 1 011747 включающую 5' - антирепрессорную последовательность А - промотор - нуклеиновую кислоту, кодирующую весь или часть интересующего белка - антирепрессорную последовательность В - 3', где антирепрессорные последовательности А и В могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы, состоящей из: ί) любой из последовательностей 8ЕО ΙΌ Νο: 1-65; ίί) фрагментов любой из последовательностей 8ЕО ΙΌ Νο: 1-65, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; ίίί) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и ίν) комплементарной последовательности к одному из ί)-ίίί), отличающейся тем, что указанная экспрессирующая кассета дополнительно включает между указанными антирепрессорными последовательностями А и В последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из: а) последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66, где указанный фрагмент обладает антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и й) комплементарной последовательности к одному из а)-с).
Изобретение дополнительно относится к клетке, содержащей молекулу по изобретению. Предпочтительно указанная клетка является клеткой млекопитающих, и в некоторых вариантах осуществления данная клетка представляет клетку СНО.
Изобретение дополнительно относится к способу получения интересующего белка, включающему культивирование клетки, содержащей молекулу рекомбинантной нуклеиновой кислоты, кодирующей интересующий белок, для экспрессии указанной нуклеиновой кислоты, кодирующей интересующий белок в указанной клетке, отличающемуся тем, что указанная молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты содержит нуклеиново-кислотную последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из: а) последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и й) комплементарной последовательности к одному из а)-с). В предпочтительном варианте осуществления способ дополнительно включает выделение указанного интересующего белка. В предпочтительных вариантах осуществления указанная нуклеиново-кислотная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, расположена слева от промотора, который контролирует экспрессию интересующего белка. В его предпочтительном варианте осуществления указанная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, и указанный промотор разделены менее чем 2 т.п.н. В некоторых вариантах осуществления указанная нуклеиновая кислота, кодирующая интересующий белок, находится в мультицистронном гене, дополнительно кодирующем селектируемый маркерный ген. В некоторых вариантах осуществления указанная клетка является клеткой млекопитающего, например клеткой СНО.
Изобретение также относится к применению нуклеиново-кислотной последовательности, обладающей антирепрессорной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из: а) последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66, где указанный фрагмент обладает антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и й) комплементарной последовательности к одному из а)-с), для повышения экспрессии интересующей нуклеиновой кислоты.
В еще одном аспекте изобретение относится к способу получения клетки-хозяина, экспрессирующей два интересующих полипептида, где способ включает: а) введение в клетку-хозяин одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты, где молекула или молекулы нуклеиновой кислоты вместе содержат: ί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей первый интересующий полипептид и первый селектируемый маркерный ген, и ίί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей второй интересующий полипептид и второй селектируемый маркерный ген, и ίίί) по меньшей мере одну последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из: (а) любой из последовательностей 8ЕО ΙΌ Νο: 1-66; (Ь) фрагментов любой из последовательностей 8ЕО ΙΌ Νο: 1-66, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; (с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности (а) или (Ь) и обладают антирепрессорной активностью; и (й) комплементарной последовательности к одному из (а)-(с); Ь) селекцию клетки-хозяина, по существу, одновременным отбором по экспрессии указанного первого и второго селектируемых маркерных генов. Изобретение также относится к способу экспрессии двух интересующих полипептидов, где способ включает культивирование клетки-хозяина, полученной способом по данному аспекту изобретения, для экспрессии первого и второго полипептидов и необязательно выделение указанных полипептидов. В одном варианте осуществления изобретения указанная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, выбрана из группы, состоящей из: а) последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8ЕО ΙΌ Νο: 66, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; с) последова
- 2 011747 тельностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности а) или Ь), где указанные последовательности обладают антирепрессорной активностью; и й) комплементарной последовательности к одному из а)-с). В некоторых вариантах осуществления указанные два полипептида являются частью мультимерного белка.
Подробное описание изобретения
Антирепрессорные последовательности.
Последовательности, обладающие антирепрессорной активностью, в том смысле, в котором здесь используется данный термин, представляют последовательности, которые способны, по меньшей мере, частично противодействовать репрессивному эффекту белков НР1 или НРС2, когда данные белки связываются с ДНК. Последовательности, обладающие антирепрессорной активностью (в некоторых случаях также относящиеся здесь к антирепрессорным последовательностям или антирепрессорным элементам), подходящие для настоящего изобретения, раскрыты в νθ 03/004704, включенной здесь для сведения, и названы здесь последовательностями «БТАВ» (там, где последовательность относится к последовательности БТАВ, то данная последовательность обладает антирепрессорной активностью по изобретению). В качестве неограничивающего примера последовательности из 65 антирепрессорных элементов, названные БТАВ1-65 (см. νθ 03/004704), представлены здесь соответственно последовательностями БЕО Ш Νο: 1-65.
Согласно изобретению функциональный фрагмент или производное данного антирепрессорного элемента рассматривается равноценным указанному антирепрессорному элементу до тех пор, пока он по-прежнему обладает антирепрессорной активностью. Наличие такой антирепрессорной активности может легко проверить специалист в данной области, например, тестом, описанным ниже. Функциональные фрагменты или производные могут легко получить специалисты в области молекулярной биологии, начав с данной антирепрессорной последовательности и осуществив делеции, добавления, замены, инверсии и т.п. (например, см. νθ 03/004704). Функциональный фрагмент или производное также включает ортологи от других видов, которые можно найти с использованием известных антирепрессорных последовательностей, способами, хорошо известными специалистам в данной области (например, см. νθ 03/004704). Следовательно, настоящее изобретение включает фрагменты антирепрессорных последовательностей, где указанные фрагменты по-прежнему обладают антирепрессорной активностью. Для фрагментов данной последовательности процентная идентичность относится к той части стандартной природной последовательности, которая обнаружена во фрагменте. Изобретение также включает последовательности, которые по меньшей мере на 70% идентичны по нуклеотидной последовательности указанным последовательностям, обладающим антирепрессорной активностью, или их функциональным фрагментам, обладающим антирепрессорной активностью, при условии, что данные последовательности, которые по меньшей мере на 70% идентичны, по-прежнему обладают антирепрессорной активностью по изобретению. Предпочтительно указанные последовательности по меньшей мере на 80% идентичны, более предпочтительно по меньшей мере на 90% идентичны и еще более предпочтительно по меньшей мере на 95% идентичны стандартной природной последовательности или ее функциональному фрагменту.
Последовательности, обладающие антирепрессорной активностью по изобретению, можно получить различными способами, включая, но не ограничиваясь клонированием из человеческого генома или из генома другого организма, или, например, амплификацией известных антирепрессорных последовательностей, непосредственно из такого генома при использовании информации о последовательностях, например, ПЦР, или их можно частично или полностью синтезировать химическим путем.
Последовательности, обладающие антирепрессорной активностью, и их функциональные фрагменты или производные здесь определяют структурно по их последовательности и в дополнении определяют функционально в качестве последовательностей, обладающих антирепрессорной активностью, что можно оценить тестом, описанным ниже.
Любая последовательность, обладающая антирепрессорной активностью по настоящему изобретению, должна, по меньшей мере, быть способной сохраняться в следующем функциональном тесте (см. νθ 03/004704, пример 1, включенную здесь для сведения). Человеческие клетки Ц-2 ОБ (АТСС НТВ-96) стабильно трансфицируют плазмидой рТе1-ОГГ (С1оп1есй К1620-А) и нуклеиновой кислотой, кодирующей гибридный белок ЬехА-репрессор, содержащий связывающийся с ДНК домен ЬехА, и кодирующую область НР1 или НРС2 (группа белков Ро1усотЬ дрозофилы, которые подавляют экспрессию гена при связывании с ДНК; тест функционирует с любым гибридным белком) под контролем транскрипционной регуляторной системы Те1-ОГГ (Оо55еп апй Вщагй. 1992). Данные клетки относятся ниже к репортерным клеткам для постановки теста определения антирепрессорной активности. Репортерная плазмида, которая обеспечивает резистентность к гигромицину, содержит последовательность полилинкера, расположенную между четырьмя сайтами оператора ЬехА и промотором БУ40, который контролирует ген резистентности к зеоцину. Последовательность, предназначенную для тестирования на антирепрессорную активность, можно клонировать в указанный полилинкер. Конструирование подходящей репортерной плазмиды, такой как рБе1ес1, описано в примере 1 и на фиг. 1 заявки νθ 00/004704. Репортерную плазмиду трансфицируют в репортерные клетки и клетки культивируют при селекции гигромицином
- 3 011747 (25 мкг/мл; селекция на присутствие репортерной плазмиды) и репрессии тетрациклином (доксициклин, 10 нг/мл; подавляет экспрессию гибридного белка ЬехА-репрессора). Через 1 неделю культивирования в таких условиях концентрация доксициклина снижается до 0,1 нг/мл (или ниже) с индукцией гена ЬехЛрепрессора, и через 2 суток добавляют зеоцин до концентрации 250 мкг/мл. Клетки культивируют в течение 5 недель до тех пор, пока контрольные культуры (трансфицированные пустой репортерной плазмидой, т.е. без клонированной антирепрессорной последовательности в полилинкере) погибают в результате действия зеоцина (в данной контрольной плазмиде промотор 8У40 репрессируется гибридным белком ЬехЛ-репрессором, который связывается с оперативными сайтами ЬехЛ, приводя к недостаточной экспрессии зеоцина в таких клетках для выживания при селекции зеоцином). Последовательность обладает антирепрессорной активностью по настоящему изобретению в тех случаях, когда указанную последовательность клонируют в полилинкер репортерной плазмиды, и репортерные клетки выживают в течение 5 недель отбора в присутствии зеоцина. Клетки из таких колоний могут по-прежнему размножаться на новой среде, содержащей зеоцин, через 5 недель после отбора по зеоцину, в то время как клетки, трансфицированные репортерными плазмидами, без антирепрессорных последовательностей не могут размножаться на новой среде, содержащей зеоцин. Любую последовательность, не способную к такому росту через 5 недель в присутствии зеоцина в данном тесте, не определяют в качестве последовательности, обладающей антирепрессорной активностью, или ее функционального фрагмента или функционального производного по настоящему изобретению. В качестве примера известные ограниченные последовательности, такие как тестированные Уаи бег У1ад е1 а1. (2000), включая 5С5 дрозофилы (Ке11ит апб 8с11еб1. 1991), 5'-Н84 локус птичьего β-глобина (Сйиид е1 а1., 1993, 1997) или области присоединения матрикса (МАК) (РЫ-Уаи е1 а1., 1990), не проходят данный тест.
Кроме того, предпочтительно, чтобы антирепрессорная последовательность или ее функциональный фрагмент или производное придавали большее количество клонов с гиперэкспрессией репортера при фланкировании гена-репортера (например, люциферазы, СРР), который интегрируют в геном клеток и-2 Θ8 или СНО, по сравнению с указанным геном-репортером, который не фланкирован антирепрессорными последовательностями или фланкирован последовательностями с более слабой блокирующей репрессию активностью, такими как 5С5 дрозофилы. Это можно проверить с использованием, например, вектора р8ЭН или аналогичных векторов, как описано в примере 1 и на фиг. 2 заявки νΟ 03/004704.
Антирепрессорные элементы по изобретению могут иметь по меньшей мере одно из трех последствий в отношении продукции белка: 1) они повышают прогнозируемость идентификации линий клетокхозяев, которые экспрессируют белок на промышленно приемлемых уровнях; 2) они приводят к получению линий клеток-хозяев с повышенным выходом белка и/или 3) они приводят к получению линий клеток-хозяев, которые проявляют более стабильную продукцию белка во время продолжительного культивирования. Каждое из данных качеств более подробно обсуждается ниже.
1) Повышенная прогнозируемость: интеграция экспрессирующих трансген кассет может происходить в случайных положениях в геноме клетки-хозяина. Однако большая часть генома представляет транскрипционно «молчащий» гетерохроматин. Когда экспрессирующие кассеты включают антирепрессорные элементы, фланкирующие трансген, то положение интеграции имеет незначительное влияние на экспрессию. Антирепрессорные элементы снижают способность смежного гетерохроматина к «умалчиванию» трансгена. Следовательно, увеличивается относительное количество содержащих трансген клеток-хозяев с экспрессией на приемлемом уровне. Действительно, включение антирепрессорных последовательностей приводит к получению колоний в 10 раз больше, по сравнению с тем же трансгеном без антирепрессорных последовательностей, когда трансфицируется тоже количество ДНК.
2) Выход: оценивали уровень экспрессии белка в первичных популяциях рекомбинантных клетокхозяев непосредственно после интеграции трансгена. Уровень экспрессии у отдельных клонов в популяции варьировал. Однако когда трансгены были защищены антирепрессорными элементами, то вариабельность снижалась. Данная пониженная вариабельность наиболее заметно проявляется в том, что получают меньшее число клонов с низким уровнем экспрессии. Кроме того, популяции с антирепрессорными элементами, как правило, имеют отдельные клоны с очень высокой экспрессией. Данные отдельные клоны с высоким выходом пригодны для продукции белков либо в целях получения, либо в целях изменения фенотипа клетки или организма, включающего такие клетки.
3) Повышенная стабильность: антирепрессорные элементы повышают стабильность трансгенов в линиях рекомбинантных клеток-хозяев обеспечением того, что трансгены не становятся транскрипционно «молчащими» во время продолжительного культивирования. В сравнительных исследованиях было показано, что в условиях, при которых трансгены не защищены антирепрессорными элементами, они прогрессивно «молчат» (5-25 пассажей при культивировании), в то время как защищенные антирепрессорными элементами трансгены продолжают экспрессироваться на высоких уровнях. Это является преимуществом для промышленного получения белковых молекул, во время которого культивирование клеток продолжается в течение продолжительных периодов времени от нескольких недель до многих месяцев. Аналогично, стабильность экспрессии в течение продолжительных периодов времени может быть преимущественной для растений или животных с измененными фенотипами в результате рекомбинантной экспрессии защищенных антирепрессорными элементами трансгенов.
- 4 011747
8ТЛВ67.
Настоящее изобретение относится к новой последовательности, обладающей антирепрессорной активностью, которой дали название 8ТЛК67 (8ЕС ΙΌ Νο: 66). Данная антирепрессорная последовательность уже в большой степени повышает экспрессию, когда ее помещают только слева от промотора, регулирующего экспрессию интересующего гена, как следует из представленных здесь примеров, в то время как оказалось, что известные к настоящему времени сильные антирепрессорные последовательности, такие как 8ТЛК6 или 8ТЛК7, обеспечивают меньшее преимущество в данной конфигурации (они функционируют особенно хорошо, когда фланкируют трансген, т.е. когда находятся как слева, так и справа от трансгена). Следовательно, 8ТЛК67 обеспечивает альтернативу для уже известных антирепрессорных последовательностей, и при расположении слева от промотора, обладает повышенным преимуществом, по сравнению с известными антирепрессорными последовательностями. 8ТЛК67 не является блокатором энхансера в противоположность другим антирепрессорными последовательностям, тестированным на данное свойство (Кетакк с1 а1., 2003), обеспечивая другое отличие между 8ТЛК67 и другими антирепрессорными последовательностями, раскрытыми ранее. Кроме того, 8ТЛК67 может функционировать в двух направлениях, как показано в примере 7. По изобретению наличие последовательности 8ТЛК67 в экспрессирующей кассете обеспечивает повышенную прогнозируемость, и/или выход, и/или стабильность экспрессии. Здесь показано, что 8ТЛК67 является функциональной в комбинации с различными промоторами и в различных клеточных линиях.
Экспрессирующая кассета.
Молекула нуклеиновой кислоты по изобретению, содержащая 8ТЛК67, может находиться в любой форме, например, в виде фрагмента ДНК, необязательно присутствующего в клонирующем векторе, таком как плазмида, предпочтительно экспрессирующем векторе, и ее можно применять, например, для целей клонирования с использованием обычной технологии рекомбинантной ДНК. В предпочтительных вариантах осуществления изобретения нуклеиновая кислота содержит экспрессирующую кассету, которая является пригодной для экспрессии интересующих последовательностей, например, в клеткаххозяевах.
Экспрессирующая кассета, в том смысле, в котором здесь используется данный термин, представляет нуклеиново-кислотную последовательность, содержащую, по меньшей мере, промотор, функционально связанный с последовательностью, экспрессия которой является желательной, где данная последовательность, экспрессия которой является желательной, предпочтительно представляет открытую рамку считывания, кодирующую весь или часть интересующего белка. Предпочтительно промотор представляет гетерологичный промотор по отношению к интересующей нуклеиновой кислоте, в результате чего гетерологичный промотор определяется как промотор, который не является природным промотором указанной интересующей последовательности. Другими словами, осуществляется некоторая форма вмешательства человека, например, молекулярное клонирование, на любой временной точке для получения функциональной комбинации гетерологичного промотора с интересующей нуклеиновой кислотой, и легко понять в данном контексте, что гетерологичный промотор может быть получен из того же или из другого организма, что и интересующая последовательность. Предпочтительно экспрессирующая кассета дополнительно содержит последовательности терминации транскрипции и полиаденилирования. Могут быть также включены другие регуляторные последовательности, такие как энхансеры. Экспрессирующие единицы по изобретению дополнительно содержат по меньшей мере одну антирепрессорную последовательность, такую как 8ТЛК67. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления указанную антирепрессорную последовательность, предпочтительно 8ТЛК67, помещают слева от указанного промотора, предпочтительно так, чтобы присутствовало менее чем 2 т.п.н. между З'-концом антирепрессорной последовательности и началом последовательности промотора. В предпочтительных вариантах осуществления менее чем 1 т.п.н., более предпочтительно менее чем 500 нуклеотидов, еще более предпочтительно менее чем примерно 200, 100, 50 или 30 нуклеотидов находилось между З'-концом антирепрессорной последовательности и началом последовательности промотора. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления антирепрессорную последовательность клонируют непосредственно слева от промотора, что приводит к расстоянию примерно 0-20 нуклеотидов между З'-концом антирепрессорной последовательности и началом последовательности промотора.
Специалистам в данной области хорошо известно, что для получения экспрессии нуклеиновокислотных последовательностей, кодирующих рекомбинантный белок, последовательности, способные регулировать такую экспрессию, могут быть функционально связаны с нуклеиново-кислотными последовательностями, кодирующими белок, давая молекулы рекомбинантной нуклеиновой кислоты, кодирующие рекомбинантный белок в экспрессируемой форме. В основном последовательность промотора помещают слева по отношению к последовательностям, кодирующим интересующий белок. В данной области имеются подходящие экспрессирующие векторы, например, серии векторов ροΌΝΆ и рЕЕ производства ΙηνίΙΐΌβοη. рМ8СУ и рТК-Нуд производства ΒΌ 8с1спсс5. рСМУ-8спр! производства 81га!адепе, и т.д.
В тех случаях, когда последовательность, кодирующую интересующий полипептид, вставляют правильно по отношению к последовательностям, регулирующим транскрипцию и трансляцию кодируемого
- 5 011747 полипептида, то полученная экспрессирующая кассета пригодна для получения интересующего белка, в отношении экспрессии. Последовательности, регулирующие экспрессию, могут включать промоторы, энхансеры и т.п. и их комбинации. Они должны быть способны функционировать в клетке-хозяине, тем самым, регулируя экспрессию нуклеиново-кислотных последовательностей, которые функционально связаны с ними. Специалисты в данной области знают, что можно использовать различные промоторы для обеспечения экспрессии интересующего гена в клетках-хозяевах. Промоторы могут быть конститутивными или регулируемыми, и их можно получить из различных источников, включая вирусы, прокариотические или эукариотические источники, или созданные искусственно. Экспрессия интересующих нуклеиновых кислот может быть с природного промотора или его производного, или с полностью гетерологичного промотора (КаиЕтап, 2000). Некоторые хорошо известные и широко применяемые промоторы для экспрессии в эукариотических клетках включают промоторы, полученные из вирусов, таких как аденовирусы, например, промотор Е1А, промоторы, полученные из цитомегаловирусов (СМУ), таких как немедленный ранний промотор СМУ (ΙΕ) (здесь относится к промотору СМУ) (полученному, например, из ροΩΝΑ. ΙηνίίΓΟβοη). промоторы, полученные из вируса обезьян 40 (8У40) (Эа5 с1 а1., 1985), и т.п. Подходящие промоторы можно также получить из эукариотических клеток, такие как промоторы металлотионеина (МТ), промотор фактора элонгации 1а (ΕΕ-1α) (СШ с1 а1., 2001), промотор убиквитина С или иВ6 (СШ с1 а1., 2001; 8сйотрр с1 а1., 1996), промотор актина, промотор иммуноглобулина, промоторы теплового шока и т. п. Некоторыми предпочтительными промоторами для обеспечения экспрессии в эукариотических клетках, которые являются подходящими промоторами в настоящем изобретении, являются СМУ-промотор, ΕΕ1-альфа-промотор млекопитающих, промотор убиквитина млекопитающих, такой как промотор убиквитина С, или промотор 8У40 (например, полученный из ρΙΚΕδ, номер по каталогу 631605, ΒΌ 8с1епсе5). Тестирование функции промотора и силы промотора является обычной практикой для специалистов в данной области, и в основном оно может, например, включать клонирование тестируемого гена, такого как 1ас2, люциферазы, СЕВ и т.д., за последовательностью промотора, и постановку теста на экспрессию тестируемого гена. Конечно, промоторы можно изменить делецией, добавлением, мутацией его последовательностей и тестировать на функциональность для поиска новых, аттенуированных или усовершенствованных промоторных последовательностей.
Экспрессирующая кассета по изобретению может быть моноцистронной, бицистронной или мультицистронной. Термин «бицистронный ген» определяется как ген, способный обеспечивать молекулу РНК, которая кодирует два белка/полипептида. Термин «моноцистронный ген» определяется как ген, способный обеспечивать молекулу РНК, которая кодирует один белок/полипептид. Термин «мультицистронный ген» определяется как ген, способный обеспечивать молекулу РНК, которая кодирует два или несколько белков/полипептидов и, следовательно, бицистронный ген входит в определение мультицистронного гена. «Ген», в том смысле, в котором используется данный термин в настоящем изобретении, может включать хромосомную ДНК, кДНК, искусственную ДНК, их комбинации и т.п. и также может быть в форме другой нуклеиновой кислоты, например, РНК. В некоторых вариантах осуществления экспрессирующая белок единица включает мультицистронный ген. Единицы, содержащие несколько цистронов, могут транскрибироваться в виде одной мРНК. Трансляцию второй и последующих кодирующих областей, присутствующих в такой РНК, можно обеспечить различными путями, включая применение сайтов реинициации трансляции или внутренних сайтов входа рибосом, из которых последний является предпочтительным. Одно преимущество би- и мультицистронных единиц заключается в простой селекции клонов, экспрессирующих интересующий белок, помещением нуклеиновой кислоты, кодирующей селектируемый маркерный белок справа от нуклеиновой кислоты, кодирующей интересующий белок или полипептид.
Для получения мультимерных белков можно использовать две или несколько экспрессирующих кассет. Было показано, что данный вариант осуществления дает хорошие результаты, например, для экспрессии тяжелой и легкой цепи антител. По изобретению по меньшей мере одна из экспрессирующих кассет и предпочтительно каждая из них должна включать последовательность 8ТАВ. В другом варианте осуществления различные субъединицы или части мультимерного белка находятся в одной экспрессирующей кассете.
Вместо или в дополнение к наличию антирепрессорной последовательности, помещенной слева по отношению к промотору в экспрессирующей кассете, было показано, что очень преимущественно обеспечить антирепрессорную последовательность с обоих концов экспрессирующей кассеты, так, чтобы экспрессирующая кассета, содержащая трансген, была фланкирована двумя антирепрессорными последовательностями, которые в некоторых вариантах осуществления в основном идентичны друг другу. Конечно, это также можно сделать со 8ТАВ67 для получения экспрессирующей кассеты, фланкированной двумя последовательностями 8ТАВ67. Также возможны альтернативные положения одной последовательности 8ТАВ67 в экспрессирующей кассете, например, за трансгеном, предпочтительно за последовательностью терминации транскрипции и сигналом полиаденилирования, притом, что З'-конец последовательности 8ТАВ67 обращен к трансгену.
Экспрессирующая кассета по изобретению может необязательно содержать селективный маркерный ген. Термин «селективный маркер или селектируемый маркер» обычно используют при обращении
- 6 011747 к гену и/или белку, присутствие которых можно детектировать прямо или опосредованно в клетке, например, ген и/или белок, который инактивирует агент селекции и защищает клетку-хозяин от летального или ингибирующего рост действия агента (например, ген и/или белок резистентности к антибиотику). Другая возможность заключается в том, что указанный селективный маркер индуцирует флуоресценцию или окраску (например, белок и производные с зеленой флуоресценцией, люцифераза, 1ас2, щелочная фосфатаза и т.д.). В некоторых вариантах осуществления селективный маркер, используемый для изобретения, представляет собой зеоцин, и для отбора второй экспрессирующей кассеты используют пуромицин. Специалистам в данной области известно, что имеются и можно использовать другие селективные маркеры, например неомицин, бластицидин, пуромицин, блеомицин, гигромицин, бЬГг и т.д.
Термин «селекция» обычно определяется как способ применения селективного маркера/селектируемого маркера и агента селекции для идентификации клеток-хозяев со специфическими генетическими свойствами (например, если клетка-хозяин содержит трансген, интегрированный в ее геном). Специалистам в данной области очевидно понятно, что возможны многочисленные комбинации селективных маркеров. Пример возможного антибиотика приведен выше. Одним наиболее преимущественным антибиотиком является зеоцин, поскольку белок резистентности к зеоцину (зеоцин-К) функционирует при связывании лекарственного препарата и делает его безвредным. Следовательно, легко оттитровать количество препарата, которое приводит к гибели клеток с низким уровнем экспрессии зеоцинаК в то же время позволяя выжить клеткам с высокой экспрессией. Все другие белки резистентности к антибиотикам в основном являются ферментами и, таким образом, действуют каталитически (не в соотношении 1:1 с препаратом). Когда проводят двухстадийный отбор, то, следовательно, предпочтительно использовать белок резистентности к антибиотикам при данном связывающем механизме действия 1:1. Следовательно, антибиотик зеоцин является предпочтительным селективным маркером. Для удобства антибиотик зеоцин в двухстадийном способе отбора можно объединить, например, с пуромицином, бластицидином или гигромицином, которые могут, например, находиться в моноцистронном гене.
Также является возможным объединить селективный антибиотик-маркер с селективным маркером, который обеспечивает индукцию флуоресценции или который обеспечивает окраску. Можно использовать различные маркеры при условии, что они функционируют в используемой клетке.
В некоторых вариантах осуществления экспрессирующая кассета содержит (слабый) внутренний сайт связывания с рибосомой (ΙΚΕ8) в качестве примера сайта инициации трансляции белка с пониженной эффективностью трансляции, например, между открытой рамкой считывания интересующего белка и открытой рамкой считывания селективного маркера. Трансляция белков с элементов ΙΒΕ8 является менее эффективной, по сравнению с кэп-зависимой трансляцией: количество белка с ΣΚΕδ-зависимых открытых рамок считывания (ОКЕ) составляет менее чем 20-50% от количества с первой ОКЕ (ΜίζιΐβΐιΟιί с! а1., 2000). Кроме того, мутация элементов ΙΚΕ8 может ослабить их активность и снизить экспрессию с ΙΚΕδ-зависимых ОКЕ до менее 10% от первой ОКЕ (Εοροζ бе ΟιιίηΙο & Μ;·ιΠίηοζ-δ;·ι1;·ΐ5. 1998; Ксс5 с! а1., 1996). В тех случаях, когда ГКТБ-зависимая ОКЕ кодирует селектируемый маркерный белок, то его относительно низкий уровень трансляции означает, что должны иметь место высокие абсолютные уровни транскрипции для отбора рекомбинантной клетки-хозяина. Следовательно, отобранные изоляты клеткихозяина будут обязательно экспрессировать высокие количества мРНК трансгена. Поскольку рекомбинантный белок транслируется с кэп-зависимой ОКЕ, то он может продуцироваться в избытке с высоким выходом продукта.
Обычные экспрессирующие системы представляют молекулы ДНК в виде рекомбинантной плазмиды или рекомбинантного вирусного генома. Плазмиду или вирусный геном вводят в (эукариотический хозяин) клетки и предпочтительно интегрируют в их геном способами, известными в данной области. В предпочтительных вариантах осуществления в настоящем изобретении также используются данные типы молекул ДНК для доставки ее улучшенной системы для экспрессии трансгена. Предпочтительный вариант осуществления изобретения представляет применение плазмидной ДНК для доставки экспрессирующей системы. Плазмида содержит ряд компонентов: обычные компоненты, известные в данной области, представляют точку начала репликации и селектируемый маркер для размножения плазмиды в бактериальных клетках; селектируемый маркер, который функционирует в эукариотических клетках для идентификации и выделения клеток-хозяев, которые несут интегрированную систему для экспрессии трансгена; нуклеиновую кислоту, кодирующую интересующий белок, транскрипция которой на высоком уровне обеспечивается промотором, который функционирует в эукариотических клетках (например, основной немедленный ранний промотор/энхансер человеческого цитомегаловируса, рСМУ (ВокйагГ с! а1., 1985)); и терминаторы транскрипции (например, сайт полиаденилирования 8У40 (КаиГтап & 8 На гр, 1982)) интересующего трансгена и селектируемого маркера. Используемый вектор может быть любым вектором, который подходит для клонирования ДНК и который можно использовать для транскрипции интересующей нуклеиновой кислоты. В тех случаях, когда используются клетки-хозяева, то предпочтительно, чтобы вектор представлял собой интегрирующий вектор. Альтернативно, вектор может быть эписомально реплицирующимся вектором.
Некоторые неограничивающие схематичные представления возможных конфигураций экспрессирующих кассет представлены на фиг. 1. Это конфигурация ДНК-элементов экспрессирующих кассет в
- 7 011747 плазмиде, а также после интеграции в геном. Конструкция А включает экспрессирующую единицу, которая содержит открытую рамку считывания, кодирующую белок (ген). Это слева от аттенуированного ЕМСУ 1ВЕ8 (Маг11псх-8а1а5 с1 а1., 1999; Μίζιΐβΐιοίιί с1 а1., 2000; Веек с1 а1., 1996) и открытой рамки считывания, кодирующей селектируемый белок-маркер резистентности к зеоцину (зео). Генная кассета имеет терминатор транскрипции 8У40 на ее З'-концах (ΐ). Данный бицистронный трансген транскрибируется на высоком уровне с промотора СМУ. Конструкция В получена из конструкции А, но 8ТАВ67 в данном случае клонирована слева от промотора СМУ. Конструкция С получена из конструкции В, но в данном случае два антирепрессорных элемента (в данном случае 8ТАВ7) клонированы для фланкирования полной кассеты.
Комбинация антирепрессорных последовательностей в экспрессирующей кассете.
Здесь показано, что комбинация первого антирепрессорного элемента, расположенного слева от промотора, и фланкирование экспрессирующей кассеты двумя другими антирепрессорными последовательностями обеспечивают получение очень хороших результатов. В частности, когда используется промотор 8У40 в клетках СНО, то экспрессия уже является очень высокой при отсутствии антирепрессорных последовательностей, но она существенно повышается при помещении 8ТАВ67 слева от указанного промотора и фланкировании целой экспрессирующей кассеты двумя антирепрессорными элементами, такими как δΤΑΒβ, 8ТАВ7 или 8ТАВ40.
Следовательно, целью изобретения является обеспечение молекулы рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащей экспрессирующую кассету, включающую (от 5' к 3'): антирепрессорную последовательность А - промотор - нуклеиновую кислоту, кодирующую интересующий белок - антирепрессорную последовательность В, отличающуюся тем, что указанная экспрессирующая кассета дополнительно включает антирепрессорную последовательность С, расположенную между антирепрессорными последовательностями А и В. В предпочтительном варианте осуществления указанная антирепрессорная последовательность С находится слева от указанного промотора, в конфигурации, представленной выше, под заголовком «экспрессирующая кассета». Экспрессирующая кассета между антирепрессорными последовательностями А и В может дополнительно содержать элементы, описанные выше для экспрессирующих кассет, например, последовательность терминатора транскрипции, сигнал полиаденилирования, селективный маркерный ген, энхансер и т.д., и может быть моноцистронной, бицистронной и мультицистронной, как описано выше.
Две или три антирепрессорных последовательности А, В и С могут быть одинаковыми, или все три могут быть различными. Антирепрессорные последовательности А и В могут быть одинаковыми или различными с антирепрессорной последовательностью С. В некоторых вариантах осуществления антирепрессорные последовательности А и В являются (в основном) идентичными друг другу. В одном варианте осуществления антирепрессорная последовательность С представляет собой 8ТАВ67 или ее функциональный фрагмент или производное.
Антирепрессорные последовательности А и В могут представлять любую антирепрессорную последовательность и в некоторых вариантах осуществления включают одну из последовательностей 8ЕО ГО Νο: 1-65 или их функциональных фрагментов или производных. В некоторых вариантах осуществления экспрессирующая кассета содержит мультицистронный ген, и в предпочтительных вариантах осуществления указанный мультицистронный ген включает последовательность, кодирующую интересующий белок или селективный маркерный ген. Альтернативно, селективный маркерный ген находится под контролем отдельного промотора.
В некоторых вариантах осуществления может присутствовать четвертая антирепрессорная последовательность Ό между 8ТАВ последовательностями А и В. В таком варианте осуществления указанная антирепрессорная последовательность Ό предпочтительно расположена справа от нуклеиновой кислоты, кодирующей интересующий белок. Вновь данная антирепрессорная последовательность Ό может быть той же самой или отличаться от других антирепрессорных последовательностей в молекуле рекомбинантной нуклеиновой кислоты, она может представлять любую антирепрессорную последовательность, и в некоторых вариантах осуществления она выбрана из любой последовательности 8ЕО ГО Νο: 1-65 или их функциональных фрагментов или производных.
Поскольку, по меньшей мере, некоторые антирепрессорные последовательности могут быть направленными (\УО 00/004704), то антирепрессорные последовательности, фланкирующие экспрессирующую кассету (антирепрессорные последовательности А и В), можно преимущественно расположить в противоположном направлении по отношению друг к другу так, чтобы 3'-конец каждой из данных антирепрессорных последовательностей был обращен внутрь к экспрессирующей кассете (и друг к другу). Следовательно, в предпочтительных вариантах осуществления 5'-конец антирепрессорного элемента обращен к ДНК/хроматину, в результате чего его влияние на трансген должно уменьшиться под действием указанного антирепрессорного элемента. Для антирепрессорной последовательности, расположенной слева от промотора в экспрессирующей кассете, 3'-конец обращен к промотору. Последовательности антирепрессорных элементов (8ЕО ГО Νο: 1-66) в перечне последовательностей представлены в направлении от 5' к 3', если не указано иначе.
- 8 011747
Клетки по изобретению.
Молекулы нуклеиновых кислот, содержащие последовательности 8ТАК и/или экспрессирующие кассеты по настоящему изобретению, можно использовать для повышения экспрессии нуклеиновой кислоты, предпочтительно в клетках-хозяевах. Термины «клетка 'V' клетка-хозяин» и «клеточная линия 'V' клеточная линия-хозяин» обычно определяются соответственно, как клетка и ее однородная популяция, которые можно поддерживать в клеточной культуре способами, известными в данной области, и которые обладают способностью экспрессировать гетерологичные или гомологичные белки. Предпочтительно клетка-хозяин по настоящему изобретению представляет эукариотическую клетку, более предпочтительно клетку млекопитающих, такую как клетка грызунов или человеческая клетка, или гибрид различных клеток. В некоторых неограничивающих вариантах осуществления указанная клетка-хозяин представляет клетку остеосаркомы И-2 08, СНО (клетка яичника китайского хомячка), НЕК 293, миеломы ΗπΝ8-Ι, ретинобластомы ^ЕК1-ВЬ-1, ΒΗΚ, νοΓΟ. несекретирующей мышиной миеломы 8р2/0-Ад 14, несекретирующей мышиной миеломы N80, карциномы надпочечников ЫС1-Н295К. или РЕК.С6®.
В некоторых вариантах осуществления изобретения клетка-хозяин является клеткой, экспрессирующей, по меньшей мере, Е1А и предпочтительно также Е1В аденовируса. В качестве неограничивающего примера такая клетка может быть получена, например, из человеческих клеток, например, из почек (например, клетки НЕК 293, см. Сгайат е( а1., 1977), легких (например, А549, см., например, XVО 98/39411) или сетчатки (например, промышленно доступные клетки НЕК под торговым названием РЕК.С6®, см. патент США № 5994128) или из амниоцитов (например, N52. Е6, описанные в патенте США № 6558948) и аналогично из других клеток. Способы получения таких клеток описаны, например, в патентах США № 5994128 и 6558948. Клетки РЕК.С6® для целей настоящего применения означают клетки до или после пассажа или клетки, происходящие слева или справа пассажа, депонированные под номером ЕСАСС № 96022940. Ранее было показано, что такие клетки способны экспрессировать белки на высоком уровне (например, νθ 00/63403 и 1оие8 е( а1., 2003).
Такие клетки-хозяева, экспрессирующие желаемый белок по изобретению, можно получить введением молекулы нуклеиновой кислоты, предпочтительно в форме экспрессирующей кассеты по изобретению, в клетки. В альтернативном варианте осуществления последовательность 8ТАК67 предназначена для целенаправленной интеграции в хромосомную область для повышения экспрессии интересующего гена, который уже был интегрирован в геном, например, в природный ген, необязательно под контролем гетерологичного промотора, который направлен слева от указанного гена для регуляции экспрессии указанного гена. Предпочтительно клетки-хозяева происходят из стабильного клона, который можно отобрать и размножить стандартными способами, известными специалистам в данной области. Культура такого клона способна продуцировать интересующий рекомбинантный белок. Клетки по изобретению предпочтительно способны расти в суспензионной культуре, в не содержащей сыворотку среде.
Интересующий белок по изобретению может представлять любой белок и может быть мономерным белком или мультимерным белком. Мультимерный белок содержит по меньшей мере две полипептидных цепи. Неограничивающие примеры интересующего белка по изобретению представляют ферменты, гормоны, иммуноглобулиновые цепи, терапевтические белки, такие как противоопухолевые белки, белки свертывания крови, такие как фактор VIII, многофункциональные белки, такие как эритропоэтин, диагностические белки или белки либо их фрагменты, пригодные для вакцинации, которые все известны специалистам в данной области.
В некоторых вариантах осуществления экспрессирующая кассета по изобретению кодирует тяжелую и легкую цепь иммуноглобулина или его антигенсвязывающую область, производное и/или аналог. В предпочтительном варианте осуществления обеспечивается единица для экспрессии белка по изобретению, где указанный интересующий белок представляет тяжелую цепь иммуноглобулина. В еще одном предпочтительном варианте осуществления обеспечивается единица для экспрессии белка по изобретению, где указанный интересующий белок представляет легкую цепь иммуноглобулина. В тех случаях, когда данные две единицы для экспрессии белка находятся в одной и той же клетке (хозяине), то имеет место сборка мультимерного белка и конкретнее антитела. Следовательно, в некоторых вариантах осуществления интересующий белок представляет иммуноглобулин, такой как антитело, который является мультимерным белком. Предпочтительно такое антитело является человеческим или гуманизированным антителом. В некоторых вариантах осуществления это 1дС, 1дА или 1дМ антитело. Иммуноглобулин может кодироваться по тяжелой или легкой цепям в различных экспрессирующих кассетах или в одной экспрессирующей кассете, где ген, кодирующий каждую отдельную цепь, каждый может находиться под контролем отдельного промотора в моноцистронных транскрипционных единицах, или альтернативно, обе цепи могут кодироваться мультицистронным геном.
Интересующий белок может происходить из любого источника, и в некоторых вариантах осуществления он представляет белок млекопитающих, искусственный белок (например, гибридный белок или мутантный белок), и предпочтительно он является человеческим белком.
Очевидно, что антирепрессорные последовательности и конфигурации экспрессирующих кассет по настоящему изобретению также можно использовать, когда конечной целью является не продукция бел
- 9 011747 ка, а сама РНК, например, для получения больших количеств РНК из экспрессирующей кассеты, которую можно использовать для регуляции других генов (например, иРНК, антисмысловой РНК), генной терапии, продукции белка в условиях ίη νίίτο и т.д.
Способ получения интересующего белка.
В одном аспекте изобретение относится к способу экспрессии интересующей последовательности, предпочтительно кодирующей интересующий белок, обеспечением клетки-хозяина с молекулой нуклеиновой кислоты или экспрессирующей кассетой по изобретению, культивированием клетки и экспрессией интересующей последовательности.
Термин «экспрессия» обычно используется по отношению к продукции специфического продукта или продуктов РНК, или специфического белка или белков, в клетке. В случае продуктов РНК он относится к способу транскрипции. В случае белковых продуктов он относится к способам транскрипции, трансляции и необязательно посттрансляционных модификаций (например, гликозилирования, образования дисульфидных связей и т.д.). В случае секретируемых белков он относится к способам транскрипции, трансляции и необязательно посттрансляционных модификаций с последующей секрецией.
Введение нуклеиновой кислоты, которая должна экспрессироваться в клетке, можно проводить одним из нескольких методов, которые известны специалистам в данной области, также зависит от формы нуклеиновой кислоты, предназначенной для введения. Указанные методы включают, но не ограничиваются трансфекцией, инфицированием, инъекцией, трансформацией и т.п.
Культивирование клетки проводят для обеспечения метаболизирования, и/или культивирования, и/или деления, и/или продукции интересующих рекомбинантных белков. Это можно осуществлять методами, хорошо известными специалистам в данной области, и это включает, но не ограничивается обеспечением питательных веществ для клетки. Методы включают культивирование при прикреплении к поверхности, культивирование в суспензии или их сочетания. Культивирование можно проводить, например, на чашках, во вращающихся сосудах или в биореакторах с использованием периодических, систем с подпиткой и непрерывных систем, таких как перфузионные системы и т.п. Для достижения крупномасштабной (непрерывной) продукции рекомбинантных белков при культивировании клеток предпочтительно в данной области иметь клетки, способные расти в суспензии, и предпочтительно иметь клетки, способные культивироваться при отсутствии сыворотки крови от животных или человека или компонентов сыворотки крови от животных или человека.
Условия для культивирования или размножения клеток (см., например, Т1ззие Си11иге, Лсабеиис Ргезз, Кгизе апб Ра1егзоп, еббогз (1973)) и условия для экспрессии рекомбинантного продукта известны специалистам в данной области. В основном принципы, протоколы и практические методики для получения максимальной продуктивности культур клеток млекопитающих можно найти в Маттайап Се11 Вю1ес1то1оду: а Ргасбса1 Лрргоасй (М. ВиНег, еб., 1КЬ Ргезз, 1991).
В предпочтительном варианте осуществления экспрессированный белок собирают (выделяют) либо из клеток, либо из культуральной среды, либо из обоих. Затем его можно дополнительно очистить с использованием известных методов, например, фильтрования, колоночной хроматографии и т.д., методами, обычно хорошо известными специалистам в данной области.
Новый способ селекции.
В настоящем изобретении раскрывается новый способ получения клеток-хозяев, экспрессирующих два интересующих полипептида, где данный способ обеспечивает удивительно хорошие результаты в том плане, что практически не появляются или отсутствуют колонии без применения антирепрессорных последовательностей, в то время как наличие антирепрессорной последовательности приводит к появлению клонов, выдерживающих отбор, и данные клоны в основном экспрессируют два интересующих полипептида на высоком уровне (пример 7, фиг. 11). Следовательно, изобретение относится к способу получения клетки-хозяина, экспрессирующей два интересующих полипептида, включающему: а) введение в клетку-хозяин одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты, где молекула или молекулы нуклеиновой кислоты вместе содержат: ί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей первый интересующий полипептид и первый селектируемый маркерный ген; и ίί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей второй интересующий полипептид и второй селектируемый маркерный ген; и ίίί) по меньшей мере одну антирепрессорную последовательность, выбранную из группы, состоящей из: (а) любой из последовательностей 8ЕО Ш Ыо: 1-66; (Ь) фрагментов любой из последовательностей 8ЕС Ш Ыо: 1-66, где указанные фрагменты обладают антирепрессорной активностью; (с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны (а) или (Ь), и обладают антирепрессорной активностью; и (б) комплементарной последовательности к (а)-(с); Ь) селекцию клетки-хозяина, по существу, одновременным отбором на экспрессию указанного первого и второго селектируемых маркерных генов. Отобранные клетки-хозяева можно преимущественно использовать для экспрессии указанных двух полипептидов культивированием указанных отобранных клетокхозяев. В одном варианте осуществления две молекулы нуклеиновой кислоты, одну, содержащую ί), и вторую, содержащую ίί), используют для введения в клетку-хозяин. В данном варианте осуществления каждая молекула нуклеиновой кислоты предпочтительно содержит по меньшей мере одну указанную антирепрессорную последовательность. В другом варианте осуществления используют одну молекулу
- 10 011747 нуклеиновой кислоты, содержащую ί) и ίί), которая затем должна включать по меньшей мере одну указанную антирепрессорную последовательность. Одно преимущество обеспечения кодирующих последовательностей для обоих полипептидов в одной молекуле нуклеиновой кислоты заключается в том, что необходимо получение только одной нуклеиновой кислоты перед введением нуклеиновой кислоты в клетки. Кроме того, в таком варианте осуществления одного события интеграции достаточно для кодирующих последовательностей обоих пептидов, в результате чего устраняется вероятность того, что нуклеиновая кислота, кодирующая первый полипептид, интегрируется в другом положении или с другим числом копий, по сравнению с таковой, кодирующей второй полипептид. В предпочтительных вариантах осуществления указанные два полипептида могут составлять часть мультимерного белка, такого как иммуноглобулин. Следовательно, способ особенно подходит для экспрессии антител. Два промотора могут быть одинаковыми или различными и могут представлять любые промоторы, описанные выше. В тех случаях, когда используется вариант осуществления, в котором одна молекула нуклеиновой кислоты содержит и ί) и ίί), то направление двух транскрипционных единиц в одной молекуле нуклеиновой кислоты может, например, быть одинаковым или противоположным направлением при обращении друг к другу, или противоположным направлением, каждое наружу. В последнем случае антирепрессорную последовательность можно поместить между двумя промоторами (см., например, фиг. 11В). Одной подходящей антирепрессорной последовательностью для данного аспекта изобретения является последовательность 8ЕО ΙΌ Νο: 66 (см. пример 7), но также могут функционировать другие антирепрессорные последовательности. Это могут легко проверить специалисты в данной области с использованием данного раскрытия и, следовательно, также применение других антирепрессорных последовательностей по данному аспекту изобретения включается в объем изобретения. Кроме того, антирепрессорные последовательности можно добавить для фланкирования одной или обоих транскрипционных единиц. Каждый из маркерных генов должен быть различным, и может, например, быть выбран из маркерных генов, описанных выше. В некоторых вариантах осуществления одним селектируемым маркером является зеоцин, и другой селектируемый маркер представляет, например, пуромицин. Однако ясно, что можно использовать другие комбинации, и все они находятся в объеме данного аспекта изобретения. Экспрессия маркеров предпочтительно должна зависеть от экспрессии интересующих полипептидов. Этого можно достичь связыванием экспрессии маркерных генов с таковой у интересующих полипептидов, например, при использовании мультицистронных генов, например, последовательностей ΙΚΕ8, как уже обсуждалось выше. «По существу, одновременный» отбор означает, что по меньшей мере часть времени, предпочтительно по меньшей мере в течение 1 суток, более предпочтительно по меньшей мере 2 суток, еще более предпочтительно по меньшей мере 5 суток присутствуют оба агента селекции, чего можно достичь обеспечением обоих агентов селекции, добавленных в культуральную среду в одно и то же время или добавлением культуральной среды, содержащей оба агента селекции (в частности, пример 7). Очевидно понятно, что добавление второго агента селекции только через несколько часов или суток в среду, в которой уже находится первый агент селекции, также будет приводить к «по существу, одновременному» отбору в значении изобретения. Данная ситуация отличается от ситуации, при которой клетки вначале отбираются с помощью первого агента селекции, и при образовании колоний клетки отбираются на новой среде, в которую внесен второй агент селекции и не добавлен первый агент селекции (последовательный отбор, в частности, пример 5 и АО 03/106684). При селекции на оба селектируемых маркера, по существу, одновременно здесь с удивлением раскрывается, что достигается быстрый и эффективный отбор, посредством чего удаляются многие клоны с низкой продуктивностью, приводя к существенному снижению рабочей нагрузки для поиска клона с желаемыми экспрессирующими характеристиками. Это является особенно преимущественным для биотехнологической промышленности, когда необходимо подвергнуть скринингу многие, обычно сотни или даже тысячи колоний, прежде чем будет идентифицирован желаемый клон, обладающий экспрессией на высоком уровне.
Кроме того, система обеспечивает возможность тестировать фрагменты антирепрессорных элементов, по меньшей мере, 8ТЛК67, но также и других антирепрессорных последовательностей, когда они функционируют в данном режиме, на функциональность. Следовательно, данный простой скрининг, который обеспечивает почти или даже все черные и белые различия во многих случаях, будет вносить свой вклад в идентификацию функциональных фрагментов или производных антирепрессорных последовательностей и/или способствовать характеристике новых антирепрессорных последовательностей. Скрининг даже можно использовать для поиска новых антирепрессорных и/или повышающих экспрессию последовательностей (поскольку данный тип скрининга в буквальном смысле не предназначен для выявления антирепрессорной активности, а в большей степени повышающей экспрессию активности, также является возможным, что будет установлена последовательность с последней, но не первой активностью). Следовательно, другой аспект настоящего изобретения относится к способу идентификации антирепрессорных и/или повышающих экспрессию последовательностей, или их функционального фрагмента или производного, включающему: а) введение в клетку-хозяин одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты, где молекула или молекулы нуклеиновой кислоты вместе содержат: ί) промотор, функционально связанный с первым селектируемым маркерным геном; и ίί) промотор, функционально связанный со вторым селектируемым маркерным геном; и ίίί) по меньшей мере одну последовательность
- 11 011747 для тестирования на антирепрессорную и/или повышающую экспрессию активность; Ь) селекцию клетки-хозяина, по существу, одновременным отбором на экспрессию указанного первого и второго селектируемых маркерных генов. Клетки-хозяева, которые проходят данный скрининг, вероятно, содержат функциональный антирепрессорный и/или повышающий экспрессию элемент. Затем это можно легко анализировать дополнительно, например, определив его последовательность и/или подвергнув его другим функциональным тестам на антирепрессорную активность, как описано выше. В одном варианте осуществления как ί), так и ίί) находятся в одной молекуле нуклеиновой кислоты, например, с расходящимися промоторами (первый и второй селектируемые маркерные гены обращены наружу), между которыми можно клонировать тестируемую последовательность для анализа. Предпочтительно указанные селектируемые маркерные гены не экспрессируются на высоком уровне, например, при использовании относительно слабых промоторов, регулирующих селектируемые маркерные гены, такие относительно слабые промоторы известны, и/или их могут идентифицировать с использованием обычных методов специалисты в данной области, или, например, при использовании сильного промотора для транскрипции и 1КЕБ, предпочтительно относительно слабой 1КЕБ, как описано выше, для трансляции генамаркера. Маркерные гены также можно преимущественно поместить справа от нуклеиново-кислотных последовательностей, кодирующих полипептид и связанных с его экспрессией, в мультицистронном гене, например, с помощью 1КЕБ (в частности, пример 7, фиг. 11 для возможной конфигурации). Вновь такие полипептиды могут представлять интересующие полипептиды, так что получают непосредственно пригодные клоны для экспрессии указанных интересующих полипептидов, но также в целях скрининга можно легко количественно определить экспрессию маркеров, например, СЕР или его производного, БЕАР, ΙποΖ, люциферазы и т.д. В такой комбинации можно непосредственно количественно определить экспрессию полипептидов для отбора антирепрессорных и/или повышающих экспрессию элементов или их фрагментов, которые обеспечивают достаточное количество колоний во время одновременного отбора, и также обеспечивают транскрипцию на высоком уровне. Когда «произвольная» нуклеиновая кислота (т.е. нуклеиновая кислота, о которой еще не известно, что она обладает антирепрессорной или повышающей экспрессию активностью), например, в форме фрагментов генома, используется в качестве последовательности для тестирования на антирепрессорную или повышающую экспрессию активность, то можно найти новые антирепрессорные и/или повышающие экспрессию последовательности. В тех случаях, когда тестируют известные антирепрессорные последовательности, то данный тест можно использовать для их дополнительной характеристики. Когда тестированию подвергаются фрагменты известных антирепрессорных последовательностей, то тест будет обеспечивать функциональные фрагменты таких известных антирепрессорных последовательностей.
В практике данного изобретения будут применяться, если не указано иначе, обычные методы иммунологии, молекулярной биологии, микробиологии, клеточной биологии и рекомбинантной ДНК, которые знакомы специалистам в данной области. См., например, БатЬгоок, ΕγιΙκοΠ апб Машабк, Мо1еси1аг С1ошпд: А ЬаЬога1огу Мапиа1, 2пб ебйюп, 1989; СиггеШ РгоЮсоЕ ίη Мо1еси1аг Вю1оду, Аи8иЬе1 ЕМ, е1 а1., еб§, 1987; Не кепек МеШобк ш Епхуто1оду (Асабетк Ргекк, 1пс.); РСК2: А ргасПса! Арртоасй, МасРйегаоп МЕ Напъ ΒΌ, Тау1ог СК, еб§, 1995; Ап11Ьоб1е§: А ЬаЬога1огу Мапиа1, Наботе апб Ьапе, еб§, 1988.
Изобретение дополнительно поясняется в последующих примерах. Примеры никоим образом не ограничивают изобретение. Они только служат для пояснения изобретения.
Примеры.
Пример 1. Конструирование векторов БТАК67.
Выделяли новую антирепрессорную последовательность с использованием генетического скрининга, как описано в заявке XVО 03/004704, и данную новую последовательность обозначали как БТАК67 (БЕО ГО Ыо: 66). Анализировали влияние БТАК67 на экспрессию трансгенов в клеточных линиях млекопитающих. Авторы описывают конструирование различных конструкций.
Материалы и методы.
Получали три плазмиды (фиг. 1):
A) СМУ-б2ЕСЕР-пе8^ео (СМУ контроль),
B) БТАК67-СМУ-б2ЕСЕР-пе8^ео (СМУ-БТАК67),
C) БТАК7-БТАК67-СМУ-б2ЕСЕР-1ге8^ео-БТАЯ7 (СМУ-БТАК67 7/7).
Конструирование конструкции А описано ниже. Плазмиду рб2ЕСЕР (ОоШесй 6010-1) модифицировали вставкой линкера в сайт Βδίνΐ с получением рб2ЕСЕР-йпк. Линкер, полученный отжигом олигонуклеотидов СТАСССАТАТСАСАТСТТТААТТААС (БЕО ГО Ыо: 67) и СТАССТТААТТАААСАТСТСАТАТ (БЕО ГО Ыо: 68), давал сайты для рестриктаз Раб, Вд111 и ВсоКУ. Это приводило к получению сайта множественного клонирования МСБ11 для вставки элементов БТАК. Затем использовали праймеры САТСАСАТСТССССССССАТТАААТССТСТССССССТТТСССТСАТСАССС (БЕО ГО Ыо: 69) и АСССССАТСССААТСТАТТТАСАААААТАААСАААТАСССС (БЕО ГО Ыо: 70) для амплификации области размером 0,37 т.п.н. из рб2ЕСЕР, которую вставляли в сайт ВдШ плазмиды р1КЕБ (С1оп1есН 6028-1) с получением р1КЕБ-81иЕ. Это приводило к введению сайтов для рестриктаз А§с1 и Бтеа1 в МСБ1, и действует в качестве «лишнего фрагмента» для того, чтобы избежать потенциального взаимодействия
- 12 011747 между элементами 8ТАВ и смежными промоторами. рГВЕЗ-зШГ расщепляли с помощью ВдШ и Езр1 для высвобождения фрагмента ДНК, состоящего из «лишнего» фрагмента, промотора СМУ, элемента ГВЕ8 (фланкированного сайтами множественного клонирования МС8 А и МС8 В) и сигнала полиаденилирования 8У40. Данный фрагмент лигировали с остовом вектора рб2Е0ЕР-йпк, полученного расщеплением ВашК1 и 81и1 с получением р1ВЕ8-йпк.
Открытую рамку считывания гена резистентности к зеоцину вставляли в сайты ВатА1/ЫоН справа от рГВЕ8 следующим образом: ОВР гена резистентности к зеоцину амплифицировали ПЦР с использованием праймеров 0АТС66АТССТТС6АААТ66ССАА6ТТ6АССА6Т0С (8ЕО ΙΌ Νο: 71) и А06С6С66СС6СААТТСТСА6ТССТ0СТССТС (8ЕО ΙΌ Νο: 72) из плазмиды рСМУ//со Дпуйгодеп, номер по каталогу У50120), расщепленной Ваш\У1 и Νοΐ1, и лигировали с ΒαΜΗ/ΝοΙΙ-расщепленной р1ВЕ8-йпк с получением р1ВЕ8-йпк-хео. ОВР репортера б2ЕСЕР вводили в р1ВЕ8-йпк-хео амплификацией рб2ЕСЕР (С1оп1есй 6010-1) с использованием праймеров 0АТС6ААТТСТС6С6ААТ66Т6А6САА6СА6АТССТ6АА0 (8ЕО ΙΌ №: 73) и А06С6ААТТСАСС66Т6ТТТАААСТТАСАСССАСТС6Т6СА66СТ6СССА60 (8ЕО ΙΌ №: 74) и вставляли ЕсоВБрасщепленную кассету б2ЕСЕР в сайт ΕсοВI в плазмиде рIВΕ8-йηк-ζеο. Это давало конструкцию А, СМУ-б2ЕСЕР-[РЕ8-2ео (СМУ контроль).
8ТАВ67 клонировали слева от промотора СМУ в сайт Азе1 (примерно 15 н.т., остающихся между 8ТАВ67 и промотором). Это давало конструкцию В, 8ΤАВ67-СМУ-б2Ε6ЕР-IВΕ8-Ζеο (СМУ-8ТАВ67).
8ТАВ67 также тестировали в условиях кассеты, которая также содержит 8ТАВ7 (8ЕЦ ΙΌ №: Ι)1, клонированную непосредственно в 5'-сайты 8ай и ХЬа1 и З'-сайты ВдШ и Раб для фланкирования полной кассеты со 8ТАВ7. Это была конструкция С (СМУ-8ТАВ67 7/7).
Пример 2. 8ТАВ67 повышает уровень экспрессии с промоторов СМУ, ЕГ1ос и ИВ6 в стабильно трансфицированных клетках β6 СНО.
Авторы тестировали, насколько присутствие 8ТАВ67, смежной с промоторами СМУ, ЕГ1а и ИВ6, оказывает влияние на уровень экспрессии данных промоторов в клетках СНО. Для данной цели использовали конструкции А и В (фиг. 1), описанные в примере 1, модифицированные для соответствующих промоторов:
1) СМУ-б2ЕСЕР-йе5^ео (СМУ контроль),
2) 8ТАВ67-СМУ-б2Е6ЕР-1гез-2ео (СМУ-8ТАВ67),
3) ЕЕЕ/.-б2ЕСЕР-йе5^ео (ЕЕ1а контроль),
4) 8ТАВ67-ЕЕ110С-б2ЕОЕР-пе5-2ео (ЕЕ110С-8ТАВ67),
5) иВ6-б2Е6ЕР-1ге5-2ео (ИВ6 контроль),
6) 8ТАВ67-иВ6-б2ЕОГР-1ге5-2ео (ИВ6-8ТАВ67).
Материалы и методы.
Промоторы ИВ6 и ЕЕ1а заменяли на промотор СМУ в плазмидах, представленных на фиг. 1. Промотор ИВ6 клонировали следующим образом. «Лишний» фрагмент ДНК размером 0,37 т.п.н. из плазмиды рб2Е0ЕР амплифицировали ПЦР, как описано в примере 1, с использованием праймеров с последовательностями 8ЕО ΙΌ №: 69 и 70. Полученный «лишний» фрагмент ДНК клонировали в сайт ВдШ плазмиды риВ6/У5-Н1з [Шуйгодеп У250-20] с получением риВ6-51иГ. Из риВ6-йиГ фрагмент Азс1-8ас1 клонировали в СМУ-б2Ε6ЕР-IВΕ8-Ζеο, из которой вырезали промотор СМУ.
Промотор ЕЕ1а амплифицировали ПЦР с рЕЕЕ/./У5-НБ [Шуйгодеп У920-20] в качестве матрицы с использованием праймеров 0АТС66С6С6ССАТТТАААТСС6АААА6Т6ССАССТ6АС0 (8ЕО ΙΌ №: 79) и А06С666АСССССТСАС6АСАССТ6АААТ66АА0 (8ЕО ΙΌ №: 80). Фрагмент ПЦР клонировали в сайты Азс1 и РриМI СМУ-б2ЕОЕР-1ге5-2ео, из которой удаляли промотор СМУ.
Линию клеток яичника китайского хомячка СНО-К1 (АТСС ССЬ-61) культивировали в среде НАМ8-Е12 + 10% фетальной бычьей сыворотки, содержащей 2 мМ глютамина, 100 Е/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°С/5% СО2. Клетки трансфицировали плазмидами с использованием реагента 8ирегЕес1 (Ц^ОЕЩ, как описано производителем. Кратко, клетки высевали в сосуды для культивирования и культивировали в течение ночи до 70-90% слияния. Реагент 8ирегЕес1 объединяли с плазмидной ДНК в соотношении 6 мкл на мкг (например, на чашку Петри диаметром 10 см 20 мкг ДНК и 120 мкл 8ирегЕес1) и добавляли к клеткам. После инкубации в течение ночи смесь для трансфекции заменяли на новую порцию среды и трансфицированные клетки инкубировали дополнительно. После культивирования в течение ночи клетки обрабатывали трипсином и высевали в новые сосуды для культивирования с новой порцией среды. После инкубации еще в течение ночи добавляли зеоцин в концентрации 50 мкг/мл и клетки дополнительно культивировали. Еще через 3 суток среду заменяли на новую порцию среды, содержащую зеоцин (100 мкг/мл) и культивировали дополнительно. Когда отдельные колонии становились видимыми (примерно через 10 суток после трансфекции) среду удаляли и заменяли новой порцией среды без зеоцина. Отдельные клоны выделяли и переносили в 24-луночные планшеты в среду без зеоциона. Через 1 сутки после выделения колоний в среду добавляли зеоцин. Экспрессию генарепортера б2ЕОЕР оценивали примерно через 3 недели после трансфекции.
Уровень экспрессии б2ЕОЕР в колониях определяли через 2-недельные периоды времени. Через
- 13 011747 первые 2 недели после трансфекции, когда проводили первое определение Й2ЕСЕР, колонии культивировали в среде без зеоцина или других антибиотиков. Таким образом, продолжали в оставшееся время опыта.
Результаты.
На фиг. 2 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержит 8ТАВ67, клонированную слева от промотора СМУ, приводила к появлению ряда колоний, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка Й2ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без 8ТАВ67, СМУ контроль. Среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных СМУ контрольной плазмидой, составляло 34 при определении через 25 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в данных 10 колониях снижалось до 13, указывая на то, что экспрессия не является стабильной в течение времени. Для сравнения среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой 8ТЛВ67-СМУ, равнялось 42 при определении через 25 суток и 32 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, через 60 суток после трансфекции конструкция 8ТЛВ67, содержащая СМУ, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором СМУ, в 2,5 раза выше в стабильно трансфицированных клонах. Важно, что через 25 суток после трансфекции, после первого определения, давление селекции устраняли культивированием колоний в среде без зеоцина. Следовательно, колонии, содержащие конструкцию 8ТЛР67. являются более стабильными в течение времени при отсутствии давления селекции, по сравнению с колониями, которые не включают конструкцию 8ТЛР67.
На фиг. 3 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержит 8ТЛВ67, клонированную слева от ЕЕ1СС-промотора, приводила к появлению ряда колоний СНО, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка Й2ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без 8ТЛВ67, ЕЕ1а контроль. Среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных контрольной плазмидой ЕЕ1а, составляло 31 при определении через 25 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в данных 10 колониях составляло 26. Для сравнения среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой ЕЕ1а-8ТЛВ67, равнялось 60 при определении через 25 суток и 76 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, в обоих случаях через 25 и 60 суток после трансфекции конструкция 8ТЛВ67, содержащая ЕЕ1а, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором ЕЕ1а, в 2,9 раза выше в стабильно трансфицированных клонах.
На фиг. 4 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержит 8ТЛВ67, клонированную слева от иВ6-промотора, приводила к появлению ряда колоний СНО, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка Й2ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без 8ТЛВ67, ИВ6 контроль. Среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных ИВ6 контрольной плазмидой, составляло 51 при определении через 25 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в данных 10 колониях составляло 29, указывая на то, что экспрессия не была стабильной в течение времени. Для сравнения среднее значение сигнала Й2ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой ИВ6-8ТАК67, равнялось 218 при определении через 25 суток и 224 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, через 25 суток после трансфекции конструкция 8ТЛВ67, содержащая ИВ6, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором ИВ6, в 4,3 раза выше в стабильно трансфицированных клонах. Через 60 суток данный коэффициент составлял 7,7 за счет нестабильности экспрессии в контрольных колониях и стабильности экспрессии в колониях ИВ6-8ТАК67. Важно, что через 25 суток после трансфекции, после первого определения, давление селекции устраняли культивированием колоний в среде без зеоцина. Следовательно, колонии, содержащие конструкцию 8ТЛВ67, являются более стабильными в течение времени при отсутствии давления селекции, по сравнению с колониями, которые не включают конструкцию 8ТЛВ67.
В заключение, 8ТЛР67 повышает экспрессию с трех различных несвязанных промоторов.
Пример 3. 8ТЛР67 повышает уровень экспрессии с промоторов СМУ, ЕГ1а и ИВ6 в стабильно трансфицированных клетках РЕР.С6.
Авторы тестировали, насколько присутствие 8ТАВ67, смежной с промоторами СМУ, ЕГ1а и ИВ6, оказывает влияние на уровень экспрессии данных промоторов в другом типе клеток, чем СНО, а именно клетках РЕР.С6. Использовали те же конструкции, что в примере 1.
Материалы и методы.
Трансфекция, культивирование и анализ клеток РЕР.С6.
Клетки РЕР.С’в® культивировали в среде ИМЕМ + пиридоксин + 9% фетальной бычьей сыворотки (без инактивации тепловой обработкой), 8,9 мМ МдС12, 100 Е/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°С/СО2. Клетки трансфицировали плазмидами с использованием реагента Ь1роГес1атше 2000 (1иуйгодеи), как описано производителем. Кратко, клетки высевали в 6-луночные планшеты и культивировали в течение ночи до 70-90% слияния. Реагент ЫроГес1атше объединяли с плазмидной ДНК при соотношении 15 мкл на 3 мкг (например, на чашку Петри диаметром 10 см 20 мкг ДНК и 120 мкл Ь1
- 14 011747 роГесЕшипе) и добавляли через 30 мин инкубации при 25°С к клеткам. После инкубации в течение ночи смесь для трансфекции заменяли новой порцией среды и трансфицированные клетки инкубировали дополнительно. После культивирования в течение ночи клетки обрабатывали трипсином и высевали (в разведениях 1:15, 1:30, 1:60, 1:120) на новые чашки Петри (90 мм) с новой порцией среды с добавлением зеоцина в концентрации 100 мкг/мл и клетки дополнительно культивировали. Когда отдельные колонии становились видимыми, отдельные клоны выделяли соскабливанием и переносили в 24-луночные планшеты в среду с зеоцином. Когда рост достигал ~70% слияния, то клетки переносили в 6-луночные планшеты. Стабильные колонии культивировали в течение 2 недель в 6-луночных планшетах перед определением сигнала 62ЕСЕР на флоуцитометре ХЬ-МСЬ Весктап СоиИет. Среднее значение сигнала принимали в качестве показателя уровня экспрессии 62ЕСЕР. Второй раз колонии оценивали через 2 недели. Затем колонии дополнительно культивировали в отсутствие антибиотика.
Результаты.
На фиг. 5 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержала 8ТАК.67, клонированную слева от промотора СМУ, приводила к появлению ряда колоний РЕК..С6, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка 62ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без БТЛР67. СМУ контроль. Среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных контрольной плазмидой СМУ, составляло 37 при определении через 30 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала 62ЕСЕР в данных 10 колониях снижалось до 14, указывая на то, что экспрессия не была стабильной в течение времени. Для сравнения среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой 8ТАК.67-СМУ, равнялось 101 при определении через 30 суток и 45 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, через 60 суток после трансфекции конструкция 8ТАК.67, содержащая СМУ, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором СМУ, в 3,2 раза выше в стабильно трансфицированных клонах.
На фиг. 6 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержала 8ТАК.67, клонированную слева от промотора ЕЕ1ОС, приводила к появлению ряда колоний РЕВ..С6, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка 62ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без 8ТАЕ67, ЕЕ1а контроль. Среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных контрольной плазмидой ЕЕ1а, составляло 5 при определении через 30 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала 62ЕСЕР в данных 10 колониях равнялось 6. Для сравнения среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой ЕЕ1С!-8ТАЕ67, равнялось 25 при определении через 30 суток и 20 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, в обоих случаях через 30 и 60 суток после трансфекции конструкция 8ТАЕ67, содержащая ЕЕ1а, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором ЕЕ1а, в 4 раза выше в стабильно трансфицированных клонах.
На фиг. 7 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержала 8ТАК.67, клонированную слева от промотора ИВ6, приводила к появлению ряда колоний РЕР.С6, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка 62ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без 8ТАВ.67, ИВ6 контроль. Среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных ИВ6 контрольной плазмидой, составляло 4 при определении через 30 суток после трансфекции. Через 60 суток после трансфекции среднее значение сигнала 62 ЕС ЕР в данных 10 колониях равнялось 2. Для сравнения среднее значение сигнала 62ЕСЕР в 10 колониях, трансфицированных плазмидой ИВ6-8ТАВ.67, равнялось 27 при определении через 30 суток и 18 при определении через 60 суток после трансфекции. Следовательно, в обоих случаях через 30 и 60 суток после трансфекции конструкция 8ТАК.67, содержащая ИВ6, обеспечивала уровень экспрессии репортерного белка, регулируемой промотором ИВ6, в 7-9 раза выше в стабильно трансфицированных клонах.
Следовательно, помещение 8ТАР67 слева от промотора приводит к достоверно более высоким уровням экспрессии белка, по сравнению с конструкциями без 8ТАР67 также и в клетках РЕР.С6. Следовательно, 8ТАР67 функционирует в различных несвязанных типах клеток.
Пример 4. Новая конфигурация 8ТАР67 в комбинации с другими антирепрессорными элементами для усиления промотора 8У40 в клетках СНО.
Авторы тестировали, насколько присутствие 8ТАВ.67, смежной с промотором 8У40, оказывает влияние на уровень экспрессии данного промотора, одной или в комбинации с другим антирепрессорным элементом, в данном примере 8ТАВ.7. Для этой цели используемыми конструкциями (см. фиг. 8) являются:
1) 8У40-62ЕСЕР-1ге5-2ео (8У40 контроль),
2) 8ТАВ67-8У40-62ЕСЕР-1ге5-2ео (8У40-8ТАЕ67),
3) 8ТАВ7-8У40-62ЕСЕР-1ге5-2ео-8ТАВ7 (8У40-8ТАЕ7/7),
4) 8ТАВ7-8ТАВ67-8У40-62ЕСЕР-1ге5-2ео-8ТАВ7 (8У40-8ТАЕ67 7/7).
Материалы и методы.
Промотор 8У40 амплифицировали ПЦР с р1РЕ8 в качестве матрицы с использованием праймеров ТТССТТССССССССССССАССАССАТССССТСАААТААССТСТСАААСАСС (8ЕО ГО \о: 81) и
- 15 011747
ТТССТТСССАССТСААССТТТТТССААААСССТАССССТССААААААСССТССТС (8ЕС) ΙΌ Νο: 82). Фрагмент ПЦР клонировали в сайты А§с1 и 8аб плазмиды СМУ-б2Е6ЕР-1КЕ8-2ео, из которой удаляли промотор СМУ.
Клетки СНО трансфицировали, выделяли колонии, размножали и анализировали, как описано в примере 2.
Результаты.
На фиг. 8 показано, что трансфекция конструкцией, которая содержала 8ТАК67, клонированную слева от промотора 8У40 (8У40-8ТАК67) или 8ТАК7, клонированную для фланкирования полной конструкции (8У40-8ТАК 7/7), не приводила к появлению колоний СНО, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни белка б2ЕСЕР, по сравнению с «пустым» контролем без антирепрессорных элементов (8У40 контроль). Среднее значение сигнала б2ЕСЕР в 18 колониях, трансфицированных контрольной плазмидой 8У40, составляло 86 при определении через 40 суток после трансфекции. Для сравнения среднее значение сигнала б2ЕСЕР в 18 колониях, трансфицированных плазмидой 8У40-8ТАК67, равнялось 82 при определении через 40 суток и среднее значение сигнала б2ЕСЕР в 18 колониях, трансфицированных плазмидой 8У40-8ТАК 7/7, равнялось 91 при определении через 40 суток. Следовательно, не наблюдали достоверного эффекта данных антирепрессорных элементов в отношении промотора 8У40 в клетках СНО.
Оказалось, что уровень экспрессии с промотора 8У40 в данных клетках уже было довольно высоким, и даже более высоким, по сравнению с наблюдаемым с промотором СМУ, который считается очень сильным промотором. Данная высокая фоновая экспрессия при отсутствии антирепрессорного элемента с использованием промотора 8У40 в клетках СНО может объяснить тот факт, что отсутствовал достоверный эффект одной 8ТАР67 или 8ТАК7, фланкирующей трансген.
Однако среднее значение сигнала б2ЕСЕР в 18 колониях, трансфицированных плазмидой 8У408ТАР67 7/7, составляло 209 при оценке колоний через 40 суток, что соответствует коэффициенту в 2,4 раза выше, по сравнению со средним значением для 18 контрольных колоний (86). Следовательно, когда элемент 8ТАК67 использовали в комбинации с другим антирепрессорным элементом, то это приводило к появлению ряда стабильно трансфицированных колоний СНО, которые показывали достоверно более высокие уровни экспрессии б2Е6ЕР.
Следовательно, в данной новой конфигурации (5' - последовательность 8ТАР А - последовательность 8ТАК С промотор - нуклеиновая кислота, кодирующая интересующий белок - последовательность 8ТАК В - 3', где в данном примере последовательности 8ТАК А и В представляют последовательность 8ТАК 7, и последовательность С является 8ТАК67), оказалось, что элементы 8ТАК функционируют даже лучше, чем раскрытые к настоящему времени конфигурации.
Авторы проводили опыты, в которых фланкирующие элементы 8ТАК7 заменяли на фланкирующие элементы 8ТАР6 (8ЕЦ ΙΌ Νο: 6) или на фланкирующие элементы 8ТАР4 (8ЕЦ ΙΌ Νο: 4) в комбинации со 8ТАК67, расположенной слева от промотора 8У40 (соответственно 8У40-8ТАК67 6/6 и 8У40-8ТАК.67 4/4 при использовании той же номенклатуры, представленной выше), и также наблюдали повышенную экспрессию с данными комбинациями. Это доказывает, что фланкирующие элементы 8ТАК7 можно заменять на другие последовательности 8ТАК, и при этом по-прежнему наблюдают улучшение новых экспрессирующих кассет с последовательностями 8ТАК.
Пример 5. Комбинация 8ТАК67 и 8ТАР7 повышает уровни регулируемой ИВ6 экспрессии антител в стабильно трансфицированных клетках СНО.
В примере 4 авторы показали, что комбинация 8ТАК67 и 8ТАК7 повышала уровни экспрессии белка б2ЕСЕР в клетках СНО. В данном случае авторы исследовали, насколько комбинацию 8ТАР67 и 8ТАК7 можно использовать для получения антител. Авторы выбрали антитела против молекулы ЕрСАМ (НиН е! а1., 1999) в качестве тестируемого белка и использовали промотор ИВ6.
Материалы и методы.
Плазмиды.
кДНК тяжелой цепи (НС-ЕрСАМ) клонировали в конструкцию, включающую промотор ИВ6. НСЕрСАМ сочетали с геном резистентности к зеоцину с помощью последовательности 1РЕ8. кДНК легкой цепи (ЬС-ЕрСАМ) также клонировали в конструкцию, включающую промотор ИВ6. ЬС-ЕрСАМ сочетали с геном резистентности к пуромицину с помощью последовательности 1РЕ8. Вместе данные две плазмиды представляли контроль ИВ6 (НС+ЬС) (фиг. 9).
Для анализа эффектов 8ТАР67 и 8ТАК.7, 8ТАР67 клонировали в обе конструкции НС+ЬС слева от промотора ИВ6. 8ТАК7 клонировали с фланкированием полной кассеты на обоих 5'- и 3'-концах (фиг. 9). Данные две плазмиды представляли 8ТАК7-8ТАК67-иВ6 (НС+ЬС) 8ТАР7.
Трансфекция и культивирование клеток СНО.
Линию клеток яичника китайского хомячка СНО-К1 (АТТС ССЬ-61) трансфицировали и культивировали, как описано в примере 2, с использованием зеоцина (100 мкг/мл) и пуромицина (2,5 мкг/мл) для селекции. Через 1 сутки после трансфекции в культуральную среду добавляли зеоцин. Когда первые колонии становились видимыми (примерно через 7 суток после добавления зеоцина) культуральную среду удаляли и заменяли на культуральную среду, содержащую пуромицин. Примерно через 7 суток колонии
- 16 011747 выделяли и переносили в 24-луночные планшеты в культуральную среду только с зеомицином.
Результаты.
На фиг. 9 показано, что трансфекция конструкциями антител, которые содержат 8ТАК67, клонированную слева от промотора ИВ6, и два элемента 8ТАК67, клонированные для фланкирования полных кассет, приводила к появлению ряда колоний СНО, которые экспрессируют достоверно более высокие уровни антитела ЕрСАМ (по данным ЕЫ8А с использованием античеловеческого ΙβΟ антитела), по сравнению с «пустым» контролем без 8ТАК.67 и 8ТАК.7. ИВ6 (НС+ЬС) контроль. Среднее значение продукции ЕрСАМ в 18 колониях, трансфицированных контрольной плазмидой ИВ6 (НС+ЬС), составляло 2,7 пкг/клетку/сутки при определении через 25 суток после трансфекции. Селективные агенты, зеоцин и пуромицин, удаляли через 25 суток. Через 45 суток после трансфекции среднее значение продукции ЕрСАМ в данных 18 колониях равнялось 2,7 пкг/клетку/сутки. Для сравнения среднее значение сигнала продукции ЕрСАМ в 18 колониях, трансфицированных плазмидой 8ТАК.7-8ТАК.67-ЬВ6 (НС+ЬС8ТАК.7), равнялось 6,7 при определении через 25 суток и 7,7 пкг/клетку/сутки при определении через 45 суток после трансфекции. Следовательно, в обоих случаях через 30 и 45 суток после трансфекции конструкция 8ТАВ67/8ТАЕ7, содержащая ИВ6, обеспечивала уровень экспрессии ЕрСАМ, регулируемой промотором ИВ6, в 2,5-2,9 раза выше в стабильно трансфицированных клонах СНО.
Следовательно, помещение 8ТАК.67 слева от промотора и двух элементов 8ТАК7 с фланкированием кассет приводило к достоверно более высокому уровню экспрессии антитела ЕрСАМ в клетках СНО, по сравнению с конструкциями без 8ТАК.67/8ТАК.7.
Пример 6. 8ТАК67 не является блокатором энхансера, в то время как 8ТАК6 и 8ТАК7 - являются.
Все известные к настоящему времени элементы 8ТАК, которые были тестированы на данное свойство, включая 8ТАВ6 и 8ТАЕ7, являются блокаторами энхансеров (АО 03/004704, К^акк с1 а1., 2003). Блокирующую энхансер активность тестировали, поместив элемент 8ТАК между сильным энхансером и промотором. В данном случае авторы тестировали, насколько также 8ТАК.67 является блокатором энхансера.
Материалы и методы.
Ген 62ЕСЕР амплифицировали ПЦР с использованием праймеров ТТ66ТТ66ТСАТ6ААТ66Т6А6САА666С6А66А6СТ6ТТС (8ЕС) ΙΌ Νο: 75) и АТТСТСТА6АСТАСАСАТТ6АТССТА6СА6АА6САС (8 ЕС) ΙΌ Νο: 76) и клонировали в плазмиду р6Ь3-промотор (Рготеда) с использованием сайтов рестрикции Ναοί и ХЬа1 для замены гена люциферазы с получением плазмиды рСЬ3-промотор-СЕР. Линкер, полученный отжигом олигонуклеотидов С6АТАТСТТ66А6АТСТАСТА6Т66С6С6ССТТ666СТА6СТ (8ЕС) ΙΌ Νο: 77) и 6АТСА6СТА6СССАА66С6С6ССАСТА6ТА6АТСТССАА6АТАТС6А6СТ (8 ЕС) ΙΌ Νο: 78), клонировали в сайты 8аб и ВдШ для получения сайтов множественного клонирования. Первоначальный сайт ВдШ разрушали при лигировании линкера с получением нового уникального сайта ВдШ внутри ДНКлинкера. 8У40-энхансер вырезали из плазмиды р6Ь3-Ьаяс (Рготеда) с использованием ВкаЫ и ВатШ и клонировали в рСЬ3-линкер-промотор-СЕР с использованием сайтов ЕотРУ и ВдШ с получением плазмиды р6Ь3-энхансер-промотор-6ЕР. Элемент 8ТАЕ40 (8ЕЦ ΙΌ Νο: 40) помещали слева от 8У40энхансера с использованием сайтов Крп1 и 8аб для предупреждения воздействия энхансера на последовательности, находящиеся слева. Наконец, антирепрессорные элементы 8ТАК6, 8ТАК7 и 8ТАК67 помещали между 8У40-энхансером и минимальным 8У40-промотором с использованием сайтов рестрикции 8ре1 и Акс1.
Трансфекция и культивирование клеток СНО.
Линию клеток яичника китайского хомячка СНО-К1 (АТСС ССЬ-61) трансфицировали, как описано в примере 2. Через 1 сутки после трансфекции определяли уровни 62ЕСЕР на флоуцитометре Еркк ХЬ (Весктап СонИе!·).
Результаты.
На фиг. 10 показано, что 8ТАК67 не является блокатором энхансера, в то время как 8ТАК.6 и 8ТАК.7 действуют в качестве блокаторов энхансера в том же тесте. 8ТАК.6, 8ТАК7 и 8ТАК67 клонировали между 8У40-энхансером и минимальным 8У40-промотором слева от гена 62ЕСЕР. В том случае, когда не клонировали элемента 8ТАВ между энхансером и промотором, то имела место сильная активация транскрипции (произвольно оцененная как 100%). Когда 8ТАК6 или 8ТАК7 помещали между энхансером и промотором, то транскрипция снижалась до фонового уровня, указывая на то, что 8ТАК6 и 8ТАК.7 являются сильными блокаторами энхансеров. В противоположность, когда клонировали 8ТАК.67 между энхансером и промотором, то относительный уровень транскрипции составлял по-прежнему 80% от контроля, указывая на то, что 8ТАК67 не является эффективным блокатором энхансера в противоположность 8ТАК6 и 8ТАК7, а также другим антирепрессорным элементам, описанным ранее (АО 03/004704, К^акк е! а1., 2003).
Пример 7. 8ТАК67 повышает уровень экспрессии антитела, регулируемой ИВ6 и СМУ, в стабильно трансфицированных клетках СНО.
В примере 5 авторы показали, что комбинация 8ТАК.67 и 8ТАК.7 повышала уровень экспрессии антитела ЕрСАМ в клетках СНО, в условиях двух различных плазмид, которые содержали тяжелую и лег
- 17 011747 кую цепи. В данном примере авторы тестировали, насколько 8ТАК67 можно использовать для продукции антитела ЕрСАМ, когда обе, тяжелую и легкую, цепи помещают в одну плазмиду. Авторы использовали одновременную селекцию для каждого селектируемого маркера.
Материалы и методы.
Плазмиды.
кДНК тяжелой цепи (НС-ЕрСАМ) находилась под контролем промотора ИВ6, и ее сочетали с геном устойчивости к зеоцину с помощью последовательности 1КЕ8. кДНК легкой цепи (ЬС-ЕрСАМ) находилась под контролем промотора СМV, и ее сочетали с геном устойчивости к пуромицину с помощью последовательности 1КЕ8. По существу, эти конструкции представляют таковые, использованные в примере 5. Данные две экспрессирующие кассеты помещали в одну плазмиду таким образом, что транскрипция двух экспрессирующих единиц шла в противоположных направлениях. В контрольной плазмиде промоторы иВ6 и СМV были разделены «лишним фрагментом» размером 500 п.н. (ЕрСАМ контроль) (фиг. 10). В другой плазмиде 8ТАК.67 помещали между промоторами ИВР и СМV (ЕрСАМ 8ТАК67) (фиг. 10).
Трансфекция и культивирование клеток СНО.
Линию клеток яичника китайского хомячка СНО-ΚΙ (АТСС ССЬ-61) трансфицировали и культивировали, как описано в примере 2, с использованием зеоцина (100 мкг/мл) и пуромицина (2,5 мкг/мл) для селекции. В примере 5 использовали последовательную селекцию для обоих селективных маркеров. В противоположность в данном случае оба селективных маркера присутствовали в культуральной среде одновременно. Через 1 сутки после трансфекции зеоцин и пуромицин вносили в культуральную среду. Селективная среда присутствовала до выделения колоний (примерно через 14 суток после трансфекции). Затем колонии выделяли и переносили в 24-луночные планшеты, клетки культивировали в присутствии зеоцина и пуромицина.
Результаты.
На фиг. 11 показано, что трансфекция конструкцией антитела, которая содержит 8ТАК67, клонированную между промоторами υΒβ и СМV, приводила к появлению ряда колоний СНО, которые экспрессируют антитело ЕрСАМ (по данным ЕЬ18А с использованием человеческого 1дС антитела). Среднее значение продукции ЕрСАМ в 19 колониях, трансфицированных плазмидой ЕрСАМ 8ТАК67, составляло 9,8 пкг/клетку/сутки при определении через 25 суток после трансфекции.
В противоположность с удивлением было установлено, что колонии не выдерживали трансфекцию контрольной плазмидой ЕрСАМ. Когда проводили селекцию с одним зеоцином или пуромицином, то контрольные колонии ЕрСАМ выживали. Однако когда давление селекции увеличивали при помещении давления селекции на обе тяжелую и легкую цепи, то в данных условиях выживали только колонии, которые содержали 8ТАК67 в трансфицированной плазмиде.
Результаты также показывают, что включение 8ТАК67 оказывает положительное действие на два промотора, промотора υΒ6 и СМV, которые помещают слева и справа от одного элемента 8ТАК67. Это указывает на то, что 8ТАК67 может функционировать в двух направлениях.
Различие между контрольной плазмидой ЕрСАМ и плазмидой ЕрСАМ 8ТАК67 является чернымбелым в том плане, что только трансфекция ЕрСАМ 8ТАК.67 приводит к появлению колоний при высоком давлении селекции. Это открывает возможность для применения данной плазмидной конфигурации для идентификации области в 8ТАК67, которая является ответственной за опосредование данного эффекта. Более мелкие, перекрывающиеся участки 8ТАК67 помещают между промоторами υΒ6 и СМV, регулирующими молекулу ЕрСАМ. Когда участок 8ТАК67 является функциональным, то колонии будут выживать, когда оба, зеоцин и пуромицин, одновременно используются в качестве селективного агента. Когда участок 8ТАК67 не является функциональным, то колонии не будут выживать в аналогичных условиях селекции.
Следовательно, помещение 8ТАК67 слева от промотора приводит к достоверно более высокому уровню экспрессии антитела ЕрСАМ в клетках СНО, по сравнению с конструкциями без таких антирепрессорных элементов. Аналогичный опыт проводили с промотором 8ν40 для регуляции экспрессии тяжелой и легкой цепей анти-ЕрСАМ-антитела. В других опытах 8ТАК67 заменяли на другие последовательности 8ТАК. В дополнительных опытах поменяли ориентацию двух экспрессирующих единиц, кодирующих тяжелую и легкую цепи, таким образом, что обе находились в одном направлении. В другом опыте экспрессирующие единицы для тяжелой и легкой цепей помещают соответственно в различных молекулах нуклеиновой кислоты (как представлено в примере 5) и полученные клоны одновременно отбирают на оба селектируемых маркера. В еще одном опыте варьировал тип клетки-хозяина. Сделаны комбинации данных вариаций.
Описание фигур
Фиг. 1. Схема изобретения.
А) Бицистронный ген, содержащий (в направлении от 5' к 3') трансген (кодирующий, например, ген 62ЕСБР), 1КЕ8 и селектируемый маркер (зео, придающий резистентность к зеоцину) под контролем промотора СМV. Экспрессирующая единица содержит терминатор транскрипции 8ν40 на ее 3'-конце (ΐ). Конструкция названа СМV-ά2ЕСΕР-^^е5-Ζео (ί,’Μν контроль).
- 18 011747
B) Конструкция, как на А, но последовательность БТАК67 клонирована слева от промотора СМУ. Конструкция названа БТАК67-СМУ-й2Е6РР-1тек-2ео (СМУ-БТАК67).
C) Конструкция, как на В, но слева и справа элементы БТАК.67 клонированы для фланкирования полной конструкции. Конструкция названа БТАК7-БТАК67-СМУ-й2Е6РР-1тек-2ео-БТАК7 (СМУБТАК67 7/7).
Фиг. 2. БТАК.67 повышает регулируемую СМУ экспрессию й2Е6РР в клетках СНО. Построен график зависимости среднего значения сигнала й2Е6РР для 10 независимых стабильных колоний для указанных конструкций в клетках СНО. А) СМУ контроль; В) БТАК67-СМУ. Х(10): средние значения уровня экспрессии й2Е6РР для 10 колоний. Подробности см. в примере 2.
Фиг. 3. БТАК67 повышает регулируемую ЕР1а экспрессию й2Е6РР в клетках СНО. То же самое, что на фиг. 2, но с промотором ЕР1а. А) ЕР1а контроль; В) БТАК67-ЕР1а.
Фиг. 4. БТАК67 повышает регулируемую ИВ6 экспрессию й2Е6РР в клетках СНО. То же самое, что на фиг. 2 и 3, но с промотором ИВ6. А) ИВ6 контроль; В) БТАК67-ИВ6.
Фиг. 5. БТАК67 повышает регулируемую СМУ экспрессию й2Е6РР в клетках РЕК.С6. То же самое, что на фиг. 2, но в клетках РЕК.С6. А) СМУ контроль; В) БТАК67-СМУ.
Фиг. 6. БТАК67 повышает регулируемую ЕР1а экспрессию й2Е6РР в клетках РЕК.С6. То же самое, что на фиг. 3, но в клетках РЕК.С6. А) ЕР1а контроль; В) БТАК67-ЕР1а.
Фиг. 7. БТАК67 повышает регулируемую ИВ6 экспрессию й2Е6РР в клетках РЕК.С’в. То же самое, что на фиг. 4, но в клетках РЕК.С6. А) υΚβ контроль; В) БТАК67-ИВ6.
Фиг. 8. БТАК67 повышает регулируемую БУ40 экспрессию й2Е6РР в клетках СНО-К1 в комбинации с другим элементом БТАК. То же самое, что на фиг. 2, но с использованием промотора БУ40 в клетках СНО и указанных конструкций. Построен график зависимости среднего значения сигнала й2Е6РР для 18-20 независимых стабильных колоний через 60 суток после трансфекции. А) БУ40 контроль, БУ40БТАК67, БУ40-БТАК7/7; В) БУ40 контроль и БУ40-БТАК67 7/7. Подробности см. в примере 4.
Фиг. 9. БТАК67 повышает регулируемую ИВ6 экспрессию антитела ЕрСАМ в клетках СНО-К1. Подробности см. в примере 5. А) Конструкции без элементов БТАК; В) конструкции со БТАК67 слева от промотора и фланкирующими элементами БТАК7. Концентрация анти-ЕрСАМ-антитела представлена в виде пкг/клетку/сутки. Х(18): среднее значение уровня продукции для 18 колоний.
Фиг. 10. БТАК67 не является блокатором энхансера, в то время как БТАК6 и БТАК7 являются. Подробности см. в примере 6.
Фиг. 11. БТАК67 повышает регулируемую ИВ6 и СМУ экспрессию антитела в стабильно трансфицированных клетках СНО. Подробности см. в примере 7. А) Одна молекула ДНК, содержащая тяжелую цепь (НС) и легкую цепь (ЕС) анти-ЕрСАМ-антитела, каждая за промотором, и каждая связанная с различным селектируемым маркерным геном (использовали одновременную селекцию на оба маркера): конструкция без элементов БТАК. Колонии не обнаружены. В) Та же конструкция со БТАК67 между двумя промоторами. Концентрация анти-ЕрСАМ-антитела в пкг/клетку/сутки. Х(19): среднее значение уровня продукции для 19 колоний.
Источники литературы
ВокРаП, М., VеЬе^, Р., 1аРп, 6., ПотксР-Нак1ет, К., Р1ескепк(ет, В., апй БсРаГГпег, ν. (1985) А уету к(гопд епРапсег 1к 1оса(ей иркРеат оГ ап 1ттей1а(е еаг1у депе оГ Ритап су(отеда1оу1гик Се11 41, 521-530.
СРипд кН., νΗίΝΒν М., апй Ре1кепГе1й 6. (1993) А 5' е1етеп( оГ (Ре сРккеп Ье(а-д1оЬт йотат кегуек ак ап тки1а(от ш Ритап егу(Рто1й се11к апй рго1ес1к адатк( рок1Роп еГГес( ίπ ЭгокорРИа. Се11 74: 505-514.
СРипд кН., Ве11 А.С., Ре1кепГе1й 6. (1997). СРагасЮпхаРоп оГ (Ре сЫскеп Ье(а-д1оЬт тки1а(от. Ргос №аР Асай Бс1 ИБА 94: 575-580.
Иак, 6.С., №уодГ Б.К., апй Ба1хтап, №.Р. (1985) БУ40 ргото(егк апй (Реи геди1аРоп Ргод №ис1ею Ас1й Кек Мо1 Бю1 32, 217-236.
6111 И.К., Бту(Р Б.Е., боййагй С.А., РРРд1е 1.А., Шддтк С.Р., Со11ейде ν.Η., апй Нуйе Б.С. (2001) 1псгеакей регкМепсе оГ 1ипд депе ехргеккюп иктд р1акт1йк соп(шшпд (Ре иЫдшРп С ог е1опдаРоп ГасЮг 1а ргото1ег. 6епе ТРегару 8: 1539-1546.
боккеп М., апй Вщагй Н. (1992) Т1дР1 соп(го1 оГ депе ехргеккюп т таттаРап се11к Ьу (еРасусРпетекропыуе ртото(етк. Ргос №111 Асай Бс1 ИБА 89: 5547-5551.
бгаРат Р.О., БтПеу Р, Кикке11 ν. апй №аип К. (1977). СРагас(ег1к(1ск оГ а Ритап се11 Рпе (гапкГогтей Ьу Э№А Ггот Ритап айепоуиик 1уре 5. Г 6еп. У1го1. 36, 59-72.
Ни1к 6.А., Неупеп 1.А.Р.М., Сиото М.Е., КошпдкЬетдег РС., V^едтаπ Ь., Вое1 Е., уап йег УииткЕйе УРек А-К, Ьоукоп Б.А.Р, Не1ГРсР ν., уап Вегде Непедои^еп 6.Р., уап Меует М., йе КгшГ Р, ЬодГепЬетд Т. (1999). А тесотЬтапр Ги11у Ритап топос1опа1 апРЬойу \\'РР апШитог асруру сопк1гис1ей Ггот рРадей1кр1ауей апРЬойу Ггадтеп(к. №11 Вю(есРпо1. 17, 27 6-281.
1опек Ό., Кгоок Ν., Апета К., Уап МопКой В., Уооук А., Уап Эег Ктаа(к Б., Уап Эег Не1т Е., БтРк Б., БсРоШеп Р, Втои^ег К., ЬадеттеегГ Р., Уап Вегке1 Р., Орк(е1(еп Ό.-Ρ, ЬодГепЬетд Т., Вой! А. (2003) Н1дР1еуе1 ехргеккюп оГ тесотЫпап! 1д6 т(Ре Ритап се11 Рпе РЕК.С6. Вю(есРпо1. Ргод. 19: 163-168.
- 19 011747
КаиГтап, ВЛ. (2000) ОуеМете оГ уес(ог бек1дп Гог таттаНап депе ехргеккюп Мо1 Вю!есНпо1 16, 151160.
КаиГтап, В.Е. апб 8Нагр, Р.А. (1982) Сопк!гисйоп оГ а тоби1аг бЛубгоГо1а!е гебис!аке с^NΑ депе: апа1ук1к оГ к1дпа1к ий^еб Гог еГйаеп! ехргекк1оп Мо1 Се11 Вю1 2, 1304-1319.
Ке11ит В., апб 8сНеб1 Р. (1991) А рок1йоп-еГГес! аккау Гог Ьоипбапек оГ Ыдйег огбег сНготокота1 ботатк. Се11 64: 941-950.
Ктеакк Т.Н., Вате!! Р., Нетпка ^., 81егкта Т., 8етеа11 В.С., 8а!уп Ό.Ρ., Вгопк ЕЕ., уап В1ок1апб В., Ктеактап Р., КгискеЬегд А.Ь., Ке1бег А., О11е А.Р. (2003) 1бепййсайоп оГ апй-гергекког е1етепГк Ла! сопГег 1пд11 апб к!аЬ1е рго!ет ргобисйоп т таттайап се11к. №! Вю!есНпо1 21, 553-558. Егга!ит ш: №! В1о!есНпо1 21, 822 (2003).
РЫ-Уап Ь., Уоп Кге1к ЕР., Ок!ег!ад ^., апб 8!га!1тд \У.Н. (1990) ТНе сЫскеп 1укοζуте 5' тайгх а!!асНтеп! гедюп тсгеакек !гапкспр!юп Ггот а Не!его1одоик ргото!ег т Йе!его1одоик се11к апб батрепк рок1Йоп еГГес!к оп (Не ехргеккюп оГ !гапкГес!еб депек. Мо1. Се11. Вю1. 10: 2302-2307.
^οреζ бе ОитЮ, 8., апб Ма^!^пеζ-8а1ак, Е. (1998) Рагате!егк тПиепстд !гапк1а!юпа1 еГйаепсу ш арН!коу1гик 1ВЕ8-Ьакеб Ыакйошс ехргеккюп уес!огк Сепе 217, 51-56.
Магйп, Ό.Ι., апб ^Н1!е1ате, Е. (1996) ТНе уадапек оГ уапедайпд !гапкдепек Вюеккаук 18, 919-923.
Ма^!^пеζ-8а1ак, Е. (1999) 1п!ета1 пЬокоте еп!гу кНе Ью1оду апб 1!к ике т ехргеккюп уес!огк Сигг Орт Вю!есНпо1 10, 458-464.
МсВитеу, М.^., Ма1, Т., Уапд, X., апб .Тагбте, К. (2002) Еу1бепсе Гог гереа!-тбисеб депе кбепстд т си1!игеб Маттайап се11к: тасйуайоп оГ !апбет гереа!к оГ !гапкГес!еб депек Ехр Се11 Век 274, 1-8.
М1д11ассю, А.В., Вепдга, С., Ьтд, I., Р1, ^., Ь1, С., 2епд, 8., Кеккт!ере, М., ^Нйпеу, В., 83110^, М., М1д11ассю, С., апб Тиап, Ό. (2000) 8!аЬ1е апб ипк!аЬ1е !гапкдепе т!едга!юп кйек т !Не Нитап депоте: ехйпс!юп оГ (Не Сгееп Е1иогексеп! Рго!ет !гапкдепе т К562 се11к Сепе 256, 197-214.
М^ζидисН^. Н., Хи, Ζ., 1кНл-^а!аЬе, А., исН1ба, Е., апб Науакатеа, Т. (2000) 1ВЕ8-берепбеп! кесопб депе ехргеккюп 1к к1дтйсап!1у 1отеег !Нап сар-берепбеп! йгк! депе ехргеккюп т а Ыс1к!гошс уес!ог Мо1 ТНег 1, 376-382.
Веек, 8., Соо!е, 1., 8!аЬ1ек, 1., Сообкоп, 8., Натк, 8., апб Ьее, М.С. (1996) ВШкВошс уес!ог Гог !Не сгеайоп оГ к!аЬ1е таттайап се11 йпек, !На! ргеб1крокек а11 апйЬюйс-гек1к!ап! се11к !о ехргекк гесотЬтап! рго!ет Вю!есНтдиек 20, 102-104, 106, 108-110.
8сйогрр, М., 1адег, В., 8сйе11апбег, К., 8сНепкеГ 1., ^адпег, Е.Е., ХУеШеи Н., апб Апде1, Р. (1996) ТНе Нитап υΗίςυίΙίπ С ргото!ег б1гес!к ЫдН иМцийоик ехргеккюп оГ !гапкдепек т писе ШОею Ас1бк Век 24, 1787-8.
8!гиЛепЬегдег, К., Вог!й, Ν., Кипег!, В., 8!е1пЕе11пег, ^., апб Кайпдег, Н. (1999) СНапдек биппд киЬс1опе беуе1ортеп! апб адетд оГ Нитап апйЬобу-ргобистд гесотЬтап! СНО се11к 1 Вю!есНпо1 69, 215-26.
Уап бег У1ад, 1., беп В1ааитееп, ЕЬ., 8етеа1!, В.С., уап ОпеГ В., апб О!!е, А.Р. (2000) Тгапкспрйопа1 гергеккюп теб1а!еб Ьу ро1усотЬ дгоир рго!етк апб о!Нег сНготайп-аккос1а!еб гергеккогк 1к ке1есйуе1у Ь1оскеб Ьу тки1а!огк 1 Вю1 СНет 215, 697-704.
^Нйе1ате, Е., 8и!Нег1апб, Н., Кеагпк, М., Могдап, Н., ХУеаутд, Ь., апб Сатск, Ό. (2001) Ер1депейс еГГес!к оп !гапкдепе ехргеккюп МеЛобк Мо1 Вю1 158, 351-68.
- 20 011747
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> Скготабепьсз Β.ν.
Οίΐβ, Ατϊβ Р.
Киакз, ТЪеойогиз Н.Л.
ЗеиаАЛ, КгсЬагЦ С.А.В.
дап В1ок1апс1, Кьк <120> Новая последовательность для повышения экспрессии нуклеиновой кислоты <130> 0111 ИО 00 ОЯО <150> РСТ/ЕР2004/051405 <151> 2004-07-08 <160 82 <170> Ра6еп61п легзьоп 3.2 <210> 1 <2И> 749 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еакиге <223> последовательность ЗТАК1 <400> 1
а1:дсдд6ддд | ддсдсдссад | адасбсд^дд | дабссббддс | Ъбддабдббб | дда+сЪСЬсб | 60 |
дадСбдссбд | бдссдсдааа | дасаддсаса | ЛЫсСдакСа | ддссбд^даа | дссСссЬдда | 120 |
ддассабсбс | аббаадасда | Ьддбаббдда | дддададбса | садааадаас | бдбддссссг | 180 |
сссбсасСдс | аааасддаад | кдакббЬакб | ГЪаакдддад | 1кддаа1.а1д | £дадддс1дс | 240 |
аддаассадб | сЪсссбссЧ: | с£5дд£Ъдда | ааадсбдддд | сбддсск.сад | адасаддк-Ц | 300 |
£111:ддссссд | скдддскддд | садбсбадбс | дасссбббдб | адаскдкдса | сассссбада | 360 |
ададсаасГа | сссс£а£аса | ссаддсГддс | гсаадрдааа | ддддсгскдд | дсЬссадСсО | 420 |
ддаааа£с£д | дкдкссбддд | дасс£с0дд! | сОГдсЮскс | бссбссссОд | сасбддсОск | 480 |
дддбдсбба*: | сбсОдсадаа | дс£кс1сдс1 | адсааассса | саббсадсдс | ссОдбадсОд | 540 |
аасасадсас | ааааадссс£ | адада11сааа | адсаЪЪадка | 1дддсад1Лд | адсдддаддв | 600 |
даа1а66£аа | сдсб£к1дб£ | саисаакаас | ксдЫддсП | £дасс1дбск | даасаадюд | 660 |
адсаабаадд | бдааабдсад | дЬсасадсдЪ | сбаасаааба | бдаааабдбд | бабаббсасс | 720 |
ссддксксса | дссддсдсдс | саддсбссс | 749 |
- 21 011747 <210> 2 <211> 883 <212> ДНК <213> Ното зараепз <220>
<221> т1зс_£еа£иге <223> последовательность 3ΤΆΡ.2.
<400> 2
дддДдсДДсс | ДдааДДсДДс | ссДдадаадд | аДддДддссд | дДааддДссд | ДдДаддДддд | 60 |
дДдсддсДсс | ссаддссссд | дсссдДддДд | дДддссдсДд | сссадсддсс | сддсассссс | 120 |
аДадДссаДд | дсдсссдадд | садсдДдддд | даддДдадДД | адассааада | дддсДддссс | 180 |
ддадДДдсДс | аДдддсДсса | саДадсДдсс | ссссасдаад | асддддсДДс | ссДдДаДдДд | 240 |
ДддддДссса | ДадсДдссдД | ДдсссДдсад | дссаДдадсд | ДдсдддДсаД | адДсдддддД | 300 |
дсссссДдсд | сссдссссДд | ссдссдДдДа | дсдсДДсДдД | дддддДддсд | ддддДдсдса | 360 |
дсДдддсадд | дасдсадддД | аддаддсддд | дддсадсссд | ДаддДасссД | дддддддсДД | 420 |
ддадаадддс | дддддсдасД | ддддсДсаДа | сдддасдсДд | ДДдассадсд | аа^дса^ада | 480 |
дДДсадаДад | ссассддсДс | сддддддсас | ддддсДдсда | сДДддадасД | ддссссссда | 540 |
ДдасдДДадс | аДдсссДддс | ссДДсДдаДс | сДДДДДдДас | ДДсаДдсддс | да££сСддаа | 600 |
ссадаДсДДд | аДсДддсдсД | садДдаддДД | садсадаДДд | дссаДсДсса | сссддсдсдд | 660 |
ссддсасадд | ДадсддДдда | адДддаасДс | ДДДсДссадс | ДссассадсД | дсдсдсГсд£ | 720 |
дДаддссдДд | сдсдсдсдсД | Дддасдаадс | сДдссссддс | дддсДсДДдД | сдссадсдса | 780 |
дсДДДсдссД | дсдаддасад | адададдаад | адсддсдДса | ддддсДдссд | сддссссдсс | 840 |
садссссДда | сссадсссдд | ссссДссДДс | сассаддссс | саа | 883 |
<210> 3 <211> 2126 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еа£иге <223> последовательность ЗТАВЗ <400>3 аДсДсдадДа сДдаааДадд ад£ааа£с£д аададсаааД аадаДдадсс адаааасса£60 даааадааса дддасДасса дДДдаДДсса сааддасаДД сссааддДда дааддссаДа120
ДассДссасД ассДдаасса аДДсДсДдДа ДдсадаДДДа дсааддДДаД ааддДадсаа180
- 22 011747
аадаРСадас | ссаадааааР | ададаасРРс | сааРссадРа | ааааРсаРад | саааРРРаТР | 240 |
даРдаРааса | аРРдРсРсса | ааддаасаад | дсададРсдР | дсРадсадад | даадсасд1д | 300 |
адсРдаааас | адссаааРср | дсРРРдРРРР | саРдасасад | дадсарааад | Расасассас | 360 |
саасРдасск | аРРааддсРд | РддРааассд | аРРсаРадад | ададдРРсРа | ааРасаРРдд | 420 |
РсссРсасад | дсааасРдса | дррсдсрссд | аасдРадРас | сРддаааРРР | даРдРссадР | 480 |
аРадаааадс | ададсадРса | аааааРаРад | аРааадсРда | ассадаРдРР | дссрдддсаа | 540 |
рдррадсадс | ассасасРРа | адаРаРаасс | РсаддсРдРд | дасРсссрсс | сРддддадсд | 600 |
дрдсРдссдд | сддсдддсдд | дсРссдсаас | РссссддсРс | РсРсдсссдс | ссРсссдРбс | 660 |
рссРсдддсд | дсддсддддд | ссдддасРдс | дссдсРсаса | дсддсддсРс | бРсРдсдссс | 720 |
ддссРсддад | дсадрддсдд | РддсддссаР | ддссРссРдс | дРРсдссдаР | дРсадсаРСР | 730 |
сдаасРдадд | дРсарсРссР | РдддасРддр | РадасадРдд | дрдсадссса | сддадддсда | 840 |
дррдаадсад | дд^дддд^д! | сассрссссс | аддаадРсса | дрдддрсадд | даасРсссСс | 900 |
сссРадссаа | дддаддссдр | дадддасРдР | дсссддрдад | адасрдрдсс | сРдаддааад | 960 |
дРдсасРсРд | дсссадарас | РасасРРРРс | ссасддРсРР | саааасссдс | адассаддад | 1020 |
Л /·* | ,-«+ + * | т лол | ||||
СЗССЗууаОС | ^’-УУУ ь ь '-'-а | аССсгСНоЗ а С | сдддссаис.1- | X с М V | ||
дддсадасас | ссадсРадсР | дсаададРРд | РРРРРРРРРР | РаРасРссРд | РддсассЬдд | 1140 |
аасдссадсд | адададсасс | РРРсасРссс | сРддаааддд | ддсРдааддс | адддассСРР | 1200 |
адсРдсдддс | Радддддррр | ддддррдадр | дддддадддд | ададддаааа | ддссРсдРса | 1260 |
РРддсдРсдР | сРдсадссаа | РааддсРасд | сРссРсРдсР | дсдадРадас | ссааРссРРР | 1320 |
ссРададдрд | дадддддсдд | драддрддаа | дрададдрдд | сдсддРаРсР | аддададада | 1380 |
аааадддсРд | дассааРадд | Рдсссддаад | аддсддассс | адсддРсРдР | РдаРРддРаР | 1440 |
тддсадрдда | сссРсссссд | дддрддрдсс | ддаддддддд | аРдаРдддРс | даддддрд^д | 1500 |
рррардрдда | адсдадаРда | ссддсаддаа | ссРдссссаа | РдддсРдсад | адрддррадр | 1560 |
дадрдддрда | садасадасс | сдраддссаа | сдддрддсср | РаадрдРсРР | РддРсРсс±с | 1620 |
сааРддадса | дсддсддддс | дддассдсда | сРсдддРРРа | аРдадасРсс | аррдддсрдр | 1660 |
ааРсадРдРс | аРдРсддаРР | саРдРсаасд | асаасаасад | ддддасасаа | ааРддсддсд | 1740 |
дсРРадРссР | ассссРддсд | дсддсддсад | сддРддсдда | ддсдасддса | сРссРссадд | 1800 |
сддсадссдс | адрррсрсад | дсадсддсад | сдсссссддс | аддсдсддрд | даддрддсдс | 1860 |
дсадссаддр | сРдРсассса | ссссдсдсдр | Ьсссаддддд | аддадасРдд | дсдддадддд | 1920 |
- 23 011747
ддаасадасд | дддддддаръ | саддддс££д | сдасдсссс5 | сссасаддсс | £с£дсдсдад | 1980 |
дд^сассдсд | дддссдсЕсд | ддд£саддс£ | дссссРдадс | д£дасдд£ад | ддддсддддд | 2040 |
аааддддадд | адддасаддс | сссдссссбс | ддсадддсс!; | с£адддсаад | ддддсддддс | 2100 |
1:сдаддадсд | даддддддсд | дддсдд | 2126 |
<210> 4 <211> 1625 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<221> т1зс_£еа£иге <223> последовательность 3ΤΆΚ4 <400> 4
да^сбдад^с | а11д££5£аад | дддаддаМс | Ь6£Сддс£дс | ^дадббдада | съадд^бдад | 60 |
ддРадСдаад | д-саааддсад | чдадассасд | Ьаддддбса): | £дсад£аа£с | саддсРддад | 120 |
абдаСддГдд | 1Ссад££дда | аЪадсад1;дс | а£д£дс£д£а | асаассЬсад | сРдддаадса | 180 |
д5а£а£дЪдд | сд££а£дасс | ксадс£ддаа | садсааЕдса | £д£дд£дд1:д | £аа£дасссс | 240 |
адс£ддд£ад | дд£дса£д£д | д£д£аасдас | с£садсСддд | ЪадсадЕд£д | ЬдбдабдЪаа | 300 |
саасс£садс | ЪдддЪадсад | Ьд£ас££да£ | аааа£д££дд | са5ас£с£ад | а££Сд££а£д | 360 |
адддбадбдс | са££ааа£££ | сСссасааа£ | £дд££д5сас | дба^дад^да | ааададдаад | 420 |
5да£ддаада | с£Ъсад£дс£ | ИЪ^ддссИда | а£ааа1:адаа | дасдЪса££Ъ | ссад'Ь'ЬааЪд | 480 |
дадасаддда | адасЪааадд | £аддд£ддда | ££сад£адад | саддбдгсса | д£Ъ££даа£а | 540 |
ЬдаЬдаасЪс | Ьдадададда | аааас£££££ | СРасс£с££а | дИЪЬЬдЬда | с^ддасМаа | 600 |
даа££ааад£ | даса£аадас | ададЪаасаа | дасаааааГа | £дсдадд£'Ьа | ССЬааСаЪбЬ | 660 |
££асС£дсад | аддддааНс! | £саааадааа | аа^даадасс | сааадаадсс | аШзаддд'Сса | 720 |
ааадс£са£а | ^дссЬРЪШа | адЬадаааа!: | даЪаааРРЫ: | аасааРдСда | даадасааад | 780 |
дбдрррдадс | СдадддсааР | ааабрдрддд | асадРдаСРа | адаааЪаСаР | дцдддааабд | 840 |
аааРдаРаад | СРаТ^РРадР | ада£5£аГ1:с | ГЪсаРаРсРа | £££11ддс£Ъс | аас££ссади | 900 |
сгсгадъдар | аадаардехс | И£с1с££ссХ / д^адаааддд | ддрасадада | дадсасс1Х£ | сРсаРдддаа | 960 |
а££££а+дас | сЛЬдс£дЪаа | даадаРсда! | с£ссРд1Ы:с | ссадсаРсад | 1020 | |
да1;дсаааса | СРСсссРсса | Сссс-адЕ^сС | саасссса1:д | дсСдддсс1:с | аСддса£1:сс | 1080 |
адса£сдс£а | £дад£дсасс | £££сс£дсад | дс!дсс£сдд | д£адс£дд£д | сас1дс£адд | 1140 |
£сад£сЬа£д | £дассаддад | с£дддсс£с£ | дддсааЪдсс | ад^гддсадс | сссса£сссР | 1200 |
- 24 011747
есассдсбдд | дддсскзсба | бссадааддд | сббддбдбдс | адаасдабдд | бдсассабса | 1260 |
бсаббсссса | сббдссабсб | ббсаддддас | адссадсбдс | Цббдддсдсд | дсааааааса | 1320 |
сссаасЬсас | ЬссЬсИсад | дддссбсбдд | бсбдаЦдсса | ссасаддаса | ЬссббдадЪд | 1380 |
с!дддсад+с | бдаддасадд | дааддад^да | 1:дассасааа | асаддаа!дд | садсадсадб | 1440 |
дасаддадда | адбсаааддс | ббдбдбдбсс | Ьддсссбдс! | дадддсбддс | дадддсссЬд | 1500 |
ддабддсдсг | садсдссбдд | бсддсбдсаа | даддссадсс | сбсбдсссаб | даддддадсб | 1560 |
ддсадбдасс | аадсбдсасб | дсссбддбдд | ЬдсабЫссб | дссссасбс! | ббссббсбаа | 1620 |
дабсс 1625
<210> <211> <212> <213> | 5 1571 ДНК Ното | зар1епз |
<220> | ||
<221> | тхзс | £еа£иге |
<223> | последовательность ЗТАВ5 | |
<400> | 5 |
сассбдабм | ааабдагсбд | бсбддбдадс | бсасбдддбс | Ъббасбсдса | Сдсбдддбсс | 60 |
асадсбссас | ЪдЬссбдсад | ддбссдбдад | бдбдддсссс | ббабсбабб-Ц | саСсабсаба | 120 |
асссбдсдбд | ЪссСсаасбс | сбддсасага | ббдддбддсс | ссабссасас | асддИдббд | 180 |
адбдаабсса | Ъдадабдаса | ааддсбабда | бдбадасбаб | аксабдадсс | адаассаддс | 240 |
бббссбассб | ссадасаабс | аадддссббд | абббдддабб | дадддадааа | ддадГадаад | 300 |
ссаддаадда | даададабьд | аддббСасса | адддбдсааа | дСссЬддссс | сбдасбдСад | 360 |
дсбдаааасб | абадааабда | бадаасаабб | ббдсаабдаа | абдсадаада | сссбдсабса | 420 |
ас!ЬЪаддЬд | ддасибсддд | ЕаИСЫабд | дссасадаас | асосгссоаь | СГассСдса1: | 480 |
ддсссадаса | садасббсаа | аасадЫдад | дссадсаддс | бссаддЕаад | ГддЬаддаЫ | 540 |
ссадаабдсс | сбсададбдб | бдбдддаддс | адсаддсдаб | Сббссбддас | ССсбдадббб | 600 |
абдадаассс | сааассссаа | ббддсаббаа | саббдаддбс | бсаабдСабс | абддсаддаа | 660 |
дсббссдади | ддбдаааадд | ааадбдааса | 1сааадсбсд | даадасаада | дддСддадбд | 720 |
абддсаасса | ададсаадас | ссббсссбсб | ссбдбдабдд | ддбддсбсба | бдбдаадссс | 730 |
ссааасбдда | сасаддбсид | дсадааГдад | даасссасбд | адаСССадсд | ссаасабсса | 840 |
дсабаааадд | дадасбдаса | бадааШда | дббадббааа | аабааддсас | аабдссбббс | 900 |
- 25 011747
аЬдЪаЪТссЕ | дад^ЪЪСдЪд | дас£дд£д££ сааЕТ'Сдсад | саРЪсбЬадб | £да!Хааа1:с | 960 | |
ЪдадаТдаад | ааададСдЪс | саасасС£Ъс | ассбЬддааа | дсЪсСддааа | адсааааддд | 1020 |
ададасаа££ | адс££са£сс | а££аас£сас | Г£ад£саГ£а | £дса£Л.са£Е | са£д£аас£а | 1080 |
ссааасасдб | асбдадбдсс | баасасбссб | дадасасбда | даадЁНЕсбС | дддаабасаа | 1140 |
адабдаабаа | ааассасдсс | аддсаддад-Ь | бддаддаадд | ббс+ддабдс | сассасдсЬс | 1200 |
£асс£сс£дд | сдддасасса | ддсаабдббд | дбаассббсб | дссбссаабб | бс+дсаааба | 1260 |
сабааб+аа!: | ааасасаадд | ЪЪаЬоЫ: с£а | аасадМсМ | аааа+дадЪс | аасЫ^дСЫ: | 1320 |
ааасббдббс | -гЬГТадада | ааааГд-ба^-б | Тббдааадад | ббддббадбд | сбаддддааа | 1380 |
£д£с£дддса | садсбсадбс | £дд£д£дада | дсаддаадса | дсЕсбд^дЪд | ЕсЪддддЕдд | 1440 |
дбасдба+дб | аддассбдбд | ддадассадд | ££дддддаад | дссссЬссЪс | аЬсаадддсС | 1500 |
ссбС1:дс£££ | дд££Едс1:1:1 | ддсдсдддад | дкдс^дбдсс | асаадддааб | асдддааа^а | 1560 |
ада+с1:с£дс | ί | 1571 |
<210> 6 <211> 1173 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
<221> т1зс_£еа1:иге <223> последовательность 5ТАН6 <400> 6
бдасссасса | садаса+ссс | сбсЬддссбс | сЬдадЬддЫ: | ссП.садсас | адсЬЬссада | 60 |
дссааа£+аа | асд£6сас£с | £а£д£с£аСа | дасааааадд | дЪСЕЕдасЪа | аасбсбдбдб | 120 |
ЪЪЪадададд | дадЬЪааа+д | сЪдЬСаас!:!. | ь^Садддд'Ъд | ддсдададдд | аЬдасаааЬа | 180 |
асаас££д+с | 1даа£дМ:1:11 | аса£££с1;сс | ссасЕдссЕс | аадааддр+с | асаасдаддб | 240 |
сабсса'Ьда'С | ааддадЪаад | ассъсссадс | сддас+д+сс | с+сддссссс | ададдасасб | 300 |
ссасададаР | а+дс+аас+д | дасб+ддада | с+ддсбсаса | сбссададаа | аадсабддад | 360 |
сасдадсдса | сададсаддд | ссааддСссс | адддасадаа | 1д£с£аддад | ддада£1ддд | 420 |
д£даддд£аа | +сСда£дсаа | Ы:ас£д£ддс | адсЪсаасаТ | Рсаадддадд | дддаадааад | 480 |
ааасадбссс | бдбсаадеаа | дббдбдсадс | ададабддРа | адсх.ссаааа | Ьбгсааасбг | 540 |
£ддс£дс£дд | ааад££££ад | ддддсадада | Таадаадаса | Таададас1:(: | £даддд6££а | 600 |
сЕасасасЪа | дасдсбсбаб | дса£г1:аЪ1:£ | аМ:£а6£а£с | £сС£ аГТЪа!: | £ас£ЬЬд,Ьа’Ь | 660 |
аасбсЫзаТа | а^аа£с1;£аЁ | даааасддаа | асссЬса^а!: | асссаГЛЬЁа | сада£дадаа | 720 |
- 26 011747
аадЕдасааЕ | ЕЕЕдададса | ЕадсЕаадаа | ЕадсЕадЕаа | дЕаааддадс | ЕдддассЕаа | 790 |
ассааасссЕ | аЕсЕсассад | адЕасасасЕ | СЕЕЕЕЕЕЕЕЕ | ЕЕссадЕдЕа | аίЕЕΕΕύЕЕа | 840 |
аЕЕЕЕЕаЕЕЕ | ЕасЕЕЕаадЕ | ЕсЕдддаЕас | аЕдрдсадаа | ддЕаЕддЕЕЕ | дЕЕасаЕадд | 900 |
ЕаЕаЕдЕдЕд | ссаЕадЕдда | ЕЕдсЕдсасс | ЕаЕсаасссд | ЕсаЕсЕаддЕ | ЕЕаадсссса | 960 |
саЕдсаЕЕад | сЕаЕЕЕдЕсс | ЕдаЕдсЕсЕс | ссЕссссЕсс | ссасассада | саддссЕЕдд | 1020 |
ЕдЕдЕдаЕдЕ | ЕссссЕсссЕ | дЕдЕссаЕдЕ | дЕЕсЕсасЕд | ЕЕсадсЕссс | асЕЕаЕдадЕ | 1080 |
дадаасдЕдЕ | ддЕаЕЕЕддЕ | ЕЕЕсЕдЕЕсс | ЕдЕдЕЕадЕЕ | ЕдсЕдаддаЕ | даЕддсЕЕсс | 1140 |
адсЕЕсаЕсс | аЕдЕсссЕдс | аааддасасд | аЕс | 1173 |
<210> 7 <211> 2101 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <220>
<221> т1зс_£еаЕиге <223> последовательность ЗТАВ7 <400> 7
аддЕдддЕдд | аЕсасссдад | дЕсаддадЕЕ | саадассадс | сЕддссааса | ЕддЕаааасс | 60 |
ЕсдЕсЕсЕас | ЕааааааЕас | даааааЕЕад | сЕддЕЕдЕдд | ЕддЕдсдЕдс | ЕЕдЕааЕссс | 120 |
адсЕасЕсдд | даддсЕдадд | саддадааЕс | асЕЕдааЕсЕ | дддаддсада | ддЕЕдсадЕд | 180 |
адсЕдадаЕа | дЕдссаЕЕдс | асЕссадссЕ | дддсаасада | сддадасЕсЕ | дЕсЕссаааа | 240 |
аааааааааа | аааЕсЕЕада | ддасаадааЕ | ддсЕсЕсЕса | аасЕЕЕЕдаа | дааадааЕаа | 300 |
аЕаааЕЕаЕд | садЕЕсЕада | адаадЕааЕд | дддаЕаЕадд | ЕдсадсЕсаЕ | даЕдаддаад | 360 |
асЕЕадсЕЕа | асЕЕЕсаЕаа | ЕдсаЕсЕдЕс | ЕддссЕаада | сдЕддЕдадс | ЕЕЕЕЕаЕдЕс | 420 |
ЕдаааасаЕЕ | ссааЕаЕада | аЕдаЕааЕаа | ЕааЕсасЕЕс | ЕдассссссЕ | ЕЕЕЕЕЕЕссЕ | 480 |
сЕсссЕадас | ЕдЕдаадсад | ааассссаЕа | ЕЕЕЕЕсЕЕад | ддаадЕддсЕ | асдсасЕЕЕд | 540 |
ЕаЕЕЕаЕаЕЕ | аасаасЕасс | ЕЕаЕсаддаа | аЕЕсаЕаЕЕд | ЕЕдсссЕЕЕЕ | аЕддаЕдддд | 600 |
ааасЕддаса | адЕдасадад | сааааЕссаа | асасадсЕдд | ддаЕЕЕсссЕ | сЕЕЕЕадаЕд | 660 |
аЕдаЕЕЕЕаа | аадааЕдсЕд | ссадададаЕ | ЕсЕЕдсадЕд | ЕЕддаддаса | ЕаЕаЕдассЕ | 720 |
ЕЕаадаЕаЕЕ | ЕЕссадсЕса | дадаЕдсЕаЕ | дааЕдЕаЕсс | ЕдадЕдсаЕд | даЕддассЕс | 780 |
адЕЕЕЕдсад | аЕЕсЕдЕадс | ЕЕаЕасааЕЕ | ЕддЕддЕЕЕЕ | сЕЕЕадаада | аааЕаасаса | 840 |
ЕЕЕаЕаааЕа | ЕЕааааЕадд | сссаадассЕ | Еасаадддса | ЕЕсаЕасааа | ЕдададдсЕс | 900 |
- 27 011747
ЪдаадШда | дб511д1;Ъсас | ШсггдШ | аМаЪсЪсс! | дссЪдгт^дЪ | са!ааа!дсд | 960 |
М1ад1аддд | адс1дс!аа6 | дасаддббсс | Иссаасадад | сдгддаадаа | ддадагдаса | 1020 |
дсСддсССсс | ссбсбдддас | адссбсадад | сТад^дддда | аасСабдМа | дсададбда! | 1080 |
дсадбдасса | адааааСадс | асбаддадаа | адсбддЪсса | £дадсадс£д | дЪдадаааад | 1140 |
ддд'Ьдд^ааЪ | са6д!а!дсс | с1Ы:сссдг1: | НаПИНа | ггдддмгсс | ^«дсс1с! | 1200 |
саа11сс11с | ЪдасааЪаса | ааабдИддб | £ддаасаЪдд | адсассбдда | аддс+ддббс | 1260 |
а1111сбс1с | ад!с!с^да | 6д16с1с1сд | ддбСсасСдс | сСаСбдтбсС | сад^сбаса | 1320 |
сИдадсаа! | с!сс1саа1а | дс^ааадсГС | ссасаа!дса | даббИЪд+да | 1дасаза11с | 1380 |
адсабсассс | адсадаас!С | адд111111:1 | с5дГсс!ссд | Ибссбдасс | ¢¢¢¢¢£¢¢01 | 1440 |
дадЪдсС5Ьа | 1д1сасс1сд | Ьдаассабсс | бСЕсс^бадЪ | са!с1асс1а | дсад¢сс¢да | 1500 |
11с11^дас | ЬСд^сГсссГ | асассасаа! | аааИсас1:аа | 11асъа1дда | 11сааСссс1 | 1560 |
ааааСИдса | сааасИдса | аабадаИас | дддИдааас | 1аадада:11 | сааасббдад | 1620 |
аааааад!!! | аааЬсаадаа | ааабдасс!± | СассЫдада | д1ададдсаа | 1д1са^1сс | 1680 |
аддаабааС!: | аСааСаабаС | сд1.<:1Ы.за1 | а111д!а5д1 | аасабббдаа | Ъасс^саа! | 1740 |
дПЛЬаШ | дЪдИаШИ: | аа!с1с11да | •ЬдЪСасеаас | ЬсаСЬ^ддба | дддаадаааа | 1800 |
са!дс6аааа | баддса^дад | 1д1с11а11з | аа1:д1:дасаа | д!даа1ада! | ддсадаадд! | 1860 |
дда!1са1а1 | Ссадиисс | а!сассс1дд | аааЪсабдсд | дадаЬдабЬЬ | с+доГЛдсаа | 1920 |
а-ЬаааасСаа | сссаа!дадд | ддаасадсЬд | Т1с1+адд5д | аааасаааас | ааасасдсса | 1980 |
аааассбгба | 1Г.с1с111а1 | 1а1дааТсаа | З11.1г.1сс1с | бсада1аа(;б | дбШаШа | 2040 |
66£а111«а | СЪа^бабЪдЬ | 1аССабдбсс | ад!с1сас1с | бдбсдссбаа | дс¢ддса¢да | 2100 |
ΐ 2101
<210> | 8 | |||||
<211> | 1821 | |||||
<212> | ДНК | |||||
<213> | Ното зар1епз | |||||
<220> | ||||||
<221> | тазе £еа!иге | |||||
<223> | последовательность ЗТАК8 | |||||
<400> | 8 | |||||
дадаИсасс! сдаададад! | сбаасдбссд | 1аддаасдс6 | с!сддд11са | сааддаИда | 60 | |
ссдаасссса дда¢асд¢сд | с6с6сса!с1 | даддеббдеб | ссааа¢ддсс | О1ссас1а61 | 120 | |
ссаддсасд! ддд¢д¢с¢сс | ссбаасЕ^с | сс1дс1с1сс | 1дадссса1д | с1дсс1а£са | 180 |
- 28 011747
ссса1:сдд1:д | саддг. с.сЛ1Г_ | скдаададс! | сддд-ЬддаИ | с1с£ сс.а^сс | сасМссМХ | 240 |
сссаадааад | аадссассд! | Сссаадасас | ссаа+дддас | айсссс11с | сассЪссИс | 300 |
1ссааад11д | сссаддСд^Ъ | саЪсасаддЪ | Еадддадада | адсссссадд | ЫЕсадМас | 360 |
ааддса1адд | асдсЕддсаЕ | даасасасас | асасасасас | асасасасас | асасасасас | 420 |
асасдасЪсд | аададдЪадс | сасааддд^с | аНааасас! | ^дасдасГдг | гыссааааа | 480 |
сдЪддаЬдса | дЫсабссас | дссааадсса | адддЬдсааа | дсааасасдд | ааЪддЬддад | 540 |
адаИссада | ддсЬсассаа | асссьс+сад | дааСаЫТГ.с | с!дассс1дд | дддсададд! | 600 |
1ддаааса11. | даддасаШ | сЪгдддасае | асддадаадс | ΐ-дассдасса | ддса1^11сс | 660 |
Шссас+дс | ааа!дасс!а | Еддсдддддс | аЪИсас! ΐΐ. | ссссЕдсааа | £сасс1а!дд | 720 |
сдадд1асс! | ссссаадссс | ссасссссас | Ыссдсдаа! | сддсаЕддсЪ | сддссЬсТа!: | 780 |
ссдддЪдЪса | с1ссадд!ад | дсЫсЬсаас | дс1сЬсддс! | сааадаадда | саа!сасадд | 840 |
Ьссаадссса | аадсссасас | сЕсИссЬЕС | ГдЫаЬассс | асадаадМа | дадаааасдс | 900 |
сасасИСЕда | дасаааМаа | дад-ЬссЪИа | Исаадссдд | сддссааада | да!ддс!аас | 960 |
дсЬсааааН | с1с!дддссс | сдаддааддд | дсПдасЕаа | сГЮЕаЕасс | Мдд'Мадд | 1020 |
ааддддаддд | даасЬсааа^ | дсдд^ааМс | ^асадаадЕа | ааааса^дса | ддааЕсаааа | 1080 |
даадсааа^д | д!1а1адада | даЪааасадЬ | Шааааддс | аааЬддЫас | ааааддсаас | 1140 |
ддгассадди | дсддддсЪс! | ааа’ЕссЬ'Ьса | Ьдасасгиад | аЕагаддЕдс | 1а1дс£ддас | 1200 |
асдаасСсаа | ддсиъагд! | сдь+асссс! | Исдадааааа | ЪссЪдддаас | ИсаЬдсас! | 1260 |
дШдЬдсса | дЬа1с11а1с | адЫдаПдд | дс1ссс11да | ааСдс^дадЕ | а+сЬдсИас | 1320 |
асаддбсаас | Ессыдсдда | адддддидд | д^ааддадсс | сП сдЕ д^с! | сдбаааСбаа | 1380 |
дддд'ЬсдаЫ | ддадШд^с | садсаМссс | адсйасадад | адссИа-Ы! | асаЪдадаад | 1440 |
сааддсЬадд | ЬдаСЪааада | дассаасадд | даадаИсаа | адСадсдас! | ЬададЪаааа | 1500 |
асааддтЪад | дсаШсас! | Псссадада | асдсдсааас | а16саа6ддд | адададдбсс | 1560 |
сдад!сд1са | аадЬсссада | 1д1ддсдадс | ссссдддадд | ааааассд+д | СсПссИад | 1620 |
да!дсссдда | асаададс!а | ддсИссдда | дсгаддсадс | сагсЪаЕдгс | сд1дадссдд | 1680 |
сдддадддад | ассдссддда | ддсдаад!дд | ддсддддсса | 1сс11с11:1:с | Ъдсбс+дсПд | 1740 |
сйдссдддда | дс1сс1ддс1 | ддсд£ссаад | сддсаддадд | ссдссд^ссЪ | дсадддсдсс | 1800 |
д^ададЫЪд | сдд!дсадад | ί | 1821 |
<210> 9
- 29 011747 <211> 1929 <212> ДНК <213> Нойю зараепз <220>
<221> т!зс_£еакиге <223> последовательность 2ТАК9 <400> 9
саскксскдд | дадкддадса | даддскскдс | дкддадсакс | сакдкдсадк | асксккаддк | 60 |
асддааддда | кедддскааа | ссакддакдд | дадскдддаа | дддаадддас | сааскксадд | 120 |
ссссаскддд | асаскддадс | кдссассскк | кададссскс | скаассскас | ассададдск | 180 |
дадддддасс | ксадасакса | сасасакдск | кксссакдкк | кксадааакс | кддаааедка | 240 |
дааскксадд | ддкдададкд | сскадакакк | даакасаадд | скадаккддд | сккскдкаак | 300 |
аксссааадд | ассскссадс | ккккксасса | дсасскаакд | сссаксадак | ассааадаса | 360 |
садсккадда | даддкксасс | скдаадскда | ддаддаддса | дееддаккад | адккдаскда | 420 |
дсааддакда | скдссккскс | сасскдасда | ккксадскдс | кдсссккккс | кккксскддд | 480 |
аакдсскдкс | дссакддсск | кскдкдксса | саддададкк | кдасссадак | асксакддас | 540 |
саддсааадд | кдскдкксск | сссадсссад | ддсссассак | даадсакдсс | кдддадсскд | 600 |
дкааддассс | адссасксск | дддскдккда | саккддсккс | ксккдсссад | саккдкадсс | 660 |
асдссаскдс | аккдкаскдк | дадакаадке | ааддкдддск | сассаддасс | кдсаскааак | 720 |
кдкдаааккс | адскссааад | ааекккддаа | аккасссакд | сакккаадса | ааакдаакда | 780 |
касскдадса | аассскккса | саккддсаса | адккасаакс | скдксксакс | сксккдакка | Θ40 |
саааккссак | ссаддсаада | дскдкаксас | сскдаддкск | ссссакксак | дккккддкеа | 900 |
акаакаккка | дккксскккк | даааакадак | ккккдкдкка | скссаккакд | акдддсадад | 960 |
дссадакдск | какаккскак | ккааакдаск | акдкккккск | акскдкааск | дддкккдкдк | 1020 |
ксаддкддка | аакдеккккк | ккккдеадке | адаадакксс | кддааддсда | ссадааакка | 1080 |
дскддссдск | дксадасскд | аадккаекке | кааадддсск | ккадааакда | аккекккккк | 1140 |
акдссккскс | кдааккскда | даадкаддск | кдаскксссс | каадкдкдда | дккдддадке | 1200 |
аасксккскд | аааадааадк | кксададсак | кккссааадс | сакддксадс | кдкдддаадд | 1260 |
даадасдакд | дакадкасад | ккдееддааа | асаскдакдд | аддеддакде | кссадсксад | 1320 |
ссааадасск | ккдккскдсс | сассссадаа | акдссссккс | сксааксдса | даааедккде | 1330 |
сссакддскс | скдакаскса | даакдсадсс | кскдассадд | ассакскдса | ксскссадда | 1440 |
декедкаада | аакдсадсак | сдкдддасск | дскддсасск | ддкдаассса | аасскдсадд | 1500 |
- 30 011747
дсРссРдддР | дрдсррдддд | сддсрдсадд | ддаададдда | дрсадсадсс | РссРссРдас | 1560 |
сИсссддсд | дсРдсРРРРс | Рдаддддсса | даардсассд | дРРдассРРд | ЕРдсаРсасР | 1620 |
ддсссаРдас | рддсРдсРРР | ддрсаддрдр | аааааддрдр | РРссададдд | РсРдсЕссРс | 1680 |
ЕсасРаРсдд | ассаддрррс | саРддададс | РсадссРссс | адсааддаРа | дадаасРРса | 1740 |
ааРддсРсаа | адаасРдада | ддссасасаР | дрдрдассрд | ааРадР.сР ср | дсРдсаааас | 1800 |
ааадддРРРс | РРааРдРааа | асдРРсРсРР | ссРсасадад | дддррессад | срдсРадЕдд | 1860 |
дсаРдРРдса | ддсаРРРссР | дддсРдсаРс | аддРРдРсар | аадссададд | аЕсаГ.ЕГ.Г.Г.д | 1920 |
ддддсРсаР | 1929 |
<210> | 10 | |
<211> | 1167 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното зартепз | |
<220> | ||
<221> | тазе Геариге | |
<223> | последовательность | 5ТАК10 |
<220> | ||
<221> | ттзс ЕеаРиге | |
<222> | (452)..(1143) | |
<223> | η является а, с, д | или Р в различных положениях |
<400> | 10 |
аддРсаддад | РРсаадасса | дссЕддссаа | сарддрдааа | сссрдрссср | асааааааРа | 60 |
саааааРРад | ссдддсдРдд | Еддддддсдс | сРаРааРссс | адсРасРсад | даРдеРдада | 120 |
саддадаарр | дрррдаассс | дддаддрдда | ддррдсадрд | аасРдадаРс | дсдссасРдс | 180 |
асРссадссР | ддрдасадад | ададасРссд | РсРсаасаас | адасааасаа | асааасааас | 240 |
аасаасаааа | аРдРРРасРд | асадсРЕРаЕ | ЕдадаЕаааа | РРсасаРдсс | аРаааддРса | 300 |
ссРЕсРасад | ЕаЕасааРРс | адРддаРРЕа | дРаРдРРсас | ааадРРдРас | дРРдРРсасс | 360 |
аРссасРсса | даасаРРЕас | арсассссЕа | ааадаадсРс | рррадсадрс | асРРсРсаРР | 420 |
сСссссадсс | ссРдссаасс | асдааРсРас | РпРсРдРсРс | РаРРсРдааР | аРРРсаРаРа | 480 |
ааддадРссР | арсарарддд | ссррррасдЕ | сРассРРсРЬ | РсасРРадса | РсаРдРРРРР | 540 |
аадаРРсаРс | сасадрдрад | сасдрдрсад | РРааРРсарР | РеаРеРРаРд | деРддаРаар | 600 |
дсРсРаРРдр | аРдсаРаРсс | сРсасРРРдс | РРаРссаРРс | аРсаасРдаР | РдасаРРРдд | 660 |
дРРаЕЕРсЕа | сРЕРРРдасР | аЕРаРдадРа | аРдсРдсРа! | даасаР РссР | дРассааРсд | 720 |
РРасдРддас | аРаРдсРРРс | ааРЕсРссЕд | адРаРдРаас | РадддРРдда | дРРдеРдддЕ | 780 |
- 31 011747
саЕаЕдЕЕаа | сЕсадЕдЕЕЕ | саШННд | аадаасЕасс | аааЕддЕЕЕЕ | ссааадЕдда | 840 |
ЕдсаасасЕЕ | 18031:1:0003 | ссадсаадаЕ | аЕдааддЕЕс | сааЕдЕсЕсЕ | асаЕЕЕЕЕдс | 900 |
саасасЕЕдЕ | даН 110111 | ЕаЕЕЕаЕЕЕа | ЕЕЕаЕЕЕаЕЕ | ЕаЕЕЕЕЕдад | аЕддадЕсЕс | 960 |
асЕсЕдЕсас | ссаддс!дда | дЕдсадЕддс | асааЕЕЕсад | сЕсасЕдсаа | ЕсЕссассЕс | 1020 |
ЕсдддсЕсаа | дсдаЕасЕсс | 1дсс1саасс | ЕсссдадЕаа | сЕдддаЕЕас | аддсдсссас | 1080 |
сассасасса | адсЕааЕЕЕЕ | 11д1аН1Е1 | адЕададасд | дддЕЕЕсаЕс | аЕдЕсддсса | 1140 |
ддпЕдЕасЕс | даасЕсЕдас | сЕсаадЕ | 1167 |
<210> 11 <211> 1377 <212> ДНК <213> Ното зарьепз <220>
<221> т1зс_£еа1иге <223> последовательность ЗТАК11 <400> 11
аддаЕсасЕЕ | дадсссадда | дЕЕсаадасс | адссЕдддса | асаЕадсдад | аасаЕдЕсЕс | 60 |
аааааддааа | ааааЕддддд | аааааасссЕ | сссадддаса | даЕаЕссаса | дссадЕсЕЕд | 120 |
аЕаадсЕсса | ЕсаЕЕЕЕааа | дЕдсааддсд | дЕдссЕссса | ЕдЕддаЕдаЕ | ЕаЕЕЕааЕсс | 180 |
ЕсЕЕдЕасЕЕ | ЕдЕЕЕадЕсс | ЕЕЕдЕддааа | ЕдсссаЕсЕЕ | аЕаааЕЕааЕ | адааЕЕсЕад | 240 |
ааЕсЕааЕЕа | аааЕддЕЕса | асЕсЕасаЕЕ | ЕЕасЕЕЕадд | аЕааЕаЕсад | дассаЕсаса | 300 |
дааЕдЕсЕда | даЕдЕддаЕЕ | ЕасосЕаЕсЕ | дЕадсЕсас! | ЕсЕЕсаасса | ЕЕсЕЕЕЕадс | 360 |
ааддсЕадЕЕ | аосЕЕсадЕд | асаассссЕЕ | дсЕдсссЕсЕ | асЕаЕсЕссЕ | сссЕсадаЕд | 420 |
дасЕасЕсЕд | аЕЕаадсЕЕд | адсЕадааЕа | адсаЕдЕЕаЕ | сссдддаЕЕЕ | саЕаЕддааЕ | 480 |
аЕЕЕЕаЕаса | ЕдадЕдадсс | аЕЕаЕдадЕЕ | дЕЕЕдааааЕ | ЕЕаЕЕаЕдЕЕ | дадддадддЕ | 540 |
аассдсЕдЕа | асаассаЕса | ссаааЕсЕаа | ЕсдасЕдааЕ | асаЕЕЕдасд | ЕЕЕаЕЕЕсЕЕ | 600 |
дЕЕсассЕда | садЕЕсадЕд | ЕЕассЕаааЕ | ЕЕасаЕдаад | асссададдс | ссасдсЕссЕ | 660 |
ЕсаЕЕЕЕддд | сЕссассдас | сЕссааддЕЕ | ЕсадддсссЕ | сЕдссссдсс | ЕЕсЕдсассс | 720 |
асаддддаад | ададЕддадд | аЕдсасасдс | ссаддссЕдд | аадЕдасдса | ЕдЕддсЕЕсс | 780 |
ссдЕссасад | асЕЕсассса | садЕссаЕЕд | дссЕЕсЕЕаа | дЕсаЕддасЕ | ссЕдсЕдадс | 840 |
ЕдссадддЕд | саЕдддаааЕ | ссаЕдЕдасЕ | дЕдЕдсссЕд | даддаадддд | адсдЕЕЕсдд | 900 |
Едадсасаса | ддадЕсЕЕЕд | ссасЕадасд | сЕдаЕдадда | ЕЕссссасад | дсдаЕдаадс | 960 |
- 32 011747
а£.ддадас£с | аЕсЕЕдЕаас | ааасадаъда | дд£д«даса | £с£с£С.аад£ | ТЛасГЕСдЕд | 1020 |
£дсад1:Е££Л | акксадакад | даааддсЕдЪ | Еаааа£с££а | асассЪаасЪ | ддаадааддд | 1080 |
ЬЕЕ^ададаа | д£д£дд££££ | садЕаадсса | д££с£££:сса | сааЕссаада | аасдааакаа | 1140 |
а£Л£ссадса | ЕддадсадЕЪ | ддсаддкаад | д£ХЪ££д££д | ЕддЕсксдсс | саддсЕЬдад | 1200 |
ЕдЪаассддС | дЕддСсаСад | сЕсасЪасаб | ЕсЕсааасСс | с£ддсс£Ъаа | дСсаЕссСсс | 1260 |
ЕдссЕсадсс | Рсссаааддс | аад£аадд£Е | аадаакаддд | даааддЕдаа | дМЕсасадс | 1320 |
ίΛΕίοϊβςδθ | ЬДсЕДЬЕ-ЬаД | £саадддас£ | с£сада£са£ | сааасссасс | садаа£с | 1377 |
<210> 12 <211> 1051 <212> ДНК <213> Ното заръепз <220>
<221> т±зс__£еаЬиге <223> последовательность 5ТАВ12 <400> 12
аСсс+дсИс | Едддаадада | д£ддсс£ссс | ££д£дсадд£ | дасНЕЕддса | ддассадсад | 60 |
ааасссаддЪ | ££сс£д£сад | даддаад£дс | ЪсадсМаЕс | £с£д£даадд | д£сд£да£аа | 120 |
ддсасдадда | ддсаддддсЕ | £дссадда£д | ££дсс£1:£с£ | дЪдссайа+д | ддаса£с£са | 1Θ0 |
дс££асд££д | Ъ+аадаааЕа | £Д£ддсаада | адаЪдсасас | адаа£££сЬд | Еаасдаакад | 240 |
даСддадфЕЕ | ЕаадддСЕас | Еасдаааааа | адаааасЪас | Еддадаадад | ддаадссааа | 300 |
сассассаад | Шдааассд | аЪ£Е£а££дд | асдаа£д£с£ | сасЕЕЕаааС | ЕЕаааЕддад | 360 |
СссаасЕЕсс | ЕЕ££с£сасс | садасдксда | дааддфддса | ££саааа£д£ | ££асас££д£ | 420 |
ЪЪсаЬсЬдсс | ££££Ъдс£аа | д£сс£дд£сс | ссЪассЪсск | ^Ьсссс сасб | £саса£££д£ | 480 |
сд£££са£сд | сасаса£а£д | сИса+сЬСИа | £а£££аса£а | Ъа£а£аа£1:1 | ££а£а£а£дд | 540 |
с££д£дааа£ | акдссадасд | адддасдааа | £ад£сс£даа | аасадскдда | ааа£1:а£дса | 600 |
асадЕдддда | даИдддсас | а£д£аса££с | £д£ас£дсаа | ад££дсасаа | садассаадр | 660 |
££д££а£аад | ЕдаддсСддд | £дд££Ъ££а£ | £Ё1:££:с£с£а | ддасаасадс | ЕЕдсскддкд | 720 |
дадЕаддссЪ | ссЕдсадаад | дса£££Ес££ | аддадсс£са | ас££ссссаа | даададдада | 780 |
дддсдадасЕ | ддад£1д£дс | Сддсадсаса | дадасааддд | ддсасддсад | дасДдсадсс | 840 |
гдсададддд | сДддадаадс | ддаддсЕддс | асссадЕддс | садсдаддсс | саддЪссаад | 900 |
Ессадсдадд | £сдадд£с£а | дадЕасадса | аддссаадд£ | ссааддксад | £дад£с£аад | 960 |
дЕссаЪддЬс | адЪдаддсЕд | адасссаддд | ЕссааЬдадд | ссааддксса | дадЪссадЕа | 1020 |
- 33 011747 аддссдадаб ссадддбсса дддаддбсаа д
1051 <210> 13 <211> 1291 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
<221> гп1гс6еа6иге <223> последовательность 5ΤΆΚ13 <400> 13
адссасбдад | дбссбаасбд | садссааддд | дссдббсбдс | асабдбсдсб | сасссбсбдб | 60 |
дсбсбдббсс | ссасададса | аасдсасабд | дсаасдббдд | бссдсбсадс | сасбддббсб | 120 |
дбддбддаас | ддбддабдбс | Ъдсасбдбда | сабсадсбда | дбаадбааса | асдасбдадд | 180 |
абдссдсбда | сссадддсбд | дддаадддда | сбсссадсбс | адасаддсбб | ддсбдбддбб | 240 |
бдсбббддда | ддададбдаа | сабсасаддд | аабддсбсаб | дбсадсссса | ддадддбддд | 300 |
сбддссссбд | дбссссдддс | бссббсбддс | ссбдсаддсд | абадададсс | бсаассбдсб | 360 |
дссдсббсбс | сббддсссдд | дбдабддссд | бсбддаадад | ссбдсадбад | аддбдсасад | 420 |
ссадсддада | дбсдбсаббд | ссдддбасад | ддбаддбдаб | даддсадддд | ббдсадббдд | 480 |
бдбссасдаб | дсссасбдбд | дддабдббса | бсббддсбдс | дбсбсбсасд | дссасдбдбд | 540 |
дсбсааадаб | дббдббдадс | дбдбдсадда | адабдабдад | дбссддсадд | сддассдбдд | 600 |
ддссааадад | даддсдсдсд | ббддбсадса | бдссдссссб | даадбадсда | дбдбдддсдб | 660 |
асбсдссаса | дбсасдддсс | абдббсбсаа | бсаддбасда | даасбдссдд | ббдсддсбба | 720 |
бааасаадаб | дабдсссббд | сддбаддсса | бдбдддсддб | даадббсаад | дссадсбдда | 780 |
ддбдсдбддс | бдбсбдббсс | аддбсдабда | ¢960969910 | саддсддсбс | ссааадабдб | 840 |
асддсбссаб | ааассбдсса | дадассссас | сааддсаадд | дддабдадад | ббсасддддс | 900 |
сабсбссасб | ддсбссббдс | аддаасасад | асдсссасса | дддасбсссд | ддсбссбсбд | 960 |
бдддддсасб | абдддсбддд | аадсасаабб | бдсаасдсбс | сссдбдбдса | бддасадсад | 1020 |
бдсадассса | бссаддссас | сссбсбдсаб | дссбсдбсбс | дбддсббаас | сссбссбасс | 1080 |
сбсбассбсб | бсссдаадда | абссбаабад | аасбдасссс | абабддабдб | дбддасабсс | 1140 |
аасабдасдс | сааааддаса | ббсбдссссд | бдсадсбсас | адддсадссд | ссбссдбсас | 1200 |
бдбссбсббс | ссдаддсббб | дсддабдадд | ссссбсбддд | дббддасбба | дсддддбдсб | 1260 |
сбдддссааа | адсаббаадд | дабсадддса | д | 1291 |
- 34 011747 <210> 14 <211> 711 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т1зс_£еаДиге <223> последовательность ЗТАК14 <400> 14
сссдддасса | дддДссдДдд | ДсДДддДддд | сасДддсдДс | ДДсДДдсДдд | дДдДДДДссД | 60 |
дДдддДсДсД | ддсааддсас | ДДДДДдДддс | дсДдсДДдДд | сДдДдДдсдд | даддддсадд | 120 |
ДдсДсДДДсс | ДсДДддадсД | ддасссДсДд | дддсдддДсс | ссдДсддссД | ссДДдДдДдД | 180 |
ДДДсДдсасс | ДддДасадсД | ддаДддссДс | сДсааДдссд | ДсдДсдсДдс | ДддадДсдда | 240 |
сдссДсдддс | дссДдДасдд | сдсДсдДдас | ДсдсДДДссс | сДссДДдсдд | ддсдддсддд | 300 |
ссДДДДааДс | ссасДДДДаД | ДсДдДасДдо | ДДсДдааддд | сддДдддддД | ДдсДддсДДД | 360 |
дДдсДдсссД | ссДДсДссДд | сдДддДсдДд | дДсдДдассД | ДддассДдад | дсДДсДдддс | 420 |
ДдсасдДДДд | ДсДДДдсДаа | ссдддддадд | ДсДдсадаад | дсдаасДссД | ДсДддасдсс | 480 |
садсаддссс | ДдссддДдса | ссассддддд | адссддсДсД | ДддДдддаДД | ДсдададДда | 540 |
сДДсдссдаа | ДДДДсаДдДд | ДдДсДддДДД | сДДсДссасД | дасссаДсас | аДДДДДдддД | 600 |
сДсаДдсДдД | сДДДДсДсаД | ДсадааасДд | ДДсДаДДДсД | дсссДдаДдс | ДсДдсДсааа | 660 |
ддадДсДдсД | сДдсДсаДдс | ДдасДдддда | ддсададссс | ДддДссДДдс | £ | 711 |
<210> 15 <211> 1876
<212> <213> | ДНК Ното зардепз | ||||||
<220> <221> <223> | т1зс_£еаДиге последовательность 5ТАК15 | ||||||
<400> | 15 | ||||||
дадДссаада | ДсааддДдсс | адсаДсДДдД | дадддссДДс | ДДдДДасдДс | асДсссДадс | 60 | |
дааадддсаа | адададдддд | адсаададаа | аддддддсдд | аасДсдДссД | ДдДадаадад | 120 | |
дсссаДДссс | дадасааДдд | саДДсаДсса | ДДсасДссас | ссДсаДддсс | ДсассассДс | 180 | |
ДсаДдаддсД | ссассДссса | дсссДддДДД | дДДддддаДД | аааДДДссаа | сасаДдссДД | 240 | |
ДДдддддаса | ДдДДааааДД | аДадсасссс | аааДдДДаса | сДаДсДДДДд | аДдадсддДа | 300 | |
дДДсДдаДДД | ДаадДсДадс | ДддссДасДД | ДДДсДДдсас | дДдддаДдсД | ДДсДдссДдД | 360 |
- 35 011747
Ессадддсад | дсадсЕсЕЕс | ЕсЕдЕсссЕс | ЕдсЕддсссс | ассЕсаЕссЕ | сЕдЕЕдЕссЕ | 420 |
СЕЕСССЕССЕ | ЕсЕдЕдсссЕ | ддддЕссЕдд | ЕдддддЕдЕд | асЕдЕсаасЕ | дсдЕЕдддсЕ | 480 |
аасЕЕЕЕЕЕс | ссЕдсЕддЕд | дсссдЕааЕд | ааадааадсЕ | ЕсЕЕдсЕссс | аадЕЕссЕЕа | 540 |
ааЕссаадсЕ | саЕадасаас | дсддЕсЕсас | адсаддссЕд | дддссадссб | сасдЕдадсс | 600 |
ссЕЕсссЕдд | ЕдЕадЕсасЕ | ддсаЕддддд | ааЕдддаЕЕЕ | СсЕдЕЕдссс | ЕасЕдЕдЕдд | 660 |
сЕдаддЕддд | ддЕЕдсЕЕсс | Еддадссадд | ссЕЕдЕддаа | дддсадЕдсс | сасЕдсадЕд | 720 |
даЕдсЕдддс | ссЕдааЕсЕд | ассссадЕдЕ | ЕсаЕЕддсЕс | ЕдЕдадассс | адЕдадддса | 780 |
дддадддаад | ЕддадсЕддд | дкдадаадЕа | даддсссЕдс | адддсссасд | Едссадссас | 840 |
саддссЕсад | асЕаддсЕса | даЕдасддад | адсЕдсасас | сЕдсссаасс | саддсссЕдс | 900 |
адЕдсссаса | Едссадссдс | Еддддсссад | асЕЕдсЕсса | дадддсддад | адсЕЕЕасас | 960 |
сддсссаасс | саддссаЕдд | сЕссаааЕдс | дЕдасадЕЕЕ | ЕдсЕдЕЕдсЕ | ЕсЕЕЕЕадЕс | 1020 |
аЕЕдЕсаадЕ | ЕдаЕдсЕЕдЕ | ЕЕЕдсададд | ассааддсЕЕ | ЕаЕдаасоЕа | ЕЕасссЕдЕд | 1080 |
ЕдаададЕЕЕ | сассаддЕба | ЕддаааЕЕЕс | ЕЕЕаааасса | ЕассасадЕЕ | ЕЕЕЕсаЕЕаЕ | 1140 |
ЕсаЕдЕаЕаЕ | ЕЕЕЕаааааб | ааЕЕасЕдса | сЕсадЕадаа | ЕаасаЕдааа | аЕдЕЕдссЕд | 1200 |
ЕЕадсссЕЕЕ | ЕссадЕЕЕдс | сссдадааЕа | сЕдддддсас | ЕЕдЕддсЕдс | ааЕдЕЕЕаЕс | 1260 |
сЕдсддсадс | ЕЕЕдссаЕда | адЕаЕсЕсас | ЕЕЕЕаЕЕаЕЕ | аЕЕЕЕЕдсаЕ | ЕдсЕсдадЕа | 1320 |
ЕаЕЕдасЕЕЕ | ддааасаааа | дасаЕсаЕЕс | ЕаЕЕЕаЕадс | аЕЕаЕдЕЕЕЕ | ЕадЕадЕддЕ | 1380 |
аЕЕЕссаЕаЕ | асаадаЕаса | дЕааЕЕЕЕсс | дЕсааЕдааа | аЕдЕсаааЕЕ | сЕадааааЕд | 1440 |
ЕаасаЕЕссЕ | аЕдсдЕддЕд | ЕЕаасаЕсдЕ | ЕсЕсЕаасад | ЕЕдЕЕддссд | аадаЕЕсдЕЕ | 1500 |
ЕдаЕдааЕсс | даЕЕЕЕЕсса | аааЕадссда | ЕЕсЕдаЕдас | ЕсадасдаЕЕ | СЕдаЕдЕЕсЕ | 1560 |
дЕЕЕадаааЕ | ааЕЕссаада | асадЕЕЕЕЕа | саЕЕЕЕаЕЕЕ | ЕсасаЕЕдаа | ааЕсадЕсад | 1620 |
аЕЕЕдскЕса | дссЕсааада | дсасдЕЕЕаЕ | дЕааааЕЕаа | аЕдадЕдсЕд | дсадссадсЕ | 1680 |
дсдсЕЕЕдЕЕ | ЕЕЕсЕаааЕд | ддаааадддЕ | ЕаааЕЕЕсас | ЕсадсЕЕЕЕа | ааЕдасадсд | 1740 |
сасадссЕдЕ | дЕсаЕададд | дЕЕддаддад | аЕдасЕЕЕаа | сЕдссЕдЕдд | ЕЕаддаЕссс | 1800 |
ЕЕЕсссссад | дааЕдЕсЕдд | дадсссасЕд | ссдддЕЕЕдс | ЕдЕссдЕсЕс | дЕЕЕддасЕс | 1860 |
адЕЕсЕдсаЕ | дЕасЕд | 1876 |
<210> 16 <211> 1282 <212> ДНК <213> Ното зарЁепз
- 36 011747 <220>
<221> тазс/еакиге <223> последовательность ЗТАК16 <400>16
сдсссасскс | ддскккссаа | адкдскддда | ккасаддсак | дадксаскдс | дсссаксскд | 60 |
аккссаадкс | кккадакаак | аасккааскк | ккксдассаа | ккдссаакса | ддсааксккк | 120 |
даакскдсск | акдасскадд | асакссскск | ссскасаадк | кдссссдсдк | ккссадасса | 180 |
аассаакдка | саксккасак | дкаккдаккд | аадккккаса | кскссскааа | асакакаааа | 240 |
ссаадскака | дкскдассас | сксаддсасд | кдкксксадд | асскссскдд | ддскакддса | 300 |
кдддксскдд | кссксадакк | кддсксадаа | кааакскскк | сааакакккк | ссадаакккк | 360 |
асксккккса | ксассаккас | скаксассса | каадксадад | ккккссасаа | сссскксскс | 420 |
адакксадка | акккдскада | акддссасс^ | аасксаддаа | адкаккккас | ккасааккас | 480 |
саакккакка | кдаадааскс | аааксаддаа | кадссааакд | даададдсак | адддаааддк | 540 |
акддаддаад | дддсасааад | сккссакдсс | скдкдкдсас | ассассскск | садсаксккс | 600 |
акдкдкксас | саасксадаа | дскскксааа | скккдксакк | каддддкккк | какддсадкк | 660 |
ссаскакдка | ддсакддккд | акаааксаск | ддксаксддк | дакадааскс | кдкскссадс | 720 |
ксскскскск | скссксссса | даадксскда | ддкддддскд | ааадккксас | ааддккадкк | 780 |
дскскдасаа | ссадсссска | ксскдаадск | аккдаддддк | сссссаааад | ккассккадк | 840 |
акддккддаа | даддсккйкк | акдаакааса | ааадакдскс | скакккккас | саскадддад | 900 |
сакакссаад | ксккдсддда | асааадсакд | ккаскддкад | сааакксака | саддкадака | 960 |
дсааксксаа | кксккдсскк | сксадаадаа | адаакккдас | саадддддса | кааддсадад | 1020 |
кдадддасса | адакаадккк | кададсадда | дкдааадккк | аккааааадк | кккаддсадд | 1080 |
аакдааадаа | адкааадкас | акккддаада | дддссаадкд | ддсдасакда | дададксааа | 1140 |
сассакдссс | кдкккдакдк | ккддсккддд | дксккакакд | акдасакдск | кскдадддкк | 1200 |
дсакссккск | сссскдаккс | кксссккддд | дкдддскдкс | сдсакдсаса | акддсскдсс | 1260 |
адсадкаддд | аддддссдса | 1282 |
<210>17 <211>793 <212> ДНК <213> Нолю зартепз <220>
<221> т1зс_кеакиге <223> последовательность ЗТАК17
- 37 011747 <400> 17
аЕссдадддд | аддаддадаа | даддааддсд | адсадддсдс | сддадсссда | ддЕдЕсЕдсд | 60 |
адаасЕдЕЕЕ | ЕаааЕддЕЕд | дсЕЕдааааЕ | дЕсасЕадЕд | с^аад^^ддс^ | ЕЕЕсддаЕЕд | 120 |
ЕсЕЕаЕЕЕаЕ | ЕасЕЕЕдЕса | ддЕЕЕссЕЕа | аддададддЕ | дЕдЕЕддддд | Едддддадда | 180 |
ддЕддасЕдд | ддааассЕсЕ | дсдЕЕЕсЕсс | ЕссЕсддсЕд | сасадддЕда | дЕаддааасд | 240 |
ссЕсдсЕдсс | асЕЕаасааЕ | сссЕсЕаЕЕа | дЕаааЕсЕас | дсддадасЕс | ЕаЕдддаадс | 300 |
сдадаассад | ЕдЕсЕЕсЕЕс | садддсадаа | дЕсассЕдЕЕ | дддаасддсс | сссдддЕссс | 360 |
ссЕдсЕдддс | ЕЕЕссддсЕс | ЕЕсЕаддсдд | СсЕдаЕЕЕсЕ | ссЕсадссс! | ссасссадсд | 420 |
ЕсссЕсаддд | асКЫсаса | ссЕссссасс | сссаЕЕЕсса | сЕасадЕсЕс | ссадддсаса | 480 |
дсасЕЕсаЕЕ | дасадссаса | сдадссЕЕсЕ | сдЕЕсЕсЕЕс | ЕссЕсЕдЕЕс | сЕЕсЕсЕЕЕс | 540 |
ЕсЕЕсЕссЕс | ЕдЕЕссЕЕсЕ | сЕЕЕсксЕд! | саЕааЕЕЕсс | ЕЕддЕдсЕЕЕ | сдссассЕЕа | 600 |
аасаааааад | адаааааааЕ | ааааЕааааа | ааасссаЕЕс | Едадссааад | ЕаЕЕЕЕаада | 660 |
ЕдааЕссаад | ааадсдассс | асаЕадсссЕ | ссссасссас | ддадЕдсдсс | аадасдсасс | 720 |
саддсЕссаЕ | сасадддссд | ададсадсдс | сасЕсЕддЕс | дЕасЕЕЕЕдд | дЕсаададаЕ | 780 |
сЕЕдсаааад | адд | 793 |
<210> 18 <211> 492 <212> ДНК <213> Нолю зараепз <220>
<221> т1зс_£еаЕиге <223> последовательность 5ТАК18 <400> 18
аЕСЕЕЕЕЕдс | ЕсЕсЕаааЕд | ЕаЕЕдаЕддд | ЕЕдЕдЕЕЕЕЕ | ЕЕЕсссассЕ | дсЕааЕаааЕ | 60 |
аЕЕасаЕЕдс | аасаЕЕсЕЕс | ссЕсаасЕЮ | аааасЕдсЕд | аасЕдаааоа | аЕаЕдсаЕаа | 120 |
аадааааЕсс | ЕЕЕдсадаад | ааааааадсЕ | аЕЕЕЕсЕссс | асЕдаЕЕЕЕд | ааЕддсасЕЕ | 180 |
дсддаЕдсад | ЕЕсдсаааЕс | сЕаЕЕдсска | ЕЕсссЕсаЕд | аасаЕЕдЕда | ааЕдааассЕ | 240 |
ЕЕддасадЕс | ЕдссдсаЕЕд | сдсаЕдадас | ЕдссЕдсдса | аддсаадддЕ | аЕддЕЕссса | 300 |
аадсасссад | ЕддЕаааЕсс | ЕаасЕЕаЕЕа | ЕЕсссЕЕааа | аЕЕссааЕдЕ | аасаасдЕдд | 360 |
дссаЕаааад | адЕЕЕсЕдаа | саааасаЕдЕ | саЕсЕЕЕдЕд | даааддЕдЕЕ | ЕЕЕсдЕааЕЕ | 420 |
ааЕдаЕддаа | ЕсаЕдсЕсаЕ | ЕЕсааааЕдд | аддЕссасда | ЕЕЕдЕддсса | дсЕдаЕдссЕ | 480 |
- 38 011747 дсаааРРаРс ср
92 <210> 19 <211> 1840 <212> ДНК <213> Ното 5ар1еП5 <220>
<221> т±зс_£еаРиге <223> последовательность ЗТАК19 <400> 19
РсасРРссРд | аРаРРРРаса | РРсааддсРа | дсРРРаРдса | рардсаасср | дрдсадррдс | 60 |
асадддсРРР | дрдррсадаа | адасрадсрс | ррддррраар | асРсРдРРдР | рдссарсррд | 120 |
адаРРсаРРа | РааРаРаарр | РРРдааРРРд | рдррррдаас | дРдаРдРсса | аРдддасааЕ | 180 |
ддаасаррса | сараасадад | дадасаддрс | аддРддсадс | сРсаарРсср | ЕдссасссРР | 240 |
РРсасаРаса | дсаРРддсаа | рдссссарда | дсасааааРР | рдддддаасс | аРдаРдсРаа | 300 |
дасРсааадс | асаРаРааас | аРдРРассРс | РдРдасРааа | адаадРддад | дрдсрдасад | 360 |
сссссададд | ссасадррра | РдРРсааасс | аааасРРдсР | радддрдсад | ааадааддса | 420 |
аРддсадддР | сРаадаааса | дсссаРсаРа | РссРРдРРРа | РРсаРдРРас | дрсссрдсар | 480 |
даасРааРса | сРРасасРда | аааРаРРдас | ададдаддаа | аРддааадаР | адддсаассс | 540 |
аРадРРсРРР | РРссРРРРад | РсРРРссРРа | РсадРааасс | ааадаРадРа | РРддРааааР | 600 |
дрдрдрдадр | РааРРааРда | дРРадРРРРа | ддсадРдРРР | ссасРдРРдд | ддраадааса | 660 |
аааРаРаРад | дсРРдРаРРд | адсРаРРааа | РдРаааРРдР | ддааРдРсад | РдаРРссаад | 720 |
РаРдааРРаа | аРаРссРРдР | аРРРдсаРРР | ааааррддса | сРдаасааса | аадаРРааса | 780 |
дРааааРРаа | СааРдРаааа | дРРРааРРРР | РасРРадааР | дасаРоаааР | адсааарааа | 840 |
адсассаРда | РаааРсаада | дададасРдР | ддааадаадд | аааасдРРРР | РаРРРРадРа | 900 |
РаРРРаардд | дасРРРсРРс | сРдаРдРРРР | дррРРдРРРР | дададададд | дардрддддд | 960 |
садддаддРс | ссаррррдрр | дсссаддсРд | дасррдаасР | ссРдддсРсс | адсРаРссрд | 1020 |
ссРРадсРРс | РРдадРадсР | дддасРасад | дсасасасса | садрдрсрда | саРРРРсРдд | 1080 |
аРРРРРРРРР | РРРРРРРаРР | РРРРРРдРда | дасаддРРсЕ | ддсРсРдРРа | сРсаддРРдс | 1140 |
адрдсадрдд | саРдаРадсд | дсРсасРдса | дссРсаассР | ссРсадсРРа | адсРасРсРс | 1200 |
ссасРРсадс | сРссРдадРа | дссаддасРа | садррдрдрд | ссассасасс | РдРддсРааР | 1260 |
РРРРдРадад | акддддРсРс | РссасдРРдс | сдаддсРддР | сРссаасРсс | РддРсРсаад | 1320 |
сдаассРссР | дасррддсср | сссдаадРдс | РдддарРаса | ддсррдадсс | асРдсаРсса | 1380 |
- 39 011747
дссЕдСссРс | СдЕдЕСааас | съасъссааС | СГдСспсса | бсСс!аса1а | аасддсбсМ; | 14 4 0 |
ПсааадНс | ссакадассЪ | сас1д11дс1. | ааЪсЕаакаа | 6ааа16а1:с6 | сссГЪГГсЫ: | 1500 |
асаРддббса | Рсад£адсад | саРбадаПд | ддсРдсРсаа | глсгиичд | РаРабРисср | 1560 |
ОсаПЪддсЬ | ^сЬддддсаС | сасасЪсГсЬ | ЬсдадЬ!ас1 | саСЪссСса! | 1да5адсНс | 1620 |
ббссРад^сС | -спгасСдд | ^сЪсссбдас | бссНааГаб | ЕдСПЛСсСс | 1680 | |
сссаддсСИ | адИсПадс | ссссЫсГдг | 1а1сЬа£Па | сасссааИс | ШсададЪс | 1740 |
СсаЬссадад | 'Ьса'СдаасСР | ааассбдбМ: | с£д£дсада£ | ааЬРсасаЬЬ | аСЪабабсбс | 1800 |
садсссадас | ЪсЬсссдсаа | асЪдсадаск | даЕссЕасЕд | 1840 |
<210> <211> <212> <213> | 20 780 ДНК Ното заргепэ |
<220> <221> <223> | т±зс £еа!иге последовательность 8ТАК20 |
<400> | 20 |
даГсРсаад! | ПсааЪа1:са | РдННддса | ааасаНсда | ^дсРсссаса | сссИассЬа | 60 |
аадс£ассад | аааддсСНд | ддаасЕдЕса | асададсбас | адаааад£са | двааадасса | 120 |
а1ддасссс€ | сааасааааа | садссаадсР | ЬИсЬдссаа | ааада£дас£ | дадаадас^д | 180 |
Пааадсааа | ааас£с£дН | сс£дсс£сад | аЕдаЬддсСа | £ссадааа1:а | даааааНаС | 240 |
Песен саа | £сс£с£аддс | Исдадад££ | 1£.дасс1дсс | Ьдаададсас | садаПдсас | 300 |
а! с! ссс сП | дадСдаадкд | ссЪсРсаЕда | ЕасНдаЬда | ддадададад | сПдаааадс | 360 |
гдМПсадс£ | дддссссссЪ | 1сассГ_Ида | ада£дссс£с | ЕссассаРдд | аааЪссааЕс | 420 |
ГдИдсад^с | СссМПаадс | аИсСдИда | сссЕддаъдЬ | ЕдааН.дсса | ссг.дШдс: | 480 |
сЪдасабада | иШаааЫ. | 1α£ίадЬдс! | НададЪПд | ЬдЪабаНИс | 5а11ааСааа | 540 |
дсаПаНбд | Пбаасадаа | ааааадабаР | аСасНаааб | ссваааабаа | аа^аассаН | 600 |
ааааддаааа | асаддадлда | Саас1аа£аа | дддаасааад | дасаРаааа!; | ддда£аа£аа | 660 |
ЬдсПааЕсс | ааааЬааадс | адааааРдаа | даааааЪдаа | а£даадааса | даЛааэкада | 720 |
ааасааа^ад | сааГаСдааа | дасааасПд | ассддд£д£д | д£ддс£да£д | сс£дЬаа£сс | 780 |
<210> 21 <211> 607 <212> ДНК
- 40 011747 <213> Ното зараепз <220>
<221> т!зс_Геабиге <223> последовательность ЗТАК21 <400> 21
дабсаабааб | ббдбаабадб | садбдаабас | аааддддбаб | абасбааабд | сбасадаааб | 60 |
бссаббссбд | ддбабааабс | сбадасабаб | ббабдсабаб | дбасассаад | абабабсбдс | 120 |
аадаабдббс | асадсааабс | бсбббдбадб | адсааааддс | сааааддбс1 | абсаасаада | 180 |
аааббаабас | аббдбддсас | абаабддсаб | ссббабдсса | абааааабдд | абдаааббаб | 240 |
адббаддббс | ааааддсаад | ссбссадаба | абббабабса | бабааббсса | бдбасаасаб | 300 |
бсаасаасаа | дсаааасбаа | асабабасаа | абдбсаддда | ааабдабдаа | сааддббада | 360 |
ааабдаббаа | бабаааааба | сбдсасадбд | абаасаббба | абдадааааа | аадааддаад | 420 |
ддсббаддда | дддассбаса | дддаасбсса | аадббсабдд | баадбасбаа | абасабаабс | 480 |
ааадсасбса | ааабадаааа | баббббадба | абдббббадс | бадббаабаб | сббасббааа | 540 |
асааддбсба | ддссаддсас | ддбддсбсас | ассбдбаабс | ссадсасббб | дддаддсбда | 600 |
ддсдддб 607
<210> | 22 | |
<211> | 1380 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното | зархепз |
<220> | ||
<221> | тазе | £еа£иге |
<223> | последовательность ЗТАК22 | |
<400> | 22 |
сссббдбдаб | ссасссдссб | бддссбссса | аадбдебддд | аббасаддсд | бдадбсасба | 60 |
сдсссддсса | сссбсссбдб | абаббабббс | баадбабасб | аббабдббаа | ааааадббба | 120 |
аааабаббда | бббаабдааб | бсссадааас | баддабббба | сабдбсасдб | бббеббабба | 180 |
бааааабааа | аабсаасааб | ааабабабдд | баааадбааа | аадаааааса | аааасааааа | 240 |
дбдааааааа | бааасаасас | бссбдбсааа | ааасаасадб | бдбдабаааа | сббаадбдсс | 300 |
бдааааббба | дааасабссб | бсбааадаад | ббебдаабаа | аабааддааб | аааабаабса | 360 |
сабадббббд | дбеаббддбб | ебдбббабдб | дабддаббаб | дбббаббдаб | ббдбдбабдб | 420 |
бдаасббабс | бсаабадабд | садасааддс | еббдабаааа | дбббббааса | ссббббсабд | 480 |
ббдаааасбс | бсаабадасб | аддбаббдаб | дааасабабс | бсаааабааб | адаадсбабб | 540 |
- 41 011747
раРдаРааас | ссаРадссаа | РаРсаРасРд | адрдддсааа | адсРддаадс | аРРсссРРЕд | 600 |
аааасРддса | саадасаадд | аРдсссРсРс | РсассасРсс | РаРРааардР | адРаРРддаа | 660 |
дРРсРддсса | дадсааРсад | дсаддадааа | дааааддРаР | РааааРадда | адададдаад | 720 |
РсаааРЕдРс | РсРдРРРдса | дРааасаРда | ррдрараррр | адаааасссс | аРРдРсРсаР | 730 |
ссРааааасР | ссРРаадсРд | аРааасаасР | РсадсааадР | сРсаддаРас | ааааРсааРд | 340 |
РдсаааааРс | асаадсаРРс | сРаРасассд | аРааРадаса | дсадададсс | аааРсаРдад | 900 |
рдаадрссса | РРсасааРРд | сРРсааадаа | ааРааааРас | РРаддааРас | аасРРРсасд | 960 |
ддасаРдаад | дасаррррса | аддасаасРа | аааассасРд | сРсааддааа | Рдадададда | 1020 |
сасааадааа | Рддаааааса | РРссаРдсРс | аРддаадааР | сааРаРсаРд | аааарддсса | 1080 |
РасРдсссаа | адРааРРРаР | адаРРсааРд | сРаассссаР | саадссасса | РРдасРРРсР | 1140 |
РсасадаасР | адааааааас | РаРРРРаааа | сРсаРаРдРа | дРсааааада | дРсддРаРад | 1200 |
ссаадасааР | ссРаадсаРа | аадаасааад | сРддаРдсаР | сасдсрдасР | рсааассаРа | 1260 |
сРасааддсР | асадРаасса | ааасадсаРд | драсрддрас | саааасадаР | адаРадассд | 1320 |
аРадаасада | асададдссР | сддаааРаас | ассасасаРс | РасаасссРР | РдаРсРРсаа | 1380 |
<210> 23 <211> 1246 <212> ДНК <213> Ното зар1епз <220>
<221> т1зс_£еаРиге <223> последовательность 5ТАК23 <400> 23
аРссссЬсаР | ссРРсадддс | адсРдадсад | ддссРсдадс | адсРддддда | дссРсасРРа | 60 |
аРдсРссРдд | дадддсадсс | адддадсаРд | дддРсРдсад | дсаРддРсса | дддРссРдса | 120 |
ддсддсасдс | ассардрдса | дссдссссса | ссРдРРдсРс | РдссРссдсс | ассРддссаР | 180 |
дддсРРсадс | адссадссас | ааадРсРдса | дсРдсРдРас | аРддасаада | адсссасаад | 240 |
садсРададд | ассРРдРдРР | ссасдрдссс | адддадсаРд | дсссасадсс | сааадассад | 300 |
Рсаддадсад | дсаддддсРР | сРддсаддсс | садсРсРасс | РсРдРсРРса | сасадаРддд | 360 |
адаРРРсРдр | РдрдаРРРРд | адрдардрдс | сссРРРддРд | асаРссаада | РадРРдсРда | 420 |
адсассдсРс | РаасааРдРд | РдРдРаРРсР | даааасдада | асРРсРРРаР | РсРдаааРаа | 480 |
ррдардсааа | аРаааРРадР | ррддарррда | ааррсраррс | аРдРаддсаР | дсасасаааа | 540 |
- 42 011747
дЕссаасаРЕ | дсаЕаРдаса | сааадаааад | ааааадсЕЕд | саррссЕраа | аРасаааЕаР | 600 |
сЕдРЕаасЕа | ЕаЕЕЕдсааа | ЕаЕаЕЕРдаа | ЕасасЕЕсЕа | ЕЕаРдЕЕаса | ЕаРааЕаРРа | 660 |
ЕаРдРаЕаРд | ЕаРаРаРааЕ | аРасаЕаРаР | аЕдРЕасаРа | ЕааЕаРасРЕ | сЕаРЕаРдРЕ | 720 |
асаЕаЕааРа | ЕЕЕаЕсЕаРа | адЕаааЕаса | ЕаааЕаРааа | даЕЕЕдадРа | дсЕдРадаас | 780 |
аГЕдРсЕЕаЕ | дЕдРЕаРсад | сЕасЕасЕас | аааааЕаРсЕ | сЕЕссасЕЕа | ЕдссадрЕЕд | 840 |
ссаРаЕаааЕ | аРдаРсРЕсЕ | саРРдаЕддс | ссадддсаад | адРдсадЕдд | дРасЕРаРРс | 900 |
ЕсЕдрдадда | дддаддадаа | аадддаасаа | ддадааадЕс | асааадддаа | аасЕсРддРд | 960 |
ЕЕдссааааЕ | дЕсаадРЕЕс | асаРаЕЕссд | адасддаааа | ЕдасаРдЕсс | сасадаадда | 1020 |
сссЕдсссад | сЕааРдРдЕс | асадаРаРсЕ | саддаадсЕЕ | аааРдаЕЕЕЕ | РРРаааадаа | 1080 |
аададаЕддс | аСЕдРсасЕЕ | дЕРРсРЕдРа | дсЕдаддсЕд | ЕдддаРдагд | садаРЕГсРд | 1140 |
дааддсааад | адсЕссЕдсЕ | ЕРЕРСсасас | сдадддасЕЕ | Есаддаасда | ддссадддрд | 1200 |
сЕдадсасЕа | сассаддааа | ЕсссСддада | дРдЕЕРЕЕсЕ | ЕасЕЕа | 1246 |
<210> 24 <211> 939 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еаЕите <223> последовательность 5ТАН24 <400> 24
асдаддРсас | дадЕЕсдада | ссадссЕддс | саадаЕддЕд | аадсссЕдЕс | ЕсрасЕаааа | 60 |
аРасаасаад | Еадссдддсд | сддрдасддд | сдссЕдЕааЕ | сссадсРасЕ | саддаддсЕд | 120 |
аадсаддада | аЕсЕсЕадаа | сссаддаддс | ддаддрдсад | ЕдадсЕдада | сЕдссссдсЕ | 180 |
дсасЕсЕадс | сРдддсааса | садсаадасЕ | сЕдЕсЕсааа | ЕаааЕаааЕа | ааЕаааЕааа | 240 |
РаааРааара | ааЕаааРааа | Радаааддда | дадррддаад | ЕадаЕдааад | адаадаааад | 300 |
аааЕссРада | ЕЕЕССЕаРсЕ | дааддсасса | Едаадардаа | ддссассЕсЕ | ЕсЕдддссад | 360 |
дЕссЕсссдР | ЕдсаддЕдаа | ссдадЕЕсЕд | дссЕссаЕРд | дадассааад | дадаЕдасЕЕ | 420 |
РддссЕддсЕ | ссЕадЕдадд | аадссаЕдсс | ЕадЕссЕдЬЕ | сЕдЕЕЕдддс | ЕРдаЕссЕдР | 480 |
аРсасЕЕдаР | ЕдЕсЕсЕссЕ | ддасЕЕЕсса | ЕддаЕЕссад | ддаЕдсаасЕ | дадаадЕЕРа | 540 |
ЕЕЕЕЕааРдс | асЕЕасЕЕда | адРаададЕЕ | аРЕЕЕаааас | аРЕЕЕадсаа | аддаааЕдаа | 600 |
ЕЕсЕдасадд | ЕЕЕЕдсасРд | аадасаЕЕса | саЕдЕдадда | ааасаддааа | ассасЕаРдс | 660 |
Еадааааадс | аааЕдсЕдРЕ | дадаЕРдРсР | сасааасаса | ааЕЕдсдрдс | садсаддрад | 720 |
- 43 011747
дбббдадссб | саддРЪдддс | асаРРРРасс | РРаадсдсас | ЪдбОддбдда | асббааддбд | 7Э0 |
асСдеаддас | б+абаЪабас | абасабасаб | аРаабабаба | Расабаббба | бдбдбабаба | 840 |
сасасасаса | сасасасаса | сасасадддб | сббдсбабсб | рдсссадддб | ддбсбссаас | 900 |
РсСдддбсбс | аадсдабсср | сЪдссЪсссс | РРсссааад | 939 |
<210> 25 <211> 1067 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т!зс_£еа6иге <223> последовательность 5ΤΆΒ.25 <400> 25
садссссбсб | РдбдРЪРбСс | бббабббсбс | дбасасасас | дсадббб+аа | дддбдабдбд | 60 |
бдбабаабба | аааддасссб | Рддсссабас | бббссбаабЛ | сбббадддас | бдддаббддд | 120 |
бРОдасбдаа | абабдЪбЪбд | дбддддабдд | дасддбддас | ббссабЪзбс | ссбааасбдд | 180 |
адббббддбс | ддбааесааа | асбаааадаа | ассбсбддда | дасбддааас | сбдаббддад | 240 |
сасбдаддаа | саадддаабд | ааааддсада | сбсбсбдаас | дбРРдабдаа | абддасбсбб | 300 |
дбдаааабба | асадбдааба | РбсасРдббд | сасбдбасда | адбсбсбдаа | абдбааббаа | 360 |
аадЪббОРаб | Ъдадсссссд | адсбббддсб | рдсдсдбарр | бббссддбсд | сддасабссс | 420 |
ассдсдсада | дссбсдссбс | сссдсбдссс | РсадссЪссд | аРдасббссс | сдсссссдсс | 480 |
сбдсбсддбд | асадасдббс | басбдсббсс | аабсддаддс | асссббсдсд | ддадсддсса | 540 |
абсдддадсб | ссддсаддсд | дддаддссдд | дссадббада | бббддаддбР | саасббсаас | 600 |
абддссдаад | саадбадсдс | саабсбаддс | адсддсбдбд | аддаааааад | дсардадддд | 660 |
Рсд+сббсдд | аабсрдрдсс | асссддсасб | ассабббсда | дддбдаадсб | ссбсдасасс | 720 |
абддбддаса | сРРбРсббса | даадсбддбс | дссдссддса | ддбааадбдд | асдсадссдс | 760 |
ддбдддадрд | бббдббддса | ссдаадсбса | аабсссдсда | ддбсаддасд | дссдсаддсб | 840 |
ддсдсдсддр | дасдбдддбс | сдсдббдддд | дсддддсадб | сддасдаддс | дасссадбса | 900 |
аабссбдадс | сббаддадбс | адддбаббса | сдсасбдаба | ассбдбадсд | дассдддара | 960 |
дсбадсбасб | ссббссбаса | ддаадссссд | ббббсасбаа | аабббсаддр | ддрбдддадд | 1020 |
ааадабадад | ссРРбдсааа | ббададсадд | д666666а66 | РбРРбаб | 1067 |
<210> 26
- 44 011747 <211> 540 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<221> т1зс_£еаЕиге <223> последовательность 8ТАН.26 <400>26
сссссЕдаса | адссссадЕд | ЕдЕдаЕдЕЕс | сссасЕсЕдЕ | дЕссаЕдсаЕ | ЕсЕсаЕЕдЕЕ | 60 |
саасЕсссаЕ | сЕдЕдадЕда | даасаЕдсад | ЕдЕЕЕддЕЕЕ | ЕсЕдЕссЕЕд | адаЕадЕЕЕд | 120 |
сЕдадааЕда | ЕддЕЕЕссад | сЕЕсаЕссаЕ | дЕссЕЕдсаа | аддаадЕдаа | сЕЕаЕссЕЕЕ | 180 |
ЕЕЕаЕддсЕЕ | саЕадЕаЕЕс | саЕддсасаЕ | аЕдЕдссаса | ЕЕЕЕЕЕЕааЕ | ссадЕсЕаЕс | 240 |
аЕЕдаЕддас | аНЕдддЕЕд | дЕЕссаадЕс | ЕЕЕдсЕаЕЕд | ЕдааЕадсас | сасааЕЕаас | 300 |
аЕаЕдЕдЕдс | аЕдЕаЕасаЕ | сЕЕЕаЕадЕа | дсаЕдаЕЕЕа | ЕааЕссЕЕсд | ддЕаЕаЕасс | 360 |
сЕдЕааЕддд | аЕсдсЕдддЕ | саааЕддЕаЕ | ЕЕсЕадЕЕсЕ | адаЕссЕЕда | ддааЕсасса | 420 |
сасЕдсЕЕЕс | сасааЕддЕЕ | даасЕааЕЕЕ | асдсЕсссас | садсадЕдЕа | ааадсаЕЕсс | 480 |
ЕаЕЕЕсЕсса | сдЕссЕсЕсс | адЕаЕсЕдЕЕ | дЕЕЕссЕдас | ЕЕЕЕЕааЕда | ЕсаЕсаЕЕсЕ | 540 |
<210>27 <211>1520 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еаЕиге <223> последовательность 8ТАК27 <400> 27
сЕЕддсссЕс | асааадссЕд | Еддссаддда | асааЕЕадсд | адсЕдсЕоаЕ | ЕЕЕдсЕЕЕдЕ | 60 |
аЕссссааЕд | сЕдддсаЕаа | ЕдссЕдссаЕ | ЕаЕдадЕааЕ | дссддЕадаа | дЕаЕдЕдЕЕс | 120 |
ааддассааа | дЕЕдаЕаааЕ | ассааадааЕ | ссададаадд | дададаасаЕ | ЕдадЕададд | 180 |
аЕадЕдасад | аададаЕддд | аасЕЕсЕдас | аададЕЕдЕд | аадаЕдЕасЕ | аддсаддддд | 240 |
аасадсЕЕаа | ддададЕсас | асаддассда | дсЕсЕЕдЕса | адссддсЕдс | саЕддаддсЕ | 300 |
дддЕддддсс | аЕддЪадсЕЕ | ЕсссЕЕссЕЕ | сЕсаддЕЕса | дадЕдЕсадс | сЕЕдаасЕЕс | 360 |
ЕааЕЕсссад | аддсаЕЕЕаЕ | ЕсааЕдЕЕЕЕ | сЕЕсЕадддд | саЕассЕдсс | сЕдсЕдЕдда | 420 |
адасЕЕЕсЕЕ | сссЕдЕдддЕ | сдссссадЕс | сссадаЕдад | асддСЕЕддд | Есадддссад | 480 |
дЕдсассдЕЕ | дддЕдЕдЕдс | ЕЕаЕдЕсЕда | ЕдасадЕЕад | ЕЕасЕсадЕс | аЕЕадЕсаЕЕ | 540 |
дадддаддЕд | ЕддЕааадаЕ | ддадаЕдсЕд | ддЕсасаЕсс | сгадададдЕ | дЕЕссадЕаЕ | 600 |
- 45 011747
дддсасакдд | дадддскдда | аддакаддкк | аскдскадас | дкададаадс | сасакссккк | 660 |
аасассскдд | скккксссас | кдссаадакс | садааадксс | ккдкддкккс | дскдскккск | 720 |
сскккккккк | кккккккккк | кккскдадак | ддадкскддс | кскдксдссс | аддскддадк | 780 |
дсадкддсас | даккксддск | саскдсаадк | кссдссксск | аддкксакас | саккскссса | 840 |
ссксадсскс | ссдадкадск | дддаскасад | дсдссассас | асссадскаа | ккккккдкак | 900 |
ккккадкада | дасддсдккк | сассакдкка | дссаддакдд | ксккдакссд | сскдссксад | 960 |
ссксссааад | кдскдддакк | асаддсдкда | дссассдсдс | ссддсскдск | кксккскккс | 1020 |
акдаадсакк | садскддкда | аааадсксад | ссаддскддк | скддааскск | кдассксаад | 1080 |
кдакскдсск | дссксадсск | сссааадкдс | кдадаккаса | ддсакдадсс | адкссдаакд | 1140 |
кддскккккк | кдккккдккк | кдааасаадд | ксксаскдкк | дсссаддскд | садкдсадкд | 1200 |
дсакасскса | дскссаскдс | адссксдасс | ксскдддскс | аадсааксск | сссааскдад | 1260 |
сскссссадк | адскддддск | асаадсдсак | дссассасдс | скддскаккк | кккккккккк | 1320 |
кккккккккк | дадааддадк | кксакксккд | ккдсссаддс | кддадкдсаа | кддсасадкс | 1380 |
ксадсксаск | дсадсскссд | ссксскдддк | ксаадсдакк | сксскдсскс | адссксссда | 1440 |
Γί ΛιΚ/Ύ/ЧСГ | 4- 4, ч- 4. 4, 4. 4. „4_ | Ч—1- Ч- Ч— +- еь ζ*τ4— гл | Л СПЛ | |||
ι. »— α ι_α^ Чж | сс^ссассах. | к- и ν к. и усу са | ц ц. у. ошу цау | 4. _/V V | ||
ддакддддкк | Ьсассаъд1?11 | 1520 |
<210> | 28 | |
<211> | 961 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното | зархепз |
<220> | ||
<221> | тазе | £еаЪиге |
<223> | последовательность 5ТАК28 | |
<400> | 28 |
аддаддккак | ксскдадсаа | акддссадсс | кадкдааскд | дакааакдсс | сакдкаадак | 60 |
скдкккассс | кдадаадддс | аккксскаас | кскссскака | ааакдссаад | кддадсассс | 120 |
садакдааак | адскдакакд | скккскакас | аадссакска | ддаскддскк | каксакдасс | 180 |
аддакаккса | сссаскдаак | акддскакка | сссаадккак | ддкааакдек | дкадккаадд | 240 |
дддксссккс | сасакддаса | ссссаддкка | каассадааа | дддкксссаа | кскадасксс | 300 |
аадададддк | ксккадасск | сакдсаадаа | адааеккддд | дсаадкасак | ааадкдааад | 360 |
саадкккакк | аадааадкаа | адааасаааа | ааакддскас | кссакаадса | аадккакккс | 420 |
- 46 011747
ЕсасИаЬа! | даЫааЕаад | адаЕддаИа | ИсаЕдадЫ | ИсЕдддааа | ддддбдддса | 480 |
а£1сс1ддаа | с-.садддиг. с | сЕсссасШ | 1адасса1а1 | адддъаюн | сс1да1а1сд | 540 |
ссаЬддсабб | ЕдбааасЕдЪ | са1ддсас1д | абдддадбдб | сЫИадса! | 1с1аа1дса1: | 600 |
ЕаЕааНада | аЕабааЪдад | садбдаддаЕ | дассададд! | сасЕЪсбдИ | дссабаббдд | 660 |
ШзсадЕддд | дИбддЫдд | ЬШЕаасса | саассТдГ.М | ИШИаП | 720 | |
1аШа111а | Ша111а1Ь | 1а1аШШ | абМШШ | адаЕддадбс | 61дс1сЬд1с | 780 |
асссаддИа | дадбдсадОд | дсассаЮОс | ддсЕсасбдс | аадсбсбдсс | ОссИддИс | 840 |
асдссаИс! | дсбдссбсад | сс1сссдад£ | адсбдддас! | асаддбдсс! | дссасса!ас | 900 |
ссддсбааМ | 66сад1адад | асддддббЛс | ассд!д1Уад | ссаддаЪддб | 960 |
С 961
<210> <211> <212> <213> | 29 2233 ДНК Ното | 5ар1епз |
<220> | ||
<221> | т±зс | Геариге |
<223> | последовательность ЗТАК29 | |
< 4 00> | 29 |
адсИддаса | сИдсЕдаЕд | ссасЫЪдда | Едббдааддд | ссдсссбсТс | ссасассдсб | 60 |
ддссасМП | аааОаЕдЕсс | ссЬсЬдссса | даадддсссс | ададдадддд | сСддОдаддд | 120 |
Ьдасаддад! | бдасбдсбсЁ | сасадсаддд | ддМссддад | ддассШбс | 1ссссаМдд | 180 |
дсадсабада | аддассЕада | адддсссссЬ | ссаадсссад | сЕдддсдбдс | адддссадсд | 240 |
аИсдабдсс | МссссЕдас | 6садд1ддсд | сбдбссбааа | дд!д1д6с;1д | Ιίί ЬсЪдИс | 300 |
дссаддддд! | ддсддаЪаса | дЕддадсаЕс | дбдсссдаад | Ед1с1дадсс | сдбддЕаадб | 360 |
ссс^ддаддд | бдсасддЪс! | ссбссдасбд | Гсбссаисас | дгсаддссЕс | асадссбдСа | 420 |
ддсассдсбс | ддддаадсс! | сЕдда^дадд | сса1д!дд1с | а1ссссс1дд | ад'Ьссбддсс | 480 |
Еддссбдаад | аддаддддад | даддаддсса | дссссЬсссб | адссссаадд | сс!дсдаддс | 540 |
бдсаадсссд | дссссасаЕЪ | сбадСссадд | сОгддсЪдлд | саадаадсад | аИдссЁддс | 600 |
ссЬддссадд | с1!сссадсЕ | аддаЪдЕдд! | аЕддсадддд | Едддддаса! | ЕдаддддсЬд | 660 |
сЪдбадсссс | сасаассЕсс | ссадд1аддд | 1дд1:даасад | Еаддсбддас | аадТддасс! | 720 |
дИссса^с! | дадагхсаад | адсссассЪс | Ъсддаддыд | садкдадссд | ада1ссс1сс | 780 |
асТдсасбсс | адссбдддса | асададсаад | асбсбдбсЕс | ааааааасад | аасаасдаса | 840 |
- 47 011747
асаааааасс | сассДсДддс | ссасДдссДа | асДДДдДааа | ДааадДДсДа | ДДддсасаДа | 900 |
дасасассса | ДДсаДДДаса | ДасДдсДдсд | дсДдсДДДДд | саДДасссДД | дадДадасда | 960 |
садассасдД | ддссаДддаа | дссааааада | ДДДасДдДсд | ддсссдддас | адаадДсДдс | 1020 |
ДсДададдда | дассссддсс | саДддддсад | дассасДддд | сдДдддсада | адддаддссД | 1080 |
сддДдссДсс | асдддссДад | ДДдддДаДсД | садДдссДдД | ДДсДДдсаДд | дадсассадд | 1140 |
ддДсадддса | адДассДдда | ддаддсаддс | ДдДДдсссдс | ссадсасДдд | дасссаддад | 1200 |
ассДДдадад | дсДсДДаасд | ааДдддадас | аадсаддасс | адддсДссса | ДДддсДдддс | 1260 |
сДсадДДДсс | сДдссДдДаа | дДдадддадд | дсадсДдДда | аддДдаасДд | Ддаддсадад | 1320 |
ссДсДдсДса | дссаДДдсад | дддсддсДсД | дссссасДсс | ДдДДдДдсас | ссададДдад | 1380 |
дддсасдддд | ДдадаДдДса | ссаДсадссс | аДаддддДдД | ссДссДддДд | ссаддДсссс | 1440 |
аадддаДдДс | ссаДсссссс | ДддсДдДдДд | дддасадсад | адДсссДддд | дсДдддаддд | 1500 |
сДссасасДд | ДДДДдДсадД | ддДДДДДсДд | аасДдДДааа | ДДДсадДдда | аааДДсДсДД | 1560 |
ДссссДДДДа | сДдааддаас | сДссааадда | адассДдасД | дДдДсДдада | адДДссадсД | 1620 |
ддДдсДддас | дДсдсссада | аадсссаддД | асДдссасдд | дсдссддсса | ддддДдДдДс | 1680 |
Ддсдссадсс | аДдддсасса | дссаддддДд | ДдДсДасдсс | ддссаддддД | аддДсДссдс | 1740 |
сддссДссдс | ДдсДдссДдд | ддадддссдД | дссДдасасД | дсаддсссдд | ДДДдДссдсд | 1800 |
дДсадсДдас | ДДдДадДсас | ссДдсссДДд | даддддсддд | асадсаасДс | ДддДддДДдд | 1860 |
ддааддддсс | ДссДдаДДса | дссДсДдсдд | асддДдсдсд | адддДддадс | ДссссдсссД | 1920 |
ссссассдсс | ссДддссадд | дДДдаасдсс | ссДдддаадд | асДсаддссс | дддДсДдсДд | 1980 |
ДДдсДдДдад | сдДддссасс | ДсДдсссДад | ассададсДд | ддссДДсссс | ддссДаддад | 2040 |
садссдддса | ддассасадд | дсдссдадДд | ассДсадддс | ДдсссдассД | ддаддсссдс | 2100 |
сДддсдДсдс | ддДдДдасДд | асадсссадд | адсдддддсД | дДДдДааДДд | сДдддДсДсс | 2160 |
ДДсасасада | ассДДДДсдд | даадаДддсД | дасаДссДдд | адаадаДсаа | даадДаадДс | 2220 |
ссдсссссса | ссс | 2233 |
<210> 30 <211> 1851 <212> ДНК <213> Ното зарДепз <220>
<221> тхзс_£еаДиге <223> последовательность ЗТАНЗО
- 48 011747 <400> 30
дддбдсаббб | ссасссаддд | дасасббддс | аабддбддда | дасаббдсбб | дббдбсасаа | 60 |
сбдддсабдд | дадбдсбдсб | дсдбсбадбд | ддбададдсс | ададабдсбс | сбаабабссб | 120 |
асааддсаса | даасадсссс | ссасаасада | да а 66. а беса | деебдааааб | дбссасадбд | 180 |
сбдаддббдд | дааасссбаб | бсбададсса | асаддсбдбд | аадеббдаеб | сабддббсса | 240 |
бсассаабад | сбдсдбдасс | ббддбдадбб | ссббадсбдс | бсбдбдссбс | ддаббсабдд | 300 |
баддббббсс | ббдббаддбб | бааабдадбд | аадббабаса | дадддссбда | адбсбсабдд | 360 |
баббббасба | дадссбсабб | дбдббббадб | бабааббада | ааббдддбаа | ддбааддаса | 420 |
садаадаадс | сабсбдабаб | дддддсббса | сасббадаад | бдассбсдда | дсааббдбаб | 480 |
бддддбддаа | адддасбаас | адссаддадс | ададддсаса | ббддааббдд | ддссададдд | 540 |
сасадасбдс | сббдбссабс | аддсабадса | абддасадад | дааддддааб | дасбадббаб | 600 |
ддсбдсаадд | ссаадбасад | дддасббабб | бсбсабабсб | абсбабсбаб | сбассбассд | 660 |
бсбаб+бабс | бабсабсбаб | сбасббаббб | абсбабсбаб | ббабдеабдб | дбассаассд | 720 |
ааадббббад | бааабдсаса | аасбдсдаба | баабдааааб | ддаааббббс | аааадаадад | 780 |
ааабсассбд | ссассбдасб | ассббаасаа | абдадбддбб | ббсабсбсбс | сббссаддсс | 840 |
бдбсаббббб | асадбдсббб | адбсабаааа | саддбссбсб | аббсбаббдб | бббабдбсас | 900 |
абдаааббдб | ассабаадса | ббббссабда | бдбдасбсса | сбдбббсабб | ббссаббббб | 960 |
ббссадаабд | аадабаассб | саббдббббб | ббссбдаббд | бааааабдеб | ебдбдебебб | 1020 |
6666666666 | Шаасаабд | саддсадбас | сааааадбаб | даадаадааб | дбаабадббс | 1080 |
ссабббссса | бсбсасбсбб | бааддссадс | аббббддбда | асабссабсс | даасааабсб | 1140 |
ссасдсд+66 | абсаабббдб | бдасббасбс | еббеббббаб | дбааабабда | асабдаббба | 1200 |
асбдссадбс | сабббддаас | сббааадбда | аддбббббба | ббдббддддб | ббдебабддб | 1260 |
сбдаабабдб | дбдбсссссс | аааабббабд | ббдаабссба | асдсссаабд | сдаббаддад | 1320 |
дбддддссаб | баддаддбда | ббаадбсабд | аадбсабсад | сссбаабдаа | бдддабббдб | 1380 |
ддссббдааа | адддасссса | дададсбдсс | ббдссссббс | бдссабдбаа | ддасасадбд | 1440 |
аддадсбадд | аадддддссб | садсададас | сааабдбдаб | ддбдссбсда | баббддаебб | 1500 |
сссадссбсс | адаабдбдад | ааабдааббб | ебдббдббба | баадбсассс | адбебабадб | 1560 |
аббббдббсб | адсадсссаа | асадасбаад | бсадддббдб | бдббббадда | адбддддааб | 1620 |
ддддссабдс | абдддбдбас | дссадаасаа | аддаадссад | саадбссбда | аадабаебдд | 1680 |
аааадддааб | адбдддсасд | бдсадбдбдб | бадбббссбд | аддебдебаб | аасааадсас | 1740 |
- 49 011747 сасаддЕЕдд дЕддсЕЕааа ЕаасадаааЕ
ЕсаЕЕсЕссс аЕсаЕЕсЕдд ддассадасд
1300
ЕсЕдаааЕса адасЕссЕаЕ дссаЕдсЕсс
ЕЕсЕдааддс
Ессаддддад
1851 <210> 31 <211> 1701 <212> ДНК <213> Ното зараепз <220>
<221> т1зс_£еаЕиге <223> последовательность 3ΤΑΒ31 <220>
<221> т1зс_£еабиге <222> (159)..(1696) <223> η является а, с, д или £ в различных положениях <400> 31
сасссдссЕЕ | ддссссссад | адЕдсбддда | ЕЕасаадЕдЕ | ааассассаЕ | ЕссЕддсЕад | 60 |
аЕЕЕааЕЕЕЕ | ЕЕааааааЕа | аададаадЕа | ддааЕадЕЕс | аЕЕЕЕаддда | дадссссСЕа | 120 |
асЕдддасад | дддсаддаса | ддддЪдаддс | ЕЕсссЕЕапЕ | ЕсаадсЕсас | сЕсааассса | 180 |
сссаддасбд | ЕдЕдЕсасаЕ | ЕсЕссааЕаа | аддаааддЕЕ | дсЕдсссссд | ссЕдбдадЕд | 240 |
сЕдсадЕдда | дддЕададдд | ссдЕдддсад | адЕдсЕЕсаЕ | ддасЕдсбса | Есаадааадд | 300 |
сЕЕсаЕдаса | аЕсддсссад | сбдсЕдЕсаЕ | сссасаЕЕсЕ | асЕЕссадсЕ | аддадааддс | 360 |
ддсЕЕдссса | садЕсассса | дссддсаадЕ | дЕсассссЕд | ддЕЕддассс | ададсЕаЕда | 420 |
ЕссЕдсссад | дддЕссадсЕ | дадааЕсадд | сссасдЕЕсЕ | аддсададдд | дсбсассЕас | 480 |
ЕдддасЕсса | дЕадсЕдЕад | ЕдсаЕддадд | саЕсаЕддсЕ | дсадсадссЕ | ддассЕддбс | 540 |
ЕсасасЕддс | ЕдбсссЕдЕд | ддсаддссаЕ | ссЕсааЕдсс | аддЕсаддсс | саадсаЕдЕа | 600 |
Есссадасаа | ЕдасааЕддд | дЕддааЕссЕ | сЕсЕЕдЕссс | адаадссасЕ | ссЕсасЕдЕЕ | 660 |
сЕассЕдадд | ааддсадддд | саЕддЕддаа | ЕссЕдаадсс | ЕдсЕдЕдадд | дЕсЕссадсд | 720 |
аасЕбдсаса | ЕддЕсадссс | ЕдссЕЕсбсс | ЕсссЕдаасб | адаббдадсд | ададсаадаа | 730 |
ддасаЕЕдаа | ссадсассса | аадааЕЕЕЕд | дддаасддсс | ЕсЕсаЕссад | дЕсаддсЕса | 840 |
ссЕссЕЕЕЕЕ | ааааЕЕЕааЕ | ЕааЕЕааЕЕа | аЕЕааЕЕЕЕЕ | ЕЕЕЕададас | ададЕсЕЕас | 900 |
ЕдЕдЕддссс | аддсЕдЕадЕ | дсадбддсас | ааЕсаЕадЕЕ | сасЕдсадсс | ЕсааасЕссс | 960 |
сассЕсадсс | ЕсЕддаЕЕад | сЕдадасЕас | аддЕдсасса | ссассасасс | садсЕааЕаЕ | 1020 |
ЕЕЕЕаЕЕЕЕЕ | дбадададад | ддЕЕЕсасса | ЕсЕЕдсссад | дсЕддЕсЕса | аасЕссЕддд | 1080 |
сбсаадЕдаЕ | сссдсссадд | ЕсЕдааадсс | сссаддс£дд | ссЕсадасЕд | ЕддддЕЕЕЕс | 1140 |
- 50 011747
саРдсадсса | сссдадддсд | сссссаадсс | адРРсаРсРс | ддадРссадд | ссрддсссрд | 1200 |
ддадасадад | рдааассадр | ддРРРРРаРд | аасРРаасРР | ададРРРааа | адаРРРсРас | 1260 |
РсдаРсасРР | дРсаадаРдс | дсссРсРсРд | дддадааддд | аасдрдасрд | даРРсссРса | 1320 |
сРдРРдРаРс | ррдаарааас | дсрдсрдсрр | сарссрдрдд | дддссдрддс | ссрдрсссрд | 1380 |
рдрдддрддд | дссРсРРсса | РРРсссРдас | РРадааасса | садРссассР | адаасадддР | 1440 |
РРдададдсР | РадРсадсас | РдддРадсдР | РРРдасРсса | РРсРсддсРР | РсРРсРРЫР | 1500 |
сРРРссадда | РРРРРдРдса | дааарддЕРс | ррррдррдсс | дрдррадрсс | РссРРддаад | 1560 |
дсадсРсада | аддсссдрда | аардрсдддд | дасаддассс | ссадддаддд | аассссаддс | 1620 |
РасдсасРРР | адддРРсдРР | сРссадддад | ддсдассРда | сссссдпаРс | сдРсддпдсд | 1680 |
сдппдппасп | ааппппРРсс | с | 1701 |
<210> 32 <211> 771 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
<221> т1зс_£еаРиге <223> последовательность ΞΤΑΚ32 <400> 32
даРсасасад | сРРдРаРдРд | ддадсрадда | РРддаасссс | адаадрсрдд | ссссаддРРс | 60 |
аРдсРсРсас | ссасРдсаРа | сааРддссРс | рсаРаааРса | аРссадРаРа | ааасаРРада | 120 |
аРсРдсРРРа | ааассаРада | аРРадрадсд | РаадРааРаа | аРдсададас | сардсадрда | 180 |
аРддсаРРсс | Рддааааадс | ссссадаадд | ааРРРРаааР | садсРРРсдР | сРааРсРРда | 240 |
дсадсРадРР | адсаааРаРд | адаакасадр | РдРРсссада | РааРдсРРРа | РдРсРдасса | 300 |
РсРРааасРд | дсдсРдРРРР | РсааааасРР | ааааасаааа | РссаРдасРс | ЕРРРааРРаР | 360 |
аааадРдаРа | саРдРсРасР | РдддаддсРд | аддрддрддд | аддаРддсРР | дадРРРдадд | 420 |
сРдсадраРд | срасрарсар | дссРаРаааР | адссдсРдса | РРссадсРРд | ддсаасаРас | 480 |
ссаддсссРа | РсРсаааааа | аРааааадРа | аРасаРсРас | аРРдаадааа | аРРааРРРРа | 540 |
РРдддРРРРР | РРдсаРРРРР | аЕРаРасаса | дсасасасад | сасаРаРдаа | ааааРдддРа | 600 |
рдаасРсадд | саРРсаасРд | даадаасадр | асРаааРсаа | РдРссаРдРа | дРсадсдРда | 660 |
срдаддррдд | рррдрррррр | СРРРРРРсРР | СРСРРСРСРР | сРсРРРРсРР | рррррррдад | 720 |
асддадсРРР | дсРсРРРРРд | сссаддсРРд | аРРдсааРдд | сдРдаРсРса | д | 771 |
- 51 011747 <210> 33 <211> 1368 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т1ас_£еаЕиге <223> последовательность ЗТАКЗЗ <400> 33
дсЕЕЕЕабсс | ЕссаЕЕсаса | дсЕадссЕдд | сссссададЕ | асссааЕЕс! | сссЕаааааа | 60 |
сддЕсаЕдсЕ | дЕаЕадаЕдЕ | дЕдЕддсЕЕд | дЕадЕдсЕаа | адбддссаса | ЕасададсЕс | 120 |
Едасассааа | ссЕсаддасс | аЕдЕЕсаЕдс | сЕЕсЕсасЕд | адЕЕсЕддсЕ | ЕдЕЕсдЕдас | 180 |
асаЕЕаЕдас | аЕЕаЕдаЕЕа | ЕдаЕдасЕЕд | ЕдададссЕс | адЕсЕЕсЕаЕ | адсасЕЕЕЕа | 240 |
дааЕдсЕЕЕа | ЕааааассаЕ | ддддаЕдЕса | ЕЕаЕаЕЕсЕа | ассЕдЕЕадс | асЕЕсЕдЕЕс | 300 |
дЕаЕЕассса | ЕсасаЕссса | асаЕсааЕЕс | ЕсаЕаЕаЕдс | аддЕассЕсЕ | ЕдЕсасдсдс | 360 |
дЕссаЕдЕаа | ддадассаса | ааасаддсЕЕ | ЕдЕЕЕдадса | асааддЕЕЕЕ | ЕаЕЕЕсассЕ | 420 |
дддЕдсаддб | дддсЕдадЕс | Едаааадада | дЕсадЕдаад | ддадасаддд | дЕдддЕссас | 480 |
ЕЕЕаЕаадаЕ | ЕЕдддЕаддЕ | адЕддааааЕ | ЕасааЕсааа | дддддЕЕдЕЕ | сЕсЕддсЕдд | 540 |
ссадддбддд | ддЕсасаадд | ЕдсЕсадЕдд | дададссЕЕЕ | дадссаддаЕ | дадссадаад | 600 |
дааЕЕЕсаса | аддЕааЕдЕс | аЕсадЕЕаад | дсадддасЕд | дссаЕЕЕЕса | сЕЕСЕЕЕЕдЕ | 660 |
ддбддаабдб | саЕсадЕЕаа | ддсаддаасс | ддссаЕЕЕЕс | асЕЕсЕЕЕЕд | ЕдаЕЕсЕЕса | 720 |
сЕЕдсЕЕсад | дссаЕсЕдда | сдЕаЕаддЕд | саддЕсасад | Есасадддда | ЕаадаЕддса | 780 |
аЕддсаЕадс | ЕЕдддсЕсад | аддссЕдаса | ссЕсЕдадаа | асЕааадаЕЕ | аЕаааааЕда | 840 |
ЕддЕсдсЕЕс | ЕаЕЕдсаааЕ | сЕдЕдЕЕЕаЕ | ЕдЕсаададд | сасЕЕаЕсЕд | ЕсааЕЕаада | 900 |
асссадЕддЕ | адааЕсдааЕ | дЕссдааЕдЕ | аааасааааЕ | асаааассЕс | ЕдЕдЕдЕдЕд | 960 |
ЕдЕдЕдЕдад | ЕдЕдЕдЕдЕа | ЕдЕдЕдЕдЕд | ЕдЕдЕаЕЕад | ададдаааад | ссЕдЕаЕЕЕд | 1020 |
даддЕдЕдаб | ЕсЕЕадаЕЕс | ЕаддЕЕсЕЕЕ | ссЕдсссасс | ссаЕаЕдсас | ссассссаса | 1080 |
ааадаасааа | саасаааЕсс | саддасаЕсЕ | Еадсдсааса | ЕЕЕсадЕЕЕд | саЕаЕЕЕЕас | 1140 |
аЕаЕЕЕасЕЕ | ЕЕсЕЕасаЕа | ЕЕаааааасЕ | дааааЕЕЕЕа | ЕдаасасдсЕ | аадЕЕадаЕЕ | 1200 |
ЕЕаааЕЕаад | ЕЕЕдЕЕЕЕЕа | сасЕдааааЕ | ааЕЕЕааЕаЕ | ЕЕдЕдаадаа | ЕасЕааЕаса | 1260 |
ЕЕддЕаЕаЕЕ | ЕсаЕЕЕЕсЕЕ | ааааЕЕсЕда | ассссЕсЕЕс | ссЕЕаЕЕЕсс | ЕЕЕЕдасссд | 1320 |
аЕЕддЕдЕаЕ | ЕддЕсаЕдЕд | асЕсаЕддаЕ | ЕЕдссЕЕаад | дсаддадд | 1368 |
- 52 011747 <210> 34 <211> 755 <212> ДНК <213> Ното зар1еп5 <220>
<221> т1зс_£еа1:иге <223> последовательность 5ТАН34 <400>34
асЕдддсасс | с£сс£аддса | ддддаа+д+д | адаасДдссд | ссдссс1ддд | дсЕдддсдсс | 60 |
аЕд+сасадс | аддадддадд | асдд+дЪСас | ассасдбддд | ааддасЬсад | дд+ддксадс | 120 |
сасааадс+д | с£дд£даЕда | ссаддддс££ | д£д£сС1сас | СсЕдсадссс | Ъаасасссад | 180 |
дсСдддССсд | сЕаддсЬсса | ЕссСддддд!: | дсадасссСд | адад+дасдс | сад£дддадс | 240 |
сЕсссдсссс | Ссссс££сс£ | сдааддссса | ддддСсааас | ад£д£адас£ | сададдсс£д | 300 |
адддсасаЕд | ШаНЬадс | адасааддЕд | дддсЬссакс | адсдддд-дд | сскддддадс | 360 |
адс+дсаГдд | дкддсасСдЕ | ддддадддСс | ЕсссадсЕсс | сСсааЕддкд | ЛЛсдддсЕдд | 420 |
ЕдсддсадсЕ | ддсддсассс | Еддасададд | ЬддаЕаЕдад | дд£да£ддд£ | ддддаааЕдд | 480 |
даддсасссд | адаЛддддас | адсадааЕаа | адасадсадс | ад+дс+дддд | ддсаддддда | 540 |
Едадсааадд | саддсссаад | асссссадсс | сасЕдсассс | ЕддссЬссса | саадсссссЕ | 600 |
сдсадссдсс | садссасасЕ | сас+дСдсас | Есадссдксд | аСасасСддЕ | сЕдПЕаддда | 660 |
дааадЕссди | садаасаддс | адскдЕдЕдЕ | д£д1:дСдсд£ | дсаГдад+дЛ | дрдЬдгдгда | 720 |
Ьссс+дас+д | ссаддЬссЬс | ЕдсасЬдссс | с+ддд | 755 |
<210>35 <211>1193 <212> ДНК <213> Ното эаргепз <220>
<221> т12с_£еа£иге <223> последовательность 3ΤΑΚ35 <220>
<221> πιΪ50_ίβ3·(:ιΐΓβ <222> (312)..(1191) <223> η является а, с, д или £ в различных положениях <400>35 сдасСЕдд+д а+дсдддсСс £££1:!:Лдд1:+ сса1;аЬдаас ^рЕааадСад СстЪссаа60
Ь£сЬд£даад ааадЪсаЬЕд д£адд££да£ ддддаЪддса 1:£даа£с1:д£ аааЪЕассЕЕ120 дддсадЕаЕд дсса£1£Еса сааЛдЕЛдаЕ ЕсСЕссЕа^с са£да£да£д дазЕдЕЛсЕ!:180
- 53 011747
ссаЕЕадЕЕЕ | дЕаЕссЕсЕЕ | ЕЕаЕЕЕссЕЕ | дадсадЕддЕ | ЕЕдЕадЕЕсЕ | ссЕЕдаадад | 240 |
дЕссЕЕсаса | ЕсссЕЕдЕаа | дЕЕддаЕЕсс | ЕаддЕаЕЕЕЕ | аЕЕсЕсЕЕЕд | аадсаааЕЕд | 300 |
ЕдааЕдддад | ЕпсасЕсасд | аЕЕЕддсЕсЕ | сЕдЕЕЕдЕсЕ | дсЕдддЕдЕа | ЕааапааЕдЕ | 360 |
пдЕдаЕпЕЕп | дЕасаЕЕдаЕ | ЕЕпдЕаЕссп | ЕдадасЕЕпд | сЕдааЕЕЕдс | ЕЕпаЕспдсЕ | 420 |
Еппдддаасс | ЕЕЕЕдддсЕд | аааспаЕддд | аЕЕЕЕсЕааа | ЕаЕасааЕса | ЕдЕсдЕсЕдс | 480 |
ааасадддаа | сааЕЕЕдасЕ | ЕссЕсЕЕЕЕс | сЕааЕЕдааЕ | асасЕЕЕаЕс | ЕссЕЕсЕссЕ | 540 |
дссЕааЕЕдс | ссЕдддсааа | асЕЕссааса | сЕаЕдпЕпдп | ааЕаддадпЕ | ддЕдададад | 600 |
ддсаЕсссЕд | ЕЕсЕЕдЕЕдс | садпЕЕЕЕса | аадддааЕдс | ЕЕссадЕЕЕЕ | ддсссаЕЕса | 660 |
дЕаЕдаЕаЕд | ддсЕдЕдддЕ | пдЕдЕсаЕаа | аЕадсЕсЕЕа | ЕпаЕЕЕЕдаа | аЕдЕдЕссса | 720 |
ЕсааЕассЕа | аЕЕЕаЕЕдаа | адЕЕЕЕЕадс | аЕдаапдсаЕ | пдЕЕдааЕЕЕ | ддЕсаааддс | 780 |
ЕЕЕЕЕсЕдса | ЕсЕаЕддааа | ЕааЕсаЕдЕд | дЕЕЕЕЕдЕсЕ | ЕЕддсЕспЕд | ЕЕЕаЕаЕдсЕ | 840 |
ддаЕпасаЕЕ | ЕаЕЕдаЕЕЕд | ЕдЕаЕаЕпда | асссадссЕп | псаЕсссадд | даЕдаадссс | 900 |
асЕЕдаЕсса | адсЕЕддсдс | дспдпсЕадс | Есдаддсадд | саааадЕаЕд | сааадсаЕдс | 960 |
аЕсЕсааЕЕа | дЕсадсассс | аЕадЕссдсс | ссЕассЕссд | сссаЕссдсс | ссЕаасЕспд | 1020 |
V> к-» (“> · 4— + ,ι— .к—1 | —к 4- 4- 1-9 -¼ 1-9 л— | -¼ —, —к Ь Г к + Ь + + | —»—к «-к —к и ,1^ ,—к -г, г. | 1 лол | ||
11 *— и·у и иг— у-и | и-а и и*— ии>^ и·и | ’-а'-уу-.уаь | иаслинииии и | синю и*—+а еду | сддпдссдсс | X V У V |
сЕдсЕЕдапс | аЕЕсададЕп | пададппЕЕд | даддсспадс | сЕЕдсаааас | гссддаспдп | 1140 |
ЕЕсЕппддаЕ | ЕдассссппЕ | ЕаааЕаЕЕЕд | ЕЕЕЕсаппдд | пда | 1193 |
<210> 36 <211> 1712 <212> ДНК <213> Ното зараепз <220>
<221> т1зс_1еаЕиге <223> последовательность 3ΤΑΚ36 <400> 36
даЕсссаЕсс | ЕЕадссЕсаЕ | сдаЕассЕсс | ЕдсЕсассЕд | ЕсадЕдссЕс | ЕддадЕдЕдЕ | 60 |
дЕсЕадссса | ддсссаЕссс | сЕддаасЕса | ддддасЕсад | дасЕадЕддд | саЕдЕасасЕ | 120 |
ЕддссЕсадд | ддасЕсадда | ЕЕадЕдадсс | ссасаЕдЕас | асЕЕддссЕс | адЕддасЕса | 180 |
ддасЕадЕда | дссссасаЕд | ЕасасЕЕддс | сЕсаддддас | ЕсаддаЕЕад | Едадссссса | 240 |
саЕдЕасасЕ | ЕддссЕсадд | ддасЕсадда | ЕЕадЕдадсс | ссасаЕдЕас | асЕЕддссЕс | 300 |
аддддасЕса | ддасЕадЕда | дссссасаЕд | ЕасасЕЕддс | сЕсаддддас | ЕсадаасЕад | 360 |
- 54 011747
1дадссссас | аЬдЬасасЪЬ | ддсМсаддд | дасРсаддак | ЕадЬдадссс | сасаРдкаса | 420 |
сИддасасд | РдаассасаЕ | сдаРдСдсРд | сададсРсад | сссРсРдсад | ардааардрд | 480 |
дРсаРддса! | ЕссМсасад | 1ддсасссс1 | сдРРсссЕсс | ссассРсаРс | РсссаРРсРР | 540 |
дЕсРдСссдс | адсассРдсс | аРдРссадсс | ддсадапсс | ассдсадсаР | сРРсРдсадс | 600 |
асссссдасс | асасассЬсс | ссадсдссЬд | с+ДддсссРс | садсссадсР | сссдссРРРс | 660 |
ИссЫдддд | аадсРсссРд | дасадасасс | сссРссРссс | адссаРддсР | РРРРссРдсР | 720 |
сЬдссссасд | сдддасссЪд | сссЪддаЕдЕ | дсРасааРад | асасаксада | РасадсссРР | 780 |
ссРсадсадс | сддсадассс | аддд£ддас1 | дсРсддддсс | РдссРдРдад | дрсасасадд | 840 |
ТдЕсдЕЕаас | ΊΐдссаЬскс | адсаасРад! | дааРаЬдддс | адаРдсРасс | РРссРР ссдд | 900 |
РРсссгддЬд | ададдЬасгд | д1дда£д1сс | рдрдррдссд | дссассРРРР | дРсссРддаР | 960 |
дссаШа:!: | ШЛВсаса | аагай+ссс | аддРсРсРРс | рдрдрдсаад | дРаРРадддс | 1020 |
Ддсадсдддд | дссаддссас | адаРсРсРдР | ссРдадаада | сРРддаРРсР | адрдсаддад | 1080 |
асРдаадРдД | аЕсасассаа | 1садЬд1ааа | РРдЕРаасРд | ссасааддад | аааддссадд | 1140 |
ааддадЕддд | дсаДддРддЕ | дРРсЕадРд! | гасаадаада | адссадддад | ддсррссрдд | 1200 |
ардаадрддс | аСсЬдассЬд | ддаРсРддад | даддадаааа | ардрсссааа | ададсадада | 1260 |
дсссасссТа | ддсРсЬдсас | саддаддсаа | сИдсСдддс | РРаРддааРР | сададддсаа | 1320 |
дРдаЬаадса | дааадИссЫ | дддддссаса | аЫаддаМИ: | сРдРсРЕсРа | аадддссРсР | 1380 |
дсссЬсРдсс | дЕдЕдассМ | дддсаадРРа | сМсассРсР | адРдсРРРдд | ЕРдссРсаРс | 1440 |
ЕдРааадЕдд | РдаддаРаа! | дсЬа!сасас | РддЕРдадав | РРдаадРааР | РаРРдсРдса | 1500 |
аадддсиа! | аадддРдРсР | аарасрадра | сРадРаддРа | сррсардрдр | сррдасаарр | 1560 |
Маабсабба | ПаНИдЬс | абсассдРса | сЪсб.ссадд | ддасРааРдР | сссрдсрдрр | 1620 |
сЬдЮсааар | РааасаРРдР | РЕаРсссРдГ | дддсаРсРдд | сдаддЕддсР | аддааадссР | 1680 |
ддадсГдИс | ссРдРРдасд | РдссадасРа | д* | 1712 |
<210> 37 <211> 1321 <212> ДНК <213> Ното зарлепз <220>
<221> т1зс_£еа1:иге <223> последовательность 5ТАК37 <400> 37 аддаРсаса! Нааддаад! дСдРддддЕс ссЕддаРдас ассадсассс ад1дсддс1с 60
- 55 011747
РдРсРддсаа | ссдсРсссаа | ддрддсадда | дрдддрдрсс | ссрдрдрдрс | адрдддсадс | 120 |
РссРдсРдад | ссРасадсРс | асРддддадс | сРдасадсдд | ддссардрдс | сРдасасРсс | 160 |
рсрсрдсррд | РддассРддс | ааддсаддда | дсадааааса | дадссасРРд | ааддсРРСсР | 240 |
дРсРдсдРсР | дрдрдсадрд | РддаРРРадР | РдРдсРРРРР | ЪсРРдсРддд | ададсасадс | 300 |
сассаРРРас | аадсадРдРс | асссРсаРдд | дрддсдадда | садаасадда | дссРсРдсРс | 360 |
РсРдРассРа | Рсрдддсссд | дрдддсРссс | РРдРссРддс | РРссаРсРсР | дРсРсадсда | 420 |
ссаРРсадсс | сРдсдсадда | асасардррд | сРРадаааад | ссаааРРсад | сссРРдРсРс | 480 |
РдссРссРсР | ддрсРсаРда | рдрдсарсрд | РРассРРдаа | асРддааасс | адРсРаРсаа | 540 |
РдРсРдРдсс | ааРРРРРРаР | РсссРсссса | ассРссРРсс | ссаРасдасР | РРРРаРРРар | 600 |
дРаддаРдРд | РдсРдРсРаа | РдаРдддаРд | ассасаРРРР | ЕссаРдРРсР | аааадрдсрс | 660 |
сРсРсссдса | дддрсссадд | дсРддРддРР | дсРРРдддРс | РасадсРасд | РсРРасссдс | 720 |
сРссРдссРс | аасадссРдР | дрддрддсаа | адссддрдрд | дддсРдддда | асдсадсдРР | 780 |
сРссаддадд | дддасссддс | РсРссРРсРд | садрдсаддс | дааддссрад | ардссадрдр | 840 |
дассРсссас | ааддсдрддс | РРссадасРс | сссддсрдда | адрдардсРР | ррррдссрсс | 900 |
ддсссРдддР | Ррдаадсадс | сРддсРРРсР | сррддраадр | ддсРддРдРс | РРадсадсРд | 960 |
саарсрдадс | РсадссассР | асасассасс | дрддссдаса | сРРРсаРРаа | ааадРРРссР | 1020 |
дадасдасрр | дсдРдсаРдР | РдасРРсаРд | аРсадсдссд | сРдддаадаа | ссссРдадсс | 1080 |
ддрддддрдд | ддсРддаадс | адсаддрдса | дРдаРддддс | рдддрдссса | ддаддссРса | 1140 |
дРдсРсааРс | аддссааддр | ддссаадссс | аддсрдсадд | дааддссддс | срдддддррд | 1200 |
рдддрдадса | саддсаддса | ссадсРдддс | адрдррадда | рдсрддадса | дсаРссдРаа | 1260 |
ссссасРдад | РддддРадРс | РддРРддддс | адддассдсР | дРРдсРРРдд | садададада | 1320 |
Р 1321 <210> 38 <211> 1445 <212> ДНК <213> Ното зар+елз <220>
<221> т1зс_£еарцге <223> последовательность 5ΤΑΡ38 <220>
<221> Ш15с_£еаРиге <222> (348)..(949} <223> η является а, с, д или £ в различных положениях
- 56 011747 <400>38
даЕсЕаРддд | адЕадсЕЕсс | ЕРадЕдадсЕ | ЕРсссЕЕсаа | аРасЕЕЕдса | ассаддЕада | 60 |
дааРЕЕЕдда | дрдааддРЕЕ | ЕдЕЕсЕЕсдЕ | ЕЕсЕЕсасаа | ЕаРддаЕаРд | саРсРРсЕРЕ | 120 |
ЕдааааРдРЕ | ааадЕаааРЕ | ассЕсЕсЕЕЕ | ЕсадаЕасРд | ЕсЕРсаРдсд | аасРРддРаЕ | 180 |
ссЕдЕЕЕсса | ЕсссадссЕЕ | сЕаЕаассса | дРаасаЕсЕЕ | ЕЕЕЕдааасс | адрдддрдад | 240 |
ааадасассЕ | ддЕсаддаас | дсддассаса | ддасаасгса | ддсЕсассса | сддсаРсада | 300 |
сЕаааддсаа | асааддасЕс | ЕдРаЕааадЕ | ассддрддса | ЕдЕдРаРпад | ЕддадаЕдса | 360 |
дссЕдЕдсЕс | Едсадасадд | дадЕсасаса | дасасЕЕЕЕс | ЕаРааРЕтсЕ | ЕаадРдсРРЕ | 420 |
дааЕдРЕсаа | дЕадааадЕс | РаасаРЕааа | ЕЕЕдаЕЕдаа | сааЕРдЕаРа | РРсаРддааЕ | 480 |
аЕЕЕЕддаас | ддааЕассаа | ааааЕддсаа | ЕадрддРЕсЕ | РЕсРддаРдд | аадасааасР | 540 |
ЕЕЕсЕЕдЕЕЕ | ааааЕаааРЕ | РЕаРРРРаРа | ЕаРЕЕдаддР | ЕдассасаРд | ассРРаадда | 600 |
ЕасаЕаРада | садЕааасЕд | дРРасЕасад | ЕдаадсаааЕ | ЕаасаРаРсР | ассаРсдЕас | 660 |
аЕадрЕасар | ЕРЕЕЕЕдЕдР | дасаддааса | дсрааааРсЕ | асдРаРРРаа | саааааЕссЕ | 720 |
ааадасааЕа | саЕЕЕРЕаРЕ | аасЕаЕадсс | сЕсаЕдаРдЕ | асаРЕадаЕс | дЕдРддРЕдЕ | 780 |
ЕЕсЕЕссдЕс | сссдссасдс | сРРссЕссРд | ддаЕддддаЕ | рсаРРсссЕа | дсаддрдрсд | 840 |
дадаасЕддс | дсссЕЕдсад | ддраддрдсс | ссддадссЕд | аддсдддпас | ЕЕЕаапаРса | 900 |
дасдсррддд | ддссддсЕдд | дааааасЕдд | сддааааЕаЕ | ЕаРаасЕдпа | сЕсЕсааРдс | 960 |
садсЕдРЕдР | адаадсЕссЕ | дддасаадсс | дЕддаадЕсс | ссРсаддадд | сЕЕссдсдаЕ | 1020 |
дЕссЕаддЕд | дсЕдсЕссдс | ссдссасддр | саЕЕЕссаРЕ | дасрсасасд | сдссдссЕдд | 1080 |
аддаддаддс | ЕдсдсЕддас | асдссддЕдд | сдссЕЕЕдсс | Едддддадсд | садссЕддад | 1140 |
сЕсЕддсддс | адсдсЕддда | дсддддссрс | ддаддсЕддд | ссЕддддасс | сааддррддд | 1200 |
сддддсдсад | даддЕдддсЕ | садддРРсРс | сададааЕсс | ссардадсЕд | асссдсаддд | 1260 |
сддссдддсс | адЕаддсасс | дддсссссдс | ддрдассЕдс | ддасссдаад | сЕддадсадс | 1320 |
сасЕдсаааЕ | дсЕдсдсЕда | ссссаааРдс | ЕдЕдЕссЕЕЕ | ааардЕЕР.Еа | аЕЕаадаара | 1380 |
аРЕааРаддЕ | ссдддЕдЕдд | аддсЕсаадс | сЕЕааЕсссс | адсассРддс | даддссдадд | 1440 |
аддда1445 <210>39 <211>2331 <212> ДНК <213> Ното заргепз
- 57 011747 <220>
<221> ιηί 5С_геа1:иге <223> последовательность 5ТА8.39 <400> 39
дЕдаааЕада | ЕсасЕааадс | ЕдаЕЕссЕсЕ | ЕдЕсЕаааЕд | ааасЕЕЕсЕа | сссЕЕЕдаЕд | 60 |
дасадсЕаЕд | сЕЕЕссссаЕ | ссЕсЕсссдЕ | сссссадссс | ЕЕддЕаасса | ЕсаЕссЕасЕ | 120 |
сЕсЕасЕЕдЕ | аддадЕЕсаа | сЕЕдЕЕЕада | ЕЕЕЕдЕдадЕ | дадаасаЕдЕ | ддЕаЕЕЕдсс | 180 |
ЕЕЕасадЕсс | ЕсЕаддЕЕЕа | ЕссаЕаЕЕдЕ | дЕЕаааЕдас | аддаЕЕсссЕ | дссЕЕЕЕЕаа | 240 |
ддсЕдааЕад | ЕаЕЕЕсаЕЕд | ЕааЕаЕаЕаЕ | асаЕасасас | асасаЕаЕас | асасасаЕаЕ | 300 |
аЕаЕасаЕаЕ | аЕасаЕаЕаЕ | дЕасаЕадаЕ | асаЕаЕаЕаЕ | дЕасаЕаЕаЕ | асасасасаЕ | 360 |
аЕасасасаЕ | аЕаЕасасаЕ | аЕаЕасаЕаЕ | асаЕаЕаЕас | асаЕаЕаЕдЕ | асаЕаЕаЕаЕ | 420 |
аасЕЕЕЕЕЕЕ | саНЕаЬсса | ЕЕсасЕЕааЕ | асаЕаЕдаЕд | дадддсЕЕЕа | ЕаЕаЕдссад | 480 |
дсЕсЕдЕдаЕ | дааЕдсЕдда | ааЕЕсааЕад | Едадааадас | ЕсадЕсЕсЕд | ссЕссааада | 540 |
дсаЕсаЕддд | сЕаддЕдсЕд | саасдаддаа | ЕЕдссаасЕд | ЕЕдЕсаЕдад | адсасадада | 600 |
адддасЕсаа | ссадссЕЕда | адааЕсаддд | даддсЕЕсЕа | адсЕааЕддг | дЕдЕдссЕдд | 660 |
ддаЕсасаЕЕ | дЕЕЕсаадса | дсадЕаасад | даЕдЕдсЕса | ддЕссадаЕд | Едадададад | 720 |
адададсаЕа | ЕдЕсЕЕсаад | ааасЕаасад | ЕадсЕсссЕа | ЕадсЕдаадс | аддадЕасаа | 780 |
ааЕадЕдадЕ | ЕЕаадЕдаЕд | аддсаадада | ЕаЕдаадаад | сЕЕдассаЕд | садсЕасасс | 840 |
дддсадсаЕд | сссЕсЕдада | саЕсЕсаЕдд | аадссддааа | ЕдддадЕдсс | ЕЕдаЕассаа | 900 |
дссададааа | ЕЕаЕааЕасЕ | аадЕадаЕад | асЕдадсадс | асЕссЕссЕд | ддаадааЕда | 960 |
дасаадсссЕ | дааЕЕЕддад | дЕаадЕЕдЕд | даЕЕддЕдаЕ | Еададдадад | дЕаасаддса | 1020 |
ссааадсаад | аааЕадЕаЕЕ | даЕдсааадс | ЕдаддЕЕааЕ | ЕддаЕдасаа | ааЕдаададс | 1080 |
аЕааддддсЕ | садасасада | сЕдадсадаа | аасдадЕадс | аЕсЕдаассЕ | адаЕЕдадЕЕ | 1140 |
асЕааЕддаЕ | дадааададЕ | ЕсЕЕааадЕЕ | даЕдассасд | ддаЕссаЕаЕ | аЕаадааЕдЕ | 1200 |
ссааЕсЕссс | саааЕЕдаЕс | сасдадЕЕса | дЕдсааЕдсс | ааЕсааааЕс | ссасЕаасаа | 1260 |
дЕЕЕаЕЕЕЕа | аааЕдЕаааЕ | дааааЕасаа | ааЕЕЕЕЕааа | аадсааадса | аЕаЕЕдаааа | 1320 |
сссаддаааа | аЕЕаддадда | сЕЕасасаас | сЕдаЕсЕсаа | аасЕЕассаЕ | ЕаЕсаадаса | 1380 |
дадЕдЕЕаЕЕ | дасасаадда | дадасаааЕа | даЕааасдда | аЕдЕддЕадЕ | сЕддадаЕдс | 1440 |
асссасаЕдЕ | аЕдЕддЕсаа | ЕЕдаЕЕЕЕЕд | дссааддсас | саадЕсааЕЕ | саааддадса | 1500 |
аддааадЕад | Еасадаааса | ассаааЕаЕЕ | дЕЕЕЕддааа | аЕааЕдасаа | адддсЕЕаЕа | 1560 |
ассадааЕаЕ | аадсаЕаЕаа | аЕаЕааЕЕсЕ | ЕЕсаааЕсаа | ЕааЕаадаад | дсаааЕаЕсЕ | 1620 |
- 58 011747
ааРааааард | адсааадаср | РдаааадРса | сРРааааадд | сРРаРРааРР | адаааЕаРдс | 1680 |
ааардррарр | адЬсРРсадр | ддааРРРаса | РРааассаса | адддаРасРа | РРаРарсРРа | 1740 |
РдсссасРад | ааРаассааа | ддаааааада | садасаааас | ааааРдсрдд | РдаддаРдРд | 1800 |
аадсаасРдд | аасРсРсаРа | сарраррддр | ддРааРдРаа | ааРРРаРаса | ассаРРаРда | 1860 |
аРаааддРРР | ддсадРРбсР | РасааадРРд | ааСдсасррс | РссасдаРда | сРаддсРРРР | 1920 |
сасРсаРадд | сдРсРддсРс | ссРадаасРд | аааасаРаРд | РРсасаадаа | дасРЬдсааа | 1980 |
РаРаРаРРсР | сссасдРсад | дадаРаРРРд | сРаРдсаРРР | аасРдасаРа | адаррадрдс | 2040 |
РададРРРар | ааРдаддРРс | РРсаааРсРа | ааадааааРд | сааадсаРаР | ааРадРаадд | 2100 |
ддрдсаддсс | аддсдсадРд | дсРсасРсРд | РааРсссадс | асрррдддад | дссдаддРдд | 2160 |
дсддаРсаса | аддЕсаддад | РРсдадасса | ассРддссаа | саРадРдааа | сссРдРсРсР | 2220 |
асРаааааРа | сааааасРад | ссаддрдсдд | рдрсардсас | сРдРадРссс | адсРасРсдд | 2280 |
даддссдадд | саддадаарс | асррдаасср | дддаддрдда | ддРРдсадРд | а | 2331 |
<210> | 40 | |
<211> | 1071 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното | зархепз |
<220> | ||
<221> | т±зс | £еаЪиге |
<223> | последовательность ЗТАВ40 | |
<400> | 40 |
дсРдЕдаРРс | ааасРдРсад | сдадаРаадд | садсадаРса | адааадсаср | ссдддсРсса | 60 |
дааддадссР | рссаддссад | сРРРдадсаР | аадсРдсРда | РдадсадРда | дрдрсррдад | 120 |
РадРдРРсад | ддсадсаРдР | РассаРРсаР | дсррдасррс | РадссадсдР | дасдададдс | 180 |
РддадРсадд | РсРсРадада | дррдадсадс | РссадссРРа | даРсРсссад | РсРРаРдсдд | 240 |
РдРдсссаРР | сдсРРРдРдР | сРдсадРссс | сРддссасас | ссадРаасад | РРсРдддаРс | 300 |
РаРдддадРа | дсРРссРРад | РдадсРРРсс | сРРсаааРас | РРРдсаасса | ддРададааР | 360 |
РРРддадРда | аддРРРРдРР | сРРсдРРРсР | РсасааРаРд | дарардсарс | РРсРРРРдаа | 420 |
ааРдРРааад | РаааРРассР | сРсРРРРсад | аРасРдРсРР | саРдсдаас! | РддСаРссрд | 480 |
РРРссаРссс | адссРРсРаР | аасссадРаа | саРсРРРРРР | дааассадРд | ддрдадааад | 540 |
асассРддРс | аддаасдсдд | ассасаддас | аасРсаддсР | сасссасддс | аРсадасРаа | 600 |
аддсааасаа | ддасРсРдРа | Рааадрассд | дрддсардрд | РаРРадРдда | даРдсадссР | 660 |
- 59 011747
дЕдсЕсЕдса | дасадддадЕ | сасасадаса | сЕЕЕЕсЕаЕа | аЕЕЕсЕЕаад | ЕдсЕЕЕдааЕ | 720 |
дЕЕсаадЕад | ааадЕсЕаас | аЕЕаааЕЕЕд | аЕЕдаасааЕ | ЕдЕаЕаЕЕса | ЕддааЕаЕЕЕ | 780 |
Еддаасддаа | Еассаааааа | ЕддсааЕадЕ | ддЕЕсЕЕЕсЕ | ддаЕддаада | сааасЕЕЕЕс | 840 |
ЕЕдЕЕЕаааа | ЕаааЕЕЕЕаЕ | ЕЕЕаЕаЕаЕЕ | ЕдаддЕЕдас | сасагдассЕ | ЕааддаЕаса | 900 |
ЕаЕадасадг | ааасЕддЕЕа | сЕасадЕдаа | дсаааЕЕаас | аЕаЕсЕасса | ЕсдЕасаЕад | 960 |
ЕЕасаЕЕЕЕЕ | ЕЕдЕдЕдаса | ддаасадсЕа | аааЕсЕасдЕ | аЕЕЕаасааа | ааЕссЕааад | 1020 |
асааЕасаЕЕ | ЕЕЕаЕЕаасЕ | аЕадсссЕса | ЕдаЕдЕасаЕ | ЕадаЕсЕсЕа | а | 1071 |
<210> 41 <211> 1135 <212> ДНК <213> Ното 5ар1еП5 <220>
<221> га1ас_£еа£иге <223> последовательность ΞΤΑΡ.41 <400> 41
сдЕдЕдсадЕ | ссасддадад | ЕдЕдЕЕсЕсс | ЕсаЕссЕсдЕ | ЕссддЕддЕЕ | дЕддсдддаа | 60 |
асдЕддсдсЕ | дсаддасасс | аасаЕсадЕс | асдЕаЕЕЕса | ЕЕсЕддаааа | аааадЕадса | 120 |
саадссЕсдд | сЕддЕЕсссЕ | ссадсЕсЕЕа | ссаддсадсс | ЕаадссЕадд | СЕссаЕЕСсс | 180 |
дсЕсааддсс | ЕЕссбсаддд | дссЕдсЕсас | сасаддадсЕ | дЕЕсссаЕдс | адддасбаад | 240 |
дасаЕдсадс | сЕдсаЕадаа | ассаадсасс | саддааааса | ЕдаЕЕддаЕд | дадсдддддд | 300 |
дЕдЕддЕсЕс | ЕадссЕЕдЕс | сассЕссддЕ | ссбсаЕдддЕ | сЕсасассЕс | сЕдадааЕдд | 360 |
дсассдсада | ддссасадсс | саЕасадсса | адаЕдасада | сЕссдЕаадЕ | дасадддаЕс | 420 |
сасадсадад | ЕдддЕдаааЕ | дЕЕсссЕаЕа | аасЕЕЕасаа | ааЕЕааЕдад | ддсаддддда | 480 |
ддддадаааЕ | дааааЕдаас | ссадсЕсдса | дсасаЕсадс | аЕсадЕсасЕ | аддЕсддсдЕ | 540 |
дсЕсЕсЕдас | ЕдсЕЕссЕсд | ЕадсЕдсЕЕд | дЕдЕсЕсаЕЕ | дссЕсадаад | саЕдЕадасс | 600 |
сЕдЕсасаад | аЕЕдЕадЕЕс | сссЕаасбдс | ЕссдЕадаЕс | асаасЕЕдаа | ссЕЕаддааа | 660 |
ЕдсЕдЕЕЕЕс | ссЕЕЕдадаЕ | аЕЕссЕЕЕдд | дЕссЕдгаЕа | сЕдаЕддадс | ЕасЕдасгда | 720 |
дсЕдсгссда | аддассссас | даддадсЕда | сЕааассаад | адЕдсадЕЕЕ | дЕасасссЕд | 780 |
аЕдаЕЕасаг | сссссЕЕдсс | ссассааЕса | асбсЕсссаа | ЕЕЕЕссадсс | ссгсасссЕс | 840 |
садЕссссЕЕ | аааадсссса | дсссаддссд | ддсасадЕдд | сЕсаЕдссЕд | ЕааЕсссадс | 900 |
асЕЕЕдддад | дссааддЕдд | дсадаЕсасс | Едадддсадд | ааЕЕЕдадас | садссЕдасс | 960 |
аасаЕдаада | аассссдЕсЕ | сЕаЕЕасааа | ЕасааааЕЕа | дссдддсдЕд | ЕЕдсЕдсаЕа | 1020 |
- 60 011747 скддкааксс садскасккд ддадддкдад дсаддадаак сасккдаакс кдддаддсдд1080 аддккдсдак дадссдадас адсдссаккд саскдсадсс кдддсаасаа дадса1135 <210>42 <211>735 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> тхзс_£еакиге <223> последовательность ЗТАК42 <400>42
аадддкдада | ксаскаддда | дддаддаадд адскакаааа | дааададдкс | асксаксаса | 60 | |
ксккасасас | кккккаааас | сккддккккк | каакдкссдк | дккссксакк | адсадкаадс | 120 |
сскдкддаад | саддадкскк | ксксаккдас | сассакдаса | адассскакк | какдааасак | 1Θ0 |
аакадасаса | сааакдккйа | ксддакаЕЕЕ | аЕЕдааакак | аддааккккк | ссссксасас | 240 |
сксакдасса | сакйскддка | саккдкакда | акдаакакас | сакаакккка | сскакддскд | 300 |
какакккадд | кскккксдкд | саддскакаа | ааакакдкак | дддссддкса | садкдаскка | 360 |
сдсссдкадк | сссадааскк | кдддаддссд | аддсдддкдд | аксасскдад | дксдддадкк | 420 |
саааассадс | скдассааса | кддадааасс | ссдкскскдс | кааааакаса | ааааккааск | 480 |
ддасасддкд | дсдкакдсск | дкааксссад | скасксддда | адскдаддса | ддадааскдс | 540 |
ккдаасссад | даддсддадд | кйдкддйдад | ксдадаккдс | дссакйдсас | кссадсскдд | 600 |
дсаасаадад | сдааакксса | ксксаааааа | аадаааааад | какдаскдка | кккадад£ад | 660 |
какдкддайк | кдааааакйа | акаадкдккд | ссаасккасс | ккадддйкка | кассакккак | 720 |
дадддкдксд | дкккс | 735 |
<210>43 <211>1227 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> тхзс_£еакиге <223> последовательность 8ТАВ.43 <400>43 сааакадакс касасаааас аадайаакдк скдсссакйк ккссааадак аакдкддЬда60 адкдддкада дадааакдса кссакксйсс ссасссаасс гскдскааак кдкссакдкс120
- 61 011747
асадрасрда | дассаддддд | сЕЕаЕЕссса | дсдддсадаа | ЕдЕдсассаа | дсассЕсЕРд | 180 |
ЕсЕсааРЕРд | садРсРаддс | ссЕдсЕаЕЕЕ | даЕддЕдЕда | аддсЕЕдсас | сЕддсаЕдда | 240 |
аддРссдРРР | РдРасРРсЕР | дсЕЕЕадсад | ЕЕсааададс | адддададсЕ | дсдадддссЕ | 300 |
сЕдсадсЕРс | адаРддаРдР | ддЕсадсЕЕд | ЕЕддаддсдс | сЕЕсЕдЕддр | ссаРЕаЕсбс | 360 |
садссссссР | дсддЕдРРдс | ЕдЕЕЕдсЕЕд | дсЕЕдЕсЕдд | сЕсЕссаЕдс | сЕЕдЕЕддсЕ | 420 |
ссааааРдЕс | аРсаРдсРдс | ассссаддаа | дааЕдЕдсад | дсссаЕсЕсЕ | ЕЕЕаЕдЕдсЕ | 480 |
РРдддсРаРР | РРдаРРсссс | дЕЕдддЕаЕа | ЕЕсссЕаддЕ | аадасссада | адасасадда | 540 |
ддРадРРдсР | РРдддададР | ЕЕддассЕаЕ | дддЕаЕдадд | ЕааЕадасас | адЕаЕсЕЕсЕ | 600 |
сЕРРсаРРРд | дрдадасрдр | ЕадсЕсЕддс | сдсддасЕда | аЕЕссасаса | дсЕсасЕЕдд | 660 |
даааасЕЕРа | РЕссааааса | ЕадЕсасаРЕ | даасаЕЕдрд | дадааЕдадд | дасададаад | 720 |
аддсссРада | РРЕдЕасаРс | ЕдддЕдЕЕаР | дЕсЕаЕаааЕ | адааЕдсЕЕЕ | ддЕддЕсаас | 780 |
РадасРРдРЕ | саРдРЕдаса | ЕЕЕадЕсЕЕд | ссЕЕЕЕсддЕ | ддЕдаЕЕЕаа | аааЕЕаЕдЕа | 840 |
РаЕсЕЕдРРР | ддааЕаЕадЕ | ддадсЕаЕдд | ЕдЕддсаЕЕЕ | ЕсаРсЕддсЕ | ЕЕЕЕдЕЕЕад | 900 |
сЕсадсссдР | ссЕдЕЕаЕдд | дсадссЕЕда | адсрсадЕад | сЕааЕдаада | ддЕаЕссЕса | 960 |
сРсссРссад | ададсддЕсс | ссЕсасддсЕ | саЕЕдададЕ | ЕЕдЕсадсас | сЕЕдаааЕда | 1020 |
дРЕЕааасРР | дЕЕЕаРЕЕЕЕ | аааасаЕЕсЕ | ЕддЕЕаЕдаа | ЕдЕдссЕаЕа | ЕЕдааЕЕасЕ | 1080 |
даасаассРР | аЕддЕЕдЕда | адааЕЕдаЕЕ | ЕддЕдсЕаад | дЕдЕаЕаааЕ | ЕЕсаддасса | 1140 |
дРдРсРсРда | ададЕЕсаЕЕ | ЕадсаЕдаад | Есадссрдрд | дсаддЕЕддд | Еддадссадд | 1200 |
даасааРдда | даадсЕЕЕса | ЕдддЕдд | 1227 |
<210> 44 <211> 1586 <212> ДНК <213> Ното зараепз <220>
<221> т!зс_£еаРиге <223> последовательность 5ТАК44 <400> 44
сассЕдссЕс | адссЕсссаа | адЕдсЕдада | ЕЕсааадааа | РРЕЕсаРдда | даддддасад | 60 |
аЕддадЕсаа | ЕЕсЕЕдЕддд | дЕдаасаЕда | дЕассасадЕ | ЕадасРдадд | РЕдддааада | 120 |
ЕЕЕЕссадас | ааЕЕддаада | дсаЕдЕдааа | дасасадаЕЕ | ррдадааард | РЕаадЕсРад | 180 |
ддаасЕдсаа | ддсЕЕЕЕддс | асаадааадс | сасЕдЕадас | ЕаЕададдса | ддаРдссбад | 240 |
аЕЕсаааЕсс | саасЕдсЕас | асЕЕсЕаадс | ЕРРдЕааРРР | РддсаадРРр | ЕЕасссЕсЕа | 300 |
- 62 011747
РРРРсРРаРс | РаРааааРаР | адаРРРРаРа | РаРаРадаРа | РадаРаРаРа | даРадаРаар | 360 |
ааррдрдсар | дссрааРааа | дррдрсааад | аррааардрр | аРаРдРдаад | РаРРРРдРас | 420 |
ддрдаРадда | асссаддаад | ддсРсРаРда | аРаРРаРдРа | РРаРРаРРаР | РсРааадРад | 480 |
сЕддааСаса | аРдРРсааад | дадаРадРдд | саддадаРаа | дРРРдааРРд | ааадаРРдад | 540 |
дссадаасаР | ааадРдссРс | сРаРаРРаРа | СРРРасаРаа | РРддаасаРс | аРРдаааааР | 600 |
РРаадРаРРа | РРРаРдРдРд | РаРдРдРдРР | РРаРаРааРР | ааРРсРадРР | саРсаРРРРа | 660 |
аааРаРсРРР | сРдаРдРсас | РдРдаасаас | адаРдадаад | аадрдааРсс | РдадрРаадд | 720 |
адассадсрс | РсрдаРРасР | дссаРааРсс | адддадддРа | ссаРааддаР | РРсаасРдда | 780 |
адРдааРсса | РсаРдаРдда | даддааддас | адддсРдааа | ааРасРРадд | аадРадРаРс | 840 |
адРаддасРд | дРРаададад | адсададдса | ддсРасаддд | дррддаддрд | РсааРсасад | 900 |
адарадддаа | ааРдддадда | даадсаддсР | РЕдааааадР | ддсРРдРсРР | дРааааРРаР | 960 |
дрдсрдрраа | аасадрасаа | дааарраара | СаРРсааРсс | сааааРасад | ддасааРРсР | 1020 |
ррррдааада | дРРасссада | РадРсРРссР | РдаадРРРРс | адРРааадаа | аРРРсРРдРР | 1080 |
аасаааРааР | дРадРсаРад | аадаааасас | РРаааасРРР | аРРдааРааа | дсРааРаааР | 1140 |
йМ· + я Ь й гтп | аядк-ЕдкЬй д | К + 1- 1- гтг' Ή я а - * - * | 1200 | |||
адРаРаааРР | ааРддаадда | дадсасдсас | асададдРРд | ааРРаРдРРР | аРдасСРРаР | 1260 |
РадРсаадаа | РасааааРРд | адРадсРаса | рсаадсадаа | дсасаРдсРР | РасааСссад | 1320 |
сасадааРсс | сРРдасаРсс | ааасРсссда | аасадасаРд | Рааарасада | РдасаРРдРс | 1380 |
адаасааааР | адддРсРсас | ссдассРаРа | аРдРРсРРРР | сРРдаРаЪаа | аРаРдсасаР | 1440 |
дааррдсаРа | сддРсаРаРд | дСРссааРРа | ссаРРаРРРс | сРсРдддсРР | адсРаРссаР | 1500 |
сРааддддаа | РРРасассаа | сасРдРасРР | сРасРРдсаа | дааРаРаРда | аадсаРадРР | 1560 |
аасРРсРддс | РРаддасссс | аасРса | 1586 |
<210> 45 <211> 1981 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т1зс_£еариге <223> последовательность ЗТАВ45 <400> 45 аРддаРсаРа дддРаааРаа аРРРаРааРР РсРРдадааа дсРРсдРасР дРРРРссаад 60
- 63 011747
аЕддсЕдЕас | ЕааЕЕЕссаЕ | ЕссЕассаас | адЕдЕасадд | дЕЕЕсЕЕЕЕЕ | сЕссасаЕсс | 120 |
Есассаасас | ЕЕаЕсЕЕсса | ЕсЕЕЕЕЕЕЕа | ЕааЕадсссЕ | адЕааааЕдЕ | дЕдаддЕдаЕ | 180 |
аЕсСсаЕЕдЕ | ддсаЕЕдаЕЕ | ЕдсасЕЕсЕс | ЕдаЕааЕЕад | дааЕдЕЕЕаЕ | даЕЕЕЕЕЕса | 240 |
ЕдЕассЕддЕ | ЕддссЕЕЕЕд | ЕаЕдаЕдЕад | даааЕдЕсЕа | ЕЕсЕдаЕЕсЕ | ЕЕдсЕЕаЕЕЕ | 300 |
ЕЕЕааЕаадс | аЕадЕЕЕЕЕЕ | ЕсЕЕаЕЕЕЕЕ | дадЕаддЕЕд | адЕЕдсЕЕаЕ | аЕаЕЕаЕЕаЕ | 360 |
аЕдадссссЕ | ЕассЕдаЕдЕ | аЕддЕЕЕааа | аабаЕЕаЕсс | саЕЕЕдЕддд | ЕЕсЕсЕЕааЕ | 420 |
ЕсЕаЕсаЕЕд | сЕЕсЕЕЕЕсс | ЕдЕддаааад | ЕЕЕЕаадЕЕЕ | ЕаЕдсадЕсЕ | саЕЕЕдЕдЕд | 480 |
ЕЕЕЕдсЕЕЕЕ | дЕЕдссЕЕЕЕ | ддааЕааЕсЕ | асадааааЕс | аЕадсЕсадд | ссааЕдЕсаЕ | 540 |
асадЕсЕссЕ | ЕсЕабаЕЕЕс | сЕЕдЕадбад | ЕЕЕЕасаЕЕЕ | ааасЕЕЕааЕ | ЕЕЕдаЕЕЕда | 600 |
ЕдсЕЕдЕаЕа | аададсаааа | ЕаааадЕсаа | аЕЕЕЕаЕЕсЕ | ЕсЕдЕаЕдЕд | даЕадЕсадЕ | 660 |
ЕЕЕдЕсЕаса | ссаЕЕЕаЕЕд | ааааЕааЕЕЕ | ЕсЕЕЕсЕЕса | сЕдЕдЕаЕЕЕ | ЕЕадЕЕаЕЕЕ | 720 |
ЕаЕсаааааа | ЕсааЕЕдасс | асадасасас | ддаЕЕЕаЕЕЕ | асаддЕЕсЕа | ЕаЕсссЕЕЕд | 780 |
ЕасЕдЕЕЕЕа | саЕдбсЕдЕЕ | ЕЕЕаЕдссаЕ | ЕдсбаЕдсЕд | ЕЕЕЕааЕЕсс | ЕаЕадсЕЕЕд | 840 |
ЕааЕададЕЕ | ЕддадЕсадд | ЕадЕсЕдаЕд | ссЕссадсЕЕ | ЕдЕЕсЕЕЕЕЕ | дЕЕсаадаЕЕ | 900 |
дсЕЕЕддЕЕд | дЕссаддЕсЕ | ЕЕЕдЕддЕЕс | саЕасааабЕ | ЕЕадсадбаа | ЕЕЕЕЕСЕаЕЕ | 960 |
ЕсЕдЕдаада | абдасаЕЕдд | ааЕЕЕдабад | ЕддЕЕдсаЕЕ | ЕааЕсЕдЕад | аЕЕдсЕЕЕдд | 1020 |
дЕадсаЕЕда | сасЕЕЕЕаса | аЕасЕааЕЕЕ | ЕЕдааЕссаЕ | сааЕдаадда | ЕдЕЕЕсЕсса | 1080 |
ЕЕЕаЕЕЕаЕд | ссаЕЕЕЕааЕ | ЕЕЕЕЕЕсаЕс | ааЕдЕдсбаЕ | адЕЕЕЕсадЕ | аЕдЕаааЕсЕ | 1140 |
ЕЕЕаЕддЕЕЕ | ЕдаЕЕаааЕЕ | ЕасЕссЕдЕс | ЕЕЕЕаЕаЕаЕ | ЕЕаЕаЕаЕсЕ | дЕЕЕЕдаЕЕс | 1200 |
ЕаЕЕаЕаааЕ | ЕдааЕЕдссЕ | ЕЕаЕЕЕЕЕса | ддЕааЕадЕЕ | ЕдЕсаЕЕадЕ | ЕааЕадааас | 1260 |
ааЕааЕдаЕа | ЕЕЕдЕаЕдЕЕ | даЕЕЕЕдЕаа | сЕаЕЕаасЕЕ | ЕаЕЕдааЕЕЕ | сЕЕсаЕсадс | 1320 |
ЕаЕаассаЕЕ | ЕаЕЕЕЕддЕд | дааЕсЕЕЕаа | даЕЕЕЕсЕсЕ | агсЕЕаадаЕ | ЕаЕаЕЕЕЕса | 1380 |
ааааасадаа | асааЕсЕЕас | сЕсЕЕссЕЕс | ссЕаЕдЕдда | ЕЕЕсЕЕЕЕас | дЕсЕЕЕдЕсЕ | 1440 |
ЕдЕдЕаасЕд | ЕЕсЕддсЕад | дсааЕЕасас | аЕааЕдЕЕЕЕ | саЕсаЕЕЕаЕ | ааЕЕЕЕасаЕ | 1500 |
сасаЕссаЕс | ЕаЕЕдЕддса | саЕЕдаЕЕдс | ЕасЕЕЕЕсаа | дЕЕдЕааасс | ЕддасаЕЕЕа | 1560 |
ЕсасЕасЕсЕ | ЕссЕссааЕа | саддадЕсса | ЕддсдЕддЕд | ЕдддсссЕас | Едбдссасад | 1620 |
Ессадддсас | ддсЕдддсЕд | аддЕбсЕсЕЕ | дЕдсаададЕ | ссдЕддсЕсЕ | дсддадсаад | 1680 |
адЕЕсЕссад | ЕдссЕЕадЕс | садддЕЕадд | саддддЕддд | дсбссЕЕсад | ЕадсЕЕадЕс | 1740 |
садЕдсдссд | сссЕдсдадд | дЕссЕссЕда | дсаддадЕас | асдаЕдаддс | адддЕссЕас | 1800 |
ЕдЕдссЕЕад | сссаддаадс | ддддддсЕдд | дЕссЕсЕддЕ | дссаЕадЕсс | аддсЕдссдд | 1860 |
- 64 011747 дадсПдддНс сНсНддНдсс аНадсНсадд ссддсдддад сНдддНссНс НддНдссдПа1920 дНссадддНд садсадааса ддадНссНдс ддадсадНад Нссадддсас дсНддддсдН1980
1981 <210>46 <211>1859 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еаНиге <223> последовательность 5ТАН46 <400> 46
анндпн.нпнс | ПсдсссННсП | дсаррРРсНд | саааРРсРдР | РдааРсаРРд | садНРасРра | 60 |
ддННПдсНПс | дПсПссссса | НРасааасНа | ерраердддр | РРРРсаассс | ПадННсссПс | 120 |
аННППНаПда | ННсаНдсНса | РРЬсНРРдНа | сасРРсдНсН | НдсРссаРсН | сссаасРсаН | 180 |
ддссссНддс | ПННддаНПаН | рдррррддрс | ННППаННННН | НдреРРеНРе | ПассПсааса | 240 |
сиаЛЫсс | НсНсссадНс | РссддРассс | РаРсассаад | дРРдРсаНРа | ассРРРсаРа | 300 |
ННаННссНса | ННаНссаНдН | аНРсаНРНдс | аааРаадсдН | аРаРРаасаа | ааРсасаддР | 360 |
ННаНддадаН | аНааННсаса | НассННаааа | НРеаддеРНР | РааадНдНас | сРРРсаРдРд | 420 |
дНсНННддНа | НаННсасааа | дНРардсаНН | даНсассасс | аРсНдаРНсс | аНаасаНдНП | 480 |
саапасспса | аааадаадпс | £драенсанС | адРадРсаРР | рсасаррсас | сасРсссНсР | 540 |
ддсПсНдддс | адНсасНдаН | сНРРдРдНсР | сНаНддаННП | дссНадНсРа | ддНаНПННЕа | 600 |
НдНаааНддс | аНсаНасаас | ардРдассРН | РРдРРРддсН | НННННсаННН | адсааааНдН | 660 |
НаНсааддНс | НдРсссРдРР | дНадсаНдНа | РРадсасРРс | аРРРерраНа | НдеНдааПда | 720 |
НаНасНННаН | ННдНссаНса | дРРдРРсаНд | еРРНаРррдН | ссаРсадРНд | ардаасаррр | 780 |
дсдннППНдс | сасРНРдддс | НаНпаадааН | ааПдснасПд | НдаасаадНд | НдНасаадРР | 840 |
ссНсНасааа | НННННдНдРд | дасаРаРссР | РРсадРНсРс | РсаддНдРар | ареРдддааР | 900 |
НдааППдсНд | ддРсдРдНад | РадсРаРдРР | ааасасНРРд | адаааеРдеН | аРааРдНРеН | 960 |
ссададсПдН | ассаРРРРаа | аНРсРдРдНа | НдаддаННсс | асдНРсРсса | сННссНсасс | 1020 |
адНдНаНдда | НРРдддддРа | ПасНННННаа | ааадНдддаН | Наддсрдддс | асадРддсРс | 1080 |
асассНдНаа | Рсссаасаср | Нсаддаадсв | даддрдддад | дансасррда | дссРадНадН | 1140 |
ННдадассад | ссНдддсаас | аНадддадас | ссРдРсРсРа | сааааааПаа | РНРааааРаа | 1200 |
- 65 011747
аДДадсДддд | сдДДдДддса | сасассДдДа | дДсссадсДа | саДдддаддс | ДдаддДддаа | 1260 |
ддаДДсссДд | адсссадаад | ДДДдаддДДд | садДдадсса | ДдаДддсадс | асДаДасДдД | 1320 |
адссдддддд | Дсададсаад | асДссдДДДс | адддаадааа | ааааааадДд | ддаДдаДаДД | 1380 |
ДДДдасасдД | ддсддсдддд | дддсддаадд | ДсаДасДДсД | ддаааДДсса | ДДаааДДадс | 14 40 |
ДддДассасД | сдаасДсаДД | дДдДДДсадд | дсДдсаДадД | ааДаДДдсаД | ааДаДаааДа | 1500 |
ДассаДДсаД | ДсаДсааадД | ДадсадаДаД | ДдасДдДДад | дДдссаддса | сДдсДсДаад | 1560 |
сдДДааадаа | ааасасасаа | ааасДДДДдс | аДДсДДадад | ДДДаДДДДсс | ааДддадддд | 1620 |
дДддадддад | дДаадааДДД | аддаааДааа | ДДааДДасаД | аДаДадсаДа | дддДДДсасс | 1680 |
адДдадДдса | дсДДдааДсд | ДДддсадсДД | ДсДДадДадД | аДаааДасад | ДасДааадаД | 1740 |
даааДДасДс | ДаааДддДдД | ДасДДаааДД | асДддааДад | дДаДДасДаД | ДадДсасДДД | 1800 |
дсаддДдааа | дДддааасас | саДсдДаааа | ДдДааааДад | дааасадсДд | дДДааДдДД | 1859 |
<210> 47 <211> 1082 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т1зс_£еаДиге <223> последовательность 5ТАВ47 <400> 47
аДсаДДадДс | аДДадддааа | ДдсаааДдаа | ааасасаадс | адссассааД | аДасассДас | 60 |
ДаддаДдаДД | Даааддаааа | ДаадДдДдаа | дааддасдДа | аадаааДДдД | аасссДдаДа | 120 |
саДДдаДддД | адаааДддаД | ааадДДдсад | ссасДдДдаа | ааасадДсДд | садДддсДса | 180 |
дааддДДааа | ДаДадаассс | сДдДДддасс | саддаасДсД | асДсДДаддс | ассссааада | 240 |
аДададааса | даааДсааас | адаДдДДДдД | аДасДааДдД | ДДдДадсаДс | асДДДДсаса | 300 |
ддадссаааа | ддДддаааДа | аДссаассаД | садДдаасаа | аДдааДдДаа | Даааадсаад | 360 |
дДддДсДдса | ДдсааДдсДа | саДсаДссаД | сДдДаааааа | сдаасаДсаД | ДДДдаДадаД | 420 |
даДасаасаД | дддДддасаД | ДдадаасаДД | аДдсДДадДд | аааДаадсса | дасасаааад | 480 |
дааДаДаДДд | ДаДааДДдДа | аДДасаДдаа | дДдссДадаа | дадДсааадд | саДасаадад | 540 |
ааадДдддаД | аддааДсасс | аДдддсДдда | ааДаддддда | аддДдсДаДа | сДдсДДаДДд | 600 |
ДддасааддД | ДДсдДаадаа | аДсаДсаааа | ДДдДдддДдД | адаДадДддД | дДДддДДаДд | 660 |
саасссДдДд | ааДаДаДДда | аДдссаДдда | дДдсасасдд | ДддДДаааад | дд ДсаааДда | 720 |
ДаааДаДДдД | дДДаДаДаДа | ДДДссссасд | аДадааааса | сдсасадсса | адсссасаДд | 780 |
- 66 011747
ссадюид! | ЕадсЬдссгъ | ссШассН | саадад^ддд | с1даадсггд | 1ссаа1с1Е1: | 840 |
сааддИдсЪ | даадасбдка | ЬдаЬддаад!: | сабсЬдсаЫ | дддааадааа | Ыаабддада | 900 |
даддадаааа | сИдадааЕс | сасасЕасЪс | асссЪдсадд | дссаадаасЕ | сЕдЕсЪссса | 960 |
ЕдсШдсЪд | ЪссЕдЕсЕса | д^аШссЕд | ЕдассассЪс | сШЫсаас | Ъдаадас'Ь'Е'Ь | 1020 |
дЕассЕдзад | дддМсссад | дНИксасс | ЬсддсссЪЬд | ЪсаддасЕда | 1сс1сЪсаас | 1080 |
1а | 1082 |
<210> | 48 | |
<211> | 1242 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното | 5ар1епз |
<220> | ||
<221> | тазе | £еа£иге |
<223> | последовательность ЗТАК48 | |
<400> | 48 |
а1са1д1аМ | 1д11С1с1да | а(:1ааг:сЫ | адабаса+Га | аГдММаСд | МассаЕдаа | 60 |
кдЪдаБаМа | ЕааЕаЕааЪа | ЙШааНд | дМдсЬасЕд | ШаЕаадаа | ШзсаЪШс | 120 |
ЬдШасОЕЕ | дссИсабаЕ | сЕдаааасс! | ЕдебдаШд | ΗΐΙθςΙςοΒΐ | ссасаааШ | 180 |
ТсМддаШ | ЕсЕаЕдддЪа | аМасааабс | Ессасасаа! | даддМдеад | Едадссаада | 240 |
Есасассас! | д1ас!ссадс | сСдддсдаса | дадЕдадаса | ссаЕсЕсаса | аааасасаба | 300 |
аасааасааа | садааасЬсс | асасааСдас | аасд1а1д1д | σϋΐϊσϊΐΐΜ: | МсЕЕсс^сЪ | 360 |
ИсОабааЕа | МзЕсШдЕс | сЕаЕсССаас | 1даас1ддсс | адааасссса | ддасаабда! | 420 |
ааабасдадс | адйдЕсааса | дасаюъса! | есссшсс! | адс1М1а1а | ааааЕаасда | 480 |
НаГдсСЬса | асаЕЕасаЪа | ЬддЕддЕдбе | даИддЪШд | ИаЬадаЕаа | дсЕЬа!садд | 540 |
Ыаадааа! 1 | ОдТс^дсдЫ: | ЪссЪадШд | дбаБааэдаЕ | ШаабаДаа | аЪдаа!дЫ:д | 600 |
гаШШса | ктаинь | ЫссОасаОс | Одскааддба | аЪссОдЕдИ | НссссИИ | 660 |
саабсессОа | абдЕддбдаа | ЪдасаЪЪааа | а1асс11с1а | ЫдЫааааО | аЫсЕ.дсаа | 720 |
сдс0д!а1:ад | аассаакдсс | ЫЕаЪЮЕдб | аМдеЕдабд | даиШдаа | аааЕабдЕад | 780 |
дЪддасЕСад | ОШсУаадд | ддааЕадааЕ | ЕЪекаабаба | ШааааС.аЬ | ШдсаЪдба | 840 |
ЕдДЕсЕдаад | дасаЕЪддЕд | ЕдЕсаШсЕ | аЪассабсЪд | дс!ас!адад | дадссдасбд | 900 |
ааадЬсасас | кдееддадда | ддддададд! | дсЪсЕгссдЬ | ЫсЕддЕдЬс | ЕдЪадссабс | 960 |
ίссадЕддба | дебдеадбда | 1аа£аа(:дс1 | дсад!дссда | садббсбдда | аддадсааса | 1020 |
- 67 011747
асадЪдаШ | садсадсадс | адбаббдсдд | дабссссасд | абддадсаад | ддааабааМ | 1090 |
сбддаадсаа | бдасаабабс | адсбдбддсб | абадсадсбд | адабдбсгадб | бсбсасддбд | 1140 |
дсадскбсаа | ддасадбадб | дабддбссаа | Дддсдсссад | ассбадааа! | дсасаЕМсс | 1200 |
бсадсассдд | сбссадабдс | бдадсббдда | садсбдасдс | сб | 1242 |
<210> 49 <211> 1015 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
<221> т1зс_£еа6иге <223> последовательность ЗТАК49 <400>49
ааассадааа | сссаааасаа | бдддадбдас | абдсбаааас | садааассса | ааасаабддд | 60 |
адддбссбдс | Ъааассадаа | асссааааса | абдддадбда | адбдсбаааа | ссадааассс | 120 |
аааасаабдд | дадбдЬссбд | сбасассада | аасссаааас | дабдддадбд | асдбдабааа | 180 |
ассадасасс | саааасаабд | ддадбдасдб | дсбааассад | ааасссаааа | саабдддадб | 240 |
дасдбдсбаа | аассбддааа | ссбаааасаа | бдсдадбдад | дбдсбаасас | садаабссаб | 300 |
аасаабдбда | дбдасдбдсб | ааассадаас | ссаааасааб | дддадбдасд | бдсбааааса | 360 |
ддаасссааа | асаабдадад | бдасдбдсба | аассадааас | ссаааасааб | дддаабдасд | 420 |
бдсбаааасс | ддаасссааа | асаабдддад | Сдабдбдсба | аассадааас | ссаааасааб | 480 |
дддаабдаса | бдсбаааас! | ддаасссааа | асаабддбаа | сбаададбда | бдсбааддсс | 540 |
сбасаЪЫЪд | дбсасасбсб | сааскаадбд | адаасббдас | бдааааддад | да6£666666 | 600 |
бсбаадасад | адб+.Мддбс | бдбсссссад | адбддадбдс | адбддса+да | Ьсбсддсбса | 660 |
сбдсаадсбс | бдссбсссдд | дИсаддсса | Ъбсбссбдсс | бсадссбссб | дадбадсбдд | 720 |
даабасаддс | асссдссасс | асасббддсб | ааииид! | абббббадба | дадабддддб | 780 |
ббсассаба! | Ъадсааддаб | ддбсбсаабс | бссбдассбс | дбдабсбдсс | сассбсаддс | 840 |
бсссааадбд | сбдддаббас | аддбдбдадс | сассасассс | адсааааадд | аддааббббб | 900 |
ааадсааааб | бабдддаддс | сабвдббббд | аассаадсбс | абдсаабадд | бсссаасада | 960 |
ссааассааа | ссааассааа | аЕддадбсас | Ъсабдсбааа | Ъдбадсабаа | бсааа | 1015 |
<210>50 <211>2355 <212> ДНК <213> Ното зартепз
- 68 011747 <220>
<221> ш1зс_£еаЕиге <223> последовательность 5ТАК50 <400> 50
саассаЕсдЕ | Ессдсаадад | сддсЕЕдЕЕР | аррааасаЕд | аааЕдаддда | ааадссРадЕ | 60 |
адсЕссаЕЕд | даЕЕдддаад | ааЕддсааад | ададасаддс | дРсаРЕЕЕсЕ | адааадсааЕ | 120 |
сРЕсасассЕ | дррддЕссЕс | асссаррдаа | ЕдРссЕсасс | сааЕсЕссаа | сасадааард | 180 |
адЕдасЕдРд | ЕдЕдсасаЕд | сдЕдЕдсаЕд | ЕдРдааадЕа | ЕдадЕдЕдаа | ЕдЕдРсЕаРа | 240 |
РдддаасаРа | ЕаЕдЕдаЕЕд | ЕаЕдЕдЕдЕа | асЕаРдЕдРд | асЕддсадсд | ЕддддадЕдс | 300 |
ЕддЕЕддадЕ | дЕддЕдЕдаЕ | дЕдадЕардс | аЕдадРддсЕ | дрдрдрарда | сгдрддсддд | 360 |
аддсддаадд | ддадаадсад | саддсЕсадд | ЕдЕсдссада | даддсЕддда | ддааасРаРа | 420 |
аассЕдддса | аЕЕСссЕссЕ | саЕсадсдад | ссЕЕЕсЕЕдд | дсааЕадддд | сададсЕсаа | 480 |
адРЕсасада | даЕадЕдссР | дддаддсаЕд | аддсааддсд | даадЕасЕдс | даддаддддс | 540 |
ададддЕсЕд | асасЕЕдадд | ддРЕсЕаард | ддаааддааа | дасссасасЕ | дааРЕссасЕ | 600 |
Еадссссада | сссЕдддссс | адсддЕдссд | дсЕЕссаасс | аЕассаасса | ЕЕРссаадЕд | 660 |
Ь ηπππγιγ·λπ | г' згг1 + I- | Ь лгглэггаялк | 720 | |||
ч» Ч_ ννν,'- | ||||||
аассаадсЕЕ | ассЕЕсссдд | садЕдЕдЕда | ддаЕдаааад | адсЕаРдЕас | дЕдаРдсасЕ | 780 |
Еадаадаадд | ЕсЕадддЕдЕ | дадЕддЕасЕ | сдЕсЕддрдд | дрдрддадаа | дасаЕЕсРад | 840 |
дсаардадда | сЕддддадад | ссЕддсссаЕ | ддсЕЕссасЕ | садсааддЕс | адРсЕсЕЕдГ | 900 |
ссЕсЕдсасЕ | сссадссЕЕс | садададдас | сЕЕсссаасс | адсасЕсссс | асдсЕдссад | 960 |
ЕсасасаЕад | ЕрасасасаЕ | асааЕсасаЕ | аРаЕдРЕссс | аРаЕадасас | аЕрсасасЕс | 1020 |
арассЕЕсас | асаЕдсасас | дсаЕдЕдсас | асасадЕсас | ЕсаРЕЕсЕдр | дЕЕддадаРЕ | 1080 |
дддгдаддас | аЕЕсааЕддд | Едаддассаа | саддЕдЕдаа | даРЕдсЕЕЕс | ЕадааааЕда | 1140 |
сЕссЕдЕсЕс | ЕсЕЕЕдссаЕ | ЕсЕЕсссааЕ | ссдаЕддадс | ЕасЕаддсЕЕ | РЕсссРсаЕЕ | 1200 |
ЕсаЕдЕЕЕаа | ЕааассЕЕсс | сааЕддсдаа | аЕдддсЕЕЕс | ЕсаадаадЕд | дЕдадЕдРсс | 1260 |
саЕсссЕдсд | дрддддасад | дддрддсадс | ддасаадссР | дссрддаддд | аасРдРсадд | 1320 |
сЕдаррссса | дРссаасЕсс | адсЕЕссаас | ассЕсаЕссЕ | ссаддсадЕс | ЕРсаЕРсРЕд | 1380 |
дсЕсЕааЕЕЕ | сдсЕсЕЕдЕЕ | ЕЕсЕЕЕЕЕЕа | ЕЕЕЕЕаЕсда | даасЕдддЕд | дададсЕЕРЕ | 1440 |
ддЕдРсаРРд | дддаЕЕдсЕЕ | ЕдааасссЕЕ | сЕсЕдссЕса | сасЕдддадс | РддсЕЕдадЕ | 1500 |
саасЕддрсЕ | ссаЕддааЕЕ | ЕсЕЕЕЕЕЕЕа | дрдрдрааас | адсЕаадРЕЕ | Еаддсадсрд | 1560 |
- 69 011747
ккдкдссдкс | садддкддаа | адсадсскдк | кдакдкддаа | скдсккддск | садакккскк | 1620 |
дддсааасад | акдссдкдкс | ксксааскса | ссааккаада | адсссадааа | акдкддсккд | 1680 |
дадассасак | дкскддккак | дкскадкаак. | ксадакддск | ксасскддда | адссскккск | 1740 |
даакдксааа | дссакдадак | аааддасака | какакадкад | скадддкддк | ссасккскка | 1800 |
ддддссакск | ссддаддкдд | кдадсаскаа | дкдссаддаа | дададдааас | кскдккккдд | 1860 |
адссааадса | кааааааасс | ккадссасаа | ассаскдаас | акккдкхккд | кдсаддккск | 1920 |
дадкссаддд | адддсккскд | аддададддд | садскддадс | кддкаддадк | какдкдадак | 1980 |
ддадсааддд | ссскккаада | ддкдддадса | дсакдадсаа | аддсададад | дкддкаакдк | 2040 |
акааддкакд | ксакдддааа | дадкккддск | ддаасададк | ккасадаака | даааааккса | 2100 |
асаскаккаа | ккдадсскск | аскасдкдск | сдасаккдкк | скадксаскд | адакаддккк | 2160 |
ддкакасааа | асааааксса | ксскскакдд | асаккккадк | даскаасаас | аакакааака | 2220 |
акаааадкда | асаааадскс | аааасакдсс | аддсаскакк | акккакккак | ккакккаккк | 2280 |
акккакккак | кккккдааас | ададксксдс | кскдккдссс | аддскддадк | дкадкддкдс | 2340 |
даксксддск | саскд | 2355 |
<210> 51 <211> 2289 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> тхзс_£еакиге <223> последовательность 8ТАВ51 <400> 51
ксасаддкда | сассаакссс | скдасаасдс | кккдадаадс | аскдкаскад | аккдаскккс | 60 |
каакдксадк | скксаккккс | кадскскдкк | асадссакдд | кскссакакк | акскадкаса | 120 |
асасасакас | ааакакдкдк | дакасадкак | даакакаака | кааааакакд | кдккакаака | 180 |
кааакакаак | аккаааакак | дкскккакас | кадакаакаа | касккаакаа | сдккдадкдк | 240 |
ккааскдскс | каадсасккк | асскдсадда | аасадккккк | кккккак.ккк | ддкдааакас | 300 |
ааскаасака | аакккаккка | сааккккаад | сакккккаад | кдкакадккк | адкддадкка | 360 |
акакакксаа | аакдккдкдс | адссдксасс | аксаксадкс | кксакааскс | кккксакакк | 420 |
дкааааккаа | аадкккакдс | ксакккаааа | акдаскссса | аккксссссс | кссксаасск | 480 |
скддаааска | ссаккскакк | ккскдссксс | дкадккккдс | ссаскскаад | кассксасак | 540 |
аадкддаакк | кдксккаккк | дсскдкккдк | дассддскда | ккксакккад | какаакдксс | 600 |
- 70 011747
РсаадРРРРа | РРсасдРРаР | аРадсаРаРд | РсаРааРРРР | сРРсасРРРР | аадсррдадр | 660 |
ааРаРРРса! | сдРаРдРаРс | РсасаРРРРд | сРРаРссаРР | саРсРсРсад | РддасасРРд | 720 |
адррдсррср | асаРРРРадс | РдРРдРдааР | асрдсрдсра | РдаасаЕддд | РдРаРаааРа | 780 |
Рсрсаадасс | РРРРРаРсад | РРРРРРаааа | РаРаРасРса | дРадРааРрР | адсрддаРРа | 840 |
РаРддРааРР | РРаРРРРРаа | РРРРРдадда | асРдРссРас | ссРРРРзРРс | ааРадРадсР | 900 |
аРассааРРд | асааРРддса | РРссРассаа | садддсаРаа | дддРРсРсаа | ЕРсрссасаР | 960 |
аРРсссРдаР | асРРдРРаРР | РРсаддРдРР | РРРРРРРРРР | РРРРРРРРРР | аРдддадсса | 1020 |
РдРРааРддд | РдРааддРда | РаРРРсаРРа | РадСРРРдаР | РРдсаРРРсс | сРааРдаРРа | 1080 |
дРдаРдРРаа | дсаРсРсРРс | аРдРдссРаР | РддссаРРРд | РаРаРсРРсР | РРаааааРаР | 1140 |
аРаРаРасРс | аРРссРРРдс | ссаРРРРРда | аРРаРдРРРа | РРРРРРдРРа | РРдадРРРса | 1200 |
аРасРрРРсР | аРаРаассРа | ддРаРРаарс | сРРРарсада | сРРаадаРРР | дсаааРаРРс | 1260 |
рсрррсаррс | сасаддррдс | рааРРсРсРс | рдррддрааР | аРсРРРРдаР | дсРдРРдРдР | 1320 |
ссадааРРда | ррсаррссрд | рдддррсррд | дРсРсасрда | сРРсаадааР | ааадсРдсдд | 1380 |
асссРадРдд | РдадРдРРас | асррсрРаРа | дарддрдррр | ссддадРРРд | РРссРРсада | 1440 |
рдрдрссада | дРРРсРРссР | рссаардддр | РсаРддРсРР | асРаасРРса | ддааРдаадс | 1500 |
сдсадассРР | сдсадрдадд | РРРасадсРс | РРаааддРдд | сдрдрссада | дррдрррдрр | 1560 |
сссссрддрд | ддррсдрддр | сРРдсРдасР | РсаддааРда | адссдсадас | ссрсдсадрд | 1620 |
адРдРРасад | сРсаРааадд | радрдсддас | асададрдад | сРдсадсаад | аРРРасРдРд | 1680 |
аададсаааа | даасааадсР | РссасадсаР | адааддасас | сссадсдддр | РссРдсРдсР | 1740 |
ддсрсаддрд | дссадРРаРР | аРРсссрРаР | ррдсссрдсс | сасаРссРдс | рдаррддрсс | 1800 |
аРРРРасада | дРасРдаРРд | дРссаРРРРа | сададРдсРд | аРРддРдсаР | РРасааРссР | 1860 |
РРадсРадас | асададрдсР | даРРдсРдса | РРсрРасада | дРдсРдаРРд | дрдсарррас | 1920 |
адРссРРРад | сРадаРасад | аасдсрдарр | дсРдсдРРРР | РРасададРд | сРдаРРддРд | 1980 |
саРРРасааР | ссРРРадсРа | дасасадрдс | рдаррддрдд | дРРРРРасад | адрдсрдарр | 2040 |
ддРдсдРсРР | РасададРдс | РдаРРддРдс | аРРРасааРс | сРРРадсРад | асасададрд | 2100 |
сРдаРРддРд | сдРРРаРааР | ссРсРадсРа | дасадаааад | РРРРссаадР | ссссассРда | 2160 |
ссдадаадсс | ссасрддсрр | сассРсРсас | РдРРаРасРР | РддасаРРРд | Рссссссааа | 2220 |
аРсРсаРдРР | даааРдРаас | сссРааРдРР | ддаасРдадд | ссадасРдда | РдРддсРддд | 2280 |
ссаРдддда 2289
- 71 011747 <210> 52 <211> 1184 <212> ДНК <213> Ното зар!епз <220>
<221> т!зс_£еаЕиге <223> последовательность 5ТАК52 <400>52
сЕсЕЕсЕЕЕд | ЕЕЕЕЕЕЕаЕЕ | ЕЕддддЕдЕд | ЕдддЕасдЕд | ЕаадаЕдада | ааЕдЕасааа | 60 |
сасаадЕаЕЕ | ЕсадааасЕс | саадЕааЕаЕ | ЕсЕдЕсЕдЕд | адЕЕсасддЕ | аааЕаааЕаа | 120 |
ааадддсааа | дЕдасадааа | ЕасаддаЕЕа | ЕЕаааадсаа | ааЕааЕдЕЕс | ЕЕЕдаааЕсс | 180 |
сссссЕЕддЕ | дЕаЕЕЕЕЕЕа | ЕсЕЕаддаЕд | садсасЕЕЕс | адсаЕдссса | адЕаЕЕдааа | 240 |
дсадЕдЕЕЕЕ | ЕасдсЕасса | сддЕааЕЕЕЕ | аЕЕЕадааас | сссаЕдЕЕса | сЕЕЕЕадЕЕЕ | 300 |
ЕааааЕддЕс | ЕЕЕаЕдасаЕ | ааааЕЕаЕса | дсаЕЕсаЕаЕ | ЕЕЕЕдЕдЕЕЕ | ЕааЕаЕЕссЕ | 360 |
ЕЕддсЕасЕЕ | аЕЕдааасад | ЕааасаЕЕас | дааааЕЕадЕ | ааасаааЕсЕ | ЕЕдаЕадЕЕд | 420 |
сИасй.ид | ЕЕЕааЕЕдаа | ЕдЕЕЕаЕЕЕЕ | аЕЕаддЕааа | ЕаЕасааЕса | ааЕЕЕаЕЕЕа | 480 |
ааааЕааЕда | ддаааадааЕ | асЕЕЕЕсЕЕЕ | сдсЕЕЕдсда | аадсааадЕд | аЕЕЕЕЕсаЕЕ | 540 |
сЕЕсЕссдЕс | сдаЕЕссЕЕс | ЕсЕЕссадсЕ | дссасадссд | асЕдасаддс | Есссддсддс | 600 |
сЕдаддадЕа | дЕаЕдсаааЕ | ЕЕЕддаЕдаЕ | ЕдасассЕас | адЕадаадсс | ааЕсасдЕса | 660 |
аадЕаддаЕд | сЕдаЕЕддЕЕ | дасаасааЕа | ддсдЕааасс | ЕЕдасдЕЕЕЕ | ааааассЕда | 720 |
сасссааЕсс | аддсдаЕЕса | ЕдсаааЕааа | ддаадддадЕ | сасаЕЕасса | ддддссадад | 780 |
адасЕЕдадЕ | асдассЕсас | дЕдЕЕсадЕд | дЕддаЕаЕЕд | сасадасдЕс | ЕдсааддЕсЕ | 840 |
аЕаЕааасдс | ЕасаЕааЕдЕ | ЕсаасЕсааЕ | ЕдсЕЕдссЕЕ | ддссЕЕЕссс | ааасЕЕдЕса | 900 |
сЕддааЕаЕа | ааЕЕаЕсссЕ | ЕЕЕЕЕааааа | ЕаааааааЕа | адааЕЕаЕдЕ | адЕдсасаЕа | 960 |
ЕаЕдаЕддЕЕ | саЕдЕадааа | ЕсЕаааЕдда | сЕЕссаасдс | аЕддааЕЕЕЕ | ссЕаЕЕЕссс | 1020 |
ссЕЕЕсЕЕЕа | ааЕЕааЕссЕ | садЕдаадда | ддсЕдЕЕЕЕс | сссЕадаЕЕЕ | сааааддасд | 1080 |
адаЕЕЕасад | адссЕЕЕссЕ | Еддадааасс | сдсЕсЕаддс | асадаЕддЕс | адЕаааЕЕЕа | 1140 |
дсЕЕсЕЕсад | сдаадЕЕсса | саЕддсассд | ссадаЕддса | Еаад | 1184 |
<210>53 <211>1431 <212> ДНК <213> Ното зартепз <220>
- 72 011747 <221> гм.5с_£еаРиге <223> последовательность 8ТАК53 <400>53
сссрдаддаа | дардасдадр | аасРссдРаа | дадаассррс | сасРсаРссс | ссасаРсссР | 60 |
дсадасдрдс | раррсрдрра | рдарасрддр | аРсссаРсРд | РсасРРдсРс | сссаааРсаР | 120 |
РсссРРсРРа | сааРРРРсра | сРдРасадса | РРдаддсрда | асдаРдадад | а+РРсссаРд | 180 |
сРсРРРсРас | РсссРдсссР | дРаРаРаРсс | ддддаРссРс | ссРасссадд | аРдсРдРддд | 240 |
дРсссааасс | ссаадраадс | ссРдаРаРдс | дддссасасс | РРРсРсРадс | с+аддааррд | 300 |
аРаасссадд | сдаддаадрс | асрдрддсар | даасадаРдд | РРсасРРсда | ддаассдрдд | 360 |
ааддсдрдрд | саддРссРда | даРадддсад | ааРсддадрд | рдсаддаРсР | дсаддрсадд | 420 |
аддадРЪдад | аррдсдРОдс | сасдРддРдд | даасРсасРд | ссасРРаРРР | ссРРсРсРсР | 480 |
РсРРдссРса | дссРсаддда | РасдасасаР | дсссаРдаРд | адаадсадаа | сдрддрдасс | 540 |
рррсасдаас | ардддсардд | сРдсддассс | срсдрсарса | ддРдсаРадс | аадрдааадс | 600 |
аадРдРРсас | аасадрдааа | адррдадсдр | саРРРРРсРР | адрдрдссаа | дадРРсдаСд | 660 |
РРадсдРРРа | сдррдраррр | РсРРасасРд | РдРсаРРсРд | РРадаРасРа | асаРРРРсаР | 720 |
рдардадсаа | дасаРасРЪа | ардсараррр | РддРРРдРдР | аРссаРдсас | сРассРРада | 780 |
ааасаадрар | РдРсддРРас | сРсрдсаРдд | аасадсаРРа | сссРссРсРс | РссссадаРд | 840 |
рдасрасрда | дддсадРРсР | дадРдРРРаа | рррсадаррр | РРРссРсРдс | аРРРасасас | 900 |
асасдсасас | ааассасасс | асасасасас | асасасасас | асасасасас | асасасасас | 960 |
асасассаад | РассадРаРа | адсаРсРдсс | арсрдсрррр | сссаРРдсса | РдсдРссРдд | 1020 |
РсаадсРссс | сРсасрсЪдР | РРссРддРса | дсардрасрс | сссРсаРссд | аРРссссРдр | 1080 |
адсадРсасР | дасадРРааР | ааассРРРдс | ааасдРРссс | садРРдРРРд | с+сдРдссаР | 1140 |
РаРРдРдсас | асадсРсЕдР | дсасдРдРдР | дсаРаРРРсР | РРаддааада | РРсРРадаад | 1200 |
РддааРРдсР | дрдрсааадд | адРсаРРРаР | Рсаасаааас | асРааРдадр | дсдРссРсдр | 1260 |
дсРдадсдсР | дРРсРаддРд | срддадсдас | дРсадддаас | ааддсадаса | ддадРРссед | 1320 |
асссссдРРс | Рададдадда | РдРРРссадР | рдррдддррр | РдРРРдРРРд | РРРсРРсРад | 1380 |
адаРддРддР | сРРдсРсРдР | ссаддсРада | дрдсадрддс | ардарсарад | с | 1431 |
<210>54 <211>975 <212> ДНК <213> Ното зартепз
- 73 011747 <220>
<221> ш1зс_£еаЕиге <223> последовательность ЗТАВ.54 <400>54
ссаЕаааадЕ | дЕЕЕсЕааас | Едсадааааа | ЕсссссЕаса | дЕсЕЕасадЕ | ЕсаадааЕЕЕ | 60 |
ЕсадсаЕдаа | аЕдссЕддЕа | даЕЕассЕда | сЕЕЕЕЕЕЕдс | саааааЕаад | дсасадсадс | 120 |
ЕсЕсЕссЕда | сЕсЕдасЕЕЕ | СЕаЕадЕссЕ | ЕасЕдааЕЕа | ЕадЕссЕЕас | ЕдааЕЕсаЕЕ | 180 |
сЕЕсадЕдЕЕ | дсадЕсЕдаа | ддасасссас | аЕЕЕЕсЕсЕЕ | ЕдЕсЕЕЕдЕс | ааЕЕсЕЕЕдЕ | 240 |
дЕЕдЕааддд | саддаЕдЕЕЕ | аааадЕЕдаа | дЕсаЕЕдасЕ | ЕдсааааЕда | даааЕЕЕсад | 300 |
адддсаЕЕЕЕ | дЕЕсЕсЕада | ссаЕдЕадсЕ | ЕададсадЕд | ЕЕсасасЕда | ддЕЕдсЕдсЕ | 360 |
ааЕдЕЕЕсЕд | садЕЕсЕЕас | сааЕадЕаЕс | аЕЕЕасссад | саасаддаЕа | ЕдаЕададда | 420 |
сЕЕсдаааас | сссадааааЕ | дЕЕЕЕдссаЕ | аЕаЕссааад | сссЕЕЕддда | ааЕддааадд | 480 |
ааЕЕдсдддс | ЕсссаЕЕЕЕЕ | аЕаСаЕддаЕ | адаЕададас | саадааадас | сааддсаасЕ | 54 0 |
ссаЕдЕдсЕЕ | ЕасаЕЕааЕа | аадЕасаааа | ЕдЕЕаасаЕд | ЕаддаадЕсЕ | аддсдаадЕЕ | 600 |
ЕаЕдЕдадаа | ЕЕсЕЕЕасас | ЕааЕЕЕЕдса | асаЕЕЕЕааЕ | дсаадЕсЕда | ааЕЕаЕдЕса | 660 |
аааЕаадЕаа | аааЕЕЕЕЕас | аадСЕаадса | дадааЕааоа | аЕдаЕЕадЕс | ададаааЕаа | 720 |
дЕадсааааЕ | сЕЕсЕЕсЕса | дЕаЕЕдасЕЕ | ддЕЕдсЕЕЕЕ | сааЕсЕсЕда | ддасасадса | 780 |
дЕсЕЕсдсЕЕ | ссаааЕссас | аадЕсасаЕс | адЕдаддада | сЕсадсЕдад | асЕЕЕддсЕа | 840 |
аЕдЕЕддддд | дЕсссЕссЕд | ЕдЕсЕсссса | ддсдсадЕда | дссЕдсаддс | сдассЕсасЕ | 900 |
сдЕддсасас | аасЕаааЕсЕ | ддддадаадс | аасссдаЕдс | садсаЕдаЕд | садаЕаЕсЕс | 960 |
адддЕаЕдаЕ | сддсс | 975 |
<210>55 <211>501 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т!зс_£еаЕиге <223> последовательность ЗТАЕ55 <400> 55
сс^даасЪса | ЕдаЕссдссс | ассЕсадссЕ | ссЕдаадЕдс | ЕдддаЕЕаса | ддЕдЕдадсс | 60 |
ассасассса | дссдсаасас | асЕсЕЕдадс | аассааЕдЕд | ЕсаЕаааада | ааЕааааЕдд | 120 |
аааЪсадааа | дЕаЕсЕЕдад | асадасаааа | аЕддааасас | аасаЕассаа | ааЕЕЕаЕддд | 180 |
асасадсааа | адсадЕЕЕЕа | ддадддаадЕ | ЕЕаЕадЕдаЕ | дааЕассЕас | сЕсааааЕса | 240 |
- 74 011747
ЕЕадссЕдаЕ | ЕддаЕдасас | ЕасадЕдЕаЕ | аааЕдааЕЕд | аааассасаЕ | ’ЕдЪдссссаЪ | 300 |
асаЕаЕаЕас | ааЕЕЕЕЕаЕЕ | ЕдЕЕааЕЕаа | аааЕааааЕа | ааасЕЕЕааа | ааадаадааа | 360 |
дадсЕсаааЕ | ааасаассЕа | асЕЕЕаЕасс | ЕсааддаааЕ | адаададсса | дс^аадссса | 420 |
аадЕРдасад | ааддаааааа | аЕаЕЕддсад | ааадаааЕда | аасададасЕ | адааадасаа | 4Θ0 |
ЕЕдаададаЕ | садсаааасЕ | а | 501 |
<210> 56 <211> 741 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1бС_£еаРиге <223> последовательность 5ТАК56 <400>56
асасаддааа | адаЕсдсааЕ | ЕдЕРсадсад | адсРРРдаас | сддддаРдас | ддЕсРсссРс | 60 |
дЕЕдсссддс | аасаЕддЕдЕ | адсадссадс | садЕЕаЕЕЕс | ЕсРддсдРаа | дсааРассад | 120 |
дааддаадЕс | ЕЕасЕдсЕдЕ | сдссдссдда | даасаддЕЕд | РЕссЕдссЕс | ЕдаасРЕдсЕ | 180 |
дссдссаЕда | адсадаЕЕаа | адаасРссад | сдссРдсРсд | дсаадаааас | даЕддааааЕ | 240 |
даасЕссЕса | аадаадссдЕ | ЕдааЕаЕдда | сдддсааааа | адЕддаЕадс | дсасдсдссс | 300 |
ЕРаЕЕдсссд | дддардддда | дРаадсррад | РсадссдРРд | РсрссдддРд | РсдсдЕдсдс | 360 |
адЕЕдсасдЕ | саЕЕсЕсада | сдаассдаРд | асРддаРдда | рддссдссдс | адРсдРсаса | 420 |
сЕдаЕдаЕас | ддаЕдЕдсЕЕ | сЕссдЕаЕас | ассаРдРРаР | сддададсрд | ссаасдРаЕд | 480 |
дЕЕаЕсдЕсд | ддЕаЕдддсд | сЕдсРЕсдса | дасаддсада | асЕЕдаРддР | аРдссЕдсда | 540 |
ЕсааЕдссаа | асдЕдЕЕЕас | сддаЕсаЕдс | дссадаардс | дсЕдРЕдсРЕ | дадсдаааас | 600 |
сЕдсЕдЕасс | дссаЕсдааа | сдддсасаЕа | саддсададр | ддссдЕдааа | дааадсааЕс | 660 |
адсдаЕддЕд | сЕсЕдасддд | РЕсдадЕРсЕ | дсЕдЕдаЕаа | сддададада | сЕдсдЕдЕса | 720 |
сдЕРсдсдсЕ | ддасЕдсЕдЕ | д | 741 |
<210>57 <211>1365 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<221> т13С_£еаЕиге <223> последовательность ΞΤΑΚ57
- 75 011747 <400> 57
ЕссЕЕсЕдЕа | ааЕаддсааа | аЕдЕаЕЕЕЕа | дЕЕЕссасса | сасаЕдЕЕсЕ | ЕЕЕсЕдЕадд | 60 |
дсЕЕдбаЕдб | ЕддаааЕЕЕЕ | аЕссааЕЕаЕ | ЕсааЕЕааса | сЕаЕассаас | ааЕсЕдсЕаа | 120 |
ЕЕсЕддадаЕ | дЕддсадЕда | аЕаааааадЕ | ЕаЕадЕЕЕсЕ | даЕЕЕЕдЕдд | адсЕЕддасб | 180 |
ЕЕааЕдаЕдд | асаааасаас | асаЕЕсЕЕаа | аЕаЕаЕаЕЕЕ | саЕсааааЕЕ | аЕадЕдддЕд | 240 |
ааЕЕаЕЕЕаЕ | аЕдЕдсаЕЕЕ | асаЕдЕдЕаЕ | дЕаЕасаЕаа | аЕдддсддЕЕ | асЕддсЕдса | 300 |
сгдадааЕдЕ | асасдЕддсд | сдаасдаддс | ЕдддсддЕса | дадааддссЕ | сссааддадд | 360 |
ЕддсЕЕЕдаа | дсЕдадЕддЕ | дсЕЕссасдЕ | дааааддсЕд | дааадддсаЕ | Ессаадаааа | 4 20 |
ддсбдаддсс | адсдддааад | аддЕЕссадб | дсдсбсЕддд | аасддааадс | дсассЕдссЕ | 480 |
дааасдаааа | ЕдадЕдЕдсЕ | дааабаддас | дсЕадааадд | даддсааадд | сЕддсаааад | 540 |
сдассдадда | ддадсЕсааа | ддадсдадсд | дддааддссд | сЕдЕддадсс | Еддаддаадс | 600 |
асЕЕсддаад | сдсЕЕсЕдад | сдддЕааддс | сдсЕдддадс | аЕдаасЕдсЕ | дадсаддЕдЕ | 660 |
дбссадааЕЕ | сдЕдддЕЕсЕ | ЕддЕсЕсасЕ | дасЕЕсаада | аЕдаададдд | ассдсддасс | 720 |
сЕсдсддбда | дбдЕЕасадс | ЕсЕЕааддЕд | дсдсдЕсЕдд | адЕЕЕдЕЕсс | ЕЕсЕдаЕдЕЕ | 780 |
сддаЕдЕдЕЕ | сададЕЕЕсЕ | ЕссЕЕсЕддЕ | дддЕЕсдЕдд | ЕсЕсдсЕддс | ЕсаддадЕда | 840 |
адсЕдсадас | сЕЕсдсддЕд | адЕдЕЕасад | сЕсаЕаааад | садддЕддас | ЕсааададЕд | 900 |
адсадсадса | адаЕЕЕаЕЕд | сааадааЕда | аадаасааад | сЕЕссасасЕ | дСддаадддд | 960 |
ассссадсдд | дЕЕдссасЕд | сЕддсЕссдс | адссЕдсЕЕЕ | ЕаЕЕсЕсЕЕа | ЕсЕддсссса | 1020 |
сссасаЕссЕ | дсЕдаЕЕддЕ | ададссдааЕ | ддЕсЕдЕЕЕЕ | дасддсдсЕд | аЕЕддЕдсдЕ | 1080 |
ЕЕасааЕссс | ЕдсдсЕадаЕ | асаааддЕЕс | ЕссасдЕссс | сассадаЕЕа | дсЕадаЕада | 1140 |
дЕсЕссасас | аааддббсЕс | сааддсссса | ссададЕадс | ЕадаЕасада | дЕдЕЕдаЕЕд | 1200 |
дЕдсаЕЕсас | ааасссЕдад | сЕадасасад | ддЕдаЕдасЕ | ддЕдЕдЕЕЕа | сааассЕЕдс | 1260 |
ддЕадаЕаса | дадЕаЕсааЕ | ЕддсдЕаЕЕЕ | асааЕсасЕд | адсЕаддсаЕ | аааддЕЕсбс | 1320 |
саддЕсссса | ссадасЕсад | дадсссадсЕ | ддсЕЕсассс | адЕдд | 1365 |
<210> 58 <211> 1401 <212> ДНК <213> Ното еархепз <220>
<221> т1зс_£еа£иге <223> последовательность 5ТАК58 <400> 58
- 76 011747
аадРРРассР | радсссрааа | РРаРРРсаРР | дРдаРРддса | РРРРаддааа | РаРдРаРРаа | 60 |
ддааРдРсРс | РРаддадаРа | аддаРаасаР | аРдРсРаада | аааРРаРаРР | даааРаРРаЬ | 120 |
РасардаасР | ааааРдРРад | аасРдааааа | ааарраррдр | аасРссРРсс | адсдраддса | 180 |
ддадРаРсРа | даРассаасР | РРаасаасРс | аасРРРааса | асРРсдаасс | аассадаРдд | 240 |
сРаддадаРР | сассРаРРРа | дсаРдаРаРс | РРРРаРРдаР | аааааааРаР | аааасРРсса | 300 |
РраааРРРРР | аадсРасРас | аарссРаРРа | ааРРРРаасР | РассадРдРР | сРсааРдсРа | 360 |
саРааРРРаа | ааРсаРРдаа | аРсРРсРдаР | РРРаасРссР | садрсррдаа | аРсРасРРаР | 420 |
РЕРРадРРас | аРараРаРсс | аарсРасРдс | сдсРадРада | адаадсррдд | ааРРРдадаа | 480 |
аааааРсада | сдРРРРдРар | аРрсРсаРаР | РсасрааРРР | аРРРРРРааа | РдадРРРсРд | 54 0 |
сааРдсаРса | адсадРддса | ааасаддада | ааааРРаааа | РСддРРдааа | адаРаРдРдЕ | 600 |
дссааасааР | сссРРдаааР | ррдардаадр | дасРааРсср | дадРРаРРдР | РРсаааРдРд | 660 |
РассРдРРРа | РасаадддРа | РсассРРРда | ааРсРсааса | РРаааРдааа | РРРРаРаадс | 720 |
ааРРРдРРдР | аасаРдаРРа | РРаРааааРР | срдаРаРаас | аРРРРРРаРР | ассРдЪРРад | 780 |
адРРРааада | дадаааадда | дРРаадааРа | аРРасаРРРР | саРРадсаРР | дрссдддрдс | 840 |
ааааасЕРсР | аасасРаРсР | РсаааРсРРР | РРсРссаРРд | ссРРсРдаас | аРасссасРР | 900 |
дддРаРсРса | РРадсасрдс | аааРРсааса | РРРРсдаРРд | сРааРРРРРс | РсссРаааРа | 960 |
рррарррдрр | РРсрсадсРР | РадссааРдР | ррсасРаРРд | ассарррдср | саадРаРадР | 1020 |
дасдсРРсаа | рдассррсад | ададсРдРРР | садрссррсс | рддасРасРР | дсаРдсРРсс | 1080 |
аасааааРда | адсасРсрРд | ардрсадрса | сРсаааРааа | рддааарддд | сссаррРасР | 1140 |
аддааРдРРа | асадаарааа | аадарадасд | РдасассадР | РдсРРсадРс | саРсРссаРР | 1200 |
РасРРдсРРа | аддссРддсс | аРаРРРсРса | садРРдаРаР | ддсдсадддс | асаЕдРРРаа | 1260 |
аРддсРдРРс | РРдРаддаРд | дрррдасрдр | рддаРРссРс | аРсРРсссРс | РссРРаддаа | 1320 |
ддааддРРас | адРадРасРд | РРддсРссРд | дааРаРадаР | РсаРааадаа | сРааРддадЕ | 1380 |
аРсаРсРссс | асРдсРсРРд | Р | 1401 |
<210> | 59 | |
<211> | 866 | |
<212> | ДНК | |
<213> | Ното | заръепз |
<220> | ||
<221> | тайс | £еа£иге |
<223> | последовательность ЗТАК59 |
- 77 011747 <400> 59
дадаксасдс | саскдсаскс | садсскдддд | дасададсаа | даскссакск | садааасааа | 60 |
сааасасаса | аадссадкса | аддкдкккаа | кксдасддкд | ксаддсксад | дксксккдас | 120 |
аддакасакс | садсасссдд | дддааасдкс | дакдддкддд | дкддаакска | ккккдкддсс | 180 |
ксаадддадд | дкккдададд | кадксссдса | адсддкдакд | дсскааддаа | дсссскссдс | 240 |
ссаадаадсд | акакксаккк | скадсскдка | дссасссаад | адддадаакс | дддсксдсса | 300 |
садассссас | аасссссаас | ссассссасс | сссасссскс | ссассксдкд | ааакдддскс | 360 |
ксдскссдкс | аддскскадк | сасассдкдк | ддккккддаа | сскссадсдк | дкдкдсдкдд | 420 |
дккдсдкддк | ддддкддддс | сддскдкдда | сададдаддд | дакааадсдд | сддкдксссд | 480 |
сдддкдсссд | ддасдкдддд | сдкддддсдк | дддкддддкд | дссададсск | кдддаасксд | 540 |
ксдсскдксд | ддасдксксс | ссксскддкс | ссскскскда | сскасдсксс | асакскксдс | 600 |
сдкксадкдд | ддассккдкд | ддкддаадко | ассакссскк | кддаскккад | ссдасдаадд | 660 |
ссдддскссс | аададкскос | ссддаддсдд | ддссккдддс | аддсксасаа | ддакдскдас | 720 |
ддкдасддкк | ддкдасддкд | акдкаскксд | даддссксдд | дссаакдсад | аддкакссак | 780 |
ккдассксдд | кдддасаддк | садскккдсд | дадксссдкд | сдкссккоса | дадасксакс | 840 |
садсдскадс | аадсакддкс | ссдадд | 866 |
<210> <211> <212> <213> | 60 2067 ДНК Ното зархепз |
<220> <221> <223> | т!зс_£еакиге последовательность 5ТАВ60 |
<220>
<221> ги1зс_£еакиге <222> (92)..(1777) <223> η является а, с, д или к в различных положениях <400> 60
адсадкдсад | ааскддддаа | даадаададк | ссскасасса | сккаакаскс | аааадкаскс | 60 |
дсаааааака | асасссскса | ссаддкддса | кпаккаскск | сскксаккда | дааааккадд | 120 |
аааскддаск | ксдкадаадс | кааккдсккк | акссададсс | асскдсакас | ааасскдсад | 180 |
сдссасскдс | акасааасск | дксадссдас | сссааадссс | ксадксдсас | саадсскскд | 240 |
скдсасассс | ксдкдссккс | асаскддссд | ккссссаадс | скддддсака | скпсссадск | 300 |
- 78 011747
сДдадаааДд | ДаДДсаДссД | ДсааадсссД | дсДсаДдДдД | ссДппДсаас | аддааааДсД | 360 |
сссаДдадаД | дсДсДдсДаД | ссссаДсДсД | ссДдссссаД | адсДДаддса | пасДДсДдДд | 420 |
дДддДдадДс | сДдддсДдДд | сДдДдаДдДд | ДДсдссДдсп | аДдДпДдДДс | ДДссссасаа | 480 |
ДдаДдддссс | сДдааДДсДс | ДаДсДсДадс | ассДдДдсДс | адДаааддсД | Ддддааасса | 540 |
ддсДсааадс | сДддсссада | ДдссассДДД | ДссадддДдс | ДДссдддддс | сассаассад | 600 |
адДдсадссД | ДсДссДссас | саддаасДсД | Ддсадсссса | ссссДдадса | ссДдсасссс | 660 |
аДДасссаДс | ДДДдДДДсДс | сдДдДдаДсд | ДаДДаДДаса | дааДДаДаДа | сДдДаДДсДД | 720 |
ааДасадДаД | аДааДДдДаД | ааДДаДДсДД | ааДасадДаД | аДааДДаДас | аааДасаааа | 780 |
ДаДдДдДДаа | ДддассдДДД | аДдДДасДдд | ДааадсДДДа | адДсаасадД | дддасаДДад | 840 |
ддаддДДДДД | ддсдааддса | ааадДДаДаД | дДдсаДДДДс | аасддсддда | ддддДсддДа | 900 |
спДсДпассс | ссаДдДДдДД | саапддДсаа | сддДсДасас | ададсададс | дааДДсасда | 960 |
садаааДдДД | адсДДдДдДс | асДадДаДсД | ссссддсдса | ДаадсДДаад | асасаДассД | 1020 |
ДдадададсД | сДДддссаДс | ДсДасДааДд | асДдаадддД | ддадддадда | дадаДдДсаД | 1080 |
ааДаддсаДа | ааасДасаДД | асаДсаДДсд | адДдссааДД | ДДдссассДД | дасссдсддд | 1140 |
Ддсаааасас | саасдДсадД | асасаДаДда | ададдааасД | дсссдадаас | ДдаадДДссД | 1200 |
дадассадда | дсДдсаддсд | ДДадаДадаа | ДаДддДдасд | ададДДасда | ддаДдасдад | 1260 |
адДаааДасД | ДсаДасДсад | ДасдДдссаа | дсасДдсДаД | аадсдсДсДд | ДаДдДдДдаа | 1320 |
дДсаДДДааД | ссДсасадса | ДсссасддДд | ДааДДаДДДД | саДДаДсссс | аДдадддаас | 1380 |
адааасДсад | аасддДДсаа | сасаДаДдсд | адааддсдса | дссддДсадД | дадададсад | 1440 |
дДДсссдДсс | аадсадДсад | ассссдадДд | сасасДсДсд | ассссДдДсс | адсадасДса | 1500 |
сДсдДсаДаа | ддсддддадД | дпДсДдДДДс | адссадаДдс | ДДДаДдсаДс | ДсададДасс | 1560 |
сааассаДда | аадааДдадд | садДаДДсап | дадсадаДдд | пдсДдддсад | ДааддсДддд | 1620 |
сДДсадааДа | дсДддааадс | ДсаадДпаДд | ддассДдсаа | даааааДсса | ДДдДДДпдаД | 1680 |
аааДадссаа | адДсссДадд | сДдДаадддд | ааддДдДдсс | аддДдсаадД | ддадсДсДаа | 1740 |
ДдДааааДсд | сассДдадДс | ДссДддДсДД | аДдадДпсДд | ддДдДасссс | адДдаааддД | 1Θ00 |
ссДдсДдсса | ссаадДдддс | саДддДДсад | сДдДдДаадД | дсДдадсддс | адссддассд | 1860 |
сддссдсдаа | сДДсассДсс | аааддсасад | ДдсассДддД | ДссДссадса | сДсадсДдсд | 1920 |
аддссссдад | ссаддддссс | ддсссссддс | ссссддсадс | ДдсДссадсД | ДссДДсссса | 1980 |
садсаДДсад | даДддДсДдс | дДДсаДдДад | ассДДДдДДД | ДсадДсДдДд | сДссдаддДс | 2040 |
аседдсадса | сДадссссдд | сДссДдД | 2067 |
- 79 011747 <210> 61 <211> 1470 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еаРиге <223> последовательность ЗТАК61 <220>
<221> тпРзс_Ееа£иге <222> (130)..(976} <223> η является а, с, д или р в различных положениях <400> 61
садсссссас | аЕдсссадсс | сРдРдсРсад | сРсРдсадсд | дддсаРддРд | ддсададаса | 60 |
сададдссаа | ддсссРдсЕР | сддддасддЕ | дддссРддда | РдадсаЕддс | сРРддссРРс | 120 |
дссдададРп | сЕсЕЕдЕдаа | ддаддддЕса | ддаддддсРд | срдсадсрдд | ддаддадддс | 180 |
даЕддсасРд | Еддсапдаад | РдаапРадЕд | ЕдддрдссРп | дсассссадд | сасддссадс | 240 |
сЕддддЕаЕд | дасссддддс | СПРсРдРЕсР | ададсаддаа | ддРаРддРда | ддассРсааа | 300 |
аддасадсса | сЕддададсЕ | ссаддсадад | дпасРРдада | ддсссРдддд | ссаРссРдРс | 360 |
ЕсЕЕЕЕсЕдд | дрсрдрдрдс | ЕсЕдддссЕд | ддсссРРссР | сРдсРссссс | дддсРРддад | 420 |
адддсЕддсс | ЕЕдссЕсдЕд | саааддасса | сРсЕадасРд | дРассаадРс | ЕддсссаЕдд | 480 |
ссРссЕдРдд | дРдсаддссЕ | дрдсдддрда | ссрдададсс | адддсЕддса | ддРсададбс | 540 |
аддададдда | ЕддсадЕдда | ЕдсссЕдЕдс | аддаРсЕдсс | ЕааРсаРддР | даддсРддад | 600 |
дааЕссааад | ЕдддсаЕдса | сЕсЕдсасЕс | аРЕРсРРРаР | ЕсаРдЕдЕдс | ссаРсссаас | 660 |
аадсадддад | ссбддссадд | адддссссбд | ддадааддса | сЕдаРдддоР | дрдррссарр | 720 |
ЕаддааддаЕ | ддасддРЕдР | дадасдддЕа | адРсадаасд | ддсЕдсссас | сЕсддссдад | 780 |
адддссссдр | ддрдддррдд | сассаРсРдд | дссрддадад | сРдсРсадда | ддсРсРсрад | 840 |
ддсЕдддЕда | ссаддпсрдд | ддРасадЕад | ссардддадс | аддрдсЕРас | срддддсрдр | 900 |
сссЕдадсад | дддсЕдсаЕЕ | дддЕдсЕсЕд | Рдадсасаса | сРРсЕсРаРР | сассРдадРс | 960 |
сспсЕдадЕд | аЕдадпасас | ссРРдРРРРд | садардаарс | ЕдадсаРдда | дардрраадр | 1020 |
ддсЕРдссЕд | адссасасад | садаРддаРд | дрдрадсрдд | дассрдаддд | саддсадРсс | 1080 |
садсссдадд | асРЕсссаад | дррдрддсаа | асРсРдасад | саРдасссса | дддаасассс | 1140 |
аЕсРсадсЕс | ЕддЕсадаса | сРдсддадРР | дРдРРдЕаас | ссасасадсР | ддадасадсс | 1200 |
асссРадссс | сасссЕЕаЕс | срсрсссааа | ддаассРдсс | СЕРЕСССРРС | аррррссрср | 1260 |
- 80 011747
РасРдсаРРд | адддассаса | садрдрддса | дааддаасаР | дддррсадда | сссадаРдда | 1320 |
с!1дс'Лсас | адрдсадссс | РссРдРссРс | РРдсададРд | сдрсррссас | рдРдаадНРд | 1380 |
ддасадРсас | ассаасрсаа | РасРдсРддд | сссдрсасас | ддрдддсадд | саасддаРдд | 1440 |
садНсасрдд | сРдРдддРсН | дсададдрдд | 1470 |
<210> 62 <211> 1011 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<221> т15с_£еа£иге <223> последовательность ΞΤΑΚ62 <400>62
адРдРсаааР | адаРсРасас | аааасаадаР | ааРдРсРдсс | саРРРРРсса | аадаРааРдР | 60 |
ддрдаадрдд | дРадададаа | аРдсаРссаР | РсРссссасс | саассРсРдс | РаааРРдРсс | 120 |
аНдРсасадР | асРдадасса | дддддсННаР | Рсссадсддд | садааРдНдс | ассаадсасс | 180 |
РсРРдРсРса | аРНРдсадРс | РаддсссРдс | РаРРРдаРдд | РдрдааддсН | РдсассНддс | 240 |
аРддааддРс | сдНРРРдРас | РРсРРдсРРР | адсадРРсаа | ададсаддда | дадсРдсдад | 300 |
ддссРсРдса | дсРРсадаРд | даРдРддРса | дсРРдРРдда | ддсдссРРсР | дРддРссаРР | 360 |
аРсРссадсс | ссссрдсддр | дРРдсРдРРР | дсРРддсРРд | НсрддсРсНс | саНдссРРдР | 420 |
РддсРссааа | аРдРсаРсаР | дсРдсасссс | аддаадааРд | Ндсаддссса | РсРсРРРРаР | 480 |
дРдсРРРддд | сНаРРНРдаН | РссссдРРдд | дНаРаРРссс | РаддРаадас | ссадаадаса | 540 |
саддаддРад | РРдсРРРддд | ададРРРдда | ссРаРдддРа | РдаддРааРа | дасасадРаН | 600 |
сРНсРсРРНс | аРРРддРдад | асРдРРадсР | сРддссдсдд | асРдааРРсс | асасадсРса | 660 |
сРРдддаааа | СРРНаРРСса | ааасаНадРс | асаРРдааса | РРдРддадаа | Рдадддасад | 720 |
адаададдсс | срадаРНРдН | асаРсРдддР | дррардрсра | РаааРадааР | дсРРНддРдд | 780 |
НсаасРадас | РРдРРсаРдР | РдасаРРРад | РсРРдссРРР | РсддРддРда | РРРаааааРР | 840 |
аРдРаРаРсР | РдНРРддааР | аРадРддадс | РарддрдНдд | сарРРНсаНс | РддсРРРРРд | 900 |
РРРадсРсад | сссдРссРдР | РаРдддсадс | сРРдаадсРс | адРадсРааР | даададдРаР | 960 |
ссРсасНссс | Рссадададс | ддРссссРса | сддсРсаРРд | ададрРРдрс | а | 1011 |
<210>63 <211>1410 <212> ДНК
- 81 011747 <213> Ното заргепз <220>
<221> πιί зс_£еабиге <223> последовательность 5ТАК63 <400>63
ссасадссбд | абсдбдсбдб | сдабдададд | аабсбдсбсб | аадддбсбда | дсддадддад | 60 |
абдссдаадс | бббдадсббб | ббдбббсбдд | сббаассббд | дбддаббббс | асссбсбддд | 120 |
саббассбсб | бдбссадддд | аддддсбддд | ддадбдссбд | дадсбдбадд | дасададддс | 180 |
бдадбддддд | ддасбдсббд | ддсбдассас | абаабаббсб | дсбдсдбабб | аабббббббб | 240 |
бдадасадбс | бббсбсбдбб | дсссаддсбд | дадбдбаабд | дсббдабадс | бсасбдссас | 300 |
сбссдссбсс | бдддббсаад | бдаббсбссб | дсббсадсбб | ссддадбадс | бдддасбдса | 360 |
ддбдсссдсс | ассабддсбд | дсбааббббб | дбабббббаб | бадсаабддд | дббббдсбаб | 420 |
дббдсссадд | ссддбсссда | асбссбдссс | бсаадбдаба | сассбдссбс | ддссбсссаа | 480 |
адбдсбддда | ббададдсбб | дадссасбдс | дссбддссад | сбдсабаббд | ббааббадас | 540 |
абаааабдса | ааабаадабд | абабааасас | аааддбдбда | аабаадабдд | асассбдсбд | 600 |
адсдсдссбд | бссбдаадса | бсдссссбсб | дсаааадсад | дддбсадсаб | дбдббсбссд | 660 |
дбссббдсбс | ббасададда | дбдадсбдсс | бабдсдбсбб | ссадссасбб | ссбдддсбдс | 720 |
бсададдссб | сбсасдддбд | ббсбдддббд | сбдссасббд | саддддбдсб | даддсддддс | 780 |
бссбсссдбд | сддддсабдб | ссаддссдсс | сбсбсбдаад | дсббддсадд | басаддбддд | 840 |
адбдддддбс | бсбдддсбдс | бдбддддасб | дддсаддсбс | сбддаадасс | бсссбдбдбб | 900 |
бдддсбдааа | дсдсадсссд | аддддаддбс | сссадддадд | ссдсбдбсдд | дддбдддддс | 960 |
ббддаддадд | даддддссда | ддадссддсд | асасбссдбд | асддсссадд | аасдЕсссба | 1020 |
аасааддсдс | сдсдббсбсд | абддддбддд | дбссдсбббс | ббббсбсааа | адсбдсадбб | 1080 |
асбссабдсб | сддаддасбд | дсдбссдсдс | ссбдббссаа | бдсбдссссд | дддсссбддс | 1140 |
сббддддааб | сддддссббд | дасбддассс | бдддддсббс | дсддадссдд | дссбддсддд | 1200 |
дсдадсддад | сададдсбдд | дсадссссдд | ддаадсдсбс | дссааадссд | ддсдсбдсбс | 1260 |
ссададсдсд | аддбдсадаа | ссададдсбд | дбсссдсддс | дсбаасдада | даададдаад | 1320 |
сдсдсбдбдб | ададддсдсс | сассссдбдд | ддсдаасссс | сббссбсаас | бссабддасд | 1380 |
дддсбсабдд | дббсссадсд | дсбсадасдс | 1410 |
<210>64 <211>1414
- 82 011747 <212> ДНК <213> Ното зархепз <220>
<221> т1зс_£еаРиге <223> последовательность 2ТАЕ64 <400> 64
РддаРсадаР | РРдРРРРаРа | сссРсссРРс | РасРдсРсРд | ададРРдРас | аРсасадРср | 60 |
асРдРаРсРд | ЫРсссаРЬа | РРарааРРРР | РРРдсасРдР | дсррдссрда | адддадссРс | 120 |
аадРРсаРда | дРсРсссРас | ссРссРссса | ааРдадасар | ддассРРРда | аРдсРРРсср | 180 |
дддассасса | ссссассРРР | саРдсРдсРд | РРаРссадда | РРРРадРРса | асадРдРРРР | 240 |
аассссссаа | аРдадРсаРР | РРРаРРдРРР | сдРаРадРда | аРдРдРаРРР | дддРРРдсРР | 300 |
аРаРддРдас | сРдРРРаРРР | дсРссРсаРР | дРассРсаРд | сРсРдсРсРР | РссРРсРада | 360 |
РРсадРсРсР | РРссРааРда | ддРдРсРсдс | адсааРРсРР | Расаадасад | ссаадаРадд | 420 |
ссадсРсРса | дадсасРРдР | РдРсРдаааа | адРсРРдРсР | РаРРРааРРР | сРРРРРсРРа | 480 |
дадаРддддР | срсаРРаРдР | РасссасасР | ддРсРсааас | РРсрддсРРа | аадсддрсср | 540 |
сссассРРдд | ссРсссааад | РдсРаддаРР | асаддсдрда | дсдассРсдР | ссадссРдРс | 600 |
.'тэгта я | 4--И-г<4-4-И-,т<- | ЯГГЭ Лп | ггллгга± я л | Λη<-ι+· | 660 | |
- - - г> - -- ---3- | *-4·-Т’-'-’-'-'У *- | |||||
ддасддРРРР | РРбссРрсад | сссРРРдаад | адрсрдрарр | РРсаРРаРсР | сссРдсаРРа | 720 |
даРд£Рс£РР | РдсаадРаас | дРдРсРСРРс | РсРсРдддРа | РРсРРааддР | РРРсРсРРРд | 780 |
ссРРРддРда | дсрдсадрдд | аРРРдсРРРР | РРсаададдР | саададааад | дааадрдрда | 840 |
ддРРРсРдРР | РРРРасРдас | ааРРРдРРРд | РРдаРРРдРР | РРсссассса | даддррссрр | 900 |
дссасРРРдс | саддсРддаа | ддсадасРРс | РРсРддРдРс | сРдРРсасад | асддддсадс | 960 |
сРдсддаадд | сссрдссаса | рдсадддссР | сддРссРсаР | РсссРРдсаР | дрддасссдд | 1020 |
дсдРдасРсс | РдРРсаддсР | ддсасРРссс | ададсРдадс | сссадссРда | ссРРссРссс | 1080 |
аРасРдРсРР | сасасссссР | ссРРРсРРсР | дарассрдда | ддррррссрр | РсРРРссРдР | 1140 |
сассрссаср | рддарррраа | арссрсрдрс | РдРддааРРд | РарРсддсас | аддаадаРдс | 1200 |
ррдсаадддс | саддсРсаРс | адсссРдРсс | сРдсрдсРдд | аадсадсаса | дсададссЬс | 1260 |
аРдсРсаддс | РдадаРддад | сададдссрд | садасдадса | сссадсРсад | сРддддРРдд | 1320 |
сдссдарддр | ддадддРссР | сдааадсРсР | ддддасдаРд | дсададсРаР | Рддсадддда | 1380 |
дссдсадддР | сРРЬРдадсс | сРРаааадаР | сРсР | 1414 |
<210> 65
- 83 011747 <211> 1310 <212> ДНК <213> Ното зардепз <220>
<221> т1зс_£еабдге <223> последовательность ЗТАК65 <400> 65
дбдаабдббд | абддабсааа | Сабсбббсбд | бдббдбббаб | сааадббааа | абааабдбдд | 60 |
бсабббааад | дасаааадаб | даддддббдд | адбсбдббса | адсааадддб | абаббаддад | 120 |
аааадсадаа | ббсбсбсссб | дбдаадддас | адбдасбссб | аббббссасс | бсабббббас | 180 |
баасбсбссб | аасбабсбдс | ббаддбадад | абабабссаб | дбасабббаб | ааассасадб | 240 |
даабсабббд | аббббддааб | ааадабадба | баааабдбдб | сссадбдббд | абабасабса | 300 |
басаббаааб | абдбсбддса | дбдббсбааб | бббасадббд | бссааадаба | абдббадддс | 360 |
абасбддсба | бддабдаадс | бссаабдббс | адаббдсааа | дааасббада | аббббасбаа | 420 |
бдааассааа | басабсссаа | дааа66666с | адаадааааа | аададааасб | адбадсааад | 480 |
бааадаабса | ссасаабабс | абсадабббб | ббббабабдб | адаабаббба | ббсадббсбб | 540 |
ббббсаадба | сассббдбсб | бсаббсаббд | басбббаббб | бббдбдаадд | бббаааббба | 600 |
бббсббсбаб | дбдбббадбд | абабббаааа | бббббаббба | абсаадббба | бсадааадбб | 660 |
сбдббадааа | абабдасдад | дсбббааббс | сдссабсбаб | аббббссдсб | аббабабааа | 720 |
дабааббдбб | ббсбсббббб | аааасаасбб | дааббдддаб | бббабабсаб | ааббббббаа | 780 |
бдбсбббббб | баббабасбб | баадббсбдд | дабасабдбд | садаасдбдс | аддбдбдбба | 840 |
сабадабаба | сасдбдссаб | ддбддбббдс | бдсасссасб | аассбдббаб | сдасаббадд | 900 |
барИскссб | аа!:дс1:аЪса | οσοαοΐβΐΧΐ | ссссассссс | сдададдссо | садбд+дбда | 960 |
бдббсбссбс | ссбдбдбсса | бдбдббсбса | ббдббсабсб | сссасббабд | дбабсбасса | 1020 |
баассббдаа | аббдбсббаб | дсаббсасбб | дбббддббдб | бабабадссб | ссабсаддас | 1080 |
адддабаббб | дсбдсбдсбб | С666666666 | бсбббббдад | асадбсббдс | бссдбсабсс | 1140 |
аддсбддадб | дсббсбсддс | бсаабдсаас | сбссассбсс | саддбббаад | сдаббсбсса | 1200 |
асббсадссб | сссааабддс | бдддасбдса | ддсабдсасс | асбасассбд | дсбааббббб | 1260 |
дбабббдбаа | бададасааб | дбббсассаб | дббддссадд | сбддбсбсда | 1310 |
<210> 66 <211> 1917 <212> ДНК <213> Ното зархепз
- 84 011747 <220>
<221> пи зс_£еаЕиге <223> последовательность 5ТАК67 <400 66
аддаЕссЕаа | ааВЕЕЕдЕда | сссЕададса | адЕасЕаасЕ | аВдааадЕда | ааЕададааЕ | 60 |
дааддааЕЕа | ЕЕЕааЕЕаад | Ессадсаааа | сссаассааа | ЕсаЕсЕдВаа | ааВаВаЕЕЕд | 120 |
ЕЕЕЕсаасаЕ | ссаддВаЕЕЕ | ЕсЕдЕдВааа | аддВЕдадЕЕ | дВаЕдсЕдас | ЕЕаЕЕдддаа | 180 |
ааабааВЕда | дВЕЕЕссссЕ | ЕсасВЕЕдсс | адЕдададда | ааВсадЕасЕ | дВааВЕдЕЕа | 240 |
ааддЕЕассс | аЕассЕассЕ | сЕасЕассдЕ | сЕадсаЕадд | ЕааадВааЕд | ЕасасЕдЕда | 300 |
адВЕЕссЕдс | ЕЕдасЕдВаа | ЕдЕЕЕЕсадВ | ЕЕсаВсссаЕ | ЕдаЕВсааса | дсЕаВЕВаВЕ | 360 |
садсасЕЕас | ЕасаассаЕд | сЕддааассс | аададЕаааЕ | аддсЕдЕдВЕ | асЕсаасадд | 420 |
асЕдаддЕас | адссдаасЕд | Есаддсаадд | ЕЕдсЕдЕссЕ | ЕЕддасЕЕдс | сЕдсЕЕЕсЕс | 480 |
ЕсЕаЕдЕадд | аадаадаааЕ | ддасаЕассд | ЕссаддаааЕ | адаВаВаВдЕ | ЕасаЕЕЕссЕ | 540 |
ЕаЕЕссаЕаа | ЕЕааВаЕЕаа | ЕаасссЕдда | садааасЕас | саадЕЕЕсЕа | дасссЕЕаВа | 600 |
дЕассассЕЕ | асссЕЕЕсЕд | даЕдааВссЕ | ЕсасаВдЕЕд | аВасаВЕЕЕа | ЕссаааВдаа | 660 |
ааЕЕВЕддЕа | сЕдВаддВаЕ | аасадасааа | дададаасад | аааасЕадад | аВдаадЕЕЕд | 720 |
ддааааддЕс | аадааадЕаа | аВааЕдсЕЕс | Еадаадасас | ааааадаааа | авдааавддв | 780 |
ааВдЕЕддда | аадЕЕЕВааВ | асаВЕЕЕдсс | сЕааддаааа | ааасЕасЕЕд | ВЕдаааЕЕсЕ | 840 |
асЕЕаадасЕ | ддассЕЕЕЕс | ЕсваааааЕЕ | дЕдсЕЕдаВд | ЕдааЕЕааад | саасасаддд | 900 |
аааВЕЕаЕдд | дсЕссЕЕсЕа | адЕЕсВассс | аасЕсассдс | аааасвдЕЕс | сЕадваддЕд | 960 |
ЕддВаЕасЕс | ЕЕЕсадаЕЕс | ЕЕЕдвдВдЕа | ЕдВаВаЕдЕд | ЕдЕдЕдЕдЕд | ЕдЕдВЕЕдВа | 1020 |
ЕдЕдЕасадВ | сЕававасаЕ | аВдЕдВассЕ | асаВдВдВдЕ | аЕаВаВаааЕ | аВаВаЕЕЕас | 1080 |
сЕддаЕдааа | ЕадсаЕаВЕа | ЕадааВаЕЕс | ЕЕЕЕЕЕсЕЕЕ | аааВаЕаВаЕ | дЕдсаВасаВ | 1140 |
авдЕаВаЕдс | асаВаЕаЕас | аВаааЕдЕад | аВаЕадсЕад | дВаддсаЕВс | аВдЕдаааса | 1200 |
аадаадссВа | ЕЕасЕЕЕЕЕа | аЕддВЕдсаВ | даВаВЕссаЕ | саЕаддадЕа | ЕадЕасаасЕ | 1260 |
ЕаЕдВаасас | асаВЕЕддсЕ | ЕдЕЕдВаааа | ЕЕЕЕддВаЕЕ | ааЕааааЕад | сасаВаЕсаЕ | 1320 |
дсааадасас | ссЕЕдсаЕад | дВсЕаВЕсаВ | ЕсЕЕЕдаВЕЕ | ЕЕассЕЕадд | асааааЕЕЕа | 1380 |
ааадЕадааЕ | ЕЕсЕдддЕса | адсадВаЕдс | ЕсаЕЕЕаааа | ЕдЕсаВЕдса | ЕаЕЕЕссааа | 1440 |
ЕЕдЕссЕсса | даааадЕадЕ | аасадЕааса | аВЕдаЕддас | ЕдсдВдЕЕЕЕ | сЕаааасЕЕд | 1500 |
саВЕЕЕЕЕЕс | сЕЕаВЕддЕд | аддЕЕЕддса | ЕЕЕЕссаВаЕ | дЕЕВаВЕсдс | аВЕЕВааВЕЕ | 1560 |
- 85 011747
ЕЕЕЕЕддЕЕс | аЕдЕсЕЕЕЕа | ЕЕсссЕЕссЕ | дсаааЕЕЕдЕ | ддЕдЕдЕсЕс | аасЕЕЕаЕЕЕ | 1620 |
аЕасЕсЕсаЕ | ЕЕЕсаЕааЕЕ | ЕЕсЕааадда | аЕЕЕдасЕЕЕ | аааааааЕаа | дасадссааЕ | 1680 |
дсЕЕЕддЕЕЕ | ааЕЕЕсаЕЕд | сЕдсЕЕЕЕЕд | аадЕдасЕдс | ЕдЕдЕЕЕЕЕа | ЕаЕасЕЕЕЕа | 1740 |
ЕаЕЕЕЕдЕЕд | ЕЕЕЕадсааа | ЕЕсЕЕсЕаЕа | ЕЕаЕааЕЕдЕ | дЕаЕдсЕдда | асааааадЕЕ | 1800 |
аЕаЕЕЕсЕЕа | аЕсЕадаЕаа | ааЕаЕЕЕсаа | даЕдЕЕдЕаа | ЕЕасадЕссс | сЕсЕааааЕс | 1860 |
аЕаЕаааЕад | асдсаЕадсЕ | дЕдЕдаЕЕЕд | ЕааЕЕадЕЕа | ЕдЕссаЕЕда | ЕадаЕсс | 1917 |
<210> 67 <211> 26 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Олигонуклеотид для получения линкера, содержащего МС311 рсСЕСРР11пк <400>67 дЕасддаЕаЕ садаЕсЕНа аЕЕаад26 <210> 68 <211>24 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Олигонуклеотид для получения линкера, содержащего МСЗII р<32ЕСРРИпк <400>68 дЕассЕЕааЕ ЕааадаЕсЕд аЕаЕ24 <210>69 <211>52 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации фрагмента размером 0,37 т.п.н. из рд2ЕСРР <400>69 даЕсадаЕсЕ ддсдсдссаЕ ЕЕаааЕсдЕс ЕсдсдсдЕЕЕ сддЕдаЕдас дд52 <210>70 <211>41 <212> ДНК <213> Искусственная
- 86 011747 <220>
<223> Праймер для амплификации фрагмента размером 0,37 т.п.н. из рс12ЕСГР <400>70 аддсддаЕсс дааЕдЕаЕЕЕ адаааааЕаа асаааЕаддд д41 <210>71 <211>36 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации ОГК гена резистентности к зеоцину <400>71 даЕсддаЕсс ЕЕсдаааЕдд ссаадЕЬдас садЕдс36 <210>72 <211>32 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации ОГК гена резистентности к зеоцину <400>72 аддсдсддсс дсааЕЕсЕса дЕссЕдсЕсс Ес32 <210>73 <211>40 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации ОГК Ц2ЕСГР <400>73 даЕсдааЕЕс ЕсдсдааЕдд Едадсаадса даЕссЕдаад40 <210>74 <211>52 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации ОГК ά2Ε6ΓΡ <400> 74 аддсдааЕЕс ассддЕдЕЕЕ ааасЕЕасас ссасЕсдЕдс аддсЕдссса дд 52
- 87 011747 <210> 75 <211> 41 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации гена 62Е6ГР <400>75 ккддккддкс акдаакддкд адсаадддсд аддадскдкк с41 <210>76 <211>36 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации гена 62ЕСЕР <400>76 аккскскада скасасаккд аксскадсад аадсас36 <210>77 <211>42 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Олигонуклеотид для получения линкера для создания МСЗ в рСЪЗпромотор-СГР <400>77 сдакаксккд дадакскаск адкддсдсдс сккдддскад ск42 <210>78 <211>50 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Олигонуклеотид для получения линкера для создания МСЗ в рбЬЗпромотор-СЕР <400>78 даксадскад сссааддсдс дссаскадка дакскссаад акаксдадск50 <210>79 <211>40 <212> ДНК <213> Искусственная
- 88 011747 <220>
<223> Праймер для амплификации промотора ЕР-1альфа <400>79 даЕсддсдсд ссаШааа! ссдаааадЕд ссасс£дасд40 <210> 80 <211>34 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации промотора ЕР-1альфа <400>80 аддсдддасс сссЕсасдас ассЕдаааЕд даад34 <210> 81 <211>51 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации промотора 3Ϋ40 <400>81
ИддРИдддд сдсдссдсад сассарддсс ЕдаааЕаасс ЕсЕдааадад д51 <210> 82 <211>55 <212> ДНК <213> Искусственная <220>
<223> Праймер для амплификации промотора 5У40 <400> 82
Иддмддда дсдсаадси ЕЫдсаааад сс1аддсс!с саааааадсс ЕссЕс 55
Claims (20)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащая экспрессирующую кассету, включающую гетерологичный промотор, связанный с представляющей интерес нуклеиновой кислотой, причем указанная нуклеиновая кислота предпочтительно кодирует представляющий интерес белок или его фрагмент; и нуклеотидную последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, включающей:a) последовательность 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66;b) фрагменты последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66, которые обладают антирепрессорной активностью;c) последовательности, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; и6) последовательность, которая комплементарна любой из последовательностей а)-с).
- 2. Молекула по п.1, в которой указанная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, расположена слева от промотора в экспрессирующей кассете.
- 3. Молекула по п.2, в которой указанная последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, и промотор разделены менее чем 2 т. п. н.
- 4. Молекула по любому из предшествующих пунктов, в которой указанная нуклеиновая кислота, кодирующая представляющий интерес белок, находится в мультицистронном гене, дополнительно кодирующем селектируемый маркерный ген.
- 5. Молекула по любому из предшествующих пунктов, дополнительно содержащая по меньшей мере- 89 011747 одну другую последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, включающей:a) любую из последовательностей 8ЕЦ ΙΌ Νο: 1-65;b) фрагменты любой из последовательностей 8ЕЦ ΙΌ Νο: 1-65, которые обладают антирепрессорной активностью; иc) последовательности, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; иб) последовательность, которая комплементарна любой из последовательностей а)-с).
- 6. Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, содержащая экспрессирующую кассету, включающую 5' - антирепрессорную последовательность А - промотор - нуклеиновую кислоту, кодирующую представляющий интерес белок или его фрагмент - антирепрессорную последовательность В - 3', где антирепрессорные последовательности А и В могут быть одинаковыми или различными и выбраны из группы, состоящей из:ί) любой из последовательностей 8ЕЦ ΙΌ Νο: 1-65;ίί) фрагментов любой из последовательностей 8ЕЦ ΙΌ Νο: 1-65, которые обладают антирепрессорной активностью;ϊϊΐ) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; и ίν) последовательности, комплементарной любой из последовательностей ί)-ίίί), причем указанная молекула нуклеиновой кислоты дополнительно включает между указанной антирепрессорной последовательностью А и промотором последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из:a) последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66;b) фрагментов последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66, которые обладают антирепрессорной активностью;c) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; иб) последовательности, комплементарной любой из последовательностей а)-с).
- 7. Клетка, включающая молекулу по любому из пп.1-6.
- 8. Клетка по п.7, которая является клеткой млекопитающего.
- 9. Клетка по п.8, которая является клеткой СНО.
- 10. Способ получения представляющего интерес белка, включающий культивирование клетки, содержащей молекулу рекомбинантной нуклеиновой кислоты, кодирующей указанный белок, для экспрессии указанной нуклеиновой кислоты, кодирующей интересующий белок, в указанной клетке, отличающийся тем, что указанная молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из:a) последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66;b) фрагментов последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66, которые обладают антирепрессорной активностью;c) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; иб) последовательности, комплементарной любой из последовательностей а)-с).
- 11. Способ по п.10, дополнительно включающий выделение белка.
- 12. Способ по п.10 или 11, в котором последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, расположена слева от промотора, который контролирует экспрессию представляющего интерес белка.
- 13. Способ по п.12, в котором последовательность, обладающая антирепрессорной активностью, и промотор разделены менее чем 2 т.п.н.
- 14. Способ по любому из пп.10-13, в котором нуклеиновая кислота, кодирующая представляющий интерес белок, находится в мультицистронном гене, дополнительно кодирующем селектируемый маркерный ген.
- 15. Способ по любому из пп.10-14, в котором указанная клетка является клеткой млекопитающего.
- 16. Способ по п.15, в котором указанная клетка является клеткой СНО.
- 17. Применение нуклеотидной последовательности, обладающей антирепрессорной активностью, выбранной из группы, состоящей из:a) последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66;b) фрагментов последовательности 8ЕЦ ΙΌ Νο: 66, которые обладают антирепрессорной активностью;c) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; иб) последовательности, комплементарной любой из последовательностей а)-с), для увеличения экспрессии представляющей интерес нуклеиновой кислоты.- 90 011747
- 18. Способ получения клетки-хозяина, экспрессирующей два представляющих интерес полипептида, включающий:a) введение в клетку-хозяин одной или нескольких молекул нуклеиновой кислоты, содержащих:ί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей первый представляющий интерес полипептид и первый селектируемый маркерный ген; и ίί) промотор, функционально связанный с последовательностью, кодирующей второй представляющий интерес полипептид и второй селектируемый маркерный ген; и ϊϊΐ) по меньшей мере одну последовательность, обладающую антирепрессорной активностью, выбранную из группы, состоящей из: а) последовательности 8Е0 Ш Νο: 66; Ь) фрагментов последовательности 8Е0 Ш Νο: 66, которые обладают антирепрессорной активностью; с) последовательностей, которые по меньшей мере на 70% идентичны последовательности а) или Ь), которые обладают антирепрессорной активностью; и б) последовательности, комплементарной любой из последовательностей а)-с);b) селекцию клетки-хозяина одновременным отбором по экспрессии указанных первого и второго селектируемых маркерных генов.
- 19. Способ экспрессии двух представляющих интерес полипептидов, включающий культивирование клетки-хозяина, полученной способом по п.18, для экспрессии указанных первого и второго полипептидов, и при необходимости выделение указанных полипептидов.
- 20. Способ по п.18 или 19, в котором указанные полипептиды входят в состав мультимерного белка.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US58700704P | 2004-07-08 | 2004-07-08 | |
EP2004051405 | 2004-07-08 | ||
PCT/EP2005/053251 WO2006005718A2 (en) | 2004-07-08 | 2005-07-07 | Novel sequence for improving expression of nucleic acid |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA200700233A1 EA200700233A1 (ru) | 2007-06-29 |
EA011747B1 true EA011747B1 (ru) | 2009-06-30 |
Family
ID=34971366
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
EA200700233A EA011747B1 (ru) | 2004-07-08 | 2005-07-07 | Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, обладающая антирепрессорной активностью, и способы ее применения |
Country Status (20)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7825232B2 (ru) |
JP (1) | JP4805262B2 (ru) |
KR (1) | KR101188013B1 (ru) |
CN (1) | CN1981057B (ru) |
AT (1) | ATE378426T1 (ru) |
AU (1) | AU2005261699B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0512798A (ru) |
CA (1) | CA2573022C (ru) |
DE (1) | DE602005003369T2 (ru) |
DK (1) | DK1763586T3 (ru) |
EA (1) | EA011747B1 (ru) |
ES (1) | ES2296201T3 (ru) |
HK (1) | HK1097004A1 (ru) |
IL (1) | IL180531A (ru) |
MX (1) | MXPA06014553A (ru) |
NO (1) | NO341862B1 (ru) |
NZ (1) | NZ551510A (ru) |
PT (1) | PT1763586E (ru) |
WO (1) | WO2006005718A2 (ru) |
ZA (1) | ZA200610470B (ru) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1572994B1 (en) * | 2002-12-20 | 2007-02-21 | Chromagenics B.V. | Means and methods for producing a protein through chromatin openers that are capable of rendering chromatin more accessible to transcription factors |
EA010863B1 (ru) * | 2004-11-08 | 2008-12-30 | Хромагеникс Б.В. | Отбор клеток-хозяев, экспрессирующих белок на высоких уровнях |
DK1809750T3 (da) | 2004-11-08 | 2012-06-25 | Chromagenics Bv | Selektion af værtsceller, der udtrykker protein ved høje niveauer |
US8999667B2 (en) * | 2004-11-08 | 2015-04-07 | Chromagenics B.V. | Selection of host cells expressing protein at high levels |
US20060195935A1 (en) | 2004-11-08 | 2006-08-31 | Chromagenics B.V. | Selection of host cells expressing protein at high levels |
US20100136616A1 (en) * | 2004-11-08 | 2010-06-03 | Chromagenics B.V. | Selection of Host Cells Expressing Protein at High Levels |
US8039230B2 (en) | 2004-11-08 | 2011-10-18 | Chromagenics B.V. | Selection of host cells expressing protein at high levels |
EP2443239B1 (en) * | 2009-06-15 | 2015-11-25 | Cellagenics B.V. | Novel stringent selectable markers |
EP2582816B1 (en) | 2010-06-15 | 2017-12-20 | Cellagenics B.V. | Novel intergenic elements for enhancing gene expression |
US9650630B2 (en) | 2010-09-01 | 2017-05-16 | Cellagenics B.V. | Nucleic acid fragments from a ribosomal protein promoter for enhancing gene expression |
CN110484563B (zh) * | 2019-07-25 | 2023-04-07 | 新乡医学院 | 哺乳动物细胞组合表达载体、表达系统、制备方法和应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003004704A2 (en) * | 2001-07-04 | 2003-01-16 | Chromagenics B.V. | Method of selecting dna sequence with transcription modulating activity using a vector comprising an element with a gene transcription repressing activity |
WO2003106684A2 (en) * | 2002-06-14 | 2003-12-24 | Chromagenics B.V. | A method for simultaneous production of multiple proteins; vectors and cells for use therein |
WO2004056986A2 (en) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Chromagenics B.V. | Means and methods for producing a protein through chromatin openers that are capable of rendering chromatin more accessible to transcription factors |
-
2005
- 2005-07-07 JP JP2007519805A patent/JP4805262B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2005-07-07 ES ES05756870T patent/ES2296201T3/es active Active
- 2005-07-07 WO PCT/EP2005/053251 patent/WO2006005718A2/en active IP Right Grant
- 2005-07-07 EA EA200700233A patent/EA011747B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2005-07-07 AT AT05756870T patent/ATE378426T1/de active
- 2005-07-07 PT PT05756870T patent/PT1763586E/pt unknown
- 2005-07-07 MX MXPA06014553A patent/MXPA06014553A/es active IP Right Grant
- 2005-07-07 KR KR1020067027165A patent/KR101188013B1/ko active IP Right Grant
- 2005-07-07 AU AU2005261699A patent/AU2005261699B2/en not_active Ceased
- 2005-07-07 US US11/632,012 patent/US7825232B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-07-07 CA CA2573022A patent/CA2573022C/en not_active Expired - Fee Related
- 2005-07-07 CN CN2005800229700A patent/CN1981057B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2005-07-07 NZ NZ551510A patent/NZ551510A/en not_active IP Right Cessation
- 2005-07-07 DK DK05756870T patent/DK1763586T3/da active
- 2005-07-07 DE DE602005003369T patent/DE602005003369T2/de active Active
- 2005-07-07 BR BRPI0512798-0A patent/BRPI0512798A/pt not_active Application Discontinuation
-
2006
- 2006-12-13 ZA ZA200610470A patent/ZA200610470B/xx unknown
-
2007
- 2007-01-03 IL IL180531A patent/IL180531A/en active IP Right Grant
- 2007-02-08 NO NO20070757A patent/NO341862B1/no not_active IP Right Cessation
- 2007-04-30 HK HK07104598A patent/HK1097004A1/xx not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003004704A2 (en) * | 2001-07-04 | 2003-01-16 | Chromagenics B.V. | Method of selecting dna sequence with transcription modulating activity using a vector comprising an element with a gene transcription repressing activity |
WO2003106684A2 (en) * | 2002-06-14 | 2003-12-24 | Chromagenics B.V. | A method for simultaneous production of multiple proteins; vectors and cells for use therein |
WO2004056986A2 (en) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Chromagenics B.V. | Means and methods for producing a protein through chromatin openers that are capable of rendering chromatin more accessible to transcription factors |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP2008505626A (ja) | 2008-02-28 |
CN1981057A (zh) | 2007-06-13 |
DE602005003369T2 (de) | 2009-03-05 |
KR20070042122A (ko) | 2007-04-20 |
IL180531A0 (en) | 2007-06-03 |
CA2573022C (en) | 2012-03-06 |
US7825232B2 (en) | 2010-11-02 |
DE602005003369D1 (de) | 2007-12-27 |
NZ551510A (en) | 2009-10-30 |
IL180531A (en) | 2011-04-28 |
ZA200610470B (en) | 2008-09-25 |
DK1763586T3 (da) | 2008-03-17 |
JP4805262B2 (ja) | 2011-11-02 |
AU2005261699B2 (en) | 2009-07-23 |
NO20070757L (no) | 2007-02-08 |
MXPA06014553A (es) | 2007-03-12 |
WO2006005718A3 (en) | 2006-08-17 |
PT1763586E (pt) | 2008-02-25 |
BRPI0512798A (pt) | 2008-04-08 |
CN1981057B (zh) | 2012-07-04 |
WO2006005718A2 (en) | 2006-01-19 |
AU2005261699A1 (en) | 2006-01-19 |
EA200700233A1 (ru) | 2007-06-29 |
HK1097004A1 (en) | 2007-06-15 |
ES2296201T3 (es) | 2008-04-16 |
ATE378426T1 (de) | 2007-11-15 |
NO341862B1 (no) | 2018-02-12 |
CA2573022A1 (en) | 2006-01-19 |
US20070212755A1 (en) | 2007-09-13 |
KR101188013B1 (ko) | 2012-10-08 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EA011747B1 (ru) | Молекула рекомбинантной нуклеиновой кислоты, обладающая антирепрессорной активностью, и способы ее применения | |
Romanova et al. | Engineered and natural promoters and chromatin‐modifying elements for recombinant protein expression in CHO cells | |
Weber et al. | Streptomyces‐derived quorum‐sensing systems engineered for adjustable transgene expression in mammalian cells and mice | |
Kovtun et al. | Leishmania cell-free protein expression system | |
AU660405B2 (en) | Method of transcriptionally modulating gene expression and of discovering chemicals capable of functioning as gene expression modulators | |
EA010863B1 (ru) | Отбор клеток-хозяев, экспрессирующих белок на высоких уровнях | |
Becerra et al. | Exploring the effect of mild hypothermia on CHO cell productivity | |
EA016880B1 (ru) | Элементы нуклеиновых кислот, обладающие регуляторной функцией | |
US10563223B2 (en) | Intergenic elements for enhancing gene expression | |
EA014332B1 (ru) | Селекция клеток-хозяев, экспрессирующих белок на высоких уровнях | |
US20110061117A1 (en) | Matrix attachment regions (mars) for increasing transcription and uses thereof | |
JP2005528925A (ja) | 多重遺伝子プラスミドおよび組み換えポリペプチドの発現増加法 | |
WO2010147464A1 (en) | Use of a cysteine synthesizing enzyme as selectable marker | |
CN103201382A (zh) | 新表达载体 | |
KR20160087903A (ko) | Cho 세포를 위한 합성 프로모터 및 전사 인자 결합 부위 모듈을 이용한 합성 프로모터의 제조 방법 | |
US7968700B2 (en) | Expression augmenting DNA fragments, use thereof, and methods for finding thereof | |
Weber et al. | Conditional human VEGF‐mediated vascularization in chicken embryos using a novel temperature‐inducible gene regulation (TIGR) system | |
WO2005059149A2 (en) | Improved protein production | |
Gupta et al. | Vector-related stratagems for enhanced monoclonal antibody production in mammalian cells | |
Maksimenko et al. | Regulatory elements in vectors for efficient generation of cell lines producing target proteins | |
ES2564227T3 (es) | Elemento de ADN que tiene actividad de aumento de expresión de un gen exógeno | |
WO2018066492A1 (ja) | Hspa5遺伝子のプロモーター | |
Naderi et al. | The augmenting effects of the tDNA insulator on stable expression of monoclonal antibody in Chinese hamster ovary cells | |
Wang et al. | Improving transcriptional activity of human cytomegalovirus major immediate-early promoter by mutating NF-κB binding sites | |
Buscà et al. | N-terminal alanine-rich (NTAR) sequences drive precise start codon selection resulting in elevated translation of multiple proteins including ERK1/2 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ KZ KG MD TJ TM |