EA003100B1 - Лечебный препарат вирулицидного действия - Google Patents

Лечебный препарат вирулицидного действия Download PDF

Info

Publication number
EA003100B1
EA003100B1 EA200100076A EA200100076A EA003100B1 EA 003100 B1 EA003100 B1 EA 003100B1 EA 200100076 A EA200100076 A EA 200100076A EA 200100076 A EA200100076 A EA 200100076A EA 003100 B1 EA003100 B1 EA 003100B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
drug
iodine
water
virus
mono
Prior art date
Application number
EA200100076A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200100076A1 (ru
Inventor
Александр Иванович ИЛЬИН
Альберт Артушович Саркесян
Анатолий Васильевич Вербкин
Евгений Алексеевич Божков
Нораин Гарибальдевич Аракелян
Павел Георгиевич Борисов
Петр Франц
Original Assignee
Александр Иванович ИЛЬИН
Альберт Артушович Саркесян
Павел Георгиевич Борисов
Евгений Алексеевич Божков
Нораин Гарибальдевич Аракелян
Анатолий Васильевич Вербкин
Петр Франц
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Александр Иванович ИЛЬИН, Альберт Артушович Саркесян, Павел Георгиевич Борисов, Евгений Алексеевич Божков, Нораин Гарибальдевич Аракелян, Анатолий Васильевич Вербкин, Петр Франц filed Critical Александр Иванович ИЛЬИН
Publication of EA200100076A1 publication Critical patent/EA200100076A1/ru
Publication of EA003100B1 publication Critical patent/EA003100B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/18—Iodine; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарственным препаратам, обладающим широким спектром вирулицидного действия, в частности ингибирующим и/или вирулицидным действием на ДНК- и РНК-содержащие вирусы, и может быть использовано для борьбы с заболеваниями вирусной природы млекопитающих, включая человека. Предлагаемый лекарственный препарат содержит в качестве активного вещества йод, иодид калия или натрия, хлорид лития, синтетический водорастворимый гелеобразующий полимер, а также природные полимеры, моно- и олигосахариды. Лекарственный препарат вирулицидного действия обладает также иммуномодулирующим и иммуностимулирующим действием.

Description

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарственным препаратам, обладающим широким спектром вирулицидного действия, оказывающим влияние на ДНК- и РНК-содержащие вирусы у млекопитающих, включая человека. Может быть использован для борьбы с инфекционными заболеваниями вирусной природы.
За последние три десятилетия было предложено множество препаратов для лечения вирусных болезней. Однако в прошлом из-за отсутствия правильной оценки естественного развития большинства вирусных инфекций, незнания механизма поражения вирусом живых клеток организма терапевтические испытания препаратов вели к ошибочным заключениям. В последнее время в результате более детального изучения и разработки методов специфической вирусной диагностики, расширения биохимических знаний о процессах репликации вирусов, а также лучшего понимания поведения вирусов в специфических популяциях клеток хозяев наметилась тенденция в разработке более действенных препаратов, используемых для поражения вирусных инфекций. Выдающимся событием явилось открытие эндогенного интерферона и установление его противовирусной активности. В настоящее время установлено, что действие ряда иммуностимулирующих и противовирусных средств связано с их интерфероногенной активностью, то есть способностью стимулировать образование эндогенного интерферона (Машковский М.Д. Лекарственные средства: Пособие для врачей. - Т. 2. - Харьков: «Торсинг», 1998. - С. 349).
Природный (лейкоцитарный человеческий) интерферон продолжают применять для профилактики и лечения гриппа и других вирусных инфекций. Из последних наиболее эффективных антивирусных синтетических препаратов следует выделить ремантадин, используемый для лечения заболеваний, вызванных вирусом гриппа, аденовирусами, пикорнавирусами и др. (Кукайн Р.А. и др. Антивирусная активность и механизм действия различных химических соединений. - Рига: «Знание», 1979).
Опасным свойством вирусов является их способность к мутации. Такие эпидемии вирусных заболеваний, как «испанка», «гонконгский грипп» и, наконец, СПИД, относящийся к ретровирусам, являются вирусами животных, тем не менее ими заболевает и человек.
Известная липосомная фармацевтическая композиция, содержащая липид и полиен, например нистатин и амфотерицин В, используется для лечения СПИДа.
Однако липосомные композиции избирательно токсичны для инфицированных ВИЧ-1 клеток (№0 92/118415, кл. А 61К 9/127, 31/71, 1992г.). Для лечения СПИДа применяют также рапамицин или его аналог, вызывающий задержку развития или замедление распростране ния ВИЧ-инфекций у млекопитающих (№0 94/05300, кл. А61К31/71, 1994г.).
Известен также фармацевтический препарат, содержащий в качестве активного компонента бенаномицин А или В для ингибирования заражения вирусом СПИДа (ЕР 0356330А, кл. 4А61К31/71, опубл. 15.09.1990г.). Недостатками вышеуказанных средств, используемых для борьбы или/и ингибирования СПИДа является то, что они вызывают ряд побочных реакций организма. Одним из наиболее применяемых препаратов для замедления развития инфекции СПИДа является 3'-азидо-2',3'-дидезоксотимидин (его называют также азидотимидин или зидовудин). Данный препарат обладает позитивным действием при патогенной ретровирусной инфекции, но говорить о полном поражении вируса СПИДа с помощью данного препарата, к сожалению, не приходится (В мире науки: Илл. журнал. - М.: Мир, 1988, № 12, с. 80-81). Наиболее близким по технической сущности и достигаемому результату является лечебный препарат, обладающий бактерицидным и вирулицидным действием, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, природные полимеры, например полисахариды, и моно- и олигосахариды, при следующем соотношении компонентов, г/л:
Йод6-10
Иодид калия или натрия9-15
Синтетический водорастворимый полимер2-4
Природный полимер (полисахариды) и моно- и олигосахариды8-120
Вода Остальное (ΟΖ 5435, А 61К 33/18, А 61К 31/715).
Недостатком данного препарата является его относительно высокая токсичность. Воздействовать на вирусы, уже проникшие в клетки, сложно, так как сама клетка надежно защищает их от любого воздействия. Именно в клетке ведет разрушительную работу приспособленный вирус. Проблема состоит в том, чтобы на молекулярном уровне подавить специфические процессы биологического синтеза вирусных частиц, не затронув, по возможности, жизнедеятельности незараженных вирусом клеток.
Таким образом, задача состоит в поиске препарата, способного поражать вирус как вне, так и внутри зараженной клетки, не убивая при этом саму клетку организма.
Кроме того, данный препарат должен обладать широким спектром действия при малой его токсичности. Поставленная задача была решена с помощью препарата, разработанного авторами настоящего изобретения.
Предложен лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК- и РНКсодержащие вирусы млекопитающих, включая человека, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый поли3 мер, природные полимеры, например полисахариды, и моно- и олигосахариды и воду, отличающийся тем, что он дополнительно содержит хлорид лития, при следующем содержании компонентов, г/л:
Йод 0,8-25
Иодид калия или натрия 1,2-3 8
Хлорид лития 0,1-20
Синтетический водорастворимый полимер 0-6
Природные полимеры (полисахариды) и моно- и олигосахариды 8-400
Вода Остальное
Интервалы концентраций компонентов выбраны не случайно. Все признаки, входящие в состав предлагаемого препарата вирулицидного действия, являются необходимыми и достаточными для достижения поставленной цели. Ни один из них не может быть исключен или заменен на другой, в противном случае технический результат не будет достигнут. Подбор как качественных, так и количественных ингредиентов, входящих в состав предлагаемого лечебного препарата, был основан на многочисленных экспериментальных данных. Качественный состав ингредиентов, с точки зрения известности их в литературе, очевиден, однако, авторы заявляемого изобретения пришли к заключению, что в совокупности с другими компонентами каждый из входящих в состав препарата компонентов проявляет не совсем очевидные свойства. В силу того, что химически и биологически активным компонентом является йод, то при его концентрации ниже 0,8 г/л происходит гидролиз йода по реакции
12 + Н2О-эШ + НО1
ΗΙ + Ο то есть лечебный препарат не подлежит хранению.
При концентрации йода выше 25 г/л за счет структурообразования комплексных ассоциатов йода с компонентами лекарственного препарата образуются желеобразные системы, неудобные для медицинского применения. Кроме того, протекают во времени реакции галогенирования моно-, олиго- и полисахаридов и при этом повышается токсичность препарата. Интервалы концентраций остальных компонентов служат для обеспечения протекания реакций комплексообразования, ассоциации и агрегации при приготовлении препарата для обеспечения его вирулицидных свойств.
Синтетические водорастворимые полимеры (например, поливиниловый спирт, поли-Νвинилпирролидон) выполняют при введении в кровь функцию плазмозаменителей, сорбентов (токсинов, например) или пролонгаторов.
В нашем случае синтетический водорастворимый полимер выполняет гелеобразующую функцию.
Следует также отметить, что одним из важных моментов в подборе компонентов, входящих в состав препарата, является то, что роль матрицы выполняют комплексные соединения йода с низко- и высокомолекулярными лигандами, которые образуют, в свою очередь, ассоциаты. Водный раствор их имеет некоторые свойства геля.
Известно, что углеводы, к которым относятся моно- и полисахариды, наряду с белками и липидами входят в состав биологических мембран, разделяющих пространство между клетками или внутри клетки.
Обнаруженные в мембранах белки обычно являются ферментами (Со1етап В. ВюсЫш. Вюрйуз. Лс1а. - 1973. - 300. - 1). Мембраны, в свою очередь, обеспечивают необходимые пространственные взаимодействия между ферментами, в результате чего продукт реакции, катализируемой одним ферментом, становится субстратом расположенного по соседству другого фермента.
На внутриклеточном уровне большую роль в регулировании процессов метаболизма играют гормоны. Связывание гормонов с их рецепторами сходно с взаимодействием фермента и его субстрата.
Образование комплексов ферментсубстрат и гормон-рецептор предполагает «узнавание» молекулами друг друга. На более высоком уровне организации такой способностью обладают клетки. Так, лейкоциты в токе крови узнают и разрушают чужеродные клетки, например бактериальные, но не нападают на собственные клетки крови. Узнавание проявляется и в контактном ингибировании: некоторые клетки высших организмов в питательной среде продолжают делиться до тех пор, пока не придут в контакт с другими клетками. Раковые клетки в тех же условиях продолжают делиться.
Процессы клеточного узнавания зависят от подвижности компонентов мембраны (Вге1зсйег М.8., ВайГ М.С. - №1иге. - 1975. - 258. - 43).
Углеводы, к которым принадлежат моно-, олиго- и полисахариды, выбранные авторами настоящего изобретения в качестве природных полимеров, являются чрезвычайно важным классом природных соединений. В биологии и медицине значение углеводов заключается в доминирующей роли, которая отводится им в живых организмах, и в сложности их функций. Углеводы участвуют в большинстве биохимических процессов в виде высокомолекулярных частиц, хотя во многих биологических жидкостях содержатся моно- и олигосахариды (СотргепзВе Огдашс Сйеш1з1гу/Ебйеб Ъу Е. Наз1аш. V. 5. Вю1ощса1 Сошроипбз. Регдашоп Ргезз, 19).
Моно-, олиго- и полисахариды, входящие в состав препарата, не являются чужеродными для организма млекопитающих, включая человека, и играют важную роль в процессе клеточного узнавания.
Йод, входящий в состав препарата, как в молекулярном виде, так и в виде солей (иодида калия или иодида натрия) в препарате находится в нескольких активных формах за счет реакций комплексообразования
П К1< >КП< >К П(1)
1\Ь< >1. \!+ >|1. 1]++(х-1)13 -(2)
I ,·Ι: < >|1. 1з]-(3) где Ь - лиганд (моно-, олиго-, полисахарид и синтетический водорастворимый полимер).
Ассоциация комплексных соединений, образующихся по реакциям (1), приводит к гелеобразованию в препарате. Гелеобразующая функция синтетического водорастворимого полимера очень важна.
В настоящее время всеобщее признание получила жидкомозаичная модель биологических мембран, предполагающая, что мембрана в физиологических условиях является текучей, а не статичной (81пдег 8.1. Αηη. Νο\ν Уогк Асаб. 8с1. - 1972. - 195. -16).
Бислои, образующие структуру мембраны и состоящие из фосфолипидов, а также глико- и сульфолипидов, при характеристической температуре претерпевают хорошо выраженный фазовый переход из относительно жесткого гелеобразного состояния в текучее жидкокристаллическое состояние. Вследствие этого компоненты мембраны способны диффундировать в плоскость мембраны. Коэффициент диффузии для белка с молекулярной массой 1 ·1010, включенного в мембрану, составляет 3·1010 см2/с (Еб1б1ап М. Αηη. Кеу. Вюрйуз. Вюепд. - 1974. -
3. - 179). Латеральная диффузия в биологических мембранах является в высокой степени регулируемым процессом. Поперечное перемещение компонентов мембран между внутренней и внешней половинами бислоя происходит во времени, однако наличие других компонентов биологических мембран может резко увеличить эту скорость (до ΐ1/2 5 мин) (Магзй Ώ. Еззауз Вюсйеш. - 1975. - 11. - 139).
Йод, его различные формы, находящиеся в составе препарата, способен взаимодействовать практически со всеми классами веществ, входящих в состав организма млекопитающего, включая человека, равно как и в состав мембраны и самой клетки: белками, углеводами, липидами, аминокислотами, глико- и фосфолипидами, гормонами, ферментами, витаминами и т.д. При этом протекают реакции комплексообразования и галогенирования, однако, последовательность биохимических процессов в живом организме приводит к тому, что после взаимодействия одной из активных форм йода образуется новая активная форма йода, входящая в состав других комплексов, например йодфермент, йод-гормон, йод-биологическая мембрана, йод-белок и т.д.
Каждый вновь образующийся комплекс является биологически активным и «своим» для живого организма млекопитающих, включая человека.
За счет механизма узнавания и специфического химического взаимодействия йод, входящий в состав лечебного препарата, а также комплексы йода, образующиеся в организме, галогенируют (иодируют) ДНК- и РНК-содержащие вирусы, находящиеся как внутри, так и вне клетки.
Галогенирование протекает, в первую очередь, посредством замещения атома водорода в пептидной связи молекулы вируса
ОН0 1
II III I
-С-Ν- + 12 — -С-Ν- + ΗΙ(4) и замещении 8Н-группы в цепи молекулы вируса
К-8Н +12 + Н2О -> К-1 + Η2δ + ΗΟΙ(5)
ΗΙ + Ο
В результате галогенирования образуются новые вещества, не обладающие свойствами исходного вируса. На этом основано специфическое вирулицидное действие лечебного препарата.
Последовательностью протекающих биохимических реакций при введении препарата в организм млекопитающего, включая человека, объясняется иммуномодулирующее, иммуностимулирующее действие лечебного препарата.
Хлорид лития, введенный в состав препарата, выполняет необычную для галогенидов щелочных металлов роль. Он улучшает проводимость в клеточных мембранах, способствует улучшению латеральной диффузии в бислое клеточных мембран за счет малого размера катиона лития и его более прочной координации по донорным атомам моно-, олиго- и полисахаридов.
Предлагаемый лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК-и РНКсодержащие вирусы, - это водный раствор темно-синего цвета молекулярных и ионных комплексов йода с ассоциатами синтетических водорастворимых гелеобразующих полимеров и природных моно-, олиго- и полисахаридов. Температура плавления лечебного препарата равна 1,51°С, плотность 1,048 г/см3, массовая доля сухих веществ не менее 25%. Лечебный препарат вирулицидного действия имеет значение рН 6-7. Все его компоненты растворены в изотоническом растворе хлорида натрия.
Лечебный препарат вирулицидного действия мало токсичен. ЛД100 равна 75 г/кг живой массы (для белых мышей) при пероральном введении.
Лечебный препарат вирулицидного действия обладает широким спектром действия. Он эффективен при инфекциях, вызываемых вирусами полиомиелита, ящура, энцефаломиокардита, гриппа, кори (РНК-содержащие вирусы);
вызываемых вирусами герпеса, оспы овец, эктимы и др. (ДНК-содержащие вирусы).
Препарат не токсичен в отношении клеточных культур в разведениях водой в соотношениях от 1:20 до 1:100.
Антивирусное действие препарата проявляется на всех уровнях при одновременном, предварительном и последующем его введении по отношению к вирусам.
Препарат является эффективным средством для химиотерапии вирусных инфекций.
Препарат обладает способностью стимулировать антителообразование в культурах лимфоцитов.
Лечебный препарат вирулицидного действия применяют для млекопитающих, включая человека, внутривенно, внутримышечно, внутрибрюшинно и подкожно. Возможно также применение пероральное и др.
Способ получения заявляемого лечебного препарата основан на реакциях комплексообразования йода с полифункциональными низко- и высокомолекулярными лигандами.
Сама методика получения антивирусного лечебного препарата заключается в следующем. В 100 мл воды растворяют 9 г иодида калия, добавляют 6 г йода кристаллического и раствор перемешивают до полного растворения йода. Отдельно растворяют в 100 мл воды 2 г поливинилового спирта. Отдельно растворяют в 200 мл воды 30 г смеси моно-, олиго- и полисахаридов. Полученные растворы смешивают в следующей последовательности: к раствору поливинилового спирта добавляют раствор смеси моно-, олиго- и полисахаридов, а после этого - раствор йода и иодида калия. Затем добавляют дистиллированной воды до 1 л, предварительно добавив 9 г хлорида натрия и 2 г хлорида лития.
По вышеописанной методике в той же последовательности операций готовят растворы лечебного препарата с учетом концентраций компонентов, заявленных в формуле изобретения.
Антивирусная активность заявляемого препарата изучалась в отношении вируса гриппа А, штамма А/А1сЫ 2/68 (Η3Ν2) - представителя ортомиксовирусов, вируса простого герпеса человека второго серотипа (семейство герпесвирусов), вируса энцефаломиокардита (семейство пикорнавирусов), вакцинного аттенуированного полиовируса III типа, штамма Сэбин, в производственных условиях на ящуре овец.
Токсичность лечебного препарата вирулицидного действия изучалась на клеточной культуре, у мышей и на куриных эмбрионах и также по отношению к лимфоцитам.
Для усиления и накопления вирусов, для изучения антивирусной активности использованы перевиваемая линия аденокарциномы гортани человека Нер-2 и первичная культура фибропластов КЭ - ФЭК. Клетки культивировали в среде Игла с глютамином и бычьей сывороткой (Нер-2) и в среде 199 с сывороткой (ФЭК).
Влияние предлагаемого авторами препарата на индукцию гуморального и клеточного иммунного ответа лимфоцитов человека в культуре изучали по методике, описанной в журнале Нейрохимия. - 1998. - Т. 15, вып. 1. - С. 45-50.
При исследовании антивирусной активности использовали стандартные методы:
титрование вируса на клеточных культурах по цитопатическому эффекту;
определение титров по методам Кербера;
титрование вирусов на мышах по методу Рида и Менча;
титрование вирусов на куриных эмбрионах;
в реакции гемаглютации.
Лечебный препарат вирулицидного действия использовался в виде водных растворов в разведениях от 1:5 до 1:100, приготовляемых ех 1етроге.
Официнальные антивирусные препараты ремантадин и ацикловир - использовались в качестве положительных контролей на мышах и куриных эмбрионах.
Статистическую обработку результатов физико-химических экспериментов и биологических испытаний проводили по методикам, описанным в ГФ XI СССР, с. 199-251.
Расчет дозы заявляемого препарата при испытаниях на мышах, куриных эмбрионах, овцах и человеке проводили по формуле
Л _ 1 п-й-к-1000 ,
Νη к' где η - количество инфекционных единиц, отнесенных к 1 см3 крови млекопитающих;
η - число молекул фармацевтического средства, необходимого для поражения одной инфекционной единицы;
к - доля воды в организме млекопитающего (для человека 0,585);
Να - число Авогадро;
к' - доля воды в крови млекопитающего (у человека равная 0,72);
М - молекулярная масса действующего начала фармацевтического средства;
Р - масса тела млекопитающего, кг.
После подстановки в уравнение численных значений получаем:
Ώ=0,187·10-4·Μ·Ρ, г.
Для подтверждения заявленных в формуле соотношений компонентов приведены используемые при проведении испытаний составы, г/л:
I. Иод кристаллический0,8
Калия (натрия) иодид1,2
Лития хлорид0,1
Природные моно-, олигои полисахариды100
Вода Остальное
II. Йод кристаллический8
Калия (натрия) иодид12
Лития хлорид2
Водорастворимый синтетический полимер3
Природные моно-, олигои полисахариды100
Вода Остальное
Ш. Йод кристаллический25
Калия (натрия) иодид38
Лития хлорид20
Водорастворимый синтетический полимер6
Природные моно-, олигои полисахариды400
Вода Остальное
В качестве природных полисахаридов используются все природные полисахариды, включая антибиотики, относящиеся к этому классу веществ, и их производные, образующие с йодом водорастворимые комплексные соединения в заявленных интервалах концентраций йода и других компонентов. В качестве синтетических водорастворимых полимеров, обладающих гелеобразующими свойствами, используются полимеры, разрешенные к применению Международной Фармакопеей и Фармакопеей СССР XI изд., образующие водорастворимые комплексы с йодом в заявленных интервалах концентраций йода и других компонентов.
Профилактическое и терапевтическое действие заявляемого лечебного препарата изучалось на белых мышах массой 12-14 г, у которых после титрования вирусом и определения ЛД50 экспериментальная гриппозная инфекция воспроизводилась путем интраназального введения вирусной суспензии, содержащей 100 ЛД50 в объеме 0,05 мл. Титр вируса гриппа для мышей, определенный по методам Рида и Менча, составлял 102,5/0,05 мл.
В табл. 1-3 представлены данные профилактического действия заявляемого препарата в различных разведениях при внутрибрюшинном введении за 2 ч до заражения вирусом гриппа.
В качестве положительного контроля мышам вводили один из наиболее эффективных химиопрепаратов против вируса гриппа типа А ремантадин.
Как следует из данных табл. 1-3, заявляемый препарат в разведениях 1:10 и 1:20 статистически достоверно защищает животных от гриппозной инфекции при введении за 2 ч до заражения.
Низкая исходная концентрация йода в препарате по примеру 1 (табл. 2), естественно, не дает возможности получить положительного эффекта при дальнейшем разведении препарата.
В табл. 4 представлены данные по изучению терапевтического действия препарата на гриппозную инфекцию у мышей. Дозы препарата, оказавшего антивирусный эффект при профилактическом введении, вводились мышам внутрибрюшинно спустя 2 ч после инфицирования вирусом гриппа.
Анализ данных табл. 4 свидетельствует о достоверном снижении летальности при введении исходного препарата и препарата в разведении 1:10.
В табл. 5 представлены данные по изучению способности заявляемого препарата в разведениях 1:20 и 1:40 нейтрализовать 100 ТЦД50 вируса энцефаломиокардита при введении за 1 ч до и после заражения им. О способности препарата нейтрализовать действие вируса судили по степени цитопатического эффекта в опытных и контрольных пробирках с монослоем клеток Нер-2, культуральная жидкость из которых была оттитрована.
Как следует из данных табл. 5, даже при применении препарата в разведении 1:40, вводимого после заражения вирусом в дозе 100 ТЦД50, разница между опытом и контролем составляла 3,5-4,0 1од, что свидетельствует о значительном подавлении вируса.
Антивирусное действие заявляемого препарата на репродукцию вируса простого герпеса (ВПГ) изучалось на развивающихся куриных эмбрионах, на хорионаллантоисной оболочке которых репродукция ВПГ проявляется в виде бляшек пролиферации.
Результаты опытов, представленные в табл. 6, указывают на ингибицию репродукции вируса под воздействием препарата в разведении 1:10. Разница между титрами вируса в опыте и контроле превышает 2 1од, что свидетельствует о подавлении титров вирусов в опытах 1 и 2 на 60 и 65% соответственно.
Данные о влиянии заявляемого препарата на индукцию гуморального иммунного ответа тонзиллярных лимфоцитов человека на ΙοΓκίηία ейегоеоййеа и §1арйу1ососси8 аитеиз представлены в табл. 7.
Как следует из данных табл. 7, заявляемый препарат обладает способностью стимулировать антителообразование в культуре лимфоцитов в концентрациях от 1:10 до 1:100 к 1ег81ша еШегосоййса и §1арйу1ососси8 аигеик.
Заявляемый препарат стимулирует также бактерицидную активность лимфоцитов человека к 1ег81п1а еШегоеоййеа и §1арйу1ососси8 аигеик.
Изучено действие заявляемого лечебного препарата при ящуре овец в производственных условиях. Полученные данные представлены в табл. 8, 9.
Данные табл. 8, 9 подтверждают вышепредставленные о профилактическом действии препарата, поскольку после двух инъекций препарата больше не выявлялись заболевшие животные с клиникой ящура.
Данные табл. 8, 9 свидетельствуют также о надежном терапевтическом действии лечебного препарата вирулицидного действия, так как после двух инъекций препарата падеж животных прекратился, а оставшиеся больные животные выздоровели за 7-10 дней. Общий падеж животных в опытной группе составил 1,83%, в то вре11 мя как в контрольной группе, несмотря на карантинные мероприятия, составил 14%.
В табл. 10 представлены данные по терапевтическому действию заявляемого препарата при заболеваниях человека, вызванных как ДНК-, так и РНК-содержащими вирусами. Препарат применяли на добровольцах.
Как следует из данных табл. 10, препарат эффективен во всех случаях, особенно при быстропротекающих инфекциях (грипп, диарея, ОРЗ, ящур). Ни в одном случае не было отмечено каких-либо осложнений.
Представленные выше примеры являются лишь иллюстрацией сущности изобретения, без ограничения ими.
Таким образом, полученные в опытах ίη νίίτο и ίη νίνο данные об антивирусном действии заявляемого препарата, отсутствие токсичности, способность поражать вирус вне клетки и внутри нее, наличие как профилактического, так и терапевтического эффекта, широкий спектр действия позволяют отнести препарат к эффективным средствам для химиотерапии вирусных инфекций.
Таблица 1
Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 1
Условия опыта Доза препарата, мг/кг Число молекул йода в 1 л Соотношение 1 ИЕ ВГ к числу молекул йода Количество мышей Абсолютное число павших % леталь- ности
П\1/10)+ВГ2 12,32 5-1019 1:5-1010 100 12/100 12
П(1/20)+ВГ 6,16 2,5-1019 1:2,5-1010 100 28/100 28
П(1/40)+ВГ 3,08 1,25-1019 1:1,25-1010 100 50/100 50
Ремантадин+ВГ 1,66 7,9-1018 1:7,9-109 100 16/100 16
ВГ 100 70/100 70
Примечания:
1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия);
2. ВГ - вирус гриппа;
3. В пересчете на йод;
4. ИЕ - инфекционная единица.
Таблица 2
Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 1
Условия опыта Доза препарата, мг/кг Число молекул йода в 1 л Соотношение 1 ИЕ ВГ к числу молекул йода Количество мышей Абсолютное число павших % леталь- ности
П1+ВГ2 3,69 1,50-1019 1:1,50-1010 100 38/100 38
П(1/10)+ВГ 0,369 1,50-1018 1:1,50-109 100 60/100 60
Ремантадин 1,66 7,90-1018 1:7,90-109 100 16/100 16
ВГ 100 70/100 70
Примечания:
1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия);
2. ВГ - вирус гриппа;
3. В пересчете на йод;
4. ИЕ - инфекционная единица.
Таблица 3
Влияние профилактического введения лечебного препарата вирулицидного действия на исход экспериментальной гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 3
Условия опыта Доза препарата, мг/кг Число молекул йода в 1 л Соотношение 1 ИЕ ВГ к числу молекул йода Количество мышей Абсолютное число павших % леталь- ности
П1(1/31)+ВГ2 12,32 5-1019 1:5-1010 100 11/100 11
П(1/62)+ВГ 6,16 2,5-1019 1:2,5-1010 100 27/100 27
П(1/124)+ВГ 3,08 1,25-1019 1:1,25-1010 100 51/100 51
Ремантадин+ВГ 1,66 7,9-1018 1:7,9-109 100 16/100 16
ВГ 100 70/100 70
Примечания:
1. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия);
2. ВГ - вирус гриппа;
3. В пересчете на иод;
4. ИЕ - инфекционная единица.
Таблица 4
Терапевтический эффект лечебного препарата вирулицидного действия в отношении гриппозной инфекции у мышей Состав препарата по примеру 2
Условия опыта Доза препарата, мг/кг Число молекул йода в 1 л Соотношение 1 ИЕ ВГ к числу молекул йода Количество мышей Абсолютное число павших % леталь- ности
ВГ1+П2 123,2 5-1020 1:5-1011 100 3/100 3
ВГ+П(1/10) 12,32 5-1019 1:5-1010 100 21/100 21
ВГ+П(1/20) 6,16 2,5-1019 1:2,5-1010 100 42/100 42
ВГ+Ремантадин 1,66 7,9-1018 1:7,9-109 100 20/100 20
ВГ 100 60/100 60
Примечания:
1. ВГ - вирус гриппа;
2. П - Препарат (лечебный препарат вирулицидного действия);
3. В пересчете на йод;
4. ИЕ - инфекционная единица.
Таблица 5
Влияние предварительного и последующего введения лечебного препарата вирулицидного действия на репродукцию вируса энцефаломиокардита (ВЭМ) в клетках культуры Нер-2 Состав препарата по примеру 2
Условия опыта Выраженность ЦПД Результаты титрования проб Степень ингибиции в 1од
1 опыт 2 опыт 1 опыт 2 опыт 1 опыт 2 опыт
П(1/20)+ВЭМ 0/4 1/4 1,0 2,0 5,5 4,5
П(1/40)+ВЭМ 0/4 1/4 0,75 2,25 5,75 4,25
ВЭМ+П(1/20) 1/4 1/4 1,5 1,75 5,0 4,75
ВЭМ+П(1/40) 2/4 3/4 2,5 3,0 4,0 3,5
Контроль ВЭМ 4/4 4/4 6,5 6,5
Таблица 6
Результаты изучения ингибирующего действия лечебного препарата вирулицидного действия на репродукцию вируса простого герпеса (ВПГ) в куриных эмбрионах (КЭ)
Разведение вируса Количество объектов КЭ Число инфицированных КЭ Титры ВПГ в 1од
контроль опыт контроль опыт
1 2 1 2 1 2 1 2
10-1 100 100/100 75/100 50/100 50/100 3,75 3,5 1,5 1,25
10-2 100 100/100 75/100 50/100 25/100
10-3 100 75/100 50/100 0/100 0/100
10-4 100 50/100 50/100 0/100 0/100
10-5 100 0/100 25/100 0/100 0/100
Таблица 7
Влияние различных концентраций препарата на формирование антителообразующих клеток (АОК) в культуре на антигены Состав препарата по примеру 2
Условия эксперимента Количество антигенспецифических АОК в (в пересчете на 1-106 клеток)
ΙοΓδίηία еШетосоййса 81арйу1ососси5 аитеик
Контроль 54 39
РАМ* 155 74
Разведение препарата
1:10 153 102
1:20 129 148
1.50 114 153
1:100 89 75
Примечание:
* РАМ - митоген американского лаконоса.
Таблица 8
Результаты действия лечебного препарата вирулицидного действия при ящуре овец Состав препарата по примеру 2. 1-е введение препарата
Количество овец, голов Количество заболевших животных Доза препарата - 0,1 мл/кг живой массы внутримышечно
голов % количество павших животных количество заболевших животных
голов % голов %
Опыт 1200 52 4,3 20 1,7 5 0,42
Контроль 500 25 5,0 15 3,0 20 4,1
Таблица 9 Результаты действия лечебного препарата вирулицидного действия при ящуре овец
Состав препарата по примеру 2. 2-е сведение препарата через 24 ч
Количество овец, голов Количество заболевших животных Доза препарата - 0,3 мл/кг живой массы внутримышечно
голов % количество павших животных количество заболевших животных
голов % голов %
Опыт 1200 52 4,3 2 0,17 - -
Контроль 500 25 5,0 20 4,3 25 5,4
* После этого в контрольной группе была сделана вакцинация, общий падеж составил 14%.
Таблица 10
Результаты терапевтического действия лечебного препарата вирулицидного действия при заболеваниях вирусной природы
Способ применения - внутримышечно. Состав препарата по примеру 2
Семейство, род вируса Заболевание Количество добровольцев Суточная доза, мл/кг Срок лечения, сутки Количество доз
ДНК-содержащие вирусы
НегреФушбае Нсгрс5УЙ115 2 Герпес 22 0,2 3-5 3
Абеиоушбае Майабеиоупик Катар верхних дыхательных путей 15 0,2 2-3 2-3
РМК-содержащие вирусы
Яеоушбае Ко1ау1ги8 Диарея 18 0,2 1-3 1-3
Согоиаушбае Согоиау|ги5 Острое респираторное заболевание (ОРЗ) 50 0,2 1-3 1-3
Ойотухоушбае 1пПиепхауйи5 А Грипп 35 0,2 1-3 1-2
РФотаутбае АрЫоУ1Ш8 Ящур 3 0,2 2-3 2
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (2)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Лечебный препарат вирулицидного действия, в частности на ДНК- и РНК-содержащие вирусы млекопитающих, включая человека, содержащий йод, иодид калия или натрия, синтетический водорастворимый полимер, природные полимеры, например полисахариды, и моно- и олигосахариды и воду, отличающийся тем, что он дополнительно содержит хлорид лития, при следующем содержании компонентов, г/л: Йод 0,8-25
    Иодид калия или натрия 1,2-38
    Хлорид лития 0,1-20
    Синтетический водорастворимый полимер 0-6
    Природные полимеры (полисахариды) и моно- и олигосахариды
    8-400 Вода Остальное
  2. 2. Лечебный препарат по п.1, отличающийся тем, что он обладает иммуномодулирующим и иммуностимулирующим действием.
EA200100076A 1998-07-29 1999-07-28 Лечебный препарат вирулицидного действия EA003100B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ19982388A CZ295765B6 (cs) 1998-07-29 1998-07-29 Léčebný přípravek s virucidním účinkem
PCT/CZ1999/000026 WO2000006202A1 (en) 1998-07-29 1999-07-28 Virucide drug containing iodine

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200100076A1 EA200100076A1 (ru) 2001-08-27
EA003100B1 true EA003100B1 (ru) 2002-12-26

Family

ID=5464866

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200100076A EA003100B1 (ru) 1998-07-29 1999-07-28 Лечебный препарат вирулицидного действия

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP0978289A1 (ru)
AU (1) AU4767499A (ru)
CZ (1) CZ295765B6 (ru)
EA (1) EA003100B1 (ru)
WO (1) WO2000006202A1 (ru)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001078751A1 (en) * 2000-04-17 2001-10-25 'armenicum+' Jsc Antiviral and antibacterial pharmaceutical preparation 'armenicum' and its use for treatment of infectious diseases
ES2164018B1 (es) * 2000-05-26 2003-06-16 Inst De Salud Carlos Iii Empleo de una sal de litio en la elaboracion de un medicamento para el tratamiento de la infeccion causada por el virus respiratorio sincitial humano (vrdh)
JPWO2005089780A1 (ja) * 2004-03-18 2008-01-31 有限会社梅田事務所 抗エイズウイルス性組成物及びウイルス感染細胞の選択的不活化方法
WO2006038900A1 (fr) * 2004-10-05 2006-04-13 Volodymyr Petrovych Vladyko Composition pharmaceutique possedant un effet actibacterien et antiviral
WO2012042587A1 (ja) * 2010-09-27 2012-04-05 中村　博 ヨウ化水素を含有する健康食品及び医薬品とその製造方法
SG192563A1 (en) 2010-12-30 2013-09-30 Respub G Predpr Nauchnyj Centr Protivoinfekcionnyh Preparatov Komiteta Promy Min Ind I Novyh Tehnolo Antibacterial agent for treating infectious diseases of bacterial origin
WO2015160195A1 (ko) * 2014-04-17 2015-10-22 이봉수 C형 바이러스 간염 치료제
WO2016015691A1 (en) * 2014-07-30 2016-02-04 Albert SARKESSYAN A pharmaceutical composition having antibacterial and virucidal effects
US20210252047A1 (en) * 2018-06-08 2021-08-19 Faraday Pharmaceuticals, Inc. Use of halogen compounds for the treatment and prevention of tissue injury and post-intensive care syndrome

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5492692A (en) * 1993-08-17 1996-02-20 University Of Kentucky Research Foundation Coated products with potent anti-HIV and antimicrobial properties
US5545401A (en) * 1994-06-02 1996-08-13 Shanbrom; Edward Antiviral, spermicidal vaginal gel and foam containing low molecular weight povidone-iodine
JPH10109938A (ja) * 1996-08-15 1998-04-28 Aikusu Lab Sangyo:Kk Ｈｉｖ，クラミジア，淋菌，トリポネマパリヅム及び単純性ヘルペス等のｓｔｄ感染予防剤並びにこの感染予防剤における主剤と基剤との保存混合装置

Also Published As

Publication number Publication date
AU4767499A (en) 2000-02-21
EP0978289A1 (en) 2000-02-09
CZ295765B6 (cs) 2005-10-12
WO2000006202A1 (en) 2000-02-10
EA200100076A1 (ru) 2001-08-27
CZ238898A3 (cs) 2000-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Bianculli et al. Antiviral polymers: past approaches and future possibilities
Sochalska et al. Manipulation of neutrophils by Porphyromonas gingivalis in the development of periodontitis
US8425939B2 (en) Remedy
JPH0648956A (ja) ヒト免疫不全ウィルス感染・増殖抑制剤
EA003100B1 (ru) Лечебный препарат вирулицидного действия
WO2004112804A1 (fr) Agent d&#39;inhibition de la reproduction de virus a membrane, procede de production dudit agent, composition pharmaceutique et methode d&#39;inhibition des infections virales
CN103154012B (zh) 聚丙基醚亚胺的糖树状聚体
JP2001505583A (ja) 抗ウイルス活性を有するサルビア種の抽出物
JPH06504429A (ja) ウイルス複製の阻害
WO2001078751A1 (en) Antiviral and antibacterial pharmaceutical preparation &#39;armenicum&#39; and its use for treatment of infectious diseases
WO1990007340A1 (en) Anti-hiv agent
SHIMIZU et al. Lignified materials as medicinal resources. VI. Anti-HIV activity of dehydrogenation polymer of p-coumaric acid, a synthetic lignin, in a quasi-in-vivo assay system as an intermediary step to clinical trials
CN103442728B (zh) 用于治疗细菌来源的传染性疾病的抗菌剂
RU2264819C2 (ru) Фармацевтическая противогерпетическая композиция и способ получения лекарственной формы на ее основе
JP4014330B2 (ja) ウイルス感染防御剤
CZ8277U1 (cs) Léčebný přípravek s virucidním účinkem
TWI855282B (zh) 水溶性幾丁聚醣高分子電解質複合物（ｐｅｃ）及其組合物與應用
RU2825642C1 (ru) Интраназальная композиция для профилактики и/или лечения инфекций вирусной и бактериальной этиологии
RU2005475C1 (ru) Противовирусное средство
EA004203B1 (ru) Антивирусный и антибактериальный фармацевтический препарат &#34;арменикум&#34; и его применение для лечения инфекционных заболеваний
JPH05504761A (ja) 哺乳類のｈｉｖ感染症の治療のための方法及び組成物
JPH0454125A (ja) レトロウイルス感染症治療および予防用薬剤
JPH04308531A (ja) 抗エイズウイルス活性を有する硫酸化βグルカンのレトロウイルス感染症治療用薬剤
TW202325314A (zh) 水溶性幾丁聚醣高分子電解質複合物（ｐｅｃ）及其組合物與應用
WO1993010793A1 (en) Antivirus agent

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU