EA002339B1 - Тиольные производные, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз (ace/nep) - Google Patents

Тиольные производные, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз (ace/nep) Download PDF

Info

Publication number
EA002339B1
EA002339B1 EA199800546A EA199800546A EA002339B1 EA 002339 B1 EA002339 B1 EA 002339B1 EA 199800546 A EA199800546 A EA 199800546A EA 199800546 A EA199800546 A EA 199800546A EA 002339 B1 EA002339 B1 EA 002339B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
groups
formula
alkyl
compound
Prior art date
Application number
EA199800546A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199800546A1 (ru
Inventor
Франко Пеллачини
Стефано Романьяно
Габриеле Норчини
Франческо Сантанджело
Клаудио Семераро
Original Assignee
Замбон Груп С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Замбон Груп С.П.А. filed Critical Замбон Груп С.П.А.
Publication of EA199800546A1 publication Critical patent/EA199800546A1/ru
Publication of EA002339B1 publication Critical patent/EA002339B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/24—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/22—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/30—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals

Abstract

В изобретении описаны соединения формулы (I)в которых R, R, Rи Rимеют значения, указанные в описании, способы их получения и фармацевтические композиции, которые содержат их в качестве действующих веществ. Соединения формулы (I) обладают смешанной АСЕ-ингибирующей и NEP-ингибирующей активностью и пригодны для лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Description

Настоящее изобретение относится к тиольным производным, обладающим ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз, и в частности оно относится к производным Ν-меркаптоацилаланина, пригодным для лечения сердечно-сосудистых заболеваний.
Интерес к изучению молекул, обладающих способностью ингибировать металлопептидазы, с точки зрения фармакологии обусловлен ролью указанных ферментов, проявляющейся на уровне сердечно-сосудистой системы.
Хорошо известным является тот факт, что соединения, которые обладают ингибирующей активностью в отношении ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ), весьма перспективны для лечения гипертензии, сердечной недостаточности и постинфарктного состояния благодаря тому, что они ингибируют образование ангиотензина II, представляеющего собой вещество, которое оказывает различные воздействия, в том числе увеличивает кровяное давление.
Соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении эндотелинпревращающего фермента (ЕСЕ), пригодны в качестве антисосудосуживающих агентов, поскольку они ингибируют образование эндотелина, представляющего собой пептид, состоящий из 21 аминокислоты и обладающий сосудосуживающей активностью.
И наоборот, соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении фермента нейтральная эндопептидаза (ΝΕΡ), который также называют энкефалиназой, пригодны в качестве сосудорасширяющих агентов, поскольку фермент ΝΕΡ ответственен за инактивацию не только эндогенного энкефалина, но также и некоторых натрийуретических факторов, среди которых, например, следует отметить предсердный фактор (предсердный натрийуретический фактор, ΑΝΕ), гормон, секретируемый сердцем, который увеличивает расширение кровеносных сосудов и на почечном уровне повышает диурез и натрийурез.
Таким образом, с учетом их разных механизмов действия на сердечно-сосудистую систему, соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз, обычно используются по отдельности или в комбинации для лечения гипертензии, почечной недостаточности, застойной сердечной недостаточности и ишемических кардиопатологий.
Из тиольных производных, обладающих ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз, в качестве соединений-аналогов для ΝΕΡ-ингибиторов и АСЕ-ингибиторов соответственно рассматривают тиорфан [(ОЬ)-(3меркапто-2-бензилпропаноил)глицин], впервые описанный Рссщсз! и др. в №1Шгс. том 288, стр. 286-288 (1980), и каптоприл (Т11С Мегск 1пйех, XI изд., № 1773, стр. 267) соответственно.
В литературе описаны другие имеющие тиольное строение молекулы, которые обладают ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз.
Ν-Меркаптоацильные дипептиды, обладающие ингибирующей активностью в отношении ЕСЕ, в частности Ν-меркаптоацильные производные триптофана, описаны у 8.Р. Вег1еи8Йате и др. в Вюотдашс & Мей1сша1 СйешИйу Ьейетз, 10, 1953-1958,1993.
В патенте США 4401677 (Ε.Κ.. 8с.|шЬЬ & 8опз, 1пс.) описаны меркаптоалканоильные аминокислоты, обладающие ингибирующей активностью в отношении энкефалиназы.
В патенте США 4199512 (Ε.Κ 8(]шЬЬ & 8опз. 1пс.) описаны меркаптоалканоильные аминокислоты, обладающие ингибирующей активностью в отношении АСЕ.
В европейской заявке 0566157 (8сйеппд Сотротайоп) описаны Ν-меркаптоапильные производные аланина, обладающие ингибирующей активностью в отношении ΝΕΡ.
В европейской заявке 0449523 (Ε.Κ 8с.|шЬЬ & 8опз, 1пс.) описаны меркапто- или ацилтиотрифторметиламиды, обладающие ингибирующей активностью в отношении ΝΕΡ.
В европейской заявке 0524553 [1пзй!и! Νιйопа1 йе 1а 8ап1е е! йе 1а Весйетсйе Мейка1е (ΙΝ8ΕΚΜ)] описаны ацилмеркаптоалканоилдипептиды, обладающие ингибирующей активностью в отношении нейтральной эндопептидазы и пептидилпептидазы А.
В международной заявке АО 93/08162 [К.йопе-Рои1епс Роге г 8.А.-1пзй!и! №Шопа1 йе 1а 8ап1е е! йе 1а Кесйетсйе Мей1са1е (ΙΝ8ΕΚΜ)] описаны β,β-дизамещенные α-меркаптометилпропиониламиды, обладающие смешанной ΑΟΕ/ΝΕΡ-ингибирующей активностью.
В европейской заявке 0419327 (8ос1е!е С1уйе Вюргсуес!) описаны производные аминокислот, такие как, например, Ν-меркаптоацильные производные фенилаланина, гистидина и триптофана, обладающие ингибирующей активностью в отношении энкефалиназы и в отношении АСЕ.
α-Меркаптоацильные дипептиды, обладающие ингибирующей активностью в отношении АСЕ и ΝΕΡ, также описаны у 8.8. Вйадга! и др. в Вюотдашс & Мей1апа1 СйешИйу Ьейега, 7, 735-738, 1995.
В этой последней работе авторами сделано заключение, что присутствие бифенилметильной группы придает представляющую интерес смешанную ΑΟΕ/ΝΕΡ-ингибирующую активность молекулам, имеющим строение αмеркаптоацильного дипептида, замещение бифенильной группы такими группами, как α- или β-нафтил, приводит к существенному снижению активности.
Согласно настоящему изобретению были обнаружены производные Ν-меркаптоацилаланина, которые обладают выраженной ингибирующей активностью в отношении ангиотен зинпревращающего фермента, а также фермента нейтральная эндопептидаза (двойная АСЕ/ΝΕΡ ингибирующая активность), что делает их особенно пригодными для лечения сердечнососудистых патологий.
Таким образом, объектом настоящего изобретения являются соединения формулы
К1
I *
К-СН2-СН-СОЖСН-СООК2 (I) * I
СН2-&3 где К обозначает меркаптогруппу или группу К4СО8, которая превращается в организме в меркаптогруппу,
К1 обозначает С2-С4алкильную группу с прямой или разветвленной цепью или арильную или арилалкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода в алкильном фрагменте, где арил обозначает фенил или 5- или 6-членный ароматический гетероцикл с одним или двумя гетероатомами, выбранными из группы, включающей азот, кислород и серу, необязательно замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, гидроксигруппы, алкокси-, алкил-, алкилтио-, алкилсульфонил- или алкоксикарбонильные группы, которые имеют от 1 до 6 атомов углерода в алкильном фрагменте, С1-С3алкильные группы, которые содержат один или несколько атомов фтора, карбоксигруппы, нитрогруппы, амино- или аминокарбонильные группы, ациламиногруппы, аминосульфонильные группы, моно- или диалкиламино- или моно- или диалкиламинокарбонильные группы, имеющие от 1 до 6 атомов в алкильном фрагменте,
К2 обозначает водород, С1-С4алкильную группу с прямой или разветвленной цепью или бензильную группу,
К3 обозначает 5- или 6-членный ароматический гетероцикл, который содержит один или два гетероатома, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу, необязательно замещенный фенильной группой, где фенильная и гетероциклическая группа необязательно замещены одним или двумя одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, алкил-, алкокси-, алкилтио- или алкоксикарбонильные группы, которые имеют от 1 до 3 атомов углерода в алкильном фрагменте,
К4 обозначает С1-С4алкильную группу с прямой или с разветвленной цепью или фенильную группу, атомы углерода, помеченные звездочкой, являются стереогенными центрами, и их фармацевтически приемлемые соли, при условии, что К3 не обозначает имидазолильную или индолильную группу.
Соединения формулы I содержат два стереогенных центра и поэтому могут находиться в форме стереоизомеров.
Таким образом, объектом настоящего изобретения являются соединения формулы I в форме стереоизомерной смеси, а также в форме отдельных стереоизомеров.
Соединения формулы I по изобретению обладают двойной АСЕМЕР-ингибирующей активностью и пригодны для лечения сердечнососудистых заболеваний.
В контексте настоящего описания, если не указано иное, под понятием алкильная группа с прямой или разветвленной цепью подразумевают алкил, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, изобутил, н-пентил, 2-пентил, 3-пентил, изопентил, трет-пентил, н-гексил и изогексил; под понятием алкоксигруппа с прямой или разветвленной цепью подразумевают алкоксигруппу, такую как метокси, этокси, н-пропокси и изопропокси; под понятием атом галогена подразумевают атом фтора, хлора, брома или йода; под понятием ацил подразумевают ацильную группу, происходящую из алифатической или ароматической карбоновой кислоты, такой как уксусная, пропионовая, масляная и бензойная кислота; под понятием 5- или 6-членный ароматический гетероцикл с 1 или 2 гетероатомами, выбранными из группы, включающей азот, кислород и серу, подразумевают такую группу, как тиазол, изоксазол, оксазол, изотиазол, пиразол, имидазол, тиофен, пиррол, пиридин, пиримидин, пиразин, пиридазин и фуран, необязательно сконденсированный с бензольным кольцом.
Примерами фармацевтически приемлемых солей соединений формулы I являются соли щелочных или щелочно-земельных металлов и соли фармацевтически приемлемых органических оснований.
Предпочтительными соединениями формулы I являются соединения, в которых К3 обозначает 5- или 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, которая содержит один или два гетероатома, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу.
Еще более предпочтительными соединениями в этом классе являются соединения формулы I, у которых К1 обозначает фенилалкильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, гидрокси-, алкил- или алкоксигруппы.
Предпочтительными примерами фармацевтически приемлемых солей соединений формулы I являются соли щелочных металлов, таких как натрий, литий и калий.
Для специалиста в данной области очевидно, что соединения формулы I, у которых К обозначает группу К4СО8, обладают способностью превращаться в организме в соединения, у которых К обозначает меркаптогруппу, а соединения формулы I, у которых К2 обозначает алкильную или бензильную группу, являются биологическими предшественниками (пролекарствами) соответствующих соединений формулы I, у которых К обозначает меркаптогруппу (К=8И) или К2 обозначает атом водорода (К2=Н) соответственно.
Конкретные примеры предпочтительных соединений формулы I по изобретению включают метиловый эфир П-(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(2-тиенил)аланина;
метиловый эфир П-(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(4-тиазолил)аланина;
метиловый эфир П-(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(2-пиридил)аланина;
метиловый эфир П-(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(3-пиридил)аланина;
метиловый эфир П-(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(2-фурил)аланина;
П-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (2-тие нил) аланин;
П-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (4-тиазолил)аланин;
П-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (2-пиридил)аланин;
П-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (3-пиридил)аланин;
П-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (2-фурил)аланин.
Получение предлагаемых соединений формулы I проводят в соответствии со способом синтеза, включающим взаимодействие между соединением формулы
Κι
I К-СН2-СН-СООН (П) *
где К и К1 имеют указанные выше значения, и производным аланина формулы *
Н2И-СН-СООК2 (Ш)
I
СН2-К3 где К2 и К3 имеют указанные выше значения.
Реакцию конденсации проводят в соответствии со способами, общепринятыми в химии пептидов.
До проведения реакции может оказаться полезным соответствующим образом защитить необязательные функциональные группы, которые могут мешать взаимодействию.
Необязательную защиту проводят общепринятыми способами.
В отношении соединений, у которых К обозначает группу К4СО8, предпочтительно использовать в качестве промежуточных веществ соединения формулы II, получая, таким образом, соответствующие соединения формулы I, у которых К обозначает группу К4СО8, из которых путем гидролиза могут быть получены соединения формулы I, у которых К обозначает группу 8И.
Оценка пригодности необязательной защиты, а также выбор приемлемого типа защиты, соответствующего проводимой реакции и функциональным группам, подлежащим защите, хорошо известны специалистам в данным области.
Удаление необязательных защитных групп проводят в соответствии с общепринятыми способами.
Общие примеры применения защитных групп в органической химии можно найти у Тйеобога Ш. Огеепе и Ре1ег Θ.Μ. ШиЕ в Рго1есШе Сгоирз ΐη Огдашс 8упШе818, .1оКп ШИеу & 8опз, Шс., 2 изд., 1991.
Соединения формул II и III являются известными или легко могут быть получены общепринятыми способами.
Например, соединения формулы II могут быть получены согласно описанию к патенту Великобритании 1576161, выданному на имя Е.К. ЗцшЬЬ & 8опз, Шс.
Соединения формулы I в форме отдельных стереоизомеров получают путем стереоселективного синтеза или разделения стереоизомерной смеси в соответствии с общепринятыми способами.
Получение солей предлагаемых соединений формулы I также проводят в соответствии с общепринятыми способами.
Соединения формулы I по изобретению проявляют двойную ЛСЕ/ПЕР-ингибирующую активность и пригодны для лечения сердечнососудистых заболеваний.
Ингибирующую активность соединений формулы I оценивали в опытах ΐη уйго.
В частности, ингибирующую активность соединений формулы I оценивали в сравнении с вышеуказанными тиорфаном и каптоприлом.
Обнаруженная ингибирующая активность ΐη уйго соединений формулы I, выраженная в виде значения КЭо. является важной с фармакологической точки зрения, поскольку проявляется в наномолярных концентрациях.
Обнаруженная ингибирующая активность в отношении АСЕ оказалась сопоставимой с активностью каптоприла, а ингибирующая активность в отношении ΝΕΡ оказалась сопоставимой с активностью тиорфана.
Для практического применения в терапии на основе соединений формулы I могут быть изготовлены твердые или жидкие фармацевтические композиции, пригодные для орального или парентерального введения.
Таким образом, фармацевтические композиции, содержащие терапевтически эффективное количество соединения формулы I в смеси с носителем, предназначенные для фармацевтического применения, являются еще одним объектом настоящего изобретения.
Конкретными примерами фармацевтических композиций по настоящему изобретению являются таблетки, таблетки с покрытием, капсулы, грануляты, растворы и суспензии, пригодные для орального введения, а также раство002339 ры и суспензии, пригодные для парентерального введения.
Фармацевтические композиции по изобретению получают в соответствии с общепринятыми способами.
Суточная доза соединения формулы I или соответствующего пролекарства может зависеть от ряда факторов, таких как серьезность заболевания, индивидуальная реакция пациента или тип композиции, но она обычно находится в диапазоне от 0,1 до 10 мг на кг веса тела и может применяться в виде однократной дозы или может быть разделена на несколько суточных доз.
Ниже изобретение проиллюстрировано на примерах.
Если не указано иное, быструю хроматографию проводили с использованием силикагеля для быстрой хроматографии фирмы Вакег (код 7024-00).
Пример 1. Получение метилового эфира Ν(3-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил) (4-тиазолил)-Ь-аланина (соединение 1).
Раствор гидроксибензотриазола (1,25 г; 9,25 ммоля) в тетрагидрофуране (30 мл), а затем раствор дициклогексилкарбодиимида (1,81 г; 9,25 ммоля) в метиленхлориде (10 мл) добавляли при перемешивании при 0°С к смеси, содержащей 3-фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионовую кислоту (2,78 г; 9,25 ммоля), метиловый эфир (4-тиазолил)-Ь-аланина (2,40 г; 9,25 ммоля), полученный обработкой метилового эфира №трет-бутоксикарбонил-(4-тиазолил)-Еаланина (поставляемого фирмой 81п(Ве1есН 1пс. Огедоп) метанолом и тионилхлоридом, триэтиламин (2,58 мл; 18,5 ммоля) в тетрагидрофуране (25 мл) и в метиленхлориде (40 мл). Реакционную смесь выдерживали при перемешивании при комнатной температуре в течение 20 ч, затем отфильтровывали дициклогексилмочевину и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Остаток собирали этилацетатом и раствор промывали 20%-ным водным раствором хлорида натрия, 5%-ным раствором бикарбоната натрия и еще раз 20%-ным раствором хлорида натрия. После разделения фаз и упаривания органической фазы образовавшееся твердое вещество очищали экспресс-хроматографией (силикагель, элюент этилацетат:гексан в соотношении 1:1, давление азота 0,1 атм.), получая таким образом метиловый эфир Ν-(3фенилкарбонилтио-2-фенилметилпропионил)(4тиазолил)-Ь-аланина (3,85 г; выход 88%) в виде маслянистого продукта.
После обработки маслянистого продукта этиловым эфиром и гексаном и последующей фильтрации получали требуемый продукт в виде твердого вещества (2,2 г; соотношение стереоизомеров 28:2В = 85:15).
’Н-ЯМР (200 МГц, С1)С1;): δ (част./млн): 2,67-3,30 (т, 7Н, СН2-СН-СН2, СН2-тиазолил); 3,60 (8, 3Н, ОСН3); 4,77-4,89 (т, 1Н, СОЯН-СН);
6.53 (8, 1Н, ΝΗ); 7,15-7,90 (т, 10Н, фенил); 6,928,51 (т, 2Н, тиазолил).
Из маточных растворов выделяли дополнительную фракцию соединения 1 (1,5 г; соотношение стереоизомеров 28:2В = 65:35) в виде маслянистого продукта.
Аналогичным путем получали следующие соединения:
метиловый эфир №(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(2-тиенил)-Ь-аланина (соединение 2):
1пл 68-70°С;
!Н-ЯМР (200 МГц, С1)С1;): δ (част./млн): 2,65-3,40 (т, 7Н, СН2-СН-СН2, СН2-тиенил); 3,61 и 3,62 (28, 3Н, ОСН3); 4,70-4,90 (2т, 1Н, СОЯН-СН); 5,85-5,90 и 5,95-6,02 (2т, 1Н, ЯН); 6,60-7,05 (т, 3Н, тиенил); 7,10-8,00 (т, 10Н, фенил);
метиловый эфир №(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(2-пиридил)-Ь-аланина (соединение 3):
1пл 84-86° С;
!Н-ЯМР (200 МГц, С1)С1;): δ (част./млн): 2,70-3,30 (т, 7Н, СН2-СН-СН2, СН2-пиридил); 3,59 (8, 3Н, ОСН3); 4,71-4,92 (т, 1Н, СОЯН-СН); 6,90-8,28 (т, 15Н, ЯН, фенил, пиридил).
Пример 2. Получение Я-(2-фенилметил-3меркаптопропионил)(4-тиазолил)-Ь-аланина (соединение 4).
Метиловый эфир №(3-фенилкарбонилтио2-фенилметилпропионил)(4-тиазолил)-Ь-аланина (1,20 г; 2,56 ммоля), полученный согласно примеру 1, суспендировали в этаноле (30 мл), дегазировали, барботируя азотом, для удаления кислорода. К суспензии при 0°С добавляли в атмосфере азота по каплям водный дегазированный 1н. раствор гидроксида натрия (7,68 мл). Реакционную смесь выдерживали при перемешивании в течение 4 ч при комнатной температуре, затем охлаждали до 0°С и подкисляли 10%-ным раствором соляной кислоты (5 мл) и предварительно дегазированной водой (5 мл). Реакционную смесь упаривали досуха при пониженном давлении и остаток собирали ацетонитрилом и еще раз упаривали досуха. Остаток, собранный смесью метанол: метиленхлорид в соотношении 1:1 (15 мл), фильтровали с целью удаления неорганических солей и раствор упаривали досуха при пониженном давлении. Затем остаток собирали водой, содержащей соляную кислоту (20 мл) и метиленхлорид (20 мл). Фазы разделяли и органическую фазу упаривали досуха при пониженном давлении, получая остаток (0,81 г), из которого после обработки третбутиловым эфиром, фильтрации и сушки получили N-(2-фенилметил-3 -меркаптопропионил) (4-тиазолил)-Ь-аланин (0,52 г; выход 58%; соотношение стереоизомеров 28:2В = 90:10).
1пл 145-147° С.
!Н-ЯМР (200 МГц, С1)С1;): δ (част./млн):
1.53 (ΐ, 1Н, 1НН=8,4 Гц, 8Н); 2,51-2,98 (т, 5Н,
СН2-СН-СН2); 3,39-3,51 (АВХ, 2Н, 1аЬ=14,7 Гц, 1ах=3,4 Гц, 1Ьх=5,9 Гц, СН2-тиазолил); 4,63-4,71 (т, 1Н, СНСОО); 6,51 (б, 1Н, 1НН=5,8 Гц, СОИН); 7,09=7,30 [т, 6Н, фенил, СН(тиазолил)]; 8,85 [б, 1Н, 1НН=2,0 Гц, СН(тиазолил)].
Аналогичным путем получали следующие соединения:
И-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (2-тиенил)-Ь-аланин (соединение 5):
Ή-ЯМР (200 МГц, С11С1;): δ (част./млн): 1,40-1,61 (т, 1Н, 8Н); 2,47-3,46 (т, 7Н, СН2-СНСН2, СН2-СН-СОО); 4,78-4,91 (т, 1Н, СНСОО); 6,00-6,06 (т, 1Н, СОИН); 6,40-7,33 (т, 8Н, ароматич.); 7,50 (Ьз, 1Н, СООН);
И-(2-фенилметил-3-меркаптопропионил) (2-пиридил)-Ь-аланин (соединение 6):
1пл 164-166°С;
Ή-ЯМР (200 МГц, ДМСО-б6): δ (част./млн): 1,78-1,86 (т, 1Н, 8Н); 2,20-2,89 (т, 5Н, СН2-СН-СН2); 2,95-3,26 (т, 2Н, СН2пиридил); 4,64-4,75 (т, 1Н, СНСОО); 8,33 (б, 1Н, 1НН=8,1 Гц, ИН); 7,10-8,47 (т, 9Н, ароматич.); 12,7 (Ьз, 1Н, СООН).
Пример 3. Оценка фармакологической активности ίη νίίτο.
а) Ингибирующая активность в отношении ΝΕΡ.
Ингибирующую активность в отношении ΝΕΡ оценивали на мембранах коркового слоя почки крыс, полученных в соответствии со способом, описанным у Т. Маеба и др. в ВюсЫт. ВюрЬуз. Ае1а 1983, 731(1), 115-120.
У самцов крыс линии 8ргадие-ОаМеу весом примерно 300 г удаляли почки и выдерживали при 4°С. Корковый слой почки осторожно выделяли, тонко измельчали и суспендировали в гомогенизирующем буфере (10 мМ фосфат натрия, рН 7,4, содержащий 1 мМ МдС12, 30 мМ №1С1. 0,02% NаNз) в концентрации 1:15 мас./об. Затем ткань гомогенизировали на холоде в течение 30 с с использованием гомогенизатора типа иИга-Тштах. Приблизительно 10 мл гомогената наслаивали на 10 мл сахарозы (41% мас./об.) и центрифугировали при 31200 об./мин в течение 30 мин при 4°С с фиксированным углом ротора. Мембраны собирали с поверхности буфера/сахарозы, дважды промывали 50 мМ трис-НС1-буфером (рН 7,4) и ресуспендировали в этом же буфере для хранения до использования в виде аликвотных количеств при -80°С. Ингибирующую активность в отношении ΝΕΡ оценивали в соответствии с методом, описанным у С.Ь1огепз и др. в Еиг. 1. Рйагшасо1. 69, (1981), 113-116, как представлено в данном описании.
Аликвотные количества суспензии мембран, полученные по описанной выше методике, (концентрация протеинов 5 мкг/мл) предварительно инкубировали в присутствии ингибитора аминопептидазы (Бестатин -1 мМ) в течение 10 мин при 30°С. Добавляли [3Н] [Ьеи5]-энкефалин (15 нМ) и трис-НС1-буфер, рН 7,4 (50 мМ), таким образом, чтобы получить конечный объем 100 мкл. Через 20 мин инкубацию при 30°С прекращали, добавляя 0,1 М НС1 (100 мкл). Образование метаболита [3Н]Туг-С1у-С1у количественно оценивали после отделения непрореагировавшего субстрата с помощью хроматографии на полистироловых колонках (Рогарак О), измеряя относительную радиоактивность с помощью жидкостного сцинтиляционного счетчика.
Процент ингибирования образования метаболита в препаратах мембран, обработанных соединениями формулы I и соединениямиэталонами, по сравнению с необработанными препаратами мембран выражали в виде значения 1С50 (нМ).
б) Ингибирующая активность в отношении АСЕ.
Ингибирующую активность в отношении АСЕ оценивали в соответствии с методом, известным из литературы |В.Но1тс.|Ш51 и др. Апа1убса1 Вюсйет151гу, 95, 540-548 (1979)].
50мкМ АСЕ (250 миллиед./мл, выделенный из легкого кролика, КФ 3.4.15.1, фирма 8ЮМА) предварительно инкубировали в термостатированных кюветах при 37°С с 50 мкл соединения формулы I или соединения-эталона, или соответствующего носителя. Реакцию начинали добавлением 500 мкл 0,8 мМ фурилакрилоилфенилаланилглицилглицина (РАРСС8ЮМА). Одновременно с помощью спектрофотометра типа Весктап ИИ-50, снабженного программой для расчета дельта А/мин и коэффициентов регрессии кривых, описывающих кинетику фермента, непрерывно в течение 5 мин регистрировали поглощение при 340 нм.
Процент ингибирования фермента в препаратах, обработанных соединениями формулы I или соединениями-эталонами, по сравнению с препаратами, которые инкубировали с носителем, выражали в виде значения 1С50 (нМ).
Ниже в таблице приведены значения 1С50 (нМ), соответствующие АСЕ-ингибирующей и ΝΕΡ-ингибирующей активности соединений 4, 5 и 6 и соединений-эталонов тиорфана и каптоприла.
Таблица АСЕ-ингибируюшая и ΝΕΡ-ингибирующая активность, выраженная в виде значения 1С50 (нМ) соединений 4, 5, 6 и тиорфана и каптоприла
Соединение АСЕ-ингибирующая активность %0 (нМ) ΝΕΡ-ингибирующая активность ГС50 (нМ)
4 12 4,7
5 6,5 5,5
б 23 7,1
тиорфан 99 18
каптоприл 4,6 не активно
Данные, приведенные в таблице, показывают, что предлагаемые соединения формулы I обладают выраженной двойной АСЕ/ΝΕΡ ингибирующей активностью. Выявленная активность сопоставима с активностью каптоприла в отношении АСЕ-ингибирующей активности и с активностью тиорфана в отношении ΝΕΡ-ингибирующей активности.

Claims (14)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы
    К) ί *
    К-СН2-СН-СОНН-СН-СООК2 (I) * I ‘
    СН2-К3 где К обозначает меркаптогруппу или группу К4СОЗ, которая превращается в организме в меркаптогруппу,
    К1 обозначает С2-С4алкильную группу с прямой или разветвленной цепью или арильную или арилалкильную группу, имеющую от 1 до 6 атомов углерода в алкильном фрагменте, где арил обозначает фенил или 5- или 6-членный ароматический гетероцикл с одним или двумя гетероатомами, выбранными из группы, включающей азот, кислород и серу, необязательно замещенный одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, гидроксигруппы, алкокси-, алкил-, алкилтио-, алкилсульфонил- или алкоксикарбонильные группы, которые имеют от 1 до 6 атомов углерода в алкильном фрагменте, С1-С3алкильные группы, которые содержат один или несколько атомов фтора, карбоксигруппы, нитрогрулпы, амино- или аминокарбонильные группы, ациламиногруппы, аминосульфонильные группы, моно- или диалкиламино- или моно- или диалкиламинокарбонильные группы, имеющие от 1 до 6 атомов в алкильном фрагменте,
    К2 обозначает водород, С1-С4алкильную группу с прямой или разветвленной цепью или бензильную группу,
    К3 обозначает 5- или 6-членный ароматический гетероцикл, который содержит один или два гетероатома, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу, необязательно сконденсированный с бензольным кольцом, необязательно замещенный фенильной группой, где фенильная и гетероциклическая группа необязательно замещены одним или двумя одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, алкил-, алкокси-, алкилтио- или алкоксикарбонильные группы, которые имеют от 1 до 3 атомов углерода в алкильном фрагменте,
    К4 обозначает С1-С4алкильную группу с прямой или разветвленной цепью или фенильную группу, атомы углерода, помеченные звездочкой, являются стереогенными центрами, и его фармацевтически приемлемые соли, при условии, что К3 не обозначает имидазолильную или индолильную группу.
  2. 2. Соединение формулы I по п.1, где К3 обозначает 5- или 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, которая содержит один или два гетероатома, выбранных из группы, включающей азот, кислород и серу.
  3. 3. Соединение формулы I по п.2, где К1 обозначает фенилалкильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими одинаковыми или различными заместителями, выбранными из группы, включающей атомы галогена, гидрокси-, алкил- или алкоксигруппы.
  4. 4. Соединение формулы I по п.1 в форме соли с щелочным металлом, выбранным из группы, включающей натрий, литий и калий.
  5. 5. Способ получения соединения формулы I по п.1, включающий взаимодействие между соединением формулы
    Κι
    I
    К-СН2-СН-СООН (П) *
    где К и К1 имеют значения, указанные в п.1, и производным аланина формулы *
    Н2К-СН-СООК2 (Ш) ί
    СН2-КЗ где К2 и К3 имеют значения, указанные в п. 1.
  6. 6. Фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения формулы I по п.1 в смеси с носителем, предназначенная для фармацевтического применения.
  7. 7. Фармацевтическая композиция по п.6, предназначенная для лечения сердечнососудистых заболеваний.
  8. 8. Способ лечения сердечно-сосудистых заболеваний, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I по п. 1.
  9. 9. Метиловый эфир Ы-(3-фенилкарбонилтио -2 - фенилметилпропионил)(4 -тиазолил) -Б аланина.
  10. 10. Метиловый эфир Ы-(3-фенилкарбонилтио -2 - фенилметилпропионил)(2 -тиенил) -Б аланина.
  11. 11. Метиловый эфир Ы-(3-фенилкарбонилтио -2 - фенилметилпропионил)(2 -пиридил) - Б аланина.
  12. 12. №(2-фенилметил-3-меркаптопропионил)(4-тиазолил) -Б - аланин.
  13. 13. №(2-фенилметил-3 -меркаптопропионил)(2-тиенил)-Б-аланин.
  14. 14. Ν- (2 - фенилметил-3 -меркаптопропио нил) (2-пиридил) - Б- аланин.
EA199800546A 1995-12-28 1996-12-09 Тиольные производные, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз (ace/nep) EA002339B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT95MI002772A IT1277736B1 (it) 1995-12-28 1995-12-28 Derivati tiolici ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
PCT/EP1996/005496 WO1997024341A1 (en) 1995-12-28 1996-12-09 Thiol derivatives with metallopeptidase (ace/nep) inhibitory activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199800546A1 EA199800546A1 (ru) 1999-02-25
EA002339B1 true EA002339B1 (ru) 2002-04-25

Family

ID=11372826

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199800546A EA002339B1 (ru) 1995-12-28 1996-12-09 Тиольные производные, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз (ace/nep)

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6166051A (ru)
EP (1) EP0883612B1 (ru)
KR (1) KR19990076808A (ru)
CN (1) CN1108295C (ru)
AT (1) ATE289597T1 (ru)
AU (1) AU706978B2 (ru)
CA (1) CA2241452A1 (ru)
CZ (1) CZ295804B6 (ru)
DE (1) DE69634387D1 (ru)
EA (1) EA002339B1 (ru)
HU (1) HUP9903840A3 (ru)
IT (1) IT1277736B1 (ru)
MX (1) MX9805168A (ru)
WO (1) WO1997024341A1 (ru)
ZA (1) ZA9610819B (ru)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2805259B1 (fr) * 2000-02-17 2002-03-29 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux derives d'aminoacides n-mercaptoacyles, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US8307671B2 (en) * 2008-09-22 2012-11-13 Jungerhans Robert R J Purification of gases in synthesis gas production process

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4199512A (en) * 1976-05-10 1980-04-22 E. R. Squibb & Sons, Inc. Compounds for alleviating hypertension
EP0419327A1 (fr) * 1989-09-15 1991-03-27 Societe Civile Bioprojet Dérivés d'amino-acides, leur procédé de préparation et leurs applications thérapeutiques
EP0449523A1 (en) * 1990-03-22 1991-10-02 E.R. SQUIBB & SONS, INC. Mercapto- or acylthio-trifluoromethyl amide derivatives and their use
EP0524553A1 (en) * 1991-07-23 1993-01-27 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Acylmercaptoalkanoyldipeptides, methods of preparation and their therapeutic use
EP0527624A2 (en) * 1991-08-12 1993-02-17 E.R. Squibb & Sons, Inc. Use of a selective inhibitor of neutral endopeptidase and an angiotensin converting enzyme inhibitor in the preparation of a pharmaceutical for treating congestive heart failure
WO1993008162A1 (en) * 1991-10-25 1993-04-29 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) N-(mercaptoacyl)amino acids, methods of their preparation and therapeutic use, and pharmaceutical compositions containing them
EP0566157A1 (en) * 1986-06-20 1993-10-20 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
WO1994017036A1 (en) * 1993-01-22 1994-08-04 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) S-lipophilic aliphatic carbonyl [n-mercaptoacyl-(amino acid or peptide)] compounds as antihypertensive agents
JPH0841015A (ja) * 1994-07-27 1996-02-13 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd 新規メルカプト−アミド誘導体
WO1996022998A1 (en) * 1995-01-27 1996-08-01 Zambon Group S.P.A. Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5599951A (en) * 1989-09-15 1997-02-04 Societe Civile Bioprojet Amino acid derivatives, the process for their preparation and their applications to therapy
US5223516A (en) * 1990-03-22 1993-06-29 E. R. Squibb & Sons, Inc. 3,3,3-trifluoro-2-mercaptomethyl-N-tetrazolyl substituted propanamides and method of using same

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4199512A (en) * 1976-05-10 1980-04-22 E. R. Squibb & Sons, Inc. Compounds for alleviating hypertension
EP0566157A1 (en) * 1986-06-20 1993-10-20 Schering Corporation Neutral metalloendopeptidase inhibitors in the treatment of hypertension
EP0419327A1 (fr) * 1989-09-15 1991-03-27 Societe Civile Bioprojet Dérivés d'amino-acides, leur procédé de préparation et leurs applications thérapeutiques
EP0449523A1 (en) * 1990-03-22 1991-10-02 E.R. SQUIBB & SONS, INC. Mercapto- or acylthio-trifluoromethyl amide derivatives and their use
EP0524553A1 (en) * 1991-07-23 1993-01-27 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Acylmercaptoalkanoyldipeptides, methods of preparation and their therapeutic use
EP0527624A2 (en) * 1991-08-12 1993-02-17 E.R. Squibb & Sons, Inc. Use of a selective inhibitor of neutral endopeptidase and an angiotensin converting enzyme inhibitor in the preparation of a pharmaceutical for treating congestive heart failure
WO1993008162A1 (en) * 1991-10-25 1993-04-29 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) N-(mercaptoacyl)amino acids, methods of their preparation and therapeutic use, and pharmaceutical compositions containing them
EP0539848A1 (en) * 1991-10-25 1993-05-05 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) N-(mercaptoacyl)amino acids, methods of their preparation and therapeutic use, and pharmaceutical compositions containing them
WO1994017036A1 (en) * 1993-01-22 1994-08-04 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) S-lipophilic aliphatic carbonyl [n-mercaptoacyl-(amino acid or peptide)] compounds as antihypertensive agents
JPH0841015A (ja) * 1994-07-27 1996-02-13 Fujisawa Pharmaceut Co Ltd 新規メルカプト−アミド誘導体
WO1996022998A1 (en) * 1995-01-27 1996-08-01 Zambon Group S.P.A. Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHEMICAL ABSTRACTS, vol. 125, no. 1. 1 July 1996, Columbus, Ohio, US; abstract no. 11459g, SHIOKAWA Y. ET AL: "Preparation of N-(mercaptoacyl)amino acid derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase and angiotensin converting enzyme", page 1258; XP002029437 see abstract & JP-A-08041015 *

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9903840A3 (en) 2001-12-28
ITMI952772A0 (ru) 1995-12-28
CZ295804B6 (cs) 2005-11-16
EP0883612A1 (en) 1998-12-16
CN1108295C (zh) 2003-05-14
US6166051A (en) 2000-12-26
CZ204798A3 (cs) 1998-11-11
CA2241452A1 (en) 1997-07-10
EA199800546A1 (ru) 1999-02-25
HUP9903840A2 (hu) 2000-03-28
ZA9610819B (en) 1997-06-24
IT1277736B1 (it) 1997-11-12
ATE289597T1 (de) 2005-03-15
WO1997024341A1 (en) 1997-07-10
AU706978B2 (en) 1999-07-01
ITMI952772A1 (it) 1997-06-28
KR19990076808A (ko) 1999-10-15
MX9805168A (es) 1998-10-31
AU1369197A (en) 1997-07-28
DE69634387D1 (de) 2005-03-31
CN1268945A (zh) 2000-10-04
EP0883612B1 (en) 2005-02-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4425333A (en) Sulfur-containing acylamino acids
US4707490A (en) Anti-hypertensive agents
US4500467A (en) Benzoylthio compounds, their preparation and their use as drugs
JP2000502687A (ja) メタロペプチダーゼ阻害活性を有するチオール誘導体
EA002339B1 (ru) Тиольные производные, обладающие ингибирующей активностью в отношении металлопептидаз (ace/nep)
AU707570B2 (en) Phosphonic acid derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
US5866604A (en) Thiol derivatives with metallopeptidase inhibitory activity
EP0755405B1 (en) Phosphonyldipeptides useful in the treatment of cardiovascular diseases
US5994539A (en) Mercapto acyl aminoacid derivatives endowed with dual ACE-NEP inhibitory activity, useful in the treatment of cardiovascular diseases
JPH06234630A (ja) 中性メタロエンドペプチダーゼ阻害剤
ITMI951257A1 (it) Derivati dell'acido fosfinico ad attivita' inibitrice delle metallopeptidasi
EP0038117A1 (en) Methods for preparing anti-hypertensive agents
MXPA98003750A (en) Acids 6- and 7-amino-tetrahidroisoquinolina-carboxilicos sustitui

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM RU