DK172632B1 - Lægemiddel til behandling af diabetes mellitus og anvendelse af insulinderivater til fremstilling af et sådant lægemiddel - Google Patents
Lægemiddel til behandling af diabetes mellitus og anvendelse af insulinderivater til fremstilling af et sådant lægemiddel Download PDFInfo
- Publication number
- DK172632B1 DK172632B1 DK198404530A DK453084A DK172632B1 DK 172632 B1 DK172632 B1 DK 172632B1 DK 198404530 A DK198404530 A DK 198404530A DK 453084 A DK453084 A DK 453084A DK 172632 B1 DK172632 B1 DK 172632B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- insulin
- formula
- agent according
- human insulin
- group
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Description
DK 172632 B1 i
Den foreliggende opfindelse ang&r et legemiddel med forhalet virkning til behandling af diabetes mellitus samt anvendelsen af insulinderivater til fremstilling af et lægemiddel til behandling af diabetes mellitus.
5 Ved behandlingen af diabetes mellitus indgives i dag sædvanligvis præparater af det blodsukkersænkende hormon insulin parenteralt. Insulinets specielle natur og dets metabolisme medfører, at virkningsvarigheden af en simpel opløsning kun er meget kort, således at der til vedvarende 10 blodsukkerkontrol hos diabetikeren enten skal indgives en varig-Infusion med doseringsapparater, flerdobbelte daglige injektioner eller et insulinpræparat med forhalet virkning. Som forhalingsprincipper er derved sådanne tilstandsformer af insulinet, som på injektionsstedet er tungt-15 opløselige (f.eks. krystallinske eller amorfe), af særlig betydning. Dertil skal f.eks. regnes zink-insulinkrystaller, (eller prptamin-insulinkrystaller, som under_.deres langsomme jgenopløsning over et vist tidsrum frigør insulin. ...
Det har nu ved behandlingen vist sig yderst gunstigt 20 at have forskellige insulinpræparater til rådighed, soro i deres virkningskarakteristik kommer så nær den enkelte patients behov som muligt. I sammenhæng med ikke-optimal indstilling diskuteres foruden umiddelbare virkninger, såsom hyper- eller hypoglykæmier, især de diabetiske sen-25 komplikationer, hvortil hører retinopathia, neuropathia, nephropathia, mikro- og makroangiopathia.
·. Insulinmangelen hos diabetikeren fører til, at kroppen ikke længere kan opnå sin naturlige hormonelle '· ligevægt.
30 Det er formålet med opfindelsen at tilvejebringe et lægemiddel til behandling af diabetes mellitus, med hvilket man bedre kan nærme sig den naturlige hormonale ligevægt ved en diabetisk tilstand, og hvorved denne bedre kan opretholdes end ved indgivelsen af insulin i de hidtil gængse 35 former.
Dette formål opfyldes ifølge opfindelsen med et læge- DK 172632 B1 2
middel med forhalet virkning til behandling af diabetes mellitus, best&ende af mindst ét insulinderivat med formlen I
5 Al rg~~~^Sl_A21
H-l Gly A-kade ^ Asn -OH
J I m 10 B1—Iqll ^ 829 l-R30-R31 hvori R1 betyder H eller H-phe, 15 R30 betyder resten af en neutral, genetisk kodbar L-araino- syre, hvis eventuelt tilstedeværende OH-gruppe kan foreligge fri eller beskyttet med en fysiologisk acceptabel gruppe, og R31 betyder en fysiologisk acceptabel neutral gruppe, som blokerer carboxygruppen, idet dog Des-B30-humaninsulin-20 LeuB30-NH2r Des-B30-humaninsulin-GlyB30-NH2· Des-B30-human-insulin-PheB30-NH2, humaninsulin-(B30)-0CH2CH2-NH2, humaninsulin (B30)-NHCH2CH2-NH2, humaninsulin-(B30)-OCH2CH2-N(CH3)3 og humaninsulin-(B30)-NHCH2CH2-N(CH3)3 er undtaget, og et farmaceutisk acceptabel bærestof.
25 Nogle i stilling B 30 forestrede humaninsuliner samt fremgangsmåder til deres fremstilling er allerede beskrevet som mellemprodukter ved semisyntesen af humaninsulin, Således er humaninsulin-ThrB 30-OBut f.eks. kendt fra US '' patentskrift nr. 4 320 196 og 4 320 197. I GB fremlæggel-
Ti ΊΛ 30 sesskrift nr. 2 069 502 beskrives humaninsulin-Thr -OMe, humaninsulin-ThrB ^®-OEt, humaninsulin-ThrB ^®-o-(2,4,6--trimethylbenzyl) samt humaninsulin-ThrB (Bufc)-OBufc.
Pra EP fremlæggelsesskrift nr. 45 187 kendes humaninsulin--(B 30)-amid.
35 I JP patentansøgning nr. 55-144032 beskrives Des-B30~ svineinsulin-LeuB30-NH2 ( Des-humaninsulin-LeuB30-NH2) DK 172632 B1 3 both værende anvendeligt til behandling af diabetes hos patienter, son er resistente over for insulin.
I Chemical Abstracts, bind 98 (1983) nr. 161148, bind 97 (1982) nr. 138818, og bind 95 (1981) nr. 25640 beskrives 5 modificeringer af den B-kæde-terminale region af insulin.
I den kendte teknik nævnes intet om en forhalet (pro-traheret) virkning, og det m& derfor betragtes som overraskende, at Insulinderivaterne med formlen I er anvendelige til fremstilling af lægemidler, som har en sådan forhalet 10 virkning, således som der vil blive gjort nærmere rede for senere i beskrivelsen.
I dansk patentansøgning nr. 4398/84 bskrives de fire insulinderivater: humaninsulin-(B30)-0CH2CH2-NH2 15 humaninsulin-(B30)-NHCH2CH2-NH2 humaninsulin-(B30)-OCH2CH2-N(ch3)3 humaninsulin-(B30)-NHCH2CH2-N(CH3)3 som er undtaget fra opfindelsens omfang.
' Genetisk koderbare er de følgende L-aminosyrer: 20 'Gly, Ala. Ser, Thr, Val, Leu, Ile, Asp, Asn, Glu, Gin,
Cys, Met, Arg, Lys, His, Tyr, Phe, Trp, Pro (neutrale aminosyrer er understreget).
Ved neutrale grupper, som blokerer den frie car-boxyfunktion, ved den C-terminale ende af B-kæden i de 25 her omhandlede forbindelser, forstås fysiologisk acceptable uladede grupper, især ester- og amidgrupper, eller andre. COOH-beskyttelsesgrupper, som f.eks. beskrives i Bodanszky et al.. Peptide Synthesis, 2. udgave (1976), ; John Wiley & Sons, fortrinsvis grupper med formlen 30 -NRaR^ eller -0RC, .hvori Ra og R*3 er ens eller forskellige og betyder hydrogen, (Cj^-Cg)-alkyl, (C3~Cg)-cycloalkyl, (Cg-C^g)-aryl, (C-j-C^) -aralkyl, (C3~Cg)-heteroaryl eller - (CHj-CHj-O^R, hvori m « 1 til ca. 120, og R = (Cj-C4)--alkyl, idet disse grupper i alkyIdelen også kan være sub-35 stitueret med én eller flere ens eller forskellige substi-tuenter valgt blandt halogen, nitro, (C,-C.)-alkoxy, me-
a ^ *K
thylendioxy og (C^-C^)-alkyl, eller R og R tilsammen be- DK 172632 B1 4 tyder "CCH2]n-, hvor n = 4-6, hvori en methylengruppe også kan være erstattet af 0 eller NH, og Rc betyder (C^-Cg)--alkyl, (C3»Cg)-cycloalkyl, (Cg-C1Q)-aryl, (Cy-Cj^^)-aralkyl, (C3-C9)-heteroaryl eller den ovenfor definerede gruppe 5 (ch2CH2-0-) R, hvor arylgruppen kan være substitueret som ved Ra og R .
Som OH-beskyttelsesgrupper for Ser, Thr og Tyr kan der anvendes fysiologisk acceptable grupper valgt blandt (^-Cgi-alkyi, (C3-Cq)-cycloalkyl, (Cg-C10)-aryl, (Cg-C^)-10 -aralkyl, (Cg-Cg)-heteroaryl, (Cj-CgJ-alkanoyl og (C7-C^J--aroyl eller en anden inden for 'péptidkemien gængs, fysiologisk acceptabel gruppe (j f. f. ek.s.. Bodanszky et ål,, loc, cit.
I den ovennævnte sammenhæng og også i det følgende 15 skal der ved (C^-Cg)-alkyl f.eks. forstås methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert.butyl, amyl eller hexyl, ved (Cg-Cg)-cycloalkyl f.eks. cyclopropyl, cyclobutyl, cyclohexyl osv., ved (Cg-C10)-aryl f.eks. phenyl eller naphthyl, fortrinsvis phenyl, ved (C7 -cn> -aralkyl f.eks.
20 benzyl, phenethyl oSv., ved (Cg-Cg)-heteroaryl f.eks.
pyridyl, pyrrolidyl, pyrimidinyl, morpholinyl, pyrazinyl, imidazolyl, indolyl eller quinolinyl, ved (Cg-Cg)-alka-noyl f.eks. formyl, acetyl, propionyl, butyryl osv., ved (C7~C^)-aroyl f.eks. benzoyl, naphthoyl eller toluyl.
25 Insulinderivater, som i stilling Bl bærer phenyl- alanin, er særlig foretrukne. Endvidere foretrækkes sådanne, som i stilling B30 udviser Ala, Thr eller Ser.
A-Kæden og kæden (B 2 - 30) af de her omhandlede forbindelser udviser hensigtsmæssigt sekvensen af okse- 30 eller svineinsulin, men især sekvensen af humaninsulin.
31
Foretrukne er også insulinderivater, i hvilke R betyder alkoxy eller aralkoxy eller -0(CH2CH2-0)mR.
Foretrukne OH-beskyttelsesgrupper til Ser, Thr eller Tyr er (Cg-Cg) -alkyl, (Cg-Cg)-alkanoyl eller (C7-Cgg)-35 -aralkyl.
DK 172632 B1 5
Blandt de her omhandlede Insulinderivater skal eksempelvis nævnes de nedenstående forbindelser, uden at opfindelsen er begrænset til disse:
Des-Pheb ^svinelnsulin-(b 30)-OBufc,
Bl t 5 Des-Phe -humaninsulin-(B 30)-OBu ,
Des-PheB ^-svinelnsulin-(B 30)-OCH,f
Bl J
Des-Phe -humaninsulin-(B 30)-OBZL,
Svinelnsulin-(B 30)-O-cyclohexy1, 10 Humaninsulin-(B 30) -Q-^^-CH3
Okseinsulin-(B 30)-OCHjr
Svinelnsulin-(B 30)-O-(CH2-CH2-0-)2oC2H5f Humaninsulin-(B 30)-NH-C2H,.
15 Des-ThrB 30-humaninsulin-ValB 30-O-C2H5
Des-ThrB 30-humaninsulin-ValB 30-NH2,
Humaninsulin-(B 30) -1^ 20 Humaninsulin-(B 30)-NH-(CH2-CH2-0)30“CH3,
Humaninsulin-(B 30)-N(CH3)2,
Humaninsulin-(B 30)-OBZL,
Humaninsulin-(B 30)-0-CH2-CH2-^^ , 25 Humaninsulin-Thrk 3®(Et)OEt,
Humaninsulin-Thrb 30{CH3)OCH3,
Humaninsulin-(b 30)-O-[CH2],-CH3,
Humaninsulin-Thr(Ae)O-Et, r
Humaninsulin-Thr(Bz)OBu , 30
Humaninsulin-(B 30)-NH^-^ f
Humaninsulin-(B 30)-0^-^, 35 Humaninsulin-Thr830(FOR)-OPr, .Humaninsulin-(B 30)-NH2· DK 172632 B1 6 insulinderivaterne med formlen (I) kan fremstilles ved, at
a) et Des-octapeptid (B23-30)-insulin med formlen XI
5 Al rS-S-|_A21
S Gly A-kæde Asn -OH
' | ; > (II) 10 f \ B2_ I_I B22
S^R1- Val B-kæde Arg | -OH
hvori R1 betyder Phe eller en binding, og S1 betyder en 15 proton-solvolytisk eller ved (J-eliminering fraspaltelig amino-beskyttelsesgruppe, såsom tert.butyloxycarbonyl--(Boc)-, tert.amyloxycarbony1-(Aoc)- eller methylsulfo-nylethyloxycarbonyl-(Msc)-gruppen, kondenseres med et peptid med formlen III
20 H-Gly-Phe-Phe-Tyr(S1)-Thr(S2)-Pro-Lys(S1)-R30-R31 (III) 30 31 hvori R eller R har de ovenfor angivne betydninger, for sig kendt måde, eller
b) et Des-B30-insulin med formlen I, hvori R1 betyder H eller Η-Phe, og C-endegrupperingen R1®-R1^ tilsammen be-30 tyder OH, i nærværelse af trypsin eller et trypsinlignende endopeptidase omsættes med en forbindelse raed formlen IV
, H-R30-R31 (IV) 35 hvori R30 og R31 har de ovenfor angivne betydninger, og eventuelt tilstedeværende beskyttelsesgrupper dernæst fra- . spaltes på i og for sig kendt måde, og de ifølge a) eller 2 t 3 S betyder hydrogen, Bzl eller Bu , og S betyder en 25 urethanbeskyttelsesgruppe, såsom Boc, Moc, Fraoc eller Z, og tilstedeværende beskyttelsesgrupper fraspaltes på i og DK 172632 B1 7 b) fremstillede forbindelser eventuelt omdannes til deres fysiologisk acceptable salte.
Ved fremgangsmådevariant a) omsættes eksempelvis NaA1,NaB1-Bis-Boc-derivatet af et Des-octapeptid-(B23-30)-5 insulin analogt med den i US patentskrift nr. 4 029 642 beskrevne fremgangsmåde direkte med ét ækvivalent af en forbindelse med formlen III, idet der som kondensationsmiddel anvendes dicyclohexylcarbodiimid i ringe underskud ji nærværelse af 1-hydroxybenzotriazol.
10 Da det ved denne fremgangsmådevariant sædvanligvis ikke er nødvendigt med nogen beskyttelse af carboxylgrup-perne, undgås."' normalt også beskadigelsen af insulinderivatet både ved forestringen og ved den alkaliske forsæbning. Ikke omsat Des-octapeptid og et peptid^ som dan-15 nes ved kondensation af forbindelsen IV til Asp -OH, kan på grund af den forskellige molekylstørrelse og ladningstallet let fraskilles ved fordelingschromatografi på "Sephadex-LH 20" eller ved gelchromatografi på "Sephadex--G 75" eller "G 50 superfine".
20 TU fraspaltning af tert.butylbeskyttelsesgrupperne skal reaktionsproduktet kun behandles med trifluoreddike-syre i 30-60 minutter ved stuetemperatur. Denne reaktion beskadiger ikke insulinderivatet. Når der som N-beskyttelsesgruppe vælges methylsulfonylethyl-oxy-carbonylgruppen, 25 er <jet til fraspaltning ved 3-eliminering nødvendigt med en alkalibehandling. Reaktionsbetingelserne er sådanne (f.eks. 0,1 N NaOH, 0°C, 5 sek.), at insulinderivatet ikke beskadiges. Det som udgangsprodukt anvendte ΝαΑ1,ΝαΒ^--Bis-Boc-Des-B23_3Q**octapeptid-insulin fra svin fremstil-30 les eksempelvis på følgende mådes
Svinelnsulin omsættes i en blanding af dimethyl-formamid, dimethylsulfoxid og vand i nærværelse af N-;-ethylmorpholin med overskydende tert.butyloxycarbonyl-N--hydroxy-succinimidester. Derved dannes det forventede 35 NaAl,NaBl'NéB29-Tris-Boc-insulin.
DK 172632 B1 8
Der sættes nu til opløsningen af denne forbindelse :i dimethylformamid og tris-puffer (pH-værdi 7,5) trypsin i små portioner, indtil der i elektrophoresen ikke længere kan ses noget udgangsprodukt. NaA*,NaB1-Bis-Boc-Des-B23_3g“ 5 -octapeptid-insulinet renses ved fordelingschromatografi på "Sephadex LH 20".
Denne forbindelse bringes nu til at reagere med 1 mol af peptidet med formlen III, som fremstilles på i og for sig kendt måde ifølge peptidkemiens metoder, 1-2 mol 10 . 1-hydroxybenzotriazol og ca. 0,9 mol dicyclohexylcarbodi- imid i dimethylformamid ved en pH-værdi på ca. 7-8 (jf.
Chem. Ber. 103 (1970), side 788).
Råproduktet renses ved fordelingschromatografi og befries for beskyttelsesgrupperne ved behandling med tri-15 'fluoreddikesyre/ånisol ved stuetemperatur. Efter fældning med ether, isoelektrlsk fældning fra vand og chromatografi på "Sephadex-G 75" eller "G 50 superfine" er forbindelsen ; elektroforetisk ren og kan bringes til at krystallisere på ' kendt måde. Det således udvundne insulinderivat er bio- 20 logisk fuldt aktivt.
Bl
Des-Phe -Insuliner som udgangsforbindelser til den her omhandlede fremgangsmåde er f.eks. kendte fra DE patentskrift nr. 20 05 658 eller fra EP fremlæggelsesskrift nr. 46 979.
25 j De ved fremgangsmådevariant b) som udgangsforbin delser anvendte Des-B30-insuliner er f.eks. kendte fra EP fremlæggelsesskrift nr. 46 979 eller fra Hoppe-Seyler's 2. Physiol. Chem. 359 (1978) 799. Det ved variant b) an-'· vendte udgangsmateriale roed formlen IV fremstilles på i 30 og for sig kendt måde ifølge peptidkemiens metoder.
Des-B 30-Insulinet og forbindelsen med formlen IV kondenseres med hinanden analogt med den i US patentskrift nr. 4 320 196 beskrevne fremgangsmåde i nærværelse af trypsin eller en trypsinlignende endopeptidase i et organisk-35 -vandigt opløsningsmiddel-system ved en pH-værdi på 5-9 .og en temperatur på 20-40°C. Det fremkomne insulin-derivat kan isoleres ifølge peptidkemiens gængse metoder.
DK 172632 B1 9
Endvidere kan de her omhandlede forbindelser syntetiseres analogt med de i f.eks. GB fremlæggelsesskrift nr.
2 069 502, EP fremlæggelsesskrift nr. 56 951, WO patentansøgning nr. 82/4069, DE fremlæggelsesskrift nr. 31 29 404 5 eller WO patentansøgning nr. 83/1074 beskrevne semisynte- tiske fremgangsmåder til fremstilling af de kendte insulin--(B 30)-estere.
Aminosyreestere med formlen IV, hvori R31 betyder en alkylpolyoxyethylenoxykæde, fremstilles analogt med den i 10 EP fremlæggelsesskrift nr. 27 161 beskrevne fremgangsmåde.
Andre forbindelser med formlen IV er kendte eller kan fremstilles analogt med kendte fremgangsmåder.
Alle de nævnte insulinderivater med formlen I har tilfælles, at molekylet ved blokeringen af (B 30)-carboxy-15 gruppen "effektivt får en yderligere positiv ladning, som .forsyner det med et i retningen af neutralpunktet forskudt , isoelektrisk punkt. Afhængigt af derivatet måles'iso-elektriske punkter på mellem 5,8 og 7,3 ved isoelektrisk fokusering, penned er derivaterne i_ neutralområdet 20 mindre opløselige end naturligt insulin eller proinsulin> som har deres isoelektriske punkt og dermed området af maksimal uopløselighed ved en pH-værdi på 5,4, medens de i neutralområdet normalt foreligger opløst.
Opløselighedsegenskaberne af Insulin og proinsulin 2 5 , kan påvirkes i området over det Isoelektriske punkt, dvs.
i det terapeutisk særligt interessante neutralområde, ved tilsætning af zinkioner. Zink virker derved som depotprin-• cip på den måde, at det stabiliserer den hexamere til-' stand af insulinet samt dets krystalliseringstendens. I
30 subcutane væv genopløses disse aggregater.
i Et yderligere velkendt depotprincip er krystallise ringen af insulinet eller proinsulinet som kompleks med jet basisk protein, f.eks. globin eller protåmiti.
Ved anvendelsen af proinsulinet I opløsning eller I 35 'forbindelse med et af de beskrevne depotprincipper behøves der en yderligere proteolytisk nedbrydning for at frigøre DK 172632 B1 10 naturligt, fuldt virksomt Insulin. Intakt proinsulin har kun ca. 1/8 af insulinets biologiske virkning, fordi, som det antages, en del af den biologisk aktive overfladeregion, receptor-bindingsregionen, maskeres af det i 5 proinsulinet tilstedeværende C-peptid. Som proinsulin til diabetesbehandling kommer der ganske vist kun homologt, altså kun insulin med menneskelig sekvens, på tale, ijf. DE-Al nr. 32 32 036. Heterologt proinsulin har en væsentlig immunogenitet. Det er i denne sammenhæng 10 bemærkelsesværdigt, at også humane proinsuliner kan udvise variationer i C-peptiddelen.
Det har overraskende vist sig, at insulinderivaterne med formlen I, hvis B-kæde er blokeret C-terminalt, til forskel fra proinsulin i ækvimolære mængde udviser en ca.
15 lige så hej biologisk virkning som naturligt insulin.
Opfindelsen angår endvidere anvendelsen af insulinderivater med formlen I ifølge definitionen ovenfor til fremstilling af et lægemiddel til behandling af diabetes mellitus.
20 De her omhandlede lægemidler repræsenterer nye for halingsprincipper, som kan bringes til virkning uden depothjælpestoffer, såsom zink eller protaminsulfat. Depotvirkningen hidrører fra et iboende, proteinkemisk betinget fysisk princip, tungtopløseligheden af insulinderivatet 25 ved dets isoelektriske punkt. Dets genopløsning under fysiologiske betingelser opnås muligvis ved fraspaltning af den eller de yderligere grupper, f.eks. ved enzymer med iesterase-aktivitet. Den eller de fraspaltede grupper er enten rent fysiologiske metaboliter eller også let meta-30 boliserbare, fysiologisk uskadelige stoffer.
Insulinderivaterne som virksomme stoffer af disse hidtil ukendte lægemidler er heller ikke, til forskel fra [mellemprodukter beskrevet i litteraturen, som endnu inde- I . - holder dele af det heterologe C-peptid, mere immunogene 35 end det tilsvarende insulin selv.
DK 172632 B1 11
De her omhandlede midler indeholder som virksomt stof ét eller flere af insulinderivaterne med formlen I.
De har fortrinsvis en pH-værdi på 2,5-8,5, indeholder et egnet isotonisk middel, et egnet konserveringsmiddel 5 og eventuelt en egnet puffer til et pH-værdiområde på 5,0-8,5.
Et typisk anvendelsesform af de beskrevne derivater udgør præparater, som under det isoelektriske punkt foreligger som opløsninger i en fysiologisk uskadelig bærer.
10 Derved kan pH-værdien af opløsningen typisk være på 4,5 og ligger altså tydeligt højere end pH-værdien af sure "gamle"insuliner (typisk pH-værdi - 3,0). En mere neutral injektionsopløsning frembyder undertiden tydelige fordele med hensyn til dens forenelighed.
15 En anden typisk anvendelsesform er suspensioner af amorfe eller krystallinske bundfald af de beskrevne derivater i en fysiologisk uskadelig barer med en ca. neutral pH-værdi.
Det er dog også muligt at forstærke den i deriva-: terne iboende tungtopløselighed i det fysiologiske pH-20 værdiområde ved yderligere depotprincipper, f.eks. ved tilsætning af zink eller protaminsulfat. Den tilsatte zink- 2+ mængde kan derved andrage op til 100 ug Zn /100 insulin- 2+ enheder, typisk ca. 50 jig Zn /100 insulinenheder. Prota-minmængden kan andrage mellem 0,28 mg og 0,6 mg pr. 100 25 enheder (beregnet på protaminsulfat). På denne måde kan der fremstilles særligt længe virksomme præparater, for hvilke der i fremtiden vil være en bredere anvendelse end •hidtil, fordi" netop en baseTlnvængde' insulin synes tera-'· peutisk fordelagtig. Dette er allerede nu en erkendelse 30 fra behandlingen méd insulindoseringsapparater.
Som fysiologisk uskadeligt og med insulinderivatet acceptabelt bærermedium egner sig en steril opløsning, som I gøres Isotonisk til blod på den gængse måde, f.eks. med glycerol, kogsalt eller glucose, og som desuden indeholder 35 et af de sædvanlige konserveringsmidler, f.eks. phenol, m-cresol eller p-hydroxybenzoesyreester. Bærermediet kan DK 172632 B1 12 yderligere indeholde et pufferstof, f.eks. natriumacetat, natriumcitrat eller natriumphosphat. Til indstilling af pH-værdien anvendes fortyndede syrer (typisk HCl) eller baser (typisk NaOH).
5 Insulinderivaterne kan i de her omhandlede midler også anvendes som alkalimetal- eller som ammoniumsalte.
En vilkårlig andel af ét eller flere insulinderivater med formlen I eller et insulinderivat med formlen I kan i en blanding af andre, af disse insulinderivater uafhængigt af 10 hinanden foreligge i opløst, amorf og/eller krystallinsk form.
Det er undertiden fordelagtigt at sætte en egnet mængde af en egnet stabilisator til det her omhandlede præparat, som forhindrer udfældning af protein ved termisk-15 mekanisk belastning ved kontakt med forskellige materia ler. Sådanne stabilisatorer er f.eks. kendte fra EP fremlæggelsesskrift nr. 18609, fra DE fremlæggelsesskrift nr.
32 40 177 og fra WO patentansøgning 83/00288.
Ved de her omhandlede midler, som også kan indeholde 20 et af de kendte forhalingsprincipper, f.eks. protaminsul-fat, globin eller zink i egnede mængder, kan et sådant forhalingsprincip anvendes i kombination med den samlede andel af virksomt stof eller med dele deraf eller ét eller flere insulinderivater med formlen I i blanding. Et middel 25 kan indeholde forskellige insulinderivater med formlen I i kombination med flere forskellige hjælpestoffer, der !virker forhalende.
De her omhandlede lægemidler kan foruden insulinderivaterne med formlen I også indeholde naturligt insulin 30 og/eller proinsulin og/eller des-Phe-insulin uafhængigt af hinanden i opløst, amorf og/eller krystallinsk form.
Med de her omhandlede terapeutiske midler kan der altså tydeligvis opnås mangfoldige og meget fint afstemmelige virkningskarakteristikker, som ifølge de tidligere 35 gjorte bemærkninger skulle være forbundet med fremskridt, især med henblik på diabetiske senkomplikationer.
DK 172632 B1 13
De følgende eksempler tjener til en yderligere beskrivelse af opfindelsen.
Fremstillingseksempel 1 5
Humaninsulin-(B30)-0-CH2-CH2-CH3 5 g Svineinsulin opløses i 45 ml dimethylformamid, 25 ml dimethylsulfoxid, 0,5 ml N-ethylmorpholin og 2,5 ml 10 vand. Under omrøring tilsættes ved stuetemperatur 1,5 g tert.butyloxycarbonyl-N-hydroxysuccinimid, og der omsættes i 6 timer. Derpå stoppes der ved tilsætning af en dråbe iseddike, og produktet udfældes med ether og frafiltreres. Remanensen opløses i 360 ml dimethylformamid og fortyndes 15 med 320 ml tris-puffer (0,05 M, 0,01 M CaCl2, pH-værdi 7,5). Ved 36°C tilsættes med 1 times mellemrum portioner på 20 mg trypsin.
Efter ialt 12 tilsætninger indstilles der med eddikesyre på en pH-værdi på 4,5, og opløsningen inddampes. Den 20 efterfølgende rensning af materialet på en "Sephadex-LH
20"-sØjle (8 x 200 cm) ved hjælp af fordelingschromatogra-fi i systemet n-butanol-lseddike-vand (2:1:10) giver 3,25 g NaA1,NaB^'-Bis-Boc-Des-B23_3Q-octapeptid-insulin (svin), . som ved sur jog basisk elektroiorese ikke længere"viser 25 noget udgangsmateriale. Aminosyreanalysen af stoffet er korrekt. Efter en prøvevis fraspaltning af BOC-gruppeme findes der ikke længere nogen insulinaktivitet. Dette materiale (3,25 g) opløses i 30 ml dimethylformamid sammen '· med 100 mg l-hydroxybenzotriazol, 750 mg HC1-Gly-Phe-Phe-30 -Tyr(But)-Thr-Pro-Lys(Boc)-Thr(But)-OCH2CH2-CH3 og 0,5 ml N-ethylmorpholin. Derpå tilsættes der ved stuetemperatur 120 mg dicyclohexylcarbodiimid, og reaktionsblandingen om-,røres i 24 timer. Det udskilte dicyclohexylurinstof fra-filtreres, og produktet udfældes ved ethertilsætning.
35 DK 172632 B1 14
Bundfaldet frafiltreres, vaskes med ether og tørres.
Materialet forrenses ved fordelingschromatografi på "Sepha-dex-LH 20" i det ovennævnte system. 2,6 g Materiale fra hovedtoppen isoleres ved fældning med acetone/ether. Det 5 tørrede, endnu ubeskyttede derivat omsættes med en blanding af 5 ml trifluoreddikesyre og 1 ml aniso1 i 60 minutter ved stuetemperatur. Fra den med is afkølede opløsning udfældes dernæst råmaterialet ved tilsætning af ether. Det tørrede bundfald opløses i vand, udfældes med vandigt 10 ammoniak og centrifugeres. Rensningen af produktet sker i 10%'s eddikesyre over "Sephadex-G 50 superfine" eller "G 75". Fra fraktionerne af den ønskede top kan humaninsulin--(B30)-OCHjCHjCHj isoleres ved frysetørring (udbytte efter krystallisation: 1,2 g). Det således udvundne insulinderivat 15 viser veden biologisk test en virkning,_dér er ækvivalent med virkningen af humaninsulin.
Fremstillingen af octapeptidet med formlen III sker ifølge det følgende kondensationsskema ifølge gængse peptid-kondensationsmetoder : 20 25 30 35 DK 172632 B1 15
Synteseskema for octapeptidet med formlen III
Cly Phe_Phe Tyr Thr__Pro Lys Thr 5 Z-OH H OBufc DCCVHOBt Z------OBufc H /Pd Bufc BOC Bufc 10 Z -OH H----03ufc 2 /oH H OHe Z Zqh j'/opr
: DCC/BOBt DCC/J103: DCC/H03L
{ Bufc [ BOC I Bu1 Z--:--OBu1, zZ----Cite 2 L---/oPr TFE H0/Pd H0/Pd 15 i 2*. 2 .. ^ Bul BOC ( ar Z--OM kZ—----OMe Z-OH HcZ---^Pr DCC/HOBt DCC/HOBt ' I Bufc I BOC Bub 20 .2--:-----X-L-—1 CMe Z--.-Z-Z)Pr
Na OH lypd
Bufc| BOC I Bufc |Z----Z-1—OH H---Z-’-/opr ! DCC/H03; 25 ; Bufc J BOC Bub Z _________Z__________Z__/q Pr ! i2/Pd
j Bufc I BOC BuU
30 IfijL-__Jl_J__1___L__J/0Pr
Aminosyre- og elementæranalyse svarer til de teore-35 tiske værdier.
DK 172632 B1 16 Lægemidler Eksempel 1
Insulin-(B 30)-OCH3 fra svin (fremstillet semisynte-5 tisk af Des-B 30-svineinsulin) i svagt sur, opløst formulering med 40 I.E. pr. ml og dets depot-virkning:
Der opløses i et samlet volumen på 10 ml vand
Insulin-(B 30)-OCH3 fra svin 14,5 mg 10 (27,5 I.E./mg)
Druesukker (monohydrat) kryst. 540,0 mg p-Hydroxybenzoesyremethylester 10,0 mg pH-Værdien indstilles til 4,5 ved tilsætning af 1 N 15 HC1 hhv. 1 N NaOH.
En sådan opløsning viser ved en dosering på-0,4 I.E./-kg hos kaniner en udpræget depot-virkning. Arealet under blodsukkerkurven er det samme som'for et standardpræparat med 40 I.E./ml.
20
Eksempel 2
Humaninsulin-ThrB 30(But)OBut (P = 6,8) fremstillet ved semisyntese ud fra svineinsulin.1 neutral formulering med 40 I.E. pr. ml og dets depot-virkning: 25 Der opløses I et samlet volumen på 10 ml vand .Humaninsulin-ThrB 30(But)OBut 14,8 mg (27 I.E./mg) Nåtriumdihydrogenphosphat-dihydrat 21,0 mg 30 m-Cresol 27,0 mg
Glycerol 160,0 mg pH-værdien indstilles til 7,3 ved tilsætning af 1 HC1 hhv. 1 N NaOH.
35 En sådan suspension viser ved en dosering på 0,4 I.E./kg hos kaniner en udpræget depot-virkning.
DK 172632 B1 17
Eksempel 3
Humaninsulin-(B 30}-NH2 fremstillet ud fra svineinsulin ved semisyntese i form af et krystallinsk NPH-præparat med 40 I.E./ml og dets stærkt forhalede virkning: 5 Der opløses 1 et samlet volumen på 10 ml med vand:
Humaninsulin-(B 30)-NH2 14,5 mg {27,5 I.E./mg)
Protaminsulfat 1,3 mg 10 Natriumdihydrogenphosphat-dihydrat 21,0 mg m-Cresol 15,0 mg
Phenol 6,0 mg
Glycerol 160,0 mg
15 pH-Værdien indstilles til 7,3 ved tilsætning af 1 N
HC1 hhv. 1 N NaOH..
En sådan krystalsuspension viser ved en dosering på 0,4 I.E./kg hos kaniner en stærkt forhalet virkning.
20 Eksempel 4 B31
Blanding af humaninsulin-Arg- -OH og humaninsulin--ThrB 30Bufc(OBut) begge fremstillet ved semisyntese ud fra svineinsulin i form af en zlnkholdig suspension med 40 I.E./-ml og dens stærkt forhalede virkning.
25 Der opløses i et samlet volumen på 10 ml med vand: B31
·. Humaninsulin-Arg- -OH
(27,5 I.E./mg) 7,3 mg
Humaninsulin-ThrB 30But(OBut) 30 (27,0 I.E./mg) 7,4 mg
Zinkchlorid, vandfrit _0,46 mg
Natriumacetat 14,0 mg p-Hydroxybenzoesyremethylester 10,0 mg
Kogsalt 80,0 mg 35 pH-Værdien Indstilles til 7,0 ved tilsætning af 1 N HCl hhv. 1 N NaOH.
DK 172632 B1 18
En sådan suspension viser ved en dosering på 0/4 I*E./kg hos kaniner en stærkt forhalet virkning.
Eksempel 5 5 Humaninsulin-(B 30)-O-(CHjCHj-O-)2oC2H5 frerostillet ved semisyntese ud fra svineinsulin i form af et neutralt præparat med 100 I.E./ml og dets forhalede virkning:
Der opløses i et samlet volumen på 10 ml med vand: 10 Humaninsulin-(B 30)-O-(CHjCHj-O-)2oC2H5 (24,0 I.E./mg) 41,7 mg
Natriumacetat 14,0 mg p-Hydroxybenzoesyremethylester 10,0 mg
Kogsalt 80,0 rag 15
Der indstilles til en pH-værdi på 7,0 ved tilsætning af 1 N HC1 hhv. 1 N NaOH,
En sådan suspension viser hos kaniner en forhalet virkning.
20 25 30 35
Claims (16)
1. Lægemiddel med forhalet virkning til behandling af diabetes mellitus, bestående af mindst ét Insulinderivat med formlen I Al S~l_A21 H-l Giv A-kæde Asn -OH ^ , l B2_l__I_ B29 R1-!Val B-Kgae |-R30-R31 5 hvori R1 betyder H eller H-phe, R30 betyder resten af en neutral, genetisk kodbar L-amlnosyre, hvis eventuelt tilstedeværende OH-gruppe kan foreligge fri eller beskyttet med en fysiologisk acceptabel gruppe, og
10 R31 betyder en fysiologisk acceptabel neutral gruppe, som blokerer carboxygruppen, idet dog Des-BSO-humanlnsulin-Leu^-NH* Des-B30-humaninsuiin-GIyB30-NH2, Des-B30-humaninsulin-PheB30-NH2, humaninsulin-(B30)-OCH2CH2-NH2, humaninsulin-(B30)-NHCH2CH2-NH2l humaninsulin-(B30)-OCH2CH2-N(CH3)3 og humaninsulin-(B30)-NHCH2CH2-N(CH3)3 er undtaget, 15 og et farmaceutisk acceptabel bærestof.
2. Middel ifølge krav 1, kendetegnet ved, at i insuiinderivatet med formlen I betyder R1 H-Phe.
3. Middel ifølge et af kravene 1 eller 2, kendetegnet ved, at i insulinderivatet med formlen I betyder R30 Ala, Thr eller Ser. 2Q 4. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-3, kendetegnet ved, at i insu linderivatet med formlen I udviser A-kæden og kæden (B2-29) sekvensen af humanin-suiin.
5. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-4, kendetegnet ved, at i insulinderivatet med formlen I betyder R31 en gruppe med formlen -NR'Rb eller -ORc, hvori 25 R* og Rb er ens eller forskellige og betyder hydrogen, C(1-6)-alkyl, C(3-8)-cycloalkyl. C(6-10)-aryl, C(7-11)-aralkyi, C(3-9)-heteroaryl eller -(CH2-CH2-0)mR med m = 1 til ca. 120, og R = C(1-4)-alkyl, idet disse grupper i alkyldelen også kan være substituerede DK 172632 B1 20 med én eller flere ens eller forskellige substituenter fra rækken halogen, nitro, C(1-4)-alkoxy, methylendioxy og C(1-4)-alkyl, eller R* og Rb sammen betyder -[CHJn med n » 4-6, hvori en methylengruppe også kan være erstattet med O eder NH, og Rc betyder C(1-6)-alkyl, C(3-8)-cycloalkyl, C(6-10)-aryl, C(7-11)-aralkyl, C(3-9)-heteroaryl eller 5 den ovenfor definerede gruppe (CH2CH2-0-)mR, idet arylgmppeme kan være substituerede som ved R* og Rb.
6. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-5, kendetegnet ved, at i insulinderivatet med formlen I betyder R31 -0-(CH2-CH2-0-)mR, idet m og R har den i krav 5 angivne betydning.
7. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-6, kendetegnet ved, at i Insu linderivatet med formlen I betyder R31 C(1-6)-alkoxy eller C(7-11)-ara!koxy.
8. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-7, kendetegnet ved, at i Insulinderivatet med formlen I er en i R30 eventuelt forekommende OH-gruppe fri eller beskyttet med C(1-6)-alkyl, C(1-6)-a!kanoyl eller C(7-11)-aralkyl. 15 Θ. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-8, kendetegnet ved, at det har en pH-værdi mellem 2,5 og 8,5, Indeholder et egnet isotoniseringsmiddel og et egnet konserveringsmiddel, og at insulinderivatet med formlen I foreligger opløst og/eller i suspension.
10. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-9, kendetegnet ved, at dette 20 indeholder en egnet puffer, og pH-værdien ligger mellem 5,0 og 8,5.
11. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-10, kendetegnet ved, at dette indeholder mellem 0 og 100 pg zink/1001.U.
12. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-11,kendetegnet ved, at det aktive stof med formlen I foreligger i form af et alkalimetalsalt eller ammoniumsalt.
13. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-12, kendetegnet ved, at en vilkårlig andel af ét eller flere insulinderivater med formlen I foreligger i en blanding af andre af disse Insulinderivater uafhængigt af hinanden i opløst, amorf og/eller krystallinsk form.
14. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-13, kendetegnet ved, at 30 dette indeholder en egnet mængde af et hjælpemiddel med forhalende virkning.
15. Middel ifølge krav 14, kendetegnet ved, at dette forhalingsprincip anvendes i kombination med den samlede andel aktivt stof eller med dele deraf eller ét eller flere Insulinderivater med formlen I i en blanding. DK 172632 B1 21
16. Middel ifølge et eller flere af kravene 1-15, kendetegnet ved, at det indeholder forskellige insulinderivater med formlen I i kombination med flere forskellige hjælpstoffer med forhalende virkning.
17. Anvendelse af insulinderivater med formlen I ifølge definitionen i ét eller 5 flere af kravene 1 -8 til fremstilling af et lægemiddel til behandling af diabetes mellitus.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3334407 | 1983-09-23 | ||
| DE19833334407 DE3334407A1 (de) | 1983-09-23 | 1983-09-23 | In position b 30 modifizierte insulin-derivate, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung sowie pharmazeutische mittel zur behandlung des diabetes mellitus |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK453084D0 DK453084D0 (da) | 1984-09-21 |
| DK453084A DK453084A (da) | 1985-03-24 |
| DK172632B1 true DK172632B1 (da) | 1999-03-22 |
Family
ID=6209839
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198404530A DK172632B1 (da) | 1983-09-23 | 1984-09-21 | Lægemiddel til behandling af diabetes mellitus og anvendelse af insulinderivater til fremstilling af et sådant lægemiddel |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0137361B1 (da) |
| JP (1) | JPS6094999A (da) |
| KR (1) | KR850002287A (da) |
| AT (1) | ATE52791T1 (da) |
| AU (1) | AU573624B2 (da) |
| CA (1) | CA1247545A (da) |
| DE (2) | DE3334407A1 (da) |
| DK (1) | DK172632B1 (da) |
| ES (1) | ES8505647A1 (da) |
| FI (1) | FI843695L (da) |
| GR (1) | GR80441B (da) |
| HU (1) | HUT36843A (da) |
| IE (1) | IE57669B1 (da) |
| IL (1) | IL73021A (da) |
| NO (1) | NO843799L (da) |
| NZ (1) | NZ209620A (da) |
| PT (1) | PT79249A (da) |
| ZA (1) | ZA847440B (da) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3326472A1 (de) * | 1983-07-22 | 1985-02-14 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Neue insulin-derivate, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung sowie pharmazeutische mittel zur behandlung des diabetes mellitus |
| DE3327928A1 (de) * | 1983-08-03 | 1985-02-21 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur herstellung von insulin-derivaten |
| DE3333640A1 (de) * | 1983-09-17 | 1985-04-25 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur herstellung von insulin-derivaten, deren b-kette c-terminal verlaengert ist, neue basisch modifizierte insulin-derivate diese enthaltende mittel und ihre verwendung |
| DE3827533A1 (de) * | 1988-08-13 | 1990-02-15 | Hoechst Ag | Pharmazeutische zubereitung zur behandlung des diabetes mellitus |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2069502A (en) * | 1936-04-21 | 1937-02-02 | American Floor Surfacing Mach | Sanderplane |
| US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
| DE2433883C2 (de) * | 1973-07-20 | 1986-03-27 | Research Corp., New York, N.Y. | Verwendung von physiologisch aktiven Polypeptiden |
| DK147437A (en) * | 1980-02-11 | 1900-01-01 | Process for preparing human insulin or threonine B30 esters of human insulin, or a salt or complex thereof | |
| JPS5767548A (en) * | 1980-10-14 | 1982-04-24 | Shionogi & Co Ltd | Insulin analog and its preparation |
| DE3101382A1 (de) * | 1981-01-17 | 1982-09-02 | Hoechst Ag, 6000 Frankfurt | "verfahren zur herstellung von humanisulin oder dessen derivaten aus schweineinsulin oder dessen derivaten" |
| DE3333640A1 (de) * | 1983-09-17 | 1985-04-25 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur herstellung von insulin-derivaten, deren b-kette c-terminal verlaengert ist, neue basisch modifizierte insulin-derivate diese enthaltende mittel und ihre verwendung |
-
1983
- 1983-09-23 DE DE19833334407 patent/DE3334407A1/de not_active Withdrawn
-
1984
- 1984-09-17 HU HU843491A patent/HUT36843A/hu unknown
- 1984-09-17 AT AT84111058T patent/ATE52791T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-09-17 DE DE8484111058T patent/DE3482265D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1984-09-17 EP EP84111058A patent/EP0137361B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1984-09-20 FI FI843695A patent/FI843695L/fi not_active Application Discontinuation
- 1984-09-21 IE IE2415/84A patent/IE57669B1/en not_active IP Right Cessation
- 1984-09-21 ES ES536115A patent/ES8505647A1/es not_active Expired
- 1984-09-21 ZA ZA847440A patent/ZA847440B/xx unknown
- 1984-09-21 DK DK198404530A patent/DK172632B1/da not_active IP Right Cessation
- 1984-09-21 AU AU33419/84A patent/AU573624B2/en not_active Ceased
- 1984-09-21 GR GR80441A patent/GR80441B/el unknown
- 1984-09-21 JP JP59196962A patent/JPS6094999A/ja active Pending
- 1984-09-21 NZ NZ209620A patent/NZ209620A/en unknown
- 1984-09-21 IL IL73021A patent/IL73021A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-09-21 NO NO843799A patent/NO843799L/no unknown
- 1984-09-21 CA CA000463810A patent/CA1247545A/en not_active Expired
- 1984-09-21 KR KR1019840005799A patent/KR850002287A/ko not_active Application Discontinuation
- 1984-09-21 PT PT79249A patent/PT79249A/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU573624B2 (en) | 1988-06-16 |
| EP0137361A2 (de) | 1985-04-17 |
| ES536115A0 (es) | 1985-06-01 |
| DK453084D0 (da) | 1984-09-21 |
| GR80441B (en) | 1985-01-21 |
| CA1247545A (en) | 1988-12-28 |
| ZA847440B (en) | 1985-05-29 |
| ES8505647A1 (es) | 1985-06-01 |
| EP0137361B1 (de) | 1990-05-16 |
| DK453084A (da) | 1985-03-24 |
| IE842415L (en) | 1985-03-23 |
| ATE52791T1 (de) | 1990-06-15 |
| FI843695A0 (fi) | 1984-09-20 |
| NZ209620A (en) | 1988-03-30 |
| IE57669B1 (en) | 1993-02-24 |
| NO843799L (no) | 1985-03-25 |
| EP0137361A3 (en) | 1987-05-06 |
| DE3334407A1 (de) | 1985-04-04 |
| DE3482265D1 (de) | 1990-06-21 |
| PT79249A (de) | 1984-10-01 |
| FI843695L (fi) | 1985-03-24 |
| AU3341984A (en) | 1985-03-28 |
| IL73021A0 (en) | 1984-12-31 |
| KR850002287A (ko) | 1985-05-10 |
| HUT36843A (en) | 1985-10-28 |
| IL73021A (en) | 1989-09-10 |
| JPS6094999A (ja) | 1985-05-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK172209B1 (da) | Lægemidler indeholdende basisk modificerede insulinderivater | |
| US4608364A (en) | Pharmaceutical agent for the treatment of diabetes mellitus | |
| JP6931033B2 (ja) | インスリン受容体部分アゴニスト | |
| DK172462B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af et insulinderivat | |
| JP2000504732A (ja) | インスリン誘導体類とその使用 | |
| EP0254516A2 (en) | Novel Peptides | |
| DK158677B (da) | Insulinderivater og anvendelsen deraf, injicerbar oploesning indeholdende insulinderivaterne samt fremgangsmaade til fremstilling af oploesningen. | |
| EP2720711A1 (en) | Multi substituted insulins | |
| JP3131215B2 (ja) | 新規インスリン誘導体 | |
| CZ301377B6 (cs) | Analogy inzulínu, zpusob jejich prípravy a farmaceutické prípravky obsahující tyto analogy | |
| DK172632B1 (da) | Lægemiddel til behandling af diabetes mellitus og anvendelse af insulinderivater til fremstilling af et sådant lægemiddel | |
| JPH0592996A (ja) | 心房性ナトリウム利尿因子活性をもつペプチド | |
| KR920005659B1 (ko) | 인슐린 유도체의 제조방법 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PBP | Patent lapsed |
Country of ref document: DK |