DK172481B1

DK172481B1 - Fremgangsmåde til selektiv methylering af erythromycin A-derivater

Info

Publication number: DK172481B1
Application number: DK198501523A
Authority: DK
Inventors: Kaoru Sota; Yoshiaki Watanabe; Shigeo Morimoto; Masami Goi; Morihiro Mitsukuchi; Takashi Adachi; Jozi Nakagami; Toshifumi Asaka; Tadashi Eguchi
Original assignee: Taisho Pharma Co Ltd
Priority date: 1984-04-06
Filing date: 1985-04-03
Publication date: 1998-11-23
Also published as: FI77250C; KR850007434A; FI77250B; GEP19960318B; DE3571323D1; AU4037885A; PT80237B; KR910007572B1; SU1577700A3; ES8602839A1; JPH053475B2; EP0158467A2; HK99694A; AR240833A1; EP0158467B1; DK152385A; ZA852349B; DK152385D0; EP0158467A3; CA1225637A

Description

i DK PR 172481 B1

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til selektiv methylering af en hydroxylgruppe ved 6-stillingen i erythromycin A-derivater.

6-O-methylerythromyciner er værdifulde som antibakteriel-5 le midler eller som mellemprodukter ved fremstillingen af antibakterielle midler. F.eks. er 6-O-methylerythromycin A ikke kun stabil under sure betingelser, men udviser også en stærk antibakteriel virkning, når den sammenlignes med erythromycin A. Specielt viser denne forbindelse en 10 udmærket virkning til behandling af infektioner ved peroral administrering, og forbindelsen er derfor et værdifuldt antibakterielt middel.

Da erythromycin A imidlertid har mange hydroxylgrupper, hvilket fremgår af følgende formel I, er det vanskeligt 15 at methylere kun en speciel hydroxylgruppe ved 6-stillin-gen selektivt.

n-ch3

9 I . OH H-0vA

ΗΟγ ]---^οΛη3 h°-tL 1 20 «Γ>ι C2Hs sAh 'o CH3 0CH3

Som tidligere anvendt fremgangsmåde til methylering af hydroxylgruppen ved 6-stillingen af erythromycin A kendes 25 en metode til fremstilling af 6-0-methylerythromycin A-derivat, der består i omsætning af et erythromycin A-derivat, der er substitueret med benzyloxycarbonylgrupper ved et hydrogenatom i 2'-hydroxylgruppen og en methyl-gruppe ved 3’-dimethylaminogruppen, med et methylerende 2 DK PR 172481 B1 middel i nærværelse af en base i et polært aprotisk opløsningsmiddel for at methylere hydroxylgruppen ved 6-stillingen (USA patentskrift nr. 4 331 803). Ved denne metode opnås imidlertid forskellige slags forbindelser, 5 der er methylerede ved hydroxylgrupper ud over 6-stillin-gen sammen med 6-0-methylformen, og der kræves derfor ved denne metode komplicerede oprensningsmetoder af den ønskede 6-0-methylform, og udbyttet af 6-0-methylformen er ringe.

10 Ved den foreliggende opfindelse tilvejebringes en fremgangsmåde til selektiv methylering af en hydroxylgruppe ved 6-stillingen i et erythromycin A-derivat, der er ejendommelig ved, at et erythromycin A-derivat, som har almindelige substituentgrupper i stedet for hydrogenato-15 met i 2’-hydroxylgruppen og/eller en methylgruppe i 3’-dimethylaminogruppen omdannes til et erythromycin A

9-oxim-derivat, og at det fremstillede erythromycin A

9-oxim-derivat omsættes med et methylerende middel.

Udtrykket "erythromycin A 9-oxim-derivat" betyder et ery-20 thromycin A-derivat, der ved 9-stiliingen udviser den almene formel RON = C < 9 (II) hvori R betegner et hydrogenatom eller en substituent som f.eks. en lavere alkylgruppe (f.eks. en methylgruppe, en 25 ethylgruppe, en n-propylgruppe eller en isopropylgruppe), en lavere alkenylgruppe (som f.eks. en allylgruppe), en arylsubstitueret methylgruppe (f.eks. en benzylgruppe, en p-methoxybenzylgruppe, en p-chlorbenzylgruppe, en m- chlorbenzylgruppe, en o-chlorbenzylgruppe, en 2,4-di-30 chlorbenzylgruppe, en p-brombenzylgruppe, en m-nitrobenz-ylgruppe, en p-nitrobenzylgruppe, en benzhydrylgruppe, en tritylgruppe eller en 1-naphthylmethylgruppe), en substitueret oxyalkylgruppe (f.eks. en methoxymethylgruppe, en 3 DK PR 172481 B1 (2-methyxyethoxy)methylgruppe, en (2-ethoxyethoxy)methyl-gruppe, en (2-methylpropoxy)methylgruppe, en 2-chloreth-oxymethylgruppe, en 2,2,2-trichlorethoxymethylgruppe, en 2-ethoxyethylgruppe, en benzyloxymethylgruppe eller en p-5 chlorphenoxyethylgruppe), en substitueret alkylgruppe (f.eks. en (1,3-dioxolan-2-yl)methylgruppe eller 3,3-di-methyl-2-oxobutylgruppe) eller en substitueret thiome-thylgruppe (f.eks. en methylthiomethylgruppe, en ethyl-thiomethylgruppe eller en phenylthiomethylgruppe).

10 I en udførelsesf orm for den foreliggende opfindelse omdannes et erythromycin A-derivat til et erythromycin A 9-oxim-derivat med formlen (II), hvori R betegner et hydrogenatom, ved en velkendt metode (f.eks. som beskrevet i engelsk patentskrift nr. 1 100 504) eller ved metoden 15 beskrevet ovenfor. Det fremstillede erythromycin A 9-oximderivat med formlen (II), hvori R betegner hydrogenatom, omsættes med en forbindelse R'X (hvori R' betegner R bortset fra et hydrogenatom), eller erythromycin A omsættes med en O-substitueret hydroxylamin for at omdan-20 ne til erythromycin A 9-oxim-derivatet med formlen (II), hvori R er forskellig fra et hydrogenatom ved en kendt metode (f.eks. som beskrevet i USA patentskrift nr.

4 349 545) eller ved metoden lig med den ovenfor beskrevne. Eksempler på forbindelsen R'X er lavere alkylhalo-25 genider (f.eks. methyliodid, ethyliodid, n-propyliodid eller isopropylbromid), lavere alkenylhalogenider (f.eks. allylbromid), arylsubstituerede methylhalogenider (f.eks.

N

benzylchlorid, p-methoxybenzylchlorid, p-chlorbenzylchlo-rid, m-chlorbenzylchlorid, o-chlorbenzylchlorid, 2,4-di-30 chlorbenzylchlorid, p-brombenzylbromid, m-nitrobenzyl-chlorid, p-nitrobenzylchlorid, benzhydrylchlorid, trityl-chlorid eller 1-naphthylmethylchlorid), substituerede oxyalkylhalogenider [f.eks. methoxymethylchlorid, (2-me-thoxyethoxy )methylchlorid, ( 2-ethoxyethoxy Jmethylchlorid, 35 (2-methylpropoxy )methylchlor id, 2-chlorethoxymethylchlo- 4 DK PR 172481 B1 rid, 2,2,2-trichlorethoxymethylchlorid, 2-ethoxyethyl-chlorid, benzyloxymethylchlorid eller p-chlorphenoxy-ethylchlorid], substituerede alkylhalogenider [f.eks.

(1,3-dioxolan-2-yl)methylchlorid eller 3,3-dime- 5 thyl-2-oxobutylchlorid], nitrilforbindelser (f.eks. brom-acetonitril eller β-chlorpropionitril) eller substituerede thiomethylhalogenider (f.eks. methylthiomethylchlorid, ethylthiomethylchlorid eller phenylthiomethylchlorid ).

Et erythormycin A 9-oxim-derivat opløses i et opløsnings-10 middel, et methylerende middel og en base tilsættes, og blandingen omrøres ved -15 til 40 °C, fortrinsvis fra O °C til stuetemperatur, i 0,5 til 5 timer til opnåelse af et 6-0-methylerythromycin A 9-oxim-derivat. Idet man kontrollerer reaktionens fremadskriden ved hjælp af tyndt-15 1agschromatografi eller væskechromatografi med stor ha stighed udføres omsætningen, indtil tilstedeværelse af erythromycin A 9-oxim-derivatet knapt kan afsløres. For at opnå 6-0-methylerythromycin A 9-oxim-derivatet fremstillet på denne måde tilsættes efter reaktionens afslut-20 ning vand til reaktionsopløsningen. Krystallerne af 6-O-methylerythromycin A 9-oxim-derivat, der udfælder, fra-filtreres. Alternativt ekstraheres reaktionsopløsningen med ikke-hydrofilt organisk opløsningsmiddel. Eventuelt udføres yderligere oprensning med silicagel-søjlechroma-25 tografi eller omkrystallisation.

Når der anvendes erythromycin A 9-oxim-derivatet med formlen (II), hvori R betegner et hydrogenatom, til me-thylering, fås der 6-0-methylerythromycin A 9-oxim-derivatet med formlen (II), hvori R betegner en methylgruppe.

30 Foretrukne anvendte opløsningsmidler ved methyleringen er polære aprotiske opløsningsmidler, som dimethylsulfoxid, N,N-dimethylformamid, hexamethylphosphortriamid, en blanding bestående af to eller flere af disse opløsningsmid- 5 DK PR 172481 B1 ler eller en blanding bestående af en af disse opløsningsmidler og f.eks. tetrahydrofuran eller 1,2-dime-thoxyethan eller lignende. Foretrukne opløsningsmidler er en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1), 5 en blanding af dimethylsulfoxid og 1,2-dimethoxyethan (1:1) eller N,N-dimethylformamid.

Eksempler på methylerende midler er methylhalogenider, som f.eks. methyliodid eller methylbromid; dimethylsul-fat, methyl-p-toluensulfonat eller methylmethansulfonat.

10 Skønt 1,0 til 10 mol ækvivalenter af det methylerende middel kan anvendes pr. mol erythromycin A 9-oxim-deri-vat, er det sædvanligvis tilstrækkeligt at anvende 1,0 til 2,6 mol ækvivalenter af midlet.

Eksempler på basen er kaliumhydroxid, natriumhydrid eller 15 kaliumhydrid. 1,0 til 1,7 mol ækvivalenter, fortrinsvis 1,0 til 1,2 mol ækvivalenter af basen kan anvendes pr. mol erythromycin A 9-oxim-derivat. Basen tilsættes ad en eller flere gange.

Tilstedeværelsen af 0-methylgruppen ved 6-stillingen i 6-20 0-methylerythromycin A 9-oxim-derivatet kan afsløres ved den karakteristiske top i NMR spektret.

6-0-methylerythromycin A 9-oxim-derivater og erythromycin A 9-oxim-derivater kan eksistere i syn-formen, anti-for-men eller som en blanding af syn- og anti-form.

25 Eksempler på substituenten i stedet for en methylgruppe ved 3'-dimethylaminogruppen i erythromycin A-derivatet, der anvendes som udgangsmateriale, er alkoxycarbonylgrup-per (f.eks. en methoxycarbonylgruppe, en ethoxycarbonyl-gruppe, en isopropoxycarbonylgruppe, en n-propoxycarbo-30 nylgruppe, en n-butyloxycarbonylgruppe, en isobutyloxy-carbonylgruppe, en see.-butyloxycarbonylgruppe, t-butyl- 6 DK PR 172481 B1 oxycarbonylgruppe, en 2-ethylhexyloxycarbonylgruppe, en cyclohexyloxycarbonylgruppe eller en methyloxycarbonyl-gruppe), alkoxyalkoxycarbonylgrupper (f.eks. en methoxy-methoxycarbony1gruppe, en ethoxymethoxycarbonylgruppe, en 5 2-methoxyethoxycarbonylgruppe, en 2-ethoxyethylcarbonyl- gruppe, en 2-ethoxyethoxycarbonylgruppe, en 2-butoxy-ethoxycarbonylgruppe eller en 2-methoxyethoxymethoxycar-bonylgruppe), halogenalkoxycarbonylgrupper (f.eks. en 2-chlorethoxycarbonylgruppe, en 2-chlorethoxycarbonyΙ-ΙΟ gruppe eller en 2,2,2-trichlorethoxycarbonylgruppe), umættede alkoxycarbonylgrupper (f.eks. en allyloxycarbo-nylgruppe, en propargyloxycarbonylgruppe, en 2-butenoxy-carbonylgruppe eller en 3-methyl-2-butenoxycarbonylgrup-pe), substituerede benzyloxycarbonylgrupper (f.eks. en 15 benzyloxycarbonylgruppe, en p-methylbenzyloxycarbonyl- gruppe, en p-methoxybenzyloxycarbonylgruppe, en p-nitro-benzyloxycarbonylgruppe, en 2,4-dinitrobenzyloxycarbonyl-gruppe, en 3,5-dimethylbenzyloxycarbonylgruppe, en p-chlorbenzyloxycarbonylgruppe eller en p-brombenzyloxy-20 carbonylgruppe) og substituerede phenoxycarbonylgrupper (f.eks. en phenoxycarbonylgruppe, en p-nitrophenoxycarbo-nylgruppe, en o-nitrophenoxycarbonylgruppe, en 2,4-dini-trophenoxycarbonylgruppe, en p-methylphenoxycarbonylgrup-pe, en m-methylphenoxycarbonylgruppe, en o-bromphenoxy-25 carbonylgruppe, en 3,5-dimethylphenoxycarbonylgruppe, en p-chlorphenoxycarbonylgruppe eller en 2-chlor-4-nitro-phenoxycarbonylgruppe). Eksempler på substituentgruppen 1 stedet for et hydrogenatom ved 2'-hydroxylgruppen er car-bonylgrupper som beskrevet ovenfor, acylgruppe, der sæd-30 vanligvis anvendes inden for den organiske syntese (f.eks. lavere alkylmonocarbonylgrupper som en acetyl-gruppe, en propionylgruppe, en butyrylgruppe eller en isobutyrylgruppe; lavere alkenylmonocarbonylgrupper, som f.eks. en acryloxygruppe eller en methacryloxygruppe; la-35 vere alkoxycarbonylalkylcarbonylgrupper, som f.eks. en methoxycarbonylmethylcarbonylgruppe, en ethoxycarbonylme- 7 DK PR 172481 B1 thylcarbonylgruppe eller en ethoxycarbonylethylcarbonyl-gruppe; acrylcarbonylgrupper, som £.eks. en benzoylgrup-pe, en p-methoxybenzoylgruppe, en 3,4,5-trimethoxybenzo-ylgruppe, en p-chlorbenzoylgruppe, en 2,4-dichlorbenzoyl-5 gruppe, en 3,5-dichlorbenzoylgruppe, en diphenylacetyl-gruppe, en 1-naphthalenacetylgruppe eller en 2-naphtha-lenacetylgruppe). Disse erythromycin A-derivater fremstilles ved behandling af erythromycin A med et tilsvarende carbonylchlorid, acylchlorid eller syreanhydrid ef-10 ter almindeligt anvendte metoder.

Som angivet ovenfor muliggør den foreliggende opfindelse at udføre selektiv methylering ved kun en hydroxylgruppe ved 6-stillingen i erythromycin A, der hidtil har været vanskeligt, og forbindelserne udgør hidtil ukendte anti-15 bakterielle midler eller mellemprodukter, som gør det muligt at fremstille 6-0-methylerythromycin A, der er anvendelige som antibakterielle midler. F.eks. kan et 6-0-methylerythromycin A 9-oxim-derivat underkastes de-oxime-rende behandling til opnåelse af et 6-0-methylerythro-20 mycin A-derivat på almindelig måde. Eventuelt kan den udføres for at fjerne substituentgrupper ved et hydrogenatom i 2'-hydroxylgruppen og/eller en methylgruppe i 3'-dimethylaminogruppen efterfulgt af N-methylering før eller efter ovennævnte de-oximering.

25 Opfindelsen beskrives nærmere i følgende eksempler og referenceeksempler .

EKSEMPEL 1

Fremstilling af 2t-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-deme-thylerythromycin A 9-oxim 30 Til 300 ml tør methanol sattes 49,4 g 2'-0,3'-N-bis(benz-yloxycarbonyl )-N-demethylerythromycin A, 17,4 g hydroxyl-aminhydrochlorid og 18,73 imidazol, og blandingen omrør- DK PR 172481 B1

B

tes 3 dage ved stuetemperatur. Det meste af opløsningsmidlet afdampedes, remanensen udhældtes i 700 ml mættet vandig natriumbicarbonatopløsning, og blandingen ekstra-heredes to gange med 500 ml ethylacetat. Ethylacetatlage-5 ne blev slået sammen, der vaskedes 3 gange med 300 ml mættet vandig natriumchloridopløsning, og der torredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet inddampedes til opnåelse af en urenset forbindelse, der herefter omkrystalliseredes med en blanding af chloroform og pe-10 troleumsether, hvorved der opnåedes 34,67 g af titelforbindelsen med et smeltepunkt 149-151 °C

Elementaranalyse for Cs2H78N20 17

Beregnet:(%): C 62,26 H 7,84, N 2,79 Fundet (%): C 61,92, H 7,58, N 2,72.

15 EKSEMPEL 2

Fremstilling af 2'-0,3 '-N-bls(benzyloxycarbonyl)-N’-deme-thylerythromycin A 9-[0-(m-nltrobenzyl)oxim] I 30 ml acetone opløstes 5 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycar-bonyl )-N-demethylerythromycin A 9-oxim, 0,94 g m-nitro-20 benzylchlorid og 0,362 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 2 timer.

Opløsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk. Remanensen tilsattes 100 ml mættet vandig natriumbicarbonatopløsning, og blandingen ekstraheredes 3 gange med 150 25 ml ethylacetat. De organiske opløsningsmiddellag blev slået sammen, der vaskedes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes, og den fremstillede urensede forbindelse rensedes ved silicagel-søjle-30 chromatografi ("Wako" gel C-200 fremstillet af Wako Junyaku Co. , idet der anvendtes en blanding af benzen og 9 DK PR 172481 B1 ethylacetat (3:1) som elueringsmiddel), hvorved 4,79 g af titelforbindelsen opnåedes, der ved omkrystallisation med en blanding af ethylacetat og n-hexan smeltede ved 108-110 °C.

5 På samme måde fremstilledes følgende forbindelser: 2'-0,3’-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-methyloxim] med smeltepunkt 118-121 °C; 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-ethyloxim] med smeltepunkt 112-114 °C;

10 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A

9-[O-isopropyloxim] med smeltepunkt 103-105 °C; 2 ' -0,3' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(p-methoxybenzyl)oxim] med smeltepunkt 100-102 °C; 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 15 9-[0-(m-chlorbenzyl)oxim] med smeltepunkt 99-100 °C; 2 ' -0,3' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(1-naphthylmethyl)oxlm] med smeltepunkt 187-189 °C.

EKSEMPEL-3

Fremstilling af 2'-0,3 *-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-deme-20 thylerythromycin A 9-[0-(p-brombenzyl )oxlm] I- 80 ml acetone opløstes 20,0 g 2 *-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl )-N-demethylerythromycin A 9-oxim, 6,0 g p-brom-benzylbromid, og 1,23 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 2 timer ved stuetemperatur.

25 Oparbejdning som beskrevet i eksempel 2 gav den urensede forbindelse, der ved omkrystallisation med en blanding af diethylether og petroleumether gav 21,3 g af titelforbindelsen med et smeltepunkt 100-102 °C.

DK PR 172481 B1 ίο På samme måde opnåedes følgende forbindelser: 2’-O,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-(n-propyl)oxim] med smeltepunkt 109-111 CC; 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 5 9-[0-(p-chlorbenzyl)oxim] med smeltepunkt 127-130 °C; 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O—(2,4-dichlorbenzyl)oxim] med smeltepunkt 94,5-96 °C; 2' -0,3' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(p-nitrobenzyl)oxim] med smeltepunkt 119-121 °C.

10 EKSEMPEL 4

Fremstilling af 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-deme-thylerythromycln A 9-[0-(methoxymethyl)oxim] I 20 ml tetrahydrofuran opløstes 1 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-oxim og 0,1 ml 15 methylchlormethylether, 58 mg 50% natriumhydrid tilsattes, og blandingen omrørtes 15 minutter ved stuetemperatur .

Efter reaktionens afslutning fortyndedes blandingen med 100 ml ethylacetat, og 100 ml vand tilsattes. Det organi-20 ske lag fraskiltes, der vaskedes med en mættet vandig na-triumbicarbonatopløsning og derefter med en vandig natri-umchloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magne-

S

siumsulfat. Efter afdampning af opløsningsmidlet rensedes det fremstillede urensede produkt ved hjælp af silica-25 gel-søjlechromatografi ("Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (10:1 - 5:1) som elueringsmiddel, og omkrystallisation med en blanding af acetone og n-hexan gav 590 mg af titelforbindelsen som krystaller, der smeltede ved 101-104 °C.

11 DK PR 172481 B1 På samme måde fremstilledes følgende forbindelser: 2' -0,3 ' -N-bis (benzyloxycarbonyl) -N-demethylerythromycin A 9-[0-(methylthiomethyl )oxim] med smeltepunkt 101-104 °C; 2 ’ -0, 3' -N-bis (benzyloxycarbonyl) -N-demethylerythromycin A 5 9-[0-(2,2,2-trichlorethoxymethyl)oxim] med smeltepunkt 108-111 °C; 2’ -0,3' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(benzyloxymethyl)oxim] med smeltepunkt 122-124 °C.

EKSEMPEL 5 10 Fremstilling af 21-0,3 ’-N-bls(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzyloxim]

I 150 ml tør Ν,Ν-dimethylformamid opløstes 20,06 g 2'-0,3’ -N-bis (benzyloxycarbonyl) -N-demethylerythromycin A

9-oxim og 3,37 g benzylchlorid, 1,25 g 60% natriumhydrid 15 tilsattes, og blandingen omrørtes 1 time. Reaktionsopløsningen udhældtes i 600 ml mættet vandig natriumbicarbo-natopløsning. Blandingen ekstraheredes 1 gang med 300 ml ethylacetat og med 200 ml af samme opløsningsmiddel. Ethylacetatlaget vaskedes 3 gange med 300 ml mættet van-20 dig natriumchloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes, og den fremstillede urensede forbindelse rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck Co., idet man anvendte en blanding af ethylacetat 25 og n-hexan (1:21:1) som elueringsmiddel], hvorved 17,92 g af titelforbindelsen opnåedes, der herefter yderligere omkrystalliseredes med en blanding af ethylacetat og pe-troleumsether, smp. 105-107 °C.

På samme måde fremstilledes følgende forbindelser: 12 DK PR 172481 B1 2'-O,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzhydryloxim]; 2'-0,3'-N-bls(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-( 2-methoxyethoxy)methyloxim] med smeltepunkt 99-104 5 °C.

EKSEMPEL 6

Fremstilling af 2 1-0,3’-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O—(o-chlorbenzyl)oxim] 1 60 ml N,N-dimethylformamid opløstes 13 g 2'-0,3'-N-bis- 10 (benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-oxim, 2,30 g o-chlorbenzylchlorid, og 0,941 g 85% natriumhydroxidpulver tilsattes under isafkøling, og blandingen omrørtes 2 timer.

Efter reaktionens afslutning udhældtes blandingen i 400 15 ml vand, og de udfældede krystaller frafiltreredes og vaskedes med vand. Krystallerne vaskedes yderligere med 100 ml 10% vandig ethanolopløsning, og der tørredes til opnåelse af 14,02 g af titelforbindelsen i form af krystaller, der ved yderligere omkrystallisation med en blanding 20 af ethylacetat og n-hexan smeltede ved 111-113 °C.

EKSEKPEL 7

Fremstilling af 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl>-N-deme-tjhylerythromycln A 9-[O-trltyloxim] 2 ml N, N-dimethylformamid opløstes 1,0 g 2'-0,3'-N-bis-25 (benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-oxim, 1,0 g tritylchlorid, og 1 ml triethylamin tilsattes, og blandingen omrørtes i 5 timer ved 80-100 °C. Efter reaktionens afslutning udhældtes blandingen i 300 ml vand, og der ekstraheredes med methylenchlorid. Methylenchloridla-30 get vaskedes med mættet vandig natriumchloridopløsning.

13 DK PR 172481 B1 og der tørredes over vandfrit natriumsulfat. Efter afdampning af opløsningsmidlet rensedes den urensede forbindelse ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako” gel C-200, idet der anvendtes en blanding af 5 ethylacetat og n-hexan (1:2) som elueringsmiddel], hvorved der opnåedes 0,80 g af titelforbindelsen med smeltepunkt 126-128 °C.

EKSEMPEL 8

Fremstilling af 2'-0,3'-N-bls(benzyloxycarbonyl)-N-deme-10 thylerythromycin A 9-oxim (den anden oximisomer af forbindelsen fremstillet 1 eksempel 1)

Den ved omkrystallisationen i eksempel 1 opnåede moderlud koncentreredes under reduceret tryk til tørhed, og remanensen påførtes en silicagel-søjle ["Wako" gel C-200, 15 idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og n-hexan (2:1) som elueringsmiddel]. Fraktionerne, der viste Rf-værdi 0,21 ved tyndtlags-chromatografianalyse [tyndtlags-plade silicagel 60 F254 fremstillet af Merck Co., idet der anvendtes en blanding af chloroform og methanol (20:1) 20 som opløsningsmiddel til fremkaldning] opsamledes, og der koncentreredes til tørhed under reduceret tryk, hvorved der opnåedes 3,0 g af samme titelforbindelse som i eksempel 1.

Herefter indsamledes fraktioner, der viste Rf-værdi 0,12, 25 og der koncentreredes til tørhed under reduceret tryk, hvorved der opnåedes 540 mg af titelforbindelsen i form af et hvidt skum, der smeltede ved 115-130 °C.

Det blev ved tyndtlags-chromatografi afsløret, at en del af denne forbindelse var isomeriseret til titelforbindel-30 sen fra eksempel 1 i chloroform eller ved opvarmning. Yderligere var det vanskeligt at rense forbindelsen ved 14 DK PR 172481 B1 omkrystallisation, og denne forbindelse udviste intet klart smeltepunkt.

EKSEMPEL 9

Fremstilling af 2'-0, 3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-deme-5 thylerythromycin A 9-[0-benzyloxim] (den anden oxlmlsomer af titelforbindelsen fra eksempel 5) I 1,5 ml tør N,N-dimethylformamid opløstes 250 mg 2'-0, 3 ' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-oxim (den anden oximisomere af titelforbindelsen fra 10 eksempel 1), fremstillet i eksempel 8, og 65 mg benzyl-chlorid, 25 mg 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og hele blandingen omrørtes under isafkøling i 2 timer. Blandingen udhældtes i 10 ml vand, der ekstraheredes med ethylacetat, vaskedes med mættet vandig natriumchloridop-15 løsning og tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Efter afdampning af opløsningsmidlet påførtes den urensede forbindelse en silicagel-søjle ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (6:1) som elu-eringsmiddel].

20 De fraktioner, der viste Rf-værdi 0,57 ved tyndt-lags-chromatograf ianalyse [ tyndt lagsplade 60 F254 frem stillet af Merck Co. , idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (3:1) som opløsningsmiddel til frem-kaldning], indsamledes, og der koncentreredes til tørhed, 25 hvorved der opnåedes 50 mg af samme forbindelse som titelforbindelsen i eksempel 5.

Herefter indsamledes fraktioner, der viste Rf-værdi 0,48, og der koncentreredes til tørhed under reduceret tryk, hvorved der opnåedes 150 mg af titelforbindelsen, der ved 30 omkrystallisation med diethylether smeltede ved 144-147 °c.

15 DK PR 172481 B1

Det blev afsløret ved tyndtlags-chromatografianalyse, at denne forbindelse ikke forandrede sig i chloroform eller ved opvarmning.

EKSEMPEL 10 5 Fremstilling af erythromycin A 9-[0-methyloxim]-2'-(3,4,5-trimethoxy)benzoat I 200 ml acetone opløstes 2,6 g erythromycin A 9-[O-me-thyloxim] , 1,72 g 3,4,5-trimethoxybenzoylchlorid, og der tilsattes 2,86 g natriumbicarbonat, hvorefter blandingen 10 opvarmedes 11 timer med tilbagesvaling. Efter reaktionens afslutning afdampedes opløsningsmidlet under reduceret tryk. Remanensen tilsattes vand, og blandingen ekstrahe-redes med methylenchlorid. Det organiske lag vaskedes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, og der tørredes 15 over vandfrit magnesiumsulfat.

Afdampning af opløsningsmidlet under reduceret tryk gav den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved sili-cagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck , Co., idet der anvendtes en blanding af chloroform og ace- 20 tone (4:1) som elueringsmiddel], herved opnåedes 1,85 g af titelforbindelsen med smeltepunkt 127-130 °C.

EKSEMPEL 11

(1) Fremstilling af 3' -N-benzyloxycarbonyl-N-demethylery-trhromycln A

25 I 250 ml methylenchlorid opløstes 29 g N-demethylerythro-mycin A, og 27,8 ml triethylamin og 7,5 g benzyloxycarbo- | nylchlorid tilsattes under isafkøling.

i I Blandingen omrørtes 5 timer ved 0-5 °C, og der koncentre redes til ca. 50 ml. Der tilsattes 800 ml vand, og de ud- i • 30 fældede krystaller frafiltreredes, hvorved der opnåedes

P

16 DK PR 172481 B1 20 g af titelforbindelsen, der herefter ved omkrystallisation med en blanding af ethylacetat og n-hexan smeltede ved 157-158 °C.

(2) Fremstilling af 3'-N-benzyloxycarbonyl-N-demethylery-5 thromycin A 9-oxim

Til 75 ml vandfrit methanol sattes 12,55 g 3’-N-benzyl-oxycarbonyl-N-demethylerythromycin A fremstillet ovenfor under punkt (1), herudover tilsattes 5,11 g hydroxylamin-hydrochlorid og 5,5 g imidazol, og blandingen omrørtes 52 10 timer ved stuetemperatur. Det meste af opløsningsmidlet afdampedes, remanensen udhældtes i 200 ml mættet vandig natriumbicarbonatopløsning, og der ekstraheredes 3 gange med 350 ml ethylacetat.

Ethylacetatlagene blev slået sammen, der vaskedes to gan-15 ge med 300 ml mættet vandig natriumchloridopløsning og tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes, og den urensede fremstillede forbindelse rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, en blanding af ethylacetat og n-hexan 20 (1:2-3:1) som elueringsmiddel], hvorved 8,6 g af titel forbindelsen opnåedes, der ved omkrystallisation med en blanding af ethylacetat og petroleumsether smeltede ved 169,5-170,5 °C.

EKSEMPEL 12 25 Fremstilling af 31-N-benzyloxycarbonyl-N-demethylerythro-mycin A 9-[O-benzyloxlm] 30 ml tør Ν,Ν-dimethylformamid opløstes 4,79 g 3'-N-benzyloxycarbonyl-N-demethylerythromycin A 9-oxim, 1,4 g benzylchlorid og 0,92 g kaliumiodid, og 0,55 g 85% kali-30 umhydroxidpulver tilsattes under isafkøling, hvorefter der omrørtes 2 timer ved stuetemperatur.

IV

DK PR 172481 B1

Blandingen behandledes som beskrevet i eksempel 6, idet den urensede forbindelse rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet man anvendte en blanding af benzen og acetone (40:1) som elueringsmid-5 del], herved opnåedes 4,55 g af titelforbindelsen, der ved omkrystallisation med Isopropanol havde smeltepunktet 110-113 °C.

EKSEMPEL 13

Fremstilling af 2'-O-benzyloxycarbonylerythromycln A 9-10 [O-benzyloxlm]

Til 10 ml acetone sattes 1,14 g erythromycin A 9-[0-benz-yloxim], 277 mg benzyloxycarbonylchlorid og 137 mg natri-umbicarbonat, og blandingen omrørtes 3 timer ved stuetemperatur til opnåelse af fuldstændig omsætning. Efter re-15 aktionens afslutning afdampedes acetonen, og remanensen ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakten vaskedes med en mættet vandig bicarbonatopløsning og herefter med mættet vandig natriumchloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes, og 20 remanensen rensedes ved silicagel-søjlechromatografi ["Wako” gel C-200, ethylacetat som elueringsmiddel], og der omkrystalliseredes med en blanding af diethylether og n-hexan, hvorved der opnåedes 1,093 g af titelforbindelsen med et smeltepunkt 155-157 °C.

25 EKSEMPEL 14

Fremstilling af erythromycin A 9-[Q-(o-chlorbenzyl )oxim] 1,498 g erythromycin A 9-oxim, 354 mg o-chlorbenzylchlo-rid og 168 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 100 ml N,N-dime-thylformamid omrørtes 1,5 timer ved stuetemperatur for at 30 opnå fuldstændig omsætning.

18 DK PR 172481 B1

Herefter udhældtes blandingen i 500 ml isvand, og der ekstraheredes med ethylacetat. Ekstrakten vaskedes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampe-5 des, og remanensen rensedes ved silicagel-søjlechromato-grafi ["Wako" gel C-200, ethylacetat som elueringsmid-del], og der omkrystalliseredes med n-hexan, hvorved 1,562 g af titel forbindelsen opnåedes med smeltepunkt 114-117 °C.

10 Til en blanding af 5 g af den således fremstillede forbindelse og 5,77 g natriumbicarbonat i 8,5 ml dioxan sattes dråbevis 8,14 ml benzyloxycarbonylchlorid under omrøring ved 55-65 °C. Blandingen omrørtes 1 time ved 65 °C.

Efter reaktionens afslutning tilsattes reaktionsblandin-15 gen 10 ml dichlormethan. Den fremstillede blanding filtreredes, og filtratet fortyndedes med 80 ml n-hexan, hvorved der opnåedes 5,92 g 2'-0,3'-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(o-chlorbenzyl )oxim] i form af krystaller. Forbindelsen var identisk med forbin-20 delsen fremstillet i eksempel 6 ud fra smeltepunkt, IR og NMR.

EKSEMPEL 15

Fremstilling af 2'-O-benzyloxycarbonylerythromycln A 9-[O-(o-chlorbenzyl)oxim] 25 Til 15 ml acetone sattes 1,5 g erythromycin A 9-[0-(o-

N

chlorbenzyl)oxim] , 438 mg benzyloxycarbonylchlorid og 216 mg natriumbicarbonat. Herefter behandledes blandingen som beskrevet i eksempel 13, de fremkomne krystaller omkrystalliseredes med en blanding af diethylether og n-hexan, 30 hvorved der opnåedes 1,248 g af titelforbindelsen med smeltepunkt 156-160 °C.

Fremstilling af 6-Q-methyl-2 ' -O, 3 * -N-bls(benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-methyloxim] EKSEMPEL 16 19 DK PR 172481 B1 I 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydro-5 furan (1:1) opløstes 1,02 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-methyloxim]. Til opløsningen sattes 341 mg methyliodid og 100 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og blandingen omrørtes 2 timer ved stuetemperatur for at omsættes. Efter reaktionens afslutning 10 tilsattes 100 ml mættet vandig natriumbicarbonatopløs-ning, og blandingen ekstraheredes med 100 ml ethylacetat og herefter med 50 ml af samme opløsning. Ethylacetatla-get vaskedes 3 gange med 100 ml mættet vandig natrium-chloridopløsning, og der tørredes over vandfrit magnesi-15 umsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk, og den tilbageblevne remanens rensedes ved silica-gel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet en blanding af ethylacetat og n-hexan (1:1) anvendtes som opløsningsmiddel], hvorved der opnåedes 0,82 g af titelforbin-20 delsen i form af et hvidt skum.

Elementaranalyse for Cj^gjNjOi·,

Beregnet (%): C 62,89, H 8,02, N 2,72 Fundet (%): C 62,48, H 7,93, N 2,65.

EKSEMPEL 17 > 25 Fremstilling af 6-0-methyl-2 ' -0,3 * -N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-ethyloxim]

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 og anvende 1,028 g 2 ' -0,3' -N-bis (benzyloxycarbonyl ) -N-demethylery-thromycin A 9-[O-ethyloxim], 341 mg methyliodid og 100 mg 30 85% kaliumhydroxidpulver i 12 ml af en blanding af di methylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1), fremstilledes 20 DK PR 172481 B1 1,05 g af den urensede forbindelse, der herefter ved om-krystallisation med en blanding af diethylether og n-hexan gav 0,85 g af titel forbindelsen i form af krystaller, der smeltede ved 105-108 °C.

5 Elementaranalyse for C55H84N2017

Beregnet (%): C 63,20, H 8,10, N 2,68 Fundet (%): C 63,23, H 7,84, N 2,72.

EKSEMPEL 18

Fremstilling af 6-Q-methyl-2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-10 ny1)-N-demethylerythromycin A 9-[Q-(n-propyl)oxlm]

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 og anvende 1,042 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery-thromycin A 9-[0-(n-propyl)oxlm], 370 mg methyliodid og 100 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 12 ml af en blanding af 15 dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) til udførsel af omsætningen, fremstilledes der 1,13 g af den urensede forbindelse, der herefter ved rensning på samme silica-gel-søjle som i eksempel 16 gav 0,52 g af titelforbindelsen som et hvidt skum.

20 Elementaranalyse for CséHe6N2Oj 7

Beregnet (%): C 63,49, H 8,18, N 2,65 Fundet (%): C 63,53, H 8,10, N 2,75.

EKSEMPEL 19

Fremstilling af 6-Q-methyl-2'-0,3'-N-bis(bengyloxycarbo-25 nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-isopropyloxlml

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 og anvende 0,44 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery-thromycin A 9-[0-isopropyloxim], 144 mg methyliodid og 21 DK PR 172481 B1 41,8 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 6 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) udførtes omsætningen. Oparbejdning på sædvanlig måde efterfulgt af rensning under anvendelse af silicagel-søjlechromatograf i 5 som i eksempel 16 gav 0,36 g af titelforbindelsen som et hvidt skum.

Elementaranalyse for CS6He6K2017

Beregnet (%): C 63,49, H 8,18, N 2,65 Fundet (%): C 63,39, H 7,86, N 2,72.

10 EKSEMPEL 20

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3'-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(methoxymethyl)oxim]

Til 10 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrof uran (1:1) sattes 1,0 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-15 nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(methoxymethyl)oxim], 320 mg methyliodid og 95 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og blandingen omrørtes 45 minutter ved stuetemperatur for at omsættes. Oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 gav den urensede forbindelse, der herefter ved omkrystallisa-20 tion med en blanding af acetone og n-hexan gav 705 mg af titelforbindelsen i form af krystaller, der smeltede ved 197-199 °C.

Elementaranalyse for C55He4N20

IB

Beregnet (%): C 62,25, H 7,98, N 2,64 25 Fundet (%): C 62,25, H 7,99, N 2,75.

Fremstilling af 6-Q-methyl-2'-O,3'-N-bis(benzyloxycarbo nyl ) -N-demethylerythromycin A 9-[O-(methylthiomethyl ) - oxim] EKSEMPEL 21 22 DK PR 172481 B1 5 Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 og anvende 230 mg 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromy-cin A 9-[O-(methylthiomethyl )oxim] , 98 mg methyliodid og 20 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 4 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) for at opnå re-10 aktion, og idet man arbejdede på almindelig måde, opnåedes der 230 mg af den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, methylenchlorid som elueringsmiddel], hvorved der opnåedes 98 mg af titelforbindelsen som et hvidt skum.

15 NMR (CDC13) δ: 2,23 (3H, -SCH3), 3,07 (3H, 6-OCH3), 5,08 (2H, -0CH2S-).

EKSEMPEL 22

Fremstilling af 6-Q-methyl-21-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl )-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzyloxim] 20 Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 og anvende 1,09 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery thromycin A 9-[O-benzyloxim], 341 mg methyliodid og 99 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) omsattes blandin-25 gen. Oparbejdelse efterfulgt af rensning under anvendelse af silicagel-søjlechromatograf i gav 830 mg af titel forbindelsen som et hvidt skum, der ved omkrystal11sation med en blanding af diethylether og petroleumsether smeltede ved 154,5-156 °C.

30 23 DK PR 172481 B1

Elementaranalyse for C50H86N2O17

Beregnet (%): C 65,08, H 7,83, N 2,53 Fundet (%): C 64,76, H 7,83, N 2,53.

EKSEMPEL 23 5 Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3’-N-bis(benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9- [O- (p-methoxybenzyl )oxim] 5,6 g 2' -0, 3' -N-bis(benzyloxycarbonyl) -N-demethylerythromycin A 9-[0-(p-methoxybenzyl )oxim] , 1,7 g methyliodid og 995 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 60 ml af en blanding af 10 dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) omrørtes 3,5 timer for at omsættes. Oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 gav 6 g af den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og 15 n-hexan (1:2) som elueringsmiddel], herved opnåedes 4,3 g af titelforbindelsen som et hvidt skum.

Elementaranalyse for C6lH88N2018

Beregnet (%): C 64,41, H 7,80, N 2,46 Fundet (%): C 63,67, H 7,67, N 2,46.

20 EKSEMPEL 24

Fremstilling af 6-0-methyl-2' -0, 3' -N-bis( benzy loxycarbonyl ) -N-demethylerythromycin A 9-[O-(p-chlorbenzyl )oxim]

Til 100 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrof uran (1:1) sattes 8,3 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-25 nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-( p-chlorbenzyl )oxim] , 2,5 g methyliodid og 730 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og blandingen omrørtes 2 timer for at omsættes. Oparbejdelse som beskrevet i eksempel 16 gav den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved silicagel-søjlechromatografi 24 DK PR 172481 B1 ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (50:1 - 25:1) som elueringsmiddel] , herved opnåedes 7,5 g af titelforbindelsen som et hvidt skum.

Elementaranalyse for C60H85ClN2O17 5 Beregnet (%): C 63,12, H 7,50, N 2,45 Fundet (%): C 62,96, H 7,40, N 2,49.

EKSEMPEL 25

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3'-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[Q-(m-chlorbenzyl )oxim] 10 1,12 g 2’ -0, 3 '-N-bis( benzyloxycarbonyl)-N-demethylery- thromycin A 9-[0-(m-chlorbenzyl)oxim], 320 mg methyliodid og 73 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) omrørtes 2 timer ved stuetemperatur for at omsættes. Ved oparbejd-15 ning som beskrevet i eksempel 16 opnåedes den urensede forbindelse, der herefter blev renset med silicagel-søj-lechromatografi ["Wako" gel C-200, methylenchlorid som elueringsmiddel] og gav 1,13 g af titel forbindelsen i form af krystaller, der smeltede ved 86-94 °C.

20 Elementaranalyse for C80H85C1N2017

Beregnet (%): C 63,12, H 7,50, N 2,45 Fundet (%): C 62,96, H 7,47, N 2,43.

EKSEMPEL 26

Fremstilling af 6-Q-methyl-2'-0,31-N-bis( benzyloxycarbo-25 nyl) -N-demethylerythromycin A 9-[Q-(o-chlorbenzyl )oxitn] 50 ml N, H-dimethylformamid opløstes 13 g 2 *-0, 3'-N-bis-(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(o-chlorbenzyl)oxim], 2,1 g methyliodid og 0,827 g 25 DK PR 172481 B1 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes under isafkøling, og blandingen omrørtes i 5 timer. Efter reaktionens afslutning udhældtes blandingen i 400 ml vand, de udfældede krystaller frafiltreredes, der vaskedes med 100 ml 10% 5 vandig ethanolopløsning og tørredes. Den urensede opnåede forbindelse omkrystalliseredes med isopropanol, hvorved der opnåedes 10,27 g af titelforbindelsen i form af krystaller, der smeltede ved 191-193 °C.

Elementaranalyse for C60HesClN2O17 10 Beregnet (%): C 63,12, H 7,50, N 2,45 Fundet (%): C 63,10, H 7,39, N 2,52.

EKSEMPEL 27

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[Q-(p-brombenzyl)oxim] 15 11,72 g 2’-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery- thromycin A 9-[0-(p-brombenzyl)oxim] , 3,41 g methyliodid og 990 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 120 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) omrørtes 1 time ved stuetemperatur for at omsættes. Ved opar-20 bejdning som beskrevet i eksempel 16 opnåedes den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af sili-cagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og n-hexan (1:2) som elueringsmiddel], herved opnåedes 10,45 g af titelforbin-25 dfelsen som et hvidt skum, der smeltede ved 98-103 °C.

Elementaranalyse for C60H8SBrN2O17

Beregnet (%): C 60,75, H 7,22, N 2,39 Fundet (%): C 60,92, H 7,02, N 2,37.

Fremstilling af 6-Q-methyl-2’-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycln A 9-[0-(2,4-dichlorbenzyl )- oxim] EKSEMPEL 28 26 DK PR 172481 B1 5 Til 48 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahy-drofuran (1:1) sattes 4,044 g 2’-0,3’-N-bis(benzyloxycar-bonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O- ( 2,4-dichlorbenzyl) -oxim], 1,33 g methyliodid og 380 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og herefter omrørtes blandingen for at omsættes.

10 Omsætning i 45 timer efterfulgt af oparbejdning som beskrevet i eksempel 1 gav den urensede forbindelse, der herefter omkrystalliseredes med en blanding af diethylet-her og n-hexan, hvorved der opnåedes 3,5 g af titel forbindelsen som krystaller, der smeltede ved 180-181 °C.

15 Element ar analyse for C60H84C12N2017

Beregnet (%): C 61,27, H 7,20, N 2,38 Fundet (%): C 61,34, H 7,04, N 2,45.

EKSEMPEL 29

Fremstilling af 6-0-methyl-2*-0,3 *-N-bis(benzyloxycarbo-20 nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzhydryloxim] 940 mg 2’ -0, 3' -N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery thromycin A 9-t0-benzhydryloxim] omsattes med 350 mg methyliodid og 92 mg 85% kaliumhydroxid i 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) under 25 omrøring i 1 time. Oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 gav den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og n-hexan (1:2) som elueringsmiddel], herved opnåedes 620 mg af titelfor-30 bindeisen.

EKSEMPEL 30 27 DK PR 172481 B1

Fremstilling af 6-0-methyl-2 '-0, 3'-N-bls( benzyloacycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-trityloxlm]

Til 4 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahy-5 drofuran (1:1) sattes 450 mg 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycar-bonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-trityloxim], 123 mg methyliodid og 30 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og blandingen omrørtes 3 timer for at omsættes. Efter omsætningen oparbejdedes som beskrevet i eksempel 16, og herved 10 opnåedes den urensede forbindelse, der derefter rensedes ved silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes methylenchlorid som elueringsmiddel] , herved opnåedes 270 mg af titelforbindelsen.

EKSEMPEL 31 15 Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0, 3'-N-bls( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycln A 9-[0-benzyloxim] I 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydro-furan (1:1) opløstes 547 mg 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzyloxim] og 1,37 g 20 methyliodid, der tilsattes 34 mg 60% natriumhydrid, og blandingen omrørtes 1 time for at omsættes. Ved oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 opnåedes den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck 25 Co. , idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og n-hexan (1:3) som elueringsmiddel], herved opnåedes 383 rag af titelforbindelsen.

Denne forbindelse var identisk med forbindelsen fremstillet i eksempel 22 med hensyn til smeltepunkt, IR og NMR.

30

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-O,3'-N-bis(benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-(o-chlorbenzyl)oxim] EKSEMPEL 32 28 DK PR 172481 B1 I 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydro-5 furan (1:1) opløstes 1,1 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(o-chlorbenzyl)oxim], 0,23 ml dimethylsulfat og 98 mg 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 90 minutter for at omsættes. Oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 gav den 10 urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck Co., idet der anvendtes methylenchlorid som elue-ringsmiddel], herved opnåedes 760 mg af samme forbindelse som i eksempel 26.

15 EKSEMPEL 33

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3'-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(m-nitrobenzyl)oxim] 1 20 ml N,N-dimethylformamid opløstes 2,97 g 2'-0,3,-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(m-20 nitrobenzyl)oxim], 0,444 g methyliodid og 0,132 g 95% natriumhydroxidpulver tilsattes under isafkøling, og blandingen omrørtes 1,5 timer under afkøling for at omsættes.

Efter omsætningen tilsattes 70 ml ethylacetat, og den fremkomne blanding vaskedes 5 gange med 100 ml mættet 25 vbndig natriumchloridopløsning og tørredes over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet afdampedes, og remanensen rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet en blanding af benzen og ethylacetat (3:1) anvendtes som elueringsmiddel], herved opnå-30 edes 2,023 g af titelforbindelsen som et hvidt skum.

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-O,31-N-bis (benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(p-nitrobenzyl)oxim1 EKSEMPEL 34 29 DK PR 172481 B1

Til 250 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahy-5 drofuran (1:1) sattes 20,2 g 2’-0,31-N-bis( benzyloxycar-bonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-(p-nitrobenzyl)- oxim], 3,02 g methyliodid og 1,41 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes under afkøling, og blandingen omrørtes 1,5 timer for at omsættes. Yderligere 2,52 g methyliodid 10 og 0,586 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 2 timer. Efter reaktionens afslutning oparbejdedes og rensedes som beskrevet i eksempel 33, hvorved der opnåedes 5,78 g af titelforbindelsen.

EKSEMPEL 35 15 Fremstilling af 6-0-methyl-2 1-0, 3 '-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9 - [0-( 1-naphthylmethyl) -oxim] I 20 ml Ν,Ν-dimethylformamid opløstes 4 g 2'-0,3'-N-bis-(benzyloxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-(1- 20 naphthylmethyl)oxim], 0,745 g methyliodid og 0,254 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes under isafkøling, og blandingen omrørtes 2 timer for at omsættes. Efter oparbejdning som beskrevet i eksempel 16 rensedes den fremstillede urensede forbindelse ved hjælp af silicagel-søjlechro-25 matografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og benzen (3:10) som elueringsmid-del], herved opnåedes 2,21 g af titelforbindelsen, der ved omkrystallisation med isopropylether smeltede ved 193-195 °C.

30 30 DK PR 172481 B1

Elementaranalyse for C64He6N2o17

Beregnet (%): C 66,42, H 7,66, N 2,42 Fundet (%): C 66,56, H 7,67, N 2,48.

EKSEMPEL 36 5 Fremstilling af 6-0-methyl-2,-0,3,-N-bis(benzyloxycarbo-nyl) -N-demethylerythromycin A 9- [O- ( 2-methoxyethoxyme-thyl)oxim] I 94 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og 1,2-dimeth-oxyethan (1:1) opløstes 8,58 g 2'-0,3'-N-bis(benzyloxy-10 carbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(2-methoxyethoxy-methyl)oxim] og 5,38 g methyliodid, 1,04 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 1 time. Yderligere 0,26 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 1 time for at omsættes. Efter omsæt-15 ningen oparbejdedes som beskrevet i eksempel 16, hvorved den urensede forbindelse opnåedes, der rensedes ved sili-cagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck Co. , idet der anvendtes en blanding af chloroform og acetone (20:1) som elueringsmiddel] , herved opnåedes 6,15 g 20 af titelforbindelsen som et hvidt skum, der smeltede ved 87-93 °C.

Elementaranalyse for Cs7HaeN2019

Beregnet (%): C 61,94, H 8,02, N 2,53 Fundet (%): C 62,21, H 7,81, N 2,56.

25

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-O,3'-N-bis( benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(2,2,2-trichlorethoxy- methyl)oxim] EKSEMPEL 37 31 DK PR 172481 B1 5 1,16 g 2’-0,3'-N-bis(benzyloxycarbonyl)-N-demethylery- thromycin A 9-[0-(2,2,2-trichlorethoxymethyl)oxim], 342 mg methyliodid og 100 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 10 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran (1:1) omrørtes 1,5 timer ved stuetemperatur for at omsæt-10 tes. Ved oparbejdning som beskrevet i eksempel 1 opnåedes den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (50:1-10:11) som elueringsmiddel], omkrystallisation med 15 en blanding af acetone og n-hexan gav 860 mg af titelforbindelsen i form af prismer, der smeltede ved 110-113 °C.

Elementaranalyse for ^56Ηβ3013Ν2018

Beregnet (%): C 57,07, H 7,10, N 2,38 Fundet (%): C 57,32, H 6,82, N 2,41, 20 EKSEMPEL 38

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3 *-N-bis( benzyloxycarbonyl)-N-deme thyl erythromycin A 9-[0-(benzyloxymethyl)oxim] I 100 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahy-% drofuran (1:1) opløstes 12,9 g 2'-O,3’-N-bis(benzyloxy-25 carbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(benzyloxyme- thyl)oxim], 3,92 g methyliodid og 1,14 g 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes ved stuetemperatur i 40 minutter for at omsættes. Efter omsætningen oparbejdedes som beskrevet i eksempel 16, hvor-30 ved der opnåedes den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi 32 DK PR 172481 B1 ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (100:1-12,5:1) som elueringsmiddel], omkrystallisation med en blanding af isopropylether og n-hexan gav 9,35 g af titelforbindelsen i form af kry-5 staller, der smeltede ved 135-136 °C.

Elementaranalyse for C61H88N2018

Beregnet (%): C 64,42, H 7,80, N 2,46 Fundet (%): C 64,41, H 7,61, N 2,49.

EKSEMPEL 39 10 Fremstilling af 6-0-methyl-2'-0,3'-N-bis(benzyloxycarbo-nyl )-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzyloxim] (den anden oximisomer af titelforbindelsen fra eksempel 22) I 1,2 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahy-drofuran (1:1) omsattes 130 mg 2’-0,3'-N-bis(benzyloxy-15 carbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[O-benzyloxim] fremstillet i eksempel 9 (den anden oximisomer af titelforbindelsen fra eksempel 5), 26 mg methyliodid og 10 mg 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes som beskrevet i eksempel 16. Oparbejdning efterfulgt af oprensning under anvendel-20 se af silicagel-søjlechromatografi ("Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethyiacetat og n-hexan (1:2) som elueringsmiddel] gav 102 mg af titelforbindelsen som et hvidt skum, der smeltede ved 94-99 °C.

EKSEMPEL 40 25 Fremstilling af 6-O-methylerythromycln A 9-[0-methyl-oxim]-2'-(3,4,5-trlmethoxybenzoat) 1 6 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og 1,2-dimeth-oxyethan (1:1) opløstes 580 mg erythromycin A 9-[O-methyloxim]-2'-(3,4,5-trimethoxybenzoat), 136,8 mg 30 methyliodid og 66 mg 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes.

33 DK PR 172481 B1 og blandingen omrørtes 2 timer ved stuetemperatur for at omsættes. Efter omsætningen tilsattes 2 ml triethylamin, og blandingen ekstraheredes med ethylacetat. Ethylacetat-laget blev vasket med en mættet vandig natriumchloridop-5 løsning, og der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat.

Opløsningsmidlet afdampedes under reduceret tryk, og den fremstillede urensede forbindelse rensedes ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi [Art. 7734 fremstillet af Merck Co., en blanding af chloroform og acetone (4:1) an-10 vendtes som elueringsmiddel], herved opnåedes 260 mg af titelforbindelsen, der smeltede ved 131-133 °C.

EKSEMPEL 41

Fremstilling af 6-Q-methyl-3'-N-benzyloxycarbonyl-N-deme-thylerythromycln A 9-[0-benzyloxim] 15 13 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydro- furan (1:1) opløstes 335 mg 3 ’ -N-benzyloxycarbonyl-N-de-methylerythromycin A 9-[O-benzyloxim], 75 mg methyliodid og 29 mg 85% kaliumhydroxidpulver tilsattes, og blandingen omrørtes 1 time under isafkøling for at omsættes. Op-20 arbejdning som beskrevet i eksempel 16 gav den urensede forbindelse, der herefter rensedes ved hjælp af silica-gel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af benzen og acetone (40:1) som elueringsmiddel], herved opnåedes 180 mg af titelforbindel-25 sen, der smeltede ved 109-114 °C.

Ved yderligere fremkaldning af søjlen opnåedes ved chro-matografi 100 mg 3'-N-benzyloxycarbonyl-N-demethylery-thromycin A 9-[O-benzyloxim], der er udgangsmaterialet.

30 EKSEMPEL 42 34 DK PR 172481 B1

Fremstilling af 6-0-methyl-21-O-benzyloxycarbonylerythro-mycin A 9-[O-benzyloxim]

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 16 under anven-5 delse af 487 mg 2'-O-benzyloxycarbonylerythromycin A

9-[O-benzyloxim], 78,1 mg methyliodid og 30,8 mg 85% kaliumhydroxidpulver i 5 ml af en blanding af dimethylsulf-oxid og tetrahydrofuran (1:1) omsattes reaktionen. Oparbejdning efterfulgt af rensning under anvendelse af sili-10 cagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet ethyl-acetat anvendtes som elueringsmiddel] gav 405 mg af titelforbindelsen i form af et hvidt skum.

‘H-NMR (CDC13) δ: 2,99 (3H, 6-OCH3).

EKSEMPEL 43 15 Fremstilling af 6-0-methyl-2'-O-benzyloxycarbonylerythro-mycin A 9-[0-(o-chlorbenzyl)oxlm]

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 42 og anvende 1,008 g 2'-O-benzyloxycarbonylerythromycin A 9-[0-(o-chlorbenzyl )oxim] , 185 mg methyliodid og 84 mg 85% kali-20 umhydroxidpulver i 10 ml af en blanding af dimethylsulf-oxid og tetrahydrofuran (1:1) for at omsætte efterfulgt af oprensning fremstilledes 855 mg af titelforbindelsen som et hvidt skum.

JH-NMR (CDClj) δ: 2,98 (3H, 6-OCH3).

25 EKSEMPEL 44

Fremstilling af 6-0-methyl-2'-O, 3'-N-bis( benzyloxycarbo- nyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-methyloxim] 35 DK PR 172481 B1 I 12 ml af en blanding af dimethylsulfoxid og tetrahydro-5 furan (1:1) opløstes 1,0 g 2'-0,3'-N-bis( benzyloxycarbo-nyl)-N-demethylerythromycin A 9-oxim, herefter tilsattes 355 mg methyliodid og 145 mg 85% kaliumhydroxidpulver, og blandingen omrørtes 2 timer ved stuetemperatur for at omsættes. Efter oparbejdning på almindelig måde og rensning 10 ved hjælp af silicagel-søjlechromatografi ["Wako" gel C-200, idet der anvendtes en blanding af ethylacetat og n-hexan (1:1) som elueringsmiddel] opnåedes 0,8 g af titelforbindelsen. Denne forbindelse var identisk med forbindelsen fremstillet i eksempel 16 med hensyn til IR og 15 NMR.

REFERENCEEKSEMPEL

I en opløsning af 11,4 g 6-0-methyl-2’-0,3'-N-bis(benzyl-oxycarbonyl)-N-demethylerythromycin A 9-[0-(o-chlorbenz-yl)oxim] i 45 ml methanol anbragtes 2,85 g 10% palladi-20 umcarbon, 6 ml myresyre og 1 g natriumformiat, og blandingen omrørtes 5 timer ved stuetemperatur. Efter omsætningen frafiltreredes katalysatoren. Filtratet tilsattes vand, og den fremstillede opløsnings pH indstilledes til ca. 10 med vandig natriumhydroxidopløsning. De fremkomne 25 krystaller frafiltreredes, vaskedes med vand, tørredes og omkrystalliseredes med ethanol, hvorved opnåedes 5,6 g 6-O-methyl-N-demethylerythromycin A 9-oxim, der smeltede ved 247-249 °C.

Elementaranalyse for C37Hi8N2013 30 Beregnet (%): C 59,34, H 9,15, N 3,74 Fundet (%): C 59,35, H 8,87, N 3,78.

36 DK PR 172481 B1 I en blanding af 12 ml ethanol og 12 ml vand opløstes 2 g 6-0-methyl-N-demethylerythromycin A 9-oxim og 2,25 g na-triumhydrogensulfit, og opløsningen opvarmedes 5 timer med tilbagesvaling. Efter omsætningen udhældtes reakti-5 onsopløsningen i vand, og opløsningens pH indstilledes til ca. 10 med vandig natriumcarbonatopløsning. Blandingen ekstraheredes med dichlormethan, og dichlormethanla-get vaskedes med vand, tørredes over vandfrit magnesiumsulfat, koncentreredes under reduceret tryk og omkrystal-10 liseredes med en blanding af chloroform og diethylether, hvorved opnåedes 1,22 g 6-0-methyl-N-demethylerythromycin A med smeltepunkt 217-219 °C.

I en opløsning af 0,4 g 6-0-methyl-N-demethylerythromycin A i 50 ml methanol anbragtes 0,2 g 5% palladiumcarbon og 15 0,4 ml 37% vandig formaldehydopløsning, og blandingen om rør tes 5 timer under en hydrogenatmosfære ved stuetemperatur. Efter omsætningen frafiltreredes katalysatoren, og filtratet koncentreredes under reduceret tryk. Remanensen tilsattes 50 ml vand, opløsningens pH indstilledes til 20 ca. 10-10,3 med fortyndet vandig natriumhydroxidopløsning, og opløsningen ekstraheredes med dichlormethan. Dichlormethanlaget vaskedes med vand, der tørredes over vandfrit magnesiumsulfat og koncentreredes. De fremkomne krystaller omkrystalliseredes med ethanol, hvorved opnåe-25 des 0,37 g 6-0-methylerythromycin A.

Claims

37 DK PR 172481 B1

1. Fremgangsmåde til selektiv methylering af en hydroxyl-gruppe i 6-stillingen i et erythromycin A-derivat, 5 kendetegnet ved, at man omdanner et erythromycin A-derivatet, som har almindelige substituentgrupper i stedet for hydrogenatomet i 2'-hydroxylgruppen og/eller en methylgruppe i 3'-demethylaminogruppen, til et erythromycin A 9-oxim-derivat, og at man omsætter det fremit) stillede erythromycin A 9-oximderivat med et methylerende middel.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at methyleringen udføres i et opløsningsmiddel i nærværelse af en base.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det methylerende middel er methyliodid, methyl-bromid, methylchlorid, dimethylsulfat, methyl-p-toluen-sulfonat eller methylmethansulfonat.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet 20 ved, at opløsningsmidlet er et polært aprotisk opløsningsmiddel .

5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at det polære aprotiske opløsningsmiddel er dime-thylsulfoxid, N,N-dimethylformamid, hexamethylphosphor- 25 triamid, en blanding bestående af to eller flere af disse opløsningsmidler eller en blanding bestående af en af disse opløsningsmidler og tetrahydrofuran eller 1,2-dime-thoxyethan.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet 30 ved, at basen er kaliumhydroxid, natriumhydroxid, natrl- umhydrid eller kaliumhydrid, og at der anvendes 1,0 til DK PR 172481 B1 1,7 mol ækvivalenter af basen pr. mol erythromycin A 9-oximderivat.