DK172010B1 - Heterocycliske oxophthalazinyleddikesyre-forbindelser og farmaceutiske præparater til inhibering af aldosereductase-aktivitet - Google Patents

Description

DK 172010 Bl i

Denne opfindelse angår hidtil ukendte heterocycliske oxophthalazinyleddikesyre-forbindelser, som er nyttige til behandling af visse kroniske komplikationer stammende fra diabetes mellitus, såsom diabetiske katarakter, reti-5 nopathia og neuropathia, samt farmaceutiske præparater indeholdende sådanne forbindelser.

Der er tidligere gjort forskellige forsøg på at opnå mere effektive orale antidiabetiske midler. Almindeligvis har 10 disse anstrengelser involveret syntese af nye organiske forbindelser, især sulfonylurinstoffer, og bestemmelse af deres evne til væsentligt at sænke blodsukkerniveauer, når de indgives oralt. Imidlertid vides kun lidt om virkningen af organiske forbindelser m.h.t. at forhindre el-15 ler lette kroniske komplikationer af diabetes, såsom diabetiske katarakter, neuropathia og retinophathia. US patentskrift nr. 3 821 383 angiver, at aldosereductase-inhibitorer som l,3-dioxo-lH-benz[d,e]isoquinolin-2(3H)-ed-dikesyre og derivater deraf er nyttige til behandling af 20 disse tilstande. US patentskrift nr. 4 226 875 angiver anvendelsen af spiro-oxazolidindioner som aldosereductase- inhibitorer til behandling af komplikationer ved diabetes. Sådanne aldosereductase-inhibitorer fungerer ved at inhibere aktiviteten af enzymet aldosereductase, 25 som er hovedansvarligt for at regulere reduktionen af aldoser, såsom glucose og galactose, til de tilsvarende po-lyoler, såsom sorbitol og galactitol, hos mennesker og andre dyr. På denne måde forhindres eller reduceres uønskede opsamlinger af galactitol i linsen hos falacto-30 sæmiske individer og af sorbitol i linsen, den perifere i nervestreng og nyrerne hos forskellige diabetiske indi vider. I overensstemmelse hermed er sådanne forbindelser af terapeutisk værdi som aldosereductase-inhibitorer til bekæmpelse af visse kroniske diabetiske komplikationer, 35 herunder sådanne af oculær art, eftersom det er kendt inden for faget, at tilstedeværelsen af polyoler i øjets 2 DK 172010 B1 linse fører til kataraktdannelse med ledsagende tab af 1inseklarhed.

US patentskrift nr. 4 251 528 angiver aromatiske carbo-5 cycliske oxophthalazinyleddikesyrer med aldosereductase-inhiberende de egenskaber. Patentskriftet nævner, at 2-(2-pyrid-2-ylethyl)-3,4-dihydro-4-oxophthalazin-l-yleddi-kesyre ikke inhiberer aldosereductase. Heterocycliske oxophthalazinyleddikesyrer og deres ethylestere med virk-10 ning på det blodkoagulerende system er angivet i Chemical Abstracts 73, 77173y (1970).

Ifølge opfindelsen tilvejebringes forbindelser med den almene formel 15 CH.COR.

p/<^Χ>ΤχΝ''<ϊΗΖΚ2 K3 o i 20 5 hvori Z betyder kovalent binding, 0, S, NH eller CH2,

Ri betyder hydroxy, di(C!-C4 )alkylamino eller (C1-C4)alk-25 oxy, som kan være substitueret med N-morpholino eller di (0χ-04) alkylamino, R2 betyder en heterocyclisk 5-leddet ring med 1 nitrogen-, oxygen- eller svovlatom, 2 nitrogenatomer, hvoraf 30 det ene kan være erstattet med et oxygen- eller svovl-i atom, eller 3 nitrogenatomer, hvoraf det ene kan være er stattet med et oxygen- eller svovlatom, hvilken ring er substitueret med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, (Cj-Ci)alkyl og phenyl eller kondenseret 35 med benzo eller monosubstitueret med pyridyl, furyl eller thienyl, hvor nævnte phenyl eller benzo eventuelt er sub- m 3 DK 172010 B1 stitueret med 1 substituent valgt blandt iod og trifluor-methylthio eller med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, brom, (C1-C4)alkyl, (C1-C4)-alkoxy, (C1-C4)~ alkylthio, (C1-C4)alkylsulfinyl, (C^-Qj )alkylsulfonyl og 5 trifluormethyl, og nævnte pyridyl, furyl eller thienyl eventuelt er substitueret i 3-stillingen med fluor, chlor, brom, (Cx-C4)alkyl eller (Ci-C4)alkoxy, eller R2 betyder en heterocyclisk 6-leddet ring med 1-3 nitrogenatomer eller med 1 eller 2 nitrogenatomer og 1 oxygen- eller 10 svovlatom, hvilken ring er substitueret med 1 eller 2 substituenter valgt blandt (C1-C4)alkyl og phenyl eller kondenseret med benzo eller monosubstitueret med pyridyl, furyl eller thienyl, hvor nævnte phenyl eller benzo eventuelt er substitueret med 1 substituent valgt blandt iod 15 og trifluormethylthio eller med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, brom, (C1-C4)alkyl, (Ci-C^-al-kylthio, (Cj-C^ )alkylsulfinyl, (0Χ.04 )alkylsulfonyl og trifluormethyl, og nævnte pyridyl, furyl eller thienyl eventuelt er substitueret i 3-stillingen med fluor, chlor, 20 (C^-C*) alkyl eller (Cx-C4 )alkoxy, eller R2 betyder oxazol eller thiazol kondenseret med en 6-leddet aromatisk gruppe indeholdende 1 eller 2 nitrogenatomer eller med thio-phen eller furan, som hver eventuelt er monosubstitueret med fluor, chlor, brom, trifluormethyl, methylthio eller 25 methylsulfinyl, eller R2 betyder imidazolo-pyridin, naph- thothiazol eller naphthoxazol, R3 og R4 er ens eller forskellige og hver for sig betyder hydrogen, fluor, chlor, brom, trifluormethyl, (Cx-C4)al-30 kyl, (Cj-C^ )alkoxy, (Ct-C4) alkyl thio, (C3-C4)alkylsulfinyl, ; (Cj-C4 )alkylsulfonyl eller nitro, eller R3 og R4 tilsammen betyder (C3-C4)alkandioxy, og R5 betyder hydrogen eller methyl, 35 i \

Hi 4 DK 172010 B1 og farmaceutisk acceptable baseadditionssalte af sådanne forbindelser med formlen I, hvori 1^ er hydroxy, eller syreadditionssalte af sådanne forbindelser med formlen I, hvori en prodrug-gruppe R2 er diiC^-C« )alkylamino eller 5 (Ci-Ci )alkoxy substitueret med N-morpholino eller di ((^-C4)alkylamino.

Specifikke forbindelser ifølge opfindelsen er de, hvori R2 er eventuelt substitueret benzothiazolyl, benzoxazo-10 lyl, isoquinolyl, benzothiophenyl, benzofuranyl eller benzimidazolyl eller substitueret oxadiazolyl eller indo-lyl.

Foretrukne forbindelser ifølge opfindelsen er de, hvori Z 15 er en kovalent binding eller CH2, Rj^ er hydroxy, R2 er eventuelt substitueret benzothiazol-2-yl, benzothiazol-5-yl, benzoisothiazol-3-yl, benzoxazol-2-yl, 2-quinolyl, 2-quinoxalyl, oxazolo[4,5-b]pyridin-2-yl, benzothiophen-2-yl, benzofuran-2-yl, eller thiazolo[4,5-b]pyridin-2-yl, 20 eller substitueret 1,2,4-oxadiazol-3-yl, 1,2,4-oxadiazol- 5-yl, isothiazol-5-yl, isothiazol-4-yl, 1,3,4-oxadiazol- 5-yl, 1,2,5-thiadiazol-3-yl, oxazol-2-yl, thiazol-2-yl eller thiazol-4-yl, og R3, R4 og R5 er hydrogen.

25 Andre foretrukne forbindelser er de, hvori methylenbroen, som forbinder oxophthalazinylgruppen med R2, er lokaliseret α i forhold til et nitrogenatom i R2, f.eks. hvor R2 er benzoxazol-2-yl eller 1,2,4-oxadiazol-3-yl som nævnt ovenfor.

30

Andre specifikke forbindelser ifølge opfindelsen er de, hvori R2 er 2-benzothiazolyl substitueret i benzodelen med en trifluormethylthiogruppe eller med 1 eller 2 sub-stituenter valgt blandt chlor, brom, methyl, methoxy, 35 trifluormethyl og 6,7-benzo, og de, hvori R3 er hydrogen, 5-fluor, 5-chlor, 5-brom eller 5-methyl, og R4 er hydro- 5 DK 172010 B1 gen, 6- eller 7-substitueret chlor, brom, methyl, isopropyl, methoxy, nitro eller trifluormethyl, 4,5-difluor eller 5,7-dichlor, og de, hvori R2 er eventuelt substitueret benzothiazol-2-yl eller quinoxalyl, og R3 og R4 begge 5 er chlor. Specifikt foretrukne forbindelser med formlen I er 3-(5-brom-2-benzothiazolylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-1-yleddikesyre, 3-(5-fluor-2-benzothiazo-l-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre, 3-(5-tri-fluormethyl-2-benzothiazolylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre, 10 3-(5-chlor-2-benzothiazolylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l- yleddikesyre, 3-(4,5-difluor-2-benzo-thiazolylmethyl )-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre, 3-(5,7-dichlor-2-benzo-thiazolylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre og 3-(4,7-dichlor-2-benzothiazolyl-methyl)-4-oxo-3H-phthala-15 zin-l-yleddikesyre.

Den foreliggende opfindelse angår også farmaceutiske præparater til inhibering af aldosereductase-aktivitet, hvilke præparater er ejendommelige ved, at de indeholder 20 en forbindelse med formlen I i en effektiv mængde til inhibering af aldosereductase-aktivitet i blanding med en farmaceutisk acceptabel bærer. Specifikke og foretrukne præparater indeholder de specifikke og foretrukne forbindelser med formlen I som beskrevet ovenfor.

25

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan anvendes ved en fremgangsmåde til behandling af en diabetisk vært, såsom et dyr eller et menneske, for med diabetes forbundne komplikationer, hvorved værten indgives en effektiv mængde 30 af en forbindelse med formlen I. Specifikke og foretrukne fremgangsmåder omfatter indgivelse af en specifik og fo-retrukken forbindelse med formlen I som beskrevet ovenfor.

35 Forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen I kan fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 6 DK 172010 B1 CH2COR1

*3 O

med en forbindelse med formlen 10 R2-Z-CH0S02R6 *5 i en inert atmosfære, i hvilke formler Rx betyder (Ci-C,,)-alkoxy, Z, R2, R3, R4 og R 5 er som defineret i krav 1, og R6 betyder (C1-C4)alkyl, trifluormethyl eller phenyl, som 15 eventuelt er substitueret med methyl, chlor, brom eller nitro.

Nummereringssystemet for forbindelserne med formlen I er som vist nedenfor: 20

8 CH COR

.i 1 1

6Uj< 3N

ir ch2r2 25 ^3^0

Betegnelsen "(Ci-C^) alkyl" skal, hvor som helst den anvendes i definitionerne af RX.R4, betegne mættede monovalente ligekædede eller forgrenede alifatiske carbonhy-30 dridgrupper med 1-4 carbonatomer, såsom methyl, ethyl, propyl, butyl, t-butyl osv.

Betegnelsen "prodrug" betegner en gruppe, som omdannes in vivo til den aktive forbindelse med formlen I, hvori Rx 35 er hydroxy. Sådanne grupper er almindeligt kendte inden for faget og inkluderer esterdannende grupper til dan- 7 DK 172010 B1 nelse af en ester-prodrug, såsom benzyloxy, di-( Cx-C4 )al-kylaminoethoxy, acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, phtha-lidoyl, ethoxycarbonyloxyethyl, 5-methyl-2-oxo-l,3-di-oxol-4-yl-methyl og (C1-C4 )alkoxy, der eventuelt er sub-5 stitueret med N-morpholino og amiddannende grupper, såsom di (Ci-C^ ) -alkylamino.

Den heterocycliske 5-leddede ring med 1-3 heteronitro-genatomer, hvoraf 1 kan erstattes af oxygen eller svovl, 10 inkluderer imidazolyl, oxazolyl, thiazolyl, pyrazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl og thiazolyl.

Den heterocycliske 6-leddede ring med 1-3 nitrogenatomer eller med 1 eller 2 nitrogenatomer og 1 oxygen- eller 15 svovlatom inkluderer triazinyl, pyrimidyl, pyridazinyl, oxazinyl og triazinyl.

Den heterocycliske ring kan være kondenseret med benzo, således at ringen er tilknyttet ved 2 nabocarbonatomer 20 til dannelse af en phenylgruppe. En sådan benzoheterocyc-lisk ring kan være knyttet til Z enten via den heterocycliske gruppe eller via benzogruppen i den benzoheterocyc-liske ring. Fremstillingen af de forbindelser, hvori Z er knyttet til benzogruppen, er belyst i reaktionsskema B 25 nedenfor. Specifikke eksempler, hvori den heterocycliske ring er kondenseret med benzo, inkluderer benzoxazolyl, quinazolin-2-yl, 2-benzimidazolyl, quinazolin-4-yl og benzothiazolyl. Oxazol- eller thiazolgruppen kondenseret med en 6-leddet aromatisk gruppe indeholdende 1 eller 2 30 nitrogenatomer inkluderer stillingsisomere, såsom oxa-zolo[4,5-b]pyridin-2-yl, thiazolo[4,5-b]pyridin-2-yl, ox-azolo[4,5-c]pyridin-2-yl, thiazolo[4,5-c]pyridin-2-yl, oxazolo[5,4-b]pyridin-2-yl, thiazolo[5,4-b]pyridin-2-yl, oxazolo[5,4-c]pyridin-2-yl og thiazolo[5,4-c]pyridin-2-35 yl.

DK 172010 Bl g

Forbindelserne ifølge opfindelsen fremstilles som skitseret i reaktionsskema A.

Phthalsyreanhydrid og dets derivater med formlen II er 5 enten kommercielt tilgængelige eller kan fremstilles ifølge standardprocedurer. Forbindelserne med formlen III, hvori R' er ethyl eller methyl, kan fremstilles ved omsætning af forbindelserne (II) med henholdsvis (carb-ethoxymethylen)triphenylphosphoran eller (carbomethoxy-10 methylen)triphenylphosphoran, ved den Wittig-reaktion, som er beskrevet i den kendte teknik, såsom US patent-skrift nr. 4 251 528 og Tetrahedron Letters, 1965, 2357.

Forbindelserne med formlen IV, hvori R' er methyl eller 15 ethyl, kan dannes ved omsætning af forbindelser med formlen III med hydrazin som beskrevet i US patentskrift nr.

4 251 528. Fortrinsvis udføres reaktionen i et vandigt opløsningsmiddel, såsom vandigt ethanol, dioxan eller di-methylformamid, og ved en temperatur på 40-120 °C, for-20 trinsvis ved tilbagesvalingstemperatur.

Forbindelserne med formlen V dannes ved omsætning af forbindelser med formlen IV, hvori R er hydrogen, methyl eller ethyl, med L-CH-Z-R2, hvori L er en fraspaltelig 25 Rs gruppe, som er i stand til at danne forbindelsen LH ved omsætning af de nævnte to reagenser. L er feks. chlor, brom eller 0S02R6, hvori R6 er (Cx-C4)alkyl, trifluorme-thyl, phenyl eller phenyl substitueret med methyl, chlor, 30 brom eller nitro.

9 DK 172010 B1

REAKTIQNSSKAMA A

5 R4 ° R4 CH-CO^R'

Sx>—> £x>—*

R3 0 R3 O

10 II III

R4 CH2C02R' R CH_CO-R’ 1 L-9H-Z-R' l iT 1 R3 0 R3 0 CHZR_

K

IV v 5 20 Når der omsættes forbindelser IV, hvori R' er methyl eller ethyl, udføres fremgangsmåden almindeligvis i et polært opløsningsmiddel, såsom en alkanol med 1-4 carbon-atomer, f.eks. methanol eller ethanol, dioxan, dimethyl-formamid eller dimethylsulfoxid, i nærvær af en base.

25 Egnede baser er alkalimetalhydrid eller -alkoxid med 1-4 carbonatomer, såsom natrium- eller kaliumhydrid, -meth-oxid eller -ethoxid. Når der anvendes et hydrid, kræves et ikke-vandigt opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid.

Når der omsættes forbindelser IV, hvori R' er hydrogen, 30 opnået ved hydrolyse af forbindelser IV, hvori R er methyl eller ethyl, er det nødvendigt, at der er mindst to molære ækvivalenter af basen til stede, da det første molære ækvivalent reagerer med carboxylsyreradikalet af en sådan forbindelse. Desuden er det, når der omsættes 35 sådanne forbindelser, at foretrække at anvende et hy- 10 DK 172010 B1 droxylisk opløsningsmiddel for at minimere produktionen af en tilsvarende ester.

Reaktionen til dannelse af forbindelser (V), hvori R5 er 5 alkyl, gennemføres fortrinsvis med forbindelser med formlen L-CH-Z-R2, hvori L er 0S02R6, hvori R6 er som k defineret ovenfor. Denne omsætning gennemføres almindeligvis i en inert atmosfære, såsom nitrogen, i et apro-10 tisk polært opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid, ved temperaturer på 20-50 °C.

Reaktionen til dannelse af forbindelsen (V) kan foregå ved stuetemperatur eller ved højere temperaturer for at 15 fremskynde processen.

De forbindelser med formlen V, hvori R' er methyl eller ethyl, kan hydrolyseres til opnåelse af forbindelser med formlen I, hvori R2 er hydrogen. Hydrolysen skrider frem 20 ved konventionelle temperaturer og i nærvær af syre eller base, såsom en mineralsyre, f.eks. saltsyre, eller et al-kalimetalhydroxid eller -carbonat, såsom natrium- eller kaliumhydroxid eller -carbonat. Reaktionen udføres i nærvær af vand og et opløsningsmiddel, f.eks. en alkanol med 25 1-4 carbonatomer, såsom methanol, eller dioxan.

De forbindelser med formlen I, hvori Rx er hydroxy, kan esterificeres ved konventionelle metoder, såsom omsætning af det tilsvarende syrechlorid, -bromid eller -anhydrid 30 med RXH til opnåelse af forbindelser (I), hvori R2 er en ester-prodrug-gruppe. Alternativt kan de forbindelser med formlen I, hvori Rx er en esterprodrug-gruppe, fremstilles ved alkylering af en opløsning af natriumsaltet af en forbindelse (I), hvori er hydroxy. Alkyleringsmidlet 35 kan være et chlorid. Hvis f.eks. Rx er benzyloxy, acet-oxymethyl eller pivaloyloxymethyl, så er alkylerings- DK 172010 B1 π midlet henholdsvis benzylchlorid, chlormethylacetat eller chlormethylpivalat. Det ovennævnte natriumsalt fremstilles almindeligvis in situ ved omsætning af en forbindelse (I), hvori Rx er hydroxy, med en natriumsaltdannende for-5 bindelse, såsom natriumhydrogencarbonat, natriumhydrid eller natrium-t-butylammoniumsulfat, i et ikke-vandigt opløsningsmiddel, såsom dimethylformamid eller methylpyr-rolidon.

10 Når Rx i forbindelser med formlen I er en amid-prodrug-gruppe, såsom diiCi-C^)alkylamino, omdannes en forbindelse (I), hvori Rx er (C^-C^)alkoxy, til det tilsvarende amid ved omsætning med en amin, f.eks. di(Ci-C^)alkyl-amin.

15 Når i forbindelserne med formlen L-CH-Z-R,, L er chlor,

Rs Z er en kovalent binding, R5 er hydrogen, og R2 er oxazol eller thiazol kondenseret med Y, hvori Y er en 6-leddet 20 aromatisk gruppe indeholdende 1 eller 2 nitrogenatomer, eller med thiophen eller furan, som hver for sig eventuelt er monosubstitueret med fluor, chlor, brom, tri-fluormethyl, methylthio eller methylsulfinyl, eller R2 er 1,2,4-oxadiazol-3-yl eller l,2,4-thiadiazol-3-yl, som 25 eventuelt er substitueret med R7, hvori R7 er en substituent valgt blandt iod og trifluormethylthio, eller 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, brom, (C!-C4 )alkyl, (C1-C4 )alkoxy, (Cj-C4) alkyl thio, (C2-C4 )alkyl-sulfinyl, (C^-C^Jalkylsulfonyl og trifluormethyl, kan 30 fremstilles ved omsætning af forbindelser med formlen

^C-NH _. NHNH

Y I eller //, 'V-CN

R N° 35 7

VI VII

12 DK 172010 B1 hvori Y og R7 er som defineret ovenfor, med triiiC!-C4 )alkoxy )CH2C1. Denne reaktion foregår almindeligvis i et reaktionsinert opløsningsmiddel, såsom en (Cx-C4)alko-hol, f.eks. ethanol, et halogencarbonhydrid, f.eks. chlo-5 roform eller methylenchlorid, eller et etherisk opløsningsmiddel, såsom diglym. Reaktionstemperaturen ligger i området fra omkring stuetemperatur til det anvendte opløsningsmiddels tilbagesvalingstemperatur. Reaktionstiden kan variere fra omkring 15 minutter til omkring 2 timer 10 eller mere.

Udgangsmaterialerne (VI) og (VII) er enten kommercielt tilgængelige eller kan fremstilles ifølge standardprocedurer, f.eks. som beskrevet i J. Am. Chem. Soc. 53, 15 309(1935) og J. Org. Chem. 29, 2653(1964).

Tri( (C1-C4)alkoxy)CH2C1-forbindelserne er enten kendte eller kan fremstilles ved omsætning af 1,1,1-trialkoxy-ethan med N-chlorsuccimmid eller med chlor i pyridin og 20 et chlorcarbonhydrid-opløsningsmiddel. Den første chlore-ringsreaktion udføres almindeligvis i et opløsningsmiddel, passende et ikke-polært opløsningsmiddel, såsom car-bontetrachlorid eller tetrachlorethylen. Reaktionen udføres hensigtsmæssigt ved temperaturer i området fra om-25 kring 40 °C til omkring opløsningsmidlets tilbagesvalingstemperatur. Reaktionen med chlor i pyridin må foregå i nærvær af et chlorcarbonhydrid-opløsningsmiddel med et eller flere chloratomer og 1-6 carbonatomer, f.eks. ethy-lenchlorid, chloroform eller trichlorethan.

30

Reaktionsskema B eksemplificerer fremstillingen af 3-(benzothiazol-5-ylmethyl)-4-oxo-phthalazin-l-yleddikesy-re, som er en forbindelse, hvori R2 er en benzoheterocyc-lisk ring med benzoringen knyttet til methylenbroen i den 35 endelige forbindelse. Andre sådanne forbindelser, hvori R2 er en benzoheterocyclisk ring med benzoringen knyttet 13 DK 172010 B1 til Z i den endelige forbindelse, kan fremstilles ved en lignende fremgangsmåde. I reaktionsskema B omsættes 5-me-thylbenzothiazol med et bromeringsmiddel, såsom N-brom-succimmid, til dannelse af 5-brommethyl-benzothiazol, som 5 derpå omsættes med 4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat til dannelse af ethyl-3-(5-methylbenzothiazolyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat under betingelser som skitseret ovenfor med henvisning til reaktionsskema A for omdannelsen af forbindelser (IV) til forbindelser (V).

10

REAKTIONSSKEMA B

CH3 I-Br “ & —> o.—> sn/ __ _CO .Et 20 2 ‘ ék !/ 30 De farmaceutisk acceptable baseadditionssalte af de forbindelser (I), hvori Rx er hydroxy, kan dannes med farmaceutisk acceptable kationer ved konventionelle metoder. Således kan disse salte let fremstilles ved behandling af forbindelsen med formlen I med en vandig opløs- 35 ning af den ønskede farmaceutisk acceptable kation og inddampning af den resulterende opløsning til tørhed, 14 DK 172010 B1 fortrinsvis under reduceret tryk. Alternativt kan en lav-ere-alkylalkohol-opløsning af forbindelsen med formlen I blandes med et alkoxid af det ønskede metal, og opløsningen derefter inddampes til tørhed. Egnede farmaceutisk 5 acceptable kationer til dette formål inkluderer, men er ikke begrænset til, alkalimetalkationer, såsom kalium og natrium, ammonium eller vandopløselige aminadditionssal-te, såsom N-methylglucamin(meglumin), lavere-alkanolammo-nium- og andre basesalte med organiske aminer, der er 10 farmaceutisk acceptable, og jordalkalimetalkationer, såsom calcium og magnesium.

De farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af forbindelserne med formlen I fremstilles på konventionel måde 15 ved behandling af en opløsning eller suspension af den frie base (I) med omkring 1 kemisk ækvivalent af en farmaceutisk acceptabel syre. Der anvendes konventionel koncentrerings- og omkrystallisationsteknik ved isolering af saltene. Belysende for egnede syrer er eddikesyre, mælke-20 syre, ravsyre, maleinsyre, vinsyre, citronsyre, gluconsy-re, ascorbinsyre, benzoesyre, kanelsyre, fumar- syre, svovlsyre, phosphorsyre, saltsyre, hydrogenbromidsyre, hydrogeniodidsyre, sulfamidsyre, sulfonsyrer, såsom me-thansulfonsyre eller benzensulfonsyre, og beslægtede sy-25 rer. Fortrinsvis er syren phosphorsyre.

De hidtil ukendte forbindelser med formlen I og de farmaceutisk acceptable salte deraf er nyttige som inhibitorer for enzymet aldosereductase ved behandling af kroniske 30 komplikationer af diabetes, såsom diabetiske katarakter, retinopathia og neuropathia. Som anvendt i denne beskrivelse med krav skal behandling forstås at inkludere både forhindring og lettelse af sådanne tilstande. Forbindelsen kan indgives et individ, som har behov for behand-35 ling, ad en række forskellige konventionelle indgivelsesveje, herunder oralt, parenteralt og topisk. I alminde- 15 DK 172010 B1 lighed vil disse forbindelser blive indgivet oralt eller parenteralt i doseringer på fra omkring 0,5 til omkring 25 mg/kg legemsvægt af det behandlede individ pr. dag, fortrinsvis fra omkring 1,0 til omkring 10 mg/kg. Imid-5 lertid vil der nødvendigvis forekomme nogen variation i dosering afhængigt af det behandlede individs tilstand.

Den person, som er ansvarlig for indgivelsen, vil i hvert tilfælde bestemme den passende dosis for det enkelte individ.

10

De hidtil ukendte forbindelser ifølge opfindelsen kan indgives alene eller i kombination med farmaceutisk acceptable bærere i enten enkelte eller flerdobbelte doser. Egnede farmaceutiske bærere inkluderer inerte faste for-15 tyndingsmidler eller fyldstoffer, sterile vandige opløsninger og forskellige organiske opløsningsmidler. De farmaceutiske præparater dannet ved kombination af de hidtil ukendte forbindelser med formlen I og de farmaceutisk acceptable bærere indgives derpå let i en række forskellige 20 doseringsformer, såsom tabletter, pulvere, pastiller, sirupper, injicerbare opløsninger og lignende. Disse farmaceutiske præparater kan om ønsket indeholde yderligere ingredienser, såsom aromaer, bindemidler, excipienter og lignende. Således kan der til oral indgivelse anvendes 25 tabletter indeholdende forskellige excipienter, såsom natriumcitrat, calciumcarbonat og calciumphosphat, sammen med forskellige nedbrydningsmidler, såsom stivelse, al-ginsyre og visse komplekse silicater, sammen med bindemidler, såsom polyvinylpyrrolidon, sucrose, gelatine og 30 acaciagummi. Desuden er glittemidler, såsom magnesium-stearat, natriumlaurylsulfat og talcum, ofte nyttige til tabletteringsformål. Faste præparater af en lignende type kan også anvendes som fyldemidler i blødt og hårdt fyldte gelatinekapsler. Foretrukne materialer til dette formål 35 inkluderer lactose eller mælkesukker og polyethylenglyco-ler med høj molekylvægt. Når der ønskes vandige suspen- 16 DK 172010 B1 sioner eller elixirer til oral indgivelse, kan den nødvendige aktive ingrediens deri kombineres med forskellige søde- eller aromamidler, farvende materiale eller farvestoffer og, om ønsket, emulgerings- eller suspenderings-5 midler, sammen med fortyndingsmidler, såsom vand, ethanol, propylenglycol, glycerol og kombinationer deraf.

Til parenteral indgivelse kan der anvendes opløsninger af den hidtil ukendte forbindelse med formlen I i sesam- el-10 ler jordnøddeolie, vandigt propylenglycol eller i steril vandig opløsning. Sådanne vandige opløsninger bør om nødvendigt være passende pufret, og det flydende fortyndingsmiddel først være gjort isotonisk med tilstrækkeligt salt eller glucose. Disse bestemte vandige opløsninger er 15 særligt egnede til intravenøs, intramusculær, subcutan og intraperitoneal indgivelse. I denne forbindelse er de anvendte sterile vandige medier alle let tilgængelige ved standardteknik, som er kendt af fagfolk.

20 Forbindelserne med formlen I kan ikke kun anvendes med fordel til fremstilling af vandige farmaceutiske præparater til parenteral indgivelse som beskrevet ovenfor, men nærmere bestemt til fremstilling af farmaceutiske præparater, som er egnet til anvendelse som ophthalmiske op-25 løsninger. Sådanne ophthalmiske opløsninger er af overvejende interesse for behandlingen af diabetiske katarakter ved topisk indgivelse, og behandlingen af sådanne tilstande på denne måde er en foretrukken anvendelse af forbindelserne ifølge den foreliggende opfindelse. Til be-30 handling af diabetiske katarakter indgives forbindelserne ifølge opfindelsen således til øjet i form af et ophthal-misk præparat fremstillet i overensstemmelse med konventionel farmaceutisk praksis, se f.eks. "Remington's Pharmaceutical Sciences" 15th Edition, side 1488 til 1501 35 (Mack Publishing Co., Easton, Pa, U.S.A.). Det ophthalmiske præparat vil indeholde en forbindelse med formlen I

17 DK 172010 B1 eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf i en koncentration på fra omkring 0,01 til omkring 1 vægt-%, fortrinsvis fra omkring 0,05 til omkring 0,5 vægt-%, i en farmaceutisk acceptabel opløsning, suspension eller sal-5 ve. Nogen variation i koncentration vil nødvendigvis forekomme afhængigt af den bestemte anvendte forbindelse, tilstanden af det individ, som behandles, og lignende, og den person, som er ansvarlig for behandlingen, vil bestemme den mest egnede koncentration for det enkelte in-10 divid. Det ophthalmiske præparat vil fortrinsvis være i form af en steril vandig opløsning, der om ønsket indeholder yderligere ingredienser, f.eks. konserveringsmidler, puffere, tonicitetsmidler, antioxidanter og stabilisatorer, ikke-ioniske befugtningseller klaringsmidler, 15 viskositetsforøgende midler og lignende. Egnede konserveringsmidler inkluderer benzalkoniumchlorid, benzethonium-chlorid, chlorbutanol, thimerosal og lignende. Egnede puffere inkluderer borsyre, natrium- og kaliumhydrogen-carbonat, natrium- og kaliumcarbonat, natriumacetat, na-20 triumhydrogenphosphat og lignende i mængder, som er tilstrækkelige til at holde pH-værdien i området fra omkring 6 til omkring 8, fortrinsvis fra omkring 7 til omkring 7,5. Egnede tonicitetsmidler er dextran 40, dextran 70, dextrose, glycerol, kaliumchlorid, propylenglycol, natri-25 umchlorid og lignende, således at den ophthalmiske opløs-ningsnatriumchloridækvivalent er i området 0,9 ± 0,2 %. Egnede antioxidanter og stabilisatorer inkluderer natri-umhydrogensulfit, natriumdisulfit, natriumthiosulfit, thiourinstof og lignende. Egnede befugtnings- og kla-30 ringsmidler inkluderer polysorbat 80, polysorbat 20, poloxamer 282 og tyloxapol. Egnede viskositetsforøgende midler inkluderer dextran 40, dextran 70, gelatine, glycerol, hydroxyethylcellulose, hydroxymethylpropylcellu-lose, lanolin, methylcellulose, petrolatum, polyethylen-35 glycol, polyvinylalkohol, polycinylpyrrolidon, carboxy-methylcellulose og lignende. Det ophthalmiske præparat 18 DK 172010 B1 vil blive indgivet topisk til øjet af det individ, som har behov for behandling, ved konventionelle metoder, f.eks. i form af dråber eller ved badning af øjet med den opthalmiske opløsning.

5

Aktiviteten af forbindelserne ifølge opfindelsen som midler til bekæmpelse af kroniske diabetiske komplikationer kan bestemmes ved et antal biologiske eller farmakologiske standardprøvninger. Egnede prøvninger inklud-10 erer (1) måling af deres evne til at inhibere enzymaktiviteten af isoleret aldosereductase, (2) måling af deres evne til at reducere eller inhibere sorbitolopsamling i ischiasnerven og linsen hos akut streptozotocinerede, dvs. diabetiske, rotter, (3) måling af deres evne til at 15 reversere allerede forhøjede sorbitolniveauer i ischiasnerven og linsen hos kronisk streptozotocin-inducerede diabetiske rotter, (4) måling af deres evne til at forhindre eller inhibere galactitoldannelse i linsen hos akut galactosæmiske rotter, (5) måling af deres evne til 20 at forsinke kataraktdannelse og reducere alvorligheden af linseopaciteter i kronisk galactosæmiske rotter, (6) måling af deres evne til at forhindre sorbitolopsamling og kataraktdannelse i isoleret rottelinse inkuberet med glucose og (7) måling af deres evne til at reducere allerede 25 forhøjede sorbitolniveauer i isoleret rottelinse inkuberet med glucose.

FORSØGSRAPPORT In vitro proces 30

Litteraturreference: Hayman og Kinoshita: Isolation and

Properties of Lens Aldose Reductase. The Journal of Biological Chemistry. Volume 240, s. 877-882, 1965.

35 19 DK 172010 B1

Enzymfremstilling:

Aldosereductase (AR) renses delvis fra menneske-placenta ved en modifikation af Hayman og Kinoshita-metoden be-5 skrevet for rottelinser. Nylig opnåede placentaer homogeniseres i 3 volumendele 0,1 M kaliumphosphat-puffer, pH 7,0, indeholdende 5 mM 2-mercaptoethanol og centrifugeres i 20 minutter ved 33000 x g ved 4 °C. De opsamlede super-natanter fra det foregående trin underkastes en 30%-75% 10 ammoniumsulfat-fraktionering. De resulterende pellets opsamles resuspenderet i et minimumsvolumen af puffer og dialyseres natten over. Dialysatet kromatograferes på DEAM-cellulose og AR elueres med en lineær gradient (0-1 M NaCl). Top-fraktioner indeholdende aldosereductase-ak-15 tivitet samles, og portioner lagres frosset. Denne metode resulterer i fremstilling af et præparat, som er mere end 30 gange beriget med hensyn til AR-aktivitet.

Målemetode: 20

Aldosereductase måles på Abbot VP bikromatisk klinisk analysator ved at måle reduktionen af hastigheden af ni-kotinamid-dihydropyridin-(NADPH)-oxidation ved 340 nM ved 24 °C i 10 minutter. En enhed af aldosereductase define-25 res som et μπιοί NADPH oxideret ved 25 °C pr. minut med dl-glyceraldehyd som substrat. Prøveforbindelserne bedømmes ved forskellige koncentrationer. Resultaterne rapporteres som procent hæmning af en kontrolhastighed for NADPH-oxidation.

30 Målebetingelser:

Aldosereductase måles i 0,25 ml 50 mM kaliumphosphat-puffer, pH 7,1, indeholdende 400 mM ammoniumsulfat, 0,067 35 mM NADPH og 0,5 mM dl-glyceraldehyd. Der tilsættes til- 20 DK 172010 B1 strækkeligt enzym til at give en hastighed af NADPH-oxidation lig med 4 millienheder over 10 minutter.

DATA

5 ___

Eksempel IC50 (molær) Smelte punkt (°C) (hvis ikke i tek- ___sten) 6 2,10 x 10"8 10 (s. 38, nr. 3 i tabel) 7,79 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 2) 1,00 x 10"8

Ti 2,13 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 8) 1,58 x 10-8

Ti 2,34 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 12) 4,57 x 10-8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 2) 3,3 x 10“8 12 (s. 40, nr. 4) 6,47 x 10'8 TT 5,18 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 3) 8,43 x 10'8

Ti 2, 15 x 10-8 11 (s. 39, nr. 3) 2,22 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 20) 4,26 x 10-8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 19) 3,00 x 10"8 12 (s. 40, nr. 1) 2,8 x 10~8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 10) 2,79 x 10"8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 7) 2,68 x 10"8 7 (tabel 1A, s. 30, sidste) 1,50 x 10~8 • 10 (s. 38, nr. 3 fra neden) 2,57 x 10"8 8, Tabel 2A: substituenten er 5-Br, og R er CH3 1,93 x 10"8 160-161 j y 21 DK 172010 B1 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 8) 1,26 x 10'8 12 (s. 49, sidste i tabellen) 3,16 x 10'8 1 4,26 x 10'8 10 4,48 x 10'8

Formel I: R^OH; 1,21 x 10-8 R2=quinazolin-2 yl; R,=RÅ = Cl___ 15, tabel 3: R2=quinazolin-2-yl__6,70 x 10~8__ 15, tabel 3: R2=thiazolo[5,4-b]pyri- 1,12 x 10’8 216 din-2-yl___ 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 5 (Na-salt) 1 x 10"8 265 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 14, Na-salt) 1,7 x 10~8 258 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 8) 5,96 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 32, nr. 20) 8,81 x 10'8 7 (s. 31, nr. 1 i tabel IB) 4,33 x 10'8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 3) 6,85 x 10~9 7 (s. 31, nr. 2 i tabel IB) 3,90 x 10'8 7 (s. nr. 3 i tabel IB) 2,60 x 10"8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 2) 3,50 x 10”9 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 11) 1,80 x 10~8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 17) 3,10 x 10”8 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 18) 1 x 10"8 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 15) 1 x 10’8 15, tabel 3: R2=benzothiazol-5-yl__9,00 x 10~8 203-4 7 (tabel 1A, s. 30, nr. 16) 2,60 x 10~8 15, tabel 3: R2=3-(2,4-difluorphe- 3,30 x 10"8 nyl)-l,2,4-oxadiazol-5-yl___ 15 (tabel 3, sidste) 5,50 x 10"10 15, tabel 3: R2=7-dichlorimidazo- 3,70 x 10-8 219-20 [1, 5-a]pyridin-2-yl___ 15, tabel 3: R2=3-chlorbenzothiofen- 5,20 x 10”8 186 2-yl 7 (tabel 1A, s. 31, nr. 14) 3,12 x 10-8 7, tabel 1A: 1-hydroxy 4,1 x 10'8 154-6 7, tabel 1A: 6-CF3 7,0 x 10‘8 194-5 7, tabel 1A: 4-OH 4,8 x 10'8 165-6 22 DK 172010 B1 7, tabel 1A: 5-OH, 7-OH I 4,8 x 1CT8 1184 15, tabel 3: R2=imidazolopyridin 10 x 10‘8 178 15, tabel 3: R2=5-chlorimidazolopy- 1,00 x 10"8 181-3 ridln___

Opfindelsen belyses nærmere ved de følgende eksempler. Protonkerne-magnetisk-resonans-spektre (HNMR) blev målt for opløsninger i deuterochloroform (CDC13), og maksi-5 mumspositioner udtrykkes i dele pr. million (ppm) nedad fra tetramethylsilan (TMS). Maksimumsformerne er betegnet som følger: s = singlet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, br = bred.

10 EKSEMPEL 1 3-(5-Brombenzothiazol-2-yl-methyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (I; R^OH; R3=R4=H; R2=5-brombenzothiazol-2- yi)_ 15 A. 2.5-Dibromthioacetanilid

En blanding af 2,5-dibromacetanilid (45,0 g), phosphor-pentasulfid (24,4 g) og benzen (500 ml) blev opvarmet un-20 der tilbagesvaling i 18 timer. Efter afkøling af reaktionsblandingen blev benzenlaget dekanteret af og derpå ekstraheret med 10% kaliumhydroxidopløsning (2 x 75 ml).

Den basiske vandige ekstrakt blev vasket med ether (2 x 50 ml) og gjort sur til pH 4,0 ved tilsætning af fortyn-25 det saltsyre, og det udfældede 2,5-dibromthioacet-anilid blev opsamlet og derpå lufttørret (udbytte 14,4 g, snip. 119-124 °C).

B. 2-Methvl-5-brombenzothiazol 30

Denne forbindelse blev fremstillet ved tilpasning af den procedure, der er beskrevet i Synthesis, 1976, 731. Til 23 DK 172010 B1 en opløsning af 2,5-dibromthioacetanilid (9,27 g) i N-methylpyrrolidinon blev forsigtigt tilsat natriumhydrid (1,93 g af en 50 vægt-% dispersion i mineralolie). Efter at tilsætningen var fuldført, blev blandingen opvarmet 5 til 150 °C i 1,5 timer. Den mørke reaktionsblanding blev hældt ud på isvand (300 ml), og den udskilte brune gummi blev ekstraheret med ethylacetat (2 x 100 ml). Den organiske ekstrakt blev vasket med vand (2 x 100 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og derpå inddampet. Det 10 resulterende rå faste stof blev chromatograferet over silicagel til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (4,7 g, smp. 84-85 °C).

C. 2-Brommethvl-5-brombenzothiazol 15

En blanding af 2-methyl-5-brombenzothiazol (32,0 g), N-bromsuccinimid (25,1 g), carbontetrachlorid (700 ml) og en katalytisk mængde benzoylperoxid (0,2 g) blev opvarmet under tilbagesvaling og under bestråling med en UV-lampe 20 i 14 timer. Reaktionsblandingen blev afkølet til stuetemperatur, filtreret for at fjerne udfældet succinimid, og filtratet inddampet til tørhed. Det resulterende faste stof blev chromatograferet over silicagel til opnåelse af produktet (7,8 g, smp. 107 °C).

25 d. E.tbyl-3-1.5rfrrafflkengQthiazQl-2Tylmethyl)-4-.pKP-3H-phthalazin-l-vlacetat

Til en opløsning af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat 30 (11,6 g) og natriumhydrid (288 g, 50 vægt-% dispersion i mineralolie) i dimethylformamid (150 ml) tilsattes 5-brom-2-brommethylbenzothiazol (16,8 g), og den resulterende blanding blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time. Denne reaktionsblanding blev hældt over isvand (500 ml), 35 der tilsattes tilstrækkeligt 10 % saltsyre til at indstille pH-værdien til omkring 4,0, og det udfældede rå 24 DK 172010 B1 faste stof blev opsamlet. Dette blev chromatograferet over silicagel til opnåelse af produktet (udbytte 15,6 g, smp. 160-161 °C).

5 E. 3-(5-Brombenzothiazol-2-ylmethvl)-4-oxo-3H-phthala-zin-l-vleddikesvre

En blanding af ethyl-3-(5-brombenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (15,0 g) og dioxan (150 ml) 10 blev bragt til opløsning ved opvarmning på et dampbad, og til denne opløsning tilsattes en blanding af 10 % kaliumhydroxidopløsning (20 ml) i ethanol (50 ml). Den resulterende mørkt purpurfarvede opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer og koncentreret for at fjerne over-15 skud af dioxan og ethanol. Koncentratet blev fortyndet med vand (100 ml), og den resulterende opløsning blev vasket med ether (2 x 100 ml). Det vandige lag blev opsamlet og gjort surt til pH 2,0 ved tilsætning af koncentreret saltsyre. Det udfældede faste stof blev krystal-20 liseret fra methylenchlorid/ethanol (400 mg/40 ml) til opnåelse af produktet (udbytte 7,65 g, smp. 214 °C).

EKSEMPEL 2 25 3-[3-(2-Pyridyl)-1,2,4-oxadiazol-5-ylmethyl]-4-oxo-3H- phthalazin-l-yleddikesyre (I; Ri-OH R3=R4=H; R2=3-(2-pyri-dyl)-l,2,4-oxadiazol-5-yl_ A. Pvridamidoxim 30

En blanding af 2-cyanpyridin (15 g), hydroxylaminhydro-chlorid (10 g), natriumcarbonat (15,3 g) og ethanol (100 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 24 timer. Reaktionsblandingen blev afkølet, filtreret, og filtratet 35 inddampet til opnåelse af et fast stof, som blev ekstraheret med ethylacetat. Den organiske ekstrakt blev tør- 25 DK 172010 B1 ret, inddampet, og remanensen krystalliseret fra benzen (3,0 g, smp. 113-114 °C).

B. 3-(2-Pvridvl)-5-chlormethvl-l.2.4-oxadiazol 5

En blanding af pyridamidoxim (4,5 g), chloreddikesyrean-hydrid (8,4 g) og toluen (350 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 12 timer. Den varme opløsning blev afkølet, vasket med vand (2 x 100 ml), mættet hydrogencarbo-10 natopløsning (2 x 50 ml), igen med vand (2 x 100 ml), og der organiske lag blev inddampet til opnåelse af et råt fast stof. Dette faste stof blev krystalliseret fra hexan til opnåelse af produktet (3,4 g, smp. 89-94 °C).

15 C. Ethvl-3-(2-pvridyl-l.2.4-oxadlazol-5-vlmethvl)-4-oxo-3H-phthalazln-l-vlacetat

Til en opløsning af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (1,6 g) og natriumhydrid (0,5 g; 50 vægt-% dispersion i 20 mineralolie) i dimethylformamid (15 ml) blev dråbevis tilsat 3-(2-pyridyl)-5-chlormethyl-l,2,5-oxadiazol (1,5 g) i løbet af 40 minutter. Efter omrøring i endnu 10 minutter blev reaktionsblandingen hældt i vand (50 ml) og ekstraheret med ether. Etherlaget blev inddampet, og re-25 manensen blev chromatograferet over silicagel til opnåelse af produktet (1,0 g, smp. 118-128 °C).

D. 3-(2-Pyridyl-l.2.4-oxadiazol-5-Ylmethvl)-4-OXO-3H-phthalazin-l-vleddikesvre 30

Til en opløsning af ethyl-3-(2-pyridyl-l,2,4-oxadiazol-5-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (1,0 g) i methanol (10 ml) tilsattes 20 % vandig KOH-opløsning (0,5 ml), og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 30 35 minutter. Afdampning af overskud af methanol gav en orange remanens. Remanensen blev opløst i vand, gjort sur med DK 172010 B1 26 eddikesyre (1 ml), og det udfældede faste stof blev opsamlet og krystalliseret fra isopropylalkohol til opnåelse af produktet (0,53 g, smp. 196-200 °C).

5 EKSEMPEL 3 3- [3-(2-Trifluormethylphenyl)1,2,4-oxadiazol-2-ylmethyl]- 4- oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (I; R1=0H; R3=R4=H; R2=3-(2-trifluormethylphenyl)-1,2,4-oxadiazol-2-yl) 10 a. 3-r2-Trifluptmethylpheny3.1-5-chlpr.methyl--2.3,.4,-pxa- diazol 2-Trifluormethylbenzimidoxim, fremstillet ifølge procedu-15 ren beskrevet i Ber., 1899. 32, (1975) (2,9 g, smp. 115-116 °C) ud fra 2-trifluormethylbenzaldehyd, blev opløst i vandfri acetone (70 ml), og derpå tilsattes fast kalium-carbonat (2,0 g). Til den resulterende opslæmning afkølet til 15-18 °C i et is-vand-bad blev tilsat en opløsning af 20 chloracetylchlorid (1,1 ml) opløst i acetone (10 ml). Efter tilsætningen blev isbadet fjernet, og reaktionsblandingen blev bragt til stuetemperatur og omrørt i 1,5 timer. Afdampning af acetonen gav en hvid remanens, som efter udrivning med vand gav o-chloracetyl-2-trifluorme-25 thylbenziminoxin (3,0 g, smp. 108 -110 °C). Dette produkt blev blandet med toluen (50 ml) og opvarmet til tilbagesvaling i 1,5 timer. Toluenopløsningen blev afkølet, vasket med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning (10 ml) og vand, og den organiske portion blev tørret og 30 inddampet. Den resulterende brune olie blev chromatogra-feret over silicagel til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse som en gul olie. 1HNMR (CDCI3, 60MHz): 4,0 (s, 2H), 4,4 (s, 2H), 7,3 (s, 5H).

35 DK 172010 B1 27 B. Ethvl-3-r3-(2-trifluormethvlphenvl )-1..2.i.-oxafliazol·--2-ylmethyll-4-oxo-3H-phthalazin-l-vlacetat

Til en opløsning af 4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (1,4 5 9) og natriumhydrid (0,43 g; 50 vægt-% dispersion i mine ralolie) i dimethylformamid (10 ml) tilsattes 3-(2-tri-fluormethylphenyl)-5-chlormethyl-l,2,4-oxadiazol (1,7 g), og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter. Reaktionsblandingen blev hældt ud på vand (20 ml), 10 gjort sur til pH 2,0 med 10 % saltsyre, og det udfældede faste stof opsamlet. Det faste stof blev udrevet med iso-propylalkohol til opnåelse af produktet som et hvidt krystallinsk stof (1,65 g, smp. 111-115 °C).

15 C. 3-Γ3-(2-Trifluormethvlphenvl)-1.2.4-oxadiazol-2-vlme-thvl1-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesvre

En opløsning af ethyl-3-[2-trifluormethylphenyl-l,2,4-oxadiazol-2-yl-methyl-4-oxo-phthalazin-l-ylacetat (1,6 g) 20 og methanol (50 ml) indeholdende 20 vægt-% vandig KOH-op-løsning (0,5 ml) blev opvarmet på et dampbad i 1 time. Efter afdampning af methanol tilsattes vand (20 ml) til remanensen, og opløsningens pH-værdi blev bragt til 2 ved tilsætning af 10 % saltsyre. Det udfældede faste stof 25 blev krystalliseret fra benzen (0,7 g; smp. 132-134 °C).

EKSEMPEL 4 3-(N-methylbenzimidazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-30 1-yleddikesyre (I; R1=0H; R=3=R4=H; R2=3-(N-methyl-benz- imidazol-2-yl)) A. Ethyl—3-(J^methvlbenzimidazol-2-vlmethy1)-4-oxo-3H-phthalazin-l-vlacetat) 35 28 DK 172010 B1

En blanding af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (2,34 g) og natriumhydrid (0,58 g, 50 vægt-% dispersion i mineralolie) i dimethylformamid (20 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 15 minutter. Til denne blanding blev tilsat 5 N-methyl-2-chlormethylbenzimidazol (2,4 g; fremstillet ifølge JACS (1943) £5., 1854), og der blev omrørt i yderligere 1 time. Blandingen blev hældt ud i vand (150 ml) og ekstraheret med ethylacetat (2 x 100 ml). Den organiske ekstrakt blev tørret, inddampet, og remanensen 10 chromatograferet over silicagel til opnåelse af produktet (2,04 g; smp. 118 °C).

B. 3-((N-methvlbenzimidazol-2-vlmethvl)-4-oxo-3H-phtha-laaihrlzyleddikesyre 15

Til en opløsning af 3-(N-methylbenzimidazol-2-yl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (2,0 g) i varmt methanol (100 ml) blev tilsat 10 % KOH-opløsning (10 ml), og der blev omrørt ved stuetemperatur i 2,5 timer og derpå inddampet 20 til opnåelse af et fast stof. Dette faste stof blev opløst i vand (50 ml), ekstraheret med ether (50 ml), og det vandige lag blev indstillet til pH 6,0 ved tilsætning af eddikesyre. Det resulterende hvide faste stof blev opsamlet, tørret og krystalliseret fra en blanding af me-25 thanol og methylenchlorid til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (0,68 g; smp. 230 °C (d)).

EKSEMPEL 5 30 3-(0xazolo[4,5-b]pyridin-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin- 1-yleddikesyre (I; R1=0H; R3=R4=H; R2=oxazolo-[4,5-b]pyri-din-2-yl)_

En opløsning opnået ved tilsætning af ethyl-4-oxo-3H-35 phthalazin-l-ylacetat (1,25 g) til en suspension af natriumhydrid (285 mg; 50 vægt-% dispersion i mineralolie) DK 172010 B1 29 i dimethylformamid (10 ml) blev dråbevis tilsat til en opløsning af 2-chlormethyl-oxazolo[4,5-b]pyridin (1,0 g) i dimethylformamid (5 ml). Efter 2 timer blev reaktionsblandingen hældt ud i koldt vand (20 ml) og ekstraheret 5 med ether. Etherekstrakten blev vasket med vand (2 x 50 ml), tørret og inddampet. Det resulterende rå materiale blev chromatograferet over silicagel, hvorved der blev opnået 3-(oxazolo[4,5-b]pyridin-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (smp. 105-107 °C), som blev anvendt 10 direkte i det næste trin. Produktet blev opløst i methanol (5 ml) indeholdende 20 % vandig KOH-opløsning (0,5 ml) og opvarmet på et dampbad i 15 minutter. Opløsningen blev inddampet til tørhed, og remanensen blev opløst i vand og gjort sur med eddikesyre (2 ml). Det resulterende 15 gule bundfald blev opsamlet, udrevet med varmt methanol og filtreret til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse som et hvidt fast stof (0,32 g; smp. 228-230 °C).

20 EKSEMPEL 6

En opløsning af methyl-3-(2-benzothiazolyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (1,92 g) i methanol (50 ml) indeholdende 10 % vandig KOH-opløsning (5 ml) blev omrørt ved 25 stuetemperatur i 4 timer. Opløsningen blev koncentreret for at fjerne methanol, og koncentratet blev fortyndet med vand (75 ml) og derpå ekstraheret med ethylacetat.

Den vandige portion blev skilt fra og gjort sur med koncentreret saltsyre til pH 2,0. Det udfældede faste stof 30 blev opsamlet og krystalliseret fra isopropylalkohol, hvilket gav 3-(2-benzothiazolyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (876 mg; smp. 205 °C (d)).

35 30 DK 172010 B1 EKSEMPEL 7 I overensstemmelse med eksempel 6 fremstilledes de følgende forbindelser: 5 DK 172010 Bl TABEL Ih 31 8’ CH-CO-H 7 6 7rfvS 1sl<=>5

Substituent Smp., °C

H 205(d) 10 4-C1 217(d) 5- C1 210-212 6- C1 207(d) 5- Br 214 6- Br 214 15 7-Br 173-175 5-SCH3 187-188 5-SOCH3 184(d) 5-S02CH3 210-211(d) 4-C1, 5-C1 222 20 5-C1, 6-C1 192-195 4-C1, 6-C1 188-190 4- C1,7-C1 223-224 5- C1,7-C1 213 5- CH3 205(d) 25 6-CH3 202(d) 6- OCH3 189(d) 51-F 204-205 5’-CH3 201-203 6,7-Benzo, 5’-F 218-222 30 6,7-Benzo, 5 ’-CH3 215-219 6'-Cl 198-199 7'-Cl 199 6'-Cl, 7'-Cl 189-192 6-Br, 6'-Cl, 7'-Cl 206(d) 35 6' -Br 211 6'-CF3 210-211 32 DK 172010 B1

Substituent Smp.. °C

61-N02 199-201 6'-OCH3 177-179 7'-Br 192 5 7'-CH3 187-190 7'-OCH3 198-202 7'-CF3 124-126 7'-N02 155-158 6,7-Benzo, 7'-Cl 209-210 10 5-CF3 197-198 6'-isopropyl 184-185 7'-isopropyl 99-101 4-F 217-218 4-F, 5-F 178-181 15 5-F 222(d) 6-isopropyl 160-161

TABEL IB

20 CH2C02H

{TYS

^CH-Z---- 0 É5 25

Z. E5 Substituent Smp. . °C

covalent bond CH3 - 159-160(d) covalent bond CH3 5-F3 182-183 covalent bond CH3 5-Cl 205 sulphur Η - 150-160 sulphur H 5-Cl 100-104 EKSEMPEL 8

En blanding af methyl-4-oxo-3H-phthazalin-l-ylacetat 30 (1,09 g) og natriumhydrid (0,269 g;-50 vægt-% dispersion DK 172010 B1 33 i mineralolie) i dimethylformamid (25 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 2 timer under nitrogen. Til den opnåede opløsning tilsattes 2-brommethylbenzothiazol (1,14 g) opløst i dimethylformamid (5 ml), reaktionsblandingen blev 5 omrørt i yderligere 1 time og derpå hældt ud i isvand (50 ml). Blandingens pH-værdi blev bragt til 4,0 ved tilsætning af 10 % saltsyre (5 ml) og ekstraheret med ethylace-tat (100 ml). Ekstrakten blev vasket med vand (50 ml), tørret (MgS04) og inddampet. Det rå produkt (1,92 g), 10 methyl-(2-benzothiazolyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat, blev karakteriseret ved NMR-spektrum (se tabel 2). De andre forbindelser i tabel 2 blev fremstillet på lignende måde under anvendelse af det passende 4-oxo-3H-phthala-zin-l-ylacetat og de passende 2-brom-methylbenzothiazo-15 ler.

TABEL -2A

8’ CH-CO-R 7 6 20 7· ____ rrV^! ?— 6 ' r-m N"" 4 5’ 6 25 Substituent R _Produkt_ H CH 1HNMR(CDC1;3,60MHz) 3.6 (s,3H) 4.0(s,2H) r 5.7 ( s ,2H) ,7.2(m,2H) f 7.6 (τη, 5H) , 8.4 (m, IH)

4-F C2H5 smp· H9-120 °C

30 5-F C2H5 smp. 118-120 °C

4—Cl C2H5 smp* H3-116 °C

35 TABEL 2A (fortsat) DK 172010 B1 34

Substituent R _Produkt_

^ 5-C1 C..H.- smp. 152-155 °C

5 2 5

5-Br CH3 smp. 160-161 °C

7-Br C-H- HNMR(CDC1-,60MHz):1.2 (t,J=8Hz,3H),4.1(s,2H),4.2 (q,J=8Hz,2H) , 5.8 (s, 2H) , 7.3 (m,2H) ,7.8 (m, 4H) ,8.4(m,IH) 10

5- CH3 C2H5 pmp. 134-136 °C

4-F,5-F C2H5 smp. 118-122 °C

4- C1,5-C1 C2H5 smp. 121-122 °C

5- C1,6-C1 CH, 1HNMR(CDC1_,90MHz):3.70 15 (s,3H),4.00(s,2H),5.75(s,2H) , 7.6- 8.0(m,5H),8.3-8.6(m,IH)

5-C1,7-C1 C2H5 smp. 144-145 °C

20 4-C1,6-C1 CH~ 1HNMR(CDC1-,90MHz) :1.20(t,J= * 8Hz,3H),4.00(s,2H),4.15(q, J=8Hz,2H),5.80(s,2H)7.40 (d,J=lHz,IH),7.60(d,J-lHz, IH) , 7.6- 7.9(m,3H),8.4-8.6(m,IH)

4-C1,7-C1 C2H5 smp.173 °C

25 i 6- OCH, CH, iHNMR(CDCl-,90MHz):3.70 Δ J (s,3H),3.80(s,3H) ,4.05(s,2H), 5.75 (s,2H),7.00(dd,J=3,9Hz,IH) 7.20(d,J=3Hz,IH) ,7.6-7.9, (m, 4H),8.4-8.6(m,IH)

5- CH, C-Ης smp. 123-124 °C

30 J * 3 6- CH, CH, XHNMR(CDC1~,90MHz):2.50 J J (s,3H),3.75(s,3H) ,4.10(s,2H) , 5.90 (s,2H),7.35(d,J=8Hz,lH) , 7.65-8.10 (ni, 4H) , 8.5-8.7 (m, lH) 35 TABEL 2A (fortsat) DK 172010 B1 35

Substituent R _Produkt_ 5 ! 6-isopropyl C H, NMR(CDC1-,90MHz):B.40 L5 (m,lH),7.9-7.5(m,5H),7.2{a,J= 9Hz,lH),5.79(s,2H),4.15(q,J= 9Hz,2H),3.85(s,2H),2.98(Sep., J=9Hz,lH),1.28(d,J=9Rz,6H), 1.20(5,J=9Hz,3H) 10 1 5*-Γ Ο,Ης HKMR(CDCl^,90MHZ) :1.20(t, 5 J=BHz,3H),4.00(s,2H),4.20(q, J=8Hz,2H),5.80(S,2H),7.2-8.1 (m,7H) 5'-CH- C-H 1HNMR(CDC15,90MHz) :1.20(t, J 1 b J=BHz,3H),2.95(s,3H),3.95 15 (s,2H),4.20(q,J=8Hz,2H), 5.75(s,2H),7.2-8.l(m,7H) 6,7-Benzo,5*-F C H, 1HNMR(CDCl-,90MHz):1.20(t, 1 b J=8Hz,3H),3.95(s,2H),4.20(q, J=8Hz,2H),5.90(s,2H),7.25-8.00(m,8H),8.80(dd,J=3,7Hz, 20 IH) 6,7-Benzo,5'-CH- C.H.. 1HUMR (CDC1» , 90MHz) :1.20(t, J 1 b J=8Hz,3H),2.95(s,3H),3.95 (s,2H),4.15(q,J=8Hz,2H),5.90 (s,2H),7.4-7.95(m,8H),8.80 (m,IH) 25 i 6'-Cl C-Η. TTNMRlCDCK^OMHz) :1.20(t, J=8Hz,3H),4.05(s,2H),4.25 (q,J=8Hz,2H),5.85(s,2H), 7.2-8.l(m,6H),8.50(d,J= 2Hz,IH) 7'-Cl C-H- 1HNMR(CDC1-,90MHz):1.25(t, 30 1 5 J=8Hz,3H),4.001s,2H),4.20 (q,J=8Hz,2H),5.80(s,2H), 7.25-7.6(m,2H),7.65-7.90 (m,3H),8.00(dd,J=2,9Hz, IH),8.45(d,J=9Hz,lH) 35 T ABEL 2A (fortsat) 36 DK 172010 B1

Substituent R _Produkt_ 5 β'-ΟΙ,Τ'σΐ C-H- 1HNMR(CDCl-,90MHz):1.20(t, J=8Hz,3H),3.00(s,2H),4.20(q, J=8Hz,2H),5.80(s,2H),7.2-7.6 (m,2H),7.7-8.l(m,3H),8.55 (s,IH) 6' -Br C-H,. 1HNMR(CDC1-,90MHz) :1.20(t, 10 J=8Hz,3H),3.90(s,2H),4.15(q, J=8Hz,2H),5.80(s,2H),7.2-8.1 (m,6H),8.60(d,J=2Hz,lH) 6'-NO- C-H- 1HNMR(CDC1,,90MHz) :1.20 (t, £ Z D J=8Hz,3H),4.05(s,2H),4.20(q, J=8Hz,2H),5.80(s,2H),7.2-7.6 (m,2H),7.7-8.1(m,3H),8.60(dd, 15 J=2,9Hz,lH),9.30(d,J=3Hz,lH) 6'-isopropyl 1HNMR(CDC13,90MHz) :8.25 (s, b IH),7.9(m,IH),7.7(m,3H),7.3 (m,2H),5.8(s,2H),4.20(q,J=9Hz, 2H),3.95(s,2H),3.1(sep.,J=9Hz, IH),1.35(d,J=9Hz,6H),1.20(s, J=9Hz,3H) 20 6’-0CH C-H^ 1HNMR(CDCl-,90MHz):1.20(t, J=8Hz,3H),3.95(brs,6H),4.15(q, J=8Hz,2H),5.80(s,2H),7.20-8.10 (τη, 7H) 6'—CF, C-Ης 1HNMR(90MHz,CDCl,):8.7(s,lH), 9I- j z o 8.15-7.7(m,4H) ,7740 (m,2H) ,5.8 (s,2H),4.21(q,J=9Hz,2H),4.0 (s,2H),1.22(5,J=9Hz,3H) 7 ’ Br C-H,. 1 HNMR(CDC1,, 90MHz) :1.20 (t, * b J=8Hz,3H),3.90(5,2H),4.15(q, J=8Hz,2H),5.85(s,2H),7.15-7.50 (m,2H),7.6-8.1(m,4H),8.30 30 (d,J=9Hz) 7'-0Η9 C-Ης 1HNMR(CDC1-,90MHz):1.20(t, J 2 b J=8Hz,3H),2.60(s,3H),4.15 (s,2H) ,4.20(q,J==8Hz,2H) ,5.80 (s,2H),7.3-8.2(m,6H),8.30(d, J=9Hz,IH) TABEL 2A (fortsat) DK 172010 B1 37 5

Substituent R _Produkt_ 7' isopropyl C.H,. 1HNMR(300MHz,CDCl-) :8.24 L 5 (d,J=9Hz,lH),7.84td,J=9Hz, IH),7.62(d,J=9Hz fIH),7.49 10 (d,J=9Hz,lH),7.36(s,lH) , 7.26("t",J=6Hz,lH),7.16 ("t",J=6Hz,lH) ,5.64 (s,2H) , 4.06(q,J=9Hz,IH),1.30(d, .

J=9Hz,6H),1.17(t,J=9Hz,3H) 7’0CH^ 1 HNMR(CDC1-,90MHz) :1.20(t, 15 J 1 * J=8Hz,3H),3.85(s,3R),3.90 (s,2H),4,20(q,J=8Hz,2H) , 5.80(s,2H),7.00(d,J=2Hz,IH) 7.2- 7.5(m,3H), 7.75(dd,J=2.8Hz, IH),8.00(dd,J=2.7Hz,IH),8.50 (d,J=9Hz,IH) 20 7*CF., 09Ης 1HNMR(90MHz,CDCl ) :8.90 (d, * b J=9Hz,IH),8.15-7.70(m,4H), 7.45-7.2(m,2H),5.8(s,2H) , 4.20(q,J=9Hz,2H),4.05(s, 2H),1.18(t,J=9Hz,3H) 25 7'-NCL· C L 1HNMR(CDC1-,90MHz):1.20 (t, 1 2 ^ J=8Hz,3H),5.05(s,2H),4.20 (q,J=8Hz,3H),5.80(s,2H), 7.2- 7.6 (in, 3H) ,7.6-8.1 (ni, 2H),8.4-8.7(m,2H) 6,7-Benzo,7’-Cl C-H,. 1HNMR(CDCl.,90MHz):1.20(t, 30 ^ J=8Hz,3H),4.00(s,2H),4.20(q, J=8Hz,2H),5.90(s,2H),7.5-8.0(m,7H),8.45(d,J=9Hz,IH) , 8.75-8.90(m,IH)

5-CF- C„Hc smp. 134-136°C

3 i 35

TABEL 2B

38 DK 172010 B1 ?H2C02C2H5 IS-^N,5

5 I I I X

Ji N 2 J_4

CH-Z

B r5 z R^ Substituent _Produkt

kov/alent binding ^-CH^ - smp. 117-118eC

10 kovalent binding CHj 5.(^ smp. 105_106.c

kovalent binding CH^ 5-C1 smp. 86-88°C

S H iHNMR(CDC1,,,60MHz) : 1.2(t,J=9Hz,3H),3.85 (s ,2H),4.2(9,J=9Hz, 2H) , 6.0 (s, 2H) ,7.1- 15 8.0(m,7H),8.2-8.4 (m,IH) EKSEMPEL 9 20 Til en blanding af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (23,4 g) i dimethylformamid (175 ml) holdt ved 10 °C blev portionsvis tilsat kalium-t-butoxid (11,2 g) i løbet af 5 minutter. Den resulterende orangefarvede opløsning blev bragt til stuetemperatur, og der tilsattes gradvis 5-25 trifluormethyl-2-chlormethylbenzothiazol i dimethylform amid (25 ml) i løbet af 15 minutter. Efter omrøring i yderligere 30 minutter blev blandingen hældt ud i isvand (1500 ml). Det udfældede faste stof blev opsamlet og vasket med en blanding af isopropylether og n-hexan (250 30 ml/500 ml). Det resulterende lysegule faste stof, ethyl- 3-(5-trifluormethyl-2-benzothiazolylmethyl)-4-oxo-phtha-lazinlylacetat, blev lufttørret (44,3 g), smp. 134-136 °C.

35

Ifølge fremgangsmåden fra eksempel ID fremstilledes de følgende forbindelser: EKSEMPEL 10 39 DK 172010 B1 5 CH2C02C2H5 7 6 [fVS <€τ>· 10 0

Benzoxazolvl-substituent Produkt H ikke isoleret 5-C1 ikke isoleret 5-Br ikke isoleret 5-Cl,7-Cl Massespektrum, m/e basistop 431,06 (delvi s isoleret)

5,6-benzo smp. 167-170 °C

15 Ifølge fremgangsmåden fra eksempel 6 fremstilledes de følgende forbindelser ud fra de ovenstående forbindelser uden isolering af disse: ch2co2h 7 6 20 |fV^ <=>5

Benzoxazolvl-substituent SrøP. , -°C

25 H 179-183 5-C1 205-207 5-Br 190-192 5-C1, 7-Cl 199-201 5,6-benzo 167-170 I overensstemmelse med eksempel 3B fremstilledes de følgende forbindelser: 40 DK 172010 B1 EKSEMPEL 11 5

<fH2C02C2«5 R

f/sS/vs N-1 CX^ a O 1 10 r Produkt 2—F,6—Cl-phenyl 1HNMR(CDC1^ , 6 0MHz): 1.3(fc,J=8Hz,3H),4.0 (s,2H),4.2(q,J=8Hz,2H) 5.8(s,2H),7.3(m,3H), 7.8(m,3H),8.4(m,lH) 15 2-pyridyl smp. 118-123 2-Br-phenyl 1HNMR(CDC1-., 60KHz) : 1.3(t,J=8Hz,3H),4.0 (s,2H),4.2(q,J=8Hz, 2H) ,5.7(s ,2H) ,7.2 9n (m,2H),7.8(m,4H),8.4 U (m, IH)

benzyl smp. 76-80 °C

2-F-phenyl smp. 100-105 °C

3—Cl,4—Cl—phenyl smp. 138-140 °C

25 EKSEMPEL 12 overensstemmelse med eksempel 3C fremstilledes de følgende forbindelser: 41 DK 172010 B1

CH CO H R

CCud 5 0 R_ _Smp. . °C_ 2-Cl-phenyl 164-167 phenyl 202-205 4-Br phenyl 193-195 10 2-methylphenyl 182-184 2-OCH3-phenyl 174-175 2- F, 6-Cl-phenyl 178-182 3- C1, 4-Cl-phenyl 220-221 2-pyrldyl 196-200 15 2-Br phenyl 171-173 benzyl 56-60 2-F phenyl 210-211 EKSEMPEL.13 20 3-( Quinolin-2-ylmethyl )-4-oxo-3H-6,7-dichlorphthalazin-l-yleddikesyre. (I; R^OH; R2=quinolln-2-yl; R3=R4=C1)_ a. 4,5=Pi.chlQrphthalsyreanhydrid 25

En blanding af kommercielt tilgængelig 4,5-dichlorphthal-syre (50,4 g) og eddikesyreanhydrid (150 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 2 timer. Efter afkøling blev det udfældede produkt opsamlet og tørret i vakuum (37,0 30 g; smp. 180 - 181 °C).

B. 3-Ethoxycarbonylmethyliden-5 r 6-dichlorphthalid

En opløsning af 4,5-dichlorphthalsyreanhydrid (10,0 g) og 35 (carbethoxymethylen)triphenylphosphoran (16,0 g) i chloroform (450 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 16 42 DK 172010 B1 timer. Afdampning af chloroform og chromatografi af remanensen over silicagel gav produktet (9,34 g).

C. Ethyl-6.7-dichlor-4-oxo-3H-phthalazin-l-Yl-acetat 5

En opløsning af 3-ethoxycarbonylmethyliden-5,6-dichlor-phthalid (9,37 g), ethanol (300 ml) og hydrazin (1,1 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 3 timer. Efter afkøling blev det udfældede faste stof opsamlet (6,85 g; mas-10 sespektrum, m/e 300 og 227).

D. Den i overskriften angivne forbindelse blev fremstillet ud fra ethyl-6,7-dichlor-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylace-tat og 2-chlormethylquinolin i overensstemmelse med pro- 15 ceduren i eksempel 6, smp. 202 - 203 °C.

EKSEMPEL 14 3-(Quinolin-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesy-20 re (I; R1=0H; R3=R4=H; R2=quinolin-2-yl

Til en opløsning af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (1,0 g) og natriumhydrid (60 vægt-% dispersion i mineralolie) i dimethylformamid (30 ml) tilsattes 2-brommethyl-25 quinolin (1,05 g). Den resulterende opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter, hældt ud i vand (100 ml) indeholdende 1 N saltsyre (5 ml) og ekstraheret med ethylacetat. Den organiske ekstrakt blev vasket med vand (3 x 50 ml), tørret og inddampet, hvorved der blev opnået 30 ethyl-3-(quinolin-2-ylmethyl)-4-oxo-phthalazin-l-ylacetat (1,54 g). Dette stof blev opløst i en blanding af vand og dioxan (70 ml/70 ml). Til opløsningen tilsattes 5 N KOH-opløsning (5 ml). Opløsningen blev omrørt ved stuetemperatur i 15 minutter, koncentreret for at fjerne over-35 skud af dioxan, fortyndet med vand (150 ml) og ekstraheret med ethylacetat (3 x 70 ml). Det vandige lag blev 43 DK 172010 B1 indstillet til pH 2 med koncentreret saltsyre. Det udfældede faste stof blev udrevet med varmt ethylacetat og derpå filtreret til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (0,54 g; smp. 193 - 194 °C).

5 EKSEMPEL· .1.5 I overensstemmelse med eksempel 6 fremstilledes de følgende forbindelser: 10 TABEL 3 44 DK 172010 B1

CH2C02H

oiu.

10

_R2_ Smp . 0 C

benzisothiazol-3-y1 16B

5- (2-chlorphenyl)-l,2,4-oxadiazol-3-yl 163-163 3-phenylisothiazol-3-y1 169-170 3-pheny1 isothiazo1-4-y1 218 ^ 2-pheny1-1,3,4-oxadizol-5-y1 260 4,5-diphenyloxazol-2-yl 197-200 quinolin-2-y1 193-194 quinoxalin-2-yl 213-217 N-methylbenzimidazol-2-yl 230(d) 20 ox azo 1o[4,5-b]pyri ri in-2-y1 228-230 thiazo lo[5,4-b]pyrid in-2-y1 216 5.7- dichlorquinolin-2-y1 200-201 6- bromquino1 in-2-y1 205-206 6.8- dichlorquinolin-2-y1 193-195 3- methy1-1,2,5-thiadi azol-4-y1 160-162 zb 5-phenyloxazol-2-yl 159-162 4- phenyloxazol-2-y1 181-184 2-phenylthiazol-5-yl 164-165 2-0-fluorphenylthiazol-5-yl 184-185 4- phenylthiazol-2-yl 181-184 5- chlorbenzothiophen-2-yl 205-206 35 EKSEMPEL 16

Ifølge eksempel 8 fremstilledes de følgende forbindelser: 45 DK 172010 B1 5 TABEL 4 C02Rj I i o R2 Rj Produkt benzisothiazol- CH, 1HNMR(CDC1^,60MHz): 3-yl 3.7(s,3H),4.0(s,2H), . _ 5.8(s,2H) ,7.6(m,7H) , lb 8.3(m,IR)

3-phenylisothiazol- C_H_ smp. 98-104 °C

5-yl ^ s 3- phenylisothiazol- C_H 1HNMR(CDC1_,60MHz): 4- yl 1.2(t,J=8Hz,3H),3.9 (s,2H),4.2(q,J=8Hz, on 2H), 5.4 (s,2H)7.6 (iu,7H) ,8.4 (ιη,ΙΗ) ,8.8 (s,IH) 2-phenyl-l,3,4- C-H iHNMR(CDC1 ,60MHz): oxadiazol-5-yl 1.2(t,J=8HZ,3H),4.0 (s,2H),4.2(q,J=BHz, 2H),5.7(s,2H),7.4 (m,3H),7.8(m,5H),8.4 25 (m, IH) 5- (2-chlorphenyl)- C2H5 1HNMR(CDC1^,60MHz): 1,2,4-oxadiazol-3-yl 1.3(t,J=8Hz,3H),4.0 (s,2H),4.2(q,J=8Hz, 2H),5.6(s,2H),7.4 (m,3H),7.8(m,4H),8.4 (m, IH)

30 N-methylbenzimidazol- C_Hc smp. 118 “C

2-yl Å b 35 46 DK 172010 B1 R^ __Produkt_

oxazolo[4,5—b]— C-H^ smp. 105-107 °C

pyridin z °

thiazolo[5,4-b]— C^H,- smp. 111-113 UC

pyridin z 3 5-phenyloxazol-2-yl C2H5 smp. 115-117 °c

4—phenyloxazol-2-yl C2H5 smp. 130-131 °C

10 2-phenylthiazol-5-yl C2H5 smp. 104-106 °C

2-o-fluorphenyl- c H smp. 104_107 oC

thiazol-5-yl z 3

4— phenylthiazol-2-yl C2H5 smp. 120-124 °C

5- chlorbenzothio-

phen-2-yl CH^ smp. 139-142 °C

EKSEMPEL 17 20 (N-Morpholino)ethyl-3-(5,6-dichlorbenzothiazol-2-ylme- thyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat/ hydrochlorid_

Til natriumsaltet af N-2-hydroxyethylmorpholin, fremstillet ved forsigtig tilsætning af natriumhydrid (0,45 g; 50 25 vægt-% dispersion i mineralolie) til en opløsning af N-2-hydroxyethylmorpholin (1,43 ml) i toluen (50 ml), tilsattes en opløsning af ethyl-3-(benzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-5,6-dichlorphthalazin-l-ylacetat (1,23 g) i toluen (30 ml). Efter omrøring af reaktionsblandingen ved stue-30 temperatur i 24 timer og derpå ved 60 °C i 6 timer blev den udsat for HCl-gas, og det udfældede faste stof blev tilsat til en mættet vandig opløsning af natriumhydrogen-carbonat (100 ml) og ekstraheret med ethylacetat (3 x 100 ml). Det organiske lag blev tørret og inddampet, og det 35 resulterende faste stof blev opløst i acetone (30 ml). Udsættelse af denne opløsning for gasformigt HC1 gav den 47 DK 172010 B1 i overskriften angivne forbindelse (0,12 g), som blev karakteriseret ved elementanalyse (C 49,83 %; H 3,83 %; N 9,36 %) 5 EKSEMPEL 3.8

Natrium-3-(5-trifluormethylbenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat 10 Natriummethoxid (54 mg) blev tilsat til 3-(5-trifluorme-thyl-benzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-phthalazin-l-yleddi-kesyre (0,4 g) i methanol (10 ml) ved stuetemperatur. Efter at tilsætningen var fuldført, blev der opnået en klar opløsning, som blev omrørt i 15 minutter ved stuetempera-15 tur. Overskuddet af methanol blev afdampet. Remanensen blev udrevet med ether (20 ml) og filtreret til opnåelse af produktet (0,43 g; smp. > 300 °C).

EKSEMPEL 19 20 3-(5-Trifluormethylbenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat, decyclohexylaminsalt

Til en blanding af 3-(5-trifluormethylbenzothiazol-2-yl-25 methyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (0,42 g) i methanol (100 ml) tilsattes cyclohexylamin (0,2 g) i methanol (5 ml). Den resulterende klare opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 15 minutter og derpå inddampet til tørhed. Udrivning af remanensen med ether (30 ml) gav et 30 hvidt fast stof (0,38 g; smp. 207 °C).

EKSEMPEL 20 3-(5-Trifluormethylbenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-35 phthalazin-l-yleddikesyre, megluminsalt_ 48 DK 172010 B1

En opløsning af 3-(5-trifluormethylbenzothiazol-2-ylme-thyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (419 mg) og me-glumin (196 mg) i methanol (50 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time og derpå inddampet til tørhed. Rema-5 nensen blev udrevet med ether (25 ml) filtreret, og det opsamlede faste stof blev lufttørret (610 mg; smp. 157 °C).

EKSEMPEL 21 10 3-(5-Brombenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-phthalazin-l-yl-eddikesyre, megluminsalt_

En opløsning af 3-(5-brombenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-15 phthalazin-l-yleddikesyre (430 mg) og meglumin (196 mg) i methanol (50 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time og inddampet til tørhed. Remanensen blev udrevet med ether (25 ml), og det faste stof blev opsamlet ved filtrering (620 mg; smp. 138 - 140 °C).

20 EKSEMPEL 22

Ethyl-3-(5-sulfinylmethylbenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat 25

Til en iskold opløsning af ethyl-(5-thiomethylbenzothia-zol-2-ylmethyl)-4-oxo-phthalazin-l-ylacetat (1,06 g) i chloroform (10 ml) tilsattes meta-chlorperoxybenzoesyre (0,50 g). Den resulterende opløsning blev omrørt ved 0-5 30 °C i 1 time. Chloroformopløsningen blev vasket med 10 % natriumhydrogencarbonatopløsning (3 x 20 ml), og det fraskilte organiske lag blev tørret over magnesiumsulfat og inddampet til tørhed. Remanensen blev renset ved chroma-tografi over silicagel til opnåelse af den i overskriften 35 angivne forbindelse [0,81 g; 1HNMR (CDC13, 60 MHz); 1,2 49 DK 172010 B1 (t, J=8Hz, 3H), 2,65 (s, 3H), 3,95 (s, 2H), 4,1 (q, J=8Hz, 2H), 5,75 (s, 2H), 7,4-8,3 (m, 7H).

EKSEMPEL 23 5

Ethyl-3-(5-sulfonylmethylbenzothiazol-2-ylmethyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat_

En opløsning af ethyl-5-thiomethylbenzothiazol-2-ylme-10 thyl)-4-oxo-3H-phthalazin-l-yleddikesyre (1,06 g) og me-ta-chlorperoxybenzoesyre (1,3 g) i chloroform (50 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time. Denne opløsning blev vasket med 10 % natriumhydrogencarbonatopløsning (3 x 20 ml), og den organiske ekstrakt blev tørret og ind-15 dampet til opnåelse af et lysegult fast stof (0,85 g; 1HNMR (CDC13, 60MHz): 1,2 (t, J=Hz, 3H), 3,1 (s, 3H), 4,0 (s, 2H), 4,15 (q, J=8Hz, 2H), 5,85 (s, 2H), 7,4-8,3 (m, 7H) .

20 EKSEMPEL 24

Ethyl-3-(5-trifluormethyl-2-a-methylbenzothiazol)-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat; (R^OCjHj; R3=R4=H; R5=CH3; R2=5-trifluormethyl-2-benzothiazolyl 25 A. 1-(2-Benzothiazolyl)ethvlchlorid

Til en opløsning af 1-(2-benzothiazolyl)ethanol (2,5 g), fremstillet ifølge J. Indian Chem. Soc., 566 (1974), i 30 methylenchlorid (50 ml) tilsattes thionylchlorid (3,32 g), og den resulterende opløsning blev omrørt ved stuetemperatur i 1 time. Opløsningen blev hældt ud i isvand (100 ml), og den organiske ekstrakt skilt fra. Denne ekstrakt blev vasket med vandig hydrogencarbonatopløsning 35 (10 ml) af en 5 % opløsning) og derpå med vand (50 ml).

50 DK 172010 B1

Methylenchloridlaget blev tørret over vandfrit magnesium-sulfat og inddampet til en lysegul olie (2,08 g).

B. 1-(5-Trifluormethvl-2-benzothiazolvl)ethanol. mesylat 5

Til en iskold opløsning af l-(5-trifluormethyl-2-benzo-thiazolyl)ethanol (smp. 93-94 °C, 4,94 g) i tørt pyridin tilsattes methansulfonylchlorid (4,58 g), og den resulterende opløsning blev omrørt ved 0 °C i 1 time. Den blev 10 hældt ud i vand, ekstraheret med ether, og etherlaget blev vasket med 10 % saltsyre (2 x 20 ml). Den organiske ekstrakt blev tørret, inddampet, og remanensen udrevet med hexan til opnåelse af den ønskede forbindelse som et fast stof, smp. 89 °C (5,89 g).

15

En blanding af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (2,34 g) og natriumhydrid (0,53 g; 50 vægt-% dispersion i mineralolie) i dimethylformamid (25 ml) blev omrørt ved stuetemperatur i 30 minutter under nitrogen. Til den opnåede 20 opløsning tilsattes l-(5-trifluormethyl-2-benzothiazol-yl)ethanol-mesylat (3,2 g) opløst i dimethylformamid (5 ml), reaktionsblandingen blev omrørt i yderligere 1 time og derpå hældt ud i isvand (50 ml). Blandingens pH-værdi blev bragt til 4,0 ved tilsætning af 10 % saltsyre (5 25 ml), og den blev ekstraheret med ethylacetat (100 ml). Ekstrakten blev vasket med vand (50 ml), tørret over vandfrit magnesiumsulfat og inddampet. Det rå produkt blev renset ved chromatografi over silicagel under elue-ring med ethylacetat/chloroform (volumenforhold 5:95).

30 Den i overskriften angivne forbindelse (2,0 g) blev opnået ved inddampning af eluaterne, smp. 105-106 °C.

EKSEMPEL 25 35 3-(Benzothiazol-5-ylmethylbenzothiazol)-4-oxo-phthalazin-1-yleddikesyre _______________ 51 DK 172010 B1 A. 5-Bromme-thylbenzothiazol blev fremstillet ifølge ek sempel 1C ud fra 5-methylbenzothiazol fremstillet ifølge Grazz. Chim. Ital., 25, 499 (1965). Produktet viste de 5 følgende NMR-resonanser - TMS (60 MHz, CDC13): 4,6 (s, 2H), 7,4 (dd, IH, J=10Hz, J=2Hz), 7,85 (d, IH, J=10Hz), 8,15 (d,J=2Hz), 9,0 (s, IH).

B. Ethyl-3-(5-methylbenzothiazolyl)-4-oxo-3H-phthala-zin- 10 1-ylacetat fremstillet ifølge eksempel ID havde de følgende NMR-resonanser - TMS, (60MHz, CDC13): 1,2 (t, J=8Hz, 3H), 3,95 (s, 2H), 4,2 (q, J=8Hz,2H), 5,6 (s, 2H), 7,2-8,2 (m, 7H), 9,0 (s, IH).

15 C. Den i overskriften angivne forbindelse blev fremstillet ifølge eksempel 1E, smp. 203-204 °C.

EKSEMPEL 26 20 Ethyl-3-(5-fluorbenzothiazolyl-2-ylmethyl)-4-oxo-phthala-zin-1-ylacetat_

Til en opløsning af ethyl-4-oxo-3H-phthalazin-l-ylacetat (2,34 g) i dimethylformamid (15 ml) tilsattes natrium-25 methoxid (0,51 g). Til den klare gule opløsning, som blev opnået efter omrøring af blandingen i 5 minutter, tilsattes en opløsning af 5-fluor-2-chlormethylbenzothiazol, fremstillet ifølge eksempel 1C, i dimethylformamid (5 ml). Efter omrøring af den resulterende opløsning i 1 30 time blev den hældt ud i isvand (50 ml) og ekstraheret med methylenchlorid. Inddampning af den organiske ekstrakt gav et lyst orangefarvet fast stof, som blev krystalliseret fra ethanol til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (3,84 g, smp. 118-120 °C).

35 52 DK 172010 B1

EKSEMPEL A

I tabel 5, blev de første to mellemprodukter fremstillet ved fremgangsmåden ifølge US patentskrift nr. 4 251 528, 5 og de resterende mellemprodukter ved fremgangsmåden fra eksempel 13C.

TABEL 5 CO,Et io 2

5 O

15 _Substituent_Produkt_ 5-F US 4 251-528 5- CH3 US 4 251 528

7-Cl smp. 189-190 °C

6- C1,7-C1 smp. 250 °C

6- N02 smp. 224-225 °C

7- CHj smp. 228-230 °C

7-OCH3 smp. 231-232 °C

7-N02 smp. 172-174 °C

6- isopropyl TMS(300MRz,CDC13): 8.28 ( s, IH), 7.63 (d,J=31Hz,2H), 4.12 (q,J=9Hz,2H), 3.92 (s,2H), 3.04 (sep., J=9Hz,lH), 1.25(d,J=9Hz,611), 1.16(t,J=6Hz,3H) 7- isopropyl TMS(300MHz,CDC13):8.32 (d,J=9Hz,IH), 7.65 (dd,J=lHz), (9Hz,lH), 7.55 (s,IH), 4,15 (q,J=9Hz,2H), 3.96 (s,2H), 3.06(sep.,J=9Hz,IH), 1.27 (d,J=9Hz,6H), 1.18 (t,J*6Hz,3H) 6-CF3 TMS(90MHz,DMS0-d6):13.0-12.6 (br,lH), 8.4 (s,IH), 8.2-79 (m, 2H), 4.00 (q,J=9Hz,2H), 3.98 (s,2H), 1.0 (t,J=9Hz,3H) 53 DK 172010 B1 7-CF3 TMS(90MHz,DMSO-d6):13.0-12.6 (br,lH) 48.5 (d,J=9Hz,IH), 8.22 (m,lH), 8.1 (s,IH), 4.10 (1,J=9Hz,2H), 4.10 (s,2H), 1.15(t,J=9Hz,3H)

EKSEMPEL B

De følgende mellemprodukter blev fremstillet ifølge ek-5 sempel 1C, med mindre andet er anført.

54 DK 172010 B1 TABEL Λ 4 s ‘ iDcim" 6 R, 7 3

Substituent R^ Z X _Produkt_ 6-C1 H Br 1HNMR(CDCl-.,60MHz) :4.75(s,2H) , !0 ~ 7.35(dd,J=Z,8Hz,IH),7.75(d,J= 2.8Hz,IH),7.85(d,J=8Hz,IH)

5- Br H - Br smp. 107 °C

6- Br H - Br · smp, 108 °C

,s 7-Br H - Br 1HNMR(CDC1 ,60MHz) :4.7(s,2H) , 7.2-8.0(m,3H] 5- C1,6-C1 H - Br 1HNHR(CDCl^,90MHz):4.80(s,2H), 8.00(s,1H),8.15(s,lH)

4- C1,6-Cl H - Br smp. 131-134 °C

^HNMRICDCIt,90MHz):4.80(s,2H), 20 7.45(d,J=lHz),7.65(d,J=lHz,lH) 6- OCR, H - Br 1HNMR(CDC1 ,90KHz):3.B5(s,3H), 3 4.75(s,2H),7.05(dd,J=2,9Hz, IH) ,7.25 (d,J=2Hz,IH),7.85(d,J= 9HZ,(IH) 6-CH, H - Br 1HNMR(CDCl.,90MHz) :2.45(s,3H) 25 3 4.90(s,2H),7.25(d,J=7Hz,IH), 7.60(s,IH),7.85(d,J=8Hz,IH)

5- C1 H - Cl smp. 78-80 °C

4-C11 H - Cl smp. 114-115 °C

30 4-F1 H - Cl 1HNMR(60MHz,CDCl,):4.9(s,

2H),7.0-79(m,3H)J

4- F,5-F1 H - Cl smp. 68-70 °C

5- C1,7-C11 H - Cl smp. 74-76 °C

35 55 DK 172010 B1

Substituent Rg_ Z X _Produkt_ 4- C1,5-C1 H - Cl 1HNMR(60MHz,CDC1-) :4.7 (s,2H) f 6.6(d2H,J=10Hz),7.2(d,2H,J= 10Hz)

5 4-C1, 7-C1 snip. 134-135 °C

5- CH3 H - Cl smp. 114-116 °C

6- isopropyl H - Cl 1HNMR(90MHz,CDCl-) :7.85(d, J=9Hz,IH),7.65(dfJ=3Hz, IH),7.40(dd,J=3Hz,9Hz, 10 IH),4.9(s,2H) ,3.00(sep.,J= 6Hz,IH)1.35(d,J=6Hz,6H) H CH - Cl 1 HNMR(60MHz,CDCl_) :2.0(d, 3H,J=8Hz),5.4(q,lH,J=8Hz), 7.0-8.0(m,4H)

5-CF, CH, - OSO.CH, smp. 84 °C

15 J J 1 3

5-Cl CH3 - 0S02CH3 smp. 92-94 “C

Η H S Cl 1HNMR(60MHz,CDCl ):5.25(s,

2H) ,7.0-8.0(ro,4HT

5-C1 H S Cl 1HNMR(60MHz,CDC1,) :5.25 (s, 20 2H),7.0-8.0(m,3Hi 1

Fremstillet ifølge Can J. Chem., 4L3., 2610 (1965) EKSEMPEL C 25

De følgende mellemprodukter blev fremstillet ved de angivne fremgangsmåder fra den kendte teknik eller ved fremgangsmåden ifølge eksempel IB.

56 DK 172010 B1 IABEL 7 4

5 /'nN- N

, CO" 7

Substituent _Produkt_ 5- bromo Chemical Abstracts; 1957 10 52,6319 6- bromo J. Chem. Soc.; 1936, 1225 7- bromo Væske, m/e 228

5-C1,6-C1 smp. 134-135 °C

6-CH- Fremstillet ifølge procedurer i J.

15 3

Chem. Soc.? 1922, 1493 og J. Org. Chem.; 1976, 41,776 4C1,6-C1 Synthesis; 1976,730 6-C1 Synthesis; 1976, 730 20

EKSEMPEL D

5-i 2-ChlorDhenyl)-2-chlormethyl-l.2.4-oxadiazol 25 A. O-2-Chlorbenzoyl-chloracetamidoxim

Chloracetamidoxim (5 g) blev opløst i varmt benzen (20 ml), og der tilsattes forsigtigt 2-chlorbenzoylchlorid (6,4 ml). Den resulterende blanding blev opvarmet til 40 30 °C i 30 minutter, og overskud af benzen blev fjernet. Efter afkøling til stuetemperatur blev den størknede masse udrevet med koldt benzen og filtreret til opnåelse af forbindelsen (1,6 g; smp. 126-130 °C).

35 B. 0-2-chlorbenzoyl-chlroacetamidoxim (1,4 g) blev tilsat til tilbagesvalende diglym (10 ml), og opvarmningen under 57 DK 172010 B1 tilbagesvaling fortsattes i 10 minutter. Efter afkøling blev reaktionsblandingen hældt ud i vand (20 ml) indeholdende ether (50 ml). Etherlaget blev vasket med vand (2 x 50 ml), mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløs-5 ning (2 x 10 ml), og det organiske lag tørret og inddam pet. Remanensen blev chromatograferet over silicagel til opnåelse af produktet, 0,8 g af en farveløs olie, 1HNMR(CDC13,60MHz): 4,7 (s,2H), 7,45 (m, 3H), 8,1 (m, IH).

10 eksempel e

Det kommercielt tilgængelige 2-amino-3-hydroxypyridin (5,0 g) og diglym (30 ml) blev opvarmet til 125 °C til 15 opnåelse af en opløsning. Til denne opløsning tilsattes 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan (9,9 g), og den resulterende blanding blev holdt ved 125 °C i 1 time. Opløsningen blev afkølet til stuetemperatur og derpå dekanteret for at fjerne en sort biproduktrest. Filtratet blev fortyndet 20 med vand (50 ml), og det resulterende gule udfældede 2-chlormethyl-oxazolo[4,5-b]pyridin blev opsamlet (1,5 g).

En lille prøve blev krystalliseret fra isopropylalkohol (smp. 115-118 °C).

25 2-Chlormethyl-thiazolo[5,4-b]pyridin blev fremstillet på lignende måde ved opvarmning af en blanding af 3-amino-2-mercaptopyridin (3,6 g), 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan (6,5 g) og ethanol (60 ml) til 60 “C i 4 timer. Efter afdampning af ethanolet blev det resulterende rå faste stof 30 chromatograferet over silicagel, hvorved der blev opnået 2,94 g af produktet, smp. 71-73 “C.

På lignende måde blev 2-chlormethyl-5-trifluormethyl-benzothiazol, smp. 52 °C, dannet ud fra 2-amino-4-tri- 35 fluormethylthiophenol-hydrochlorid og 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan i ethanol.

58 DK 172010 B1

EKSEMPEL E

Mellemprodukter med formlen Hal-CH2R2 blev fremstillet ved de nedenfor anførte fremgangsmåder eller ved fremgangsmå-5 den ifølge eksempel E.

TABEL 8

Struktur Produk t 10 3-brommethylbenisothiazol R.A. Gillham, Jr., Ph.D.

thesis, California Institute of Technology, 1969 3-phenyl-5-chlormethyl- ^HNMRiCDCl-jéOMHz); isothiazol 4,B(s,2H),7,4(m,3H), 7,9(m,2H )

15 2-chlormethy1-5-phenyl- smp. 64-66 °C

oxazo1

2- chlormethyl-4-phenyl- smp. 50-52 °C

oxazol 5-chlormethy 1-2-phenyl- GB patentskrift nr.

thiazol 1 137 529 20 5-chlormethy1-2-0-fluor- GB patentskrift nr.

phenylthiazol 1 137 529 3- phenyl-4-chlormethyl- *HNMR(CDCl.,.60MHz): isothiazol 4,5(s,2H),7,4(m , 3H ) , 7,7(m,2H) 2-pheny1-5-chlormethy1- Chem. Ber. 96, 1049 1.3.4- oxadiazol (1963) 25 2- chlormethy1-5-chlor- J.Chem. Soc. (C), benzothiophen (1967) 3- ch1 ormethy 1-5-(2-chlor- Fremstilling iføi- phenyl )-1,2,4-oxadiazol ge proceduren i J.

Geterocyclic Chem.

16, 1469 (1979).

30 1 HNMR (CDC1,,60MHz): 4,7(s,2H),7,4 5(m, 3H),8,l(m,1H) N-methy1-2-chlormethy1- JACS, 65, 1854,

benzimidazol (1943), smp. 95 "C

,= 3-methyl-4-broromethyl- ^ Heterocyclic 35 , O c lu 1 Chem., 21, 1157 1.2.5- thiadiazol (1984), kp.

30-35 °C v/ed 7 mmHg 59 DK 172010 B1

EKSEMPEL G

Benzoatet af 4-phenylthiazol-2-methanol (7,4 g), fremstillet ifølge J. Am. Chem. Soc., 53, 1470 (1931), blev 5 opløst i vandfrit tetrahydrofuran (50 ml). Til denne opløsning tilsattes lithiumaluminiumhydrid (525 mg), og blandingen blev omrørt i 1 time ved stuetemperatur. Efter omhyggelig udslukning af overskuddet af lithiumaluminiumhydrid med ethylacetat blev blandingen hældt ud i iskoldt 10 vand (50 ml) og gjort sur til pH 3 under anvendelse af 10 % saltsyre. Blandingen blev filtreret, og filtratet blev ekstraheret med ether (3 x 50 ml). Den organiske ekstrakt blev tørret, inddampet, og det rå produkt renset ved chromatografi til opnåelse af 4-phenylthiazol-2-methanol 15 (1,8 g). Denne forbindelse blev omdannet til 4-phenyl- thiazol-2-methanol-methansulfonat ifølge proceduren beskrevet i eksempel 24B. Produktets smeltepunkt var 80 °C.

EKSEMPEL H

20

De følgende mellemprodukter blev fremstillet ved fremgangsmåden ifølge Helvetica Chimica Acta 49, 412 (1966) undtagen de to sidste mellemprodukter, som blev fremstillet ved fremgangsmåden ifølge J. Med. Chem. 4, 351 25 (1961).

60 DK 172010 B1

TABEL 9 Cl 4yNv R

5 0-N

— Produkt phenyl Helvetica Chimica Acta 49, 412 (1966) in 2~C1 phenyl 1HNMR(CDC1-,60MHZ): υ 4.8(s,2H) ,7.4(m,3H) , 7.9 (ro, IH)

4-Br phenyl smp. 155-I60 °C

2-mefchylphenyl JHNMR (CDC1-., 60MHz) : 2.6(s, 3H) , 9.7 (s, 2H) , ,c 7.3{m,3H),8.0(m,IH) ±3 2-OCH3 phenyl smp. 59_62 0f; 2-F, 6-C1 phenyl 1HNMR(CDCl-l, 60MHz) : 4.8 ( s, 2H) ,7.3 (πι, 3H) 2-F phenyl smp. 32-34 »c

20 3-C1, 4-Cl phenyl Smp. 38-41 oC

2-pyridyl smp. 89_94 „c 2-bromophenyl smp. 45_46 oc 2-CF3 phenyl 1flNMR(CDCl,,60MHz) : 25 4.8(s,2H) ,7.8(n, 4H) benzyl 1HRMR(CDC1-,60MHz); 4.0 (s , 2H) , 4.4 (s, 2R) , 7.3(s,5H) EKSEMPEL J 30

En blanding af 5-chlor-2-hydroxyanilin (10 g) og chlor-acetamidsyre-ethylester-hydrochlorid (8,5 g) i chloroform (100 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 5 timer.

Den mørkebrune opløsning blev filtreret, vasket først med 35 10 % vandig KOH-opløsning (10 ml) og derpå med vand (20 ral). Det organiske lag blev tørret (magnesiumsulfat) og 61 DK 172010 B1 derpå inddampet til tørhed. Remanensen blev renset ved søjlechromatografi (smp. 53-56 °C, udbytte 8,6 g).

De følgende mellemprodukter blev fremstillet ved den ov-5 enstående procedure: 7 6 o-^>5 C1 Jc- V/ ^ N'"' 4 10

Substituent Produkt

5-Brom smp. 63-65 °C

5-C1, 7-C1 smp. 52-53 °C

15 5,6-dibenzo smp. 105 °C

EKSEMPEL K

A. En blanding af 1,1,1-triethoxyethan (97,3 g) og N-20 chlorsuccinimid (88,1 g) i carbontetrachlorid (600 ml) blev opvarmet til 40 °C og derpå bestrålet med en ultraviolet lampe. Reaktionen blev exotherm og døde derpå hen efter fuldførelse af reaktionen. Det udfældede succin-imid-biprodukt blev frafiltreret, og filtratet blev kon-25 centreret for at fjerne carbontetrachlorid. Den resterende væske blev destilleret til opnåelse af rent 2-chlor- 1,1,1-triethoxyethan (91,0 g; kp. 91 °C/25 mmHg).

B. En opløsning af 2-chlor-1,1,1-triethoxyethan (5,9 g) 30 og 2-aminothiophenol (2,5 g) blev opvarmet til 80 “C i 15 minutter. Efter afkøling til stuetemperatur blev den opløst i methylenchlorid (30 ml), og den resulterende opløsning blev vasket med 3 N saltsyre (10 ml) og derpå med vand (20 ml). Den organiske portion blev inddampet, og 35 remanensen chromatograferet over silicagel, hvorved der 62 DK 172010 B1 blev opnået chlormethylbenzothiazol (3,35 g; 90 % udbytte), smp. 34 °C.

EKSEMPEL l· 5 2-Chlormethvl-5-brombenzothiazol

En blanding af råt 2-amino-4-bromthiophenol-tin-hydro-chlorid-kompleks (71,6 g), fremstillet ifølge JACS 53, 10 209 (1931), 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan (58,7 g) og ethanol (400 ml) blev opvarmet til svag tilbagesvaling i 30 minutter til dannelse af en opløsning. Til den varme opløsning tilsattes 3 N saltsyre (10 ml), og det udfældede faste stof blev opsamlet, vasket med vand og derpå 15 tørret til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (35,5 g), smp. 107 °C.

EKSEMPEL M

20 A. 2-Amino-4-trifluormethvlthiophenol-hvdrochlorid

Det kommercielt tilgængelige 4-chlor-3-nitro-benzotri-fluorid (100 g) blev opløst i ethanol (400 ml). Til denne opløsning blev portionsvis tilsat en opløsning fremstil-25 let ved først at sætte natriumsul f idhydrat (80 g) til varmt ethanol (200 ml) og derpå svovl (9,6 g). Efter at den oprindelige exotherme reaktion var døet hen, blev reaktionsblandingen opvarmet under tilbagesvaling i yderligere 30 minutter og derpå afkølet til stuetemperatur.

30 Det udfældede gule faste stof blev opsamlet, vasket med koldt ethanol og derpå tørret, hvorved der blev opnået 4,4'-ditrifluormethyl-2,2'-dinitrodiphenyldisulfid (63,0 g; smp. 152-154 °C). En blanding af denne forbindelse (62 g), metallisk tin (findelt til maskevidde 0,84 mm, 132,0 35 g), ethanol (50D ml) og koncentreret saltsyre (200 ml) blev opvarmet til forsigtig tilbagesvaling ved 80 °C, til 63 DK 172010 B1 der næsten var opnået en opløsning. Derpå blev reaktionsblandingen holdt ved 70 "C i 30 minutter. Den varme opløsning blev filtreret, og filtratet koncentreret under lavt tryk til en viskøs væske. Til denne tilsattes 6 N 5 saltsyre, og det udfældede hvide faste stof blev frafiltreret til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (49,0 g; smp. 208 -209 °C).

B. 2-Chlormethvl-5-tri fluormethvlbenzothiazol 10

Til en opløsning af 2-amino-4-trifluormethylthiophenol-hydrochlorid (30,0 g) i ethanol (125 ml) tilsattes 2-chlor-1,1,1-triethoxyethan (31,0 g). Blandingen blev opvarmet i 1 time ved 60 °C. Opløsningen blev koncentreret 15 for at fjerne overskud af ethanol, og det resulterende materiale blev ekstraheret med ether (500 ml). Den organiske ekstrakt blev vasket successivt med 10 % saltsyre (20 ml), vand (100 ml), 10 % natriumhydrogencarbonatop- løsning og vand (100 ml) og derpå inddampet til opnåelse 20 af en ravfarvet olie, som krystalliserede efter henstand ved stuetemperatur (28,9 g; smp. 52 °C).

EKSEMPEL N

25 2-Chlormethvl-5.7-dichlorbenzoxazol

Til en opløsning af 2,4-dichlor-6-nitrophenol (10,0 g) i vand (450 ml) indeholdende natriumhydrogencarbonat (4,8 g) blev tilsat natriumdithionat i en tilstrækkelig mængde 30 til at gøre den oprindelige mørke opløsning farveløs. Den varme reaktionsblanding blev filtreret, filtratet blev afkølet til stuetemperatur, og det krystalliserede produkt, 2-amino-4,6-dichlorphenol, blev opsamlet (1,6 g). 2-Amino-4,6-dichlorphenolet (1,6 g) blev opløst i ethanol 35 (5 ml), og der tilsattes 2-chlor-1,1,1-triethoxyethan (1,9 g). Den resulterende opløsning blev opvarmet på et DK 172010 B1 64 dampbad i 1,5 time. Efter afkøling til stuetemperatur tilsattes koldt vand (5 ml). Det udfældede faste stof blev opsamlet og derpå lufttørret til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse (1,12 g; snip. 52-53 °C).

5

EKSEMPEL O

2-Chlormethv1-5-brombenzoxazo1 10 2-Amino-4-bromphenol (1,6 g), fremstillet ifølge US patentskrift nr. 4 157 444, blev opløst i ethanol (5 ml), og der tilsattes 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan (1,9 g).

Den resulterende opløsning blev opvarmet på et dampbad i 1,5 time. Efter afkøling af reaktionsblandingen til stue-15 temperatur tilsattes koldt vand (5 ml). Det udfældede faste stof blev opsamlet og lufttørret til opnåelse af produktet (1,12 g; smp. 63-65 °C).

EKSEMPEL P

20

Ved en fremgangsmåde mage til den i eksempel K.B. fremstilledes 2-chlormethyl-5-chlorbenzoxazol, smp. 53-56 “C, ud fra kommercielt tilgængeligt 2-amino-4-chlorphenol under anvendelse af ethanol eller chloroform som opløs-25 ningsmiddel i stedet for methylenchlorid. På lignende måde fremstilledes 2-chlormethyl-5-methylthiobenzothi-azol, smp. 65-66 °C, og 2-chlormethyl-5-fluorbenzothia- zol, smp. 73 °C, ud fra henholdsvis 2-amino-4-methylthio-phenyl-hydrochlorid og 2-amino-4-fluorthiophenol-hydro-30 chlorid i ethanolopløsning.

35 65 DK 172010 B1

EKSEMPEL O

5-Chlormethyl-2-phenvl-l.3.4-oxadiazol 5 En blanding af 2-chlor-l,1,1-triethoxyethan (4,8 g), ben-zoylhydrazin (3,0 g) og ethanol (30 ml) blev opvarmet under tilbagesvaling i 2 timer, og opløsningen fik lov at afkøles til stuetemperatur. Til det udfældede hvide krystallinske stof tilsattes vand (10 ml) indeholdende nogle 10 få dråber 10 % saltsyre. Blandingen blev omrørt i 10 minutter og derpå filtreret, og det faste stof blev opsamlet. Modervæsken blev inddampet til tørhed, og remanensen blev udrevet med vand og filtreret til opnåelse af en anden mængde hvidt fast stof. Det kombinerede udbytte af 15 de to mængder var 3,8 g (89 %; 1HNMR identisk med produktet beskrevet i Chem. Ber. 1049 (1969).

Claims (9)

66 DK 172010 B1

1. Heterocycliske oxophthalazinyleddikesyre-forbindelser med den almene formel CH-COR. 5 RS 10 hvori Z betyder kovalent binding, 0, S, NH eller CH2, Ri betyder hydroxy, di(Cx-C4 )alkylamino eller (Ci-C^alk-oxy, som kan være substitueret med N-morpholino eller 15 di(Cx-C4 )alkylamino, R2 betyder en heterocyclisk 5-leddet ring med 1 nitrogen-, oxygen- eller svovlatom, 2 nitrogenatomer, hvoraf det ene kan være erstattet med et oxygen- eller svovl-20 atom, eller 3 nitrogenatomer, hvoraf det ene kan være erstattet med et oxygen- eller svovlatom, hvilken ring er substitueret med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, (Cx-C4) alkyl og phenyl eller kondenseret med benzo eller monosubstitueret med pyridyl, furyl eller 25 thienyl, hvor nævnte phenyl eller benzo eventuelt er substitueret med 1 substituent valgt blandt iod og trifluor-methylthio eller med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, brom, (0χ-04 )alkyl, (Cx-C4 )-alkoxy, (Cx-C4)-alkylthio, (Cj-C^alkylsulfinyl, (Cx-C4 )alkylsulfonyl og 30 trifluormethyl, og nævnte pyridyl, furyl eller thienyl eventuelt er substitueret i 3-stillingen med fluor, chlor, brom, (Cx-C4)alkyl eller (Cx-C4)alkoxy, eller R2 betyder en heterocyclisk 6-leddet ring med 1-3 nitrogenatomer eller med 1 eller 2 nitrogenatomer og 1 oxygen-35 eller svovlatom, hvilken ring er substitueret med 1 eller 67 DK 172010 B1 2 substituenter valgt blandt (C^-C^)alkyl og phenyl eller kondenseret med benzo eller monosubstitueret med pyridyl, furyl eller thienyl, hvor nævnte phenyl eller benzo eventuelt er substitueret med 1 substituent valgt blandt iod 5 og trifluormethylthio eller med 1 eller 2 substituenter valgt blandt fluor, chlor, brom, (Cj-C^) alkyl, ((^-C«)-alkyl thio, (C2-C4 )alkylsulfinyl, (03_04 )alkylsulfonyl og tri-fluormethyl, og nævnte pyridyl, furyl eller thienyl eventuelt er substitueret i 3-stillingen med fluor, chlor, 10 (C^-C^)alkyl eller ()alkoxy, eller R2 betyder oxazol eller thiazol kondenseret med en 6-leddet aromatisk gruppe indeholdende 1 eller 2 nitrogenatomer eller med thiophen eller furan, som hver eventuelt er monosubstitueret med fluor, chlor, brom, trifluormethyl, methyl-15 thio eller methylsulfinyl, eller R2 betyder imidazolo-pyridin, naphthothiazol eller naphthoxazol, R3 og R4 er ens eller forskellige og hver for sig betyder hydrogen, fluor, chlor, brom, trifluormethyl, (Cj-C^Jal-20 kyl, (03-04 )alkoxy, (Ci-C^alkylthio, (Ci-C4 ) alkyl sul finyl, (Ci-C.jJalkylsulfonyl eller nitro, eller R3 og R4 tilsammen betyder (C^-C^ )alkandioxy, og R5 betyder hydrogen eller methyl, 25 og farmaceutisk acceptable baseadditionssalte af sådanne forbindelser med formlen I, hvori R3 er hydroxy, eller syreadditionssalte af sådanne forbindelser med formlen I, hvori Rx er di(Cx-C4)alkylamino eller (Cx-C4 )alkoxy sub-30 stitueret med N-morpholino eller di( Cx-C4 )alkylamino.

2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R2 er benzothiazolyl, benzoxazolyl, isoquinolyl, benzothiophen-yl eller benzofuranyl, hvilke grupper even-35 tuelt er substitueret som defineret i krav 1, eller oxa- 68 DK 172010 B1 diazolyl eller indolyl substitueret som defineret i krav 1.

3. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 5 ved, at Z er en kovalent binding eller CH2, Rx er hydroxy, R2 er benzothiazol-2-yl, benzothiazol-5-yl, benzo-isothiazol-3-yl, benzoxazol-2-yl, 2-quinolyl, 2-quinoxal-yl, oxazolo[4,5-b]pyridin-2-yl, benzothiophen-2-yl, ben-zofuran-2-yl, eller thiazolo[4,5-b]pyridin-2-yl, hvilke 10 grupper eventuelt er substitueret som defineret i krav 1, eller 1,2,4-oxadiazol-3-yl, 1,2,4-oxadiazol-5-yl, isothi-azol-5-yl, isothiazol-4-yl, 1,3,4-oxadiazol-5-yl, 1,2,5- thiadiazol-3-yl, oxazol-2-yl, thiazol-2-yl eller thiazol- 4-yl substitueret som defineret i krav 1, og R3, R4 og R5 15 er hydrogen.

4. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R2 er 2-benzothiazolyl substitueret i benzodelen med 1 trifluormethylthiosubstituent eller med 1 eller 2 20 substituenter valgt blandt chlor, brom, methyl, methoxy, trifluormethyl og 6,7-benzo.

5. Forbindelser ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at R3 er hydrogen, 5-fluor, 5-chlor, 5-brom 25 eller 5-methyl, og R4 er hydrogen; 6- eller 7-substitue-ret chlor, brom, methyl, isopropyl, methoxy, nitro eller trifluormethyl; 4,5-difluor; eller 5,7-dichlor.

6. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 30 ved, at R2 er benzothiazol-2-yl eller quinoxalyl, hvilke grupper eventuelt er substitueret som defineret i krav 1, og R3 og R4 begge er chlor.

7. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 35 ved, at de er i form af natriumsaltet eller N-methylglu- caminsaltet. 69 DK 172010 B1

8. Farmaceutisk præparat til inhibering af aldosereduc-tase-aktivitet, kendetegnet ved, at det omfatter en forbindelse ifølge ethvert af kravene 1-7 i blanding med en farmaceutisk accaptabel bærer. 5

9. Forbindelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1-7 til anvendelse som lægemiddel.