DK160289B - Bundet fase af siliciumdioxid og carboalkoxyalkylsilaner til fastfase-ekstraktion og fremstilling og anvendelse deraf - Google Patents
Bundet fase af siliciumdioxid og carboalkoxyalkylsilaner til fastfase-ekstraktion og fremstilling og anvendelse deraf Download PDFInfo
- Publication number
- DK160289B DK160289B DK208686A DK208686A DK160289B DK 160289 B DK160289 B DK 160289B DK 208686 A DK208686 A DK 208686A DK 208686 A DK208686 A DK 208686A DK 160289 B DK160289 B DK 160289B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- approx
- solid
- carbon atoms
- silica
- pore size
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic System
- C07F7/02—Silicon compounds
- C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
- C07F7/12—Organo silicon halides
- C07F7/14—Preparation thereof from optionally substituted halogenated silanes and hydrocarbons hydrosilylation reactions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
- B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
- B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
- B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
- B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
- B01J20/3257—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur together with at least one silicon atom, these atoms not being part of the carrier as such
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
- B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
- B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
- G01N33/948—Sedatives, e.g. cannabinoids, barbiturates
Description
O
DK 160289 B
Den foreliggende opfindelse angår fyldningsmateriale til fastfaseekstraktion, især sådant fyldningsmateriale, som er anvendeligt til oprensning af urinprøver til analyse af cannabinoider i urin.
5 Påvisning af marihuana-anvendelse ved analyse af bio logiske prøver, såsom urin eller blod, får mere udstrakt anvendelse. Da anvendelse af urinprøver indebærer en ikke-invasiv og mere bekvem fremgangsmåde, begynder påvisning af metaboliter af Δ-9-tetrahydrocannabinol i urin at få 10 større popularitet. Endvidere er anvendelsen af en sådan bestemmelsesmetode begyndt at få større betydning og mere udstrakt anvendelse, ikke kun på grund af dens anvendelse til afsløring af marihuana-brugere, men som et hjælpemiddel ved programmer til vejledning af stofmisbrugere som en 15 screeningsmetode til at overvåge, at personerne overholder inddragelsesprocedurerne og fortsætter med at holde sig fra marihuana-anvendelse.
Af de forskellige metaboliter af Δ-9-tetrahydrocannabinol fundet i urin er den vigtigste ll-nor-4-9-tetrahy-20 drocannabinol-9-carboxylsyre, i det følgende omtalt som THC-COOH, i enten dens frie eller konjugerede (glucuronid) form. Der findes adskillige ikke-automatiserede fremgangsmåder til påvisning af THC-COOH i urin, såsom tyndtlags-chromatografi, gaschromatografi, gaschromatografi/masse-25 spektrometri, radioimmunobestemmelse, enzym-forstærket immunobestemmelse og i den seneste tid højydelsesvæskechro-matografi (HPLC). Sådanne fremgangsmåder er imidlertid ganske arbejdskrævende og på grund af de talrige og varierende interfererende faktorer i urinprøven ganske besværlige 30 at udføre. Endvidere er det vanskeligt-at måle THC-COOH i urin på grund af den komplekse natur af denne matriks. Ekstraktionen af THC-COOH fra urin gøres mere vanskelig, fordi THC-COOH er én organisk syre blandt et stort antal forskellige organiske syrer, som er til stede i urin. En del 35 af disse organiske syrer har chromatografiske egenskaber, som ligner THC-COOH og vil vanskeliggøre dens måling. Por at kunne opnå en meningsfyldt og relativ hurtig måling
DK 160289 B
O
2 af THC-COOH i urin skal man kunne ekstrahere den selektivt fra urinprøven.
Gængse metoder til screening af totale urinprøver for nærværelse af THC-COOH er sædvanligvis .enten tyndt-5 lagschromatografi eller den enzymforstærkede immunobestem-raelsesmetode (EMIT) ifølge Syva Company. Når en positiv prøve først er påvist, foretages en bekræftelsesanalyse, sædvanligvis ved gaschromatografi/massespektrometri. Med tilstrækkelig oprensning af urinprøven, dvs. koncentration 10 af THC-COOH i urinprøven, og anvendelse af en indre standard, er bekræftelse ved HPLC imidlertid mulig. Der er således et stort behov for en meget mere tilfredsstillende metode til oprensning af urinprøver til koncentrering af THC-COOH, som er til stede i de nævnte prøver. En chroma-15 tografisk fyldning af bundet fase, som udelukkende og specifikt ekstraherer THC-COOH fra menneskeurin, ville være særdeles ønskelig. Desuden ville en bundet fase, som er specifik nok for THC-COOH, men som alligevel tillader selektiv eluering af THC-COOH fra søjlen uden fjernelse af uren-2o hederne fra søjlen eller selektiv eluering af urenhederne fra søjlen uden fjernelse af THC-COOH, være særdeles ønskelig. Der er et stort behov for en bundet fase, som tilveje-bringer en renset urinekstrakt, som er ren nok til at tillade en mere følsom analyse af THC-COOH ved bekræftelses-25 metoder, såsom ved HPLC. Urene ekstrakter resulterer også i høje og støjfyldte basislinier, som formindsker evnen til at påvise lave niveauer af THC-COOH. Oprensning af urinprøver, som er tilstrækkelig til at påvise lave niveauer af THC-COOH, ville være særdeles ønskelig.
30 I overensstemmelse med opfindelsen tilvejebringes en bundet fase, som muliggør ekstraktion af en mere højtrenset eller -koncentreret form af THC-COOH fra menneskeurin, af det carboxylfrie reaktionsprodukt fremkommet ved omsætning af silicagel eller glas med kontrolleret porestør-35 relse med carboalkoxyalkylsilaner med formlen
O
3
DK 160289 B
R2-—Si-A-C (01 OR
5 ^ hvori R er en alkylgruppe med 1-3 carbonatomer, A er en 1 2
alkylengruppe med fra ca. 2 til "4 carbonatomer, og R , R
3 og R kan være ens eller forskellige og er valgt blandt halogen, alkoxy med 1-6 carbonatomer, alkoxyalkoxy med 10 2-5 carbonatomer og alkyl med 1-3 carbonatomer, med den 12 3 forudsætning, at mindst én af R , R og R er en anden gruppe end en alkylgruppe. Med sådanne siliciuradioxidprodukter med bundet fase fås en meget renere ekstrakt af THC-COOH fra urin end fra tidligere anvendte eller tilgængelige 15 bundne faser, og dette muliggør kvantitering ved meget lavere niveauer af THC-COOH og også nøjagtigere måling af THC-COOH. Ved anvendelse af denne bundne fase opnås endvidere en meget simplere og hurtigere ekstraktion af THC-COOH.
20 Carboalkoxyalkylsilanerne omsat med silicagel eller glas med kontrolleret porestørrelse kan være enhver silan med den tidligere angivne formel. I denne formel er halogen fortrinsvis chlor, R er fortrinsvis methyl, og A er for- 12 3 trinsvis ethylen. Mest foretrukket er R , R og R methyl 25 eller chlor, mest foretrukket er alle chlor. Som eksempler på sådanne silaner, som skal omsættes med silicagel eller glas med kontrolleret porestørrelse, kan nævnes carbome-thoxyethyltrichlorsilan, carbomethoxyethylmethyldichlor-silan, carbomethoxyethyldimethylchlorsilan, carboethoxy-30 propyltrichlorsilan, carbomethoxybutyltrichlorsilan, car-bopropoxyethyltrichlorsilan, carbomethoxyethyltrimethoxy-silan, carbomethoxyethyltrimethoxymethoxysilan, carbome-thoxyethyltriethoxysilan og lignende.
Reaktionsproduktet er anvendeligt som en søjlefyldning 35 ved væskechromatografi til rensning og fraskillelse af THC-COOH fra menneskeurin, især ved højydelsesvæskechroma-tografi(HPLC)-anvendelser.
O
4
DK 160289 B
Sådanne siliciumdioxidprodukter med bundet fase fås ved omsætning af silaner med den tidligere angivne formel med silicagel eller glas med kontrolleret porestørrelse (CPG). Den anvendte silicagel er silicagel med en gennem-5 snitlig partikeldiameter på ca. 3 til ca. 70 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 50 til ca. 1000, fortrinsvis ca. 50 til ca. 250 Å.
Det partikelformige glas med kontrolleret porestørrelse, som er anvendeligt som et udgangsmateriale ved den 10 foreliggende opfindelse, er CPG med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 37 til ca. 177 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 40 til ca. 1000 Å.
De her omhandlede siliciumdioxidprodukter med bundet fase fremstilles i overensstemmelse med de følgende trin: 15 A. Omsætning af enten partikelformig silicagel med en gen^· nemsnitlig partikeldiameter på ca. 3 til ca. 70 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 50 til ca. 1000 Å eller partikelformigt glas med kontrolleret porestørrelse med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 37 til 177 20 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 40 til ca.
1000 Å i en indifferent organisk opløsningsmiddelopslæmning med en carboalkoxyalkylsilan med den tidligere angivne formel, idet reaktionen gennemføres ved omgivelsestil tilbagesvalingstemperatur i ca. 2 til ca. 50 timer; 25 B. udvinding af det fremkomne faste stof fra reaktionsblandingen; og C. opvarmning af den nævnte faste fraktion ved en temperatur og i et tidsrum, som er tilstrækkelige til at tørre og fuldstændig binde silanen til hhv. silicagelen eller 30 glasset med kontrolleret porestørrelse.
Uden at være bundet deraf menes det, at reaktionen forløber til afslutning i to trin som følger, i hvilke f.eks. en carbomethoxyethyltrimethoxysilan anvendes som en reaktant.
35
O
5
DK 160289 B
Trin 1« Siliciumdioxidhydroxylgrupper og methoxygrupperne på silanen omsættes til dannelse af Si-O-Si-bindinger og frit methanol/ idet nogle resterende me-thoxygrupper forbliver uomsatte: 5 ίϋ— OH MeC^ CH2) 2COOCH3 2ii—0^ yiCH2) 2COOCH3 + si -2 MeOHv Si /\ -> /. \
Hi—OH MeO OMe !!i—0 OMe
Trin 2: Reaktionen med de resterende methoxygrupper afsluttes ved varmehærdning ved a) og b): 15 a) 25i—o CH2) 2COOCH3 i li—
Si ^Si—(CH2) 2COOCH3 ίϋ—Ο \>Me ili—O*"^^ 20 -MeOMe ^ Λ
varme * T
<;i—0^ ^OMe i li—
Si ^Si—(CH2) 2COOCH3 25 !5i— / \cH2)2COOCH3 |i—O''''' b) l i
Si—o (CH2) 2COOCH3 Si—O
30 \ / X
Si MeOMe y ii—O-Si (CH2)2COOCH3
/ \ varme S
i li—O OMe i i—O'
35 I i OH
O
DK 160289B
e Sådanne produkter egner sig til anvendelse som chroma-tografisk søjlefyldning i overensstemmelse med opfindelsen.
Det foretrækkes imidlertid, at sådanne produkter afsluttes, dvs. de uomsatte silanolgrupper omsættes med f.eks. trime-5 thylchlorsilan eller hexamethyldisilizan for at gøre sila-1 nolerne indifferente.
Silicagel bestående af amorft siliciumdioxid er kommercielt tilgængelig i uregelmæssige og sfæriske partikel-formige former og i forskellige kommercielle kvaliteter 10 med meshstørrelser på 3-325 (ASTM). I stedet for at stole på en numerisk angivelse af meshstørrelse er mere nøjagtige angivelser hvad den foreliggende opfindelse angår imidlertid hhv. den gennemsnitlige diameter og den gennemsnitlige porestørrelse af silicagelpartiklerne fra ca. 3 til ca. 70 15 jam og fra ca. 50 til ca. 1000, fortrinsvis 50-250 Å.
CPG, som er et silicatholdigt bæremateriale, som kemisk ligner siliciumdioxid til anvendelse ved væskechroma-tografi, er f.eks. kommercielt tilgængeligt fra Pierce Chemical Co., Rockford, Illinois, med en gennemsnitlig par-20 tikeldiameter på ca. 37 til ca. 177 pm og en gennemsnitlig porestørrelse, som udgangsmateriale, på ca. 40 til ca. 1000 Å, og fortrinsvis anvendes CPS på ca. 40 til ca. 500 Å.
Blandt de indifferente organiske opløsningsmidler, som egner sig til fremstilling af silicagel- eller CPG-op-25 slæmningen, er aliphatiske carbonhydrider, f.eks. hexan, heptan og lignende, aromatiske carbonhydrider, f.eks. benzen, toluen, xylen og lignende, chlorerede methaner, f.eks. methylenchlorid, chloroform, carbontetrachlorid og lignende, og sådanne andre indifferente opløsningsmidler som 30 tetrahydrofuran, glym, diglym og lignende. Sædvanligvis giver en l:5-forhold mellem silicagel eller CPG i g og opløsningsmiddel i ml en egnet opslæmning. På grund af den fine, uopløselige natur af den partikelformige silicagel og CPG fås snarere en opslæmning end en rigtig opløsning.
35 Carboalkoxyalkylsilanerne er kendte eller kan let fremstilles. F.eks. fremstilles carbomethoxyethyltrichlor-silan let ved omsætning af methylacrylat og trichlorsilan.
O
7
DK 160289 B
Sædvanligvis anvendes ca. 25 til ca. 100 g af silanen til omsætning for hver 100 g silicagel eller CPG. Reaktionen kan gennemføres ved omgivelsestemperatur, selv om forhøjede temperaturer op til tilbagesvalingstemperaturen 5 af reaktionsopløsningsmiddelsystemet kan anvendes til at forøge reaktionshastigheden. Reaktionen forløber let til hovedsagelig afslutning (trin 1) i løbet af 2-50 timer. Fordelagtigt anvendes omrøring under blandingen af reaktanterne, selv om reaktionen derefter kan fortsætte uden 10 yderligere omrøring.
Den fremkomne faste fraktion udvindes af reaktions-blandingen ved konventionelle fysiske metoder, f.eks. filtrering, centrifugering og lignende. Sædvanligvis er et filtreringsmiddel, som er tilstrækkeligt til at tilbage-15 holde en partikelstørrelse på 5 jum, egnet, hvorimod centrifugering er egnet til en partikelstørrelse på 3 μιη.
Den udvundne faste fraktion varmehærdes derpå ved en temperatur og i et tidsrum, som er tilstrækkelige til at tørre og fuldstændig binde silanet kovalent til silica-20 gelen eller CPG'et. Sædvanligvis har ca. 1-4 timer ved ca. 40-120°C vist sig t i ls traskkel i ge.
De omhandlede reaktionsprodukter udgør hidtil ukendte og anvendelige bundne faser til rensning, koncentrering og fraskillelse af THC-COOH og er især egnede til anvendelse 25 med fastfaseekstraktionsudstyr. Fyldningen kan være af forskellige meshstørrelser, f.eks. fra ca. 50 til ca. 600 mesh. Et eksempel på den metodik, som egner sig til rensning og koncentrering eller fraskillelse af THC-COOH, ligner den der er nævnt i litteraturen under anvendelse af 30 andre,men meget mindre effektive og virksomme bundne faser, f.eks. metodikken beskrevet af M. Elsohly i J. Analytical Toxicology, bind 7, s. 262-264, november/december 1983.
I de følgende repræsentative eksempler illustreres fremstillingen af de her omhandlede, hidtil ukendte car-35 boxylfrie bundne faser.
O
8
DK 160289 B
Eksempel 1
Til en opslæmning af 250 g siliciumdioxid (40 pm, 60 Å) i 1250 ml toluen sættes 75 ml carbomethoxyethyl-trichlorsilan med omrøring. Efter ca. 20 minutters omrøring 5 henstilles blandingen i ca. 20 timer.
Blandingen filtreres derpå, filterkageproduktet vas-mes med 2 x 800 ml toluen og derefter med 2 x 800 ml methanol, tørres og hærdes i en ovn ved ca. 80-85°C i ca.
3-4 timer.
10 Produktet ende-afsluttes derpå ved behandling som følger.
Til 295 g produkt opslæmmet i 1500 ml toluen sættes 80 ml trimethylchlorsilan. Blandingen omrøres i ca. 15 til 20 minutter og henstilles i ca. 2 til 3 timer, hvorpå den filtreres. Produktet vaskes med 2 x 1000 ml toluen og 15 2 x .1000 ml methanol og tørres derpå i en ovn ved ca. 80 til 85°C. Udbytte: ca. 300 g.
Eksempel 2
Til en opslæmning af 100 g silicagel (40 pm, 60 20 Å) i 500 ml toluen sættes 30 ml carbomethoxyethyldichlor-methylsilan. Blandingen omrøres i ca. 15 til 20 minutter og henstilles i ca. 16 timer. Det filtreres derpå, vaskes med 2 x 400 ml toluen og 2 x 400 ml methanol. Den bundne fase tørres og hærdes i en ovn ved ca. 80 til 85°C i ca.
25 3 til 4 timer.
Selv om dette bundet-faseprodukt kan anvendes som det er til chromatografi, foretrækkes det at ende-afslutte produktet.
Til det hærdede produkt i 500 ml toluen sættes ca.
30 15 til 25 ml trimethylchlorsilan (eller ca. 10 til 25 ml hexamethyldisilizan). Blandingen omrøres i ca. 2 til 3 timer, filtreres, vaskes med 2 x 1000 ml toluen og 2 x 1000 ml methanol og tørres derpå i en ovn ved ca. 80 til 85°C.
35
DK 160289 B
9
O
Eksempel 3
Til en opslæmning af 100 g silicagel (40 pm, 250 Å porestørrelse) i 500 ml toluen sættes 25 ml carbomethoxye-thyldimethylchlorsilan. Blandingen omrøres i ca. 1/2 time, 5 henstilles i ca. 6 til 18 timer og filtreres derpå og vaskes med 2 x 400 ml toluen og 2 x 400 ml methanol. Derpå tørres den og hærdes ved ca. 80 til 85°C i en ovn i ca. 3 til 4 timer.
Sædvanligvis behøver dette bundne faseprodukt ikke 10 at blive ende-afsluttet, men hvis ende-afslutningen ønskes, kan den foretages på den i eksempel 1 angivne måde.
Som eksempel på anvendelsen af de her omhandlede bundet-faseprodukter ved oprensningen af urinprøver til analyse af cannabinoider henvises til det følgende eksem-15 pel. I det følgende eksempel hydrolyseres urinprøven først til hydrolysering af den konjugerede form af THC-COOH til den frie form til chromatografisk behandling i overensstemmelse med opfindelsen. Typisk gennemføres en sådan hydrolyse af en urinprøve på den følgende måde. 3 ml urin, 20 3 ml destilleret vand og 300 jiliter 10 N KOH-opløsning.
sættes til et 15 ml's skruéLågsrør. Røret lukkes, og opløsningen blandes grundigt og anbringes i et 60°C-vandbad i ca. 20 minutter. Efter dette hydrolysetrin indstilles pH-værdien af hydrolysatet på 6 ved tilsætning af en passen-25 de mængde koncentreret HC1.
Eksempel 4
En 3 ml's standard-polypropylen-fastfaseekstraktions-søjle-patron (serologisk kvalitet) tørpakkes med 500 mg 30 af den ende-afsluttede bundne fase fra eksempel 1. Bunden af denne patron fastgøres derpå ved friktion med en fitting af Leur-typen på et egnet vakuumgrenrør. Vakuummet forøges derpå til 356 mm Hg, som resulterer i en strømningshastighed på 5 ml/min. Søjlen konditioneres derpå til udskylning 35 af opløselige stoffer ved tilsætning af to 2 ml1s portioner methanol og derefter to 2 ml1s portioner destilleret vand (idet der passes på, at søjlen ikke løber tør under eller efter konditioneringen). Der slukkes derpå 10
DK 160289 B
o for vakuummet. Derpå indføres nok destilleret vand til at fylde patronen 2/3. Et 15 ml's standard-polypropylenrese-voir (serologisk kvalitet) fastgøres derpå ved friktion til toppen af ekstraktionssøjlen via en adapter. 5 ml de-5 stilleret vand indføres derpå i søjlen sammen med den hydrolyserede urinprøve. Hele denne opløsning suges derpå gennem søjlen ved en strømningshastighed på 5 ml/min.
(356 mm Hg). Reservoiret skylles med en lille portion destilleret vand, efter at det er løbet tørt. Ekstraktions-10 søjlen får lov til at løbe tør, hvorpå reservoiret og adapteren fjernes. På dette stadium iagttages en farvet zone på ca. 2 mm i toppen af patronen. Denne zone består af det ekstraherede THC-COOH samt en stor mængde co-ekstrahe-rede urenheder. Disse urenheder vaskes fra den bundne fase 15 ved at suge to 1 ml's portioner 50%'s acetonitril/50%'s 0,1 N HC1 i vandopløsning gennem søjlen ved en strømningshastighed på 5 ml/min. Den farvede zone i toppen af søjlen forskydes fra søjlen af den første portion af vaskeopløsningen. Søjlen får lov til at lufttørre i 1 minut, før 20 der slukkes for vakuummet. Dernæst anbringes en holder indeholdende et 3 ml's glasprøveopsamlingsrør i vakuumgren-røret på en sådan måde, at elueringsmidlet fra fastfase-ekstraktionssøjlen opsamles. Vakuummet indstilles igen således, at der opnås en strømningshastighed på 5 ml/min.
25 (356 mm Hg), og tre 0,5 ml's portioner 100%'s acetonitril indføres i søjlen. Efter at søjlen har tørret, slukkes der for vakuummet, og prøveopsamlingsrøret indeholdende det koncentrerede THC-COOH-prøveeluer.ingsmiddel fjernes fra holderen i vakuumgrenrøret.
30 Hvis yderligere oprensning er ønskelig, kan der an vendes en 1 ml's cyanopropylpatron med bundet fase (f.eks. produkt nr. 7021, som er tilgængeligt fra J.T. Baker Chemical Co., Phillipsburg, New Jersey). Elueringsmidlet fra den første ekstraktionspatron fortyndes (l:8-fortynding)
35 med 0,1 N HC1 og suges gennem cyanopropylpatronen. Søjlen vaskes med to 0,5 ml's portioner 20%'s acetonitril/80%'s 0,1 N HCl-opløsning. Det ekstraherede, rensede THC-COOH
DK 160289 B
XI
O
elueres derpå fra søjlen med tre 100 pliter's portioner 100%’s acetonitril.
De her omhandlede bundne faser tilvejebringer en meget hurtigere, nemmere og mere effektiv prøvefremstil-5 lingsteknik, dvs. koncentrering af THC-COOH i prøven, end det er muligt med hidtil tilgængelige bundne faser.
10 15 20 25 30 35
Claims (10)
1. Et fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt, kendetegnet ved, at det omfatter reaktionsproduktet af siliciumdioxid og en carboalkoxyalkylsilan med formlen 5 R1 R2———Si-A-C (O) OR 10 hvori R er en alkylgruppe med 1-3 carbonatomer, A er en 12 3 alkylengruppe med 2-4 carbonatomer, og R , R og R kan være ens eller forskellige og er valgt blandt halogen, alkoxy med 1-6 carbonatomer, alkoxyalkoxy med 2-5 carbon- 15 atomer og alkyl med 1-3 carbonatomer, med den forudsætning, 12 3 at mindst én af R , R og R er forskellig fra alkyl.
2. Et fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt ifølge krav 1, kendetegnet ved, at siliciumdioxidreak-tanten er valgt blandt partikelformig silicagel med en 20 gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 3 til ca. 70 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 50 til ca. 100Q Å og partikelformigt glas med kontrolleret porestørrelsé med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 37 til ca. 177 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 40 til ca. 25 1000 Å.
3. Fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt ifølge krav 1, kendetegnet ved, at siliciumdioxidreak-tanten er partikelformig silicagel med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 3 til ca. 70 pm og en gennemsnit- 30 lig porestørrelse på ca. 50 til ca. 1000 Å.
4. Fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den partikelformige silicagel har en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 20 til ca. 70 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 50 35 til ca. 500 Å.
5. Fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt ifølge krav 3 eller 4, kendetegnet ved, at carboalkoxy- DK 160289 B O alkylsilanreaktanten deri er en forbindelse, i hvilken R 12 3 er methyl, A er ethylen, og R , R og R er valgt blandt chlor og methyl.
6. Fastfase-bundet siliciumdioxidprodukt ifølge 5 krav 5, kendetegnet ved, at carboalkoxyalkyl-silanreaktanten deri er valgt blandt carbomethoxyethyl-trichlorsilan, carbomethoxyethyldichlormethylsilan og carbornethoxyethy1dimethy1chlorsi1an.
7. Fastfase-bundet siliciumdioxidreaktionsprodukt 10 ifølge krav 6, kendetegnet ved, at carboalkoxy- alkylsilanreaktanten deri er carbomethoxyethyltrichlor-silan.
8. Fremgangsmåde til fremstilling af et fastfase--bundet siliciumdioxidprodukt, kendetegnet ved, 15 at a. siliciumdioxid valgt blandt partikelformig silicagel med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 3 til ca. 70 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 50 til ca. 1000 Å og partikelformigt glas med kontrolleret pore-20 størrelse med en gennemsnitlig partikeldiameter på ca. 37 til ca. 177 pm og en gennemsnitlig porestørrelse på ca. 40 til ca. 1000 Å, i en indifferent organisk opslæmning, omsættes med en carboalkoxyalkylsilan med formlen
25 R1 R2-—si-A-C (O) OR R3"^ 30 hvori R er en alkylgruppe med 1-3 carbonatomer, A er en 12 3 alkylengruppe med 2-4 carbonatomer, og R , R og R kan være ens eller forskellige og er valgt blandt halogen, alkoxy med 1-6 carbonatomer, alkoxyalkoxy med 2-5 carbon- atomer og alkyl med 1-3 carbonatomer, med den forudsætning, 12 3 35 at mindst én af R , R og R er forskellig fra alkyl, b. den fremkomne faste fraktion udvindes fra reaktionsblandingen, og c. den nævnte faste fraktion opvarmes ved en temperatur DK 160289 B O og i et tidsrum, som er tilstrækkelige til at tørre og fuldstændig binde silanet til hhv. silicagelen eller glasset med kontrolleret porestørrelse.
9. Søjle, som egner sig til fastfaseekstraktion, 5 kendetegnet ved, at den omfatter en søjle fyldt med det fastfase-bundne siliciumdioxidreaktionsprodukt ifølge et af kravene 1-7.
10. Fastfase-ekstraktionssøjle-fremgangsmåde til oprensning og koncentrering af ll-nor-Δ -9~tetr3'hydroaanna- 10 binol-9-carboxylsyre fra en urinprøve, kéndeteg-' net ved, at den omfatter anvendelse af søjlen ifølge krav 9 som en fastfase-ekstraktionssøjle. 15 20 25 30 35
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/731,530 US4640909A (en) | 1985-05-07 | 1985-05-07 | Bonded phase of silica and carboalkoxyalkyl silanes for solid phase extraction |
| US73153085 | 1985-05-07 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK208686D0 DK208686D0 (da) | 1986-05-06 |
| DK208686A DK208686A (da) | 1986-11-08 |
| DK160289B true DK160289B (da) | 1991-02-25 |
| DK160289C DK160289C (da) | 1991-07-29 |
Family
ID=24939915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK208686A DK160289C (da) | 1985-05-07 | 1986-05-06 | Bundet fase af siliciumdioxid og carboalkoxyalkylsilaner til fastfase-ekstraktion og fremstilling og anvendelse deraf |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4640909A (da) |
| EP (1) | EP0201286B1 (da) |
| JP (1) | JPS61257237A (da) |
| KR (1) | KR890003429B1 (da) |
| AT (1) | ATE57108T1 (da) |
| AU (1) | AU579459B2 (da) |
| CA (1) | CA1256419A (da) |
| DE (1) | DE3674630D1 (da) |
| DK (1) | DK160289C (da) |
| IE (1) | IE58992B1 (da) |
| IL (1) | IL78227A (da) |
| NZ (1) | NZ215555A (da) |
| ZA (1) | ZA862091B (da) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4650784A (en) * | 1986-02-20 | 1987-03-17 | J. T. Baker Chemical Company | Bonded phase of silica for solid phase extraction |
| US5066395A (en) * | 1986-03-06 | 1991-11-19 | J. T. Baker Inc. | N-acylated derivatives of polyethyleneimine bonded phase silica products |
| US4898853A (en) * | 1988-02-16 | 1990-02-06 | Merck & Co. Inc. | Acetylenic esters |
| US5137626A (en) * | 1989-02-21 | 1992-08-11 | Rohm And Haas Company | Solid-phase extraction tubes containing sulfonazide bonded-phase extractants |
| DE3925358A1 (de) * | 1989-07-31 | 1991-02-07 | Degussa | Aminoalkylsubstituierte organopolysiloxan-thioharnstoff-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und verwendung |
| US5149646A (en) * | 1989-12-20 | 1992-09-22 | The Procter & Gamble Company | Process for isolating galactose oxidase |
| WO1991011711A1 (en) * | 1990-01-26 | 1991-08-08 | Shiseido Company, Ltd. | Chromatographic packing and preparation thereof |
| US5637135A (en) * | 1995-06-26 | 1997-06-10 | Capillary Technology Corporation | Chromatographic stationary phases and adsorbents from hybrid organic-inorganic sol-gels |
| US6156431A (en) * | 1999-01-04 | 2000-12-05 | United Chemical Technologies, Inc. | Extraction material comprising treated silica and method for determination of gamma-hydroxybutyrate |
| JP4707810B2 (ja) * | 2000-09-28 | 2011-06-22 | 株式会社カネカ | 内因性カンナビノイドの吸着材、吸着除去方法および吸着器 |
| JP4670112B2 (ja) * | 2000-12-07 | 2011-04-13 | 孝雄 津田 | 化学物質捕集体及びその製造方法、並びに化学物質捕集管 |
| AU2002348583B2 (en) * | 2002-04-19 | 2006-12-07 | Regen Biotech, Inc. | The method for measuring the amount of betaig-h3 protein and diagnostic kit using the same |
| US6923895B2 (en) * | 2002-09-09 | 2005-08-02 | Beckman Coulter, Inc. | Coated capillary electrophoresis tubes and system |
| EP1616184B2 (en) * | 2003-03-27 | 2018-05-30 | Children's Hospital Medical Center | A method and kit for detecting the early onset of renal tubular cell injury |
| US20050272101A1 (en) * | 2004-06-07 | 2005-12-08 | Prasad Devarajan | Method for the early detection of renal injury |
| JP4741603B2 (ja) * | 2004-12-20 | 2011-08-03 | アンチボディショップ・アクティーゼルスカブ | 腎障害の診断用マーカーとしての好中球ゼラチナーゼ関連リポカリン（ｎｇａｌ）の測定 |
| US20070037232A1 (en) * | 2005-03-31 | 2007-02-15 | Barasch Jonathan M | Detection of NGAL in chronic renal disease |
| US20080090304A1 (en) * | 2006-10-13 | 2008-04-17 | Barasch Jonathan Matthew | Diagnosis and monitoring of chronic renal disease using ngal |
| WO2008017306A1 (en) * | 2006-08-07 | 2008-02-14 | Antibodyshop A/S | Diagnostic test to exclude significant renal injury |
| CN101680903A (zh) * | 2007-03-21 | 2010-03-24 | 比奥波托诊断股份公司 | 肾损伤的诊断试验 |
| US20100304413A1 (en) * | 2007-11-15 | 2010-12-02 | Lars Otto Uttenthal | Diagnostic use of individual molecular forms of a biomarker |
| EP2391653B8 (en) | 2009-01-28 | 2015-09-30 | Industrial Technology Research Institute | Biomarkers associated with nephropathy |
| US20100233739A1 (en) * | 2009-02-12 | 2010-09-16 | Jonathan Barasch | Use of urinary ngal to diagnose unilateral and bilateral urinary obstruction |
| ES2667066T3 (es) | 2010-05-24 | 2018-05-09 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Proteínas NGAL mutantes y usos de las mismas |
| JP6360482B2 (ja) | 2012-09-17 | 2018-07-18 | ダブリュー・アール・グレース・アンド・カンパニー−コーンＷ Ｒ Ｇｒａｃｅ ＆ Ｃｏ−Ｃｏｎｎ | クロマトグラフィー担体及びデバイス |
| WO2014081980A2 (en) | 2012-11-21 | 2014-05-30 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Mutant ngal proteins and uses thereof |
| JP6914189B2 (ja) | 2014-05-02 | 2021-08-04 | ダブリュー・アール・グレース・アンド・カンパニー−コーンＷ Ｒ Ｇｒａｃｅ ＆ Ｃｏ−Ｃｏｎｎ | 官能化担体材料並びに官能化担体材料を作製及び使用する方法 |
| BR112017026193B1 (pt) | 2015-06-05 | 2021-09-14 | W.R. Grace & Co-Conn | Adsorventes, método de produção dos adsorventes e uso dos adsorventes |
| CN107441770A (zh) * | 2017-09-13 | 2017-12-08 | 江易扬 | 黄酮化合物的萃取方法以及苯基键合硅胶固相萃取柱 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3652761A (en) * | 1969-09-04 | 1972-03-28 | Corning Glass Works | Immunochemical composites and antigen or antibody purification therewith |
| US3795313A (en) * | 1970-05-22 | 1974-03-05 | Du Pont | Chromatographic packing with chemically bonded organic stationary phases |
| US3935299A (en) * | 1972-05-11 | 1976-01-27 | Andrei Vladimirovich Kiselev | Process for preparation of wide-pore adsorbent for use in chromatography |
| US4056488A (en) * | 1974-03-14 | 1977-11-01 | Mobil Oil Corporation | Synthetic amorphous silicas of predetermined pore distribution, method of producing same |
| US4276061A (en) * | 1979-07-31 | 1981-06-30 | The Dow Chemical Company | Chromatographic column packing having a bonded organosiloxane coating |
| US4324689A (en) * | 1980-02-26 | 1982-04-13 | Shah Ramesh M | High carbon content chromatographic packing and method for making same |
| CA1141358A (en) * | 1980-02-29 | 1983-02-15 | Jan Chmielowiec | Mercuro-organic bonded phase sorbents |
| US4537759A (en) * | 1981-08-24 | 1985-08-27 | Eagle-Picher Industries, Inc. | Production of elemental silicon from impure silane feed |
| EP0105583A1 (en) * | 1982-09-06 | 1984-04-18 | Imperial Chemical Industries Plc | Method for packing chromatography columns and columns adapted for that method |
| US4540486A (en) * | 1983-11-25 | 1985-09-10 | J. T. Baker Chemical Company | Polyethylenimine bound chromatographic packing |
-
1985
- 1985-05-07 US US06/731,530 patent/US4640909A/en not_active Expired - Lifetime
-
1986
- 1986-03-14 IE IE68786A patent/IE58992B1/en not_active IP Right Cessation
- 1986-03-18 CA CA000504368A patent/CA1256419A/en not_active Expired
- 1986-03-20 ZA ZA862091A patent/ZA862091B/xx unknown
- 1986-03-21 IL IL78227A patent/IL78227A/xx unknown
- 1986-03-21 NZ NZ215555A patent/NZ215555A/xx unknown
- 1986-03-24 AU AU55044/86A patent/AU579459B2/en not_active Expired
- 1986-04-02 KR KR1019860002502A patent/KR890003429B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1986-04-25 JP JP61094960A patent/JPS61257237A/ja active Granted
- 1986-05-01 EP EP86303320A patent/EP0201286B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-05-01 DE DE8686303320T patent/DE3674630D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-05-01 AT AT86303320T patent/ATE57108T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-05-06 DK DK208686A patent/DK160289C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE57108T1 (de) | 1990-10-15 |
| EP0201286A3 (en) | 1987-05-20 |
| IE58992B1 (en) | 1993-12-15 |
| CA1256419A (en) | 1989-06-27 |
| IL78227A0 (en) | 1986-07-31 |
| AU579459B2 (en) | 1988-11-24 |
| DK208686A (da) | 1986-11-08 |
| AU5504486A (en) | 1987-12-24 |
| NZ215555A (en) | 1988-11-29 |
| IE860687L (en) | 1986-11-07 |
| EP0201286A2 (en) | 1986-11-12 |
| JPH0426901B2 (da) | 1992-05-08 |
| IL78227A (en) | 1989-09-10 |
| DK208686D0 (da) | 1986-05-06 |
| KR860009025A (ko) | 1986-12-19 |
| KR890003429B1 (ko) | 1989-09-21 |
| DK160289C (da) | 1991-07-29 |
| DE3674630D1 (de) | 1990-11-08 |
| US4640909A (en) | 1987-02-03 |
| ZA862091B (en) | 1987-01-28 |
| JPS61257237A (ja) | 1986-11-14 |
| EP0201286B1 (en) | 1990-10-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK160289B (da) | Bundet fase af siliciumdioxid og carboalkoxyalkylsilaner til fastfase-ekstraktion og fremstilling og anvendelse deraf | |
| EP0234129B1 (en) | Bonded phase of silica for solid phase extraction | |
| US4680120A (en) | Bonded phase of silica and carboalkoxyalkyl silanes for solid phase extraction | |
| DK165925B (da) | Fremgangsmaade til rensning af immunoglobulin g ved hjaelp af immobiliseret carboxyleret polyethyleniminsilan | |
| Biernat et al. | Complexing and chelating agents immobilized on silica gel and related materials and their application for sorption of inorganic species | |
| JP2000502952A (ja) | 吸着材と吸着材を調整する方法 | |
| CN101638430B (zh) | 抗结核ctl表位肽 | |
| WO2011012019A1 (zh) | 基于硅胶表面共聚反应的分离材料及其制备方法 | |
| EP2794052B1 (en) | Bioseparation compositions and methods for using same | |
| US4379931A (en) | Metal extraction from solution and novel compounds used therefor | |
| CN109174048B (zh) | 硅胶色谱填料及其制备方法 | |
| CN102507808A (zh) | 一种微量多氯联苯富集分离方法 | |
| JP5298139B2 (ja) | 支持されたｎ−官能化ポリアザシクロアルカンを含有する重金属イオンの固体／液体抽出のための材料 | |
| JPS6336466B2 (da) | ||
| US7312175B2 (en) | Ion exchange materials, method of forming ion exchange materials, and methods of treating liquids | |
| Kitagawa et al. | Anti-poly (I)· poly (C) antibody bound to cellulose and its use in the specific separation of double-stranded RNAs | |
| Mingalyov et al. | Activated silica supports for preparation of chromatographic sorbents. A comparative study of silicas containing attached epoxy, tosyloxy and halogen groups | |
| CN109603776A (zh) | 一种新型的用于稀土吸附分离的聚合物接枝改性SiO2 | |
| CN1110702C (zh) | 烷基胺键合色谱固定相及其制备方法 | |
| CN215593059U (zh) | 一种核酸萃取柱装置 | |
| JP3790303B2 (ja) | クロマトグラフィー用充填剤の製造法 | |
| Nasuto et al. | Column packing with chemically bonded methyl-vinyl stationary phase for RP-HPLC | |
| PL148970B1 (en) | Method for manufacturing sorption agents with high density of chemically bonded alkyl phase | |
| JPH0943222A (ja) | 液体クロマトグラフィー用充填剤及びその製造法並びにそれを用いた分離方法 | |
| CN1808119A (zh) | 一种净化α－玉米赤霉醇的方法及其专用免疫亲和色谱柱 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |