DK157891B - Fremgangsmaade til fremstilling af 11beta,21-dihydroxy-2'-methyl-5'-betah-1,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion - Google Patents

Fremgangsmaade til fremstilling af 11beta,21-dihydroxy-2'-methyl-5'-betah-1,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion Download PDF

Info

Publication number
DK157891B
DK157891B DK572081A DK572081A DK157891B DK 157891 B DK157891 B DK 157891B DK 572081 A DK572081 A DK 572081A DK 572081 A DK572081 A DK 572081A DK 157891 B DK157891 B DK 157891B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
methyl
dihydroxy
oxazole
dione
culture
Prior art date
Application number
DK572081A
Other languages
English (en)
Other versions
DK572081A (da
DK157891C (da
Inventor
Alfred Weber
Mario Kennecke
Rudolf Mueller
Original Assignee
Schering Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Schering Ag filed Critical Schering Ag
Publication of DK572081A publication Critical patent/DK572081A/da
Publication of DK157891B publication Critical patent/DK157891B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK157891C publication Critical patent/DK157891C/da

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P33/00Preparation of steroids
    • C12P33/02Dehydrogenating; Dehydroxylating
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07JSTEROIDS
    • C07J71/00Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton is condensed with a heterocyclic ring
    • C07J71/0036Nitrogen-containing hetero ring
    • C07J71/0057Nitrogen and oxygen
    • C07J71/0068Nitrogen and oxygen at position 16(17)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

DK 157891 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af 11/3,21-di hydroxy-2 '-methyl-S'/SH-l, 4-pregnadieno {16,17-d) -oxazol - 3,20-dion.
5 Den mikrobiologiske Δ^-dehydrering af llf},21-dihydroxy-2‘- methyl-5,ØH-4-pregneno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion er, som ansøgernes forsøg har vist, ikke så simpel at udføre som dehydreringen af andre steroider.Fermentation af dette stof med levende kulturer af kendte steroid-A^-dehydrerende 10 organismer, såsom Bacillus lentus ATCC 13 805, Bacillus sphaericus ATCC 7054, ATCC 7055 og ATCC 12 488, Bacillus subtilis NRRL B 558 samt Norcardia corallina ATCC 4273 og 4275, forløber utilfredsstillende, dels fordi der dårligt kunne iagttages nogen omsætning af substratet, og dels 15 fordi substratet metaboliseres stærkt.
Det har længe været kendt, at Arthrobacter simplex, der tidligere blev betegnet Corynebacterium simplex, har evne til A^-dehydrering af steroider. Den anvendes ofte i teknik-2o ken, da den i sammenligning med de fleste ovennævnte steroid-Δ'''-dehydrerende organismer har den fordel, at omsætningen forløber væsentligt hurtigere med denne stamme end med de andre mikroorganismer. Men på den anden side har Arthrobacter simplex også to ulemper: 25 1. Den er ofte tilbøjelig til, ved længere fermentationstid, at metabolisere steroider, hvilket kan føre til ikke ubetydelige udbyttetab af ønskede produkter, og 30 2. Den er ofte tilbøjelig til at standse reaktionen, når der endnu er 1 til 3% udgangssteroid i kulturvæsken.
Dette vanskeliggør ofte ganske betydeligt fremstillingen af produkterne fra fremgangsmåden med en renhed, som er 35 nødvendig til lægemiddelstoffer. De to nævnte ulemper iagttages også ved fermentation af 113,21-dihydroxy-2'-methyl-51βΗ-pregneno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion.
2
DK 157891 B
Det har nu vist sig, at man kan Δ^-dehydrere 11β,21-dihydro-xy-2 '-methy 1 -5 ! βΗ-4-pregneno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion og samtidig undgå de ovenfor nævnte ulemper, hvis man ifølge opfindelsen udfører Δ*-dehydrer i ngen med Arthrobacter simplex i 5 nærværelse af 0,04 g til 0,12 g kobolt (Il)-ioner per liter kulturvæske. En mindre koncentration af kobo 11(11)-i oner giver ingen nævneværdig virkning, og en højere koncentration af kobolt (Il)-ioner virker hæmmende. Egnede midler, der giver kobolt (Il)-ioner er vandopioselige kobbersalte, som f.eks.
10 0ο012, CoN03, C0S04 eller C0S04, 7H20. Anionerne i disse salte er uden betydning for gennemførligheden af fremgangsmåden, da kobolt(II)-saltene jo dissocierer i kulturmediet.
I øvrigt udføres fremgangsmåden ifølge opfindelsen under 15 de betingelser, som man sædvanligvis anvender til A^-de= hydrering af steroider med mikroorganismer af arten Arthro= bacter simplex.
Under de til denne mikroorganisme sædvanligt anvendte kul-20 turbetingelser dyrkes i et egnet næringsmedium under luftning en submerskultur. Derefter sætter man til kulturerne substratet (opløst i et egnet opløsningsmiddel eller fortrinsvis i emulgeret form) og fermenterer, indtil der er opnået en maksimal substratomdannelse.
25
Egnede substratopløsningsmidler er f.eks. methanol, ethanol, glycolmonomethylether, dimethylformamid eller dimethylsulf= oxyd. Et særligt egnet opløsningsmiddel er hexamethylphos= phorsyretriamid. Emulgeringen af substratet kan f.eks. be-30 virkes ved, at man igennem en dyse indfører disse i mikro- niseret form eller opløst i et med vand blandbart opløsningsmiddel (såsom methanol, ethanol, acetone, glycolmonomethyl= ether, dimethylformamid eller dimethylsulfoxyd) under stærk turbulens i (fortrinsvis afkalket) vand, som indeholder 3 5 de sædvanlige emulgeringshjælpemidler. Egnede emulgeringshjælpemidler er ikke-ionogene emulgatorer, som f.eks. et= hylenoxydadditionsprodukter eller fedtsyreestere af poly=
DK 157891 B
3 glycoler. Som egnede emulgatorer skal nævnes de i hande- (¾) Æ\ len værende befugtnlngsmidler Tegin Tagat Tween ^ og Span ® .
5 Den optimale substratkoncentration, substrattilsætningstid og fermentationsvarighed er afhængig af arten af den anvendte mikroorganisme. Disse størrelser må, som nødvendigt ved mikrobiologiske steroide omdannelser i almindelighed, konstateres i det-enkelte tilfælde ved forudgående forsøg, IQ som er velkendt for fagmanden.
Det følgende udførelseseksempel tjener til at belyse fremgangsmåden ifølge opfindelsen.
2 5 Det i det følgende udførelseseksempel anvendte proteinhydro= lysat blev fremstillet af fjermel, efter forskrifterne i Organic Synthesis, Col. bind 1, side 194, men efter endt hydrolyse blev der neutraliseret med ammoniak og steril-filtreret. Det fremkomne filtrat blev uden yderligere rens-2o ning anvendt som "proteinhydrolysat".
EKSEMPEL
a) En 2 liter Erlenmeyerkolbe med- 1 liter steril nærings-25 opløsning indeholdende 0,5% ma j s s tøbevæske 0,05% glucosemonohydrat 0,1% gærekstrakt 30 indstillet til pH 7,0 podes med en afskylning af en tørkultur af Arthrobacter simplex ATCC 6946 og rystes ved 30°C i 72 timer med 180 omdrejninger per minut.
b) En 50 liter forgæringsbeholder med 30 liter steril næringsopløsning indeholdende 35
DK 157891 B
4 0,5% majsstøbevæske 0,05% glucosemonohydrat 0,1% gæreks trakt
4 ml silikon SH
4 ml pluronic indstillet til pH 7,0 podes med 1 liter Arthrobacter simplex-forkultur, og denne forkultur inkuberes ved 30°C under luftning (2 m^ per time) og omrøring (220 omdrejninger per minut) i 24 timer.
c) 15 g 113,21-dihydroxy-21-methyl-5'3H-4-pregneno(16, 17-d)-oxazol-3,20-dion med smeltepunkt 114/118-130°C opløses i 300 ml hexamethylphosphorsyretriamid, og sterilfiltreres .
15 d) 12 g CoS04, 7H20 og 12 g (NH4)2SC>4 opløses i 500 ml vand, indstilles til en pH-værdi på 6,5 og sterilfiltreres.
e) En 50 liter forgæringsbeholder fyldes med 30 liter steril næringsopløsning indeholdende 0,5% majsstøbevæske 0,05% glucosemonohydrat 25 0,3% "proteinhydrolysat"
4 ml silikon SH
4 ml pluronic indstillet til pH 7,0 podes med 3 liter Arthrobacter simplex-forkultur, og inku- 3 30 beres under luftning (2 m per time) og omrøring (220 omdrejninger per minut) i 6 timer ved 30°C. Derefter sætter man til kulturen den i afsnit c) fremstillede sterile 113f 21-dihydroxy-2'-methyl-S,3H-4-pregneno(16,17-d)-oxazol-3, 20-dionopløsning, og de i afsnit d) fremstillede tilsætninger.
35 Derefter forgæres videre i 20 timer.
Efter endt fermentation ekstraheres den med 5 liter ethylen-chlorid stabiliserede kulturvæske 3 gange med hver 20 liter

Claims (3)

5 Man får 11,4 g 113,21-dihydroxy-2'-methyl-5'ØH-l,4-pregna= dieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion, smeltepunkt 210/212-220°C. Patentkrav. 10
1. Fremgangsmåde til fremstilling af 110,21-dihydroxy-2'-me-thy1-5'βΗ-l,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazo1-3,20-di on, k e n -d e t e g n e t ved, at man fermenterer ll^,21-dihydroxy-2'-methy1-5'βΗ-4-pregneno(16,17-d)-oxazo1-3,20-dion med en leven- 15 de kultur af Arthrobacter simplex i nærværelse af 0,04 til 0,12 g kobo 11(11)-i oner per liter kultur.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man til kulturen sætter 11β, 21-di hydroxy-2 ' -methyl-5'βΗ-4- 20 pregneno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion som 2-7 vægtVig opløsning i hexamethylphosphorsyretriamid.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at man udfører fermentationen i en levende kultur af Ar- 2. throbacter simplex ATCC 6946. 30 35
DK572081A 1980-12-23 1981-12-22 Fremgangsmaade til fremstilling af 11beta,21-dihydroxy-2'-methyl-5'-betah-1,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion DK157891C (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3049401 1980-12-23
DE3049401 1980-12-23

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK572081A DK572081A (da) 1982-06-24
DK157891B true DK157891B (da) 1990-02-26
DK157891C DK157891C (da) 1990-09-03

Family

ID=6120492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK572081A DK157891C (da) 1980-12-23 1981-12-22 Fremgangsmaade til fremstilling af 11beta,21-dihydroxy-2'-methyl-5'-betah-1,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion

Country Status (10)

Country Link
US (1) US4431732A (da)
EP (1) EP0055832B1 (da)
JP (1) JPS57170197A (da)
AT (1) ATE18257T1 (da)
DD (1) DD202050A5 (da)
DE (1) DE3173923D1 (da)
DK (1) DK157891C (da)
FI (1) FI72144C (da)
HU (1) HU186454B (da)
RO (1) RO83630B (da)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0054810B1 (de) * 1980-12-23 1986-07-30 Schering Aktiengesellschaft Verfahren zur Herstellung von 3-Oxo-delta-1,4-steroiden
JPS6145294A (ja) * 1984-08-09 1986-03-05 ヤマハ株式会社 楽音合成方法
JPH0799478B2 (ja) * 1985-11-22 1995-10-25 カシオ計算機株式会社 電子楽器
GB8730216D0 (en) * 1987-12-29 1988-02-03 Lepetit Spa Process for preparation of pregnenooxazolines
CN101177443B (zh) * 2006-11-09 2011-08-03 天津药业研究院有限公司 新的甾体化合物及其应用
CN110157764B (zh) * 2019-05-29 2021-01-29 浙江仙琚制药股份有限公司 一种地塞米松中间体的制备方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1070176B (de) * 1959-12-03 American Cyanamid Company, New York, N. Y. (V. St. A.) Verfahren zur Herstellung neuer Steroidverbindungen der 1, 4 - Pregnadienreihe
US2837464A (en) * 1955-01-11 1958-06-03 Schering Corp Process for production of dienes by corynebacteria
DE1093792B (de) * 1957-11-27 1960-12-01 Pfizer & Co C Verfahren zur Herstellung von 3-Keto-í¸-steroiden
US2981659A (en) * 1959-05-01 1961-04-25 Upjohn Co Method for the microbiological conversion of pregnane series steroids
DE1107225B (de) * 1959-08-05 1961-05-25 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von 1, 4, 17(20)-Pregnatrienen
US3274182A (en) * 1963-12-28 1966-09-20 Searle & Co Process for reducing 19-methyl-1, 4-dien-3-ones to corresponding 19-nor-3-oxy-1, 3, 5(10)-trienes
NL6705450A (da) * 1965-10-22 1968-10-21
NL6703781A (da) * 1967-03-13 1968-09-16
US3718673A (en) * 1971-02-01 1973-02-27 Du Pont Process for the preparation of 21-chloro-6,6,9alpha-trifluoro-11beta, alpha, 17alpha-trihydroxy-1,4-pregnadien-3,20-dione 16,17-ketals and selected intermediates
US4101378A (en) * 1975-06-06 1978-07-18 Mitsubishi Chemical Industries Limited Process for the microbiological oxidation of steroids
US4246346A (en) * 1978-09-05 1981-01-20 Aktiebolaget Fermenta Antibiotic and steroid transformation process

Also Published As

Publication number Publication date
FI814127L (fi) 1982-06-24
DK572081A (da) 1982-06-24
HU186454B (en) 1985-08-28
JPS57170197A (en) 1982-10-20
JPH0218071B2 (da) 1990-04-24
EP0055832B1 (de) 1986-02-26
RO83630A (ro) 1984-06-21
DD202050A5 (de) 1983-08-24
RO83630B (ro) 1984-08-30
DE3173923D1 (en) 1986-04-03
FI72144B (fi) 1986-12-31
US4431732A (en) 1984-02-14
FI72144C (fi) 1987-04-13
EP0055832A1 (de) 1982-07-14
ATE18257T1 (de) 1986-03-15
DK157891C (da) 1990-09-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK157891B (da) Fremgangsmaade til fremstilling af 11beta,21-dihydroxy-2'-methyl-5'-betah-1,4-pregnadieno(16,17-d)-oxazol-3,20-dion
NO125818B (da)
FI72744B (fi) Foerfarande foer framstaellning av 3-oxo- / 1,4-steroider.
DE3235884C2 (da)
US2960436A (en) Synthesis of steroids by diplodia natalensis
CS258482B2 (en) Method of 4-androstane-3,17-dione and 1,4-androstadiene-3,17-dione production
US4303754A (en) Method for obtaining 7β hydroxy steroids
US2991230A (en) Oxygenation of steroids with streptomyces halstedii
US3033749A (en) 19-nor-16-oxy-allopregnanes
GB1601168A (en) Hydroxylated 1a,2a-methylene-steroids
DE69612871T2 (de) Verfahren zur herstellung von (11beta,16beta)-21-(acetyloxy)-11-hydroxy-2'-methyl-5'h-pregna-1,4-dieno(17,16-d)oxazole-3,20-dione
US3076828A (en) 11-oxygenated-14alpha-hydroxy-9alpha-halogen-pregnenes
EP0261187A1 (de) VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON 17a$g(a)-HYDROXY-D-HOMO-1,4-PREGNADIEN-3,20-DION
EP0028309B1 (de) Verfahren zur Herstellung von 11-alpha-Hydroxy-20-alpha-hydroxymethyl-1,4-pregnadien-3-on
US3012940A (en) Derivatives of pregnene (18-11) lactones and pharmaceutical compositions thereof
AT248627B (de) Verfahren zur Herstellung von neuen 16-Halogen-methylen-steroiden
DE1793784A1 (de) Verfahren zur herstellung optisch aktiver oestran-derivate
CZ279575B6 (cs) Způsob výroby 17-oxosteroidů
DE2841335A1 (de) Verfahren zur herstellung von 3-(17 beta -hydroxy-4-androsten-3- on-17 alpha -yl)-propiolacton
WO1993020222A1 (de) VERFAHREN ZUR HERSTELLUNG VON 17α-HYDROXY-3-METHOXY-8,14-SECO-1,3,5(10),9(11)ESTRATETRAEN-14-ON
DE2919984A1 (de) 12 alpha -hydroxysteroide und deren herstellung
WO1996015253A1 (de) Verfahren zur herstellung von 1-hydroxymethyl-1.4-androstadien-3.17-dion
PL97023B1 (pl) Sposob otrzymywania enzymu subtilopeptydazy
DE1228255B (de) Verfahren zur Herstellung von 16alpha-Hydroxy-9beta, 10alpha- oder 9alpha, 10alpha-stiden der Androstan- oder Pregnanreihe
DE2901562A1 (de) 17 beta -hydroxy-18-methyl-4,15oestradien-3-on, verfahren zu seiner herstellung und diese verbindung enthaltende pharmazeutische praeparate