DK156291B - Pulverformet oosporeholdigt praeparat til beskyttelse af spirende sukkerroefroe mod svampeangreb og fremgangsmaade til fremstilling af praeparatet - Google Patents

Description

DK 156291 B

Opfindelsen angâr et præparat til beskyttelse af 5 spirende sukkerroefr0 mod svampeangreb samt en fremgangsmâde til fremstilling af præparatet. Det angivne præparat er ejendommeligt ved, at det bestâr af et t0rret og pulverformet oosporeholdigt produkt, som er fremkommet ved forgasring af et fr0- eller 10 kornsubstrat med Pythium oligandrum Drechsler, og som indeholder i det mindste 1.000.000, fortrinsvis 50.000.000 - 500.000.000 oosporer pr. g.

Det er kendt, at spirende sukkerroeplanter ofte bli-15 ver angrebet af parasitiske svampe, der findes i jor-den, f.eks. af Pythium ultimum, Pythium debaryanum, forskellige arter af Aphanomyces og Fusariumslægterne og af Rhizoctonia solani og andre. Pythium oligandrum er blevet anset for ogsâ at være en mild parasit. De 20 nævnte parasitter er ârsagen til en kendt sygdom, der sædvanligvis kaldes for rodbrand, der er i stand til at 0delægge et stort antal af de spirende sukkerroeplanter, navnlig i koldt vejr. Sygdommen angriber i hovedsagen de spirende fr0, for det meste f0r spiren 25 har gennemtrængt jordoverfladen. Sygdommen d0r sæd-vanligt væk, sâ snart det f0rste par af de egentlige blade er dannet. Derved er det muligt at forklare det faktum, at de skader, der blev forârsaget af sygdommen f0r i tiden, ikke har været ait for alvorlige, da 30 naturlige frpklynger blev udsâet i en mængde pâ 25 -30 kg pr. hektar. Derved spirede der omkring 1.500.000 planter pr. hektar, og overflpdige planter blev fjernet samtidig med svage eller tilsyneladende syge planter pè et tidspunkt, hvor de rigtige blade 35 allerede var dannet og sygdommen overstâet. Denne metode var imidlertid upkonomisk, idet.den kræver en stor mængde manuelt arbejde. Nutildags bruges der

...................... .. . DK 156291 B

2 betydeligt mindre doser af slebet eller genetisk énspirefr0, sâ at der kun spirer omkring 200.000 planter pr. hektar, og der er Ingen overfl0dige planter, som skal luges bort. Denne metode er som sâdan 5 meget 0konomisk, men den nævnte sygdom viser sig at være mere 0delæggende end f0rhen, idet den ofte ned-sætter antallet af roer ganske betydeligt. Derfor bliver den” nævnte sygdom ved spirende sukkerroer den begrænsende faktor, der er en hindring for en mere 10 udbredt brug af moderne dyrkningsmetoder, ved hvilke sukkerroerne sâs pâ forudbestemte afstande og ikke kræver noget manuelt arbejde. Den eneste mâde til at beskytte spirende sukkerroeplanter mod den nævnte sygdom har indtil nu været en gennemvædning eller 15 dressing af fr0ene med fungicider, der for det meste indeholder organiske forbindelser af kviks01v og svovl.

Sâdanne fungicider er effektive, men samtidig skade-20 lige for dyr og mennesker, og det kan forventes, at deres brug efterhânden vil blive reduceret for at beskytte biosfæren mod forurening.

Kviks01v opsamles i jordbunden og trænger ind i plan-25 ter,planteædende dyr og fisk i vandl0b og nâr gennem f0dekæden ind i mennesker, hvor det forârsager lang-varige degenerative skader. Svovlforbindelser er ogsâ tilstrækkeligt giftige, selv om de ofte betragtes som forholdsvis harml0se. Sâledes har f.eks. tetra-30 methylthiuram-disulfid (TMTD) en temmelig lav LD50, der er pâ 865 mg pr. kg levende vægt. St0vet af pul-verformet TMTD er omkring 5 gange mere giftig end visse systemiske fungicider og g0r navnlig arbejdet ved fr0behandlingsmaskiner og sâmaskiner farligt, 35 idet det angriber menneskets nervesystem alvorligt.

Der kendes ingen effektive og samtidig helt uskade-lige fungicider, der er i stand til at beskytte suk- 3

DK 156291 B

kerroer mod ovennævnte sygdom.

Denne sygdom forârsages i hovedsagen af micromyceter af Pythium genus, navnlig af Pythium ultimum og P.

5 debaryanum.

Pythium oligandrum blev opdaget i 1930 pâ ærter0dder som en af fier© patogene organismer. Opdageren C. Drechsler fandt, da han studerede svampe, som for-10 ârsager forrâdnelse af r0dder og andre dele af pro-dukter og frugter af forskellige kultiverede planter, f.eks. tomater og vandmeloner i den sydlige del af U.S.A., allerede i 1943, at Pythium oligandrum lever som parasit pâ forskellige andre getogene arter af 15 samme slægt, f.eks. Pythium ultimum og Pythium debaryanum (Drechsler, C., Phytopathology 33, 1943, 4, 261-299). Senere har J.W. Deacon studeret analoge biotiske forbindelSer af Pythium oligandrum med microorganismer, der lever som parasitter pâ korn 20 (f.eks. Gaeumannomyces graminis) og anf0rt, at han har haft held til at kontrollere en hvedesygdom, der er forârsaget af Pythium ultimum, ved at pode jord-bunden samtidig med Pythium oligandrum og Pythium ultimum (Frans. Br. mycol. Soc., bind 66, nr. 3, 25 1976, J.W. Deacon "Studies on Pythium Oligandrum, An

Aggressive Parasite of other Fungi", side 383-391).

Den nævnte forfatter sagde som sin mening, at resul-tatet kunne være forârsaget af en næringskonkurrence eller mâske ogsâ ved en direkte svækkelse af parasit-30 ten Pythium ultimum af mycoparasitten Pythium oligandrum. Eksistensen af mycoparasitisme i rhizosfæren for sukkerroer har hidtil hverken været unders0gt eller opdaget.

35 Fors0get pâ at kontrollere den nævnte sygdom var mest rettet mod fremavl af modstandsdygtige sukkerroe- planter, sammenlign f.eks. Gruppo gior. ed agric, 4

DK 156291 B

bind 20, 1974, F. Koch, "Studi sulla prevenzione e la lotta conto le matattie del germogli dalla bar-babietola de zucchero”, side I-II/5 til I-II/13, spe-cielt side I-II/8 til I-II/10, hvilken forfatter i 5 overensstemmelse med andre indbefattede Pythium oligandrum i samme gruppe af patogener som f.eks.

Pythium ultimum og Pythium irregulare. En anden gen-tagne gange pr0vet vej til at kontrollere den nævnte sygdom var brugen af antibioose. Der blev fremstillet 10 og afpr0vet forskellige midler, som var baseret pâ produktionen af antibiotika ved hjælp af visse mikro-myceter, f.eks. Trichoderma viride. Der er imidlertid ud fra et medicinsk synspunkt alvorlige indvendinger mod brugen af antibiotika i landbrug, navnlig fordi 15 landbrugsarbejderens gentagne kontakt med antibiotika i de lavere blandt de effektive doser kan résultera i modstandsdygtige arter af patogene mikroorganismer.

Desuden har de foreslâede antibiotika kun et snævert spektrum af aktivitet, og deres virkning i praksis er 20 temmelig usikker, idet den afhænger af vej ret og af jordbundsbetingelseme, f.eks. af fugtigheden og af den tilstedeværende mængde af antagonister i jorden.

Ned i jordbunden podede mikroorganismer, der er i stand til at frembringe antibiotika, bukker ikke blot 25 under for antagonister, men ogsâ for paras!tter og er ogsâ tilb0jelige til at stimulere væksten af disse patogener.

Opfinderne har studeret floraen i rhizosfæren for 30 sukkerroer systematisk og med nogen succès fors0gt at beskytte spirende planter ved pâf0ring af sporer af Pythium oligandrum Drechsler pâ fr0ene i form af en vandig suspension, sammenlign f.eks. D. Vesely, Use of Pythium oligandrum Drechsler to Protect Emerging 35 ~ Sugar Beet, Abstract of Papers, 3rd International

Congress of Plant Pathalogy, 16 - 23 August, 1978, München i B. Schippers & W. Gams, "Soil-Borne Plant 5

DK 156291 B

Pathogens", 1979, Academie Press, New York, side 593-595 i kapitel 52, eller D. Vesely, Biological Protection of emerging sugar beet against damping-off established by mycoparasitism in non-sterilized soil, 5 Zbl. Bakt, II. Abt. Bd. 133, 436-443 1978 og andre artikler af samme forfatter. Opfinderne har ogsâ udviklet en submers dyrkningsmetode for Pythium oligandrum til at opnâ suspensioner af oosporer, som kan pâf0res pâ sukkerroefr0ene. Opfinderne har imid-10 lertid derefter fundet, at det er vanskeligt at opnâ den forn0dne koncentration af kraftige oosporer, nâr der bruges vandige suspensioner.

Den foreliggende opfindelse er baseret pâ mere de-15 taljerede studier, der har bevist, at Pythium oligandrum er mere vidt udbredt i j or den, end man hidtil har regnet med, og at den er kontrolleret af forskellige antagonister og hyperparasitter, sâ at den ofte ikke kan opdages, medmindre der udf0res en 20 mere systematisk unders0gelse pâ forskellige steder og til forskellige tider. Opfinderne har fundet frem til det faktum, at det er n0dvendigt at anvende oosporer af Pythium oligandrum i usædvanligt h0je mængder pâ fr0ene, fortrinsvis mere end 100.000 25 oosporer pr. fr0 i gennemsnit, for at sikre en pâ-lidelig beskyttelse, idet der undgâs en for tidlig 0delæggelse af mycoparasitten, og at dette ikke kan opnâs sikkert, hvis der bruges vandige suspensioner af oosporerne.

30

Tillige er vandige midler for ustabile, idet de ikke forbliver virksomme i mere end to uger. Derfor vil en betydelig andel af oosporerne under sædvanlige lager-betingelser og distribution tabe deres spireevne, el-35 1er i det mindste deres spirekraft, pâ grund af analyse eller forurening med hyperparasitter.

- ----------- - DK 156291 B

6

Det har nu overraskende vist sig, at de ovennævnte ulemper kan undgâs ved hjælp af det pulverformede præparat i£01ge opfindelsen, der indeholder i det mindste en million (fortrinsvis 50.000.000 - ! 5 500.000.000), af levende og kraftige oosporer pr, g.

Det pulverformede præparat hæfter godt til fr0enes overflade, selv i fravær af adhæsiver. Om 0nsket, kan en forholdsvis lille mængde af passende t0rrede klæbemidler tilsættes for at sikre en passende tyk 10 dressing. Præparatet bestàr af t0rret og formalet forgæret substrat af et fast fr0- eller kornsubstrat, pâ hvilket Pythium oligandrum blev dyrket under be-tingelser, der begunstiger sporedannelsen, navnlig i nærværelse af to - tre procent calciumchlorid i det 15 tilsatte flydende næringsstof, idet substratet under forgæringen blev bestrâlet med synligt, fortrinsvis blât eller gr0nt lys.

F0r man kunne bruge h0je koncentrationer af myco-20 parasitsporerne, mâtte det godtg0res, at den natur-lige ligevægt mellem forskellige jordmikroorganismer ikke ville blive pâvirket pâ en permanent og u0nsket mâde. Heldigvis har det vist sig, at den oprindelige ligevægt huritgt bliver frembragt pâny pâ grund af 25 forskellige mikroorganismer, der 0delægger overskud-det af Pythium oligandrum, og at beskyttelsen kun va-rer for en temmelig kort tidsperiode, der er n0dven-dig til at beskytte spirerne mod parasitterne under den kritiske période af væksten. Sàledes vil den bio-30 logiske beskyttelse af sukkerroerne ved hjælp af mid-let if01ge opfindlelsen ikke indf0re fremmede mikroorganismer i jorden - Pythium oligandrum h0rer til den sædvanlige mikroflora - og vil kun forandre den naturlige ligevægt i en begrænset tid og lokalt netop 35 i de snævre omgivelser af sukkerroer0dderne. Under mikroorganismer, der kontrollerer Pythium oligandrum, kan der nævnes forskellige arter af slægterne 7

DK 156291 B

Drechslera og Mucor, der findes overalt i dyrket jord og i sukkerroeplanters rhizosfære.

André forplantningsorganer end oosporer er gemmae og 5 oogonia, der sædvanligvis er til stede i mindre mæng- der.

Det har overraskende vist sig, at midlet if01ge op-findelsen trods den pâstâede fakultative parasitisme 10 for Pythium oligandrum stimulerer væksten af sukker- roep1anterne, der i gennemsnit bliver synligt mere kraftige og sunde end kontrolplanter, der er behand-let enten med TMTD eller med andre sædvanlige pesti-cider eller slet ikke er behandlet.

15

For at for0ge antallet af oosporer pâ fr0ene er det muligt at anbringe det pulverformede middel pâ det fugtige £r0. Derved dannes der et tykkere lag af midlet pâ £r0ene. Tilsætning af t0rre klæbemidler til 20 det t0rre præparat er ogsâ muligt, men sædvanligt overfl0dig, da formalet mycélium og substrat hæfter meget godt til fr0enes overflade, navnlig hvis fr0ene er blevet let fugtet f0r pâf0ringen af præparat, og fortrinsvis lige f0r sâningen. Fr0ene kan i stedet 25 for med vand fugtes let med vandige opl0sninger af substanser, der stimulerer væksten og samtidig for-0ger adhæsionen af det pulverformede præparat, f.eks. med fortyndede opl0sninger eller suspensioner af or-ganiske og uorganiske g0dningsmidler eller fortykkel-30 sesmidler. Effekten af fortykkelsen af det pâf0rte lag ligner effekten af de kendte dressingfremgangs-mâder. Den sædvanlige dressing med tilsætning af det pulverformede præparat if01ge opfindelsen er ogsâ brugelig, forudsat at sporerne af Pythium oligandrum, 35 der findes i præparatet, ikke bliver 0delagt af nogen bestanddel i dressingen, der skal være steril bortset fra oosporerne af Pythium oligandrum.

8

DK 156291 B

Ved fremgangsmâden i£01ge opfindelsen til fremstil-ling a£ præparatet bliver der f0rst foretaget en be-lægning af fortrinsvis aluminiumplader aller form-stofplader med et omtrent 1- 2 cm tykt lag af steri-5 liserede korn, f.eks. afskallet hirse. Det nævnte lag bliver derefter gennemvædet med et passende flydende næringsstof, og det sâledes fremstillede substrat steriliseres i~enr dampautoklav ved 120°C 1 30 minut-ter. Podning af substratet udf0res ved brusning med 10 eller ved homogen udspredning af en vandig suspension af oosporer af Pythium oligandrum, idet der bruges omkring 200. ml af suspenslonen for hvert kg korn. Til suspensionen af oosporerne kan der bruges sterilise-ret destilleret vand. Det podede substrat dyrkes 14 15 dage ved 25°C 1 et særligt klimatiseret semi-sterilt dyrkningsrum. Under dyrkningen kontrolleres væksten af Pythium oligandrum mikroskopisk med hensyn til graden af fruktifikâtionen, hvorved der forstâs dan-nelsen af forplantningsorganer (oosporer og gemmaer), 20 og vækstbetingelserne og forurening ved dyrkningens afslutning. Efter den afsluttende dyrkning bliver vitaliteten og fruktifikationsgraden af myceliet kontrolleret biologisk. Afslutningen af dyrkningen afhænger i det væsentlige af den opnâede optimale 25 produktion af oosporer, der skal ligge pâ over 1 million, fortrinsvis i et omràde pâ 50.000.000 - 5000.000.000 oosporer pr. g t0rret forgæret substrat.

Den ovenfor beskrevne fremstillingsfremgangsmâde 30 if01ge opfindelsen har vist sig at være den bedste til at opnâ en h0j fruktifikation, navnlig, hvis substratet under forgæringen bliver bestrâlet med blât eller gr0nt lys. André fordele er, i sammen-ligning med vâd beluftet submers dyrkning, en bedre 35 0konomi, idet mængden af vand, der skal fordampes, bliver meget lille. T0rringen af mycoparasitten sam-men med fermenteringssubstratet kan udf0res pâ enhver 9

DK 156291 B

egnet mâde, idet der bruges f.eks. en bândt0rrer ved temperaturer, der ikke ligger over 35°C, fortrinsvis ikke over 30°C. En ariden egnet t0rremetode er lyo-filisering. Det t0rrede materiale bliver derefter 5 formalet og homogeniseret, idet den ovenfor nævnte temperaturgrænse overholdes. Det pulverformede materiale skal \være meget fint, sâ at det hæfter let til 'den ru fr0over<fla:da. TEn biologisk kontrol sikrer vitalifeaten og cantâllét ;.af oosporer. Findes der over-.10 ;mâde rstore .mængder af Oosporer, kan koncentrationen jjusteres ved f^lsætriing ?af et inert pulverformet intateriale,, mien æædvanligvis er den homogenisering, tder opnâs ^ved .sammeriblanding af forskellige por-tioner, çganskefilfredsstillende, idet et overskud af 15 sparer er ibedre cend en for knap mængde. Under henvis-?ning til de ovenfor forklarede s ammenhænge mellem paras!tier, mycoparasitter og hyperparasitter i rhizosfæren kan et: overskud af oosporer af Pythium oligandrum ikke g0re megen skade. Pâ den anden side 20 sikrer dette overskud praktisk tait den fuldstændige fjernelse af sygdomme, der er forârsaget af svampe.

Et stort antal af oosporer pâ fr0overfladen, i det mindste 100.000 pr. fr0, beskytter de spirende fr0 mod parasitterende svampe, ikke blot ved en direkte 25 fjernelse af dem pâ grund af mycoparasitisme, men ogsâ ved at g0re konkurrencesammenhænge umulige pâ grund af den rent overvældende mængde. Kombinationen af de to nævnte faktorer er tilsyneladende afg0rende for at opnâ tilfredsstillende resultater i praksis, 30 idet der ikke gives nogen chance hverken for anta-gonister eller for parasitter af nogen art til at 0delægge Pythium oligandrum fuldstændig i 10bet af den tid, der er n0dvendigt for effektiv beskyttelse.

35 Sporedannelsen kan underst0ttes ved bestrâling af faststâende kulturer med synligt lys, idet der fortrinsvis bruges blâ eller gr0nne filtre (440 - 550

DK 156291 B

10 nm).

Opfindelsen illustreras nærmere ved hjælp af neden-stâende eksempler, idet eksempel 1-2 illustrerer 5 præparatet og dets fremstilling, raedens eksempel 3 illustrerer opnàelsen af den ovenfor anf0rte fungi-cide virkning hidr0rende fra det pâf0rte oosporehol-dige præparat i ovennævnte mængder pâ sukkerroefr0: 10 Eksempell

Hirsekorn, der er steriliseret ved 120°C, blev ud-spredt i et 1,5 cm tykt lag pâ aluminiumplader, gennemvædet med et flydende næringsstof, der bestod 15 af en vandig opl0sning, som indeholdt 3% sacharose, 3% inddampet majsst0bevæske og 2,5% calciumchlorid, og med et pH pâ 5,5 til 6,0, og podet med et podestof bestâende af Pythium oligandrum, hvilket podestof var tilberedt pâ f01gende mâde: 20

Et vegetativt podestof af en udvalgt og testet kultur blev opformeret i et næringsstof, der bestod af

Kartoffelstivelse 30 g 25 Ammoniumsulfat 15 g

Kaliumdihydrogenfosfat 5 g

Magnesiumsulfat 0,5 g T0rret gær 10 g

Calciumcarbonat 10 g 30 Sojab0nneblomst 50 g

Vand 1000 g (pH 6,0, steriliseret ved 120°C i 30 minutter).

35 Dyrkningen blev udf0rt i en frem- og tilbagegâende ryster, amplitude 10,5 cm, 96 svingninger pr. minut, 20°C, 48 timer.

n DK 156291 B

Kulturen blev brugt som podestof til steriliserede hirsekorn, der i forvejen var gennemvædet med £01gende kogende opl0snlng: 5 Zinksulfat 50 vægtdele

Kaliurndihydrogenfosfat 150 vægtdele

Mangansulfat 50 vægtdele

Calciumchlorid 250 vægtdele

Vand 200.000 vægtdele 10

Kornene skal ikke være klæbrige, og de enkelte korn foreligger adskilt.

Substratet blev fordelt i 500 ml Erlenmayer kolber 15 med 50 ml i hver (25 - 30). Efter at være blevet steriliseret to gange ved 120°C og hver gang i 40 minutter, med et tidsinterval pâ 24 timer mellem de to sterilisationer, under en prop af vat afdækket med et stykke kaliko (der er et bestemt vævet bomulds-20 materiale) blev hver kolbe podet med 3 - 4 ml af det ovenfor beskrevne pdestof. Dyrkningen blev gennemf0rt i en termostat ved 18 - 20 °C, en relativ luft- fugtighed pâ 80 - 90% i 10 - 14 dage. Derefter blev indholdet testet for sterilitet, og antallet af 25 oosporer pr. gram hirsekorn blev kontrolleret ved hjælp af et Bürkerkammer. Indholdet blev opbevaret ved -10eC og brugt som podestof for substratet pâ aluminiumpladerne, der var tilberedt som beskrevet ovenfor.

30

Dyrkningen blev udf0rt under semisterile betingelser i et klimatiseret rum ved 25eC i 14 dage, belyst med 500 W lamper, der var afdækket med et blât filter (435 - 480 nm).

Efter en biologisk kontrolaf vitaliteten af ............

oosporerne og efter en mikroskopisk kontrol af 35 12

DK 156291 B

sporedanne1sesgraden blev det forgærede substrat t0r-ret pâ en bândt0rrer ved 30 - 35 °C, og den t0rrede masse blev formalet omhyggeligt, uden at den nævnte temperatur blev overskredet. Adskillige portioner 5 blev homogeniseret sammen, og produktet blev pakket og oplagret. Det indeholdt omkring 25.000.000 oosporer pr. g.

Aktiviteten af produktet var ikke væsentligt nedsat 10 efter oplagring 12-3 mâneder i et koldt, t0rt og m0rkt rum.

Præparatet hæftede let til sukkerroefr0, og antallet af oosporer pâ hvert fr0 var mindst 100.000. Be-15 skyttelsen var mindst lige sâ god som den, der opnâs ved effektive kemiske præparater. Pulveret kan anven-des pâ sukkerroefr0, og fr0ene kan opbevares i adskillige mâneder, uden at den beskyttende effektivi-tet gâr tabt.

20

Eksempel 2

Dyrkningen blev udf0rt pâ samme mâde som i eksempel 1, idet der dog blev benyttet et flydende sporedan-25 nende næringsstof, der havde f01gende sammensætning: 3% inddampet majsst0bevæske, 3% sacharose, 2,5% calciumchlorid, 0,5% zinksulfat og 0,2% mangansulfat. Antallet af sporer i det t0rrede produkt var omkring 40.000.000 pr. g.

30

Eksempel3

Det sukkerroefr0materiale, der var blevet behandlet med biopræparatet if01ge eksempel 1, blev udsâet i 35 âret 1985 pâ 6-7 lokaliteter i Mâhren pâ fors0gsmar-ker hver pâ 1000 m2 og med næsten kvadratisk form ved siden af lignende sammenligningsmarker tilsâet med

DK 156291 B

13 fr0materiale, der ikke har været underkastet en be-handling (kontrol) og med fr0materiale, der har været underkastet den sædvanlige behandling med thiuramdisulfid (kemisk standard). Fors0get blev 5 gennemf0rt under kontrol af den centrale kontrol- og fors0gsanstalt for landbrug UKZUZ i Brno i Tjekkoslovakiet. Ud fra resultaterne kan man se, at pâ stadiet med det f0rste par ægte blade var antallet af planter 1 de fleste tilfælde st0rre for det med 10 biopræparatet og thiuramdisulfid behandlede fr0-materiale end pâ kontrolfladerne. Det samme gælder for antallet af planter, der er angrebet af rodbrand (ty. Wurzelbrand). I flertallet af tilfælde var sund-hedstilstanden bedre pâ de flader, hvor fr0ene var 15 blevet behandlet med biopræparatet. I 4 ud af 6 tilfælde var sundhedstilstanden bedre ved biopræparatet end ved den kemiske standard.

Resultaterne blev delvis pâvirket til fordel for den 20 kemiske standard af forekomsten af billen Atomaria lineata. Biopræparatet er virksomt over for svampe, men ikke over for insekter.

Sammenfattende blev det konstateret, at biopræparatet 25 fremtræder som meget tiltalende som middel til be-skyttelse af spirende sukkerroeplanter, idet der dog blev anbefalet yderligere feltfors0g, idet klimaet i âret 1985 var usædvanligt og atypisk i mange retnin-ger.

30

Ud af de talmæssige resultater blev f01gende anf0rt: T a b e 1 1

Antar spirende planter ~pâ stadiët' med kimbladsbïade. Gennemsnit ud fra 7 lokaliteter.

35

DK 156291 B

14 kontrol biopræparat kemisk standard 144.000 154.429 145.286 5 T a b e 1 2

Sundhedstilstanden for planter, der er angrebet af rodbrand, pâ stadiet med f0rste par ægte blade.

10

Gennemsnit ud fra 5 lokaliteter pâ hver 400 planter.

1 = upâklagellg 2 = brune blade 3 = hel tilintetgjort kontrol biopræparat kemisk standard 15 1 23 1 231 2 3 287,4 81,4 33,2 366,4 32,4 11,2 352,8 33,8 13,4 20 T a b e 1 3

Sundhedstilstand for planter pâ stadiet med det f0rste 25 par ægte blade. Planterne er angrebet af rodbrand og udsat for angreb af billen Atomaria lineata.

(som ovenfor i tabel 2) kontrol biopræparat kemisk standard 30 123 1 231 23 329,6 51,8 24,6 338,8 36,2 25 345,6 30 24,2

Bemærkning: Atomaria lineata perforerer kimblads- bladene, og dette g0r det lettere for parasitternes 35 hyfer at trænge ind.

DK 156291 B

15 T a b e 1 4 Vægten af planter pâ stadiet med det £0rste par ægte blade.

5 Gennemsnit ud fra 400 planter.

Kun mâlt pâ 5 lokaliteter.

Kontrol biopræparat kemisk standard 57,75g 61,5g 60,8g 10 Pâ trods af de ugunstige vejrforhold ser man klart , ud fra de ovenfor anf0rte resultater, at biopræparatet med 15 oosporer af Pythium oligandrum i sammenligning med kontrollen er i det mindste lige sâ effektivt mod rod-brand som den kemiske standard.

Feltfors0gene stemmer derfor godt overens med forud-20 gâende smâfors0g, sk0nt de sidstnævnte - takket være udelukkelse af insektskadedyr og n0jagtigere over-holdelse af betingelserne - synes at være endnu mere udslagsgivende.

25 30 35

Claims (3)

1. Præparat til beskyttelse af spirende sukkerroefr0 mod svampeangreb, kendetegnet ved, at 5 det bestâr af et t0rret og pulverformet oospore-holdigt produkt, som er fremkommet ved forgæring af et fr0- eller kornsubstrat med Pythium ollgandrum Drechsler, og som Indeholder i det mindste 1.000.000, fortrinsvis 50.000.000 - 500.000.000 oosporer pr. g. 10

2. Fremgangsmâde til fremstilling af præparatet if01ge krav 1, kendetegnet ved, at Pythium oligandrum Drechsler dyrkes i stationære kulturer pà flade plader pâ et fr0- eller korn- 15 substrat, der er fugtet med et flydende næringsstof, indtil det forgærede substrat indeholder mindst 1.000.000, fortrinsvis 50.000.000 - 500.000.000 oosporer pr. g. t0rstof, hvorefter substratet bliver t0rret og formalet ved temperaturer, der ikke over-20 stiger 35°C.

3. Fremgangsmâde if01ge krav 2, kendetegnet ved, at substratet udover de sædvanlige be-standdele sukker, majsst0bevæske og mineralsalte 25 indeholder fra 2 til 3% calciumchlorid og under forgæring bliver bestrâlet med synligt lys, idet der bliver brugt blâ eller gr0nne filtre. 30 35