DK155567B - Anthelmintisk parasiticid - Google Patents

Description

1 DK 155567B

Opfindelsen angår et anthelmintisk parasiticid til bekæmpelse af helmin-tiske parasiter systemisk i dyr.

Det er velkendt at bekæmpe helmintiske parasiter i dyr ved indgift af kemiske forbindelser i dyrene. De kemiske forbindelser indgives enten oralt eller ved injektion. Det har nu vist sig muligt at benytte udvendig applikation.

Dét anthelmintiske parasiticid ifølge opfindelsen er ejendommeligt ved, at det omfatter en anthelmintisk forbindelse forskellig fra en organophosphor-cholinesteraseinhibitor og en bærer, der muliggør passage af forbindelsen gennem dyrets hud til opnåelse af et anthelmintisk parasicitid beregnet til påføring på huden af det pågældende dyr.

Det var ikke forud kendt at påføre noget som helst medikament på huden af noget som helst dyr med det formål, at medikamentet skulle absorberes gennem

2 DK 155567 B

huden og transporteres inde i dyret og derefter virke i en fjerntliggende del af dyrets legeme. Det er derfor overraskende, at dette formål opnås med det anthelmintiske parasicitid ifølge den foreliggende opfindelse under samtidig opnåelse af en række fordele som anført nedenfor.

Det anthelmintiske parasicitid ifølge opfindelsen gør det lettere at sikre en akkurat dosis, end det er muligt, når et anthelmintikum sættes til dyrets foder eller drikkevand. Man undgår muligheden for inhalering eller påfølgende udstødning, når et anthelmintikum indgives direkte i dyrets mund. Det er hurtigt og let at anvende. Det er ikke nødvendigt at sterilisere materialer, som det er tilfældet, når et anthelmintikum indgives ved injektion, og et større antal billigere bærere kan anvendes, end det er tilfældet i præparater til anvendelse ved injektion. Man undgår også en lokal reaktion, som kan forekomme i nogle dyr, f.eks. nogle kvægarter, rundt om injektionsstedet. Endvidere kan man opnå langvarig absorption af anthelmintiket, hvilket resulterer i et mere fordelagtigt terapeutisk forhold.

Der kan benyttes forskellige hensigtsmæssige udførelsesformer for det anthelmintiske parasicitid ifølge opfindelsen som angivet i krav 2-9.

Forbindelser, som kan indgives i det omhandlede parasicitid .'indbefatter de i handelen tilgængelige anthelminthiske forbindelser (dvs. forbindelser, som dræber eller på anden måde bekæmper helminthiske parasiter), som hidtil har været indgivet ved injektion. De fleste af de forbindelser, som har god virkning, når de indgives ved injektion, har også god virkning, når de indgives i det omhandlede parasicitid. I handelen tilgængelige anthelminthiske forbindelser, der hidtil har været indgivet oralt, kan også anvendes, dog selvsagt ikke nogle kemikalier, der indgives oralt, og hvis anvendelighed er afhængig af, at de overføres i den anthelminthiske forbindelse ved passage gennem dyrets fordøjelseskanal. Egnede anthelminthiske forbindelser indbefatter tetramisol (2,3,5,6-te-trahydro-6-phenylimidazo[2,l-b]thiazol, specielt den laevo-isomere, eller et salt deraf), thiabendazol [2-(4-thiazolyl)benzimidazol eller et salt deraf], carbontetrachlorid, hexachlorophen [2,2'-methylenbis-(3,4,6-trichlorphenol) eller et salt deraf], methyridin [2-(2-methoxyethyl)pyridin eller et salt deraf], nitro-xynil (4-hydroxy-3-iod-5-nitrobenzonitril eller et salt deraf), rafoxanid [3*-chlor-4'-(p-chlorphenoxy)-3,5-diiodsalicylanilid eller et salt deraf], oxyclo-zanid (3,31,5,5',6-pentachlor-2,2’-dihydroxybenzanilid eller et salt deraf), benomyl (methyl-l-[butylcarbomoyl]benzimidazol-2-carbamat), bavistin (methyl-benzimidazol-2-carbamat eller et salt deraf), oxibendazol (methyl-5-propoxy-benzimidazol-2-carbamat eller et salt deraf), specielt den førstnævnte.

I det omhandlede parasiticid kan der specielt anvendes en anthelmin-tisk forbindelse, som er en substitueret benzimidazol med den almene formel I

I · 3

DK 155567B

R*

"jHSO, B

/ hvori R betegner hydrogen eller en alkylgruppe med 1-12 carbonatomer, betegner en alkylgruppe med 1-12 carbonatomer, eller R og R*· danner sammen med det nitrogenatom, hvortil de er knyttede, en hetero- cyclisk ring, og 2 3 4 R , R og R , som er ens eller forskellige, betegner hver især et halogenatom, eller et salt af denne substituerede benzimidazol.

2 3 4 R , R og R , som er ens eller forskellige, betegner fortrinsvis hver især et chlor- eller bromatom.

Når R eller R^ betegner en alkylgruppe med 1-12 carbonatomer, er det fortrinsvis en gruppe med 1-6 carbonatomer, f.eks. methyl eller ethyl, specielt ethyl.

Når R og R·*· sammen med det nitrogenatom, hvortil de er knyttede, danner en heterocyclisk ring, kan det f.eks. være en ring med 5 eller 6 led, sædvanligvis indeholdende ét nitrogenatom eller ét nitrogenatom og ét oxygenatom som heteroatonerne i ringen og sædvanligvis mættet. Det kan f.eks. være en piperi-dino- eller morpholinoring.

Således betegner R fortrinsvis hydrogen eller alkyl med op til 6 carbon- 1 1 atomer, og R betegner alkyl med op til 6 carbonatomer, eller R og R danner sammen med det nitrogenatom, hvortil de er knyttede, en piperidinogruppe, og 2 3 4 R , R og R , som er ens eller forskellige, betegner hver især et chlor- eller bromatom.

En specielt foretrukken gruppe af disse forbindelser er de, hvori R og 1 2 3 4 R hver især betegner en ethylgruppe, og R , R og R , som kan være ens eller forskellige, hver især betegner et chlor- eller bromatom.

Særligt foretrukne specielle forbindelser er: 4.5.6- trich1or-7-(diethylsuIfamoy1)-2-(trifluormethy1)benzimidazol, 4-brom-5,6-dichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyDbenzimidazol, 4.5.6- tribrom-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol, 4.6- dibrom-5-chlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol, 4.5.6- trichlor-7-(ethylsulfamoyl)-2-(trif luorme thyDbenzimidazol, 4.5.6- trich1or-7-(methy1suIfamoy1)-2-(trifluormethy1)benzimidazo1, 4 . S . fi-f-rir.hl rer-7- (n.nrnnul sul fammrl }-0-(hi*i f 1 ικυγτϊμ» Hivi Ibftnzimidazol.

I ,

4 DK 155567B

og specielt den førstnævnte, samt salte deraf.

Det skal bemærkes, at den omhandlede benzimidazol kan være på saltform.

Saltet må selvsagt ikke virke skadeligt på de pågældende dyr, der behandles.

Salte, som kan dannes på grund af imidazoldelen i molekylet, indbefatter ammoniumsalte, metalsalte, som f.eks. natrium-, kalium-, calcium-, Zink-, kobber-og magnesiumsalte, og aminsalte, som f.eks. methylamin-, ethylamin-, dimethylamin-, triethylamin-, ethanolamin-, triethanolamin- og benzylaminsalte. Det foretrækkes at anvende alkalimetalsalte eller N-methylglucaminsalte.

Saltene kan fremstilles ved i vandig eller vandig-organisk opløsnings-middelopløsning eller-suspension at omsætte den substituerede benzimidazol med en alkalisk forbindelse af metallet, såsom hydroxidet, eller med aminen eller ammoniak, som det falder hensigtsmæssigt. Metalsaltene kan også fremstilles ved metatese, f.eks. mellem alkalimetaIsaltet af benzimidazolen og et salt af metallet. Nogle af benzimidazolerne er også basiske på grund af SCENER -delen i molekylet og kan danne salte med stærke syrer, såsom saltsyre.

Parasiticidet ifølge opfindelsen anvendes fortrinsvis på pattedyr, specielt husdyr eller dyr i landbruget, såsom får, svin, kvæg, heste, geder, hunde og katte. Den kan også anvendes på mennesker. Den kan endvidere anvendes på forsøgsdyr, såsom rotter, mus og marsvin. Forbindelsen kan anvendes til at forhindre infektion eller til behandling af en allerede udbrudt infektion.

De anthelmintika,som kan eksistere i form af salte, (f.eks. 2,3,5,6-te-trahydro-6-phenylimidazo(2,l-b)thiazol) har generelt vist sig at være meget mere effektive i parasiticidet ifølge opfindelsen, når de an vendes på ikke-saltform. Ifølge en foretrukken udførelsesform anvendes ikke-saltformen af sådanne anthelmintika.

Den anthelminthiske virkning af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo(2,l-b)-thiazol og salte deraf menes at ligge næsten udelukkende i den laevo-isomere. Således anvendes den laevo-isomere i en foretrukken udførelsesform. En blanding af de optiske isomere (f.eks. racematet) kan imidlertid anvendes, hvor det er hensigtsmæssigt.

Fra det omhandlede parasiticid absorberer dyret forbindelsen gennem huden, idet forbindelsen påføres i form af et præparat indeholdende en bærer.

En lang række hensigtsmæssige bærere kan anvendes. Præparatet kan være en creme.

Det er imidlertid særligt hensigtsmæssigt at anvende et flydende præparat, hvilket f.eks. letter afmålingen af doser og absorberbarheden gennem huden. Således foretrækkes en opløsning eller suspension af forbindelsen i en flydende bærer. Opløsninger er særligt gode til overføring af forbindelsen gennem huden og foretrækkes derfor i særlig grad. Den flydende bærer omfatter fortrinsvis en eller

5 DK 155567B

flere væsker valgt blandt carbonhydrider (f.eks. aromatiske carbonhydrider, såsom en aromatisk carbonhydridfraktion med kogepunkt 130-250°C, f.eks. 180-220°C, xylen, benzen eller toluen, eller paraffiner, såsom sådanne med 6-20 carbonato-mer), halogenerede alifatiske carbonhydrider (f.eks. carbontetrachlorid), ketoner (f.eks. cyclohexanon eller 2-butanon), estere (f.eks. ethylacetat, ethyl-benzoat eller triacetin), ethere (f.eks. diisopropylether eller tetrahydrofuran), alkoholer (f.eks. alkanoler med 2-8 carbonatomer, såsom butylalkohol, amylalkohol eller isopropylalkohol, eller glycoler, såsom monopropylenglycol), amider (f.eks. dimethylformamid), sulfoner (f.eks. dimethylsulfon eller sulfolan) og sulfoxider (f.eks. dimethylsulfoxid). I mange tilfælde er det ønskeligt at anvende en blanding af væsker. Resultaterne varierer afhængigt af den pågældende bærer, der anvendes, og en udmærket bærer for én forbindelse er det måske ikke for en anden. En vilkårlig bærer, man tænker at anvende, kan selvsagt let afprøves ved rutineforsøg, sædvanligvis til at begynde med på forsøgsdyr, såsom mus eller rotter, og der har i almindelighed vist sig en god korrelationsgrad mellem resultater på sådanne forsøgsdyr og resultater på dyr i landbruget, såsom får og kvæg. Resultater på én art kan imidlertid ikke direkte overføres på en anden. Fortrinsas er den flydende bærer en eller flere væsker valgt blandt carbonhydrider (f.eks. aromatiske carbonhydrider), alkoholer (f.eks. isopropylalkohol eller amylalkohol) og sulfoxider (f.eks. dimethylsulfoxid). Opfindelsen tilvejebringer specielt et flydende anthelminthisk parasiticid til anvendelse ved udvortes påføring på dyret, hvilket parasiticid omfatter en opløsning eller suspension af forbindelsen i en bærer omfattende mindst én af forbindelæme dimethylsulfoxid og amylalkohol, fortrinsvis begge. En blanding af dimethylsulfoxid og amylalkohol er en specielt værdifuld bærer. Således omfatter et specielt parasiticid en opløsning af 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazo1 i en bærer omfattende en b landing a£ dimethylsulf oxid og amylalkohol.

Foruden forbindelsen og bæreren, som er effektiv til at føre forbindelsen gennem dyrets hud, kan parasiticidet indeholde additiver, f.eks. til at lette brugen på dyret. Parasiticidet kan f.eks. indeholde additiver til at lette kontakt med dyrets hud, til at beskytte huden mod en eventuel uønsket virkning, f.eks. irritation, der ellers forårsages af bæreren, eller til at forbedre retention af parasiticidet på dyret.

Viskositeten af de flydende præparater kan forøges ud over det sædvanlige ved inkorporering af fortykningsmidler, som forøger viskositeten. Dette kan være ønskeligt for at retardere eller forhindre praq>aratet i at løbe af dyret.

Additiverne kan f.eks. indbefatte et overfladeaktivt middel, et animalsk fedtstof eller voks, f.eks. lanolin, en mineralolie, f.eks. flydende paraffin, en vegetabilsk olie, f.eks. jordnøddeolie, olivenolie, majsolie eller ricinusolie, eller en polymer, f.eks. en carbonhydridpolymer, såsom polyisobuten.

6 DK 155567 B

De overfladeaktive midler kan indbefatte anioniske forbindelser, f.eks. sæber, fedtsulfatestere, såsom dodecylnatriumsulfat, aromatiske fedtsulfonater, såsom alkylbenzensulfonater eller butylnaphthalensulfonater, mere komplekse fedtsulf onater, såsom amidkondensationsproduktet af oliesyre og N-methyltaurin eller natriumsulfonatet af dioctylsuccinat.

De overfladeaktive midler kan også omfatte ikke-ioniske overfladeaktive midler, som f.eks. kondensationsprodukter mellem fedtsyrer, fedtalkoholer eller substituerede fedtphenoler og ethylenoxid, eller fedtestere og -ethere af sukkerarter eller polyvalente alkoholer, eller de produkter, der opnås ud fra sidstnævnte ved kondensation med ethylenoxid, eller de produkter, der kendes som blok-copolymere af ethylenoxid og propylenoxid. De overfladeaktive midler kan endvidere omfatte kationiske midler, som f.eks. cetyltrimethylammoniumbromid.

Udtrykket "overfladeaktivt middel" anvendes i bred betydning dækkende materialer, der også kaldes befugtningsmidler, emulgeringsmidler og disperge-ringsmidler.

Præparatet kan indeholde stoffer, hvis smag afskrækker andre dyr fra at slikke præparatet af det behandlede dyr. Et eksempel på et sådant stof er bitter aloesaft.

Almindeligvis kan additiver, der letter anvendelsen af andre materialer, der er dyrefysiologisk aktive, f.eks. systemiske insecticider, i påhældningspræparater også være til nytte i parasiticidet ifølge opfindelsen.

Parasiticidet kan indeholde andre materialer, som stimulerer dyrets helbred, f.eks. systemiske materialer, som i sig selv kan anvendes som påhældningspræparater. Således kan der forefindes materialer, som bekæmper ektoparasiter, f.eks. lus, mider eller bremser, såsom famphur (0-[p-(dimethylsulfamoyl)phenyl]-0,0-dimethylphosphorthionat).

Et enkelt materiale kan virke på mere end én måde; det kan f.eks. beskytte huden og forøge retentionen.

Et foretrukket parasiticid er en opløsning omfattende 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo(2,l-b)thiazol, cyclohexanon, aromatisk carbonhydrid (f.eks. aromasol) og vegetabilsk olie (f.eks. majsolie). Et andet foretrukket parasiticid er en opløsning omfattende 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo(2,l-b)ithiazol, dimethylsulfoxid, amylalkohol og eventuelt vegetabilsk olie.

De specielle additiver og mængden deraf, som anvendes, afhænger af den specielle forbindelse og behandling. Almindeligvis kan parasiticidet imidlertid bestå af 1/2 til 95 vægt-% af forbindelsen, 5-99 1/2 vægt-% af bæreren og 0-60 vægt-% additiv, sædvanligvis 1-15 vægt-%, f.eks. 1-10 vægt-% af forbindelsen, 45-99 vægt-% af bæreren og 0-50 vægt-%, f.eks. 5-50 vægt-% af additivet.

Den anthelminthiske forbindelse kan være en blanding af anthelminthiske forbindelser, f.eks. flere af de i det foregående specielt nævnte.

DK 155567B

7

Parasiticidet ifølge opfindelsen indeholder hensigtsmæssigt 1-10 vægt-?o af forbindelsen, og det kan benyttes ved en fremgangsmåde til bekæmpelse af hel-mintiske parasiter i et dyr, specielt et ikke-menneskeligt pattedyr, ved hvilken man påfører dyrets hud en anthelmintisk mængde af et parasiticid, som er en 1-10 vægt-Vs opløsning eller suspension af forbindelsen i en bærer.

Forbindelsen påføres sædvanligvis ganske enkelt dyrets legeme, sædvanligvis kun dets ryg, fortrinsvis kun en lille del af dets ryg. Når der anvendes et flydende præparat,kan det ganske enkelt udhældes på dyrets ryg. Volumenet af det anvendte præparat er sædvanligvis 0,01-10 ml pr. kg legemsvægt af dyret.

Doseringsmængden afhænger af sådanne faktorer som den specielle forbindelse og eventuelt anvendte bærer, forbindelsens toxicitet, den ønskede behandling og det behandlede dyr. Almindeligvis påføres præparatet dog i en mængde på 1-250, fortrinsvis 1-100, specielt 5-50, mg af forbindelsen pr. kg legemsvægt af dyret. For større pattedyrs vedkommende er en hensigtsmæssig dosis 150-1500 mg En enkelt dosis kan være tilstrækkelig, eller den kan gentages, om nødvendigt.

Parasiticidet kan forefindes i form af enhedsdoser, f.eks. enhedskapsler. Det er ønskeligt,at det er sterilt. Det kan fremstilles ved blanding af bestand-delene.

Tre substituerede benzimidazoler og deres salte, som falder inden for den ovenfor angivne formel I, og som kan anvendes i det omhandlede parasiticid, er de hidtil ukendte forbindelser 4,5,6-trichlor-7-(ethylsulfamoyl)-2-(tri-fluormethy1)benzimidazol, 4,5,6-trichlor-7-(n-propylsulfamoyl)-2-(trifluor-methyl)benzimidazol og 4,5,6-trichlor-7-(methylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)-benzimidazol og terapeutisk acceptable salte af disse forbindelser. De nævnte hidtil ukendte forbindelser kan fremstilles ved, at man omsætter 4,5,6-tri-chlor-2-trifluormethylbenzimidazol-7-sulfonylchlorid med ethylamin, methylamin eller n-propylamin. De nævnte hidtil ukendte forbindelser falder inden for den almindelige ramme for de forbindelser, der er omhandlet i beskrivelsen til hollandsk ansøgning nr. 7110461 som aktive over for pattedyrsparasiter, men er særlig fordelagtige.

De hidtil ukendte forbindelser har fremragende egenskaber til anvendelse som parasiticid. De har en fremragende god kombination af lav toxicitet og høj parasiticid, specielt anthelminthisk virkning. Forbindelserne kan anvendes til bekæmpelse af udvortes dyreparasiter, f.eks. kvægmide eller fårespyflue. Forbindelserne er imidlertid specielt værdifulde som anthelmintika.

Det skal bemærkes, at de hidtil ukendte forbindelser på grund af opløselighed etc. kan være terapeutisk acceptable salte,og det kan selvsagt let bestemmes, om et specielt salt er terapeutisk acceptabelt. Et salt, som er acceptabelt for udvortes behandling, behøver selvsagt ikke være acceptabelt til

DK 155567B

8 indvendig behandling. Et salt er terapeutisk acceptabelt til de omhandlede formål med de hidtil ukendte forbindelser, hvis det er terapeutisk acceptabelt foren vilkårlig af de omhandlede behandlinger. Det i et specielt tilfælde anvendte salt må selvsagt ikke være et sådant, som kan beskadige det dyr, der behandles. Saltene kan dannes på grund af imidazoldelen i molekylet og indbefatter sådanne salte som angivet i det foregående i forbindelse med forbindelserne med formlen I; de kan også dannes som dér beskrevet.

De hidtil ukendte forbindelser har parasiticM virkning. De er specielt værdifulde som anthelmintika (f.eks. som fasciolicider), men de har også virkning over for ydre parasiter, f.eks. spyflue og mide. Til en vilkårlig af disse anvendelser kan forbindelserne anvendes til at forhindre infektion eller til at behandle en allerede tilstedeværende infektion.

De hidtil ukendte forbindelser anvendes i form af præparater på samme måde som de øvrige forbindelser med den ovennævnte formel I. De er specielt aktive over for lever-ikte (Fasciola hepatica), såvel i de ikke fuldt udviklede som i de voksne stadier. De er også aktive over for indre parasiter, f.eks. rottenematode (Nippostrongylus brasiliensis).

Opfindelsen forklares nærmere ved hjælp af de efterfølgende eksempler, hvori koncentrationer af aktive forbindelser er angivet i g pr. 100 ml, opløs-ningsmiddelblandinger er udtrykt efter volumen, dele og procentdele er efter vægt, med mindre andet er angivet og temperaturer er i °C, med mindre andet er angivet. Som det er almindeligt er mængder af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimida-zo(2,l-b)thiazol eller et salt deraf af den raeemiske blanding, med mindre andet er angivet. Eksempel 33-35 belyser fremstillingen af de ovennævnte hidtil ukendte benzimidazoler.

, DK 155567 B

Eksempel 1

To får, der hver vejede 25 kg, blev inficeret med lever-ikter (Fasciola hepatica) og mavenematoder (Haemonchus contortus). Et af fårene blev derpå behandlet med 0,625 g 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benz-imidazol ved udhældning af 21 ml af en 37e's opløsning i en aromatisk carbonhy-dridfraktion med kogepunktsinterval 180-220°C ("Solvent 200") langs rygraden.

Det andet får blev behandlet med opløsningsmiddel alene.

En uge senere blev de to får slået ihjel og undersøgt. Der blev ikke fundet nogen orm af nogen af arterne i det får, der var behandlet med benzimidazol-derivatet, hvorimod der i det får, der udelukkende var behandlet med opløsningsmiddel, blev fundet store mængder af begge arter.

Eksempel 2

To kalve, der hver vejede 100 kg, blev inficeret med lever-ikter (Fasciola hepatica). En af kalvene blev derpå behandlet med 2 g 4,5,6-trichlor-7-(di-ethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol ved udhældning af 67 ml af en 3%'s opløsning i en aromatisk carbonhydridfraktion ("Solvent 200") langs rygraden. Den anden kalv blev behandlet med opløsningsmiddel alene.

En uge senere blev de to kalve slået ihjel og undersøgt. Der blev ikke fundet nogen ikter i galdegangen hos den kalv, der var behandlet med benzimida-zolderivatet, hvorimod der i den kalv, der udelukkende var blevet behandlet med opløsningsmiddel, opnåedes 75 ikter på alle udviklingsstadier.

Eksempel 3-8

Otte får, der hver i forvejen var inficeret med 300 metacercaria af lever-ikten (Fasciola hepatica ), blev behandlet ved udhældning langs rygraden (med ulden skilt) af en 5%'s opløsning af 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)- 2-(trifluormethyl)benzimidazol i et opløsningsmiddel bestående af en blanding af 4 dele amylalkohol og 1 del dimethylsulfoxid. Volumenet af den anvendte opløsning blev indstillet, så der blev givet doseringsmængder som angivet i den efterfølgende tabel.

Efter 13 ugers forløb blev fårene slået ihjel og leverne undersøgt. Antallet af levende orm i leveren blev noteret og er angivet i den efterfølgende tabel.

1D DK 155567B

Får nr. Dosis Antal ikter Gennemsnitligt Reduktion (%) (mg/kg) antal ikter ^ ® 05 100 2 200 1 5 3 100 1 10 99 4 100 1 lj0 99 5 50 0 49 0 64 6 50 98 y,U ° 7 kontrol 142 8 kontrol 128

Eksempel 9-14

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 meta-cercaria af lever-ikten. Fasciola hepatica. Efter 45 dages forløb, når de fleste af ikterne havde etableret sig i galdegangen, blev rotterne behandlet der-malt ved påføring til deres rygge af en 3%'s opløsning af 4,5,6-trichlor-7-(di-ethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol i forskellige opløsningsmidler i doseringsmængder som angivet i det følgende. Seks dage senere blev rotterne slået ihjel, og galdegangen blev dissekeret til bestemmelse af antallet af overlevende voksne ikter. Den procentuelle reduktion af ikter i sammenligning med kontroldyr behandlet med opløsningsmiddel alene fremgår af den efterfølgende tabel, hvor hvert resultat er gennemsnittet for fire rotter.

Opløsningsmiddel Dosis (mg/kg) Ikte reduktion (%) 80% isopropanol + 20% dimethyl- sulfoxid 100 80 50% aromatisk carbonhydrid ("Solvent 150 85 200") + 50% dimethylsulfoxid 100 80 50 65 25% aromatisk carbonhydrid ("Solvent 100 85 200") + 75% dimethylsulfoxid 50 60

Eksempel 15 og 16

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacer-caria af lever-ikten (Fasciola hepatica). Efter 37 dages forløb blev rotterne intraperitonealt inficeret med 400 L^-larver af Nippostrongylus brasiliensis. Otte dage senere, da de fleste af ikterne havde etableret sig i galdegangen og nematoderne havde etableret sig i tyndtarmen, blev rotterne behandlet med en blanding af 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol (A) og 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo[2,l-b]thiazol (B). Behandlingen blev udført ved på rotternes ryg at hælde en blanding af en 2%'s opløsning af A i 11

DK 155567 B

dimethylsulfoxid og en 1%'s opløsning af B i dimethylsulfoxid. Der blev anvendt to ingiftsmængder svarende til (100 mg A + 50 mg B) pr. kg legemsvægt og (100 mg A + 25 mg B) pr. kg legemsvægt.

Seks dage efter indgift blev rotterne slået ihjel,og antallet af overlevende nematoder i tyndtarmen og antallet af overlevende voksne ikter i galdegangen blev talt. Den procentvise reduktion af orm sammenlignet med kontroldyr behandlet alene med opløsningsmiddel fremgår af den efterfølgende tabel, hvor hvert resultat er gennemsnittet opnået ud fra de 4 anvendte rotter.

Dosis pr. kg Reduktion af Reduktion af F. hepatica (%) N. brasiliensis (%) (100 mg A + 50 mg B) 60 100 (100 mg A + 25 mg B) 50 97

Eksempel 17 Får, der vejede 16-28 kg, inficeret med mavenematoden Haemonchus contor-tus, blev behandlet ved udhældning langs rygraden af en 5%1 s opløsning af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo[2,l-b]thiazol i et opløsningsmiddel bestående af 20% dimethylsulfoxid og 80% amylalkohol. Der blev påført mængder svarende til 100, 50 og 25 mg af forbindelsen pr. kg legemsvægt. Fæces, der passerede i løbet af de følgende 24 timer, blev opsamlet og undersøgt. Fæces viste sig at være fri for nematodeæg,hvorimod fæces fra får behandlet alene med opløsningsmiddel var alvorligt inficeret.

Eksempel 18 og 19

Der blev udført forsøg som i eksempel 9-14 under anvendelse af andre ant-helmintika. Resultaterne var følgende:

Anthelmintikum Opløsningsmiddel Dosis Ikte- (mg/kg) reduktion (%) 4-hydroxy-3-iod-5- dimethylsulfoxid 100 67 nitrobenzonitril 50 54 3,-chlor-4,-(p-chlor- dimethylsulfoxid 50 97 phenoxy)-3,5-diiodsa- 25 83 licylanilid

Eksempel 20-24

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev intraperitonealt inficeret med 200 L^-larver af nematodeiNippostrongylus brasilienis. Efter 8 dages forløb, når ormene havde etableret sig i tyndtarmene, blev rotterne dermalt behandlet ved påføring af en opløsning eller suspension af et anthelmintikum på ryggen.

12 DK 155567B

I I

Arten af disse anthelmetika og opløsningsmidlet og koncentrationen fremgår af det følgende.

Fire dage senere blev rotterne slået ihjel og tyndtarmene fjernet til bestemmelse af antallet af overlevende orm. Den procentvise reduktion af orm i sammenligning med rotter behandlet med opløsningsmiddel alene fremgår af den følgende tabel, hvor hvert resultat er gennemsnittet for fire rotter.

Anthelmintikum Koncentration Opløsningsmiddel Dosis Ormereduk- (mg/kg) tion (%) 2,3,5,6-tetrahydro- 1% dimethylsulfoxid 50 100 6-phenylimidazo[2,l- 25 100 bjthiazol 2-(2-methoxyethyl)- 3% 20% dimethylsulfo- 1000 100 pyridin xid + 80% amylal- kohol 2-(4-thiazolyl)benzi- 3% 20% dimethylsulfo- 200 100 midazol suspension xid + 80% amylal- kohol methyl-l-(butyl-car- 5% 20% dimethylsulfo- 750 100 bamoyl)benzimidazol- xid + 80% amylal- 94 86 2-carbamat kohol methylbenzimidazol- 5% 20% dimethylsulfo- 750 100 2-carbamat xid + 80?o amylal- 94 50 kohol

Eksempel 25

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacer-caria af liver-ikte, Fasciola hepatica. Efter 45 dages forløb, da de fleste af ikterne var etableret i galdegangen, blev rotterne dermalt behandlet med hexa-chlorophen i en dosis på 100 mg/kg. Denne blev påført deres rygge i form af en 3%'s opløsning af 2,2’-methylenbis(3,4,6-trichlorphenol) i en 20%-80%'s blanding af dimethylsulfoxid og amylalkohol. Seks dage senere blev rotterne slået ihjel og galden dissekeret til bestemmelse af antallet af tilstedeværende levende ikter. Den procentvise reduktion af ikter i sammenligning med kontroldyr behandlet med opløsningsmiddel alene var 67%.

13

DK 155567 B

Eksempel 26

Et får, der i forvejen var inficeret med 500 metacercaria af lever-ikten Fasciola hepatica blev behandlet dermalt 12 uger senere med oxychlozanid i en dosismængde på 200 mg/kg. Denne blev påført rygraden (med skilt uld) i form af en 10%'s opløsning af 3,31,5,5',6-pentachlor-2,2'-dihydroxybenzanilid i en 20-80%fs blanding af dimethylsulfoxid og amylalkohol. Fåret blev slagtet seks dage efter behandling og galdegangen undersøgt for levende ikter. Der blev fundet 102 døde ikter i sammenligning med 196 og 279 levende ikter fra kontroldyr behandlet med opløsningsmiddel alene.

Eksempel 27-29 Får blev inficeret med 2500 Haemonchus contortus larver. Fem uger senere blev der udført dermale behandlinger som angivet i den efterfølgende tabel, under anvendelse af (A) en vandig 3%’s opløsning af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenyl-imidazo[2,l-b]thiazol,hydrochlorid og (B) en 5%'s opløsning af 2,3,5,6-tetra-hydro-6-phenylimidazo[2,l-b]thiazolbase i en blanding af 20-80%'s dimethylsulf-oxid og amylalkohol. Behandlingerne blev bedømt ved udførelse af fækale ægtællinger.

Eksempel Dosis Præparat Fækal ægtælling (antal/g) (mg/kg) Behandlingsdagen 4 dage efter behand ling 27 25 B 6750 0 28 50 B 7900 0 29 100 A 24950 21400

Eksempel 3G og 31

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacercaria af lever-ikten, Fasciola hepatica. Efter 45 dages forløb blev rotterne dermalt behandlet med 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)-benzimidazol i en dosismængde på 100 mg/kg. Denne blev påført dyrenes ryg i form af en 3%1 s opløsning i en aromatisk carbonhydridfraktion ("Solvent 200") indeholdende enten (A), 107o af en polyisobuten ("Hy.vis'®) eller (B), 10% lanolin. Seks dage senere blev rotterne slået ihjel og dissekeret til bestemmelse af antallet af tilstedeværende levende ikter. Resultaterne fremgår af den efterfølgende tabel.

DK 155567B

14

Eksempel Dosis (mg/kg) Præparat Reduktion (%) 30 100 A 70 31 100 B 55

Eksempel 32

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacer-caria af lever-ikten, Fasciola hepatica. Efter 45 dages forløb, da de fleste af ikterne havde etableret sig i galdegangen, blev rotterne dermalt behandlet med 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazol i en dosismængde på 150 mg/kg, som blev påført dyrenes ryg i form af en 3%'s opløsning i en 50-50%'s blanding af en aromatisk carbonhydridfraktion ("Solvent 200") og jordnøddeolie. Seks dage senere blev rotterne slået ihjel og galden dissekeret til bestemmelse af antallet af tilstedeværende levende jktøsr· Den procentuelle reduktion af ikter i sammenligning med kontroldyr behandlet med opløsningsmiddel alene var 50%.

Eksempe1 33 4,5,6-Trichlor —2-trifluormethylbenzimidazol-7-sulfonylchlorid (9 dele) i acetone (40 dele) blev sat til en vandig opløsning af methylamin (24% efter vægt/volumen) (30 dele). Temperaturen blev holdt under 20¾. Blandingen blev omrørt i 3 timer, filtreret og filtratet inddampet til en olie, som blev behandlet med fortyndet saltsyre. Det faste produkt blev opsamlet, vasket med vand og tørret (7,9 dele). Omkrystallisation af toluen gav 4,5,6-trichlor-7-(methylsulfa-moyl)-2-trifluormethylbenzimidazol, smp. 197-199°C.

C9H5C13F3N302S Fundet: C: 28,4, H: 1,7, N: 10,65

Kræver: C: 28,25, Hi 1,35, N: 10,95%

Eksempel 34

Under anvendelse af den i eksempel 33 beskrevne metode, men under erstatning af methylamin med en vandig opløsning af ethylamin (65% efter vægt/volumen) (16,5 dele) opnåedes 9,1 dele 4,5,6-trichlor-7-(ethylsulfamoyl)-2-trifluormethylbenzimidazol (omkrystalliseret af toluen), smp. 175-177°C.

C10H7C13F3N302S Fundet: C: 29,9, H: 1,8, N: 10,35

Kræver: G: 30,25, H: 1,8, N: 10,6% 15

DK 155567 B

Eksempel 35

En opløsning af 4,5,6-trichlor-2-(trifluormethyl)benzimidazol-7-sulfonyl-chlorid (126 dele) i acetone (400 dele) blev langsomt sat til en opløsning af n-propylamin (40 dele) i acetone (80 dele), idet temperaturen blev holdt under 10°C. Blandingen blev derpå omrørt i 3 timer, filtreret og filtratet inddampet til opnåelse af et orangefarvet fast stof, som blev behandlet med fortyndet saltsyre, vasket med vand og tørret. Omkrystallisation af nitromethan gav 4.5.6- trichlor-7-(n-propylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazo1 (62 dele, udbytte 45%), smp. 175-177°C.

Cj^HgClgF^OgS Fundet: C: 32,40, H: 2,50, N: 10,20

Kræver: C: 32,17, H: 2,21, N: 10,23%

Eksempe1 36-38

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacer-caria af lever-ikten, Fasciola hepatica. Efter 14 dages forløb, hvor en stor del af de vandrende ikter stadig var i lever-parenkymvævet, fik rotterne oralt indgivet de i de følgende angivne forbindelser (5% i tragant) i mængder på 46 og 23 mg aktivt stof pr. kg legemsvægt. Der blev anvendt fem rotter for hver do-sis af hver forbindelse.

Seks dage efter indgift af forbindelserne blev rotterne slået ihjel og leverne findelt til frigørelse af ikke fuldt udviklede overlevende ikter. Den procentuelle ikte-reduktion i sammenligning med ubehandlede kontroldyr fremgår af den følgende tabel. Hvert resultat er gennemsnittet af fem behandlinger.

Forbindelse 46 mg/kg 23 mg/kg 4.5.6- trichlor-7-(ethylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol - 85 4.5.6- trichlor-7-(methylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol 100 50 4.5.6- trichlor-7-(n-propylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol 100 78

Eksempel 39-41

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret oralt med 30 metacer-carier af lever-ikten, Fasciola hepatica. Efter 40 dages forløb, da de fleste af ikterne havde etableret sig i galdegangen, fik rotterne oralt indgivet de i det følgende angivne forbindelser (5% i tragant) i mængder på 46 og 23 mg aktiv bestanddel pr. kg legemsvægt. Fem rotter blev anvendt for hver dosismængde af hver forbindelse.

DK 155567B

16

Seks dage efter indgift af forbindelserne blev rotterne slået ihjel og galdegangen dissekeret til bestemmelse af antallet af overlevende voksne ikter. Den procentuelle ikte-reduktion fremgår af den efterfølgende tabel i sammenligning med ubehandlede kontroldyr. Hvert resultat er gennemsnittet af fem behandlinger.

Forbindelse 46 mg/kg 23 mg/kg 4.5.6- trichlor-7-(ethylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol - 90 4.5.6- trichlor-7-(methylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol 100 65 4.5.6- trichlor-7-(n-propylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol 75 50

Eksempel 42 og 43

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev subcutant inficeret med 200 L^-larver af rottenematoden Nippostrongylus brasiliensis. Efter 10 dages forløb, da ormene havde udviklet sig fuldt ud i den første fjerdedel af tynd tarmen, fik rotterne oral.tindgivet de i det følgende angivne forbindelser (5% i tragant) i mængder på 46 og 23 mg aktiv bestanddel pr. kg legemsvægt. Der blev anvendt tre rotter for hver dosismængde af hver forbindelse.

To dage senere blev rotterne slået ihjel og tarmene fjernet for undersøgelse til bestemmelse af tilstedeværelsen af orm. Den procentuelle orme-reduktion fremgår af den efterfølgende tabel i sammenligning med ubehandlede kontroldyr. Hvert resultat er gennemsnit af tre behandlinger.

Forbindelse 46 mg/kg 23 mg/kg 4.5.6- trichlor-7-(ethylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol - 100 4.5.6- trichlor-7-(methylsulfamoyl)- 2-trifluormethylbenzimidazol 100 90

Eksempel 44

Tre uger gamle rotter (Wistar race) blev inficeret intraperitonealt med 200 L^-larver af nematodaiNippostrongylus brasiliensis. Efter 8 dages forløb, da ormene havde etableret sig i tyndtarmene, blev rotterne dermalt behandlet ved påføring af en 3%>'s opløsning af 4,5,6-trichlor-7-(methylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)benzimidazo1 i et opløsningsmiddel bestående af 20% dimethyl-sulfoxid og 80% amylalkohol på dyrets ryg i mængder på 94 og 46 mg aktiv bestanddel pr. kg legemsvægt.

DK 155567 B

17

Fire dage senere blev rotterne slået ihjel og tyndtarmene fjernet til bestemmelse af antallet af overlevende orm. Den procentuelle orme-reduktion fremgår af den efterfølgende tabel i sammenligning med rotter behandlet med opløsningsmiddel alene, idet hvert resultat er gennemsnit for tre rotter.

Indgiftsmængde Øfcmereduktion (%) (mg/kg) 94 91 46 65

Eksempe 1 45

Idet man gik frem på samme måde som i eksempel 20, bortset fra at der i stedet for racematet af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo(2,l-b)thiazol blev anvendt den laevo-isomere i den halve dosis, opnåedes lignende resultater.

Claims (9)

1. Anthelmintisk parasiticid til bekæmpelse af helmintiske parasiter systemisk i dyr, kendetegnet ved, at det omfatter en anthelmintisk forbindelse forskellig fra en organophosphor-cholinesteraseinhibitor og en bærer, der muliggør passage af forbindelsen gennem dyrets hud til opnåelse af et anthelmintisk parasiticid beregnet til påføring på huden af det pågældende dyr.

2. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den anthelmin-tiske forbindelse er 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo-(2,1-b)thiazol eller et salt deraf.

3. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er et væskeformigt parasiticid med en bærer, der omfatter en eller flere væsker valgt blandt carbonhydrider, ketoner, estere, ethere, alkoholer, amider, sulfoner eller sulfoxider.

4. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den anthel-mintiske forbindelse er opløst eller suspenderet i en bærer omfattende mindst én af forbindelserne dimethylsulfoxid og amylalkohol.

3. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den anthelmin-tiske forbindelse er 4,5,6-trichlor-7-(diethylsulfamoyl)-2-(trifluormethyl)-benzimidazol opløst i en bærer omfattende en blanding af dimethylsulfoxid og amylalkohol.

6. Parasiticid ifølge et vilkårligt af de foregående krav, kendetegnet ved, at det omfatter en anthelmintisk forbindelse, en bærer og et fortykkelsesmiddel .

7. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er en blanding af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo-(2,1-b)thiazol, cyclohexanon, aromatisk carbonhydrid og vegetabilsk olie i form af en opløsning.

8. Parasiticid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er en blanding af 2,3,5,6-tetrahydro-6-phenylimidazo-(2,1-b)thiazol, dimethylsulfoxid og amylalkohol i form af en opløsning.

9. Parasiticid ifølge krav 8, kendetegnet ved, at der yderligere er inkorporeret vegetabilsk olie.