DK153552B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 1,8-naphthyridinderivater - Google Patents

Description

DK 153552 B

o

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af 1,8-naphthyridinderivater med kraftig antibakteriel virking, hvilke derivater har den almene formel 5 0 o

x., . 7 .COOR

X X'X X4X. X

10 x j'· 3fT

(I) __ 1.7 U. 1 ·> / \ X " -'-iX N'-' HN Ν' i \ / i1 15 hvor X er et halogenatom, især et fluoratom, R er en 2 ethyl- eller vinylgruppe, og R er et hydrogenatom eller 20 en C^_g-alkylgruppe, eller salte deraf.

Ved udtrykket "lavere alkylgruppe" enten som selvstændig gruppe eller som del af andre grupper skal her forstås en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer.

Saltene af naphthyridinforbindelserne (I) dannes 25 af naphthyridinforbindelserne (I) samt syrer eller baser.

Syrerne kan være forskellige uorganiske og organiske syrer, og som eksempler på egnede syrer kan nævnes saltsyre, eddikesyre, mælkesyre, ravsyre, lactobionsyre og methansulfonsyre. Baserne kan være vilkårlige uorgani-30 ske eller organiske baser, som er i stand til at danne salte med carboxylgruppen i forbindelserne med formlen (I), og eksempler på egnede baser er metalhydroxider såsom natrium- eller kaliumhydroxid og metalcarbona-ter såsom natrium- eller kaliumcarbonat.

OR

Særligt foretrukne salte af forbindelserne med formlen (I) er hydrochloriderne og methansulfonaterne.

2

DK 1535S2B

O

Afhængigt af betingelserne kan naphthyridinfor-bindelserne med formlen (I) dannes i form af hydrater.

Disse hydrater omfattes også af de her omhandlede naphthyridinforbindelser med formlen (I).

5 Det er formålet med opfindelsen at tilvejebringe hidtil ukendte naphthyridinforbindelser med kraftig antibakteriel virkning mod grampositive bakterier og gramnegative bakterier, herunder Pseudomonas aeruginosa, samt fremgangsmåder til fremstilling af disse forbin-10 delser.

Typiske eksempler på de her omhandlede forbindelser er anført i det følgende med angivelse af forbindelsernes strukturformler.

l-Ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pipera-15 zinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre (forbindelse 1) samt de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte deraf.

0

F .. COOH

• » · 20 • - · ·

•'• -NN

HN N ' C2H5

Ethyl-l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pi-25 perazinyl)-l,8-naphthyridin-3-carboxylat (ethylesteren af forbindelse 1) med nedenstående formel samt de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte deraf.

0 F . V C00CoHc

Z D

• · · 30 i ·» · • · ·

HN N- NN

. . c2h5 35

DK 153552 B

3 6-Fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)--1-vinyl-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre (forbindelse 2) med nedenstående formel samt de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte deraf.

5 0

F ... COOH

i li li HN N ’ N ? ’ CH=CH« 10 *

Ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)--1-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxylat (ethylesteren af forbindelse 2) med nedenstående formel samt de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte deraf.

15 0 F . COOC2H5 . . ’ ' \ • · · HN N N N- . . CH=CH9 20 6-Chlor-l-ethyl-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl) -l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre (forbindelse 3) med nedenstående formel samt de ikke-toksiske, farmaceutisk acceptable salte deraf.

25 0

Cl . COOH

· · • . · ·

"-N N

HN N C9H,- 30 6-Chlor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1--vinyl-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre (forbindelse 4) med nedenstående formel samt de ikke-toksiske, farma- 35 ceutisk acceptable salte deraf.

DK 153552 B

4

Cl 0

COOH

·' · ' ·

Il II

I !| >l

/ \ N- N

HN N ,

b \ CH=CH

\ ..... · ^

Blandt de her omhandlede naphthyridinforbindelser er forbindelse 1 samt saltene deraf mest værdifulde som antibakterielle midler. Som vist i de efterfølgende 10 tabeller I - VI udviser forbindelse 1 samt saltene deraf meget kraftig antibakteriel virkning både ved in vitro-og in vivo-forsøg over for grampositive og gramnegative bakterier, herunder Pseudomonas aeruginosa. Da de har yderst lav toksicitet, er de anvendelige til behandling 15 af ikke blot urinvejsinfektioner forårsaget af forskellige grampositive og gramnegative bakterier, men også systemiske infektioner forårsaget af disse bakterier.

Foruden forbindelse 1 samt saltene deraf er forbindelse 2 samt saltene deraf værdifulde som antibakte-20 rielle midler. De lavere alkylestere af forbindelserne 1 og 2 udviser temmelig kraftig antibakteriel virkning in vivo. Disse estere er anvendelige ikke blot som antibakterielle midler, men også som mellemprodukter til fremstilling af forbindelserne 1 og 2.

25 Som forbindelser med en struktur, der svarer til strukturen af de her omhandlede forbindelser 1 og 2 er der i US patentskrift nr. 4.017.622 anført pipera-zinderivater med nedenstående formel samt saltene deraf.

0

30 · C00R

• . · · .... i i; i!

R^-N N- N· N

\ - R2 35 I ovenstående formel betyder R^ et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en benzylgruppe

DK 153552B

5 eller en acetylgruppe, R2 betyder et hydrogenatom/ en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, en benzylgruppe eller 3 en vinylgruppe, og R betyder et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-6 carbonatomer.

5 Som det fremgår klart af ovenstående formel, har de i US patentskrift nr. 4.017.622 beskrevne naphthy-ridinderivater ingen substituent i naphthyridinkernens 6-stilling.

Det har nu vist sig, at de her omhandlede forbin-10 delser, som vist i de efterfølgende eksempler A og B, har meget bedre antibakteriel virkning mod gramnegative bakterier, herunder Pseudomonas aeruginosa, samt mod grampositive bakterier end de i det ovenfor anførte US patentskrift anførte 1,8-naphthyridinderivater.

15 I beskrivelsen til offentliggjort japansk patent ansøgning nr. 83590/77 (sammendrag anført i Central Patents Index udgivet af Derwent Publications Ltd. under nr. 60389Y/34) er beskrevet 6-nitro-l,8-naph-thyridinderivater med nedenstående formel 20 o

02N . COOR

R I l! -! \

N N N

25 R< Rl hvor -N(R)(R1) er en gruppe valgt blandt amino, substitueret anilino, alkylamino, (cyclo)alkylamino, dialkyl-aminoalkylamino, hydroxyalkylamino, dialkylamino, alkyl-allylamino, alkylcycloalkylamino, dihydroxyalkylamino, 30 pyrrolidino, piperidino, morpholino og piperazino, og 1 2 R og R hver for sig betyder lavere alkyl.

I beskrivelsen til den ovenfor anførte offentliggjorte japanske patentansøgning er imidlertid kun anført, at disse forbindelser har antitrichomonal virk-35 ning. Denne ansøgning angår således - i modsætnind til den foreliggende opfindelse - ikke antibakterielle midler.

DK 153552B

6 I et referat af The 98th Annual Meeting of Pharmaceutical Society of Japan, side 233 (udgivet 10. marts 1978) er anført, at forbindelser med formlen 9 5 3 R °

0 * '1 C00H

X X- I i| I il li R - · X X - 1 5 11 R° Rx 10 hvor R^ er en ethylgruppe eller en tilsvarende gruppe, 2 3 5 R er hydrogen, R og R er elektrontiltrækkende grup- 4 per, og R er en elektronafgivende gruppe, har vist sig at besidde kraftig virkning.

J dette referat er det anført, at forbindelser 3 5 15 med den ovenfor anførte formel, hvor R og R er chlor 4 eller fluor, og R er piperazino eller substitueret piperazino, er blevet undersøgt for relationen mellem deres struktur og virkning, og forbindelser med ovenstående formel, hvor R er ethyl, R er hydrogen, 3 5 4 20 R eller R er chlor eller fluor, og R er piperazino, har vist sig at have kraftigere antibakteri-el virkning end nalidixinsyre I US patentskrift nr. 4.146.719, som svarer til BE patentskrift nr. 863.429, er beskrevet quinolin-25 derivater med nedenstående formel (senere betegnet forbindelse D) 0

F . C00H

• ,'' · · t.

30 HN N . N' . . c2h5 beskrivelsen til offentliggjort japansk patentansøgning nr. 65887/78 (sammendrag anført i Der. nr.

35 52436 A/29) er beskrevet quinolinderivater med neden stående formel (senere betegnet forbindelse C)

DK 153552B

7 j

O

Cl. . V COOH

• ^ \ ^ \ ' ......... I ίί I! S ··. .· · HN N· ' '"X ' XN^ 5 % 1 c2h5

Det har nu vist sig, at de her omhandlede forbindelser 1 og 2 har meget kraftigere antibakteriel virkning mod gramnegative bakterier, herunder Pseudomonas 10 aeruginosa, end quinolinderivater såsom forbindelserne C og D, hvilket fremgår af de efterfølgende tabeller II og III.

Forbindelserne med formlen (I) samt deres salte fremstilles ved at gennemføre mindst én af de i det 15 efterfølgende beskrevne fremgangsmåder A-F.

Fremgangsmåde A; Hydrolyse o

Forbindelser med formlen (I), hvor R betyder et hydrogenatom, dvs. forbindelser med formlen

O

20 X . 1' COOH

i’ ii ii (ι-a) •.....·. I 11 ' ,Λ . .· #

HN N" ‘ N ’ -N

. .. R1 25 hvor X og R"*" har den under formel (I) anførte betydning, fremstilles ved hydrolyse af en forbindelse med formlen 0 4»

Il p’ · X. · · • · ' 30 * , .

! ; (a)

..... I

\ -* · 4 «

HN N ' N N

\ 11 v......R

hvor R^ og X har den under formel (I) anførte betydning, 4." 35 og R er en lavere alkoxycarbonylgruppe eller en gruppe 4 ’· 4 > R ', hvor R ' er en cvanogruppe, en carbamoylgruppe, en amidinogruppe eller en gruppe

DK 153552 B

8

NH

-C^ O-lavere alkyl.

Denne reaktion gennemføres ved behandling af for-5 bindelse (a) med vand. Til fremskyndelse af reaktionen gennemføres denne almindeligvis i nærværelse af en katalysator såsom en syre eller en base. Som eksempler på syrer kan nævnes uorganiske syrer såsom saltsyre, hydro-genbromidsyre, svovlsyre eller phosphorsyre samt orga-10 niske syrer såsom eddikesyre, trifluoreddikesyre, myresyre og toluensulfonsyre.

Som eksempler på baser kan nævnes alkalimetal-hydroxider såsom natriumhydroxid og bariumhydroxid, al-kalimetalcarbonater såsom natriumcarbonat eller kalium-15 carbonat samt natriumacetat.

Denne reaktion kan også gennemføres ved direkte opvarmning af forbindelse (al i nærværelse af den oven·* for nævnte syre, hvorefter der tilsættes vand. Opløsningsmidlet er sædvanligvis vand, men afhængigt af forbindelse 20 (ai's egenskaber kan der anvendes et opløsningsmiddel såsom ethanol, dioxan, ethylenglycoldimethylether, benzen eller eddikesyre sammen med vand. Reaktionstemperaturen ligger sædvanligvis i området 0-^150°C, fortrinsvis 30-l00°C, 25 Fremgangsmåde B: Fjernelse af beskyttelsesgruppe

Forbindelserne med formlen (I) kan fremstilles ved fjernelse af gruppen R , dvs. en beskyttelsesgruppe i en forbindelse med formlen 0 4 XII ** OU ·.. Iv I II ij (b)

R3'-N N ' N- N

R1 35 hvor X og R1 har de i forbindelse med formlen (I) anførte 3 * 4 betydninger, R er en beskyttelsesgruppe, og R er en carboxylgruppe, en lavere alkoxycarbonylgruppe eller en

DK 153552B

9 4' 4' gruppe R , hvor R har den ovenfor anførte betydning.

3»' Når R i forbindelsen (b) er en gruppe, som kan fjernes solvolytisk, gennemføres den reaktion, ved hvilken beskyttelsesgruppen fjernes, ved at underkaste for-5 bindeisen (b) en solvolysereaktion indbefattende hydrolyse.

Som specifikke eksempler på gruppen R , som kan fjernes ved solvolyse, kan nævnes acylgrupper, såsom formyl-, acetyl-, trifluoracetyl-, benzyloxycarbonyl-, 10 t-butoxycarbonyl-, p-methoxybenzyloxycarbonyl-, vinyl- oxycarbonyl-, 3-(p-toluensulfonyl)ethoxycarbonyl- og o-nitrophenylsulfenylgrupper, en trimethylsilylgruppe, en tritylgruppe, en tetrahydropyranylgruppe og en diphenylphosphinylgruppe.

15 Denne reaktion gennemføres i nærværelse eller fra værelse af en katalysator såsom en syre eller en base i et opløsningsmiddel. Som eksempler på syrer skal nævnes uorganiske syrer såsom saltsyre, hydrogenbromidsyre, . svovlsyre og phosphorsyre og organiske syrer såsom 20 eddikesyre, trifluoreddikesyre, myresyre og toluensul- fonylsyre. Som eksempler på baser skal nævnes alkalime-talhydroxider såsom natriumhydroxid og'.bariumhydroxid, alkalimetalcarbonater såsom natriumcarbonat og kalium-carbonat samt natriumacetat. Som opløsningsmiddel an-25 vendes sædvanligvis vand, men afhængigt af forbindelsen (b)'s egenskaber kan der anvendes opløsningsmidler som ethanol, dioxan, ethylenglycoldimethylether, benzen, eddikesyre eller blandinger deraf med vand.

Reaktionstemperaturen ligger sædvanligvis i om- 30 rådet 0-150°C, fortrinsvis 30-l00°C.

3' Når gruppen R i forbindelse (b) er en gruppe, som kan fjernes ved reduktion, og R1 er en ethylgruppe, kan reaktionen til fjernelse af beskyttelsesgruppen også gennemføres ved at underkaste denne forbindelse 35 hydrogenolyse. Som specifikke eksempler på beskyttel- 3' sesgruppen R , der kan fjernes ved hydrogenolyse, kan nævnes arylsulfonylgrupper såsom p-toluensulfonyl, 10

DK 1535S2B

methylgrupper substitueret med phenyl eller benzyl-oxy såsom benzyl, trityl eller benzyloxymethyl, arylmethyloxycarbonylgrupper såsom benzyloxycarbonyl eller p-methoxybenzyloxycarbonyl, halogenoethoxy-5 carbonylgrupper såsom 3/3,3”trichlorethoxycarbonyl eller 3-iodethoxycarbonyl.

31

Ved fjernelsen af beskyttelsesgruppen R fra forbindelse (b) (R1 = ethyl) ved hydrogenolyse, skal reaktionsbetingelserne ændres afhængigt af beskyttel-3' 10 sesgruppen R 's egenskaber. Reaktionen gennemføres almindeligvis på følgende måde.

Denne reaktion gennemføres ved behandling af forbindelse (b) med en hydrogenstrøm i et indifferent opløsningsmiddel i nærværelse af en katalysator så- 15 som platin, palladium, Raney-nikkel eller lignende eller ved behandling af forbindelse (b) med metallisk natrium i flydende ammoniak. Den kan ligeledes gennemføres ved omsætning af forbindelse (b) med metal såsom zink i eddikesyre eller en alkohol såsom methanol.

20 Den katalytiske hydrogenolyse gennemføres ved stuetemperatur. Den kan imidlertid eventuelt gennemføres ved en højere temperatur op til 60°C. Egnede opløsningsmidler til denne reaktion er ethylenglycol, dioxan, dimethylformamid, ethanol og eddikesyre.

25 Specielt når R er en benzyl-, trityl-, benzyloxycarbonyl- eller en p-toluensulfonylgruppe, kan en sådan gruppe fraspaltes med metallisk natrium i flydende ammoniak, sædvanligvis ved temperaturer i området -50°C --20°C.

4 30 Den fremkomne forbindelse, i hvilken R bety- 4' der gruppen R , underkastes derefter - med eller uden isolering og rensning - hydrolyse som beskrevet under fremgangsmåde A, hvorved den omdannes til forbindelsen med formlen (I).

35

DK 153552 B

11

Fremgangsmåde. C: Ombytning med piperazin eller deriva-_ter deraf.____

Forbindelserne med formlen (I) fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 5 0 4 x ... " ir • *·- · .· (c) y . N· N·· R1 10 hvor Y er et halogenatom, en lavere alkoxygruppe en lavere alkylthiogruppe, en lavere alkylsulfinylgruppe, en lavere alkylsulfonylgruppe, en lavere· alkylsulfonyl-oxygruppe eller en arylsulfonyloxygruppe, og R3-, og X har den ovenfor anførte betydning, med en forbindel-15 se med formlen ·* -·· r1-n nh (-d) • · 3 3' 20 hvor R betyder et hydrogenatom eller en gruppe R , hvor R har den ovenfor anførte betydning. Denne omsætning gennemføres ved opvarmning af forbindelserne (c) og (d) i et opløsningsmiddel, eventuelt i en forseglet reaktionsbeholder. Det foretrækkes at gennem-25 føre reaktionen i nærværelse af en base som syre-acceptor. Som eksempler herpå kan nævnes natrium-hydrogencarbonat, natriumcarbonat, kaliumcarbonat, triethylamin, pyridin og picolin. Forbindelserne (c) og (d) anvendes sædvanligvis i støkiometriske mængder.

30 Endvidere kan forbindelse (d) anvendes i overskud, hvorved forbindelserne ligeledes tjener som syre-acceptorer.

Forbindelse (d) kan anvendes i form af et hydrat eller et syreadditionssalt, f.eks. hydrochlorid. Den 35 foretrukne reaktionstemperatur ligger i området 20-150°C.

DK 153552B

12

Det ved denne reaktion anvendte opløsningsmiddel vælges i overensstemmelse med egenskaberne hos de udgangsmaterialer, der skal anvendes. Som eksempler på opløsningsmidler kan nævnes aliphatiske alkoholer så-5 som ethanol og propanol, aromatiske carbonhydrider såsom benzen og toluen, halogenalkaner såsom dichlor-ethan og chloroform, ethere såsom tetrahydrofuran, dioxan eller diphenylether, acetonitril, dimethylsulf-oxid, dimethylformamid og vand. De kan anvendes enten 10 alene eller i kombinationer deraf.

4

Den fremkomne forbindelse, hvor R er gruppen 41 R ,underkastes derefter hydrolyse, og den frem- 3 3' komne forbindelse, hvor R er gruppen R underkastes derefter en reaktion til fjernelse af beskyttelses-15 gruppen, hvorved fås den ønskede forbindelse.

Fremgangsmåde D: Alkylering

De forbindelser med formlen (I), hvor R^ er en ethylgruppe, dvs. forbindelser med formlen ® 2

20 X . C00RZ

• r’ *· i s) i (I-B) ·. · · .·

H-N N N N

* * C2H5 25 hvor X og R^ har den i forbindelse med formlen (I) angivne betydning, fremstilles ved omsætning af en forbindelse med formlen 0 .

·' '· i !| si 30 3 ... (e)

R -N N -N N

V

. . H 1 4 hvor R , R og X har de ovenfor anførte betydninger, med et ethyleringsmiddel. Der kan anvendes et vilkår-35 ligt kendt ethyleringsmiddel. Som eksempler herpå kan nævnes ethylhalogenider såsom ethyliodid-og ethylestere 13

DK 153552 B

såsom diethylsulfat, ethyl-p-toluensulfonat og triethyl-phosphat.

Denne reaktion gennemføres almindeligvis ved omsætning af forbindelse (e) med en støkiometrisk mængde 5 af ethyleringsmidlet i et indifferent opløsningsmiddel ved forhøjet temperatur, f.eks. 25-150°C. Når er en beskyttelsesgruppe, kan ethyleringsmidlet anvendes i overskud.

Som eksempler på opløsningsmidler kan nævnes 10 ethanol, dioxan, methylcellosolve, dimethylformamid, dimethylsulfoxid og vand. Omsætningen kan fremskyndes ved tilsætning af en syreacceptor, f.eks. en base såsom et alkalimetalcarbonat, et alkalimetalhydroxid, et alkalimetalalkoxid, natriumhydrid, pyridin, triethyl- 15 amin eller benzyltrimethylammoniumhydroxid.

4 4'

Den dannede forbindelse, hvor R er gruppen R , underkastes derefter hydrolyse, og den dannede for-3 3' bindelse, hvor R er gruppen R , underkastes en reaktion til fjernelse af beskyttelsesgruppen, hvorved fås 20 den ønskede forbindelse.

Fremgangsmåde E: Vinylering

Forbindelser med formlen (I) , hvor R·'· er en vinylgruppe, dvs. forbindelser med formlen 0 2

25 X. . C00R

(I-C) / Λ ·

H-N N" N N

\ I

··.________· CH=CH2 2 30 hvor R og X har den i forbindelse med formlen (I) anførte betydning, kan fremstilles ved opvarmning af en forbindelse med formlen 0 4

X . V. R

35 Ϊ' li p (f)

v : 1! ‘ I

R-N Ν' ' N N

- hc-ch9

Ί1 2 Z Z

DK 153552B

14 3 4 hvor X, R og R har de ovenfor anførte betydninger, 1 2 og Z og Z er forskellige fra hinanden og hver for sig betyder et hydrogenatom, et halogenatom, en lavere alkoxygruppe, en benzyloxygruppe, en alkoholisk hydrox- 5 ylgruppe eller derivater deraf eller en gruppe, som sammen med resten kan danne en tertiær eller kva- 1 2 ternær amin, idet dog enten Z eller Z altid er et hydrogenatom.

Som eksempler på de alkoholiske hydroxylgrupper 10 Z og Z kan nævnes acyloxygrupper såsom acetoxyl eller ethoxycarbonyloxy, arylsulfonyloxygrupper såsom p-toluensulfonyloxy eller lavere alkylsulfonyloxy-grupper såsom methansulfonyloxy, S-aryldithiocarbonyl-oxygrupper såsom S-tolyldithiocarbonyloxy eller S-phe-15 nyldithiocarbonyloxy eller lavere alkyldithiocarbonyl-oxy såsom S-methyldithiocarbonyloxy eller S-ethyldi-thiocarbonyloxy.

1 2

Som eksempler på de grupper Zx og Z , som kan danne en tertiær eller kvaternær amin med resten, 20 kan nævnes -N(CH3)2, -N(C2H5)2, -if i, -N+(CH3) 3l“, 0 \ . > i+ r- 1 -r:(C2H5)3OH og -N(CH3)2.

Reaktionen ifølge fremgangsmåde E gennemføres ved simpel opvarmning af forbindelse (f) eller opvarm-25 ning af denne i nærværelse af en katalysator såsom en syre eller en base. Som eksempler på katalysatorer skal nævnes ordinære syrer såsom saltsyre, svovlsyre, poly-phosphorsyre, phorphorpentoxid, myresyre, eddikesyre eller toluensulfonsyre, Lewis-syrer såsom thionylchlo-30 rid, phosphorylchlorid, bortrifluorid eller zinkchlorid, baser såsom kaliumhydrogencarbonat, alkalimetalhydroxider eller alkalimetalcarbonater, metalhydrider såsom natriumhydrid, alkalimetalalkoxider såsom natrium-ethoxid, natriummethoxid eller kalium-tert.-butoxid, 35 pyridin, collidin, benzyltrimethylammoniumhydroxid, eddikesyreanhydrid phthalsyreanhydrid, sølvoxid, iod og tert.-butyllithium.

DK 153552B

15

Reaktionstemperaturen ligger sædvanligvis i området 50-270°C. Reaktionen kanLgennemfØres i fraværelse af opløsningsmiddel,' men 'den gennemføres fortrinsvis i et indifferent opløsningsmiddel. Som eksempler på opløs-5 ningsmidler kan nævnes vand, alkohol, eddikesyre, dimethyl formamid, dimethylsulfoxid, ether, benzen, dioxan, tetrahydrofuran og pyridin.

4 41

Den fremkomne forbindelse, hvor R er gruppen R , underkastes derefter hydrolyse, og den fremkomne for-10 bindelse, hvor R er gruppen R , underkastes derefter en reaktion til fjernelse af beskyttelsesgruppen, hvorved fås den ønskede forbindelse.

Fremgangsmåde F: Halogenering via diazoniumsalt

Forbindelserne med formlen (I) kan ligeledes frem-15 stilles ved spaltning af en forbindelse med formlen (-.+'· H R4 z ·« · i ;l |i , , i i ί (g)

r3-n n ' ' · N· N

20 ... R1 - 1 3 hvor A er en halogenholdig aniongruppe, og R , R og 4 R har de ovenfor anførte betydninger^

Som eksempler på aniongruppen A kan nævnes Cl , 25 Br“, i", BF^, SiF~~, PF~ og SbF-.

Spaltningsreaktionen, der er kendt som Schiemann- reaktionen, Sandmeyer-reaktionen, Gattermann-reaktionen eller lignende reaktioner, gennemføres ved opvarmning af diazoniumsaltet (g) eller ved bestråling med lys, 30 med eller uden katalysator.

F.eks. fremstilles en forbindelse med formlen (I), hvor X er et fluoratom, ved opvarmning af et diazoniumsalt (g), hvor A-'er en fluorholdig anion såsom BF^, til en temperatur i området fra ca. 50°C til ca. 170°C 35 (termisk spaltning) eller ved lysbestråling af forbindelsen, fortrinsvis med lys med bølgelængder på

DK 153552 B

16 3000 S til 3700 S ved en temperatur i området 5-50°C, almindeligvis 25-35°C (fotolytisk spaltning). Denne reaktion kan gennemføres under anvendelse af et fortyndingsmiddel i en mængde på 3-5 gange mængden af dia-5 zoniumsaltet (g) eller i et organisk opløsningsmiddel. Fortyndingsmidlet er f.eks. sand, bariumsulfat eller natriumfluorid. Eksempler på organiske opløsningsmidler er sådanne, som ikke tager del i den pågældende reaktion, f.eks. petroleumsether, cyclohexan, benzen, 10 toluen, biphenyl, tetrachlormethan, ethylacetat eller quinolin.

En forbindelse med formlen (I), hvor X er et chloratom, fremstilles f.eks. ved tilsætning af en katalysator såsom kobber (I)halogenid, fortrinsvis 15 kobber(I)chlorid eller kobberpulver til en vandig opløsning af et diazoniumsalt med formlen (g), hvor A er Cl , og som er afledt af en forbindelse (h), som beskrives i det følgende, hvorefter blandingen eventuelt opvarmes til ca. 40-l00°C til tilendebringelse 20 af reaktionen.

Den fremkomne forbindelse, hvor er gruppen 41 R , underkastes derefter hydrolyse, og den frem- 3 3' komne forbindelse, hvor R er gruppen R , underkastes derefter en reaktion til fjernelse af beskyttel-25 sesgruppen, hvorved fås den ønskede forbindelse.

Diazoniumsaltet (g) fås ved omsætning af en forbindelse med formlen 0 4

H2N- . R

30 j ';i (h) R3-N N N- N" .

. . R1 13 4 hvor R , R og R har de ovenfor anførte betydninger, 35 med et diazoteringsmiddel i nærværelse af en syre.

17

DK 153552 B

Som eksempler på diazoteringsmidler kan nævnes natriumnitrit, isoamylnitrit og nitrosylsvovlsyre.

Som eksempler på syrer kan nævnes uorganiske syrer såsom saltsyre, svovlsyre, tetrafluorborsyre og phosphor-5 syre samt organiske syrer såsom eddikesyre.

Denne reaktion gennemføres ;ved omrøring af forbindelse (h) og diazoteringsmidlet under afkøling i vand, et organisk opløsningsmiddel eller en blanding deraf med vand i nærværelse af en syre. Mængden af den 10 til reaktionen nødvendige syre er sædvanligvis 3,5-5 ækvivalenter i forhold til forbindelsen (h), og 'diazoteringsmidlet anvendes i ringe overskud i forhold til forbindelsen (h).

Til gennemførelse af denne reaktion i vandig op-15 løsning omsættes forbindelse (h) med natriumnitrat i nærværelse af den ovenfor nævnte syre, eller forbindelsen (h) omsættes med nitrosylsvovlsvre i en vandig eddikesyreopløsning.

Når der anvendes isoamylnitrit som diazoterings-20 middel, kan denne reaktion hensigtsmæssigt gennemføres i et organisk opløsningsmiddel såsom ethanol, tetra-hydrofuran, dioxan, acetonitril eller eddikesyre.

Et diazoniumsalt (g), hvor A er BF^, kan ligeledes fremstilles let, f.eks. ved tilsætning af tetra-25 fluorborsyre (HBF^) eller et salt deraf til et diazoniumsalt forskelligt fra BF^ saltet.

Det således med eller uden isolering fremstillede diazoniumsalt (g) underkastes den ovenfor beskrevne spaltningsreaktion, hvorved fås det ønskede produkt 30 med formlen (I).

Et udgangsmateriale (e), hvor er en carboxyl-eller ethoxycarbonylgruppe, udgangsmaterialer (c) og (h), hvor Ri er en ethylgruppe, og R4 er en carboxyl·^ eller ethoxycarbonylgruppe, og et udgangsmateriale (a), hvor 35 r4" er en ethoxycarbonylgruppe, kan f.eks. fremstilles i overensstemmelse med nedenstående reaktionsskema (1).

18

DK 153552 B

I Reaktionsskena (1)

0_N 0 !! 1) aminaring rK

2 ombytning ^ 2 -* acetvlerim^ . , 3

ϊΛ' Cl Ρ3-ί·Γ~!.· N^Ci —N

W ^ * j K

l .

reduktion i . b AØif OH.' . H2Hn^ OH. ' _ i li i J;tering ___ } || » -5 R.3-S N^N"SrC° * ΗΒ-ΐΓίΑΛί^00 N—' j H · · v_y h

Scniemann eller aminering ·, ^ Sandmaner-reaktion · ! . .* i

X ^..... X

C.t3 nyorcxy- λ-λ k.jL^CO se .O-i'n'-i·- RO-iPti^1’ £ * η3-:< / w

• \ f H

reduktion kondensation ^ i i.

°2BV^ . P-k /OOSt I ru o /—>. ->jjLrK ~ u μ ijvv-- υ-^νλνη0 e3-n «/xh f h?-m irNrNk ~

. * . w Et N—f H

> forbindelse (m) kondensation k ondensation i I - i - 1 ,r-.,X.'i,.kc00Et ringdannelse ΓΊ W ΙΊ \_t t

Ft ^ υ r Drbindelse (k)

V

i

19 DK 153552 B

0.t 1 ^coost rii Y , A v ]) COQEt ringdannelse i w w ψ 0 H COOE+-

forbindelse (j ) y 0 I ^11 I I

11 -u ·/—V. /\Λν^ , *\j N h R J-N N Μ N ethy lering '—1 forbindelse (e)

tiZ

i ringdannelse · forbindelse (a) ! ! hydrolyse j ^0 coon 3 r~\ Ava> R3 -N N N h

i— / LI

^ forbindelse (e} °2N\^-^A^CC0Sfc 0 IC1! 'J V'\^\^ACCOEt y^N^ST .....alky lering K lf i] x m s ro j

L7 V

1 i·« i'l forbindelse (n) i.

! i cmbytning reduktion V 0

R^-iTVS N • W H

alkylering >

V

r ° 0 0 i----c O 0 E Lr A I C if if Ét i reduktion . -y .

DK 153552 B

l o .20 i' o ' Η2Ν~Ύ^'υΝ''"°00Ξ1: , ^ <,,on^tmSg- Y^nK) R3-N N V ^ » - N—f Et Et forbindelse (h) 1 ^ \diazoterxng na: ^ 0 » Y-^N N .

hydrolyse \ . Et \ . ' " Schienann eller \ Sandmeyer \ reaktion \ .

0 - XK o · X^/>/^C00Et Χ^^γ^γ-COOEt '

. Jo 'A. U < Q^ytnincr- 1-JXV

R3-M w N M ~ Y NN

Et St , _ v forbindelse (c) forbindelse ia > . j hydrolyse

v 0 - . · ^ 0 h9nx/vjl^cooh . X^nA^C00H

,Αμ.t. vjsnr.·

R 3-M N NN Y N N

w 1 * .

Et Et „ , . , , forbindelse (c) forbindelse ih) diazotering gennemføret ved Schiemann- eller Gatter-mann-reaktion.

(-) 3 21

DK 153552 B

hvor R , X og Y har de ovenfor anførte betydninger, og Et er en ethylgruppe.

Ringdannelsesreaktionen i ovenstående reaktionsskema (1) , dvs. forbindelse (j) -> forbindelse (n) , 5 forbindelse (k) -forbindelse (a), forbindelse (m) -> forbindelse (e), gennemføres på følgende måde.

Forbindelse (j), (k) eller (m) opvarmes direkte eller i et højtkogende opløsningsmiddel såsom diphenyl-10 ether, biphenyl, o-dichlorbenzen, diphenylenoxid, di-butylphthaiat eller blandinger deraf. Den egnede opvarmningstemperatur ligger i området 140-260°C. Det er ligeledes muligt at gennemføre ringdannelsesreaktionen i nærværelse af et konventionelt dycliaeringsmiddel 15 såsom polyphosphorsyre, et lavere alkylpolyphosphat, koncentreret svovlsyre, phosphorylchlorid eller phosphorpentoxid. Når der anvendes polyphosphorsyre, lavere alkylpolyphosphat eller phosphorpentoxid, gennemføres reaktionen almindeligvis i et opløsningsmiddel 20 såsom benzen, dioxan eller dimethylformamid. Når der anvendes koncentreret svovlsyre, gennemføres reaktionen almindeligvis i et opløsningsmiddel såsom eddike-syreanhydrid eller eddikesyre. Afhængigt af cyclise-ringsmidlets egenskaber kan dette også tjene som opløs-25 ningsmiddel. Når der anvendes cycliseringsmiddel, gennemføres reaktionen ved forholdsvis lav temperatur, f.eks. ved en temperatur i området 100-160°C.

4"

En forbindelse med formlen (a), hvor R er gruppen R^ kan f.eks. fremstilles i overensstemmelse 30 med det efterfølgende reaktionsskema (2).

35

DK 153552 B

22

Reaktionsskema (2) X. (ΥΛΠ*. 0 0 3 /-N tfl VyV* VvV°0St s H ^T’’ *?-«_/· ,:; ji h » dannelse / ." Et Λ

,/A alkylering H^O

O alkylering A n M

J u r-yi i u io \Y>YV ~t0ri > YAr^ v--.

R3-;? tfW Β3·Η R?-N V^N^N

I CH-CH-Cl i Ét - Et \ ' d i ' \ i i i i eliminering hyuroivse ‘x _ I5 i ; J N 3 I HK,. Cl

i ! “ \ V

v o v o - O „>;h

Xy^^i^CN Xyv^JlCOrHp Xv^sA/C' Γ”** I i li \y I i II “ ' » \»tl .3 .ΓΎΑ" A U , /~λ Λ' A υ . , /—\ A A U 2 - -a 1/ Μ M R3-M ;r· M n ?3-Π a « κ

ί** «-Ι — tJ ΓΓ Γ1 V

UΠ - Oil2 i.« 0 it 3 hvor X, R og.Et har de ovenfor anførte betydninger.

Forbindelserne (f) kan fremstilles ved omsætning af en forbindelse (e) med en forbindelse med formlen 25 2 1 Z -Ci^CHfZ )-halogen på den under fremgangsmåde D beskrevne måde.

De her omhandlede forbindelser fremstillet ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåde kan isoleres og ^ renses ved gængse metoder. Forbindelserne (I) kan fås i fri form eller i form af et salt, afhængigt af valget af udgangsmaterialer og reaktionsbetingelser. Forbindelserne (I) kan omdannes til farmaceutisk acceptable salte ved behandling med en syre eller en base. Syren kan være mange forskellige organiske og uorganiske 3 5 syrer, f.eks. saltsyre, eddikesyre, mælkesyre, ravsvre, lactobionsyre, oxalsyre og methansulfonsyre.

23

DK 153552 B

De her omhandlede 1,8-naphthyridinderivater har, som det fremgår af de efterfølgende eksempler, fremragende antibakteriel virkning og lav toksicitet. Disse forbindelser kan således anvendes til. behandling eller 5 forebyggelse af bakterieinfektioner hos varmblodede dyr, inclusive mennesker.

Dosis af den her omhandlede forbindelse (I) eller salte deraf ved anvendelse til mennesker reguleres efter patientens alder, legemsvægt og tilstand, ind-10 giftsmetoden, antallet af doser, etc. Dosis til voksne er sædvanligvis 0,1-7 g/dag, fortrinsvis 0,2-5 g/dag.

De her omhandlede forbindelser kan f.eks. anvendes i form af farmaceutiske præparater indeholdende forbindelserne i blanding med et organisk eller uor-15 ganisk, farmaceutisk acceptabelt fast eller flydende hjælpestof til oral eller topisk indgift.

Farmaceutisk acceptable hjælpestoffer er stoffer, som ikke reagerer med de her omhandlede forbindelser.

Eksempler herpå er vand, gelatine, lactose, stivelse, 20 cellulose, fortrinsvis mikrokrystallinsk cellulose, carboxymethylcellulose, methylcellulose, sorbitol, magnesiums tearat, talkum, vegetabilske olier, benzylalko-hol, kautsjuk, propylenglycol·, polyalkylenglycoler, methylparaben og andre kendte medicinske hjælpestoffer.

25 De farmaceutiske præparater kan være pulver, granulater, tabletter, salver, suppositorier, cremer, kapsler etc.

De kan være steriliseret og/eller indeholde tilsætningsstoffer såsom konserveringsmidler, stabiliseringsmidler eller fugtemidler. De kan endvidere indeholde andre 30 terapeutisk værdifulde stoffer afhængigt af anvendelsesformålet.

Fremgangsmåderne til fremstilling af de her omhandlede forbindelser (I) og salte deraf samt deres farmakologiske virkning illustreres i det følgende.

35 Eksempel I til VI illustrerer fremgangsmåder til fremstilling af udgangsforbindelser.

DK 153552 24

Eksempel 1-23 illustrerer fremgangsmåder til fremstilling af de .her. omhandlede forbindelser (I) samt salte deraf-

Eksempel VII illustrerer en fremgangsmåde til 5 fremstilling af en forbindelse, som er ny, og som ikke er omfattet af den foreliggende opfindelse.

Eksempel A til G illustrerer den farmakologiske virkning af de her omhandlede forbindelser (I) og deres salte i sammenligning med virkningen af for-10 bindeiser, der ligger uden for opfindelsens omfang, som kontrolforbindelser.

Eksempel H og J illustrerer fremstillingen af farmaceutiske præparater indeholdende de her omhandlede forbindelser med formlen (I) .

15 De ifølge de efterfølgende eksempler fremstil lede forbindelser identificeres ved elementæranalyse, massespektroskopi, IR-spektroskopi, NMR-spektroskopi og tyndtlagschromatografi.

Eksempel I

20 Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen 0 f . 'Λ ^cooc2h5 \ i m m

CH-jCON N Ν' N

25 C H

* * ^2Ά5

Til 10 g polyphosphorsyre sættes 2,18 g diethyl--N-[6-(4-acetyl-l-piperazinyl)-5-fluor-2-pyridyl]-N--ethylaminomethylenmalonat, og den fremkomne blanding 30 opvarmes ved 110-120°C i 15 minutter under omrøring.

Efter afkøling blandes det sirupagtige materiale med isvand, og opløsningen indstilles på pH 6 med 20%’s vandig natriumhydroxidopløsning og ekstraheres med chloroform. Efter tørring koncentreres chloroformeks-35 trakten til tørhed. Remanensen krystalliseres ved tilsætning af ethylacetat. Der omkrystalliseres af ethyl-

DK 153552B

25 acetat, hvorved der fås 1,3 g ethyl-7-(4-acetyl-l--piperazinyl)-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8--naphthyridin-3-carboxylat, smp. 195-*197°C.

Eksempel II

5 Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen 0

F .. ” .CN

i t .» ·. 'V. ·· CH^CO-N N N N· ' 10 0 \ 1 C2H5 3,3 g ethyl-N-[6-(4-acetyl-l-piperazinyl)-5--fluor-2-pyridyl]aminomethylencyanoacetat, som er fremstillet ud fra 6-(4-acetyl-l-piperazinyl)-5-fluor-2- t 15 -aminopyridin og ethyl-ethoxymethylencyanoacetat, opvarmes i en blanding af biphenyl og diphenyloxid ("Dowtherm A") ved 255°C, hvorved fås 2,3 g 7-(4-acetyl-l-piperazinyl) -6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naph-thyridin-3-carbonitril. Den således fremstillede nitril 20 omsættes uden yderligere rensning ved 80°C med ethyl-iodid og kaliumcarbonat i dimethylformamid. Reaktionsblandingen koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Remanensen ekstraheres med chloroform, og ekstrakten vaskes med vand og tørres. Chloroformen afde-25 stilleres. Den faste remanens omkrystalliseres fra en blanding af ethanol og chloroform, hvorved der fås 2,2 g 7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-l-ethyl-6-fluor-1,4--dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carbonitril, smp.

289-290°C.

30 Eksempel III

Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen 0

F . ” COOH

y ’ *' · »

: ’ ‘I

i 35 Cl W ' ' N· ;2h5

DK 153552 B

26

En blanding af 3,25 g l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro--7-hydroxy-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre og 30 ml phosphorylchlorid opvarmes til tilbagesvaling i 5 minutter. Efter fjernelse af et overskud af phospho-5 rylchlorid ved destillation sættes 30 g isvand til remanensen under omrøring, og blandingen henstilles ved stuetemperatur natten over. Bundfaldet isoleres ved filtrering, vaskes med vand og omkrystalliseres fra acetonitril, hvorved der fås 3,2 g 7-chlor-l-ethyl-6-10 -fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxyl- syre, smp. 265-267°C.

Eksempel IV

Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen 15 F-^.. /.V. ^COOC2H5

i II

C^HcOCO-n' N -N-·" ^ ' N^

2 5 / H

20 2,6-Dichlor-3-nitropyridin omsættes med N-ethoxy- carbonylpiperazin, hvorved fås 6-chlor-2-(4-ethoxy-carbonyl-l-piperazinyl)-3-nitropyridin. Produktet opvarmes uden rensning med ethanolisk ammoniak i et forseglet rør ved 120-125°C, hvorved fås 6-amino-2-(4-25 -ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-3-nitropyridin (smp.

132-134°C), som behandles med eddikesyreanhydrid i eddikesyre, hvorved fås 6-acetylamino-2-(4-ethoxycarbonyl- 1-piperazinyl) -3-nitropyridin (smp. 168-169°C).

Denne forbindelse hydrogeneres katalytisk i nærværelse 30 af 5%'s palladium-på-carbon i eddikesyre, hvorved fås 3-amino-6-acetylamino-2-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-pyridin. Det fremstillede 3-aminoderivat opløses uden yderligere rensning i en blanding af ethanol og 42%'s tetrafluorborsyre, og til denne opløsning sættes en op-35 løsning af isoamylnitril i ethanol under 0°C under omrøring. 20 minutter senere tilsættes opløsningen ether.

27

DK 153552 B

Det dannede bundfald isoleres ved filtrering og vaskes med en blanding af methanol og ether og derpå med chloroform, hvorved fås 6-acetylamino-2-(4-ethoxycarb-onyl-l-piperazinyl)-3-pyridin-diazonium-tetrafluorborat, 5 smp. 117-117,5°C (sønderdeling).

En suspension af diazoniumsaltet i toluen opvarmes gradvis og holdes ved 120°C (badtemperatur) i 30 minutter under omrøring. Efter fordampning af opløsningsmidlet under formindsket tryk gøres remanensen 10 alkalisk med 10%'s natriumcarbonat og ekstraheres derpå med chloroform. Chloroformekstrakten tørres over vandfrit kaliumcarbonat. Efter fordampning af opløsningsmidlet omkrystalliseres den krystallinske remanens fra ethylacetat, hvorved fås 6-acetylamino-2-(4-15 -ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-3-fluorpyridin, smp.

132-133°C. 3-Fluorderivatet hydrolyseres med en blanding af 15%'s saltsyre og methanol (1:2 r/r), hvorved fås 6-amino-2-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-3-fluorpyridin. Denne forbindelse behandles med diethyl-20 ethoxymethylenmalonat ved 130-140°C, hvorved fås N-[2-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-3-fluor-6-pyri-dinyl]amino-methylenmalonat (smp. 144-145°C)/ og derpå cycliseres produktet ved 255°C, hvorved fås ethyl-7--(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-6-fluor-1,4-di-25 hydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp.

279-281°C.

Eksempel V

Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen F ® 30 \ ‘ COOC2H5 • ·' '· ! li |j c2h5oco-n n · - N. · N„ 4 • * CH2CH2C1 35 En blanding af 10,5 g ethyl-7-(4-ethoxycarbonyl- -1-piperazinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthy-ridin-3-carboxylat, 100 ml dimethylformamid og 7,4 g

DK 153552B

28 kaliumcarbonat opvarmes ved lOO°C i 15 minutter. Opløsningen tilsættes en opløsning af 10,1 g ethylenbrom-hydrin di 10 ml dime thylf ormamid, og blandingen opvarmes ved 100°C i 45 minutter under omrøring. Efter fra-5 filtrering af det dannede uorganiske stof koncentreres filtratet til tørhed under formindsket tryk. Remanensen tilsættes 80 ml vand, og de dannede krystaller isoleres ved filtrering og omkrystalliseres fra ethanol, hvorved fås 10,2 g ethyl-7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-10 -6-fluor-1-(2-hydroxyethyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naph- thyridin-3-carboxylat, smp. 215-217°C. 5,0 g thionyl-chlorid sættes til opløsningen af det dannede droxylethylderivat (4,6 g) i 50 ml chloroform, og blandingen opvarmes under tilbagesvaling i 30 minutter.

15 Efter afkøling behandles opløsningen med 30 ml vand og neutraliseres med en mættet natriumhydrogencarbonatop-løsning. Chloroformlaget isoleres, vaskes med vand og tørres over vandfrit natriumsulfat. Efter fjernelse af opløsningsmidlet chromatograferes remanensen på silica-20 gel med chloroform, og krystallerne hidrørende fra hovedfraktionen omkrystalliseres fra ethylacetat, hvorved fås 4,7 g ethyl-1-(2-chlorethyl)-7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl) -6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-1,8--naphthyridin-3-carboxylat, smp. 143-144°C.

25 Eksempel VI

Fremstilling af en udgangsforbindelse med formlen 0 h2n . cooc2h5 • · · i i; S!

' NN

CH-CO-N N , \ . C2H5 3,8 g ethyliodid sættes til en omrørt blanding af 4,7 g ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-l,4-dihydro-6-35 -nitro-4-0xo-l,8-naphthyridin-3-carboxylat og 3,77 g kaliumcarbonat i 40 ml dimethylformamid, som holdes ved 80°C. Blandingen omrøres i 80 minutter ved samme

DK 153552B

29 temperatur. Efter fjernelse af uopløseligt materiale ved filtrering koncentreres filtratet til tørhed under formindsket tryk. Remanensen opløses i vand og ekstra-heres med chloroform. Ved fordampning af chloroform og 5 tilsætning af ether til remanensen fås 4,5 g ethyl-7--(4-acetyl-l-piperazinyl)-1-ethyl-l,4-dihydro-6-nitro--4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 211-212°C.

16 g reduceret jern sættes portionsvis til en opløsning ved 70-'80°C af 8,0 g af det ovenfor beskrevne 10 produkt i 200 ml eddikesyre. Efter omrøring i 0,5 time ved samme temperatur tilsættes blandingen ethanol.

Efter filtrering koncentreres filtratet til tørhed under formindsket tryk. Remanensen tilsættes 300 ml vand, og den vandige blanding afkøles i et isbad.

15 Det dannede faste stof isoleres og omkrystalliseres fra ethanol, hvorved fås 5,8 g ethyl-7-(4-acetyl-l--piperazinyl)-6-amino-l-ethyl-l,4-dihydro-4-oxo--1,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 265-270°C.

Eksempel 1

20 Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde A

3,48 g ethyl-l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo--7-(1-piperazinyl)-l,8-naphthyridin-3-carboxylat opvarmes med 30 ml 5%'s vandig natriumhydroxidopløsning på et dampbad i 30 minutter. Efter afkøling indstilles 25 reaktionsblandingen på pH 7 med eddikesyre. Det fremkomne faste stof isoleres og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 3,0 g l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)--l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp. 220-224°C.

30 Eksempel 2

Fremstilling af forbindelse 1 og dets hydrochlorid ved fremgangsmåde A og fremgangsmåde B

En blanding af 20 g ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazinyl) -1-ethy1-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyri-35 din-3-carboxylat og 100 ml 20%'s saltsyre opvarmes til tilbagesvaling i 3,5 timer, hvorefter reaktionsblandin-

DK 153552B

30 gen tilsættes 100 ml vand og 200 ml ethanol. Det fremkomne faste stof isoleres og opløses i 300 ml varmt vand, hvorefter opløsningen behandles med 5 g trækul og filtreres. Filtratet tilsættes 25,5 ml koncentreret 5 saltsyre, og blandingen afkøles i et isbad, hvorved fås 15,2 g 1-ethy1-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pi-perazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre-hydrochlo-rid, smp. over 300°C.

Hydrochloridet (14,2 g) opløses i 100 ml 4%'s 10 vandig natriumhydroxidopløsning og indstilles på pH 7,5 med fortyndet eddikesyre. Det dannede bundfald isoleres, vaskes med vand og omkrystalliseres fra en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 11,7 g l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-15 -1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 3

Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde A og fremgangsmåde B

3,43 g 7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-l-ethyl-6-20 -fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-6-carbonitril opløses ved opvarmning i 10 ml koncentreret svovlsyre. Opløsningen opvarmes på et dampbad i 15 minutter og hældes på isvand. Den vandige opløsning indstilles på pH 8 med 10%1 s vandig natriumhydroxidopløsning og eks-25 traheres med chloroform. Ekstrakten vaskes med vand, tørres, og chloroformen fordampes. Remanensen krystalliseres ved tilsætning af ethanol. Krystallerne renses ved omkrystallisation af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved der fås 3,35 g 7-(4-acetyl-l-pipe-30 razinyl)-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naph- thyridin-3-carboxamid, smp. 282-283°C.

En blanding af 3,3 g 7-(4-acetyl-l-piperazinyl)--l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin--3-carboxamid, 20 ml eddikesyre og 20 ml koncentreret 35 saltsyre opvarmes til tilbagesvaling i 4 timer. Blandingen koncentreres til ca. 1 trediedel af dens rumfang

DK 153552B

31 og indstilles på pH 7 med 10%'s vandig natriumhydroxid-opløsning. Det faste stof isoleres, vaskes med vand og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 2,92 g l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-5 -(l-piperazinyl)-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 4

Fremstilling af forbindelse 1 og dens ethylester ved fremgangsmåde A og fremgangsmåde B

Til en omrørt opløsning af 2,66 g ethyl-l-ethyΙ-ΙΟ -6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(4-trifluoracetyl-l-pipera- zinyl)-l,8-naphthyridin-3-carboxylat i en blanding af 10 ml chloroform og 30 ml methanol sættes en opløsning af 4,14 g kaliumcarbonat i 60 ml vand. Blandingen omrøres i 5 timer ved stuetemperatur og neutraliseres 15 derpå med eddikesyre og ekstraheres med chloroform.

Ekstrakten tørres, og chloroformen fordampes, hvorved der fås et krystallinsk produkt. Det rå produkt omkrystalliseres af ethylacetat, hvorved fås 2,0 g ethyl-1--ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-20 -1,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 150-151°C.

Carboxylatet (1,74 g) opvarmes med 15 ml 5%'s vandig natriumhydroxidopløsning på et dampbad i 20 minutter. Efter afkøling indstilles reaktionsblandingen på pH 7 med eddikesyre. Det fremkomne faste stof iso-25 leres og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 1,5 g l-ethyl-6-fluor-1,4--dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3--carboxylsyre.

Eksempel 5

30 Fremstilling af forbindelse 2 ved fremgangsmåde A

Analogt med den i eksempel 4 beskrevne fremgangsmåde fremstilles 6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl) -1-viny1-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp.

256-260°C (sønderdeling), ud fra ethyl-6-fluor-1,4-di-35 hydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1-vinyl-l,8-naphthyri- din-3-carboxylat.

DK 153552 B

32

Eksempel 6

Fremstilling af forbindelse 2 ved fremgangsmåde B

30 ml 5%'s natriumhydroxidopløsning sættes til 1,5 g 7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-6-fluor-l,4-5 -dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxyl- syre. Blandingen opvarmes til tilbagesvaling i 5 timer under omrøring. Efter afkøling indstilles opløsningen på pH 7 med eddikesyre. Det dannede bundfald isoleres ved filtrering. Bundfaldet opløses i 10%'s vandig eddi-10 kesyre under opvarmning, og opløsningen indstilles på pH 9 med ammoniakopløsning. Det dannede bundfald isoleres ved filtrering, hvorved der fås 0,98 g 6-fluor--1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1-vinyl-l,8--naphthyridin-3-carboxylsyre.

15 Eksempel 7

Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde A og fremgangsmåde B

En blanding af 10 g ethyl-l-ethyl-7-(4-ethoxy-carbonyl-1-piperazinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-20 -l,8-naphthyridin-3-carboxylat, 50 ml 15%'s saltsyre og 50 ml ethanol opvarmes til tilbagesvaling i 45 minutter. Efter fordampning af ethanolen afkøles blandingen. Det dannede faste stof isoleres, vaskes med vand og omkrystalliseres af en blanding af dichlor-25 methan og ethanol, hvorved der fås 7,5 g l-ethyl-7--(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-6-fluor-l,4-dihy-dro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp.

246-247°C.

En opløsning af 7,5 g l-ethyl-7-(4-ethoxycarbo-30 nyl-l-piperazinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-l,8-naph- thyridin-3-carboxylsyre i 75 ml 10%'s vandig natriumhydroxidopløsning opvarmes til tilbagesvaling i 3 timer. Blandingen afkøles og indstilles på pH 7 med eddikesyre.

35 Det dannede faste stof isoleres, vaskes med vand og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chlo- 33

DK 153552 B

roform, hvorved der fås 5,45 g l-ethyl-6-fluor-1,4-di-hydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 8

5 Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde B

En omrørt opløsning af 1,12 g l-ethyl-6-fluor--1,4-dihydro-4-oxo-7-(4-trityl-l-piperazinyl)-1,8--naphthyridin-3-carboxylsyre i 30 ml eddikesyre henstilles natten over ved stuetemperatur. Efter fordamp-10 ning af eddikesyren linder formindsket tryk indstilles remanensen på pH 8-9 med fortyndet ammoniakopløsning.

Det dannede bundfald isoleres, vaskes med vand og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 0,6 g l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-15 -4-OXO-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxyl- syre.

Eksempel 9

Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde B

Til en opløsning af 1,4 g 7-(4-benzyloxycarbonyl-20 -1-piperazinyl)-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8- -naphthyridin-3-carboxylsyre, smp. 232-234°C, i en blanding af 20 ml ethanol, 8 ml vand og 2 ml piperadin sættes 140 mg 5%'s palladium-på-trækul. Blandingen hydrogeneres ved stuetemperatur ved rystning under en 25 hydrogenatmosfære. Efter absorption af 84 ml hydrogen filtreres blandingen til fjernelse af katalysatoren, og filtratet koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Remanensen tilsættes 16 ml vand, og opløsningen indstilles på pH 7, hvorved der dannes et bundfald.

30 Bundfaldet isoleres, vaskes med vand og omkrystallise res af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved der fås 0,82 g l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7--(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

35

DK 153552B

34

Eksempel 10

Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde B

500 mg l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-[4--(β,β,β-trichlorethoxycarbonyl)-1-piperazinyl]-1,8-5 -naphthyridin-3-carboxylsyre behandles med 500 mg zinkstøv i 5 ml eddikesyre ved stuetemperatur i 2 timer.

Der filtreres, og filtratet koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Remanensen opløses i vand og neutraliseres med ammoniakopløsning. Det fremkomne 10 bundfald isoleres og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved der fås 290 mg l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)--1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 11

15 Fremstilling af forbindelse 1 ved fremgangsmåde C

Til en omrørt blanding ved 70°C af 7,96 g vandfri piperazin og 200 ml acetonitril sættes en varm opløsning af 5,0 g 7-chlor-l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro--4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre i 200 ml aceto-20 nitril. Reaktionsblandingen holdes ved 70°C i 1 time under omrøring. Efter fjernelse af acetonitrilet ved destillation tilsættes remanensen 150 ml 3%'s vandig eddikesyre. Det uopløselige materiale frafiltreres, og filtratet koncentreres til tørhed under formindsket 25 tryk. Remanensen tilsættes 100 ml vand og 10 ml 28%'s vandig ammoniakopløsning, og blandingen opvarmes i nogle få minutter og afkøles i et isbad. Det fremkomne faste stof isoleres, vaskes med vand og omkrystallise-rea fra en blanding af ethanol og chloroform, hvorved 30 der fås 5,4 g l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7- -(1-piperazinyl)-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 12

Fremstilling af forbindelse 2 ved fremgangsmåde C

Analogt med den i eksempel 11 beskrevne frem-35 gangsmåde fremstilles 6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1- -piperazinyl)-1-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre

DK 153552B

35 ud fra 7-chlor-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8--naphthyridin-3-carboxylsyre.

Eksempel 13

Fremstilling af ethylesteren af forbindelse 1 ved frem-5 gangsmåde C

En opløsning af 1,0 g ethyl-l-ethyl-7-ethansulfo-nyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carb-oxylat og 0,6 g vandfri piperazin i 60 ml acetonitril opvarmes til tilbagesvaling i 1 time. Blandingen koncen-10 treres til tørhed under formindsket tryk, og remanensen krystalliseres af ethylacetat. Det isolerede faste stof omkrystalliseres af ethylacetat, hvorved der fås 0,63 g ethyl-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1--piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylat.

15 Eksempel 14

Fremstilling af forbindelse 1 og dens syreadditionssalte ved fremgangsmåde D

Ethyl-7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-6-fluor--1,4-dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylat sus-20 penderes i 10 ml dimethylformamid, og til suspensionen sættes 0,53 g kaliumcarbonat. Blandingen holdes ved 60°C i 10 minutter under omrøring, og opløsningen tilsættes derpå 1,2 g ethyliodid. Blandingen omrøres i 2 timer ved 60-70°C. Reaktionsblandingen koncentreres til tørhed 25 under formindsket tryk, og remanensen tilsættes vand.

Der ekstraheres med chloroform, og chloroformekstrakten tørres over vandfrit kaliumcarbonat. Efter fjernelse af chloroform ved destillation omkrystalliseres det dannede bundfald fra en blanding af dichlormethan og 30 n-hexan, hvorved der fås 0,89 g ethyl-l-ethyl-6-fluor--l,4-dihydro-4-oxo-7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)--1,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 171-173°C.

En blanding af 0,8 g af den ovenfor beskrevne ethylester, 6 ml 10%'s natriumhydroxidopløsning og 2 ml ethanol op-35 varmes under tilbagesvaling i 3 timer. Der afkøles, og opløsningen indstilles på pH 7,0-7,5 med 10%'s eddike- -i

DK 153552 B

36 syre. Bundfaldet isoleres ved filtrering, vaskes med ethanol og omkrystalliseres af en blanding af dimethyl-formamid og ethanol, hvorved fås 0,57 g l-ethyl-6--fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthy-5 ridin-3-carboxylsyre.

Den således fremstillede carboxylsyre (0,2 g) opløses i 5%'s saltsyre, og opløsningen koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Remanensen krystalliseres fra vand, hvorved fås 0,21 g carboxylsyre-hydro-10 chlorid.

0,2 g af den ovenfor fremstillede fri carboxylsyre opløses i en 7%'s methansulfonsyreopløsning under opvarmning. Efter afkøling omkrystalliseres bundfaldet fra fortyndet methanol, hvorved fås 0,22 g 15 methansulfonsyresalt af carboxylsyren, smp. over 300°C

(sønderdeling).

Den fri carboxylsyre (1,0 g) opløses ved opvarmning i ethanol, og opløsningen tilsættes 1,0 ml eddikesyre. Blandingen afkøles, og de fremkomne krystaller 20 isoleres og omkrystalliseres af ethanol, hvorved fås 0,93 g eddikesyresalt af carboxylsyren, smp. 228-229°C.

Eksempel 15

Fremstilling af hydrochloridet af forbindelse 3 ved fremgangsmåde D

25 Analogt med den i eksempel 14 beskrevne fremgangs måde fremstilles 6-chlor-l-ethyl-l,4-dihydro-4-oxo-7--(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre-hydro-chlorid, smp. over 300°C, ud fra ethyl-6-chlor-7--(4-ethoxycarboxyl-l-piperazinyl)-1,4-dihydro-4-oxo-30 -1,8-naphthyridin-3-carboxylat.

Eksempel 16

Fremstilling af ethylesteren af forbindelse 1 ved fremgangsmåde D

Ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-7-(4-trifluor-35 acetyl-l-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylat behandles med ethyliodid og kaliumcarbonat i dimethyl-

DK 153552 B

37 formamid analogt med den i eksempel 14 beskrevne fremgangsmåde, hvorved fås ethyl-l-ethyl-6-fluor-l,4-di-hydro-4-oxo-7-(4-trifluoracetyl-l-piperazinyl)-1,8--naphthyridin-3-carboxylat. Dette produkt hydrolyse-5 res ved behandling med vandig kaliumcarbonat i en blanding af chloroform og methanol ved den i eksempel 4 beskrevne fremgangsmåde, hvorved fås ethyl-l-ethyl-6-fluor--1,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin--3-carboxylat.

10 Eksempel 17

Fremstilling af propyl- og butylestere af forbindelse 1 ved fremgangsmåde D

Analogt med den i eksempel 14 beskrevne fremgangsmåde fremstilles propyl-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro-4-15 -oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 133-135°C, og butyl-l-ethyl-6-fluor-1,4-dihydro--4-OXO-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 119-120°C.

Eksempel 18

20 Fremstilling af forbindelse 2 og dens syreadditionssalte ved fremgangsmåde E

2,27 g ethyl-1-(2-chlorethyl)-7-(4-ethoxycarboxy1--1-piperazinyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthy-ridin-3-carboxylat opløses i 15 ml ethanol ved opvarm-25 ning, og opløsningen tilsættes en opløsning af 0,84 g kaliumhydroxid i 15 ml ethanol. Den fremkomne opløsning opvarmes under tilbagesvaling i 2 timer under omrøring.

De fremkomne krystaller isoleres ved filtrering og vaskes med ethanol. Krystallerne opløses derpå i 20 ml 30 vand ved opvarmning, og opløsningen indstilles på pH

4-5 med 10%'s eddikesyre. De fremkomne krystaller isoleres ved filtrering, vaskes med ethanol og omkrystalliseres af en blanding af ethanol og chloroform, hvorved fås 1,74 g 7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazinyl)-6-fluor-35 -1,4-dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxyl- syre, smp. 246-248°C. 30 ml 5%'s natriumhydroxidopløs-

DK 153552B

38 ning sættes til 1,5 g 7-(4-ethoxycarbonyl-l-piperazi-nyl)-6-fluor-1,4-dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyri-din-3-carboxylsyre. Blandingen opvarmes til ^tilbage- ·. svaling i 5 timer under omrøring. Efter afkøling ind-5 stilles opløsningen på pH 7 med eddikesyre. Det dannede bundfald isoleres ved filtrering. Bundfaldet opløses i 10%'s vandig eddikesyre under opvarmning, og opløsningen indstilles på pH 9 med ammoniakopløsning.

Det dannede bundfald isoleres ved filtrering, hvorved 10 fås 0,98 g 6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)--1-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre.

Carboxylsyren (0,2 g) blandes med en lille mængde koncentreret saltsyre, og det dannede .hydrochlorid isoleres ved filtrering. Der omkrystalliseres fra 15 ethanol, hvorved fås 0,21 g hydrochloridsalt af carboxylsyren, smp. 290°C (sønderdeling).

Den ovenfor fremstillede fri carboxylsyre (0,2 g) opløses i 7%'s methansulfonsyreopløsning under opvarmning. Efter afkøling omkrystalliseres bundfaldet fra 20 fortyndet ethanol, hvorved fås 0,20 -g methansulfonsyre-salt af carboxylsyren, smp. 291-293°C (sønderdeling).

Eksempel 19

Fremstilling af forbindelse 4 ved fremgangsmåde E

Til en opløsning ved 90-95°C af 1,52 g kalium-25 carbonat i 40 ml ethanol sættes 4,0 g ethyl-7-(4-acetyl--1-piperazinyl)-6-chlor-l-(2-chlorethyl)-l,4-dihydro-4--oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylat, og blandingen opvarmes til tilbagesvaling i 1,5 time. Blandingen afkøles, og det dannede kalium-7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-6-chlor-30 -l,4-dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxy- lat isoleres og opløses i 30 ml vand og 20 ml 1 N natriumhydroxidopløsning. Blandingen opvarmes til tilbagesvaling i 2 timer og syrnes med eddikesyre, hvorefter der indstilles på pH 8 med ammoniakopløsning, og et bund-35 fald dannes. Bundfaldet opløses i fortyndet saltsyre, og der indstilles igen på pH 8 med ammoniakopløsning, hvor-

DK 153552B

39 ved fås 1,56 g 6-chlor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pipera-zinyl)-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp.

272-274°C.

Eksempel 20 5

Fremstilling af forbindelse 2 ved fremgangsmåde E

En suspension af 3,62 g ethyl-7-(4-acetyl-l-pipe-razinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-3-carboxylat og 2,76 g kaliumcarbonat i 100 ml dimethylformamid opvarmes ved 70-100°C i 30 minutter under omrøring. Til sus-pensionen sættes 2,71 g β-dimethylaminoethylchlorid--hydrochlorid og 3,45 g kaliumcarbonat. Efter opvarmning af den fremkomne blanding ved 100-110°C i 2 timer tilsættes blandingen yderligere 1,08 g β-dimethylamino- ethylchlorid-hydrochlorid og 2,76 g kaliumcarbonat.

15

Opvarmning ved samme temperatur fortsættes i 1 time.

Blandingen filtreres varm, og filtratet koncentreres til tørhed under formindsket tryk. Remanenskrystalierne omkrystalliseres fra ethylacetat, hvorved fås 3,87 g ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-1-(β-dimethylamino- 20 ethyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-3- -carbonat, smp. 163-165°C.

En opløsning af 1,0 g af det således fremstillede dimethylaminoderivat og 1 ml methiodid opvarmes til tilbagesvaling i 1 1/2 time. Blandingen koncentreres 25 til tørhed, og det dannede metnyliodid isoleres og omkrystalliseres af methanol, hvorved fås 1,3 g β—[7—(4— -acetyl-l-piperazinyl)-6-fluor-3-ethoxycarbonyl-l,4--dihydro-4-oxo-1,8-naphthyridin-l-yl]ethyltrimethyl-ammoniumiodid, smp. 252-255°C (sønderdeling).

Frisk fremstillet sølvoxid ud fra 849 mg sølvnitrat og 200 mg natriumhydroxid suspenderes i 50 ml vand. Suspensionen tilsættes 1,3 g af det overifor fremstillede ammoniumiodid, og blandingen omrøres kraftigt i 1 time og filtreres til fjernelse af det under 35 reaktionen dannede sølviodid. Filtratet koncentreres til

DK 153552B

40 tørhed under formindsket tryk, hvorved fås farveløse krystaller af β-[7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-6-fluor-3--ethoxycarbonyl-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyridin-l--yl]ethyltrimethylammoniumhydroxid, smp. ca. 240°C 5 (sønderdeling).

Ammoniumhydroxidet opvarmes uden yderligere rensning til 230-250°C under formindsket tryk på ca.

30 mm Hg. Produktet ekstraheres med chloroform. Ekstrakten vaskes med vand og tørres over magnesiumsulfat.

10 Chloroformen destilleres, og remanensen chromatogra- feres på silicagel med chloroform som opløsningsmiddel.

Fra hovedfraktionen isoleres et krystallinsk produkt, som derpå omkrystalliseres af ethylacetat, hvorved fås 530 mg ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-6-fluor-l,4-15 -dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxylat, smp. 213-215°C.

Den således fremstillede ester hydrolyseres ved den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde, hvorved fås 7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-6-fluor-l,4-dihydro-4-20 -oxo-1-viny1-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp.

264-266°C.

Endvidere hydrolyseres esteren og dens fri carboxylsyre hver for sig ved den i eksempel 2 beskrevne fremgangsmåde, hvorved fås 6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-25 -7-(1-piperazinyl)-1-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxyl- syre.

Eksempel 21

Fremstilling af hydrochloridet af forbindelse 1 ved fremgangsmåde F

30 Til en opløsning ved 0-3°C af 4 g ethyl-7-(4- -acetyl-l-piperazinyl)-6-amino-l-ethyl-l,4-dihydro-4--oxo-1,8-naphthyridin-3-carboxylat i 80 ml 1 N saltsyre sættes lidt efter lidt en opløsning af 1 g natriumnitrat i 12 ml vand under omrøring. Denne opløs-35 ning tilsættes 65%'s vandig hexafluorphosphorsyre, indtil fældningen af et diazoniumsalt er fuldstændig.

DK 153552 B

41

Bundfaldet isoleres og tørres fuldstændigt, vægt: 5,2 g.

4 g af dette diazoniumsalt suspenderes i 150 ml n-hep-tan, og suspensionen opvarmes ved 80-100°C i 15 minutter under omrøring. Det dannede bundfald isoleres og 5 blandes med vand. Den vandige blanding ekstraheres med chloroform. Ekstrakten tørres, og chloroformen destilleres. Den-faste remanens omkrystalliseres fra ethyl-acetat, hvorved fås 2,2 g ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazi-nyl) -l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-l, 8-naphthyri-10 din-3-carboxylat, smp. 195-197°C.

En blanding af 2 g ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazi-nyl) -l-ethyl-6-fluor-l, 4-dihydro-4-oxo-l, 8-naphthyri-din-3-carboxylat og 10 ml 20%'s saltsyre opvarmes til tilbagesvaling i 3,5 timer, og reaktionsblandingen til-15 sættes derpå 10 ml vand og 20 ml ethanol. Det dannede faste stof isoleres, opløses i 30 ml varmt vand, og opløsningen behandles med 0,5 g trækul og filtreres.

Filtratet tilsættes 2,5 ml koncentreret saltsyre, og blandingen afkøles i et isbad, hvorved fås 1,5 g 20 l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)- -1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre-hydrochlorid.

Eksempel 22

Fremstilling af ethylesteren af forbindelse 1 ved fremgangsmåde F

25 Ethyl-6-amino-l-ethyl-6-fluor-7-(4-trifluorace- ty1-1-piperazinyl)-1,4-dihydro-4-oxo-l,8-naphthyri-din-3-carboxylat underkastes Schiemann-reaktion ved den i eksempel 21 beskrevne fremgangsmåde, og produktet behandles med en base ved den i eksempel 4 beskrevne 30 fremgangsmåde, hvorved fås ethyl-l-ethyl-6-fluor-l,4- -dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin--3-carboxylat.

Eksempel 23

Fremstilling af forbindelse 2 ved fremgangsmåde F 35 Analogt med den i eksempel 21 beskrevne frem gangsmåde fremstilles 6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-

DK 153552 B

42 -piperazinyl)-1-vinyl-l,8-naphthyridin-3-carboxyl-syre ud fra ethyl-7-(4-acetyl-l-piperazinyl)-6-ami-no-1,4-dihydro-4-oxo-l-vinyl-l,8-naphthyridin-3--carboxylat.

5 Til brug ved bedømmelse af de her omhandlede, hidtil

ukendte 1,8-naphthyridinforbindelsers virkning fremstilles i det efterfølgende eksempel VII

en forbindelse, som ligger uden for opfindelsens omfang, og hvis fremstilling ikke hidtil har væ-10 ret beskrevet.

Eksempel VII

Fremstilling af en'referenceforbindelse med formlen 0

F..^ ... '1 COOH

15 |i ,! CHo-N )ϊ·" '" •Ν ' -N ' * J \ / » c2h5

Til en opløsning af 12 ml 37%'s formalin og 20 18 ml myresyre sættes 6,0 g l-ethyl-6-fluor-l,4-dihy- dro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, og blandingen opvarmes ved 120-125°C i 4 timer under omrøring. Blandingen koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk, og remanensen ind-25 stilles på pH 8 ved tilsætning af 7%*s vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning, hvorefter der ekstraheres med chloroform. Ekstrakten tørres, og opløsningsmidlet fordampes. Den krystallinske remanens omkrystalliseres af en blanding af dichlormethan og ethanol, hvorved fås 30 5,0 g l-ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-7-(4-methyl-1-pipera zinyl) -4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre, smp.

228-230°C.

Forbindelse 1 l-Ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-plpera-35 zinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 43

DK 153552 B

O

F.. . COOH

J I! i! HN -N/" X......C2H5

Forbindelse 1' l-Ethyl-6-fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-pipera- zinyl)-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre-methansulfonat

10 O

F ,. '1 ...COOH

' KS ^ Λ ^

li li · CH3S03H

' ... é v · ·

HN N N ' N

v·......... c2h 15 Δ 3

Forbindelse 2 6-Fluor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1--vinyl-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre

20 F-,. . J- . . · C00H

HN V ' N· N''' f i .__CH=CH2 25 Forbindelse 3 6-Chlor-l-ethyl-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl) -l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre-hydrochlorid

O

Cl. . ” COOH

'*·'-· · ' 9' 30 ! |j i| · HC1 HN Ν'" ' N- N-'· ’ i2H5 35

DK 153552B

44

Forbindelse 4 6-Chlor-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1--vinyl-1,8-naphthyridin-3-carboxylsyre 0

Cl ... '1 COOH

b ·. ,-'·' - . .

·' ^ ·' .. > .· * HN V ' ' "N·'·'' N" \__________· ch=ch2

10 Forbindelse A

l-Ethyl-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl)-1,8- -naphthyridin-3-carboxylsyre (undertiden betegnet_ 6-usubstitueret 1,8-naphthyridin) 0

15 ... Ϊ COOH

··*’ · · · 1 i! . :

HN N ' N N

AH5 2q (forbindelsen beskrevet i US-patentskrift nr. 4.017.622)

Forbindelse B

l-Ethyl-6-fluor-ly 4-dihydro-7-(4-methyl-l-pipe-razinyl)-4-oxo-l,8-naphthyridin-3-carboxylsyre

O

F " COOH

' / i i [ ! I! / A · · 'Λ

CHo-N N N- N

30 (forbindelsen fremstillet i Eksempel VII)

Forbindelse C

6-Chlor-l-ethyl-l,4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazinyl) guinolin-3-carboxylsyre 35 45 DK 1535528

O

Cl. /·. Λ -COOH

.--- J..>4 X-. } ' \ / V'' ' N-

5 HN N V

\____/ C2H5 (forbindelsen beskrevet i beskrivelsen til offentliggjort japansk patentansøgning nr. 65887/78)

Forbindelse D

10 l-Ethyl-6-fluor-l/4-dihydro-4-oxo-7-(1-piperazi- nyl)quinolin-3-carboxylsyre 0

F .. ^COOH

''*· ' * * · 15 1 II Ί

X \ · · . ' · N

HN N ’ , C0Hc —v Z o (forbindelsen beskrevet i belgisk patentskrift nr.

863.429)

20 Forbindelse E

1-Ethyl-l,4-dihydro-7-methyl-4-oxo-l,8-naphthyri-din-3-carboxylsyre (nalidixinsyre) (forbindelsen beskrevet i US-patentskrift nr. 3.149.104)

Forbindelse F

25 8-Ethyl-5,8-dihydro-5-oxo-2-(1-piperazinyl)-pyri- do[2/3-d]pyrimidin-6-carboxylsyre (pipemidinsyre) (forbindelsen beskrevet i US-patentskrift nr. 3.887.557)

Forbindelse G

g-(5-Indanyloxycarbonyl)benzylpenicillin-natrium-30 salt (Carindacillin) (forbindelsen beskrevet i US-patentskrift nr. 3.557.090)

Forbindelse H

D-g-Aminobenzylpenicillin (Ampicillin) (forbindelsen beskrevet i US-Patentskrift nr. 2.985.648)

35 Forbindelse J

7-(D-g-Åminophenylacetamido)desacetoxycephalospo-ransyre (Cephalexin) (forbindelsen beskrevet i US-patentskrift nr. 3.507.861) 46

DK 153552 B

Eksempel A

De minimale hæmningskoncentrationer (jig/ml) in vitro fremgår af den efterfølgende tabel I.

5 10 15 20 25 30 35

Tabel X

DK 153552B

47 X-.-.Tj-’k·8·*0 ar^Hbakterisl virkning' mod. 19 bakterisstsminpr___

BlkteilS-~--ΐθ££Ιη3θΐ3β l I· 2 3 4

Staphylococcus aureus r -o n ςί- on on 20 9P JC-1 °»7° l,J/C " φ

Staphylococcus aureus > , „ ,β 0 n /" r

No. 50774 £ °>?δ c>78 3,1-3 6,*5 6,*5 •rl M ~

Streptococcus faecalis ® ® , „ - 1ος ος ~ κ Ρ-ΡΛ73 12>5 l2>5 -5 25 - ——--— , g, -— -----------— -----—

Streptococcus pyogenes g£ , p r lp e 10 c -, P c c 65A u « ------ ei λ-------—----------—

Coryuebacterium 6 % & g pyogenes C-21 7 7__* ...._ ? _ 7

Escherichia coli NIHJ p n jC_p °>1 °,7b 0,a

Escherichia coli , Λ Λ_ „ *Q 0 Ί p_51cl 0,1 0,1 υ, 05 ',,39 0,1

Escherichia coli 0 19 0 1 P-i40a u>~

Salaoaella typhimurium C>1 0>1 0,05 0,39 0,2 -— -----—' M----------------------------

Salmonella enteritidis ® p , n , n 0- n 0 o

No, 1891 ______ U __? ___2i_

Shigella flexneri 2a ^ 0,2 C,2 0,1 0,78 0,2

Shigella Xlexiieri 4a p on a qo p n 1 a p ® Jjr V/,,, —Ϊ 20 a *rl

Klebsiella pneumoniae +J Λ r. ,-, n Ί ι a qo

Ho. 13 & C^;' 0,1 >5b “— ---------------<D '—------------

Enterobacter cloacae & ' 0 ~ „ Ί ~ ~p Λ -,

P-2.540 k 0,2 U^ »J 4,,/-- J

---------~--—--ftj-----------------------

Pawidom..« aeruginosa S 0, 39 0,39 0,2 6,25 1,56

Tsuchi jiaa _ 7 '_ 7 ______*______

Pseudomonas aeruginosa ^ -c Λ ~r ~ „η ς or ις/; Νθο 12 0,71 nb9 bjos 0» bo

Serratia marcescoas r „Q n ~Q Λ n -, Kc a 72 XFO 3736 O, py 0,J1 -L, bo 4 ,/e

Proteus norganii Kono 0,2 0,2 0,1 1,5δ 0,2

Proteus nirabilis a 00 0 a 0 -, -1 0 n 7c p-p.381___c,39[ o,39 I -,? 3,-, °,79

DK 153552B

48

Tabel I (fortsat).

--k B c S

?ct?fjc!r°CUS aUrøUS 25 1,56 c,78 0,39 loo —- : — — “ φ - - - - ! “ g^r°“ aUreUS a _J2_ J^_liK_0I7e_5C__

Streptocoo°us faecalis || >100 12fJ 6>„ 3)1: >a00

Streptococcus pyogenes |||“ 6 s _ >ac0 o 5a.___k td _ 7 1 ________

Corynebacterium 0 > pyogenes C-21________ __ 7 _7"_________

Escherichia coll NIHJ S>85 c,39 0,39 0,1 12,5

Escnerichla coli 3,13 0,2 0,?, 0,05 3,13 * J1 ^

Escherichia coli P_ i4ca Off-o ^j-··

Salmonelia typhiiaurium r nK Λ n „ Λς oio ^ Oj'> W'- v;j- 5 li-1-! kJc.^.i0^ej.is enter i minis fj ·, Kc o i o o nc o to ITOo 1D91 S ^5U-> l)1"!

Shigella fle>sieri 2a ^ €,?5 C, 39 0,39 0,1 6,25

Shigella flexneri 'ia c 3 0 ~ ~ -c ^ ^ r 0 p _ 3 3C > Cj/·-

-P

Klebsiella pneumoniae «5 Ί „ _ 0 OQ ^ 7o o o η,, e

No. 13 % °7-i9 ~7?° °7i- -J.L«-T·* — - . """Γ- n " “ I “T"‘r"nr^r" ~' Γ — "Il r* ρΐίΐί,"-330*01' cloacae I 6,25 0,39 0,2 0,1 6,25

Fseucionanas aeruginosa o fi c,39 200

Tsuchijxtaa __ ____7 7 _____7J________

Pseudomonas aeruginosa 25 3 13 3 13 0f7C 20C

i'J O e -i-£U

Serratia narcescens τ o r ·, Λ ,o n r-, £ nc IF0 373S · υ,.<, 0,4:0

Proteus morganii Kono 6,25 C,7S C, 39 0,1 6,25

Proteus mirabilis ot- ·,κ/· ~ οΩ A o P-2381 ?5 ^5° C’3^ °»Λ

DK 153552B

49

Tabel I (fortsat)__ 'Γ'Τ'Τ Γ——»——Forbindelse „ n Tjr , ’

Bakterier —___ F G ή J

Staphylococcus aureus , „ λ ~0 n r.c i cr 2C9P JC-1 12>5 °?39 °’Gj ^5o o 5taohylococcus aureus > οκ „ _c n C£

No„~ 50-77¾__ ί 25 c,7° 1»-,° P“3^73°COCCUS f“““‘ S 5 200 50- 1,56 200

Streptococcus pyogenes | ΐ aoc 0 , 0,025 O,70 °.5h........ ...... £ _ Λ ____-....... ......________ ______________-_________

Corynebacterium ρς o , ·,=,<; i =< pyogenes C-21__ ^ J*1' ^

Escherichia coli NIHJ , , nP r „ JC_P i,5o o,a5 o, 25 12,5

Escherichia coli 3 Kc c c Ρς 1P ς P~ 5-101 -*-f o 1 S‘j c-'j

Escherichia coli Ί vr r n ν,γλΓ.ο P-lACa jL-

Salmonella typ hi murium Kr A _ o n „Q /- oc- c;_g M f *- υ,3/ °)!v

•H

Salmonella enteritidis m „ „ r, AO „ 10

No. 1891_______ s -ί,5ο °»7c 0,e____3A3

Shigella flexneri 2a 3;13 10,5 3»13 12,5

Shigeiln flexneri 4a g i>56 S,?5 6,25 2.00

Sl.bei.lla pneumonia. g, 6,35 >200 ICC 6,25

Ho« 13 __________ <y ________________________________

W

Enterobacter cloacae i lc/- o i o so^a xon·^ P-2S40 1 >20^

Pseudomonas aeruginosa ώ 0 c r oc- Scoo m - *. . . J-w· O « op /cA'^

Tsuchijxma_______________ ____J T ______________________

Pseudomonas aeruginosa ocr ι~^, >,nnn

No. 12 ________ _____ _____ ' y _ IFO 3736________ 3’13 3’12___^ >2°°

Proteus norganii Kono 3,13 C, 7” ICC j>20C

P-236I _____3, -O '^7h 3?13 1^5

De i tabellen anførte tal angiver minimale hæmningskoncentrationer (MIC) (ug/ml). Metode: Chemotherapy, 22(6), 1126 (1974) .

DK 153552 B

50

Af de i tabel I anførte resultater fremgår følgende .

1) Forbindelse 1-4, specielt forbindelserne lf 1' og 2 udviser meget kraftig antibakteriel virkning 5 mod grampositive bakterier og gramnegative bakterier, herunder Pseudomonas aeruginosa.

2) Forbindelse A (6-usubstitueret 1,8-naphthyri-din) har meget svagere antibakteriel virkning mod grampositive bakterier og gramnegative bakterier end de 10 her omhandlede forbindelser.

Eksempel B

In vivo terapeutisk virkning

Forbindelse 1-4 og ethylesteren af forbindelse 1 og A-G opløses hver for sig i afioniseret vand eller 15 suspenderes i 0,2%'s vandig CMC-opløsning. Hver opløsning indgives oralt til mus, der er inficeret med hver testorganisme under de i det følgende beskrevne betingelser. Den fremkomne effektive gennemsnitsdosis (EDj-q) er anført i den efterfølgende tabel II.

20 Forsøgsbetingelser:

Mus:

Han-mus (stamme ddYl, vægt ca. 20 g Infektion: 1) Staphylococcus aureus nr. 50774.

25 Intravenøs infektion med 50-100 LDC~ 8 -3° (ca. 5 x 10 celler/mus) bakeriesuspension i saltopløsning.

2) Escherichia coli P-5101.

Intraperitoneal infektion med 50-100 LD,--.

6 30 (ca. 9 x 10 celler/mus) af en bakteriesus pension i trypto-sojasubstrat med 4% mucin.

3) Pseudomonas aeruginosa nr. 12,

Intraperitoneal Infektion med 50-100 LD^q (ca. 5 x 103 celler/mus) af en bakteriesus- 35 pension i trypto-sojasubstrat med 4% mucin.

DK 153552 B

51

Behandling:

To gange, ca. 5 minutter og 6 timer efter infektion.

Observation: 5 Staphylococcus aureus nr. 50774 i 14 dage

Escherichia coli P-5101 i 7 dage

Pseudomonas aeruginosa nr. 12 i 7 dage Tabel II

In vivo virkning mod systemiske infektioner i mus 10 Staphylococcus Escherichia Pseudomonas

Bakterie aureus coli aeruginosa nr. 50774 P-5101 nr. 12 1 ' I I II — ...... ! , . ‘ j {

Indgifts- , , , i metode oralt oralt oralt t- Forbindelse ; 1 I 10 1,8 9,0 1' j 10* 1,8* 9,0* 2 j 33,4 1,3 · 2,4 3 I ca. 90* 6,5* 58,6* · 20 4 jca. 100 4,8 18,5

Ethyl- ! ; ester af · j forb. 1 ca. 20 I - 21,0 A >100 - >200 25 B 4,8 1,2 10,6 C jca;. 100 ca. .15 >100 D 21,9 4,7 15,5 E >800 29,2 >200 F 215 21,2 99,5 ; 30 i G 10-40 100 201,6 I H 2,2 43,5 >400 i J i 12,1 22,6 >400 ' I i_,_.

35 Beregnet for fri carboxylsyre.

De i tabellen anførte tal viser ED^0 (mg/kg). .

ED,-0-værdierne er beregnet i overensstemmelse

DK 153552B

52 med Behrens-Kaerber-metoden (Arch. Exp. Path.

Pharm. 162, 480 (1931).

Af de i Tabel II anførte resultater kan drages følgende slutninger: 5 1) De her omhandlede forbindelser 1 og 1' har kraftig terapeutisk virkning på systemiske infektioner med grampositive og gramnegative bakterier.

2) Den terapeutiske virkning af forbindelse 2 mod infektioner med grampositive bakterier er ringere 10 end den terapeutiske virkning af forbindelse 1 eller 11, men den terapeutiske virkning mod infektioner med gramnegative bakterier er kraftigere. Den her omhandlede forbindelse 2 er således specielt anvendelig til behandling af systemisk infektion forårsaget af Pseu- 15 domonas aeruginosa.

3) Forbindelserne 1, 1' og 2 udviser kraftigere terapeutisk virkning mod systemisk infektion med gramnegative bakterier, specielt Pseudomonas aeruginosa, end forbindelserne A og C, forbindelserne E og F, som 20 er kommercielt tilgængelige syntetiske antibakteriel- le midler, og forbindelserne G, H og J, som er kommercielt tilgængelige antibiotica.

4) Forbindelserne 1 og 1' har tydeligt kraftigere terapeutisk virkning in vivo mod grampositive bakterier 25 end forbindelse D. Forbindelserne 1, 1' og 2 har tydeligt kraftigere terapeutisk virkning in vivo mod gramnegative bakterier, inklusive Pseudomonas aeruginosa, end forbindelse D.

5) Ethylesteren af forbindelse 1 er anvendelig 30 som intermediat til fremstillingen af forbindelserne 1 og 1'. Den har ligeledes fremragende antibakteriel virkning in vivo mod grampositive bakterier og gramnegative bakterier.

35

DK 153552B

53

Eksempel C

In vivo terapeutisk virkning

Forbindelserne 1 og 2 og forbindelse D testes ved den i det følgende beskrevne fremgangsmåde for 5 terapeutisk virkning mod tiltagende nyreinfektion med Pseudomonas aeruginosa nr. 12 i mus. De fremkomne resultater (ED^Q: mg/kg) er anført i den efterfølgende tabel III.

Forsøgsmetode: 10 Hunmus (stamme ddY-S) , som vejer 22·*·30 g, an æs teriseres ved intravenøs injektion af natriumpento-barbital i en dosis på 50 mg/kg. Gennem et lille supra-pubesindsnit frilægges urinblæren og inficeres derpå ved injektion af 0,1 ml af en 1:10.000 fortynding af 15 Pseudomonas aeruginosa nr. 12 dyrket i 20 timer i trypto-sojasuhstrat, under anvendelse af en 0,25 ml sprøjte med 0,25 mm nål. Musene afholdes fra drikkevand i en periode på fra 1 dag før til 1 dag efter infektionen og behandles to gange daglig i 3 dage startende 20 på infektionsdagen. På 5. dag efter Infektionen udtages nyrerne til påvisning af bakterierne, gennemskæres på tværs og knuses på King A agar, som inkuberes ved 37°C natten over. Hvis der Ikke findes bakterier i nyrerne, betragtes disse som værende beskyttet mod 25 tiltagende nyreinfektion. ED5Q-værdier beregnes ved sandsynlighedsanalyse.

Tabel III

In vivo virkning på tiltagende nyreinfektion med Pseudomonas aeruginosa nr .' 12 i mus._' _ 30 Forbindelse Indgiftsmetode ED^q (mg/kg 1 oralt 2,4 2 oralt 0,56 D oralt 16,1 35 Af de i tabel III anførte resultater fremgår det, at den terapeutiske virkning af forbindelserne 1 og 2

DK 153552 B

54 mod tiltagende nyreinfektion med Pseudomonas aeruginosa er klart bedre end virkningen af forbindelse D.

Eksempel D

Akut toksicitet 5 En opløsning indeholdende forbindelserne 1 til 4 og forbindelserne B til J i forskellige koncentrationer indgives oralt til hanmus (stamme: ddY) (4-8 dyr i hver gruppe) i en dosis på 0,1 ml pr. 10 g legemsvægt. De døde mus optælles efter 7 dage, og værdien 10 for den gennemsnitlige letale dosis (LD^0, mg/kg) beregnes i overensstemmelse med Behrens-Kaerber metoden. Resultaterne er anført i tabel IV.

Tabel IV

Akut toksicitet i mus 15 Forbindelse LD,-q (mg/kg) 1 >4000 1' >4000* 2 >4000 3 >2000* 20 4 >2000 B 210 C >2000 D >2000 E 1516 25 F >5000 G >4000 H >5000 J 3000 30 ^Beregnet for carboxylsyre

Af de i tabel IV anførte resultater fremgår følgende: 1) Forbindelserne 1 til 4 har yderst lav toksicitet.

35 2) Forbindelse B, som er fremkommet ved indføring af en methylgruppe i 4-stilling i 1-piperazinylgruppen i forbindelse 1, har lige så kraftig eller kraftigere

DK 153552 B

55 virkning end de her omhandlede forbindelser, som vist i tabel I og II, men har yderst høj toksicitet.

Eksempel E

Subakut toksicitet 5 Forbindelse 1 indgives oralt til 6 hunmus (stamme: LCL-LCR) med en gennemsnitslegemsvægt på 20 g i en dosis på 2 g/kg, 1 gang daglig i 14 dage.

I løbet af testperioden måles legemsvægten for hver mus. På den 15. dag undersøges musene hæmatologisk.

10 Efter den hæmatologiske undersøgelse aflives musene, organerne vejes og undersøges histopatologisk. Der fås følgende resultater: ledergruppe,; .sombar fået;;.ihdgivet .forbindelse 1, konstateres ingen abnormitet med hensyn·.>.til legems-15 vægt, hæmatologisk undersøgelse og histopatologisk observation i modsætning til en kontrolgruppe. Dette demonstrerer den store sikkerhed for forbindelse 1.

Eksempel F

Plasmakancehtration 20 To Beagle hanhunde, som hver især vejer 12 kg, indgives hver .især. oralt en 'kapsel indeholdende én af forbindelserne 1 eller :2 i en dosis på 25 mg/kg ru med 200 ml mælk. Der tages blodprøver fra de to hunde ved venepunktur 0,5, 1, 2, 3, 5, 8 og 10 timer efter 25 indgift, og blodprøverne centrifugeres til fraskillelse af plasma.

Koncentrationen af aktivt stof bestemmes ved tyndtlagshulplademetoden under anvendelse af Escherichia coli Kp som indikatororganisme.

30 De fremkomne resultater er anført i den efter følgende tabel V.

Tabel V

Plasmakoncentration

Tid efter indgift (timer) 35 Forbindelse 0,5 1 2 3^ (5 8_ 10 1 0,6 2,4 5,5 5,9 4,2 3,7 2,4 2 nd nd 1,52,85,55,24,4

DK 153552 B

56

Tallene i tabel V angiver plasmakoncentrationen (jig/ml) . nd = ikke påviselig.

Af de i tabel V anførte resultater fremgår følgende .

5 1) Forbindelserne 1 og 2 absorberes udmærket i legemet ved oral indgift og bibeholdes i høj koncentration i plasma i ret lang tid.

Især udviser forbindelse 1 en højere plasmakoncentration end MIC-værdierne (se tabel I) mod de fle-10 ste bakterier i et tidsrum på 1-10 timer efter indgift. Forbindelse 2 udviser samme plasmakoncentration i et tidsrum på mindst 2 timer og endog mere end 10 timer efter indgift. F.eks. er plasmakoncentrationen (579 pg/ml) for forbindelse 1 ca. 8 gange højere end 15 MIC-værdierne mod Pseudomonas aeruginosa nr. 12 og

Staphylococcus aureus nr. 50774 og ca. 60 gange MIC-værdien mod Escherichia coli P-5101.

2) Forbindelse 1 og 2, som udviser høje plasmakoncentrationer og kraftig antibakteriel virk-20 ning, giver fremragende resultater ved lave doser i behandlingen af systemiske infektioner forårsaget af forskellige bakterier.

Eksempel G

Urinudskillelse 25 Urin afgivet af de i eksempel F anvendte hunde i løbet af 24 timer, opsamles, og indholdet af forbindelse 1 eller 2 I den opsamlede urin bestemmes ved den i eksempel F anvendte metode. Resultaterne er anført i den efterfølgende tabel VI.

30 Tabel VI

Urinudskillelse

Koncentration

Forbindelse (uq/ml) Genvinding (%).

1 606 40,7 35 2 326 29,4

DK 153552 B

57

Af de i ovenstående '.tabel VI anførte resultater fremgår følgende: 1) Urinudskillelsen for forbindelserne 1 og 2 er ret god, og ca. 30-40% af de oralt indgivne forbin-5 delser er udskilt i urinen 24 timer senere.

2) Urinkoncentrationerne (326-606 jig/ml) for forbindelserne 1 og 2 udgør ca. 13-6.000 gange MlC-værdi-erne (0,1-25 jig/ml) mod forskellige bakterier som vist i tabel I.

10 3)De her omhandlede forbindelser 1 og 2 udviser således fremragende virkning ved lave doser i behandlingen af urinvejsinfektion forårsaget af forskellige bakterier.

Som det fremgår af tabel I-VI udviser de her om-15 handlede forbindelser, specielt forbindelserne 1, 1' og 2, fremragende terapeutisk virkning på de eksperimentelle Infektioner med grampositive og gramnegative bakterier, og efter oral indgift bibeholder de høje plasma- og urinkoncentrationer i forholdsvis lang tid.

20 Endvidere har de lav toksicitet. Disse forbindelser er således effektive i lave doser ved behandling af urinvejsinfektioner og systemiske Infektioner forårsaget af forskellige bakterier.

I modsætning hertil er forbindelserne A og C 25 klart ringere i in vitro og in vivo antibakteriel virkning mod grampositive og gramnegative bakterier, hvilket fremgår af tabel I og II.

Forbindelse D er klart ringere end forbindelserne 1, 1' og 2 1 terapeutisk virkning (se tabel III) 30 på tiltagende nyreinfektion med Pseudomonas aeruginosa.

Nalidixinsyre (forbindelse EJ. og pipemidinsyre (forbindelse Fj, som er kommercielt tilgængelige syntetiske antibakterlelle midler, og Carindacillin (forbindelse GJ, Ampicillin (forbindelse H) og Cepha-35 lexi'n (forbindelse jj, som er kommercielt tilgængelige antibiotika, har tydeligt ringere terapeutisk virkning (se tabel IIJ in vivo mod gramnegative bakterier, spe^ 58

DK 153552 B

cielt Pseudomonas aeruginosa end de her omhandlede forbindelser 1, 1* og 2.

Eksempel H

Forbindelse 1 eller 2 250 g 5 Stivelse 50 g

Lactose 35 g

Talkum 15 g

Ovenstående bestanddele blandes, granuleres og fyldes i 1.000 kapsler ved konventionelle metoder.

10 Eksempel J

Forbindelse 1 eller 2 250 g

Stivelse 54 g

Calciumcarboxymethylcellulose 40 g

Mikrokrystallinsk cellulose 50 g 15 Magnesiumstearat 6 g

Ovenstående bestanddele blandes, granuleres og formuleres i tabletter ved i og for sig kendt metode.

Der fremstilles således 1000 tabletter, som hver især vejer 400 mg.

20 25 30 35

Claims (5)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af en 1,8--naphthyridinforbindeIse med formlen 5

0. XJ . '.V COORZ _ ! II il (I) HN Ν'"" N"

10 V,./ έ1 hvor X er et halogenatom, R er en ethyl- eller en vinylgruppe, 2 15 og R er et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-6 carbon-atomer, eller et ikke-toksisk, farmaceutisk acceptabelt salt deraf, kendetegnet ved, at A) en forbindelse med formlen 20 0 4- X .. .R4 * * (a) HN N~ N N- -------R1 25 1 4" hvor X og R har den ovenfor anførte betydning, og R er en alkoxycarbonylgruppe med 1-6 carbonatomer eller gruppen 4 » 4' R , hvor R er en cyanogruppe, en amidmogruppe, en carba-30 moylgruppe eller gruppen ,-NH -c' N *S Ό-lavere alkyl, 35 hydrolyseres til dannelse af en forbindelse med formlen O DK 153552B O X.. . " COOH r. .-· (I-A) .·-· ^ HN '1ST' ' N- N 5 R1 hvor X og R1 har den ovenfor anførte betydning, eller ' " B) beskyttelsesgruppen fjernes fra en forbindelse 1Q med formlen 0 4 x ·. " R " · ’ ’ ·" (b) • - ·

15 R1'-n’ N- ^ N ' -N' . ./ k1 i 31 hvor X og R har den ovenfor anførte betydning, R er en 4 beskyttelsesgruppe, og R er en carboxylgruppe, en 41 20 alkoxygruppe med 1-6 carbonatomer eller gruppen R , som 4 har den ovenfor anførte betydning, hvorefter - når R er 4 ’ gruppen R - reaktionsproduktet eventuelt hydrolyseres, eller C) en forbindelse med formlen 25 0 4 X- . · . R (c) '^' · · ! · ί . « » il * ·. ,A · Y N"' -N R1 30 hvor Y er et halogenatom, en lavere alkoxygruppe, en lavere alkylthiogruppe, en lavere alkylsulfinylgruppe, en lavere alkylsulfonylgruppe, en lavere alkylsulfonyl-oxygruppe eller en arylsulfonyloxygruppe, og X, R"*- og R^ har de ovenfor anførte betydninger, omsættes med en 35 forbindelse med formlen /--V· R -N &H (d) O DK 153552 B 3 31 3« hvor R er et hydrogenatom eller gruppen R , hvor R har den ovenfor anførte betydning, hvorefter - når R4 41 er gruppen R - reaktionsproduktet hydrolyseres, eller - når R er gruppen R - beskyttelsesgruppen 5 fjernes fra reaktionsproduktet, eller Di en forbindelse med formlen 0 4 v ..-χ ...-R ί !ί i (e) 10 . ,------- J... > R -N N - '"NX N^' ' \ I H hvor X, R"^ og R4 har de ovenfor anførte betydninger, omsættes med et ethyleringsmiddel, hvorefter - når R4 15 41 er gruppen R - reaktionsproduktet hydrolyseres, eller 3 31 - når R er gruppen R - beskyttelsesgruppen f jieknes fra reaktionsproduktet til dannelse af en forbindelse med formlen 0 2

20 X .· " COOR (I-B) , \ -· *. HN N"' Ν'" N- c2h5 25 2 hvor X og R har den ovenfor .anførte betydning, eller E) en forbindelse med formlen 0 4 X ... " R : ,i <f> 30 . * ' ·-. .. i R -N Ν' 'N N- . . ch-ch9 Ί '2* Z Z^ 3 4 hvor X, R og R har de ovenfor anførte betydninger, og 35 i 2 Z og Z er forskellige og hver for sig betyder et hydrogenatom, et halogenatom, en lavere alkoxygruppe, en benzyloxygruppe, en alkoholisk hydroxygruppe eller et derivat deraf, eller gruppen kan danne en tertiær O DK 153552B eller kvaternær amin sammen med resten, forudsat 1 2 at Z eller Z altid er et hydrogenatom, opvarmes, 4 41 hvorefter - når R betyder gruppen R , reaktionspro- 3 duktet hydrolyseres, eller - når R betyder gruppen o«

5 R - beskyttelsesgruppen fjernes fra reaktionsproduktet til dannelse af en forbindelse med formlen X ° 2 . I! COOR d-c) I II II 10 · ™ Nd \ / CH=CH„ - · M 2 hvor X og R har den ovenfor anførte betydning, eller F) en forbindelse med formlen

15 A0 N2® ° R4 \ ^ <9> _ ] |[ II 3 y \ ^ R -N N \ / R 20 --- hvor er en aniongruppe, herunder et halogenatom, og 13 4 R , R og R har de ovenfor angivne betydninger, spaltes, 4 4' hvorefter - når R betyder gruppen R , reaktionsproduk- 3 31 tet hydrolyseres, eller - når R betyder gruppen R 25 beskyttelsesgruppen fjernes fra reaktionsproduktet, hvorefter den fremkomne forbindelse eventuelt omdannes til et ikke-toksisk, farmaceutisk acceptabelt salt deraf.

2. Fremgangsmåde ifølge krav ID), kendetegnet ved, at en forbindelse med formlen 30 O / COOC2H5 .. /-\ I il 'I R3 -N \___/ H 35 3" hvor R er en acylgruppe, omsættes med et ethyleringsmiddel, hvorpå reaktionsproduktet hydrolyseres til dannelse af en forbindelse med formlen DK 153552B O F,. .. " ,COOH > / >· » L II i HN Ν' "•Ν''' N-^ ς \ / · --7 C2H5 hvorpå forbindelsen eventuelt omdannes til et ikke-toksisk, farmaceutisk syreadditionssalt deraf.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 E) , kende-10 tegnet ved, at en forbindelse med formlen 0 F. .. ; COOH i II i o 11 · · · R -N N- -N^· N'-' 15 ' ________ CH2-CH2-halogen 3" hvor R har den ovenfor anførte betydning, opvarmes, 3" og gruppen R i reaktionsproduktet eventuelt hydrolyseres til dannelse af en forbindelse med formlen 20 0 F. , V .COOH \ • ,· « '-mr t , t ·-. i ’ il HN Ν''''" ''':-N-N·'''* CH=CH0 25 ^ og denne omdannes til et ikke-toksisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af et syreadditionssalt af en forbindelse med formlen 30

0. F. , .COOR • '· ‘ · ; .i t ^ ^ HN N · '' ‘ "Ν' '' N · / i -i 35 ·.___/ Rx 1 2 hvor R og R har de ovenfor anførte betydninger, DK 153552 B kendetegnet ved, at den ovenfor anførte forbindelse omsættes med en syre.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ved, at syren er saltsyre eller methansulfonsyre. 5 10 15 20 25 30 35