DK153402B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 3-(2-methoxy-phenoxy)-3-methyl-benzo-2,4-dioxacyklohexanon - Google Patents

Description

: DK 153402 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogi fremgangsmåde til fremstilling af den hidtil ukendte forbindelse 3-(2-methoxy-phenoxy)-3-methyl-benzo-2,4-dioxacyklohexanon med formlen cx^jp CH3 OCH3

Denne forbindelse udviser bemærkelsesværdige farmakologiske 5 egenskaber. Eksempelvis har den en antitussiv virkning, der er højere end codeins antitussive virkning, en antiinflamma-torisk virkning, som praktisk taget er den samme som den, der udvises af acetylsalicylsyre, og en antipyretisk virkning, som kun er en smule mindre end den, der udvises af 10 acetylsalicylsyre. Disse gunstige egenskaber i forbindelse med fuldstændig fravær af nogen som helst gastrolæsiv virkning og en næsten negligerbar toksicitet (såvel akut, sub-akut som kronisk) forårsager, at denne forbindelse tåles fortrinligt i maveregionen og følgelig navnlig er egnet 15 til oral og rektal administration.

Forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen, der for kortheds skyld i det følgende omtales som MR 693, fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, der er ejendommelig ved, at chloridet af acetylsalicylsyre, guaiacol og pyridin i det mo-20 lære forhold 1:1:1 omsættes i et indifferemt organisk opløsningsmiddel, såsom eksempelvis methylenchlorid.

Det følgende eksempel illustrerer nærmere fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

2

DK 153402B

Eksempel a) Chloridet af acetylsalicylsyre blev fremstillet ved kogning i 3 timer af syren og thionylchlorid, afdampning af overskuddet af thionylchlorid og destillation af den opnåe- 5 de rest under vakuum (150°C/30 mm Hg). Det opnåede udbytte androg 50-70% af det teoretiske udbytte.

Det opnåede chlorid blev holdt ved 0-4 C i 18 timer.

b) En opløsning af 709 g (3,57 mol) af det som anført under a) opnåede chlorid af acetylsalicylsyre i 685 ml methylen= 10 chlorid blev tilsat 442 g (3,57 mol) guaiacol. Den resulterende blanding blev kølet udefra ved hjælp af et vandbad, hvorpå 282 g (3,57 mol) pyridin blev tilsat dråbevis under opretholdelse af reaktionstemperaturen ved 20-25°C. Efter afsluttet tilsætning blev omrøring fortsat i yderligere ca.

15 1 time, hvorpå blandingen blev henstillet i 16 timer.

Blandingen blev vasket flere gange med vand, den organiske fase blev tørret over vandfrit natriumsulfat, og den blev til slut inddampet under formindsket tryk. Den opnåede gule rest krystalliserede langsomt. Den blev efter 48 timer optaget i en ringe mængde ethanol, hvorpå den resulterende 20 blanding blev filtreret, og de opnåede krystaller blev vasket. Efter krystallisation fra ethanol opnåedes 291 g af forbindelsen med formlen I, der smelter ved 70-74°C.

Grundstofanalysen er i overensstemmelse med den formodede strukturformel, der også er blevet bekræftet ved hjælp af 25 krystallografiske undersøgelser: MR 693 (empirisk formel C16H14°5 ; molekylvægt = 286,29) krystalliserer i det orthorhombiske system, rumgruppe Pbca.

Celleparametrene er: a = 9,968(3), b = 23,808(4), c = 11,668(2)Å; Y = 2769(2)Å^. De er blevet bestemt ved hjælp 2

DK 153402B

3 af en kvadrat-minimumsanalyse af sin φ-værdierne for 50 reflekser. Målingerne er blevet udført ved hjælp af et automatisk diffraktometer CAD4 (Nonius) ved anvendelse af Mo Κα-strålingen (λ = 0,71069 Å) med grafitmonokromator.

3 5 Massefylden, beregnet for 8 molekyler i cellen, er 1,373 g/cm , og den eksperimentelle værdi (ved flotation i I^Hgl^-oplØs-ning) er 1,370 g/cm^.

Yed anvendelse af det samme diffraktometer og under anvendelse af ω-skanningteknikken ved variabel hastighed er 10 2377 intensiteter blevet målt på en tilnærmelsesvis sfærisk krystal (diameter på ca. 0,28 mm). Den periodiske kontrol af tre standardintensiteter har ikke vist nogen forringelse af krystallen. Dataene er blevet korrelleret med Lorentz-og polarisationsfaktorerne. Ingen absorptionskorrektion har 15 været nødvendig [μ (Mo Ka) = 1,1 cm^] .

Strukturen (se den tilhørende tegning) er blevet fastslået ved hjælp af direkte metoder. Den endelige fastlæggelse af 247 parametre (skalafaktor, sekundær ekstinktionskoefficient, koordinater og termiske anisotrope faktorer for 16 C og 20 50, koordinater og isotrope B-faktorer for 14 H) er blevet foretaget ved hjælp af efterfølgende cykler af komplette matrix-kvadratminima på basis af 2055 reflekser med positiv intensitet. Den minimerede mængde har været Σ w (F0~FC)^ med vægte w = 4PQ^/a^ (Fo) ^.

25 Slutvariansindekset R = (Σ|i Fo | - I Fc || /Σ | Fo | ) er 0,069, beregnet på grundlag af de 2055 reflekser, der blev benyttet

ved fastlæggelsen. Vægtindekset R er 0,036 [for de 1662 2 2 W

reflekser med F > aF ) er værdier af R og Rw henholdsvis 0,048 og 0,035]. De farmakologiske og toksikologiske egen-50 skaber af MR 693 er anført i det følgende.

4

DK 153402B

Pharmakokinetik og metabolisme

Undersøgelser er blevet foretaget såvel in vitro som in vivo. Forsøgene in vitro har vist, at forbindelsen MR 693 hydrolyseres enzymatisk til dannelse af acetylsalicylsyre og guaia-5 col. De organer, der udviste den højste esteraseaktivitet, viste sig at være lungerne og nyrerne. Eftersom MR 693 ikke indeholder nogen ioniserbar funktionel gruppe, er den meget lipofil, og man kan med rimelighed antage, at den passerer meget let gennem tarmepitelet.

1Q Forsøgene in vivo har bekræftet, at forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen, der absorberes som sådan for størstedelens vedkommende efter oral administration, hydrolyseres til dannelse af acetylsalicylsyre, salicylsyre og guaiacol. Salicylsyren og dens acetylderivat kommer ind i kredsløbet og ud-15 sondres ad urinvejene.

Guaiacol absorberes derimod hovedsagelig ad den præsystemiske vej. Den kommer ind i lungerne via de lymfatiske kar og fjernes ad respiratorisk vej.

Koncentrationerne af salicylsyre og acetylsalicylsyre, der 20 viser sig i lungerne efter administration af MR 693, har vist sig at være højere end de koncentrationer, der iagttages i plasmaet og i leveren. Det må derfor antages, at guaiacols udtalte pulmonare tropisme også medfører en relativt bedre pulmonar tropisme af salicylaterne.

25 Antitussiv virkning

Forsøg er blevet udført med marsvin ved anvendelse af den metode, ved hvilken hoste fremkaldes med citronsyreaerosol. Effektiviteten af MR 693 er blevet undersøgt ved administration af forbindelsen ad oral og intraperitoneal vej og an-30 vendelse af codein som sammenligningsforbindelse, dvs. et velkendt og almindeligt benyttet antitussivt middel.

DK 153402 B

5

Udfra de opnåede resultater, der er anført i den efterfølgende tabel 1, kan følgende udledes: - oral_administration

Ved den afprøvede dosis på 500 mg/kg forårsager MR 693 en 5 betydelig formindskelse i forhold til kontrol.grupperne med hensyn til antallet af hosteanfald. Denne virkning er bedre end den virkning, som en oral dosis på 25 mg/kg af codein udviser under de samme betingelser.

- intrageritoneal_administration 10 MR 693 udviser også en fortrinlig virkning, når den administreres ad denne vej. Ved en dosis på 100 mg/kg er en 100% reduktion i forhold til kontrolgrupperne med hensyn til antallet af hosteanfald blevet iagttaget, medens codein ved en dosis på 12,5 mg/kg, også administreret ad intra-15 peritoneal vej, har forårsaget en reduktion på 93%.

TABEL 1

Forsøg med hoste hos marsvin fremkaldt ved hjælp af citronsyreaerosol: Antitussiv virkning af MR 693 og codein

Forbindelse Dosis Administrations- % Xnhibering 20 (mg/kg) vej af hosteanfald MR 693 500 os 84,3 100 i.p. 100,0

Codein 25 os 76,7 12,5 i.p. 93,7 25 Gastrolæsiv virkning MR 693 og acetylsalicylsyre som sammenligningsforbindelse blev administreret ad oral vej til rotter, der havde fastet i mindst 18 timer.

6

DK 153402B

Efter 6 timer fra forsøgets begyndelse blev rotterne dræbt, og mavesækkene^-blev åbnet og undersøgt med henblik på verifikation af tilstedeværelsen af læsioner i maveslimhinden.

De. opnåede resultater, udtrykt som den gennemsnitlige dia-5 meter (i mm) af læsionerne, er anført i den efterfølgende tabel 2. De viser tydeligt, at forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen i modsætning til acetylsalicylsyre tåles fortrinligt i maveregionen.

TABEL 2 10 Gastrolæsiv virkning af MR 693 og acetylsalicylsyre på rotter efter oral administration

Forbindelse Dosis Gennemsnitlig diameter af (mg/kg os) af læsioner (mm)

Kontrol- I

15 grupper - 0,1+0,1 j MR 693 100 0 ' 400 0 i ;

Acetylsali= . ' ! cylsyre 250x 3,7 i 0,8 j _i 20 * Ækvimolære doser.

Antiinflammatorisk virkning

De antiinflamma tori ske egenskaber af MR 693 er blevet undere-søgt ved hjælp af forsøg med carrageenininduceret ødem hos rotter ved administration af forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen 25 ad oral vej og anvendelse af acetylsalicylsyre som sammen ligningsforbindelse i ækvimolære doser.

De opnåede resultater viser tydeligt, at MR 693 bevirker en betydelig ødemreduktion, og at denne reduktion er praktisk taget af samme størrelse som den, der opnås med sammenlig-30 ningsforbindelsen. Disse resultater er anført i den efter- 7

DK 153402B

følgende tabel 3.

TABEL 3

Forsøg med carrageenininduceret ødem hos rotter: Antiinflam-matorisk virkning af ækvimolære doser af MR 693 og acetyl-5 salicylsyre

Forbindelse Dosis (mg/kg os) % ødeminhibering MR 693 400 30

Acetylsalicylsyre 250 33 10 Antipyretisk virkning

Denne virkning er blevet undersøgt ved hjælp af forsøget med gærfremkaldt hypertermi hos rotter, idet acetylsalicylsyre atter anvendes som sammenligningsforbindelse, og for= bindeiserne administreres i ækvimolære doser.

15 De opnåede resultater, der er anført i den efterfølgende tabel 4, viser, at MR 693 udviser en betydelig antipyretisk virkning, der kun er en smule mindre end den, der udvises af acetylsalicylsyre.

TABEL 4 20 Forsøg med gærfremkaldt hypertermi hos rotter: Antipyretisk virkning af ækvimolære doser af MR 693 og acetylsalicylsyre

Forbindelse Dosis (mg/kg os) % inhibering MR 693 400 86

Acetylsali- 25 cylsyre 250 103

DK 153402B

8

Toksicitet Akut toksicitet

Forsøg med akut toksicitet er blevet udført med mus og rotter ved administration af forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen ad oral 5 og intraperitoneal vej. Som det fremgår af de i nedenstående tabel 5 anførte resultater, kan MR 693 betragtes som en meget lidt toksisk forbindelse.

TABEL 5

Akut toksicitet af MR 693 overfor mus og rotter 10 Dyreart Administrationsvej DL50 m9/kg

Mus os >3000

Rotte os >3000 i.p. 1750

Subakut toksicitet 15 Undersøgelser vedrørende subakut toksicitet er blevet ud ført på rotter og hunde ved administration af MR 693 ad oral vej i 4 på hinanden følgende uger.

De parametre, som er taget i betragtning, er følgende: - opføssel 20 - dødelighed - vægtforøgelse - hæmatologiske data hæmatokemiske data - glycosuri, proteinuri, albuminuri og hæmoturi .25 - obduktiv undersøgelse - vægt af de væsentligste organer - histologisk undersøgelse af de væsentligste organer; men i intet tilfælde har der nogensinde været tegn på

; DK 153402B

£f£“ 9 ændringer eller misdannelser, der må tilskrives behandlingen med forbindelsen fremstillet ifølge opfindelsen.

Kronisk toksicitet

Undersøgelser vedrørende kronisk toksicitet er blevet udført 5 med rotter, som ad oral vej blev indgivet MR 693 i 24 på hinanden følgende uger, og med hunde, der ad oral og rektal vej blev indgivet foibindelsen fremstillet ifølge opfindelsen, også i 24 uger.

De parametre, som har været taget i betragtning er som følger: - generelle betingelser 10 - opførsel - dødelighed - hæmatisk krise - biokemisk blodundersøgelse - glycosuri, proteinuri, hæmaturi, albuminuri 15 - obduktiv undersøgelse - vægt og histologisk kontrol af de væsentligste organer, men ingen ændringer eller særlig signifikante anatomiskpatologiske tilstande har nogensinde været påvist. Endvidere viste undersøgelsen af mave-tarmkanalen ikke nogen æn-20 dring af slimhinden.

Teratogenese

Teratogeneseundersøgelser har været udført med rotter og kaniner, som ad oral vej var blevet behandlet med MR 693 under hele graviditetsperioden.

25 Undersøgelsen af: - antallet af gravide hunner - antallet af døde hunner - begyndelseslegemsvægt/slutlegemsvægt (af mødrene)

DK 153402 B

10 samlet antal fostre gennemsnitligt antal levende fostre - samlet antal døde fostre - samlet antal re-absorptioner 5 - gennemsnitlig vægt af levende fostre - eventuelle misdannelser har vist, at behandlingen med MR 693 ikke har forårsagen nogen ændring. I virkeligheden er der hverken blevet iagttaget somatiske eller skeletale misdannelser, ligesom der 10 ikke er blevet iagttaget nogen ændring i antallet af levende kuld.

Farmaceutiske' præparater

Forbindelsen fremstillet ifølgeiopfindelseonkan administreres ad oral·?, eller rektal vej, og den kan inkorporeres i forskellige 15 farmaceutiske præparater, såsom eksempelvis: tabletter og kapsler indeholdende 0,5 g af den aktive bestanddel, 5,0% og 3,3% (vægt%) suspensioner, suppositorier indeholdende 1,2 og 0,5 g af den aktive be·^-standdel.

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af 3-(2-methoxy-phe-5 noxy)“3-methy1-benzo-2,4-dioxacyklohexanon med formlen øX f) 10 ch3 och3 kendetegnet ved, at chloridet af acetylsalicylsyre med formlen 15 v^s^COCl O OCOCH3 guaiacol og pyridin omsættes i det molære forhold 1:1:1 i nær-20 værelse af et indifferent organisk opløsningsmiddel.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det indifferente organiske opløsningsmiddel er methylen-chlorid. 25 30 35