DK142058B - Fremgangsmåde til fremstilling af 17-spirosultiner. - Google Patents

Description

(11) FREMLÆGGELSESSKRIFT 1^2058 DANMARK (51) lnt Cl·3 c 07 J 33/00 É(21) Ansøgning nr. 47^3/77 (22) Indleveret den 26. Okt. 1977 (23) Løbedag 26· Okt. 1977 (44) Ansøgningen fremlagt og o o fremlseggeleesekriftet offentliggjort den 1 8 · &Ug. T 9 80

DIREKTORATET FOR

PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Prioritet begæret fra den

27. okt. 19764 7632334, FR

(71) R0U5SEL-UCLAF S.A., 35* Boulevard des Invalides, 73007 Paris, FR.

(72) Opfinder: Vesperto Torelll, 5, rue de la Convention, 947ΟΟ Malsons-Alfort, FR: Daniel "Philibert, 1β, rue Chevalier, 94210 La Varenne Salnt-Hllalre, FR.

(74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Patentagentfirmaet Magnus Jensens Eftf._- _ . . r (64) Fremgangsmåde til fremstilling af 17-spirosultiner.

Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 17-epirosultiner med den i kravets indledning angivne almene formel I.

R1 betegner fortrinsvis methyl eller ethyl.

Disse forbindelser eksisterer i form af to dlastereolsomere med hensyn til svovlatomet, og de kan eventuelt skilles fra hinanden og skal betegnes isomer A og isomer B, idet ifølge vedtægt isomer A er den isomer, hvis smeltepunkt er højest.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del anførte.

K betegner fortrinsvis en oyklisk alkylketalgruppe med 2-4 oarbonatomer og navnlig ethylenketal eller propylenketal eller også en dialkylketal, f.eks. dimethyl- eller diethylketal, 2 142058

Det benyttede trimethylsulfoniumhalogenid er fortrinsvis trimethylsulfoniumbromid eller -iodid.

Det alkaliske middel er fortrinsvis natriumethylat.

Midlet til sur hydrolyse, som er i stand til at hydrolysere ketalgruppen og at isomerisere A^'^’^'^-dobbeltbindingssystemet til et Δ* -system, er fortrinsvis en mineralsyre såsom saltsyre eller svovlsyre i en lavmolekylær alkanol eller perchlorsyre i eddikesyre eller en sulfonsyre som p-toluensulfonsyre.

Midlet til dannelse af sultin er fortrinsvis N-chlorsuccin- imid.

Til adskillelse af de forskellige isomere, som fås tinder iværksættelsen af fremgangsmåden, benytter man de klassiske skillemetoder, f.eks. chromatografi, således som det er angivet nedenfor i den eksperimentelle del.

I en foretrukken udførelsesform gælder: - E betegner en ethylenketalgruppe, - Det benyttede trimethylsulfoniumhalogenid er trimethyl-sulfoniumiodid, og det alkaliske middel er natriumethylat.

- Midlet til sur hydrolyse, som er i stand til at hydrolysere ketalgruppen og at isomerisere dobbeltbindingssystemet, er perchlorsyre i eddikesyre.

- Midlet til cyklisering til spirosultin er N-chlorsuccin- imid.

Forbindelserne med formlen II, der benyttes som udgangsprodukter, er i almindelighed kendte og kan fremstilles efter den fremgangsmåde, som er angivet i fransk patentskrift 1.336.083» og som består i at underkaste en forbindelse med formlen

Z

hvor Z betegner en ketalgruppe, indvirkning af et oxidationsmiddel til opnåelse af den ønskede forbindelse.

Forbindelserne med formlen I har interessante farmakologiske 142058 egenskaber, især en bemærkelsesværdig progestomimetisk virkning .«SiSt en antialdosteronvirkning.

De kan således især benyttes til behandling af menstruelle forstyrrelser som følge af luteal insuffleiens såsom amenora&é eller metrorragi, primær eller sekundær sterilitet som følge af luteal insufficiens uden fare for visse eventuelle forstyrrelser, eom skyldes hypersekretion af aldosteron.

Den nyttige dosis afhænger af den behandlede lidelse og indgiftsmåden. Den kan f.eks. ligge fra 0,1 til 100 mg aktivt stof pr, dag hos voksne ad oral vej.

Nedenstående eksempler illustrerer fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

4 142058

Eksempel 1« (175)-21-oxid o-spiro-(es tra-4,9-d ien-17,5 *-(1 *,21)-oxathiolan)--3-on (isomer B).

Trin A: ?-((l,2-ethandiyl)-acetal) af (17R)-spiro-estra-5(lO),9(ll)--dien-17.2 ^oxiran^-on.

Man sætter 4,6 g 3-((1,2-ethandiyl)-acetal) af estra-5(10), 9(ll)-dien-3,17-dion fremstillet efter fremgangsmåden ifølge fransk patentskrift 1.336.083 og 15 ml tetrahydrofuran til en opløsning af 5,25 g trimethylsulfoniumiodid i 50 ml dimethylsulfoxid. Man afkøler den således opnåede opløsning til 10°C og tilsætter under omrøring 2 g natriumethylat. Man holder reaktionsblandingen under omrøring i 1 time og tilsætter 200 ml vand.

Man ekstraherer med ether, vasker med vand, tørrer og destil-lerer til tørhed.

Der fås således 4,4 g af det ønskede produkt. Smp. 110°0 efter omkrystallisation af petroleumsether (kp. 60-80°C).

Trin B: 3-( (1.2-ethandi.vl)-aoetal) af r73-hydroxy-21-(l.l-dimethyl-ethylsulfinyl)-19-nor-17a-pregna-5(10).9(ll)-dien-3-oner (isomer Å og isomer B).

Man afkøler til mellem 0 og 5°C en blanding af 4,7 g tert.--butylmethylsulfoxid og 40 ml tetrahydrofuran og tilsætter i løbet af 30 minutter 20 ml 2 M opløsning af n-butyllithium i hexan. Til den således opnåede opløsning sætter man 5,15 g af det i trin A fremstillede produkt opløst i 30 ml tetrahydrofuran, lader genantage stuetemperatur· og lader henstå i 22 timer. Man fortynder med vand, ekstraherer med chloroform og inddamper til tørhed. Den tørre ekstrakt renses ved chromatografi på silicagel (elueringsmiddel: benzen og acetone i forholdet 7:3). Man isolerer successivt 2,82 g af isomer A af det ønskede produkt, smp. 204°0 efter omkrystallisation af methylethylketon og Bf = 0,2 (benzen og acetone (7:3)), og derefter 2,99 g af isomer B af det ønskede produkt med smp. 116°0 efter omkrystallisation af 50#1 s vandigt ethanol og Bf = 0,13 (benzen og acetone (7:3)).

Trin 0; 21-(1,l-dimethylethylsulfinyl)-173-hydroxy-19-nor-17g-preana--5(lO).9(ll)-dien-3-on (isomer A).

Man opløser 3 g af isomer A af produktet fremstillet i forrige trin i en opløsning indeholdende 30 ml eddikesyre og 3 ml per-chlorsyre. Man holder den således opnåede opløsning i 1 time ved stuetemperatur, hvorpå man fortynder med vand og ekstraherer med c 142058 5 chloroform. Den tørre ekstrakt chromatograferes på ailicagel (elue-ringsmiddel: "benzen og acetone (7:3)). Man isolerer 2,38 g af det ønskede produkt, som man umiddelbart benytter i det næste trin.

Det ved omkrystallisation af ethanol rensede produkt har esp, 256°C og a2p = -317° +4° (o = 1$, chloroform).

Trin D? (17R)-2t~oxido~splro~(estra-4.9-dien-17.5t-(lt.2t)-oiathio-lan)-3-on (isomer B).

Man indfører 2,1 g af det i trin C fremstillede produkt (isomer A) i en opløsning indeholdende 40 ml tetrahydrofursus og 20 ml destilleret vand. Til den således opnåede opløsning sætter man 764 mg N-chlorsuccinimid, og man holder den således opnåede reaktionsblanding under omrøring ved stuetemperatur i 45 minutter. Derpå eliminerer man tetrahydrofuranet ved destillation tinder formindsket tryk, og man fortynder med vand, omrører i 30 minutter, suger fra, vasker og tørrer. Der fås 1,65 g af det ønskede produkt. Smp. 165°C. Efter omkrystallisation af ethylacetat har en prøve smp, 174 C, α ^ = -353° +4° (c = 1?6, chloroform).

Eksempel 2.

(l7R)-2 '-oxido-spiro-testra^.g-dien-^.S *-(!*. 2»)-oxathioIan)-3--on (isomer A).

Trin A; 21-f 1.1-dimeth.vlethylsulfip.vl )-178-hvdroxy-19-nor-17g--pregna-4.9-dien-3-on (isomer B).

Idet man arbejder som angivet 1 trin C i eksempel 1 Ud fra 3*7 g 3-((1,2-ethandiyl)-acetal) af 17p-hydroxy-21-(l,l-diaethyl-ethylsulfinyl)-19-nor-17a-pregna-5(l0),9(ll)-4ien-3-on (isomer B), får man 2,56 g af det ønskede produkt. Smp, 174°0 efter omkrystalli-sation af ethylacetat, a2J * -172° ±2,5° (c * l£, chloroform).

Trin B; (17B)-2 *-οχ1άθ«-8ΡΐΓθ-(θΒΐ«ι-4.9-β1οη-Γ7.5 '-(l* .21 )-oxathio-lan)-5-oa (isomer A).

Idet man arbejder som angivet i trin D i eksempel 1 ud fra 2,3 g af det i trin A i nærværende eksempel fremstillede produkt, får man 1,13 g af det ønskede produkt, isomer A, smp. 217°C, a2^ s -281° +4,5° (o = 1$, chloroform).

142058 β

Progestomimetisk virkning af(t17R)-2,-oxido-apiro-(e3tra-4«9--dien-17.5 *-(1' «21 )-oxathiolan)-3-on (isomer B)« i det følgende betegnet produkt A.

Den progeatomimetiake virkning af produktet underaøgea ved metoden med hormonale receptorer beskrevet af J, P, Raynaud m.fl, i J. Ster. Biochem,, 1975, £, 615-622 og i "Physiology and Genetics of Reproduction", 1975, del A, side 143-160. Teknikken er som følger:

Man indgiver på ikke-kønsmodne kaniner 25 γ estradiol ad perkutan vej. Fem dage efter denne behandling aflives dyrene, og uterus udtages og homogeniseres i en 10 mM tromethaminatødpude, som er 0,25 M med hensyn til saccharose og er tilsat HC1 indtil en pH--værdi på 7,4. Homogenatet centrifugeres ved 105.000 G i 1 time.

Den overliggende væske eller cytosol indstilles derpå til opnåelse af en fortynding på 1/50 (vægt af uterus/omfang).

Man inkuberer ved 0°C i 2 timer lige store rumfang af.cytosol med en fast koncentration af tritiumholdigt 17,21-dimethyl-19-nor-pregna-4,9-dien-3,20-dion (i det følgende betegnet tritiumholdigt produkt R), enten alene eller i nærværelse af voksende koncentrationer af indifferent 17,21-dimethyl-19-nor-pregna-4,9-dien-3,20--dion (i det følgende betegnet "koldt" produkt R), af progesteron eller af det produkt, som skal undersøges.

Man bestemmer radioaktiviteten af det bundne tritiumholdige produkt R ved teknikken med adsorption på kul og dextran (1,25$ -0,625$).

Man tegner derpå: - de kurver, som repræsenterer procentsatsen af bundet tritiumholdigt produkt R i afhængighed af logaritmen til koncentrationen af "koldt" produkt R, af progesteron eller af det tilsatte produkt, aom skal undersøges, og - den rette linie I^0 parallel med abscisseaksen og med ordinaten B _ B//TMax + B//%in _ _ 2 ®/%ax er Procen'“sa‘tsen "hundet tritiumholdigt produkt R, når der ikke er tilsat noget produkt.

B/T^ir er procentsatsen af bundet tritiumholdigt produkt R, når der er tilsat den maksimale mængde af "koldt" produkt R.

7 142058

Skæringspunkterne mellem denne rette linie og kurverne gør det muligt at bestemme værdierne Cp og 0χ:

Cp = koncentration af progesteron, som med 50$ inhiberer fikseringen af det tritiumholdige produkt R.

Οχ = koncentration af det undersøgte produkt, som med 50$ inhiberer fikseringen af det tritiumholdige produkt R.

Den relative affinitet af det undersøgte produkt A^ er givet ved ligningen: c

Ari = 100 x ^

X

De opnåede resultater er som følger:

Produkter ARL

Progesteron 100 produkt A 280

Konklusion,

Ud fra et biokemisk synspunkt viser produkt A sig at være kraftigt progestomimetisk.

Farmakologisk aktivitet: Undersøgelse af den antlaldosteroniske virkning på rotter af (l7R)-2t-oxido-spiro-(estra-4«9-dien-r7.5t--(l1,2 *)-oxathiolan)-3-on (isomer B), i det følgende betegnet produkt A.

Man underkaster hanrotter af stammen Sprague Dawley på 180 g adrenalektomi. Fra dette øjeblik at regne modtager dyrene fysiologisk serum som drikkevand. Efter to dages forløb bringes dyrene til at faste i 16 timer. Som drikkevand modtager de vand med 5$ glucose.

Produkterne indgives ad subkutan vej efter 16 timers forløb i form af suspension eller opløsning i 25$'s carboxymetfcylcellulose tilsat "Tween 80" (indregistreret varemærke). En time efter indgiften af produktet modtager dyrene en overdosis af saltvand ad intra-peritoneal vej i en mængde på 5 ml 0,9$'s fysiologisk serum pr, rotte, dels 1 μg/fcg aldosteron-monoacetat i 2,5$'s alkoholisk opløsning ad subkutan vej. Dyrene anbringes i diuresebure uden mad eller drikke i 4 timer. På dette tidspunkt fremkalder man tvungen vandladning ved tryk på blæren. Man indstiller det således samlede urinrumfang på 50 ml. Man foretager natrium- og kaliumbestemmelse på autoanaly- 8 142058 sator.

Det således opnåede resultat udtrykt i procent aktivitets-inhibering af 1 pg/kg aldosteron-monoacetat injiceret ad subkutan vej på forholdet natriumkoncentrati on kaliumkoncentration hos den adrenalektomiserede rotte er som følger:

Dosis af produkt indgivet procent inhibering ad subkutan ve,i_ 5 mg/kg 88#

Dette resultat viser, at produkt A har en interessant anti- aldosteronaktivitet ad subkutan vej allerede fra en dosis på 5 mg/kg.

Undersøgelse af antialdosteronvirkningen ad subkutan ve.i af forbindelsen ifølge eksempel 1 sammenlignet med forbindelserae ifølge eksempel 6 og 10 i tysk patentskrift nr, 2.541.659. i det følgende betegner forbindelse A* og forbindelse B*.

Man går frem på samme måde som ovenfor og får følgende resultater ad subkutan vej.

Dosis indgivet Procent inhi-forbindelse bering_

Forbindelse ifølge eksempel 1 5 mgAg 88#

Forbindelse A’ 5 mg Ag 38#

Forbindelse Β» 5 mg/kg 31#

Konklusion: Forbindelsen fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse udviser ad subkutan vej en antialdosteronvirkning, som er langt bedre end virkningen af forbindelserne ifølge patentskriftet.

Claims (1)

1. 9 142058 Patentkrav. " Analogifremgangsmåde til fremstilling af 17-spirosultiner med den almene formel I - hvor R·1- betegner en alkylgruppe med 1-4 earbonatomer, k e η τ ' detegnet ved, at man underkaster en forbindelse med formlen II r1 O K hvor. K betegner en ketalgruppe, og R1 betegner en alkylgruppe med 1-4 earbonatomer, indvirkning af et trimethylsulfoniumhalogenid med formlen (CH^ j^S^Hal*" hvor Hal betegner et halogenatom i nærværelse af et alkalisk stof til opnåelse af et produkt med formlen III (III) K som man underkaster Indvirkning af methyl-tert,-butylsulfoxid i