DE942944C - Verfahren zur Gewinnung der natuerlichen herzwirksmen Glykoside aus Boviea volubilis - Google Patents

Description

• Verfahren zur Gewinnung der natürlichen herzwirksamen Glykoside aus Boviea volubilis Nach der heutigen Kenntnis der Wirkstoffe von Boviea volubilis enthält diese Droge eine größere Anzahl von herzwirksamen Glykosiden, aus denen bei der Aufarbeitung der Droge durch Ferment wirkung oder chemische Eingriffe leicht zuckerärmere sekundäre Glykoside entstehen.
• Bei der Gewinnung der Bovieaglykoside wurde bisher auf die Erhaltung der natürlichen Form der Glykoside kein besonderer Wert gelegt; auch konnte nach den bisherigen Verfahren nur ein Teil des Gehaltes an Wirkstoffen isoliert werden. So hat man beispielsweise die frische Zwiebel einer Selbstfermentation unterworfen, um die primären, nicht oder nur sehr schwer kristallisierenden Glykosiden zu leichter kristallisierbaren Glykosiden mit nur noch einem Zuckermolekül, sogenannten Monosiden, abzubauen. Man erhält hierbei eine Reihe von kristallisierten Einzelglykosiden, jedoch nur in minimalen Ausbeuten von O,OOI bis 0,01 %.
• Ein anderes bereits bekanntes Verfahren besteht darin, die mit Ammonsulfat vermischte Droge abzupressen und den Preßsaft wie den getrockneten Preßrückstand mit Essigester zu extrahieren. Nach dem Auswaschen des Abdampfrückstandes mit Äther erhält man ein braunes amorphes Glykosidpulver in einer Ausbeute von nur 0,0490/0, bezogen auf die Frischdroge. Schließlich ist auch noch bekannt, die getrocknete Droge mehrmals mit Me- thanol zu extrahieren, die vereinigten Extrakte einzuengen und die Wirkstoffe aus den durch Ausfällen mittels Aceton von Ballaststoffen befreiten Auszügen durch wiederholte Adsorption an Alummiumoxyd und anschließende Elution getrennt zw isolieren. Man gewinnt auf diese Weise zwei kristallisierte Produkte, die eine stark unterschiedliche Keller-Kiliani-Reaktion ergeben. Ein wesentlicher Teil der Glykoside wird dabei anscheinend vom Aluminiumoxyd so fest gebunden, so daß nur ein geringer Teil des Wirkstoffgehaltes der Droge gewonnen wird.
• Diese bisher bekannten, auf die Isolierung reiner kristallisierter Einzelglykoside der Boviea volubilis abzielenden Verfahren ergaben somit keinen brauchbaren Weg, um ein für die Therapie geeignetes, die Wirkung der natürlichen Gesamtglykoside der Boviea volubilis in sich schließendes Präparat in befriedigender Ausbeute zu gewinnen.
• Es wurde nun gefunden, daß man praktisch quantitativ die von Ballaststoffen freien Gesamtglykoside der Boviea volubilis in ihrer natürlichen, verhältnismäßig leicht wasserlöslichen Form gewinnen kann, wenn man die -frischen Bovieazwiebeln zunächst in Gegenwart von Methanol, dessen Konzentration so hoch gehalten wird, daß die vorhandenen Fermente ausgefällt werden, zu einem dünnen Brei zermahlt. Nach Abtrennen des ersten Methanolextraktes werden die noch vorhandenen Glykosidimengen nochmals mit kaltem Methanol erschöpfend ausgezogen und die vereinigten Methanollösungen nach Einengen im Vakaum unter geringer Wasserzugabe in eine wäßrige Lösung übergeführt, aus der die Glykoside mittels Essigester erschöpfend extrahiert werden. Die vereinigten Essigesterauszüge werden eingeengt und mit Cblorcalcium getrocknet, wobei hydrophile Verunreinigungen ausgeschieden werden. Darauf wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand zwecks Reinigung mit geringen Mengen eines mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmitteis, wie Hexan, Pentan, Dibutyläther oder Diisopropyläther, behandelt. Man erhält ein hellbraunes lockeres Pulver, das sämtliche Glykoside der Bovieazwiebel in ihrer natürlichen Form nahezu frei von unwirksamen Begleitstoffen enthält. Zur weiteren Reinigang werden die erhaltenen Glykoside in einem niedrigen aliphatischen Alkohol gelöst und aus der Lösung durch Zusatz von Dibutyläther, Pentan oder Hexan als farbloses, amorphes Pulver in praktisch reiner Form ausgefällt.
• Nach einer Abänderung des Verfahrens wird die glykosidhaltige wäßrige Lösung vor dem Ausziehen mit Essigester durch Behandeln mit Pentan, Hexan oder Dibutyläther von störenden Verunreinigungen, welche die quantitative Überführung der Glykoside in den Essigester erschweren, befreit.
• Beispiel i kg frische Bovieazwiebeln. werden in einer geeigneten, schnell .arbeitendenZerkleinerungsmaschine unter Zusatz von 3 kg wasserfreiem Methanol in einen dünnflüssigen Brei yerwandelt und 1 Stunde kräftig gerührt. Hierauf wird die etwa 800/o Methanol enthaltende Flüssigkeit von Zwiebelfasern und ausgeschiedenen Begleitstoffen getrennt, der Rückstand noch 3- bis qmal mit der jeweils 3fachen Gewichtsmenge Methanol- ausgerührt und wieder abgetrennt, bi,s, 5 ml des Abdampfrückstandes des setzten Auszuges keine positive Keller-Kilinni-Reaktion mehr ergeben. Die vereinigten Methanolauszüge werden bei vermindertem Druck bis auf etwa 1 1 verdampft und nach Zusatz von 1 1 Wasser nochmals. auf 11 eingeengt. Der methanolireie und fast klar gewordene wäßrige Extrakt wird mehrmals mit dem gleichen Volumen an Essigester ausgeschüttet, bis 2 ml des Abdampfrückstandes der wäßrigen Phase keine positive Keller-Kiliani-Reaktion mehr ergeben. Hierzu sind meist zehn bis fünfzehn Ausschüttelungenerforderlich. Diese Essig esterextraktion kann auch durch Perforation des wäßrigen Extraktes mit Essigester durchgeführt werden, wobei man zur Schonung der Glykoside vorteilhaft unter vermindertem Druck in Stickstoffatmosphäre arbeitet. Darauf werden die vereinigten Essigesterextrakte schonend auf etwa 1 1 eingeengt, unffltriert mit einer ausreichenden Menge Chlorcalcium scharf getrocknet, vom Trockenmittel und ausgeschiedenen Begleitstoffen abgesaugt, mit wasserfreiem Essigester gründlich nachgewaschen und das Filtrat im Vakuum eingeengt. Nach Trocknen des Rückstandes im Vakuum hinterbleibt ein rotbrauner Rückstand, der durch mehrmaliges Verreiben mit der z- bis 3fachen Menge Hexan von lipoidartigen Bestandteilen befreit und dadurch in ein lockeres helibraunes Pulver verwandelt wird.
• Zur weiteren Reinigung wird das Glykosidgemisch inv der 8fachen Menge absolutem Alkohol gelöst, die Lösung filtriert und in dünnem Strahl unter Rühren in das 3ofache Volumen Dibutyläther eingetragen, wobei etwa 85 <yo des gelösten GlykosidpuLvers nahezu farblos ausfallen. Der Niederschlag wird abgesaugt, mit Dibutyläther nachgewaschen und im Vakuum getrocknet. Weitere etwa 5 0/0 Glykoside scheiden sich beim Einengen der Dibutyläther-Alkohol-Lösung auf 25 bis 30 ml noch in ähnlicher Reinheit ab. Ausbeute: 3 g = o,3 °/o der Frischdroge. Der Wirkungswert des Glykosidgemisches beträgt etwa 1,6 bis I,7 Mill. ME/g.

Claims (4)

1. PATENTANSPRUCHE: 1. Verfahren zur quantitativen Gewinnung der natürlichen herzwirksamen Gesamtglykoside aus.Boviea volubilis durch Methanolextraktion, dadurchigekermzeichnet, daß man den Methanolextrakt in eine wäßrige Lösung überführt und die Glykoside aus dieser Lösung durch Extraktion mit Essigester, Trocknen und Verdampfen der Essigesterlösung isoliert.
2. 2. Verfahren nach Anspruch I, dadurch gekennzeichnet, daß man - die. Fris.chdroge zuerst zwecks Ausfällung -der Fermente mit wasserfreiem Methanol vermahlt, - die FlüssigIreit abtrennt und den Rückstand nochmals - kalt mit Methanol erschöpfend auszieht.
3. 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das isolierte Glykosidgemisch zwecks Reinigung mit einem mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel, wie Pentan, Hexan, Diisopropyläther oder Dibutyläther, behandelt und schließlich nach Lösen in Alkohol mit einem der genannten Lösung mittel wieder ausfällt.
4. 4. Abänderung des Verfahrens nach den Ansprüdien I und 3, dadurch gekennzeichnet, daß man die wäßrige Lösung der Glykoside vor der Extraktion mit Essigester einerVorreinigung durch Extrahieren mit einem mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel, wie Pentan, Hexan, DiisopropylätlDer oder Dibutyl äther, unterwirft.