DE8622818U1 - Flasche zur Züchtung und Erhaltung von Zellkulturen - Google Patents
Flasche zur Züchtung und Erhaltung von ZellkulturenInfo
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Description
Anmelder:
CA. Greiner und Söhne
GmbH & Co. KG
Galgenbergstraße 9
7440 Nürtingen
GmbH & Co. KG
Galgenbergstraße 9
7440 Nürtingen
G 86 22 818.8 1620 044 13.06.1989 D/ma
Titel: Flasche zur Züchtung und Erhaltung von Zellkulturen
Die Erfindung betrifft eine Flasche zur Züchtung und Erhaltung
von Zellkulturen aus Zellen humanen, tierischen oder pflanzlichen Ursprungs für biologische, virologische,
immunologische und cytologische Analytik und Diagnostik mit
einem Schraubverschluß. Derartige Flaschen werden von den verschiedensten Herstellern als Einwegflaschen aus glasklarem
Kunststoff, zumeist Polystyrol, Polycarbonat oder Polypropylen angeboten. Sie haben z.B. quaderförmig Gestalt und können
sowohl liegend als auch stehend benutzt werden. Es gibt auch Flaschen in Zylinderform mit engem oder weitem Hals (sog.
Erlenmeyer-Kolben). Die Schraubverschlüsse dienen dazu, die Flaschen hermetisch dicht zu verschließen.
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Zellkulturen sind von zunehmender Bedeutung, da ihre Verwendung für Analytik u. Diagnostik immer mehr Tierversuche
ersetzt. Die Zellkulturen benötigen jedoch die Anwesenheit von Gasen, z.B. C0a,0,,N2.H* (vgl. bezüglich der Züchtungstechnik
und der sich daraus ergebenden biologischen Maßnahmen J.H. Peters et a] , "Monoklonale Antikörper", 1985).
Seither hat man einen Gasaustausch zwischen dem Flaschecinnem
und der umgebenden Atmosphäre dadurch ermöglicht, daß der
hermetische Flaschenverschluß beseitigt wurde. Der Schraubverschluß wurde geringfügig gelöst. Ein Gasausiausch
kann dann über die Labyrinthwege der ineinandergreifenden
Gewinde von Flaschenhals und Verschluß erfolgen. Man hat auch am Schraubverschluß Markierungen "vent" angebracht, um die
geöffnete Stellung kenntlich zu machen.
Eine solche Maßnahme hat den Nachteil, daß der Austausch zu
langwierig ist; häufig ist eine spontane Gaszufuhr erwünscht. Ein Gasaustausch ist in dieser Form auch nur vertretbar, wenn
er unter Reinraumbedingungen erfolgt, d.h. wenn die uiagebende
Atmosphäre steril ist.
Da ferner der Flascheninhalt trotz eines niedrigen Füllstandes
häufig bis in den Bereich der FlaschenSffnung treten kann.
z.Bi durch eine Schütteimechanik öder beim Transport, ist
nicht auszuschließen, daß bei gelockertem Gewindeverschluß
biologisch (z.B. viröloeisch) bedenkliche oder toxische
Flüssigkeiten sich den Weg durch das Gewinde nach außen suchen Und somit die Gefahr besteht, daß Benutzer bei der Handhabung
infiziert werden. In gleicher Weise besteht die
Gefahr, daß die Benutzer bei der Handhabung dia Zsllkulturan
von außen her mit Mikroorganismen kontaminieren. Desgleichen kann sich der Spalt im Gewinde durch Kondenswasser oder durch
das Schütteln mit Flüssigkeit füllen und den Gasaustausch
dadurch blockieren. Dasselbe gilt auch für die in der Praxis immer noch übliche Methode, die sog. Erlenraeyer-Kolben mit
sterilen Wattestöpfen zu verschließen.
Aus der US-A-4 416 984 ist ein Sterilisationsindikator bekannt geworden, der durch einen ersten Behälter gebildet wird, der
in einem zweiten Behälter steckt. Der erste Behälter enthält einen mit Sporen geimpften Streifen. Der Behälter ist an
seinem einen Ende gegenüber der Außenseite mit einem Verschluß versehen, der für Bakterien undurchläßig, jedoch für zur
Sterilisation eingesetzte Gase oder Dampf durchlässig ist.
Zusammen mit den eigentlichen Gegenständen, die sterilisiert werden sollen, wir ein solcher Sterilisationsindikator dem
Sterilisationsprozeß durch Heißdampf oder sonstige Bakterien
abtötende Giftgase unterworfen. Anschließend schiebt man die beiden Röhrchen des Sterilisationsindikators so ineinander,
daß Nährlösung an den mit Sporen geimpften Streifen gelangen
kann. War die Sterilisation unvollständig oder in irgendeiner
Weise nicht ausreichend, dann erfolgt ein von außen beobachtbares Wachstum d«r Sporen auf dem genannten Streifen
und damit eine Indikation mangelhafter Sterilisation.
Das Bekanntsein dieser steriler Filter an eich hat j«doch bis
jetzt trotz eines lange bestehenden drin««nden Bedürfnisses
keino Anregung dazu gegeben, die eingangs genannten Nachteile der mit Schraubverschlüssen versehenen Zellkulturflaschen zu
überwinden.
Aus der US-A-4 410 630 ist sin Gerät zur Filtration zellulärer
lysierter Blutbestandteile mit einem Filter zur Zurückhaltung der zerstörten Blutzellen bekannt. Auch dies hat die
Entwicklung von mit Schraubverschlüssen versehenen Flaschen der eingangs genannten Art nicht beeinflußt.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, mit einfachen Mitteln eine Flasche für ZellkuXturen der eingangs genannten
Art so zu verbessern, daß eine sterile Belüftung unter
schlechten Umgebungsbedingungen gewährleistet ist, wobei
gleichzeitig ein Schutz gegen Kontamination durch Mikroorganismen (Bakterien, Pilze) beibehalten werden kann,
ohne die Handhabbarkeit zu verschlechtern.
Dieäe Aufgabe wird *rfindunesgaraäp durch dl* in Anspruch 1
bzw, Anspruch 12 angecebenen Mittel tfelöst. Vorteilhafte
Weiterbildungen sind in den Unteransprüchen angegeben.
B»r Vorteil dieser überraschend einfachen und in der Praxis
rasch erfolgreichen Lösung ist, daß bei dem zell- und
mikrobiologisch kontaminationssicheren permanenten Verschluß
der Flasche ein permanenter gleichmäßiger Gasaustausch mit der umgebenden Atmosphäre gewährleistet ist. Auch bei unreiner
Umgebungsatmösphäre kann nur steriles Gas in die Flasche gelängen. Die Handhabung ist sicherer geworden. Das
Filterelement hat bevorzugt innerhalb des Verschlußkörpers
einen für den Benutzer berührungssicheren und damit bruchsicheren Platz. Liegend benutzte Flaschen können auch bei
Anwendung einer Schüttelmechanik höher aufgefüllt werdet, so
daß eine größere Zuchtausbeute erreicht werden kann.
Ausführungsbeispiele der Erfindung sind im folgenden anhand
der beiliegenden Zeichnungen näher erläutert. Dabei zeigen:
Figur 1 ein 1. Ausführungsbeispiel;
Fijfur 2 einen Detailquerschnitt eines 2.
Ausführungsbeispiel;
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Fixur 4 ein 4. Ausführun«sbeispiel bei einem
Figur 5 ein 5. Ausführuntfsbeispiel;
6 ein 6. Ausführuncsbeispiel;
Figur 7 eine Ansicht des 4. Ausführungsbeispieles von
ur»ten ;
Figur 8 eine Draufsicht auf das 61 Ausführungsbeispiel nach
Figur 6 ohne Schutzfolie;
Figur 9 . ein 7t Ausführungsbeispiel mit einem
Schraubverschluß mit versetzt angeordneten Durchbrechungen; und
Figur 10 eine vergrößerte Draufsicht auf das Ausführungsbeispiel nach Figur 9 (Ausschnitt).
Gemäß Figur 1 ist die Flasche F mit einer flüssigen Zellkultur Z teilweise gefüllt und durch den Schraubverschluß
kontaminationssicher verschlossen. Der Schraubverschluß 1 nach
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Figur 1 und 2 hat üblicherweise ein innengewinde 7, welches mit dem Außengewinde des Flaschenhalses F1 korrespondiert und
sich mit seiner inneren Schulter 6 dicht auf oder an den Oberrand des Flaschenhalses F1 anpreßt.
Erfindungsgemäß ist der die Flaschenöffnung F1 abdeckende Teil
2 des Verschlußkörpers 1 aus Kunststoff mit mindestens einer oder mehreren Durchbrechungen 3 ausgestattet. In der
Ausführungsform nach Figur 6 ist auf der Innenseite des Verschlußkörpers 1 eine drainierende Fi Herabsetzung 5, z.B.
. in Form konischer Stützkörper integriert. Auf einem kreisförmigen Kragen 21 ist ein hydrophober, mikroporöser
Flachfilterzuschnitt 4 mit seinem Rand leckdicht befestigt,
vorzugsweise durch Siegelung oder UItraschallverschweißung.
Gemäß Figur 6, 9 können die Durchbrechungen 3 insgesamt durch
eine selbstklebende Schutzfolie 8 abgedeckt sein, so daß das
Filterelement 4 vor Benutzung zusätzlich mechanisch geschützt ist bzw. bedarfsweise der Gasaustausch erlaubt oder verhindert
werden kann. Bei der Ausführungsform des Schraubverschlusses
nach Figur 5 bis 10 wird trotz der durchgehenden Durchbrechungen 3 eine Kontamination durch Berührung des
Flachfilterzuschnittes 4 und auch eine ungewollte mechanische Beschädigung des Fl achf i 1 terzuschn·: · *., durch den Benutzer
verhindert.
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Beschädigung des Flachfilterzuschnittes 4 durch den Benutzer
durch die Durchbrechungen 3 hindurch praktisch ausgeschlossen ist, da die Durchbrechung 3 jeweils einen axialen und radialen
Versatz 31 innerhalb der Wandstärke des Kunststoffkörpers
aufweist.
Um dem Benutzer unter den vorbeschriebenen biologisch kontaminationssicheren Arbeitsbedingungen auch eine
Probeentnahme des Flascheninhaltes zu ermöglichen, ohne den Schraubverschluß ganz zu entfernen, ist gemäß der
Ausführungsform nach Figur 9 und 10 im Schraubverschluß ein
Silikonstopfen 9 angeordnet, der außerhalb des eingegrenzten Filterbereiches, jedoch innerhalb des Bereiches der
F^aschenhalsöffnung F1 liegt, der Silikonstopfen 9 ist dabei
in Durchmesser und Stärke so bemessen, daß sich dieser wieder hermetisch selbsttätig abdichtet, wenn die eingestochene
Hohlnadel nach der Probeentnahme wieder entfernt wird.
In einer nicht dargestellten Ausführungsform besteht das Filterelement aus einem patronenförmigen Fi1terkörper, etwa in
der Gestalt des Silikonstopfens 9. In einer weiteren nicu-t
dargestellten Ausführungsform ist dia Decke des Schraubverschlusses selbst in Form eines porösen gesinterten
Kunststoffabschnittes ausgebildet, der einen Gasaustausch ermöglicht und einen Flüssigkeitsaustritt unterbindet.
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Flaschenschulter ein Fenster angeordnet, das mit dem
Filterelement 4 und Schutzfolie 8 verschlossen ist. Der Schraubverschluß ist dabei ohne Filterelement ausgebildet.
In allen Fällen ist auch das Filtermaterial aus einem
bezüglich der Zellkulturen inerten Kunststoff, z.B.
Polypropylen, PTFE, Silikon, hydrophobem Zeilulosederivat
gebildet und hat eine Porengröße bzw. ein cut off, die einersetis einen Gasaustausch unter Sterilbedingungen zuläßt,
nicht toxisch oder zytotoxisehen für die Flüssigkeit und
Zellkulturen ist und anderersetis auch ein Durchwachsen von Zellen und Mikroorganismen verhindert.
Claims (1)
- • t ■· MM ■· f °.Ill BI · I ■ ··G 86 22 818.8 1620 044CA. Greiner und Söhne 17.07.1989 D/maGmbH & Co. KGTitel: Flasche zur Züchtung und Erhaltung von ZellkulturenSchutzansprüche1. Flasche zur Züchtung und Erhaltung von Zellkulturen (Z) aus Zellen humanen, tierischen oder pflanzlichen Ursprungs für di* biologische, virologische, imii.unologische oder cytologische Analytik und Diagnostik mit einem Schraubverschluß, dadurch gekennzeichnet, daß der die Flaschenöffnung (F1) abdeckende Teil (2) des Schraubverschlußes (1) ein hydrophobes Filterelement (4) aus für die Zellkulturen inertem Filtermaterial aufweist, dessen Porengröße derart bestimmt ist, daß ein Gasaustausch möglich ist und eine Kontamination durch Mikroorganismen verhindert wird.2. Flasche nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Filterelement (4) berührungssicher von außen hinter mindestens einer Durchbrechung (3) des die Flaschenöffnung (F1) abdeckenden Teils (2) des Verschlußkörpers (1) liegt.3. Flasche nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, (laß das Filterelement durch einen gesinterten porösen Abschnitt des Verschlußkröpers (1) aus Kunststoff gebildet ist.• ♦ # ♦ f * » ■• t ¥ a t « · «a tt isiMi <> * «■I I I · I I ItIit * &igr; «ir tilt< < ti· II It < I t t«ti (I Il < I > I <4i FlasGhe nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß das FiItefelement aus einem Im Verschlußkörper (1) eingebetteten Patrönenfilter gebildet ist*5. Flasche nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß das Filterelement (4) aus einem mikroporösen Flachfilterzuschnitt gebildet ist, der auf der Innenseite bzw. Außenseite des mit mindestens einer Durchbrechung (3), vorzugsweise mehreren Durchbrechungen (3) versehenen Verschlußkörpers (1) im Bereich der abzudeckenden Flaschenöffnung (F1) aufgesiegelt, aufge-^ schweißt oder aufgeklebt ist.6i Flasche nach Anspruch 1 und 5, dadurch gekennzeichnet, daß der vom festgelegten Rand (2') des Flachfilterzuschnittes (4) eingegrenzte innere Bereich des Verschlußkörpers (1) eine drainierende FiIterabstützung (5) aufweist.7. Flasche nach Anspruch 1, 5 und 6, dadurch gekennzeichnet, daß im Verschlußkörper (1) innerhalb der Wandungsdicke die Durchbrechungen (3) einen den direkten axialen Durchlaß verdekcenden axialen und radialen Querschnittsversatz (31) aufweisen, der die mikroporöse Membran (4) gegen Berührung von außen und gegen mechanische Beschädigung von außen schützt.• &iacgr; :8. Flasche nach Anspruch 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet * daß die Oberseite des die Flaschenöffnung (F') abdeckenden und die Durchbrechungen aufweisende Bereich des Verschlußkörpers (1) eben ausgebildet ist und eine die Durchbrechungen (3) abdeckende und verschließende, entfernbar? Schutzfolie (8) aufweist.9. Flasche nach Anspruch 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß die mikroporöse Membran eine Porengröße zwischen um und 0,001 /im aufweist.10. Flasche nach Anspruch 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß außerhalb des von dem Filterelement (4) eingegrenzten Bereichs des Verschlußkörpers (1) und innerhalb des von der Flaschenöffnung (F1) eingegrenzten Bereichs im Verschlußkörper (1) in einem Abschnitt seiner Wandung (2) ein zur Probeentnahme mittels Nadel geeigneter Verschlußstopfen (9) aus Silikon od. dgl. angeordnet ist, dessen Querschnitt so bemessen ist, daß sich die Öffnung für die Nadel selbsttätig wieder schließt.11. Flasche zur Züchtung und Erhaltung von Zellkulturen (Z) aus Zellen humanen, tierischen oder pflanzlichen Ursprungs für die biologische, virolögische, immunuologische oder cytologische Analytik undDiagnostik mit einem Schraubverschluß, dadurch gekennzeichnet, daß die Zellkulturflasche (F) unterhalb des Schraubenverschlußes (1) im Bereich des Flaschenhalses bzw. Flaschenschulter eine Durchbrechung aufweist, die von einem rändseitig nit der Durchbrechnung dichtend verbundenen hydrophoben Filterelement (4) aus für die Zellkulturen (Z) inertem Filtermaterial verschlossen ist, dessen Porengröße derart bestimmt ist, daß ein Gasaustausch möglich ist und eine Kontamination durch Mikroorganismen verhindert wird.
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|---|---|---|---|
| DE19868622818 DE8622818U1 (de) | 1986-08-26 | 1986-08-26 | Flasche zur Züchtung und Erhaltung von Zellkulturen |
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Publications (1)
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|---|---|
| DE8622818U1 true DE8622818U1 (de) | 1989-08-17 |
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ID=6797707
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Country Status (1)
| Country | Link |
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