DE69629716T2

DE69629716T2 - Succinimid und maleimid cytokin-inhibitoren

Info

Publication number: DE69629716T2
Application number: DE69629716T
Authority: DE
Inventors: W. George MULLER; Mary Shire
Original assignee: Celgene Corp
Current assignee: Celgene Corp
Priority date: 1995-10-06
Filing date: 1996-10-04
Publication date: 2004-07-08
Anticipated expiration: 2016-10-05
Also published as: EP0862552A1; JPH11513387A; FI980776A; KR100345826B1; US5658940A; PT862552E; KR19990064052A; CA2233975C; DE69629716D1; ATE248145T1; SK44698A3; PL326063A1; CA2233975A1; FI980776A0; CZ105398A3; NZ321001A; ES2206600T3; JP3226546B2; RU2176242C2; EP0862552B1

Description

Hintergrund der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Senkung der TNFα-Spiegel und zur Hemmung der Phosphodiesterase in einem Säuger (einschließlich des Menschen), sowie Verbindungen und Zusammensetzungen, die dafür geeignet sind.
TNFα, oder Tumornekrosefaktor α, ist ein Cytokin, das in erster Linie von mononukleären Phagozyten als Antwort auf verschiedene Immunstimulatoren freigesetzt wird. Wenn es Tieren oder Menschen verabreicht wird, ruft es Entzündung, Fieber, cardiovaskuläre Wirkungen, Hämorraghie, Coagulation und Akutphasenantworten hervor, die denen ähneln, die während akuter Infektionen und Schockzuständen zu beobachten sind.
Eine übermäßige oder unregulierte TNFα-Produktion wird mit einer Reihe von Krankheitszuständen in Verbindung gebracht. Diese schließen ein: Endotoxemie und/oder toxisches Schocksyndrom (Tracey et al., Nature 330, 662–664 (1987) und Hinshaw et al., Circ. Shock 30, 279–292 (1990)); Cachexie (Dezube et al., Lancet, 335 (8690), 662 (1990)), und Adult Respiratory Distress-Syndrom, wo TNFα-Konzentrationen von über 12 000 pg/Milliliter in den Lungenaspiraten von ARDS-Patienten nachgewiesen wurden (Millar et al., Lancet 2(8665), 712–714 (1989)). Die systemische Infusion von rekombinanter TNFα führte ebenfalls zu Veränderungen, wie sie typischerweise bei ARDS zu beobachten sind (Ferrai-Baliviera et al., Arch. Surg. 124(12), 1400–1405 (1989)).
TNFα scheint auch an Knochenresorptionserkrankungen einschließlich von Arthritis beteiligt zu sein, wo nachgewiesen wurde, daß Leukozyten, wenn sie aktiviert sind, eine Knochenresorption bewirken, und die Daten nahelegen, daß TNFα zu dieser Aktivität beiträgt {Bertolini et al., Nature 319, 516–518 (1986) und Johnson et al., Endocrinology 124(3), 1424–1427 (1989)}. Es wurde nachgewiesen, daß TNFα in vitro und in vivo durch Stimulation der Osteoclastenbildung und -aktivierung in Kombination mit einer Hemmung der Osteoblastenfunktion die Knochenresorption stimuliert und die Knochenbildung hemmt. Obwohl TNFα an vielen Knochenresorptionserkrankungen einschließlich von Arthritis beteiligt sein kann, besteht seine deutlichste Verbindung mit einer Erkrankung in dem Zusammenhang zwischen der Produktion von TNFα durch Tumor- oder Wirtsgewebe und der mit Malignität einhergehenden Hypercalcämie {Calci. Tissue Int. (US) 46 (Suppl.), S. 3–10 (1990)}. Bei der Graft-versus-Host-Reaktion wurden erhöhte TNFα-Spiegel im Serum mit schweren Komplikationen in der Folge von akuten allogenen Knochenmark-Transplantationen in Verbindung gebracht {Holler et al., Blood, 75(4), 1011–1016(1990)).
Die zerebrale Malaria ist ein letales, hyperakutes neurologisches Syndrom, das mit hohen TNFα-Spiegeln im Blut einhergeht, und stellt die schwerwiegendste Komplikation dar, die bei Malariapatienten auftritt. Die TNFα-Spiegel im Serum stehen in direktem Zusammenhang mit der Schwere der Erkrankung und der Prognose bei Patienten mit akuten Malariaanfällen {Grau et al., N. Engl. J. Med. 320 (24), 1586–1591(1989)}.
TNFα spielt außerdem eine Rolle im Bereich der chronischen Lungenentzündungs-Erkrankungen. Die Ablagerung von Quarzstaub führt zur Silikose, einer Krankheit mit progressivem Lungenversagen, das durch eine fibrotische Reaktion hervorgerufen wird. TNFα-Antikörper blockierten die durch Quarzstaub induzierte Lungenfibrose in Mäusen vollständig {Pignet et al., Nature, 344: 245–247 (1990)}. Die Produktion großer TNFα-Mengen im Serum und in isolierten Makrophagen wurde in Tiermodellen von durch Quarzstaub und Asbest induzierter Fibrose gezeigt {Bissonnette et al., Inflammation 13(3), 329–339 (1989)}. Es wurde auch gefunden, daß alveolare Makrophagen von Lungensarcoidose-Patienten im Vergleich zu Makrophagen von normalen Spendern spontan gewaltige Mengen an TNFα freisetzen {Baughman et al., J. Lab. Clin. Med. 115(1), 36–42(1990)}.
TNFα ist auch an der Entzündungsantwort beteiligt, die auf eine Reperfusion folgt und die als Reperfusionsschaden bezeichnet wird, und stellt die Hauptursache für Gewebeschädigungen nach fehlender Durchblutung dar {Vedder et al., PNAS 87, 2643–2646 (1990)}. TNFα ändert auch die Eigenschaften der Endothelialzellen und zeigt verschiedene koagulationsfördernde Wirkungen, beispielsweise bewirkt es eine Steigerung der koagulationsfördernden Gewebefaktoraktivität und eine Unterdrückung des Stoffwechselwegs des koagulationshemmenden Proteins C und reguliert die Thrombomodulin-Expression herab {Sherry et al., J Cell Biol. 107, 1269–1277 (1988)}. TNFα weist entzündungsfördernde Wirkungen auf, die es zusammen mit seiner frühen Produktion (während des Anfangsstadiums des Entzündungsereignisses) zu einem wahrscheinlichen Vermittler von Gewebeschäden bei mehreren wichtigen Funktionsstörungen machen, einschließlich von, aber nicht beschränkt auf: Herzinfarkt, Schlaganfall und Kreislaufschock. Von besonderer Bedeutung kann die TNFα-induzierte Expression von Adhäsionsmolekülen, wie dem interzellulären Adhäsionsmolekül (ICAM) oder dem endothelialen Leukozyten-Adhäsionsmolekül (ELAM) auf Endothelialzellen sein {Munro et al., Am. J. Path. 135(1), 121–132(1989)}.
Darüber hinaus ist bekannt, daß TNFα ein potenter Aktivator der Retrovirusreplikation einschließlich der Aktivierung von HIV-1 ist. {Duh et al., Proc. Nat. Acad Sci. 86, 5974–5978 (1989); Poll et al., Proc. Nat. Acad Sci. 87, 782–785 (1990); Monto et al., Blood 79, 2670 (1990); Clouse et al., J. Immunol. 142, 431–438 (1989); Poll et al., AIDS Res. Hum. Retrovirus, 191–197 (1992)}. AIDS ist die Folge einer Infektion von T-Lymphozyten mit dem Humanen Immunschwächevirus (HIV). Bisher wurden mindestens drei HIV-Stämme identifiziert, d. h. HIV-1, HIV-2 und HIV-3. Als Folge einer HIV-Infektion wird die T-Zellen-vermittelte Immunität geschwächt, und infizierte Individuen können schwere opportunistische Infektionen und/oder ungewöhnliche Neoplasmen zeigen. Für den Eintritt von HIV in den T-Lymphozyten ist die Aktivierung des T-Lymphozyten notwendig. Andere Viren, wie HIV-1 und HIV-2, infizieren die T-Lymphozyten nach einer T-Zellen-Aktivierung, und diese Virusproteinexpression und/oder -replikation wird durch diese T-Zellen-Aktivierung vermittelt oder aufrechterhalten. Wenn ein T-Lymphozyt einmal mit HIV infiziert ist, muß der T-Lymphozyt weiterhin im aktivierten Zustand gehalten werden, um eine HIV-Genexpression und/oder HIV-Replikation zu ermöglichen. Cytokine, insbesondere TNFα, sind insofern an der durch aktivierte T-Zellen vermittelten HIV-Proteinexpression und/oder Virusreplikation beteiligt, als sie eine Rolle bei der Aktivierung der T-Lymphozyten spielen. Daher unterstützt die Störung der Cytokinaktivität, beispielsweise durch die Verhinderung oder Hemmung der Produktion von Cytokinen, insbesondere von TNFα, in einem HIV-infizierten Individuum die Begrenzung der durch die HIV-Infektion bewirkten aufrechterhaltenen T-Lymphozyten-Aktivierung.
Monozyten, Makrophagen und verwandte Zellen, wie Kupffer- und Gliazellen, wurden ebenfalls mit der Aufrechterhaltung einer HIV-Infektion in Verbindung gebracht. Diese Zellen sind wie die T-Zellen Ziele für die virale Replikation, und der Grad der viralen Replikation hängt vom Aktivierungszustand der Zellen ab {Rosenberg et al., The Immunopathogenesis of HIV Infection, Advances in Immunology, 57 (1989)}. Es wurde gezeigt, daß Cytokine, wie TNFα, die HIV-Replikation in Monozyten und/oder Makrophagen aktivieren {Poli et al. Proc. Natal. Acad. Sci., 87, 782–784 (1990)}, daher trägt die Verhinderung oder Hemmung der Cytokinproduktion oder -aktivität zur Begrenzung der HIV-Progression bei, wie oben für die T-Zellen ausgeführt. Zusätzliche Studien haben TNFα als üblichen Faktor bei der Aktivierung von HIV in vitro identifiziert und haben einen klaren Wirkungsmechanismus über ein Kern-Regulatorprotein, das im Zellzytoplasma vorkommt, zu Tage gebracht (Osborn, et al., PNAS 86, 2336– 2340). Dieser Nachweis läßt darauf schließen, daß eine Reduzierung der TNFα-Synthese bei HIV-Infektionen eine antivirale Wirkung hat, da sie die Transkription und somit die Virusproduktion verringert.
Die virale HIV-Replikation von latentem HIV in T-Zell- und Makrophagen-Linien kann durch TNFα induziert werden {Folks et al., PNAS 86, 2365–2368 (1989)}. Ein molekularer Mechanismus für die virusinduzierende Aktivität wird durch die Fähigkeit von TNFα nahegelegt, ein Genregulatorprotein (NFκB) zu aktivieren, das im Zellzytoplasma vorkommt, und das die HIV-Replikation durch Bindung an eine virale Genregulatorsequenz (LTR) fördert {Osborn et al., PNAS 86, 2336–2340 (1989)}. TNFα in mit AIDS einhergehender Cachexie wird durch erhöhte TNFα-Spiegel im Serum und große Mengen an spontan produziertem TNFα in Monozyten im peripheren Blut von Patienten nahegelegt {Wright et al., J. Immunol. 141(1), (1),99–104 (1988)}.
TNFα wurde aus ähnlichen Gründen wie den bereits genannten auch mit anderen Viruserkrankungen in Verbindung gebracht, beispielsweise mit dem Zytomegalievirus (CMV), dem Influenzavirus, dem Adenoviurs und der Herpesvirenfamilie.
Es wird erwartet, daß die Verhinderung, Begrenzung oder Hemmung der TNFα-Produktion oder -Wirkung (z. B. eine Behandlung mit den Verbindungen dieser Erfindung) eine potente therapeutische Strategie für zahlreiche entzündliche, infektiöse, immunologische oder bösartige Erkrankungen darstellt. Diese schließen, ohne darauf beschränkt zu sein, die folgenden ein: septischen Schock, Sepsis, endotoxischen Schock, hämodynamischen Schock und septisches Syndrom, postischämischen Reperfusionsschaden, Malaria, mycobakterielle Infektion, Meningitis, Psoriasis, kongestive Herzinsuffizienz, Fibrose, Cachexie, Transplantatabstoßung, Krebs, Autoimmunerkrankungen, opportunistische Infektionen bei AIDS, rheumatoide Arthritis, rheumatoide Spondylitis, Osteoarthritis und andere arthritische Zustände, Crohn-Krankheit, Colitis ulcerosa, multiple Sklerose, systemischen Lupus erythrematodes, ENL bei Lepra, Strahlungsschaden, Asthma und hyperoxischen Alveolarschaden. Die Bemühungen, die auf die Unterdrückung der TNFα-Wirkungen gerichtet worden sind, reichen vom Einsatz von Steroiden, wie Dexamethason und Prednisolon, bis zur Verwendung von sowohl polyklonalen als auch monoklonalen Antikörpern (Beutler et al., Science 234, 470–474 (1985), WO 92/11383).
Der Nuclear Faktor kB (NFκB) ist ein pleiotroper Transkriptionsaktivator (Lenardo et al., Cell 1989, 58, 227–29). NFκB wurde als Transkriptionsaktivator mit einer Reihe von Erkrankungs- und Entzündungszuständen in Verbindung gebracht, und man nimmt an, daß er die Spiegel von Cyctokinen, einschließlich von TNFα, aber nicht darauf beschränkt, reguliert und außerdem ein Aktivator der HIV-Transkription ist (Dbaibo et al., J. Biol. Chem. 1993, 17762–66; Duh et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 1989, 86, 5974–78; Bachelerie et al., Nature, 1991, 350, 709–12; Boswas 7. et al., Acquired Immune Deficiency Syndrome, 1993, 6, 778–786; Suzuki et al. Biochem. And Biophys. Res. Comm. 1993,193, 277–83; Suzuki et al., Biochem. And Biophys. Res. Comm. 1992, 189, 1709–15; Suzuki et al., Biochem. Mol Bio. Int. 1993, 31 (4), 693–700; Shakhov et al., 1990, 171, 35–47; und Staat et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990, 87, 9943–47). Somit kann die Hemmung oder Aktivierung der NFκB-Bindung die Transkription von Cytokingen(en) regulieren und durch diese Modulierung und andere Mechanismen bei der Inhibierung einer Vielzahl von Krankheitszuständen nützlich sein. Die in diesem Patent beanspruchten Verbindungen können die Wirkung von NFκB im Zellkern hemmen und sind somit nützlich bei der Behandlung einer Reihe von Krankheiten, einschließlich von Asthma, rheumatoider Arthritis, rheumatoider Spondylitis, Osteoarthritis, anderen arthritischen Zuständen, septischem Schock, Sepsis, endotoxischem Schock, Graft-versus-Host-Erkrankung, Auszehrung, Crohn-Krankheit, Colitis ulcerosa, multipler Sklerose, systemischem Lupus erythrematodes, ENL bei Lepra, HIV, AIDS und opportunistischen Infektionen bei AIDS, jedoch nicht auf diese beschränkt.
TNFα und NFκB-Spiegel werden von einer reziproken Rückkopplungsschleife beeinflußt. Wie oben angegeben, beeinflussen die Verbindungen der vorliegenden Erfindung die Spiegel von sowohl TNFα als auch von NFκB. Derzeit weiß man jedoch nicht, wie die Verbindungen der vorliegenden Erfindung die Spiegel von TNFα, NFκB oder von beiden regulieren.
Zahlreiche Zellfunktionen können durch die Spiegel des cyclischen Adenosin-3',5'-monophosphats (cAMP) vermittelt werden. Diese Zellfunktionen können zu entzündlichen Zuständen und Krankheiten, einschließlich von Asthma, Inflammation und anderen Zuständen beitragen (Lowe und Cheng, Drugs of the Future, 17(9), 799–807, 1992). Es wurde gezeigt, daß die cAMP-Steigerung in Entzündungs-Leukozyten ihre Aktivierung und die anschließende Freisetzung der Entzündungsvermittler hemmt. Erhöhte cAMP-Spiegel führen auch zur Entspannung der glatten Atemwegsmuskulatur.
Der primäre Zellmechanismus für die Inaktivierung von cAMP ist der Abbau von cAMP durch eine Familie von Isoenzymen, die als cyclische Nucleotid-Phosphodiesterasen (PDE) bezeichnet werden (Beavo und Reitsnyder, Trends in Pharm., 11, 150–155, 1990). Man kennt sieben Mitglieder der PDE-Famile. Beispielsweise wurde nachgewiesen, daß die Hemmung von PDE Typ IV sowohl bei der Hemmung der Freisetzung von Entzündungsvennittlem als auch bei der Entspannung der glatten Atemwegsmuskulatur besonders wirksam ist. Somit würden Verbindungen, die spezifisch PDE IV hemmen, die gewünschte Entzündungshemmung und Entspannung der glatten Atemwegsmuskulatur mit einem Minimum an unerwünschten Nebenwirkungen, wie beispielsweise cardiovaskulären oder thrombozytischen Wirkungen, zeigen. Die derzeit verwendeten PDE IV-Hemmer zeigen bei akzeptablen therapeutischen Dosen keine selektive Wirkung.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind nützlich bei der Hemmung von Phosphodiesterasen, insbesondere von PDE III und PDE IV, und bei der Behandlung von Krankheitszuständen, die von diesen vermittelt werden.
Detaillierte Beschreibung
Die vorliegende Erfindung beruht auf der Entdeckung, daß eine Klasse von nichtpolypeptidischen Imiden, die hierin genauer beschrieben ist, die Wirkung von TNFα zu hemmen scheint.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel:
mit PDE- und TNFα-Hemmwirkung,
worin:
R¹ für -CH₂-, -CH₂CO- oder -CO- steht;
R² und R³ zusammengenommen für folgendes stehen: (i) Ethylen, das unsubstituiert oder mit 1–10 Kohlenstoffe aufweisendem Alkyl oder Phenyl substituiert ist; (ii) Vinylen, das mit zwei Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1–10 Kohlenstoffatomen und Phenyl, (iii) ein zweiwertiges Cycloalkyl mit 5–10 Kohlenstoffatomen, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Nitro, Cyano, Trifluormethyl, Carbethoxy, Carbomethoxy, Carbopropoxy, Acetyl; Carbamoyl, das unsubstituiert oder mit Alkyl mit 1–3 Kohlenstoffatomen substituiert ist; Acetoxy, Carboxy, Hydroxy, Amino; substituiertem Amino; Alkyl mit 1–10 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1–10 Kohlenstoffatomen, Norbornyl, Phenyl oder Halo; oder (iv) Cyclohexenyl;
R⁴ Phenyl ist, das mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkoxy mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl oder Bicycloalkoxy mit 3 bis 10 Kohlenstoffatomen; und
R⁵ für -COX, -CN, -CH₂COX, Alkyl mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, Phenyl, -CH₂OR, -CH₂phenyl oder -CH₂OH steht,
wobei X für NH₂, OH, NHR, R oder OR⁶ steht,
wobei R eine Alkylgruppe ist, die 1 bis 6 Kohlenstoffatome enthält; und
wobei R⁶ eine Alkylgruppe, die 1 bis 18 Kohlenstoffatome enthält, oder Benzyl ist;
unter zwar unter folgenden Voraussetzungen:

(a) wenn R¹ für -CO- steht und R⁵ Alkyl ist, dann sind R² und R³ zusammengenommen nicht Vinylen; und
(b) wenn R¹ für -CO- oder -CH₂ steht und R⁵ für -CH₂OR oder CH₂OH steht, dann ist R⁴ nicht Phenyl, das mit einer oder mehreren Alkoxygruppen mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen substituiert ist.

Der Ausdruck Alkyl, wie er hierin verwendet wird, bezeichnet eine einwertige, gesättigte, verzweigte oder gerade Kohlenwasserstoff-Kette. Solange nichts anderes angegeben ist, können solche Ketten 1 bis 18 Kohlenstoffatome enthalten. Beispiele für solche Alkylgruppen sind Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, sec-Butyl, tert-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Neopentyl, tert-Pentyl, Hexyl, Isohexyl, Heptyl, Octyl, Nonyl, Decyl, Undecyl, Dodecyl, Tridecyl, Tetradecyl, Pentadecyl, Hexadecyl, Heptadecyl, Octadecyl und dergleichen. Wenn als „Nieder-" bezeichnet, enthält die Alkylgruppe 1 bis 6 Kohlenstoffatome. Der gleiche Kohlenstoffgehalt trifft auch auf den Oberbegriff „Alkan" und auf abgeleitete Ausdrücke wie „Alkoxy" zu.
Der Ausdruck Cycloalkyl (oder cyclisches Alkyl), wie er hierin verwendet wird, bezeichnet eine einwertige gesättigte cyclische oder bicyclische Kohlenwasserstoffkette. Solange nichts anderes angegeben ist, können solche Ketten 1 bis 18 Kohlenstoffatome enthalten. Beispiele für solche Cycloalkylgruppen sind Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl, Cycloheptyl, Cyclooctyl, Cyclononyl, Cyclodecyl, Cycloundecyl, Cyclododecyl, Cyclotridecyl, Cyclotetradecyl, Cyclopentadecyl, Cyclohexadecyl, Cycloheptadecyl, Cyclooctadecyl, cyclische Terpene und dergleichen. Wenn mit „Nieder-" bezeichnet, enthalten die Cycloalkylgruppen 3 bis 6 Kohlenstoffatome. Der gleiche Kohlenstoffgehalt trifft auf den Oberbegriff „Cycloalkan" und auf abgeleitete Ausdrücke wie „Cycloalkoxy" zu.
Der Ausdruck substituiertes Amino, wie er hierin verwendet wird, bezeichnet ein einwertiges Amin mit einem oder zwei Substituenten, die jeweils unabhängig ausgewählt sind aus den anderen Formen der Gruppe bestehend aus Nitro, Cyano, Trifluormethyl, Carbethoxy, Carbomethoxy, Carbopropoxy, Acetyl, Carbamoyl, Acetoxy, Carboxy, Hydroxy, Amino, Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen oder Phenyl.
Typische Verbindungen der Erfindung umfassen:
Methyl-3-succinimidyl-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-succinimidyl-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-succinimidyl-(3-cyclopentoxy-4-methoxyphenyl)propionat,
Ethyl-3-succinimidyl-(3,4-diethoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-succinimidyl-(4-methoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-(cis-1,2,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat,
3-(cis-1,2,5,6-Tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionamid,
Methyl-3-(cis-1,2,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-ethoxyphenyl)propionat,
Ethyl-3-(cis-hexahydrophthalimido)-3-(3,4-ethoxyphenyl)propionat,
Propyl-3-(cis-hexahydrophthalimido)-3-(3-cyanophenyl)propionat,
Ethyl-3-(4'-amino-cis-hexahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat,
3-(4'-Amino-cis-hexahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionitril,
Ethyl-3-maleimido-3-(3,4-diethoxyphenyl)propionat,
3-Maleimido-3-(3,4-diethoxyphenyl)propionamid,
Methyl-3-(4-amino-3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-(3-amino-3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-diethoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-(3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(4-methoxyphenyl)propionat,
Methyl-3-(3-amino-3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propionat,
und
3-(3-Amino-3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3-hydroxyphenyl)propionnitril.
Eine erste bevorzugte Untergruppe betrifft Verbindungen, in denen R⁴ Aryl ist und R⁵ für CH₂CO₂CH₃, CN oder CH₂CONH₂ steht.
Die Verbindungen können unter Aufsicht von qualifiziertem Personal eingesetzt werden, um die unerwünschten Wirkungen von TNFα zu hemmen. Die Verbindungen können oral, rektal oder parenteral, allein oder in Kombination mit anderen therapeutischen Mitteln einschließlich von Antibiotika, Steroiden usw. an Säuger (einschließlich des Menschen) verabreicht werden, die einer Behandlung bedürfen. Orale Verabreichungsformen schließen Tabletten, Kapseln, Dragees und ähnlich geformte gepreßte pharmazeutische Formen ein. Isotonische Salzlösungen, die 20–100 Milligramm/Milliliter enthalten, können für die parenterale Verabreichung verwendet werden, welche die intramuskulären, intrathekalen, intravenösen und intraarteriellen Verabreichungswege einschließt. Die rektale Verabreichung kann mit Hilfe von Suppositorien durchgeführt werden, die mit herkömmlichen Trägern, wie Kakaobutter, formuliert wurden.
Die Dosierungen müssen für die spezielle Indikation, das Alter, das Gewicht und die allgemeine körperliche Verfassung des Patienten sowie die erwünschte Antwort titriert werden, aber allgemein liegen die Dosen bei etwa 1 bis etwa 500 Milligramm/-Tag, die je nach Bedarf einmal oder auf mehrere Male verteilt pro Tag verabreicht werden. Allgemein kann zu Beginn der Behandlung eine Dosis übernommen werden, von der bekannt ist, daß sie für die Störung der TNFα-Aktivität durch die Verbindungen der vorliegenden Erfindung bei anderen TNFα-vermittelten Krankheitszuständen wirksam ist. Behandelte Individuen werden regelmäßig auf die Zahl ihrer T-Zellen und ihre T4/T8-Verhältnisse untersucht und/oder es werden Viremiemessungen durchgeführt, beispielsweise bezüglich der Spiegel der Umkehrtranskriptase oder von viralen Proteinen und/oder bezüglich der Progression von Problemen, die mit der Cytokin-vermittelten Erkrankung einhergehen, wie Cachexie oder Muskeldegeneration. Wenn im Anschluß an die übliche Behandlung keine Wirkung zu beobachten ist, wird die Höhe des die Cytokin-Aktivität störenden Mittels erhöht, z. B. wöchentlich um 50 Prozent.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung können auch topisch bei der Behandlung oder Prophylaxe topischer Krankheitszustände eingesetzt werden, die durch eine übermäßige TNFα-Produktion vermittelt oder verschlimMert werden, beispielsweise bei viralen Infektionen wie denen, die durch die Herpesviren verursacht werden, oder bei viraler Konjunktivitis usw.
Die Verbindungen können auch bei der veterinären Behandlung von Säugern außer dem Menschen verwendet werden, bei denen die TNFα-Produktion verhindert oder gehemmt werden muß. TNFα-vermittelte Erkrankungen bei Tieren, die therapeutisch oder prophylaktisch behandelt werden müssen, schließen Krankheitszustände ein wie die oben genannten, aber insbesondere virale Infektionen. Beispiele sind unter anderem das Feline Immunschwächevirus, das infektiöse Pferdeanämie-Virus, das Schaf/Ziege-Arthritisvirus, das Visnavirus und das Maedivirus, ebenso wie andere Lentiviren.
Einige dieser Verbindungen können eines oder mehrere Chiralitätszentren besitzen und als optische Isomere existieren. Sowohl die Razemate dieser Isomere und die einzelnen Isomere an sich, als auch Diastereoisomere, bei denen zwei oder mehr chirale Zentren vorliegen, liegen im Bereich der vorliegenden Erfindung. Die Razemate können als solche verwendet werden oder können mechanisch in ihre einzelnen Isomere getrennt werden, beispielsweise durch Chromatographie unter Verwendung eines chiralen Absorbens. Als Alternative können die einzelnen Isomere in chiraler Form erzeugt werden oder chemisch aus einer Mischung abgetrennt werden, und zwar durch Bilden von Salzen mit einer chiralen Säure, beispielsweise die einzelnen Enantiomere von 10-Camphersulfonsäure, Camphersäure, alpha-Bromcamphersäure, Methoxyessigsäure, Weinsäure, Diacetylessigsäure, Äpfelsäure, Pyrrolidon-5-carbonsäure und dergleichen, und anschließendes Befreien einer oder beider gelöster Basen, optionales Wiederholen des Verfahrens, um entweder eines oder beide Isomere im Wesentlichen frei vom jeweils anderen zu erhalten. d. h. in einer Form, die eine optische Reinheit von > 95% hat.
Die Verhinderung oder Hemmung der TNFα-Produktion durch diese Verbindungen kann zweckmäßig anhand von in der Technik bekannten Verfahren analysiert werden. Beispielsweise wurden TNFα-Inhibierungs-Assays in LPS-stimuliertem PBMC wie folgt durchgeführt:
PBMC-Isolierung: PBMC von normalen Spendern wurde anhand einer Ficoll/-Hypaque-Dichtegradientenzentrifugation erhalten. Die Zellen wurden in RPMI kultiviert, das mit 10% AB+-Serum, 2 mM L-Glutamin, 100 E/ml Penicillin und 100 mg/ml Streptomycin ergänzt war.
PBMC-Suspension: Die Arzneistoffe wurden in DMSO (Sigma Chemical) gelöst, weitere Verdünnungen wurden in ergänztem RPMI durchgeführt. Die endgültige DMSO-Konzentration in Anwesenheit oder Abwesenheit von Arzneistoffen in den PBMC-Suspensionen betrug 0,25 Gew.-%. Die Arzneistoffe wurden als halblogarithmische Verdünnungen ausgehend von 50 mg/ml analysiert. Die Arzneistoffe wurden eine Stunde vor der Zugabe von LPS zu PBMC (10⁶ Zellen/ml) in Platten mit 96 Vertiefungen gegeben.
Zellstimulierung: PBMC (10⁶ Zellen/ml) wurde in Abwesenheit oder Anwesenheit von Arzneistoffen durch eine Behandlung mit 1 μg/ml LPS von Salmonella minnesota 8595 (List Biological Labs, Campbell, CA) stimuliert. Die Zellen wurden dann bei 37°C 18–20 Stunden lang inkubiert. Dann wurden die Überstände entnommen und sofort auf ihre TNFα-Spiegel analysiert oder bei –70°C (nicht länger als 4 Tage) eingefroren, bis sie analysiert wurden.
Cytokin-Bestimmung: Die TNFα-Konzentration im Überstand wurde durch human TNFα-ELISA-Kits (ENDOGEN, Boston, MA) gemäß den Herstellerangaben bestimmt.
Die Verbindungen können anhand von Verfahren hergestellt werden, die allgemein für die Herstellung von Imiden bekannt sind. Allgemeine Reaktionsschemata werden durch die folgenden Formeln dargestellt:
Die folgenden Beispiele dienen dazu, die Art der Erfindung näher zu beschreiben, aber sollten nicht als Beschränkung von deren Bereich aufgefaßt werden, da dieser Bereich ausschließlich von den beigefügten Ansprüchen definiert ist.
Beispiel 1
N-[1-(3,4-Dimethoxyphenyl)-2-carbomethoxymethan]-3-carboxypropionamid
Zu einer Suspension von Bernsteinsäureanhydrid (0,50 Gramm, 5,0 mMol) und Methyl-3-amino-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat-Hydrochlorid (1,38 Gramm, 5,0 mMol) in Methylenchlorid (20 ml) wurde Triethylamin (0,75 ml, 5,4 mMol) gegeben, nach 3–4 Minuten wurde die Mischung homogen. Die Lösung wurde 1,5 Stun den lang bei Raumtemperatur gerührt. Der Forschritt der Reaktion wurde mittels TLC (5% Methanol/Methylenchlorid, UV, I₂) überwacht, das Produkt und das Ausgangsmaterial hatten ähnlich R_f-Werte, aber das Ausgangsmaterial wurde von Iod dunkelgelb gefärbt. Die Lösung wurde nacheinander mit 5 N wäßriger Chlorwasserstoffsäure (15 ml) und Wasser (10 ml) gewaschen. Die resultierende organische Schicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, und in vacuo aufkonzentriert, was 1,2 Gramm (70%) des Produkts als weißen Schaum ergab; ¹H NMR (CDCl₃) δ 7,04–6,89 (m, 1H), 6,88 bis 6,72 (m, 3H), 5,93–5,25 (m, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,01–2,71 (m, 2H), 2,76–2,39 (m, 4H); ¹³C NMR (CDCl₃ ) δ 176,2, 171,8, 171,4, 149,0, 148,5, 132,8, 118,2, 111,2, 109,9, 55,9, 55,8, 51,9, 48,6, 39,8, 30,7, 29,5.
Methyl-3-succinimidyl(3,4-dimethoxyphenyl)propionat
Eine Mischung aus N-[1-(3,4-Dimethoxyphenyl)-2-carbomethoxymethan]-3-carboxypropionamid (0,61 Gramm, 1,8 mMol) und Natriumacetat (0,07 Gramm, 0,9 mMol) in Essigsäureanhydrid (8 ml) wurde 30 Minuten lang refluxiert. Der Fortschritt der Reaktion wurde durch TLC (10% Methanol/Methylenchlorid, UV) überwacht, und war nach 30 Minuten abgeschlossen. Die Reaktionsmischung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, in Eiswasser (50 ml) gegossen und 15 Minuten lang gerührt. Die Mischung wurde in Ether (25 ml) absorbiert und wurde nacheinander mit einer Lösung von gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat (25 ml), Kochsalz (10 ml), Natriumbicarbonat (25 ml) und Kochsalz (10 ml) gewaschen. Die Etherschicht wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und in vacuo aufkonzentriert, was 0,36 Gramm Rohprodukt als braunes Öl lieferte. Das Rohprodukt wurde durch Blitzchromatographie (Silicagel, 10% Ethylacetat/Methylenchlorid) getrocknet, wodurch man 0,23 Gramm (40%) Produkt als Öl erhielt, das nach dem Kühlen zu einem weißen Feststoff erstarrte; ¹H NMR (CDCl₃) δ 7,18–7,01 (m, 2H), 6,90–6,74 (m, 1H), 5,68–5,54 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,83–3,62 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,22–3,04 (m, 1H), 2,65 (s, 4H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 177,1, 171,1, 148,9, 148,8, 130,5, 120,5, 111,3, 110,9, 55,9, 55,8, 51,9, 51,4, 34,8, 27,9; Anal. Berechn. für C₁₆H₁₉NO₆. Theroretisch: C, 59,81; H, 5,96; N, 4,36. Gefunden: C, 60,00; H, 5,98; N, 4,26.
Beispiel 2
Methyl-3-(cis-1,2,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat
Eine gerührte Mischung aus cis-1,2,5,6-Tetrahydrophthalsäureanhydrid (0,76 g, 5,0 mMol), Methyl-3-amino-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat-Hydrochlorid (1,38 g, 5,0 mMol) und Natriumacetat (0,41 Gramm, 5,0 mMol) in 20 ml Essigsäure unter N₂ wurde 20 Stunden lang am Rückfluß erwärmt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde in vacuo aufkonzentriert, und der Rest wurde mit 25 ml Methylenchlorid verdünnt, und dann wurden 25 ml gesättigtes Natriumbicarbonat portionsweise zugefügt, und die resultierende Mischung wurde 30 Minuten lang gerührt. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet (Natriumsulfat) und in vacuo aufkonzentriert, was das Rohprodukt als Öl ergab. Das Rohprodukt wurde durch Blitzchromatographie gereinigt (Silicagel, 1/9 Ethylacetat/Hexane), was 0,85 Gramm (46%) Methyl-3-(cis-1,2,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat als Feststoff lieferte: Schmelzp. 100–101,5°C; ¹H NMR (CDCl₃/TMS) δ 7,00 (m, 2H), 5,83 (m, 2H), 5,77 (dd, J = 10,0, 5,9 Hz, 1H, CH), 3,85 (s, 6H, 2OCH₃). 3,62 (dd, J = 10,0, 16,4 Hz, 1H), 3,64 (s, 3H, OCH₃), 3,10 (dd, J = 16,4, 5,9 Hz, 1H), 3,00 (m, 2H), 2,62–2,45 (m, 2H), 2,30–2,22 (m, 2H); ¹³C NMR (CDCl₃/TMS) δ 180,0, 179,7, 170,3, 148,8, 130,6, 127,6, 127,5, 120,1, 111,0, 110,8, 55,8, 55,8, 51,8, 51,4, 38,8, 35,3, 23,5, 23,4; TLC (1/9 EtOAc/Hexane, UV), R_f = 0,34. Anal. Berechn. für C₂₀H₂₃NO₆. Theorie C, 64,33; H, 6,21; N, 3,75. Gefunden C, 64,29; H, 6,19; N, 3,68.
Beispiel 3
Methyl-3-(cis-hexahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat
Eine gerührte Mischung aus 1,2,5,6-Hexahydrophthalsäureanhydrid (0,77 g, 5,0 mMol), Methyl-3-amino-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat-Hydrochlorid (1,38 g, 5,0 mMol) und Natriumacetat (0,40 Gramm, 4,9 mMol) in 20 ml Essigsäure unter N₂ wurde 20 Stunden lang am Rückfluß erwärmt. Die abgekühlte Reaktionsmischung wurde in vacuo aufkonzentriert, und der Rückstand wurde mit 25 ml Methylenchlorid verdünnt, und dann wurden 25 ml ges. Natriumbicarbonat portionsweise zugegeben, und die resultierende Mischung wurde 30 Minuten lang gerührt. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet (Natriumsulfat) und aufkonzentriert, was das Rohprodukt als Öl lieferte. Das Rohprodukt wurde mittels Blitzchromatographie (Silicagel, 1/9 EtOAc/Hexane) gereinigt, was 0,72 Gramm (38%) Methyl-3-(cis-hexahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat als gebrochen weißen Feststoff (Wachs) ergab: Schmelze. 92,5–95°C; ¹H NMR (CDCl₃/TMS) δ 7,02 (m, 2H, Ar), 6,65 (m, 1H, Ar), 5,56 (dd, J = 5,5, 10,5 Hz, 1HCHN), 3,86 (2s, 6H, 2OCH₃), 3,74 (dd, J = 16,5, 10,5 Hz, 1H), 3,66 (s, 3H, OCH₃), 3,08 (dd, J = 5,5, 16,5 Hz, 1H, CHCO), 2,77 (m, 2H, Brückenkopf Hs), 1,87–1,55 (m, 4H), 1,5–1,3 (m, 4H); ¹³NMR (CDCl₃/TMS) δ 179,5, 179,4, 171,1, 148,9, 148,8, 130,9, 120,1, 111,0, 110,9, 55,9, 55,8, 51,8, 51,0, 39,6, 35,2, 23,6, 23,5, 21,6; TLC (1/9 EtOAc/Hexane, UV), R_f = 0,36. Anal. Berechn. für C₂₀H₂₅NO₆. Theorie: C, 63,99; H, 6,71; N, 3,73. Gefunden: C, 63,89; H, 6,81; N, 3,61.
Beispiel 4
Methyl-N-(maleinsäure)-3-amino-3-(3',4'-dimethoxyphenyl)propionat
Zu einer gerührten Suspension von Methyl )-3-amino-3-(3',4'-dimethoxyphenyl)-propionat-Hydrochlorid (1,38 Gramm, 5,00 mMol) und Maleinsäureanhydrid (0,49 g, 5,0 mMol) in Methylenchlorid (20 ml) wurden 0,75 ml Triethylamin (5,4 mMol) gegeben. Nach 1 Stunde wurde die Reaktionsmischung mit 0,5 N Chlorwasserstoffsäure (15 ml) und Wasser (10 ml) gewaschen. Die organische Schicht wurde getrocknet (Natriumsulfat) und aufkonzentriert, was 1,59 Gramm (94%) Produkt als weißen Schaum ergab: ¹H NMR (dmso-d₆, 250 MHZ) δ 14,27 (br s, 1H), 9,35 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,05–6,80 (m, 3H), 6,38 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 6,26 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 5,23 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 2,85 (m, 2H), ¹³C (dmso-d₆, 250 MHZ) 170,4, 165,9, 164,2, 148,7, 148,2, 133,2, 132,4, 131,3, 118,6, 111,6, 110,6, 55,5, 51,5, 49,7.
Methyl-3-maleimido-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat
Eine Mischung aus Methyl-N-(maleinsäure)-3-amino-3-(3',4'-dimethoxyphenyl)propionat (1,0 Gramm, 1,5 mMol) und Natriumacetat (1,48 mMol) in 7,5 ml Essigsäureanhydrid wurde bei Raumtemperatur 2 Stunden lang gerührt, dann 20 Minuten lang am Rückfluß erwärmt. Die abgekühlte (10°C) Reaktionsmischung wurde in 50 ml Eiswasser gegossen und 15 Minuten lang gerührt und dann mit 50 ml Diethylether absorbiert. Die Etherschicht wurde nacheinander mit Natriumbicarbonat (20 ml) und Kochsalzlösung (20 ml) gewaschen. Die Etherschicht wurde über Natriumsulfat getrocknet und in vacuo aufkonzentriert, was ein hellbraunes Ol ergab, das durch Blitzchromatographie (1/1 Ethylacetat/Hexane, Silicagel) gereinigt wurde, was 0,47 g (54%) Produkt als Wachs lieferte: Schmelzp.: 75–76°C; ¹H NMR (dmso-d₆, 250 MHZ) δ 7,02 (m, 2H, Ar), 6,80 (m, 1H, Ar), 6,64 (s, 2H, Vinyl), 3,87 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,7 bis 3,58 (m, 4H, CH, CO₂CH₃), 3,12 (dd, J = 5,8, 16,5 Hz, 1H), ¹³C (dmso-d₆, 250 MHZ): 170,9, 170,5, 149,0, 148,9, 134,0, 131,0, 120,1, 111,0, 110,9, 55,9, 55,8, 51,9, 50,7, 35,9. Anal. Berechn. für C₁₆H₁₇N₁O₆. Theoretisch: C, 60,18, H, 5,37, N, 4,39. Gefunden: C, 60,18; H, 5,40; N, 4,32.
Beispiel 5
Methyl-3-(3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat
Zu einer gerührten Suspension von 3,4,5,6-Tetrahydrophthalsäureanhydrid (0,38 Gramm, 2,5 mMol) und Methyl-3-amino-3-(3,4-dimethoxyphenyl)propionat-Hydrochlorid (0,69 Gramm, 2,5 mMol) in Essigsäure (10 ml) wurde Natriumacetat (0,21 Gramm, 2,5 mMol} gegeben. Die Suspension wurde über Nacht unter Stickstoff refluxiert. Die Essigsäure wurde in vacuo entfernt, was ein orange-farbenes Öl ergab, das in Wasser (5 ml) aufgenommen wurde, und der pH wurde mit einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung auf 7 eingestellt. Die resultierende Mischung wurde mit Methylenchlorid (3 × 20 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Extrakte wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und in vacuo aufkonzentriert, was 0,62 g Rohprodukt als gelbes Öl ergab. Das Rohprodukt wurde durch Blitzchromatgraphie (Silicagel, 35% Ethylacetat/Hexan) gereinigt, und der resultierende Feststoff wurde in vacuo (60°C, < 1 mm) getrocknet, was 0,22 g (23%) Produkt als blaßgelben Feststoff ergab: ¹H NMR (CDCl₃ δ 7,09–6,99 (m, 2H), 6,84–6,75 (m, 1H), 5,60–5,48 (m, 1H), 3,87 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,71–3,55 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,23–3,06 (m, 1H), 2,38–2,21 (m, 4H), 1,85–1,64 (m, 4H); ¹³C NMR (CDCl₃) δ 171,1, 170,8, 148,9, 148,7, 120,1, 111,2, 110,9, 55,9, 55,8, 50,4, 36,1, 21,2, 19,9. Anal. Berechn. für C₂₀HN₂₃O₆. Theoretisch: C, 64,33; H, 6,21; N, 3,75. Gefunden: C, 64,25; H, 6,10; N, 3,70.
Beispiel 6
Methyl-3-(3,4,5,6-tetrahydrophthalimido)-3-(3'-ethoxy-4'-methoxyphenyl)propionat
3,4,5,6-Tetrahydrophthalsäureanhydrid (0,61 g, 4,0 mMol) und Methyl-3-amino-3-(3-ethoxy-4-methoxyphenyl)propionat (1 g, 4 mMol) wurden 5 Minuten lang zusammen gerührt und geschmolzen. Die flüssige Schmelze ließ man abkühlen. Das resultierende Rohprodukt wurde durch Blitzchromatographie (Silicagel, 3% Ethylacetat/-Methylenchlorid) gereinigt, was 0,78 g nicht ganz reinen Feststoff ergab. Der Feststoff wurde umkristallisiert (Hexan/Ethylacetat), was 0,6 g (39%) Produkt ergab; Schmelzp. 104,5–106,0°C; ¹H NMR (CDCl₃) 7,09–6,97 (m, 2H), 6,85–6,76 (m, 1H), 5,52 (dd, J = 6,9 Hz, 1H), 4,10 (q, J = 7 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,61 (dd, J = 9,8, 16 Hz, 1H), 3,14 (dd, J = 6,16 Hz, 1H), 2,38–2,20 (m, 4H), 1,83–1,64 (m, 4H), 1,45 (t, J = 7 Hz, 3H); ¹³C NMR (CDCl₃) 171,1, 170,8, 148,9, 148,1, 141,4, 131,5, 120,0, 112,5, 111,2, 64,3, 55,8, 51,8, 50,3, 36,1, 21,2, 19,9, 14,7; Anal. berechn. für C₂₁H₂₅NO₆. Theoretisch: C, 65,10; H, 6,50; N, 3,62. Gefunden. C, 65,28; H, 6,46, N, 3,50.
Beispiel 7
1-(3,4,5,6-Tetrahydrophthalimido)-1-(3'-ethoxy-4'-methoxyphenyl)propan
3,4,5,6-Tetrahydrophthalsäureanhydrid (0,8 g, 5,0 mMol) und 1-(3'-Ethoxy-4'-methoxyphenyl)propylamin (1 g, 5 mMol) wurden 5 Minuten lang zusammen gerührt und geschmolzen. Die flüssige Schmelze ließ man abkühlen. Das resultierende Rohprodukt wurde durch Blitzchromatographie (Silicagel, 2% Ethylacetat/Methylenchlorid} gereinigt, was 0,6 g (35%) Produkt als Öl ergab, das langsam erstarrte; Schmelzp. 51,5–56,5°C; ¹H NMR (CDCl₃) 7,16–6,94 (m, 2H), 6,87–6,71 (m, 1H), 4,90 (dd, J = 7, 9,2 Hz, 1H), 4,10 (q, J = 7 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,54–2,09 (m, 6H), 1,89–1,64 (m, 4H), 1,45 (t, J = 7 Hz, 3H), 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 3H}; ¹³CNMR (CDCl₃) 171,1, 148,6, 147,9, 141,1, 132,7, 120,4, 112,7, 110,9, 64,2, 56,1, 55,7, 24,6, 21,2, 19,8, 14,7, 11,5: Anal. Berechn. für C₂₀H₂₅NO₄. Theoretisch: C, 69,95; H, 7,34; N, 4,08 Gefunden C, 70,03; H, 7,11; N 4,07.
Beispiel 8
Tabletten, die jeweils 50 Milligramm aktiven Inhaltsstoff enthalten, können auf die folgende Weise hergestellt werden: Bestandteile (für 1000 Tabletten)

aktiver Inhaltsstoff 50,0 Gramm

Lactose 50,7 Gramm

Weizenstärke 7,5 Gramm

Polyethylenglycol 6000 5,0 Gramm

Magnesiumstearat 1,8 Gramm

entmineralisiertes Wasser qs.
Die festen Inhaltsstoffe werden zuerst durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,6 mm getrieben. Dann werden der aktive Inhaltsstoff, die Lactose, das Talkum, das Magnesiumstearat und die Hälfte der Stärke gemischt. Die andere Hälfte der Stärke wird in 40 Milliliter Wasser suspendiert, und diese Suspension wird einer kochenden Lösung des Polyethylenglycols in 100 Milliliter Wasser zugegeben. Die resultierende Paste wird zu den pulverförmigen Substanzen gegeben, und die Mischung wird granuliert, falls nötig unter Zugabe von Wasser. Das Granulat wird über Nacht bei 35 °C getrocknet, durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 1,2 mm getrieben und komprimiert, um Tabletten mit einem Durchmesser von ungefähr 6 mm zu bilden, die auf beiden Seiten konkav sind.
BEISPIEL 9
Tabletten, die jeweils 100 Milligramm aktiven Inhaltsstoff enthalten, können auf die folgende Weise hergestellt werden: Bestandteile (für 1000 Tabletten)

aktiver Inhaltsstoff 100,0 Gramm

Lactose 100,0 Gramm

Weizenstärke 47,0 Gramm

Magnesiumstearat 3,0 Gramm
Sämtliche Inhaltsstoffe werden zuerst durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,6 mm getrieben. Dann werden der aktive Inhaltsstoff, die Lactose, das Magnesiumstearat und die Hälfte der Stärke vermischt. Die andere Hälfte der Stärke wird in 40 Milliliter Wasser suspendiert, und diese Suspension wird zu 100 Millilitern kochendem Wasser gegeben. Die resultierende Paste wird den pulverförmigen Substanzen zugesetzt, und die Mischung wird granuliert, falls nötig unter Zugabe von Wasser. Das Granulat wird über Nacht bei 35°C getrocknet, durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 1,2 mm getrieben und komprimiert, um Tabletten mit einem Durchmesser von ungefähr 6 mm zu formen, die auf beiden Seiten konkav sind.
BEISPIEL 10
Kautabletten, die jeweils 75 mg aktiven Inhaltsstoff enthalten, können auf die folgende Weise hergestellt werden: Zusammensetzung (für 1000 Tabletten)

aktiver Inhaltsstoff 75,0 Gramm

Mannitol 230,0 Gramm

Lactose 150,0 Gramm

Talkum 21,0 Gramm

Glycin 12,5 Gramm

Stearinsäure 10,0 Gramm

Saccharin 1,5 Gramm

5% Gelatinelösung qs.
Alle festen Inhaltsstoffe werden zuerst durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,25 mm getrieben. Das Mannitol und die Lactose werden gemischt, unter Zugabe der Gelatinelösung granuliert, durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 2 mm getrieben, bei 50°C getrocknet und wieder durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 1,7 mm getrieben. Der aktive Inhaltsstoff, das Glycin und das Saccharin werden gründlich vermischt, das Mannitol, das Lactosegranulat, die Stearinsäure und das Talkum werden zugegeben, und das Ganze wird gründlich gemischt und komprimiert, um Tabletten mit einem Durchmesser von ungefähr 10 mm zu formen, die auf beiden Seiten konkav sind und eine Bruchrille auf der Oberseite aufweisen.
BEISPIEL 11
Tabletten, die jeweils 10 Milligramm aktiven Inhaltsstoff enthalten, können auf die folgende Weise hergestellt werden: Bestandteile (für 1000 Tabletten)

aktiver Inhaltsstoff 10,0 Gramm

Lactose 328,5 Gramm

Maisstärke 17,5 Gramm

Polyethylenglycol 6000 5,0 Gramm

Talkum 25,0 Gramm

Magnesiumstearat 4,0 Gramm

entmineralisiertes Wasser qs.
Zuerst werden die festen Inhaltsstoffe durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,6 mm getrieben. Dann werden der aktive Inhaltsstoff, die Lactose, das Talkum, das Magnesiumstearat und die Hälfte der Stärke innig vermischt. Die andere Hälfte der Stärke wird in 65 Milliliter Wasser suspendiert, und diese Suspension wird einer kochenden Lösung des Polyethylenglycols in 260 Milliliter Wasser zugegeben. Die resultierende Paste wird den pulverförmigen Substanzen zugegeben, und das Ganze wird gemischt und granuliert, falls nötig unter Zugabe von Wasser. Das Granulat wurde über Nacht bei 35 °C getrocknet, durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 1,2 mm getrieben und komprimiert, um Tabletten zu formen, die einen Durchmesser von ungefähr 10 mm aufweisen und die an beiden Seiten konkav sind und eine Bruchrille an der Oberseite aufweisen.
BEISPIEL 12
Gelatinekapseln mit trockener Füllung, die jeweils 100 Milligramm des aktiven Inhaltsstoffs enthalten, können auf die folgende Weise hergestellt werden: Bestandteile (für 1000 Tabletten)

aktiver Inhaltsstoff 100,0 Gramm

mikrokristalline Cellulose 30,0 Gramm

Natriumlaurylsulfat 2,0 Gramm

Magnesiumstearat 8,0 Gramm
Das Natriumlaurylsulfat wird durch ein Sieb mit einer Maschenbreite von 0,2 mm in den aktiven Inhaltsstoff gesiebt, und die beiden Komponenten werden 10 Minuten lang gründlich vermischt. Die mikrokristalline Cellulose wird dann durch ein Sieb mit einer Maschenweite von 0,9 mm zugegeben, und das Ganze wird wiederum 10 Minuten lang innig vermischt. Schließlich wird das Magnesiumstearat durch ein Sieb mit einer Weite von 0,8 mm zugegeben, und nach einem weiteren Mischen von 3 Minuten, wird die Mischung in Portionen von jeweils 140 Milligramm in Trockenfüllungs-Gelatinekapseln der Form 0 (verlängert) eingefüllt.
BEISPIEL 13
Eine 0,2%ige Injektions- oder Infusionslösung kann beispielsweise auf die folgende Weise hergestellt werden:

aktiver Inhaltsstoff 5,0 Gramm Natriumchlorid 22,5 Gramm

Phosphatpuffer pH 7,4 300,0 Gramm entmineralisieries Wasser auf 2500,0 Milliliter
Der aktive Inhaltsstoff wird in 1000 Milliliter Wasser gelöst und durch einen Mikrofilter filtriert oder in 1000 ml H₂O gelöst. Die Pufferlösung wird zugegeben, und das Ganze wird mit Wasser auf 2 500 Milliliter aufgefüllt. Um Verabreichungseinheiten zu bilden, werden jeweils Portionen von 1,0 oder 2,5 Milliliter in Glasampullen (die jeweils 2,0 bzw. 5,0 Milligramm aktiven Inhaltsstoff enthalten) eingeführt.

Claims

Verbindung der Formel:
mit PDE- und TNFα-Hemmwirkung, worin: R¹ für -CH₂ , -CH₂CO- oder -CO- steht; R² und R³ zusammengenommen für folgendes stehen: (i} Ethylen, das unsubstituiert oder mit 1–10 Kohlenstoffe aufweisendem Alkyl oder Phenyl substituiert ist; (ii) Vinylen, das mit zwei Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkyl mit 1–10 Kohlenstoffatomen und Phenyl, (iii) ein zweiwertiges Cycloalkyl mit 5–10 Kohlenstoffatomen, das unsubstituiert oder mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Nitro, Cyano, Trifluormethyl, Carbethoxy, Carbomethoxy, Carbopropoxy, Acetyl; Carbamoyl, das unsubstituiert oder mit Alkyl mit 1–3 Kohlenstoffatomen substituiert ist; Acetoxy, Carboxy, Hydroxy, Amino; substituiertem Amino; Alkyl mit 1–10 Kohlenstoffatomen, Alkoxy mit 1–10 Kohlenstoffatomen, Norbornyl, Phenyl oder Halo; oder (iv) Cyclohexenyl; R⁴ Phenyl ist, das mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, die jeweils unabhängig voneinander ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus Alkoxy mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl oder Bicycloalkoxy mit 3 bis 10 Kohlenstoffatomen; und R⁵ für -COX, -CN, -CH₂COX, Alkyl mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, Phenyl, -CH₂OR, -CH₂phenyl oder -CH₂OH steht, wobei X für NH₂, OH, NHR, R oder OR⁶ steht, wobei R eine Alkylgruppe ist, die 1 bis 6 Kohlenstoffatome enthält; und wobei R⁶ eine Alkylgruppe, die 1 bis 18 Kohlenstoffatome enthält, oder Benzyl ist; unter zwar folgenden Voraussetzungen: (a) wenn R¹ für -CO- steht und R⁵ Alkyl ist, dann sind R¹ und R³ zusammengenommen Vinylen; und (b) wenn R¹ für -CO- oder -CH₂ steht und R⁵ für -CH₂OR oder CH₂OH steht, dann ist R⁴ Phenyl, das mit einer oder mehreren Alkoxygruppen mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen substituiert ist.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R² und R³ zusammengenommen Cyclohexenyl sind.
Verbindung nach Anspruch 2, worin das Cyclohexenyl substituiert ist.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R² und R³ zusammengenommen Cyclohexyl sind.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R² und R³ zusammengenommen Ethylen sind.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R² und R³ zusammengenommen Vinylen sind.
Verbindung nach Anspruch 6, worin R² und R³ jeweils mit Phenyl substituiert sind.
Verbindung nach Anspruch 6, worin R² und R³ jeweils mit Methyl substituiert sind.
Verbindung nach Anspruch 1, worin R² und R³ zusammengenommen Cyclopentyl sind.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 für die Verwendung als Medikament.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 bei der Herstellung eines Medikaments zur Hemmung der TNFα-aktivierten Retrovirus-Replikation in einem Säuger (einschließlich des Menschen).
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9 in einer Menge, die bei einmaliger oder mehrmaliger Verabreichung eine TNFα-hemmende Wirkung aufweist.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 bei der Herstellung eines Medikaments zur Phosphodiesterase-Hemmung in einem Säuger (einschließlich des Menschen).
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9 in einer Menge, die bei einmaliger oder mehrmaliger Verabreichung eine Phosphodiesterase-hemmende Wirkung aufweist.