DE69431300T2

DE69431300T2 - Eine pharmazeutische oder kosmetische zubereitung, die eine kolostrumfraktion enthält und deren medizinische verwendung

Info

Publication number: DE69431300T2
Application number: DE69431300T
Authority: DE
Inventors: Jouni Uolevi Aalto; Markku Tapani Jalkanen; Harry Goesta Jalonen; Ari Perttu Tapani Kanttinen; Matti Kalevi Laato; Raimo Antero Pakkanen
Original assignee: NOVATREAT TURKU Oy
Current assignee: NOVATREAT TURKU Oy
Priority date: 1993-06-23
Filing date: 1994-06-13
Publication date: 2003-07-31
Anticipated expiration: 2014-06-14
Also published as: EP0711171B1; EP0711171A1; AU6847894A; DE69431300D1; WO1995000155A1; EE9400174A

Description

GEBIET DER ERFINDUNG

Diese Erfindung betrifft eine pharmazeutische oder kosmetische Zusammensetzung, umfassend eine Kolostrum-Fraktion, und deren Verwendung.

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Der Ausdruck "Verbesserung der Heilung von Wunden" beim vorliegenden Text bezieht sich auf die zu machenden Schritte, durch welche Wunden, die keine Neigung zur Heilung zeigen, veranlasst werden, den Heilungsprozess zu beginnen, und Wunden, die begonnen haben zu heilen, werden veranlasst, schneller zu heilen; oder die zu machenden Schritte, die für eine kosmetische Verbesserung des funktionellen Ergebnisses während der Heilung oder nach deren Abschluss führend sind. Die Verbesserung der Wundheilung ist besonders wichtig, wenn die natürliche Heilung langsam ist oder wenn sie durch eine Anzahl negativer Faktoren erschwert wird, beispielsweise eine Infektion der Wunde, ein erschwerter Blutstrom, medizinische Behandlung mit Zellgiften oder mit verschiedenen Arten von Steroiden, oder in Fällen, bei denen Patienten an chronischen Störungen mit einer begleitenden Beeinträchtigung der normalen Wundheilung leiden, z. B. wenn sie für längere Zeiträume bettlägerig sind oder an Verbrennungen, hypertrophen Narben, Keloiden, hohem Alter, Krebs, Erkrankungen, die ernsthafte Nährstoffmängel verursachen, von solchen Arten, wie z. B. Krankheitsbilder einer chronischen Entzündung des Darms, Krankheitsbilder, die durch ausgedehnte Körperverletzungen verursacht werden (sogenannte Polytrauma-Patienten), und vergleichbaren Arten von Krankheitsbildern, leiden.
Faktoren, die die Heilung von Wunden stimulieren, wurden früher beschrieben. Als Beispiele können hier der epidermale Wachstumsfaktor (EGF), der Wachstumsfaktor aus Blutplättchen (PDGF) (Grotendorst, J. Clin. Invest. 76: 2323, 1985) erwähnt werden. Von diesen Faktoren ist bekannt, dass sie eine erhöhte Zellteilung bei Organkulturen erzeugen. Am Anfang wurde gedacht, ein vielversprechender Heilungsstimulans wäre EGF, als dieser in experimentellen Studien seiner Wirkungen in vivo getestet wurde.
Die Hauptzellarten der Haut sind epidermale Keratinozyten und dermale Fibroblasten. Für die Wundheilung wäre es von Nutzen, wenn das Wachstum und/oder die Migration der epidermalen Keratinozyten gefördert werden könnte. Auch kann bei der allgemeinen Hautpflege die Wachstumsstimulierung von Keratinozyten dazu beitragen, das gesunde Aussehen der Haut zu erhalten.
Viele bekannte Wachstumsfaktoren und andere bekannte Mittel, die dafür bekannt sind, das epidermale Wachstum zu stimulieren, haben den Nachteil, dass sie die Wachstumsstimulierung des Binde(Granulations)-Gewebes im Vergleich zu ihrem stimulierenden Einfluss auf die epidermale (Keratin)-Schicht zu stark stimulieren. Eine exzessive. Collagensynthese könnte zu hypertrophen Narben oder Keloiden, wie beispielsweise solche bei Verbrennungen, führen. Ein ideales Ergebnis würde erhalten, wenn die Keratin-Schicht schnell wächst, während das Granulationsgewebe sehr langsam oder überhaupt nicht wächst. Ein optimales Stimulationsmittel sollte deshalb eine hohe wachstumsfördernde Wirkung auf die Keratin-Schicht und eine wachstumshemmende Wirkung auf das Granulationsgewebe ausüben.
Die Publikation des europäischen Patents EP 334 776 betrifft kosmetische oder pharmazeutische Zusammensetzungen, umfassend mikrofiltriertes oder ultrafiltriertes Kolostrum-Serum als Inhaltsstoff. Die Porengröße des Filters beträgt bevorzugt ungefähr 0,14 Mikrometer. Bei der Publikation wird gesagt, dass die Zusammensetzungen eine hydratisierende, stimulierende, erweichende, nährhafte, regenerierende und vernarbende Wirkung haben. Es ist keine Wundheilungswirkung offenbart.
Die Publikation der Patente FR 2 460 135 und U.S. 4 342 747 betreffen die Verwendung von Kolostrum, aus dem Rahm entfernt wurde, zur Verwendung als ein ophthalmisches Mittel. Sie beziehen sich weder auf eine Kolostrum- Fraktion, die als Filtrat erhalten wurde, indem das Kolostrum durch eine 100.000 Da-Membran filtriert wurde, noch beziehen sie sich auf die Verwendung einer solchen Fraktion für die Wundheilung.
Die Veröffentlichung des russischen Patents SU 1 685 253 bezieht sich auf die Verwendung der Fett-Fraktion des Kolostrums.
Die Publikation des Patents FR 2 627 386 betrifft Zusammensetzungen aus Kolostrum-Lactoserum und Vitamin A für die Verwendung für das Auge. Es ist keine Ultrafiltration mit einer Membran mit einem Cut-off-Wert von 100.000 Da offenbart. Es ist auch keine Wirkung auf die Wundheilung beschrieben.
Die Publikation des Patents WO 93/08264 offenbart eine Kolostrum-Fraktion, die eine niedrige Endotoxin-, Protein- und Immunglobulin-Konzentration hat und die durch Ultrafiltration von vorbehandeltem Rinder-Kolostrum unter Verwendung einer Membran, die ein Cut-off-Wert von 100.000 Da hat, hergestellt wurde.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Diese Erfindung betrifft eine pharmazeutische oder kosmetische Zusammensetzung, umfassend eine Kolostrum-Fraktion, wobei die Kolostrum-Fraktion hergestellt wurde, indem Kolostrum, aus dem ein Teil des Fetts und Zelltrümmer durch herkömmliche Verfahren entfernt worden waren, einer Ultrafiltration durch Verwendung einer Membran mit einem Cut- off-Wert von 100.000 Da unterworfen wurde und das Filtrat gewonnen wurde, und einen kompatiblen nicht-toxischen pharmazeutischen oder kosmetischen Träger dafür. Die Erfindung betrifft auch die Verwendung der Fraktion zur Herstellung einer pharmazeutischen oder kosmetischen Zusammensetzung.

KÜRZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN

Die Fig. 1A und 1B veranschaulichen transdermale Präparationen.
Die Fig. 2 veranschaulicht die Stimulierung der DNA- Synthese in Keratinozyten durch unterschiedliche Konzentrationen der Kolostrum-Fraktion.
Die Fig. 3 beschreibt die Proliferation von HaCat-Zellen in vitro in 10% FCS (Dreiecke), 1% Serum von erwachsenen Rindern (Kreise) und 1% Serum von erwachsenen Rindern + 5% CF (Quadrate).

BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORMEN

Die Erfinder haben herausgefunden, dass eine Kolostrum- Fraktion, die Wachstumsfaktoren des Kolostrums enthält, das Wachstum der Keratin-Schicht sehr stark stimuliert, während sie das. Wachstum des Granulationsgewebes gleichzeitig inhibiert.
Rinder-Kolostrum-Fraktionen, die reich an Wachstumsfaktoren sind, sind als exzellente Zusätze zu Zellkulturmedien bekannt, um das Wachstum von Zellen, besonders von Hybridomzellen, zu fördern. Es wird auf R. Pakkanen et al., Appl. Microbiol. Biotechnol. (1992) 37: 451-456 und auf die Internationale Patentanmeldung PCT/FI92/00268 verwiesen. Diese Publikationen beschreiben die Herstellung der Kolostrum-Fraktion, die sehr geringe Konzentrationen von Endotoxin, Protein und Immunglobulin hat, die aber Wachstumsfaktoren, Spurenelemente, Vitamine und andere niedermolekulare Bestandteile, die für das Zellwachstum wesentlich sind und im Kolostrum vorkommen, enthält.
Die Erfindung betrifft somit ein Verfahren zur Verbesserung der Heilung von Wunden bei Säugern einschließlich Menschen, das eine lokale Verabreichung einer sicheren und wirksamen Menge einer Kolostrum-Fraktion an den Säuger umfasst, wobei die Kolostrum-Fraktion hergestellt wurde, indem Kolostrum, aus dem ein Teil des Fetts und Zelltrümmer durch herkömmliche Verfahren, beispielsweise Zentrifugation, entfernt worden waren, einer Ultrafiltration durch Verwendung einer Membran mit einem Cut-off-Wert von 100.000 Da unterworfen wurde und das Filtrat gewonnen wurde.
Die Erfindung betrifft weiter eine pharmazeutische oder kosmetische Zusammensetzung, im Besonderen eine Zusammensetzung zur Verbesserung der Heilung von Wunden bei Säugern einschließlich Menschen, umfassend eine Kolostrum- Fraktion, wobei die Kolostrum-Fraktion hergestellt wurde, indem Kolostrum, aus dem ein Teil des Fetts und Zelltrümmer durch herkömmliche Verfahren entfernt worden waren, einer Ultrafiltration unter Verwendung einer Membran mit einem Cut-off-Wert von 100.000 Da unterworfen wurde und das Filtrat gewonnen wurde, und einen kompatiblen nicht- toxischen Träger dafür.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform wurde Casein aus dem Kolostrum durch Präzipitation vor dessen Ultrafiltration entfernt. Das Entfernen von Casein bewirkt niedrigere Endotoxin- und Immunglobulin-Gehalte in der ultrafiltrierten Kolostrum-Fraktion.
Die Kolostrum-Fraktion wird aus praktischen Gründen bevorzugt aus Rinder-Kolostrum erhalten. Das Kolostrum von anderen Quellen kann jedoch auch als verwendbar für die Herstellung der Kolostrum-Fraktion, wie sie in dieser Erfindung verwendet wird, angesehen werden.
Die topische oder transdermale Verabreichung der Kolostrum-Fraktion kann hauptsächlich durch drei unterschiedliche Wege durchgeführt werden: (i) durch Mischen (oder Adsorbieren) einer wirksamen Menge der Kolostrum- Fraktion mit geeigneten nicht-toxischen Trägern und gegebenenfalls Penetrationsverstärkern um Salben, Emulsionen, Lösungen, Suspensionen, Lotionen, Cremes, Gele, Pulver, Aerosole, Verbandpflaster oder dergleichen zu bilden, wobei bevorzugt eine feste Menge der Zubereitung auf die Wunde angewendet wird, oder (ii) durch Einarbeiten der Kolostrum-Fraktion in ein transdermales Abgabesystem entsprechend der bekannten Technologie oder (iii) durch Einarbeiten der bioaktiven Substanzen aus der Kolostrum- Fraktion in Liposomen, die entweder als solche verwendet werden können oder in die Zubereitungen der vorher genannten Alternativen (i) oder (ii) eingeschlossen werden können.
Die Rolle der transdermalen Verabreichung der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen besteht hauptsächlich darin, die Kolostrum-Fraktion durch die epidermale Schicht zu transportieren und nicht notwendigerweise darin, eine systemische Wirkung zu erzeugen.
Beispiele von geeigneten Arzneimittel-Trägerstoffen schließen diejenigen mit ein, die auf dem Gebiet der Pharmazie und der Kosmetik zur Herstellung topischer Zubereitungen bekannt sind, beispielsweise wässrige gepufferte Salzlösungen, nichtflüchtige Fettalkohole, Säuren, Ester, z. B. Cetostearylalkohol und Cetylalkohol; flüchtige Alkoholverbindungen, z. B. Ethanol und Isopropanol; Glykole und Glykolether.
Die Heilung von Wunden im Magen oder im Darm, beispielsweise bei peptischem Ulkus, kann auch durch die Verwendung des erfindungsgemäßen Verfahrens verbessert werden. Zur Behandlung von peptischem Ulkus kann die Kolostrum- Fraktion als solche, kombiniert mit Aromastoffen und Konservierungsstoffen, verwendet werden. Alternativ kann die Kolostrum-Fraktion in Teilchen oder in eine Matrix adsorbiert werden, welche gegebenenfalls mit einem Material beschichtet werden kann, das eine langsame Freisetzung oder enterische Eigenschaften hat. Die Matrix oder die Teilchen können weiter in Tabletten gepresst oder in Kapseln gefüllt werden.
Die folgenden nicht-beschränkenden Beispiele veranschaulichen die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen.

Vergleichsbeispiel

Molke wurde aus entfettetem Kolostrum durch Entfernung von Casein durch Säurepräzipitation hergestellt (siehe z. B. R. Pakkanen et al., Appl. Microbiol. Biotechnol. (1992) 37; S. 452). Ein Ultrafiltrat wurde aus gereinigter Molke durch Filtration durch Membranen mit einem nominalen Cut- off-Wert des Molekulargewichts von 100.000 Da erhalten. Das so erhaltene Kolostrum-Ultrafiltrat (Kolostrum- Fraktion) enthielt 1,1 g/l Protein, 0,24 g/l Immunglobulin G (IgG) und weniger als 0,24 EE (Endotoxin-Einheit)/ml Endotoxine.

Beispiel 1

Beispiele von halbfesten Präparaten

a) Alvolen 20 g
Stearylalkohol 25 g
Propylenglykol 10 g
Natriumlaurylsulfat 1 g
Methylparaben 25 mg
Propylparaben 15 mg
Destilliertes Wasser 34 ml
Kolostrum-Fraktion 10 ml
b) Polyethylenglykol 4000 45 g
Polyethylenglykol 400 45 g
Kolostrum-Fraktion 10 ml
c) Methocel 90 H.C. 4000 1 g
Carbopol 934 24 mg
Propylenglykol 18 g
Methylparaben 15 mg
Destilliertes Wasser 71 ml
Kolostrum-Fraktion 10 ml
NaOH wurde hinzugefügt um den pH auf 7 einzustellen.

Beispiel 2

Transdermale Zubereitungen

Die Kolostrum-Fraktion kann in ein transdermales Arzneimittel-Abgabesystem eingeschlossen werden. Solche Vorrichtungen sind in den Fig. 1A und 1B veranschaulicht, wobei die Bezugsnummer 1 eine Trägerschicht repräsentiert, 2 eine Klebschicht ist, die das Pflaster an der Haut gebunden hält, und 3 ein poröses Polymer ist. In der Fig. 1A wurde die Kolostrum-Fraktion in das poröse Polymer 3 ab sorbiert, entweder alleine oder in Kombination mit einem Träger und/oder einem Penetrationsverstärker. In der Fig. 1B enthält der Speicher 4 die Lösung der Kolostrum- Fraktion.

Beispiel 3

Liposom-Zubereitungen

Kolostrum-Fraktion 1 ml
Phosphatidylcholin 70 mg
Phosphatidylserin 20 mg
Cholesterin 10 mg
Gepuffertes destilliertes Wasser 10 ml
Der beste Weg, Liposomen des oben genannten Gemisches herzustellen, ist entweder die Verwendung der "French Presse" oder des Membran-Extrudierverfahrens. Alternativ ist möglich, nicht-beladene Liposomen entsprechend den bekannten Verfahren herzustellen und Später die bioaktiven Bestandteile der Kolostrum-Fraktion durch Verwendung von pH- Gradienten entsprechend der Beladungswirkstoffe (R R C New, Liposomees - a practical approach, IRL Press in Oxford University Press) hinzuzufügen.
Die benötigte Dosis der Kolostrum-Fraktion variiert speziell mit der besonderen Art der zu behandelnden Wunde, der Schwere ihres Zustands und der Dosierungsform. Wir glauben, dass eine geeignete Dosis zwischen einigen Millilitern und einem Liter oder mehr der Kolostrum- Fraktion pro Tag und erwachsener Person liegen könnte. Die bevorzugte Dosis für topische oder transdermale Präparate sollte zwischen 0,5 bis 1 ml/Tag und cm² der Wundfläche betragen. Für die Behandlung von peptischem Ulkus wird die bevorzugte orale Dosis zwischen ungefähr 50 bis 1000 ml pro Tag und erwachsener Person angenommen.
Die therapeutische Wirkung der Kolostrum-Fraktion wird durch die folgenden nicht-beschränkenden Beispiele demonstriert. Die Kolostrum-Fraktion, die in den Experimenten verwendet wurde, hatte einen Endotoxingehalt von 1,0 EE/ml, einen Gesamtproteingehalt von 2,0 mg/ml und einen Immunglobulingehalt von 0,25 mg/ml. Die Fraktion wurde erhalten, indem das entfettete Kolostrum vor der Ultrafiltration einer Caseinpräzipitation unterworfen wurde.

Beispiel 4

Behandlung von Keratinozytenkulturen mit Lösungen einer Kolostrum-Fraktion (CF)

Die Wirkung der Kolostrum-Fraktion (CF) wurde deshalb anhand der Stimulierung des Keratinozyten-Wachstums untersucht. Dies wurde mit klassischen Zellkulturmethoden durchgeführt, bei denen kultivierte Keratinozyten verschiedenen Konzentrationen von CF ausgesetzt wurden. Eine menschliche Keratinozyten-Zelllinie (HaCat: Fusenig und Worst, Exp. Cell Res. 93: 443-457, 1992) wurde routinemäßig in modifiziertem Eagle-MEM, ergänzt mit 10% FCS (fötales Kälberserum) und Antibiotika bei 37ºC, 5% CO&sub2; in 95% Luft in einem befeuchteten Inkubator wie beschrieben (Elenius et al., J. Biol. Chem., 265: 17837-17843, 1990) kultiviert. In dem ersten Experiment wurden HaCat-Zellen auf Petrischalen aufgeteilt und bis zur Semikonfluenz wachsen gelassen. Danach wurden die Zellen nach der Zugabe von verschiedenen Konzentrationen von CF und FCS für 24 h in serumfreiem Medium gehalten. Die Zellen wurden in diesen Lösungen für die nächsten 24 h inkubiert, nach denen ¹²&sup5;I- Desoxyuridin für weitere 2 Stunden hinzugefügt wurde. Schließlich wurden die Zellen mit kaltem PBS gewaschen, fixiert und in 0,2 M NaOH extrahiert. Die Radioaktivität, die in den Zellextrakten zurückblieb, wurde mit einem gamma-Zähler gemessen.
Die Fig. 2 veranschaulicht die Stimulation der DNA- Synthese in Keratinozyten durch CF. Menschliche Keratinozyten wurden auf Kulturplatten ausplattiert und zur Semikonfluenz in der Gegenwart von 10% FCS wachsen gelassen. Nach 24 h Nährstoffmangel in einfachem Kulturmedium wurden für die nachfolgenden 24 Stunden Medien hinzugefügt, die unterschiedliche Konzentrationen von CF oder 10% FCS enthielten. Am Ende der Inkubation wurden die DNA- Syntheseraten gemessen, indem ¹²&sup5;I-Desoxyuridin zu den Kulturen für weitere zwei Stunden gegeben wurde und die Einbauraten von IdU gemessen wurden. Der Mittelwert ± S.A. von vier Proben ist dargestellt. C = einfaches Medium; 1% M = 1% CF; 5% M = 5% CF; 10% M = 10% CF; 10% FCS = 10% fötales Kälberserum.
Wie in der Fig. 2 gezeigt, offenbarte diese Analyse eine Stimulation der DNA-Synthese in der Gegenwart von steigenden Konzentrationen von CF. Die Stimulation war beinahe so hoch wie die Stimulation, die mit fötalem Kälberserum erhalten wurde, das beste Wachstum, das für kultivierte Zellen erhalten wurde. Diese Ergebnisse weisen klar darauf hin, dass CF Faktoren enthält, welche die DNA-Synthese von Keratinozyten stimulieren.
Bei dem zweiten Experiment wurden HaCat-Zellen in modifiziertem Eagle's-MEM, ergänzt mit 1% Serum von erwachsenen Rindern und Antibiotika, suspendiert und auf Zellkulturplatten mit 24 Vertiefungen bei einer Konzentration von 30.000 lebensfähigen Zellen/ml (1,5 ml/Vertiefung) aufgeteilt. Die Zellen wurden bei 37ºC, 5% CO&sub2; und 95% Luft für 24 h inkubiert. Dann wurden die Medien aus den Vertiefungen entfernt und es wurden 1,5 ml Proben von Testmedien hinzugefügt (10% FCS, 1% Serum von erwachsenen Rindern, 5% CF + 1% Serum von erwachsenen Rindern in modifiziertem Eagle's-MEM, ergänzt mit Antibiotika). Bei den angezeigten Zeitpunkten (Fig. 3) wurden die gebundenen Zellen mit Trypsin losgelöst und gezählt. Die alten Medienproben der anderen Vertiefungen wurden auch durch frische Proben an denselben Tagen ersetzt. Die Zellzählungen wurden in einem Hämatocytometer durch Verwendung eines Trypanblau- Ausschlusses, welcher die Lebensfähigkeit anzeigt, durchgeführt und jede Zelle wurde nur einmal gezählt. Das Experiment wurde doppelt durchgeführt.
Wie in der Fig. 3 gezeigt, belegen die Ergebnisse, dass CF Wachstumsfaktoren enthält, welche die Proliferation von HaCat-Zellen in vitro stimulieren. Darüber hinaus weisen die Ergebnisse darauf hin, dass diese Faktoren entweder nicht in normalem Serum von erwachsenen Rindern vorkommen oder dass deren Konzentration in CF signifikant höher ist.

Beispiel 5

Wirkung der Kolostrum-Fraktion auf das Granulationsgewebe

Die Wirkung der Kolostrum-Fraktion (CF), wie in dem vorhergehenden Beispiel beschrieben, auf die Verbesserung der Wundheilung wurde in einem standardisierten experimentellen Wundmodell in Ratten, wie von Niinikoski, Heughan und Hunt (Surg. Gynecol. Obstet 133: 1003-1007, 1971) beschrieben, untersucht. Dieses Modell könnte wie folgt kurz beschrieben werden:

Behandlung der Wunde mit Lösungen einer Kolostrum-Fraktion (CF)

Viskoser Celluloseschwamm (Säteri Oy, Valkeakoski, Finnland) wurde als eine induktive Matrix zur Wiederherstellung von Gewebe verwendet. Das Material wurde in zylindrische Stücke geschnitten, 40 mm lang und 10 mm im Durchmesser, und es wurde ein Tunnel mit 3 mm im Durchmesser durch das Zentrum des Schwamms gebildet. Silikon-Gummischeiben, 10 mm im Durchmesser und 2 mm dick, wurden an beide Enden des Schwamms genäht um einen stabilen Hohlraum zu bilden.
Die Zylinder wurden durch Kochen für 30 min in physiologischer Kochsalzlösung dekontaminiert und die Implantationen wurden mit streng keimfreien Techniken durchgeführt. Männliche Sprague-Dawley-Ratten, die 230 bis 250 g wiegen, wurden mit Ether narkotisiert und es wurde ein Schnitt, 4 cm lang, an der dorsalen Mittellinie des kaudalen Teils des Rückens gemacht. Jede Ratte bekam einen Schwammzylinder, der in Längsrichtung verlaufend unter der Haut, kopfwärts vom Schnitt, implantiert wurde. Während der Experimente bekamen die Tiere gewöhnliche Rattennahrung und Wasser ad libitum und wurden individuell in Käfigen in Tierställen untergebracht. Der Entwurf der Arbeit wurde durch das örtliche Ethikkomitee genehmigt.

In-vivo-Experimente

Insgesamt 32 Ratten wurden in vier Gruppen mit 8 Tieren untersucht. Bei den drei Testgruppen wurde in die Implantate sofort nach der Implantation 1 ml von 1, 5 oder 10% der Kolostrum-Fraktion (CF) in phosphatgepufferter Salzlösung (PBS) in den zentralen Tunnel injiziert. Die Kontrollgruppe erhielt die gleiche Injektion, jedoch nur Trägerlösung. Die Injektionen von allen Gruppen wurden täglich unter streng keimfreien Bedingungen wiederholt. Es wurden keine Infektionen beobachtet. Nach dem Einsammeln der Fluidproben der Wunde wurden die Ratten mit Ether narkotisiert und getötet. Die Implantate wurden von dem umgebenden Gewebe freigelegt und die Silikon-Gummischeiben wurden entfernt. Die Nukleinsäuren wurden entsprechend dem Verfahren von Schmidt und Thannhauser aus den Implantaten extrahiert. Die DNA wurde durch die Diphenylaminreaktion bestimmt und die RNA wurde als RNA-Ribose durch das Verfahren von Ceriotti untersucht. Aliquote wurden zur Bestimmung von Stickstoff, Hydroxyprolin, Hexosaminen und Uronsäuren genommen (Laato M., Acta Chir. Scand. Suppl. 546: 1-44, 1988).
Die Ergebnisse befinden sich in der Tabelle 1. Die Einheiten sind mg/Schwamm und die Abkürzungen haben die folgende Bedeutung: CF = Kolostrum-Fraktion; HYPRO = Hydroxyprolin; HEXOS = Hexosamine und URONIC = Uronsäure. Tabelle 1

Claims

1. Pharmazeutische oder kosmetische Zusammensetzung, umfassend eine Kolostrum-Fraktion, wobei die Kolostrum- Fraktion hergestellt wurde, indem Kolostrum, aus dem ein Teil des Fetts und Zelltrümmer durch herkömmliche Verfahren entfernt worden waren, einer Ultrafiltration durch Verwendung einer Membran mit einem Cut-off-Wert von 100.000 Da unterworfen wurde und das Filtrat gewonnen wurde, und einen kompatiblen nichttoxischen pharmazeutischen oder kosmetischen Träger dafür.

2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, die zur Verbesserung der Heilung von Wunden bei Säugern einschließlich Menschen verwendbar ist.

3. Zusammensetzung nach Anspruch 2, wobei Casein vor einer Ultrafiltration durch Präzipitation aus dem Kolostrum entfernt wurde.

4. Zusammensetzung nach Anspruch 3, wobei die Kolostrum-Fraktion eine Rinder-Kolostrum-Fraktion ist.

5. Zusammensetzung nach Anspruch 2, die in Form einer Salbe, Emulsion, Suspension, Lotion, Lösung, eines Gels, einer Creme, eines Pulvers oder eines Aerosols vorliegt.

6. Zusammensetzung nach Anspruch 2, die ein transdermales Abgabesystem ist.

7. Zusammensetzung nach Anspruch 2, die in Form einer Tablette oder einer Kapsel zur oralen Verabreichung vorliegt.

8. Verwendung einer Kolostrum-Fraktion, wobei die Kolostrum-Fraktion hergestellt wurde, indem Kolostrum, aus dem ein Teil des Fetts und Zelltrümmer durch herkömmliche Verfahren entfernt worden waren, einer Ultrafiltration durch Verwendung einer Membran mit einem Cut-off-Wert von 100.000 Da unterworfen wurde und das Filtrat gewonnen wurde, zur Herstellung einer pharmazeutischen oder kosmetischen Zusammensetzung zur Heilung von Wunden bei Säugern einschließlich Menschen.