DE60208233T2

DE60208233T2 - Absolute öle aus allium sativum und therapeutische oder kosmetische anwendungen

Info

Publication number: DE60208233T2
Application number: DE60208233T
Authority: DE
Inventors: Isabelle Tomatis
Original assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Current assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Priority date: 2001-10-26
Filing date: 2002-10-22
Publication date: 2006-08-17
Anticipated expiration: 2022-10-23
Also published as: CA2464331A1; US7192613B2; ES2256578T3; EP1450834B9; AU2002358849B2; DE60208233D1; PT1450834E; US20040258777A1; WO2003035085A1; ATE313330T1; FR2831447A1; EP1450834A1; BR0213204A; JP2005509636A; ZA200403925B; FR2831447B1; EP1450834B1

Description

Die Erfindung betrifft Extrakte von Knollen von Allium sativum (Knoblauch) sowie deren Verwendungen. Die genannten Zusammensetzungen können vorteilhafterweise und spezieller in der pharmazeutischen und kosmetischen Industrie zur Anwendung kommen. Die Erfindung betrifft somit auch therapeutische Zusammensetzungen (Medikamente), besonders für die Behandlung von Fettleibigkeit. Die Erfindung betrifft auch kosmetische Zusammensetzungen, insbesondere kosmetische Zusammensetzungen zur topischen Anwendung für die Schönheit (Schönheitsprodukte) oder die Hautpflege und kosmetische Zusammensetzungen für die präventive oder kurative Behandlung von Cellulit und/oder von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen auf topischem Wege.
Im gesamten Text werden die Begriffe, die die Extraktionsprodukte definieren (essentielles Öl, Concrete, Oleoresin oder Resinoid, absolutes Öl usw.), gemäß der in der Norm NF T 75-006 (Februar 1998) definierten Terminologie angewendet sind.
Allium sativum, d.h. Knoblauch, ist seit langem für seinen hohen Nährwert (hoher Gehalt an Proteinen, Vitaminen A und C, Thiamin und an Mineralsalzen), für seine verdaulichen Vorzüge sowie für seine antiseptische, antivirale, Herz und Kreislauf schützende, tonische und diuretische Wirkung usw. bekannt. Aufgrund seines charakteristischen starken Geruchs ist er jedoch nicht sehr beliebt, ausgenommen in kleinen Mengen für kulinarische Gerichte.
Ebenso sind, im Gegensatz zu anderen Pflanzen, die Gegenstand einer breiten Palette von Extraktionen geworden sind, wie essentielle Öle, Concretes, Oleoresine, absolute Öle usw., Publikationen, die Extrakte auf der Basis von Allium sativum erwähnen, selten. Die JP-04 338 336 z.B. beschreibt Tabletten zur oralen Behandlung von Fettleibigkeit, die einen Knoblauchextrakt enthalten, der von getrocknetem Knoblauch erhalten wurde, der einmal mit Wasser oder Ethanol extrahiert wurde. Somit handelt es sich hier um ein Extraktionsoleoresin.
Es ist somit Ziel der vorliegenden Erfindung, diese Lücke zu füllen, indem sie neue Zusammensetzungen bereitstellt, insbesondere neue wasserlösliche Knoblauchextrakte, deren Eigenschaften auf vorteilhafte Weise von der Industrie, besonders von der pharmazeutischen Industrie oder der Kosmetikindustrie, genutzt werden können und die mit einem Verfahren erhalten werden können, das sich sowohl einfach als auch kostenarm ausführen lässt.
Es ist auch Ziel der Erfindung, Anwendungen für diese Zusammensetzungen bereitzustellen, besonders für die therapeutische Behandlung von Fettleibigkeit oder für die topische kosmetische Behandlung der Haut, von Cellulit und/oder von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen.
Die Erfindung betrifft somit ein absolutes Öl aus Knollen von Allium sativum.
Ein absolutes Öl ist ein Extrakt aus wenigstens zwei Extraktionsstufen. Die erste Stufe erfolgt mit einem flüchtigen, nichtwässrigen – insbesondere nichtaromatischen – Extraktionslösungsmittel und ergibt ein Concrete oder ein Oleoresin. Die zweite Stufe erfolgt mit Ethanol als Lösungsmittel. Es ist zu bemerken, dass die absoluten Öle von Pflanzen einen sehr ausgeprägten Geruch haben, der für die Pflanze charakteristisch ist. Sie werden herkömmlicherweise ausschließlich in der Parfümindustrie hergestellt und verwendet. Außerdem gab es kein Interesse an einem absoluten Öl, das aus Knoblauch hergestellt wurde, dessen Geruch sich sehr schlecht für diese Extraktkategorie eignet. Außerdem gab es nach dem bisherigen Kenntnisstand nichts, was auf absolute Öle verwiesen hätte, die von Allium sativum erhalten wurden.
Die JP 51 033066 , die EP 0 464 521 und die FR 01/03325 beschreiben zwar Knoblauchextrakte, aber keine davon beschreibt ein absolutes Öl von Allium sativum gemäß der Erfindung oder ein Verfahren zum Erhalten eines absoluten Öls oder ein Extrakt, das die strukturellen oder funktionellen Eigenschaften eines absoluten Öls hätte.
Absolute Öle aus Allium sativum werden vorteilhafterweise und erfindungsgemäß aus wenigstens einem Concrete (Extrakt von frischem oder aufgetautem Knoblauch mit einem flüchtigen, nichtwässrigen – insbesondere nichtaromatischen – Lösungsmittel), insbesondere einem mit Hexan extrahierten Concrete (im gesamten Text bedeutet der Begriff ACH ein absolutes Öl, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde) oder einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete (im gesamten Text bedeutet der Begriff ACEA ein absolutes Öl, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde) erhalten wurde.
Gemäß einer anderen Ausgestaltung der Erfindung wird ein absolutes Öl aus Allium sativum von wenigstens einem Extraktionsoleoresin (Extrakt von getrocknetem Knoblauch mit einem flüchtigen, nichtwässrigen – insbesondere nichtaromatischen – Lösungsmittel), insbesondere einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten (im gesamten Text bedeutet der Begriff AOA ein absolutes Öl, das von einem mit Aceton extrahierten Oleoresin erhalten wurde).
Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung eines Allium sativum Extrakts, das einem absoluten Öl gemäß der Erfindung entspricht.
Ein Verfahren zur Herstellung eines Extrakts aus Allium sativum gemäß der Erfindung umfasst die folgenden Schritte:

– Unterziehen von Allium sativum einer Extraktion mit einem nichtwässrigen flüchtigen Lösungsmittel,
– Verdunstenlassen des Lösungsmittels, um ein erstes Extraktionsprodukt zu gewinnen.

Gemäß der Erfindung wird dieses erste Extraktionsprodukt dann einer Folgeextraktion mit Ethanol unterzogen, um ein absolutes Öl zu gewinnen.
Es ist zu bemerken, dass, wenn das verwendete Pflanzenmaterial ein frisches oder aufgetautes Material ist (das zum Konservieren eingefroren wurde), das erste Extraktionsprodukt, das nach dem Extraktionsschritt in Lösungsmittel erhalten wird, ein Concrete ist. Es ist ein Extraktionsoleoresin (oder Resinoid), wenn das Pflanzenmaterial im trockenen Zustand für diesen selben Extraktionsschritt verwendet wird.
Im gesamten Text umfasst der Begriff „Knollen" sowohl die Knollen der Pflanze (Gruppen von Knoblauchzehen) als auch die individuellen Zehen, geschält oder ungeschält.
Das in dem erfindungsgemäßen Verfahren verwendete Pflanzenmaterial ist vorteilhafterweise und erfindungsgemäß ein frisches oder aufgetautes Material (das zum Konservieren eingefroren wurde).
Die Folgeextraktion mit Ethanol, mit der insbesondere Wachse aus dem ersten Extraktionsprodukt eliminiert werden können, besteht vorteilhafterweise und erfindungsgemäß aus den folgenden Schritten:

– Auflösen des ersten Extraktionsprodukts in dem Ethanol bei Umgebungstemperatur, um eine erste Ethanollösung durch Filterung zurückzugewinnen,
– Abkühlen der ersten Ethanollösung auf eine Temperatur von etwa –10°C und anschließende Filterung, um eine zweite Ethanollösung zurückzugewinnen,
– Destillieren des Ethanols der zweiten Ethanollösung, um schließlich ein absolutes Öl zu gewinnen.

Die Extraktionsstufe durch ein nichtwässriges flüchtiges Lösungsmittel erfolgt vorteilhafterweise und erfindungsgemäß mit einem nichtwässrigen und nichtaromatischen flüchtigen Lösungsmittel.
Diese Extraktion erfolgt vorteilhafterweise und erfindungsgemäß mit Hexan oder Ethylacetat als nichtwässriges und nichtaromatisches flüchtiges Lösungsmittel.
Gemäß einer Variante der Erfindung ist das in dem erfindungsgemäßen Verfahren verwendete Pflanzenmaterial ein Pflanzenmaterial im trockenen Zustand. Die Extraktion erfolgt vorteilhafterweise und erfindungsgemäß mit Aceton als nichtwässriges und nichtaromatisches flüchtiges Lösungsmittel.
Die Erfindung betrifft auch eine Zusammensetzung, die wenigstens ein absolutes Öl von Allium sativum mit besonders interessanten Anwendungen insbesondere für therapeutische und/oder kosmetische Zwecke enthält.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung basiert auf der äußerst überraschenden und unerwarteten Entdeckung der Effekte von absoluten Ölen gemäß der Erfindung auf der Ebene von zwei biologischen Mechanismen des menschlichen Körpers: Hautmikrozirkulation und Differenzierung von Präadipozyten in Adipozyten.
Auf der Ebene der Hautmikrozirkulation hat der Erfinder demonstriert, dass absolute Öle gemäß der Erfindung einen positiven Einfluss auf die Sekretion von VEGF (vaskulärer Endothelwachstumsfaktor) hat.
Der VEGF ist einer der wichtigsten Faktoren in der positiven Angiogeneseregulierung (Ferrera N., Endocr. Rev. 13: 18–32, 1992), Vasodilatation (Folkman J. et al., J. Biol. Chem. 267: 10931–10934, 1992), vaskuläre Permeabilität (Keck P. J., Science 246: 1309–1312, 1989). Er ist für das vaskuläre Endothel spezifisch. Dies ist einer der wichtigsten Faktoren für das Wachstum und Überleben des Endothels. Er wird als der wichtigste proangiogene Faktor angesehen. Seine Wirkung ist auf die Ebene der Endothelzellen begrenzt (Mustenen T. et al., J. Cell. Biol. 129: 895–898, 1995) und seine Expression ist in perfekter Korrelation mit dem Prozess der Angiogenese, der mit dem Reparaturprozess assoziiert ist.
Aus diesem Grund sind die absoluten Öle aus Allium sativum von großem Interesse für die Herstellung von Medikamenten, besonders für die Behandlung von Hautstörungen, wo sie vorteilhafterweise als Aktivatoren der Hautmikrozirkulation verwendet werden können. Sie können auch einen wirkungsvollen Beitrag, als Zusatzmittel, für jede therapeutische oder kosmetische Behandlung (Schönheitsprodukt, Hautpflege usw.) leisten, bei der eine Verbesserung der Mikrozirkulation gewünscht wird.
Der Grund ist, dass die Haut äußerst vaskulär ist. Eine Hautzirkulation findet in der Ebene der Dermis statt: es dringen keine Blutgefäße in die Epidermis ein, deren Stoffwechselbedarf durch Diffusion von der papillären Dermis gedeckt wird. Die Hautzirkulation ist für die Sauerstoffversorgung und Ernährung der verschiedenen Strukturen der Haut verantwortlich. Sie ist insbesondere in der Ebene der Fibroblasten für die Verteilung sämtlicher Primärstoffe verantwortlich, die zum Erzeugen der Kollagen- und Elastinfasern benötigt werden. Gleichzeitig führt sie die bei ihrem Stoffwechsel entstehenden Abfallprodukte ab. Der Fluss von Blut zum Gewebe wird sowohl in der allgemeinen Organismusebene als auch in der lokalen Gewebeebene reguliert.
Hautschäden entstehen aufgrund von Veränderungen am dermalen mikrovaskulären System, in allen Fällen infolge einer Verringerung der der Haut zugeführten Blutmenge über eine Atrophie des dermalen Mikrozirkulationssystems.
Ferner wurde auch gezeigt, dass erfindungsgemäße absolute Öle auf vorteilhafte Weise als Fettablagerungen hemmende Wirkstoffe in kosmetischen Zusammensetzungen für die präventive oder kurative Behandlung von Cellulit oder von lokalisierten adipösen Überlastungen oder in therapeutischen Zusammensetzungen für die Behandlung von Fettleibigkeit eingesetzt werden.
Bekannte Schlankheitscremes enthalten derzeit wenigstens einen die Lipolyse fördernden und/oder die Lipogenese hemmenden Wirkstoff und/oder zielen darauf ab, die kapillare und lymphatische Mikrozirkulation wiederherzustellen. Die erfindungsgemäß bereitgestellten Zusammensetzungen eröffnen einen neuen Weg im Kampf gegen Cellulit. Sie wirken zwar auf die traditionellen Ziele, wie die bekannten Schlankheitscremes, aber die Zusammensetzungen der Erfindung arbeiten auf dem Niveau des Prozesses der Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten, eine Schlüsselstufe beim Wachstum von Fett.
Einfach ausgedrückt, entspricht Cellulit der Konzentration von Fettgewebe in bestimmten Teilen des Körpers, insbesondere den Hüften, dem Gesäß, den Knien und den Unterarmen. Dieses adipöse Gewebe oder Fett im Organismus ist fast unter der gesamten Oberfläche der Haut vorhanden. Cellulit ist häufig mit einer globalen adipösen Überlastung verbunden, und die Stabilität des Fettes ist ein wichtiger Faktor bei der Unterdrückung der Entwicklung von Cellulit.
Eine zu starke Entwicklung von Fettmasse wird gewöhnlich mit einer Zunahme des Volumens an Adipozyten und deren Triglyceridgehalt ohne Erhöhung ihrer Anzahl in Verbindung gebracht: dies ist als Hypertrophie bekannt. In bestimmten Fällen von Übergewicht ist Hypertrophie von Hyperplasie begleitet, mit anderen Worten, durch eine Erhöhung der Zahl der adipösen Zellen.
Es wurde nun auch gezeigt, dass die Zahl der Fettzellen nicht in der perinatalen Periode bestimmt wird, da sich Adipozyten während des gesamten Lebens bilden können. Dieser Prozess beginnt mit Vorläuferzellen, den Präadipozyten. Das Präadipozyt ist eine dünne Zelle mit fibroblastischer Morphologie: und es ist diese Zelle, und nicht das Adipozyt, die sich vermehren kann.
Einfach ausgedrückt, eine terminale adipozytische Differenzierung erfolgt in zwei Stufen, mit einer Umwandlung des Präadipozyts in ein reifes Adipozyt, wobei das letztere Triglyceride speichern kann.
Die vorliegende Erfindung stellt aktive Grundsätze bereit, die in den absoluten Ölen von Allium sativum vorliegen und mit deren Hilfe eine adipozytische Umwandlung von Präadipozyten in reife Adipozyten durch topische Anwendung verhindert werden kann.
Erfindungsgemäße absolute Öle von Allium sativum wirken somit auf einen neuen Aspekt des Kampfs gegen Cellulit: indem sie die Rekrutierung latenter Präadipozyten begrenzen, begrenzen sie die Expansion von Fettgewebe.
Ihre Wirksamkeit ist darauf jedoch nicht beschränkt, da gefunden wurde, dass ein einziger Fettablagerungen hemmender Wirkstoff gemäß der Erfindung mehrere Schlüssel im Kampf gegen Cellulit bietet. Der Grund ist, dass ein erfindungsgemäßes Fettablagerungen hemmendes Mittel auch eine gute Vaskularisierung des Fettgewebes bietet.
Die erfindungsgemäßen absoluten Öle sind somit äußerst wirksame Fettablagerungen hemmende Wirkstoffe, die es unnötig machen, mehrere Wirkstoffe in kosmetischen oder therapeutischen Schlankheitsformulierungen zu kombinieren.
Andere Experimente haben überraschenderweise auch gezeigt, dass die Fettablagerungen hemmenden Wirkstoffe gemäß der Erfindung auch auf der Ebene von reifen hypertrophierten Adipozyten aktiv sind. Sie wirken somit auf die beiden Fettwachstumsprozesse Hyperplasie und Hypertrophie, so dass sie erfolgreich in der Therapie zur Behandlung von Fettleibigkeit eingesetzt werden können. Ferner wirken diese Fettablagerungen hemmenden Wirkstoffe lokal an der Fettzelle, ohne die Freisetzung ihrer Fettsäuren in den Blutstrom zu verursachen, die, wenn sie nicht verbrannt werden, einen schädlichen Effekt auf die Gesundheit haben können (Ablagerung an der Arterienwand oder am intraabdominalen Gewebe). Ein weiterer Vorteil, der in Verbindung mit den Fettablagerungen hemmenden Wirkstoffen gemäß der Erfindung gefunden wurde, liegt in der Tatsache, dass die erhaltenen Phänomene reversibel sind und dass sie infolgedessen keine Blockierung des physiologischen Mechanismus verursachen.
Die Erfindung stellt somit allgemein eine Zusammensetzung bereit, die wenigstens ein absolutes Öl gemäß der Erfindung enthält.
Die Erfindung erstreckt sich auch auf eine therapeutische Zusammensetzung insbesondere für die topische Behandlung von Hautstörungen und/oder von Fettleibigkeit, die wenigstens ein erfindungsgemäßes absolutes Öl enthält. Die Erfindung betrifft auch eine kosmetische Zusammensetzung für die präventive oder kurative topische Behandlung von Hautstörungen und/oder Cellulit und von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen, die wenigstens ein absolutes Öl gemäß der Erfindung enthält. Unter der Behandlung von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen ist eine Behandlung von lokalisiertem Fett auf der Ebene von Dermis und Hypodermis zu verstehen.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält vorteilhafterweise eine Menge von wenigstens einem absoluten Öl gemäß der Erfindung, die geeignet ist, um wenigstens im Wesentlichen eine VEGF-Sekretion zu induzieren und/oder wenigstens im Wesentlichen die Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten zu hemmen, im Wesentlichen ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut zu verursachen.
Die Menge an absolutem Öl/absoluten Ölen gemäß der Erfindung wird vorteilhafterweise so eingestellt, dass eine Hautmikrozirkulation und/oder die Behandlung von Cellulit und/oder von lokalisierten adipösen Überlastungen wenigstens im Wesentlichen gefördert wird. Gemäß der Erfindung liegt diese Menge vorzugsweise zwischen 3 ppm und 20 ppm – insbesondere bei etwa 10 ppm.
Es ist zu bemerken, dass die verschiedenen absoluten Öle in der Praxis der vorliegenden Erfindung zwar auf 25% in Ethanol verdünnt werden, aber der Anteil an absolutem Öl/absoluten Ölen in ppm in den verschiedenen Zusammensetzungen gemäß der Erfindung bezieht sich auf eine Menge von „reinem/n" absolutem/n Öl(en), mit anderen Worten ein absolutes Öl, das weniger als 2% Ethanolrest enthält.
Gemäß einer Ausgestaltung der vorliegenden Erfindung enthält die Zusammensetzung wenigstens ein absolutes Öl von Allium sativum in wässriger Lösung.
Gemäß der Erfindung besteht die Zusammensetzung aus einer wässrigen Lösung von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum.
In einer bevorzugten Ausgestaltung enthält eine erfindungsgemäße Zusammensetzung wenigstens ein absolutes Öl, das von einem aus Allium sativum Knollen extrahierten Concrete erhalten wurde. Gemäß derselben Ausgestaltung enthält eine Zusammensetzung gemäß der Erfindung vorteilhafterweise ferner wenigstens ein absolutes Öl, das von einem aus Allium sativum extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde.
Spezieller, eine erfindungsgemäße Zusammensetzung ist vorteilhafterweise dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl aus Allium sativum umfasst, das ausgewählt ist aus: einem absoluten Öl, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde; einem absoluten Öl, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde; einem absoluten Öl, das von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde.
Erfindungsgemäß liegt die Menge für eine Zusammensetzung, die ein absolutes Öl enthält, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde, vorteilhafterweise zwischen 3 ppm und 20 ppm – insbesondere bei etwa 10 ppm.
Erfindungsgemäß liegt die Menge für eine Zusammensetzung, die ein absolutes Öl enthält, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde, oder ein absolutes Öl, das mit einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde, vorteilhafterweise zwischen 5 ppm und 20 ppm – insbesondere bei etwa 10 ppm.
Ferner repräsentieren die therapeutischen oder kosmetischen Zusammensetzungen gemäß der Erfindung ein Hautpflegemittel, das vorzugsweise wenigstens einmal täglich extern auf die zu behandelnden Bereiche der Haut appliziert wird.
Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen erfordern keinen anderen Wirkstoff als die absoluten Öle gemäß der Erfindung. Das/die absolute(n) Öl(e) von Allium sativum kann/können das/die einzige(n) Mittel zur Aktivierung der Mikrozirkulation oder der/die einzige(n) Fettablagerungen hemmende(n) Wirkstoff(e) in der genannten Zusammensetzung sein. Demzufolge kann eine erfindungsgemäße Zusammensetzung frei von Zusatzwirkstoffen sein. Insbesondere ist/sind das/die absolute(n) Öl(e) von Allium sativum das/die einzige(n) Pflanzenextrakt(e) in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann jedoch auch für „Flash"-Behandlungen verwendet werden, die aus einer Behandlung über 2 oder 3 Monate, vorzugsweise vor der Sommerperiode ausgeführt werden. In diesem Fall enthält sie vorteilhafterweise einen Zusatzwirkstoff, der aus einem lipolytischen Mittel eines beliebigen an sich bekannten Typs besteht. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält vorteilhafterweise wenigstens ein lipolytisches Mittel, das aus lipolytischen Mitteln natürlichen Ursprungs ausgewählt ist (z.B. Koffein und Mittel zum Stimulieren von AMPc-Synthese) und aus synthetischen lipolytischen Mitteln (Xanthinbasenverbindungen).
Weitere Zusatzwirkstoffe, insbesondere solche mit einem kosmetischen Effekt, können mit den erfindungsgemäßen absoluten Ölen assoziiert werden.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann eine bestimmte Anzahl von Mitteln mit den folgenden Fähigkeiten enthalten: Stabilisieren des elastischen Netzes (z.B. Siliciumderivate); und/oder Erzeugen eines sofortigen Tonungseffekts (Einbau von synthetischen Polymeren oder von Pflanzenproteinen (Sojabohne, Getreidekeime); und/oder Gewährleisten einer optimalen Hydrierung (Einbau von Benetzungsmitteln und/oder Umstrukturierungsmitteln).
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung erfordert vorteilhafterweise keine Integration von Mitteln zum Verbessern ihrer Eindringleistung (wie z.B. Exfolianten).
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung kann ein beliebiges Bindemittel enthalten, das mit den erfindungsgemäßen absoluten Ölen kompatibel ist, das pharmazeutisch oder kosmetisch akzeptabel ist und das geeignete Additive wie Gelierungsmittel, Parfüme, Konservierungsmittel, Stabilisatoren, Färbemittel usw. enthalten kann, so dass die gewünschte und geeignete galenische Form erhalten werden kann.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung hat vorzugsweise die Form einer einfachen Lotion.
Der Erfinder hat ebenso überraschenderweise gefunden, dass in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung der Geruch des Knoblauchs leichter maskiert werden kann als der eines von derselben Pflanze erzeugten Oleoresins oder eines Concretes. Bisher war dieses Ergebnis für die Fachperson völlig unvorhersehbar, da absolute Pflanzenöle hauptsächlich wegen ihrer angenehmen Geruchseigenschaften verwendet werden. Ein erfindungsgemäßes absolutes Öl hat jedoch über seine vorteilhaften Eigenschaften für die Behandlung von Cellulit und/oder adipösen Überlastungen und/oder Fettleibigkeit hinaus auch den Vorteil, dass es in Zusammensetzungen von einfach herzustellenden Cremes oder Lotionen integriert werden und eine effektive Behandlung durch topische Anwendung ohne unangenehmen Geruch ermöglichen kann.
Beispiele für die Herstellung einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung werden nachfolgend aufgeführt.
Für die Herstellung von Lotionen auf der Basis von absoluten Knoblauchölen können die Volumenkonzentrationen der verschiedenen Bestandteile wie folgt sein:

– Zusammensetzung 1:
– Absolutes Öl von Allium sativum, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde: 0,0003 bis 0,002
– Bindemittel: Konzentration auf den Erhalt von 100% eingestellt
– Zusammensetzung 2:
– Absolutes Öl von Allium sativum, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde: 0,0005% bis 0,002
– Bindemittel: Konzentration auf den Erhalt von 100% eingestellt
– Zusammensetzung 3:
– Absolutes Öl von Allium sativum, das von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde: 0,0005 bis 0,002
– Bindemittel: Konzentration auf den Erhalt von 100% eingestellt

Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung ist äußerst einfach und kostenarm.
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur kosmetischen Behandlung der Haut, von Cellulit, von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen, dadurch gekennzeichnet, dass wenigstens ein absolutes Öl von Allium sativum topisch als Mikrozirkulationsaktivierungsmittel und/oder als Fettablagerungen hemmender Wirkstoff auf die zu behandelnden Bereiche der Haut appliziert wird. Die Erfindung betrifft auch ein Medikament, dadurch gekennzeichnet, dass eine erfindungsgemäße Zusammensetzung verwendet wird.
Die Erfindung betrifft auch die Verwendung von wenigstens einem absoluten Öl von Allium sativum für die Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung, insbesondere für die topische Behandlung von Hautbeschwerden oder von Fettleibigkeit durch topische Applikation auf die zu behandelnden Hautbereiche, dadurch gekennzeichnet, dass eine wirksame Menge von wenigstens einem absoluten Öl von Allium sativum in die Zusammensetzung als Mikrozirkulationsaktivierungsmittel und/oder als Fettablagerungen hemmender Wirkstoff eingebaut wird.
In einem Verfahren oder bei einer Verwendung gemäß der Erfindung wird vorteilhafterweise eine Menge von wenigstens einem absoluten Öl von Allium sativum verwendet, die geeignet ist, eine VEGF-Sekretion oder eine Hemmung der Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten wenigstens im Wesentlichen zu induzieren, ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut zu verursachen.
In einem Verfahren oder bei einer Verwendung gemäß der Erfindung wird eine erfindungsgemäße Zusammensetzung vorteilhafterweise topisch auf wenigstens einen zu behandelnden Bereich der Haut appliziert.
Die Wirksamkeit der Erfindung geht aus den Ergebnissen der Beispiele 1 bis 6 hervor, die nachfolgend beschrieben und mit Bezug auf die beiliegenden 1A bis 1F, 2A und 2B, 3A und 3B illustriert werden.
Die 1A bis 1F, 2A und 2B sind mikroskopische fotografische Bilder von adipösen Zellen. Die 3A und 3B sind fotografische Bilder von Elektrophoresegelen.
1. BEISPIEL: Erhalten von absoluten Ölen von Allium sativum und Herstellung von absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Ölen und diese enthaltenden Lösungen
Die erfindungsgemäßen absoluten Öle werden mit einem Verfahren hergestellt, das an sich standardmäßig, gut bekannt und in der Parfümindustrie gut definiert ist.
Erhalten eines absoluten ACH-Öls
Ein erster Schritt beinhaltet die Herstellung eines Concretes aus Allium sativum Knollen. Zu diesem Zweck werden geschälte frische Knoblauchzehen mechanisch gemahlen. Dann erfolgt eine Extraktion mit Hexan. Das Concrete wird nach vollständiger Verdunstung des Hexans unter mäßiger Erwärmung, ohne das Gemisch zum Sieden zu bringen, zurückgewonnen. Dieses Concrete enthält die Wachse und aromatischen Produkte. Bei Umgebungstemperatur hat es ein pastenähnliches, gelbliches Aussehen.
Nach dem Auflösen dieses Concretes in Ethanol durch Waschen wird die Lösung gefiltert und dann auf –10°C gefroren, um die Wachse zu eliminieren. Nach der Destillation des Ethanols erhält man das absolute ACH-Öl. Auf 25% in Ethanol verdünnt, hat es das Aussehen einer klaren, hellgelben Lösung mit einem starken Geruch.
Erhalten des absoluten ACEA-Öls
ACEA wird mit einem Verfahren hergestellt, das mit dem zum Erhalten des ACH vergleichbar ist, aber der erste Schritt besteht hier in einer Extraktion mit Ethylacetat.
Das absolute ACEA-Öl, auf 25% in Ethanol verdünnt, hat das Aussehen einer klaren, hellbraunen Lösung mit einem mäßigen Geruch.
Erhalten des absoluten AOA-Öls
AOA wird mit einem Verfahren hergestellt, das mit dem zum Erhalten des ACH vergleichbar ist, aber der erste Extraktionsschritt erfolgt dieses Mal mit Knoblauchzehen, die zuvor einer Trocknungsstufe unterzogen wurden, und mit Aceton. Am Ende dieser ersten Extraktion erhält man ein Extraktionsoleoresin, das bei Umgebungstemperatur die Form einer sehr dunklen braunen Paste hat. Das absolute AOA-Öl wird dann wie oben angegeben hergestellt.
Dieses absolute AOA-Öl, auf 25% in Ethanol verdünnt, hat das Aussehen einer klaren braunen Lösung mit einem sehr schwachen Geruch.
Die erfindungsgemäßen absoluten Öle können mit einem einfachen Test charakterisiert und von den meisten anderen Extrakten auf Knoblauchbasis differenziert werden (Oleoresine, Concretes, essentielle Öle, wässrige Extrakte). Dieser Test beinhaltet das Kühlen der Lösung auf eine sehr niedrige Temperatur, insbesondere von etwa –20°C. Nur die absoluten Öle bleiben flüssig und klar. Es werden keine Fettablagerungen beobachtet.
Herstellen von wässrigen Lösungen von absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Ölen
Wässrige Lösungen von ACH, ACEA und AOA werden durch Verdünnen, in einem Verhältnis von 1:10 in Wasser für eine Zellkultur (Eurobio^® Frankreich), Ausgangsmateriallösungen von jedem absoluten Öl (ACH, ACEA oder AOA) in einem Verhältnis von 18,4 μl absolutes Öl (ACH, ACEA oder AOA) und 981,6 μl Wasser für die Zellkultur (Eurobio® Frankreich) hergestellt.
2. BEISPIEL: Die Wirkung von ACH, ACEA und AOA auf Primärkulturen von menschlichen dermalen mikrovaskulären Zellen.
Auf der Ebene der Hautmikrozirkulation bestehen die Gefäße, die in der Haut, hauptsächlich in der papillären Dermis, vorhanden sind, aus einer Endothelzellenschicht, einer Muskelwand, einer diskontinuierlichen Perizytenschicht und einer Basalmembran.
Die Endothelzelle hat wichtige Funktionen, die in der Grenzfläche zwischen Blut und Gewebe benötigt werden: sie spielt eine Doppelrolle, indem sie den Spannungszustand im Gefäß reguliert, mit anderen Worten den Gewebeblutfluss, und die Struktur der Arterienwand. Es hat sekretorische und metabolische Aktivitäten, und auf der Ebene dieser Zellen beginnt der Angiogeneseprozess, der die Bildung von neuen Gefäßen sicherstellt.
ZELLEN UND BEHANDLUNGEN
Primäre Kulturen von humanen dermalen mikrovaskulären Zellen (p3 HdMEC, Clonetics^®) wurden in 6-Well-Platten eingeimpft (3500 Zellen/Well) und in einem kompletten EBM-Medium (Endothelbasalmedium) kultiviert, dem Aliquoten vom Zulieferer (Clonetics^®) zugegeben wurden: 10 ng/ml rekombinantes EGF; 5 μg/ml Insulin; 1 μg/ml Hydrokortison; 50 μg/ml Gentamicin; 50 ng/ml Amphotericin B; und 5% SVF. Die Experimente erfolgten zwischen den Zyklen 5 und 7. Die HdMEC-Zellen werden im Medium kultiviert, dem schließlich 3 bis 10 μl einer ACH- oder ACEA- oder AOA-Lösung pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. HdMEC-Zellen werden in dem Medium allein in Kultur gehalten. Das Kulturmedium wird alle 2 Tage erneuert.
Die folgenden Aktivitätskriterien werden angewendet:

– Stimulation der Differenzierung von HdMEC-Zellen. Die morphologischen Änderungen werden durch morphologische Analyse mit einem an einer CCD-Kamera angeschlossenen Umkehrphasenmikroskopie bestimmt;
– Stimulation der Sekretion des Angiogenfaktors VEGF (vaskulärer Endothelwachstumsfaktor) durch Analyse des im Kulturmedium sekretierten VEGF (Quantikine Human VEGF Immunoassay, R&D Systems, UK).

ERGEBNISSE
Morphologische Änderungen
Die Zugabe von ACH oder ACEA oder AOA zum Kulturmedium für HdMEC-Zellen induziert morphologische Veränderungen: die HdMEC-Zellen werden zu einer Spindelform verlängert und dehnen sich in Richtung auf benachbarte Zellen aus. Die Mehrzahl der HdMEC-Kontrollzellen haben die Form einer homogenen Population von polygonalen Zellen, mit einem zentralen Kern und verschwommenen Zellgrenzen. Diese strukturellen Umordnungen führen zur Bildung eines Typs von kapillarähnlichem Netz.
VEGF-Sekretion
Die Zugabe von ACH oder ACEA oder AOA zum Kulturmedium für HdMEC-Zellen induziert die Sekretion von VEGF im Kulturmedium sehr signifikant. Das absolute Öl von Allium sativum, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete (ACH) erhalten wurde, das absolute Öl von Allium sativum, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete (ACEA) erhalten wurde, das absolute Öl von Allium sativum, das von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin (AOA) erhalten wurde, wirken auf die differenzierten Funktionen der Endothelzellen, ohne deren proliferativen Eigenschaften zu modifizieren. Diese Justierung der VEGF-Raten führt zu einer Erhöhung der Hautmikrovaskularisierung.
3. BEISPIEL: Wirkung von ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Adipozytenmorphologie (1A bis 1F)
Verwendete Zellularmodelle und Behandlungen
Die bei der Adipozytendifferenzierung beteiligten Mechanismen wurden in vitro viele Jahre lang studiert (allgemeine Übersicht: Klaus S., BioEssays, 19: 215–223, 1997).
Die biologischen Aktivitäten von ACH, ACEA und AOA werden mit Kulturen von 3T3-F442A Zellen (murine Zelllinie, die aufgrund ihrer Lipidspeicherungsfähigkeit verwendet wird) demonstriert und dann an primären Kulturen von humanen Präadipozyten bestätigt.
Die Zellen werden in 6-Well-Platten eingeimpft (Impfdichte: 15000 Zellen/Well) und bis zum Konfluieren in einem Medium aus DMEM-10% SVD und einem Antibiotikum gehalten. Bei Konfluenz werden die Präadipozyten dann in einem Medium aus DMEM-10% SVF und Insulin kultiviert. Die behandelten Zellen werden im Kulturmedium gehalten, dem schließlich 25 μl von einer der zu testenden Lösungen (ACH oder ACEA oder AOA) pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Die 3T3-F442A Kontrollpräadipozyten werden im Kulturmedium kultiviert, dem 25 μl Kontrolllösung pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Das Kulturmedium wird alle 48 Stunden erneuert.
Primärkulturen von humanen Präadipozyten
Die humanen Präadipozyten (ZenBio^®, USA) werden gemäß Herstelleranweisungen kultiviert. Beim Erhalt werden die humanen Präadipozyten in dem geeigneten mitgelieferten Medium kultiviert, dem schließlich 3 μl bis 10 μl einer der zu testenden Lösungen (ACH oder ACEA oder AOA) pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Die Kontrollpräadipozyten werden in dem Medium allein in Kultur gehalten. Das Kulturmedium wird alle 3 Tage erneuert.
ERGEBNISSE
Nach Ablauf von 7 (3T3-F442A Zellen, 1A und 1B) und 9 Behandlungstagen (humane Präadipozyten, 1C bis 1F) wurde die Wirkung der ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen auf den Differenzierungsprozess auf der Basis von morphologischen Kriterien durch mikroskopische Beobachtung der behandelten Kulturen und Kontrollkulturen studiert. Die Zellen werden dann als differenziert angesehen, wenn eine morphologische Analyse mit einem an einer CCD-Kamera angeschlossenen Umkehrphasenmikroskop zeigt, dass sie eine runde Kontur angenommen haben und ihr Zytoplasma völlig mit Lipidtröpfchen gefüllt ist. Man stellt fest, dass die ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen eine zelluläre Differenzierung von murinen 3T3-F442A Präadipozyten hemmen (1A und 1B).
Nach Ablauf von 7 Tagen einer chronischen Behandlung induziert die ACH-Lösung (1A) eine erhebliche Reduzierung der Zahl der entwickelten reifen Adipozyten. Die Mehrzahl der Zellen behalten ihre fibroblastische Präadipozytenmorphologie mit einer sehr ausgeprägten Lipidspeicherungshemmung. Obwohl in den Figuren nicht zu sehen, werden dieselben Ergebnisse auch mit den ACEA- und AOA-Lösungen erhalten. Die 3T3-F442A Kontrollzellen (1B) folgen dem normalen Prozess der terminalen Differenzierung und nehmen die morphologischen Charakteristiken von reifen Adipozyten an, mit einem Zytoplasma, das mit Triglyceridtröpfchen gefüllt ist, wie die hohe Beugungsleistung demonstriert.
Es wurde auch gefunden, dass die ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen den Prozess der terminalen Differenzierung von humanen Präadipozyten hemmen.
Die in Anwesenheit einer ACH-Lösung (1C) kultivierten humanen Präadipozyten behalten eine Präadipozytenmorphologie bei: die humanen Zellen bleiben spindelförmig, es sind nur sehr wenig Lipidtröpfchen im Zytoplasma nachweisbar. Dieselben Ergebnisse werden mit der ACEA- (1D) und der AOA-Lösung (1E) erhalten. Zum Vergleich, die humanen Kontrollpräadipozyten (1F) verlieren ihre fibroblastische Morphologie, mit dem Aussehen einer sphärischen Gestalt und dem Vorliegen von zahlreichen intrazytoplasmischen Lipidvesikeln, die anhand ihrer hohen Beugungsleistung identifizierbar sind.
Eine Langzeitbehandlung mit dem absoluten Öl von Allium sativum, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete (ACH) erhalten wurde, dem absoluten Öl von Allium sativum, das mit einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete (ACEA) erhalten wurde, dem absoluten Öl von Allium sativum, das von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin (AOA) erhalten wurde, begrenzt die morphologischen und biologischen Veränderungen, die für eine Adipozytendifferenzierung charakteristisch sind. Bei einem Kontakt mit ACH, ACEA und AOA sind die Präadipozyten nicht mehr für die hormonale Umgebung empfindlich, die ihren Lipidmetabolismus reguliert und die normalerweise die Umwandlung von Präadipozyten in reife differenzierte Fettzellen zulässt.
4. BEISPIEL: Wirkung von ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Morphologie von reifen hypertrophierten Adipozyten (2A and 2B)
Bei Konfluenz werden die 3T3-F442A Präadipozyten 4 Tage lang in einem Differenzierungsmedium (DMEM-10% SVF und Insulin) kultiviert. Unter diesen Bedingungen verändern sich die Zellen zu „reifen Adipozyten", deren Volumen und Triglyceridgehalt erhöht ist. Die Zellen werden dann wie zuvor beschrieben behandelt.
Im Vergleich zu den reifen Kontrolladipozyten (2B), die eine voluminöse, sphärische Gestalt und eine starke Speicherung von Lipidvesikeln im Zytoplasma haben, haben die mit einer ACH-Lösung (2A) behandelten reifen Adipozyten eine weniger runde Zellmorphologie und einen stark reduzierten Gehalt von Intraadipozyt-Lipidvesikeln, so dass die erfindungsgemäße ACH-Lösung sich im Prozess des Begrenzens der Adipozytenhypertrophie durch Umkehren des Differenzierungsprozesses als effektiv erweist. Dieselben Ergebnisse werden mit den erfindungsgemäßen ACEA- oder AOA-Lösungen erhalten.
5. BEISPIEL: Wirkung von ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die PPARγ2 mRNA Expression (3A und 3B)
Die Differenzierung von Adipozyten ist eine wichtige Komponente in der Entwicklung von adipösem Gewebe und von Fettleibigkeit. Der Prozess der Adipozytendifferenzierung ist in vitro durch die programmierte Induktion verschiedener Gene charakterisiert, die die Lipoproteinlipolyse, die Zellabsorption von Fettsäuren und die Synthese von Fettsäuren und Triglyceriden regulieren. Einfach ausgedrückt, können diese Gene als Differenzierungsmarker der folgenden Typen kategorisiert werden: sehr früh (wie z.B. die Expression von Lipoproteinlipase mRNA), früh (wie z.B. die Expression von PPARγ2 mRNA) oder spät (wie z.B. die Leptinexpression) (allgemeine Übersicht: Morrison R. F., Farmer S. R., J. Cell. Biochem Suppl. 32/33: 59–67, 1999). Auf diese Weise kann die genaue Stufe der Adipozytendifferenzierung durch Studieren des Expressionsniveaus der relevanten mRNAs (PPARγ2 mRNA) oder anhand des Levels der Leptinexpression bestimmt werden.
Der Prozess der terminalen Differenzierung ist durch die Induktion von frühen und späten Differenzierungsmarkern charakterisiert (allgemeine Übersicht: Morrison R. F., Farmer S. R., J. Cell. Biochem Suppl. 32/33: 59–67, 1999).
Die Familie der Nuklearrezeptoren des PPAR-Typs („Peroxisomal Proliferator-Activated Receptor") umfasst 3 Untertypen: PPARα, PPARδ, PPARγ. PPARα wird in der Leber stark exprimiert, wo er die Expression der am Lipidmetabolismus beteiligten Gene reguliert. Die PPARδ-Expression ist allgegenwärtig. Die Funktion dieses Rezeptors wurde noch nicht bestimmt. PPARγ liegt in der Form von zwei Isoformen vor, PPARγ1 und PPARγ2. Und PPARγ2 wird im Fettgewebe von Säugetieren stark exprimiert. Wenn PPARγ2 aktiviert wird, dann induziert es die Transkription von mehreren Adipozytgenen, die Proteine und Enzyme codieren, die an der Erzeugung und Haltung des Adipozytenphänotyps beteiligt sind. Es spielt daher eine bedeutende Rolle bei der Differenzierung und beim Metabolismus von adipösen Zellen.
Die Wirkung von ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die PPARγ2 mRNA Expression wurde nach Ablauf von 3 (3A, 3T3-F442A Zellen) oder 6 Behandlungstagen (3B, humane Präadipozyten) bestimmt. Der PPARγ2 mRNA Gehalt wird durch RT-PCR (umgekehrte Transkriptions-Polymerasekettenreaktion) nach Reinigung der RNA gemäß dem Verfahren für das RNeasy Total RNA System Kit (Qiagen^®), Quantifizieren des RNA-Gehalts in den Proben durch Messen und Aufzeichnen der Absorptionskoeffizienten bei 260 und 280 nm und Verifizieren der Qualität der nach der Migration auf Agarosegel erhaltenen RNAs analysiert.
Für die RT-Stufe wird komplementäre DNA (cDNR) von 1 μg Gesamt-RNA (3T3-F442A) oder von 0,2 μg Gesamt-RNA (humane Präadipozyten) synthetisiert. Die Amplifikationen von cDNA, die PPARγ2 codieren, werden in Anwesenheit von geeigneten Sens- und Antisens-Primern erhalten (Genset^®, siehe Tabelle 1). Die PCR-Produkte haben jeweils eine Größe von 307 Basenpaaren (3T3-F442A Zellen) und 582 Basenpaaren (humane Präadipozyten). Es wurden geeignete Kontrollen (Umkehrtranskriptions- und PCR-Amplifikationsstufen) durchgeführt. Die PCR-Gemische durchliefen 22 Zyklen (3T3- F442A Zellen) bzw. 35 Zyklen (humane Präadipozyten) der Amplifikation durch Denaturation (2 Minuten bei 94°C), Hybridisierung (1 Minute bei 60°C) und Elongation (6 Minuten bei 72°C). Die PCR-Produkte wurden mit Elektrophorese in Agarosegel analysiert und mit Ethidiumbromid angezeigt.
Tabelle 1
Das Expressionsniveau des adipogenen Transkriptionsfaktors PPARγ2 wird stark reduziert, wenn die 3T3-F442A Zellen mit einer ACH-Lösung (3A, Ergebnis 2) in Kontakt waren, im Vergleich zu den Kontrollzellen, wie durch die Intensität der Bande demonstriert wurde (3A, Ergebnis 1). Dieselben Ergebnisse werden mit der ACEA-Lösung (3A, Ergebnis 3) und der AOA-Lösung (3A, Ergebnis 4) erhalten.
Ebenso hemmen die erfindungsgemäßen ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen die PPARγ2 mRNA Expression von humanen Präadipozyten (3B, Ergebnis 6, das eine Behandlung mit einer ACH-Lösung illustriert) im Vergleich zu den humanen Kontrollpräadipozyten (3B, Ergebnis 5) signifikant.
Das absolute Öl von Allium sativum, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete (ACH) erhalten wurde, das absolute Öl von Allium sativum, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete (ACEA) erhalten wurde, und das absolute Öl von Allium sativum, das mit einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin (AOA) erhalten wurde, wirken auf die Ebene des Differenzierungsprogramms durch Reduzieren der Expression des PPARγ2-Messengers.
6. BEISPIEL: Wirkung von absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Ölen auf die Leptinsekretion
Die Kapazität von absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Ölen zur Hemmung des Differenzierungsprozesses in humanen Präadipozyten wurde durch quantitative Messung der Leptinraten bestimmt, die im Kulturmedium der verschiedenen Assays sekretiert wurden. Leptin, das durch das ob Gen codiert und durch die Adipozyten synthetisiert und sekretiert wird, wird als später Marker des Adipozytendifferenzierungsprozesses angesehen. In vitro nimmt die Basalsekretion von Leptin im Verlaufe des Umwandlungsprozesses von Präadipozyten in reife Adipozyten allmählich zu (MacDougald, O. A. et al., Proc Natl Acad Sci, USA, 92: 9034–9037, 1995).
Die Wirkung auf die Leptinsekretion der absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Öle wurde über eine Behandlungsperiode von 9 Tagen (humane Präadipozyten) studiert. Die Leptinraten, die von den Kontrollzellen und von den behandelten Zellen sekretiert wurden, wurden in den verschiedenen Kulturmedien gemessen, von denen nach 3, 6 und 9 Tagen Proben genommen wurden (Tage, an denen das Medium erneuert wurde). Die freigesetzten Leptinraten wurden quantitativ durch ELISA-Analyse (R&D Systems Europe) gemäß Herstelleranweisungen bestimmt. Die Ergebnisse werden dann als Mittel ± Standardabweichung vom Mittel ausgedrückt. Die statistischen Vergleiche erfolgen mit dem Student's T Test (p < 0,005, was das Signifikanzlevel repräsentiert).
Die Ergebnisse werden wie folgt standardisiert: am Ende der 9 Behandlungstage werden die für jede der Behandlungen an Tag 3, Tag 6 und Tag 9 gemessenen Leptinwerte gesammelt und als Prozentanteil der für die Kontrollen erhaltenen Werte ausgedrückt (Tabelle 2).
Tabelle 2: Wirkung von ACH, ACER oder AOA auf die Leptinsekretion
Die in Anwesenheit von absolutem ACH-, ACEA- und AOA-Öl kultivierten humanen Präadipozyten sekretieren Leptinmengen im Kulturmedium, die erheblich geringer sind als die, die im Kulturmedium von unbehandelten humanen Kontrollpräadipozyten nachgewiesen wurden. Die erhaltenen Ergebnisse zeigen, dass die absoluten ACH-, ACEA- oder AOA-Öle auf die Ebene des Differenzierungsprogramms wirken und den Prozess der Adipozytenumwandlung hemmen können.

Claims

Absolutes Öl aus Allium sativum.
Absolutes Öl aus Allium sativum, die von wenigstens einem Concrete von Allium sativum erhalten wird.
Absolutes Öl nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass es von einem mit Hexan extrahierten Concrete gewonnen wurde.
Absolutes Öl nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass es von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete gewonnen wurde.
Absolutes Öl aus Allium sativum, das von einem Extraktionsoleoresin von Allium sativum erhalten wurde.
Absolutes Öl aus Allium sativum nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass es von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde.
Zusammensetzung, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl aus Allium sativum umfasst, und dadurch, dass sie wachsfrei ist.
Zusammensetzung nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl aus Allium sativum in wässriger Lösung umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass sie aus einer wässrigen Lösung von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum gebildet ist.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 9, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine Menge von wenigstens einem aboluten Öl aus Allium sativum umfasst, die geeignet ist, um wenigstens im Wesentlichen eine VEGF-Sekretion einzuleiten, im Wesentlichen ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut hervorzurufen.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine Menge von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum umfasst, die geeignet ist, um wenigstens im Wesentlichen die Hautmikrozirkulation zu fördern.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 11, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine Menge von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum umfasst, die geeignet ist, um wenigstens im Wesentlichen die Differenzierung von Präadipozyten in reifen Adipozyten zu hemmen, im Wesentlichen ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut hervorzurufen.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 12, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine Menge von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum umfasst, die für eine topische Behandlung von Cellulit und/oder von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen geeignet ist.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 13, dadurch gekennzeichnet, dass sie zwischen 3 ppm und 20 ppm absolutes Öl aus Allium sativum umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 7 oder 14, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl umfasst, das von einem Concrete erhalten wurde, das aus Allium sativum extrahiert wurde.
Zusammensetzung nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass sie ferner wenigstens ein absolutes Öl umfasst, das von einem Extraktionsoleoresin erhalten wurde, das aus Allium sativum extrahiert wurde.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 16, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl aus Allium sativum umfasst, das ausgewählt ist aus: einem absoluten Öl, das von einem mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde; einem absoluten Öl, das von einem mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde; einem absoluten Öl, das von einem mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresin erhalten wurde.
Therapeutische Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 17.
Verfahren zur kosmetischen Behandlung der Haut, dadurch gekennzeichnet, dass wenigstens eine wirksame Menge absolutes Öl aus Allium sativum auf topischem Weg auf wenigstens eine Zone der zu behandelnden Haut appliziert wird.
Verfahren zur kosmetischen Behandlung der Haut, dadurch gekennzeichnet, dass eine Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 7 bis 18 auf topischem Weg auf wenigstens eine Zone der zu behandelnden Haut appliziert wird.
Verwendung von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum für die Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die Behandlung von Erkrankungen der Haut auf topischem Weg.
Verwendung von wenigstens einem absoluten Öl aus Allium sativum für die Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die Behandlung von Fettleibigkeit auf topischem Weg.
Verfahren zum Erhalten eines Extrakts aus Allium sativum, das die folgenden Schritte umfasst: – Unterziehen von Allium sativum einer Extraktion mit einem nichtwässrigen flüchtigen Lösungsmittel, – Verdunstenlassen des Lösungsmittels, um ein erstes Extraktionsprodukt zu gewinnen, dadurch gekennzeichnet, dass das erste Extraktionsprodukt einer Folgeextraktion mit Ethanol unterzogen wird, um ein absolutes Öl zu gewinnen.
Verfahren nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet, dass die Folgeextraktion mit Ethanol aus den folgenden Schritten besteht: – Auflösen des ersten Extraktionsprodukts in dem Ethanol bei Umgebungstemperatur, um eine erste Ethanollösung durch Filtration zurückzugewinnen, – Abkühlen der ersten Ethanollösung auf eine Temperatur von etwa –10°C und anschließende Filterung, um eine zweite Ethanollösung zurückzugewinnen, – Destillieren des Ethanols der zweiten Ethanollösung, um schließlich ein absolutes Öl zu gewinnen.
Verfahren nach Anspruch 23 oder 24, dadurch gekennzeichnet, dass die Extraktionsstufe durch ein nichtwässriges flüchtiges Lösungsmittel mittels eines nichtwässrigen und nichtbenzolischen flüchtigen Lösungsmittels realisiert wird.