DE60120744T2

DE60120744T2 - Mittel gegen feetgewebe enthaltend knoblauch zwiebelgewächse

Info

Publication number: DE60120744T2
Application number: DE60120744T
Authority: DE
Inventors: Isabelle Tomatis
Original assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Current assignee: Pierre Fabre Dermo Cosmetique SA
Priority date: 2000-10-31
Filing date: 2001-10-26
Publication date: 2007-06-14
Anticipated expiration: 2021-10-27
Also published as: FR2815865B1; WO2002036093A3; ES2266280T3; AU2002214111B9; DK1335701T3; PT1335701E; DE60120744D1; EP1335701B1; CN1226996C; CN1487822A; BR0115009A; JP4124648B2; CA2426284A1; US6852343B2; AU2002214111B2; CY1105267T1; ZA200303693B; AU1411102A; EP1335701A2; ATE329575T1

Description

Die Erfindung betrifft eine antiadipöse Zusammensetzung zur topischen Behandlung sowie die Anwendungen dieser Zusammensetzungen und/oder von Knoblauchextrakten kosmetisch für eine präventive oder kurative Behandlung von Cellulit oder von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen oder therapeutisch zur Behandlung von Fettleibigkeit.
Mehr als 90% der Frauen haben Cellulit im größeren oder kleineren Ausmaß. Es gibt viele Ursachen für Cellulit: genetische Prädisposition, Hormonungleichgewicht, falsche Ernährung, Kreislaufprobleme, Stress oder Depressionen. Kurz ausgedrückt, entspricht Cellulit einer Zunahme des adipösen Gewebes in bestimmten Regionen des Körpers, insbesondere an den Hüften, am Gesäß, an den Knien und an den Vorderarmen. Diese(s) adipöse Gewebe oder Fettmasse des Körpers befindet sich praktisch unter der gesamten Hautoberfläche. Cellulit wird häufig mit einer allgemeinen adipösen Überlastung in Verbindung gebracht und die Stabilität der Fettmasse ist bei der Regulierung der Cellulitentwicklung ein wichtiger Punkt.
Cellulit ist in der Dermis lokalisiert. In der Hypodermis, einer tiefen Schicht der Dermis, sammeln sich adipöse Zellen oder Adipozyten zu Läppchen, die durch Partitionen (Reihen von Kollagenfasern) begrenzt werden, die parallel zueinander und lotrecht zur Hautoberfläche liegen. Das Adipozyt ist eine große Zelle, bei der 80% ihres Volumens aus Lipidvakuolen bestehen. Ihre Größe ist variabel. Wenn das Vakuol mit Fett überlastet ist, dann nimmt das Adipozytvolumen zu und das dermale Bindegewebe verdickt sich.
Cellulit hängt auch von Funktionskriterien ab, da es auch eine lokalisierte Masse ist, in Verbindung mit einer Insuffizienz des Venentonus und/oder einer Beeinträchtigung des Lymphsystems.
Die erste Verformung des Cellulitgewebes erfolgt in den Adipozyten. Sobald das Adipozytvolumen zunimmt, erfahren die Partitionen eine tiefe Dehnung, die an der Oberfläche der Epidermis an bestimmten Stellen als Grübchen erscheinen. Diese Grübchen werden noch stärker sichtbar, wenn man die Haut zusammenkneift: dies ist der Orangenhauteffekt.
Die zweite Verformung erfolgt in der Grundsubstanz. Die Grundsubstanz ändert sich je nach der Menge des darin enthaltenen Wassers. Dies erläutert den Verlust der Elastizität in der Haut in Cellulitbereichen. Der Druck des von der Grundsubstanz zurückgehaltenen Wassers zerdrückt die Zellen und führt wieder zu einer Verschlechterung der Elastin- und Kollagenfasern.
Schließlich ist die letzte Folge einer überschüssigen Wasserrückhaltung in der Grundsubstanz eine Kompression der Lymph- und Blutgefäße. Die Folge dieser Kompression ist ein Rückgang des Venenblutflusses und des Lymphflusses, die sowohl auf epidermaler als auch hypodermaler Ebene auftritt. Dies führt zu einem schlechten Blutgleichgewicht und zu einer mangelhaften Beseitigung von Gift- und Abfallstoffen.
Vom Stoffwechselstandpunkt her gesehen dient das Adipozyt in adipösem Gewebe als Energiereserve für den Körper.
Um seine Energiereservefunktion zu gewährleisten, kann das Adipozyt Energie in Form von Triglyzeriden in seinen Fetttröpfchen speichern (dies ist Lipogenese) und diese Energie dann in Form von Fettsäuren im Blutkreislauf freisetzen (dies ist Lipolyse).
Und das Gleichgewicht zwischen diesen beiden Stoffwechselwegen (Lipogynese und Lipolyse) konditioniert die Adipösität.
Die Lipogenfunktion des Adipozyts erfordert die Anwesenheit von Fettsäuren, die im Wesentlichen von triglyzeridreichen zirkulierenden Lipoproteinen abgeleitet werden.
Auf der katabolischen Seite entspricht Lipolyse der Trennung der Bestandteile der Adipozyt-Triglyzeride in Glycerol einerseits und Fettsäuren andererseits. Diese Lipolyse findet aufgrund der Aktion eines Begrenzungsenzyms statt, der hormonempfindlichen Lipase. Die Aktivierung von hormonempfindlicher Lipase ist vom Gehalt an zyklischem AMP abhängig. In menschlichem adipösem Gewebe können die Hormone und diversen Agenzien die intrazellulären Konzentrationen von cAMP modulieren und somit an der Regulierung der hormonempfindlichen Lipase und daher der Lipolyse teilnehmen.
Derzeit enthalten alle bekannten Schlankheitskrems wenigstens einen Wirkstoff, der Lipolyse fördert und/oder Lipogenese hemmt oder der darauf abzielt, die lymphatische und kapillare Mikrozirkulisation wiederherzustellen.
Trotz der Diversität der bisher entwickelten Schlankheitskrems und der großen Zahl von zur Behandlung von Cellulit vorgeschlagenen verwandten Therapien (elektrische Stimulisation, Wärme, Massage usw.), wurde bisher keine Behandlung gefunden, die für die Bekämpfung von Cellulit wirklich wirksam ist.
Parallel dazu wurden die an der Ausdehnung der Fettmasse beteiligten Mechanismen in den letzten Jahren aufgezeigt.
Die übermäßige Entwicklung von adipöser Masse ist gewöhnlich mit einer Zunahme des Adipozytenvolumens und von deren Triglyzeridgehalt verbunden, ohne dass ihre Anzahl zunimmt: dies ist als Hypertrophie bekannt. In bestimmten Fällen von Übergewicht wird Hypertrophie von Hyperplasie begleitet, d.h. eine Zunahme der Zahl der adipösen Zellen.
Es wurde jetzt auch gezeigt, dass die Zahl der Fettzellen in der perinatalen Periode nicht bestimmt wird, da die Bildung von Adipozyten über die gesamte Lebenszeit stattfinden kann. Sie entsteht von Vorläuferzellen, den Präadipozyten. Das Adipozyt ist eine dünne Zelle mit Fibroplastmorphologie: und diese Zelle, und nicht das Adipozyt, kann sich vervielfältigen.
Kurz ausgedrückt, die letztendliche Differenzierung von Adipozyten erfolgt in zwei Schritten mit der Umwandlung des Präadipozyts in ein reifes Adipozyt, wobei das Letztere Triglyzeride speichern kann.
Solche Ergebnisse bieten zwar einen neuartigen und interessanten Ansatz für die Behandlung von Cellulit, sie ergaben jedoch aufgrund ihres Unvermögens, aktive Prinzipien zu finden, die es ermöglichen, durch topische Anwendung eine Hemmung der adipozytischen Umwandlung der Präadipozyten in reife Adipozyten zu erzielen, keine praktische Wirkung.
Es ist Ziel der vorliegenden Erfindung, dieses Fehlen anzugehen, und es ist ihre Hauptaufgabe, eine therapeutische oder kosmetische Zusammensetzung für die antiadipöse Behandlung durch topische externe Anwendung (auf der Haut) bereitzustellen, die insbesondere sehr effektiv die Differenzierung von Präadipozyten in Adipozyten blockiert.
Die Erfindung schlägt insbesondere eine verbesserte kosmetische oder therapeutische Behandlung von Cellulit, von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen und von Fettleibigkeit vor.
Die Erfindung schlägt ferner neuartige kosmetische oder therapeutische Verwendungszwecke von Extrakten – insbesondere von nichtwässrigen Extrakten – von Allium sativum (Knoblauch) Knollen vor.
Im gesamten Text erstreckt sich der Begriff „Knollen" auf Knollen der Pflanze (Gruppen von Knoblauchzehen) und auf separate Knoblauchzehen, geschält oder ungeschält.
Die Erfindung schlägt auch neuartige Zusammensetzungen auf der Basis von Knoblauchknollenextrakten und deren Verwendungen vor, insbesondere für kosmetische oder therapeutische Zwecke.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Bereitstellung einer therapeutischen Zusammensetzung, die an reifen hypertrophierten Adipozyten im Zusammenhang mit der Behandlung von Fettleibigkeit wirksam ist.
Im gesamten folgenden Text werden die Begriffe, die Extrakte definieren (Extrakt, essentielles Öl, absolutes Öl, Concrete, Oleoresin usw.), gemäß der in der Norm NFT 75-006 (Februar 1998) definierten Terminologie benutzt.
So betrifft die Erfindung eine Zusammensetzung zur topischen externen Behandlung wie in Anspruch 1 definiert. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung ist dadurch gekennzeichnet, dass sie Folgendes umfasst:

• eine wirksame Menge von wenigstens einem antiadipösen Wirkstoff, der aus Extrakten von Allium sativum Knollen, mit Ausnahme von einem mit Hexan extrahierten Extraktionsoleoresin, ausgewählt ist;
• bei Bedarf ein oder mehrere weitere komplementäre Wirkstoffe, mit Ausnahme von Nympheaceae-Extrakten,
• ein kosmetisch oder pharmazeutisch akzeptables Bindemittel, das äußerlich – insbesondere auf die Haut – topisch angewendet werden kann.

Vorteilhafterweise umfasst die erfindungsgemäße Zusammensetzung eine Menge von wenigstens einem antiadipösen Wirkstoff, der wenigstens im Wesentlichen zum Hemmen der Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten geeignet ist, im Wesentlichen ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut zu verursachen.
Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß umfasst die Zusammensetzung eine wirksame Menge von wenigstens einem antiadipösen Wirkstoff, der aus nichtwässrigen Extrakten von Allium sativum Knollen ausgewählt ist.
Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß liegt die Menge der Extrakte von Allium sativum Knollen zwischen 3 ppm und 20 ppm, insbesondere bei etwa 10 ppm.
In einer ersten Ausgestaltung und erfindungsgemäß umfasst die Zusammensetzung als antiadipösen Wirkstoff ein essentielles Öl von Allium sativum Knollen und einen Emulgator.
Ferner wird zum Herstellen einer Krem, die topisch appliziert werden kann, das Gemisch aus essentiellem Öl und Emulgator vorteilhafterweise in einem Gel und einer Flüssigkeit wie Wasser integriert.
In einer zweiten Ausgestaltung und erfindungsgemäß umfasst die Zusammensetzung als antiadipösen Wirkstoff wenigstens ein absolutes Öl von Allium sativum Knollen in wässriger Lösung. Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß umfasst sie wenigstens ein absolutes Öl, das auf der Basis eines aus Allium sativum Knollen extrahierten Concrete erhalten wurde. Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß umfasst sie ferner wenigstens ein absolutes Öl, das auf der Basis eines aus Allium sativum Knollen extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde.
Spezieller, eine erfindungsgemäße Zusammensetzung ist vorteilhafterweise dadurch gekennzeichnet, dass sie als antiadipösen Wirkstoff wenigstens ein Extrakt von Allium sativum Knollen umfasst, ausgewählt aus einem essentiellen Öl, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde, und einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde.
Erfindungsgemäß liegt für eine Zusammensetzung, die ein absolutes Öl, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde, die Menge des absoluten Öls vorteilhafterweise zwischen 3 ppm und 20 ppm, insbesondere bei etwa 10 ppm.
Gemäß der Erfindung liegt für eine Zusammensetzung, die wenigstens ein Extrakt von Allium sativum Knollen umfasst, ausgewählt aus einem essentiellen Öl, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Oleoresins erhalten wurde, die Menge der Extrakte vorteilhafterweise zwischen 5 ppm und 20 ppm, insbesondere bei etwa 10 ppm.
Es ist zu bemerken, dass in der Praxis der vorliegenden Erfindung die verschiedenen absoluten Öle zwar zu 25% in Ethanol verdünnt sind, dass sich aber der Anteil an absoluten Ölen in ppm der verschiedenen erfindungsgemäßen Zusammensetzungen auf eine Menge an „reinen" absoluten Ölen bezieht, d.h. ein absolutes Öl, das weniger als 2% Restethanol enthält.
Die Erfindung basiert somit auf der äußerst überraschenden und unerwarteten Entdeckung, dass Extrakte von Allium sativum Knollen eine sehr effiziente Aktivität beim Hemmen der Differenzierung von adipösen Zellen zeigen.
Es ist zu bemerken, dass Allium sativum seit vielen Jahrhunderten für seine antiseptische, antivirale, kardioprotektive, tonische, diuretische usw. Aktivität bekannt ist.
Die EP-0923937 beschreibt eine Zusammensetzung zur Behandlung von Hautstörungen wie Allergien, Depigmentierungen, Mykosen, Sprödigkeit, Hyperkeratosen, Schnitte und Verbrennungen, die wenigstens zwei Pflanzenextrakte in Form von Öl oder Pulver enthält, die durch Extraktion mit Lösungsmitteln auf der Basis von getrockenen Pflanzen erhalten wurden. Dies sind somit Extraktionsoleoresine (oder Resinoide). Unter den verschiedenen Extrakten umfasst die Zusammensetzung 1% bis 3% eines mit Hexan extrahierten Extraktionsoleoresins von Knoblauch, das keine antiadipöse Wirkung zeigt.
Die GP-1106551 beschreibt die Verwendung von Extrakten von Pflanzen der Familie Nympheaceae als Wirkstoffe für die therapeutische Behandlung von Neoplasmen und von Cellulit. Die beschriebenen Zusammensetzungen beinhalten auch ein oder mehrere zusätzliche essentielle Öle von Pflanzen anderer Spezies, insbesondere der Familie Cruciferaceae (z.B. Senföl oder Meerrettichöl) oder der Familie Liliaceae (z.B. Knoblauchöl), die einen stabilisierenden Effekt auf Nympheaceae-Extrakte und einen synergistischen Effekt mit diesen Extrakten erzeugen. Für die topische Behandlung von Cellulit werden die essentiellen Öle in Olivenöl aufgelöst. Dieses Dokument gibt an, dass die genannten zusätzlichen essentiellen Öle individuell keinen eigenen Effekt haben.
Die EP-0-333548 beschreibt stabile wässrige Emulsionen von essentiellem Orangenöl, das 1 bis 45 Gewichtsteile essentielles Öl, 0,01 bis 1 Gewichtsteil eines nichtionischen Emulgators, ausgewählt aus Sucroglyzeriden und Sucroestern, 0,2 bis 1,5 Gewichtsteile Xantan-Gummi und den Rest des Gewichts an Wasser umfassen. Diese Emulsionen können für die Herstellung von Konzentraten als Geschmacksverbesserer für Lebensmittelprodukte verwendet werden, insbesondere für alkoholfreie Getränke und Konfekt oder Konzentrate für Kosmetika. Dieses Dokument gibt an, dass im Prinzip jedes Pflanzen-„Essenz" (in der Tat jedes Extrakt) in der Emulsion verwendet werden kann, und erwähnt darunter insbesondere „Knoblauchessenz". Es gibt jedoch nur Ausführungsarten für Orangenessenz. Folglich kann mit den angegebenen Proportionen keine Emulsion von essentiellem Öl mit all den bekannten essentiellen Ölen und insbesondere mit dem essentiellen Öl von Knoblauch erhalten werden. Dieses Dokument stellt daher keine realistische Lehre in Bezug auf eine Zusammensetzung bereit, die auf essentiellem Öl von Knoblauch basiert.
Die JP-04338336 beschreibt Tabletten für die orale Behandlung von Fettleibigkeit, die Knoblauchextrakte umfassen, die auf der Basis von getrocknetem Knoblauch und einer Extraktion mit Wasser oder Ethanol erhalten wurden. Dieses Dokument betrifft somit die Nutzung des gut bekannten hypolipidemischen Effekts bestimmter Knoblauchextrakte im zirkulierenden Blut.
Die am 3. August 2001 veröffentlichte FR-2804319 beschreibt eine kosmetische Schlankheitszusammensetzung, die ein ANP enthaltendes Pflanzenextrakt umfasst, das unbedingt durch Extraktion mit Wasser und unter Verwendung der Stiele, Blätter und Blütenblätter der Pflanzen erhalten wird. Dieses Dokument erwähnt verschiedene benutzbare Pflanzen einschließlich Knoblauch, beschreibt aber keine Zusammensetzung, die einen Extrakt von Allium sativum Knollen umfasst. Der Wirkmechanismus der Zusammensetzung besteht in der Förderung der Lipolyse der Adipozyten, wirkt aber in keiner Weise auf die Umwandlung der Präadipozyten in reife Adipozyten ein.
So gibt es nach dem derzeitigen Wissensstand nichts, was darauf hindeutet, dass die Verwendung von Extrakten von Allium sativum Knollen zur Entstehung einer neuen Generation von Schlankheitskrems führen könnte, die nicht mehr nur auf die Mechanismen zum Lagern/Ablagern von Fetten (und somit auf Lipogynese/Lipolyse) einwirken, sondern insbesondere auf den Vorgang der Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten.
Die Allium sativum Extrakte gemäß der Erfindung wirken lokal auf die adipöse Zelle, ohne die Freisetzung eines Teils ihrer Fettsäuren in die Blutzirkulation zu verursachen, was, infolge unvollständiger Verbrennung, gesundheitsschädlich werden könnte (Ablagerung an der Arterienwand oder im intraabdominalen Gewebe).
Somit wirken erfindungsgemäß Allium sativum Extrakte über einen neuartigen Ansatz zum Bekämpfen von Cellulit: sie begrenzen die Ausbreitung des adipösen Gewebes durch Begrenzen der Rekrutierung von latenten Präadipozyten.
Aber ihre Wirksamkeit besteht nicht nur darin, da gefunden wurde, dass man mit einem einzigen erfindungsgemäßen antiadipösen Wirkstoff mehrere Schlüssel zum Bekämpfen von Cellulit erhält. Der Grund ist, dass ein erfindungsgemäßes antiadipöses Mittel auch eine gute Vaskularisierung von adipösem Gewebe durch Reduzieren der Vasopressorenniveaus gewährleistet.
Die erfindungsgemäßen Allium sativum Extrakte bilden somit antiadipöse Wirkstoffe mit maximaler Wirksamkeit, so dass es nicht notwendig ist, die Kombinationen von Wirkstoffen in kosmetischen oder therapeutischen Schlankheitsformulierungen zu vervielfachen.
Bei anderen Experimenten konnte auch unerwarteterweise beobachtet werden, dass die antiadipösen Wirkstoffe gemäß der Erfindung auch auf die reifen hypertrophierten Adipozyten wirken. Sie wirken somit auf die beiden Prozesse des adipösen Wachstums ein, Hyperplasie und Hypertrophie, so dass sie erfolgreich im therapeutischen Bereich zur Behandlung von Fettleibigkeit eingesetzt werden können.
Ein weiterer beobachteter Vorteil von antiadipösen Wirkstoffe gemäß der Erfindung liegt in der Tatsache, dass die erhaltenen Phänomene reversibel sind und dass sie demzufolge nicht zu einer Blockierung des physiologischen Mechanismus führen.
Ferner bilden, da die Wirksamkeit der antiadipösen Wirkstoffe gemäß der Erfindung insbesondere auf der Reduzierung der Rekrutierung von latenten Präadipozyten beruht, die erfindungsgemäßen therapeutischen oder kosmetischen Zusammensetzungen ein Körperpflegemittel, das vorzugsweise als externe Behandlung auf die zu behandelnden Bereiche der Haut einmal am Tag an jedem Tag des Jahres aufgebracht wird.
In diesem Fall erfordert die erfindungsgemäße Zusammensetzung keinen weiteren Wirkstoff als den gemäß der Erfindung und das/die Allium sativum Extrakt(e) kann/können somit der/die einzige(n) antiadipöse(n) Wirkstoff(e) in der genannten Zusammensetzung sein. Demzufolge ist die erfindungsgemäße Zusammensetzung frei von zusätzlichen Wirkstoffen. Insbesondere ist/sind das/die Extrakt(e) von Allium sativum Knollen das/die einzige(n) Pflanzenextrakt(e) einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann jedoch auch für „Flash"-Behandlungen eingesetzt werden, die in der Durchführung einer 2 oder 3 Monate dauernden Behandlung bestehen, insbesondere vor der Sommerperiode. In diesem Fall umfasst sie vorteilhafterweise einen zusätzlichen Wirkstoff, der aus einem lipolytischen Mittel eines beliebigen an sich bekannten Typs besteht. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung umfasst vorteilhafterweise wenigstens ein lipolytisches Mittel, das aus lipolytischen Mitteln natürlichen Ursprungs (z.B. Koffein und lipolytische Mittel) oder synthetischen Ursprungs (Verbindung(en) auf Xanthin-Basis) ausgewählt sind, die die Synthese von cAMP stimulieren können.
Andere zusätzliche Wirkstoffe, insbesondere mit einem kosmetischen Effekt, können mit den erfindungsgemäßen antiadipösen Wirkstoffen kombiniert werden.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann eine bestimmte Anzahl von Mitteln mit den folgenden Fähigkeiten beinhalten: Stabilisieren des elastischen Netzes (z.B. Silicumderivate); und/oder Vermitteln eines sofortigen Spanneffekts (Einbau von synthetischen Polymeren oder Pflanzenproteinen (Soja, Weizenkeime)); und/oder Gewährleisten einer optimalen Hydrierung (Einbau von Befeuchtungsmitteln und/oder Rekonstruierungsmitteln).
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung benötigt vorteilhafterweise keinen Einbau von Mitteln, die ihre Penetrationsleistung verbessern (wie z.B. Exfolianten).
Ebenso ist es nicht notwendig, Mittel in die erfindungsgemäße Zusammensetzung einzubauen, die die Mikrozirkulisation der Haut verbessern.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung kann jedes beliebige pharmazeutisch oder kosmetisch akzeptable Bindemittel beinhalten, das mit den erfindungsgemäßen antiadipösen Wirkstoffen kompatibel ist, das jedes geeignete Adjuvans umfassen kann, z.B. Gelierungsmittel, Parfüme, Konservierungsmittel, Stabilisatoren, Färbemitteln usw., um die gewünschte und geeignete pharmazeutische Form zu erhalten. Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung kann xanthanfrei sein.
Bei einem essentiellen Öl von Allium sativum Knollen ist es insbesondere möglich, als Emulgator das als Liposol bekannte Produkt zu verwenden, das von der Firma SIEGEN (Genf, Schweiz) erhältlich ist, oder einen beliebigen anderen Emulgator, insbesondere einen beliebigen Emulgator, der weder ein Sucroglyzerid noch ein Sucroester ist.
Die Menge an verwendetem Emulgator wird so gewählt, dass die gewünschte Emulsion erhalten wird. In der Praxis ist sie sehr viel – typischerweise 50 Mal – größer als die des essentiellen Öls.
Im Falle eines absoluten Öls in wässriger Lösung hat die erfindungsgemäße Zusammensetzung vorteilhafterweise die Form einer einfachen Lotion.
Es folgen Beispiele für die Herstellung einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung.
Für die Herstellung eines Krems für die topische Anwendung wird das essentielle Öl von Allium sativum zunächst in einen Emulgator wie Liposol (SIEGEN, Schweiz) integriert, dessen jeweilige Volumenanteile beispielsweise etwa 0,001% essentielles Öl, 0,05% Liposol, der Rest bis 100% Bindemittel sind.
Mit den absoluten Ölen können beispielsweise Lotionen hergestellt werden. So können z.B. die Mengen, als Volumenkonzentrationen, der verschiedenen Bestandteile wie folgt lauten:

– Zusammensetzung Nr. 1:
• absolutes Öl von Allium sativum Knollen, erhalten auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete: 0,0003% bis 0,002%
• Bindemittel: zum Erhalten von 100% gewählte Konzentration
– Zusammensetzung Nr. 2:
• absolutes Öl von Allium sativum Knollen, erhalten auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete: 0,0005 bis 0,002%
• Bindemittel: zum Erhalten von 100% gewählte Konzentration
– Zusammensetzung Nr. 3:
• absolutes Öl von Allium sativum Knollen, erhalten auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Oleoresins: 0,0005% bis 0,002%
• Bindemittel: zum Erhalten von 100% gewählte Konzentration.

Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung ist äußerst einfach und kostenarm.
Die Erfindung erstreckt sich auf ein präventives oder kuratives kosmetisches und/oder therapeutisches Verfahren zur Behandlung von Cellulit, von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen oder Fettleibigkeit, dadurch gekennzeichnet, dass wenigstens ein Extrakt von Allium sativum Knollen topisch als antiadipöser Wirkstoff auf zu behandelnde Flächen der Haut aufgebracht werden. Der Ausdruck „Behandlung von dermalen adipösen Überlastungen" bedeutet eine Behandlung der Fettmasse, die sich sowohl in der Dermis als auch in der Hypodermis befindet.
Die Erfindung betrifft auch ein Behandlungsverfahren, das dadurch gekennzeichnet ist, dass eine erfindungsgemäße Zusammensetzung verwendet wird.
Die Erfindung betrifft auch die Verwendung von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum Knollen als antiadipösen Wirkstoff für die präventive oder kurative kosmetische Behandlung von Cellulit und von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen durch topische Anwendung auf die zu behandelnden Hautbereiche.
Die Erfindung betrifft auch die Verwendung von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum Knollen als antiadipösen Wirkstoff für die Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die präventive oder kurative Behandlung von Fettleibigkeit durch topische Anwendung auf die zu behandelnden Hautbereiche (Unterleib, Oberschenkel, Hüften, Gesäß, Wülste, Gliedmaßen usw.). Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die präventive oder kurative Behandlung von Fettleibigkeit durch topische Anwendung auf zu behandelnde Hautbereiche, dadurch gekennzeichnet, dass in die Zusammensetzung eine wirksame Menge von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum Knollen als antiadipöser Wirkstoff integriert wird.
Vorteilhafterweise wird bei einem/r erfindungsgemäßen Verfahren oder Verwendung eine Menge von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum Knollen verwendet, die geeignet ist, die Differenzierung von Präadipozyten in reife Adipozyten wenigstens im Wesentlichen zu hemmen und/oder die Hypertrophie von reifen Adipozyten wenigstens im Wesentlichen zu begrenzen oder zu hemmen, und die dies erzielt, ohne eine Reizung oder Sensibilisierung der Haut zu verursachen.
Die Erfindung erstreckt sich auch auf ein Verfahren zur extrakorporalen Hemmung der adipozytischen Umwandlung von Präadipozyten in reife Adipozyten, dadurch gekennzeichnet, dass eine wirksame Menge von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum Knollen in Kontakt mit Präadipozyten oder einem sie enthaltenden biologischen Gewebe gebracht wird.
In einem/r erfindungsgemäßen Verfahren oder Verwendung wird/werden vorteilhafterweise ein oder mehrere nichtwässrige(r) Extrakt(e) von Allium sativum Knollen ausschließlich als antiadipöse(r) Wirkstoff(e) verwendet.
Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß werden zwischen 3 ppm und 20 ppm an Extrakt(en) von Allium sativum Knollen verwendet.
Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß wird wenigstens ein essentielles Öl und wenigstens ein Emulgator als antiadipöser Wirkstoff verwendet. In einer Variante wird vorteilhafterweise und erfindungsgemäß wenigstens ein absolutes Öl in wässriger Lösung als antiadipöser Wirkstoff verwendet. Vorteilhafterweise und erfindungsgemäß wird wenigstens ein Extrakt von Allium sativum Knollen als nichtadipöser Wirkstoff verwendet, der ausgewählt ist aus einem essentiellen Öl, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde, und einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde.
Vorteilhafterweise wird in einem/r erfindungsgemäßen Verfahren oder Verwendung eine erfindungsgemäße Zusammensetzung verwendet. Die Erfindung betrifft auch allgemeiner eine Zusammensetzung, die zum Ausführen eines (kosmetischen und/oder therapeutischen) Behandlungs- oder eines Hemmverfahrens gemäß der Erfindung geeignet ist.
Die Erfindung betrifft auch eine Zusammensetzung, ein – insbesondere kosmetisches – Behandlungsverfahren, ein Verfahren zur Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung, eine Verwendung, in Kombination durch alle oder einige der oben oder nachfolgend erwähnten Merkmale gekennzeichnet.
Die Wirksamkeit der Erfindung geht aus den Ergebnissen der nachfolgend beschriebenen und mit Bezug auf die beiliegenden 1A bis 1F, 2A und 2B sowie 3A und 3B illustrierten Beispiele 1 bis 4 hervor:
1A bis 1F, 2A und 2B sind mikroskopische Fotos von adipösen Zellen,
3A und 3B sind Fotos von Elektrophoresegelen.
Die Beispiele 1, 2, 3 und 4 illustrieren die biologische Wirksamkeit an den Verfahren der Adipozytenhyperplasie und -hypertrophie eines essentiellen Öls (EÖ genannt) von Allium sativum Knollen; eines absoluten Öls von Allium sativum Knollen, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde (ACH genannt); eines absoluten Öls von Allium sativum Knollen, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde (ACEA genannt); und eines absoluten Öls von Allium sativum Knollen, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde (AOA genannt). Die Details der Herstellung der EÖ-, ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen, die verwendeten Zellenmodelle und die Behandlungsmethoden werden nachfolgend beschrieben.
Herstellung der EÖ-, ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen:
• Herstellung der EÖ-Lösung:
Eine dem Kulturmedium zugegebene EÖ-Lösung wird durch 10-fache Verdünnung einer Vorratslösung der EÖ in Wasser für die Zellkultur (EuroBio^®, Frankreich) hergestellt (von Sigma Aldrich Fine Chemicals erhältlich; „Garlic Oil, Chinese", Ref. W250309), die aus 18,4 μl EÖ und 981,6 μl Liposol (natürlicher Emulgator auf der Basis von von Pflanzenzellenmembranen extrahierten Substanzen, erhältlich von SIEGEN, Schweiz) besteht. Eine dem Kulturmedium zugegebene Kontrolllösung wird durch 10-fache Verdünnung einer Kontrollvorratslösung, die aus 18,4 μl Wasser für die Zellkultur (EuroBio^®, Frankreich) und 981,6 μl Liposol besteht, in Wasser für die Zellkultur (EuroBio^®, Frankreich) hergestellt.
• Herstellung wässriger Lösungen von absoluten ACH-, ACEA- und AOA-Ölen:
Die erfindungsgemäßen absoluten Öle werden mit einem Verfahren hergestellt, das in der Parfümindustrie standardmäßig, gut bekannt und gut definiert ist. Kurz, ein absolutes Öl ist ein Extrakt, das aus zwei Extraktionsschritten resultiert. Der erste Schritt erfolgt mit einem nichtwässrigen – insbesondere nicht benzolhaltigen – flüchtigen Extraktionslösungsmittel und ergibt ein Concrete, wenn das Ausgangspflanzenmaterial frisch oder aufgetaut ist (nachdem es zur Lagerung gefroren wurde), oder ein Oleoresin, wenn das genannte Material in trockener Form verwendet wird. Der zweite Schritt wird mit Ethanol als Lösungsmittel durchgeführt. Die absoluten ACH-, ACEA- oder AOA-Öle werden mit einem auf Allium sativum Knollen angewendeten Verfahren erhalten.
Zum Erhalten eines absoluten ACH-Öls werden frische Knoblauchzehen geschält und dann mechanisch zermahlen.
Dann erfolgt eine Extraktion mit Hexan. Durch mäßiges Erhitzen, ohne zu kochen, und nach einer totalen Verdunstung des Hexans, wird das Concrete zurückgewonnen. Es enthält Wachse und aromatische Produkte. Bei Raumtemperatur hat es ein pastenähnliches, gelbes Aussehen.
Nach dem Auflösen dieses Concrete in Ethanol durch Waschen wird die Lösung gefiltert und dann auf –10°C gekühlt, um die Wachse zu entfernen. Nach dem Abdestillieren des Ethanols wird das absolute ACH-Öl erhalten. Bei Verdünnung auf 25% in Ethanol hat es das Aussehen einer blassgelben klaren Flüssigkeit mit einem starken Geruch.
Das absolute ACEA-Öl wird gemäß einem Protokoll hergestellt, das mit dem für den Erhalt des ACH vergleichbar ist, wobei der erste Schritt dieses Mal in einer Extraktion mit Ethylacetat besteht.
Das absolute ACEA-Öl, in Ethanol auf 25% verdünnt, ist eine blassbraune klare Lösung mit mäßigem Geruch.
Das absolute AOA-Öl wird gemäß einem Protokoll hergestellt, das mit dem für den Erhalt von ACH vergleichbar ist, wobei jedoch die erste Extraktion dieses Mal mit Aceton erfolgt, unter Verwendung von Knoblauchzehen, die zuvor getrocknet wurden. Nach dieser ersten Extraktion wird ein Extraktionsoleoresin erhalten. Dieses hat bei Raumtemperatur die Form einer sehr dunkelbraunen Paste.
Diese Paste wird mit Ethanol destilliert, um schließlich das absolute AOA-Öl zu erhalten.
Nach Verdünnung mit Ethanol auf 25% hat das absolute AOA-Öl die Form einer klaren braunen Lösung mit geringem Geruch.
Die dem Kulturmedium zugegebenen ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen werden durch 10-fache Verdünnung von aus 18,4 μl des absoluten Öls (ACH, ACEA oder AOA) und 981,6 μl Wasser für die Zellkultur (EuroBio^®, Frankreich) bestehenden Vorratslösungen jedes absoluten Öls (ACH, ACEA oder AOA) in Wasser für die Zellkultur (EuroBio^®, Frankreich) hergestellt.
Angewendete Zellenmodelle:
Die am Verfahren der Adipozytdifferenzierung beteiligten Mechanismen wurden in vitro viele Jahre lang studiert (allgemeine Übersicht: Klaus S., Bio. Essays 19: 215–223, 1997).
Die biologischen Aktivitäten von EO, ACH, ACEA und AOA wurden mit Kulturen von 3T3-F442A Zellen demonstriert (Mauszelllinie, wegen ihrer Kapazität zum Speichern von Lipiden verwendet) und dann an primären Kulturen von humanen Präadipozyten bestätigt.
Die Zellen werden in 6-Well-Platten (in Okkulationsdichte: 15.000 Zellen/Well) und in DMEM-Medium – 10% DCS plus Antibiotika auf dem Konfluenzpunkt gehalten. Bei Konfluenz werden die Präadipozyten dann in DMEM-Medium – 10% FCS plus Insulin kultiviert. Die behandelten Zellen werden im Kulturmedium gehalten, dem schließlich 25 μl von einer der Testlösungen (EÖ oder ACH oder ACEA oder AOA) pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Die 3T3-F442A Kontrollpräadipozyten werden im Kulturmedium kultiviert, dem 25 μl Kontrolllösung pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Das Kulturmedium wird alle 48 Stunden erneuert.
Humane Präadipozytenprimärkulturen:
Die humanen Präadipozyten (ZenBio^®, USA) werden gemäß Herstelleranweisungen kultiviert. Nach dem Erhalt werden die humanen Präadipozyten in dem gelieferten adäquaten Medium kultiviert, dem schließlich 3 μl bis 10 μl von einer der Testlösungen (EÖ oder ACH oder ACAE oder AOA) pro Milliliter Kulturmedium zugegeben werden. Die Kontrollpräadipozyten werden in dem Medium allein in Kultur gehalten. Das Kulturmedium wird alle 3 Tage erneuert.
1. Beispiel: Effekt der EO-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Adipozytenmorphologie (1A bis 1F)
Nach sieben (3T3-F442A Zellen) und neun (humane Präadipozyten) Behandlungstagen wurde der Effekt von EÖ-, ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen auf den Differenzierungsprozess auf der Basis von morphologischen Kriterien durch mikroskopische Beobachtung der behandelten Kulturen und der Kontrollkulturen studiert. Die Zellen wurden als durch morphologische Analyse durch Umkehrphasenmikroskopie, mit einer CCD-Kamera gekoppelt, differenziert angesehen, wenn sie eine runde Kontur angenommen hatten und wenn ihr Zytoplasma vollständig mit Fetttröpfchen gefüllt war. Man stellt fest, dass die EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen die Zellendifferenzierung von murinen 3T3-F442A Präadipozyten hemmen (1A bis 1C).
Nach 7 Tagen chronischer Behandlung induziert die EÖ-Lösung (1A) oder die ACH-Lösung (1B) eine signifikante Abnahme der Zahl der entwickelten reifen Adipozyten. Die meisten Zellen behalten ihre präadipozytische Fibroplasmamorphologie bei, mit einer sehr ausgeprägten Hemmung der Lipidspeicherung. Obwohl in den Figuren nicht dargestellt, werden dieselben Ergebnisse mit den ACEA- und AOA-Lösungen erzielt. Die 3T3-F442A Kontrollzellen (1C) folgen dem normalen Prozess der terminalen Differenzierung und nehmen die morphologischen Eigenschaften von reifen Adipozyten an, mit einem mit Triglyzeridtröpfchen gefüllten Zytoplasma, wie durch die starke Brechung nachgewiesen wird.
Man stellt auch fest, dass die EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen den Vorgang der terminalen Differenzierung von humanen Präadipozyten hemmen.
Die in Anwesenheit einer EÖ-Lösung (1D) oder einer ACH-Lösung (1E) kultivierten humanen Präadipozyten behalten eine präadipozytische Morphologie bei: die humanen Zellen bleiben fusiform mit sehr wenigen erkennbaren intrazytoplasmischen Fetttröpfchen. Obwohl in den Figuren nicht dargestellt, werden dieselben Ergebnisse mit den ACEA- und AOA-Lösungen erhalten. Im Vergleich dazu verlieren die humanen Kontrollpräadipozyten (1F) ihre Fibroplastmorphologie, mit dem Aussehen einer sphärischen Gestalt und dem Vorliegen zahlreicher intrazytoplasmischer Lipidvesikel, die an ihrer starken Brechung erkennbar sind.
Die chronische Behandlung mit essentiellem Öl (EÖ) von Allium sativum, dem absolutem Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde (ACH), dem absoluten Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde (ACEA), oder dem absoluten Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Oleoresins erhalten wurde (AOA), begrenzt die morphologischen und biochemischen Veränderungen der Charakteristik einer Adipozytendifferenzierung. Bei Kontakt mit EÖ, ACH, ACEA und AOA sind die Präadipozyten nicht mehr für die hormonale Umgebung empfindlich, die ihren Lipidmetabolismus reguliert und normalerweise die Umwandlung der Präadipozyten in reife, differenzierte adipöse Zellen zulässt.
2. Beispiel: Effekt der EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Morphologie von reifen hypertrophierten Adipozyten (2A und 2B)
Bei Konfluenz werden die 3T3-F442A Präadipozyten 4 Tage lang im Differenzierungsmedium kultiviert (DMEM – 10% FDS plus Insulin). Unter diesen Bedingungen gehen die Zellen in die „reife" Adipozyten-Stufe über, in der das Volumen und der Triglyzeridgehalt erhöht wurde. Die Zellen werden dann wie zuvor behandelt.
Im Vergleich zu den reifen Kontrolladipozyten (2B), die eine voluminöse sphärische Gestalt und eine große Ansammlung von intrazytoplasmischen Fettvesikeln haben, haben die mit einer EÖ-Lösung (2A) behandelten reifen Adipozyten eine weniger runde Zellmorphologie und einen stark reduzierten Gehalt an intraadipozytischen Lipidvesikeln, so dass die erfindungsgemäße EÖ-Lösung sich im Verfahren zum Begrenzen von Adipozytenhypertrophie durch Umkehren des Differenzierungsprozesses als effektiv erwiesen hat. Dieselben Ergebnisse werden mit den erfindungsgemäßen ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen erhalten.
3. Beispiel: Effekt der EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Expression von PPARγ2 mRNA (3A und 3B)
Die Adipozytendifferenzierung ist ein wichtiger Faktor bei der Entwicklung von adipösem Gewebe und Fettleibigkeit. Das Verfahren der Adipozytendifferenzierung ist in vitro durch die programmierte Einleitung von verschiedenen Genen gekennzeichnet, die eine Lipoproteinlipolyse, die Aufnahme von Fettsäuren durch Zellen und die Fettsäure- und Triglyzeridsynthese regulieren. Kurz, diese Gene können als Differenzierungsmarker der folgenden Typen klassifiziert werden: sehr früh (wie z.B. die Expression von Lipaselipoprotein mRNA), früh (wie die Expression von PPARγ2 MRNA) oder spät (wie die Expression von Leptin) (allgemeine Übersicht: Morrison R. F., Farmer S. F., J. Cell. Biochem Suppl. 32/33: 59–67, 1999). So kann die Stufe der Adipozytendifferenzierung präzise durch Studieren des Expressionsniveaus der relevanten mRNA (PPARγ2 mRNA) oder über das Leptinexpressionsniveau ermittelt werden.
Die Familie der nuklearen Rezeptoren von PPAR („Peroxisomal Proliferator-Activated Receptor") besteht aus drei Subtypen: PPARα, PPARδ, PPARγ. PPARα wird in der Leber stark exprimiert, wo es die Expression der am Lipidmetabolismus beteiligten Gene reguliert. PPARδ wird überall exprimiert; die Funktion dieses Rezeptors ist noch nicht bestimmt. PPARγ liegt in der Form von zwei Isoformen vor, PPARγ1 und PPARγ2. PPARγ2 wird in adipösem Säugetiergewebe stark exprimiert. Wenn PPARγ2 aktiviert wird, dann induziert es die Transkription mehrerer Adipozytengene, die Proteine und Enzyme codieren, die an der Erzeugung und Aufrechterhaltung des Adipozytenphänotyps beteiligt sind. Es spielt somit eine fundamentale Rolle bei Differenzierung und Metabolismus von adipösen Zellen.
Der Effekt der EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf die Expression von PPARγ2 mRNA wurde nach drei (3A, 3T3-F442A Zellen) oder sechs (3B, humane Präadipozyten) Behandlungstagen bestimmt. Der Gehalt an PPARγ2 mRNA wird mit RT-PCR („Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction") analysiert, nachdem zuvor die RNA gemäß der Prozedur des Kits RNeasy Total RNA System (Qiagen^®) gereinigt, der RNA-Gehalt der Proben anhand des Messwertes und des Verhältnisses der Absorbanzen bei 260 und 280 nm quantifiziert und nach der Migration auf Agarosegel die Qualität der erhaltenen RNAS geprüft wurden.
Für den RT-Schritt wird die komplementäre DNA (cDNA) auf der Basis von 1 μg an Gesamt-RNA (3T3-F442A) oder von 0,2 μg Gesamt-RNA (humane Präadipozyten) synthetisiert. Die Amplifikationen von PPARγ2-codierender cDNA werden in Anwesenheit der geeigneten Sense- und Antisense-Primer erhalten (Genset^®, siehe Tabelle 1). Die Größen der PCR-Produkte sind 307 Basenpaare (3T3-F442A Zellen) und 582 Basenpaare (humane Präadipozyten). Es wurden die geeigneten Kontrollen (Umkehrtranskription und PCR-Amplifikation) durchgeführt. Die PCR-Gemische wurden 22 Zyklen (3T3-F442A Zellen) oder 35 Zyklen (humane Präadipozyten) Amplifikation durch Denaturation (2 Minuten bei 94°C), Hybridisierung (1 Minute bei 60°C) und Elongation (6 Minuten bei 72°C) unterzogen. Die PCR-Produkte werden durch Agarosegel-Elektrophorese analysiert und mit Ethidiumbromid sichtbar gemacht.
Tabelle 1
Das Expressionsniveau des adipogenen PPARγ2 Transkriptionsfaktors ist stark reduziert, wenn die 3T3-F442A Zellen mit einer EÖ-Lösung (3A, Ergebnis 2) oder einer ACH-Lösung (3A, Ergebnis 3) in Kontakt gebracht wurden, im Vergleich zu den Kontrollzellen, wie anhand der Intensität des Bandes (3A, Ergebnis 1) zu Tage tritt. Dieselben Ergebnisse werden mit der ACEA-Lösung und der AOA-Lösung erhalten.
Ebenso hemmen die erfindungsgemäßen EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen die Expression der PPARγ2 mRNA der humanen Präadipozyten signifikant (3B, Ergebnis 5, das eine Behandlung mit einer EÖ-Lösung illustriert, und Ergebnis 6, das eine Behandlung mit einer ACH-Lösung illustriert), im Vergleich zu den humanen Kontrollpräadipozyten (3B, Ergebnis 4).
Das essentielle Öl (EÖ) von Allium sativum, das absolute Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde (ACH), das absolute Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde (ACEA), und das absolute Öl von Allium sativum, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde (AOA), wirken auf das Differenzierungsprogramm durch Reduzieren der Expression des PPARγ2-Messengers ein.
4. Beispiel: Effekt von EÖ, ACH, ACEA und AOA auf die Leptinsekretion
Die Kapazität von EÖ, ACH, ACEA und AOA, den Differenzierungsprozess von humanen Präadipozyten zu hemmen, wurde durch quantitative Messung der in das Kulturmedium in verschiedenen Tests sekretierten Leptinniveaus bestimmt. Speziell, durch das ob-Gen codiertes und durch die Adipozyten synthetisiertes und sekretiertes Leptin wird als ein Spät-Marker des Adipozytendifferenzierungsprozesses angesehen. In vitro steigt die Basalsekretion von Leptin allmählich über den Prozess der Umwandlung von Präadipozyten in reife Adipozyten (MacDougald, O. A. et al, Proc. Natl Acad. Sci., USA, 92: 9034–9037, 1995).
Der Effekt von EÖ-, ACH-, ACEA- und AOA-Lösungen auf die Leptinsekretion wurde über eine Behandlungsperiode von 9 Tagen (humane Präadipozyten) studiert. Die Mengen an von den Kontrollzellen und von den behandelten Zellen sekretiertem Leptin wurden in den verschiedenen Kulturmedien gemessen, nach 3, 6 und 9 Tagen wurden Proben genommen (Tage, an dem das Medium erneuert wurde). Die quantitative Bestimmung der freigesetzten Leptinmengen erfolgte durch ELISA-Assay (R&D Systems Europe) gemäß Herstelleranweisungen. Die Ergebnisse sind als Mittel ± Standardabweichung vom Mittel ausgedrückt. Statistische Vergleiche erfolgten mit dem Student T Test (P < 0,05 ist die Signifikanzschwelle). Die Ergebnisse werden wie folgt normalisiert: nach 9 Behandlungstagen werden die für jede der Behandlungen am dritten, sechsten und neunten Tag quantifizierten Leptinwerte akkumuliert und als Prozentanteil der für die Kontrollzellen erhaltenen Werte ausgedrückt (Tabelle 2).
Tabelle 2 – Effekt von EÖ, ACH, ACEA oder AOA auf die Leptinsekretion
Die in Anwesenheit von EÖ, ACH, ACEA und AOA kultivierten humanen Präadipozyten sekretieren Mengen an Leptin in das Kulturmedium, die erheblich geringer sind als die im Kulturmedium der unbehandelten humanen Kontrollpräadipozyten erfassten Mengen. Die erhaltenen Ergebnisse zeigen, dass die EÖ-, ACH-, ACEA- oder AOA-Lösungen auf das Differenzierungsprogramm wirken und den Adipozytenumwandlungsprozess hemmen können.

Claims

Zusammensetzung zur topischen externen Behandlung, dadurch gekennzeichnet, dass sie Folgendes umfasst: • eine wirksame Menge, die einem Gewichtsanteil von 3 bis 20 ppm der Gesamtzusammensetzung entspricht, von wenigstens einem antiadipösen Wirkstoff, der aus Extrakten von Allium sativum, mit Ausnahme von einem mit Hexan extrahierten Extraktionsoleoresin, ausgewählt ist; • bei Bedarf ein oder mehrere weitere komplementäre Wirkstoffe, mit Ausnahme von Nympheaceae-Extrakten, • ein kosmetisch oder pharmazeutisch akzeptables Bindemittel, das äußerlich – insbesondere auf die Haut – topisch angewendet werden kann.
Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass sie eine wirksame Menge von wenigstens einem antiadipösen Wirkstoff umfasst, der aus nichtwässrigen Extrakten von Allium sativum ausgewählt ist.
Zusammensetzung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass sie als antiadipösen Wirkstoff ein essentielles Öl von Allium sativum und einen Emulgator umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Gemisch aus essentiellem Öl und Emulgator in einem Gel und einer Flüssigkeit wie Wasser integriert ist.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass sie als antiadipösen Wirkstoff wenigstens ein absolutes Öl von Allium sativum in wässriger Lösung umfasst.
Zusammensetzung nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein absolutes Öl umfasst, das auf der Basis eines aus Allium sativum extrahierten Concrete erhalten wurde.
Zusammensetzung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass sie darüber hinaus wenigstens ein absolutes Öl umfasst, das auf der Basis eines aus Allium sativum extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass sie als antiadipösen Wirkstoff wenigstens einen Extrakt von Allium sativum umfasst, ausgewählt aus einem essentiellen Öl, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde, einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde, und einem absoluten Öl, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass der/die Extrakt(e) von Allium sativum den/die einzigen antiadipösen Wirkstoff(e) bildet/bilden.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, dass sie keinen komplementären Wirkstoff aufweist.
Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, dass sie wenigstens ein lipolytisches Mittel als komplementären Wirkstoff umfasst.
Verfahren zur präventiven oder kurativen kosmetischen Behandlung von Cellulit und von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen, dadurch gekennzeichnet, dass auf topischem Weg auf die zu behandelnden Hautzonen eine Zusammensetzung aufgetragen wird, die wenigstens einen Extrakt von Allium sativum als Wirkstoff enthält, wobei die Menge des Extrakts von Allium sativum der genannten therapeutischen Zusammensetzung einem Gewichtsanteil von 3 bis 20 ppm der Gesamtzusammensetzung entspricht.
Verfahren zur präventiven oder kurativen kosmetischen Behandlung von Cellulit und von lokalisierten dermalen adipösen Überlastungen, dadurch gekennzeichnet, dass eine Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 verwendet wird.
Verwendung von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum als antiadipösen Wirkstoff für die Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die präventive oder kurative Behandlung von Fettleibigkeit durch topische Anwendung auf die zu behandelnden Hautzonen, wobei die Menge des Extrakts von Allium sativum der genannten therapeutischen Zusammensetzung einem Gewichtsanteil von 3 bis 20 ppm der Gesamtzusammensetzung entspricht.
Verfahren zur Herstellung einer therapeutischen Zusammensetzung für die präventive oder kurative Behandlung, durch topische Applikation auf zu behandelnde Hautzonen, von Fettleibigkeit, dadurch gekennzeichnet, dass in die Zusammensetzung eine wirksame Menge, die einem Gewichtsanteil von 3 bis 20 ppm der Gesamtzusammensetzung entspricht, von wenigstens einem Extrakt von Allium sativum als antiadipösen Wirkstoff integriert wird.
Verfahren zum extrakorporalen Hemmen der adipozytären Umwandlung von Präadipozyten in reife Adipozyten, dadurch gekennzeichnet, dass eine Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 mit Präadipozyten oder einem sie enthaltenden biologischen Gewebe in Kontakt gebracht wird.
Verwendung oder Verfahren nach einem der Ansprüche 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, dass als antiadipöse(r) Wirkstoff(e) ausschließlich ein oder mehrere nichtwässrige Extrakte von Allium sativum verwendet werden.
Verwendung oder Verfahren nach einem der Ansprüche 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, dass als antiadipöser Wirkstoff wenigstens ein essentielles Öl und wenigstens ein Emulgator verwendet werden.
Verwendung oder Verfahren nach einem der Ansprüche 12 bis 16, dadurch gekennzeichnet, dass als antiadipöser Wirkstoff wenigstens ein absolutes Öl in wässriger Lösung verwendet wird.
Verwendung oder Verfahren nach einem der Ansprüche 12 bis 19, dadurch gekennzeichnet, dass wenigstens ein Extrakt von Allium sativum, der aus einem essentiellen Öl ausgewählt wurde; ein absolutes Öl, das auf der Basis eines mit Hexan extrahierten Concrete erhalten wurde; ein absolutes Öl, das auf der Basis eines mit Ethylacetat extrahierten Concrete erhalten wurde; ein absolutes Öl, das auf der Basis eines mit Aceton extrahierten Extraktionsoleoresins erhalten wurde, als nichtadipöser aktiver Wirkstoff verwendet wird.