DE60207612T2

DE60207612T2 - Verbindungen zur Bilddarstellung der Alzheimer-Krankheit

Info

Publication number: DE60207612T2
Application number: DE60207612T
Authority: DE
Inventors: Raymond Denis BOUVET; John Harry WADSWORTH
Original assignee: GE Healthcare Ltd
Current assignee: GE Healthcare Ltd
Priority date: 2001-12-19
Filing date: 2002-12-12
Publication date: 2006-08-03
Anticipated expiration: 2022-12-13
Also published as: GB0130305D0; EP1463721B1; US7173061B2; ES2254763T3; EP1463721A1; AU2002350950A1; ATE310736T1; JP2005516935A; DE60207612D1; WO2003051859A1; JP4418237B2; US20050080130A1

Description

Beschreibung
Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf das Gebiet der diagnostischen Bildgebung der Aizheimer-Krankheit und stellt Verbindungen, die bei einer derartigen diagnostischen Bildgebung nützlich sind, wie auch Verfahren für ihre Herstellung und Verwendung bereit.
Die Alzheimer-Krankheit ist die vierthäufigste Todesursache in der westlichen Welt, nach Herz-Erkrankung, Krebs und Schlaganfällen. In den USA gibt es annähernd vier Millionen Personen, die an der Alzheimer-Krankheit leiden, mit jährlichen Kosten von $ 100 Milliarden. Deshalb betragen die Kosten pro Person in den USA $ 25000 pro Jahr. Es gibt gegenwärtig 20 Millionen Personen, die in der Welt an Demenz leiden. Es wird angesetzt, dass sie sich auf 40 Millionen im Jahr 2025 verdoppeln, da sich die Anzahl von Personen im Alter von 65 von jetzt 390 Millionen auf 800 Millionen in 2025 verdoppelt. Von diesen 40 Millionen werden annähernd 56% an der Alzheimer-Krankheit leiden, was 22,2 Millionen ausmacht.
Die in-vivo-Bildgebungstechniken, die gegenwärtig verwendet werden, differenzieren nicht in allen Fällen die Diagnose der Alzheimer-Krankheit von anderen Formen der Demenz. Die differentielle Diagnose von Patienten wird zunehmend wichtig werden, da mehr Behandlungen verfügbar werden. Bildgebungsmittel werden auch erforderlich sein, um Alzheimerpatienten in früheren Stufen der Krankheit abzubilden, um eine vorsorgliche Behandlung zu ermöglichen und um den Krankheitsfortschritt zu überwachen.
Gegenwärtig ist der einzige definitive Test für die Alzheimer-Krankheit die Untersuchung des Gehirns auf das Vorhandensein von charakteristischen Pathophysiologien bei einer Autopsie. Eine der am meisten verbreitet Anerkannten dieser Pathophysiologien ist das Vorhandensein von senilen Plaques im Hirngewebe. Senile Plaques sind Ablagerungen eines 40-43-Aminosäure-Proteins, das das β-Amyloidprotein genannt wird. Sie sind ein früher und invarianter Aspekt der Krankheit und es wird gedacht, dass die Ablagerung von β-Amyloid zu einem Zeitpunkt etwas vor dem Einsetzen der klinischen Symptome erfolgt.
Amyloid-spezifische Radiotracer wurden als leistungsfähige Bildgebungsmittel für die Alzheimer-Krankheit vorgeschlagen. Es wurde gezeigt, dass Congo Red ein effektiver Binder von β-Amyloid ist, aber nicht gut durch die Blut-Hirn-Schranke (BBB) tritt (Klunk et al, 1994, Neurobiology of Aging, Band 15, Seiten 691–698). Es gibt keinen überzeugenden funktionellen Beweis, dass Abnormalitäten in der BBB bei der Alzheimer-Krankheit existieren (Kalaria 1992, Cerebrovascular and Brain Metabolism Reviews, Band 4, Seite 226). Deshalb ist eine wichtige Eigenschaft eines in-vivo-Bildgebungsmittels der Alzheimer-Krankheit, dass es durch die BBB tritt.
US 3,947,470 und US 4,024,273 beschreiben bestimmte Benzofuran-Verbindungen mit einer Aktivität als koronarer Vasodilatator. Howlett et al (Biochem J. (1999), 340, 283–9) beschreibt eine Reihe von Benzofuran-Derivaten, die Inhibitoren der Fibrillenbildung in β-Amyloidpeptid sind.
Das Ziel der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung neuer ^99mTc-markierter Mittel für die in-vivo-Bildgebung der Alzheimer-Krankheit. Um fähig zu sein, die Alzheimer-Krankheit in vivo erfolgreich abzubilden, muss ein Mittel fähig sein, durch die BBB zu treten, wie auch an β-Amyloid zu binden.
Markieren einer Verbindung mit ^99mTc erfordert, dass die Verbindung mit einem geeigneten ^99mTc-Chelator gekoppelt wird. Es ist in der Technik bekannt, dass geeignete ^99mTc-Chelatoren relativ voluminöse Moleküle sind, und als solche wirken würden, das Molekulargewicht eines Amyloid-Bindungsmittels zu vergrößern, was wiederum die Chancen verringert, dass ein derartiges Mittel durch die BBB tritt. Auf ähnliche Weise würde erwartet werden, dass die Bindung eines geeigneten ^99mTc-Chelators an ein Amyloid-bindendes Mittel mit den Bindungseigenschaften des Mittels interfe riert. Es ist deshalb überraschend, dass wir eine Klasse von Bindungsmitteln gefunden haben, die chelatierte ^99mTc umfassen, aber die fähig sind, durch die BBB hindurchzutreten und sich mit β-Amyloid zu verbinden.
In einem ersten Aspekt stellt diese Erfindung eine Verbindung der Formel (I) bereit:
oder ein Salz davon, worin entweder

(i) R für Wasserstoff steht und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵ [B]-[A] steht, worin R⁴ und R⁵ unabhängig aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl ausgewählt sind, [A] für ein Chelat steht und [B] für eine Linkergruppe steht und bevorzugt für -C(O)NR⁶- steht, worin R⁶ für Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl steht; oder
(ii) R für die Gruppe
steht und eine Gruppe von R¹ und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] wie oben definiert steht; und die andere Gruppe für die Gruppe -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ steht, worin n für 0 oder 1 steht, und R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl; und R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.

In einem Aspekt der Erfindung steht die Gruppe R in der Verbindung der Formel (I) für Wasserstoff, deshalb wird eine Verbindung der Formel (Ia) bereitgestellt:
oder ein Salz davon, worin R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] steht, worin R⁴ und R⁵ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl, [A] für ein Chelat steht und [B] für eine Linkergruppe steht und bevorzugt für -C(O)NR⁶- steht, worin R⁶ für Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl steht;
und
R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.
In einem weiteren Aspekt der Erfindung ist eine Verbindung der Formel (Ib) bereitgestellt:
oder ein Salz davon, worin:
eine Gruppe von R¹ und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] wie für Formel (I) definiert steht; und die andere Gruppe für die Gruppe -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ wie für Formel (I) definiert steht; und
R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.
Bevorzugte Verbindungen der Formel (I) umfassen jene der Formel (Ic):
oder ein Salz davon, worin
eine Gruppe von R¹ und R² für -OCH₂C(O)NH-[A] steht, worin [A] für ein Chelat steht;
die andere Gruppe für -O-(CH₂)_2,3-NR⁷R⁸ steht, worin R⁷ und R⁸ unabhängig aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl ausgewählt sind.
Verbindungen der Formel (I), die von besonderem Interesse sind, umfassen jene, die in den Beispielen 1 (vii), 2 (vii) und 8 (iii) beschrieben sind, speziell wenn Pn216 konjugiert ist.
Der Begriff „Chelat" ist in der vorliegenden Erfindung definiert als ein Tetradentat-Metall-Komplexiermittel, bevorzugt geeignet zum Komplexieren von Technetium. Technetium-Chelate werden im Abschnitt B von „Technetium: chemistry and radiopharmaceutical applications", Klaus Schwochau, 2000, Seiten 373–423, veröffentlicht durch Wiley-Vch Verlag GmbH diskutiert. Geeignete Chelate der Erfindung können ausgewählt sein aus:

(i) Diamindioxime der Formel (A):
wobei R^A1-R^A6 jeweils unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Haloalkyl oder Aminoalkyl; und -(Q^A)_n- eine brückenbildende Gruppe ist, wobei n für 3, 4 oder 5 steht und jedes Q^A unabhängig ausgewählt ist aus -O-, -NR- und -CR₂-, wobei R für Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Fluoralkyl oder Aminoalkyl steht, unter der Maßgabe, dass es ein Maximum einer Q^A-Gruppe gibt, die ausgewählt ist aus -O- oder -NR-.
(ii) Makrozyklische N₄-Liganden der Formel (B):
wobei R^B1 und R^B2 unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl, gegebenenfalls substituiert mit Aminoalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Haloalkyl oder Aminoalkyl.
(iii) Diamindiphenole der Formel (C):
wobei Q^C entweder für C(R^C2) oder N steht; R^C1 und R^C2 unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Haloalkyl oder Aminoalkyl, und; m gleich n ist und beide ganze Zahlen sind, die geeigneterweise ausgewählt sind aus 1, 2, 3 und 4.
(iv) N₂S₂-Liganden der Formel (D):
wobei P^D1 und P^D2 für Wasserstoff oder Schutzgruppen stehen, wie Benzoyl, Acetyl oder Ethoxyethyl, die vor oder während des Markierungsprozesses gespalten werden können, und; R^D1 bis R^D8 unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Haloalkyl oder Aminoalkyl, und; eine oder mehrere der Paare R^D1/R^D2, R^D3/R^D4, R^D5/R^D6, R^D7/R^D8 zusammen mit dem Kohlenstoff, an den sie gebunden sind, eine C=O-Gruppe repräsentieren können; und -(Q^D)_n- eine brückenbildende Gruppe ist, wobei n für 2, 3, 4 oder 5 steht und jedes Q^D unabhängig ausgewählt ist aus -O-, -NR-, und -CR₂-, wobei R für Wasserstoff, C_1-6-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Haloalkyl oder Aminoalkyl steht, unter der Maßgabe, dass es ein Maximum von einer Q^D-Gruppe gibt, die aus -O- oder -NR- ausgewählt ist.
(v) Hydrazin-Nicotinamid-Liganden der Formel (E):
wobei Technetium koordiniert ist in Zusammenhang mit einem co-Liganden, der aus den Formeln (Ei) bis (Ev) ausgewählt ist:
wobei R^E1 ausgewählt ist aus Wasserstoff, Benzyl und C_1-6-Alkyl (geeigneterweise Methyl) und R^E2 ausgewählt ist aus Wasserstoff und -CH₂COOH.

Bevorzugte Diamindioxime der Formel (A) besitzen R^A1 bis R^A6, die unabhängig ausgewählt sind aus C_1-3-Alkyl, Arylalkyl, Alkoxyalkyl, Hydroxyalkyl, Fluoralkyl oder Aminoalkyl. In den am meisten bevorzugten Diamindioximen stehen alle R^A1 bis R^A6 für CH₃. Ein bevorzugtes chelatbildendes Mittel der vorliegenden Erfindung ist ein Diamindioxim der Formel (A), wobei R^A1 bis R^A6 alle für CH₃ stehen und (Q^A)_n für -NH(CH₂)₂N(CH₂CH₂NH₂)(CH₂)₂NH- steht. Ein anderes bevorzugtes chelatbildendes Mittel der vorliegenden Erfindung ist ein Diamindioxim der Formel (A), wobei R^A1- bis R^A6 alle für CH₃ stehen und (Q^A)_n für -CH₂C(CH₃)(CH₂NH₂)CH₂- steht. Amyloidbindende Mittel der Erfindung können geeigneterweise an das Chelat an einem beliebigen funktionellen Rest gebunden sein. Amyloid-bindende Mittel der Erfindung sind bevorzugt über eine Funktionalität in (Q^A)_n und am meisten bevorzugt über eine Amingruppe in (Q^A)_n gebunden, um die [B]-Linkergruppe -C(O)NR⁶- zu bilden.
Bevorzugte makrozyklische N₄-Liganden der Formel (B) besitzen R^B1 als H und R^B2 als Aminoalkyl, Arylalkyl (geeigneterweise Aminomethylbenzyl, am meisten geeigneterweise 4-Aminomethylbenzyl). Amyloid-bindende Mittel der Erfindung können an das Chelat über eine beliebige funktionelle Gruppe gebunden werden, aber bevorzugt über eine funktionelle Gruppe R^B1 oder R^B2. Amyloid-bindende Mittel der Erfindung sind am meisten bevorzugt an das Chelat über ein endständiges NH₂ des R^B2 gebunden, um die [B]-Linkergruppe -C(O)NR⁶- zu bilden.
Bevorzugte Diamindiphenole der Formel (C) besitzen Q^C als C(R^C2) und eine Gruppe von R^C1 und R^C2 als Aminoalkyl und die andere als Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl. In einer am meisten bevorzugten Ausführungsform steht Q^C für C(R^C2), R^C1 steht für CH₃ und R^C2 steht für CH₂NH₂. Amyloid-bindende Mittel der Erfindung sind geeigneterweise an einen beliebigen funktionellen Rest des Chelats gebunden, aber bevorzugt an entweder R^C1 oder R^C2. Amyloid-bindende Mittel der Erfindung sind am meisten bevorzugt über eine endständige NH₂-Gruppe von R^C2 gebunden, um die [B]-Linkergruppe -C(O)NR⁶- zu bilden.
In bevorzugten N₂S₂-Liganden der Formel (D) stehen R^D1, R^D2, R^D7 für Wasserstoff und die Paare R^D3/R^D4 und R^D5/R^D6, zusammen mit den Kohlenstoffen, an die sie gebunden sind, stehen für C=O, und k^D8 steht für Aminoalkyl. In einem am meisten bevorzugten N₂S₂-Liganden der Erfindung stehen R^D1, R^D2, R^D7 und R^D8 für Methyl, R^D3, R^D4, R^D5, R^D6 stehen für Wasserstoff und (Q^D)_n steht für -CH₂CH(CH₂NH₂)- oder -CH₂C(CH₃)(CH₂NH₂)CH₂-. Amyloid-bindende Mittel der Erfindung können geeigneterweise an eine funktionelle Gruppe auf dem Chelat gebunden sein, aber bevorzugt an eine funktionelle Gruppe am Q^D, und am meisten bevorzugt an ein endständiges NH₂ am Q^D, um die [B]-Linkergruppe -C(O)NR⁶- zu bilden.
Die Synthese dieser Chelatverbindungen ist in der Technik gut bekannt. Diamindioxim-Liganden der Formel (A) werden durch die Verfahren hergestellt, die beschrieben sind von Jurisson et al (Inorg. Chem. 1986, Band 25, Seiten 543–549). Makrozyklische N₄-Liganden der Formel (B) werden durch die Verfahren von (Int. J. Nuc. Med. Biol., 1984, Band 2 (2), Seiten 113–119) hergestellt. Diamindiphenol-Liganden der Formel (C) können synthetisiert werden gemäß der Verfahren, die beschrieben sind von Pillai et al (Nucl. Med. Biol. 1993, Band 20 (2), Seiten 211–216). N₂S₂-Liganden der Formel (D) werden synthetisiert durch die Verfahren von Sun et al (J. Med. Chem. 1996, Band 39, Seiten 458–470). Hydrazino-Nikotinamid-Liganden der Formel (E) werden synthetisiert gemäß der Verfahren, die beschrieben sind in US 5206370 .
Ein „Salz" einer Verbindung der Formel (I) ist definiert als ionische Versionen der Verbindungen der Formel (I), gebildet durch Ersetzen einer oder mehrerer Wasserstoffionen einer Säure mit einem anderen positiven Ion, wie ein Alkalimetall (geeigneterweise Na⁺ oder K⁺).
„Alkyl", verwendet entweder allein oder als Teil einer anderen Gruppe (wie Arylalkyl, Hydroxyalkyl) ist hier als eine beliebige geradkettige oder verzweigte C₁H_2n+1-Gruppe definiert, wobei, falls nicht anders spezifiziert, n für 1 bis 10 steht und bevorzugt n für 1 bis 6 steht.
Der Begriff „Halo" bedeutet eine Gruppe ausgewählt aus Fluoro, Chromo, Bromo und Iodo.
Wie oben angemerkt ist, sind, für in-vivo-Bildgebungszwecke, die Verbindungen der Erfindung radiomarkiert. Deshalb wird in einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung eine radiomarkierte Version der vorliegenden Erfindung bereitgestellt. Eine radiomarkierte Verbindung der Erfindung ist geeigneterweise mit γ-emittierenden Radioisotopen markiert, die für Single Photon Emission Computed Tomography (SPECT)-Bildgebung nützlich sind. Die am meisten bevorzugten Bildgebungs-Einheiten sind γ-emittierende Radiometalle, insbesondere ^99mTc. Im Falle von ⁹⁹Tc wird Markieren durch Komplexieren von ^99mTc durch den Chelatteil der Verbindung der Erfindung durchgeführt. Die Verwendung von ^99mTc in radiopharmazeutischen Anwendungen wird diskutiert in Abschnitt B von „Technetium: chemistry and radiopharmaceutical applications", Klaus Schwochau, 2000, Seiten 373–423, veröffentlicht von Wiley-Vch Verlag GmbH.
Eine Verbindung der vorliegenden Erfindung (I) kann für die Herstellung eines Medikaments für die in-vivo-Bildgebung oder -Diagnose einer mit Amyloid in Verbindung stehenden Krankheit verwendet werden. Ein derartiges Medikament ist bevorzugt radiomarkiert und am meisten bevorzugt ^99mTc-markiert. Wenn das Medikament ^99mTc-markiert ist, wird ein steriles ^99mTc-Pertechnetat (TcO₄ ^–) von einem ^99mTc-Radioisotop-Generator durch Elution mit steriler Salzlösung erhalten. ^99mTcO₄ ^–, hergestellt von einem Generator, ist relativ unreaktiv und muss zu einer niedrigeren Oxidationsstufe vor der Verwendung als ein Radiopharmazeutikum reduziert werden. Das am meisten allgemein verwendete Reduktionsmittel ist Zinn(II)-chlorid. Radiomarkieren wird in einer Mischung ausgeführt, die eine Verbindung der Erfindung, TcO₄ ^– und ein geeignetes Reduktionsmittel aufweist, durch Verfahren, die jenen Fachleuten bekannt sind (siehe Abschnitt B von „Technetium: chemistry and radiopharmaceutical applications", Klaus Schwochau, 2000, Seiten 373–423, veröffentlicht von Wiley-Vch Verlag GmbH).
Eine radiomarkierte Verbindung gemäß der Erfindung wird bevorzugt in einer radiopharmazeutischen Formulierung verabreicht, die die Verbindung der Erfindung umfasst. Ein „radiopharmazeutische Formulierung" ist in der vorliegenden Erfindung definiert als eine Formulierung, die eine radiomarkierte Verbindung der Erfindung, bevorzugt eine Tc-markierte Verbindung, in einer Form umfasst, die für die Verabreichung an Menschen geeignet ist. Eine Verabreichung wird bevorzugt ausgeführt durch Injektion der Formulierung als eine wässerige Lösung. Eine derartige Formulierung kann gegebenenfalls weitere Inhaltsstoffe enthalten, wie Puffer; pharmazeutisch annehmbare Lösungsvermittler (z.B. Cyclodextrine oder oberflächenaktive Mittel, wie Pluronic, Tween oder Phospholipide); pharmazeutisch annehmbare Stabilisatoren oder Antioxidantien (wie Ascorbinsäure, Gentisinsäure oder para-Aminobenzoesäure) oder Füllstoffe für die Lyophilisierung (wie Natriumchlorid oder Mannitol). Die radiopharmazeutische Formulierung wird in einer Menge verabreicht, die ein zuverlässiges Bild ergibt, zum Beispiel für eine Tc-markierte Verbindung, in einer Menge von 0,1 bis 50 mCi in ungefähr 0,5 bis 50 ml zum Zeitpunkt der Verabreichung.
In geeigneter Weise wird in einer weiteren Ausführungsform der Erfindung ein Kit für die Herstellung von ^99mTc-markierten Verbindungen zur Bildgebung und Diagnose von mit Amyloid in Verbindung stehender Krankheit bereitgestellt. Ein „Kit", wie durch die vorliegende Erfindung definiert, ist eine Ausführungsform der Erfindung, die gestaltet ist, um sterile, pyrogenfreie, radiopharmazeutische Produkte, die für die Verabreichung an den Menschen geeignet sind, z.B. über eine Injektion in den Blutstrom, zu ergeben. Wenn das Radiometall ^99mTc ist, umfasst das Kit ein Glasfläschen, das das Verbindungs-Chelat-Konjugat der Erfindung zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Reduktionsmittel enthält, wie Natriumdithionit, Natriumbisulphit, Ascorbinsäure, Formamidinsulphinsäure, Zinn(II)-ionen, Fe (II) oder Cu (I), bevorzugt ein Zinn(II)-salz wie Zinn(II)-chlorid oder Zinn(II)-tartrat. Bei Verwendung wird eine Quelle von ^99mTc in das Glasfläschen gegeben, um die radiomarkierte Verbindung zu erzeugen.
Verbindungen der Formel (I), in der R für die Gruppe
steht, können hergestellt werden aus der entsprechenden Verbindung der Formel (II)
worin eine Gruppe von R⁹ und R¹⁰ für -OCR⁴R⁵C(O)OH steht,
worin R⁴ und R⁵ wie für die Verbindung der Formel (I) definiert sind;
die andere Gruppe für -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ steht, worin n, R⁷ und R⁸ wie für die Verbindung der Formel (I) definiert ist; und R³ wie für die Verbindung der Formel (I) definiert ist;
durch Koppeln mit einem Chelat der Formel H₂N-[A] wobei [A] wie für die Verbindung der Formel (I) definiert ist.
Verbindungen der Formel (I), in der R⁶ für C_1-6-Alkyl steht, kann durch Alkylierung der entsprechenden Verbindung der Formel (I) hergestellt werden, in der R⁶ für Wasserstoff steht.
Diese Kopplungsreaktion kann ausgeführt werden unter Verwenden von Standardverfahren der Amidbindungsbildung. Zum Beispiel kann die Reaktion in einem aprotischen Lösungsmittel, wie N,N-Dimethylformamid, in Anwesenheit einer organischen Base, wie N-Methylmorpholin (NMM) und 2-(1H-Benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborat (TBTU), bei einer nicht-extremen Temperatur wie 10° bis 40°C, bevorzugt bei Umgebungstemperatur, ausgeführt werden.
Verbindungen der Formel (II) sind nützlich für Zwischenprodukte bei der Herstellung von Verbindungen der Formel (I) und repräsentiert daher einen weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung.
Verbindungen der Formel (II) können in geeigneter Weise durch Hydrolyse des entsprechenden Esters, geeigneterweise ein C_1-6-Alkylester, bevorzugt das Methylester, hergestellt werden. Die Hydrolyse kann unter Verwenden herkömmlicher Verfahren ausgeführt werden, geeigneterweise Alkali- oder Säurehydrolyse, zum Beispiel unter Verwenden von wässrigem Natriumhydroxid.
Veresterte Verbindungen der Formel (II) können aus der entsprechenden Verbindung der Formel (III) hergestellt werden
worin eine Gruppe von R¹¹ und R¹² für Hydroxy steht und die andere für -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ steht,
worin n, R⁷ und R⁸ wie für die erwünschte Verbindung der Formel (II) definiert sind;
und R³ wie für die Verbindung der Formel (II) definiert ist;
durch Reaktion mit dem Bromacetat der Formel BrCR⁴R⁵C(O)OCH₃, worin R⁴ und R⁵ wie in der Verbindung der Formel (II) definiert sind und bevorzugt beide für Wasserstoff stehen.
Verbindungen der Formel (III) können durch Verfahren hergestellt werden, die jenen analog sind, die in der Literatur (zum Beispiel Howlett et al, siehe oben) beschrieben sind oder unter Verwenden der Verfahren, die in den Beispielen unten beschrieben sind.
Verbindungen der Formel (I), in denen R für Wasserstoff steht, können hergestellt werden durch die entsprechende Verbindung der Formel (IV):
oder einem geschützten Derivat davon, worin R¹⁰ für -OCR⁴R⁵C(O)OH, wie für die Verbindung der Formel (II) definiert, steht; und R³ wie für die Verbindung der Formel (I) definiert ist;
durch Koppeln mit einem Chelat der Formel H₂N-[A] worin [A] wie für die Verbindung der Formel (I) definiert ist.
Koppeln einer Verbindung der Formel (IV) mit dem Chelat kann erreicht werden wie oben beschrieben für das Koppeln einer Verbindung der Formel (II) mit einem Chelat.
Verbindungen der Formel (IV) können hergestellt werden durch Verfahren, die jenen analog sind, die oben für die Herstellung von Verbindungen der Formel (II) beschrieben sind und wie sie unten veranschaulicht sind.
Die Erfindung kann durch die folgenden nicht-beschränkenden Beispiele veranschaulicht werden.
Beispiele Zwischenprodukt 1A
Schritt (i)
Zu einer Lösung von 4-Chlorphenol (Aldrich) (2,134 g, 16,6 mmol, 1 äq) und 4-Methoxybromacetophenon (Aldrich) (4,138 g, 18,26 mmol, 1,1 äq) in Aceton (50 ml) wurde Kaliumcarbonat (3,516 g, 1,53 äq, 25,48 mmol) gegeben. Die Mischung wurde bei Rückfluss-Temperatur 5 Stunden lang gerührt und erwärmt. Man ließ die Reaktion dann auf Raumtemperatur abkühlen und filtrierte. Das Filtrat wurde zum Trocknen verdampft, dann in Ethylacetat (50 ml) aufgelöst. Die organische Schicht wurde dann sequentiell mit 2 M (NaOH) zweimal, Wasser und gesättigter NaCl-Lösung gewaschen. Die organische Schicht wurde dann getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und zum Trocknen verdampft, um einen gelben Feststoff zu ergeben. Dieser wurde unter Verwenden von Ethylacetat (EtOAc)/Benzin kristallisiert, um das erwünschte Produkt als einen cremefarbenen Kristall zu erzeugen.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 3,86 (s, 3H, OCH₃), 5,18 (s, 2H, CH₂), 6,82 (d, 2H, aromatisch), 6,96 (d, 2H, aromatisch), 7,21 (d, 2H, aromatisch), 7,96 (d, 2H, aromatisch)
Schritt (ii)
Die Verbindung des Schritts (i) (3,244 g, 11,72 mmol) (30) wurde zu einer Mischung von Polyphosphorsäure (50 g) und Xylol (50 ml) gegeben und unter Verwenden eines Überkopfrührers gerührt. Die resultierende Mischung wurde bei 140°C bis zur Beendigung erwärmt (überwacht durch Dünnschichtchromatographie (TLC)). Man ließ die Reaktion auf Raumtemperatur (RT) ankühlen und Ethylacetat (100 ml) wurde zugegeben. Die obere organische Schicht wurde abdekantiert. Die Polyphosphorsäure wurde mit Wasser (100 ml) behandelt und aus dem Kolben entfernt. Weitere 200 ml Wasser wurden zugegeben und die wässrige Phase wurde mit 3 × 100 ml EtOAc extrahiert. Die kombinierte organische Schicht wurde dann mit Salzlösung (100 ml) gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und verdampft, um einen rohen Feststoff zu erzeugen. Dieser wurde durch Umkristallisieren unter Verwenden von Ethylacetat gereinigt.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 3,84 (s, 3H, OCH₃), 6,80 (s, 1H, aromatisch), 6,95 (d, 2H, aromatisch), 7,18 (d, 1H, aromatisch), 7,39 (d, 2H, aromatisch), 7,49 (d, 1H, aromatisch), 7,77 (d, 2H, aromatisch).
Zwischenprodukt 1
Eine Lösung des Zwischenprodukts 1A (100 mg, 0,38 mmol) (21) unter Stickstoff in Dichlormethan (DCM) (7 ml) wurde in einem Eisbad gekühlt. Bortribromid-Lösung (1 M in DCM, 3,8 ml, 3,8 mmol, 10 äq) wurde langsam zugegeben. Die dunkelbraune Reaktionsmischung wurde unter N₂ gerührt und man ließ sie dann langsam auf Raumtemperatur erwärmen. Nach 4 Stunden zeigte TLC, dass die Reaktion beendet war (Eluent: 5:1 Petrolether:Ethylacetat). Die Reaktion wurde durch Zugabe von 20 ml 10%-iger HCl-Lösung gequencht und mit DCM verdünnt.
Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat extrahiert. Die organischen Schichten wurden getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und zum Trocknen verdampft, um einen schmutzigbraunen/schwarzen Feststoff zu erzeugen. Dieser wurde durch Flash-Säulenchromatographie (Eluent 5:1 Benzin:Ethylacetat) gereinigt, um einen leicht braunen Feststoff zu erzeugen.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 6,79 (s, 1H, aromatisch), 6,87 (d, 2H, aromatisch), 7,18 (d, 1H, aromatisch), 7,37 (d, 1H, aromatisch), 7,49 (d, 1H, aromatisch), 7,73 (d, 2H, aromatisch).
Zwischenprodukt 2-Diethyl(3-chlorpropyl)amin
Eine Lösung von 3-Diethylamino-1-propanol (Aldrich) (10 g, 76 mmol) in DCM wurde bei 0°C gerührt. Eine Lösung von Thionylchlorid (DCM 30 ml) wurde dann tropfenweise derart zugegeben, dass die Reaktionstemperatur bei 0°C blieb. Sobald die Zugabe abgeschlossen war, wurde die Reaktion eine Stunde lang unter Rückfluss gekocht. Man ließ die Reaktion abkühlen und das überschüssige DCM und Thionylchlorid wurden unter Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde unter Verwenden von 2 N NaOH basisch gemacht (pH 8–9) und die wässrige Mischung wurde mit DCM (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (MgSO₄) und verdampft, um ein braunes Öl zu ergeben. Das Öl wurde destilliert (160°–165°C), um das Produkt als ein klares Öl (4,2 g, 36,9%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,02 (6H, 2 × CH₃), 1,89 (2H, CH₂), 2,52 (6H, 3 × CH₂), 3,59 (2H, CH₂), m/z 150/151 M + H
Zwischenprodukt 3-Diethyl-chlorethylamin
Eine Lösung von 2-Diethylaminoethanol (Lancaster) (10 g, 85 mmol) in DCM wurde bei 0°C gerührt. Eine Lösung Thionylchlorid (30 ml DCM) wurde derart zugegeben, dass die Temperatur der Reaktion bei 0°C blieb. Sobald die Zugabe abgeschlossen ist, wird die Reaktion eine Stunde lang unter Rückfluss gekocht. Man lässt die Reaktion abkühlen und das überschüssige DCM und Thionylchlorid wurden unter Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde unter Verwenden von 2 N NaOH basisch gemacht (pH 8–9) und die wässige Mischung mit DCM (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (MgSO₄) und verdampft, um ein braunes Öl zu ergeben. Das Öl wurde destilliert (165°–169°C), um das Produkt als ein klares Öl (6,7 g 58%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,02 (6H, 2 × CH₃), 2,58 (4H, 2 × CH₂), 2,78 (2H, CH₂), 3,52 (2H, CH₂), m/z 136/137 M + H
Beispiel 1 Beispiel 1 (i) Ethyl-4-(diethylaminoethyloxy)benzoat
Die Titelverbindung wurde durch Alkylierung von Ethyl-4-hydroxybenzoat mit Diethylchlorethylamin unter Verwenden von Verfahren hergestellt, die zu jenen, die in Beispiel 2 (i) beschrieben sind, analog sind.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,07 (6H, 2 × CH₃), 1,38 (3H, CH₃), 2,63 (4H), 2,89 (2H, CH₂), 4,1 (2H, OCH₂), 4,35 (2H, OCH₂), 6,91 (2H), 7,97 (2H).
Beispiel 1 (ii) 4-(3-Diethylaminoethyloxy)benzoesäure
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 1 (i) hergestellt, unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 2 (ii) beschrieben sind, um das erwartete Produkt 5,2 g, 91% Ausbeute, zu ergeben.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 1,22 (6H, 2 × CH₃), 3,18 (4H), 3,49 (2H, CH₂), 4,46 (2H, OCH₂), 7,05 (2H), 7,89 (2H).
Beispiel 1 (iii) 4-(2-Diethylaminoethyloxy)benzoylchlorid
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 1 (ii) hergestellt, unter Verwenden von Verfahren, die jenen in Beispiel 2 (iii) analog sind, um 5,4 g, 100% Ausbeute zu ergeben.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 1,27 (6H, 2 × CH₃), 3,17 (4H), 3,49 (2H), 4,47 (2H, OCH₂), 7,07 (2H), 7,9 (2H).
Beispiel 1 (iv) 5-Chlor-2-(4-methoxyphenyl)-3-[4-[2-diethylaminoethyloxy)benzoyllbenzofuran.
Die Verfahren des Beispiels 2 (iv) wurden zum Koppeln des Zwischenprodukts 1A an die Verbindung des Beispiels 1 (iii) verwendet, um das erwartete Produkt (1,21 g, 68%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,28 (6H, 2 × CH₃), 2,99 (4H), 3,22 (2H), 3,81 (3H, CH₃), 4,38 (2H, OCH₂), 6,84 (4H), 7,27 (1H), 7,46 (2H), 7,63 (2H), 7,83 (2H).
Beispiel 1 (v) 5-Chlor-2-(4-hydroxyphenyl)-3-[4-(3-diethylaminoethyloxy)benzoyl]benzofuran.
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 1 (iv) hergestellt, unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 2 (v) beschrieben sind.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 0,91 (6H, 2 × CH₃), 2,5 (4H), 2,27 (2H), 4,03 (2H, OCH₂), 6,96 (2H), 6,87 (2H), 7,35 (4H), 7,68 (3H).
Beispiel 1 (vi)
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 1 (v) hergestellt, unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 4 (iv) beschrieben sind.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 0,91 (6H, 2 × CH₃), 2,6 (4H), 2,88 (2H), 3,8 (3H), 4,03 (2H, OCH₂), 4,67 (2H), 6,84 (4H), 7,4 (1H), 7,49 (2H), 7,61 (2H), 7,84 (2H).
Beispiel 1 (vii)
Das Titelprodukt wurde aus dem entsprechenden Methylester unter Verwenden der folgenden Route hergestellt:
Eine Lösung der Verbindung des Beispiels 1 (vi) in Methanol wurde bei RT gerührt. 2 N NaOH (äquivalentes Volumen) wurde zugegeben und die Reaktionen wurden bei RT zwei Stunden lang gerührt. Die Reaktion wurde mit H₂O verdünnt und auf pH 4 angesäuert. Der wässrige Teil wurde mit DCM (3×) extrahiert und die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet und verdampft, um die Titelverbindung zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,36 (6H, 2 × CH₃), 3,25 (6H), 4,4 (2H, OCH₂), 4,5 (2H), 6,62 (2H), 6,68 (2H), 7,14 (2H), 7,34 (1H), 7,46 (1H), 7,53 (2H), 8,1 (1H).
m/z 522,26/524,49
Beispiel 1 (viii) Koppeln an Chelat
Das Benzofuran des Beispiels 1 (vii) (1 äq) und das Chelat (als ein freies primäres Amin) (1 äq) werden in Dimethylformamid aufgelöst. TBTU (2-(1H-Benzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetramethyluroniumtetrafluorborat) (1,2 äq) und N-Methylmorpholin (1,2 äq) werden dann zugegeben. Die Reaktion wird bei Raumtemperatur 12 Stunden lang gerührt. Das Endprodukt wird durch präparative HPLC (PRP-Säule) ohne irgendwelche weiteren Behandlungen gereinigt. Pn44 konjugiert (aus Beispiel 1 (vii))
M/S: ES+: m/z 819,3, 410,6; M + H, (M + 2)/2 Pn216 konjugiert (aus Beispiel 1 (vii))
M/S: ES+: m/z 848,2, 425,1; M + H, (M + 2)/2 cPn216 konjugiert (von Beispiel 1 (vii))
M/S: ES+: m/z 847,3, 424,6; M + H, (M + 2)/2
Beispiel 2 Beispiel 2 (i) Ethyl-4-(diethylaminopropyloxy)benzoat
Eine Lösung von Ethyl-4-hydroxybenzoat (10 g, 6 mmol), Zwischenprodukt 2 (10 g, 6,7 mmol) und Kaliumcarbonat (16,6 g, 12 mmol) in DMF wurde auf 100°C 48 Stunden lang erwärmt. Bei Beendigung wurde die Reaktion auf 200 ml Eiswasser gegossen, und die Mischung unter Verwenden von Ethylacetat (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft. Der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie gereinigt, um die Titelverbindung 7,6 g, 61% als ein blasses orangefarbenes Öl zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,07 (6H, 2 × CH₃), 1,35 (3H, CH₃), 1,92 (2H, CH₂), 2,56 (6H), 4,06 (2H, OCH₂), 4,35 (2H, OCH₂), 6,91 (2H), 7,97 (2H).
Beispiel 2 (ii) 4-(3-Diethylaminopropyloxy)benzoesäure
Eine Lösung der Verbindung von Beispiel 2 (i) (8 g, 29 mmol) in H₂O (50 ml) wurde bei RT gerührt. Conc. HCl wurde zugegeben (50 ml) und die Reaktion wurde bei Rückfluss 18 Stunden lang erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und verdampfte zum Trocknen. Das Lösungsmittel wurde in heißem Ethanol aufgelöst und Petrolether wurde hinzugegeben, um das erwartete Produkt als weiße Plättchen 72 g, 88 zu erzeugen.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 1,19 (6H, 2 × CH₃), 2,17 (2H), 3,12 (6H, CH₂), 4,14 (2H, OCH₂), 7,02 (2H), 7,88 (2H).
Beispiel 2 (iii) 4-(Diethylaminopropyloxy)benzoylchlorid
Eine Lösung der Verbindung des Beispiels 2 (ii) (6 g, 24 mmol) in DCM wurde bei 0°C gerührt. Thionylchlorid wurde tropfenweise zugegeben und die Reaktion wurde bei Rückfluss 24 Stunden lang erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und die Lösungsmittel unter Vakuum entfernen, um die erwartete Verbindung als einen stechenden rohen Feststoff 5,9 g, 100% zu erzeugen. Der Feststoff wurde ohne weitere Reinigung verwendet.
¹H NMR (d⁶DMSO) δH ppm 1,19 (6H, 2 × CH₃), 2,16 (2H), 3,12 (6H), 4,12 (2H, OCH₂), 7,03 (2H), 7,89 (2H).
Beispiel 2 (iv) 5-Chlor-2-(4-methoxyphenyl)-3-[4-(3-diethylaminopropyloxy)benzoyl)benzofuran
Eine Lösung von 5-Chlor-2-(4-methoxyphenyl)benzofuran (1 g, 3,9 mmol) in DCM (100 ml) wurde bei 0°C unter Stickstoff gerührt. Die Verbindung des Beispiels 2 (iii) (1,68 g, 6,9 mmol) wurde zugegeben, gefolgt von tropfenweise Zugabe einer Zinn(II)-chlorid-Lösung (1 M DCM, 11,6 mmol). Die Farbe wurde zu einem tiefen Rot und die Reaktion wurde bei RT für 3 Stunden gerührt. Die resultierende Suspension wurde auf Eiswasser (250 ml) gegossen und der organische Teil getrennt. Die wässrige Schicht wurde mit DCM extrahiert und die organischen Teile wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft. Der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie gereinigt, um die Titelverbindung als einen gelben Teer (1,34 g, 72%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,38 (6H, 2 × CH₃), 2,36 (2H), 3,12 (4H), 3,81 (3H, CH₃), 4,12 (2H, OCH₂), 6,83 (4H), 7,29 (1H), 7,46 (2H), 7,65 (2H), 7,82 (2H).
Beispiel 2 (v) 5-Chlor-3-[4-(3-diethylaminopropyloxy)benzoyl]-2-(4-hydroxyphenyl)benzofuran
Eine Lösung der Verbindung des Beispiels 2 (iv) (4,3 g, 8,7 mmol) in Dichlorethan (100 ml) wurde auf 10°C gekühlt. Aluminiumchlorid (50 mmol) wurde zugegeben, gefolgt von 2-Methyl-5-tert-butylthiophenol (17,4 mmol) und die Reaktion wurde bei 40°C 4 Stunden lang erwärmt. Methanol (20 ml) wurde zugegeben, gefolgt von H₂O (150 ml). Die organische Phase wurde getrennt, unter Vakuum konzentriert und durch Flash-Chromatographie gereinigt, um die erwartete Verbindung als ein helles gelbes Öl zu ergeben. 1,9 g, 46% Ausbeute.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,34 (6H, 2 × CH₃), 2,18 (2H), 3,08 (6H), 4,05 (2H, OCH₂), 6,66 (2H), 6,79 (2H), 7,25 (3H), 7,43 (1H), 7,60 (2H), 7,75 (1H).
Beispiel 2 (vi)
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 2 (v) unter Verwenden von Verfahren hergestellt, die jenen analog sind, die in Beispiel 4 (iv) beschrieben sind.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 0,18 (6H, 2 × CH₃), 2,1 (2H), 2,8 (6H), 3,8 (3H), 4,07 (2H), 4,63 (2H, OCH₂), 6,84 (4H), 7,26 (2H), 7,45 (1H), 7,64 (2H), 7,83 (2H).
Beispiel 2 (vii)
Die Titelverbindung wurde hergestellt unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (vii) beschrieben sind.
δH ppm 1,12 (6H, 2 × CH₃), 2,07 (2H), 6,76 (6H), 4,22 (2H, OCH₂), 4,5 (2H), 6,85 (2H), 6,94 (2H), 7,5 (3H), 7,65 (1H), 7,76 (2H), 7,82 (1H).
m/z 536,34/538,37
Beispiel 2 (viii)
Das Benzofuran des Beispiels 2 (vii) wurde an verschiedene Chelate gekoppelt unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (viii) beschrieben sind. Pn44 konjugiert (von Beispiel 2 (vii))
M/S: ES+: m/z 833,3, 417,5, M + H, (M + 2)/2 Pn216 konjugiert (von Beispiel 2 (vii))
M/S: ES+: m/z 862,3, 432,1, M + H, (M + 2)/2 cPn216 konjugiert (von Beispiel 2 (vii))
M/S: ES+: m/z 861,3, 431,7, M + H, (M + 2)/2
Beispiel 3 Beispiel 3 (i) 5-Chlor-2-[4-(2-diethylaminoethyloxy)phenyl]benzofuran
Eine Lösung des Zwischenprodukts 1 (5 g, 20 mmol) in DMF wurde bei RT gerührt. Das Zwischenprodukt 3 (22 mmol) wurde zugegeben, gefolgt von Kaliumcarbonat. Die Reaktion wurde auf 90°C zwei Stunden lang erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und sie wurde dann auf Eiswasser gegossen. Der resultierende Feststoff wurde durch Filtration gesammelt und getrocknet, um die Titelverbindung als einen weißen Feststoff (4,5 g, 65,5%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,08 (6H, 2 × CH₃), 2,65 (2H, 2 × CH₂), 2,91 (4H, 2 × CH₂), 4,09 (2H, OCH₂), 6,8 (1H), 6,97 (2H), 7,18 (1H), 7,38 (1H), 7,49 (1H), 7,76 (2H).
m/z 342/344 M + H
Beispiel 3 (ii)
Eine Lösung der Verbindung des Beispiels 3 (i) (3,5 g, 10 mmol) und p-Anisoylchlorid (18 mmol) in trockenem DCM wurde bei 0°C unter Stickstoff gerührt. Eine Lösung von SnCl₄ (1 M DCM, 30 mmol) wurde tropfenweise zugegeben und das Rühren wurde zwei Stunden lang bei RT unter Stickstoff fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wurde vorsichtig zu 1,0 ml Eiswasser gegeben und der wässrige Teil wurde mit Ethylacetat (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft, um ein helles gelbes Öl zu ergeben. Dieses wurde durch Flash-Chromatographie (Silica Flash) gereinigt, um die Titelverbindung als einen weißen Feststoff (2,1 g, 45%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,45 (6H, 2 × CH₃), 3,24 (4H, 2 × CH₂), 3,43 (2H, CH₂), 3,87 (3H, CH₃), 4,55 (2H, OCH₂), 6,85 (4H), 7,3 (1H), 7,44 (2H), 7,67 (2H), 7,86 (2H).
m/z 477/479 M + H
Beispiel 3 (iii)
Pyridinhydrochlorid (10 g) wurde auf 170°C erwärmt. Das feste Produkt von Beispiel 3 (ii) wurde zugegeben und die Reaktion wurde bei 170°C für weitere 2 Stunden erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und Eiswasser wurde zugegeben (100 ml) und die wässrige Mischung wurde extrahiert unter Verwenden von DCM (3 × 100 ml). Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft, was einen öligen Rückstand ergab. Dieser wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂) gereinigt, um die Titelverbindung als einen blassen gelben Schaum (0,8 g, 63%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 0,91 (6H, 2 × CH₃), 2,5 (4H, 2 × CH₂), 2,75 (2H, CH₂), 4,03 (2H, OCH₂), 6,71 (2H), 6,88 (2H), 7,37 (4H), 7,69 (2H).
m/z 451/453 M + H
Beispiel 3 (iv)
Die Titelverbindung wurde aus der Verbindung des Beispiels 3 (iii) unter Verwenden von Verfahren hergestellt, die jenen analog sind, die in Beispiel 4 (iv) beschrieben sind. 0,21 g 37% des Produktes wurden erhalten.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,06 (6H, 2 × CH₃), 2,62 (4H, 2 × CH₂), 2,84 (2H, CH₂), 3,8 (3H, CH₃), 4,04 (2H, OCH₂), 4,6 (2H, OCH₂), 6,83 (4H), 7,29 (1H), 7,47 (2H), 7,61 (2H), 7,83 (2H).
Beispiel 3 (v)
Die Titelverbindung wurde hergestellt unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (vii) beschrieben sind.
¹H NMR (DMSO) δH ppm 1,14 (6H, 2 × CH₃), 3,04 (4H), 3,3 (2H), 4,3 (2H, OCH₂), 4,6 (2H), 6,76 (2H), 6,90 (2H), 7,4 (3H), 7,6 (3H), 7,7 (1H).
m/z 522,28/524,47
Beispiel 3 (vi)
Die Verbindung des Beispiels 3 (v) wurde konjugiert an eine Vielfalt von Chelaten unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (viii) beschrieben sind. Pn44 konjugiert (von Beispiel 3 (v))
M/S: ES+: m/z 819,3, 410,2; M + H, (M + 2)/2 Pn216 konjugiert (von Beispiel 3 (v))
M/S: ES+: m/z 848,3, 424,7; M + H, (M + 2)/2 cPn216 konjugiert (von Beispiel 3 (v))
M/S: ES+: m/z 847,3, 424,5; M + H, (M + 2)/2
Beispiel 4 Beispiel 4 (i) 5-Chlor-2-[4-(3-diethylaminopropyloxy)phenyl)benzofuran
Eine Lösung des Zwischenproduktes 1 (4 g, 16 mmol) in DMF wurde bei RT gerührt. Das Zwischenprodukt 2 (18 mmol) wurde zugegeben gefolgt von Kaliumcarbonat. Die Reaktion wurde auf 90°C zwei Stunden lang erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und sie wurde dann auf Eiswasser gegossen. Der resultierende Feststoff wurde durch Filtration gesammelt und getrocknet, um die Titelverbindung als einen weißen Feststoff (4,2 g, 76,4%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,04 (6H, 2 × CH₃), 1,94 (2H, CH₂), 2,58 (6H, 3 × CH₂), 4,07 (2H, OCH₂), 6,79 (1H), 6,95 (2H), 7,17 (1H), 7,38 (1H), 7,49 (1H), 7,74 (2H).
m/z 357/359 M + H
Beispiel 4 (ii) 5-Chlor-2-[4-(3-diethylaminpropyloxy)phenyl]-3-(4-methoxybenzoyl)benzofuran
Eine Lösung des Produktes von Beispiel 4 (i) (1 g, 2,8 mmol) in trockenem DCM wurde bei 0°C unter Stickstoff gerührt. Anisoylchlorid (4,9 mmol) wurde zugegeben gefolgt von einer Lösung von SnCl₄ (1 M DCM, 4,9 mmol). Eine sofortige rote Farbe trat auf und das Rühren wurde zwei Stunden lang fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wurde vorsichtig zu 100 ml Eiswasser gegeben und der wässrige Teil wurde mit Ethylacetat (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft, um ein helles gelbes Öl zu ergeben. Dieses wurde durch Flash-Chromatographie (Silica Flash) gereinigt, um die Titelverbindung als einen blassen gelben Feststoff zu ergeben (0,8 g 58%).
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,42 (6H, 2 × CH₃), 2,37 (2H, CH₂), 3,17 (6H, 3 × CH₂), 3,89 (3H, CH₃), 4,08 (2H, OCH₂), 6,82 (4H), 7,26 (1H), 7,45 (2H), 7,63 (2H), 7,84 (2H).
m/z 491/493 M + H
Beispiel 4 (iii) 5-Chlor-2-[4-(3-diethylaminopropyloxy)phenyl]-3-(4-hydroxybenzoyl)benzofuran
Pyridinhydrochlorid (10 g) wurde auf 170°C erwärmt. Das feste Produkt von Beispiel 4 (ii) wurde zugegeben und die Reaktion wurde bei 170°C für weitere 2 Stunden erwärmt. Man ließ die Reaktion abkühlen und Eiswasser wurde zugegeben (100 ml) und die wässrige Mischung wurde extrahiert unter Verwenden von DCM (3 × 100 ml). Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft, was einen öligen Rückstand ergab. Dies wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂) gereinigt, um die Titelverbindung als einen blassen gelben Feststoff (1,2 g, 61,4%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,11 (6H, 2 × CH₃), 2,01 (2H, CH₂), 2,94 (4H, 2 × CH₂), 3,31 (2H, CH₂), 4,08 (2H, OCH₂), 6,76 (2H), 6,96 (2H), 7,4 (2H), 7,56 (2H), 7,68 (2H), 7,75 (1H).
m/z 477/479 M + H
Beispiel 4 (iv)
Eine Lösung des Produktes von Beispiel 4 (iii) (0,8 g, 1,8 mmol) in trockenem DMF wurde bei RT gerührt. Kaliumcarbonat wurde zugegeben und die Reaktion wurde auf 90°C 2 Stunden lang erwärmt. Die Reaktionsmischung wurde auf Eiswasser gegossen und der wässrige Teil unter Verwenden von DCM (3 × 100 ml) extrahiert. Die organischen Extrakte wurden kombiniert, getrocknet (Na₂SO₄) und verdampft, um einen gelben Rückstand zu ergeben. Dieser wurde gereinigt unter Verwenden von Flash-Chromatographie, um die Titelverbindung als einen orangefarbenen Teer (0,13 g, 21%) zu ergeben.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 1,18 (6H, 2 × CH₃), 2,22 (2H, CH₂), 2,79 (6H, 3 × CH₂), 3,8 (3H, CH₃), 4,08 (2H, OCH₂), 4,67 (2H, CH₂), 6,83 (4H), 7,27 (1H), 7,45 (2H), 7,65 (2H), 7,83 (2H).
m/z 549/551 M + H
Beispiel 4 (v)
Die Titelverbindung wurde hergestellt unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (vii) beschrieben sind.
¹H NMR (DMSO) δH ppm 1,26 (6H, 2 × CH₃), 2,15 (2H), 3,22 (6H), 3,38 (2H), 4,16 (2H, OCH₂), 4,79 (2H), 6,9 (2H), 7,0 (2H), 7,5 (2H), 7,66 (2H), 7,84 (3H).
m/z 536,32/538,43
Beispiel 4 (vi)
Das Benzofuran des Beispiels 4 (v) wurde an eine Vielfalt von Chelaten unter Verwenden von Verfahren konjugiert, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (viii) beschrieben sind. Pn44 konjugiert (von Beispiel 4 (v))
M/S: ES+: m/z 833,3, 417,6, M + H, (M + 2)/2 Pn216 Benzofuran 3 konjugiert (von Beispiel 4 (v))
M/S: ES+: m/z 862,3, 432,1, M + H, (M + 2)/2 cPn216 Benzofuran 3 konjugiert (von Beispiel 4 (v))
M/S: ES+: m/z 861,3, 431,4, M + H, (M + 2)/2
Beispiel 5 ^99mTc-Markieren von Verbindungen der Erfindung (I)
Eine aliquote Menge von 0,1 ml einer 1 mg/ml-Lösung einer Verbindung der Erfindung, aufgelöst in Methanol oder H₂O, wird in ein mit Stickstoff gefülltes 10 ml-Glasfläschen zusammen mit desoxidierter Salzlösung (0,9% gew/v, 1 ml) und 0,035 ml wässrigem NaOH (0,1 M) übertragen. Zu dieser Lösung wird ein Technetium- Generator-Eluat (1 ml, annähernd 0,4 GBq) und dann wässrige Zinn(II)-chlorid-Lösung (0,1 ml, ca. 10 μg) gegeben. Der Markierungs-pH beträgt 9,0 bis 10,0. Die Glasfläschen werden bei Umgebungslabortemperatur (15–25°C) 30 Minuten lang inkubiert, um Markieren zu bewirken. Die HPLC-Reinigung wird ausgeführt, um unmarkiertes Ausgangsmaterial und radioaktive Verunreinigungen vor dem Testen zu entfernen. Nach der Reinigung wird das organische Lösungsmittel unter Vakuum entfernt und die Probe wird in ungefähr 5 ml 0,1 M Phosphatpuffer pH 7,4 wieder aufgelöst, um eine Arbeitskonzentration von 6–9 MBq/ml zu ergeben. Die radiochemische Reinheit wird vor der Verwendung durch das Dünnschichtchromatographie (TLC)-System, das unten beschrieben wird, bewertet:

i) ITLC SG 2 cm × 20 cm, eluiert mit 0,9% gew/v Salzlösung
ii) Whatman Nr. 1,2 cm × 20 cm, eluiert mit 50:50 v/v Acetonitril:H₂O

Die markierten Substrate bleiben beim oder nahe am Ursprung im TLC System (i) und bewegen sich in der Nähe der Lösungsmittelfront im System (ii). Wenn analysiert durch eine geeignete Detektionsausrüstung, liegt die radiochemische Reinheit typischerweise über 85% der markierten Verbindung.
Beispiel 6 ^99mTc-Markieren von Verbindungen der Erfindung (II)
Ein Glukonat-Kit, umfassend Natriumglukonat (1 mg), Natriumbicarbonat (2 mg), Zinn(II)-Chlorid (15 μg) wird mit Technetiumgeneratoreluat (5 ml, 2 GBq) zur gewünschten Konzentration verdünnt und man lässt es bei Raumtemperatur 15 Minuten lang inkubieren, um das Markieren zu bewirken. Eine aliquote Menge (0,1 ml) einer Verbindung der Erfindung, die in Methanol (5 mg/ml) frisch aufgelöst ist, wird in ein mit Stickstoff gefülltes 10 ml-Glasfläschen zusammen mit 0,025 ml wässrigem NaOH (0,1 M) und 2 ml der ^99mTc-Glukonatlösung übertragen. Der Markierungs-pH beträgt 9,0. Die Fläschen werden bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubiert, um das Markieren zu bewirken. Die Reinigung und die Bewertung der radiochemischen Reinheit werden ausgeführt wie für Beispiel 5.
Beispiel 7 ^99mTc-Markieren von Verbindungen der Erfindung (III)
Eine aliquote Menge von 0,1 ml einer Verbindung der Erfindung, aufgelöst in Methanol (1 mg/ml), wird übertragen in ein mit Stickstoff gefülltes 10 ml-Glasfläschen zusammen mit Tricin, aufgelöst in Wasser (0,5 ml, 37,5 mg), und Phosphindynetris-(benzolsulphonsäure)-trisnatriumsalz, aufgelöst in Wasser (0,1 ml, 1 mg). Zu dieser Lösung wird ein Technetium-Generator-Eluat (1 ml, annähernd 0,4 GBq) und dann eine Lösung von Zinn(II)-chlorid in 0,1 M HCl (0,02 ml, ca. 2 μg) gegeben. Der Markierungs-pH beträgt 4,5–5,5. Die Glasfläschen werden bei 60°C 30 Minuten lang inkubiert, um das Markieren zu bewirken. Die Reinigung und die Bewertung der radiochemischen Reinheit wird ausgeführt wie in Beispiel 5.
Beispiel 8 Herstellung von 3-H-Verbindungen Beispiel 8 (i)
Das Zwischenprodukt 1 (200 mg, 8,1710-4 mol), Methylbromacetat (0,38 ml, 4,09 × 10-3 mol, 5 äq) und Kaliumcarbonat (1,129 g, 8,17 × 10-3 mol, 10 äq) wurden in Aceton (30 ml) gerührt und auf Rückfluss-Temperatur erwärmt. Die Mischung wurde 5 Stunden lang unter Rückfluss gekocht. Die Reaktionsmischung wurde zum Trocknen verdampft und der Rückstand wurde zwischen Wasser und Ethylacetat geteilt. Die Schichten wurden getrennt und die organische Phase wurde mit weiteren 2 Portionen Wasser gewaschen. Die organische Phase wurde getrocknet (Na₂SO₄), filtriert und verdampft. Der Rückstand wurde durch Umkristallisieren aus Ethylacetat gereinigt, um das Produkt als weiße Kristalle (36) (125 mg, 48%) zu erzeugen.
¹H NMR (CDCl₃) δH ppm 3,83 (3H, OCH₃), 4,7 (2H, OCH₂), 6,84 (1H), 7,0 (d, 2H), 7,2 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,51 (d, 1H), 7,80 (d, 2H).
Beispiel 8 (ii)
Die Titelverbindung wurde hergestellt unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (vii) beschrieben sind.
Beispiel 8 (iii)
Die folgenden chelatierten Verbindungen wurden aus der Verbindung des Beispiels 8 (ii) hergestellt, unter Verwenden von Verfahren, die jenen analog sind, die in Beispiel 1 (viii) beschrieben sind. Wenn markiert mit ^99mTc unter Verwenden des Verfahrens, das in den Beispielen 5–7 beschrieben ist, können diese Verbindungen auch zum Abbilden der Alzheimer-Krankheit nützlich sein und repräsentieren daher einen weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung. Pn44 konjugiert
M/S: ES+: m/z: 600,2
1 H NMR (DMSO): d 0,718 (s, 3H); 1,09 (s, 12H), 1,67 (s, 6H), 2,0 (m, 4H); 3,09 (m, 2H); 4,59 (s, 2H); 7,08 (d, 2H); 7,27 (s, 1H); 7,31 (m, 1H); 7,63 (d, 1H); 7,69 (m, 1H); 7,87 (d, 2H); 8,21 (bt, 1H); 10,36 (bs, 1H). Pn216 konjugiert
M/S: ES+: m/z: 629,2
1 H NMR (DMSO): 1,010 (s, 12H); 1,69 (s, 6H), 2,26 (m, 4H); 2,42 (m, 2H); 3,18 (m, 2H); 4,85 (s, 2H); 7,08 (d, 2H); 7,26 (s, 1H); 7,30 (m, 1H); 7,63 (d, 1H); 7,67 (m, 1H); 7,87 (d, 2H); 8,01 (bt, 1H); 10,38 (bs, 1H). cPn216 konjugiert
M/S: ES+: m/z: 628,2
1 H NMR (DMSO): 1,07 (s, 12H), 1,315 (m, 7H), 1,90 (s, 6H); 2,14 (m, 4H); 3,09 (m, 2H); 4,48 (s, 2H); 7,03 (d, 2H); 7,20 (s, 1H); 7,26 (dd, 1H); 7,54 (d, 1H); 7,61 (d, 1H); 7,80 (d, 2H); 8,12 (bt, 1H); 10,38 (bs, 1H). DADP konjugiert
M/S: ES+: m/z: 614,1
1 H NMR: (DMSO): 0,79 (s, 3H); 2,33 (m, 4H), 3,11 (m, 2H); 3,70 (s, 4H); 4,61 (s, 2H); 4,86 (s, 1H); 6,70 (m, 4H); 7,05 (m, 6H); 7,27 (m, 2H); 7,62 (d, 1H); 7,68 (d, 1H); 7,90 (d, 2H); 8,20 (bt, 1H); 7,94 (s, 1H).
Biologische Daten
Bestimmung der Amyloid-Bindung
Das Binden von Verbindungen wurde bestimmt verglichen zur Fähigkeit des ¹²⁵I-beta-Amyloidproteins 1-40 (¹²⁵I-BAP 1-40, Amersham Biosciences IM294), an Amyloid 1-40-Fibrillen zu binden. Die Amyloid-Bindung wurde im wesentlichen ausgeführt wie folgt.
Drei frische Puffer-Stammlösungen wurden für die Experimente hergestellt: Puffer 1, 50 mM HEPES/0,1% Rinderserumalbumin (BSA) pH 7,5; Puffer 2, 50 mM HE-PES/0,1% BSA/400 μM ZnCl₂ pH 7,5; Puffer 3, 50 mM HEPES/0,1% BSA/100 μM ZnCl₂ pH 7,5.
Mit Streptavidin bedeckte Scintillations-Proximity-Assay-Kügelchen (SA-SPA-Kügelchen, Amersham Biosciences) wurden verwendet, um das fibrilläre Beta-Amyloid-Protein (BAP 1-40) zu immobilisieren. Mit Amyloid bedeckte Kügelchen (SPA-BAP) wurden hergestellt durch Inkubieren von 250 μl SA-SPA-Kügelchen (100 mg/ml) mit 250 μl Puffer 2, 425 μl Puffer 1, 50 μl biotinyliertem BAP 1-40 (0,5 mg/ml, Biosource 03-243), 25 μl BAP 1-40 (10 mg/ml, Biosource 03-138). Nicht-spezifische bindende SPA-Kügelchen (SPA-NSB) wurden hergestellt, um das Binden von Verbindungen an SPA-Kügelchen ohne assoziierte BAP 1-40-Fibrillen in der folgenden Inkubation zu bewerten: 250 μl SA-SPA-Kügelchen (100 mg/ml) mit 250 μl Puffer 2, 500 μl Puffer 1.
SPA-BAP- und SPA-NSB-Inkubationen wurden 24 Stunden lang bei Raumtemperatur belassen und dann in 1,5 ml Röhrchen (Eppendorf, Merk, 306/0421/12) 2 Minuten lang bei 1000 × g verwirbelt. Die Überstände wurden entfernt und die Kügelchen wurden zweimal gewaschen durch sie resuspendieren in 1 ml Puffer 3, gefolgt von Zentrifugation für 2 Minuten bei 1000 × g. Schließlich wurden gewaschene SPA-BAP- und SPA-NSB-Kügelchen in 1 ml Puffer 3 resuspendiert.
Die Amyloid-Bindung von ¹²⁵I-BAP 1-40 und Testverbindungen wurde dreifach in 0,5 ml-Röhrchen (Eppendorf, Merk, 306/0421/02) durch Zugeben von 50 μl SPA-BAP-Kügelchen zu 25 μl Puffer 2 und 25 μl markierter Verbindung (¹²⁵I-BAP 1-40 oder Testverbindung) ausgeführt. Die Röhrchen wurden dann 180 Minuten lang bei Raumtemperatur unter Schütteln inkubiert, gefolgt von Zentrifugation für 2 Minuten bei 1000 × g. Die Überstände wurden entfernt und das SPA-BAP-Pellet wurde zweimal mit 300 μl Puffer 3, der 1% TWEEN-20 (Sigma, P7949) enthielt, gewaschen. Nicht-spezifisches Binden für markierte Verbindungen an die SPA-Kügelchen wurde bestimmt unter Verwenden von Inkubationen, wie oben beschrieben, aber durch Ersetzen von SPA-BAP-Kügelchen mit SPA-NSB-Kügelchen. Die Radio-Aktivität, die mit den gewaschenen SPA-Kügelchen-Pellets in Verbindung stand, wurde dann bestimmt.
Die Affinität von markierten Verbindungen für fibrilläres Bap 1-40 wurde eingeschätzt durch Abziehen von SPA-NSB-verbundenen Counts von SPA-BAP-verbundenen Counts. Das Binden von markierten Verbindungen wurde dann mit der ¹²⁵I-BAP-Bindung verglichen, die als 100% angenommen wurde.
In diesen Experimenten wurden ¹²⁵I-BAP 1-40 oder die Testverbindungen in äquimolaren Mengen zugegeben.
Ergebnisse und Diskussion
BAP 1-40 aggregiert auf einfache Weise selbst. In diesem Assay wurde das Binden von ¹²⁵I-BAP 1-40 an eine feste Menge von Amyloid-Fibrillen, die auf SPA-Kügelchen immobilisiert waren, als eine Referenz für andere Verbindungen verwendet. Die Tabelle 1 zeigt, wie andere Amyloid-Binder und -Nichtbinder mit dem Binden von ¹²⁵I-BAP 1-40 im Vergleich sind. Die Testverbindungen binden an Amyloid-Fibrillen mit 40, 15 beziehungsweise 23% der Affinität von ¹²⁵I-BAP 1-40, was günstig ist im Vergleich zur ¹²⁵I-markierten BAP 15-21-Sequenz (Amersham Biosciences) (21%) und der ^99mTc-markierten BAP 15-21-Sequenz (9%). Die BAP 15-21-Sequenz ist für das Binden von BAP an sich selbst währen der Bildung von Amyloid-Fibrillen verantwortlich.
Tabelle 1

Claims

Verbindung der Formel (I):
oder ein Salz davon, worin entweder (iii) R für Wasserstoff steht und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵ [B]-[A] steht, worin R⁴ und R⁵ unabhängig aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl ausgewählt sind, [A] für ein Chelat steht und [B] für eine Linkergruppe steht und bevorzugt für -C(O)NR⁶- steht, worin R⁶ für Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl steht; oder (iv) R für die Gruppe
steht und eine Gruppe von R¹ und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] wie oben definiert steht; und die andere Gruppe für die Gruppe -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ steht, worin n für 0 oder 1 steht, und R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl; und R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.
Verbindung nach Anspruch 1 der Formel (Ia):
oder ein Salz davon, worin R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] steht, worin R⁴ und R⁵ unabhängig ausgewählt sind aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl, [A] für ein Chelat steht und [B] für eine Linkergruppe steht und bevorzugt für -C(O)NR⁶- steht, worin R⁶ für Wasserstoff oder C_1-6-Alkyl steht; und R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.
Verbindung nach Anspruch 1 der Formel (Ib):
oder ein Salz davon, worin: eine Gruppe von R¹ und R² für die Gruppe -OCR⁴R⁵[B]-[A] wie in Anspruch 1 definiert steht; und die andere Gruppe für die Gruppe -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ wie in Anspruch 1 definiert steht; und R³ für Halo, bevorzugt Chloro, steht.
Verbindung nach Anspruch 3 der Formel (Ic):
oder ein Salz davon, worin eine Gruppe von R¹ und R² für -OCH₂C(O)NH-[A] steht, worin [A] für ein Chelat steht; die andere Gruppe für -O-(CH₂)_2,3-NR⁷R⁸ steht, worin R⁷ und R⁸ unabhängig aus Wasserstoff und C_1-6-Alkyl ausgewählt sind.
Radiomarkierte Verbindung mit einer Verbindung der Formel (I), (Ia), (Ib) oder (Ic) nach einem der Ansprüche 1 bis 4, markiert mit ^99mTc.
Radiopharmazeutische Formulierung mit der Verbindung des Anspruchs 5 und einem oder mehreren pharmazeutisch annehmbaren Hilfsstoffen.
Kit für die Herstellung eines Radiopharmazeutikums mit einer Verbindung der Formel (I), (Ia), (Ib) oder (Ic) nach einem der Ansprüche 1 bis 4.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Verwendung in therapeutischen oder diagnostischen Verfahren.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Verwendung in einer in-vivo-Bildgebung oder Diagnose der Alzheimer-Krankheit, der familiären Alzheimer-Krankheit, des Typ-II-Diabetes, des Down-Syndroms, von Homozygoten für das Apolipoprotein-E4-Allel, der rheumatoiden Arthritis, der systemischen Amyloidosis (primär und sekundär) und des haemorrhagischen Schlaganfalls.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 5 zur Herstellung eines Medikaments für die in-vivo-Bildgebung oder Diagnose der Alzheimer-Krankheit, der familiären Alzheimer-Krankheit, des Typ-II-Diabetes, des Down-Syndroms, von Homozygoten für das Apolipoprotein-E4-Allel, der rheumatoiden Arthritis, der systemischen Amyloidosis (primär und sekundär) und des haemorrhagischen Schlaganfalls.
Verbindung der Formel (II):
worin eine Gruppe von R⁹ und R¹⁰ für -OCR⁴R⁵C(O)OH steht, worin R⁴ und R⁵ wie in Anspruch 1 definiert sind; und die andere Gruppe für -(O)_n-C_1-6-Alkyl-NR⁷R⁸ steht, worin n, R⁷ und R⁸ wie in Anspruch 1 definiert sind; und R³ wie in Anspruch 1 definiert ist.