DE563858T1 - Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen. - Google Patents
Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebender Mikroorganismen.Info
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Claims (11)
1. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebensfähiger Mikroben in einer Probe, gekennzeichnet durch:
Filtrieren einer Lösung der (betreffenden) Probe durch ein hydrophiles Membranfilter zum Einfangen darin
enthaltener lebensfähiger Mikroben auf einer Filtrationsmembran dieses Filters;
Aufsprühen eines flüchtigen Extraktionsreagenz eines Kp unter 120*C auf die Membran zur Extraktion von
mikrobiellem Adenosintriphosphat;
Anschließendes oder gleichzeitiges Einwirkenlassen von Umgebungstemperatur oder erhöhter Temperatur auf
die Membran zur Verdampfung flüssiger Bestandteile; Aufsprühen einer Lösung eines lumineszenzinduzierenden
Reagenz vom Luciferin/Luciferase-Typ auf die Membran zur Induktion von Lumineszenz und
Bestimmen der Lumineszenzmenge unter Verwendung einer für eine solche Messung geeigneten Vorrichtung.
2. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebenfähiger Mikroben nach Anspruch 1, wobei das hydrophile Membranfilter
eine Anzahl kleiner hydrophiler Filtrationsmembranabschnitte, die voneinander durch hydrophobe
gO Trenneinrichtungen praktisch vollständig isoliert sind,
aufweist.
3. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl lebensfähiger Mikroben nach Anspruch 1 oder 2, wobei es sich bei
dem hydrophilen Membranfilter um einen am unteren Ende bzw. Boden eines KunststoffZylinders mit einer hydrophilen
Filtrationsmembran ausgestatteten Filterbecher handelt.
4. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei das hydrophile Membranfilter aus einem Werkstoff, ausgewählt aus der Gruppe hydrophiler Formen von Polytetrafluorethylen,
Poly(vinylidenfluorid), Polycarbonat, Polyamid, Polysulfön, Polyethylen, Polypropylen und Mischungen
und Mischpolymeren hiervon, Acetylcellulose und Nitrocellulose, hergestellt ist.
5. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei das flüchtige Extraktionsreagenz für ATP aus Methanol oder Ethanol besteht.
. ■
6. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei das flüchtige Extraktionsreagenz für ATP aus einem Gemisch aus Methanol oder Ethanol mit 0,1 bis 5 Gew.% Ammoniumhydroxid
besteht.
7. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei das lumineszenzinduzierende Reagenz in 3- bis 6-mal höherer Konzentration als normalerweise verwendet
eingesetzt wird.
8. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei die Membran zur Verdampfung flüssiger Bestandteile einer Temperatur von 40*C bis 70*C ausgesetzt wird.
9. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einem der vorhergehenden Ansprüche,
wobei es sich bei der geeigneten Vorrichtung um ein Biolumineszenz-Bildanalysesystem
handelt.
10. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Zellen nach Anspruch 9, wobei der
Fernsehkamerakopf des Biolumineszenz-Bildanalysesystems entweder sich verjüngende Fasern, eine Photostromver-Stärkungseinheit
und eine Bildröhre oder sich verjüngende Fasern und eine gekühlte CCD-Fernsehkamera umfaßt.
11. Verfahren zur Bestimmung der Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach Anspruch 9 oder 10, wobei das
Biolumineszenz-Bildanalysesystem die Anzahl an lebensfähigen Mikroben nach einer Bildverarbeitung derart
bestimmt, daß nicht von lebensfähigen Mikroben herrührende Hintergrundlumineszenz ausgelöscht und
intensives Licht oberhalb der Schwellenintensität emittierende helle Flecken angezeigt werden.
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