DE4107037C2 - - Google Patents
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Darstellung von zwei-
und dreiwertigem Eisen zur Diagnostik histologischer Schnittpräparate
nach dem Oberbegriff des Anspruches 1.
Ein solches Verfahren ist aus Romeis "Mikroskopische Technik",
1989, 17. neubearbeitete Auflage, herausgegeben von P. Böck -
Urban und Schwarzenberg (München - Wien - Baltimore), Seite
400, bekannt. Dort wird zur Darstellung von zwei- und dreiwertigem
Eisen dreiwertiges Eisen mit Hilfe einer frisch zubereiteten
Ammoniumsulfid-Lösung innerhalb eines Zeitraumes von 1 bis
24 Stunden umgesetzt.
Ein weiteres, ebenfalls in Romeis "Mikroskopische Techniken"
(s. o.), Seite 400, beschriebenes Verfahren geht davon aus, daß
kleine Gewebestücke in ein Gemisch aus 95 ml 70%igem Alkohol und
5 ml Ammoniumsulfid gelegt werden, dann in absoluten Alkohol,
dem einige Tropfen Ammoniumsulfid zugesetzt wurden, kommen.
Diese Lösungen müssen jeweils 24 Stunden einwirken. Bei diesem
bekannten Verfahren ist jeweils ein relativ langer Zeitraum
zum Einwirken der Lösungen erforderlich.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren der eingangs
genannten Art so weiterzuentwickeln, daß in sehr kurzer
Zeit eine sichere Darstellung von zwei- und dreiwertigem Eisen
zur Diagnostik histologischer Schnittpräparate in der Human- und
Tiermedizin erreicht werden kann. Diese Aufgabe wird durch ein
Verfahren mit den Merkmalen im Anspruch 1 gelöst.
Der Vorteil der Erfindung liegt darin, einen Darstellungsweg
zugängig zu machen, der in kürzester Zeit mit handelsüblichen
Chemikalien einen sicheren Eisennachweis in der Histologie
ermöglicht. Durch Einstellung des pH-Bereiches 8,5-8,7 mit
Hilfe verdünnter eisenfreier Schwefelsäure in einer handelsüblichen
Ammoniumpolysulfid-Lösung wird dieses Ziel erfindungsgemäß
innerhalb von 5-10 min erreicht. Weiterhin gewährleistet
dieses pH-Milieu eine besonders schonende Schnittbehandlung, so
daß ein bei herkömmlichen Verfahren beobachtetes "Abschwimmen"
der Schnitte hier nicht in Frage kommt. Ausgestaltungen der
Erfindung sind in den Unteransprüchen gekennzeichnet.
Die Erfindung wird nachstehend an einem Ausführungsbeispiel
erläutert:
Formalin-fixierte, entparaffinierte Schnitte werden aus Aqua
dest. in eine 10%ige Ammoniumpolysulfid-Lösung gegeben. Diese
handelsübliche Sulfid-Lösung wurde zuvor mit 10%iger eisenfreier
Schwefelsäure in den pH-Bereich 8,5-8,7 gebracht. Die fertige
Gebrauchslösung muß folgendermaßen zubereitet werden: 10 ml
einer 7%igen Ammoniumpolysulfid-Lösung werden mit 90 ml Aqua
dest. verdünnt. Durch Zugabe von ca. 5 ml einer 10%igen Schwefelsäure
wird der notwendige pH-Bereich eingestellt. Eine Überprüfung
kann mit kommerziellem Indikatorpapier vorgenommen werden.
Bei auftretenden Abweichungen wird gegebenenfalls weitere
verdünnte Schwefelsäure (pH oberhalb 9) oder Ammoniumpolysulfid-Lösung
(pH unterhalb 8) tropfenweise hinzugegeben. Die Arbeitslösung
ist mehrfach verwendbar, sollte aber im Kühlschrank
aufbewahrt werden.
Die entparaffinierten und mit Wasser gespülten Schnitte müssen
5-10 min mit dieser Lösung behandelt werden. Anschließend wird
wiederum gründlich mit Aqua dest. gespült. Danach werden die
Schnitte nach bekannter Vorschrift 10 min in einer frisch hergestellten
Mischung von gleichen Teilen einer 20%igen wäßrigen Kaliumferrizyanid-Lösung
und einer 1%igen Salzsäure eingestellt,
mit Aqua dest. gewaschen, die Kerne gegengefärbt (z. B. mit
Kernechtrot oder Parakarmin), nochmals mit Wasser gespült, entwässert
und zum Schluß über Xylol in Balsam eingebettet (vergleiche
Romeis, 1989, Seite 400: "Turnbulls Blau"). Die Untersuchung
der derart präparierten Schnitte erfolgt dann mit Hilfe
der konventionellen Lichtmikroskopie.
Claims (3)
1. Verfahren zur Darstellung von zwei- und dreiwertigem Eisen
zur Diagnostik histologischer Schnittpräparate, bei dem in
entparaffinierten Schnitten eine Reduktion von dreiwertigem
Eisen zu Eisen-II mit Hilfe einer Ammoniumsulfid-Lösung und
der Nachweis des Eisen-II nach bekannten Methoden erfolgt,
dadurch gekennzeichnet,
daß die Ammoniumsulfid-Lösung mit verdünnter eisenfreier
Schwefelsäure auf einen pH-Wert von 8,5 bis 8,7 eingestellt
ist.
2. Verfahren nach Anspruch 1,
dadurch gekennzeichnet,
daß eine 10%ige Ammoniumpolysulfid-Lösung verwendet wird.
3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2,
dadurch gekennzeichnet,
daß zum Nachweis von zweiwertigem Eisen eine Kaliumferrizyanid-Lösung
verwendet wird.
Priority Applications (1)
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Applications Claiming Priority (1)
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Publications (2)
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| DE4107037A1 DE4107037A1 (de) | 1992-09-03 |
| DE4107037C2 true DE4107037C2 (de) | 1993-04-01 |
Family
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| DE19914107037 Granted DE4107037A1 (de) | 1991-03-01 | 1991-03-01 | Verfahren zur darstellung von zwei- und dreiwertigem eisen zur diagnostik histologischer schnittpraeparate |
Country Status (1)
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Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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-
1991
- 1991-03-01 DE DE19914107037 patent/DE4107037A1/de active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE4107037A1 (de) | 1992-09-03 |
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