DE2944019C2 - Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten - Google Patents
Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von MikroobjektenInfo
- Publication number
- DE2944019C2 DE2944019C2 DE19792944019 DE2944019A DE2944019C2 DE 2944019 C2 DE2944019 C2 DE 2944019C2 DE 19792944019 DE19792944019 DE 19792944019 DE 2944019 A DE2944019 A DE 2944019A DE 2944019 C2 DE2944019 C2 DE 2944019C2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- micro
- radiation
- luminescence
- objects
- wave component
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 title claims description 119
- 238000011835 investigation Methods 0.000 title claims description 6
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 115
- 230000005284 excitation Effects 0.000 claims description 20
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 11
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims description 4
- 230000004907 flux Effects 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 24
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 17
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 8
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 8
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 239000003990 capacitor Substances 0.000 description 5
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 5
- 241000192700 Cyanobacteria Species 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 4
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 4
- 238000001748 luminescence spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 230000005236 sound signal Effects 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N acridine Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3N=C21 DZBUGLKDJFMEHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 102000003983 Flavoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010057573 Flavoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009118 appropriate response Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 201000000053 blastoma Diseases 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000002380 cytological effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 201000008184 embryoma Diseases 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- XTLNYNMNUCLWEZ-UHFFFAOYSA-N ethanol;propan-2-one Chemical compound CCO.CC(C)=O XTLNYNMNUCLWEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000013081 microcrystal Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/18—Arrangements with more than one light path, e.g. for comparing two specimens
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/16—Microscopes adapted for ultraviolet illumination ; Fluorescence microscopes
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Description
Die Erfindung bezieht sich auf eine Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten
gemäß dem Oberbegriff des Patentanspruches 1.
Die Erfindung kann bei wissenschaftlichen und angewandten
Untersuchungen in der Biologie, Chemie, Physik und Medizin, insbesondere auf den Gebieten der
Onkologie, der Hämatologie, der Immunologie, der Toxikologie, der Epidemiologie sowie bei Kontrolluntersuchungen
der Wirksamkeit von Arzneimitteln, in der Mikrobiologie und der mikrobiologischen Industrie, beim
Umweltschutz, bei Analysen und Pulvern von Mikrokristallen benutzt werden.
Es ist bekannt, Mikrospektrofluorimeter zur Registrierung
und Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten zu verwenden. (VergL-iche
z. B. Olson R. A. »Rapid Scanning microspektrofluorimeter«,
Rev. Sei. Instrum, v. 31, p. 844, 1960.) Diese Mikrospektrofluorimeter
enthalten ein Lumineszenzmikroskop, auf dessen Objekttisch ein Mikroobjekt angeordnet
ist, sowie einen Monochromator, auf dessen Eingargsspalt
eine vom Lumineszenzmikroskop vergrößerte Lumineszenzabbildung des Mikroobjekts projiziert
wird. Hinter dem Ausgangsspalt des Monochromator befindet sich im Wege der Mikroobjekt-Lunineszenzstrahlung
ein als Fotovervielfacher ausgeführter Lichtempfänger, der das Lichtsignal in elektrischen
Strom umwandelt, welcher dem Eingang eines Linienschreibers zugeführt wird. Bei Einschaltung der Ablenkvorrichtung
des Monochromators wird mit Hilfe des Linienschreibers das Lumineszenzspektrum des im Gesichtsfelds
des Mikroskops liegenden Mikroobjekts registriert Das Lumineszenzspektrum jedes Mikroobjekts
weist in der Reg/J ausreichend kennzeichnende Merkmale auf. Dieses Spektrum kann man dazu benutzen,
unter einer Vielzahl von Mikroobjekten solche zu finden, die sich durch ihre Spektralkennwerte, und folglich
durch ihre physikalischen und chemischen Eigenschaften von allen übrigen Mikroobjekten unterscheiden.
Bei Beginn eines bestimmten Vorganges, dessen frühes Entwicklungsstadium man erkennen will, ist die
Zahl von veränderten Mirkoobjekten gegenüber der Gesamtzahl von Mikroobjekten im Präparat sehr gering
und verhält sich zu dieser Gesamtzahl etwa 1 :1000 oder 1 :10 000. Die verhältnismäßig lange Dauer der
Registrierung und der Analyse von Li"T>ineszenzspektren
jedes Mikroobjekts im Präparat und die sich ergebende Notwendigkeit, die Lumineszenzspektren von
Hunderten und Tausenden von Mikroobjekten zu registrieren und zu analysieren, ehe ein verändertes Mikroobjekt
gefunden wird, erfordern für diese Suche eines veränderten Mikroobjekts bei Benutzung des vorstehend
beschriebenen Mikrospektrofluorimeters einen hohen Zeitaufwand.
Ferner sind zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten Einrichtungen bekannt,
bei denen Mikroobjekte durch geeignete Bestrahlung zur Lumineszenz angeregt, die Lumineszenzstrahlung
in Abhängigkeit ihrer Wellenlänge in getrennten Kanälen erfaßt und aus der Verteilung dieser Lumineszenzstrahlung
auf gewisse Eigenschaften der untersuchten Mikroobjekte geschlossen wird (vgl. DE-OS 27 09 399).
Eine ähnliche bekannte Einrichtung (Papajan G. W., Joffe W. A., Winogradowa W. N., Barski I. J. »Zweistrahl-Impuls-Mikrospektrofluorimeter
mit Ziffernablesung«, Zytologie, Band 16, Nr. 3, Seiten 355 bis 357,
1974) umfaßt ein Lumineszenzmikroskop, auf dessen Objekttisch ein Mikroobjekt angeordnet ist, das unter
der Einwirkung der Strahlung einer Anregungsstrahlungsquelle luminesziert. Im Wege der Lumineszenzstrahlung
ist eine Lichtzerlegungsplatte mit einem Interferenzbelag angeordnet. Diese mit dem Intcrlcrcnzbelag
überzogene Lichtzerlegungsplattc reflektiert die kurzwellige Komponente der Mikroobjekt-Lumincszenzstrahlung
zu einem Kanal für die Registrierung der
kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung und läßt die langwellige Komponente der
Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung zu einem anderen, zur Registrierung dieser Komponente vorgesehenen
Kanal hindurch. Jeder dieser Kanäle enthält im Wege der Lumineszenzstrahlung ein entsprechendes Lichtfilter,
das die Strahlung in einem schmalen Spektralbereich durchläßt, sowie einen Fotovervielfacher, an dessen
Ausgang tin elektronischer Verstärker angeschlossen ist. Die Ausgänge der elektronischen Verstärker der
Kanäle sind an ein Digitalvoltmeter angeschlossen, mit dessen Hilfe das Verhältnis der Intensität der Mikroobjekt-Lumineszenz
in zwei vorher gewählten charakteristischen Wellenlängenintervallen des Lumineszenzspektrums
gemessen wird. Als charakteristische Intervalle der Längenweilen des Lumineszenzspektrums gelten
solche Intervalle, in denen eine Änderung der Lumineszenzintensität auf eine Änderung biologischer oder
physikalisch-chemischer Eigenschaften des Mikroobjekts hinweist. Die für die Mikroobjektanalyse mit dieser
Einrichtung erforderliche Zeit beträgt einige Stunden, da die Lumineszenzkennwerte von Hunderten und
Tausenden von Mikroobjekten des zu untersuchenden Präparates registriert und miteinander verglichen werden
müssen, ehe ein Mikroobjekt gefunden wird, das sich durch seine Lumineszenzkennwerte von den anderen
unterscheidet und visuell sowie mit Hilfe von Geräten näher untersucht werden soll.
Aus der US-PS 41 22 348 ist schließlich eine Einrichtung
zur Klassifizierung biologischer Zellen bekannt, bei der die von den Zellen nach einer Bestrahlung mit
polarisiertem Licht emittierte Lumineszenzstrahlung hinsichtlich ihres Polarisationszustandes in zwei getrennten
Kanälen mit Fotovervielfacher gemessen und registriert wird. Das Ausgangssigna! des Registriersystems
wird dabei zur Steuerung zweier den Objekttisch antreibenden Elektromotoren rückgekoppelt Diese
Rückkopplung beinhaltet eine Summenschaltung für die Signale der beiden Registrierkanäle und bewirkt eine
Selektionsverschiebung des Objekttisches. Dabei wird jede Zelle bezüglich des Objektivs zentriert und Messungen
der Parameter der Zellen durchgefünrt. Die Bedienungsperson gewinnt die Kenntnis von der Pathologie
einer bestimmten Zelle allein dadurch, daß diese die Parameterwerte jeder im Präparat vorhandenen mit bestimmten
Parameterwerten vergleicht. Hierzu ist jedoch ein hoher Zeitaufwand erforderlich.
Es ist somit Aufgabe der Erfindung, eine Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von
Mikrcobjekten zu schaffen, die zu einer wesentlichen Verringerung des Zeitaufwandes für die Erkennung eines
veränderten Mikroobjekts beiträgt, das näher untersucht werden soll.
Diese Aufgabe wird bei einer Einrichtung der oben genannten Gattung durch die kennzeichnenden Merkmale
des Patentanspruchs 1 gelöst.
Vorteilhafte Weiterbildungen und Ausgestaltungen der erfindungsgemäßen Einrichtung sind Gegenstand
der Patentansprüche 2 bis 4.
Durch die Erfindung ist die Möglichkeit gegeben, einzelnes verändertes und näher zu untersuchendes Mikroobjekt
unter Hunderten und Tausenden von anderen nicht veränderten Mikroobjekten des Präparates bedeutend
schneller zu erkennen, da die Bewegung des Objekttisches nur dünn stillgesetzt wird, wenn eine paihalogische
Zelle mit e'nem Parameter erscheint, der über einen vorgegebenen Grenzwert hinausgeht. Die
vorgeschlagene Einrichtung weist außerdem verhältnismäßig kleine Abmessungen und ein geringes Gewicht
auf. Außerdem zeichnet sie sich durch niedrige Herst;llungs-
und Betriebskosten aus.
Die Ausgestaltung gemäß Anspruch 2 ermöglicht eine tragbare Einrichtung zu schaffen.
Die Ausgestaltung gemäß Anspruch 3 dient der leichteren Umstellung der Einrichtung zur Untersuchung
verschiedenartiger Mikroobjekte in einem weiten Bereich. Durch die Ausgestaltung gemäß Anspruch 4 kann
die Bedienung der Einrichtung vereinfacht werden.
Die Erfindung wird im folgenden anhand der Zeichnungen näher erläutert Es zeigt
F i g. 1 die Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften
von Mikroobjekten im Blockschaltbild;
F i g. 2 ein Funktionsschaltbild der Einheit zur Erfassung
des Verhältnisses der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
und des Diskriminators für die Größe des gebildeten Verhältnisses;
F i g. 3 ein Funktionsschaltbild ei,:, r anderen Ausführungsform
der Einheit zur Erfassung des Verhältnisses der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
und des Diskriminators für die Größe diesem gebildeten Verhältnisses;
Fig \ ein anderes Ausführungsbeispiel der Einrichtung
zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten;
Fig.5 Bewegungsbahnen des auf dem Schirm der
Elektronenstrahlröhre abgebildeten Leuchtflecks bei einer normalen veränderten Zelle (ausgezogene Linie)
und einer Krebszelle (Strichlinie).
Die vorgeschlagene Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten ist
mit einem Lumineszenzmikroskop 1 (Fi g. 1) ausgcstattet.
Das Lumineszenzmikroskop 1 besteht aus einer Anregungsstrahiungsqueiie 2, in dessen Strahiungsgang
nacheinander eine Kollektorlinse 3 zur Sammlung der Strahlung der Anregungsquelle 2, einen schmälet. Strahlungsbereich
bestimmendes Lichtfilter 4, eine Feldblende 5 zur Begrenzung des Gesichtsfeldes des Mikroskops
1 sowie eine Lichtzerlegungsplatte 6 mit einem Interferenzbelag angeordnet sind. Im Wege der an der Oberfläche
der Lichtzerlegungsplatte 6 reflektieren Strahlung befinden sich ein Mikroskopobjek»'v 7 und ein Mikroobjekt
8, das in dem auf dem Objekttisch 9 des Mikroskops 1 befestigten Präparat enthalten ist. Das Mikroskopobjektiv
7 dient zur Konzentration der die Lumineszenz anregenden Strahlung auf dem Mikroobjekt
8 und zur Sammlung der Lumineszenzstrahlung dieses Mikroobjekts 8. Im Strahlengang der Lumineszenzstrahlung
des Mikroobjekts 8, die unter Einwirkung cVr Strahlung der Anregungsspule 2 entsteht, befindet sich
h'nte. der Lichtzerlegungsplatte 6 in Richtung der Lumineszenzstrahlung
ein Spiegel 10. Im Strahlengang der an der Oberfläche aes Spiegels 10 reflektieren Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
liegt ein Okular 11, das eine vergrößerte Lumineszenzabbildung des Mikroobjekts 8 erzeugt, v/obei die Maße dieser Abbildung durch
die Abmessungen der Feldblende 5 bestimmt werden.
Im Strahlengang ist zwischen dem Okular U und dem Auge des Forschers ein Lichtfilter 12 angeordnet, das
die vom Lichtfilter 4 durchgelassene und am Mikroobjekt reflektierte Strahlung der Anregungsquelle 2 zurückhält.
Bei Herarsführung des Spiegels 10 aus dem Strahlengang der Lumineszenzstrahlung liegt im Wege
der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 eine mit Interferenzbelag versehene Lichtzerlegungsplatie 13,
die die kurzwellige Komponente der Mikroobjekt-Lu-
mineszenzstrahlung zum einein als Detektoreinheit ausgebildeten
Kanal 14 für die Registrierung der kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszcnzstrahlung
reflektiert und die langwellige Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 zu einem als
Detektoreinheit ausgebildeten Kanal 15 für die Registrierung der langwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
hindurchläßt. Der für die_ Registrierung der kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
bestimmte Kanal 14 enthält im Strahlengang der von der Oberfläche der
Lichtzerlegungsplatte 13 reflektierten Lumineszenzstrahiunfj
des Mikroobjekts 8 hintereinander ein schmalbandiges Lichtfilter 16 und einen Fotovervielfacher
17. dessen Ausgang mit dem Eingang eines Regelverstärkers 18 verbunden ist. In dem zur Registrierung
der langwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung bestimmten Kanal 15 liegen im Strahiciigaiigcuei
LumineszenzM! ahiurigues fviikroobjektsS
ebenfalls ein schmalbandiges Lichtfilter 19 und dahinter ein Fotovervielfacher 20, dessen Ausgang mit dem Eingang
eines Regelverstärkers 21 verbunden ist.
Die Ausgänge der Verstärker 18 und 21, die zu den für die Registrierung der entsprechenden Komponenten
der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung vorgesehenen
Kanälen 14 und 15 gehören, sind mit den Eingängen einer Divisionseinheit 22 zur Erfassung des Verhältnisses
der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung verbunden. Der Ausgang dieser Divisionseinheit
22 liegt am Eingang eines Diskriminators 23 für die Größe dieses gebildeten Verhältnisses an. Das Ausgangssignal
dieses Diskriminators 23 trägt die Information über das Vorhandensein eines veränderten Mikroobjekts
in dem von der Feldblende 5 begrenzten Gesichtsfeld des Lumineszenzmikroskops 1. Der Ausgang
des Diskriminators 23 ist mit dem Eingang einer Steuereinheit 24 verbunden. Am Aus^sp.*1 dieser Steuereinheit
24 liegt ein Elektromotor 25, der mit dem Objekttisch 9 des Lumineszenzmikroskops 1 mechanisch verbunden
ist.
Die Divisionseinheit 22 zur Erfassung des Verhältnisses der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
stellt eine Elektronenstrahlröhre 26 (Fig. 2) dar, bei der die Horizo'iUlablenkplatten 27 mit dem
Ausgang des Verstärkers 18 im Kanal 14 zur Registrierung der kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
und die Vertikalablenkplatten 28 mit dem Ausgang des Verstärkers 21 im Kanal 15 zur
Registrierung der langwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung verbunden sind. Der
Diskriminator 23 isi als Fotodetektor 29 ausgeführt, der
am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 mit Hilfe einer schmalen Platte 31 befestigt ist, wobei die letztere
einen Längsschlitz 32 zur Verschiebung des Fotodetektors 29 entlang dieser Platte 31 aufweist. Die Platte 31 ist
an einer Achse 33 befestigt und kann um diese Achse 33 mitsamt dem Fotodetektor 29 parallel zum Schirm 30
der Elektronenstrahlröhre 26 geschwenkt werden. Die auf diese Weise mit Hilfe der Bauelemente 29,30,31,32,
33 ausgeführte Polarkoordinaten-Vorrichtung ermöglicht, daß der Fotodetektor 29 an einem beliebigen vorher
gewählten Punkt des Schirmes 30 der Elektronenstrahlröhre 26 festgelegt werden kann. Die Lumineszenzstrahlung
des Mikroobjekts 8 (Fig. 1) ist amplitudenmoduliert, da die Anregungsstrahiungsqueile 2 eine
Quelle mit amplitudenmodulierter Strahlung darstellt, wobei die Modulation mittels entsprechender Speisung
der Anregungsstrahlungsquelle 2 mit Wechselstrom erfolgt.
Die Modulation der die Lumineszenzerregung bewirkenden
Strahlung kann auch mit Hilfe einer mechanischen Verschlußblende erfolgen, die im Strahlengang
der Lumineszenzerregungsstrahlung zwischen der Anregungsquelle 2 und der Lichtzerlegungsp'atte 6 eingebaut
wird, wobei die Anregungsstrahlungsquelle 2 mit
_ Gleichstrom gespeist wird.
Infolge der Amplitudenmodulation der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 wird jedes Mikroobjekt
am Schirm 30 (F i g. 2) der Elektronenstrahlröhre 26 als leuchtende Linie 34 dargestellt, deren auf die Horizontalachse
bezogener Neigungswir keltangens der Größe des Verhältnisses der langwellige η Komponente der Lumineszenzstrahlung
des Mikrocbjekts 8 zur kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszen/strahlung
proportional ist. Die Mikroobjektc 8. die sich voneinander durch die Größe des Verhältnisses der langweiligen
Komponente der Lumineszenzstrahlung zur kurzwelligen Komponente unterscheiden, werden als
leuchtende Linien 34, 34', 34" mit verschiedenen Neigungswinkeln zur Horizontalachsc dargestellt. Deswegen
bestimmt der Befestigungspunkt des Fotodetektor 29 am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 die Grenze
der Lokalisation eines veränderten Mikroobjekts 8 beim Queren dieses Punktes durch die leuchtende Linie
34.
Das M.xroobjekt kann auf dem Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre
durch eine leuchtende Linie 34 auch in dem Falle dargestellt werden, wenn die Lumineszenzstrahlung
des Mikrcobjekts 8 nicht in der Amplitude moduliert wird. In diesem Falle, d. h. wenn zur Erzeugung
der Lumineszenz des Mikroobjekts 8 eine nichtmodulierte Strahlung benutzt wird, kann die leuchtende
Linie 34 auf dem Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 mittels der Modulation von Verstärkungsfaktoren
der Verstärker IS und 2! oder der Fotovervielfacher 17
und 20 erzeugt werden.
Eine Vereinfachung der Bedienung der Einrichtung kann bei einer anderen Ausführungsvariante des Diskriminators
23 erreicht werden. Bei dieser Variante enthält der Diskriminator 23 einen Fotodetektor 35 (Fig. 3).
der im Strahlengang des vom Schirm 30 der Elektronenröhre 26 emittierten Lichtstromes angeordnet wird, sowie
eine am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 angeordnete Maske 36, die aus einem im Bereich der
Spektralempfindlichkeit des Fotodetektors 35 undurchlässigen Werkstoff gefertigt wird. Bei einer derartigen
Ausführung des Diskriminators 23 wird die Anregungsstrahlungsquelle2(Fig.
l)des LumineszenzmikroslOps 1 mit Gleichstrom gespeist (die Gleichstromquelle ist in
der Zeichnung nicht gezeigt). Dabei wird jeder Mikroobjekt 8 am Schirm 30 (F i g. 3) der Elektronenstrahlröhre
26 als Leuchtfleck 37 dargestellt, dessen Koordinaten
durch das Verhältnis der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
bestimmt werden. Die sich durch dieses Verhältnis unterscheidenden Mikroobjekte 8 werden als Leuchtflecke 37,37', 37" abgebildet, die
an verschiedenen Stellen des Schirmes 30 der Elektronenstrahlröhre
26 liegen. Die Grenzen der Maske 36 bestimmten dabei die Lokalisationsgrenze der veränderten
Mikroobjekte.
Die Steuereinheit 24 (F i g. 4), die bei der Einrichtung zur Untersuchung der Lumineszenzeigenschaften von
Mikroobjckten benutzt wird, enthält einen für elektrische
Signale bestimmten Regelverstärker 38 mit einem einstellbaren Verstärkungsfaktor, dessen Eingang an
den Ausgang des Diskriminators 23 angeschlossen ist
Der Ausgang des elektrischen Signalverstärkers 38 ist
mit dem invertierenden Eingang eines Schmitt-Triggers 39 verbunden.
In der Einrichtung wird eine allgemein bekannte Schaltungsvariante des Schmitt-Triggers 39 benutzt
(vgl. z. B. Analog integrated circuits. Devices circuits. Systems and Applications. S. A. Corielley (Ed.) John Wiley
and Sons Publ., New-York — London — Sydney —
Toronto, 1975).
Der nichtinvertierende Eingang des Schmitt-Triggers 39 ist über einen Widerstand 40 mit seinem Ausgang
und über einen anderen Widerstand 41 mit dem Schleifer 42 eines Potentiometers 43 verbunden, das an den
Minuspol 44 und an den Pluspol 45 einer nicht gezeigten Speisequelle des Schmitt-Triggers 39 angeschlossen ist.
Der Schleifer 42 wird mit dem Minuspol 44 der nicht gezeigten Speisequelle über einen normal geöffneten
Stopknopf 46 und mit dem Pluspo! 45 dieser Speisequel-Ie über einen normal offenen Startknopf 47 verbunden.
Parallel zum Knopf 47 liegt ein Ausschalter 48.
Der Ausgang des Schmitt-Triggers 39 ist über eine Diode 49 an parallel zusammengeschaltete elektronische
Schalter 50 und 51 angeschlossen, deren miteinander verbundene Ausgänge an den Elektromotor 25 geschaltet
sind. Parallel zur Diode 49 ist ein Kondensator
52 angeschlossen. Der Ausgang der Diode 49 ist mit der gemeinsamen Schiene einer nicht gezeigten Speisequelle
des Schmitt-Triggers 39 über einen Regelwiderstand
53 verbunden. Der Ausgang der Schalter 50 und 51 steht über eine Diude 54 mit einem Tongenerator 55 und
einem Kondensator 56 in Verbindung, über den die Speisung des Tongenerators 55 erfolgt.
Zur Ermittlung des Verhältnisses der veränderten Mikroobjekte zur Gesamtzahl der Mikroobjekte im untersuchten
Präparat enthält die Einrichtung einen Impulszähler 57, der über einen Ausschalter 58 an den Ausgang
des Verstärkers 2i des Kanais i5 zur Registrierung der
langwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung angeschlossen ist, sowie einen Impulszähler 59, der über
einen Ausschalter 60 an den Ausgang des Verstärkers 18 des Kanals 14 zur Registrierung der kurzwelligen
Komponente der Lumineszenzstrahlung geschaltet ist, und einen Impulszähler 61, der über einen Ausschalter
62 mit dem Ausgang des Diskriminators 23 verbunden ist. Zur Ermittlung einer allgemeinen statistischen Charakteristik
aller Mikroobjekte des Präparats enthält die Einrichtung einen Impulsamplitudenanalysator 63 und
einen mit diesem in Reihe liegenden elektronischen Signalteiler 64, deren Eingänge über einen zweipoligen
Ausschalter 65 an die Ausgänge der Verstärker 18 und 21 der zur Registrierung der entsprechenden kurzwelligen
bzw. langwelligen Komponenten der Lumineszenzstrahlung von Mikroobjekten bestimmten Kanäle 14
und 15 angeschlossen sind. Der elektronische Signalteiler 64 ist nach der bekannten Schaltungsvariante ausgeführt,
die im Buch »Analoge und digitale integrierte Schaltungen«, red. von S.W. Jakubowski, S.239, 240,
Verlag »Sowetskoje Radio«, Moskau, 1979, angeführt ist.
Die Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten funktioniert folgendermaßen:
Ein das Mikroobjekt 8 (F i g. 1) enthaltendes Präparat
wird auf dem Objekttisch 9 des Lumineszenzmikroskops ί angeordnet Die von der Koüektoriinse 3 gesammelte
und vom Lichtfilter 4 durchgelassene Strahlung der Anregungsquelle 2 gelangt auf die mit einem
Interferenzbelag versehene Lichtzerlegungsplatte 6, die diese Anregungsstrahlung unter einem Winkel von 90°
zum Mikroskopobjektiv 7 ref'kiiert, das die Anregungsstrahlung
auf die Ebene des Präparats mit den Mikroobjekten 8 fokussiert, bei welchen unter Einwirkung
der Anregungsstrahlung der Quelle 2 die Lumineszenz hervorgerufen wird. Die Lumineszenzstrahlung
der Mikroobjekte 8 wird vom Mikroobjektiv 7 gesammelt, von der mit einem Interferenzbelag überzogenen
Lichtzerlegungsplatte 6 durchgelassen, vom Spiegel 10
ίο reflektiert und erzeugt so ein Bild der Mikroobjekte 8 in
ihrem Lumineszenzlicht. Dieses Lumineszenzbild der Mikroobjekte 8 wird von der Bedienungsperson mit
Hilfe des Okulars 11 und des Lichtfilters 12 betrachtet, welches die Strahlung der Quelle 2 absorbiert. Bei der
Betrachtung der Lumineszenzabbildung der im Präparat enthaltenen Mikroobjekte 8 durch das Okular 11
verändert die Bedienungsperson die Abmessungen der Feldblende 5 des Mikroskops 1 in der Weise, daß das
Gesichtsfeld des Mikroskops 1 gleich einem einzelnen lumineszierenden Mikroobjekt 8 im Präparat oder um
einige Male größer wird. Darauf verschiebt die Bedienungsperson den Spiegel 10 aus dem Strahlengang der
Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8, wobei diese Strahlung auf die Lichtzerlegungsplatte 13 mit Interferenzbelag
fällt, die die Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 in zwei Komponenten zerlegt. Die kurzwellige
Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 wird von der Lichtzerlegungsplatte 13 reflektiert,
durchdringt das Lichtfilter 16 und gelangt zur Fotokatode des Fotovervielfachers 17, der diese kurzwellige
Komponente der Mikroobjektstrahlung in ein zur Intensität der Komponente proportionales elektrisches
Signal umwandelt. Das Ausgangssignal des Fotovervielfachers 17 wird vom Verstärker 18 verstärkt und
einem der Eingänge der zur Erfassung der Komponenten der Lumineszenzstrahlung vorgesehenen Divisionseinheit
22 zugeführt. Die langwellige Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 durchdringt
ungehindert die mit einem Interferenzbelag überzogene Lichtzerlegungsplatte 13, passiert das Lichtfilter 19 und
fällt auf die Fotokatode des Fotovervielfachers 20, der diese langwellige Komponente der Lumineszenzstrahlung
des Mikroobjekts 8 in ein zur Intensität der Komponente proportionales elektrisches Signal umformt.
Das Ausgangssignal des Fotovervielfachers 20 wird vom Verstärker 21 verstärkt und gelangt zum zweiten
Eingang der zur Erfassung der Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung bestimmten Divisionseinheit
22, die als Elektronenstrahlröhre 26 (F i g. 2,
3) ausgeführt ist.
Den Horizontalablenkplatten 27 der Divisionseinheit 22 wird das Signal vom Ausgang des zum Kanal 14 für
die Registrierung der kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung gehörenden Verstärkers
18 zugeführt Auf die Vertikalablenkplatten der Divisionseinheit 22 wird das Signal vom Ausgang des
Verstärkers 21 vom Kanal 15 zugeführt der für die Registrierung der langwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung
vorgesehen ist. Infolgedessen wird der Elektronenstrahl von seiner Anfangslage am Schirm 30
der Elektronenstrahlröhre 26 zu einem Punkt abgelenkt, bei dem das Verhältnis seiner Vertikalkoordinate zu seiner
Horizontalkoordinate dem Verhältnis der Intensität der langwelligen Komponente der Lumineszenzstrah-
iung des Mikroobjekts 8 zur Intensität der kurzweiligen Komponente der Lumineszenzstrahlung dieses Mikroobjekts
8 proportional ist
Bei einer der Ausführungsvarianten der Einrichtung
zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten wird im Lumineszenzmikroskop 1 eine
amplitudenmodulierte Anregungsstrahlungsquelle 2 benutzt, die mit Wechselstrom gespeist wird. Infolgedessen
bewegt sich der Elektronenstrahl (F i g. 2) mit der Modulationsfrequenz zwischen seinem Anfangspunkt
(Nullpunkt) und einem Punkt, bei dem die Horizontalkoordinate der L jrzwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung
und die Vertikalkoordinate der langwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts
8 proportional sind, wobei am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 eine leuchtende Linie 34 entsteht,
deren Neigungswinkeltangens dem Verhältnis der langwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung
zur kurzwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 proportional ist. Bei Einschaltung
des Elektromotors 25 (F i g. 1), der die horizontale Verschiebung des Objekttisches 9 im Lumineszenzmikroskop
1 bewirkt, erscheinen im GpsirhKfek! des Lumineszenzmikroskops
1 abwechselnd die Mikroobjekte 8, wobei jedem dieser Mikroobjekte am Schirm 30 der
Elektronenstrahlröhre 26 eine leuchtende Linie 34, 34', 34" (F i g. 2) entspricht. Wenn im Gesichtsfeld des Lumineszenzmikroskops
1 ein Mikroobjekt 8 erscheint, bei dem der Wert des Verhältnisses der langwelligen Komponente
der Lumineszenzstrahlung zur kurzwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung größer als der
durch den Anordnungspunkt des Fotodetektors 29 am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 festgelegte
Wert ist, schneidet die diesem Mikroobjekt 8 entsprechende leuchtende Linie 34 die Anordnungsstelle des
Fotodetektors 29, wobei an seinem Ausgang ein elektrisches Signal entsteht, welches das Ansprechen der
Steuereinheit 24 (Fig. 1) bewirkt. Die letztere bringt den Elektromotor 25 zum Stehen, so daß das erkannte
Mikroobjekt 8 im Mittelpunkt des Gesichtsfeldes des Lumineszenzmikroskops 1 bleibt. Gleichzeitig gibt die
Steuereinheit 24 der Bedienungsperson ein Tonsignal, welches die Erkennung des veränderten Mikroobjekts 8
signalisiert, dessen Lumineszenzkenndaten näher zu untersuchen sind. Nach durchgeführter Untersuchung der
Lumineszenzkennwerie de« erkannten Mikroobjekts 8
schaltet die Bedienungsperson den Elektromotor 25 wieder ein und setzt den Suchvorgang fort.
Durch VeiSchiebung des Fotodetektors 29 (Fig. 2)
entlang des in der Platte 31 vorgesehenen Schlitzes 32 und durch Drehung dieser Platte 31 um die Achse 33
stellt die Bedienungsperson den Fotodetektor 29 in einem beliebigen vorher gewählten Punkt des Schirmes
30 der Elektronenstrahlröhre 26 ein und gibt dadurch die Grenze der Lokalisation veränderter Mikroobjekte
vor.
In einer anderen Ausführungsvariante der Einrichtung zur Untersuchung der Lumineszenzeigenschaften
von Mikroobjekten wird im Lumineszenzmikroskop 1 eine Anregungsstrahlungsquelle 2 (Fig. 1) benutzt, die
mit Gleichstrom gespeist wird. Somit entspricht jedem im Gesichtsfeld des Lumineszenzmikroskops 1 erscheinenden
Mikroobjekt 8 bei eingeschaltetem Elektromotor 25 des Objekttisches 9 ein am Schirm 30 (F i g. 3) der
Elektronenstrahlröhre 26 entstehender Leuchtfleck 37, bei dem seine Horizontalkoordinate der kurzwelligen
Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts 8 und seine Vertikalkomponente der langwelligen
Komponente seiner Lumineszenzstrahlung proportional sind.
Bei dieser Variante der Einrichtung funktioniert der Diskriminator 23 folgendermaßen:
Bei eingeschaltetem Elektromotor 25 (Fig. I) des Objekitisches 9 üischeinen im Gesichtsfeld des Lumineszenzmikroskops
1 nacheinander die Mikroobjekte 8, wobei jedem dieber Mikroobjekte 8 ein am Schirm 30
der Elektronenstrahlröhre 26 entstehender Leuchtfleck 37, 37' bzw. 37" (Fig. 3) entspricht. Wenn im Gesichtsfeld
des Lumineszenzmikroskops 1 ein Mikroobjekt 3 erscheint, bei dem der Wert des Verhältnisses der langwelligen
Komponente der Lumineszenzstrahlung zur
ίο kurzwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung
größer als der durch die Konfiguration der Maske 36 gegebene Wert ist, erscheint der Leuchtflcck 37 in dem
Teil des Schirmes 30 der Elektronenstrahlröhre 26, der durch die Maske 36 nicht verdeckt ist, wobei der
Leuchtfleck 37 vom fotoelektrischen Geber 35 registriert wird, an dessen Ausgang ein elektrisches Signal
entsteht, welches dem Eingang der Steuereinheit 24 (Fig. 1) zugeführt wird. Durch Änderung der Konfiguration
r\r*r 2^y; Schirm 30 *i~r Elektronenstrahlröhre 2fc
angeordneten Maske 36 gibt die Bedienungsperson eine beliebige Grenze der Lokalisation veränderter Mikroobjekte
8 vor.
Die Steuereinheit 24 funktioniert wie folgt:
Beim Schließen des Kontaktes des Startknopfes 47 (Fig.4) wird dem nichtinvertierenden Eingang des
Schmitt-Triggers 39 über einen Widerstand 41 eine positive Spannung zugeführt, wobei am Ausgang des
Schmitt-Triggers 39 eine positive Spannung erscheint, die über die Diode 49 zum Eingang der parallel zusammengeschalteten
elektronischen Schalter 50 und 51 gelangt. Hierbei wird der elektronische Schalter 50 leitend
und schließt den vom positiven Pol der Speisequellc führenden Speisestromkreis des Elektromotors 25. Der
Elektromotor 25 verschiebt den Objekttisch des Lumineszenzmikroskops 1. Beim Erscheinen eines veränderten
Mikroobjekts 8 im Gesichtsfeld des Lumineszenzmikroskops 1 entsteht am Ausgang des Diskriminators
23 ein elektrisches Signal, das nach seiner Verstärkung im Verstärker 38 dem invertierenden Eingang des
Schmitt-Triggers 39 zugeführt wird und in diesem einen Zustand herstellt, bei dem am Ausgang de? Schmitt-Triggers
39 eine negative Spannung erscheint. Im Laufe eines Zeitabschnitts, der durch die Zeitkonstante des aus
dem Kondensator 52 und dem Regelwiderstand 53 bestehenden /?C-Gliedes bestimmt wird, liegt diese Spannung
am Eingang der parallel verbundenen elektronischen Schalter 50 und 51. Infolgedessen wird der elektronische
Schalter 50 gesperrt und unterbricht den vom Pluspol der Speisequelle kommenden Speisestromzweig
des Elektromotors 25. In der Zeitspanne, die von den Werten des Kondensators 52 und des Regelwiderstandes
53 abhängt, ist der elektronische Schalter 51 leitend und schließt den negativen Speisestromzweig
des Elektromotors 25, wobei der Objekttisch 9 zurückgeschoben und die trägheitsbedingte Verschiebung des
Mikroobjekts 3 in bezug auf den Mittelpunkt des Gesichtsfeldes des Lumineszenzmikroskops 1 kompensiert
wird. Durch die vom Ausgang des elektronischen Schalters 51 über die Diode 54 zugeführte negative Spannung
wird der Kondensator 56 aufgeladen, von dem der Tongenerator 55 gespeist wird. Der Tongenerator gibt der
Bedienungsperson ein Tonsignal bei der Erkennung eines Mikroobjekts 8, bei dem die Größe des Verhältnisses
der langwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung zur kurzwelligen Komponente seiner Lumineszenzstrahlung
über dem vom Diskriminator 23 vorgegebenen Pegel liegt
Beim Auftreten dieses Tonsignals führt die Bedie-
nungsperson den Spiegel 10 in den Strahlengang ein und beginnt mit Hilfe des mit dem Lichtfilter 12 ausgestatteten
Okulars 11 die morphologische Untersuchung des
erkannten Mikroobjekts 8. Danach schiebt die Bedienungsperson den Spiegel 10 aus dem Strahlengang des
Luminesrenzmikroskops 1 heraus und untersucht die unter Einwirkung von physikalisch-chemischen Faktoren,
z. B. einer Ultraviolettstrahlung, erfolgte Änderung des Verhältnisses der kurzwelligen und der langwelligen
Komponenten der Strahlung des erkannten Mikroobjekts.
Nach Beendigung der Untersuchung des erkannten Mikroobjekts leitet die Bedienungsperson durch Drükken
des Stprtknopfes. 47 die Suche der Mikroobjekte 8
mit vorgegebenen Lumineszenzkennwerten ein. Durch Drücken des Stopfknopfes 46 kann die Bedienungsperson
in jedem beliebigen Moment die negative Spannung auf den nichtinvertierenden Eingang des Schmitt-Trigger·«
39 geben u'iu die Arbeit des Elektromotors 25 stoppen.
Mit Hilfe des Schleifers 42 des Potentiometers 43 wird die erfo.iderliche Betriebsart des Schmitt-Triggers
39 vorgegeben. Der Schalter 48 blockiert den Startknopf 47 für die Zeit der Einstellung der Einrichtung zur
Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften der Mikroobjekte 8. Indem die Bedienungsperson mit Hilfe des
Ausschalters 58 den Impulszähler 57 an den Ausgang des Kanals 15 zur Registrierung der langwelligen Komponente
der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung anschließt oder mit Hilfe des Ausschalters 60 den Impulszähler
59 an den Ausgang des Kanals 14 zur Registrierung der kurzwelligen Komponente der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung
anschließt, erhält sie die Information über die Gesamtzahl von lumineszierenden Mikroobjekten
8 im untersuchten Präparat. Beim Anschluß des Impulszählers 61 an den Ausgang des Diskriminators
23 mit Hilfe des Ausschalters 62 erhält die Bedienungsperson Angaber, über die Anzahl von veränderten
Mikroobjekten 8 im Präparat, und auf Grund der angezeigten Werte des Impulszählers 57 oder 59 und
des Impulszählers 61 bestimmt sie die relative Anzahl von veränderten Mikroobjekten 8 im Präparat.
Beim mit Hilfe des zweipoligen Ausschalters 65 erfolgenden Anschließen der Eingänge des elektronischen
Signalteilers 64 an die Ausgänge der zur Registrierung
der kurzwelligen und der langwelligen Komponenten der Mikroobjekt-Lumineszenzstrahlung bestimmten
Kanäle 14 und 15 erhält man am Ausgang des elektronischen Signalteilers 64 ein Ausgangssignal, welches dem
Wert des Verhältnisses der langwelligen Komponente zur kurzwelligen Komponente der Lumineszenzstrahlung
des Mikroobjekts entspricht. Vom Ausgang des elektronischen Signalteilers 64 werden die Signale dem
Eingang des ImpulsamDlitudenanalysators 63 zugeführt,
der ein Staffelbild der Amplitudenverteilung der Werte der Verhältnisse der langwelligen zu den kurzwelligen
Komponenten der Lumineszenzstrahlung aller zum Untersuchungsmuster gehörenden lumineszierenden Mikroobjekte
konstruiert
Die Benutzung der Einrichtung in verschiedenen Anwendungsgebieten wird durch nachstehende Beispiele
veranschaulicht
Beispiel 1
Medizinische Diagnostik
Medizinische Diagnostik
Abstriche von Blut, Knochenmark, Aszitesflüssigkeit,
abgeschabte Schleimhaut, Abdrücke von Biopsiematerial,
Gewebeschnitte werden im Laufe von 4 bis 10 Minuten auf dem Objektglas mit Carnoi-Flüssigkeit oder einer
Äthanol-Azeton-Lösung (1:) fixiert, in einer Zitrat-Phosphat-Pufferlösung mit pH =4,0 ... 4,6 im Laufe
von 4 bis 6 Minuten gehalten und mittels einer Akridin-
5 orange-Lösung mit einer Konzentration voi. 5 IC-5...
10-4 M sowie einer Zitrat-Phosphai-Pufferlösung mit
pH = 4,0... 4,2 bei einer Temperatur von 18. ..20" C im Laufe von 8—12 Min. gefärbt. Die gefärbten Präparate
werden mit derselben Pufferlösung oder mit destilliertem Wasser gespült, mit einem Deckglas abgedeckt und
auf dem Objekttisch 9 der Einrichtung zur Untersuchung der Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten
angeordnet.
Man benutzt die Interferenzplatte 13 (F ig. 1), die die
Strahlung im grünen Spektralbereich (500—580 nm) reflektiert 'ind im roten Spektralbereich (600—700 nm)
durchläßt, sowie die Lichtfilter 4,16,19 mit Durchlaßbereichsmaxima
bei 436 nm (4), 530 nm (16) und 640 nm (19). Die Impulszähler59 und61 sind angeschlossen.
Als charakteristisches Merkmal benutzt man das Verhältnis der Intensität /M0 der roten Komponente
(640 nm) der Lumineszenzstrahlur.g einer Zelle zur Intensität
/530 der grünen Komponente (530 nm) der Zellenlumineszenz,
das dem Verhältnis der Menge von Einspiral-Nukleinsäuren (NS]) zur Menge von Zweispiral-Nukleinsäuren
(NS2) in der Zelle proportional ist:
λ = W/530 = A ■
(1)
wobei A ein Proportionalitätsfaktor ist. Nach Einstellung
einer bestimmten Ansprechschwelle des Diskriminators 23 schaltet die Bedienungsperson durch Betätigung
des Startknopfes 47 den Elektromotor 25 des Objekttisches 9 im Lumineszenzmikroskop 1 ein und findet
schnell eine veränderte Zelle, deren Kennwert λ über der von ihr eingestellten Ansprechschwelle des Diskrirninators
23 liegt, Nach Eriöiien eines Tonsignais rückt
die Bedienungsperson den Spiegel 10 in den Strahlengang und untersucht die erkannte veränderte Zelle nach
ihren morphologischen Daten.
Nach Beendigung der morphologischen Untersuchung der Zelle führt die Bedienungsperson den Spiegel
10 wieder aus dem Strahlengang heraus und un< --sucht
den Vorgang der Farbstoff-Fotodestruktion in der erkannten Zelle. Verläuft die Fotodestruktion des Farbstoffes
unter Einwirkung der Strahlung der Quelle 2 so, daß die Bewegungsbahn 66 (F i g. 5) des Leuchtfiecks 37
am Schirm 30 der Elektronenstrahlröhre 26 längs der Linie gerichtet ist, die den Koordinatenanfangspunkt
und den die betreffende Zelle kennzeichnenden Ausgangspunkt verbindet, so gehört die erkannte Zelle zur
normalen differenzierten Zellenart, und der hohe a-Wert
dieser Zelle ist die Folge ihrer erhöhten synthetischen Aktivität.
Wenn in einem der oben aufgeführten zytologischen Präparate, mit Ausnahme vom Knochenmark, bei dem
das Vorhandensein von Blastomzellen als normal gilt, unter den gefundenen Zellen mit erhöhtem «-Wert eine
Zelle erkannt wird, in der die Fotodestruktion des Farbstoffes unter Einwirkung der Anregungsstrahlungsquel-Ie
2 so erfolgt, daß die Intensitätsabnahme bei der roten Komponente (640 nm) von einer Erhöhung der Intensität
der grünen Komponente (530 nm) begleitet wird und die Bewegungsbahn 67 des Leuchtflecks 37 am Schirm
30 der Elektronenstrahlröhre 26 einen bedeutenden Anteil aufweist, der senkrecht zu der den Koordinatenanfangspunkt
mit dem Ausgangspunkt 37 verbindenden Linie steht, so ist diese Zelle nichtdifferenziert (oder
eine dedifferenzierte Krebszelle) und zeugt von einer
gefährlichen Pathologie des Organismus. Wenn die Fotodestruktion
der erwähnten Art für den segmentkernigen Granulozyt charakteristisch ist, der anhand seiner
morphologischen Merkmale mit Hilfe des Okulars 11 leicht erkannt wird, .veist dies auf eine Art von Lupus
systemicus beim betreffenden Organismus hin.
Nach Beendigung der visuellen und apparativen Untersuchung der erkannten veränderten Zelle drückt die
Bedienungsperson auf den Startknopf 47 und setzt das Suchen fort. Nach der Präparatanalyse erhält die Bedienungsperson
mit Hilfe des Impulszähiers 59 die Information über die Gesamtzahl von kernhaltigen Zellen im
Präparat, mit Hilfe des Impulszähiers 61 die Angaben über die Anzahl «on veränderten Zellen im betreffenden
Präparat sowie Hinweise auf den Veränderungsgrad von vorhandenen Zeilen auf der morphologischen
und molekularen Ebene.
Beispiel 2
'rnrnünoiugie
'rnrnünoiugie
Die Zellen eines Organismus läßt man mit den durch Lumineszenzfarbstoffe, z. B. 4-Azetamid, 4'-IsothiozyanostiIben-2,2'-Disulfonsäure
markierten Antikörpern nach einem für diese immune Reaktion geeigneten Verfahren
ausbrüten, setzt zusätzlich die Bromid-Etydium-Lösung (2,7-Diamino-10-ÄthyI-9-Phenylphenantrydium-Rromid)
mit einer Konzentration von 10—· — 10~5 g/ml hinzu, deckt das Präparat mit einem Deckglas
ab und legt es nach I bis 8 Min. auf den Objekttisch 9.
Man benutzt die Interferenzplatte 13 (Fig. 1), die die
Strahlung im blauen Spektralbereich (400—500 nm) reflektiprt
-jnd im roten Spektralbereich (580—700 nm) durchläßt, sowie die Lichtfilter 4,16,19 mit Durchlaßbereichsmaxima
bei 365 ηm (4), 460 nm (16) und 610 nm (19) und schalter die Impulszähler 57 und 61 ein.
Als charakteristisches Merkmal benutzt man das Verhältnis der Intensität Aw der Lumineszenz im blauen
Spektralbereich zur Intensität /öionm im roten Spektralbereich,
welches das Verhältnis der Immunfluoreszenz-Markierung (M) zur Gesamtmenge von Nukleinsäuren
(NS)m der betreffenden Zelle wiedergibt:
« = W/610 = A ■ M/NS
ANS (l-Anilin-Naphthalen-8-Sulfonat) in einer Konzentration
von 10~4g/ml sowie von Bromidetydium
(10-5g/ml) hinzu. Das erhaltene Gemisch wird auf das
Objektglas aufgetragen, mit einem Deckglas bedeckt und auf dem Objekttisch 9 angeordnet
Man benutzt die mit Interferenzbelag versehene Lichtzerlegungsplatte 13, die die Strahlung im blauen
Spektralbereich (400—520 nm) reflektiert und im roten Spektralbereich (580—700 nm) durchläßt, sowie die
Lichtfilter 4,16,19, deren Durchlaßbereichsmaxima bei
365 nm (4), 490 nm (16) und 610 nm (19) liegen.
Als charakteristisches Merkmal benutzt man das Verhältnis der Lumineszenzintensität k\a um im roten Spektralbereich
zur Intensität Asonm im blauen Spektralbereich:
wobei A einen Proportionalitätsfaktor darstellt.
Nach Einstellung der entsprechenden Ansprechschwelle des Diskriminators 23 schaltet die Bedienungsperson
den Elektromotor 25 durch einen Druck auf den Startknopf 47 ein und findet schnell die Zellen mit hoher
immuner Aktivität, falls solche im Präparat vorhanden sind. Die erkannten Zellen werden mit Hilfe des Okulars
11 morphologisch untersucht. Nach der durchgeführten
Analyse der Probe erhält die Bedienungsperson mit Hilfe des Impulszählers 57 die Information über die Gesamtzahl
von kernhaltigen Zellen in der Probe, mit Hilfe des Impulszählers 61 die Angaben über die Anzahl von
Zellen mit hoher immuner Aktivität und mit Hilfe des Okulars 11 die morphologischen Daten von Zellen mit
hoher immuner Aktivität.
Beispiel 3
Mikrobiologie
Mikrobiologie
Zur Suspension von gramnegativen Mikroorganismen
(Produzenten) setzt man wäßrige Lösungen von x =
welches den Grad der Zellschadigung charakterisiert.
Nach Einstellung der Ansprechschwelle des Diskriminator*
23 und nach Betätigung des Siartknupfes 47 erkennt
die Bedienungsperson schnell die im Präparat enthaltenen Zellen mit dem vorgegebenen oder größeren
Beschädigungsgrad und unterzieht sie der morphologischen Analyse mit Hilfe des Okulars 11.
Zellenenergetik
Eine Suspension von lebenden Zellen oder ein Abdruck von Biopsiematerial wird auf das Objektglas aufgetragen,
mit einem Deckglas bedeckt und auf dem Objekttisch 9 angeordnet.
Man benutzt eine Lichtzerlegungsplatte 13, die die Strahlung im blauen Spektralbereich (400—490 r.m) reflektiert
und im grünen Spektralbereich (500—600 nm) durchläßt, sowie die Lichtfilter 4, 16 und 19 mit Durchlaßbereichsmaxima
bei 365 ηm (4), 470 nm (16) und 530nm(19).
Als charakteristisches Merkmal benutzt man das Verhältnis der Lumineszenzstrahlungs-Intensität von oxidierten
Flavoproteinen auf der Wellenlänge von 530 nm zur Lumineszenzintensität der reduzierten Pyridinnukleotide
auf der Wellenlänge von 470 nm:
= /530//470,
welches die energetische Aktivität der Zelle charaktcrisiert.
Nach Einstellung der Ansprechschwelle des Diskriminators 23 und nach Betätigung des Startknopfes 47 erkennt
die Bedienungsperson schnell die Zellen mit erhöhter energetischer Aktivität und untersucht sie mit
Hilfe des Okulars II.
Biomonitoring des Mikrophytoplanktons
Ein Wassertropfen aus einem zu untersuchenden Wasserbecken wird auf das Objektglas aufgetragen, mit
einem Deckglas bedeckt und auf den Objekttisch 9 gelegt.
Man benutzt eine Interferenzplatte 13. die die Strahlung
im gelb-orangenen Spektralbereich (560—660 nm) reflektiert und im roten Spektralbcrcich (670—750 nm)
durchläßt, sowie die Lichtfilter 4, 16,19 mit DurchlaUbc-
15
reichmaxima bei 436 nm (4), 660 nm (16), 680 nm (19) und schaltet die Impulszähler 57 und 61 an.
Als charakteristisches Merkmal einer Zelle benutzt man das Verhältnis der Lumineszenzintensität des AlIophykozyanins
bei 660 nm zur Lumineszenzintensität des Chlorophylls bei 680 nm:
λ = /tW/bso, (5)
welches das Aiter der Zellen von Blaugrünalgen kennzeichnet
Nach der Einstellung der Ansprechschwelle des Diskriminators 23 erkennt die Bedienungsperson im Präparat
die Zellen der Blaugrünalgen, die sich im stationären Entwicklungsstadium befinden. Dabei erhält die Bedienungsperson
mit Hilfe des Impulszählers 61 die Information über das Verhältnis der Anzahl von Zellen der
Blaugrünalgen, die sich im Wasserbecken im stationären Entwicklungsstadium befinden, zur Gesamtzahl von
Zellen des Mikrophytoplanktons. die mittels des Impuls-Zählers 57 ermittelt wird.
Dasselbe Präparat wird 5 bis 10 Minuten einer totalen Bestrahlung mit Ultraviolettstrahlung von 365 nm Wellenlänge
unterzogen, worauf es wiederholt analysiert wird. Nach dieser Analyse erhält man das Verhältnis der
Gesamtzahl von Zellen der Blaugrünalgen, die mittels des Impulszählers 61 bestimmt wird, zur Gesamtzahl
von Zellen des Mikrophytoplanktons, die mit Hilfe des Impulszählers 57 ermittelt wird.
Die beschriebene Einrichtung weist bei allen aufgeführten Anwendungsbeispielen gegenüber den bekannten
zu ähnlichen Zwecken angewandten Einrichtungen ent:chiklertde Vorteile auf. Bei Benutzung der vorgeschlagenen
Einrichtung in der medizinischen Diagnostik ähnlich dem Beispiel 1 kann während eines Arbeitstages
die Analyse von 100 bis 200 Präparaten des menschlichen
Gewebes zwecks Erkennung von dedifferenzierten Krebszellen beim Vorhandensein von einer bis zwei ja
pathologischen Zellen in 1000 bis 10 000 normalen ZeI- "
lcn durchgeführt werden. Dabei erhöht sich die Genauigkeit der Diagnose des dedifferenzierten Zustands einer
Krebszelle stark infolge der Auswertung ihrer besonderen physikalisch-chemischen Kennwerte (Farbstoff-Fotodestruktion)
zusätzlich zur üblichen morphologischen visuellen Analyse einer derartigen Zelle. Der
verhältnismäßig einfache Aufbau der Einrichtung bedingt eine wesentliche (um das 7- bis lOfache) Senkung
der Hcrstellungs- und Betriebskosten gegenüber den bekannten automatischen Einrichtungen, bei denen zur
Erkennung der pathologieverdächtigen Zellen morphologische
Merkmale benutzt werden.
Hierzu 3 Blatt Zeichnungen
55
b0
65
Claims (4)
1. Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekien, die auf einem
mittels eines Elektromotors (25) bewegbaren Objekttisch (9) eines Lumineszenzmikroskops liegen,
mit einer im Weg der durch die Strahlung einer Anregungsstrahlungsquelle (2) hervorgerufenen Lumineszenzstrahlung
des zu überprüfenden Mikroobjekts (8) liegenden Lichtzerlegungsplatte (13), die die
kurzwellige Komponente der Lumineszenzstrahlung auf eine erste Detektoreinheit (16, 17, 18) für
die Erfassung der entsprechenden Komponente der Lumineszenzstrahlung reflektiert und die langwellige
Komponente der Lumineszenzstrahlung zu einer zweiten Detektoreinheit (19, 20, 21) für die Registrierung
der entsprechenden Komponente der Lumineszenzstrahlung durchläßt, mit einer Auswertseinheit
(22, 23) für die von den jeweiligen Detektoren erfaßte Lusnineszenzstrahlung und einer dieser
nachgeordneten Steuereinheit (24) für den Objekttisch, wobei in die Auswerteeinheit Kriterien für die
Unterscheidbarkeit der Mikroobjekte aufgrund der einzelnen Komponenten der Lumineszenzstrahlung
eingebbar sind, dadurch gekennzeichnet, daß die Auswerteeinheit (22, 23) eine Divisionseinheit
(22) zur Bildung des Verhältnisses zwischen der langwelligen Komponente und der kurzwelligen
Komponente der Lumineszenzstrahlung des Mikroobjekts sowie einen Diskriminator (23) für die Größe
dieses gebildeten Verhältnisses aufweist und daß die Steuereinheit (24) aufgrund jes von der Auswerteeinheit
(22,23) kommenden Signals zur Bewegung oder Stillsetzung des mit dei.. Objekttisch (9)
verbundenen Motors (25) ausgelegt ist.
2. Einrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Divisionseinheit (22) als Elektronenstrahlröhre
(26) ausgebildet ist, deren Horizontalablenkplatten (27) mit dem Ausgang der ersten
Detektoreinheit (16, 17, 18) und deren Vertikalablenkplatten (28) mit dem Ausgang der zweiten Detektoreinheit
(19,20,21) verbunden sind.
3. Einrichtung nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Diskriminator (23) als Fotodetektor
(29) ausgeführt ist, der an einer Stelle am Schirm (30) der Elektronenstrahlröhre (26) festlegbar
ist, die die Grenze für die Erfassung der veränderten Mikroobjekte (8) bestimmt.
4. Einrichtung nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß der Diskriminator (23) eine am
Schirm (30) der Elektronenstrahlröhre (26) angeordnete Maske (36) enthält, die die Grenze für die Erfassung
der veränderten Mikroobjekte (8) bestimmt, und daß ein Fotodetektor (35) vorgesehen ist, der im
Wege des vom Schirm (30) der Elektronenstrahlröhre (26) emittierten Lichtstromes angeordnet ist.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU782679980A SU938936A1 (ru) | 1978-11-01 | 1978-11-01 | Устройство дл поиска измененных клеток в цитологическом препарате |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2944019A1 DE2944019A1 (de) | 1980-06-12 |
DE2944019C2 true DE2944019C2 (de) | 1985-08-29 |
Family
ID=20791696
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19792944019 Expired DE2944019C2 (de) | 1978-11-01 | 1979-10-31 | Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS5574448A (de) |
DD (1) | DD147002A1 (de) |
DE (1) | DE2944019C2 (de) |
FR (1) | FR2441190A1 (de) |
GB (1) | GB2039031B (de) |
SU (1) | SU938936A1 (de) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS585652A (ja) * | 1981-06-30 | 1983-01-13 | Shimadzu Corp | クロマトグラフ検出デ−タ処理表示装置 |
US4586819A (en) * | 1982-07-09 | 1986-05-06 | Hitachi, Ltd. | Laser Raman microprobe |
US4659429A (en) * | 1983-08-03 | 1987-04-21 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method and apparatus for production and use of nanometer scale light beams |
US4662747A (en) * | 1983-08-03 | 1987-05-05 | Cornell Research Foundation, Inc. | Method and apparatus for production and use of nanometer scale light beams |
GB2215838B (en) * | 1988-02-12 | 1992-10-21 | Nat Res Dev | Fluorimeters |
US4917462A (en) * | 1988-06-15 | 1990-04-17 | Cornell Research Foundation, Inc. | Near field scanning optical microscopy |
US5091652A (en) * | 1990-01-12 | 1992-02-25 | The Regents Of The University Of California | Laser excited confocal microscope fluorescence scanner and method |
US7498164B2 (en) | 1998-05-16 | 2009-03-03 | Applied Biosystems, Llc | Instrument for monitoring nucleic acid sequence amplification reaction |
JP2003524754A (ja) * | 1998-05-16 | 2003-08-19 | ピーイー コーポレイション (エヌワイ) | Dnaのポリメラーゼ連鎖反応をモニタする装置 |
DE19927724A1 (de) * | 1998-06-19 | 2000-01-20 | Optiscan Pty Ltd | Verfahren und Vorrichtung mit Zweiphotonen-Endoskop oder Mikroskop |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3413464A (en) * | 1965-04-29 | 1968-11-26 | Ibm | Method for measuring the nucleic acid in biological cells after enhancement in an acidic solution |
US3497690A (en) * | 1967-09-21 | 1970-02-24 | Bausch & Lomb | Method and apparatus for classifying biological cells by measuring the size and fluorescent response thereof |
DE1919628C3 (de) * | 1969-04-18 | 1975-04-10 | Wolfgang Prof. Dr. Dittrich | Anordnung zum automatischen Zählen und/oder Klassifizieren von in einem strömungsfähigen Medium dispergierten Teilchen |
US3657537A (en) * | 1970-04-03 | 1972-04-18 | Bausch & Lomb | Computerized slit-scan cyto-fluorometer for automated cell recognition |
IL49622A0 (en) * | 1976-05-21 | 1976-07-30 | Elscint Ltd | A method and apparatus for classifying biological cells |
DE2709399C3 (de) * | 1977-03-04 | 1980-07-24 | Goehde, Wolfgang, Dr., 4400 Muenster | Einrichtung zum Messen von Zelleigenschaften |
JPS53135660A (en) * | 1977-04-30 | 1978-11-27 | Olympus Optical Co Ltd | Fluorescent photometric microscope using laser light |
-
1978
- 1978-11-01 SU SU782679980A patent/SU938936A1/ru active
-
1979
- 1979-10-10 GB GB7935116A patent/GB2039031B/en not_active Expired
- 1979-10-31 DD DD21659079A patent/DD147002A1/de not_active IP Right Cessation
- 1979-10-31 FR FR7927052A patent/FR2441190A1/fr active Granted
- 1979-10-31 DE DE19792944019 patent/DE2944019C2/de not_active Expired
- 1979-11-01 JP JP14051379A patent/JPS5574448A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FR2441190B1 (de) | 1983-06-17 |
DE2944019A1 (de) | 1980-06-12 |
SU938936A1 (ru) | 1982-06-30 |
GB2039031A (en) | 1980-07-30 |
DD147002A1 (de) | 1981-03-11 |
FR2441190A1 (fr) | 1980-06-06 |
GB2039031B (en) | 1983-06-15 |
JPS5574448A (en) | 1980-06-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3331017C2 (de) | Verfahren zur Unterscheidung verschiedenartiger Zell-Subpopulationen | |
DE69125574T2 (de) | Vorrichtung zur Auswertung fluoreszenzmarkierter Gelelektrophoresemuster | |
DE69028370T2 (de) | Hochempfindliche fluoreszierende einzelteilchen, gerät und verfahren zum nachweis einzelner moleküle | |
DE4111903C2 (de) | ||
DE69722800T2 (de) | Probenanalyseverfahren mittels bestimmung einer funktion der spezifischen helligkeit | |
DE69131844T2 (de) | Bildgebender Durchflusszytometer | |
DE69007118T2 (de) | Verfahren und gerät zum zählen von teilchen. | |
DE69521558T2 (de) | Vorrichtung und Verfahren zur Zytometrie unter Verwendung einer Kapillarküvette mit definiertem Volumen | |
DE69222880T2 (de) | Vorrichtung zur Erfassung mehrfarbiger Elektrophoresemuster | |
DE3781855T2 (de) | Mittel zum kalibrieren von durchflusszytometriegeraeten und anderen analysevorrichtungen. | |
DE69030703T2 (de) | Verfahren und Gerät zur Messung von optischen Eigenschaften biologischer Proben | |
DE69213315T2 (de) | Reagenzien und Verfahren zur Zellanalyse im Harn | |
DE1498824C3 (de) | Vorrichtung zur maschinellen Krebsdiagnose | |
EP0762114A2 (de) | Vorrichtung für parallele Zweiphotonen-Fluoreszenz-Korrelations-Spektroskopiemessungen (TPA-FCS) an mehreren Proben und deren Verwendung zum Wirkstoff-Screening | |
WO2003098313A2 (de) | Verfahren und anordnung zur untersuchung von proben | |
DE3781070T2 (de) | Durchfluss-zytometrieverfahren zum klassifizieren von leukozyten. | |
DE69217899T2 (de) | Gerät zur Teilchenbildanalyse | |
EP0034156A1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur bestimmung von glucose im serum oder im harn. | |
DE19630956A1 (de) | Verfahren und Vorrichtung zur Raman-Korrelationsspektroskopie | |
DE2944019C2 (de) | Einrichtung zur Untersuchung von Lumineszenzeigenschaften von Mikroobjekten | |
DE2153405A1 (de) | Vorrichtung zum Bestimmen des prozentualen Anteils von Partikelarten in einem Medium | |
DE3486120T2 (de) | Atemanalysevorrichtung. | |
DE19718016A1 (de) | Verfahren zur optischen Detektion von Analytmolekülen in einem natürlichen biologischen Medium | |
DE2606481A1 (de) | Fluorometer | |
DE69524575T2 (de) | Spektrale differential-fluoreszenz messung einer substratbeschichtung |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
OAR | Request for search filed | ||
OC | Search report available | ||
OI | Miscellaneous see part 1 | ||
OD | Request for examination | ||
D2 | Grant after examination | ||
8364 | No opposition during term of opposition | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |