DE2824372A1

DE2824372A1 - Pharmakologisch wirksame ester, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen

Info

Publication number: DE2824372A1
Application number: DE19782824372
Authority: DE
Inventors: Roderic Stafford Andrews; Stephen Andrew Bone; George Margetts; David Allan Matkin
Original assignee: Sterwin AG
Current assignee: Sterwin AG
Priority date: 1977-06-02
Filing date: 1978-06-01
Publication date: 1978-12-14
Also published as: NO148780B; AT366372B; NL7806018A; GB1589816A; IE781105L; NO148780C; IE47712B1; ATA398778A; DK244078A; NO781907L; BE867761A; LU79757A1; FR2392979A1; FR2392979B1; SE7806462L

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft pharmakologisch wirksame Ester, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Ester enthalten. Außerdem betrifft die Erfindung verschiedene Zwischenprodukte, die zur Herstellung der erfindungsgemäßen Ester wichtig sind, sowie Verfahren zu ihrer Herstellung.

Analgetika sind heutzutage weit verbreitet, und viele Verbindungen verschiedenen Typs sind vorgeschlagen und für diesen Zweck auf den Markt gebracht worden. Zur Linderung chronischer Beschwerden wie Rheumatismus und Arthritis sind in der Regel Mittel erwünscht, die neben ihrer analgetischen Wirksamkeit auch entzündungswidrige Eigenschaften haben. So werden heutzutage zur Linderung bei chronischer Arthritis, Rheumatismus und ähnlichen Leiden normalerweise einige der bekannten entzündungswidrigen, analgetischen Mittel angewendet.

Zu den bekanntesten, wirksamsten und weitverbreiteten entzündungswidrigen Analgetika gehören die 4-Alkyl-3,5-dioxopyrazolidin-Derivate der allgemeinen Formel

8Ü9850/0975

IV—hy

θ/ V-f: ^(I)

von denen angenommen werden kann, daß sie in den folgenden tautomeren Formen vorliegen:

v y

W-IV (V_.fsJ

Alk '^<IK

(Jj.) (Ib)

wobei in jeder der allgemeinen Formeln I, Ia und Ib entweder X eine Phenyl- und Y eine Phenyl- oder p-Hydroxyphenylgruppe bedeutet, oder X und Y zusammen mit den dazwischen liegenden Stickstoffatomen, an die sie entsprechend gebunden sind, ein mit dem Pyrazolidinring kondensiertes 3-Dimethylamino-7-methy1-[j ,2,4J-benzotriaz in-Ringsystem darstellen, und Alk eine η-Butyl- oder n-Propylgruppe bedeutet.

Im folgenden werden einige Beispiele für diese bekannten entzündungswidrigen und analgetischen Pyrazolidinderivate der allgemeinen Formel I genannt:

1,2-Diphenyl-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin; 1-Pheny1-2-(p-hydroxyphenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin

809850/0975

BAD ORIGINAL

S-Diinethylamino-iJ-methyl^-n-propyl-IH-pyrazolo- [1 , 2-aJ [1,2,4]· benzotriazin-1,3(2H)-dion.

Ganz besonders gut bekannt ist als Analgetikum die Verbindung 2-Acetoxy-benzoesäure mit der Strukturformel

0.CO.CH₃

(ID CO. OH

auch unter dem Namen Aspirin bekannt.

Leider werden die erwünschten entzündungswxdrxgen und analgetischen Eigenschaften der Pyrazolidinderivate der allgemeinen Formel I und die erwünschten analgetischen Eigenschaften der 2-Acetoxy-benzoesäure durch die Tendenz dieser Stoffe, Störungen des Magentraktes zu verursachen, aufgehoben. Darüber hinaus fand man, daß bei gleichzeitiger Verabreichung diese beiden Verbindungen antagonistisch wirken, indem sie sich gegenseitig bei der Assimilation behindern.

überraschenderweise wurde nun gefunden, daß durch die Bildung einer Esterverknüpfung zwischen der Carboxylgruppe in der 2-Acetoxy-benzoesäure und der Hydroxygruppe bzw. den Hydroxygruppen in den Pyrazolidinderivaten der allgemeinen Formel I

809850/0975

(bzw. den tautomeren Formen Ia und Ib) Verbindungen erhalten werden, die, obwohl sie aus Magenstörungen verursachenden und antagonistisch wirkenden Ausgangsverbindungen entstanden sind, weitgehend oder nahezu vollständig frei von unerwünschten Nebenwirkungen auf den Verdauungstrakt sind, hervorragende entzündungswidrige und schmerzstillende Wirkungen besitzen und in zufriedenstellender Weise vom Körper des Patienten assimiliert werden,

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind dementsprechend 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinderivaten der oben angegebenen allgemeinen Formel I und gegebenenfalls ihre Säureadditionssalze mit pharmakologisch verträglichen Mineral- und organischen Säuren.

Von diesen erfindungsgemäßen Verbindungen werden die folgenden besonders bevorzugt:

1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-buty1-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en der folgenden Strukturformel:

0 C i .) ( ) ii υ \· 7 \ 7

CiI₃-C-O_x C~i\ V-*/ ^(A)

809850/0975

1-Phenyl-2-(p-hydroxy-phenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxybenzoyloxy) -pyrazolid-4-en der folgenden Strukturformel:

\ Λ ^> Oll

cM.j-c-0 ce 0 < y-o

W/ ~ ^J '

oder sein 3-(2-Acetoxy-benzoyloxy)-5-oxo-Isomeres, das auch besser als 1-(p-Hydroxy-phenyl)-2-phenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en bezeichnet wird, mit der Strukturformel

HO-Γ )^_Ί^^{ ) CH-. -CO-O. ( 0 (' C *> -0 (B')

1-Phenyl-2-(ρ- \2 '-acetoxy-benzoyloxy] -phenyl)-3,5-dioxo-4-nbutyl-pyrazolidin der Strukturformel

/Γ\

oder eine ihrer tautomeren Formen, nämlich dan 5-Hydroxy-4-en-3-on-Isomere und/oder das 3-Hydroxy-3-en-5-on-Isomere,

809850/0975 bad original

i-Phenyl-2-(ρ- p>'-acetoxy-benzoyloxy]-phenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en der Strukturformel:

CH₃-OO-Q

(D)

oder sein 3-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-5-oxo-Isomeres, das auch besser als 1-(ρ- [2'-acetoxy-benzoyloxy!-phenyl)-2-pheny1-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en bezeichnet wird, mit der Strukturformel:

•ν·

■Λ

-θ-ώ-cH,

(D¹)

ferner 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [j ,2-aJ p,2, 4j benzotriazin der Strukturformel

^v Λ

¹V

Cfi_;

^un?,

f.

-^o

(E)

50/0

sowie deren Säureadditionssalze mit pharmakologisch verträglichen Säuren und gegebenenfalls sein i-Oxo-3-hydroxy-Isomeres der Strukturformel

0-CO-CH₅

n-Propyl

und den entsprechenden Säureadditionssalzen mit pharmakologisch verträglichen Säuren.

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein Verfahren zur Herstellung dieser 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten und gegebenenfalls ihrer entsprechenden Säureadditionssalze, das dadurch charakterisiert ist, daß man ein 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der
allgemeinen Formel I (in einer der tautomeren Formel Ia oder Ib) in Gegenwart einer Base mit 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid der Formel

O.CO.CH₃

(III) CO. Cl

809850/097B

umsetzt, wobei man die gewünschten 2-Acetoxy-benzoesäureester von entsprechenden 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen oder gegebenenfalls ihre Säureadditionssalze erhält.

Die Reaktion zwischen dem Pyrazolidinderivat der allgemeinen Formel I und dem 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid wird vorteilhaft in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel durchgeführt.

Da die Reaktion ziemlich heftig verläuft, kann sie bei Zimmertemperatur ohne Zufuhr von Wärme oder, wenn die Reaktion sehr heftig wird, unter Kühlung durchgeführt werden.

Als inertes Lösungsmittel wird vorteilhaft ein organisches Lösungsmittel verwendet, insbesondere (a) substituierte aromatische Kohlenwasserstoffe einschließlich halogenierter aromatischer Kohlenwasserstoffe, zum Beispiel Toluol, (b) aliphatische Kohlenwasserstoffe einschließlich der halogenierten aliphatischen Kohlenwasserstoffe, zum Beispiel Chloroform und Dichlormethan und (c) aliphatische Äther, zum Beispiel Diethyläther. Besonders bevorzugt werden Chloroform und Dichlormethan eingesetzt.

Die Reaktion muß in Gegenwart einer Base durchgeführt werden. Besonders geeignet ist ein tertiäres Amin. Ganz besonders bevorzugt wird Pyridin als Base verwendet.

809850/0975

Dieses erfindungsgemäße Verfahren umfaßt auch vorteilhaft die Vorstufe zur Herstellung des 2-Acetoxy-benzoesäurechlorids der Strukturformel III, die man durch Umsetzung einer lösung und/oder Suspension der 2-Acetoxy-benzoesäure in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel mit Thionylchlorid erhält.

Die Umsetzung mit Thionylchlorid kann bei jeder geeigneten Temperatur im Bereich zwischen Raumtemperatur und der Rückflußtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt werden, in der Regel im Bereich zwischen Raumtemperatur bis zu 65 C.

Die Umsetzung in der Vorstufe und in der darauffolgenden Stufe werden vorzugsweise im gleichen Lösungsmittel durchgeführt, da dann das erhaltene 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid nicht aus dem Reaktionsprodukt isoliert zu werden braucht. Beispielsweise kann ein relativ niedrig siedendes inertes Lösungsmittel verwendet werden, insbesondere eines der oben beschriebenen organischen Lösungsmittel. Besonders bevorzugt werden auch hier Chloroform und Dichlormethan.

Wenn als Lösungsmittel wasserfreies Dichlormethan eingesetzt wird, kann die Reaktion besonders vorteilhaft unter RückfLuß bei ca. 40⁰C durchgeführt werden. Das MolverhältnLs der Reaktionsteilnehmer beträgt vorzugsweise 1 Mol Thionylchlorid pro Mol 2-Acetoxy-benzoesäure.

809850/0975

Es wurde ferner gefunden, daß es vorteilhaft ist, die Umsetzung zwischen der 2-Acetoxy-benzoesäure und dem Thionylchlorid in Gegenwart einer katalytischen Menge N,N-Dimethylformamid durchzuführen.

Gemäß einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung erfolgt die Herstellung der 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen in der Weise, daß ein gemischtes Anhydrid der allgemeinen Formel

0 0 0

CH₃-C-O j ^ C-O-Q- [0] _m-Ayl (IV)

in der AyI eine Alkylgruppe mit 1 bis 20 C-Atomen, eine Arylgruppe mit 6 bis 20 C-Atomen, eine Alkarylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen oder eine Aralkylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen darstellt, m = 0 oder 1 ist und Q ein C-Atom oder, wenn m 0 ist, eine SuIfinylgruppe S=O bedeutet, mit einem 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der allgemeinen Formel I (in einer seiner tautomeren Formen Ia oder Ib) zum gewünschten 2-Acetoxy-benzoesäureester umgesetzt wird.

Die Umsetzung zwischen dem gemischten Anhydrid der allgemeinen Formel IV und dem 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der allgemeinen Formel I kann und sollte nach Möglichkeit in einem

809850/0975

wasserfreien, inerten Lösungsmittel, vorzugsweise in einem der oben beschriebenen organischen Lösungsmittel, durchgeführt werden.

Die Reaktion kann ohne Nachteil auch in Gegenwart einer Base wie eines tertiären Amins, zum Beispiel in Gegenwart von
Triethylamin oder Pyridin, durchgeführt werden.

Die Erfindung umfaßt auch die gemischten Anhydride der oben angegebenen allgemeinen Formel IV, die nützliche Zwischenprodukte für die Synthese der erfindungsgemäßen 2-Acetoxybenzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten nach dem zweiten erfindungsgemäßen Verfahren sind.

Die gemischten Anhydride der allgemeinen Formel IV können vorteilhaft in einer Vorstufe hergestellt werden, bei der ein reaktionsfähiges Säurechlorid der allgemeinen Formel

0
Ayl[o]_m-Q-Cl (V)

in der AyI, m und Q die oben genannten Bedeutungen haben, mit 2-Acetoxy-benzoesäure oder einem seiner Salze in Gegenwart einer Base umgesetzt wird.

Als reaktionsfähiges organisches Chlorid der allgemeinen Formel V kann eingesetzt werden:

809850/097B

(a) ein Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkaryl-chlor-Ameisensäureester der allgemeinen Formel

0
Ayl.O-C-Cl (Va)

(b) ein sterisch gehindertes Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkaryl-Säurechlorid der allgemeinen Formel

0
AyI-C-Cl (Vb)

oder

(c) ein Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkaryl-Sulfonylchlorid der allgemeinen Formel

0 O
AyI-S-Cl (Vc)

in der, wie in der allgemeinen Formel V, AyI eine Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkarylgruppe mit der dort angegebenen Anzahl von C-Atomen bedeutet.

Die Umsetzung zwischen der 2-Acetoxy-benzoesäure und dem reaktionsfähigen Säurechlorid der allgemeinen Formel V (oder Va₇ Vb bzw. Vc), nachfolgend als "Erste-Stufe-Reaktion" bezeichnet, wird besonders vorteilhaft in einem wasserfreien, inerten und üblicherweise organischen Lösungsmittel ausgeführt. Dieses Lösungsmittel kann beispielsweise ein substituiertes organisches Lösungsmittel wie Toluol, ein üblicherweise

809850/0975

verwendeter halogenierter aromatischer Kohlenwasserstoff oder ein halogenierter aliphatischer Kohlenwasserstoff, zum Beispiel Chloroform, sein.

Die "Erste-Stufe-Reaktion" muß in Gegenwart einer Base, vorzugsweise eines tertiären Amins, .insbesondere von Triethylamin oder Pyridin, durchgeführt werden.

Wie oben angegeben, wird die nachfolgende Reaktion zwischen dem gemischten Anhydrid der allgemeinen Formel IV und dem 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der allgemeinen Formel I, nachfolgend als "Zweite-Stufe-Reaktion" bezeichnet, vorteilhaft in demselben wasserfreien, inerten organischen Lösungsmittel durchgeführt wie die "Erste-Stufe-Reaktion". Die Gegenwart einer Base ist in der "Zweite-Stufe-Reaktion" nicht von Nachteil. Es ist daher möglich und sogar wünschenswert, beide Reaktionen in dem gleichen wasserfreien, inerten organischen Lösungsmittel ohne Isolierung des Reaktionsproduktes der ersten Stufe und in demselben Reaktionskessel durchzuführen .

Gemäß einer weiteren erfindungsgemäßen Ausführungsform ist ein drittes Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten in der Weise charakterisiert, daß man ein 4-Alkyl-

809850/0975

3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der allgemeinen Formel I (in einer der tautomeren Formen Ia oder Ib) mit einer Lösung von 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid der Strukturformel

0 O

Ii Ί

CIh-CO-O C-O-C 0-CO-CH₅

in einem mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittel in Gegenwart einer starken wäßrigen Base umsetzt. Das Reaktxonsgemisch bildet ein Zwei-Phasen-System, das unter Rühren den gewünschten 2-Acetoxy-benzoesäureester ergibt.

Die Umsetzung zwischen dem 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivat der allgemeinen Formel I und dem 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid ergibt als Nebenprodukt 2-Acetoxy-benzoesäure und muß daher in Gegenwart einer starken Base durchgeführt werden. Als Base kann beispielsweise eine organische Base wie Triethylamin, vorzugsweise aber wäßrige Natriumhydroxidlösung verwendet werden. Da das Anhydrid in Gegenwart von Wasser ziemlich instabil ist, muß es in einem wasserfreien, inerten, mit Wasser nicht mischbaren organischen Lösungsmittel, wie Benzol, Toluol, Chloroform, Dichlormethan oder einem aliphatischen Äther wie Diethylather zur Reaktion gebracht werden. Die Reaktion wird unter heftigem Rühren in einem

Zwei-Phasen-System durchgeführt, wodurch ein Zersetzen des Anhydrids, bevor es an der beabsichtigten Reaktion teilgenommen hat, auf ein Minium beschränkt wird. Die Reaktion wird vorteilhaft bei Zimmertemperatur oder annähernder Zimmertemperatur, jedoch nicht über 30⁰C, durchgeführt.

Die Erfindung erstreckt sich ferner auf das 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid der Formel VI, das als nützliches Zwischenprodukt bei dem erfindungsgemäßen dritten Verfahren zur Herstellung von 2-Acetoxy-benzoesäureestern von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten eingesetzt wird.

Dieses erfindungsgemäße dritte Verfahren umfaßt vorteilhaft auch die Vorstufe zur Herstellung des 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrids der Formel VI, bei der man 2-Acetoxy-benzoesäure mit einem Carbodiimid in einem wasserfreien, keine Hydroxylgruppen enthaltenden und im übrigen inerten organischen Lösungsmittel bei Zimmertemperatur oder annähernder Zimmertemperatur, im allgemeinen aber nicht über 30⁰C, umsetzt.

Im Prinzip kann jedes Carbodiimid verwendet werden, sofern es genügend stabil ist. Dementsprechend eignen sich am besten N,N'-Di[alkyl/arylj-carbodiimide der allgemeinen Formel

C (VII)

Z" N

809850/0975

worin Z¹ und Z" jeweils eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Alkaryl-, Aryl- oder Aralkylgruppe mit 6 bis 20 C-Atomen bedeuten. Aus wirtschaftlichen Gründen, insbesondere wegen seines günstigen Preises, wird die Verwendung von N,N'-Dicyclohexyl-carbodiimid im Rahmen dieser Erfindung besonders bevorzugt.

Als Lösungsmittel wird bei dieser Umsetzung bevorzugt Tetrahydrofuran eingesetzt.

Die erfindungsgemäßen 2-Acetoxy-Benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen zeichnen sich durch hervorragende entzündungswidrige und schmerzstillende Wirkungen aus, wie entsprechende, allgemein für die Prüfung von entzündungswidrigen Arzneimitteln anerkannte Testmethoden ergeben haben. Ferner deuten die vorläufigen Untersuchungen darauf hin, daß diese erfindungsgemäßen Verbindungen bei oraler Verabreichung im wesentlichen keine unerwünschten Nebenwirkungen im Magentrakt verursachen.

Für die Anwendung der erfindungsgemäßen 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten der allgemeinen Formel I und insbesondere der bevorzugten Verbindungen der Formeln A, B und B¹, C, D und D¹, E und E¹ in der Human- und Veterinärmedizin als entzündungswidrige Analgetika sollten die genannten Verbindungen zweckmäßigerweise in Form geeigne-

809850/0975

ter pharmazeutischer Zusammensetzungen unter Verwendung verträglicher pharmazeutischer Trägermaterialien eingearbeitet werden.

Der Begriff "pharmazeutisch" wird hier in dem Sinne gebraucht, daß keine solchen Trägermaterialien (pharmazeutische Vehikel) verwendet werden sollen, die bezüglich der beabsichtigten Verabreichungsform der Zusammensetzung ungeeignet oder sogar schädlich sein können. Die Auswahl eines geeigneten Trägers für jeden gewünschten Zweck und jede gewünschte Verabreichungsart ist für einen einschlägigen Fachmann ohne weiteres möglich.

Die Erfindung betrifft demgemäß ferner pharmazeutische Zusammensetzungen, die als Wirkstoffkomponente ein oder mehrere der erfindungsgemäßen 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen der allgemeinen Formel I zusammen mit geeigneten pharmazeutischen Trägern enthalten.

Diese erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen sind zwar in erster Linie für die Verabreichung über den Verdauungstrakt, einschließlich der rektalen Anwendung, vorgesehen, sie können aber ebenfalls parenteral verabreicht werden. Vorzugsweise werden diese Zusammensetzungen jedoch oral oder perlingual verabreicht. Im Hinblick auf die ver-

809850/0975

schiedenen Darreichungsformen kann der pharmazeutische Träger beispielsweise sein:

(a) ein einnehmbarer Arzneimittelträger in Form von Tabletten, überzogenen Tabletten, sublingualen Tabletten oder Pillen; ein einnehmbarer Träger in Form einer Kapsel oder eines Cachets; ein einnehmbarer pulvriger Feststoffträger in Form eines Pulvers, oder ein einnehmbares flüssiges Medium in Form eines Sirups, einer Lösung, einer Suspension oder eines Elixirs;

(b) ein festes oder flüssiges Medium in Form einer Paste, Lotion, Salbe oder Salbengrundlage;

(c) eine sterile, injizierbare flüssige Lösung oder Suspension oder

(d) ein Grundstoff mit niedrigem Schmelzpunkt, der fähig ist, den aktiven Bestandteil freizusetzen, so daß er seine pharmakologische Wirkung voll entfalten kann, wobei dieser Grundstoff in geeigneter Weise zu Suppositorien geformt wird.

Die oben genannten Anwendungsformen sind zwar die am häufigsten verwendeten, die Aufzählung gibt jedoch keineswegs erschöpfend alle Möglichkeiten an.

Die erfindungsgemäßen entzündungswidrigen Analgetika und insbesondere die oben genannten bevorzugten 2-Acetoxy-benzoe-

809850/0975

säureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten der Formeln A, B und B', C, D und D', E und E¹ werden besonders häufig in Form von Tabletten, Kapseln und anderen festen Darreichungsformen verabreicht.

Die Höhe der Dosierung der erfindungsgemäßen entzündungswidrigen Analgetika in den pharmazeutischen Zusammensetzungen hängt bis zu einem gewissen Grade von der speziellen Verbindung, der Art der Verabreichung und natürlich auch von den Behandlungsbedingungen ab. Im allgemeinen gilt als geeignete Dosis für Erwachsene ein Bereich von 400 mg bis zu 5 g (in mehreren Dosen) des analgetischen Wirkstoffes pro Tag, wobei eine Dosierungseinheit in der Regel zwischen 150 mg und 400 mg enthält.

Die Erfindung wird nachfolgend durch Beispiele weiter erläutert, um einige weitere Aspekte der Erfindung und insbesondere verschiedene Herstellungsmethoden und Formulierungen für die erfindungsgemäßen Wirkstoffe aufzuzeigen.

Gruppe I Herstellungen mit Hilfe des "ersten" Verfahrens über das 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid

Beispiel 1

Herstellung von 1 ,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5- (2 '-acetoxybenzoyloxy)-pyrazolid-4-en (A)

809850/0975

Stufe A Herstellung von 2-acetoxy-benzoesäurechlorid (III)

100 g 2-Acetoxy-benzoesäure wurden in 27 ml Chloroform, das 1 ml Ν,Ν-Dimethylformamid enthielt, suspendiert. 42 ml (68,9 g) Thionylchlorid wurden zugesetzt und die Mischung zwei Stunden bei Zimmertemperatur gerührt. Dann wurden weitere 5 ml Thionylchlorid zugesetzt und die Mischung 20 Minuten lang auf 35°C erwärmt. Dabei wurde das Reaktionsgemisch klar, das Lösungsmittel wurde mit einem Rotationsverdampfer entfernt und der Rückstand zwei Stunden unter Hochvakuum evakuiert.

Das so hergestellte 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid wurde in einer Ausbeute von ca. 100 g als Öl erhalten, das ohne weitere Reinigung in der folgenden Stufe B eingesetzt wurde.

Eine Probe des Öls wurde in einer Mischung von Petroläther/ Chloroform (20:1) aufgenommen, so erhält man das gewünschte 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid in kristalliner Form.

Es wurde eine Ausbeute von 80 g erhalten, die Kristalle besaßen einen Schmelzpunkt von 48 bis 50 C.

Stufe B Herstellung von 1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (A)

20 g 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid aus Stufe A wurden in 300 ml Äther gelöst und zu dieser Lösung 9,0 g Pyridin gegeben. An-

809850/0975

schließend setzte man 30,8 g 1,2-Diphenyl-3,5-dioxo-4-n-butylpyrazolidin zu, rührte das Reaktionsgemisch 20 Minuten lang intensiv und kochte dann eine Stunde unter Rückfluß.

Die Mischung wurde filtriert, um das Pyridin-hydrochlorid zu entfernen, dann wurde der Äther entfernt und der Rückstand in 100 ml Dichlormethan gelöst. Die Lösung wurde mit verdünnter Salzsäure und anschließend mit 5 %iger Natriumcarbonatlösung gewaschen. Die Dichlormethanlösung wurde getrocknet und unter Vakuum bis zur Trockne eingedampft.

Dünnschichtchromatografisch (Chloroform) wurde die Gegenwart von nicht reagiertem Pyrazolidin-Derivat angezeigt. Dieses konnte jedoch dadurch vollständig entfernt werden, daß man das Produkt in 75 ml Äther löste und mit 100 ml 2,5-molarer Natriumhydroxidlösung 20 Minuten lang heftig schüttelte. Dann gab man weitere 100 ml Äther zu der Mischung, um das Produkt zu extrahieren. Die Ätherschicht wurde getrocknet. Nach Eindampfen erhielt man ein fast farbloses Öl, das beim Stehen schnell fest wurde. Das Dünnschichtchromatogramm (Chloroform) ergab, daß das Produkt rein war.

Es wurden 30 g des gewünschten 1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)~pyrazolid-4-en mit einem Schmelzpunkt von 96 bis 9-9⁰C erhalten.

809850/0975

Beispiel 2

Herstellung von 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [1 ,2-aJ [i , 2 , 4J -benzotriazin (E)

Stufe A Herstellung von 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid

Die Herstellung erfolgte analog zu Stufe A des Beispiels 1.

Stufe B Herstellung der Verbindung (E)

Eine Mischung von 9,0 g S-Dimethylamino-D-methyl^-n-propyliH-pyrazolo|/l ,2-a] [1 ,2,4J-benzotriazin-1 ,3 (2H)-dion und 3,0 g Pyridin in 50 ml Dichlormethan wurden unter Rührung zu einer Lösung von 60 g 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid in 100 ml Dichlormethan zugesetzt.

Das Reaktionsgemisch wurde 10 Minuten unter Rückfluß gekocht, abgekühlt und mit 100 ml 2-molarer Salzsäure gewaschen. Die Dxchlormethanlosung wurde dann unter reduziertem Druck eingeengt, das zurückgebliebene Öl in 200 ml Äther, der 5 % Ethylacetat enthielt, gelöst und zweimal mit je 100 ml 2-molarer wäßriger Natriumhydroxidlösung und dann mit 100 ml Wasser gewaschen. Anschließend trocknete man über Magnesiumsulfat. Eindampfen der ätherischen Lösung unter vermindertem Druck ergab ein gelbes öl.

809850/097 5

Durch Zusatz einer Äther/Petroläther-Mischung (Siedepunkt 60 bis 80°C> zu dem Öl kristallisierte das gewünschte 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propy l-3-oxo-5-dimethylaird.no-9-methyl-pyrazolid-2-eno £i, 2-aj [λ ,2, 4J-benzotriazin (E) in cremefarbenen Nadeln mit einem Schmelzpunkt von 138 bis 140⁰C aus. Man erhielt eine Ausbeute von 6,4 g.

Gruppe II Herstellungen mit Hilfe des "zweiten" Verfahrens

über das gemischte Anhydrid der allgemeinen Formel IV

Beispiel 3

Herstellung von 1-Phenyl-2-(p- [2 '-acetoxy-benzoyloxyj-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin (C)

Stufe A Herstellung des gemischten Anhydrids der 2-Acetoxybenzoesäure und Ameisensäure (Formel IV, in der AyI = Ethylgruppe und m = 1, Q= C-Atorn sind)

3,6 g (0,02 Mol) 2-Acetoxy-benzoesäure und 2,18 g (0,02 Mol) Chlorameisensäure-Ethylester wurden zusammen mit 50 ml Dichlormethan bei 5⁰C gerührt. Dann wurde eine Lösung von 2,O2 g

(0,02 Mol) Triethylamin in 25 ml Dichlormethan bei einer Temperatur unter 10⁰C tropfenweise zugesetzt. Anschließend wurde die Mischung 30 Minuten bei Zimmertemperatur gerührt.

Man erhielt auf diese Weise eine Lösung des gewünschten gemischten Anhydrids der 2-Acetoxy-benzoesäure und der Ameisensäure der allgemeinen Formel IV, in der AyI eine Ethylgruppe

809850/0975

darstellt, m = 1 und Q ein C-Atom ist. Diese Lösung wurde ohne weitere Isolierung in Stufe B eingesetzt.

Stufe B Herstellung von 1-Phenyl-2-(p- [2'-acetoxy-benzoyloxyj-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin (C)

Zu der Lösung aus Stufe A fügte man langsam eine Lösung von 3,24 g (0,01 Mol) 1-Phenyl-2-(p-hydroxyphenyl)-3,5-dioxo-4-nbutyl-pyrazolidin und 2,02 g (0,02 Mol) Triethylamin in 25 ml Dichlormethan hinzu. Die Mischung wurde 30 Minuten bei 40 C gerührt, abgekühlt und nachfolgend mit 50 ml-Portionen von zunächst 2-molarer Salzsäure und dann 2-molarer Natriumhydroxidlösung gewaschen. Die erhaltene Lösung wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel abgedampft. Man erhielt so das 1-Phenyl-2-(p-£2'-acetoxybenzoyloxyj-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin als eine weiße kristalline Substanz mit einem Schmelzpunkt von 156 bis 157°C.

Gruppe III Herstellung mit Hilfe des "dritten" Verfahrens über das 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid

Beispiel 4

Herstellung von 1-Phenyl-2-(p- [2 '-acetoxy-benzoyloxyj-phenyl) 3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin (C)

809850/0975

Stufe A Herstellung des 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrids (VI)

16,5 g (0,08 Mol) Ν,Ν'-Dicyclohexyl-carbodiimid wurden zu einer Lösung von 14,4 g (0,08 Mol) 2-Acetoxy-benzoesuure in 150 ml Tetrahydrofuran gegeben. Die erhaltene Mischung ließ man bei Zimmertemperatur über Nacht stehen. Sie wurde dann filtriert und das Filtrat zur Trockne eingedampft. Den Rückstand nahm man in Ethanol auf und kristallisierte ihn um. Es wurden 6,5 g des gewüschten 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrids mit einem Schmelzpunkt von 83 bis 85°C erhalten.

Stufe B Herstellung der Verbindung (C)

3,24 g (0,01 Mol) 1-Phenyl-2-(p-hydroxy-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin wurden in 20 ml 1-molarer Natriumhydroxidlösung gelöst. Zu dieser Lösung wurde anschließend eine Lösung von 6,84 g (0,02 Mol) 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid aus Stufe A in 20 ml Benzol zugefügt. Das Zwei-Phasen-Gemisch wurde 30 Minuten lang intensiv geschüttelt und dann filtriert, wobei man das gewünschte Produkt mit einem Schmelzpunkt von 156 bis 157°C erhielt.

Unabhängig von dem angewandten Verfahren führt die Veresterung von 1-Phenyl-2-(p-hydroxy-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-buty1-pyrazolidin mit 2-Acetoxy-benzoesäure vorzugsweise eher zu

Ö09850/0975

dem Monoester 1 -Phenyl-2- (p- |~2 '-acetoxy-benzoyloxy]-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin (Verbindung C) als zu den ebenfalls möglichen isomeren Monoestern Verbindung B oder Verbindung B', zumindest unter den in den Beispielen 3 und angewandten Bedingungen, Geringe Mengen des 1-Phenyl-2-(phydroxyphenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung B) und des 1-(p-Hydroxyphenyl)-2-phenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung B¹) werden jedoch auch im Verlaufe dieser Reaktionen gebildet, ebenso gewisse Mengen der Diester 1-Phenyl-2-(p-[2'-acetoxy-benzoyloxy]-phenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung D) und 1 -(p- [2 '-Acetoxy-benzoyloxyJ-phenyl)-2-phenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung D'). Diese genannten Verbindungen können isoliert werden, wenn die Reaktion in einem geeigneten Maßstab und unter geeigneten Verfahrensbedingungen durchgeführt werden. Da die Verbindung C leichter herzustellen ist als die anderen genannten Mono- und Diester, wird keine gesonderte detaillierte Beschreibung der Herstellung dieser letztgenannten Verbindungen gegeben. Entsprechende Untersuchungen haben ergeben, daß die Verbindung C im wesentlichen die gleiche pharmakologische Wirkung besitzt wie ihre Isomeren.

Das gleiche gilt auch für die Veresterung von 5-Dimethylamino-9-methyl-2-n-propyl-lH-pyrazolo fi ,2-a] [j ,2,4] benzotriazin-

809850/0975

1,3(2H)-dion mit 2-Acetoxy-benzoesäure, die vorzugsweise eher zum 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)^-n-propyl-S-oxo-S-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno p ,2-aJ £i ,2,4jbenzotriazin (Verbindung E> als zu dem Isomeren t-Oxo-2-n-propyl-3-(2'-acetoxy-benzoyloxy> -5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-3-eno [Ί, 2-aJ [1, 2,4j benzotriazin (Verbindung E¹) führt, zumindest unter den Reaktionsbedingungen von Beispiel 2. Geringe Mengen des Isomeren E¹ können jedoch im Verlaufe der Reaktion gebildet, wiedergewonnen und isoliert werden, wenn die Reaktion in einem geeigneten Maßstab und unter geeigneten Verfahrensbedingungen durchgeführt wird.

Im folgenden werden zur weiteren Erläuterung der Erfindung einige beispielsweise Formulierungen von pharmazeutischen Zusammensetzungen mit erfindungsgemäßen Wirkstoffen angegeben.

Formulierung 1 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form

von Tabletten

Eine Tablettenmischung wurde durch inniges Mischen der folgenden Bestandteile hergestellt:

1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-npropyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-D , 2-aJ \j\, 2,4] benzotriazin
(Verbindung C) 4OO mg/Tablette 0,8OO kg

sprühgetrocknete Lactose 100 mg/Tablette 0,200 kg

809850/0975

mikrokristalline Cellulose 25 mg/Tablette 0,050 kg

Stearinsäure 5 mg/Tablette 0,010 kg

530 mg/Tablette 1/060 kg

Die Mischung wurde dann mittels einer konventionellen Tablettierungsvorrichtung zu 20OO Tabletten von jeweils 530 mg gepreßt, von denen jede 400 mg des erfxndungsgemäßen Wirkstoffes Verbindung E enthielt.

Formulierung 2 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form von

Tabletten

1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-

4-en (Verbindung A) 150 mg/Tablette 0,600 kg

mikrokristalline Cellulose 32 mg/Tablette 0,128 kg

sprühgetrocknete Lactose 15O mg/Tablette 0,600 kg

Stearinsäure 3 mg/Tablette 0,Q12 kg

335 mg/Tablette 1,340 kg

Die Bestandteile wurden durch ein Sieb mit einem Sieböffnungsdurchmesser (Apertur) von 1,00 mm vorgesiebt und dann innig
miteinander vermischt. Dann wurde die Mischung mit Hilfe einer konventionellen Tablettierungsvorrichtung zu insgesamt 4000
Tabletten gepreßt, wobei jede Tablette ein Gewicht von 335 mg besaß und 150 mg des erfindungsgemäßen Wirkstoffes Verbindung A enthielt.

809850/0975

2S24372

Formulierung 3 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form von

Kapseln

Eine entsprechende Mischung wurde durch inniges Vermischen der folgenden Bestandteile hergestellt;

1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-npropyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [1_r2-aJ

£1 ,2,4]benzotriazin [Verbindung E) 400 mg/Kapsel 0,800 kg

Stärke 192 mg/Kapsel 0,384 kg

Lactose 192 mg/Kapsel 0,384 kg

Stearinsäure 8 mg/Kapsel 0_r0i6 kg

Talk 8 mg/Kapsel O,Oi6 kg

800 mg/Kapsel 1,6OO kg

Aus dieser Mischung wurden Granulate gebildet und diese Granulate in 20OO Kapseln abgefüllt, von denen jede 800 mg der
Mischung und entsprechend 400 mg der erfindungsgemäßen Verbindung E enthielt.

Formulierung 4 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form von

Kapseln

Eine entsprechende Mischung wurde durch inniges Vermischen der folgenden Bestandteile hergestellt:

1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-

(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-

4-en (Verbindung A) 150 mg/Kapsel 0,600 kg

Lactose 76,4 mg/Kapsel 0,3O56 kg

809850/0975

Maisstärke 76,4 mg/Kapsel 0,3056 kg

Stearinsäure 3,6 mg/Kapsel 0,0144 kg

Talk 3,6 mg/Kapsel O,0144 kg

310 mg/Kapsel 1,2400 kg

Aus der Mischung wurden Granulate gebildet, die mit Hilfe einer geeigneten Kapselfüllmaschine in 4000 Kapseln abgefüllt wurden, wobei jede Kapsel 31O mg der Mischung und entsprechend 150 mg der erfindungsgemäßen Verbindung A enthielt.

Formulierung 5 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form von

Suppositorien

Es wurden folgende Bestandteile verwendet:

Wirkstoff: 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propyl-

S-oxo-S-dimethylamino-SI-inethyl-pyrazolid-^-

eno [1 ,2-a] [1 ,2 ,4] benzotriazin (Verbindung E) 1,6 kg

Synthetisches Wachs (aus Mono-, Di- und

Triglyceriden) 6,4 kg

Das Wachs wurde in einem geeigneten Kessel geschmolzen und dann der gemahlene Wirkstoff zugemischt. Die geschmolzene Mischung wurde dann in geeignet geformte Gießformen gefüllt, aus denen man nach dem Festwerden 4000 Suppositorien von jeweils 2 g erhielt, die jeweils 400 mg des Wirkstoffes enthielten.

809850/0975

I-'ormu] iorung 6 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form von

Suppositorien

Es wurden folgende Bestandteile verwendet:

Wirkstoff: 1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung A) 0,3 kg

synthetisches Wachs (aus Mono-, Di- und

Triglyceriden) 3,7 kg

Das Wachs wurde in einem geeigneten Kessel geschmolzen und dann der gemahlene Wirkstoff zugemischt. Die geschmolzene Mischung wurde in geeignet gestaltete Formen abgefüllt.'Man erhielt auf diese Weise nach dem Festwerden 2000 Suppositorien, von denen jedes 2 g wog und 150 mg des Wirkstoffes enthielt.

Formulierung 7 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form einer

injizierbaren Suspension

Der Wirkstoff 1 -(2'-Acetoxy-benzoyloxy) -^-ndimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [i,2,-aJ [1 ,2,4]benzotriazin (Verbindung E) wurde gemahlen und in einem geeigneten isotonischen Injektionsmedium suspendiert. Dann wurde die Gesamtpartie im Autoklaven sterilisiert und unter aseptischen Bedingungen in dosierten Portionen in Ampullen abgefüllt. Jede Ampulle enthielt 400 mg der Verbindung E.

809850/0975

Formulierung 8 Pharmazeutische Zusammensetzung in Form einer

injizierbaren Suspension

Der Wirkstoff 1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-{2'-acetoxybenzoyloxy)-pyrazolid-4-en (Verbindung A) wurde gemahlen und in einem geeigneten isotonischen Injektionsträger suspendiert, die Gesamtpartie im Autoklaven sterilisiert und unter aseptischen Bedingungen in dosierten Portionen in Ampullen abgefüllt. Jede Ampulle enthielt 150 mg der Verbindung A.

Nachfolgend werden anhand bevorzugter erfindungsgemäßer 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen einige Auswertungen zusammengestellt, die zeigen, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen frei von unerwünschten Nebenwirkungen sind und ausgezeichnete entzündungswidrige und/oder analgetische Eigenschaften besitzen.

Beurteilung der Stabilität der erfindungsgemäßen Verbindungen Zur Beurteilung der Stabilität der erfindungsgemäßen Verbindungen im Magen-Darm-Trakt wurden simulierte Magen- und Darmflüssigkeiten wie folgt hergestellt:

Herstellung einer simulierten Magenflüssigkeit 2g Natriumchlorid wurden mit 7,O ml konzentrierter Salzsäure gemischt und die Mischung anschließend mit destilliertem Wasser auf 1000 ml aufgefüllt. Man erhielt eine simulierte Magenflüssigkeit mit einem pH-Wert von etwa 1,2.

809850/0975

Herstellung von simulierter Darmflüssigkeit

6,8 g einbasisches Kaliumphosphat wurden in 250 ml Wasser gelöst und anschließend hierzu eine Mischung von 190 ml 0,2-molarer Natriumhydroxidlösung und 400 ml Wasser zugefügt. Der pH-Wert der erhaltenen Lösung wurde mit O,2-molarer Natriumhydroxidlösung auf 7,5 eingeregelt und die Lösung mit destilliertem Wasser auf 1000 ml verdünnt. Man erhielt auf diese Weise eine simulierte Darmflüssigkeit.

Die Prüfung auf Stabilität wurde wie folgt durchgeführt: Je 10O mg der zu prüfenden Verbindungen wurden in jeweils 5 ml der betreffenden simulierten Flüssigkeit suspendiert und die Suspensionen 16 Stunden bei 37°C geschüttelt. Anschließend ließ man die Mischung ruhen. Die überstehende Flüssigkeit wurde auf Silicagel-Dünnschichtplatten aufgetragen und mit einer Mischung von Chloroform/Methanol im Verhältnis 90:10 entwickelt. Die Mischung wurde anschließend mit 5 ml Chloroform extrahiert und die chloroformhaltige Mischung durch phasentrennende Papiere filtriert, durch die nur die Chloroformlösung passieren konnte. Diese Chloroformlösung wurde ebenfalls auf mit Kieselgel beschichteten Dunnschichtchromatografieplatten aufgetragen und mit Chloroform/Methanol im Verhältnis 90:10 entwickelt.

Aus den auf diese Weise durchgeführten Versuchen sowohl mit der simulierten Magen- als auch der simulierten Darmflüssigkeit

809850/0975

geht hervor, daß in beiden Medien nur eine vernachlässigbare Zersetzung erfolgt. Daraus folgt, daß alle untersuchten erfindungsgemäßen Wirkstoffe praktisch keine Störungen des Magens verursachen, wenn sie oral verabreicht werden.

Beurteilung der.Magenverträglichkeit in Ratten

Die Magenunverträglichkext ist ein besonderes Problem, das bei der oralen Verabreichung der Klasse von. Verbindungen mit analgetischen und entzündungshemmenden Eigenschaften auftritt. Der therapeutische Index (oder der Sicherheitsfaktor) solcher Verbindungen wird am besten über den Magenverträglichkeitstest in Ratten festgestellt.

Dementsprechend wurde eine der erfindungsgemäß bevorzugten, typischen Verbindungen auf seine akute Magenverträglichkeit Jn Ratten geprüft (Dauer: 4 Stunden), indem man die orale Verabreichung in zwei verschiedenen Dosierungsstufen vornahm und gleichzeitig mit einer äquimolaren Mischung der beiden entzündungswidrigen Wirkstoffe verglich, die die beiden Bausteine des erfindungsgemäßen, getesteten Esters sind.

Damit die Versuche unter Bedingungen durchgeführt werden konnten, die den Unterschied zwischen den erfindungsgemäßen Ver-. bindungen und den bekannten, als Vergleichsstandard verwendeten Verbindungen in reproduzierbarer und eindeutiger Weise fest-

809 850 / 0 97 5 -

zustellen erlaubten, wurde vorher die Wirkung der Vergleichswirkstoffe in Beziehung zu ihrer Dosis ebenfalls in einer Serie von Vorversuchen geprüft, um die geeigneten Dosierungsmengen zu finden.

Das Prüfungsverfahren

Gruppen von jeweils 10 männlichen Ratten (Charles River) mit einem Körpergewicht von jeweils etwa 180 bis 250 g bekamen etwa 21 Stunden, bevor sie getötet wurden, kein Putter mehr. Die Wirkstoffe wurden oral verabreicht, und zwar als eine Suspension in 1 % Traganthgummi. Vier Stunden nach der Verabreichung wurden die Tiere durch Ausblutenlassen am Hals getötet. Dann wurden die Mägen entfernt, geöffnet, vorsichtig mit einer Salzlösung gewaschen und dann zur weiteren Prüfung flach an ein Brett geheftet.

Bei der Prüfung wurden die oberflächlichen Schleimhautblutungen nach ihrer Schwere, entsprechend ihrem Umfang und ihrer Anzahl, klassifiziert in Zonen von Nadelspitze-, Flecken- oder umfangreicherer Größe.

Blutende Schädigungen, die die Schleimhaut durchdrungen hatten (submuköse Schädigungen) wurden als Geschwüre betrachtet, die ebenfalls nach ihrer Schwere entsprechend ihrem Umfang und ihrer Anzahl eingestuft wurden: Flecken (1 bis 2 mm groß) und

609850/0975

Furchen (von länglicher Ausdehnung). Perforationen wurden normalerweise nicht beobachtet.

Die Tierkörper wurden dann nach der Schwere der vorhandenen Symptome eingeordnet, wobei vorhandene Geschwüre (submuköse Schädigungen) in der Regel als schwerwiegender bewertet wurden als oberflächliche Schleimhautblutungen. Die Kontrolltiere zeigten regelmäßig gewisse Anzeichen von "Hyperämie", die einem Blutandrang erzeugenden Zustand (Kongestion) des Gefäßsystems im Augenblick des Tötens entsprachen und daher nicht einer funktioneilen (organisch bedingten) Hyperämie zuzurechnen waren. Sie wurden daher auch nicht als Anzeichen einer Magenirritation angesehen.

Statistische Vergleiche zwischen spezifischen Testgruppen wurden nach der Einheitstestmethode von Mann und Whitney angestellt, die auf der eingestuften Schwere der beobachteten Schädigungen basierten. Die Ergebnisse wurden als Prozentsatz der Versuchstiere angegeben, die entweder nur oberflächliche Schleimhautblutungen oder submuköse Schädigungen (Geschwüre) in der Regel zusammen mit Schleimhautblutungen zeigten, bezogen auf die Gesamtzahl der Versuchstiere einer Gruppe, und in vereinfachter Form in Tabelle I zusammengestellt.

809850/0975

Tabelle 1

Substanz

Kontrollgruppe

-J Verbindung Ph cn + Aspirin-Mischung

Anzahl Anzahl der Dosis der Ver- normalen mg/kg suchsratten Mägen und

Anzahl der hyperämischen Mägen

Anzahl der Ratten mit Magens chädigungen

~x) „„...„ *)

Blutungen mukös

Ulkus subraukös

Gesamtzahl
der

Schadensfälle

Einheitstest
gegen
Kontrollgruppe

60)

36)

12 12

12 2

1+5 + 1

1 + 2

0%
83%

P< 0.001

Einheitstest gegen Verbindung Ph oder Mischungen von Verbindung A und Aspirin

Kontrollgruppe	80	8	4 -	2 + 1 +	1	1 H	0%	P	= 0.005	P = O.OO7
Verbindung Ph	120	8	1 -	2 +	1	1 -	75%	P	= 0.002	P<0.005
Verbindung Ph	122	8	1				87%		NS
Verbindung A	183	8	3 -				0%		NS
Verbindung A	8	1 -				0%
	h 4	l· 1
l· 1	h 3

l· 5
i- 7

Die Stellung der Ziffern von links nach rechts gibt die Zahl der zunehmend schwerer werdenden Schädigungen an. qq

ro

Verbindung A	91,	6	12	4	+ 8	2	+ 6 +	1	1	+ 2	0%	NS	P <0.00l

Kontrollgruppe Aspirin	180		14 18	14 6						0% 67%	P<O.OO1	—

to

Anmerkungen zu Tabelle I:

(a) Verbindung Ph = 1,2-Diphenyl-3,5-dioxo-4-n-butyl-pyrazolidin

(b) Verbindung A = 1^-Diphenyl-S-oxo-^-n-butyl-S-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en

(c) Aspirin = 2-Acetoxy-benzoesäure

Die Ergebnisse in Tabelle I zeigen, daß im Vergleich mit Verbindung Ph allein oder im Gemisch mit Aspirin und sogar mit
Aspirin allein die erfindungsgemäße Verbindung A eine bemerkenswert gute Verträglichkeit in Bezug auf die Magenschleimhaut
aufweist bei einer Dosis bis zu 183 mg/kg. Sie ist damit weit besser verträglich als das in vergleichbaren Dosierungen verabreichte Aspirin.

Ähnliche Prüfungen mit anderen erfindungsgemäßen Verbindungen bestätigen deren gute Magenverträglichkeit. Insbesondere
wurden akute Magenverträglichkeitstest durchgeführt, bei
denen die Wirkungen von 1-(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [j /2-a] Jj ,2,4] benzotriazin (Verbindung E) mit den Wirkungen von 5-(Dimethylamino)-9-methyl-2-n-propyl-1H-pyrazolo-[i ,2-a] [i ,2,4]benzotriazin-1,3(2H)-dion (im folgenden kurz Verbindung Az genannt) verglichen wurden. In Vorversuchen ermittelte man das geeignete

809850/0975

Zeitintervall zwischen der Verabreichung der Dosis und dem Töten der Versuchstiere mit 6 Stunden. In den anschließenden Tests wurden die zu prüfenden Verbindungen gemahlen und in 1 %igem Traganthgummi-Trägermaterial suspendiert. Jeweils eine einzige Dosis von 1 mMol/kg in einem Volumen von 10 ml/kg Körpergewicht wurde den Ratten einer Gruppe verabreicht. Eine Kontrollgruppe erhielt nur die Trägersubstanz verabreicht. Die Ergebnisse sind in Tabelle II zusammengestellt.

	Dosis mg/kg	Anzahl d. Versuchs ratten	Tabelle	II	Anzahl d. Ratten mit Magenschä digungen . Blutungen (mukös)	Gesamtzahl der Schadens fälle
Substanz .	_	8	Anzahl d. normalen d.hyper- ämischen Mägen		keine
Kontroll gruppe	336	8	3 + 5	2 + 1	37 %
Verbin dung Az	462	5	3 + 2		keine
Verbin dung E		3 + 2

Anmerkungen: Die Stellung der Ziffern von links nach rechts gibt die Zahl der zunehmend schwerer werdenden Schädigungen an.

Die Ergebnisse in Tabelle II zeigen, daß im Vergleich mit der wohlbekannten Verbindung Az beim erfindungsgemäßen Wirkstoff E die Magenschädigungen stark reduziert sind.

609850/0975

Beurteilung der pharmakologischen Wirkungen

Drei verschiedenartige Prüfungen werden in der Regel durchgeführt, um die Wirksamkeit von analgetischen und entzündungshemmenden Wirkstoffen zu beurteilen. Auch im vorliegenden Fall wurden diese Tests durchgeführt, und zwar zunächst mit Verbindung A = 1 ,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5- (2 ' -acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en im Vergleich mit der bekannten Verbindung Ph = 1 ,2-Diphenyl-3 ,S-dioxo-'l-n-butyl-pyrazolidin, und danach mit der Verbindung E = 1 -(2'-Acetoxy-benzoyloxy)-2-n-propyl-3-oxo-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-2-eno ["1 ,2-aJß ,2,4]-benzotriazin im Vergleich mit der bekannten Verbindung Az = 5-Dimethylamino-9-methyl-2-n-propyl-1H-pyrazolo [1 ,2-a][i ,2,4]-benzotriazin.

1a) Adjuvantischer Arthritis-Test (Schrägsieb-Test) in Ratten

(Verbindung A)

Die adjuvantische Arthritis wurde in mehreren Gruppen von Ratten durch Injizieren von mykobakteriellen Adjuvantien künstlich erzeugt. Dabei wurden an von der Injektionsstelle entfernten Körperstellen etwa 10 bis 15 Tage nach der Injektion Entzündungsherde hervorgerufen, die nach etwa 30 Tagen wieder abnahmen.

Eine Gruppe von Ratten blieb als Kontrollgruppe unbehandelt. Andere Gruppen von Ratten wurden 18 Tage lang täglich mit einer

809850/0975

oralen Dosis behandelt, und zwar mit verschiedenen Mengen der Stammverbindung, nämlich der Verbindung Ph, die bei dem Versuch als Standard diente, und der zu prüfenden Verbindung A. In jedem Falle wurde der Wirkstoff den Ratten in einer Lösung verabreicht, die 1 Teil Polyoxyethylen-Ölsäureglycerinester, aufgefüllt auf 5 Teile mit 1 %iger wässriger Traganthgummilösung, enthielt, zu der 1 %iges Ethanol zugefügt wurde, falls dies aus Löslichkeitsgründen erforderlich war. Von diesem Lösungsmittelträger wurden im allgemeinen 5 ml pro kg Ratte verabreicht. Die gleiche Trägerlösung ohne den Wirkstoff wurde in der gleichen Menge den Ratten der Kontrollgruppe verabreicht.

Die Behandlung wurde über 18 Tage fortgesetzt, und während dieser Zeit wurden die Ratten in gewissen Abständen mit Hilfe des üblichen Schrägsieb-Tests geprüft. Bei dieser Prüfung wird die Greiffunktion der Ratten beurteilt, indem man sie auf ein Maschendrahtsieb stellt, das um einen Winkel von von der horizontalen zur vertikalen Richtung drehbar gelagert ist, und falls erforderlich, sogar darüber hinaus. Der Winkel, bei dem die zu prüfende Ratte den Halt verliert und vom Sieb herunterfällt, wird bestimmt. Je größer der Neigungswinkel ist, bei dem die Ratte vom Sieb fällt, um so größer ist die Kraft, mit der sie sich auf dem Sieb hält, und um so weniger hat ihre Greiffunktion unter der arthritisähnlichen Erkrankung

809850/0975

gelitten bzw. um so größer ist die Linderung der durch die Krankheit hervorgerufenen Schmerzen durch die Prüfsubstanz.

Die Ratten der Kontrollgruppe erhielten über den entsprechenden Zeitraum (18 Tage) nur das Trägermaterial in entsprechender Dosierung verabreicht. Eine zweite Gruppe von Ratten erhielt 18 Tage lang 40 mg/kg pro Tag an Verbindung Ph. In dieser Gruppe starben 1/10 der Versuchstiere bis zum 9. Tag. Einer dritten Gruppe wurden 80 mg/kg pro Tag der Verbindung Ph verabreicht. In dieser Gruppe starb jedoch keines der Versuchstiere, was zeigt, daß die Sterbeziffer in der 2. Gruppe ein rein zufälliges Ergebnis war, das ohne Bedeutung ist. Eine vierte Gruppe von Ratten erhielt 61 mg/kg der Verbindung A. Hierbei entsprechen 61 mg/kg der Verbindung A als molares Äquivalent einer Dosis von etwa 40 mg/kg der Verbindung Ph.

Die auf diese Weise erhaltenen Ergebnisse sind grafisch in Fig. 1 dargestellt, wobei die Kurven für die fortschreitende Verschlechterung der Greiffunktion als Neigungswinkel des Siebes gegen die Zeit (in Tagen) für jeder der geprüften Verbindungen und für die Blindproben aufgetragen worden sind.

Aus Fig. 1 ergibt sich, daß die Verbindung A bei einer Dosierungsmenge von 61 mg/kg pro Tag im Greiffunktionstest eine etwa 1,5 mal so große Wirkung zeigt, wie eine äquimolare Menge der Verbindung Ph. Bei der Behandlung mit der erfindungsgemäßen

809850/0975

Verbindung A blieben alle Ratten am Leben, dagegen starb ein Versuchstier bei der Behandlung mit Verbindung Ph.

1b) Adjuvantischer Arthritis-Test (Körpergewicht) in Ratten

(Verbindung A)

Die experimentelle Ermittlung unbekannter Nebenwirkungen ist schwieriger als die Ermittlung der Magenirritation. Ihr Vorliegen kann jedoch durch eine festgestellte Abnahme des Körpergewichts angenommen werden. Um deshalb sicherzustellen, daß die Ergebnisse, die mit dem Schrägsieb-Test erhalten wurden, nicht durch andere Nebenwirkungen der zu prüfenden Verbindung unzulässig wiedergegeben werden, wurde das Körpergewicht der untersuchten Ratten täglich bestimmt und das durchschnittliche Gewicht jeder Gruppe von Ratten in Fig. 2 dargestellt. Aus dieser Figur ist ersichtlich, daß die systemische Wirkung der Verbindung A auf das Körpergewicht größer ist als die doppelte molare Menge der Verbindung Ph.

1c) Adjuvantische Arthritis (akute Phase) in Ratten (Verbindung E)

Die entzündungswidrige Wirksamkeit der Verbindung E wurde durch eine subakute Prüfung ermittelt, indem man Ratten mit einer dreimaligen Dosis behandelte, wobei man das folgende Verfahren durchführte:

809850/0975

Gruppen von jeweils sechs weiblichen Ratten (Charles River) von 17Og Körpergewicht, die normal ernährt wurden, erhielten jeweils eine subplantare Injektion von 0,5 mg Mycobacterium butyricum in 0,1 ml sterilem Paraffinöl in die rechte Hinterpfote. Das sich in der Folge bildende ödem wurde in Intervallen gemessen mittels einer differentialen Volumenmessung (Plethysmografie) der injizierten und der unbehandelten Pfoten unter Verwendung einer Ugo-Basile-Vorrichtung. Das folgende Behandlungsschema wurde dabei angewendet:

0. Tag - 09.00 Uhr: 1. Wirkstoffdosis

10.00 Uhr: mykobakterielles Adjuvans, s.c. Injektion 15.00 Uhr: Volumenbestimmung des Ödems

1. Tag - 09.00 Uhr: 2. Wirkstoffdosis

14.00 Uhr: Volumenbestimmung des Ödems

2. Tag - 09.00 Uhr: 3. Wirkstoffdosis

14.00 Uhr: Volumenbestimmung des Ödems

3. Tag - 09.00 Uhr: Volumenbestimmung des Ödems (keine

weitere Medikation)

Folgende Wirkstoffe wurden geprüft:

Verbindung E = 1 - (2 ' -Acetoxy-benzoyloxy) ^-n-propyl-S-oxo-

5-dimethylamino-9-pyrazolid-2-eno [1 ,2-a][1 ,2,4]-benzotriazin

809850/0975

Verbindung Az = S-Dimethylamino-Q-methyl-^-n-propyl-IH-pyrazolo-

[1 ,2-a] [1 , 2,4]benzotriazin-1 ,3 (2H) -dion

Die Wirkstoffe wurden den Versuchstieren oral verabreicht, und zwar die Verbindung Az in Dosierungen von 0,1, 0,2 und 0,4 mMol/kg und die Verbindung E in einer Dosierung von 0,2 mMol/kg, die als statistisch bedeutend wirksame Dosis festgestellt worden war. Die Kontrollgruppe erhielt natürlich keine Medikation.

Die auf diese Weise erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle III zusanunenges teil t.

809850/0975

Tabelle III

CD O CO 00 cn ο

CO

cn

Behandlung	Dosierung	mg/kg	Hauptödem-Volumen (ml) Reduktion des Ödems in Prozent Statistische Auswertung, verglichen	Tag 1	mit der	Kontrollgruppe	Tag 3	0.19
	mMol/kg	-	Tag 0	0.75 +_ 0.08	Tag 2		1.00 +_	0.04
Kontrollgruppe	-	33.6	O.43+O.O3	0.70 + 0.06 7 %	0.87 +	0.14	0.81 + 19	0.12
Verbindung Az Dihydrat	0.1	67.2	0.41 +_ 0.04 5 %	0.65 +_ 0.08 13 %	0.68 +_ 22	0.06	0.78 +_ 22	0.10
Verbindung E	0.2	134.4	0.33 +_ 0.04 23 %	0.46 +_ 0.08 39 % Ρ<Ό.05	0.62 +_ 29	O.O9	0.61 +_ 39	0.09 ^%ro CO
0.4	92.5	0.27 +_ 0.04 37 % P <0.0l	0.63 + 0.09 16 %	0.48 +_ 45 P<0.05	0.09	0.86 + 14
0.2	O.36 + 0.04 16 %	0.76 + 13	0.08

Die Ergebnisse in Tabelle III zeigen, daß die Verbindung Az eindeutig dosierungsabhängige Wirkungen im Bereich von O,1 über 0,2 bis 0,4 mMol/kg zeigt: Die Gesamtwirkungen, zum Beispiel die Summe der Prozentsätze der an den Tagen 1 bis 3 beobachteten Hemmung des Ödems, betrugen 53 %, 87 % und 160 %, bezogen auf die oben angegebenen angewandten Dosierungen. Verbindung E war mit einem Prozentsatz der Gesamtwirkung von 59 % etwa weniger wirksam, nämlich angenähert äquivalent der Wirkung einer 0,5-molaren Menge der Verbindung Az.

2a) Antipyretischer Test gegen Hefe-induzierte Hyperthermie

in Ratten (Verbindung A)

Es wurde die übliche Methode angewandt, bei der Gruppen von Ratten (jede Gruppe bestand aus 10 Tieren) mit Hefe injiziert wurden. Unmittelbar nach der Injektion wurden unterschiedliche Dosierungen der Verbindung A und zu Vergleichszwecken von Aspirin und von einer Mischung aus Aspirin mit Verbindung Ph den verschiedenen Gruppen von Ratten oral verabreicht, ausgenommen die Kontrollgruppe, die nur den pharmazeutischen Träger erhielt.

Die Körpertemperatur der Versuchsratten wurde über einen Zeitraum von acht Stunden nach der oralen Verabreichung des Wirkstoffes sorgfältig registriert. Die" Ergebnisse sind in den Figuren 3 und 4 grafisch dargestellt.

809850/0975

Man ersieht daraus, daß die Verbindungen in folgenden Dosierungen untersucht wurden:

Verbindung A: 30,5 mg/kg, 61 mg/kg, 122 mg/kg und 244 mg/kg;

Aspirin: 61 mg/kg; Verbindung Ph: 20 mg/kg und 40 mg/kg;

eine Mischung von 12 mg/kg Aspirin und 20 mg/kg Verbindung Ph.

Die Verbindung A besitzt demnach eine dosierungsabhängige Wirksamkeit im Bereich von 30 bis 120 mg/kg, mit einem relativ langsamen Anfang, verglichen mit den Wirkungen von Aspirin oder einer Mischung aus Aspirin und Verbindung Ph.

2b) Antipyretischer Test gegen Hefe-induzierte Hyperthermie

in Ratten (Verbindung E)

Es wurde im wesentlichen dasselbe Verfahren, das unter 2a) beschrieben wurde, benutzt, mit Gruppen von jeweils sieben männlichen Ratten mit einem Körpergewicht von 215 bis 235 g. Die Ergebnisse, die einen Vergleich von Verbindung E mit Verbindung Az enthalten, sind in Tabelle IV zusammengestellt.

809850/0975

lung

Dosierung

-

Tabelle

0

1 Std

•

2 Std.

IV

4 Std.

5 Std.

6 Std.

7 Std.

I

Kontroll
gruppe

mMol/kg mg/kg

84,1

Hauptkörpertemperatur (
Statistische Auswertung

3
)

39,7
± 0,1

1

39,5
± 0,2

39,6
± 0,13

39,7
± 0,07

39,8
± 0,07

39,9
± 0,12

cn
I

Verbin
dung Az
(Dihy-

-

168,2

0 Std

1

39,4
± 0,1
(- 0,3

5
)

39,0
± 0,16
(- 0,5)

39,2
± 0,22
(- 0,4)

39,1
± 0,09
(- 0,6)
P«c0,001

39,0
^± 0,16
(- 0,8)

39,2
± 0,13
(- 0,7)
P-cO,01

drat)

0,25

231 ,2

39,5
± 0,1

1
)

39,4
± 0,1
(- 0,3

9
)

39,0
± 0,28
(- 0,5)

39,0
± 0,10
(- 0,6)

39,1
± 0,12
(- 0,6)
P<0,001

39,3
± 0,12
(- 0,5)
P<0,01

39,3
± 0,11
(- 0,6)
P «CO,01

Verbin
dung E

0,5

39,6
± 0,1
(+ 0,1

39,4
± 0,1
(- 0,3

1
)

39,2
± 0,15
(- 0,3)

°C) - SEM (Fiebersenkung ⁰C)
, verglichen mit der Kontrollgruppe

39,0
± 0,08
(- 0,6)
P-cO,01

39,3
± 0,13
(- 0,4)
P^O,02

39,4
± 0,17
(- 0,4)
P-CO,05

39,5
± 0,18
(- 0,4)

80985C

0,5

39,5
± 0,1
(0)

3 Std.

1/0975

39,6
± 0,1
(+ 0,1

39,5
± 0,14

39,1
± 0,13
(- 0,4)

39,1
± 0,21
(- 0,4)

39,0
± 0,12
(- 0,5)
P-cO,05

Aus Tabelle IV geht hervor, daß Verbindung E bei einer Dosierung von 0,5 itiMol/kg eine antipyretische Wirksamkeit besitzt, die nur wenig niedriger liegt als die der Verbindung Az.

3a) Der Randall-Selitto-Test in Ratten (Verbindung A) Es wurde die übliche Technik angewandt, bei der die verschiedenen, oben genannten Testverbindungen Gruppen von jeweils 10 Ratten oral verabreicht wurden, 30 Minuten später wurde jede Ratte in einer der Hinterpfoten mit Hefe injiziert. Eine Kontrollgruppe von Ratten erhielt nur die pharmazeutische Trägersubstanz.

Um die Wirkung dieser Behandlung auf die Schmerzschwelle beurteilen zu können, wurde ein Druck sowohl auf die injizierte als auch auf die unbehandelte Hinterpfote der Versuchstiere ausgeübt. Die Schmerzschwelle wurde als Druck festgestellt, bei dem die Ratte zurückzuckte. Die Werte für jede Ratte wurden in Prozent des Schmerzschwellendrucks an der injizierten Hinterpfote gegen denjenigen an der unbehandelten Hinterpfote ausgedrückt.

Diese Schmerzschwellen-Prozentsätze wurden in Zeitintervallen von 3, 5,7 und 24 Stunden nach der Injektion bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle V zusammengestellt.

809850/097B

Tabelle V Randall-Selitto-Test in männlichen Ratten

Schmerzschwellenwert in % der unbehandelten Hinterpfoten-Druckwerte Statistische Auswertung gegen die Kontrollgruppe

Zeitraum seit Injizierung der Hefe (seit Verabreichung der Testverbindung)

Q Verabreichte Menge in to Verbindung mg/kg co

κ on τ TT) iip> — <i - α _ ·-> « / — α \ α -ι — ν α iy - α _ r ι

_ο Kontrolle

2 "Ph" ' 30

"Ph" 60

"A" 23

"A" 46

"A" 91

3 (3,!	Std. 5 Std.)	+	+	4,5	5 Std. (5,5 Std.)	+	+ :0,	4,1	7 (7,:	Std. 5 Std.)	+	2,4	24 (24	Std. ,5 Std.)
35	+	53 ± P<0,	4,4	37	55 ± P -ZO₁	+	6,5 ,05	43	+	+	4,1	52	- 4,0
47	+	46	4,7 ,01	60	+	5,1 ,01	46	+	58 ± P<:0,	3,7 ,001	58	± 4,3 "
54 ± P<0,	4.7	42	54 ± P<0,	4,1	64 ± P<0₍	5,2	61	± 4,1
43	2,6 ,01	49-	5,0	51	3,8	53	± 4,7
6,2	5,7 ,05	47	3,6 ,01	49	± 4,2
52	± 2,5

Wie aus der Tabelle V zu entnehmen ist, wurde die Verbindung A in einer Dosierung von 23 mg/kg, 46 mg/kg und 91 mg/kg pro Tag geprüft und mit Verbindung Ph in einer Dosierung von 30 mg/kg und 60 mg/kg pro Tag verglichen. Eine Menge von 46 mg/kg der Verbindung A ist 30 mg/kg der Verbindung Ph äquimolar. Die Ergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäße Verbindung A den gleichen analgetischen Effekt wie die Verbindung Ph bei den niedrigeren geprüften Dosierungen besitzt. Bei der höchsten verabreichten Dosis von 91 mg/kg ist nach drei Stunden Verbindung A weniger wirksam als die äquimolare Dosis von 60 mg/kg der Verbindung Ph, was einem sehr langsamen Einsetzen der Wirkung der Verbindung A entspricht.

3b) Der Randall-Selitto-Test in Ratten (Verbindung E) Es wurde die gleiche Technik angewandt, wie sie in 3a) beschrieben ist, wobei man Gruppen von jeweils 10 weiblichen Ratten mit einem Körpergewicht von 135 bis 155 g einsetzte und die analgetischen Eigenschaften der Verbindung E mit denen der Verbindung Az verglich. Die Ergebnisse sind in Tabelle VI zusammengestellt.

809850/0975

Tabelle VI

3 Stunden

entzünOO O CD 00

co <ϊ cn

	Dosis	normale	dete
Substanz	inMol/kg	Pfote	Pfote
Kontroll
gruppe	-	12,8	5,5
		+ _{1 9}	±0,7
Verbin
dung Az
(Dihydrat)	0,1	17,2	9,3
		±2,0	± 1,3

0,2

13,8 ±2,0

45

54

5 Stunden

entzünnormale dete Pfote Pfote

12,7

13,9

±3,7 ± 1,9

P <:0,05 P-CO,05

10,0 ¹ 2,4

67

16,4

± 5,1 ± 1,9 P<0,001

5,2

7,0
± 1,2

10,7
± 1,1

42

51

66

Stunden

entzünnormale dete Pfote Pfote

12,9

± 0,6 ±2,6 - 1,9

12,9

± 4,6 ± 1,5

,7

- 4,6 - 1,1 P<0,001 P<0,001

5,3

7,2

43

± 0,7 ± 2,5

56

+	1	,1	± 4	,1	1
			P <0	,02	CTl
					CTl
	6	,8	58		I
+	0	,7	± 3	,6

Verbindung E

0,2

15,7 ■ 1,9

8,8

± 1,1 P<0,05

59

12,4

i 5,2 Ξ 1,4 ι,05

6,5
± 0,7

55

11,1

± 3,5 ± 1,2

6,6

60

± 0,9 ± 3,3 P<0,001

ro

CO TO

LO

ro

Aus Tabelle VI geht hervor, daß Verbindung E etwas weniger wirksam als die Verbindung Az ist. Sie ist bei einer Dosierung von 0,2 mMol/kg etwa 0,5 mal so wirksam.

Beurteilung des therapeutischen Index

Aus der relativen Magenverträglichkeit, wie sie aus Tabelle I hervorgeht, und der relativen entzündungswidrigen Wirkungen, die aus Fig. 1 hergeleitet werden können, ist es möglich, im Vergleich mit Verbindung Ph eine relative Trennung der entzündungswidrigen Wirkung von der gastrischen Toxizität der Verbindung A herzuleiten, wie in Tabelle VII angegeben.

809850/0975

Tabelle VII

relativer Sicherheitsvorteil gegenüber dem
Vergleichswirkstoff

	Wirkstoff Vergleichswirkstoff	Verbin dung Ph	entzündungs	relative	relative Wirksamkeit
	Verbin dung A	in Ratten erzeugte Arthritis:	widrige Wirksamkeit(a)	gastrische Toxizität(b)	relative gastrische Toxizität
809860/09	(a)	= 1,5 χ molar	1/4 molar orale Dosis	6
	17 Tage je eine

(b) akute (4 Std., eine einzige orale Dosis) gastrische Toleranz in Ratten

(Ti OO

Hieraus kann gefolgert werden, daß die Verbindung A, verglichen auf molarer Basis, nicht nur hinsichtlich einer stärkeren entzündungswidrigen und analgetischen Wirkung bedeutend besser ist als der Vergleichswirkstoff Ph, sondern außerdem eine stark verminderte gastrische Toxizität aufweist. Diese verschiedenen positiven Faktoren zusammen ergeben für die erfindungsgemäße Verbindung A einen sechsmal besseren therapeutischen Index als für den bekannten Wirkstoff Verbindung Ph.

Pharmakologische Vorprüfungen haben ergeben, daß auch die anderen, hier nicht im einzelnen besprochenen erfindungsgemäßen Wirkstoffe qualitativ ähnliche Ergebnisse liefern. Insbesondere zeigen die vorhergehenden Ergebnisse für die erfindungsgemäße Verbindung E, daß sie, verglichen auf molarer Basis, gegenüber dem bekannten Wirkstoff Verbindung Az zwar eine etwas geringere entzündungswidrige und analgetische Wirkung hat, dafür aber wiederum eine deutlich bessere gastrische Toleranz aufweist, so daß auch hier der therapeutische Index mindestens so gut, wahrscheinlich aber besser als der des bekannten Wirkstoffs ist.

sy :kö

809950/0975

Claims

UEXKÜLL & STOLBERG PATENTANWÄLTE

BESELERST^ASSE 4 2000 HAMBURG 52

DR. J.-D.

DR. ULRICH GRAF STOLBERG DIPL.-ING. JÜRGEN SUCHANTKE

Sterwin A.G. (Prio: 2. Juni 1977

GB 23321/77 - 14982) Zeughausgasse 9

Z u g/Schweiz Hamburg, 30. Mai 1978

Pharmakologisch wirksame Ester, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen

Patentan Sprüche

2-Acetoxy-benzoesäureester der 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidine der allgemeinen Formel

V- ■ 0

in der entweder X eine Phenylgruppe und Y eine Phenyl- oder p-Hydroxyphenylgruppe bedeutet oder X und Y zusammen

809850/0976

mit den dazwischen liegenden Stickstoffatomen, an die sie entsprechend gebunden sind, ein mit dem Pyrazolidinring kondensiertes 3-Dimethylamino-7-methyl-[i,2,4]-benzotriazin-Ringsystem darstellen, und Alk eine n-Propyl- oder n-Butylgruppe bedeutet, sowie, soweit möglich, ihre mit pharmakologisch verträglichen Mineral- und organischen Säuren gebildeten Säureadditionssalze.
2. 1,2-Diphenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en.
3. i-Phenyl-2-(p-hydroxy-phenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en.
4. 1-(p-Hydroxy-phenyl)-2-phenyl-3-oxo-4-n-butyl-5-{2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en.
5. 1-Phenyl-2-(p-\2'-acetoxy-benzoyloxyj-phenyl)-3,5-dioxo-4-n-buty1-pyrazolidin.
6. 1-Phenyl-2-(p-[2'-acetoxy-benzoyloxyj-phenyl)-3-oxo-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en.

809850/0975
7. 1—(ρ-\l'-Acetoxy-benzoyloxyJ-phenyl)-2-pheny1-3-OXO-4-n-butyl-5-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-pyrazolid-4-en.
. 1 - (2 ' -Acetoxy-benzoyloxy) ^-n-propyl-S-oxo-B-diinethy 1-amino-9-methyl-pyrazolid-2-eno [1 ,2-a] |j ,2,4] -benzotriazin sowie die Säureadditionssalze davon mit pharmakologisch verträglichen Säuren.
9. 1-Oxo-2-n-propyl-S-(2'-acetoxy-benzoyloxy)-5-dimethylamino-9-methyl-pyrazolid-3-eno [Ϊ , 2-aJ £i ,2,4J-benzotriazin sowie die Säureadditionssalze davon mit pharmakologisch verträglichen Säuren.
10. Verfahren zur Herstellung von 2-Acetoxy-benzoesäureestern von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-derivaten sowie gegebenenfalls ihrer Säureadditionssalze, dadurch gekennzeichnet, daß man ein 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinderivat der allgemeinen Formel

in der entweder X eine Phenylgruppe und Y eine Phenyl- oder p-Hydroxyphenylgruppe bedeuten, oder X und Y zu-

809850/0975

sammen mit den dazwischen liegenden Stickstoffatomen, an die sie entsprechend gebunden sind, ein mit dem Pyrazolidinring kondensiertes S-Dimethylamino-T-methyl-[1,2,4]-benzotriazin-Ringsystem darstellen, und Alk eine n-Propyl- oder eine n-Butylgruppe darstellt, mit 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid in Gegenwart einer Base umsetzt.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung in einem wasserfreien inerten organischen" Lösungsmittel ohne Erhitzen durchgeführt wird.
12. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß als inertes Lösungsmittel ein organisches Lösungsmittel, wie substituierte aromatische Kohlenwasserstoffe einschließlich der halogenierten aromatischen Kohlenwasserstoffe, aliphatische Kohlenwasserstoffe, halogenierte aliphatische Kohlenwasserstoffe und aliphatische Äther, allein oder im Gemisch, verwendet wird.
13. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß als Lösungsmittel Chloroform oder Dichlormethan verwendet werden.

809850/0975
14. Verfahren nach den Ansprüchen 10 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß ein tertiäres Amin, insbesondere Pyridin, als Base verwendet wird.
15. Verfahren nach den Ansprüchen 10 bis 14, dadurch gekennzeichnet, daß man in einer Vorstufe das 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid durch Umsetzung von in einem wasserfreien inerten Lösungsmittel gelöster und/oder suspendierter 2-Acetoxy-benzoesäure mit Thionylchlorid herstellt.
16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung bei einer Temperatur im Bereich von Raumtemperatur bis zu 65 C durchgeführt wird.
17. Verfahren nach den Ansprüchen 15 und 16, dadurch gekennzeichnet, daß in der Vorstufe das gleiche Lösungsmittel verwendet wird wie in der nachfolgenden Reaktionsstufe, und daß das erhaltene 2-Acetoxy-benzoesäurechlorid aus dem Reaktionsgemisch nicht vor Durchführung der nachfolgenden Stufe isoliert wird.
18. Verfahren nach den Ansprüchen 15 bis 17, dadurch gekennzeichnet, daß wasserfreies Dichlormethan als Lösungsmittel eingesetzt wird und die Umsetzung durch Kochen unter Rückfluß erfolgt.

809850/0975
19. Verfahren nach den Ansprüchen 15 bis 18, dadurch gekennzeichnet, daß die Reaktanten im wesentlichen im Verhältnis 1 Mol Thionylchlorid pro Mol 2-Acetoxy-benzoesäure eingesetzt werden.
20. Verfahren nach den Ansprüchen 15 bis 19, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung in Gegenwart einer katalytischen Menge N,N-Dimethy!formamid durchgeführt wird.
21. Verfahren zur Herstellung von 2-Acetoxy-benzoesäureestern von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-Derivaten, dadurch gekennzeichnet, daß man ein gemischtes Anhydrid der allgemeinen Formel

CU ,-C-O —-7r "w: C-υ-'-./- LG J _m- λ,

in der AyI eine Alkylgruppe mit 1 bis 20 C-Atomen, eine Arylgruppe mit 6 bis 20 C-Atomen, eine Alkarylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen oder eine Aralkylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen bedeutet, m 0 oder 1 ist und Q ein C-Atom oder, wenn m 0 ist, eine Sulfinylgruppe S=O darstellt, mit einem 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin-derivat der allgemeinen Formel ν

8098 50 /0 9/flB-

in der entweder X eine Phenylgruppe und Y eine Phenyl- oder p-Hydroxyphenylgruppe bedeutet, oder X und Y zusammen mit den dazwischen liegenden Stickstoffatomen, an die sie entsprechend gebunden sind, ein mit dem Pyrazolidinring kondensiertes S-Dimethylamino-T-methyl- £i ,2,4j-benzotriazin-Ringsystem darstellen, und Alk eine n-Propyl- oder eine n-Butylgruppe bedeutet, umsetzt.
22. Verfahren nach Anspruch 21, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung in einem wasserfreien, inerten organischen Lösungsmittel, insbesondere Toluol und/oder Chloroform, durchgeführt wird.
23. Gemischte Anhydride der allgemeinen Formel

0 0 0

!I ti Ii ,

LOJAI _(IV)

worin AyI eine Alkylgruppe mit 1 bis 20 C-Atomen, eine Arylgruppe mit 6 bis 20 C-Atomen, eine Alkarylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen oder eine Aralkylgruppe mit 7 bis 20 C-Atomen bedeutet, m 0 oder 1 ist und Q ein C-Atom oder, wenn m 0 ist, eine SuIfiny!gruppe S=O darstellt.

809850/0975
24. Das gemischte Anhydrid aus 2-Acetoxy-benzoesäure und Ameisensäure.
25. Verfahren nach den Ansprüchen 21 und 22, dadurch gekennzeichnet, daß in einer Vorstufe das gemischte Anhydrid durch Umsetzung von 2-Acetoxy-benzoesäure oder einem ihrer Salze mit einem reaktionsfähigen organischen Chlorid der allgemeinen Formel

0
Ayl[o]_m-Q-Cl (V)

in der AyI, m und Q die oben angegebenen Bedeutungen haben, in Gegenwart einer Base hergestellt wird.
26. Verfahren nach Anspruch 25, dadurch gekennzeichnet, daß als reaktionsfähiges organisches Chlorid eingesetzt wird:

(a) ein Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkaryl-chlorformiat der allgemeinen Formel

0
Ayl.O-C-Cl (Va)

oder

(b) ein sterisch gehindertes Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkarylsäurechlorid der allgemeinen Formel

809850/0975

AyI-C-Cl (Vb)

oder

(c) ein Alkyl-, Aralkyl-, Aryl- oder Alkaryl-sulfonyl-

chlorid der allgemeinen Formel

AyI-S-Cl (Vc)

wobei in diesen Formeln AyI die in Anspruch 23 angegebenen Bedeutungen hat.
27. Verfahren nach den Ansprüchen 25 und 26, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung in einem wasserfreien, inerten organischen Lösungsmittel, wie einem substituierten aromatischen Kohlenwasserstoff, einschließlich einem halogenierten aromatischen Kohlenwasserstoff, und/oder einem halogenierten aliphatischen Kohlenwasserstoff, insbesondere Chloroform, durchgeführt wird.
28. Verfahren nach den Ansprüchen 25 bis 27, dadurch gekennzeichnet, daß ein tertiäres Amin, insbesondere Triethylamin oder Pyridin, als Base eingesetzt wird.
29. Verfahren nach den Ansprüchen 25 bis 28, dadurch gekennzeichnet, daß man das Reaktionsprodukt ajis der ersten

809850/0975

Stufe ohne Zwischenisolierung in der zweiten Stufe einsetzt und in beiden Stufen die Umsetzung in demselben wasserfreien, inerten organischen Lösungsmittel durchführt.
30. Verfahren zur Herstellung von 2-Acetoxy-benzoesäureestern von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen, dadurch gekennzeichnet, daß man ein 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidin der allgemeinen Formel

Ö=< W)

AU

worin entweder X eine Phenylgruppe und Y eine Phenyl- oder p-Hydroxyphenylgruppe darstellt, oder X und Y zusammen mit den dazwischen liegenden Stickstoffatomen, an die sie entsprechend gebunden sind, ein mit dem Pyrazolidinring kondensiertes 3-Dimethylamino-7-methylol ,2,4j-benzotriazin-Ringsystem darstellen, und Alk eine n-Propyl- oder n-Butylgruppe ist, mit einer Lösung von 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid in einem mit Wasser nicht mischbaren Lösungsmittel in Gegenwart einer starken wäßrigen Base umsetzt, wobei das sich

809850/0975

bildende Zweiphasensystem kräftig gerührt wird.
31. Verfahren nach Anspruch 30, dadurch gekennzeichnet, daß als Base eine wäßrige Natriumhydroxidlösung verwendet wird.
32. Verfahren nach den Ansprüchen 30 und 31, dadurch gekennzeichnet, daß als mit Wasser nicht mischbares organisches Lösungsmittel Benzol, Toluol, Chloroform, Dichlormethan oder Diethylather eingesetzt werden.
33. Verfahren nach den Ansprüchen 30 bis 32, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung bei Raumtemperatur oder annähernder Raumtemperatur, jedoch nicht über 30 C, durchgeführt wird.
3 4. 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid.
35. Verfahren nach den Ansprüchen 30 bis 33, dadurch gekennzeichnet, daß man in einer Vorstufe das 2-Acetoxy-benzoesäureanhydrid durch Umsetzung von 2-Acetoxy-benzoesäure mit in einem wasserfreien, keine Hydroxylgruppen enthaltenden, inerten organischen Lösungsmittel gelöstem Carbodiimid bei Raumtemperatur oder annähernder Raumtemperatur, jedoch nicht über 3O C, herstellt.

809850/0975
36. Verfahren nach Anspruch 35, dadurch gekennzeichnet, daß als Carbodiimid ein N,N¹-Di[alkyl/aryl]-carbodiimid der allgemeinen Formel

Z¹ N

C (VII)

Z" N

worin Z¹ und Z" jeweils eine Alkyl-, Cycloalkyl-, Alkaryl-, Aryl- oder Aralkylgruppe mit 6 bis 20 C-Atomen bedeuten, eingesetzt wird.
37. Verfahren nach Ansprüchen 35 und 36, dadurch gekennzeichnet, daß als Carbodiimid das N,N'-D!cyclohexylcarbodiimid verwendet wird.
38. Verfahren nach den Ansprüchen 35 bis 37, dadurch gekennzeichnet, daß als Lösungsmittel Tetrahydrofuran verwendet wird.
39. Pharmazeutische Zusammensetzungen, dadurch gekennzeichnet, daß sie als Wirkstoff ein oder mehrere 2-Acetoxy-benzoesäureester von 4-Alkyl-3,5-dioxo-pyrazolidinen gemäß

den Ansprüchen 1 bis 9 in Verbindung mit einem geeigneten pharmazeutischen Trägermaterial enthalten.

809850/0975
40. Pharmazeutische Zusammensetzungen nach Anspruch 39, dadurch gekennzeichnet, daß der pharmazeutische Träger ein einnehmbarer Arzneimittelträger in Form von Tabletten, überzogenen Tabletten, sublingualen Tabletten oder Pillen, oder ein einnehmbarer Behälter in Form einer Kapsel oder eines Cachets, oder ein einnehmbarer pulvriger Feststoffträger in Form eines Pulvers ist.
41. Pharmazeutische Zusammensetzungen nach Ansprüchen 39 und 40, dadurch gekennzeichnet, daß sie in Form von festen Dosierungseinheiten 150 bis 400 mg des Wirkstoffes enthalten.

009850/0975