DE2605182A1

DE2605182A1 - Arzneimittel gegen tumor

Info

Publication number: DE2605182A1
Application number: DE19762605182
Authority: DE
Inventors: Boris Vassilev Dipl Ch Alexiev; Ivan Ivanov Dr Angelov; Emanuil Alexandrov D Emanuilov; Evgeni Viktorov Dip Golovinski; Liljana Stoilova Dr Med Maneva; Alexander Vassilev Pro Spassov; Stojtscho Borissov Dipl Stoev; Zanko Stefanov Dr M Stojtschev
Original assignee: EZNPK BIOLOG I MEDIKO BIOLOG P
Current assignee: EZNPK BIOLOG I MEDIKO BIOLOG P
Priority date: 1975-02-12
Filing date: 1976-02-10
Publication date: 1976-08-26
Also published as: JPS51148030A; GB1478002A

Description

(Priorität?■12. Februar 1975 - Bulgarien - Nr. 28954)

Die Erfindung betrifft ein Aiititumormittel. Üs ist bekannt, daß in der klinischen Praxis etwa vierzig definierte chemische Verbindungen darstellende Z3^rtostatika angewandt werden _t die zu einigen Hauptgrupj)en gehören, wie alkylierende Zytostatika, Antiiastabolika, Antibiotika und andere. Jedes einzelne der vorhandenen Mittel wirkt auf einige Krebsarten· Doch sehr oft werden diese gegenüber den einzelnen Antituraorrnitteln schnell resistent.

Einige von. diesen Mitteln, v/ie z.B. E - 39» A-139, Colchicine, Dopan> Azaserin und andere v/erden verhältnismäßig schnell wegen ihrer großen Toxizität in der klinischen Praxis abgesetzt.

Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist, ein Zytostatikum bereitzustellen» welches strukturell einen Antimetabolit (Hydrazid des Cystins bzw. des Cysteins) mit einer alkylierenden Gruppe (dieser des Stickstofflosts) verbindet.

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Das Wesen der Erfindung betrifft die Zusammensetzung und die Antituiaorwirkung eines synthetischen Zytostatikums aus der Gruppe der modifizierten natürlichen ^C-Aminosäuren auf

der Basis von Cystin bzw. Cystein, welches hydrazidartig mit Bis-(ß-chloräthyl)-hydrazin verbunden ist.

Das erfindungsgemäßo Antitumormittel stellt ein Gemisch der Brom-Wasserstoff salze des L--Cystin3>-l~bis-/(N, N~ß-chlor äthyl) · hydrazids (I)J und L-Cysteinyl (N,N-ß-chloräthyl)hydrazide (II) dar.

_Ί „ Q _

^X2

S-

i
CHKH

C.

2^)₂

CH,

SH

2 HBr

CHTiH₂ HBr

CO. NHW ( CH₂CEE₂Cl)

II

Der Gehalt des Gemisches kann von 1 bis 99 Mol-$> für Jede einzelne Komponente variieren. Die optimalen Bedingungen zur Herstellung des AntitumormitteIs sind die, bei walchen das Verhältnis der Komponente I und II im Gemisch 95 : 5 Mcl-$> beträgt.

Das Antitumormittel weist erfindungsgemäß farblose, hydroskopische Kristalle auf, die im Wasser stark und in organischen Lösungsmitteln schwach löslich sind. Der Stoff ist D-aktiv (rechtsaktiv). Die Elementaranalyse und das mittels eines Massenspektrographs bestimmte Gewicht stimmen mit der angegebenen Zusammensetzung gut überein. Das infrarote Spektrum enthält Absorptionszonen der SuIfhydryl-Bindung. Außerdem weist das Antitumormittel eine positive Reaktion für die Sulfhydryl-Gruppe durch das Elmanns-Reaktionsmittel auf, welche bei einem kurzen Luftdurchgang durch die Lösung, offen-

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sichtlich wegen Oxydation abfällt. Dies erlaubt eine kolo~ rimetrische Bestimmung der beiden Formen bei Reduktion und Aufbewahrung des Stoffes«

Bei einem längeren Luftzutritt tritt eine sichtbare Zersetzung des AntituuiormitteIe gleichzeitig mit einer Verfärbung und einem schaffen Geruch ein. In einer Stickstoffatmosphäre und gut verschlossen tritt diese Veränderung nicht ein.

Das mikroskopische Pre-screening zeigt, daß das Antitumormittel eine bakter:* ostatische Wirkung au-Twoist. Das Präparat inhibiert (unterdrückt) dos Wachstum der Staphylocccc&n-Mutanton UB^! - 2 und UP' - 3 und ö.qs Sarcin?e lutea. Gegenüber anderer Mikroorganismen erwies ?;icb das Mittal als nicht aktiv.

Die cancerost?.tische Aktivität wurde s.uf transplantable Ge-

schvailste an Mäusen und Ratten getestet (geprüft). 1 ml der Wasserslösung des Antituraormittels wird interperitoneal bei den kompakten Tumoren und intrakutan bei den aßziten Tumoren injiziert. Die Gruppe Kontrolltiere wird auf dieselbe Weise mit physiologischer Lösung behandelt«, Für jeden Test (Prüfung) werden je 6 Versuchs- und je 6 Kontrolltiere vorgesehen* Die Behandlung fängt am 4. bis 5. Tag nach der Tumortransplantation an. Bis zur Sterbezeit der Tiere (einen Tag nach der Einstellung der Behandlung), wenn das Behandlungsergebnis berechnet wird, wurde kein einziger Todesfall der behandelten Tiere festgestellt. Die Differenzen zwischen den am Leben gebliebenen Versuchs- und Kontrolltieren sind anhand der Bearbeitung nach der Student-Fisher-Moschkovski-Methode statistisch zuverlässig.

Nachstehend sind Beispiele über die Antitumorwirkung angeführt:

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BAß ,

Tabelle

Tumor

Dosis Anwendung in hinmg/kg tereinander fol--

Inhibition

genden Tagen

n/
7*

1. Melom P~8

2. Sarkom 180 Crocker 3* Karzinosarkom Walker

4. Sarkom Joshida*

5. Lymphosarkom Pliss

6. Sarkom Jenssen

7. Aszite Tumoren Ehrlich und Geren

12

10

8 ' 100

10 80

8 - 100 10 100

9 60 10 100 10 75

keine Inhibition

* Die der behandelten Tiere bestimmte Lebensdauer betrug 120 Tage; fünf Tiere haben diese Zeit ohne Spur,von Tumor-

gewebe überlebt; ein Tier ist am 35sten Tag von Rezidiv gestorben; alle Kontrolltiere sind zwischen dem 18ten und 26sten Tag gestorben.

Beispiele für akute Toxizität;

in mg/kg

Mäuse

Ratten

Interperitoneales Injizieren Intrakutanes Injizieren

71
76

Beispiele für subakute Toxizität:

Eine Gruppe von 20 Ratten, die während 30 Tagen mit 5 mg/kg interperitoneal injiziert wurden.

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BAD

am 15	• Tag	am	30. Tag	Ko:	ntrol	000
	80		71		108	800
6,540	.000	4.	18OcOOO	6	.780.
4	.350		4.880		5.

Hämoglobin %
Erythrozyten
Leukozyten

Die pharmakologische Charakteristik des Antitumormittels umfaßt auch das Testen (Prüfung) der ΐ/irkimg des Präparats auf den Blutdruck, Puls und Atmung. Die Prüfung wurde an fünf mit Urethan narkotisierten Katern ausgeführt, wobei der Blutdruck na oh der iAidwig-Zion-Methode und die Atmung mittels der Mareevschen Kapsel registriert wurde. Das Kittel wurde intravenös in Dosen von 10, ^O und 100 mg/kg in ei.nstund.igen Intervallen injiziert. Bei diesen Versuchsverhältnissen vermindert das Antitumormittel den Blutdruck,· v/elcher aber von der Introduktionsgeschwindigkeit und nicht von der Gesamtquant it lit des Präparats limitiert wird, wonach er sich allmählich erhöht ohne den Aufgangswert zu erreichen. Das Mittel übt keine besondere Wirkung auf den Puls aus, erregt am Anfang des Versuches die Atmung, wonach sich die letztere am Ende des Versuches verlangsamt und ihre Amplituden weisen eine Verminderung auf. Diese Veränderungen sind ein Zeichen eines sich relativ langsam entwickelnden toxikosen Effekts.

Zur Klärung einiger Mechanismen der zytostatischen Wirkung des Präparats wurden Versuche über seinen Einfluß auf die Biosynthese der DNS in den Tumorzellen eines EhrlichVschen asziten Tumors ausgeführt. Es wurde ein Inhibitionseffekt bis zu B0% festgestellt.

Die zytostatische Aktivität des Antitumormittels entspricht seiner chemischen Zusammensetzung, da es ein Antimetabolit einer Aminosäure (Cystin bzw. Cystein) darstellt und eine

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alkylieronde Wirkung aufweist, was auf die Bis-(chloräthyl)~ hydrazin-Reste in κeinem Molekül zurückzuführen ist« Die alkyliercnde Wirkung des Antitumorra.ittoIs wird durch die positive p-IJitrobenzyl-Pyriciiü-Resktion, die das Mittel aufweist, bewiesen. Sie ist in Vergleich zu der des Stickstofflosts stärker und im Vergleich, zu der Sarkolysin-Reaktion s chwäche r aus gepr agt.

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Claims

Patentanspruch

Antitumarmittelj dadurch gekennzeichnet, daß es ein Gemisch von Bromwasserstoffsalzen des Bis-(f3~dichloräthyl)-hydrazide des Cystins und des Cysteine in einem Verhältnis von 1 Με 99 Mol~?i für jede einzelne Komponente darstellt.

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